PT97483A

PT97483A - Processo para a preparacao de biciclo{7.3.1}tridec-4-eno-2,6-diinos com actividade citotoxica e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT97483A
Application number: PT97483A
Authority: PT
Inventors: John F Kadow
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1990-04-27
Filing date: 1991-04-26
Publication date: 1992-01-31
Also published as: FI911982A0; AU648073B2; HUT57781A; NZ237944A; IE911424A1; EP0454146A1; CA2040855A1; JPH04225934A; FI911982A; IL97965A0; HU9401362D0; HU210786B; AU7628291A; HU911399D0; MY135674A; KR910018349A; TW217414B; YU73391A

Description

|gI§|QL=MYER§=SQUIBB_ÇOMPANY PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE BICICLO-[7.3.1]TRIDEC-4-ENO--2,6-DIINOS COM ACTIVIDADE CITOTÕXICA E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM".

Antecedentes da Invenção 1. Campo da Invenção A presente invenção refere-se a compostos que cindem o DNA citotõxico, a um novo processo para a sua preparação e a produtos intermédios produzidos desse modo. 2. Antecedentes da Invenção

As esperamicinas e as caliquemicinas pertencem a uma classe de antibióticos antitumorais extremamente potentes isolados de fontes microbianas. Os estudos para elucidação da ejs trutura das esperamicinas e das caliquemicinas foram descritos em J. Am. Chem. Soc., 109 (1987), 3461-3462 e J. Am. Chem.

Soc., 109 (1987), 3464-3466, respectivamente. Estes antibiõti^ cos partilham um núcleo de aglícona comum que contém um sistema cíclico biciclo[7.3.1]tridecano com uma cadeia lateral de trissulfureto alílica.

CH302CNH OH

aglicona caliquemicina X = H aglicona esperamicina X = OH -2- 0 mecanismo de acção proposto para estes antibióticos envolve primeiro uma activação biorredutora do trissulfureto para gerar um tiol que se adiciona intramolecularmente à enona ο('β -insaturada. Ά alteração resultante da hibridação do ãto mo de carbono em ponte faz com que as duas extremidades da par te diineno fiquem mais próximas, ligando-se para formar 1,4-dir radical benzénico que é capaz de remover um átomo de hidrogénio da estrutura de fosfato açúcar do DNA para efectuar uma quebra do cordão simples ou dupla. A estrutura e mecanismo de acção singulares destes com postos despertaram muito interesse na síntese do fragmento do núcleo de diineno bicíclico. Foram estabelecidas várias estratégias para conseguir o fecho do anel de um composto ciclo-he-xilo contendo o fragmento de diineno necessário para formar um anel decagonal.

Kende et al., Tet. Lett., 29 (1988) 4217-4220, trataram o 3,3-(1,2-etilenodioxi)-5-(3-hexano-l,5-diinil)-1-ciclo--hexenocarboxaldeído com bis(trimetilsilil)-amideto de lítio, seguido de remoção do grupo protector etilenodioxi-cetona para obter 8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4,9-dieno-2,6-diin-ll-ona.

Magnus et al., J. Am. Chem. Soc. 110 (1988) 1626-1628 descreveram a preparação do complexo de hexacarbonil-dicobal-to de l-(TBSoxi)-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diin-10-ona [TBS = t-butildimetilsililo), a partir do complexo 1,4-bis-(TBSoxi).4-(7-metoxi-3-hepteno-l,5-diinil)-ciclo-hexano de hexa carbonil-dicobalto, mediante tratamento com tetracloreto de titânio/diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) à temperatura de -78°C. Contudo, a descomplexação do produto, causou a quebra da molécula no composto benzenóide correspondente. -3-

Magnus et al.f J. Am. Chem. Soe., 110 (1988) 6921-6923; e Tomioka et al., Tet. Lett. , 30 (1989) 851-854 descreveram a preparação, de I- (TBSoxi)-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diin-13-ona (cetona bicíclica a partir do complexo de hexacarbonil-dicebalto de 1,6-bis(TBSoxi)-6-(7-metoxi-3-hepteno-l,5-diinil)-ciclo-hexeno mediante tratamento com tetracloreto de titânio/DABCO, seguido de descomplexação com iodo ou com óxido de trimetilamina. Mag-nus et al. trataram ainda a cetona bicíclica com hexametil-dissilazeno de potássio (KHMDS) e cloreto de fenilselénio para formar o q( -fenilselenido que, após oxidação com peróxi-do de hidrogénio, deu 1-(TBSoxi)-biciclo[7.3.1]tridec-4,9-die no-2,6-diin-13-ona (enona bicíclica). Este último produto foi também obtido como um sub-produto quando se oxidou o éter enó lico de t-butildimetilsililo da cetona bicíclica com dióxido de selénio [Magnus et al., Tet. Lett., 30 (1989) 3637-3640 ].

Danishefsky et al., J. Am. Chem. Soc., 110 (1988) 6890--6891, descreveram a preparação de 1-(TBSoxi)-8-hidroxi-ll-me-toxi-biciclo[7.3.1]tridec-4,9,ll-trieno-2,ô-diino-lS-espiroetL leno-epóxido a partir de 3-metoxi-5-(TBSoxi)-5-(3-hexeno-l,5--diinil)-1,6-ciclo-hexadienocarboxaldeído-6-espiro-etileno--epõxido após tratamento com base. O produto foi depois trans^ formado para proporcionar, entre outros, 1,8-di-hidroxi-bici-clo[7.3.1]tridec-4,9-dieno-2,6-diin-ll,13-diona e o cetal II- etilénico correspondente e l,8-di-hidroxi-biciclo[7.3.1]-tridec-4-eno-2,6-diin-ll,13-diona. Este último composto mostrou cindir DNA in vitro [J. Org. Chem. 54 (1989) 2781-2783; e J. Am. Chem. Soc., 111 (1989) 7638-7641].

Magnus et al., J. Org, Chem., 55 (1990) 1709-1711 descreveram a preparação de 8-hidroxi-l-TBSoxi-biciclo[7.3.1]tri- -4- dec-4-eno-2,6-diin-13-ona por tratamento do complexo de dico-balto de 6-TBSoxi-6-(7-oxo-3-hexeno-l,5-diinil)-ciclo-hexano-na com triflato de dibutil-boro/DABCO para efectuar o fecho do anel seguido por õxido de N-metil-morfolina para remover o grupo cobalto-carbonilo.

Danishefsky et al., J. Am. Chem. Soc., 112 (1990) 3253--3255, descreveram a síntese total de dl-caliqueamicinona.

Os métodos conhecidos para o fecho do anel ou requerem precussores embaraçosos que são difíceis de preparar ou formam diinenos bicíclicos a que faltam certos grupos funcionais importantes. O processo da presente invenção ultrapassa estes problemas e proporciona uma via muito eficaz para os diinenos bicíclicos com múltiplos grupos funcionais importantes. Além disso, o processo da presente invenção origina a formação de um único par de diastereómeros e permite a introdução do grupo 8-hidroxi tendo a mesma configuração estereoquímica relativa do grupo 8-hidroxi da aglícona da esperamicina.

Sumário,da Invenção A presente invenção proporciona, em um dos seus aspectos, um processo para o fecho do anel decagonal para formar um sistema cíclico 8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6--diino-13-ona. 0 processo consiste em : 1) fazer reagir um complexo de hexacarbonil-dicobalto de um derivado 6-hidroxi--protegido de 6-(7-oxo-3-hepteno-l,5-diinil)-2-ciclo-hexenona com uma espécie nucleófila (Nu) capaz de adição 1,4-conjugada à enona; e 2) tratar o produto da reacção resultante com um reagente de titânio para o fecho do anel para formar o corres- -5- pondente complexo de hexacarbonil-dicobalto do derivado 6-hi-droxi protegido 10-Nu-8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno--2,6-diino“13-ona. A descomplexação do composto obtido por este processo faz também parte da presente invenção.

Num outro aspecto, da presente invenção proporciona um processo para a preparação de 8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tri-dec-4,9-dieno-2,6-diino-13-ona que consiste na eliminação oxi dativa do substituinte 10-Nu- da 10-Nu-8-hidroxi-biciclo[7.3.1J_ tridec-4-eno-2,6-diino-13-ona.

Num outro aspecto da presente invenção proporciona derivados de 10-Nu-8-hidroxi-biciclo[7.3.1]-tridec-4-eno-2,6-di-ino-13-ona e seus complexos de cobalto. A presente invenção proporciona ainda certos derivados de 8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4,9-dieno-2,6-diino-13-ona.

Descrição Pormenorizada da Invenção 0 sistema cíclico biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diino referido nesta descrição tem a numeração seguinte: 13

"0 anel decagonal" é o anel definido pelos átomos de -6- carbono 1 a 9 e 13 do sistema cíclico biciclo[7.3.1]tridec-4--eno-2,6-diino. 0 complexo de hexacarbonil-dicobalto com uma ligação tripla carbono-carbono ê representada por III co2(co)6.

Este grupo i também referido nesta descrição como "com pleoxode carbonil-cobalto" ou "complexo de cobalto". 0 grupo hexacarbonil-dicobalto pode ser utilizado como um grupo protec tor da ligação tripla carbono-carbono. 0 acetileno-complexado com cobalto é objecto da revisão de Nicholas, K. M., Accounts in Chemical Research, 20 (1987) 207-214. "TBS" i utilizado nesta descrição como a abreviatura de t-butildimetilsililo [também referido como (1,1-dimetiletil)--dimetilsililo].

Novo Processo A presente invenção proporciona um processo para o fecho de um anel decagonal ambas para formar um derivado 8-hidro xi-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diino-13-ona que consiste em: 1) fazer reagir uma 6-7-oxo-3-hepteno-l,5-diinil)-2-ciclo-he-xenona-6-hidroxi-protegida complexada com hexacarbonil-dicobal to de fórmula geral I com uma espécie nucleófila (Nu) capaz de realizar a adição 1,4-conjugada à enona; e 2) tratar o produ to da reacção resultante com um reagente de titânio para se ob ter a 10-Nu-8-hiâroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diino-13--ona 1-hidroxi-protegida complexada com hexacarbonil-dicobalto -7- de fórmula geral III. A espécie nucleõfila ê geralmente um rea gente organometãlico de fórmula geral NU-M na qual Nu representa um grupo nucleõfilo capaz da adição 1,4-conjugada a um composto carbonílico de , -insaturado, e M representa um ca tião de um metal monovalente ou um metal substituído com valên cia superior a 1. Este proceso está representado no Esquema I em que os reagentes preferidos estão exemplificados. Deve entender-se que, embora os reagentes preferidos sejam os utiliza dos para ilustrar a presente invenção nos Esquemas seguintes, esta mesma invenção não ê limitada por isso.

Esquema I

III -8- em que representa um grupo protector hidroxi; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido; R^ e R^ representam, cada vim, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido; ou R^ e R^ conjuntamente com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam um grupo ceto protegido. 0 composto de fórmula ge ral R,-SA1 (Rg^ exemplifica um composto de fõr mula geral Nu-M; em que

Rj. e Rg representam, cada um , um grupo escolhido en tre alquilo 01-5, cicloalquilo C3_6, arilo Cg_1Q ou arilo Cg_^Q comportando como substituintes um ou mais grupos escolhidos entre alquilo e alcoxi A escolha do grupo protector de hidroxi e os grupos pro tectores de cetona não é particularmente limitada; os grupos protectores podem ser quaisquer grupos que sejam facilmente substituídos por um átomo de hidrogénio sob condições que não afectem outros grupos funcionais da molécula.

Os exemplos de grupos protectores de hidroxi incluem, mas não estão limitados a: a) formação de uma ligação éter com: i) vim grupo alquilo inferior ou alcenilo inferior, por exemplo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, pentilo e propenilo; ii) um grupo aralquilo por exemplo benzi_ lo, difenil metilo, trifenilmetilo , e tris(p-metoxifenil)-me tilo; e iii) um grupo triorganosililo, por exemplo, trimetijL sililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, triisopro pilsililo; b) formação de um acetal ou cetal com, por exemplo, tetra-hidropirano, metoximetilo, metoxietoximetilo, metiltio-metilo, tetra-hidrotiofuranilo e tetra-hidrotiopiranilo; e c) formação de éster com: i) um grupo alcanoílo inferior eventualmente substituído, por exemplo formilo, acetilo, propioni. lo, butirilo, trifluoroacetilo, cloroacetilo, metoxiacetilo, e fenoxiacetilo ; ii) benzoílo ou £-nitrobenzoílo? iii) um gru po alcoxicarbonilo eventualmente substituído, por exemplo meto xicarbonilo, etoxicarbonilo, t-butiloxicarbonilo, isobutiloxi-carbonilo, tricloroetoxicarbonilo e tribromoetoxicarbonilo. 0 grupo protector de hidroxi preferido i o grupo t-butildimetil. sililo.

Um grupo protector de uma cetona pode ser qualquer grupo funcional oxo convertido num grupo cetal. Exemplos de grupos cetal incluem, mas não estão limitados a, a) cetais dialquílicos, co mo cetais dimetílico e dietílico e cetal 2,2,2-tricloroetíli-co; b) cetais cíclicos, tais como 1,3-dioxolano, 1,3-dioxano, 2.2- dimetil-l,3-dioxano e 4-bromometil-l,3-dioxolano; c) tio cetais e hemitiocetais, tais como 1,3-oxatiolano, 1,3-oxatiano, 1.3- ditiano, 1,3-ditiolano e 2,2-dialquil(inferior)-l,3-ditia-no. Os grupos protectores de cetona preferidos são os cetais cíclicos, tais como 1,3-dioxolano e 1,3-dioxano.

Num aspecto preferido da presente invenção R2 represen ta um átomo de hidrogénio. Em outro aspecto preferido e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio. Ainda em um ou tro aspecto preferido, R1 representa um grupo triorganossililo. 10-

Num aspecto ainda mais preferido, R^ e R^ representam, ca da um, um átomo de hidrogénio e representa um grupo trior-ganossililo; com maior preferência R1 representa um grupo t--butildimetilsililo.

De acordo com o Esquema I faz-se reagir um composto de fórmula geral I com um composto de tio-aluminio de fórmula geral R,-S-A1 (Rg) 2# na qual R,- e Rg representam, cada um, um resíduo orgânico, tal como um grupo alquilo C^_g, cicloalqui-lo Cg_g, arilo Cg_^Q e arilo Cg_^g comportando eventualmente um ou mais* substituintes escolhidos entre grupos alquilo e grupos alcoxi.

Os compostos de tio-alumínio preferidos são os dialquil(fenil-tio)-alumínio, por exemplo dimetil-(feniltio)-alumínio, isto é, (CH^) 2^-ÍSCgHg. Deve entender-se que o reagente de tio-alu minio i um exemplo de um composto organometálico de fórmula geral Nu-M como definido anteriormente. Em geral, no composto de fórmula geral Nu-M, o catião metálico representado por M pode ser qualquer catião metálico correntemente utilizado para estabilizar um enolato, por exemplo, um metal alcalino, metal alcalino-terroso, alumínio, zinco, etc.; de preferência, o catião metálico é o alumínio. A espécie nucleófila representada por Nu é qualquer capaz de adição 1,4-conjugada a um compos^ to carbonílico -insaturado e que possa ser eliminado após oxidação para regenerar a ligação dupla carbono-carbono; os exemplos destas espécies nucleófilas incluem os nucleófilos de enxofre e de selénio; de preferência, essa espécie nucleófila é um nucleófilo de enxofre. A reacção realiza-se no seio de um dissolvente orgâni co aprõtico inerte, tal como tetra-hidrofurano, hexano, etc., ou em uma sua mistura, a uma temperatura inferior à temperatura ambiente, convenientemente à temperatura de 0o C ou infe -11- rior. A reacção gera in situ um enolato de alumínio de fór mula geral II que pode ser directamente submetido a uma reacção de fecho do anel descrita a seguir. Alternativamente, o enolato pode ser convertido na cetona correspondente mediante procedimentos convencionais e em seguida pode utilizar-se a cetona no fecho subsequente do anel. Embora se possa utilizar qualquer enolato ou cetona no passo de fecho do anel, o reagente preferido para o presente processo é o enolato.

Trata-se a mistura reaccional contendo o enolato de alumínio de fórmula geral II com um reagente de titânio para efectuar o fecho intramolecular do anel para obter o diineno bicíclico complexado com o cobalto, de fórmula geral III. Os exemplos de reagentes de titânio apropriados incluem, mas não estão limitados a, alcóxidos de titânio de fórmula geral Ti[0-(C1_5)-alquilo]4 e halogenetos de alcóxido de titânio de fórmula geral XTi [0- (C-^) -alquilo] 3 na qual X representa um átomo de halogéneo, tal como bromo, cloro ou iodo. Alguns exemplos específicos de reagentes de titânio que se podem men cionar são o isopropóxido de titânio Ti(OCH(CH3)2)4, o próprio xido de titânio Ti (OC^CI^CH^) 4, o etóxido de titânio Ti(OCE^CH^)4, e o cloreto de isopropóxido de titânio Ti (OCH (CH^) 2) 3CI· O nucleófilo de fórmula geral R,--S-Al(Rç)2 e o reagente de titânio são utilizados pelo menos em quantidades equimolares mas de preferência em excesso, relativamente ao diineno. Deste modo, pode utilizar-se até cerca de 10 equivalentes do nucleófilo de enxofre e até cerca de 40 equivalentes do reagente de titânio. De preferência, o nucleófilo de enxofre é utilizado em uma quantidade compreendida entre cerca de 1>5 e 10 equivalentes e o reagente de titânio entre 12- cerca de 1,5 e 40 equivalentes, relativamente ao diineno. 0 grupo carbonil-cobalto dos compostos de fórmula geral III póde ser removido para se obterem compostos de fórmula geral IV mediante tratamento com agentes de descomplexação conhecidos, tais como o iodo, nitrato de ferro III, e um N-óxjL do de amina terciária, por exemplo N-metilmorfolina-N-óxido , trimetilamina-N-óxido e outros. O reagente preferido é o iodo. A reacção realiza-se no seio de um dissolvente orgânico inerte, tal como benzeno, dicloroetano, etc; um dissolvente preferido é o benzeno. A temperatura de reacção pode ser qualquer temperatura que conduza à formação do produto, podendo ser a temperatura ambiente. 0 agente de descomplexação é utilizado em uma quantidade pelo menos equiraolar relativamente ao diineno mas, de preferência, é utilizado num excesso compreendido entre cerca de 1,5 e cerca de 10 equivalentes.

(IV) 0 substituinte sulfureto na posição 10 do diineno bi-cíclico de fórmula geral IV pode ser oxidado para dar o correspondente sulfóxido, sendo este último grupo em seguida eli^ minado para dar uma enona de fórmula geral Va. O diineno bi-cxclico complexado com dicobalto da fórmula geral III pode ser 3- de uma forma similar convertido numa enona complexada com cobalto, de fórmula geral Vb.

Os métodos de oxidação dos sulfuretos e eliminação dos sulfóxidos para se obterem compostos de carbonilo CÍ./3 -insatu rados são geralmente bem conhecidos. 0 substituinte sulfureto dos compostos de fórmulas gerais IV e III pode ser oxidado para dar o correspondente sulfóxido com o auxílio de diversos rea gentes, incluindo, mas não se limitando a, peróxido de hidrogénio, perácidos, periodatos, perboratos, acilnitrilos e outros. Realiza-se a reacção no seio de um dissolvente orgânico inerte apropriado, tal como um álcool inferior ou um álcool inferior aquoso, a uma temperatura e durante um período apropriados para se efectuar a eliminação do sulfóxido com formação de produtos diineno bicíclicos o(, j3 -insaturados de fórmulas gerais Va e Vb, respectivamente. De preferência, realiza-se a reacção à temperatura ambiente, estando geralmente completa num período inferior a 10 horas para se obter a enona pretendida. Os compostos de fórmula geral Vb podem converter-se em compostos de fórmula geral Va mediante procedimentos de descomplexação des^ critos anteriormente. Deve entender-se que, embora se tenha exemplificado para os substituintes sulfuretos, os substituin- tes seleneto podem ser similarmente convertidos em enonas de fórmulas gerais Va e Vb.

Num aspecto preferido da presente invenção, o substi-tuinte sulfureto na posição 10 dos compostos de fórmulas gerais IV e III é um sulfureto de fenilo e a reacção de oxidação/eli-minação é realizada à temperatura ambiente, utilizando-se perio dato de sódio ou ácido m-cloroperbenzóico (mCPBA) como agente oxidante.

Alternativamente, pode converter-se um composto de fór mula geral III no composto correspondente de fórmula geral Va em um passo por tratamento do composto complexado de hexacar-bonilo-dicobalto de fórmula geral III com ácido meta-cloroper-benzóico (mCPBA) . Realiza-se a reacção num dissolvente orgânjL co inerte, tal como o cloreto de metileno, a uma temperatura que conduza à obtenção do produto, de preferência a uma tempera tura próxima da temperatura ambiente. De um modo geral, a reac ção completa-se em algumas horas. Utiliza-se o ácido meta-clo-roperbenzõico em uma quantidade pelo menos equivalente ao composto diineno bicíclico, mas, de preferência, é utilizado num excesso até cerca de 4 equivalentes do diineno.

Novos Compostos

Os compostos de fórmula geral III e IV são novos e pre-param-se pelos processos descritos anteriormente. Para os compostos de fórmulas gerais III e IV, o grupo protector de hidró xi representado por pode ser removido mediante procedimentos conhecidos na técnica para dar os correspondentes compostos de 1-hidroxi. 0 procedimento de desprotecção depende da natureza do grupo protector e pode ser, por exemplo, a hidrõli se sob condições ácidas ou básicas, a hidrogenólise e alcoóli-se. Quando representa um grupo t-butildimetilsililo, pode remover-se este grupo, por exemplo, com ácido trifluorometanos^ sulfõnico. Nos compostos de fórmulas gerais III e IV em que R2 representa um grupo hidroxi protegido ou em que um dos símbolos R^ e R^ ou ambos representam um grupo hidroxi protegido, este grupo protector de hidroxi pode ser também removido por procedimentos como os descritos anteriormente para os grupos representados por R^· Nos compostos de fórmulas gerais III e IV em que R3 e R4 representam, conjuntamente, um grupo cetona protegido, pode realizar-se a desprotecção por procedimentos convencionais, tais como a hidrólise ácida.

Assim, num outro aspecto da presente invenção proporcio nam-se diinenos biciclicos de fórmula geral Va, assim como os seus correspondentes complexos de hexacarbonilo-dicobalto de fórmula geral VIb 0 0

em que —co2(CO)5 R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo cl protector de hidroxi; R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hi droxi eventualmente protegido;

Rc e representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi eventua]. mente protegido; ou Rc e R^ representam, conjuntamente, um grupo oxo ou um grupo ceto protegido; e

Rj. tem o significado definido antes.

Um aspecto preferido proporciona compostos de fórmulas gerais Via e VIb em que R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo triorganossililo, de preferência um grupo t-butil-dimetilsililo. Um outro aspecto preferido proporciona compostos de fórmulas gerais Via e VIb em que R£ representa um átomo de hidrogénio. Um outro aspecto preferido proporciona compostos de fórmulas gerais Via e VIb em que Rc e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio. Um outro aspecto preferido propor ciona compostos de fórmulas gerais Via e VIb em que R,- tem o significado definido antes e representa de preferência um grupo arilo eventualmente substituído e, com maior preferência, um grupo fenilo ou fenil(substituído)-alcoxi. Um aspecto parti cularmente preferido proporciona compostos de fórmulas gerais VI a e VIb em que R representa um grupo trialquilsililo, de preferência um grupo t-butildimetilsililo; R^, Rc e R^ represen tam, cada um, um átomo de hidrogénio; e R^ representa um grupo fenilo ou alquilo ou fenil(substituído)-alcoxi. A presente invenção também proporciona novos compostos de fórmula geral -17-

VII na qual R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo pro- α tector de hidroxi; de preferência Ra representa um átomo de hi drogénio ou um grupo t-butildimetilsililo. Um composto de fõr mula geral VII, na qual R representa um grupo protector de hi. droxi pode converter-se no correspondente composto em que R& re presenta um átomo de hidrogénio mediante a remoção do grupo protector hidroxi mediante métodos convencionais, como descrito anteriormente. Em particular, quando Ro representa um gru-po t-butildimetilsililo pode realizar-se a desprotecção utilizando ácido trifluorometanossulfónico.

Deve entender-se que os diversos compostos preparados de acordo com o novo processo da presente invenção podem existir sob a forma de isómeros ópticos; os isómeros individuais assim como as misturas racémicas e as misturas diastereoméricas estão abrangidos pelo âmbito da presente invenção.

Similarmente, o novo processo da presente invenção é aplicável aos estereoisómeros individuais, assim como às suas misturas racémicas ou diastereoméricas. As notações estereo-químicas utilizadas nas fórmulas de estrutura apresentadas nes ta descrição e nas reivindicações representam as orientações relativas dos vários substituintes do sistema cíclico bicí- cio[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diino e não limitam os compostos re presentados por estas fórmulas a configurações absolutas específicas.

Preparação dos Compostos Iniciais

Voltamos agora ã preparação dos compostos de fórmula geral I que são os compostso iniciais utilizados no novo processo desta invenção. Nos Esquemas seguintes R^, R2, R^ e R^ têm os significados definidos anteriormente para a fórmula ge ral I. 0 complexo de cobalto do diineno-aldeído de fórmula geral I pode preparar-se a partir. do acetal não complexado correspondente, tal como se mostra no Esquema II.

Esquema II

Assim, faz-se reagir o diineno-acetal de fórmula geral VIII com octacarbonil-dicobalto ã temperatura ambiente, no seio de um dissolvente orgânico inerte, tal como o heptano ou o cloreto de metileno. 0 diineno-acetal complexado com cobalto de fórmula geral IX, é, convertido no correspondente aldeí- 19- do de fórmula geral I mediante tratamento com tetracloreto de titânio e 1,4-diazobiciclo[2.2.2]ocatno (DABCO) à temperatura de -65°C, em cloreto de metileno. Neste Esquema R, representa um grupo alquilo inferior ou os dois grupos representados por R juntam-se para formar um acetal cíclico. Deve entender--se que é possível inverter a ordem dos dois passos de reac-ção representados no Esquema II? isto é, o diineno acetal de fórmula geral VIII pode converter-se primeiro no aldeído correspondente por meio de hidrólise ácida utilizando, por exemplo, ácido trifluoroacético/clorofórmio, seguido de complexa-ção com octacarbonil-dicobalto para se obter o composto de fórmula geral I. 0 diineno-acetal de fórmula geral VIII pode ser obtido a partir de um derivado de 2-ciclo-hexenona e de um fragmen to de diineno-acetal. Podem utilizar-se diversas estratégias para realizar este objectivo, as quais se representam no Esque ma III.

XIV -20-

a: 1) I^O; 2) triflato de t-butildimetilsilil; 3) dióxido de selénio b: 1) Triflato de t-butildimetilsilil; 2) dióxido de selenio c: 1) Cloreto de fenil-selénio; 2) peróxido de hidrogénio d: 1) ArSS02Ar

No Esquema III, M representa um metal alcalino, por exemplo, litio, sódio ou potássio. R representa um grupo alquilo inferior ou os dois grupos representados por R juntam-se para formar um acetal cíclico. Ar representa um grupo fenilo que comporta eventualmente como substituinte um grupo alquilo inferior ou alcoxi inferior, tal como metilo, etilo, metoxi e etoxi.

Para se realizar o Esquema III, faz-se reagir o anião do diineno acetal, representado por X, com uma ciclo-hexanona de fórmula geral XI para se obter um enolato de ciclo-hexanona diineno-substituída de fórmula geral XIII. Ou, faz-se reagir o anião representado por X com 2-ciclo-hexanona 3-ariltio-subs^ tituída de fórmula geral XII, para se obter uma ciclo-hexanona diineno-substituída de fórmula geral XIV. Os compostos de fõr mula geral XIII e XIV são posteriormente transformados para se obter o diineno-acetal de ciclo-hexanona de fórmula geral VIII.

Num processo do Esquema III, faz-se reagir o anião do diineno-acetal com 2-ciclo-hexenona 3-ariltio-substituída de fórmula geral XII, a baixa temperatura, por exemplo, ã tempera tura de -78°C. Em seguida oxida-se para o sulfóxido o composto de adição de fórmula geral XIV obtido, utilizando um agente oxidante convencional, tal como o ácido m-cloroperbenzóico ou o periodato de sódio, de preferência a baixa temperatura, por exem pio, à temperatura de -78°C. Mediante aquecimento do sulfóxji do, por exemplo, sob refluxo em tetracloreto de carbono ou aquecimento em piridina a uma temperatura compreendida entre cerca de 100°C e 110°C, obtém-se o diineno-acetal de ciclo--hexenona de fórmula geral VIII.

Como uma variante desta sequência, pode utilizar-se o sulfóxido do composto de fórmula geral XII em substituição do composto de fórmula geral XII para se obter o sulfóxido de fõr mula geral XIV. Em seguida, aquece-se o sulfóxido de fórmula geral XIV no seio de um dissolvente orgânico, tal como um hep-tino ou piridina sob refluxo e, eventualmente, na presença de um reagente que aprisiona o produto de eliminação de enxofre , por exemplo, 2-mercaptobenzotiazol, para se obter um composto de fórmula geral VIII.

No segundo processo do Esquema III, faz-se reagir o aniao do diineno-acetal com uma ciclo-hexanona de fórmula geral XI, no seio de um dissolvente inerte, tal como o tetra-hidrofu rano, a uma temperatura baixa, por exemplo compreendida entre -78°C e -50°C, aproximadamente, para se obter o enolato metáli_ co de fórmula geral XIII que, em seguida, pode ser captado e oxidado para dar o diineno-acetal de ciclo-hexanona de fórmula geral VIII. Num procedimento, dilui-se o enolato metálico de fórmula geral XIII com água à temperatura ambiente e, faz-se reagir a cetona resultante, com trifluorometanossulfonato de t-butildimetilsililo (triflato de TBDMS), à temperatura ambien te, para obter o correspondente éter enólico silílico. Este po de ser também obtido mediante tratamento do enolato metálico de fórmula geral XIII com triflato de TBDMS à temperatura de -78°C. Em seguida, oxida-se o éter enólico de silílico com dióxido de -22-

selénio, a temperatura elevada, por exemplo, a temperatura de refluxo da mistura reaccional, para obter a enona de fórmula geral VIII. A enona de fórmula geral VIII pode também ser pre parada por tratamento do enolato metálico de fórmula geral XIII com cloreto de fenilselénio , à temperatura de -78°C, se guido de oxidação do d -fenil-seleneto resultante com peróxi^ do de hidrogénio. Tal como se indica no Esquema III, o enola to metálico de fõrmuma geral XIII pode também ser tratado com um composto de fórmula geral ArSSC^Ar para dar um composto de fórmula geral XIV que, por sua vez, é convertido num composto de fórmula geral VIII do modo descrito anteriormente. 0 diineno-acetal de fórmula geral X pode ser sintetiza do utilizando o processo seguinte. Faz-se reagir cis-l,2-di-cloroetileno com 3,3-dietoxipropino, na presença de iodeto de cobre, tetraquis(trifenilfosfina)paládio e n-butilamina, ã tem peratura ambiente na ausência de luz. Trata-se o produto, (Z)-5-cloro-l, l-dietoxi-4-penteno-2-ino, com trimetilsililacetjL leno, na presença de iodeto de cobre, tetraquis(trifenilfosfina) paládio e n-butilamina, ã temperatura ambiente e protegido da luz, para obter (Z)-7,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3-hepten-l,5--diino. 0 anião correspondente é, em seguida, gerado mediante tratamento com um hidróxido de um metal alcalino, tal como o hidróxido de lítio.

As ciclo-hexenonas de fórmulas gerais XI e XII podem preparar-se a partir de compostos iniciais comercializados. Por exemplo, 2-TBSoxi-2-ciclo-hexanona(XI,R-^TBSyR^R^R^H) pode obter-se a partir de 1,2-ciclo-hexanodiona mediante tratamento com uma base, tal como a trietilamina ou diisopropilamideto de lítio (LDA), segui<£>por triflato de TBS. 3-(4-metilfenil)-2-

-TBSoxi-2-ciclo-hexanona(XII, R^=TBSf R2=R2=R4=H,AR=^"’met;*'^^e" nil) pode preparar-se a partir de 1,2-ciclo-hexanodiona mediante tratamento com uma base, tal como o bis(dimetilsilil)--amideto de lítio, seguido por tiossulfonato de 4-metilfenil-4-metil-benzeno; o produto resultante ê tratado com uma base, por exemplo trietilamina, e triflato de TBS para se obter o produto pretendido.

Os compostos de fórmula geral XI, na qual R^ e R^ não representam ambos um átomo de hidrogénio, podem preparar-se a partir de 1,4-ciclo-hexanodiona. Assim, converte-se primeira mente 1,4-ciclo-hexanodiona em uma forma mono-protegida de fõr mula geral XVa na qual R^' e R^', conjuntamente com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam um grupo cetona pro tegido.

XVa

De preferência a cetona é protegida por conversão em um cetal. 0 monocetal de fórmula geral XV pode obter-se após tratamento com uma quantidade controlada de um álcool, tal como metanol, um ortoéster, tal como o ortoformato de metilo, tal como 2,2-dimetoxipropano, ou um diol, tal como o etilenoglicol. Alguns dos monocetais de 1,4-ciclo-hexanodiona estão comercializados, por exemplo, mono-etileno-cetal e mono-2,2-di-metil--trimetileno-cetal. A 1,4-ciclo-hexanodiona mono-protegida de fórmula geral c * XVa pode converter-se em uma ciclo-hexanona 4-hidroxi-protegidaf primeiramente, por redução da cetona, para um grupo hidroxi uti lizando, por exemplo, boro-hidreto de sódio. 0 grupo hidroxi pode proteger-se utilizando procedimentos e reagentes conhecidos, por exemplo, mediante tratamento com uma base, tal como o hidreto de sódio e o brometo de benzilo. O grupo protector de cetona é, em seguida, removido para proporcionar uma ciclo-hexa nona 4-hidroxi-protegida.

na qual um dos símbolos e R^Hrepresenta um átomo de hidrogé nio e o outro representa um grupo hidroxi protegido.

Os compostos de fórmulas gerais XVa e XVb são depois transformados para dar compostos de fórmula geral XI, na qual e R^ não representam ambos um átomo de hidrogénio. Uma se quência reaccional deste tipo está representada no Esquema IV.

Esquema IV SPh 0

1. LDA Rq 2.PhSS02Ph ^

Pb(OAc)4 PHs OAc Λ

0

XV XVI

XVIII

XIX

OR 1

XVII -2 %

No Esquema IV, e não representam ambos um átomo de hidrogénio mas têm os restantes significados definidos antes para a fórmula geral I. A ciclo-hexanona de fórmula geral XV, preparada de acordo com os procedimentos descritos ante-riormente, i tratada, primeiro, com uma base, tal como o diiso propilamideto de lítio (LDA) e, em seguida, com o éster s-fenllico do ácido benzenossulfonotióico, para dar o composto oi -fenil-sulfureto de fórmula geral XVI correspondente. Um composto de fõr mula geral XVI é oxidado com tetra-acetato de chumbo para dar um derivado ç( -cetoxi-ctf -feniltiociclo-hexanona de fórmula geral XVII, que se pode converter no correspondente éter enólico sililíco de fórmula geral XVIII, por tratamento primeiro com uma base forte, tal como o diisopropilamideto de lítio, seguido de um agente de sililagão de fórmula geral R^-L na qual R^ represen ta um grupo triorganosililo, e L representa um grupo removível. 0 composto de fórmula geral R^-L pode ser, por exemplo, o trifla to de TBS e o iodotrimetilsilano. 0 éter enólico silílico de fórmula geral XVIII é convertido no correspondente derivado 2-sililoxi-2-ciclo-hexenona de fórmula geral XIX mediante hidró lise catalisada por uma base.

As ciclo-hexanonas de fórmulas gerais XI e XII em que R2 representa um átomo de hidrogénio podem converter-se nos de rivados θ( -hidroxi correspondentes (R2=OH) por tratamento da ciclo-hexanona com uma base, tal como o bis(trimetilsilil)--amideto de lítio, seguido por agente de hidroxilação, tal como o reagente conhecido como MOOPh(Aldrich). 0 grupo 0^-hidro xi pode em seguida proteger-se utilizando grupos protectores convencionais para se obterem ciclo-hexanonas de fórmulas gerais XI e XII em que R2 representa um grupo hidroxi protegido. -26- -26-

Os compostos de fórmula geral I podem também preparar -se a partir de hidroxi-3-hepteno-l,5-diino-7-protegido e uma arilsulfociclo-hexanona do modo descrito no Esquema V.

Esquema V

No Esquema V, M', R^, R2» R^r R^ e Ar têm os significados definidos antes; P representa um grupo protector de hi-droxi. 0 grupo protector de hidroxi não é particularmente limitado sendo preferido um grupo tetra-hidropiranilo. -2 0 diineno-ãlcool protegido de fórmula geral XX pode preparar-se a partir de cis-1,2 dicloroetileno e álcool pro-pargílíco protegido de um modo similar ao descrito supra para a preparação do diineno-acetal de fórmula geral X. Obtém--se uma arilsulfociclo-hexenona de fórmula geral XXI a partir da ariltiociclo-hexenona correspondente de fórmula geral XII mediante oxidação com m-cloroperbenzóico (mCPBA). A condensação do diineno-ãlcool protegido de fórmula geral XX e da arilsulfociclo-hexenona de fórmula geral XXI é realizada num dissolvente orgânico, inerte, tal como o tetra-hidrofura no, a uma temperatura inicial de -78°C. Deixa-se a temperatura da reacção aumentar gradualmente até à temperatura ambiente, ficando a reacção, geralmente, completa em algumas horas. 0 pro duto de fórmula geral XXII obtido deste modo é submetido a aque cimento em piridina â temperatura de cerca de 105°C para efec-tuar a eliminação do sulfóxido de arilo, obtendo-se a enona cor respondente. A desprotecção do grupo hidroxilo pode realizar--se utilizando técnicas convencionais; por exemplo, pode remover-se o grupo tetra-hidropiranilo por hidrólise ácida. 0 álcool livre de fórmula geral XXIII é, em seguida, convertido no correspondente diineno-aldeído complexado com cobalto, de fórmula geral I, mediante tratamento com octacarbonil-dicobalto e oxidação com brometo de t-butoxi-magnésio e (azodicarbonil)--dipiperidina. A presente invenção proporciona um processo eficaz para a obtenção de um sistema cíclico 8-hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec--4-eno-2,6-diino-13-ona. Os produtos que se podem obter por este processo, por exemplo, os compostos de fórmulas gerais IV e V, podem depois transformar-se para se obter a aglícona de espera-

micina/caliquemicina. Assim, os compostos de fórmulas gerais IV e V sao intermédios úteis para a síntese de compostos antd. tumorais pertencentes à classe estrutural de esperamicina/ca liquemicina. Além disso, os compostos de fórmulas gerais IV e V podem acoplar-se a agentes antitumorais conhecidos, por exemplo, o clorambucil pode ser ligado a um grupo 8-hidroxi utilizando um seu equivalente de acilação, tal como o cloreto de ácido, para se obterem moléculas híbridas activas contendo melhor perfil de actividade biológica do que o composto progenitor.

Os compostos de fórmula geral VI, na qual o grupo pro-tector foi removido e de fórmula geral VII, na qual o grupo R cl representa um átomo de hidrogénio , são eles próprios compostos citotóxicos e, portanto, são úteis para inibir a proliferação rápida de células indesejadas, tal como no processo neo plásico. Como agente terapêutico para o tratamento de tumores de mamíferos, estes compostos podem ser administrados segundo as formas de administração apropriadas para esperamicina e ca liquemicina. Assim, podem ser administrados por via sistémica ou tópica; a via preferida é a administração parentérica; mas, em geral, devido ao facto de os compostos da presente invenção terem menor citotoxicidade do que a esperamicina, doses 10 a 1000 vezes superiores ã da esperamicina podem ser toleradas e podem ser mais adequadas. A via de administração e a dose óptima podem ser determinadas facilmente pelos especialistas na matéria e variarão, evidentemente, dependendo de factores, tais como o tipo e o sítio do tumor a tratar e as caractierísticas in dividuais dos doentes, tais como extensão da doença, a idade, o peso e outros.

A presente invenção inclui no seu âmbito as composições farmacêuticas que contêm uma quantidade eficaz inibidora de tumor, de um composto de fórmula geral IV no qual os grupos pro-tectores foram removidos ou um composto de fórmula geral VII na qual R representa um átomo de hidrogénio em associação com um

CL veiculo ou diluente aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Estas composições podem preparar-se sob qualquer forma far macêutica apropriada para administrar pela via desejada. Os exemplos destas composições incluem composições sólidas para ad ministração oral, tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, põs e grânulos; composições liquidas para administração oral tais como soluções, suspensões, xaropes ou elixires; e preparações para administração parentérica, tais como soluções, suspensões ou emulsões estéreis. As composições farmacêuticas podem também preparar-se sob a forma de composições sólidas estéreis que podem dissolver-se em água esterilizada, solução de cloreto de só dio fisiológica ou outro meio injectãvel estéril, imediatamente antes do uso.

Além disso, os compsotos de fórmula geral VI nos quais os grupos protectores foram removidos e de fórmula geral VII na qual R& representa um átomo de hidrogénio são eficazes para danificarem o DNA e clivarem o DNA de dupla hélice são portanto valiosos como reagentes laboratoriais, para estas finalidades.

Actividade biológica 0 composto do Exemplo 4 foi avaliado in vitro contra três linhas de células tumorais de cólon humano; HCT-116, HCT/ /VM46 e HCT/VP35; as duas últimas são resistentes a teniposido /

e etoposido, respectivamente. 0 ensaio da citotoxicidade in vitro envolveu o desenvolvimento de células tumorais em placas de microtitulação aplicando métodos de cultura de tecido convencionais. A concentração do composto ensaiado requerida para inibir o desenvolvimento das células em 50% (CI5Q) foi determinada em seguida por uma técnica de quatro diluições em série. Na experiência incluíramrse caro controlos positivos, etoposido e teniposido. No Quadro I apresentam-se os resultados obtidos:

Quadro I

Resultados do ensaio de citoxicidade in vitro

Cl,-,, (ug/ml) Composto HCT-116 DU HCT/VM46 hct/vp; Exemplo 4 0,037 ^ 0,031 0,042 0,043 ^ 0,031 0,046 4 0,031 0,047 0,072 Etoposido 0,101 4,24 5,14 0,128 3,57 6,29 0,140 2,08 6,75 Teniposido 0,077 0,313 0,084 0,088 0,237 0,091 0,083 0,236 0,111 e trataram-se com diversas doses 0 composto do Exemplo 4 foi também avaliado contra leu cernia P388 murina transplantãvel. Implantaram-se por via in-traperitonialmente inoculos de tumor com 10^ células de leuce mia P388 em murganhos CDF^ do composto de ensaio. Utilizaram-se 6 murganhos para cada do se e trataram-se 10 murganhos com solução de cloreto de sódio para servirem como controlo. O composto de ensaio foi adminijs trado por via intraperitonial durante 5 dias consecutivos com início no lQ dia após a implantação do tumor. A actividade an titumoral expressou-se sob a forma de percentagem de T/C que é a relação entre o tempo médio de sobrevivência (MST) para o gru po tratado com o fármaco e o tempo médio de sobrevivência para o grupo de controlo tratado com solução de cloreto de sódio.

Um composto que tenha uma % T/C de 125 ou mais é consi_ derado como possuindo actividade antitumoral significativa. Os resultados do ensaio de P388 no 39Q dia da experiência para o composto do Exemplo 4 apresentam-se no Quadro II. Os resultados indicam que este composto tem grande actividade sobre as células de leucemia P388.

Quadro II

Actividade in vivo sobre leucemia P388

Dose (mg/kg) Tempo de sobrevivência % T/C sobrevivência (dias) d.5 (39)* 32 7 64 6/6 16 9,5 86 6/6 8 > 39 355 6/6 (4) 4 NJ O O 182 6/6 2 16,5 150 6/6 1 13 118 6/6 Controlo 11 100 10/10 * Os números entre parênteses representam um número de murganhos sobreviventes no 39° dia.

Os Exemplos seguintes são ilustrativos da presente invenção e não devem ser considerados como limitativos do seu âm bito em qualquer sentido.

Aspectos Específicos Preparação de Compostos Iniciais

As estruturas dos compostos descritos nesta secção são apresentadas em páginas separadas depois da secção dos Exemplos.

Preparação I (Z)-7,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3-hepten-l,5-diino-[composto A] a) (Z)-5-cloro-l,l-dietoxi-4-penteno-2-ino[composto B]

Adicionaram-se 4,5 ml (60 mmoles) de cis-1,2-dicloro-etileno puro, seguidos de 8,0 ml (81 mmoles) de butilamina, a uma solução de 0,90 g (4,73 mmoles) de iodeto de cobre e 1 g (0,86 mmoles) tetraquis(trifenilfosfina)-paládio em 40 ml de ben zeno anidro, agitando sob atmosfera de argonà temperatura de 25°C. Imediatamente a seguir, adicionou-se através de um tubo uma solução de 5 g (39 mmoles) de 3,3-dietoxi-propino em 10 ml de benzeno. Envolveu-se o recipiente da reacção numa folha de alumínio para o proteger da luz e agitou-se a mistura reaccional durante 4,2 horas ã temperatura de 25°C. Filtrou-se a mistura reaccional castanho-escuro por sucção através de um filtro de vidro-sinterizado grosseiro e diluíu-se até cerca de 180 ml com éter dietílico. Lavou-se a solução com 75 ml de ãgua e com 120 ml de solução saturada de cloreto de sódio e secou-se a fase orgâ nica sobre sulfato de sódio anidro e em seguida concentrou-se sob vazio. Submeteu-se o resíduo a uma cromatografia rápida em gel de sílica utilizando como eluente éter dietílico/penta no, a 5%, depois a 10% e em seguida a 15%, para se obter o pro duto desejado sob a forma de um líquido límpido (3,9 g rendimento de 55%). RMN *Η (CDC13): £ 6,46 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,92 (dd, J = 1,5 7,6 Hz, 1H), 5,45 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 3,80 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 1,26 (t, J = 7,0 Hz, 3H). b) (7,)-1,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3-hepteno-l, 5-diino

Através de um tubo adicionou-se uma solução 5-cloro--1,l-dietoxi-4-penteno-2-ino (Composto B; 3,8 g; 20 mmoles) em 10 ml de benzeno a uma solução de 1,1 g (0,95 mmole) tetraquis-(trifenilfosfina) paládio e 0,47 g (2,46 mmoles) de iodeto de cobre em 20 ml de benzeno, com agitação sob atmosfera de argon, ã temperatura de 25°C. Imediatamente a seguir, adicionaram--se 4 ml (40 mmoles) de butilamino, seguido da adição de 5 ml (40 mmoles) de trimetilsililacetileno, através de uma seringa. Envolveu-se o recipiente da reacção numa folha de alumínio e agitou-se a mistura reaccional à temperatura de 25°C durante 4,25 horas. Verteu-se a mistura reaccional em 100 ml de água e extraíu-se com 100 ml de éter dietílico. Reextraíu-se a fase aquosa com 2 x 40 ml de éter dietílico, reuniram-se os extrac tos orgânicos, lavou-se com 50 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio e concen-trou-se sobre vazio. A cromatograf ia rápida sobre gel de síljl

-34- aa utilizando como eluente éter dietílico/pentano, a 2%, depois a 4% e em seguida a 5% proporcionou 2,7 g do composto em título (rendimento de 54%) sob a forma de um óleo castanho claro. RMN ΧΗ (CDC13) $ : 5,89 (s, 2H), 5,46 (s, 1H), 3,83-3,75 (m, 2H), 3,69-3,61 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,1 Hz, 6H), l,40E-4 (s, 9H) . RMN 13C (CDC13) è : 130,6, 111,6, 92,8, 92,0, 79,4 , 61,3, 15,2.

Preparação II (Z)-6-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]-6-(7,7-dietoxi-3--hepteno-1,5-diinil)-2-ciclo-hexenona (composto C) a) (Z)-6- [ [ (1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]-6-(7,7-dieto-xi-3-hepteno-l,5-diinil)ciclo-hexanona (Composto D)

Adicionaram-se 3 g (71,5 mmoles) do mono-hidrato de hi dróxido de lítio a uma solução de 3,20 g (12,6 mmoles) de (Z)--7,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3-hepteno-l,5-diino (composto A) em 30 ml de tetra-hidrofurano e 5 ml de água. Agitou-se a mi£ tura reaccional durante 4 horas e verteu-se em 100 ml de penta no e 50 ml de água. Lavou-se a fase orgânica com 50 ml de solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio e, em seguida, concentrou-se sob vazio por evaporação ro tativa. Adicionaram-se 50 ml de cloreto de metileno e concentrou-se novamente a solução por evaporação rotativa e, em seguida, colocou-se sob auto vácuo durante 25 minutos para se ob terem 3,3 g aproximadamente, de um óleo castanho claro que ime

diatamente se dissolveu em 160 ml de tetra-hidrofurano anidro. Arrefeceu-se a solução a temperatura de -78 C e, em seguida , adicionou-se hexametil-disilazano de lítio (1,0 M, em tetra--hidrofurano, 15,5 ml, 15,5 mmoles) por meio de uma seringa , numa só porção. Agitou-se a mistura reaccional durante 20 mi nutos e, em seguida, adicionou-se uma solução de 3,65 g (6,12 mmoles) de 2-tert-butildimetilsililoxi-2-ciclo-hexenona em 10 ml de tetra-hidrofurano anidro, que tinha sido previamente arrefe cida até, aproximadamente, à temperatura de -50°C, efectuando--se a adição de uma só vez por meio de uma seringa. Agitou-se a mistura reaccional durante 1 minuto e em seguida, retiraram--se os banhos de arrefeciemnto. Deixou-se a mistura reaccional sob agitação durante 2,5 horas para retomar a temperatura ambiente (25°C) e gerar in situ o enolato de lítio. Diluíu-se o enolato com água para se obter a cetona correspondente, do seguinte modo: verteu-se a mistura reaccional em 400 ml de uma mistura a 9:1 de acetato de>etilo/éter dietílico e 100 ml de água. Extraíu-se a mistura e, em seguida, voltou-se a extrair a fase aquosa com 100 ml da mistura a 1:1 de acetato de etilo/ /éter dietílico. Eeuniram-se os extractos orgânicos, lavou-se com 50 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se sob vazio. A cromato-grafia rápida utilizando uma mistura de acetato de etilo/hexa-no, a 3%, depois a 4% e em seguida a 5%, deu 3,50 g (rendimento de 72%) do composto em título pretendido, a ciclo-hexanona sob a forma de um óleo verde muito claro. RMN ΧΗ (CDC13) 6 :5,92 (s, 2H), 5,41 (s, 1H), 380-3,70 (m, 2H), 3,65-3,55 (m, 2H), 2,88 (dt, J = 13,3, 5,7 Hz, 1H), 2,46 (td, J = 7,7, 12,2 Hz, 1H), 2,27-2,23 (m, 1H), 2,00-1,58 (m, 5H), -36- 1,24 (t, J = 7,08 Hz, 6H), 0,91 (s, 9H), 0,046 (s, 3H), 0,018 (s, 3H). b) (Z)-l,6-bis[[[(l,l-dimetiletil)dimetil]silil]oxi]-6-7,7- dietoxi-3-hepteno-l,5-diinil]ciclo-hexeno [composto E]

Adicionou-se por meio de uma seringa 0,62 ml de tri-fluorometanossulfonato de tert-butildimetilsililo puro a uma solução de 0,69 ml (2,72 mmoles) de trietilamina e 0,54 g (1,33 mmole) do composto D preparado anteriormente em 20 ml de clore to de metileno agitando-se à temperatura de 25°C sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura reaccional durante 22,5 horas e, em seguida, verteu-se em 100 ml de cloreto de metileno e 50 ml de água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se sob vazio e submeteu-se o resíduo a uma cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de acetato de etilo a 3%/hexano para obter o compos^ to em título, (683 mg, rendimento de 98%), bis-sililoxi-ciclo--hexeno sob a forma de um líquido límpido. IV (NaCl, película): 3046, 2954, 2932, 2890, 2858, 2212, 1660, 1468, 1252 cm"1. RMN 1H (CDC13)& : 5,88 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 1,10, 1,3Hz, 1H), 4,82 (t, J = 3,9 Hz, 1H), 3,79-3,74 (m, 2H), 3,64-3,58 (m, 2H), 2,05-1,99 (m, 4H), 1,81-1,56 (m, 2H), 1,24 (t, J = 7,1 Hz, 6H), 0,94 s, 9H), 0,87 (s, 9H), 0,21 (s, 3H) , 0,18 (s, 3H), 0,17 (s, 3H), 0,16 (s, 3H). RHM 13C (CDC13) S : 151,1, 121,4, 118,1, 105,0, 102,1; 92,2, 91,5, 82,9, 81,5, 70,2, 61,2, 41,1, 26,1, 24,4, 18,8, 18,5, 18,4, 15,3, -2,8, -3,0, -4,3, -4,4.

c) (Z)—6— C[[ (1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]-6-(7,7-dieto xi-3-hepteno-l,5-diinil]-2-ciclo-hexenona [composto C] A uma solução de 1,0 g (1,98 mmole) do composto E em 60 ml de dioxano, adicionaram-se 600 mg (5,41 mmoles) de dió-xido de selénio. Submeteu-se a mistura reaccional a refluxo durante 1,5 horas e adicionaram-se mais 300 mg (2,71 mmoles) de dióxido de selénio e continuou-se o refluxo durante mais 3 horas. Em seguida, verteu-se a mistura reaccional em 150 ml de acetato de etilo e 100 ml de solução aquosa saturada de hi-drogenocarbonato de sódio. Extraíu-se novamente a fase aquosa com 50 ml de acetato de etilo. Reuniram-se as fases orgânicas, secou-se sobre sulfato de sódio, concentraram-se sob vazio e purificou-se por cromatografia rápida em gel de sílica utilizando uma mistura de hexano e acetato de etilo a 3% e depois a 5% para se obterem 620 mg (rendimento de 77%) da ciclo-hexenona em título sob a forma de um óleo límpido.

Anãl. Calcd. para c, 68,62; H, 8,51.

Encontrado: C, 68,26; H, 8,42. RMN 1H (CDC13) '· o /93-6, -88 (m, 1H), £ j,98 (dupleto de mul- tipletos, J = 9,49 Hz, 1H) , 5,89 (s , 2H) , - 5,41 (s, 1H) , 3,80- -3, 70 (m, 2H) , 3,66-3, 55 (m, - 2H), 2 ,82-2, -66 (m, 1H), 2 ,53-2,40 (m, 1H) , 2,35- 2,16 (m, 2H) , 1,24 (t , J = 7,04 Hz, 6H), 0,89 (s, 9H) , 0,22 (s, 3H), 0,20 (s, 3H) • RMN 13C (CDC1 3) 6 : 194,4, 150,7, 127,4, - 120,5, 120,0 , 95,4, 92, 4, 92, 2-, 84 ,6, 82,5 , 73, -6, 61,3 , 39,( ), 26,0, 25,4, 18,5, 15, 3, -3, 0, -3 ,1. -38-

Preparagão III

[ Jl- [6— [(5,6—ly; 5,6-ty) -7,7-dietoxi-3-hepteno-l, 5-diinil-6-- [ [ (1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]oxi]-2-ciclo-hexenona]3 --hexacarbonil-cobaJ-to, di(Co-Co), (Z) [composto F) A \ima solução do composto C (0,64g 1,584 mmole) adicio nou-se 0,542 g (1,58 mmole) de octacarbonil-dicobalto sólido , agitando à temperatura de 25°C sob atmosfera de azoto em 28 ml de heptano anidro. Agitou-se a mistura reaccional durante 2 horas e concentrou-se sob vazio. A cromatografia rápida em gel de sílica utilizando uma mistura de acetato de etilo/hexa-no, primeiro a 2%, depois a 3% e em seguida a 5%, proporcionou 728 mg (rendimento de 66%) do complexo de cobalto em título pretendido sob a forma de um óleo de cor púrpura escuro.

Anál. Cale. para C29H34O10SiCo2: C, 50 ,59; H, 4,98; N, 0,0. Encontrado: C, 50 ,56; H, ^ · a o ** o • IV (NaCl, película): 2978, 2956, 2932, 2896, 2858, 2094, 2056, 2028, 1700, 1624, 840 cm"1. RMN 1H (CDC13) $ : 6,89 e 6,86 (t, 3,91 Hz, 0,5H), 6,78 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 5,99 e 5,96 (t, J = 2,0 Hz, 0,5 H), 5,87 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 3,83-3,75 (m, 2H), 3,68--3,59 (m, 2H), 2,50-2,43 (m, 2H), 2,26 (t, 5,6 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 6,9 Hz, 6H) , 0,84 (s, 9H) , 0,17 (s, 3H) , 0,07 (s, 3H) . RMN 13C (CDC13) $ : 199,1 (b), 192,6, 149,9, 137,1, 126,9, 110,5, 101,6, 98,9, 96,0, 85,3, 82,0, 73,6, 63,2, 38,2, 25,7, 24,2, 18,3, 15,0, -3,3, -3,5. -39-

Preparagão IV.

[ ji—[6-[(5,6-^:5,6-V^)-7-oxo-3-hepteno-l,5-diinil-6-[[1,1-dime-tiletil)dimetil-siil]oxi]-2-ciclo-hexenona]]hexacarbonil-co-balto, di.(Co-Co), (Z) (Composto G)

Com o auxílio de uma seringa adicionou-se 0,195 ml (1,79 mmole) de tetracloreto de titânio a uma solução de 0,41 g (0,60 mmole) do complexo de cobalto de ciclo-hexenona (composto F) e de 67 mg (0,60 mmole) de l,4-diazobiciclo[2,2,2]octano em 40 ml de cloreto de metileno, com agitação à temperatura de -65°C, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura reaccional durante 5 minutos e, em seguida, verteu-se sobre 60 ml de cloreto de metileno e 25 ml de água. Extraíu-se a mistura e , em seguida, extraíu-se novamente a fase aquosa com 10 ml de clore to de metileno. Reuniram-se as fases orgânicas, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se por evaporação rotativa e cromatografou-se para se obter 301 mg (rendimen to de 82%) do aldeído complexado com cobalto em título, sob a forma de um semi-sólido púrpura avermelhado, espesso e viscoso.

Anál. calcd. para C25H24°9S^Co2: Cf 87; H, 3,94; N, 0,00.

Encontrado: C, 48,42; H, 3,82; N, 0,04. RMN 1H (CDC13) $ : 10,39 (s, 1H), 6,93 (dt, J = 10,1, 4,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 6,03 (dt, 10,1, 1,9 Hz, 1H) , 5,93 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,56-2,18 (m, 4H), 0,87 (s, 9H), 0,19 (s, 3H), 0,11 (s, 3H). RMN 13C (CDC13) 5 : 198,5-198,1 (b, -CO's), 193,3, 190,8 , 150,9, 136,6, 127,4, 111,5, 100,4, 85,2, 73,9, 38,1, 25,9, 24,4, 18,5, -3,15, -3,35.

Preparagão V

Método alternativo para a preparação do composto E

Seguindo o procedimento descrito na preparação II (a), preparou-se uma solução de enolato de litio a partir de 5 mmo les de 7,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3-hepteno-l,5-diino. Agitou-se esta solução ã temperatura de -78°C em 85 ml de dissol vente e, em seguida, adicionaram-se 1,15 ml (5,0 mmoles) de trifluorometanossulfonato de tert-butildimetilsililo. Agitou--se a mistura reaccional durante 15 minutos à temperatura de -78°C e em seguida retirou-se do banho de arrefecimento fican do sob agitação durante mais 25 minutos, antes de se verter nu ma mistura de 100 ml de água, 70 ml de acetato de etilo, 25 ml de éter dietílico e 25 ml de pentano. Extraiu-se a mistura e, em seguida, extraíu-se novamente a fase aquosa com 100 ml de uma mistura a 50:50 de pentano/acetato de etilo. Reuniram-se os extractos orgânicos, lavou-se com 75 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio, con-centrou-se sob vazio e purificou-se por cromatografia rápida em gel de sílica utilizando como eluente acetato de etilo/hexano , a 2% e depois a 3%, para se obterem 1,47 g (rendimento de 51%) do éter sililenõlico pretendido, idêntico ao produto preparado na Preparação II (b).

Preparagão VI

Método alternativo para a preparagão do composto C

Seguindo o procedimento da preparação II (a), preparou-se uma solução do enolato de litio em 85 ml de dissolven- -41-

% te, a partir de 5 mmoles de 7,7-dietoxi-l-trimetilsilil-3--hepteno-l,5-diino. A esta solução adicionaram-se por meio de uma seringa; à temperatura de -78°C, durante um período de 2 minutos, uma solução de cloreto de fenil-selénio (0,99 g, 5 mmoles) em 6 ml de tetra-hidrofurano anidro que previamente se arrefecera até à temperatura de -78°C. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura de -78°C durante 20 minutos, em segui da retirou-se o banho de arrefecimento e manteve-se a agitação durante mais 20 minutos e verteu-se a mistura reaccional em 100 ml de éter dietílico/100 ml de acetato de etilo/100 ml de água e extraíu-se. Extraíu-se de novo a fase aquosa com 50 ml de éter dietílico/acetato de etilo a 1:1. Reuniram- se os ex-tractos orgânicos, lavou-se 75 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-e sobre sulfato de sódio e concentrou--se sob vazio. A cromatografia rápida sobre gel de sílica uti^ zando acetato de etilo/hexano, primeiro a 4% e em seguida a 5%, deu 1,68 g (rendimento de 57%) de um líquido castanho claro que era uma mistura de seleneto de fenilo, 2-[[(1,1-dimetilsilil)--dimetil]-silil]-oxi-2-(7,7-dietoxi-3-hepteno-l,5-diinil)-6-fe-nilseleno-ciclo-hexanona [composto H).

Dissolveu-se a mistura de selenetos impura em 10 ml de cloreto de metileno e adicionou-se 0,485 ml (6,0 irmoles) de piri-dina. Arrefeceu-se a solução num banho de gelo e água e adicio nou-se através de uma seringa 0,82 ml (8 mmoles) de peróxi-do de hidrogénio a 30% em 1 ml de ãgua, numa só porção. Agitou--se a mistura reaccional durante 5 minutos e removeu-se o banho de gelo. Agitou-se a mistura reaccional durante 5 minutos e removeu-se o banho de gelo. Agitou-se a mistura reaccional durante 25 minutos e adicionou-se 0,25 ml da mesma solução de perõxido de hidrogénio (1 mmole). Agitou-se a mistura reaccio nal durante 15 minutos e adicionaram-se 1,57 ml (7 mmoles9 de solução de perõxido de hidrogénio. Verteu-se a mistura reac-cional em 160 ml de cloreto de metileno, 50 ml de solução aquo sa saturada de hidrogenocarbonato de sõdio e 50 ml de ãgua. Filtrou-se por sucção a mistura agitada, para separar a emulsão e separaram-se as fases. Lavaram-se os extractos orgânicos com 50 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sõdio, secaram-se sobre sulfato de sódio e filtraram-se sob vazio. A cromatografia rápida utilizando acetato de etilo e 4%/hexano deu a enona pretendida cujas propriedades físicas foram coeren tes com o produto obtido na Preparação II (c).

Preparação VII

Métodos alternativos para a preparação do composto C

Adicionaram-se 28,7 ml (28,77 mmoles) de uma solução 1,0 M de bis(trimetil)sililamideto de lítio em tetra-hidrofu-rano a 30 ml de tetra-hidrofurano anidro, com agitação e sob atmosfera de azoto e arrefeceu-se a solução até à temperatura de -10°C. Adicionou-se através de uma seringa, com uma corrente lenta, uma solução de 1,54 g (13,7 mmoles) de 1,2-ci clo-hexanodiona em 7 ml de tetra-hidrofurano. A mistura reaccional tornou-se castanho avermelhado escuro. Agitou--se a mistura reaccional durante 15 minutos ã temperatura de -10°C e, em seguida, arrefeceu-se até à temperatura de -50°C. Através de uma seringa e numa sõ porção, adicionou-se uma solução de 3,5 g (14,2 mmoles) de 4-metil-benzenotiossulfo nato de 4-metilfenilo em 10 ml de tetra-hidrofurano, ã tempera tura de -50°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 2 horas à temperatura de -50°C , deixou-se aquecer à temperatura ambien te até aproximadamente 0°C e, em seguida, adicionaraam-se 100 ml de ácido clorídrico 0,1N. Extraíu-se a mistura reaccional com 300 ml e, em seguida, com 100 ml de éter dietílico, reuniram-se os extractos orgânicos e secou-se sobre sulfato de sódio anidro. A concentração sob vazio proporcionou um sólido amarelo que se purificou por cromatografia rápida sobre gel de síli ca, utilizando cloreto de metileno, acetato de etilo a 10%/hexa no e, em seguida, metanol a 3%/cloreto de metileno como eluen-te. Isolou-se o produto pretendido (1,939 g; rendimento de 60%), 2-hidroxi-3-[(4-metilfenil)-tio]-2-ciclo-hexenona composto Iy sob a forma de um sólido branco.

Anál. Calcd. para C-^H^C^S: C' 66,64; H, 6,02; N, 0,00.

Encontrado: C, 66,63; H, 6,10; N, 0,00. IV (KBr): 3372, 3054, 2954, 2920, 2870, 2834, 1642, 1600, 820, 656, 628 cm-1. RMN 1H (CDC13): & 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,47 (s, 1H, -OH), 2,44 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,17 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 1,87 (m, 2H). RMN 13C (CDC13) & : 191,1, 143,0, 140,3, 136,0, 133,5, 130,6, 126,3, 35,4, 28,3, 22,8, 21,5.

Através de uma seringa adicionaram-se 20,75 ml (90,03 mmoles) de trifluorometanossulfonato de tert-butildimetilsili lo (TBSOTf) a uma solução de 17,64 g (75,28 mmoles) do composto Iy e de 15,7 ml (112,92 mmoles) de Et^N em 250 ml de cio reto de metileno, com agitação sob atmosfera de azoto, à temperatura de 2°C. Decorridos 5 minutos, retirou-se o banho de ar- refecimento e deixou-se a mistura reaccional sob agitação duran te 22 horas. Adicionou-se mais 0,78 ml (5,59 mmoles) de Et^N seguido de 0,865 ml (3,76 mmoles) de TBSOTf e agitou-se a mis^ tura reaccional durante mais 2 horas. Em seguida verteu-se a mistura reaccional em 200 ml de água e 50 ml de cloreto de meti. leno e extraíu-se. Lavou-se a fase orgânica com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio e concentrou-se sob vazio. A purificação por cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente um gradiente de acetato de etilo de 0 a 10%/hexano deu 21,22 g (rendimento de 81%) sob a forma de um sólido de cor branco sujo de 2-TBSoxi--3-[(4-metilfenil)-tio]-2-ciclo-hexenona (composto J). KMN 1H (CDC13) 6 : 7,38 (d, J = 8,06 Hz), 2H), 7,15 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,38-2,34 (m, 2H), 2,12 (t, J = 6,05 Hz, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,00 (s, 9H), 0,21 (s, 6H).

Através de uma pipeta adicionou-se uma solução de 8,64 g (40 mmoles) de MCPBA com uma pureza de 80-85% em 125 ml de diclorometano, à temperatura de 25°C, a uma solução de 12,7 g (36,4 mmoles) do composto J em 600 ml de diclorometano à temperatura de -78°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 1,75 horas ã temperatura de -78°C e verteu-se em 1100 ml de éter dietílico e 500 ml de solução aquosa saturada de sulfito de sódio. Após extracção, lavou-se a fase orgânica sucessivamente com 300 ml e com 200 ml de solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e depois secou-se com sulfato de sódio. Após remoção do dissolvente sob vazio, purificou-se o produto por cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando primeiro acetato de etilo a 10%/hexano e depois acetato de etilo a 20%/hexano como eluente para se obterem 12,2017 g (ren dimento de 92%) do sulfóxido correspondente [composto K) sob a forma de um óleo viscoso amarelo claro.

Anãl. calcd. para ci9H28°3SSi: C, 62,59; H; 7,49; N, 0,00.

Encontrado: C, 62,24; H, 7,49; N, 0,06. IV (NaCl, Filme): 2954, 2930, 2886, 2858, 1694, 1610, ΙΟδΟαη"1. RMN 1H (CDC13) $ : 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8,2

Hz, 2H), 2,82-2,74 (m, 1H), 2,55-2,46 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,38-2,29 (m, 1H), 2,05-1,86 (m, 3H), 0,98 (s, 9H), 0,32 (s, 3H), 0,20 (s, 3H). RMN 13C (CDC13) & : 195,5, 142,6, 141,6, 140,5, 130,6, 124,3, 38,3, 26,1/ 22,4, 21,5, 19,2, 18,5, -3,4, -4,0.

Através de uma seringa adicionaram-se 40 ml de uma solução 1,0M em tetra-hidrofurano de bis(trimetilsilil)-amideto delítio a uma solução de 7,13 g (40,0 mmoles) de 7,7-dietoxi--3-hepteno-l,5-diino em 250 ml de tetra-hidrofurano anidro , com agitação, à temperatura de -78°C, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a solução escura durante 30 minutos e, em seguida, adicionou-se por meio de um tubo, durante 5 minutos, uma solução de 12,15 g (33,3 mmoles) do composto K, que previamente fo ra arrefecida até à temperatura de -78°C. Retirou-se a mistura reaccional do banho de arrefecimento e manteve-se sob agitação à temperatura ambiente durante 1,6 horas. Verteu-se a mistura reaccional em 500 ml de ácido clorídrico IN e 1 litro de éter dietílico/acetato de etilo a 1:1 e extraíu-se. Extraíu-se novamente a fase aquosa com duas porções de 150 ml do referido dissolvente, reuniram-se os extractos orgânicos e lavou-se com 200 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio e, em se guida, secou-se sobre sulfato de sódio anidro. A purificação por cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando um gra diente de 10-25% de acetato de etilo/hexano como eluente, proporcionou 15,5 g (rendimento de 86%) de um líquido castanho viscoso que era o produto pretendido, sob a forma de ula mistu ra de diastereõmeros (composto L). IV (NaCl, Filme): 2930, 2858, 2214, 2256, 1736, 1652, 1798 , 1086, 1052 cm"1.

Durante 50 minutos aqueceu-se sob refluxo uma solução de 12,02 g (22,1 mmoles) do composto L e de 7,4 g (44,3 mmoles) de 2-mercaptobenzotiazol em 100 g de heptino e depois deixou-se arrefecer e verteu-se em 400 ml de éter dietílico e 400 ml de água. Separaram-se as fases, secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio anidro, eliminou-se a maior parte do éter .die tílico por evaporação rotativa, o que provocou a deposição de um precipotado castanho que se retirou por filtração sob sucção e se rejeitou. A purificação do filtrado por cromatografia rápida sobre gel de sílica, da forma habitual, proporcionou 4,47 g (rendimento de 50%) da enona pretendida que tinha as caracterís^ ticas físicas descritas anteriormente.

Preparação VIII

Método alternativo para a preparação do compsoto G a) (Z) 5-cloro-l-(2-tetra-hidropiraniloxi)-4-penteno- -47- -2-ino (composto M)

Através de um tubo adicionaram-se 600 ml de tetra-hidro furano desgasifiçado a um frasco contendo 7,5 g (39,6 mmoles) de iodeto de cobre e 5,93 g (5,13 mmoles) de tetraquis(trife-nilfosfina)paládio(0), com agitação sob atmosfera de ãrgon. Adicionaram-se 50 g (516 mmoles) de cis-1,2-dicloroetileno puro, por meio de uma seringa seguidos de 68 ml (688 mmoles) de butilamina. Durante 10 minutos, adicionaram-se, gota a gota, 48 g (344 mmoles) de 2-(3-propiniloxi)-tetra-hidrofurano. Após completar-se a adição agitou-se a mistura reaccional durante 10 minutos e, em seguida, arrefeceu-se por meio de um banho de ge lo e ãgua exterior durante 40 minutos. Retirou-se o banho de arrefecimento e manteve-se a mistura reaccional sob agitação durante 4 horas ã temperatura ambiente (25°C). Fez-se borbulhar ar através da mistura reaccional durante 15 minutos e, em segui da, filtrou-se por sucção através de um filtro de vidro sinteri. zado utilizando pentano e depois éter como lavagens de transferência. Retomou-se a reacção em acetato de etilo e lavou-se por duas vezes com ãgua. Extraíram-se as fases aquosas com ace tato de etilo, reuniram-se as fases orgânicas, secaram-se sobre sulfato de sédio, filtraram-se e concentraram-se sob vazio. A cromatografia rápida em gel de sílica utilizando acetato de etjL lo a 2,5% e depois a 4% em mistura com hexano como eluente pro porcionou 48,74 g (rendimento de 71%) sob a forma de um líquido ligeiramente avermelhado, transparente: RMN 1H (CDC13) S 6,33 (d, J=7,5 Hz, 1H) , 5,84 (m, 1H) , 4,80 (m, 1H) , 4,36 (m, 2H) , 3,78 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 1,80-1,40 (m, 6H). -48- RMN 13C (CDC13) S 128,7, 111,6, 96,7, 93,5, 79,6, 62,0, 54,5, 30,2, 25,3, 19,0. IV (NaCl película) 3084 , 3026, 2944, 2870, 2854, 1592 cm"1.

Anál. Calcd. para C102: C, 59,86) H, 6,53.

Encontra do: C, 59,74; H, 6,44; N, 0,03. b) (Z) 7-(2-tetra-hidroxipiraniloxi)-1-(trimetilsilil)-3- -hepteno-l,5-diino (Composto N)

Sob atmosfera de argon e com agitação adicionaram-se 500 ml de tetra-hidrofurano anidro desgasifiçado a 5,86 g (4,32 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) sólido e 5,17 g (27,1 mmoles) de iodeto de cobre (I). Através de um tubo adicionou-se uma solução de cloreto de vinilo (composto M do passo a) ; 45,38 g, 226,1 mmoles) em 100 ml de tetra-hi drofurano anidro, seguidos imediatamente da adição de 45 ml (455 mmoles) de butilamina pura. Revestiu-se o recipiente com folhas de alumínio para protecção da luz e, em seguida, adicio naram-se por meio de uma seringa, durante 4 minutos, 41,6 ml (294 mmoles) de trimetilsilil-acetileno. Após 10 minutos a mistura ficou muito quente arrefecendo-se com um banho de água arrefecida com gelo durante 3 minutos. Retirou-se em seguida o banho de arrefecimento e manteve-se a mistura reaccional sob agitação durante 4 horas à temperatura ambiente» Fez-se borbu lhar ar através da mistura reaccional durante 15 minutos e, em seguida filtrou-se por sucção através de um filtro de vidro sinteriza-do utilizando pentano e depois éter dietílico como lavagens de transferência. Diluíu-se a mistura reaccional com éter dietílico e lavou-se com 5 porções de 500 ml de água . Extraíram-se -49-

as fases aquosas com uma pequena quantidade de éter dietílico , reuniram-se os extractos orgânicos e secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se num evaporador rota ti vo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como eluente acetato de etilo primeiro a 2,5% e depois a 4% em mistura com hexano proporcionou52,86 g (rendimento de 89%) do padrão pretendido sob a forma de um líquido. RMN 1H (CDC13) 6 5,83 (m, 2H), 4,86 (bs, 1H), 4,44 (ABq, Jab= =14 Hz, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,52 (m, 1H) , 1,89-1,49 (m, 6H) , 0,33 (s, 9H). RMN 13C (CDC13) á 120,1, 119,7, 103,0, 101,7, 96,5, 93,4 , 83,0, 61,3, 54,6, 30,2, 25,3, 18,9, -0,21. IV (NaCl, película) 2956, 2144, 844 cm

Anál. Calcd. para C15H2202Si: c. 68,65; H, 8,45; N, o o o « Encontrado: c, 68,79; H, 8,35, N, 0,06. c) (Z) 7-(2-tetra-hidropiraniloxi)-3-hepteno-l,5-diino (composto-O)

Adicionaram-se numa só porção 22,55 g (0,54 mmole) de mono-hidrato do hidróxido de lítio a uma solução de 21,62 g (82,38 mmoles) de silil-diineno (composto N do passo b)) em 240 ml de tetra-hidrofurano e 40 ml de água, com agitação à temperatura de 25°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 1,58 horas e, em seguida, diluíu-se com uma mistura a 1:1 de éter dietílico/hexano e com água. Extraíu-se de novo a fase aquosa com três porções de éter dietílico, reuniram-se os extractos ogãnicos, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e submeteram-se a

-sY cromatografia rápida sobre gel de silica utilizando um gradien te de 2,5 a 10% de acetato de etilo/hexano como eluente para se obterem 15,69% (rendimento de 98%) de um líquido castanho. RMN 1H (CDC13) & 5,92 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 5,78 (DD; J = 11,1, 2,2 Hz, 1H) , 4,87 (m, 1H) , 4,45 (multipletoalto, 2H) , 3,83 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,30 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 1,79-1,48 (m, 6H) . RMN 13C (CDC13) & 121,2, 118,7, 96,6, 93,5, 84,7, 82,7, 80,.5, 62,0, 54,6, 30,2, 25,4, 19,0. IV (NaCl, película) 3288, 2944, 2870, 2854, 2096, cm"1.

Anál. Calcd. para ^i2H14<33= 75,76; H, 7,42. Encontrado = = C, 75,22; H, 7,30. d) (Z) 6-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsililoxi]-6-[7-(2-tetra- "v, -hidropiraniloxi)-3-hepteno-l,5-diinil]-2-ciclo-hexenona (Composto P)

Através de uma seringa adicionaram-se 89 ml (89 mmoles) de uma solução 1,0 M de bis(trimetilsililamideto) de lítio em tetra-hidrofurano a uma solução de 15,4 g (80,9 mmoles) de di-ineno (composto O do passo c)) em 500 ml de tetra-hidrofurano, com agitação ã temperatura de -78°C sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura reaccional durante 35 minutos e, em segui^ da, adicionaram-se 24,6 g (67,46 mmoles) de uma solução de su_l fóxido-cetona (composto K) em 100 ml de tetra-hidrofurano, à temperatura de -70°C, por meio de um tubo. Retirou-se o banho de arrefecimento e manteve-se a mistura reaccional sob agitação -51- à temperatura ambiente durante 2 horas (que alcançou gradualmen te a temperatura de 25°C). Diluíu-se a mistura reaccional com solução aquosa saturada de cloreto de amónio e extraíu-se com duas porções de uma mistura de acetato de etLlo/éter dietilico a 1:1. Reuniram-se os extractos orgânicos, lavou-se com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, em seguida com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sõ dio e concentrou-se sob vazio. A purificação por cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando um gradiente de 2,5 a 20% de acetato de etilo/hexano como eluente proporcionou 27,3 g (rendimento de 73%) de um óleo viscoso que constituía os ceto--sulfóxidos pretendidos sob a forma de uma mistura de diaste-reómeros.

Durante 1,75 horas aqueceu-se ã temperatura de 105°C uma solução de 27,3 g (49,2 mmoles) do sulfóxido obtido anterior mente em 540 ml de piridina e, em seguida, diluíu-se com to-lueno (adicionaram-se várias porções para auxiliar a remoção de piridina numa mistura azeotrópica) e concentrou-se num evapo-rador rotativo. Purificou-se o produto impuro por cromatografia rápida utilizando acetato de etilo a 5 e depois a 10%/hexano co mo eluente para se obterem 18,0 g (rendimento de 88%) de um óleo amarelo claro que constituía o produto pretendido contamina do com traços de sub-produtos de enxofre. Este produto foi utilizado directamente na reacção seguinte de désprotecção do álcool: RMN 1H (CDC13) & 6,89-6,82 (m, lH), 5,96 (dd, J = 10,91, 1,2 Hz, 1H) , 5,87-5,77 (m, 2H), 4,78 (m, 1H), 4,46-4,31 (m; 2H) , 3,81 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 2,70-2,64 (m, lH), 2,47-2,39 (m, 1H), 2,29-2,14 (m, 2H), 1,81-1,49 (m, 6H), 0,68 (s, 9H), 0,20 (s, 3H), 0,18 (s, 3H). /-52- e) (Z) 6-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]-6-[(7-hidroxi)- -3-hepteno-l,5-diinil-2-ciclo-hexenona (composto Q)

Adicionou-se 1,21 g (6,36 mmoles) de ácido £-toluenos-sulfónico a uma solução de éter tetra-hidropiranílico (composto P do passo (d), 18,0 g 43,3 mmoles) em 200 ml de metanol , com agitação ã temperatura de 25°C. Agitou-se a mistura reac-cional durante 30 minutos e, em seguida, concentrou-se num eva porador rotativo. Retomou-se o óleo impuro em acetato de etilo, lavou-se com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sõdio e, em seguida, com solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secaram-se os extractos orgânicos sobre sulfato de sódio anidro e depois concentraram-se sob vazio. A purificação por cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando um gra diente de 5 a 20% de acetato de etilo/hexano como eluente, pro porcionou 10,75 g (rendimento de 75%) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo claro. RMN jH (CDC13) 6,91 (m, aH), 5,98 (dt, J = 10,3, 1,9 Hz, 1H), 5,88 (dt, J = 10,8, 0,6 Hz, 1H), 5,80 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 6,2 Hz), 2,51-2,20 (m, 4H), 1,59 (s, 1H), 0,85 (s, 9H), 0,20 (s, 3H), 0,18 (s, 3H) . RMN 13C (CDC13) 194,3, 150,7, 127,0, 121,0, 119,0, 95,9, 94,3, 84,8, 82,6, 72,9, 51,3, 38,3, 25,5, 24,5, 18,0, -3,5, -3,6. f) [u-[(5,6n:5,6)-(Z) 6-[[(1,1-dimétiletil)dimetilsilil]- -6-[(7-hidroxi)-3-hepteno-l,5-diinil]-2-ciclo-hexanona-hexacar bonil-cobalto, di(Co-Co) (composto R) -53-

Adicionaram-se 4,41 g de octacarbonil-dicobalto (alfa, 12,9 mmoles), em uma porção, a uma solução de 4,27 g (12,9 mmo les) de enona-ãlcool (composto Q do passo e) sob agitação em 170 ml de diclorometano ã temperatura de 25°C e sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura reaccional durante 2 horas e, em seguida, concentrou-se num evaporador rotativo. A purifica ção por cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando um gradiente de 5 a 20% de acetato de etilo/hexano proporcionou 6,18 (rendimento de 78%) do produto pretendido sob a forma de um óleo cor de púrpura. RMN (CDC13) 6,91 (m, 1H), 6,72 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 6,01 (dupleto largo, J = 10,1 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,56-2,30 (m, 2H), 2,27 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,50 (bs, 1H), 0,85 (s, 9H), 0,19 (s, 3H), 0,074 (s, 3H).

Isolou-se ainda o isõmero menor que eluíu mais lentamen te, (1,29 g? rendimento de 16%) e o complexo do outro acetileno do diineno.

g) Composto G

Adicionou-se, gota a gota, 6,50 ml (13 moles) de uma solução 2,0 M de brometo de etil-magnésio em tetra-hidrofu rano, a uma solução de 1,29 ml (13,5 mmoles) de t-butanol em 30 ml de tetra-hidrofurano anidro , ã temperatura de 0°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos e, em seguida, retirou-se o banho de arrefecimento. Após 5 minutos adicionou-se através de úm tubo uma solução do álcool complexa-do com cobalto (composto R do passo f); 6,18 g ; 1,003 mmoles). Através de um tubo adicionou-se, gota a gota, uma solução de 3,39 g (13,4 mmoles) de 1,1'-(azodicarbonil)-dipiperidina -54-

em 30 ml de tetra-hidrofurano anidro. Após completar-se a adição verteu-se a mistura reaccional numa solução aquosa saturada de cloreto de sódio e extraíu-se. Láv-ou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e, em seguida, com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, Reuniram-se os líquidos de lavagem aquosos, extraíu--se uma vez com uma mistura de acetato de etilo/éter dietílico a 1:1 e, em seguida, reuniram-se os extractos orgânicos e secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se sob vazio. A cromatografia rápida utilizando acetato de etilo a 10%/hexano como eluente, deu 5,57 g (rendimento de 89%) de um liquido viscoso purpura avermelhado.

Preparação IX

Preparação de dimetilfeniltiol-alumínio

Durante 0,5 minutos adicionou-se, gota a gota, 1,0 ml de uma solução de trimetil-alumínio 2,0 M em hexano, a uma so lução de 0,2054 ml (2,0 mmoles) de tiofenol em 2 ml de hexano anidro, com agitação, sob atmosfera de azoto, num banho de água arrefecida com gelo.

Agitou-se a mistura reaccional durante 30 minutos e, em seguida, adicionaram-se por meio de uma seringa 6 ml de tetra--hidrofurano anidro.

Exemplo 1 [^i[ (6,7-^) -1- [ [ (1,1-dimetiletil) -dimetilsilil] -oxi-8-hidroxi--10-feniltiobiciclo[7,3,1]-tridec-4-eno-2,6-diin-13-ona]]-hexacarbonil-cobalto-di-(Co-Co)

Com o auxilio de uma seringa, adicionou-se, de uma só vez, uma solução de reserva preparada previamente constituída por 6,85 ml (1,49 mmole) de dimetil-(feniltio)-alumínio a uma solução do complexo de enona-cobalto-aldeído (composto G, 297 mg, 0,483 mmole) em 11 ml de tetra-hidrofurano anidro, com agitação sob atmosfera de azoto, ã temperatura de -5Q°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos e, em seguida, arrefeceu-se até à temperatura de -78°C. Em seguida, deixou--se elevar a temperatura da mistura reaccional até -50°C., du rante 90 minutos e adicionou-se 1,0 ml (3,34 mmoles) de isopro póxido de titânio puro, duma só vez, através de uma seringa. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos a uma temperatura compreendida entre -50°C e 45°C e, em seguida, adiciona ram-se mais 2,0 ml (6,68 mmoles) de isopropóxido de titânio puro. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos a uma tem peratura compreendida entre -50°C e -45°C e, em seguida, durante 20 minutos a uma temperatura compreendida entre -45°C e -40°C e adicionaram-se depois mais 2,0 ml (6,68 mmoles) de isopropóxido de titânio. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos a uma temperatura compreendida entre -40°C e -30°C e, em segui da, arrefeceu-se de novo até ã temperatura de -65°C. Deixou-se -56- a mistura reaccional aquecer até à temperatura de -55°C duran te 30 minutos e, em seguida, retirou-se o banho de arrefecimento. Agitou-se a mistura reaccional durante 20 minutos à temperatura ambiente e, em seguida, verteu-se em 300 ml de ace tato de etilo e 100 ml de água e extraíu-se. Extraíu-se de no vo a fase aquosa com 100 ml de acetato de etilo, reuniram-se os extractos orgânicos, lavou-se com 100 ml de solução aquosa satu rada de cloreto de sódio e depois secou-se sobre sulfato de sódio anidro. Após filtração e concentração sob vazio, purificou-se o produto impuro por cromatografia rápida sobre gel de sílica, obtendo-se quatro fracções dos produtos que se indicam a seguir pela ordem de eluição da coluna. A fracção 1 continha 56 mg (rendimento de 16%) de um óleo viscoso púrpura que era um aldeído resultante da adição de fe /*· nilmercaptano ao conjugado simples;a fracção 2 continha 68,2 mg (rendimento de 23%) do composto inicial recuperado puro ; e a fracção 3 continha uma mistura a 6:4 do produto pretendido e do composto inicial (59 mg; 11% do produto pretendido; 6% do composto inicial). A fracção 4. proporcionou 142 mg (rendimento de 41%) do composto em título pretendido, sob a forma de uma espuma cor de púrpura avermelhada. IV (KBr): 3442, 3060, 2954, 2930, 2894, 2858, 2096, 2060, 2029, 1730, 1080, 838, 780, 744 cm"1. RMN 1H (CDC13) S s 7,50-7,47 (m, 2H), 7,36-7,24 (m, 3H), 7,03 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,29 (bt, J = = 7,5 Hz, 1H), 4,32 (bs, 1H), 2,77 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 2,51--2,38 (m, 2H), 2,28-2,27 (m, 1H), 1,98-1,93 (m, 1H), 1,38 (d, J = 7,5 Hz, 1H, -OH), 0,83 (s, 9H), 0,19 (s, 3H), 0,13 (s, 3H) . RMN 13C (CDC13) & : 199,1 (b), 198,3, 142,4, 133,7, 129,7, 128,4, 110,5, 99,2, 97,4, 92,1, 82,6, 69,4, 62,6, 48,5, 37,1, 25,9, 23,4, 18,5, -2,6, -2,9.

Exemplo 2 !-[[(!,1-dimetiletil)-dimetilsilil]-oxi]-8-hidroxi-biciclo-[7.3.1]trideca-4,9-dieno-2,6-diin-13-ona-biciclo[7.3.1]tri-deca-4,9-dieno-2,6-diin-8-hidroxi-13-ona

O

a) Preparação de 1-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]-8-hi droxi-10-feniltio-biciclo[7.3.1]tridec-4-eno-2,6-diin-13-ona

Adicionaram-se 12 mg (0,095 mmole) de cristais de iodo a uma solução do produto da reacção do complexo de cobalto do

Exemplo 1 (19 mg, 0,026 mmoles) em 5 ml de vebzeno anidro, com agitação e atmosfera de azoto ã temperatura de 25°C. Agitou--se a mistura reaccional durante 2 horas, concentrou-se ligeiramente sob vazio e, em seguida, submeteu-se a cromato-grafia rápida sobre gel de sílica utilizando acetato de etilo a 4%/hexano como eluente, para se obterem 6 mg (rendimento de 53%) do substrato descomplexado pretendido sob a forma de um óleo transparente. EM, FAB (ΝΟΒΑ) : M+ 438. IV, puro (NaCl, pelícuka): 3484, 3060, 2954, 2958, 2208(w), 1714, 1584 cm"1. RMN 1H (CDC13) : 7,48-7,38 (m, 2H), 7,36-7,31 (m, 3H), 5,92 (s, 2H), 5,25 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 4,43 (d, J = 11,0 Hz, 1H, -OH), 4,05 (dt, J = 5,5, 9,8 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 10,1, 4,6 Hz, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,29 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 0,88 (s, 9H), 0,19 (s, 3H), 0,17 (s, 3) . RMN 13C (CDC13) : 207,1, 134,7 , 132,6 , 129,8 , 129,0 , 125,1, 123,6, 99,6, 98,0, 92,9, 85,0 , 74,4, 65,7, 59,1, 43,1, 34,7, 26,9, 25,9, 18,4, -2,9, -3,0. b) Preparação de 1-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil-oxi]-8--hidroxi-biciclo[7.3.1]tridec-4,9-dieno-2,6-diin-13-ona

Adicionou-se uma solução de 120 mg (0,56 mmoles) de pe-riodato de sõdio sólido a uma solução do produto obtido no pas^ so a) anteriormente (5 mg, 0,011 mmole) em 5 ml de metanol e 2 ml de ãgua, ã temperatura de 25°C. Agitou-se a mistura reac «-59- cional durante 10 minutos e adicionou-se 1 ml de água para dis; solver o precipitado, continuando-se a agitação durante 90 minutos. Adicionaram-se mais 149 mg (0,70 mmole) de periodato de sódio e, em seguida, agitou-se a mistura reaccional durante 45 minutos, extraiu-se com 50 ml de cloreto de metileno e 5 ml de água, extraiu-se de novo a fase aquosa com 10 ml de cloreto de metileno. Reuniram-se os extractos orgânicos e secou-se sobre sulfato de sódio anidro, concentrou-se sob vazio e submeteu-se a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utj. lizando acetato de etilo a 10%/hexano como eluente para se ob terem duas fracções: A fracção 1 proporcionou menos de 1 mg de um produto secundário de eluição mais rápida. A fracção 2 proporcionou 2 mg (ren dimento de 56%) do composto em titulo pretendido, sob a forma de um sólido branco. EM, FAB (ΝΟΒΑ): (M+H) 329. IV, puro (NaCl) 3356, 2952, 2928, 2856, 1712, 1690, 1414, 782 cm 1 • RMN (CDC13) s : 6 /37 (bs, 1H) , 5,84 (s, 2H) , 5,22 (d. J = 10,8 Hz, 1H) / 4 ,82 (d, J = 10,8 Hz, 1H, -OH) , 2,51- -2,47 (m, 2H) , 2,28-2, 25 (m, 1H), 2, 16-2, 10 (m / 1H), 0 /91 (s, , 9H) 0,22 (s, 3H), 0, 19 (s, 3H) . RMN 13c (cdci3) 6 • 196,8, 139,4 , 137 /2, 124, 8, 123, rl/ 101, 4, 96,3, 93, o, 87, 7, 74,6, 69,2 / 34, 6, 26,0, 24,8, 18,5, 00 <N 1 , -3 ,1. -60-

Exemplo 3.

Preparação alternativa cb composto do Exemplo 2

Adicionaram-se 10,3 mg de ácido 3-cloroperbenzóico sob a forma sólida (mCPBA, 0,059 mmole) a uma solução do produto do Exemplo 1 (23,4 mg, 0,032 mmole) em 10 ml de cloreto de me-tileno, à temperatura de 25°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 15 minutos e adicionaram-se mais 14,9 mg (0,086 mmole). Agitou-se a mistura reaccional durante mais 1 hora, tempo durante o qual se adicionaram mais 6,2 mg (0,035 mmole) de ácido 3-cloroperbenzóico. Verteu-se a mistura reaccional em apro ximadamente 20 ml de cloreto de metileno e 10 ml de solução sa turada de hidrogenocarbonato de sódio. Extraiu-se a fase aquo sacom cloreto de metileno e lavou-se a fase orgânica com solução saturada de cloreto de sódio, reuniram-se as fases orgânicas, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se sob vazio. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente acetato de etilo a 5%/hexano, proporcionou 4,6 mg (rendimento de 43%) do produto pretendido sob a forma de um só lido de cor branco sujo. FAB MS (ΝΟΒΑ): (M+H) 329. IV, puro (NaCl): 3356, 2952, 2928, 2856, 1712, 1690, 1414 , 782 cm ^. RMN 1H (CDC13) &> : 6,37 (bs, 1H) , 5,84 (s, 2H) , 5,22 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 10,8 Hz, 1H, -OH), 2,51-2,47 (m, 2H), 2,28-2,25 (m, 1H), 2,16-2,10 (m, 1H), 0,91 (s, 9H), 0,22 (s, 3H), 0,19 (s, 3H). 87,7, RMN X , parcial (CDC13 ) & ' 139,4, 137,2, 124,8, 123,1, 93,0/ 69,2, 34,6, 29,9/ 26,0, 24,8, —2,8, —3,1.

* &

Exemplo 4 . 1,8-di-hidroxi-biciclo[7.3.1]trideca-4,9-dieno-2,6-diin-13-ona 0 Hl

OH

Adicionaram-se 2 gotas de ácido trifluorometanossulfóni. co (com uma agulha de calibre 22; 0,010 ml, 0,11 mmole) a uma solução de 8-hidroxi-l-TBSoxi-biciclo[7.3.1]-trideca-4,9-dieno--2,6-diin-13-ona (produto do Exemplo 2; 12,2 mg, 0,040 mmole) em 7 ml de diclorometano contendo 800 mg de peneiros molecula- o o res de 4A, agitando a temperatura de 25 C. Agitou-se a mistura reaccional durante 10 minutos, diluíu-se com 50 ml de diclo rometano e lavou-se com 50 ml de solução aquosa saturada de hi drogenocarbonato de sódio. Concentrou-se a fase orgânica sob vazio. Juntou-se o produto impuro obtido deste modo, ao produ to impuro proveniente de uma experiência similar em que se uti lizaram 2,5 mg da enona-álcool. A cromatografia rápida do pro duto impuro reunido, sobre gel de sílica, utilizando acetato de etilo a 10% e depois a 20%/hexano como eluente, proporcionou 8,6 mg (rendimento de 83%) do produto pretendido, sob a forma de um sólido branco estável. EM: m/e 214. RMN 1H (CDC13) S : 6,51 (m, 1H), 5,84 (s, 2H), 5,23 (d, J = = 11,2 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 11,2 Hz, 1H, -OH), 3,93 (s, 1H, 62- -ΟΗ), 2,58-2,51 (m, 2Η), 2,46-2,39 (m, 1Η), 2,13-2,01 (m, 1H) .

Composto A Composto B

Composto E Composto F

’63- Composto G

Composto H

OEt EtO

Composto H

Composto L

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

(I) na qual R1 representa um grupo protector do radical hidroxi; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hi

droxi protegido; e representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido ou R^ e representam, considerados conjuntamente, um grupo ceto protegido; e Rg representa um grupo alquilo cicloalquilo ou aril° ^6-10 c0mP0rtan<^0 este último grupo, eventualmente, um ou mais substituintes escolhidos entre grupos alquilo ou alcoxi caracterizado pelo facto (a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

na qual R^, R2, R3 e R4 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral R5-S-A1<R6)2 na qual Rg tem os significados definidos antes, e Rg representa um grupo alquilo j, e (b) de se fazer reagir o composto preparado na alí nea (a) com um reagente escolhido entre compostos de fórmula

T^O-alquil C1-5)4 ou compostos de fórmula geral ΧΤ±(O-alquil C1-5)3 na qual X representa um átomo de halogêneo.

2,- Processo.para a preparação de compostos de fõrmu

na qual R^ representa um grupo protector do radical hidroxi; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido? R3 e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido ou R^ e R4 representam, considerados conjuntamen te, um grupo ceto protegido; e representa um grupo alquilo cicloalquilo C3_6 ou arilo Cg_^Q comportando este último grupo, eventualmente, um ou mais substituintes escolhidos

entre grupos alquilo C^j- ou alcoxi C^_^, caracterizado pelo facto (a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

na qual R^/ R2r R3 e R4 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral %-S-Al(R6)2 na qual Rg tem os significados definidos antes, e Rg representa um grupo alquilo , (b) de se fazer reagir o produto preparado na alínea (a) com um reagente escolhido entre compostos de fórmula T±(O-alquil Οχ_5)4 ou compostos de fórmula geral XT± (O-alquil C.j_5)3 na qual X representa um átomo de halogéneo; e (c) de se remover o grupo cobalto-carbonilo do compos to obtido na fase (b), ou de se tratar o composto obtido na fase (b) com um perácido. 3

Processo para a preparação de compostos de fórmula geral 0

(Va) na qual R-|_ representa um grupo protector do radical hidroxi; representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegido; e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi protegi do ou R^ e R^ representam, considerados conjuntamente, um grupo ceto protegido; e R^ representa um grupo alquilo C^_g, cicloalquilo 0U aril° C6_io comportando este ultimo grupo, eventualmente, um ou mais substituintes escolhidos entre grupos alquilo C1_5 ou alcoxi C·^, caracterizado pelo facto (a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

6

na qual R^, R2/ R3 e R4 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral R5-S-A1<V2 na qual Rj tem os significados definidos antes, e Rg representa um grupo alquilo C1_5; (b) de se fazer reagir o composto preparado na fase (a) com um reagente escolhido entre compostos de fórmula Ti(O-alguil ou compostos de fórmula geral ΧΤ±(O-alquil Οχ_5)3 na qual X representa um átomo de halogéneo; (c) de se remover o grupo cobaíto-carbonilo do composto preparado na alínea (b); e (d) de se transformar mediante oxidação o grupo sulfu-reto do composto preparado na alínea (c) em um grupo sulfóxido para se obter o composto pretendido.

4,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral ο

i i u

sr5 oh (VIb) •C02(C0)6

na qual R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do radical hidroxi; R^ representa um átomo de hidrogénio, um grupo hidroxi ou um grupo protector do radical hidroxi; Rc e R^ representam, cada um, independentemente um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi eventualmen te protegido ou Rc e representam, considerados conjuntamente, um grupo oxo ou um grupo ceto protegido? e R^ tem os significados definidos na reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

5.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral VI b na qual R^, RQ e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

6. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral VI b na qual Rc, R^ e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, R& representa um grupo trialquilsililo e R^ representa um grupo fenilo, ca-racterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais cor respondentemente substituídos.

7. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral VI b na qual R^, Rc e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, R& representa um grupo t-butildimetilsililo e R^ representa um grupo fenilo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

8. - Processo de acordo com a reivindicação 2, para a preparação de compostos de fórmula geral 0

na qual Ra representa um átomo de hidrogénio ou um grupo pro tector do radical hidroxi; R^ representa iam átomo de hidrogénio ou um grupo hi

droxi eventualmente protegido; Rc e representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi eventualmen te protegido ou Rc e R^ representam, considerados conjuntamente um grupo oxo ou um grupo ceto protegi do; e r5 tem os significados definidos na reivindicação 2, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

9. - Processo de acordo com a reivindicação 8, para a preparação de compostos de fórmula geral Via na qual R^, Rc e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

10. - Processo de acordo com a reivindicação 8, para a preparação de compostos de fórmula geral Via na qual R^, Rc e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, R& representa um grupo trialquilsililo e R^ representa um grupo fenilo, carac terizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos. e

11. - Processo de acordo com a reivindicação 8, para a preparação de compostos de fórmula geral Via na qual R^, Rc R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio, R& representa um grupo t-butildimetilsililo e R^ representa um grupo fenilo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

12,- Processo de acordo com a reivindicação 3, para a preparação de compostos de fórmula geral 0

OH R \\ (VII) na gual R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do radical hidroxi, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

13, - Processo de acordo com a reivindicação 12, para a preparação de compostos de fórmula geral VII na qual R re- cl presenta um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

14, - Processo de acordo com a reivindicação 12, para a preparação de compostos de fórmula geral VII na qual R re- cl presenta um grupo t-butildimetilsililo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente sub£ tituídos.

15.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas utilizadas no tratamento de tumores malignos, caracte rizado pelo facto de se misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral VII preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 14, com um excipien te ou diluente aceitável em farmácia. Lisboa, 26 de Abril de 1991 O Aaente Oficial da Propriedade Indotfria<

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