PT85432B

PT85432B - Processo para a preparacao de um composto carbapenemico sob a forma cristalina e de composicoes farmaceuticas que o contem

Info

Publication number: PT85432B
Application number: PT8543287A
Authority: PT
Inventors: Makoto Sunagawa; Yutaka Isobe; Yutaka Takeuchi; Haruki Matsumura; Tetsuo Noguchi; Yukio Ozaki
Original assignee: Sumitomo Pharma
Priority date: 1986-07-30
Filing date: 1987-07-28
Publication date: 1990-06-29
Also published as: PT85432A

Description

A presente invenção diz respeito a um composto carbapenémico numa forma cristalina, à sua preparação e utilização.

composto oarbapenémico de acordo com a presente invenção é o ácido (4r,5s,6s,8r,2^,sA’S)-3-[^ll-(2-dimetilaminocarboniDpirrolidiniltioJ-h-metil-ó-d-hidroxietiD-l-azabiciclo[3.2.0]hept'-2-en-7ona-2-carboxilico (a seguir referido como Composto A) de fórmula

2^H H

COOH que tem um largo espectro antimicrobiano e possui uma forte actividade antimicrobiana, sendo utilizável como um agente antibiótico.

composto A numa forma não-cristalina, isto é, sob a forma de um pó amorfo obtido por liofilização e a respectiva utilização como um agente antibiótico são descritos no pedido de patente de invenção europeia n^e. 126587» Contudo, o Composto A nessa forma não-cristalina não é suficientemente estável e decompõe-se com diminuição da sua actividade antibiótica, na armazenagem durante um período longo.

Como resultado do estudo extensivo, foi agora possí vel obter o Composto A numa forma cristalina com elevada pureza. Além disso, descobriu-se que o Composto A nessa forma cristalina é muito mais estável do que na forma não-cristalina, sendo adequado para a armazenagem. Por outro lado, o Composto A pode ser facilmente purificado nessa forma cristalina.

Composto A cristalino de acordo com a presente invenção pode ser administrado por via parentérica, ou seja por injecção, devido à sua elevada pureza. Para a administração por injecçao, o Composto A pode ser misturado com qualquer carbonato não-tóxico de modo a obter un preparado facilmente solúvel. Na administração prática, este preparado pode ser dissolvido num meio aquoso fisiologicamente aceitável, tal como água destilada ou uma solução salina fisiológica, de modo a obter uma composição injectável. 0 Composto A cristalino é vantajosamente muito estável mesmo no estado de uma mistura com um carbonato não-tóxico, e esta mistura é também adequada para armazenagem durante um período longo.

Para a preparação do Composto A cristalino, arrefece -se uma solução aquosa do produto bruto do Composto A e/ou dilui- se com um dissolvente orgânico miscível com a água, para se obter o Composto A sobressaturado. Em alternativa, pode dissolver-se o Composto A não cristalino num meio aquoso tal como água ou uma sua mistura com un dissolvente orgânico miscível com a água, seguido de arrefecimento e/ou diluição com um dissolvente orgânico miscível com a água, para se obter o Composto A sobressaturado.

Antes do referido arrefecimento e/ou diluição, a solução aquosa contendo o Composto A pode ser adequadamente concentrada, se necessário. Tal concentração da solução contendo o Composto A como uma fase eventual pode ser realizada, por exemplo, mediante aquecimento sob pressão atmosférica ou sob pressão reduzida, para evaporar a água. Em alternativa, a concentração pode ser efectuada mediante a adaptação de qualquer processo de separação por membrana tal como osmose inversa, para eliminar a água. Em geral, a separação por membrana é favorá vel, dado que a concentração pode ser realizada a uma temperatu ra baixa sem decomposição do Composto A. São exemplos de membr^ nas utilizáveis para osmose inversa, as membranas de poliacrilo nitrilo, de álcool polivinilico, de poliamida, de acetato de ce lulose, etc.

teor de Composto A na solução aquosa, no início do arrefecimento e/ou da diluição não e limitativo, mas usualmente está compreendido entre cerca de 0,5 e 20% em peso em relação ao peso de água na referida solução aquosa. Essa solução aquosa, ou seja uma solução saturada ou quase saturada do Composto A, é arrefecida por abaixamento de temperatura e/ou diluição mediante mistura com um dissolvente orgânico miscível com a água, até se obter um estado de sobressaturação. A solução inicial saturada ou quase saturada e a solução resultante sobressaturada podem estar a quaisquer temperaturas apropriadas, em geral, respectivaraente, compreendidas entre cerca de 20 e 50 C e entre cerca de 0^o e 20°C. 0 abaixamento da temperatura pode ser efectuado a uma velocidade relativamente pequena, de preferência com agitação.

A cristalização do Composto A a partir da solução sobressaturada assim obtida pode ocorrer expontaneamente, por exemplo, na superfície de um reaetor ou de un agitador. Em alternativa, pode ser efectuada mediante a adição de cristais de sementeira.

A recuperação do Composto A cristalizado pode fazer-se mediante um processo de separação convencional adaptado para uma mistura sólido/líquido, Por exemplo, a mistura é filtrada, filtrada sob sucção de vazio, centrifugada, decantada ou submetida a um processo semelhante para recolher os cristais. Os cristais recolhidos são em seguida secos, em geral à temperatura ambiente ou a uma temperatura ligeiramente mais elevada (por exemplo, compreendida entre cerca de 15° e 50°C), de prefe rência a uma temperatura compreendida entre cerca de 20° e 30°C, até obtenção de peso quase constante. Para acelerar a secagem, a operação pode ser efectuada sob pressão reduzida.

Como exemplos de dissolventes orgânicos miscíveis com a água podem referir-se alcanois inferiores (por exemplo, metanol, etanol, propanol, isopropanol), cetonas (por exemplo, acetona, metiletilcetona), ésteres (por exemplo, acetato de metilo, acetato de etilo), hidrocarbonetos alifáticos (por exemplo, hexano, heptano), hidrocarbonetos aromáticos (por exemplo, tolueno, xileno), hidrocarbonetos halogenados (por exemplo, diclorometano, dicloroetano), éteres (por exemplo, tetra-hidrofurano, dioxano), amidas (por exemplo, dimetilformamida, dimetila cetamida), nitrilos (por exemplo, acetonitrilo, propionitrilo), etc. São preferidos etanol, isopropanol, acetona, tetra-hidrofu rano, dioxano, acetonitrilo, etc. Estes compostos podem ser usa dos sós ou em associação.

Composto A cristalino obtido forma geralmente um tri-hidrato e contém água numa proporção de cerca de 12/a em peso. Mediante secagem pode obter-se qualquer produto cristalino contendo um teor menor de água. Portanto, o Composto A cristali no de acordo com a presente invenção não está necessariamente limitado ao referido tri-hidrato.

Em comparação com o Composto A não-cristalino conven cional, o Composto A cristalino de acordo com a presente invenção apresenta a vantagem de ser mais estável e poder ser armazenado durante um longo período sem alteração material. Quando, por exemplo, for mantido numa garrafa selada a uma temperatura de 50°C, o Composto A cristalino (tri-hidrato) de acordo com a presente invenção não sofre qualquer decomposição mesmo ao fim de 6 meses, enquanto o Composto A não-cristalino convencional apresenta um teor final de apenas $1,8$ e 32,6^ ao fim de 7 dias e 11 dias, respectivamente.

Composto A cristalino pode ser administrado como tal ou sob qualquer forma de preparado convencional, mas a sua administração por via parentérica é geralmente favorável, devido à rápida e segura actuação da actividade antimicrobiana. De um modo muito vantajoso, o Composto A cristalino é estável mesmo na presença de carbonatos e deste modo pode ser misturado com um carbonato não-tóxico para se obter um preparado em pó facilmente solúvel na água. Na utilização, este preparado pode ser dissolvido num meio aquoso e então ser administrado por injecção. Como carbonatos não-tóxicos podem usar-se, por exemplo,

-5bicarbonatos de metais alcalinos (por exemplo carbonato de hidrogénio e sódio, carbonato de hidrogénio e potássio), etc. A proporção equivalente do Composto A cristalino e do carbonato não-tóxico pode estar geralmente compreendida entre 1:0,5 e 1:3,5» de preferência entre 1:1 e 1:2. Mo caso de o carbonato não-tóxico ser uma base monoácida tal como carbonato de hidrogénio e sódio, por exemplo, pode utilizar-se una proporção com preendida entre cerca de 1 e 2 moles para 1 mole de Composto A cristalino. A formulação pode ser efectuada por um processo convencional de mistura. Caso se deseje, pode adicionar-se qualquer aditivo convencional tal como un agente de anestesia local (por exemplo, cloridrato de lidocaína, cloridrato de mepivacaína). A composição assim formulada é usualmente introduzida assepticamente em ampolas ou frascos. Se for necessário, pode fazer-se a selagem sob vazio; o grau de vazio neste caso é usualmente superior a 4 x 10^ Pa.

Composto A numa forma não-cristalina pode ser preparado, por exemplo, a partir do correspondente composto carbapenémico de fórmula geral

na qual representa um grupo protector do grupo amino, e representa um grupo protector do grupo carboxilo, (a seguir designado por Composto B) mediante eliminação dos grupos protectores R^ e IL·, eventualmente por fases ou simultaneamente numa só fase. 3m geral a eliminação simultânea e favore cida.

Como grupo protector para o radical amino representado por R^, podem referir-se, por exemplo, um grupo benziloxicarbonilo eventualmente substituído por radicais nitro (por exemplo, benziloxicarbonilo, ^-nitrobenziloxicarbonilo, o-nitrobenziloxicarbonilo) um grupo alceniloxKC^-C^Í-carbonilo eventualmente su bstituído por um átomo de halogéneo tal como cloro ou bromo (por exemplo aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo), um grupo trialquil(C^-C^)-sililo (por exemplo um grupo trimetilsililo, trietilsllilo, t-butildimetilsililo), etc. Como exemplo de um grupo protector do radical hidroxilo representado por R₂ pode referir-se um grupo benzilo eventualmente substituído por um radical nitro (por exemplo, benzilo, p>-nitrobenzilo, o-nitrobenzilo), um grupo alcenilo C^-Cy eventualmente substituído por um átomo de halogéneo tal como cloro ou bromo (por exemplo, ali lo, 2-cloroalilo), um grupo etilo substituído por um radical triaL quil(C^C^)-sililo na posição 2 (por exemplo 2-trimetilsililetilo), um grupo trialquil (C^-C^J-sililo (por exemplo trimetilsililo, trietilsllilo, t-butildimetilsililo), etc.

A eliminação dos referidos grupos protectores pode ser efectuada por um processo convencional per se. Quando, por exemplo, representa um grupo trialquil(Cj-C^)-sililo ou R^ representa um grupo trialquil(CpC^)-sililo ou um grupo etilo substituído por um radical trialquil(C₁-Cq.)-sililo, a eliminação pode ser efectuada mediante tratamento com um sal do ácido fluo ridrico capaz de formar aniões fluoreto tal como um fluoreto de um metal alcalino (por exemplo fluoreto de sódio, fluoreto de po tássio) na presença de um éter de coroa, tratamento com um fluoreto de uma base orgânica quaternária tal como fluoreto de tetral quiKCj-C]*)- amónio (por exemplo fluoreto de tetraetilamónio, fluoreto de tetra-n-butilamónio) ou tratamento com um tampão ácido contendo um ácido orgânico ou inorgânico (por exemplo, ácido fosfórico, ácido acético, ácido cítrico). Quando R^ representa um grupo benziloxicarbonilo eventualmente substituído por um ra dical nitro ou R₂ representa um grupo benzilo eventualmente substituído por um radical nitro, a eliminação pode ser realizada mediante hidrogenação catalítica na presença de um catalisador (por exemplo, paládio, platina). Quando R^ representa um grupo o-nitrobenziloxicarbonilo ou R₂ representa um grupo o-nitrobenzi lo, a eliminação pode ser também efectuada mediante uma reacção fotoquímica, além da hidrogenação catalítica. Quando R^ represen ta um grupo alcenilíC^-C^y-oxicarbonilo eventualmente substituído por um átomo de halogéneo ou R₂ representa um grupo alcenilo C^-C? eventualmente substituído por um átomo de halogéneo, a eliminação é realizada mediante tratamento com uma quantidade catalitica de complexo de paládio solúvel em dissolventes orgânicos comportando um ligando fosfina (por exemplo, tetracistrifos.

fina-paládio) na presença de um grupo fixador de radicais alcenilo.

Na presente invenção, é preferível que R^ represente um grupo benziloxicarbonilo eventualmente substituído por um radical nitro e R₂ represente um grupo benzilo eventualmente substituído por um radical nitro, em particular que R^ represente um grupo jo-nitrobenzil oxicarbonilo e R₂ represente um grupo jo-nitrobenzilo. É também preferido que R^, represente um grupo alcenil (CyC?)-oxicarbonilo e R₂ represente um grupo alcenilo C^-C?, em especial que R·^ represente um grupo aliloxicarbonilo e R₂ represente um grupo alilo. Nestes casos, a eliminação simultânea dos dois grupos protectores pode ser facilmente efectuada mediante os processos a seguir descritos.

a) Quando R^ representa um grupo benziloxicarbonilo eventualmente substituído por um radical nitro (por exemplo, £-nitrobenziloxicarbonilo) e R₂ representa um grupo benzilo eventual mente substituído por um radical nitro (por exemplo n-nitrobenzilo), reduz-se o Composto B, em particular mediante hidrogenação catalitica na presença de um catalisador. Como catalisador é favorável utilizar um catalisador contendo paládio (por exemplo paládio-carbono, hidróxido de paládio-carbono, paládic-carbonato de cálcio, paládio-sulfato de bário, paládio-alumínio), ou um catalisador contendo platina (por exemplo óxido de platina, platina-carbono). Entre estes catalisadores, é particularmente favorável a utilização de paládio-carbono, hidróxido de paládio-carbono, óxido de platina ou similares. A hidrogenação catalíti ca é usualmente efectuada no seio de um dissolvente inerte, a uma temperatura compreendida entre neroa de 0^o e 100°C, de preferência entre cerca de 0^o e 50°C na presença de hidrogénio. 0 dissolvente inerte pode ser escolhido entre aleanois inferiores (por exemplo, metanol, etanol), éteres (por exemplo tetra-hidrofurano, dioxano), ácido acético, as suas misturas com água ou tampões contendo ácido fosfórico ou ácido morfolinopropano-sulfónico, etc., entre os quais é favorável uma mistura de tetra-hidrofurano e água ou tampão de morfolinopropanossulfonato. A pressão do hidrogénio pode ser atmosférica ou mais elevada, normalmente está compreendida entre a pressão atmosférica e 100

Kg/cm².

Depois de concluída a hidrogenação catalítica, o catalisador é removido da mistura reaccional contendo o Composto A mediante filtração. Concentra-se o filtrado e eventualmente faz-se a sua desalinização mediante tratamento com uma resina de adsorção (por exemplo o gel resinoso HP-20P” produzido pela Fir ma Mistsubishi Chemical), seguido de liofilizaço para obter o Composto A numa forma não-cristalina.

Quando se efectua a hidrogenação catalítica no seio de um dissolvente orgânico contendo água, o filtrado obtido por filtração da mistura reaccional para remoção do catalisador pode ser destilado para evaporação do dissolvente orgânico. Reste caso, o Composto A pode ser cristalizadp directamente a partir do concentrado aquoso resultante. Assim, o Composto A cristalino po de ser obtido sem separar e isolar o Composto A não-cristalino por exemplo, por cromatografia em coluna ou liofilização. Em com paração com o referido processo em que o Composto A não-cristali, no é recuperado de uma vez, este processo é favorável para a pre paração eficiente do Composto A sob uma forma cristalina, devido ao problema da estabilidade do Composto A não-cristalino referido antes.

b) Quando R^ representa um grupo alcenil (CyCy)-oxicarbonilo (por exemplo aliloxicarbonilo) e lU representa. um grupo alcenilo CyCy (por exemplo alilo), trata-se o Composto B com uma quantidade catalítica de tetracistrifenilfosfina-paládio na presença de um agente de fixação de grupos alcenilo. Como agente de fixação de grupos alcenilo podem, referir-se as aminas com impedimento estéreo (por exemplo t-butilamina), trialquil-(CpC^)-aminas (por exemplo trietilamina, diisopropiletil-amina), aminas cíclicas (por exemplo pirrolidina, piperidina, morfolina, tiomorfolina), aminas aromáticas (por exemplo anilina X-metilanilina), compostos beta-dicarbonilicos alifáticos ou aliciclicos (por exemplo acetilacetona, aceto acetato de etilo, 1,3-ciclo-hexanodiona, dimodona), ácidos alcanoíCg-C^-carboxilicos (por exemplo ácido acético, ácido propiónico, ácido 2-etil-hexanóico) e os seus sais dos metais alcalinos (por exemplo, sal de sédio, sal de potássio), etc. Estes compostos podem ser utili

-9zados sós ou em associação. Entre eles, são preferidos os com postos beta-dicarbonilicos aliciclicos tais como 1,3-ciclo-he xanodiona e dimodona e as aninas aromáticas tais como anilina e N-metilanilina. 0 agente de fixação de grupos alcenilo é utili zado geralmente numa quantidade compreendida entre cerca de 1,5 e 10 equivalentes do Composto Β. A quantidade de tetracistrifenilfosfina-paládio pode ser qualquer quantidade catalítica e normalmente está compreendida entre cerca de 2 e 20f molar em rela ção ao Composto B. 0 tratamento é geralmente efectuado no seio de um dissolvente inerte, à temperatura ambiente ou outra mais baixa ou mais elevada, por exemplo, compreendida entre cerca de 0^o e 70°C (em especial compreendida entre cerca de 10° e 5o°C), eventualmente no seio de um gás inerte (por exemplo azoto, árgon). Como exemplos de dissolventes inertes podem referir-se éteres (por exemplo éter dietilico, tetra-hidrofurano, dioxano), hidrocarbonetos aromáticos (por exemplo benzeno, tolueno), ésteres acéticos (por exemplo acetato de etilo, acetato de isopropilo), hidrocarbonetos hidrogenados (por exemplo cloreto de metileno, clorofórmio, 1,2-dicloroetano), acetonitrilo, etc., sendo preferidos os ésteres acéticos, tetra-hidrofurano, cloreto de metileno, etc. As suas misturas são também utilizáveis.

Depois de concluída a reacção, pode combinar-se a mis tura reaccional com uma quantidade apropriada de água e separada na fase aquosa e na fase do dissolvente orgânico. Lava-se repetidamente a fase aquosa com um dissolvente orgânico, para eliminar as impurezas nela contidas e em seguida cristaliza-se o Composto A, Por este processo, obtém-se o Composto A cristalino sem separação e purificação do Composto A não-cristalino.

Da comparação entre os dois processos conclui-se que o processo b) é geralmente mais vantajoso que o processo a), dado que se utiliza um metal de transição como catalisador e menores quantidades de dissolvente.

Composto B é já conhecido e pode ser preparado mediante processos conhecidos, por exemplo, como se descreve nos pedidos de patente de invenção europeia n2. 126587 e nQ. 188816. Um exemplo tipico é o indicado no seguinte esquema:

I -10✓

COY coor₂ + Β^Υθ

C00R₂ (li) R~A χ

Ί

em que R^ e R₂ ⁰ significado definido antes, X representa um grupo hidroxilo protegido (isto é, um grupo hidroxilo protegido por um grupo protector de grupos hidroxilo), COY q o resíduo de ura grupo activo éster carboxílico ou anidrido, um grupo tiolcarboxilico protegido, um grupo ariloxicarbonilo substituído ou um grupo heteroa riloxicarbonilo, B representa ura átomo de um metal alcali no, R-A representa um agente de alquilação ou de acilação e L representa o resíduo de um éster activo em relação ao grupo hidroxilo.

No esquema anterior, trata-se o composto beta-lactâmico (I) com uma base, no seio de ura dissolvente inerte, para se obter o composto (IV) (fase (D). Trata-se o composto (IV) com um agente de alquilação (por exemplo iodometano, iodopropano, brometo de alilo, brometo de benzilo, ]3-tolueno-sulfonato de metilo) ou com um agente de acilação (por exemplo cloreto de £-tolueno-sulfonilo, cloreto de metano-sulfonilo), para remover o grupo Y do primeiro com o último (fase (ii)), após o que se efeç tua o tratamento com um agente de esterificação activo em relação ao grupo hidroxilo, para se obter o composto (V) (fase (iii)). Em seguida, faz-se reagir o composto (V) com um mercaptano de fórmula geral

HS na qual R^ tem o significado definido antes, se necessário na presença de uma base, para se obter o composto (III) (fase (iv)). Em seguida efectua-se a eliminação do grupo protector do radical hidroxilo, no composto (III), para se obter o Composto B (fase (v)). Nas reacções anteriores, não é necessariamente requerida a separação da mistura reaccional do produto de cada fase; nomeadamente, em qualquer fase, a mistura reaccional pode ser submetida à reacção da fase seguinte.

No composto inicial beta-lactâmico (I), o grupo protector do radical· hidroxilo representado por X não é limitativo e pode ser um qualquer convencional, escolhido entre um grupo aleoxi(Cj-Ci_f)-carbonilo eventualmente substituído por um átomo de halogéno tal como cloro, bromo ou iodo (por exemplo £-butoxicarbonilo, 2-iodoetiloxicarbonilo, 2,2,2,-tricloroetilo xicarbonilo), um grupo alceniMCyC^-oxicarbonilo eventualmente substituído por um átomo de halogéneo (por exemplo aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo), um grupo benziloxicax bonilo eventualmente substituído por um radical nitro ou metoxi (por exemplo benziloxicarbonilo, j)-nitrobenziloxicarbonilo, o-nitrobenziloxicarbonilo, β-metoxibenziloxicarbonilo), um grupo trialquil (Cj-C^-sililo (por exemplo trimetilsililo, trietilsi lilo, i-butildimetilsililo), um grupo metilo substituído (por exemplo metoximetilo, 2-metoxietoximetilo, metiltiometilo), um grupo tetra-hidropiranilo, etc.

Quando o grupo COY no composto (I) representa o resíduo de um éster carboxilico ou anidrido activo, o símbolo Y pode representar um átomo de halogéneo (por exemplo cloro, bromo, iodo), um grupo alcoxi(Cj-C^)-carbonilo (por exemplo etoxicarbja niloxi, isopropiloxicarbonilo, ^-butoxicarbonilo), um grupo alcano-(C^“C^)-sulfoniloxi (por exemplo metano-sulfoniloxi), um grupo arilsulfoniloxi (por exemplo β-tolueno-sulfoniloxi), um grupo dialquilíCj-C^J-fosforiloxi (por exemplo dimetilfosforiloxi, dietilfosforiloxi), um grupo diarifosforiloxi (por exemplo difenilfosforiloxi), um grupo imidoxi ciclico (por exemplo N-succinimidoxi, N-ftalimidoxi), um grupo heteroalilo (por exemplo imidazolilo, triazolilo), um grupo heterocicloalquilo (por exemplo 3-(2-tioxo)tiazolidinilo) ou similares.

Quando o grupo COY representa um grupo tiolcarboxilo protegido, o grupo protector pode ser um grupo alquilo eventualmente substituído por átomos de halogéneo (por exemplo, metilo, etilo, isopropilo, i-butilo, 2-iodoetilo, 2,2,2,-tricloro-etilo) um grupo alcenilo CyC? eventualmente substituído por átomos de halogéneo ou por um radical alquilo inferior (por exemplo, alilo, 2-metilalilo, 2-cloroalilo), um grupo fenilo eventualmente substituído por átomos de halogéneo ou grupos nitro ou metoxi (por exemplo, fenilo, jo-clorofenilo, 2,4,6-triclorofenilo, ja-nitrofenilo, o-nitrofenilo, β-metoxifenilo), um grupo heteroarilo (por exemplo, 2-piridilo, 3-pi ridilo, %-piridilo, 2-pirimidilo, 2-(%,6-dimetil)pirimidilo) ou similares.

Em relação à fase (i), podem referir-se como exemplos da base os hidretos dos metais alcalinos (por exemplo hidreto de sódio, hidreto de potássio), metilsulfinilmeteto de sódio, sais metálicos de aminas (por exemplo diisopropila mideto de litio, bis(trimetilsilil)am.id.eto de litio, amideto de sódio), etc., e são exemplos do dissolvente inerte, éteres (por exemplo éter dietílico, tetra-hidrofurano, dioxano), hidrocarbonetos aromáticos (por exemplo benzeno, tolueno), acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, etc.. Estes compostos podem ser usados sós ou em associação, agente de esterificação activo em relação ao grupo hidroxilo, utilizado na fase (iii) pode ser escolhido entre cloreto de difenilfosforilo, cloreto de £-tolueno-sulfonilo, cloreto de metano-sulfonilo, etc..

A base utilizável na fase (iv) pode ser escolhida entre as exemplificadas para a fase (i) e também entre bases orgânicas tais como trietilamina, diisopropiletilamina, 4-diireti laminopiridina, l,8-diazabiciclo[5A.C]undec-7-eno (DEU), 1,5-diazabiciclo[¹+.3,0]non-5-eno (DBN) e l,%-azabiciclo[2.2.2] octano (DABCO). Quando se quiser, pode usar-se um dissolvente inerte tal como acetonitrilo, dimetilformamida e dimetilsulfé xido, adicionalmente para acelerar a reacção.

Durante as fases (i) a (iv), os reagentes, incluindo o composto mercaptano (II) são utilizados em quantidades tais que se assegure a realização correcta da reacção em cada fase. A base utilizada na fase (i) e normalmente usada numa quantidade compreendida entre 2 e % equivalentes, enquanto os oiiros reagentes são geralmente utilizados em quantidades compreendidas entre 1 e 1,5 equivalentes. Além disso, a reacção em cada fase é geralmente realizada a uma temperatura compreendida entre cerca de -70° e 6o°C, de preferência entre cerca de -%0° e 10°C.

A remoção do grupo protector do radical hidroxilo na fase (v) pode ser efectuada mediante um processo apropriado, que depende do tipo do referifo grupo protector; exemplos tí-Ιλpicos de processos convencionais são os adaptados para a remo çao do grupo protector Rj ou do grupo protector R^ e também a hidrólise, redução catalítica, tratamento com um ácido ou uma base, redução, etc., á ainda possível efectuar a remoção do grupo protector do radical hidroxilo simultaneamente com a re moção do grupo protector R₇ e/ou do grupo protector R_n.

As maneiras práticas e presentemente preferidas de realizar a presente invenção são ilustradas nos Exemplos seguintes. Contudo, o objecto da presente invenção não é limitado por esses exemplos. Além disso, nos Exemplos de Referência, tal como se indica a seguir, as abreviaturas têm o seguinte significado:

Ph:	grupo fenilo
Me:	grupo metilo
AOC:	grupo aliloxicarbonilo
TBDMS:	grupo t-buULdimetilsililo
t-Bu:	grupo t-butilo

Exemplo 1

Dissolve-se em ?0 ml de água, à temperatura de 30°C,

5,Cg de ácido (LR^SjóS^R^Sj^SÍ-S-E^-te-dinietilaminocarbo ) nil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo [3»2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico (Composto A) e arrefece-se num banho de água, verificando-se a precipitação de uma pequena quantidade de cristais. Junta-se 250 ml de acetona e agita-se a mistura obtida durante 1 hora. Recolhe-se mediante filtração os cristais precipitados, lava-se com 90 ml de aceto na e seca-se à temperatura ambiente sob pressão reduzida, durante 2 horas, obtendo-se 4,7g do Composto A cristalino (tri-hidrato).

Análise elementar para ,βΗ^Ο:

Calculada: C, 46,6?%; H, 7,1*+%; N, 9,60%; S, 7,33% Determinada: C, 46,32%; H, 7,41%; N, 9,71%; S, 7,24/. 0 pó do Composto A cristalino (tri-hidrato) obtido tem o seguinte espectro de difracção de raios X, em que I/Ip representa a intensidade relativa considerando que a intensida de de difracção máxima é igual a 1C0:

	Espaço na rede cristalina	I/I₇	Intensidade relativa
	1,81	'X	5
	1,95		½
	2,0½		6
	2,15		Ç7
	2Λ5		8
	2,29		12
1	2,37		½
	2,39		½
	2,53		10
	2,58		17
	2,66		7
	2,8o		15
	2,86		7
	2,9½		16
	3,Cl		9
	3,07		9
	3,1“*		9
	3,30		16
1	3,35		6
F	3,M)·		8
	3,52		16
	3,79		31
	3,88		1½
	3,96		20
	^0½		28
	^3½		12
	^1		10
	M,57		12
	^6½		3½
	^80		15
	5,15		2
	5,25		71

-165,35

6,71

6,89

7,88

100

Exeolo .2

Introduz-se num frasco, 568 mg de Composto A cristalino (tri-hidrato) obtido no Exemplo 1 e 103 mg de carbonato de sódio, selando-se em seguida o frasco de modo a obter um preparado injectável depois de dissolvido.

Exemnlo 3

Dissolve-se em 177g de tetra-hidrofurano, 3,0g (teor de 78%) de (4R,5s,6s,8R,2’sA’S)-2-nitrobenzil-3<Ml-2-nitrobenziloxicarbonil-2-dimetilalinocarbonil)pirrolidinilti]-^li-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilato, junta-se 24-Og de água e 6,0g de paládio-carbono a 10% e introduz-se hidrogénio à temperatura ambiente, sob uma pressão de hidrogénio de 5 Kg/cm G durante 5 horas. Após remoção do catalisador mediante filtração, lava-se o filtrado com água e em seguida filtra-se sob pressão reduzida para remover o tetra-hidrofurano. Lava-se o resíduo com diclorometano e de.s tila-se outra vez a fase aquosa, sob pressão reduzida, para ell minar o dissolvente orgânico, obtendo-se 4-72 g de uma solução aquosa contendo o produto bruto. Concentra-se 230 g desta solução aquosa, utilizando uma membrana plana do tipo de aparelho de condensação de osmose inversa, sob uma pressão de 50 Kg/cm G. Arrefece-se até à temperatura de 5°C os 7,7 g de condensado obtl do e junta-se 7,7 ml de tetra-hidrofurano, agitando-se depois djj rante 1 hora. Recolhe-se mediante filtração os cristais precipitados, lava-se com 15 ml de tetra-hidrofurano e seca-se à temperatura ambiente, sob pressão reduzida, durante 2 horas, para se obter 390mg do Composto A cristalino (tri-hidrato).

Procedendo do mesmo modo que no Exemplo 1, mas usando tetra-hidrofurano em vez de acetona, obtém-se 152 mg de Composto A cristalino (tri-hidrato), a partir de 200 mg de produto liofilisado do Composto A não-cristalino.

Exemplo 5

Procedendo do mesmo modo que no Exemplo 1, mas usando isopropanol em vez de acetona, obtém-se 14-0 mg de Composto A cristalino (tri-hidrato), a partir de 200 mg de produto lio filisado do Composto A não-cristalino.

Exemplo 6

Dissolve-se em 20,7 ml de acetato de etilo, 1,033 g (teor de 67%) de (4·Κ,53,63,8Η,2’8,^?+^,3)-η1ί1-3-[^-(1-&1ί1οχ1carboniloxi-2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-?-ona-carboxilato, junta-se 0,85 g de dimodona e introduz-se árgon duran te 5 minutos, apôs o que se aquece até à temperatura de 3θ°0. Junta-se, gota a gota, uma solução de 155 mg de tetracistrife nilfosfina-paládio em 5 ml de cloreto de metileno, à temperatura de 30°C e agita-se a mistura reaccional a esta temperatu ra, durante 3 horas, sob uma corrente de azoto. Junta-se 10,3 ml de agua, mantendo a agitação. Separa-se a fase aquosa, lava- se duas vezes com 10 ml de acetato de etilo, de cada vez, e junta-se a 20 ml de tetra-h5drofurano arrefecido em banho de gelo, após o que se agita durante 30 minutos, mantendo o banho de gelo. Junta-se à mistura resultante, cerca de 1 mg de cristais ãe Composto A (tri-hidrato) adicionando-se em seguida 30 ml de tetra-hidrofurano. Mantém-se a agitação durante mais 2 horas, em banho gelo. Mediante filtração, recolhe-se os cristais precipitados que se lavam com 10 ml de tetra-hidro furano, apôs o que se seca à temperatura ambiente, sob pressão reduzida, durante 5 horas, para se obter 323 mg de Composto A cristalino (tri-hidrato).

Exemplo 7

Aquece-se a refluxo, durante 30 minutos, uma solução de Γ+9 mg de anilina em ⁵+ ml de acetato de isopropilo, após o que se arrefece até à temperatura de 3C°J» Junta-se . 102 mg de (^R,5S,63,8R,2’S,^’S)-alil-3-L't-(l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonil)pirrolidinilotio]-^l+-metil-6(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-on-2-carboxilato e 46 mg de tetracistrifenilfosfina-paládio, à temperatura de 30°C e agita-se a mistura resultante a esta temperatura durante 3 horas, sob uma corrente de azoto. Faz-se o pós-trata mento da mistura reaccional tal como no Exemplo 6, para se obter ácido (Mi,58,6S,8R ,2’3,½’3)-3- [4-(2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-M- metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo [3«2.0]hept-2-en-7-on-2-carboxilico cristalino (tri-hidrato)·

I

Exemplo 8

Procede-se do mesmo modo que no Exemplo 7, mas usando 129 mg de N-metilanilina em vez de anilina, para se obter ácido (*+R,58,6S,8R,2’3,4’o)-3-[4- (2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.2] hept-2-en~7-on-2-carboxilico (tri-hidrato).

Exemplo de Referência 1

Em Ι^,Μ- ml de álcool alilico dissolve-se 13,15 2 (teor de 92,8^) de (3S,4s)-3-[(lR)-l-hidroxietil]-4-[(lR)-l-feniltiocarboniletil]-l-carboximetil-2-azetidinona. λ mistu ra resultante, junta-se, à temperatura ambiente, 10,8ml de clotrimetilsilano, e depois agita-se durante 1,5 horas. Junta-se à mistura resultante, 50 ml de tolueno, após o que se concentra sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo numa coluna de cromatografia com gel de sílica, para se obter 13Λ g (rendimento 98,2,0 de (3S,^S)-3-[(lR)-l-hidroxietil]-4.r(lR)-l-feniltiocarboniletil]-l-aliloxicarboximetil-2-azetidinona.

^IVmáx° 3^50, 1745, 1695, 1410, 1372,

1195, 1130, 95o, 745.

RMN á (CDCI^): 1,33 (3H, d, J = 6,2 Hz), 1,34 (3H, d, J = 6,9 Hz), 3,16 (2H, m), 3,88 (IH, AB_d, J = 18,1

Hz), 4,17 (IH, dd, J = 2,3 e 4,3 Hz), 4,23 (IH, quinteto, J = 6,2 Hz), 4,34 (IH, AB_d, J = 18,1 Hz), 4,62 (2H, d, J = 5,9 Hz), 5,25 (IH, d, J = 10,2 Hz), 5,32 (IH, d, J = 17,2 Hz), 5,88 (lH,m), 7,42 (5H).

Exemplo de Referência 2

HO Me Me₀SiO

Em 60 ml de tolueno seco dissolve-se 14, 7 g (teor

90,6%) de (3S,4s)-3-[(lR)-l-hidroxietil]-4-[(lR)-l-feniltiocarboniletil]-l-aliloxicarbonilmetil-2-azetidinona e junta-se, banho de gelo, 7,8 g de clorotrimetilsilano e 7,8 g de trietila mina, após o que se agita à temperatura ambiente durante 4o minutos. Dilui-se a mistura reaccional com 300 ml de tolueno, lava-se com 300 ml de solução de carbonato de hidrogénio e sódio a 2% e 2 vezes com 300 ml, de cada vez, de solução aquosa de cio reto de sódio e seca-se sobre sulfato de magnésio para se obter 16,35 g (rendimento de 90%) de (3S,4s)-3-[(lR)-l-trimetilsililoxietil]-4-[(lR)-l-feniltiocarboniletil]-l-aliloxicarbonilmetil-2-azetidinona.

20^IVmáx° ^65, 1750 (sh), 1700, 1410,

1370, 1250, 1190, 980, 84o, 745.

RMN í (CDCip: 0,1? (9H, s), 1,29 (6H, d, J = 6,9 Hz), 3>O8 (1H, dd, J= 2,3 e 7,6 Hz), 3>1? (1H, d , J = =2,3 e 6,9 Hz), 3,35 (1H, AB_d, J = 17,2 Hz), 4,1 - 4,2 (2H, m) 4,33 (1H, AB_d, J = 17,2 Hz), 4,6o (2H, d, J = 5,6 Hz), 5,2 -5,3 (2H, m), 5,8 - 5,92 (1H, m), 7,41 (5H, m).

Em 5,5 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano, na proporção de 4:1, dissolve-se 1,0 g (teor de 90$) de (3S,4s)-3-[(IR)-1-trimetilsililoxietil]-4-[(IR)-1-feniltioearboniletil]-l-aliloxicarbonilmetil-2-azetidinona e junta-se, gota a gota, a mistura resultante a uma mistura de 200 mg de hi dreto de sódio (suspensão em óleo a 60$, 5mM), 410 mg de (2,4 mM) de brometo de benzilo e 2,7 mg de trimetilsilanol em

8,5 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de 4:1, a una temperatura compreendida entre -15° e -10°C, após o que se agita durante 2 horas. Adiciona-se uma solução de 590 mg (2,2 mM) de clorofosfato de difenilo em 1 ml de tolueno, a mesma temperatura, e agita-se durante mais 4 horas. Junta-se, gota a gota_? una solução de 670 mg (2,6 mM) de (2S,4s)-l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonil-4-mercaptopirrolidina em 1 ml de tetra-hidrofurano, 426 mg (2,8 mM) de l,8-diazabiciclo[5.4.0]-undec-7-eno e agita-se a mistura resultante durante uma noite, a uma temperatura compreendida entre -15° e -10°C, Junta-se à mistura reaccional 10 ml de uma solução aquosa de di-hidrogeno-fosfato de potássio 0,1 M e separam-se as fases aquosa e orgânica. Extrai-se a fase aquosa duas vezes com 5 ml de tolueno, de cada vez e juntam-se os extractos de tolueno à fase orgânica. Lava-se a mistura resultante com tampão de fosfato 0,1 M (pH, 7,0) e solução aquosa de cloreto de sódio para secar sobre una mistura de sulfato de magnésio e carbonato de potássio, na proporção de 1:1, após o que se elimina o dissolvente sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de silica para se obter 0,90 g de (4R,5S,6S,8R,2’3,4’S)-alil-3-[4(l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonilpirrolidinil)tio]-4-metil-6-(l-trinetilsililoxietil)-l-azabiciclo[3*2.0Jhept2-en-7-ona-2-carboxilato.

IV ?'g° (cn^-1): 1770, 170?, 1655, 1M, 1320,

1210, 1135, 980, 8^0.

Exemplo de Referência 4

Me^SiO Η H ^Me

Me

AOC / -22Dissolve-se 600 mg (1,0+ mM) de (4R,5S,63,8R,2’S, 4’S)-alil-3-[4-(l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonilopir rodinil)-tio]-4-metil-6-(l-trimetilsililoxietil)-azabiciclo [3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilato em 6 ml de tetra-hidrofu rano, após o que se adiciona 3 ml de uma solução-tampão de ci trato (pH 3)* Agita-se vigorosamente a mistura resultante, à temperatura ambiente durante 1,5 horas, dilui-se com 30 ml de acetato de etilo, lava-se com solução aquosa de cloreto de sódio e seca-se sobre uma mistura de sulfato de magnésio e carbonato de potássio na proporção de 1:1. A eliminação do dissolvente sob pressão reduzida permite obter (4R,5S,6S,8R,2’S,4’S)-alil-3-[4-(l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonilpirrodinil)tio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilato.

UVA^: 317«.

IV (cm^-1): 3420, 1770, 1705, 1645, 1550,

1405, 1320, 1278, 1205, 1175, 1135, 975, 75o.

RMN J (CDC1₃): 1,26 (3H), 1,36 (3H), 1,94 (1H,

m), 2,67 (1H, m), 2,97 2,99, 3,06, 3,11 (6Ξ, total, cada singleto), 3,2 - 3,7 (4e, m), 4,25 (2H, m), 4,47 - 4,8? (5H, m), 5,15 - 5,5 (4H, m), 5,94 (2H, m).

Exemplo de Referência 5

-23Dissolve-se 1,0 g de (3S,4s)-3-[(lR)-l-±-butildimetil sililoxietil]-4-[(lR)-l-p-clorofeniltiocarboniletil]-t-butoxicarbonilmetil-2-azetidinona em 10 ml de cloreto de metileno s.g co e adiciona-se 497 mg de anisole e 1,04 g de complexo triflu reto de boro-éter dietílico e agita-se em seguida durante 3 horas a uma temperatura compreendida entre 3θ° β 42°C. Sacode-se a fase orgânica com água e solução aquosa de carbonato de hidrogénio e sódio. Separa-se a fase aquosa, ajusta-se o pH a 1 com ácido clorídrico concentrado e extrai-se com acetato de etilo. Seca-se o extracto sobre sulfato de sódio anidro e concentra-se sob prejâ são reduzida. Junta-se ao resíduo 1 ml de acetato de etilo e aquece-se a mistura resultante até à temperatura de 50°C. Depois de adicionar 5 ml de tolueno, gota a gota, agita-se a mistura re sultante durante 30 minutos e deixa-se arrefecer até à temperatu ra ambiente. Recolhe-se mediante filtração os cristais precipita dos e seca-se para se obter (3S,4s)-3-[(lR)-l-hidroxietil)-4-[(lR)-l-p-clorofeniltiocarboniletil]-l-(carboximetil)-2-azeti-

dona.

p.f., 81° - 83°C.

IV ^^Χ3 (cm¹) í 34oo (br), 1748, 1700, 1475,

1383, 1190, 1090.

RMN ò (CDCK): 1,29 (3H, d), 1,31 (3H, d), 3,16

(2H, m), 4,08 (2H, A3_ql J = 18,1 Hz), *+,22 (1H, dd, J = 2,3 e 4,3 Hz), 4,27 (ÍH, m), 7,35 (4h, AB_q, J = 8,6 Hz).

Exemolo de Referência 6

C00^\^ —24—

Dissolve-se 371 mg de (3S,4s)-3-[(lR)-l“hidroxietil)-4-[(lR)-l-j)-clorofeniltiocarboniletil]-l-(l-carboximetil)-2-azetidinona em 0,4 ml de álcool alilico e junta-se 0,3 ml de trimetilclorossilano e agita-se a mistura resultante a temperatura ambiente durante 1 hora. Após eliminação do dissolvente, purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna com gel de silica, para se obter (3S,4s)-3-[(lR)-l“hidroxietil]-4-[(lR)-1-jD-clorof eniltiocarboniletil]-l-(l-aliloxicarbonilmetil)-2-azetidona.

^IVmáí° (^onrl)^: 3^30, 1763 (sh), 174o, 1698, 1477, 1383, 1190, 950, 723.

NMR â (CDC1₃): 1,32 (3H, d, J = 6,6 Hz), 1,33 (3H, d, J = 6,9 Hz), 2,36 (1H, brs), 3,15 (2H, m), 4,10 (2H, AB_q, J = 18,1 Hz), 4,17 (1H, dd, J = 2,3 e 4,3 Hz), 4,22 (1H, m), 4,62 (2H, d, J = 5,9 Hz), 5,28 (2H, m), 5,87 (1H, m), 7,35 (4h, AB_q, J = 8,6 Hz).

Exemplo de Ref erência ,7

coo^Xa

Dissolve-se 305 mg de (3S,4s)-3-[(lR)-l~hidroxietil] -4-[(lR)-l-£-r»lorofeniltiocarboniletil]-l-(l-aliloxicarbonilmetil)-2-azetidinona em 1,5 ml de tolueno seco e junta-se 145 mg de trietilclorossilano e 150 mg de trietilamina, após 0 que se agita a mistura resultante durante 1 hora à temperatura ambiente. Lava-se a fase orgânica com solução aquosa a 2% de carbonato de hidrogénio e sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio para depois de secar sobre sulfato de sódio anidro e concentrar a pressão reduzida, se obter (3S^S)-3-[dR)-trimetilsililoxietil]-^[(lR)-jo-clorofeniltiocarboniletil]-l-(l-aliloxicarbonilmetil]-2-azetidona.

IV £g° (cm”¹): 1762, 17^0, 17ⁿ2, 1^75, 12^5,

1086, 976, 837.

RMN ò (CDCip: 0,1½ (9H,s), 1,30 (3H, d, J = 6,9

ΗζΊ, 1,30 (3H, d, J = 6,6 Hz), 3,07 (1H, m), 3,1½ (1H, d ) J = 3,3 e 6,9 Hz), ^08 (2H, AB_q, J = 17,8 Hz), ^10 (1H,

m), M6 (1H, m), ^6n (2H, dt, J = 1,3 e 5,6 Hz), 5,27 (2H, nO, 5,88 (1H, 7,35 ^H, AB_qí J = 8,6 Hz).

Exemplo da Referência 8

----- \ ⁰ ooo/x^

Dissolve-se 30θ mg de (3S^S)-3-[(líO-l-trimetilsililoxietil ]-Λ·- [ (IR)-l-f eniltiocarboniletil J-l-aliloxicarbonilmetil-2-azetidinona em 2 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de ^1, após o que se junta, gota a gota, a solução resultante a uma mistura de 89,2 mg de hidreto de sódio numa suspensão oleosa a 6o£ (2,23 mM), 77,½ mg de brometo de alilo (0,6½ mM) e 0,86½ mg de trimetilsilanol em 2,5 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de ^1, à temperatura de

-26^r * .

-15°C, agitando-se durante duas horas a uma temperatura compreendida entre -15° e -10°C. Junta-se, gota a gota, uma solu ção de 2ⁿ7 mg (0,77 mH) de clorofosfato de difenilo em 0,5 ml de tolueno, à mesma temperatura e mantém-se a agitação durante mais 2 horas. Adiciona-se, gota a gota, uma solução de 16? mg (0,64 mM) de (2S,4s)-l-aliloxicarbonil-2-dimetilaminocarbonil-4-mercaptopirrolidina em 1 ml de tetra-hidrofurano e agita-se a mistura resultante durante 1 hora a uma temperatura compreendida entre -5° e 0°C. Junta-se à mistura reaccional 5 ml de uma solução aquosa 0,1 M de di-hidrogenofosfato de potássio e separa-se a fase aquosa que se extrai com 5 ml de acetato de etilo. Junta-se o extracto á fase orgânica, lava-se com solução aquosa de cloreto de sódio, seca-se sobre uma mistura de sulfato de magnésio e carbonato de potássio na proporção de 1:1 e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna com gel de silica para se obter (^}+R,5S,6S,8R,2’S,4’S)-alil-3-[4-(l-aliloxicarbo nil-2-dimetilaminocarbonilpirrodinil)tio]-4-metil-6-(l-trimetilsililoxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]-hept-2-en-7-ona-carboxilato. 0 espectro de infra-vermelho deste produto é idêntico ao do produto obtido no Exemplo de Referência 3·

Exemplo de Referência 9

Dissolve-se 15 g (teor de 90$) de (33,4s^-3-[(1R)-1-trimetilsililoxietilJ-4-Γ(IR)-l-feniltiocarboniletilJ-l-ali-

loxicarbonilmetil-2-azetidinona em 65 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de 4:1 e adiciona-se, gota a gota, a solução resultante a uma suspensão de hidreto de sódio (suspensão oleosa a 6o5; 4,2 g; 105 mH), 4,0 g (33 mM) de brometo de alilo e 28 mg de trimetilsilanol em 115 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de 4:1, a uma temperatura compreendida entre -15° e -10°C seguido de agitação durante 3 horas. X mesma temperatura, junta-se uma solução de 0,67 g (36 mH) de cloro fosfato de difenilo em 15 ml de uma mistura seca de tolueno e tetra-hidrofurano na proporção de 4:1, mantendo a agitação durante mais 4 horas. Junta-se algumas gotas de solução-tampão de fosfato C,1 M (pH, 7,0) e interrompe-se a reacção. Adi ciona-se 150 ml de solução-tampão de fosfato 0,1 M (pH, 7,0) e extrai-se a mistura reaccional com 150 ml de acetato de etilo. Extrai-se de novo-a fase aquosa com 100 ml de acetato de etilo. Junta-se o extracto à fase orgânica, lava-se com solução saturada de cloreto de sódio e seca-se sobre uma mistura de sulfato de magnésio e carbonato de potássio na proporção de 1:1, após o que se elimina o dissolvente sob pressão reduzida. Submete-se o resíduo a cromatografia em coluna com gel de silica utilizando uma mistura de tolueno e acetato de etilo (95*5 - 90*10) como eluente e concentram-se as fracções eluídas para se obter (4H,5fí,6S,8fí)-alil-3-(difenilfosforiloI xi)-4-metil-6-(l-trimetilsililoxietil)-l-azabiciclo[3.2.0] hept-2-en-7-ona-2-carboxilato.

^IV (cm¹)* 1780, 1725, 1630, 1588, 1483, íucLa.

1285, 1250, 1182, 955.

xW S (CDCl^)* 0,11 (9H, s), 1,19 (3H, d, J = 7,3 Hz), 1,25 (3H, d, J = 6,3 Hz), 3,24 (1H, dd, J = 3,0e 6,6

Hz), 3,46 (1H, m), 4,11 (1H, dd, J = 3,0 e 10,6 Hz),4,18 (1H, m), 4,66 (2H, d, J = 5,61 Hz), 5,20 (ÍH, d, J =10,6

Hz), 5,37 (ÍH, d, J = 17,2 Hz), 5,86 (ÍH, m), 7,21 -7,41 (10H, m).

-28Exemplo de Referência 10

Dissolve-se 290 mg de (^Í+R,5R,6S,8R)-alil-3-(difenilfosforiloxi)-^-metil-6-(l-trimetilsililoxietil)-l-azabiciclo [3»2.0]-hept-2-en-7-ona-2-carboxilato em 1,5 ml de acetonitri lo seco e junta-se 1^2 mg de (2S,¹+S)-l-aliloxicarbonil-2-dime tilaminocarbonil-^-mercaptopirrolidina, após o que se arrefece até â temperatura de -15°C. Junta-se, gota a gota, uma solução de 77,5 mg de diisopropiletilamina em cerca de 0,2 ml de acetonitrilo seco e agita-se a mistura resultante durante 5 horas, a uma temperatura compreendida entre -15° e -10°C. Junta-se à mistura reaccional 10 ml de uma solução aquosa 0,1 M de di-hidrogenofosfato de potássio e 10 ml de acetato de etilo e separa-se as fases aquosa e orgânica. Lava-se a fa se orgânica com 10 ml de solução aquosa 0,1 M de di-hidrogeno fosfato de potássio. Após confirmar que o pH da fase aquosa está compreendido entre 4 e 5, agita-se a fase orgânica à tem peratura ambiente durante 5 a 15 horas. Confirma-se a eliminação do grupo trimetilsililo por cromatografia em camada fina, utilizando uma mistura de benzeno e ácido acético na proporção de 1:1. Lava-se a solução orgânica resultante com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre uma mistura de sulfato de magnésio e carbonato de potássio na proporção de 1:1 e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna com gel de silica para se obter (4R,5S,6S,8R,2’3,^}+’S)-alil-3-[^í+-(l-alilo „29xicarbonil-2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo [3,2.0]hept-2-en-7-ona-carboxilato. Este produto é idêntico ao obtido no Exemplo de Referên cia 4, no que respeita aos espectros de ultra-violeta (UV), infra-vermelho (IV) e ressonância magnética nuclear (RMN).

Exemplo de Referência 11

Trata-se o (4-R,5R_?6S,8R)-alil-3-(difenilfosforiloxi)-4-metil-6-(l-trimetilsililoxiet.il )-l-azabiciclo[3.2.0 ]hept-2-en-7-ona-2-carboxilato bruto obtido no Exemplo de Referência 9, do mesmo modo que no Exemplo de Referência 10 para se obter (4R,5S,6S,8r,2’S,4’3)-alil-3-(l-aliloxícarbonil-2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-M-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3»2.0]-hept-2-en-7-ona-2-carboxilato.

-30RESUMO

Claims

Descreve-se um processo para a preparação do ácido (4r,5S, 6s, 8r,
2 ’ S, 4 ’ S)-3“[4-(2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico sob uma forma cristalina que consiste na eliminação do grupo protector do radical hidroxilo, do grupo protector do radical amino e do grupo protector do radical carboxilo, simultaneamente ou por fases, num composto de fórmula geral ►

para se obter o ácido (4R,5S,8R,2'S,4‘s)-3-[4-(2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico bruto, na dissolução em água ou numa sua mistura com um dissolvente orgânico do produto I bruto obtido, seguido da cristalização do produto pretendido mg diante arrefecimento e/ou diluição com um dissolvente orgânico.

Descreve-se também a preparação de composições farmacêutj. cas contendo o composto preparado de acordo com a presente invenção, utilizáveis como antibióticos.

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12. - Processo para a preparação de ácido (4R,5S,6S,8R,2’S, 4’S)-3-rⁱ+-(2-dinietilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil'i-l-azabiciclo[3.2.0]hept“2-en-7-ona-2-carbo xilico sob uma forma cristalina, caracterizado pelo facto de, num composto carbapenémico de fórmula geral

CHna qual X representa um grupo hidroxilo protegido, R^ representa um grupo protector do radical amino e R^ representa um grupo protector do radical carboxilico, se eliminar o grupo protector do radical hidroxilo, o grupo protector do radical amino e o grupo protector do radical car boxilo, por fases ou simultaneamente, para se obter o ácido (4R,5S,6S,8R,2’S,4^,S)-3-[^í+-(2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6- (l-hidroxietiP-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico bruto, se dissolver em água ou numa sua mistura com um dissolvente orgânico o produto bruto assim obtido e em seguida se efectuar a cristalização do produto pretendido mediante arrefecimento e/ou diluição com um dissol vente orgânico.

23. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracteriza do pelo facto de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual COY representa o resíduo de um grupo activo éster ou anidrido de um ácido carboxílico, um grupo tiolcarboxilo protegido, um grupo acriloxicarbonilo ou um grupo heteroariloxicarbonilo, X representa um grupo hidroxilo e R₂ representa um grupo protector do radical carboxilo, com uma base, fixando o resíduo Y~ (que é o resíduo do grupo COY), de se remover o grupo carbonilo da mistura resultante com um agente de alquilação ou de acilação e de se fazer reagir a mistura resultante com um agente de esterificação activo em relação ao grupo hidróxilo e de em seguida se fazer reagir o composto resultante com um mercaptano de fórmula geral na qual R^ representa um grupo protector do radical amino ou dos seus sais, se necessário na presença de uma base, para se obter o composto carbapenémico inicial.
3^Q. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracteriza

-33^J ** · do pelo facto de o dissolvente orgânico ser escolhido entre etanol, isopropanol, acetona, tetra-hidrofurano, dioxano, acjg tonitrilo ou uma mistura destes compostos.
4θ. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caraoterizâ do pelo facto de o grupo protector do grupo amino ser £-nitrobenziloxicarbonilo ou aliloxicarbonilo e o grupo protector do grupo oarboxilo ser jo-nitrobenzilo ou alilo.
5^Ô. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caraoterizâ do pelo facto de o grupo protector do grupo amino ser β-nitro-benziloxicarbonilo e o grupo protector do grupo carboxilo ser Ê-nitrobenzilo.

62. - Processo de acordo «om a reivindicação 1, caracteriza do pelo facto de o grupo protector do grupo amino ser aliloxicarbonilo e o grupo protector do grupo carboxilo ser alilo.
7^Q. - Processo para a preparação do ácido (4r,5s,6s,
8r, 2'S,4's)-3~[4-(2-dimeltilaminocarbonilJpirrolidiniltioj-^-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo [3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico sob uma forma cristalina, caracterizado pelo facto de se dissolver o ácido (4R,5S,6S,8R,2’S,4’S)-3-[4-(2-dimetllaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6-(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]-hept-2-en-7-ona-2-carboxilico não «ristalino, em água ou numa sua mistura com um dissolvente orgânico e de em seguida se cristalizar o produto pretendido mediante arrefecimento e/ou diluição com um dissolvente orgânico.

82. - Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo facto de o arrefecimento e a diluição com um dissolvente orgânico serem efectuados por fases ou simultaneamente.
9^Q, - Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo facto de o dissolvente orgânico ser escolhido entre etanol, isopropanol, acetona, tetra-hidrofUrano, dioxano, acetonitrilo ou uma mistura destes compostos.

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-3410δ. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 e 3 a 9) caracterizado pelo facto de se obter o produto pretendido sob a forma de um tri-hidrato.

112. - Processo para a preparação de composições farmacêuti cas injectáveis, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz do ácido (4R,5S,6s,8R,2’S,4‘S)-3“[4-(2-dimetilaminocarbonil)pirrolidiniltio]-4-metil-6(l-hidroxietil)-l-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-7-ona-2-carboxilico numa forma cristalina, preparado de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 10, com um veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

122. - Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo facto de se incorporar na composição farmacêutica um carbonato não-tóxico.