PT95113B - Processo para a preparacao de pirido /2,3-b/-/1,5/-benzoxazepina (e tiazepina)-5(6h)-onas e -tionas e de composicoes farmaceuticas que as contenham, para a prevencao e tratamento da infeccao pelo hiv - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

DA

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 95 113

Boehringer In.gelh.eim Pharmac eu ticais Inc. estabelecida em 90 East Ridge, P.O. Box 368 Ridgefield, Connecticut 06877, Estados Unidos REQUERENTE: ^da América, e Dr. Karl Thomae Gesellschaft mit beschrãnkter Haftung, com sede em D-7950 Biberach an der Riss, República Federal AlemS

EPÍGRAFE: PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE PIRIDO/2,3-b/-/1,^7-BENZOXAZEPINA (e TIAZEPINA)-5(6h)-ONAS E -TIONAS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTENHAM, PARA A PREVENÇÃO E TRATAMENTO DA INFECÇÃO PELO HIV

INVENTORES: ^Dr· ^{Kar D}· Hargrave, residente nos E.U.A., Dr. Gtlnther Schnidt, residenta na Alemanha

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

norte-americanos, em 29 de Agosto de 1989 e 15 de Junho de 1990, sob os números de série 4θθ,253 θ 539,294.

INPI MOD Π3 RF 1C732

Descrição referente à patente de invenção de Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc., norte-americana, industrial, e comercial, estabelecida em 90 East Ridge, P.O. Box 568, Ridgefield, Gonnecticut 06877, Estados Unidos da América e de Dr. Karl Thomae Gesellschaft mit beschránkter Haftung, alemã, industrial! e comercial, com sede em D-7950 Biberach. an der Riss, República Federal Alemã, (inventores: Dr. Karl D. Hargrave, re- i sidente nos E.U.A. e Dr. Gunther Schmidt, residente na Alemanha Ocidental), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE PIRIDO/2,5-b7-7T,57SENZOXAZEPINA(E tiazepiba)-5(6H)-0NAS E -TIONAS E DE COMPOSIÇÕES

FARMACÊUTICAS QUE AS CONTENHAM, PARA A

PREVENÇÃO E TRATAMENTO DA INFECÇÃO PELO

HIV

DESCRIÇÃO

Memória descritiva:

!

jPatentes relacionadas

Esta patente é uma continuação parcial da patente N2 559,294, registada a 25 de Junho de 1990, que i é uma continuação da patente N2 400,255, registada a 28 de

Agosto de 1989, agora abandonada.

ΚΚΪΚΒΟΒβτ;

Âmbito da invenção

A invenção refere-se a novas pirido /2,3-b7/í,^7benzoxazepina (e tiazepina)-5(6H)-ona e tionas e aos seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, a métodos para a preparação destes compostos, ao uso destes compostos na prevenção ou tratamento da infecção HIV, e a composições farmacêuticas que contêm estes compostos.

Fundamento da invenção

A doença humana, síndroma da imunodefi ciência adquirida (SIDA) é causada pelo virus sa imunodeficiên cia humana (HIV) , particularmente pela estirpe conhecida por HIV-1.

Como outros virus, o HIV-1 não se pode : replicar sem controlar o sistema biossintêtico da célula hospedeira que infecta. Leva esse sistema a produzir as proteínas estruturais que dão origem à descendência virai. Estas proteínas são codificadas pelo material genético contido na partícula virai infecciosa, ou virião. Sendo um retrovirus, conrudo, o material genético do HIV é ENA e não DNA como no genoma da célula hospedeira. Deste modo, o ENA virai tem de ser convertido primeiro em DNA e depois integrado no genoma da célula hospedeira para que a célula hospedeira produza as ! proteínas virais necessárias. A conversão do ENA em DNA efectua-se através do uso do enzima transcriptase reversa (ET) , que se inclui no virião indectante juntamente com ο ΕΝΑ. A ' transcriptase reversa tem três funções enzimáticas; actua como uma DNA polimerase dependente do ENA, como uma ribonuclease ’ e como uma DNA polimerase dependente do DNA. Actuando primeiro j! como uma DNA polimerase dependente do ENA, a ET faz uma cópia de DNA de cadeia simples do ENA virai. Depois actuando como uma ribonuclease, a ET liberta o DNA acabado de produzir a partir do ENA virai original e destrói assim o ENA original*

Finalmente, actuando como uma DNA polimerase dependente do DNAj a RT faz um segundo DNA complementar, que se integra no genoma; da célula hospedeira através de um outro enzima chamado inte- j grase. t

Os compostos que inibem as funções enzi máticas da transcriptase reversa doHIV-1 inibem assim a replicação do H1V-1 nas células infectadas. Tais compostos são úteis na preenção ou tratamento da infecção pelo HIV-1 em seres humanos.

Descrição da invenção

No seu aspecto geral a invenção refere-se a pirido/2,3-b7/l,^7benzoxazepina (e tiazepina)-5(6H)-onas e tionas, de fórmula I

na qual

X é oxigénio ou enxofre, j Z é oxigénio ou enxofre ,

R^ é alquilo com 1 a 5 átomos de carbono, fluoroalquilo com ί: 1 a 3 átomos de fluor e 1 a 5 átomos de carbono , cicloalquilo ! j com 3 a 5 átomos de carbono, mono- oudi-halovinilo, 2-halo-2-propeno-l-ilo, alcenilmetilo ou alcinilmetilo com 3 a 5 átomos de carbono , alcooxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 4

- 3 I

; átomos de carbono, arilmetilo (em que a metade arilo é fenilo, tienilo ou furanilo opcionalmente substituído por metilo, metoxi ou halogènio), alcooxicarbonilalquilo com 3 a 4 átomos dej carbono, alcaniloxi- ou alciniloxi-carbonilo em que cada metade alcenilo ou alcinilo contém 2 a 4 átomos de carbono, hidroxilo , alcooxilo com 1 a 4 átomos de carbono, amino, mono- ou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 5 átomos ' de carbono, aminocarbonilmetilo, alcanoilaminoalquilo em que a metade alcanoilo contém 2 a 5 átomos de carbono e a metade I alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, hidroxialquilmetilo com 2 a 5 átomos de carbono , alcanoilo com 2 a 3 átomos de carbono, ou cianoalquilo em que a metade alquilo contém 1 a 4 átomos de carbono;

5 zl _z um dos grupos R , R⁵ e R é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, alcenilo ou alcinilo oom 2 a 4 átomos de carbono, halogénio, hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 3 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, monoou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos decarbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de carbono, monoou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 4 átomos de car i' i bono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, alcooxicarbonilo com 2 a 3 átomos de carbono, tri-halometilo, alcanoilo com 2 a 3 átomos de carbono, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de carbono, ! ciano, azido, alcooxicarbonilmetilo com 3 a 4 átomos de carbo no ou metoxicarbonilmetoxi, sendo um dos dois restantes grupos hidrogénio ou metilo e sendo o grupo restante hidrogénio; ou i , . 2 3 4 aois aos grupos R , R e R sao metilo, etilo ou cloro, sendo o grupo restante hidrogénio; ou

3 4 ~ z

R , R^ e R sao cada um deles hidrogénio; e um dos grupos R⁵, R⁶, R? e R⁸ é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, alcenilo ou alcinilo com 2 a 4 átomos de carbono, halogènio, hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 3 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, • mono- ou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 2

ΧΖ3ΣΓ.

átomos de carbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos cLe carbono, mono- ou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 4 átomos de carbono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, alcooxicarbonilo com 2 a 3 átomos de carbono, tri-halometilo, alcanoilo com 2 a 3 átomos de carbono, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de carbono, ciano, azido, alcooxicarbonilmetilo com 3 a 4 átomos de carbono ou metoxicarbonilmetoxi , sendo um dos três grupos restantes hidrogénio, metilo, etilo ou cloro e sendo os outros dois grupos restantes hidrogénio; ou

R^ , Βθ, R? e R& são cada um deles hidrogénio.

Num aspecto mais restrito a invenção refere-se a compostos de fórmula I,

na qual

X e oxigénio ou enxofre; í , _z i

Z e oxigénio ou enxofre; 1 ί

R¹ é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, fluoroalquilmetilo com 1 a 3 átomos de flúor e 2 a 4 átomos de carbono, mono- ou di-halovinilo, 2-halo-2-propeno-l-ilo, alcenilmetilo ou alcinilmetilo com 3 a 4 átomos de carbono, alcooxialquilo ou alquiltioal quilo com 2 a 4 átomos de carbono, alcooxicarbonil- ;

j alquilo com 3 a 4 átomos de carbono, alceniloxi- ou alcinil- j oxicarbonilo em que cada metade alcenilo ou alcinilo contém 2 a 4 átomos de carbono, aminocarbonilmetilo , alcanoilaminoalquilo em que a metade alcanoilo contém 2 a 3 átomos de carbono e a metade alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, hidroxial' quilmetilo com 2 a 4 átomos de carbono, alcanoilo com 2 a 3 | átomos de carbono, ou cianoalquilo em que a metade alquilo con í tém 1 a 4 átomos de carbono;

5 4 z um dos grupos R , R^ e R e alquilo com 1 a 3 átomos de carbono , alcenilo ou alcinilo com 2 a 3 átomos de carbono, haiogénio , hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 2 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, monoΊ ! i 'í - 5 -

ou di-alquilamino em que cala metade alquilo contém 1 a 2 átomos de cartono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de cartono, mono- ou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 5 átomos de cartono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 3 átomos de cartono, tri-talometilo, acetilo, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de cartono, ciano, azido ou metoxicartonilmetoxi , sendo um dos dois grupos restantes hidrogénio ou metilo e o último grupo restante hidrogénio; ou dois dos grupos B , e 3 são metilo, etilo ou cloro, sendo o grupo restante hidrogénio; ou .j

cartono, alcenilo ou alcinilo com 2 a 3 átomos de cartono, halogénio, hidroxilo , alcooxilo ou alquiltio com 1 a 2 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, mono- ou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a ií 2 átomos de cartono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de cartono, íi mono- ou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 3 átomos de cartono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 3 átomos de cartono, tri-halometilo, acetilo, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de cartono, ciano, azido ou metoxicartonilmetoxi; sendo um dos três grupos restantes hidrogénio, metilo, etilo ou cloro e os outros dois grupos restantes hidrogénio; ou , Εθ, Β? e Εθ gão _ca<}_a um deles hidrogénio.

Num outro aspecto restrito a invenção refere-se a compostos de fórmula I, na qual

X é oxigénio ou enxofre;

Z é oxigénio; 1

R^ é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, fluoroalquilaetilo s com 1 a 3 átomos de fluor e 2 a 4 átomos de cartono, mono- ou ói-halovinilo , 2-halo-2-propeno-l-ilo , alce ni lme til o ou alcinil6 metilo com 3 a 4 átomos de carbono, alquiloxialquilo ou alquil tioalquilo com 2 a 4 átomos de carbono, aminocarbonilmetilo, ou cianoalquilo em que a metade alquilo contém 1 a 3 átomos de carbono ;

3 4 , um dos grupos E , R e R e metilo, etilo, cloro ou amino, sendo os dois restantes grupos hidrogénio; ou !

dois dos grupos R , R³ e R são metilo, etilo ou cloro, sendo o grupo restante hidrogénio; ou

3 4 ~ f

R , R^y e R sao cada um deles hidrogénio; e um dos grupos R^, R^, R? e R^ é metilo, etilo, cloro ou amino, sendo os três restantes grupos hidrogénio; ou dois dos grupos , R^, R? e R^ são metilo, etilo ou cloro, | sendo os dois restantes grupos hidrogénio; ou 'i 5 6 7 8 ~ t

R , R , R e R sao cada um deles hidrogenio.

Num outro a invenção refere-se a compostos aspecto ainda mais restrito de fórmula I, na qual

X é oxigénio ou enxofre;

Z é oxigénio;

R¹ é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, alilo ou alquiltioalquilo com 2 a 4 átomos de carbono;

4 _z

R e R sao hidrogenio;

R^ é hidrogénio ou amido;

ív e R' sao hidrogénio ou metilo; e r- ô

R° e R são hidrogénio.

'! Os compostos de fórmula I podem prepa: rar-se de acordo com métodos conhecidos ou modificações óbvias !; destes. Os métodos A, B e C abaixo descritos são ilustrativos • l· dos métodos para a preparação de compostos de fórmula I.

- 7 CTMétodo A

Os compostos de fórmula I, que Z é oxi1 8 _ôónio e X e R -R° têm os significados acima mencionados, podem preparar-se, por exemplo, convertendo um composto de fórmula II

II correspondentes de metal alcalino ou alcalino-terroso, de fórmula III

III subsequentemente , sem isolamento , este composto de metal alcalino com um reagente alquilante ou acilante de fórmula IV

h.

r;;

R¹ Y

IV em que R¹ tem o significado acima mencionado e Y é um grupo rejeitado adequado tal como cloreto, brometo, iodeto, um sulfonato de alquilo ou arilo, ou um grupo alquilcarboniloxi ou arilcarboniloxi, em condições de alquilação ou acilação bem conhecidas.

É evidente para o especialista na matéria que a presença de substituintes nucleófilos nos compostos de fórmula II, por exemplo, implica o emprego de um termediário que tenha substituintes que, para além do azoto da posição 5 não sejam nucleófilos mas que possam ser derivatizados ao grupo pretendido. Por exemplo, os substituintes amino ou monoalquilamino obtêm-se de preferência alquilando ou acilando um intermediário de fórmula II com grupo(s) nitro nas posições desejadas, e reduzindo subsequentemente o(s) ' grupo(s) nitro, e alquilando se necessário, para se obter j o produto final.

i

Método B

Os compostos de fórmula I, em que Z é _z 16 oxigénio e X e R -R° se definem como anteriormente podem obter, se por ciclização de compostos de fórmula V

R

V

- 9 h em que X e Η^-Ηθ se definem como anteriormente e hal ê fluor, j cloro, bromo ou iodo, de preferência na presença de uma base !

inorgânica, tal como hidreto de sódio ou de potássio, alquil- j

-lítio tais como n-butil-lítio, hidróxido de sódio de potássio!, _A i ou na presença de uma base organica tal como quinolina ou h- ,

-(N,N-dimetilamino)-piridina, à temperatura ambiente ou mais elevada, de preferência a 8O-175°C> atê ao ponto de ebulição da mistura reaccional. Os solventes adequados incluem solventes apróticos tais como tolueno, sulfolano ou dimetilformamida.

As piridofenilamidas de fórmula V, podem obter-se, por exemplo, condensando cloretos de ácido do 2-halonicotinicos, de fórmula VI

VI em que hal pode ser fluor, cloro, bromo ou iodo e R -R se definem como anteriormente, com ortoaminofenóis (ou tiofenóis) de fórmula VII

R^c

R

VII

C Q em que X, R e R -R se definem como anteriormente, em condições reaccionais bem conhecidas. Conforme as condições reac’ T 8 cionais utilizadas e a natureza de X e R -R , os compostos 1 R tricíclicos de fórmula I, em que X e R -R se definem como anteriormente, podem formar-se num só passo, sem isolamento da amida de fórmula V, por condensação de compostos de fórmula VI com compostos de fórmula VII. Esta formação num só passo do composto tricíclico efectua-se mais prontamente quan do X é enxofre e a temperaturas elevadas, em particular na gama de 80-175°C·

Método C

As tiolactamas de fórmula I, em que Z ê enxofre e X e R -R se definem como anteriormente, podem obter-se por tratamento de lactamas de fórmula I com reagentes sulfurantes tais como 2,4-dissolfureto de 2,4-bis(4-metoxifenil)-1,3-ditio-2,4-difosfetano, sulfureto de bis(triciclo- ; -hexilestanho), sulfureto de bis(tri-n-butilestanho), sulfure-;

I to de bis(trifenilestanho), sulfureto de bis(trimetilsililo) i

e pentassulfureto de fósforo. A reacção efectua-se geralmente em condições anidras em solventes orgânicos inertes tais como sulfureto de carbono, benzeno ou tolueno, por exemplo à temperatura ambiente ou, de preferência, a temperaturas mais elevadas até ao ponto de ebulição da mistura reaccional.

Quando se empregam os sulfuretos de estanho ou de sililo acima mencionadas épreferível efectuar a reacção de sulfurização na presença de um ácido de Lewis tal como o tricloreto de boro.

É evidente para os especialistas da matéria que a presença de um outro grupo carbonilo num compos to de formula I, por exemplo, um composto em que Z seja oxigénio e um dos grupos R^-R⁸ contenha um grupo carbonilo , impli' ' cara que essa função carbonilo seja protegida por métodos conhecidos antes da reacção de sulfuração, obtendo-se o composto . desejado por desprotecçao após a reacção de sulfuração. Do r ·* ,1

seja, por exemplo, acetílo, é )

mesmo modo, nos casos em que R evidente que a reacção de sulfuração se deve efectuar antes da acilação (em N-5) · lios casos, em que os substituintes R^ a R são derivados de um grupo nitro, por exemplo alcanoilaminn , a reacçao de sulfuração pode efectuar-se com o correBpondente nitro- derivado, seguida por uma reacção adequada (conhecida) e finalmente por acilação para se obter o produto desejado.

Os compostos de fórmula I podem, se se desejar, converter-se nos seus sais farmaceuticamente aceitáveis por meio de métodos convencionais. A invenção refere-se também a esses sais.

Exemplos de ácidos inorgânicos e orgânicos que podem formar sais de adição de ácido farmacêuticamente aceitáveis e não tóxicos com compostos de fórmula I, são os seguintes: ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido metanossulfónico e semelhantes.

Exemplos de bases que podem formar sais farmaceuticamente aceitáveis com compostos de fórmula I com substituintes ácidos, são os seguintes: hidróxido de sódio, nidróxido de potássio, hidróxido de cálcio, amoníaco, trometamina e semelhantes.

Os compostos de fórmula I acima descritos têm uma actividade inibidora contra a trascriptase reversa do HIV-1. Quando administrados em formas de dosagem íI adequadas, são úteis na prevenção ou no tratamento do SIDA, j: ARC e doenças relacionadas associadas com a infecção pelo ^! HIV-1. Por isso, um outro aspecto da invenção refere-se a _: um processo para prevenção ou tratamento da infecção pelo ! HIV-1, caracterizado por se administrar a um ser humano, expos to a ou infectado pelo HIV-1 , uma quantidade profilática ou l· terapêutica efectiva de um novo composto de fórmula I, como i' ·' descrito acima.

- 12 t

Os compostos de fórmula I podem administrar-se em uose única ou dividida por via oral, parenteral ou tópica. Uma dosagem oral adequada para um composto de fór mula I situa-se na gama de cerca de 0, 5 mg a 1 g por dia.

Sm formulações parenterais, uma unidade de dosagem adequada pode conter de 0,1 a 250 mg dos referidos compostos. enquanto que para administração tópica se preferem formulações contendo 0,01 a 1% de ingrediente activo. Deve contudo ter-se em conta que a dosagem administrada varia de paciente para paciente e que a dosagem para um determinado paciente depende do critério do clínico, que utilizará como critério para determinar a dosagem adequada o tamanho e o estado do paciente hem como a resposta do paciente à droga.

Quando os compostos da presente invenção se destinam a ser administrados por via oral, podem administrar-se como medicamentos na forma de preparação farmacêuticas que os contêm em associação com um veículo farmacêutico adequado. Tal veículo pode ser um veículo inerte orgânico ou inorgânico adequado paia administração oral. Exemplos destes veículos são água, gelatina, talco, amido, estearato da magné sio, goma arábica, óleos vegetais, polialquilenoglicois, paral! fina e semelhantes.

ί i

i ' As composições farmacêuticas podem ! preparar-se de um modo convencionai e as formas de dosagem finais podem ser solidas, por exemplo cjmprimidos, drageias, cápsulas e análogos, ou liquidos, por exemplo soluções, suspensões, emulsões e análogos. As composições farmacêuticas podem sujeitar-se a operações farmacêuticas convencionais tais j; como a esterilização. Além disso, as composições farmacêutii'

I; cas podem conter adiuivos convencionais tais como conservantes, estabilizadores, emulsionances, aromatizantes, humectantes, l tampões, sais para variar a pressão asmática e semelhante.

iodem inciuir-se veículos sólidos, por exemplo amido, lactose, ; manitol, metilcelulose, celulose microcristalina, talco, síli• ¹¹ h ca, fosfato de cálcio dibásico e polímeros de elevado peso molecular (tais como polietilenoglicol).

Para uso parenteral, um composto de j fórmula I pode administrar-se numa solução aquosa ou não aquosa, em suspensão ou emulsão num óleo farmaceuticamente aceitá-i vel ou numa mistura de líquidos, que poue conter agentes bacte, riostáticos . antioxidantes , conservantes, tampões ou outros solutos para tornar a solução isotónica com o sangue , agentes esoessantes, agentes de sus/ensão ou outros aditivos farmacêu-: ticamenbe aceitáveis. Aditivos deste tipo são, por exemplo tartarato, citrato e outros tampões, etanol, porpilenoglicol, polietilenoglicol, complexantes (tais como EDTA), antioxidantes (tais como bissulfito de sódio, metahissulfito de sódio e ' ácido ascórbico), polímeros de elevado peso molecular (Vais como óxidos de polietileno líquidos) para regulação da visco- !

!

sidade e derivados de polietileno de anidridos de sorbitol. ] Também se podem adicionar conservantes se necessário, tais como ácido benzóico, metil- ou propil-parabeno, cloreto de benzalcónio e outras compostos de amónio quaternário.

Os compostos desta invenção podem tam bém administrar-se como soluções para aplicação nasal e podem conter para além dos compostos desta invenção tampões adequados, ajustadores de tonicidade, conservantes microbianos, antoxidantes e agentes para aumentar a viscosidade em meio aquoso. Exemplo de agentes utilizados para aumentar a viscosidade são álcool polivinílico, derivados de celulose, polivinilpirro lidona, polissorbatos ou glicerina. Os conservantes microbiaj nos adicionados podem ser cloreto de benzalcónico, timerosal,

I clorobutanol ou álcool feniletílico. !

Além destas formas, os compostos de acordo com a invenção pode administrar-se em supositórios.

í ! Como já referido, os compostos de acor do com a invenção inibem a actividade enzimática da RT do HIV-1. Com base em testes destes compostos, como se descreve abaixo, sabe-se que eles inibem a actividade da DNA polimerase da RT ίdo HIV-1 dependente do RNA. Supõe-se que eles inibem também a actividade da DNA polimerase da RT do HIV-1 dependente do DNA.

Utilizando-o ensaio da transcriptase reserva (RT) abaixo descrito, podem testar-se os compostos em relação à sua capacidade para inibir a actividade da DNA poli-i i

merase da RT do HIV-1 dependente do RNA, Certos compostos específicos descritos nos exemplos que se seguem foram testados i deste modo. Os resultados destes testes apresentam-se abaixo na Tabela I.

ENSAIO DA TRANSCRIPTASE REVERSA (RI)

Teoria do ensaio:

De entre os enzimas codificados pelo virus da imunodeficiência humana (HIV-1) encontra-se uma trans ciptase reversa (1), assim chamada porque transcreve uma cópia de DNA a partir de um templato de RNA. Esta actividade pode medir-se quantitativamente num ensaio enzimático isento de células, previamente descrito (2), e baseia-se na observação de , i

que a transcriptase reversa é capaz de usar um templato sinta-! tico /poli r(C) primada com oligo d(G/7 para transcrever uma' cadeia de DNA radio-marcada, precipitável com ácido, utilizando ^H-dGTP como substrato.

Materiais:

a) Preparação do enzima enzima transcriptase reversa da estirpe LAV do virus da imunodeficiência humana (HIV-1)(1) isolou-se a partir da estirpe bacteriana JM 109(3) que exprime o cloro de DNA pBRTprtl+ (2) que está sob o controle do promotor lac no veccor de expressão pI3I21(4). Uma cultura de uma noite desenvolvida em meio 2XXT (3T°C, 225rpm)(5) suplementada com 100 ^b/^ml ό-θ amplicilina para selecção positiva inoculou-se a uma diluição 1:40 em meio Mg suplementado com 1Q ^J-g/ml de tiamina, 0,5% de casaminoácidos, e 50/ig/ml de amplicilina (5). Incubou-se a culcura (37°C, 225rpm) até alcaçar uma 0D a 540nm de 0,3-0,4. Nessa aloura adicionou-se o inibidor repressor

- 15 <* jrwqMWv*.* .J

I' IPTG (isopropil-/5-D-tiogalactopiranósido) a 0 ,5 mui, e incubou-se a mistura durante mais 2 noras. Peletizaram-se as bacté( rias, ressuspenderam-se tampão me Tris 30 miA, EDTA 0,6 miu, NsGL ô,5⁹5 ^e digeriu-se por adição de licosima (1 mg/ml) durante : 50 minutos em gelo, lisaram-se as células por adição de 0,2 % ue r.P—+0 e oulocaram—se em Naol 1 m.

Após remoção da massa insolúvel por centrifugação, precipita-se a proteina por adição de 3 volumes de uma solução aquosa saturada de sulfato de amónio. Peletica-se o ensima, ressuspende-se em tampão PT (50 mia Tris, pH 7,5) 1 miú EDTA; 5 mMDTT; 0,1% NP-40; 0 ,lií Nacl e 50% deglicerol) e armazena-se a - 70°C para uso posterior. ι

b) Composição da mistura reaccional stock concentrada 2 x

Reagente Stock	Concentração Líix 2X
1 m Tris pH 7,4-	100 mil
1 li Ditiotreitol	4-0 mM
d- ivi m, 3-01	120 mri
i% de Eonidet P--0	0,1 %
1 m MgCl	4- mi!

/poli r(C)/oligo d(G/7(5:l) ^H-dCTP (61 nii)

Processo ao ensaio:

A mistura reaccional stocx concentrada 2X uivide-se em partes i_ouais e armazena-se a -20°C. A mistura é estável e uescongela-se antes de usar em cada teste. Este teste enzimtico foi adaptado a uma sistema de microplaca de 96 orifícios e encontra-se descrito (6). Colocam-se tampão Tris(50aiI; pH 7,4), veículo (diluído com solvente a uma diluição i^pual à uo composto), ou os compostos em veículo, em piscas ue microtitulaçao de 46 orifícios (10 ul/orifício;

- lo

ο ri íicios/com^ost ο) . Descon^ela-se o enzima HIV-ST, dilui—se em ms a yn ' ,4 u.6 Lioeo que lp enzima dríux^.o contenham 0,001 Uni-aie (tua Uniiaáe é a quanticade de enzima necessária para transformai· 1 micromole ae substrato por minuto a 25 C), θ colocam-se 15yxl por orifício. Adicionaram-se 20 μΐ ãe HD1A 0,12-0,5 Ki aos primeiros três orifícios da placa de microtitulação. 0 LD2A complexa o hg⁺⁺ presente e impede a transcriptação reversa, liste grupo serve como polimerização base que é subtraída a todos os outros grupos. Adicionam-se 25 da mistura reaccional 2X a todos os orifícios e deixa-se incubar o conjunto à temperatura ambiente durante 60 minutos. fermina-se o teste precipitando o DNA em cada orifício com 5õ/Ul de ácido tricloroacético (TCA) a 10% (peso/volume) em pirofosfato de sódio (1%, peso/volume). Incuba-se a placa de microtitulação durante 15 minutos a 4°C e fixa-se o precipitado em papel de fibra de vidro #50 (Sch.leich.er & Schuell) usando um colector semi-automático Skatron. Lavam-se então os filtros com mais TCA (5%) contendo pirofosfato de sódio (1%) , enxaguam-se com etanol aquoso (^0%), secam-se e transferem-se para ampolas de cintilação(c) . Colocam-se 2 ml de mistura de cintilação em cada ampola e conta-se num contador beta 3eckman.

cálculo da percentagem de inibição é o seguinte:

q g e -x de i nib i ç a o = Valor .nédio do reste (OPh)-Valor hédio do controle (CPm valore médio do controle (CPk)

X 100

Referencias:

1. Henn, S., et al . , Science 250:92-9, 1985

2. Farmerie, W.G. et. al. , Science 256:505, 198?

5. Yanisch-Perron, G., Viera, J., and messing, J.,55:105, 1985

4. International Biotechnologies, Inc., New Haven, CT 06555 5· maniatis, T, Fritsch, H.F., and J. Sambrook, eds. Molecular ir cue ien um valor r?

'50

TT ΡϊχΰΑ A i Cionin₀: .. Laboratory manual, Cola Spring harbor Laboratory, i;.o,_.

6. Spira, T . , et. al. J. Clinicai microbiology, 25:97, 19b⁷.

i

De modo a determinai· aproximadamente a citotoxicidade acs compostos de acordocom a invenção, testa! ram-se vários cjcpoeíos desses -'egando o Teste de Citotoxicii aade Células mTT abaixo descrito. Cs resultados deste teste encontram-se na Tabela I, abaixo. Preferência os compostos relativamente elevado.

ClTOTOXICIDADE CELULAR ί

Teoria do ensaio; !

j 0 teste LTT ^/brometo de 5-(4- ,5-dimetil tiazole-2-il)-2,5-diíeniltetrazólio7baseia-se na libertação do brometo le tetrazólio pelas células metabolicamente activas, resultando numa coluração azul altamente quantitativa, mste ;

teste encontra-se descrito (1) mas optimizou-se para o objec- ! trvo ao oeste aour reisrruo . ;

| * i | i i h.o οΰdo do L·e s ue ivi' ;lula te susoensao

Usa-se a linha celular H9(2), uma linha ie lirTcxma humana bem estabelecida, desunvolvida em PPml 154o suplementado com 10% de soro bovino fetal, como linha celular em estudo neste teste. Colocam-se as células (100 yUl) nos orifícios de uoa pl^ca de micro ticulaçao a uma concentração ae 1^5 células por ml na presença de concentrações variáveis te inibid<,r. Incubam-se as células a a ' 0 num incuoauor Ce 0 tarde , adicionam-se 20 ^ul j2L.'t6J.llU Ό. r*. Ό 2; Ο Ό ~-l -·. U C> d. ο. J Ο Ο ΙΊ 2

2L ie xxumruiiicaao. Cinco aras mars xLTT (5 mg/ml em hPml 1640, des- ;

liitraáo a 0,2 micron e armazenado - -.o.

a -O) a cada orifício, Após 4 horsp, ancionam-se 60 yul ae Iriton-X a cada orifício e mistura-se eiicmnenue para ajudar a solubilização dos cristais. Acicioae nova mcuoaçao , i'5 na-se aranol aosoluúo (5 71I) a cada orifício e incuba-se a misuura resul-anse iaraníe -iinucos a 60°C , e revela-se ime diauamente num revelador* de placas (Dynatech) ao comprimento ue onda de 5^0 nm. Usam-se 03 aados (lestes teste para uma análise de regressão não linear de onue se obtém o valor EC-~.

pO í: neferências :

ί

1. Mosmann, Tim, t 2 . Jacobs , J .P. ,

Oomposto do ί Exemplo N°.

J. Immunol. Letmods, 65:55, 1985. J.Natl. Câncer Inst., 34:251, 1965·

TABELA I

Inibição da ET % (o> 10 ng/ml

Teste de citotoxicidade

1	80	¢-^50) . NT
d	69	NT
5	5P*	515 yhtí
4-	9m	NT i I
	- - *	I
5		NT '
0	C-*	NT
7	71	NT
o	77	NT
9	89	NT
u	28	NT
	7 $
11	*~+>	NT
r a	θπ*	NT
r p	41+	NT
14	V*	NT
15	65	NT

j ml •ft?

Nota: ui¹ = não testato ί * inibição (s) )im

I % inibição (a) 2.5^¹

Os exemplos seguintes destinam-se a melnor ilustrar a presente invenção, permitindo as especialista da matéria compreendê-la mais completamente. Deve entender-se, contudo, que a invenção não está limitada aos exemplos a seguir apresentados.

Exemplo 1

6-(n-propil)pirido/2,5-b7/d,57óenzoxazepina-5(6H)-ona j Adicionou-se hidreto de sódio (0,96 g í de uma suspensão a 56% em óleo mineral) a uma solução de 2,12 g de pirido {2 ,3-^7^1,27όθ^ηζ0χ&^ζθΡίηη-5(6Η)-ona (sintetizada de acordo com processos publicados) em 50 ml de ãimetilíorma-i mida e agitou-se a mistura resultante durante 1 hora. Àdicionou-se lentamente 1-bromoprop anol (2,46 g) e deixou-se a mistura reaccional sob agitação durante a noite à temperatura am-j ; biente. Adicionou-<e gelo picado para decompor o hidreto de í sódio não reagido. Adicionou-se então água e extraiu-se o pro ! duto com éter, secou-se (com sulfato de sódio anidro) e concentrou-se em vácuo. Após purificação numa coluna de sílica ! gei (com acetato de etilo/hexano, 1:4) obteve-se 1,52 g de produto na forma de um óleo incolor viscoso.

'i LX&iiOíO d.

i i

N ! 5-etrlpirido/2,5-o7/1,57^OenLQdlazepína-5(6d)-ona ί a) pirido_(2,5~b7/i ,57benzotiazepina-5(6H)-ona

-V

Refluxou-se rurante > horas uma mis. cura j.ô áci^-o 2-cÍoronicotínico (51,5 g; 4 ,2 mol) e cloreto

i.

' de tionilo (100 ml), memoveu-se o solvence em vácuo e adicio nou-se então o cloreto de ácido a uma mis Cura de 2-aminotiofenol (2> g), tolueno (4Ό0 ml) e piridina (54 g). Refluxou-se a mistura resultante durante 4 noras e o.eixou-se em repou i so durante a noiue à temperatura ambiente. Recolheu-se o pre' expirado amarelo e agitou-se com água duranCe 5 horas, filtrou ; -se e secou-se ao ar. Recristalizou-se o produto de acetato ' de etilo obtendo-se 20,8 g (4-5 %) do rendimento teórico) de ^: um produto amarelo quase puro, em condições de se usar para !i a reacção seguinte . Recristalizou-se uma pequena quantidade jí deste produto em acetonitrilo obtendo-se o produto puro , na j ί forma de um sóliro amarelo claro, de p. de fusão 260-261°C.

b) 6-etilpirido/2,5-b7/r,57^Denzotiazepina-5(6H)-ona

Adicionou-se hidreto de sódio (1,05 S de uma suspensão a 50% em óleo mineral) a uma suspensão de pi ri do /2,5-0 ,57oenzotiazepina-5(6H)-ona (4,0 g; 0,0175 mol!) em 100 ml de dimetilformamida e agitou-se a mistura resultante] até cessar a libertação de gás, após 0 que se aqueceu a mistura a 50°C durante 50 minutos. Após arrefecer até à temperatura ambiente, adicionou-se lentamente iodeto de etilo (5,4-6 g; 0,055 mol) e deixou-se a mistura reaccional sob agitação duran recompor o hidreto adicionou-se _õelo picado para sódio nao reagido. Adicionou-se então água e extraiu-se 0 ;om écer, secou-se (com sulfato de sódio anidro) e concenúrou-se em vácuo, laví resíduo sóliro com nexano recristalxzou-se re acetato re etiio/hexano obtendo-se .ib ua.j. .íj ro ren^imenuo teorico) ro produto na forma de marelos , re p. re iusao 148—149^0 .

-- -,ί -.1 o ~z.

m —.--no-e ,f-^-^mctilpirido/2 ,5-b7/l ,57'tenzoxasepina-5(6H) -ona a) Acrro 2-hi.Íroxi-5-ni crocotínico ;_r ί' .adicionou-se áciuo nítrico fumante i! (d=l,5; 10 ml; 0,24 mol) a uua solução de ácido 2-hidroxinicocínico (14 g; 0,1 mol) e ácido sulfúrico concentrado (40 ml). Aoueceu-se a mistura resultante a 50°C durante 4 horas e deitou-se depois cuidadosamente em á^ua gelada. Recolheu-se o ' precipitado levenence alaranjado, lavou-se com água fria e reg (~2R do rendide cristais amausar na reacção cristalizou-se depois de egua obtendo-se 15,3 menuo teórico) de produto quase puro na forma relo pálido, de ponto de fusão 240 °C , ponto a SβΏu’6 ·

b) ácido 2-cloro-5-nitronicotínico

Refluxou-se duranve 5 ção de ácido 2-hidroxi-5-nitronicotinico (9,2 horas uma solu-_: g; 0 ,05 mol) em oxicioreto de fósforo (25 ml). Removeu-se o solvente em váί; cuo e dissolveu-se o resíduo numa mistura de tetra-hidrofurano¹ ;; e éter. Após arrefecer a solução em banho de gelo, adicionou-, | -se água, cuidadosamente gota a gota, soo agitação, até se li ~ _z _ a !

oocer uma separaçao nítida de fases, navou-se a fase organica t com ague e com uma solução saturada ue cloreto de sodio , secou;

-se (com sulfato de magnésio anidro) e concentrou-se. Após í '' recristalização de éter obviveram-se 6,94 g (69% do rendimento teórico) de produco puro, de p. fusão 155°C (com decomposição).

| i

P c) 2-cloro-5-nitro-N-(5-hidroxitol-4-il)-5-piridinocarboxamida

1'

Refluxou-se durante 5 horas uma mistura P de ácido 2-cloro-5-nitronicotínico (6,1 g) 0,05 mol) e cloreto j de tionilo (15 ml) . Removeu-se o solvente em vácuo e dissol; veu-se o cloreto de ácido em tetra-hidrofurano (150 ml). Adi; cionou-se lentamente a solução resultante a uma solução de 6, -amino-m-cresol (49; 0,05 mol), Ν,Ν-di-isopropiletilamina I (^ ml; 0,04 mol) e tetra-hidrofurano (150 ml) a 0°0, sob atmos fera de argon, e agitou-se a solução resultante durante 2 horas Diluiu-se então a mistura com água e extraiu-se o produto com

_H éter, lavou-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, i

secou-se (com sulfato de magnésio anidro) e concentrou-se até metade do volume. Recolheu-se o produto bruto pastoso alaranjado e agitou-se com cloreto de metileno (50 ml) durante 50 : minutos, Lavou-se o precipitado com cloreto de metileno e secou-se ao ar, obtendo-se 6,5 S (68% do rendimento teórico) de produto puro na forma de um pó laranja brilhante.

d) 5-nitro-9-metilpirido/2,5-^7/1- »27benzoxaz^epina-5(6H)-ona !

Aqueceu-se sob atmosfera de argon, a j 90°C durante 2,5 horas, uma mistura de 2-cloro-5-nitro-N-(5ji -hidroxitol-4-il)-5-piridinocarboxamida (6,5 g; 0,02 mol) e piridina (100 ml). Diluiu-se a solução arrefecida com água e recolheu-se o precipitado amareio-alaranjado e lavou-se com , água. Agitou-se então o sólido em água quante (100 ml) durante 45 minutos, filtrou-se e lavou-se com etanol e éter obtendo-se 4,5 g de um sólido acastanhado. Após recristalização de dimetilformamida/água obtiveram-se 5,7θ S (68% do rendimen, to teórico) de produto. , [ I

e) 5-nitro-6,9-dimetilpirido/2,5-b7/I,^7benzoxazepina-5(5H)- I

-ona

A uma suspensão de hidreto de sódio (0,73 S; 0,015 mol de uma dispersão a 50% em óleo mineral) em ί dimetilformamida (75 ml), sob atmosfera de argon, adicionou-se de uma só vez 5-nitro-9-metilpirido/2,3-b7/I ,£7benzoxazepina -5(óH)-ona (5,75 g; 0,014 mol). Adicionou-se iodeto de metilo, (1,5 ml; 0,021 mol) e a_faitou-se a solução resultante durante a noite à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura com água gelada, e recolheu-se o produto precipitado e lavou-se com água e éter de petróleo. Recristalizou-se o produto bruto de acetato ue etilo obtendo-se 5 ,14- g (79% do rendimento teórico) oe prouuto ne forma de um sólido amarelo claro, de t>. de fusão ' 19-19õ°G.

í) p-amino-ο,p-u.ime cilijirido/2 ,ρ-ο7/ΐ ,57c>enzoxazepina-p(cH) —o na

A uma suspensão ae 3-nitro-6,9-dimerilpirido/2,3-b7/I,57benzoxazepina-p(6H)-ona (1,6 g; p,ó mol) em áciuo acético (30 ml) adicionou-se uma solução de di-hidrato de cloreto estanhoso (10 g; 44 mmol) em ácido clorídrico concentrado (lp ml). Após agitar a mis cura durante J horas, íilurou-se o produro precipitado e lavou-se com éter. Dissolvem-se então o produco em água, basificou-se com hidróxido de sódio 217, extraiu-se com étei· e acetato de etilo, secou-se (com sulfato de magnésio anidro) e concentrou-se. Após recris. salização de etanol/hexano obtiveram-se 0,82 g (57% do rendi-j menro teórico) de produto puro na forma de agulhas cór de brcn ze, de p. de fusão 191-193°G.

mxernolos 4—19

Os compostos dos exemplos seguintes prepararam-se de acordo com processos análogos aos descritos acima:

me-glo NQ .

•e. 9-amino-5,^r7,9-srimetilpirido/ã,3 ,b7Z^^57henzoxazeρina-5(cm)-ona; p.f. 234-236°G .

· 5-a_iino-7,9-dimetil-6-e cilpirido^ã ,p-b//I ,57benzoxazepina-5(6H)-ona; p.f. 2p2-234°C.

c . p-amino-^ ,9-uimecil-ò-(n-propil)pirido^/2,p-b.7/Γ ,57-benzoxaze?ina-5(6H)-onu; p.f. 195-19/°C.

6-metilpirido/2,3-b7/I,2?uensoxazepina-5(6rI)-ona; p.f. 1O^-1O9°C.

i i , c—etilpirido/Σ ,p-'o//± ,>7benzoxazepina-5(cK)-ona;

^.f. ôl-8p°C.

9. 6-alilpirido/ã,3-b7/T,5/bensoxazepina-5(6H)-ona; !

»v*t

10. S-propioniioirido/2,5-b7/r ,27Donzoxaze₁3Ína-3(oH)-ona;

í ^.f. 111-113°C.

11. 0,9-aiiâctilplriào^ ,0-ό_7/Γ ,27benzúxaz^rsepina-5(OK)-orLa ; p.f. 165-lõõ°C.

j 12. 6-etil-9-metilpiriáo/2,5-b7Z-L »27ben2Oxazepina-5(6H)-ona; i p.f. 114-116°G.

13· 3-hiãroxi-5 ,9-dimetilpirid.o/2,3-P7/X ,27'D^en2OXazepinaί -5(6H)-ona; p.f. 257-25Ô ,5°G · í, 14. T-amino-o-erilpirido/^ »3-b7/^ ,]?7benzoxazepina-5(5H) -ona;

p.f. 114-11Ô°G. ί . 6-metilpirido/2,3-6.7/^ >57benzotiazepina-5(6H)-ona;

p.f. 1?2-174°G. ί l| í l Pxemolo 10 i !' 3-smiino-3 ,9-dimebilpirido/2,3-p7A ,37'PeD^2O'bíazepina-5(6H) -ona J

Ί ¹ ’ Prepara-se o composto do título empre-í gando um processo análogo ao do exemplo 3 > nas usando ácido ^1 2-mercapto-5-nitronicotinico como reagente de partida. i ' i ) mm-. Im. 1“ a 21

N ί / Prepararam-se os composros se_Duintesutilizando processos análogos aos descritos acima.

m^xemplo N9«

I ' l^:

I⁷. 3-amino-5,^r?,9-tri3ietilpirido2(2»3-b7/^5^.Z^Denzo4iazepina-3(δη)-ona la. 3-amino-t,9-dimetil-ô-etilpirido/a,3-^7/2,57benzoxazepi na-3(δη)-o na , 13. 3-amiino-9,3-dimetil-ó-(n-prepil)pirido/2,3-b7/Ií57I -bci~sotiazepina-5(6H)-ona . 2c. 3-ac.ino-'?',9-iiaetil-õ-(isopiOpil)pirido^2,3-b7/r,57’ -be^sociasepina-3(ãd)-ona • !

- -3 1r

21. 5-amino-',9-uimecil-6-alilpirido^/2,g-b7/I ,^7benzotiazepina-5( '—*) -ona.

EJCElíPTiO A í Capsulas ou Comprimidos

Ingredientes !	Quantidade
! Composto do exemplo 1	50 mg
Amido	160 mg
Celulose microcristalina	90 mg
Amidoglucato de sódio	10 mg
p Lstearato de magnésio ! ί	2 mg
Silica coloidal fumado	1 mg
A-2
Ingredientes	Quantidade
Composto do exemplo 1 ί	50 mg
Fosfato dicálcico	160 mg
Celulose microcristalina 1	90 mg
I ! ácido esteárico 1	5 mg
Amidoglicolato de sódio	10 mg
Silica coloidal fumada 1 1 1	1 mg

mismura-se o composto do exemplo 1, em pó com os materiais excipienmes acima indicados, com excepção do lubrificante. Adiciona-se então o lubrificante e comprime-se a miscura resuluante em comprimidos ou coloca-se em cápsulas de gelatina aura.

ppluções parenrerais

Ingredientes Composto do Exemplo 1

Áciuo uartanco

Álcool benzílico ' Agua para injecção

Quanridade

500 mg 1,5 S

0,1% em peso q.b. até 100 ml misturam-se os materiais excipientes com a água e depois adiciona-se o composto do exemplo 1. Conrinua a misturar-se até se obter uma solução clara. Ajusta-se o pH desta solução a 3,0 e filtra-se depois para ampolas apropriadas e esterilizou-se em autoclave.

: EXEMPLO C

I

Soluções nasais

Ingredientes

Composto do exemplo 1 Acido cítrico Cloreto de benzalcónico

EDTA

Álcool polivinílico Água

Quantidade

100 mg 1,92 g

0,025% em peso 0 ,1% em peso 10 % em peso q.b. até 100 ml

Misturam-se os materiais excipientes com a água e adiciona-se depois o composto do exemplo 1 e continua a misturar-se até se obter uma solução límpida.

Ajusta-se o pH desta solução a 4,0 e filtra-se depois para ampolas apropriadas.

Claims (5)

1. REIVINDICAÇÕES

   - lê Processo para a preparação de compostos de fórmula I h na qual i; X é oxigénio ou enxofre, i Z é oxigénio ou enxofre, !í r! é alquilo com 1 a 5 átomos de carbono, fluoroalquilo com 1 ' ί' a 3 átomos de fluor e 1 a 5 átomos de carbono, cicloalquilo com 3 a 5 átomos de carbono, mono- ou di-halovinilo, 2-halo-2-propeno-l-ilo, alcenilmetilo ou alcinilmetilo com 3 a 5 j í átomos de carbono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 4 átomos de carbono, anilmetilo (em que a metade arilo é fenilo, tienilo ou furanilo opcionalmente substituído por metilO| metoxi ou haiogénio), alcooxicarbonilo com 3 a 4 átomos de car, hono, alceniloxi ou alciniloxi-carbonilo em que cada metade ί alcenilo ou alcinilo contém 2 a 4 átomos de carbono, hidroxilo, alcooxilo com 1 a 4 átomos de carbono, amino, mono- ou di-alqui lamino em que cada metade alquilo contêm 1 a 3 átomos de carbono, aminocarbonilmetilo, alcanoilaminoalquilo em que a metade alcanoilo contêm 2 a 3 átomos de carbono e a metade alquilo’ i ;

   contém 1 a 2 átomos de carbono, hidroxialquilmetilo com 2 a 5 .X’

   X ! átomos de carbono, alcanoilo com 2 a 5 átomos de carbono, ou ! cianoalquilo em que a metade alquilo contém 1 a 4 átomos de I carbono;

   ’ 2 3 ^4- z z i um dos grupos R , R^? e R é alquilo com 1 a 4 átomos de carbo¹ no, alcenilo ou alcinilo com 2 a 4 átomos de carbono, hidrogénio, hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 3 átomos de car ! bono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, mono- ou ¹ di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos i de carbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de carbono, mono- ou i

   di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 4 átomos de carbom ) no, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, alcooxicarbonilo com 2 j a 3 átomos de carbono, tri-halometilo , alcanoilo com 2 a 3 , átomos de carbono, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de carbono, : ciano, azido, alcooxicarbonilmetilo com 3 a 4 átomos de carboro ou metoxicarbonilmetoxi, sendo um dos dois restantes grupos hidrogénio ou metilo e sendo o grupo restante hidrogénio; ou , 1 2 ó - aois aos _&rupos R , R e R' sao metilo, _;tilo ou cloro, sendo j o _brupo restante hidrogénio; ou

   R^, v? e R^ são cada um deles hidrogénio; e um nos grupos R .8 e aiouilo com 1 a 4 átomos de carbono, alcenilo ou alcinilo com 2 a 4 átomos ae carbono, halogénio, hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 3 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, ^s mono- ou di-alquilamido em que cada metade alquilo contêm 1 a !
2. 2 átomos ae carbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de carbono, mono- ou ai-metilaminometilo , hidroxialquilo com 1 a 4 átomos ae carbono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo em que cada metaae alquilo contém 1 a 2 átomos ae carbono, alcooxicarbonilo j com 2 a 5 átomos de carbono, tri-halometilo, alcanoilo com 2 a
3. 3 átomos ae carbono, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de carbono, ciano, anao , alcooxiaarbonilmetiio com 3 a
4. 4 átomos de carbono ou metoxicaroonilmetoxi, sendo um aos três grupos restentes hidrogénio, metilo, .tilo ou cloro e sendo os outros dois grumos restantes hidrogénio; ou R'⁵, λ°, u hiãro_Dénio;

   8 ~ e R são cada um deles ou re u~ seu s por farmaceuticamente aceitável, caracterizado

   a) se prepararem compostos de fórmula I, em cue Z é oxigénio ele a se definem como anteriormente, convertendo comoostos de fórmula II

   II na qual 2 8
5. 5l a ?l se definem como acima, nos correspondentes compostos de metal alcalino ou alcalino terroso, de fórmula III

   III na suai

   Λ a a° se refinem como acima, 1 I o c e fazer reagir ao seguira estes compostos de metal alcalino 0'J. ·! alcalinoterroso com reagentes aiquilantes ou adiantes, de • f ' 1 .mm 17 - - pz -

   '·· · ·

   R¹!

   (IV) na ouai

   R^ tem os signiíiçados acima indicados, e Y é um grupo rejeitado adequado, de preferência cloro, bromo ou iodo, um sulfato de alquilo ou de arilo, um grupo alquilcarboniloxi ou arilcarboniloxi , em condições de alquilação ou acilação bem conhecidas , ou

   1 8 e X e R a R se definem como anteriormente , por ciclização

   b) se prepararem compostos de fórmula I, em que Z é oxigénio 1 8 e X e R a R se definem c de compostos de fórmula V

   R^! na qual ,1

   X e R- a R^ se definem como acima e hal é fluor, cloro, bromo ou iodo, de preferência na presença de uma base inorgânica, tal como o hidreto de sódio ou de potássio, alquil-lítios, hidroxido de sódio ou de potássio, ou na presença de uma base orgânica, a temperaturas até ao ponto de ebulição da mistura reaccional, na presença de um solvente, ou

   c) no caso de se pretender preparar uma tiolactoma de fórmula: I, em que Z é enxofre e X e R a R se definem como anterior- ; mente, se tratar uma lactama de fórmula I, em que Z é oxigénio, com reagentes de sulfuração, tais como 2,4-dissulfureto do 2,4-bis(4-metoxifenil)-1,3-ditia-2,4-difosfetano, sulfureto

   I

   Η de bis(triciclohexilestanho), sulfureto de bis(tri-n-butilestanho) , sulfureto de bis(trifenilestanho), sulfureto de bis(trimetilsililo) e pentassulfureto de fósforo, em condições í anidras e solventes orgânicas inertes, à temperatura ambiente i ou a temperaturas até ao ponto de ebulição da mistura reaccio ij nal, e, se se desejar, converter um composto de fórmula I num seu sal farmaceuticamente aceitável.

   - 2& Processo para a preparação de compostos de fórmula I, de acordo com a reivindicação lb), caracterizado por se preparar o composto de fórmula V por condensação de cloretos de ácidos 2-halonicotínicos, de fórmula VI

   Cl hal

   VI ! p zl ' em que hal é fluor, cloro, bromo ou iodo e R a R se definem . i i como acima, : !

   com orto-amino-fenóis- ou -tiofenóis de fórmula VII

   VII .X

   5 o

   1 em que X e R a R se definem como acima, e se confirmar a l· reacção in situ até se obter o composto de fórmula I.

   - 3ê Processo para a preparação de compostos de fórmula I, de acordo com a reivindicação lc), caracterizado por

   a)

   b)

   c) se proteger o carbonilo da cetona no composto de partida, antes da reacção de sulfurização , por um grupo protector que é removido depois da reacção de sulfurização, ou no caso de R^ ser um grupo acilo, se efectuar a reacção de sulfurização antes da acilação, ou 2 õ sempre que um substituinte R a R possa ser derivado de um grupo nitro, se efectuar a reacção de sulfurização no correspondente nibro-derivado , seguida por uma redução e finalmente por uma acilação .

   - Processo para a preparação de composI tos de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza do por se obter um composto de fórmula I, em que í

   X é oxigénio ou enxofre;

   í

   S é oxi₀énio ou enxofre;

   n~ é alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, fluoroalquilmetilo ' i a 5 átomos de fluor e 2 a 4 átomos de carbono, mono- ou -nalovinilo, 2-ualo-2-propeno-l-ilo, alcenilmetilo ou alcinil tilo com 3 a 4 átomos de carbono, slcoxialquilo ou alquiltio quilo com 2 a 4 átomos de carbono, alcooxicarbonilalquilo coq a - átomos carbono, alceniloxi- ou alciniloxi- carbonilo ' co

   C-i me aj.

   em

   Cc cua cana metaae arcemlo ou sinilo contém átomos ae .roono , amino car oonrlmetil o , alcanoilaminoal quilo em que a me.re alcanoilo contém 2 a 3 átomos de carbono e a metade alqui- 33 - ^-|| lo oontém 1 a 2 átomos at carbono, nixroxialquilmetilo com

   2 a 4 átimos ie caroono, aicanoilo com 2 a 3 átomos ãe carbono,

   I ou ciano&lquilo em que a metade alquilo contém 1 a 4 átomos de carbono; um dos grupos E , E^y e E e alquilo com 1 a 3 átomos i

   j me carbono, alcenilo ou alcinilo com a 3 átomos de carbono, í halogénio, hidróxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 4 átomos ' de caroono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, mono- ou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 2 átomos de carbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de carbono, mono- ou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 3 átomos de carbono, alcoaxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 3 átomos de carbono, tri-halometilo, acetilo, alcanoilamino com 1 a 3 átomos de carbono, ciano, azido ou metoxicarbonilmetoxi, sendo um mos grupos restantes hidrogénio ou metilo e o ^: último grupo restante hidrogénio; ou - 2 3 4 mois dos grupos Ε , R e E sao metilo, etilo ou cloro, senuo : o grupo restante hidrogénio; ou ; q z q ~ - x ,í E , E^ e R sao cada um meles hidrogénio; e 5 6^8, !

   ,i um dos grupos Ε , Ε , R' e E é alquilo com 1 a 3 átomos de í carbono, alcenilo ou alcinilo com 2 a 5 átomos de carbono, halOoénio, hidroxilo, alcooxilo ou alquiltio com 1 a 2 átomos de carbono, alcanoiloxi com 2 a 3 átomos de carbono, amino, mono-! ou di-alquilamino em que cada metade alquilo contém 1 a 2 áto-i mos de carbono, aminoalquilo com 1 a 2 átomos de carbono, monop i ou di-metilaminometilo, hidroxialquilo com 1 a 3 átomos de carm bono, alcooxialquilo ou alquiltioalquilo com 2 a 3 átomos de ! carbono, tri-halometilo, acetilo, alcanoilamino com 1 a 3 átomos me carbono, ciano, azido ou metoxicarbonilmetoxi, sendo !

   ι um dos brês grupos restantes hidrogénio, metilo, etilo ou cio-, j ro e os outros dois _Orupos restantes hidrogénio; ou χ , ií , Ε θ E sac cada um neles hidrogénio · • Processo para a preparação de composjl cós ae i o mula x, m+e acoraj coa a reivindicação 1, caracteriza í: οi ~ oouei iimi coiUDuírto is iomici I eiii ç^ue η

   ·’· •••aea.TASiu

   1 X é oxigénio ou enxofre;

   i i

   Z é oxigénio;

   R¹ é o.icuilo com 1 a é átomos -de carbono, fluoroalquilmetilo j com 1 a 3 átomos de flúor e 2 a 4 átomos de carbono, mono- ou ' j di-halovinilo, 2-halo-2-propeno-l-ilo, alcenilmetilo ou alcinilmetilo com 5 a 4 átomos de carbono, alcooxialquilo ou alquiltio alquilo com 2 a 4 átomos de carbono, aminocarbonilme; tilo, ou cianoalquilo em que a metade alquilo contém 1 a 3 í átomos de carbono;

   i 2 3 4 z j um dos grupos R , e Ré metilo, etilo, cloro ou amino, sendo os dois grupos restantes hidrogénio; ou

   2 -3 4 ~

   c.013 dos grupos R , R e R sao metilo, etilo ou cloro, sendo _: o grupo restantes hidrogénio; ou i; _ 2 3 - 4 ~ Z . η , R e R sao cada um deles hidrogénio; e um dos grupos R , R°, R' e R° é metilo, etilo, cloro ou amino, sendo os três grupos restantes hidrogénio; ou

   5 ô - 7 B dois dos grupos R , R , R e R sao metilo, etilo ou cloro, sendo os dois grupos restantes hidrogénio; ou ' ' R , R , R^Z e R° sao cada um deles hidrogénio. j

   - 6ê ' Processo para a preparação de compostos de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto de férmula I, em que X é oxigénio ou enxofre;

   p Z é oxigénio;

   ii ⁷ p3 e alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, alilo ou alquiltioalquilo com 2 a 4 átomos de carbono;

   I 2 - 4 ~ z

   R e R sao hidrogénio;

   I

   R^ é hidrogénio ou amino;

   I ¹ 5 9 «* .! R^ e R são hidrogénio ou metilo; e í ¹ • ^: R° e R° são hidrogénio.

   ! Processo para a preparação de composι .

   ! tos de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza' ι do por se obter um dos seguintes compostos:

   ! 3-amino-6 ,9-dimetilpirido/2’57benzoxaz,epina-5(6H)~°h.a;

   J 3-amino-6,7,9-trimetilpirido/2,3-h7^r,57^ht^>enzoxazepina-5(6H)-ona;

   3-amino-7,9-dimetil-6-etilpirido/2,3-b.7/1 ,57benzoxazepina-5(6H2.

   I

   -ona;

   3-amino-7,9-dimetil-6-(n-propil)pirido/2,3-b7\/r,j?7beE.zoxazepina -5(6H)-ona;

   3-amino-6,9-dimetilpirido/2,3-b7/T,^7benzotiazepina-5(6H)-ona;

   3-amino-6,7,9-trimetilpirido/2,3-h.//3- ,57benzotiazepina-5(6H)-ona; ~ ~

   3-amino-7,9-dimetil-6-etilpirido/5 ,3-b7ZT j^Tbenzotiazepina-5(6H)-ona;

   3-amino-7,9-dimetil-6-(n-propil)pirido/2,3-b7/T,£/benzotiaze- í pina-5(6H)-ona;

   3-amino-7,9-dimetil-6-(isopropil)pirido^2,3-b7/r»27^t,enzotiaze” pina-5(6H)-ona;

   3-amino-7,9-dimetil-6-alilpirido/2,3-0.7/^ ,27b®nzotiazepina-5(6H)-ona; i e os respectivos sais de adição de ácido farmaceuticamente ' assimiláveis.

   - 8& Processo para a preparação de uma composição farmacêutica para a prevenção ou tratamento de infecções causadas pelo HIV, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade profilática ou terapêutica de um composto de fórmula I, quando preparado de acordo com qualquer; das reivindicações anteriores, com um veículo farmacêutico adequado, de modo a obter uma forma de administração apropriada.

   - 36 As requerentes reivindicam a prioridá de dos pedidos norte-americanos apresentados em 29 de Agosto ; de 1989 θ em 15 de Junho de 1990, sob os números de série 400,253 θ 539^294, respectivamente. I