PT87427B

PT87427B - Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas combinadas contendo artemisinina e/ou derivados desta e compostos seleccionados do grupo cloroquina, 10-0-metil-floxacrina, quinina, mefloquina, amodiaquina, pirimetamina, sulfadoxina e piramiquina

Info

Publication number: PT87427B
Application number: PT87427A
Authority: PT
Inventors: Bansi Lal; Bindumadhavan Venugopalan; Dipak Kumar Chatterjee; Noel John De Souza; Richard Helmut Rupp
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1987-05-08
Filing date: 1988-05-06
Publication date: 1992-09-30
Also published as: PT87427A; IL86302A0; EP0290959A3; ZA883209B; HUT47846A; HU200688B; DK249688A; DE3715378A1; AU614515B2; AU1567588A; JPS6452714A; EP0290959A2; DK249688D0; IN166154B; KR880013558A

Description

Memória Descritiva

A presente invenção refere-se a uma combinação dos terapêuticos anti-malária artemisinina e seus derivados, por exemplo dihidro-artemisinina, arteéter, arteméter ou artesunato, com um ou roais dos compostos anti-malária cloroquina, 10-0-metilfloxacrina, quinina,, mefloquina, amodiaquina, pirimetamina, sulfaaoxina, primaquina e seus sais farmacologicamente utilizáveis para potenciação da sua eficácia, bem como de métodos de dosagem destas combinações de princípios activos.

As designações genéricas aqui utilizadas, bem como outras partes do texto, foram retiradas do Tropical Diseases Research, Seventh Programme Report, Capítulo 2; Malaria, UNDP/WORLD BANK/WHO, editado pela OMS em 1985í a 10-0-metilfloxacrina é um derivado do composto anti-malária floxacrina, e foi descrita na Patente alemã P 36 24 778.2.

A malária resistente aos medicamentos constitui um grave problema para a clínica e para a saude pública. 0 parasita da malária, Plasmodium falciparum, desenvolveu uma capacidade multifacetada de escapar à acção de um medicamento, quer através de mecanismos genéticos, quer através de métodos não genéticos (adaptativos). Foi comprovado que a resistência do parasita da malária à cloroquina é uma propriedade estável, e determinada geneticamente (Warhurst, D.C. Pfearmaceut* J. Nov. 23 (1985) 689-692). A expansão do Plasmodium falciparum, que é resistente à cloroquina e a outros medicamentoe anti-malária, coloca o programa de saúde pública nos países tropicais e subtropicais perante um grave problema (Suphat et al., Trans. R. Soo. Trop Med. and Hyg. (1983) 73 (3). 338-340).

A utilização de combinações de diferentes medicamentos anti-malária é conhecida na quimio-terapeutica da malária. Assim foi utilizada na clínica por exemplo uma combinação de amodiaquina e tetraciclina. e uma combinação de pirimetamina e sulfaxodina, que é conhecida sob a designação Fansidar (Suphat et al., idem). Recentemente foram encetados ensaios clínicos com uma outra combinação de medicamentos anti-malária, o Fansimef (mefloquina, pirimetamina e sulfadoxina) (OMS, idem),

Num ensaio animal Peters (Peters et al. Ann. Trop. Med. and Parasit, 71 (1977). 407-418) referiu que o desenvolvimento de resistência pode ser retardado se for administrado um medicamento anti-malária em combinação com determinados outros medicamentos anti-malária. Peters

(W. Peters, Buli. V. H. 0. 51 (1974). 379-383 e W. Peters, Handbook of Experimented Pharmacology 68/11 (1984) Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, Editor: W. Peters e W. H. G. Richards) salientou também a aplicação de combinações adequadas de medicamentos para o tratamento da malária no ser humano, que não sá podem retardar o aparecimento de resistências, mas também melhorar o êxito terapêutico. Assim, foi por exemplo comprovado que uma combinação tripla de mefloquina, sulfadoxina e pirimetamina retardava o desenvolvimento de resistência no Plasmodium berghei (Merkli et al., Ann. Trop. Med. and Parasit. (1980). 4(1). 1-9).

A artemisinina e seus derivados são igualmente já conhecidos como medicamentos anti-malária. A artemisinina foi isolada da Artemisina annual L·., mais tarde sintetizada e utilizada no tratamento da malária provocada pelo P. falciparum (Η. P. Koch, Pharm. Int. (1981), 184-185? L. J. Bruce-Chwatt, British Med, J. 284 (1982), 767-768). Revelou-se igualmente eficaz contra estirpes de P. falciparum resistentes à cloroquinina no ser humano. A dihidro-artemisinina, artáeter, artemeter e artesunato por exemplo são derivados semi-sintéticos da artemisinina, cuja eficácia contra a malária foi descrita em diversos trabalhos (W. H. 0. Report of the Scientific Workign Group on the Chemo therapy of Malária, PDR/Chemal 3^rd Review, 85.3, Geneva,

3-5 de Junho de 1985, e referências bibliográficas aí citadas) .

A artemisinina e seus derivados são representados pela fórmula geral I

em que R e RI representam em conjunto um átomo de oxigénio (artemisinina), ou R representa respectivamente um átomo de hidrogénio e RI -OH (dihidro-artemisinina), -O-alquilo com 01-06, -0-alcenilo com Cl-06, 0-alcanoilo com 01-C6, ácido O-alcanoilo-carboxílico tendo o radical alcanoilo C1-C6, -0-ciclohexilcarbonilo, -0-benzoilo ou -0-naftoilo, bem como os respectivos sais fisiologicamente toleráveis.

compostos da fórmula I com R = H e RI = -O-CHj é designado arteméter, com R = H e RI = -0-0₂H₅ arteéter, com R = H e RI = -0-C0CH₂CH₂C0₂Na artesunato.

Surprendentemente, descobriu-se agora que as combinações de artemisinina e/ou dos seus derivados acima referidos com os conhecidos medicamentos anti-malária cloroquina, 10-0-metilfoxacrina, quinina, mefloquina, amodiaquina, pirimetamina, sulfadoxina, primaquina e os seus sais farmacologicamente utilizáveis, possuem uma acção sinergética.

A importância clínica da presente composição melhorada para tratamento da malária reflecte-se nos respectivos ensaios animais. Nos exemplos específicos que se seguem encontram-se protocolos de ensaio típicos, nos quais foi estudada a capacidade das composições a testar, de serem eficazes como medicamentos anti-malária mesmo con,tra estirpes de P. berghei resistentes aos medicamentos.

A presente combinação de medicamentos anti-malária, abaixo descrita em mais pormenor, possibilita o desejado tratamento da malária, tanto no que se refere à profilaxia como à terapêutica, e impede ou retarda o desenvolvimento de resistência.

A artemisinina ou um dos seus derivados acima citados foram administrados aos mamíferos em geral em concentrações entre 0,125-10 mg/kg x 5 dias, diàriamente numa dose única. 0 outro medicamento anti-malária já anteriormente referido nesta especificação (i.e., cloroquina,

10-0-metilfloxacrina, quinina, pirimetamina, mefloquina, amodiaquina, sulfadoxina e primaquina) pode ser administrado em separado; neste caso, estes últimos são administrados numa dose situada dentro dos limites (na maior parte dos casos inferiores) posológicos e segundo os esquemas terapêuticos (frequência, forma de administração e composições), tais como são especificados para a sua utilização nas publicações anteriores, por exemplo nas fontes bibliográficas acima citadas ou noutras fontes bibliográficas referidas.

De preferência, e mais comodamente, a artemisinina ou um dos seus derivados e os outros medicamentos anti-malária da presente invenção são administrados numa única composição farmacêutica combinada. Esta pode ser uma formulação que seja adequada para administração parenteral, mas prefere-se no entanto uma formulação adequada para administração oral. A concentração de cada medicamento na formulação combinada proposta corresponde à concentração da dos< total diária de cada medicamento quando este é administrado por si só. Os medicamentos combinados podem ser administrados em doses únicas ou individuais.

Na forma de administração preferida por via oral a dose de artemisinina para um doente adulto médio situar-se-é em geral entre 0,2-2 g, em combinação com 200-4θ0 mg de cloroquina ou com 200-400 mg de 10-0-metilfloxacrina como dose de ataque inicial; a segunda dose pode ser

administrada 6 horas depois, sendo de 0,2-2 g de artemisinina em combinação com 100-200 mg de cloroquina ou com 100-200 mg de 10-0-metilfloxacrina. A dose administrada na segundo toma pode ser mantida durante mais 3 dias, sendo administrada diariamente uma dose única.

As combinações de artemisinina ou de um dos seus derivados com os outros medicamentos anti-malária do segundo grupo podem ser administradas de forma idêntica. Em geral pode administrar-se a um doente adulto uma combinação de dihidro-artemisinina (entre 0,2-1,5 g) com cloroquina (entre 200-400 mg) ou com 10-0-metilfloxacrina (entre 200-400 mg), sendo administrada 6 horas mais tarde uma segunda dose de 0,2-1,5 g de dihidro-artemisinina em combinação com 100-200 mg de cloroquina ou com 100-200 mg de 10-0-metilfloxacrina. A quantidade administrada como segunda dose pode em geral ser administrada durante mais 3 dias, diàriamente sob a forma de dose única.

A um doente adulto pode também adminis trar-se uma combinação de arteéter (entre 0,2-1,5 g) em combinação com cloroquina ou com 10-0-metilfloxacrina (entre 200-400 mg). A segunda dose pode ser administrada 6 horas depois da primeira dose e pode ser constituida por 0,2-1,5 g de arteéter mais 100-200 mg de cloroquina ou de 10-0-metil floxacrina. A dose administrada como segunda toma pode em geral ser dada durante mais 3 dias, diàriamente sob a forma de dose única.

Os compostos combinados são administra dos por si só numa outra combinação com excipientes farmalogicamente toleráveis, tanto por via oral como parenteral. Em caso de administração oral fazem parte dos excipientes farmacêuticos adequados os diluentes ou adjuvantes inertes utilizados para a preparação de comprimidos, pós, cápsulas e outros. Estas composições farmacêuticas pode, se desejado, conter outros componentes tais como aromatizantes, agentes

aglomerantes, agentes correctores ou outros. São utilizados por exemplo comprimidos gue contém diferentes agentes correctores tais como citrato de sódio, em conjunto com diferentes compostos solúveis tais como amido, alginatos e determinados silicatos complexos e aglomerantes como polivinilpirrolidona, sacarose, gelatina e goma arábica. Fara a preparação de comprimidos são também freguenteraente indicatos agentes lubrificantes tais como estearato de magnésio, laurilsulfato de sódio e talco. Composições sólidas deste tipo são também utilizadas como enchimento de cápsulas de gelatina mole e duras. Assim fazem-se parte dos materiais preferidos a lactose e polietileno-glicóis com elevado peso molecular.

A presente invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos. D_eve no entanto salientar-se gue a presen te invenção não se limita aos pormenores específicos dos exemplos.

EXEMPLO 1

Efeito de potenciação, isto é, efeito terapêutico sinérgico ou aditivo de doses subcurativas de arteéter em combinação com doses subcurativas de guinino contra a infecção por estirpes de Plasmodium berghei (NS) resistentes à cloroguina no ratinho suiço infectado.

A avaliação das actividades esguizouticidas no sangue realizou-se seguindo a maneira de proceder indicada na presente memória descritiva utilizando a estirpe resistente a cloroguina de P. berghei (173) (A. N. Chawira et al. 1987, Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 81:554-558).

A metodologia seguida no presente estudo foi adoptada a partir do ensaio de supressão de 4 dias (ref. W. Peters? 1987, Chemotherapy and Drug Resistance im Kalaria, Vol. 1, págs. 111). Os dados esperimentais foram analizados pelo Método da Tábua de Xadrez (Chess

Board Method) sob a forma de um isobolograma (ref.; Λ. N.

Chawira e D. C. Warhurst? 1987, J. Trop. Med, Hyg. 90j 1-8).

Determinarsm-se os valores c!e DE_C_ e DE„^ usando um método oO 90 de log-probit.

Metodologia Geral

Hospedeiros ratinhos suiços (20-22 g)

Sexo

Parasita

Via de infecção masculino i P. berghei (NS) (resistente a cloroguina) • intravenosa

Via de administração : per os do fármaco

Preparação, do fármaço

Artéter í A^icionaram-se algumas gotas de óleo de Kardi e de Tween 80 a arteéter para fazer uma pasta, seguidas por solução de tiloze (carboximetil-celulose) a 0,5%. Preparou-se uma suspensão homogénea usando um homogeneizador de tecidos em tubos de vidro revestido com Teflon.

Sulfato de guininat

Preparou-se uma solução em tilose a 0, 5% usando um homogeneizador de tecidos.

Cloridrato de mefloguina : Preparou-se uma. solução em tilose a 0, 5/b usando um homogeneizador de tecidos.

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Fez-se engulir o arteéter usando tubo que penetra até ao estômago (0,5 ml), seguido ou por quinina (0,5 ml) ou por mefloguina (0,5 ml) conforme se queira.

farmaco foi administrado da seguinte maneira: (+ 2H, 24 H, 48 H, 72 H) em cada dia numa dose duran te 4 dias.

Preparação de. lâminas oara observação microscópica do sangue

Controlo - Ratos infectados não tratados

Preparam-se lâminas para, observação microscópica de sangue de ratos individuais e coraram-se com Giemsa no dia D + 4. As lâminas foram examinadas com lentes de imersão em óleo e registou-se a parasitemia em 15 campos de observação escolhidos aleatoriamente. Determinou-se a média de eritrocitos infectados e não infectados para cada animal. Finalmente, determinou-se a parasitemia média do grupo completo e considerou-se como 100% para comparação com o grupo tratado.

Parasitemia do grupo tratado

Para determinar a parasitemia, examinaram-se pelo menos 5000 a 7500 eritrocitos aleatoriamente. Em certos casos, em que a parasitemia era extremamente pequena. examinaram-se 10 000 a 15 000 eritrocitos.

Resultados

Cnmbinacão de arteéter e quinina

Na Tabela 1, apressnta-se o resultado da terapia de combinação acima indicada.

Os valores de ^e de de artééter foram calculados estrapolando as doses do composto na •'waiiiZlVr.

mesma experiência (Tabela 2). Os dados experimentais deste estudo foram transformados no isobolograma representado na Figura 1.

Notas isobolograma representado na Figura 1 mostra claramente que o arteéter em combinação com quinino proporciona um forte efeito de potenciação.

A estirpe MS tem algumas características específicas biológicas únicas parecendo-se com P. falciparum e tem uma resistência moderada a cloroguina.

de arteeter e quinina contra a estirpe NS de I^;. berghei em ratinhos do sexo

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Tabela II

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Figura 1

Construção do isobolograma usando a técnica de diluição 1:2

Valor de de quinina

110 mg/kg, p.o. - 1.0 unidades isobolar

unidade isobolar isobolograma representado indica claramente gue o arteéter em combinação com quinina proporciona um intenso efeito de potenciação.

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Figura 2

Construção do isobolograma usando a técnica de diluição Is 2

Valor de

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3,6 mg/kg, p.o. = 1,0 unidade isobolar

de arteéter 4,2 mg/kg, p.o. - 1,0 unidades isobolar

O isobolograma acima representado mostra claramente que o arteéter em combinação com mefloquina proporciona um efeito de potenciação.

EXEMPLO COMPARATIVO 1

Efeitos terapêuticos sinergéticos de doses subcurativos de artemisinina, de di-hidroartemisinina e arteéter em combinação com doses subcurativas de cloroquina, 10-0-metilfloxacrina, mefloquina ou pirimetamina contra a infecção por Plasmodium berghei sensível a cloroquina em ratinhos suiços.

Metodologia da avaliação biológica

Para fazer a avaliação biológica, utilizou-se a avaliação do efeito esguizoutocida no sangue do teste dos 28 dias descrito por Raether e Prink (Am.

Trop. Med. and Parasit., 73 (1979), 503-526).

Ratinhos: Todos os enaaios experimentais foram realizados com ratinhos do sexo masculino e do sexo feminino criados aleatoriamente que foram fornecidos pela organização de criação de Hoechst índia, Ltd., de Mulemd, Bombaim.

Os animais estavam isentos de Ssperythrozon cocoides. Os animais foram alimentados com alimentos secos e receberam água à vontade; foram mantidos e a uma temperatura ambiente durante dentro do intervalo de 22-25°C.

Parasitas? A Escola de Medicina de Higiene Tropical de Londres (London School of Hygiene and Tropical Medicines) forneceu a estirpe de Plasmodium berghei K-173 sensível a medicameatos e a estirpe P. berghei (NS) moderadameate resistente à cloroquina. Depois de terem sido inoculadas intraperitonalmente, as estirpes provocaram uma infecção mortal no caso de eriterócitos atacados com 1x10 parasitas por ratinho.

Administracão_das, compostost. Os compostos foram administrados por via oral ou subcutânea de acordo com os métodos descritos por Raether e Pink (2c.). A artemisinina, a &

di-hidro-artemisinina e o arteéter foram homogeneizados em óleo de milho duplamente refinado e utilizados sob a forma de suspensão para a inoculação subcutânea em ratinhos. Os medicamentos foram administrados durante 5 dias. A primeira administração realizou-se ao fim de 2 horas depois da infecção (D +0), seguida de administração nos dias D+l,

D+2, D+3 e D+4 (respectivamente# 1 dia de intervalo).

Observações dos...ratinhos-.bratadosi.

A partir do dia D+4 preparam-se lamelas com amostras de sangue colhidas em intervalos de tempo diferentes até ao dia D+28. As amostras de sangue foram colhidas na extremidade posterior da cauda e foram coradas com solução de Giensa. Os ratinhos no dia D+28 estavam isentos de P. berghei e foram considerados como completamente curados. Por cada dosagem, foram ensaiados pelo menos 12 ratinhos.

efeito terapêutico sinergético de doses subcutativas de artemisinina, de di-hidro-artesiminina e de arte-éter, respectivamente em combinação com doses subcurativas de cloroguina, mefloquina, pirimetamina em 10-0-metil-floxacrina sobre os ratinhos infectados com P. berghei sensível à cloroguina é referida na Tabela III no caso da administração dos compostos por via oral e na Tabela IV no caso da administração dos compostos por via subcutânea. Gomo estes valores mostram# doses subcurativas de artemisinina# de di-hidro-arteminina e de arteéter em combinação com doses subcurativas de cloroguina de 10-0-metil-floxacrina ou de pirimetamina curam completamente ratinhos infectados com P. berghei sensível a cloroguina# se os compostos forem administrados ou por via oral ou por via subcutânea

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EXEMPLO COMPARATIVO 2

Efeito sinergético de doses subcurativas de artemisinina ou de derivados de artemisinina em combinação com doses subcurativas de cloroguina, 10-0-metilfloxacrina ou pirimetamina contra estirpes de Plasmodium bergbei resistentes à cloroguina (NS) em ratinhos suíços infectados.

A avaliação dos efeitos esquizonticidas no sangue faz-se de acordo com o processo descrito no Exemplo Comparativo 1, utilizando a estirpe de P. berghei resistente à cloroguina.

efeito terapêutico sinergético de doses subcurativas de artemisinina, di-hidro-artemisinina ou de arteéter em combinação com doses subaurativas de cloroquina ou de 10-0-metilfloxacrina ou de pirimetamina contra a infecção de ratinhos suíços por Piasmidium berghei (NS) é apresentada na Tabela V, no caso da administração por via oral e subcutânea. Tal como estes dados demonstram, os ratinhos infectados com Plasmitium berghei resistentes à cloroquina são completamente curados por doses subcurativas de artemisinina, di-hidro-artemisinina ou arteéter em combinação, se os compostos forem administrados por via oral ou subcutânea.

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REIVINDICAÇÕES

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Processo para a preparação de composições farmacêuticas combinadas com efeito sinérgico contra a malária, caracterizado por se incorporarem um ou mais compostos com a fórmula geral I na qual R e RI representam em conjunto um átomo de oxigénio, ou R representa respectivamente um átomo de hidrogénio e RI representa -OH, -O-alguilo com C1-C6, -O-alcenilo com C1-C6, -O-alcanoilo com C1-C6, ácido -O-alcanoilo-carboxílico tendo o radical alcanoilo C1-C6, -O-ciclohexilcarbonilo -O-benzoil- ou -O-naftoilo, bem como dos seus sais farmacologicamente toleráveis (grupo 1) e um ou mais compostos do grupo (2) cloriguina, 10-Q-metil-floxacrina, guinina, mefloquina, amodiaguina, pirimetamina, sul£adox.ina, primaquio.·? be.u ooiiu o.e. seus sais farmacologicamente eficazes, em conjunto com os adjuvantes e excipientes usuais, numa formulação çalênica adequada, sendo os compostos do grupo 1 incor porados na gama de 34% r 96% em peso e os do grupo 2 na gama de 4 a 66% em peso.

'^ν“ »' ·«£· _ 2^S Processo para a preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar um ou mais compostos de entre o grupo di-bid.ro- artemisinina, arteéter e artesunato e um ou mais compostos do grupo (2).

- 3¾ P_rocessc para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar respectivaraente um composto do grupo (1) e um ou mais compostos do grupo (2).

_ 4-¾ Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar um composto do grupo (1) e um composto do grupo (2).

Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar arteéter e quinina.

- Processo para a preparação de composições farmacêuticas combinadas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar arteéter e mefloquina.

- 7~ Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar arteéter, quinina e mefloguina.

- δ- Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar dibidro-artemisinina e cloroguina.

Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar dibidro-artemisinina e 10-O-metilfloxacrina.

- 10-' Processo para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar dibidro-artemisinina e pirimstanina.

- 1K Pr-ocesso rara preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, arteéter e cloroguina.

12ê

P_rocesso para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar arteéter e 10-0-metilfloxacrina.

- 13«

P_rocesso para preparação de composições farmacêuticas combinadas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se utilizar arteéter e pirimetamina.

A requerente declara que o primeiro pedido desta patente foi apresentado na Republica Federal Alemã em 8 de Maio de 1987, sob o n£ 1- 37 15 378.1.

Lisboa, 6 de Maio de 1988