PT90262B

PT90262B - Processo para a preparacao de novos derivados trienicos com estrutura cromenica

Info

Publication number: PT90262B
Application number: PT90262A
Authority: PT
Inventors: Jean-Daniel Brion; Guillaume Le Baut; Patrick Ducrey; Sylvie Piessard-Robert; Claude Cudennec; Genevieve Seurre
Original assignee: Adir
Priority date: 1988-04-13
Filing date: 1989-04-12
Publication date: 1994-07-29
Also published as: AU3266089A; DE68905361D1; DE68905361T2; JPH01305079A; PT90262A; IE64180B1; AU616500B2; US4975454A; ATE86989T1; CA1326675C; DK179389A; EP0337885A1; ZA892717B; FR2630111A1; JPH064615B2; FR2630111B1; ES2055121T3; IE891162L; OA09416A; DK179389D0

Description

Processo para a preparação de novos derivados triénicos com estrutura croménica

A presente invenção diz respeito a um processo para a preparação de novos derivados dotados de propriedades anti-cancerosas pertencentes à família dos retinóides e de composiçoes farmacêuticas que os contêm.

Conhecem-se numerosas substâncias da família dos retinóides conceituadas pelas suas propriedades anti-cancerosas. As patentes de invenção norte-americanas N2s 4,059-,589; 4,106,681; 4,157,246; 4,165,105; 4,169,100; 4,171,518; 4,224,244; belga N° 861982; francesa NR 2 558 548; e europeia 111124 descrevem derivados da família dos retinóides cuja cadeia tetraénica se encontra em uma estruturamcnocíclica ciclohexénica ou benzénica.

Mais particularmente, a patente de invenção norte-americana N2 4,105,681 descreve o etretinato utilizado em terapêutica e cujas propriedades anti-cancerosas são hoje conhecidas.

A patente de invenção norte-americana N2 4,521,209,assim como os documentos de prioridade DT 2 59-2 600 e DT 2 59-2 601, descrevem derivados cuja cadeia triénica está fixada sobre uma estrutura monocíclica aromática.

As necessidades da terapêutica exigem o desenvolvimento constante de novos anti-cancerosos com o duplo objectivo de obter moléculas cada vez mais activas mas igualmente menos tóxicas .

Os derivados obtidos pelo processo de acordo com a pre-

sente invenção possuem uma estrutura original constituída por uma cadeia triénica fixada sobre uma estrutura bicíclica do tipo cromeno que se encontra em numerosas substâncias naturais eventualmente substituída sobre o núcleo aromático. A originalidade da estrutura dos compostos de acordo com a presente invenção permite a obtenção de propriedades farmacológicas particularmente interessantes visto que se revelam, nos ensaios estudados, superiores às do etretinato. Alám disso, a sua toxicidade é particularmente fraca visto que parece que estes derivados não levam à toxicidade hipervitamínica A,contrariamente ao etretinato.

Mais particularmente, a presente invenção tem por objectivo um processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral

R,

R<

na qual:

R^, R₂, R^ e R^, iguais ou diferentes, representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo inferior, alcenilo inferior, alcoxi inferior ou alceniloxi inferior eventualmente substituídos por um ou vários átomos de halogéneo, representa um grupo carboxilo alcoxi-(inferior)-carbonilo, alceniloxi (inferior)-carbonilo cuàLciniloxi (inferior)-carbonilo.

dos seus isómeros, estereoisómeros, diastereoisómeros assim como dos seus sais de adição com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

entendendo-se que:

. entre as bases susceptiveis de salificar os compostos de fórmula geral I em que o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, podem-se citar como exemplos hidróxidos de sódio, de potássio, de cálcio, ou de alumínio, carbonatos de metais alcalinos ou alcalino-terrosos ou bases orgânicas tais como a trietilamina, a benzilamina, a dietanolamina, a butil terc.-amina, a diciclo hexilamina, a arginina, etc., . por radicais alquilo inferior, alcenilo inferior, alcoxi inferior, alceniloxi inferior e alciniloxi inferior entendem-se os grupos de cadeias lineares ou ramificadas comportando entre 1 e 6 átomos de carbono, caracterizado pelo facto de se condensar mediante aquecimento a refluxo do dissolvente um derivado de fórmula geral

na qual R^, Rp, R^ e R^_ têm os significados definidos antes com o 3-oxo-l-buteno de fórmula

(III) ch₂ na presença de um agente alcalino escolhido de preferência entre os carbonatos alcalinos e alcalino-terrosos, ou as bases orgânicas como por exemplo a trietilamina ou a piridina ou uma mistura constituída por um carbonato alcalino ou alcalino-terroso e uma base orgânica no seio de um dissolvente polar preferencialmente escolhido entre os dissolventes cetónicos tais como a 2-butanona ou amídicos tais como a dimetilformamida, para se obter, após arrefecimento e evaporaçao eventual do meio reaccional, retoma com água a que se adicionou eventualmente um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, extracção com um dissolvente orgânico apropriado tal como o éter dietílico, o clorofórmio ou o cloreto de metileno, lavagem da fase orgânica, evaporaçao do dissolvente e purificação do resíduo mediante cristalização ou destilação, ou cromatografia em coluna de sílica ou de alumina, um derivado de fórmula geral

CH (IV) na qual R^, R^, R^ e R^ têm os significados definidos antes, que se submete, quer a uma hidrogenação catalítica, após dissolução em um dissolvente orgânico conveniente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifáticos inferiores, com vantagem na presença de um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, hidrogenação realizada de preferência com um hidreto misto de metal alcalino, tal como o borohidreto de sódio para se obter, após uma extracção com um dissolvente orgânico conveniente tal como o éter dietílico, o diclorometano ou o clorofórmio, eventualmente precedida da evaporação do meio reaccional, lavagem seguida de evaporação da fase orgânica e purificação, um derivado de fórmula geral

na qual R^, R£, R^ e R^ têm os significados definidos antes, que se submete à acção de um sal de trifenil-fosfónio no seio de um dissolvente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifáticos inferiores à temperatura ambiente e sob agitação para se obter, após evaporação do dissolvente e purificação mediante cromatografia sobre gel de sílica e cristalização no seio de um dissolvente ou de uma mistura de dissolventes apro-

priados,

(VI) na qual A~ representa o anião de um hidrácido e R^, R₂, R^ e R^ têm os significados definidos antes, que se faz reagir, no seio de um dissolvente apropriado, preferencialmente sob atmosfera inerte e na presença de n-butil-lítio em hexano, com um aldeído diénico de estereoquímica bloqueada sob a forma de um complexo de tricarbonil-ferro de fórmula geral VII de acordo com a reacção descrita por WITTIG (Ber 195*, §2, 1518 e Ber 1955, 88, 165*):

OHC

(VII) na qual o símbolo R^ tem o significado definido antes, a uma temperatura preferencialmente compreendida entre -5°C e -50°C, com vantagem compreendida entre -15°C e -20°C, para se obter, após extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica, um complexo intermediário que, após purificação mediante cromatografia, se submete, a refluxo do dissolvente orgânico escolhido para esta etapa, à acção do N-óxido de trimetilamina, para se obter, após arrefecimento, extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica, e cromatografia em coluna, um composto de fórmula geral I, quer à acção do bromoacetato de etilo na presença de zinco, seguida de hidrólise extemporânea do meio reaccional, extracção com um dissolvente orgânico apropriado preferencialmente escolhido entre acetato deetilo, cloreto de metileno, clorofórmio, éter dietílico, depois à acção do oxicloreto de fósforo no seio de um dissolvente orgânico apropriado, evaporação do meio reaccional e nova extracçao com um dissolvente preferencialmente escolhido entre acetato de etilo, cloreto de metileno, clorofórmio, éter dietílico, para se obter, após eventual cromatografia sobre gel de sílica, um derivado de uma fórmula geral

COOC₂H₅ (VIII) na qual R^, ΐί^ι antes, e R^ têm os significados definidos que se faz reagir a baixa temperatura, preferencialmente compreendida entre -50° e 0°C, com vantagem compreendida entre -25°C e 5°C, no seio de um dissolvente escolhido de preferência entre éter dietílico, éter diisopropílico e tetrahidrofurano, com hidreto de litio e alumínio para se obter um derivado de fórmula geral na qual R^, antes,

R,

R_x e R_a têm os significados definidos que se submete a uma oxidação com dióxido de manganês para se obter, após cromatografia sobre gel de sílica e eventual cristalização, um derivado de fórmula geral

na qual R^, π/, R^·e antes,

R^_ têm os significados definidos que se fez reagir com um derivado de fórmula geral XI de acordo com a reacçao descrita por WADSWORTH - EMMONS (J. Am. Ohem. Soc. 1961, 83, 1733):

na qual R^ tem o significado definido antes e Z representa um grupo alquilo inferior, à temperatura ambiente para se obter, após extracção com um dissolvente orgânico apropriado, evaporaçao e purificação mediante cromatografia em coluna de sílica, um composto de fórmula geral I, que se pode, eventualmente,

- ou quando o símbolo R^ representa um grupo carboxílico, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus estereoisómeros de acordo com uma técnica de cristalizaçao ou de cromatografia e depois, eventualmente, quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Os compostos de fórmula geral I possuem propriedades farmacológicas muito interessantes. Inibem de um modo importante o crescimento da linha L 1210 no murganho, têm uma actividade sobre a diferenciação das células da linha HL 60 e, facto partieularmente interessante, para a sua utilização em terapêutica, não parecem levar à toxicidade hipervitamínica A, induzida pelo etretinato e cujos sintomas são a perda de peso rápida, a alcpeoia e a fragilização dos ossos.

Os compostos obtidos pelo processo de acordo com a presente invenção encontram portanto uma utilização em terapêutica tanto como agentes anti-tumorais, para o tratamento ou a profilaxia dos neoplasmas benignos ou malignos, assim como nas indicações clássicas dos retinóides, tais como as perturbações cutâneas (acne, psoríase) assim como as perturbações degenerativas e/ou inflamação das mucosas.

A presente invenção tem igualmente por objectivo um processo para a preparaçao de composiçoes farmacêuticas contendo os compostos de fórmula geral I, ou um dos seus sais de adição com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, só ou em associação com um ou vários excipientes ou veículos inertes, não tóxicos, aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

Entre as composições farmacêuticas obtidas de acordo com a presente invenção, pode-se citar mais particularmente as que convêm para a administração oral, parenteral, nasal, rectal, perlingual, ocular ou respiratória e particularmente os comprimidos simples ou drageificados, os comprimidos sublinguais, as saquetas, os pacotes, as gélulas, os trociscos, as tabletes, os supositórios, os cremes, pomadas, geles dérmicos, as preparações injectáveis ou bebíveis, os aerossois, as gotas oculares ou nasais, etc.

A posologia útil varia de acordo com a idade e o peso do paciente, a via de administração, a natureza da indicaçao terapêutica e dos tratamentos eventualmente associados e está compreendida entre 0,1 e 200 mg por dia.

Os exemplos seguintes ilustram a presente invenção sem contudo a limitarem de modo nenhum.

As preparações indicadas a seguir não permitem obter os compostos de acordo com a presente invenção. Permitem contudo a obtenção de intermediários úteis para a síntese dos compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção.

PREPARAÇAO 1: TRICARBONIL -/*η 1-4-(l-ETOXICARBONIL-2-METIL-5-OXO-l-PENTADIENO(E) ,3-(E)-ál/-EERRO

ESTÁDIO A: 4,4-DIMETOXI-3-METIL-2-BUTENOATO DE

ETILO

Adiciona-se uma mistura de 50 mmoles de 1,1-dimetoxi-acetona e de 60 mmoles de 2-(dietoxi-fosforil)-acetato de etilo no decurso de uma hora a uma suspensão de 125 mmoles de carbonato de potássio em lOml de água agitando energicamente e mantendo a temperatura entre 20° e 30°C. Uma vez terminada a adição, mantém-se a agitação durante 24 horas à temperatura ambiente, elimina-se depois o composto insolúvel mediante filtração e lava-se com éter dietílico. Separa-se a fase orgânica e lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio até à neutralidade. Após secagem e evaporação do dissolvente, purifica-se o composto mediante destilação sob vazio para se obter uma mistura de isómeros (E + Z) sob a forma de um óleo.

-» ±3 ESTÁDIO B: 3-METIIr-4-0X0-2-BUTEN0(E)AT0 DE ETILO

Coloca-se 50 mmoles de 4,4-dimetoxi-3-metil-2-butenoato de etilo (Ε + Z) em um meio acético tamponado (3g de acetato de sódio, l,5nil de água, JOml de ácido acético). Aquece-se o meio reaccional a 100°C durante 5 horas e elimina-se depois os dissolventes sob vazio. Retoma-se o resíduo com água, adiciona-se lOOml de éter dietílico, separa-se a fase orgânica e lava-se com lOOml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem e evaporação dos dissolventes, assegura-se a purificação mediante destilação sob vazio para se obter o estereoisómero E.

Rendimento: 85# P.E = 44—46°C

ESTÁDIO 0: 3-METIL-6-0X0-2-HEXADIEN0(E),4(E)AT0

DE ETILO:

Sob agitação vigorosa e atmosfera de azoto adiciona-se uma solução de 50 mmoles de 5^-nietil-4—oxo-2-butenoato(E) de etilo em 25ml de benzeno no decurso de dez minutos a uma suspensão benzénica (lOOml) de 50 mmoles de formilmetilenotrifenilfosforano, mantendo-se a temperatura a cerca de 0°C. Após retorno à temperatura ambiente, aquece-se o meio reaccional a refluxo durante 6 horas. Após arrefecimento despeja-se o meio reaccional sobre uma mistura de água e éter etílico, separa-se depois a fase orgânica e seca-se. A evaporação dos dissolventes é seguida por uma cromatografia em coluna de gel de sílica (Si0₂ :70 - 250 malhas, eluente: cloreto de metileno) para se obter um óleo (mistura de isómeros) a partir do qual se separa,

mediante cristalização fraccionada, o isómero (E,E).

Rendimento : 65%

ESTÁDIO D: TRICARBONIL/*/, l-4(ET0XI-l-CARB0NII^2-METIL-5-OXO-l-PENTADIENO(E),3(E)il J-EERRO

Eliminam-se os gases de uma solução de 10 mmoles de

3-metil-6-oxo-2-hexadieno(E),4(E)ato de etilo em 75 ml de tolueno com uma corrente de azoto durante 30 minutos antes da adição de 34-ml de (21 mmoles) de pentacarbonilferro e irradia-se depois. Realiza-se a fotólise, em uma célula de pirex com arrefecimento por circulação de água, com uma lâmpada Philips HPK 125W durante 18 horas a uma temperatura próxima de 35°6.

Após evaporação do dissolvente, purifica-se o resíduo mediante cromatografia sobre coluna de gel de sílica (S1O2: 70 - 23 malhas, eluente: cloreto de metileno) para se obter um óleo amarelo.(Rendimento: 85%). Obtém-se do mesmo modo os Tricarbonil / η l-4( alcoxi-l-carbonil-2-metil-5-oxo-l-pentadieno(E) , 3(E)il J-ferro utilizando o 2-^ãietoxi-fosforil)-acetato de alquilo apropriado.

PREPARAÇÃO 2: 4-DIET0XIP0SP0RIL-3-METIL-2-BUTEN0(E)

ATO DE ETILO(E)

ESTÁDIO A: 4-HIDR0XI-3-METII^2-BUTEN0(E)ATO DE

ETILO

Sob agitação e a uma temperatura inferior a 20°C, reduz-se 0,125 mmole de 3-metil-4—oxo-buteno(E)ato de etilo obtido

-/14 no estádio B, preparação 1, dissolvidos em lOOml de etanol, com uma solução hidro-alcoólica de 4,72g (125 mmoles) de borohidreto de sódio. Mantém-se a agitação durante 1 hora depois de terminada a adição, filtra-se depois o meio reaccional e lava-se o composto insolúvel com éter dietílico. Após eliminação dos dissolventes, retoma-se o resíduo com água e extrai-se com JxlOOml de éter dietílico. Após secagem e evaporação dos dissolventes, purifica-se o óleo mediante passagem sobre coluna de gel de sílica (eluente: diclorometano, SiOg: 70 - 230 malhas).

Rendimento: 76$ óleo

ESTÁDIO B: 4-BR0M0-3-METIL-2-BUTEN0(E)AT0 DE ETILO(E)

Ao abrigo da humidade, sob agitaçao e a frio (0°-5°C), adiciona-se, gota a gota (10 minutos), 10,5g (59 mmoles) de tribrometo de fósforo a uma solução etérea (75ml) de 100 mmoles de 4-hidroxi-3-nietil-2-buteno(E)ato de etilo obtido anteriormente. Depois de um tempo de contacto de 1 hora e 30 minutos, despeja-se o meio reaccional sobre água. Separa-se e lava-se a fase orgânica com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio até à neutralidade. Após secagem e evaporação do dissolvente, submete-se o resíduo a uma cromatografia em coluna de gel de sílica (eluente: diclorometano: SiC>2: 70 - 230 malhas).

Rendimento: 91$ óleo

ESTÁDIO 0: 4-DIET0XIF0SF0RIL-3-METIL-2-BUTEN0(E)AT0

DE ETILO

Ao abrigo da humidade,aquece-se a 130 -140°C 50 mmoles de 4—bromo-3-metil-2-buteno(S)ato de etilo. Uma vez terminado o aquecimento,adiciona-se, gota a gota, 50 mmoles de trietilfosfito de maneira a manter a temperatura a cerca de 130°C; elimina-se o bromoetano à medida que se vai formando. Uma vez terminada a adição, completa-se a reacçao mediante aquecimento durante 30 minutos a 15O°-16O°C. Uma destilação sob vazio permite a obtenção do composto pretendido.

Rendimento: 94# P.E ₂: 150 - 152°C

Obtêm-se os dietoxi-4-fosforil-3-metil-2-buteno(E)atos de alquilo de um modo idêntico mas utilizando, no estádio A, o 3-metil-4-oxo-buteno(E)ato de alquilo correspondente ao composto pretendido.

EXEMPLO 1: 7-(6,8-DIMET0XI-2H-CR0MENIL-3)-3-METIIr-2,4,6-OCTATRIENOATO DE ETILO (Ε,Ε,Ε).

ESTÁDIO A: 6,8-DIMETIL-3-ACETIL-2H-CR0MEN0

A uma suspensão de 0,14g (l mmole) de carbonato de potássio em 50ml de 2-butanona adiciona-se à temperatura ambiente l,50g (10 mmoles) de aldeído-2-hidroxi-3»5-â.imetil-benzóico assim como 0,66g (10 mmoles) de 3-oxo-l-buteno. Leva-se a refluxo sob agitação e mantém-se a esta temperatura durante 90 minutos. Evapora-se o meio reaccional em banho-maria sob vazio, retoma-se o resíduo com lOOml de água e extrai-se com 3 vezes 75ml de éter dietílico. Reúne-se as fases orgânicas, lavam-se até à neutralidade com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e evapora-se r ló -

em banho-maria sob vazio e submete-se a uma cromatografia em coluna de sílica (70 - 250 malhas) eluindo com diclorometano.

Rendimento; 81%

ESTÁDIO B: 6,8-DIMETIL-5-(l-HIDR0XI-ETIL)-2H-CROMENO

Dissolve-se 2,02g (10 mmoles) de 6,8-dimetil-5-acetil-2H-cromeno obtido no estádio anterior em 50ml de etanol. Adiciona-se, de uma só vez, sob agitação magnética, uma solução de O,58g (10 mmoles) de borohidreto de sódio em 5ml de uma solução aquosa de hidróxido de sódio. Mantém-se a agitação durante 2 horas e evapora-se depois a mistura dissolvente. Retoma-se o resíduo com 50ml de água e extrai-se com 5 vezes 50ml de éter dietílico. Lava-se a solução etérea com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio até à neutralidade das águas de lavagem, seca-se e evapora-se a fase orgânica.

Rendimento: 86%

ESTÁDIO C: BROMETO DE l-(6,8-DIMETIL-2H-5-CR0MENIL)-1-ETIL _/-TRIFENILF0SFÓNI0

Coloca-se sob atmosfera de azoto e à temperatura ambiente 2,04-g (10 mmoles) de 6,8-dimetil-5-(l-hidroxi-etil)-2H-cromeno obtidos no estádio anterior e 5,9-5g (10 mmoles) de bromohidrato de trifenilfosfónio em 80ml de etanol. Agita-se durante 96 horas. Elimina-se o resíduo obtido sobre coluna de gel de sílica (70 - 250 malhas) utilizando como dissolvente de eluição a mistura de cloreto de metileno e etanol a 95/5 (v/v) e cristaliza-se

em benzeno.

Rendimento: 68%

Ponto de fusão: 164 ⁰ C

ESTÁDIO D: 7-(6,8-DIMETIL-2H-CR0MENIIr-3)-3-METIL-2,4,6-OCTATRIENOATO DE ETILO-(E,E,E).

A uma suspensão de 5,29g (10 mmoles) de brometo de £ l-(6,8-dimetil-2H-cromenil-3)-l-etil ./-trifenilfosfónio em 50ml de tetrahidrofurano, adiciona-se, no decurso de 10 minutos, sob agitação, à temperatura ambiente e sob atmosfera inerte, 70ml de uma solução de n-butil-lítio em hexano (l,6M). Mantém-se a agitaçao durante 15 minutos e arrefece-se depois até uma temperatura compreendida entre -15°C e -20°C. Adiciona-se 5,06g (10 mmoles) de tricarbonil-/”η 1-4-( 1-etoxicarbonil-2-metil-5-oxo-(lE, 3E)-pentadienil J-£erro, obtido na preparação 1, de uma sé vez. Mantém-se o meio reaccional à temperatura ambiente sob agitação durante 18 horas. Despeja-se em 75ml de égua e extrai-se três vezes com lOOml de éter dietílico de cada vez. Reúnem-se as fases orgânicas e lavam-se até à neutralidade com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e evapora-se o éter dietílico. Purifica-se mediante passagem em cromatografia de gel de sílica.

Coloca-se então o composto obtido em contaco com ll,15g de dihidrato de trimetilamina-N-óxido em 50ml de cloreto de metileno. Aquece-se a refluxo durante 5 horas. Arrefece-se, despeja-se em lOOml de água e extrai-se com três vezes 75ml de diclorometano de cada vez. Reúne-se as fases orgânicas, seca-se

- /18

Μsobre sulfato de sódio e evapora-se o dissolvente. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia sobre gel de sílica (70 - 230 Malhas) e recristaliza-se o composto obtido em éter diisopropílico.

Rendimento: 20%

Ponto de fusão: 122°C

Análise elementar:

Calculada: C: 78,07

Encontrada: C: 77,41

H: 7,74 H: 8,14

Caracteristicas espectrais:

Infravermelho

Absorção a 1700, 1610, 1160 e 960 cm'

Ressonância magnética nuclear (60 MHz):

Dissolvente CDC1-, £ = 1,30 ppm ; tripleto 3H CH^ éster J = 7Hz ó= 2,00 a 2,45 ppm ; 4 singuletos 4x3H 4CH^ (cromeno + + cadeia) b- 4,25 ppm ; quadrupleto 2H CH2 éster J = 7Hz ó= 4,85 ppm ; 2H CH2 cromeno á= 5,75 a 7,45 ppm ; 7H ; multipleto ; aromáticos e etilénicos.

EXEMPLO 2: 7-(2H-CROMENIL-5)-3-METIL-2,4,6-OCTATRIENOATO DE ETILO

ESTÁDIO A: 3-ACETIIr-2H-CROMENO

A uma suspensão de 0,14g (1 mmole) de carbonato de potássio em 50ml de 2-butanona adiciona-se à temperatura ambiente l,22g (10 mmoles) de aldeído salicílico assim como 0,66g (10 mmoles) de 3-oxo-l-buteno. Aquece-se a refluxo sob agitação e mantém-se a esta temperatura durante 4 horas. Procede-se em seguida de acordo com a técnica descrita no exemplo 1, estádio A. Substitui-se a cromatografia final por uma recristalização em hexano.

Rendimento: 57%

Ponto de fusão: 58 - 60°C

ESTÁDIO B: 3-(l-HIDR0XI-ETIL)-2H-CR0MEN0

Procede-se de acordo com o descrito no exemplo 1, estádio B, mas substituindo o 6,8-dimetil-3-acetil-2H-cromeno pelo

3-acetil-2H-cromeno obtido no estádio anterior.

Rendimento: 95%

ESTÁDIO C: BROMETO DE /l-(2H-CR0MENIL-5)-ETILJ-TRIFENILFOSFONIO

Procede-se de acordo com o descrito no exemplo 1, estádio G, mas subst ituirdo o 6,8-dimetil-3-( 1-hidroxi-etil)-2H-cromeno pelo 3-(hidroxi-etil)-2H-cromeno.

Rendimento: 198%

ESTÁDIO D: 7-( 2H-CR0MENIIr-3)-3-METIIr-2 ,4,6-OCTATRIENOATO DE ETILO

Procede-se de acordo com o processo descrito no exemplo 1, estádio D.

Dissolvente de cristalização: diclorometano

Rendimento: 30%

EXEMPLO 3: 7-(6-CLORO-8-METIL-2H-CROMENIIr-3)-3-METIL-2,4,6-0CTATRI3OAT0 DE ETILO (Ε,Ε,Ε).

ESTÁDIO A: 6-CL0R0-8-METIIr-3-Á0ETIIr-2H-CR0MEN0

Procedendo de acordo com o processo descrito no exemplo 1, estádio A, mas substituindo o aldeído 2-hidroxi-3,5-dimetil-benzáico pelo aldeído 2-hidroxi-3-metil-5-cloro-benzáico, obtém-se o composto pretendido que se purifica mediante uma recristalização suplementar na mistura éter-isopropílico/éter de petróleo.

Ponto de fusão: 78° - 79°C

ESTÁDIO B: 3-(6-CLORO-8-METIIr-2H-CROMENIL-3)-2-BUTENOATO DE ETILO

Em um balão equipado com um agitador, uma ampola com bromo, um refrigerador e um termómetro, adiciona-se um volume de dimetoximetano suficiente para cobrir 0,108 at.g. de zinco. Adicionam-se então algumas gotas de bromoacetato de etilo puro. Inicia-se então a reacção com um ligeiro aquecimento (à chama

de um isqueiro). Em seguida mantém-se a reacção mediante adição, gota a gota, de uma solução de 0,1 mmole de bromoacetato de etilo em dimetoximetano anidro. Regula-se o caudal da adição de modo a que a temperatura não ultrapasse 40°C. Terminada a adição, agita-se o meio reaccional ainda durante 30 minutos à temperatura ambiente, adiciona-se, depois, 0,083 mmole de

3-acetil-cromeno em solução em THE anidro de uma sé vez. Agita-se o meio reaccional ainda durante 15 minutos e hidrolisa-se depois com uma solução saturada de cloreto de amónio. Após 3 extracções sucessivas com acetato de etilo, seca-se os extractos orgânicos sobre sulfato de magnésio e elimina-se os dissolventes. Dissolve-se 50 mmoles do composto pretendido em 50ml de benzeno e adiciona-se Imi de oxidoreto de fósforo. Aquecese a refluxo durante 1 hora e 30 minutos. Após arrefecimento, despeja-se o meio reaccional em lOOml de água. Decanta-se a fase benzénica e extrai-se a fase aquosa com 2 x 50ml de éter dietilico. Após lavagem dos extractos orgânicos com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio até à neutralidade, secagem e eliminação dos dissolventes, purifica-se o éster em coluna de gel de sílica (SiC^i 70-230 malhas; eluente diclorometano ) .

Características espectrais: R.M.N. 1H£ : ppm (s singuleto

2,45 (1H, ; t : tripleto ; q 1,30 (3H, t, J = (3H, s. e., CHj)

4,20 (2H, q, J =

s.e., — C), \

H

6,75, 6,90, 6,95 quadrupleto : s.e. : sinal esperado) 7Hz, OCH₂CH₅) ; 2,15 (3H, s, CH^ em 8);

7Hz, OCH₂CH₅) ; 4,95 (3H, s) ; 5,55 (3H, s.e., H^, H^ e H?)'

f ^2 ESTÁDIO C: 3-(6-0L0R0-8-METII^2H-CR0MENIL-3)-2-3UTEN0L

Ao abrigo da humidade, sob agitação e a frio (-15, adiciona-se uma solução de 20 mmoles do éster obtido no estádio B em 70ml de éter dietílico (ou de tetrahidrofuranona), gota a gota, a 20 mmoles de hidreto de lítio e alumínio, em suspensão no seio do mesmo dissolvente. Uma vez retomada a temperatura ambiente, mantém-se a agitação durante 2 horas e destrói-se depois o excesso de hidreto mediante adição prudente de acetato de etilo e depois água. Acidifica-se em seguida o meio reaccional (pH 2-3). Após secagem e evaporação dos dissolventes, submete-se o composto bruto directamente à oxidação.

Rendimento: 95#

Características espectrais:

Infravermelhos : 3400	V	OH
1610	V	0=0
1235	V	0=0

ESTÁDIO D: 3-(6-CLORO-S-METIL-2H-CROMENII-3)-2-BUTENAL(E).

A frio (-15, -10°C) e sob agitação, adiciona-se lentamente uma solução de 20 mmoles do álcool escolhido em 50ml de diclorometano a 400 mmoles de dióxido de manganês em suspensão em um mínimo de diclorometano. Terminada a adição, mantém-se a agitação sob arrefecimento durante 1 a 3 horas e filtra-se depois o meio. Após evaporação do dissolvente,purifica-se o composto obtido em coluna de gel de sílica (SiO₂: 70 - 230

- 2p -

malhas) eluindo com diclorometano

Rendimento: 20%

ESTÁDIO E: 7-(6-CLORO-8-METIL-2H-OROMENIL-3)-2,4,6-OCTATRIENOATO DE ETILO (Ε,Ε,Ε).

Sob atmosfera de azoto e à temperatura ambiente,a l,20g (4,54 mmoles) de dietoxi-4-fosforil-3-metil-2-buteno(E)ato de etilo obtido na preparação 2, dissolvido em lOml de THF anidro, adiciona-se 3ml de uma solução hexânica de n-butil-lítio (1,6M). Terminada a adição, mantém-se a agitação durante 15 minutos (coloração avermelhada do meio reaccional), adiciona-se depois uma solução de 0,91g (4,54 mmoles) de aldeído croménico obtido no estádio anterior em 5ml de THF; mantém-se a agitação durante 3 horas à temperatura ambiente. Despeja-se, em seguida, o meio reaccional sobre lOOml de água e extrai-se com 3 x 25ml de éter dietilico. Após secagem e evaporação dos dissolventes, submete-se o resíduo a uma cromatografia em coluna de gel de sílica (2 crornatografias sobre SÍO2 70-230 malhas; eluente: diclorometano e uma terceira sobre S1O2 230-400 malhas; eluente: diclorometano). Obtém-se deste modo 400mg de um composto sólido amarelo, recristalizado em cloreto de metileno.

Ponto de fusão: 107°0

EXEMPLO 4: 7-(2H-CROMENI3>3)-3-METIL-2,4,6-00TATRIENOATO DE ETILO

Procedendo de acordo com o processo descrito no exemplo

3, mas substituindo o aldeído 2-hidroxi-3-metil-5-cloro-benzóico

- 24 pelo aldeído salicilico, obtém-se o composto do título do exemplo 2.

No estádio C, o tempo de contacto será contudo levado a 48 horas.

Ponto de fusão: 107⁰C

EXEMPLOS 5 a 9

Substituindo no exemplo 1, estádio A * o aldeído 2-hidroxi-3,5-dimetil-benzóico pelo:

- aldeído 2-hidroxi-5-cloro-3-nietil-benzóico, obtém-se o 7-(6-cloro-8-metil-2H-cromenil-3)-5-nietil-2,4,6-octa-trienoato de etilo (Ε,Ε,Ε) (EXEMPLO 5)

- aldeído 2-hidroxi-5,6-dimetil-4-metoxi-benzoico, obtém-se o 7-(5,6-dimetil-7-metoxi-2H-cromenil-3)-3-metil-2,4,6—octatrienoato de etilo (Ε,Ε,Ε) (EXEMPLO 6) aldeído 2-hidroxi-4-metoxi-benzáico, obtém-se o

7-(7-metoxi-2H-cromenil-3)-3-metil-2,4,6-octatrienoato de etilo (Ε,Ε,Ε) (EXEMPLO 7)

- aldeído 2-hidroxi-5~nietoxi-benz6ico, obtém-se o

7-(6-metoxi-2H-cromenil-3)-3-nietil-2,4,6-octatrienoato de etilo (Ε,Ε,Ε) (EXEMPLO 8) aldeído 2-hidroxi-3,5-dicloro-benzóico, obtém-se o

7-(6,8-dicloro-2H-cromenil-3)-5-metil-2,4,6-octatrienosLto de etilo (Ε,Ε,Ε) (EXEMPLO 9)

Os compostos dos exemplos 5 a 9 podem igualmente ser preparados de acordo com o processo descrito no exemplo 3

ESTUDO FARMACOLÓGICO

EXEMPLO 10 : INIBIÇÃO DO CRESCIMENTO DA LINHAL 1210 crescimento desta linha leucémica de murganho é avaliado pela capacidade das células para incorporar a timidina tritiada. A taxa de incorporação mede-se 48 horas depois da introdução dos compostos a ensaiar no meio cultivado.

composto n2 1 possui neste ensaio uma dose inibidora de crescimento (ΙΟ^θ) de 25 pM enquanto a do etretinato é de 80 pM.

EXEMPLO 11 : ESTUDO DA TOXICIDADE SOBRE ÚMEROS DE FETOS DE RATOS COM 21 DIAS DE GESTAÇÃO.

A toxicidade dos retinóides pode ser avaliada sobre úmeros de fetos de ratos explantados in vitro de acordo com a técnica descrita por KISTLER (1985).

A actividade dos retinóides traduz-se por uma libertação de proteoglicanos da matriz óssea. Esta libertação é avaliada ao fim de 7 dias de cultura in vitro mediante doseamento da concentração de proteoglicanos no meio de acordo com o método descrito por WITHEMAN (1975).

Os compostos de acordo com a presente invenção revelam-se totalmente incapazes de estimular a libertação de proteoglicanos da matriz óssea dos úmeros de fetos de ratos com uma concentração de 100 p.M enquanto o etretinato permite uma libertação significativa destes proteoglicanos para uma dose de 40 pM.

EXEMPLO 12 : DETECÇÃO DE UMA TOXICIDADE DO TIPO

HIPERVITAMlNICO A IN VIVO.

Os efeitos secundários que limitam a utilização dos agentes retinóides em clínica humana traduzem-se pelo aparecimento de um síndroma de hipervitaminose A, o qual pode ser reproduzido experimentalmente no animal.

protocolo de tratamento escolhido é uma injecção quotidiana durante cinco dias, repetido duas vezes, espaçado de dez dias. Ê idêntico ao utilizado por BOLLAG e colab. (1981).

Enquanto o ácido retinóico e o etretinato levam a uma rápida perda de peso, ao aparecimento de uma alopecia e à fragilização dos ossos, manifestações da sua toxicidade, os compostos de acordo com a presente invenção revelaram-se desprovidos de toxicidade do tipo hipervitamínico A: nenhum sinal ponderai estatisticamente significativo, nenhuma fractura detectável mediante radiografia, nenhum início de alopecia foram assinalados a seguir ao tratamento com os compostos de acordo com a presente invenção.

-27REIVINDICAÇÕES

1.- Processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral

na qual

R^, Rg, Rg e R^, iguais ou diferentes, representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou de halogêneo ou um grupo alquilo inferior, alcenilo inferior, alcoxi inferior ou alceniloxi inferior, eventualmente subst tuídos por um ou mais átomos de halogêneo,

Rg representa um grupo carboxilo, alcoxi-(inferior)-carbonilo, alceniloxi(inferior)-carbonilo ou alceni loxi(inferior)-carbonilo, e dos seus isómeros, estereoisómeros e diastereoisómeros, assim como dos seus sais de adição com uma base aceitãvel sob o ponto de vista farmacêutico, quando o símbolo R^ representar um grupo carboxilo, caracterizado pelo facto de se condensar, mediante aquecimento a refluxo do dissolvente, um derivado de fórmula geral

na qual R^ , R^, R^ ^e R^ têm os significados definidos antes, com o 3-oxo-l-buteno de fórmula

CH.

(III) na presença de um agente alcalino preferencialmente escolhido entre os carbonatos alcalinos e alcalino-terrosos , ou as bases orgânicas, como por exemplo a trietilamina ou a piridina, ou uma mistura constituída por um carbonato alcalino ou alcalino-terroso e uma base orgânica no seio de um dissolvente polar preferencialmente escolhido entre os dissolventes cetónicos tais como a 2-butanona ou amídicos tais como a dimetilformamida, para se obter, apõs arrefecimento e eventual evaporação do meio reaccional, reto ma com água a que se adicionou eventualmente um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, extracção com um dissolvente orgânico apropriado tal como o éter dietílico, o clorofórmio ou o cloreto de metileno, lavagem da fase orgânica, evaporação do dissolvente e purificação do resíduo mediante cristalização ou destilação ou mediante cromatografia em coluna de sílica ou de alumina, um derivado de fórmula geral

na qual R^ , R₂, R₃ e R^ tém os significados definidos antes, que se submete a uma hidrogenação catalítica, apõs dissolução no seio de um dissolvente orgânico conveniente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifáticos inferiores, com vantagem na presença de um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, hidrogenação realizada de preferência com um hidreto misto de metal alcalino tal como o borohidreto de sódio, para se obter, apos extracção com um dissolvente orgânico conveniente tal como o eter dietílico, o diclorometano ou o clorofórmio, eventualmente precedida da evaporação do meio reaccional, lavagem seguida de evaporação da fase orgânica e purificação, um derivado de formula geral

na qual R^, Rg, Rg e R^ têm os significados definidos antes , que se faz reagir com um sal de trifenil-fosfónio no seio de um dissolvente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifaticos inferiores ã temperatura ambiente e sob agitação para se obter após evaporação do dissolvente e purificação mediante cromatografia sobre gel de sílica e cristalização em um dissolvente ou uma mistura de dissolventes apropriados, um derivado de fórmula geral

Claims

REIVINDICAÇÕES

Rg e R^ têm os significados definidos antes, que se faz reagir, no seio de um dissolvente apropriado preferencialmente sob atmosfera inerte e na presença de n-butil-lítio em hexano, com um aldeído diénico de estereoquímica bloqueada sob a forma de um complexo tricarbonil-ferro de fórmula geral

OHC

VII na qual R^ tem o significado definido antes, a uma temperatura preferencialmente compreendida entre -5°C e

-30°C, com vantagem, compreendida entre -15°C e -20°C, para se obter, após extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica, um complexo intermediário ι

-32que, após purificação mediante cromatografia, se submete, a refluxo do dissolvente orgânico escolhido para esta etapa, ã acção do N-õxido de trimetilamina, para se obter, após arrefecimento extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica e cromatografia de coluna, um composto de fórmula geral I, que se pode, eventualmente,

- ou quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar·com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus estereoisómeros de acordo com uma técnica de cristalização ou de cromatografia e depois, eventualmente, quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
2,- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se condensar, mediante aquecimento a refluxo do dissolvente, um derivado de fórmula geral

II na qual , R^ e R^ têm os significados definidos antes na fórmula geral I com o 3-oxo-l-buteno de fórmula ^CH4 na presença de um agente alcalino preferencialmente escolhido entre os carbonatos alcalinos e alcalino-terrosos, ou as bases orgânicas tais como por exemplo a trietilamina ou a piridina ou uma mistura constituída por um carbonato alcalino ou alcalinoterroso e uma base orgânica no seio de um dissolvente polar preferencialmente escolhido entre os dissolventes cetónicos tais como a 2-butanona ou amídicos tais como a dimetilformàmida, para se obter, após arrefecimento e eventual evaporação do meio reaccional , retoma com ãgua a que se adicionou eventualmente um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, extracção com um dissolvente orgânico apropriado tal como o éter dietílico, o clorofórmio ou o cloreto de metileno, lavagem da fase orgânica, evaporação do dissolvente e purificação do resíduo mediante cristalização, ou destilação, ou cromatografia em coluna de sílica ou de alumina, um derivado de fórmula geral na qual R^, , R^ e R^ têm os significados definidos antes na fórmula geral I, que se faz reagir com bromoacetato de etilo na presença de zinco, seguida de hidrólise extemporânea do meio reaccional, extracção com um dissolvente orgânico apropriado, preferencialmente escolhido entre acetato de etilo, cloreto de merileno, clorofórmio e éter dietílico, depois reacção com oxicloreto de fósforo no seio de um dissolvente orgânico apropriado, evaporação do meio reaccional e nova extracção com um dissolvente preferencialmente escolhido entre acetato de etilo, cloreto de metileno, clorofórmio e éter dietílico para se obter, após eventual cromatografia sobre gel de sílica, com um derivado de fórmula geral cooc₂h₅

VIII na qual R^, R₂, R^ e R^ têm os significados definidos antes na fórmula geral I que se faz reagir, a baixa temperatura, preferencialmente com-35preendida entre -50° e 0°C com vantagem compreendida entre -25° e 5°C, no seio de um dissolvente de preferência escolhido entre éter dietílico, éter diisopropílico e tetrahidrofurano, com hidreto de alumínio e lítio para se obter um derivado de fórmula geral na qual R^, , R^ θ têm os significados definidos antes na fórmula geral I, que se submete a uma oxidação com dióxido de manganês para se obter, após cromatografia sobre gel de sílica e cristalização eventual, um derivado de fórmula geral

CHO na qual Rj_ r ^2' ^3 ^€ ^4 antes na fórmula geral I, os significados definidos que se faz reagir com um derivado de fórmula geral (ZO) ₂0

R

XI na qual geral I

Rç. tem o significado definido antes na fórmula e Z representa um grupo alquilo inferior, ã temperatura ambiente, para se obter, após extracção com um dissolvente orgânico apropriado, evaporação e purificação mediante cromatografia em coluna de sílica, um composto de fórmula geral I, que se pode, eventuaimente, ou, quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.,

- ou separar nos seus estereoisómeros de acordo com uma técnica de cristalização ou de cromatografia e depois, eventualmente, guando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Lisboa, 31 de Julho de 1989 O Ag^-fe Oficial da Prcprbdade Ind'. '

RESUMO

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE NOVOS DERIVADOS TRIÉNICOS COM ESTRUTURA CROMÉNICA

Descreve-se um processo para a preparação de compostos de fórmula geral e dos seus isómeros, estereoisómeros ou diastereoisómeros, assim como dos seus sais de adição com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, quando o símbolo R$ representar um grupo carboxilo, caracterizado pelo facto de se condensar, mediante aquecimento a refluxo do dissolvente, um derivado de fórmula geral

4 « · (II)

R« Η com ο 3-oxo-l-buteno de fórmula (III) na presença de um agente alcalino preferencialmente escolhido entre os carbonatos alcalinos e alcalino-terrosos, ou as bases orgânicas como por exemplo a trietilamina ou a piridina ou uma mistura constituída por um carbonato alcalino ou alcalino-terroso e uma base orgânica no seio de um dissolvente polar preferencialmente escolhido entre os dissolventes cetónicos tais como a 2-butanona ou amídicos tais como a dimetilformamida, para se obter, após arrefecimento e eventual evaporação do meio reaccional, retoma com ãgua a que se adicionou eventualmente um agente alcalino tal como o hidróxido de sódio, extracção com um dissolvente orgânico apropriado tal como o éter dietilico, o clorofórmio ou o cloreto de metileno, lavagem da fase orgânica, evaporação do dissolvente e purificação do resíduo mediante cristalização ou destilação mediante cromatografia em coluna de sílica ou de alumina, um derivado de fórmula geral (IV) que se submete a uma hidrogenação catalítica, após dissolução no seio de um dissolvente orgânico conveniente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifáticos inferiores, com vantagem na presença de um agente alcalino tal como o hidroxido de sódio, hidrogenação realizada de preferência com o borohidreto de sódio para se obter, após extracção com um dissolvente orgânico conveniente tal como o êter dietílico, o diclorometano ou o clorofórmio, eventualmente precedida da evaporação do meio reaccional, lavagem seguida de evaporação da fase orgânica e purificação, um derivado de fórmula geral (V) que se faz reagir com um sal de trifenil-fosfónio no seio de um dissolvente preferencialmente escolhido entre os álcoois alifãticos inferiores à temperatura ambiente e sob agitação para se obter apos evaporação do dissolvente e purificação mediante cromatografia sobre gel de sílica, e cristalização em um dissolvente ou uma mistura de dissolventes apropriados, que se faz reagir, no seio de um dissolvente apropriado, preferencialmente sob atmosfera inerte e na presença de n-butil-lítio em hexano, com um aldeído dienico de estereoquímica bloqueada sob a forma de um complexo de tricarbonil-ferro de,formula geral VII

OHC (VII) a uma temperatura preferenciãlmente compreendida entre -5°C e -30°C com vantagem compreendida entre -15°C e -20°C, para se obter, apos extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica, um complexo intermediário que, após purificação mediante cromatografia, se submete, a refluxo do dis- solvente orgânico escolhido para esta etapa, â acção do N-óxido de trimetilamina, para se obter, apos arrefecimento, extracção com um dissolvente orgânico apropriado, lavagem e evaporação da fase orgânica e cromatografia de coluna, um composto de fórmula geral I, que se pode, eventualmente,

- ou, quando o símbolo R^ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico ,

- ou separar nos seus estereoisómeros de acordo com uma técnica de cristalização ou de cromatografia e depois, eventualmente, quando o símbolo R$ representa um grupo carboxilo, salificar com uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico .

Aplicação no domínio farmacêutico como medicamentos.