PT91365A

PT91365A - Processo para a preparacao de novos derivados de n-2,3-butadienil trie tetraaminoalcanos e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT91365A
Application number: PT91365A
Authority: PT
Inventors: Philippe Bey; Alan Joseph Bitonti; Michael Louis Edwards; David Martin Stemerick
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1988-08-04
Filing date: 1989-08-03
Publication date: 1990-03-08
Also published as: KR900003105A; NO893135D0; DE68912020T2; CN1039800A; NO893135L; ZA895840B; AU617502B2; DK381189D0; CA1321603C; EP0353752A1; FI893681A; EP0353752B1; JPH0283357A; NO172043C; AU3927189A; HU207833B; DK381189A; FI893681A0; PH27214A; JP2722255B2

Description

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MERRELL DOW PHARMACEUTICALS INC., "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVOS DERIVADOS DE N-2,3-BUTADIENIL TRI-E TETRAAMINOALCANOS E DE COMPOSIÇQES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos compostos químicos que são derivados de N-2,3-butadieni1 tri- e tetra-aminoalcanos. Estes compostos são úteis pelas suas propriedades farmacológicas.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Ainda que as poliaminas, espermina e espermidina, fossem identificadas originalmente como constituintes do líquido seminal,'e denominadas de acor do com esse facto, é bem conhecido que estas poliaminas e o seu precursor, a putrescina, são componentes de todas as células de mamífero. As reacções enzimáticas que conduzem â formação e interconversão das poliaminas foram caracterizadas presentemente. Consultar, por exemplo, P.McCann et al., eds. "Inhibition of Polyamine Metabolism", Academic Press, Inc., Harcourt Brace Jovanovich, New York, 1987.

Estas reacções nas células de mamíferos e de protozoários são, de um modo geral, idênticas às encontradas nas plantas e nas bacté- -2- / .'r rias ainda que haja diferenças importantes tais como a ausência nos mamíferos de arginina descarboxilase como uma via para a putrescina através da agmatina. Estudos anteriores demonstraram uma acumulação crescente de putrescina e de espermidina nas células durante o cre_s cimento e um grande e rápido aumento na actividade da ornitina des-carboxilase (ODC) após aplicação de estimulantes promotores do cre_s cimento, sugerindo que as poliaminas podem desempenhar o papel crítico na proliferação celular. Esta correlação foi confirmada preseii temente de uma forma mais directa por diversas vias. As mutantes de células CHO obtiveram-se com ausência de ODC funcional e verificou--se que estas não eram viáveis na ausência de putrescina ou de espermidina. Os compostos que impedem a síntese de poliaminas foram presentemente sintetizados e demonstraram possuir uma acção inibido^ ra acentuada na proliferação celular. Estes inibidores da bio-sínt£ se derpoliaminas foram investigados e estudados intensivamente durante 20 anos,mas o principal feito nttcampo das poliaminas está di-rectamente atribuído à síntese dos inibidores irreversíveis da enzima activada de ODC. A capacidade destes inibidores tem vindo a permitir muitas experiências que proporcionam novos caminhos para as funções das poliaminas e para a sua importância na fisiologia celular. A interconversão e degradação das poliaminas surge da acção de uma poliamina oxidase dependente do FAD intra-celular. Os seus 1 substratos são os derivados N -acetilados da espermidina e da espejr mina. Assim?a extensão da ocorrência destas reacções é regulada pela actividade de PAT que é verdadeiramente induzível por um excesso de -3-

poliaminas e por uma diversidade de substâncias que causam danos ce lulares. Estas reacções contribuem para a redução rápida das conceii trações de poliamina celular, mas também permitem a reutilização do componente putrescina das poliaminas. Esta reciclagem pode ter impor^ tância fisiológica uma vez que existe uma diminuição significativa 1 4 no conteúdo de espermina tecidular quando se associa a N ,N -bis-(2, 3-butadieni1)-1,4-butanodiamina, um potente inibidor da poliamina oxidase, com od.—difluorometilornitina que inibe a ODC.

Outro método de bloquear a síntese da poliamina foi desenvoj^ vido por Porter e colaboradores que descobriram que certos derivados 1 8 sintéticos de poliaminas tais como a N ,N -bis-(etil)-espermidina e 1 12 a N ,N -bis-(eti1)-espermidina mimetizam a acção das poliaminas principais na repressão de ODC e de AdoMetDC. 0 contacto das células com estes compostos conduz à depleção das poliaminas naturais. No eii tanto, estes análogos bis-(etil) não suportam o desenvolvimento de cé lulas L1210 e têm algum potencial como agentes anti-tumorais e para a investigação de funções das poliaminas que são críticas para a pro liferação celular.

Na pesquisa recente das poliaminas, uma das áreas mais compensadoras foi a elucidação do seu desempenho no desenvolvimento dos protozoários. A primeira indicação do impacto que parasitas protozoários teriam no campo da poliamina foi a descoberta de que o DFMO cu raria totalmente as infecções agudas provocadas pelo tripanosoma africano T.b. brucei no murganho. Esta descoberta dramática conduziu ao uso, notavelmente rápido, de DFMO nos que teriam sido casos fatais de resistência ao fármaco de doença do sono em humanos, no úl -4- <» timo estádio, em África.

Um dado número de protozoários da classe esporozoa mostrou ser sensível aos efeitos de DFMO,incluindo a Eimeria spp. e a Pneu-mocystis carínii relacionada de modo distante. Contudo, alguns dos achados mais interessantes foram os relativos à Plasmodia spp., agentes da malária, a doença parasitária mais espalhada e existente no mundo actual. Ainda que os achados originais de diversos laboratórios indicassem ausência de efeitos curativos de DFMO nas formas eritroacíticas de malária in vivo (P. gallinaceum nos frangos e P. berghei nos murganhos), o DFMO bloquearia a multiplicação eritrocíti_ ca (esquizogoma) nas culturas in vitro como recentemente se demon^ trou na redução significativa da parasitémia nas infecções por P. berghei. De modo interessante, quando se estudou o esquizogónio exo eritrocítico, isto é, nas células hepáticas, o DFMO não somente inibiu o ciclo no fígado de murganhos infectados, mas também inibiu totalmente o ciclo esporogónico no vector mosquito. Assim,a malária pode demonstrar bem ser um alvo significativo para a utilização de j inibidores da bio-síntese e função da poliamina.

Presentemente, descobriu-se uma nova classe de inibidores da PAO.

RESUMO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos N-substituídos-2,3-buta_ dienil tri- etetra-aminoalcanos de fórmula geral: -5-

H2C=C=CH-CH2-NH-CH2-A-CH2-NH-CH -B-CH2-NH-R na qual A e B representam cada um, independentemente,uma ligação dupla, um grupo alquileno ou alcenileno C2“C8*,e R representa um grupo metilo, etilo, propilo, 2-propenj_ lo ou 2,3-butadienilo; ou R representa um grupo de fórmula geral: -ch2-d-ch2nhr' em que D ... representa uma ligação ou um grupo alquileno C^-Cg ou alcenileno C2~cg; e R1 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, etilo, propilo, acetilo, 2-propenilo ou 2,3-butadienilo; ou aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico .

Noutros aspectos, a presente invenção refere-se ã capacidade destes compostos para actuarem como inibidores da poliamino oxidase.

Ainda um outro aspecto desta invenção diz respeito a compos^ ções farmacêuticas que contêm os novos compostos e à sua preparação.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Tal como se utiliza aqui a designação "alquileno C^-Cg" sign^ fica grupos alquileno de cadeia linear ou ramificada com 1 a 8 átomos de carbono em que as valências abertas podem estar no mesmo ou em diferentes átomos de carbono. Exemplos incluem os grupos metileno, 1,2-etanodi - ilo- (eti leno), 1-meti 1-1,2-etanodi-ilo-(propileno),1,2-pro-panodi-ílo, 1,1 -etanod i-i:lo- (et i 1 idina), 1 -meti 1 propi 1 ide no - (sec-but ilide no), 1,1-propanodi-ilo-(propilideno), 2,2-dimetil-propilideno-(neopen-tilideno), 2-meti1-trimetileno, 1,8-octanodi-ilo e 1,6-hexanodi-ilo.

Tal como se utiliza aqui o termo "alcenileno ^-Cg" significa alcenilenos de cadeia linear ou ramificada com 2 a 8 átomos de carbono em que as valências abertas podem estar no mesmo ou em diferentes átomos de carbono. Exemplos incluem etenileno-(1,2-rêtenodi-i lo), 1,3--propenodi-ilo-(propenileno)e 1,3-butadieno-1,3-di-ilo.

Tal como com qualquer outra classe de compostos farmacêuticos, alguns dos compostos, e algumas das sub-classes de compostos, são preferidos a outros. Destes compostos de fórmula geral 1 preferem-se aqueles em que A e B, assim como D se presente, representam grupos alquileno de cadeia linear ou ramificada. Destes preferem-se os compostos de fórmula geral 1 em que A e B representam, cada um, um grupo alquilideno de cadeia linear com 1 a 2 átomos de carbono. Também se preferem aqueles compostos de fórmula geral 1 em que R representa um grupo de fórmula geral -CHg-D-CHg-NHR1 e em que A e D representam, cada um, um grupo alquileno de cadeia linear com 1 a 2 átomos de car bono e destes são especialmente preferidos os compostos em que B representa um grupo alquileno de cadeia linear com 5 a 8 átomos de car -7-

L bono.

Além disso, preferem-se os compostos de fórmula geral 1 em que R representa um grupo metilo, etilo ou propilo ou em que R representa um grupo 2,3-butadienilo assim como os compostos em que R representa um grupo de fórmula geral -CH2-D-CH2-NHR' e em que R1 represeji ta um grupo metilo, etilo ou propilo ou em que R' representa um grui po 2,3-butadienilo.

Exemplos de compostos incluídos no âmbito da presente invenção são: 3.3- 1,5-9-triaza-1,9-bis-(2,3-butadien-1-il)nonano, 4.4- 1,6,11-triaza-1,11-bis-(2,3-butadien-1-il)undecano, 3,8,3-1,5,14,18-tetraaza-1,18-bis-(2,3-butadien-1-il)octadecji no , 2.8.2- 1,3,13,16-tetraaza-1,16-bis-(2,3-butadien-1-i1)hexade- cano, 3.6.3- 1,3,11,16-tetraaza-1,16-bis-!(2,3-butadien-1 -i 1 )hexade- cano.

Exemplos representativos dos sais dos compostos da presente invenção,aceitáveis sob o ponto desvista farmacêutico,incluem os sais de adição de ácidos não tóxicos formados com ácidos inorgânicos tais como o ácido clorídrico, o ácido bromídrico,o ácido sulfúrico o ácido fosfórico ou com ácidos orgânicos tais como os ácidos orgânicos carboxílicos como, por exemplo, o ácido salicílico, o ácido ma-leico, o ácido malónico, o ácido tartárico, o ácido cítrico e os áci_ dos ascór'bicos,e ácidos orgânico sulfónicos como, por .exemplo o ácido metano-sulfónico. -8-

De um modo geral,os compostos de fórmula geral 1 podem ser preparados por desprotecção de um composto de fórmula geral 2: 2

H2C=C=CH-CH2-N-CH2-A-CH2-N-CH2-B-CH2-N-R na qual A, B e R se encontram definidos na fórmula geral 1; e P representa um grupo de protecção amino de um modo conhecido para ser útil à eliminação dos grupos de protecção amino representados por P.

Os grupos de protecção amino P são escolhidos de acordo com as reacções importantes usadas para preparar os compostos particula_ res de fórmula geral 2 e tendo em conta a facilidade da sua remoção.

Os grupos de protecção incluem grupos alcanoilo inferior, por exemplo o acetilo,propionilo e trifluoroacetilo; aroílo, por exemplo o benzoílo toluílo; alcoxicarbonilo inferior, por exemplo o metoxi-carbonilo, etoxicarbonilo e terciobutoxicarbonilo; carbobenzoxi;ben-zeno-sulfonilo; e tosilo.

Na preparação dos compostos de fórmula geral 2,os grupos pro tectores são introduzidos de um modo conhecido tal como a reacção de uma amina primária ou secundária apropriada com cloreto de alcanoílo inferior ou de aroílo anidro, cloreto de sulfonilo, terciobutoxicar boniloxi-imino-2-fenilacetonitrilo (BOC-ON) ou di-terciobutildicar-bonato X (BOC)^07- grupo amino protector preferido é o terciobu-toxicarbonilo (BOC). A remoção dos grupos de protecção dos compostos de fórmula ge^ ral 2 é realizada de forma conhecida dos técnicos para os grupos de protecção principais.

Normalmente,a referida remoção envolve a cisão hidrolítica utilizando-se um ácido mineral ou orgânico tal como o ácido trifluoro acético , o ácido clorídrico e outros; ou por meio de cloreto de hidrogénio gasoso sob condições anidras.

Os dissolventes utilizados serão escolhidos dependendo das condições de eliminação do grupo de protecção. Por exemplo éteres tais como o éter dietílico podem ser utilizados para a clivagem com cloreto de hidrogénio gasoso. Se estão presentes na molécula outros grupos funcionais sensíveis aos ácidos, as condições ácidas escolhidas para a eliminação dos grupos de protecção devem ser misturadas a fim de evitar reacções secundárias indesejáveis. No caso de um gru po de protecção carbobenzoxi, este poderá ser eliminado de uma forma convencional por meio de hidrogenólise catalítica.

Os compostos de fórmula geral 2 em que R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo de fórmula geral -CH2-D-CH2NHR1 e em que R1 representa um átomo de hidrogénio e p representa um grupo tercio-butiloxicarbonilo (:B0C) são preparados de acordo com o método que se descreve a seguir no esquema 1, iniciando-se com um ácido N-terciobuti loxicabonilomega-aminocarboxí1ico como se representa na fórmula ge ral 3: na qual ho2c-a-ch2 BOC -1i-.çh2-b-ch2

BOC-L 3 A e B têm os seus significados definidos na fórmula geral 1 ESQUEMA 1 3 + HC =' CCH0NH0---► 2 2 dcc

0 BOC BOCII I I HC = CCH2NHC-A-CH2-N-CH2-B-CH2-NH 4 5 CH20 Dl PA Cu

BOC BOC H2C = C =CHCH2NHC0-A-CH2-Í-CH2-B-CH2-Íh 6 BOC BOC * H2C=C=CHCH2NHCH2-A-CH2-Í-CH2-B-CH2-Íh 7 BOC BOC BOC H2^C =CHCH2NCH2-A-CH2-ll-CH2-B-CH2-NH 8 -11-

Na primeira fase do esquema 1, um composto de fórmula geral 3 reage de modo convencional com propargi1amina (4) para fornecer um composto de fórmula geral 5. A reacção é realizada de forma con-veniente na presença de N,N -diciclo-hexilcarbodi-imida (DCC) no seio de um dissolvente orgânico, por exemplo em acetonitrilo.O gnj po etinilo do composto 5 pode converter-se no grupo alenilo do composto 6 de um modo convencional utilizando-se o método geral descrj_ to por P. Crabbe et al., J.C.5. Chem. Comm, 859-860 (1979) e H.Fil-lion et al., Tet. Letters, 929-930 (1980) para álcoois alénicos. De acordo com este processo o derivado amino protegido de um composto de fórmula geral 5 é tratado com farmaldeído e uma amina secundária com um átomo de hidrogénio no átomo de carbono oce é aquecido no seio de um dissolvente orgânico na presença de um sal inorgânico.De preferência o aquecimento será realizado utilizando condições de re fluxo. A amina preferida é a di-isopropi1amina (DIPA) e o sal inorgânico preferido é um sal de cobre, particularmente o brometo cupro^ so ou o cloreto cúprico. Dissolventes apropriados incluem; o dioxa-no, o tetra-hidrofurano, o 1,2-dimetoxietano, o benzeno, o acetoni-trilo e/ou tolueno. A conversão procederá provavelmente do derivado amino protegido correspondente do composto propini1-amina secundário. 0 composto 6 é selectivamente reduzido na terceira fase, de uma forma convencional, para um composto de fórmula geral 7. A redu^ ção do grupo carbonilo é convenientemente realizada por meio de hi-dreto de alumínio e lítio em éter dietílico. 0 composto 7 pode então converter-se, de um modo convencional, para um composto de fórmula 8 -12-

uti1izando-se métodos convencionais para a introdução de um grupo de protecção BOC de uma amina secundária. Assim, por exemplo, a amina secundária pode ser protegida mediante tratamento com carbonato de diterciobutilo em THF ou em diclorometano.

De um modo geral, os compostos de fórmula geral 2 na qual R re presenta -CHg, CH2CH3 ou -CH2CH2CH3, CH2CH=C=CH2 ou -CH2CH=CH2 são preparados de modo convencional por meio de uma reacção de um composto N-protegido-2,3-butadienilamina de fórmula geral 9:

P

I H2.C = C = CHCH NH 9 na qual P representa um grupo de protecção amina com um composto de fórmula geral 10:

P P x-ch2-a-ch2-n-ch2-b-ch2-n-r j_0 na qual A e R têm os seus significados definidos na fórmula geral 1; P representa um grupo de protecção amina; e X representa um grupo eliminável.

Os grupos elimináveis preferidos são-os grupos mesilato, tosi-lato, brometo ou iodeto, sendo este último o grupo eliminável mais preferido. A reacção pode realizar-se convenientemente no seio de um dissolvente orgânico tal como o THF, o éter dietílico, a DMF ou o -1 3-

benzeno na presença de um equivalente de uma base forte tal como o hidreto de potássio ou de sódio ou o terc-butoxido sódico ou potá£ sico q.u di-isopropilamida de lítio durante um período que irá dos 10 minutos até 24 horas a uma temperatura que irá dos -30°C até aos 100°C de unLEiodo-óptimo na presença de uma quantidade catalítica de iode-to de sódio. As condições de reacção preferidas utilizam o hidreto de sódio em DMF a uma temperatura entre os 0°C e os 25°C.

Os compostos de fórmula geral 2 na qual R representa um grupo podem também ser preparados por meio de reacção de dois equivalentes de um composto de fórmula 9 com um composto de fór mula 11:

P 11 x-ch2-a-ch2-n-ch2-b-ch2-x na qual A e B têm os seus significados definidos na fórmula 1; X representa um grupo eliminável, tal como os definidos para a fórmula 10; e P representa um grupo protector amina, de preferência BOC.

Esta reacção pode ser realizada de modo convencional como foi descrito para um composto de fórmula 9 com um composto de.fórmula 10.

Os compostos de fórmula 2 em que R representa um grupo -Ch^-D--CI^NHR1 e R1 representa um grupo acetilo ou um átomo de hidrogénio são preparados de um modo convencional mediante reacção da sequência descrita em seguida no esquema 2, iniciando-se a partir de um composto de fórmula geral 8 ( ver esquema 1):

Esquema 2 *·

8 + CH2=CH-CN

BOC BOC BOC h2c=c=ch-ch2n-ch2-a-ch2-n-ch2-b-ch2n(ch2)2cn 12

BOC BOC BOC h2c-c=ch-ch2n-ch2-a-ch2-n-ch2-b-ch2n(ch2)3nh2 13 H2C=C=CH-CH2 BOC li-d-L-A-ChL-2 2 BOC Íl-C.H2 b-ch2 BOCA(CH2)3 NHC0CH3 14 na qual P representa um grupo de protecção amino tal como an-teriormente se definiu. -15- r.

Na primeira fase do esquema 2, um composto de fórmula geral 8 faz-se reagir com acrilovitrilo (11) de um modo convencional para proporcionar um composto de fórmula geral-12,. A reacção é realizada na presença de uma base no seio de um dissolvente orgânico.

Na segunda fase do esquema 2 o composto 12 é redu_ zido para fornecer o composto de fórmula geral 13, de uma forma conhecida utilizando métodos convencionais ( não catalíticos ) pji ra uma redução selectiva do grupo ciano para um grupo amina primjl rio. 0 reagente preferido é o hidreto de alumínio e lítio. A preparação do derivado de N-acetil de fórmula geral 14 a partir de um composto 13 é realizada de uma forma habitualmente seguida pelos técnicos utilizando técnicas de acetilação convencionais.

Os compostos N-protegidos 2,3-butadieni1 amina de fórmula geral 9 podem ser preparados de modo habitual a partir da amina de propagilo N-protegido de fórmula geral 15: hc=cch2nhp na qual P representa um grupo de protecção amino tal como anteriormente se definiu. -16.-

-16.- ) 5V w- ( & Ο processo para a realização desta transformação é descrito anteriormente no que se refere à segunda fase do esquema 1.

Os compostos de fórmula geral 1 são inibidores irreversíveis da poliamina oxidase (PAO) como se pode demonstrar in vitro e in vj^ vo por meio de testes bioquímicos. 0 teste bioquímico para demonstrar a capacidade inibidora de PAO dos compostos representativos está ilustrado no exemplo 3.

Os inibidores da PAO são de interesse especial para o estudo do papel fisiológico da poliamina nos esquemas de interconversão nos mamíferos. Adicionalmente os inibidores da PAO impedem a degradação 1 de N -acetilespermidina com a formação concomitante de putrescina.A capacidade para diminuir a quantidade de putrescina circulante nos mamíferos será altamente vantajosa com certas condições tais como, por exemplo, em situações de proliferação celular aumentada.

Considera-se que os compostos de fórmula geral 1 são "inibido^ res irreversíveis de substrato —induzido" de PAO. Tais inibidores são também conhecidos pelos técnicos como "inibidores irreversíveis de enzima activada", "inibidores de enzima suicida", "inibidores de C â K " ou "inibidores de mecanismo". Para que se possa considerar que-umcomposto é um "inibidor de enzima irreversível de substrato -induzido" o composto deve ser um substrato para a enzima alvo e. o'compo'S£ to deve conter um grupo reactivo lactente susceptível de ser desma£ carado como o resultado de uma acção catalítica normal da enzima. 0 desmascarar do grupo reactivo lactente pela acção da enzima gera uma função reaccional que alquilata um resíduo nucleofílico presente no -17-

sítio activo da enzima. Assim forma-se uma ligação covalente entre o inibidor e a enzima no sítio activo,resultando numa inactivação irr£ versível da enzima. Estes inibidores são extremamente específicos uma vez que o inibidor deve ter um substrato para a enzima-alvo e que a bio-transformação do inibor pela enzima-alvo é necessária antes da enzima ser inactivada.

Apesar de se considerar que os compostos de.fórmula geral 1 exercem geralmente a sua acção por meio de-um mecanismo de substra · to-induzido, a inibição pode ocorrer por meio de outros mecanismos tais como uma inibição competitiva.

Em virtude da potente actividade inibidora de^PAO,os compostos da.presente invenção interrompem a síntese da poliamina nos si£ temas vegetais e animais. Os compostos são úteis para o tratamento de infecções por Plasmodium Falciporium e no tratamento de outras doenças e estados. Os compostos inibem a PAO quando utilizados numa concentração entre cerca de 1 a cerca de 100 micromoles. A quantidade de ingrediente activo a ser administrada pode va riar largamente de acordo com a unidade de dose particular utilizada, o período de tratamento, a idade e o sexo do doente a tratar e a natureza e extensão da doença em causa. A quantidade total de ingredieii te activo a ser administrada será geralmente da ordem dos 5 mg a cejr ca de 500 mg por dia. A dose unitária deve conter de 25 mg a 500 mg de ingrediente activo e pode ser administrada uma ou mais vezes por dia. 0 composto activo de fórmula geral 1 pode ser administrado com um veículo farmacêutico utilizando formas de dose unitárias convencio nais, quer por via oral,quer parentérica ou tópica. -18- -18- •s. ίί

Para administração oral os compostos podem ser formulados em preparações sólidas ou líquidas tais como cápsulas, pílulas, compri_ midos,trociscos, pastilhas, pós, soluções, suspensões e emulsões.As formas de dose unitária sólidas podem constituir uma cápsula que po de ser a cápsula vulgar de gelatina mole ou dura contendo, por exem pio, agentes tensio-activos, agentes lubrificantes e cargas inertes tais como a lactose, a sacarose, o fosfato de cálcio e o amido de milho. Num outro aspecto,os compostos da presente invenção podem ser comprimidos com bases convencionais tais como a lactose, a sacarose e o amido de milho em combinação com agentes ligantes tais como a acácia, o amido de milho ou a gelatina, agentes de desagregação, agen tes que auxiliam a desagregação ou a dissolução durante a administração do comprimido tais como o amido de ;batata,o ácido algínico, ,amj_ do de milho,a gema de guar,agentes lubrificantes que se utilizam para me lhorar o escoamento da granulação para a conversão e para impedir a adesão do material a comprimir à superfície das matuzes, por exemplo o talco, o ácido esteárico ou o magnésio, o cálcio, o estearato de zinco, corantes, agentes de coloração e agentes apaladantes que se considerem reforçar as qual idades estéticas-* dos comprimidos? torpando-os mais aceitáveis para o doente. São excipientes apropriados para formas de dose líquidas para administração oral os dissolventes tais como a água e álcoois como, por exemplo, o etanol,o álcool benzílico e álcoois poli et i1é-nicos, com ou sem adição de agentes tensio-activos aceitáveis em far mácia, agentes de suspensão ou agentes de emulsão.

Os compostos da presente invenção também se podem administrar por via parentérica, isto é, por via sub-cutânea, intra-venosa ou iin -19- intra-muscular ou por via interperitoneal como doses injectáveis dos com postos num dissolvente compatível fisiologicamente, conjuntamente com um veículo farmacêutico que pode ser um líquido estéril ou uma mistura de líquidos tais como a água, solução de cloreto de sódio, dextrose aquosa, soluções de açúcares afins, um álcool tal como o eta nol, o isopropanol ou o álcool hexadecílico, glicóis tais como o pro pileno-glicol ou o polietileno-glicol, cetais de glicerol tais como 2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol, ésteres tais como o poli-(etile noglicol) 400, um óleo, um ácido gordo, um éster de um ácido gordo ou um glicerido ou um glicerido de um ácido gordo acetilado com ou sem a adição de um agente tensio-activo aceitável em farmácia tal c£ mo um sabão ou um detergente, um agente de suspensão tal como a pec-tina, carbomeros,meticelulose, hidroxipropilmetilcelulose ou carbo-ximetilcelulose ou agentes de-emulsão ou outros adjuvantes aceitáveis em farmácia. Oleos representativos que podem ser utilizados nas composições parentéricas da presente invenção são os óleos do petróleo, óleos animais, óleos vegetais ou óleos de origem sintética,por exemplo o óleo de amendoim, de soja, de sésamo, de algodão,de milho, azeite,parafina e óleos minerais. Ácidos gordos apropriados incluem o ácido oleico,o ácido esteárico, o ácido isoesteárico. ésteres de ácidos gordos apropriados são, por exemplo,o oleato de etilo e o mi-ristato de isopropilo. Sabões apropriados incluem os sais gordos de metais alcalinos, sais de amónio e sais de trietanolamina e os deter gentes apropriados incluem os detergentes catiónicos tais como halo-genetos de dimetil dialquil amónio, halogenetos de alquil piridínio e acetatos de alquilamina; detergentes aniónicos tais como sulfona- - 20r & tos de alquilo, de^arilo e olefina, sulfatos e sulfo-succinatos de alquilo olefina,éter e de monoglicéridos; detergentes não-iónicos como,por exemplo,óxidos de aminas gordas, alcanolamidas de ácidos gordos e copolímeros de polioxietilenopolipropileno, e detergentes anfotéricos tais como beta-aminopropinato de alquilo e sais de amó nio quaternário de 2-alquiir.imidazolina assim como misturas. As comp£ sições parentéricas da presente invenção incluirão tipicamente entre cerca de 0,5% e cerca de 25% em peso de ingrediente activo em solução. Os agentes conservantes e tampões podem também ser utilizados com vantagem. A fim de minimizar ou eliminar a irritação no local de injecção,estas composições podem conter agentes tensioactivos não-iónicos que apresentem um equilíbrio hidrofilo-lipofilo (HLB) de cer ca de 12 a cerca de 17. A quantidade de tensioactivo nestas composições varia entre cerca de 5% e cerca de 15% em peso. 0 tensioactivo pode ser um componente simples exibindo o equilíbrio hidrófilo-lipofilo citado antes ou pode constituir uma mistura de dois ou mais componentes pos_ suindo o desejado HLB.

Agentes tensioactivos representativos utilizados nas compos_i_ ções parentéricas são a classe dos ésteres dos ácidos gordos de po-1ietileno-sorbitano tais como o mono-oleato de sorbitano e aditivos de elevado peso molecular do óxido dè etileno com uma base hidrófoba, formados por condensação de óxido de propileno com propileno-glicol.

EXEMPLOS

Os exemplos que se seguem não têm qualquer carácter limitatj. vo e ilustram vários- aspectos da presente invenção.

Exemplo 1

Tri-hidro-cloreto ds N-2,3-butadienil-N*-C 3-(2,3-butadienilamino)- -propil 7-1, 3-propanodiamina.

Converteu-se a bis-:(3-hidroxipropi 1 )-amina no derivado BOC com dicarbonato de di-t-butilo.O derivado BOC (11,5 g, 0,05 mole) e trietilamina (18,5 g, 0,18 mole) foram dissolvidos em diclorometano (500 ml) e a solução foi arrefecida até 0°C. Adicionou-se gota a g£ ta uma solução de cloreto de metano-sulfonilo (12,5 g, 0,11 mole) em diclorometano (85 ml). A mistura foi agitada durante 1 horaemeia diluiu-se com diclorometano (250 ml) e extraiu-se c'om ácido acético 1N, carbonato de hidrogénio e sódio aquoso,água e solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica e evaporou-se, puriH cou-se o resíduo com uma coluna de gel de sílica rápida eluída com acetato de etilo/hexano (3/2) que forneceu 8,8 g de um sólido branco de N-butiloxicarboni1-bis-(3-mesiloxipropi1)-amina.

Análise (C13H27N0gS2) . C, Η, N, S.

Adicionaram-se em 50 ml de dimetilformamida 6,7 g de iodeto de sódio (44 moles), 1,96 g de ihidreto de sódio (49 moles de dispersão em óleo)e 8,8g do composto N-batiloxicarbóni l-bis-(3-mesri.loxipropil)--

-amina (22 mmoles) e a mistura foi arrefecida até 0°C. Adicionou-se uma solução de 8,3 g (48 mmoles) do composto alenílico N-butiloxicar bonil-N-(2,3-butadienil)-amina em 20 ml de DMF e a mistura foi agitja da durante 3 horas e meia à temperatura de 0°C. 0 dissolvente foi eliminado e retomou-se o resíduo com acetato de etilo e extraiu-se a solução com água. 0 resíduo orgânico foi seco e evaporado. A crt) matografia rápida do resíduo utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo a 25%/hexano forneceu 7,9 g de um óleo espesso, o derivado bis BOC do derivado do composto em título. 0 derivado bis BOC foi dissolvido em 35 ml de etanol e adicit) nou-se uma solução de 120 ml de ácido clorídrico etérea 2N e agitou--se a mistura durante 18 horas à temperatura ambiente. A mistura foi filtrada e o precipitado foi seco sob vácuo â pressão reduzida com P2O5 para se obter 0 produto sob a forma do tri-hidro-cloridrato P.F. 273°-275°C com decomposição.

Análise: (C14H25N3.3-HC1) C, Η, N, Cl.

De um modo idêntico mas partindo-se de bis-(2-hidroxieti1)--amina e seguindo a mesma sequência reaccional obtém-se 0 composto tricloridrato de N-2,3-butadieni1-Ν’-[ 2(2,3-butadienilamino)-eti1 J -1,2-etanodiamina.

Do mesmo modo mas partindo de bis-(4-hidroxiboti1)-amina obtém-se 0 composto N-2,3-butadienil-N' -C 4-(2,3-butadienil(amino)bu-til 7-1,4-butadiamina.

Exemplo 2

Tetra-cloridrato de 1,18-bis-(2,3-butadienil--1 -i1)-5, 14, 18-tetra-azaoctadecano

Converteu-se o diol N,N*-t-butoxicarbonil-NjN1-bis-(3-hidro xipropi1)-1,8-diamino-octano em dimesilato e este fez-se reagir com dois equivalentes de N-t-butoxicarbonil-2,3-butadienilamina. 0 produto foi desbloqueado mediante aplicação de ácido clorídrico etanó-lico para fornecer sal tetra-cloridrato. P.F. 286°-287°C com decomposição.

Anal.: Calcd. para C22H42N4.4HC1: C, 51,96, H,9,12, N, 11,02; Cl 27,89

Determ.: C, 51,80, H,9,12; N, 11,12 ; Cl,27,73

Por meio de uma sequência similar as substâncias iniciais seguintes podem converter-se nos produtos mencionados. A. Inicial: N,N' -bis-t-butoxicarboni1-N,N'-bis-(3-hidroxipropil)- -1,7-diamino-heptano

Produto : Tetrahidrocloridrato de 1,17-bis(2,3-butadieni1-1-i1 )--1,5,13,17-tetraazatieptadecano. B. Inicial: N,N*-bis-t-butoxicarbonil-N,N‘ -bis(2-hidroxietil )-1,8- diaminooctano.

Produ-to ; 1,16-bis(2,3-butadienil-1-il )-1,4,13,16-tetraazahexade cano. -24-

Ν,Ν1-bis-t-butoxicarbonil-Ν,Ν ^-bis-ÇS-hidroxipropí1)- -1,7-diamino-heptano

Dissolveram-se 26,9 g (0,063 mole) de N,N' -bis-(3-hidroxipr£ pil)-N,N* -dibenzil-1, 7-di amtncrliieptano em 220 ml de etanol e hidrog£ nou-se num aparelho de hidrogenação de Parr na presença de Pd(0H)2 (catalisador de Pearlman) (0,5 g). Após a absorção teórica do hidro génio, a mistura foi filtrada e o filtrado foi evaporado.0 resíduo foi redissolvido em 300ml de diclorometano e adicionaram-se 44 g (0,2 mole) de-di-t-butildicarbonato e a mistura foi agitada durante 18 h£ ras. Eliminou-se o dissolvente num evaporador rotativo e purificou--se o resíduo por cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/tolueno (4/1) para fornecer 22 g do produto sob a forma de uma goma. 0 espe£ tro de massa mostrou o ião molecular M+1 para 447.

Aná.l.; Calcd. para C, 61,85; H, 10,38; N, 6,27

Determ.: C, 62,04; H, 10,26; N, 6,25

Pelo mesmo processo, uti1izando N,N*-bis-(3-hidroxipropi1)-N, N*-dibenzi 1-1,8-diamino-octano obtém-se N,N*-bis-t-butoxicarboni1-N, N-*-bis-(3—h-idroxipropil )-1,8-diamina.

Da mesma forma,uti1izando N,N'-bis-(4-hidroxibutil)-N,N-dibe£ zil-1,7-diamino heptano obtém-se N,Nl-bis-t-butoxicarbonil-N,Nr-bis--(4-hidroxibuti1)-1,7-diamino heptano. -25-

N-N1-bis-(3-hidroxipropi1)-N,N*-dibenzil-1, 7-diamino heptano

Uma mistura de 26 g (0,084 mole) de N,Ν'-dibenzi1-1,7-diamino heptano, 15,9 g (0,168 mole) de 1-cloro-3-hidroxipropano, 53 g (0,50 mole) de carbonato de sódio, 1,2 g de iodeto de sódio e 40 ml de N-butanol foi aquecida sob refluxo durante 20 horas. A mistura foi arrefecida e diluída com uma mistura de 700 ml de diclorometano e 500 ml de água. Separou-se a fase orgânica, secou-se e evaporou-se. 0 resíduo foi purificado por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/álcool metílico (10/1) para se obter 26,9 g de uma goma espessa. 0 espectro de massa revelou o ião molecular M+1 427.

Ana'1: Calcd, para C27H42N2°2’ C’ 76,01; H, 9,92; N, 6,57 Determ.: C, 76,26; H, 9,91; N, 6,77

Utilizando as mesmas condições com N,Ν'-dibenzil-1,8-diamino--octano obtém-se N,N‘-bis-(3-hidroxipropi1)-N,N'-dibenzil-1,8-diami-no-octano.

Utilizando as mesmas condições com 1-cloro-2-hidroxietano ou 1-cloro-4-hidroxibutano em substituição de 1-cloro-3-hidroxipropano obtém-se N-N*-bis(2-hidroxietilJ-NjN1-dibenzil-1,7-diamino-heptano e N,N*-bis(4-hidroxibuti1)-N,N#-dibenzil-1,7-diamino-heptano. Ν,Ν1 -dibenzil-1,7-diaminoheptano

Uma solução de:46 g (0,44 mole) de benzaldeído e 26 g (0,2 rno le) de 1,7-diamino heptano em 200 ml de etanol foi hidrogenada num -26- aparelho de hidrogenização com agitação de Parr na presença de óxido de platina (0,5 g) até â absorção do hidrogénio ser igual à do valor teórico para a reacção. A mistura foi filtrada, o filtrado foi evaporado e o resíduo foi destilado até se obterem 27 g do produto; p.e. 0,4 - 185°C.

De forma similar e partindo de 1,8-diamino octano obtém-se N,N'-dibenzil-1,8-diamino octano.

Exemplo 3 A capacidade dos compostos de fórmula geral 1 para inibir a PAO ex vivo pode demonstrar-se de acordo com o seguinte teste:

Avaliação das actividades de PAO nos tecidos de murganho: A actividade de PAO foi avaliada em fígado de murganho e de rato homogeneizado utilizando-se como substrato acetil espermina se guindo-se o método de Bolkenius et al., Bio. Chem. Biophys. Acta. 838 : 69-76, 1985.

I

í,..V QUADRO INIBIÇÃO DA POLIAMI V NA OXIDASE i ·*· Gcnposto Estrutura In Vitro l In Vivo Baode fígado de Dose MI Aotiviclscte Rato Ki#yM—T50#min mg/kg p/mol/min/mg proteína 46 t <%>\^MH(CH2)3HH(CH2)3»HN/ 3.0 4.0 o o j 51 NH(CH2)3NH ^ I . (CH2)8 1 HH(CH2)3»H 2.5 2.0 10 4.1 56 HH(CH2) 4 NB ^ 1.7 1.0 2.5 3.9 25.0 1.9 Control o 0 18-7 - Dosearam-se os murganhos por via intraperitoneal com fármacos 24 horas antes da determinação da actividade de PAO no fígado. A poliamina oxidase do fígado de rato foi purificada pelo processo de E. Holtta5 BioCh'ein 1s try Í6: 91-10,1977-através de fase cromatográfica em DEAE-celulose. Determinaram-se a Ki et50 utili- -28- zando-se PAO purificada pareialmente como descrito por Bey et al., J. Med. Chem 28:1, Ί985, Os fígados de murganho foram homogeneiza-zados e determinou-se a actividade de PAO como descreveu . Bolke-nius et al., Biochem. Biophys. Acta 838: 69-76, 1985. as concentrações de proteínas foram avaliadas pelo método de Bradford, Anal. BiΘ-chem. 72:248-254, 1976, utilizando como padrão albumina de soro de. bovino.

Claims

-29-

REIVINDICAÇÕES 1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral H2C=C=CH-CH2-NH-CH2-A-CH2-NH-CH2-B-CH2-NH-R (1) na qual A e B representam, cada um, independentemente, uma ligação ou um grupo alquileno C^_g ov. alcenileno C2_g, e R representa um grupo metilo, etilo, propilo, 2-propenilo ou 2,3-butadienilo ou um grupo de fórmula geral *-CH2-D-CH2NHR' na qual D representa uma ligação ou um grupo alquileno C^_g ou alcenileno C0 e R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, etilo, propilo, acetilo, 2-propenilo ou 2,3-butadienilo, -30- fj ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (a) de se desproteger um composto de fórmula geral f ? ? H2C=C=CH-CH2-N-CH2-A-CH2-N-CH2-B-CH2-N-R (2) na qual A, B e R têm o significado definido antes e P representa um grupo protector do radical amino, ou (b) de se proteger um composto de fórmula geral BOC BOC l / H02C-A-CH2-N-CH2-B-CH2-NH ‘ (3) na qual A e B têm o significado definido antes.
2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R representa um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3-butadienilo e A e B representam, cada um, independentemente, uma ligação ou um grupo al-quileno C^g, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R representa um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3-butadienilo e A e B representam, cada um, independentemente, uma ligação ou um grupo al-quileno C1-2, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de formula geral (1) na qual R representa um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3-butadienilo e A e B representam, cada um, um grupo metileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R representa um grupo 2,3-butadienilo e A e B representam, cada um, um grupo metileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R representa um grupo de fórmula geral -CH2-D-CH2-NHR' e A, B e D representam, cada um, uma ligação ou um grupo alquileno C^_g, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos. , caracterizado
7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R representa um grupo de fórmula geral -d^-D-C^-NHR' e A, B e D representam, cada um, uma ligação ou um grupo alquileno C^_g » -32- V f pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8.- Processo de acordo com a reivindicação 7, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3--butadienilo e A, B e D representam, cada um, uma ligação ou um grupo alquileno C^_g, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9.- Processo de acordo com a reivindicação 7, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3--butadienilo, A e D representam, cada um, independentemente, uma ligação ou um grupo alquileno C e B representa uma ligação ou um grupo alquileno Cg_g, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10.- Processo de acordo com a reivindicação 7, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, etilo, propilo ou 2,3-butadienilo, A e D representam, cada um um grupo metileno e B representa um grupo hexametileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos. 11.- -33-
11.- Processo de acordo com a reivindicação 7, para a preparação de compostos de fórmula geral (1) na qual R' representa um grupo 2,3-butadienilo, A e D representam, cada um, um grupo metileno e B representa um grupo hexametileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
12.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas com acção antimalárica, caracterizado pelo facto de se misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral (1), preparado pelo processo de acordo com as reivindicações 1 a 11, e que apresenta uma acção inibidora da função e da biosíntese da poliamina-oxidase, com um veículo aceitável em farmácia.
13.- Método para o tratamento da malária, caracterizado pelo facto de se utilizar uma quantidade compreendida entre cerca de 5 e cerca de 500 mg/dia, de um composto de fórmula geral (1) com acção inibidora da poliamina-oxidase, preparado pelo processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 11,