PT830345E - Derivados de estiril benzimidazole como inibidores da proliferacao de celulas mulculares lisas - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE ESTIRIL BENZIMIDAZOLE COMO INIBIDORES DA PROLIFERAÇÃO DE CÉLULAS MUSCULARES LISAS" O presente invento relaciona-se com derivados de estiril benzimidazole úteis como inibidores da proliferação de células musculares lisas e com a utilização desses compostos e de composições farmacêuticas contendo esses compostos no tratamennto de doenças ou condições relacionadas com a proliferação de células musculares lisas, e com um processo para a preparação desses compostos. A proliferação e migração dirigida de células musculares lisas vasculares constituem componentes oclusivos vasculares importantes em processos tais como remodelação vascular induzida por hipertensão, restenose vascular, e aterosclerose (Gibbons, G.H:; Dzau, V.J.; NEJM, 1994; 330:1431). O processo patológico global é referido como doença vascular hiperproliferativa tendo como base a etilologia do processo patológico. A oclusão vascular é precedida por estenose resultante de hiperplasia de células musculares lisas da íntima (Clowes, A.W.; Reidy, M.A.; J. Vasc. Surg., 1991, 13:885). A causa subjacente da hiperplasia de células musculares lisas da íntima é a lesão da célula muscular lisa vascular que leva a rebentamento do endotélio e da matriz extracelular (Schwartz, S.M., Human Pathology, 1987; 18:240; Fingerle, J. Arteriosclerosis, 1990; 10:1082). Normalmente, as células da parede arterial encontram-se sob controlo negativo restrito e num estado de proliferação basal baixo ou num estado não proliferativo quiescente. A seguir a lesão vascular, a libertação de factores de crescimento e de citoquinas dá origem a proliferação e a migração de células musculares lisas (Fagin, J.A.; Forrester, J.S., Trends in Cardiovascular Med., 1992; 2; 90.; Shiratani, M.; Yui, Y.; Kawai, C., Endothelium, 1993; 1:5). A lesão vascular que leva a hiperplasia da íntima pode ser induzida imunologicamente ou por processos cardiovasculares invasivos. A aterosclerose é uma forma comum de lesão vascular mediada biologicamente que pode progredir para estenose. A proliferação anormal de células musculares lisas vasculares constitui uma caracteristica de placas ateroscleróticas responsáveis por lesões obstrutivas da neo-íntima no sítio da lesão da íntima (Ross, R., Nature, 1993: 362; 801; Cascells, W., Circulation, 1992; 86: 723). A lesão mecânica que leva a hiperplasia da íntima pode ocorrer a seguir a procedimentos com angioplastia, cirurgia para transplantação de orgãos e outros processos invasivos vasculares que destroem a integridade vascular (Clowes, A.W.; Reidy, M.A., J. Vasc. Surg., 1991; 13:885; Isik, F.F.; McDonald, T.O.; Ferguson, M.; Yanaka, E., Am. J. Pathol., 1992; 141:1139). A angioplastia coronária transluminal percutânea tem tido ampla aceitação para o tratamento da estenose das artérias coronárias. Neste procedimento o endotélio é lesado e exposto a uma série de agentes quimioatractivos e mitogénicos que têm origem no sangue ou que são libertados no sítio da lesão. De entre estes agentes, pensa-se que o factor de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) desempenha um papel significativo no processo de proliferação de células musculares lisas e de quimiotaxis (Reidy, M.A.; Fingerle, J.; Linder, V.; Circulation, 1993: 86 (suppl III): III-43; Fems, G.A.A.; Raines, E.W.; Sprugel, K.H.; Montani, A.S.; Reidy, M.A.; Ross, R.; Science, 1991; 253: 1129; Jawien, A.; et al., J. Clin. Invest., 1992; 89: 507; Nabel, E.G., et al., J. Clin. Inbest., 1993; 91: 1822). 3 a 6 meses após a angioplastia, ocorre uma redução significativa no fluxo sanguíneo em aproximadamente 30-40% dos pacientes como resultado de restenose causada por resposta a lesão vascular dirante este procedimento. Estes pacientes necesstam então de um segundo procedimento intervencionai (Pepine, C., Circulation, 1990; 81: 1753.; Hardoff, R.J., J. Am. Coll. Cardiol., 1990; 15: 1486). Consequentemente, agentes que limitassem o processo de restenose trariam um benefício significativo. Agentes que inibissem a proliferação de células musculares lisas vasculares, particularmente a proliferação induzida por PDGF, seriam úteis no tratamento de afecções hiperproliferativas vasculares (Molloy, C.J., Drug Dev. Res., 1993; 29: 148; Newby, A.C.; George, S.J., Cardiovasc. Res., 1993; 27: 1173). DE 4, 129, 603 apresenta compostos heterocíclicos reunidos (benzimidazoles) como inibidores de agregação de plaquetas induzida por colagénio e fibrinogénio, que podem também ser úteis no "tratamento de angioplastia transluminal". A Patente dos E.U.A. No. 5.387.600 apresenta benzimidazoles 2-tio substituídos para o tratamento da aterosclerose. A Patente dos E.U.A. No. 5.026.705 apresenta 2-estiril benzimidazolil piridazinonas como agentes inotrópicos positivos úteis no tratamento da insuficiência cardíaca congestiva. A actividade tuberculostática de derivados de 2-[a-ciano-P-aril vinil] benzimidazole foi apresentada em Pol. J. Pharmacol. Pharm., 1981, 33,217 (CA 96: 293). WO 9116305 apresenta derivados di-heterocíclicos de propeno nitrilo como agentes antiproliferativos das células. A Patente dos E.U.A. No. 5.196.446 apresenta indolil propenonitrilos como agentes antiproliferativos da célula.

Certos estiril benzimidazoles são apresentados em Zh. Obshch. Khim. 32, 2624-33 (1962) e Zhumal prikladnoi spektrokopii, Vol. 2, No. 1, pp. 63-68 (1965) e Inorganic Chimica Acta, 191 (1992), 131-139. Não é apresentada * i -4-

A 4y J. qualquer actividade biológica ou terapêutica. Certos benzimidazoles 1-bcnzil substituídos são apresentados como agentes anti-inflamatórios em JP Kokai 7481369 e é referido que certos benzimidazoles apresentam actividade terapêutica em J. Med. Chem. 1970, 13(4), 784-6. Chemical Abstracts: vol. 102, 1985, no 149180; vol. 121, 1994, no 057384; vol. 119, 1993, no 180702; vol. 117, 1992, no 171308; vol. 113, 1990, no 077503; vol. 106, 1987, no 102171; e vol. 071, 1969, no 022066 todos eles apresentando compostos de benzimidazoles individuais alguns dos quais apresentam propriedades terapêuticas. FR-A-2104717 apresenta compostos de benzimidazole com actividade pesticida, USP 3575956 apresenta certos compostos de benzimidazole como produtos intermediários.

De acordo com este invento, é proporcionada a utilização de um composto da fórmula I ou da fórmula II r/%^XXRj I r3

O

r4 R 5 em que R é fenilo ou fenilo substituído com halogénio, hidroxilo, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, trifluorometilo, ou R é furilo, piridilo ou quinolinilo;

Rt e R2 são hidrogénio, halogénio, alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi com 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com 7 a 12 átomos de carbono; R3 c hidrogénio, alquilo com 1 a 6 átomos dc carbono, ou bcnzilo substituído facultativamente com alcoxicarbonilo com 2 a 6 átomos de carbono; R4 e R5 são hidrogénio ou alquilo com 1 a 6 átomos de carbono; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para 0 fabrico de um medicamento para a prevenção de proliferação de células musculares lisas num mamífero.

Num outro aspecto do presente invento é proporcionado um sal farmaceuticamente aceitável de um composto da fórmula I ou Π acima indicada em que R, R|, R2, R3, R4 e R5 são tal como foram acima definidos, para utilização no tratamento de mamíferos contanto que na fórmula I quando R é fenilo, furan- 3- ilo, ou pirid-3-ilo, Ri, R2 e R3 não sejam todos hidrogénio, e quando R é fenilo substituído e um de entre Rj ou R2 seja hidrogénio, cloro ou nitro e o outro seja hidrogénio, então R3 não é hidrogénio, metilo ou benzilo, e ainda contanto que quando R3 seja benzilo, R não seja estiril benzimidazole ou 2,4-diclorostril benzimidazole; e contanto que quando Rj ou R2 seja H, nitro ou cloro e R3 seja hidrogénio, então R não é fenilo substituído com cloro, e contanto que quando um de entre Rj ou R2 seja broomo e R3 seja hidrogénio então R não é fenilo ou fenilo substituído com 2-, 2,6- ou 4-cloro, 2- ou 4-hidroxilo, 3-nitro ou 3-metoxi- 4- hidroxi; e ainda contanto que quando R seja 2-furilo e um de entre Ri ou R2 seja nitro, então R3 não é hidrogénio.

De acordo com ainda outro aspecto do presente invento é proporcionado um composto da fórmula I ou II tal como foi acima definido em que: R é fitrilo, piridilo, fenilo ou fenilo substituído com alcoxi com 1 a 6 átomos de carbono;

Ri e R2 são hidrogénio, halogénio, alcoxi com 1 a 6 átomos de -6- -6-

carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com 2 a 7 átomos dc carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono; R3 é hidrogénio ou benzilo substituído com alcoxicarbonilo com de 2 a 6 átomos de carbono; R4 e Rj são hidrogénio ou metilo; contanto que na fórmula I, R1; R2 e R3 não sejam todos hidrogénio e contanto que quando R seja fenilo ou piridilo, um de entre Rj e R2 não é nitro quando o outro é hidrogénio, e contanto que o composto da fórmula I não seja 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5-nitro-1 H-benzimidazole ou 2-[2-(4-metoxifenil)-vinil]-5-nitro-1 H-benzimidazole.

De acordo com outra apresentação preferida do presente invento é proporcionado um composto da fórmula I acima indicada que é

em que

Ri e R2 são hidrogénio, halogénio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono, contanto que Ri e R2 não sejam ambos hidrogénio e contanto que um de entre Ri e R2 não seja nitro quando 0 outro é hidrogénio; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. R é de preferência furilo, piridilo, fenilo ou fenilo substituido.

Substituintes preferidos no fcnilo são alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, particularmente metoxi,

Rt e R2 são de preferência hidrogénio, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, particularmente metoxi, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono, particularmente éster metílico de ácido carboxílico, ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono, particularmente fenilmeta-nona. R3 é de preferência hidrogénio ou benzilo substituído com alcoxicarbonilo com de 2 a 6 átomos de carbono, particularmente éster metílico de ácido benzóico. R4 e R5 são de preferência hidrogénio ou metilo.

Compostos particularmente preferidos são: • (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5-metoxi-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • {2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-1 H-benzoimidazol-5-ilo} -fenil-metanona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • ácido (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-1 H-benzoimidazole-5-carboxíli-co ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • ácido (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole-5-carboxíli-co ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5-nitro-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. -8- ϊ. t*.\ • éster mctílico dc ácido 4-{2-[2-(3,4-dinietoxifenil)-viml]-4,7-diiiietoxi-5,6-dimetilbenzoimidazol-1 -ilmetil} -benzóico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5,6-dimetil-1 H-benzoimidazole-4,7-diona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • (E)-5-nitro2-(2-piridin-4-il-vinil)-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. • (E)-2-(2-furan-3-il-vinil)-5-nitro-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Os compostos do presente invento são preparados de acordo com a sequência geral de reacções indicadas no esquema apresentado mais abaixo.

CN

HQ

MeOH R^ 1

ROH NH r^V^OMc *HCJ 2

NaH/DMF/RJBr

R'^' J

R3 I OMe

R< Rs (NHífeCeíNOafc R-Wjlf —" rYRj

Rj 0 II

L -9-

O liidrocloreto do ixiiinoétcr (2) é preparado fazendo reagir um nitrilo apropriado com um álcool e cloreto de hidrogénio em excesso a 0o C. A reacção de (2) e um 1,2-diaminobenzeno apropriado em etanol sob refluxo proporciona o correspondente 2-estiril-benzimidazole (4). A alquilação de (4) com um haleto de alquilo, arilo ou arilalquilo em dimetilformamida usando hidreto de sódio como base proporciona compostos da fórmula I. Compostos da fórmula II são obtidos por oxidação de derivados 1,4-dimetoxi da fórmula I com nitrato de amónio e césio. Dois equivalentes de nitrato de amónio e césio são dissolvidos em água/acetonitrilo 1:4 e são dissolvidos em água/acetonitrilo 1:4 e são adicionados gota a gota a uma solução de um 1,4-dimetoxi-estirilbenzi-midazole apropriado e ácido acético. A mistura é aquecida a 40° C durante 1 hora para se obter compostos da fórmula II.

Assim, de acordo com um outro aspecto deste invento é proporcionado um processo para a preparação de um composto da fórmula I ou II tal como é aqui defindo que compreende (a) reacção de um nitrilo da fórmula 1 tal como é aqui definido com um álcool e cloreto de hidrogénio para formar o composto da fórmula 2, e (b) fazendo reagir o composto da fórmula 2 com um composto da fórmula 3 tal como é aqui definido na presença de um álcool para formar o composto da fórmula 4 e (c) fazendo reagir o composto da fórmula 4 com R.3-haleto na presença de um agente de alquilação para formar o composto da fórmula I tal como é aqui definido (d) e facultativamente fazendo reagir o composto da fórmula 5 tal como é aqui definido com (NH4)2Ce(N)3)6 na presença de ácido acético para formar o composto da fórmula II tal como é aqui definido.

Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis são os sais derivados de ácidos orgânicos e inorgânicos tais como: ácidos acético, láctico, cítrico, fumárico, tartárico, succínico, maleico, malónico, clorídrico, bromídrico, fosfórico, azótico, sulfurico, metanosulfurico, metilbenzeno sulfónico, e ácidos aceitáveis couheuidos de um modo similar. Com os compostos possuindo um substituinte acídico tal como ácidos carboxílicos, os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os sais de metal alcalino (sódio ou potássio), os sais de metal terroso alcalino (cálcio ou magnésio) e sais de amónio.

Este invento inclui composições farmacêuticas compreendendo estiril benzimidazoles quer isoladamente quer em combinação com excipientes (isto é materiais farmaceuticamente aceitáveis sem qualquer efeito farmacológico). Essas composições são úteis para doenças que são caracterizadas por excessiva proliferação de células musculares lisas mais frequentemente originada a partir de cirurgia reconstrutiva vascular e de transplantação, por exemplo, angioplastia com balão, cirurgia de enxerto vascular, cirurgia de bypass arterial coronário, e transplantação do coração. Outros estado patológicos em que existe proliferação vascular não desejada incluem hipertensão, asma, e insuficiência cardíaca congestiva. Os compostos deste invento são assim úteis para o tratamento destas doenças e estados.

Os compostos deste invento podem ser administrados de um modo sistémico, por exemplo por injecção intravenosa, variando tipicamente entre 0,1 e 10 mg/kg durante 5-30 dias, ou por injecção subcutânea em dose baixa, por administração por via oral numa dose mais elevada do que a da injecção intravenosa. A administração localizada dos compostos deste invento pode também ser conseguida por vias de administração transmembranar, transdermica ou outras vias usando dispositivos apropriados de libertação contínua tais como matriz de suporte, quando aplicáveis. As composições do invento podem ser formuladas com excipientes convencionais, tais como um agente de enchimento, um agente de desintegração, um agente de ligação, um agente de lubrificação, um agente de aromatização, etc. Estes são formulados de um modo convencional.

Os compostos podem ser administrados puros ou com um veículo farmacêutico sólido ou líquido a um paciente necessitado desse tratamento. Veículos sólidos aplicáveis podem incluir uma ou mais substancias que podem também actuar como agentes de aromatização, agentes de lubrificação, agentes de solubilização, agentes de suspensão, agentes de enchimento, agentes de deslizamento, auxiliares de compressão, agentes de ligação ou agentes de desintegração de comprimidos ou um material de encapsulação. Em pós, o veículo é um sólido dividido finamente que está misturado com o ingrediente activo dividido finamente. Em comprimidos, o ingrediente activo é misturado com um veículo tendo as propriedades de compressão necessárias em proporções apropriadas e é comprimido na forma e tamanho desejados. Os pós e comprimidos contêm de preferência até 99% do ingrediente activo. Veículos sólidos apropriados incluem, por exemplo, fosfato de cálcio, estearato de magnésio, talco, açúcares, lactose, dextrina, amido, gelatina, celulose, metil-celulose, carboximetilcelulose de sódio, polivinilpirrolidina, ceras com ponto de fusão baixo e resinas permutadoras de iões.

Podem ser usados veículos líquidos na preparação de soluções, suspensões, emulsões, xaropes e elixires. O ingrediente activo deste invento pode ser dissolvido ou suspenso num veículo líquido farmaceuticamente aceitável tal como água, um solvente orgânico, uma mistura de ambos ou óleos ou gordura farmaceuticamente aceitáveis. O veículo líquido pode conter outros aditivos farmacêuticos apropriados tais como agentes de solubilização, emulsificadores, tampões, agentes de conservação, edulcorantes, agentes de aromatização, agentes de suspensão, agentes de espessamento, corantes, reguladores da viscosidade, estabilizadores ou osmo-reguladores. Exemplos apropriados de veículos líquidos para administração por via oral ou parentérica incluem água (particularmente contendo aditivos tal como foi acima referido por exemplo derivados da celulose, de preferência solução de carboximetilcelulose de sódio), álcoois (incluindo álcoois mono-hídricos e álcoois poli-hídricos por exemplo glicois) e seus derivados, e óleos (por exemplo óleo de côco c óleo dc araquis fraccionados). Para administração parentérica o veículo pode também ser um éster oleoso tal como oleato de etilo e miristato de isopropilo. Veículos líquidos estéreis são usados em composições sob forma líquida estéril para administração por via parentérica.

Composições farmacêuticas líquidas que são soluções ou suspensões estéreis podem ser utilizadas por, por exemplo, injecção intramuscular, intraperitoneal ou subscutânea. Soluções estéreis podem também ser administradas por via intravenosa. A administração por via oral pode apresentar-se sob a forma de composição líquida ou sólida. De preferência a composição farmacêutica apresenta-se sob a forma de unidade de dosagem, por exemplo sob a forma de comprimidos ou cápsulas. Nessa forma, a composição é sub-dividida em dose unitária contendo quantidades apropriadas do ingrediente activo; as formas de dosagem unitárias podem ser composições embaladas, por exemplo pós embalados, frascos, ampolas, seringas cheias previamente ou saquinhos contendo líquidos. A forma de unidade de dosagem pode ser, por exemplo, uma cápsula ou comprimido, ou pode ser um número apropriado de qualquer uma dessas composições sob forma embalada.

Assim, de acordo com um outro aspecto do presente invento é proporcionada uma composição compreendendo um composto da fórmula I ou II tal como é aqui definido ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo farmaceuticamente aceitável. A dosagem a ser usada no tratamento de um paciente específico sofrendo de uma doença envolvendo proliferação de células musculares lisas deverá ser determinada de um modo subjectivo pelo médico assitente. As variáveis envolvidas incluem o estado patológico específico e o tamanho, idade e padrão de resposta do paciente. -13-

Os compostos são úteis para a prevenção de proliferação de células musculares lisas num mamífero. Assim, de acordo com um outro aspecto do presente invento é proporcionada a utilização dos compostos da fórmula I ou II tal como é aqui definido para o fabrico de um medicamento para o tratamento de, e em particular, para a prevenção da proliferação de células musculares lisas num mamífero que compreende a administração a esse mamífero, por via oral ou parentérica, de um composto da fórmula I ou II tal como foram aqui definidas. A capacidade dos compostos do presente invento para inibir a proliferação de células musculares lisas foi estabelecida usando células musculares lisas da aorta de porco numa modificação do processo de Castellot et al. J. Biol. Chem 257 (19) 11256 (1982), como se segue:

Aortas frescas de porco, libertadas de um modo escrupuloso de tecido gordo, são lavadas em solução salina tamponada com fosfato estéril com 2% de antibiótico-antimicótico líquido (100 x) (10.000 unidades de penicilina (base), 10.000 pg de estreptomicina (base), e 25 pg de anfotericina B/ml utilizando penicilina G (sal de sódio), sulfato de estreptomicina, e anfotericina B como Fungizone® em 0,85% de solução salina, fornecida por Gibco Laboratories, Grand Island Biological Co., Grand Island, NY). O tecido é então digerido em 10-15 ml de uma solução de enzima contendo colagenase do tipo I, 165 U/ml; elastase do tipo III, 15 U/ml; BSA, 2 mg/ml; e inibidor de tripsina de soja, 0,375 mg/ml, seguindo-se incubação a 37° C sob 5% de atmosfera de CO2 durante 10 a 15 minutos. Após este tratamento, a superfície exterior adventícia é removida por descamação com um fórceps. A aorta é então cortada longitudinalmente e mantida aberta e a camada endotelial é removida por raspagem. A camada de células central é lavada na solução enzimática, e é -14- -14-

κπ colocada numa nova placa de 100 mm com 10 ml de solução cnzimática. A camada de células central é picada usando uma par de tesouras finas e é digerida durante 2-3 horas a 37° C em 30 ml de solução enzimática fresca. Após digestão, o tecido central é homogeneizado usando uma pipeta de Pasteur estéril com uma extremidade polida pelo fogo de um aparelho para pipetar Eppendorf com uma extremidade de pipeta estéril de 200-1.000 μΐ. A suspensão é então centrifugada durante 10 minutos a 8.000 rpm e a pílula é suspensa em 4-6 ml de uma solução enzimática fresca e é revestida para 4-6 frascos de 100 ml com cápsulas com respiradouros. As células são então deixadas crescer até confluência e são divididas (separadas) usando 0,25% de tripsina. As células são avaliadas quanto à sua pureza e qualidade global usando anticorpo para actina SMC.

As células são ensaiadas em passagem precoce (geralmente passagem 3-7) em condições sub-confluentes. As culturas são feitas crescer em placas de cultura com múltiplos recipientes (24 recipientes) de 16 mm em meio 199 suplemetado com soro bovino fetal a 10% e 2% de antibiótico/antimicótico. Em subconfluência, as células são colocadas num meio de linfocitos definido, sem soro (AIM-V; Gibco) durante 24-48 horas antes do início do protocolo experimental. O processo do teste padronizado é iniciado por adição do composto do teste, H timidina e soro ou um factor de crescimento específico para as células sincronizadas privadas de soro. As estimulações de factor de crescimento e soro são optimizadas para cada tipo de célula. Os compostos do teste são adicionados a cada recipiente numa diluição de 50 vezes (20 μΐ/recipiente) e as placas são incubadas durante 24-36 horas a 37° C numa atmosfera de CO2 a 5%. Os compostos do teste são dissolvidos em etanol a 50% e são ensaiados a 1,10 e 100 μΜ. Como um controlo, RG 50872 (Bilder, G.A.; et al., Am. J. Cell Physiol., 1991; 260: C721) é ensaiado de um modo rotineiro nas condições de cada preparação celular numa concentração de 5 μΜ.

Quando a experimentação fica completa, as placas são colocadas sobre gelo, são lavadas três vezes com PBS arrefecido com gelo e são incubados em ácido tricloroacético (TCA) a 10% arrefecido com gelo durante 30 minutos a fim de remover proteínas solúveis em ácido. Cada solução é transferida para um frasco de cintilação contendo HC1 0,4N (500 μΐ/recipiente a fim de neutralizar NaOH) e cada recipiente é lavado duas vezes com água (500 ml) para um volume total de 2 μΐ/recipiente.

Os dados são quantificados submetendo os recipientes a uma contagem por cintilação, em triplicado, para as amostras tanto de controlo como experimentais. Dados de controlo (100%) são obtidos a partir de células estimuladas de um modo máximo, como o resultado de estimulação de factor de crescimento ou soro. Dados experimentais são obtidos a partir de células estimuladas de um modo máximo com factor de crescimento ou soro e são tratados com um composto do teste. (O factor de crescimento derivado de plaquetas usado no ensaio foi recombinante humano PDGF-AB fornecido por Upstate Biotechnology Inc., Lake Placid, NY). Os dados são expressos como uma percentagem de controlo a partir da qual são determinadas CIsoS.

Para distinguir a citotoxicidade da capacidade de um composto para evitar proliferação, os compostos do teste foram examinados usando uma modificação comercial do ensaio MTT. Resumidamente, são feitas crescer células em placas com 24 recipientes até uma confluência de 70-80%. As células foram privadas dc soro durante 24-48 horas antes do início do protocolo experimental. Para assegurar que o ensaio MTT monitorizava a toxicidade em vez da proliferação, as células foram incubadas com 50 mM do composto do teste em meio fresco sem soro durante 24 horas a 37° C num incubador com CO2 humidificado. Depois do tratamento do composto ficar completo, corante -16- indicador MTT foi adicionado durante 4 horas a 37° C. Foram então solubilizadas células e porções alíquotas de cada recipiente foram transferidas para uma placa de 96 recipientes para análise. Absorvência a um comprimento de onda de 570 nm com um comprimento de onda de referência de 630 nm foi registada usando um leitor de placa ELISA. Os resultados são referidos como percentagem viável não usando droga (100% de viabilidade) e padrões de pré-solubilização (0% de viabilidade).

Os compostos do presente invento são inibidores eficazes da proliferação de células musculares lisas tal como é indicado pelos dados apresentados no Quadro 1.

Quadro I

Composto do Exemplo Número Antiproliferação de Células Musculares Lisas Porcinas CI50 ou % Inibição a x Concentração Citoxicidade % Células Viáveis Soro PDGF 1 5,91 μΜ 4,1 μΜ 100 2 11,4 μΜ 3,48 μΜ 100 3 7,6 μΜ 0,324-0,801 μΜ 100 4 1,28 μΜ 1,5 μΜ 100 5 1,2 μΜ 6,12 μΜ 100 6 2,26 μΜ 7,49 μΜ 100 7 0,567-1,9 μΜ 1,49 μΜ 100 8 0,915-10,2 μΜ 0,622 μΜ 80 9 14,5 μΜ 0,858 μΜ 100 10 8,36 μΜ 0,62 μΜ 45 11 1,36 μΜ 0,06 μΜ 100

Os exemplos que se seguem são proporcionados a título de ilustração c não de limitação, para compostos representativos do invento e métodos para a sua produção. EXEMPLO 1 Passo 1

Hidrocloreto de (3,4-dimetoxi)-cinamoimidato de metilo

Uma suspensão de 3,4-dimetoxicinamonitrilo (10 g; 52 mmol) em EtOH (150 ml) foi arrefecida num banho de gelo. A mistura fria foi então saturada com cloreto de hidrogénio. A solução da reacção foi refrigerada durante 18 horas. O precipitado formado foi recolhido por filtração. O sólido incolor deu origem a 8,0 g (rendimento de 60%) de hidrocloreto de metil-(3,4-dimetoxi)-cinamoimidato o qual foi usado na reacção seguinte, !H RMN (DMSO-ck; 200 MHz) δ 11,8 (s amplo 1H), 10,9 (s amplo, 1H), 7,82-7,9 (d, 1H), 7,3 (d, 2H), 7,02-7,12 (d, 1H), 6,81-6,9 (d, 1H), 4,2 (s, 3H), e 3,76 (s, 3H), 3,82 ppm (s, 3H).

Passo 2 (E)-2-[2-(3,4-Dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazoIe

Uma mistura de 1,2-fenilenodiamina (0,63 g; 5,8 mmol) e hidrocloreto de (3,4-dimetoxi)-cinamoimidato de metilo (1,5 g; 5,8 mmol) em metanol (35 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A solução de metanol foi concentrada até à secura. O resíduo foi recristalizado a partir de MeOH-Éter Dietílico a fim de se obter 1,3 g (rendimento de 67%) do composto do título sob a forma de um mono-hidrocloreto, hidrato, sólido amarelo, p.f. 248° C dec. Anal. Cale. para C,7H,6N202 HC1 H20: C, 60,98, H, 5,12; N, 8,37. -18-

Encontrados: C, 60,78; H, 5,12; N, 8,45. Espectro de Massa: (EI; M*) ni/z 280. *H RMN (DMSO-d$; 400 MHz) δ 15,2 (s amplo, 1H), 8,18-8,2 (d, 1H), 7,76-7,8 (m, 2H), 7,45-7,54 (m, 2H), 7,32 (d 1H), 7,2-7,3 (m, 3H), 7,08-7,12 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,86 ppm (s, 3H). EXEMPLO 2 2-(2-(3,4-Dimetoxifenil-vinil]-5-metoxi-lH-benzoimidazoIe

Uma mistura de di-hidrocloreto de 4-metoxi-1,2-fenilenodiamina (1,55 g; 7,3 mmol) e hidrocloreto de (3,4-dimetoxi)-cinamoimidatometilo (1,9 g; 7,3 mmol) em metanol (50 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 72 horas. O metanol foi concentrado até 25 ml. Foi separado por filtração um sólido amarelo. O sólido foi suspenso em MeOH (10 ml), e foi tratado com cloreto de hidrogénio. O precipitado que se formou foi recolhido a fim de se obter 515 mg (rendimento de 21%) do composto do título sob a forma de um mono-hidrocloreto, hidrato, sólido amarelo, p.f. 246-249° C. Anal. Cale. para Ci8H18N203HC1.H20:C, 61,72, H, 5,20; N, 7,79. Encontrados: C, 61,61; H, 5,37; N, 7,84. Espectro de massa: (EI; M*) m/z 310. RMN (DMSO-d^; 400 MHz) δ 14,8 (s amplo, 1H), 8,3-8,5 (d, 1H), 7,62-7,63 (d, 1H), 7,3 (d, 1H), 7,21-7,23 (dd 1H), 7,2 (d, 2H), 7,07-7,16 (m, 3H), 3,86-3,88 (d, 6H), 3,82-3,84 ppm (s, 3H). EXEMPLO 3 {2-[2-(3,4-Dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazol-5-il}-fenil-metanona

Uma mistura de 3,4-diaminobenzofenona (1,7 g; 8,0 mmol) e hidrocloreto de metil-(3,4-dimetoxi)-cinamoimidato (2,0 g; 8,0 mmol) em metanol (50 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 48 horas. O metanol foi -19- λ». ***» η ι concentrado até 25 ml. Um precipitado amarelo que se formou foi separado por filtração. Recristalização a partir de MeOH proporcionou 1,14 g (rendimento de 37%) do composto do titulo sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 211-214° C. Anal. Cale. para C24H20N2O3: C, 74,98; H, 5,24; N, 7,29. Encontrados: C, 74,88; H, 5,12; N, 7,23. Espectro de massa: (FAB, M+H) m/z 385. 'Η RMN (DMSO-de*, 400 MHz) δ 12,9-13,0 (s amplo, 1H), 7,9 (s, 1H), 7,73-7,77 (d, 2H), 7,64-7,69 (m, 4H), 7,55-7,6 (t, 2H), 7,3 (s, 1H), 7,16-7,22 (d, 2H), 7,0 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,8 ppm (s, 3H). EXEMPLO 4 Passo 1 2,3-Dimetil-5,6-dinitro-l,4-dimetoxibenzeno

Uma solução de 2,3-dimetil-l,4-dimetoxibenzeno (16,6 g; 0,1 mol) em ácido acético (100 ml) foi arrefecida num banho de gelo, sendo em seguida concentrada. HNO3 (40 ml) foi adicionado gota a gota durante 15 minutos. Depois da adição, a mistura da reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas, sendo em seguida aquecida a 50° C. durante 20 minutos. A solução foi concentrada até 75 ml sob vácuo, sendo em seguida vertida para gelo-H20 (350 ml). O precipitado amarelo (8,1 g) foi recolhido. A recristalização a partir de EtOH deu origem a 5,4 g (rendimento de 18,5%) de 2,3-dimetil-5,6-dinitro-l,4-dimetoxibenzeno sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 147-150° C.

Passo 2 2,3-Dimetil-5,6-diamino-l,4-dimetoxibenzeno 2,3-Dimetil-5,6-dinitro-l,4-dimetoxibenzeno (4,0 g; 15 mmol) em EtOH (120 ml) foi aquecido até solução, e foi adicionado 10% de paládio sobre carvão (1,0 g). A mistura da reacção foi hidrogenada a 45 psig durante 3 horas. -20-

Após manipulação, 2,41 g (rendimento de 83%) de 2,3-dimctil-5,6-diamino-l,4-dimetoxibenzeno foram obtidos sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 1 ΟΤΙ 10°C.

Passo 3 2-(2-(3,4-Dimetoxifenil)vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole

Uma mistura de 2,3-dimetil-5,6-diamino-l,4-dimetoxibenzeno (2,57 g; 10 mmol) e hidrocloreto de metil-(3,4-dimetoxi)-cinamoimidato (1.96 g; 10 mmol) em metanol (35 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A solução em metanol foi concentrada até 15 ml. O precipitado amarelo foi separado por filtração. Recristalização a partir de MeOH proporcionou 2,1 g (rendimento de 58%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 116-119° C. Anal. Cale. para C21H24N2O4: C, 66,46; H, 6,57; N, 7,60. Encontrados: C, 66,83; H, 6,64; N, 7,41. Espectro de massa (EI, M*) m/z 368 Ή RMN (DMSO-d<j; 400 MHz) δ 12,4-12,5 (s amplo, 1H), 7,6-7,4 (d, 1H), 7,2 (d, 1H), 7,07-7,16 (m, 2H), 7,0 (d, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 2,2 ppm (s, 3H). EXEMPLO 5 Éster metflico de ácido (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole-5-carboxílico

Uma mistura de l,2-diamino-4-metilcarboxibenzeno (3,6 g; 20 mmol) e hidrocloreto de metil-(3,4-dimetoxi)-cmamoimidato (5,4 g; 20 mmol) em metanol (150 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 48 horas. A solução foi concentrada até à secura. O resíduo foi recristalizado a partir de MeOH a fim de se obter 3,8 g (rendimento de 56%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 185-188° C Canl. Cale. para C19H18N2O4: C, -21 - r~i \ ' 67,45; Η, 5,36; N, 8,28. Encontrados: C, 67,25; H, 5,45; N, 8,28. Espectro de Massa: (EI; M*) m/z 338. 'H RMN (DMSO-d*; 400 MHz) δ 12,9 (s amplo, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,63-7,69 (d, 1H), 7,57-7,62 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,17-7,21 (dd 1H), 7,14-7,19 (d, 1H), 7,08-7,12 (d, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,79 ppm (s, 3H). EXEMPLO 6

Acido (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifeniI)-vinil]-lH-benzoimidazole-5-carboxflico

Uma mistura de éster metílico de ácido 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole-5-carboxílico (3,5 g; 11 mmol) em MeOH (75 ml) e solução de NaOH 2,5N (7,5 ml) foi submetida a refluxo durante 3 horas. A mistura da reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi agitada durante 18 horas. A mistura da reacção foi concentrada até à secura. O resíduo foi dissolvido em H20, e foi acidificado com HC1 2N. O precipitado foi recolhido. Recristalização a partir de MeOH deu origem a 600 mg (15%) do composto do título sob a forma de um sólido cremoso, mono-hidrocloreto, p.f. acima de 285° C. Anal. Cale. para 0|8Ηι6Ν204ΗΟ: C, 59,92; H, 4,75; N, 7,76. Encontrados: C, 59,62; H, 4,80; N, 7,66. Espectro de Massa: (EI: M4) m/z 324. !H RMN (DMSO-dé; 400 MHz) δ 13,5 (s amplo, 1H), 8,24 (d, 1H), 8,14-8,2 (d, 1H), 8,02-8,06 (dd, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,26-7,28 (dd, 1H), 7,2-7,24 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,83 ppm (s, 3H). EXEMPLO 7 (E)-2-[2-(3,4-Dimetoxifenil)-vinil]-5-nitro-lH-benzoimidazoIe

Uma mistura de 4-nitro-l,2-fenilenodiamina (1,2 g; 8 mmol) e hidrocloreto de metil-(3,4-dimetoxi)-cinamoimidato (2,0 g; 8 mmol) em metanol (70 ml) foi submetida a refluxo durante 18 horas. A solução foi concentrada até à secura. O resíduo foi recristalizado a partir de MeOH para se obter 603 mg (rendimento de 23%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 223-225° C. Anal. Cale. para C, 62,76; H, 4,65; N, 12,92.

Encontrados: C, 62,67; H, 4,62; N, 13,05. Espectro de massa: (EI; M4) m/z 325. 'H RMN (DMSO-do; 400 MHz) δ 13,2 (s amplo, 1H), 8,4 (s amplo, 1H), 8,1 (dd, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,62-7,72 (m, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,19-7,23 (dd, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,8 ppm (s, 3H). EXEMPLO 8 Éster metílico de ácido 4-{2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetilbenzoimidazoI-l-ilmetil}-benzóico A uma suspensão de hidreto de sódio, dispersão a 60% em óleo (150 mg; 3,5 mmol) em 20 ml de DMF, {2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimctil-lH-benzoimidazole (1,2 g; 3,25 mmol) em DMF (20 ml) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos. Após adição, a mistura da reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, sendo então adicionado metil-4-(bromometil)benzoato (745 mg; 3,25 mmol) em DMF (10 ml). A mistura da reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura da reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A DMF foi concentrada até se obter um resíduo, e foi adicionado H20. O sólido foi recolhido por filtração. Rccristalização a partir de MeOH deu origem a 620 mg (rendimento de 37%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo claro, hemi-hidrato, p.f. 111-114° C Anal. Cale. para C3oH32N206-0,5 H20: C, 68,56; H, 6,33; N, 5,33. Encontrados: C, 68,51; H, 6,27; N, 5,28. Espectro de massa: (EI; M4) m/z 516. *H RMN (DMSO-d*: 400 MHz) δ 7,9 (d, 2H), 7,72-7,78 (d, 1H), 7,31 *Ί -23- k»- (d, 1H), 7,2-7,26 (m, 4H), 6,95 (d, 1H), 5,9 (s, 2H), 4,12 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,53 (s, 3H), 2,1 pptn (d, 6H). EXEMPLO 9 2- [ 2-(3,4-Dimetoxifenil)-vinil] -5,6-dimetil-lH-benzoimidazoL4,7-diona A uma solução de 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole (2,0 g; 5,4 mmol) em ácido acético (15 ml), nitrato de amónio e cério (7,25 g; 13 mmol) em 15 ml (H20/CH3CN; 3/12) foram adicionados gota a gota. A mistura da reacção foi aquecida a 40° C durante 1 hora. Após arrefecimento, o sólido foi separado por filtração, e o produto filtrado foi concentrado até à secura, foi misturado com água e foi filtrado. O sólido vermelho foi seco a 60° C sob vácuo, foi suspenso em MeOH e tratado com cloreto de hidrogénio para dar origem a 243 mg (rendimento de 13,5%) do composto do título sob a forma de um sólido castanho escuro, um quarto de hidrato, p.f. 248° C dec. Anal. Cale. para Ci9Hi8N2O4-0,25 H20: C, 66,68; H, 5,33; N, 8,22. Encontrados: C, 66,84; H, 5,32; N, 8,09. Espectro de massa: (EI; M+) m/z 338. 1H-RMN (DMSO-dô; 400 MHz) Ô, 7,6-7,67 (d, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,1-7,14 (dd, 1H), 6,9-7,0 (d, 1H), 6,94-6,98 (d, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 1,9 ppm (s, 6H). EXEMPLO 10 (E)-5-Nitro2-(2-piridin-4-il-vinil)-lH-benzoiniidazole

Uma mistura de ácido 4-piridil-acrílico (1,6 g; 10 mmol), 4-nitro-1,2-fenilenodiamina (1,5 g; 10 mmol) e ácido polifosfórico (15 g) foi aquecida a 110° C durante 2,5 horas. A mistura da reacção foi arrefecida até 50° C, sendo em seguida vertida para gelo-H20 (100 rui). Material insolúvel foi separado por filtração e o produto filtrado foi basificado até pH 8 com hidróxido de amónio. O sólido (2,3 g) foi submetido a cromatografia "flash" sobre gel de sílica (CH2Cl2/MeOH; 9:1) a fim de proporcionar 735 mg (rendimento de 28%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. acima de 280° C. Anal. Cale. para Ci4H10N4O2: C, 63,15; H, 3,79; N, 21,04. Encontrados: C, 62,92; H, 3,78; N, 21,08. Espectro de Massa: (EI; ΝΓ) m/z 266. *H RMN (DMSO-d*; 400 MHz) δ 13,44 ( s amplo, 1H), 8,63 (dd, 2H), 8,35-8,55 (d amplo, 1H), 8,03-8,18 (s amplo, 1H), 7,69-7,83 (s amplo, 2H), 7,65-7,7 (dd, 2H), 7,52-7,59 ppm (s, 1H). EXEMPLO 11 Passo 1

Hidrocloreto de 2-furanacriloimidato

Uma solução de 2-furanacrilonitrilo (10,9 g; 91 mmol) em EtOH (75 ml) foi arrefecida num banho de gelo. A mistura fria foi então saturada com cloreto de hidrogénio. A solução da reacção foi refrigerada durante 18 horas. A mistura da reacção foi concentrada até 20 ml e foi adicionado éter dietílico. O sólido castanho deu origem a 10,5 g (rendimento de 63%) de hidrocloreto de 2-Furanacriloimidato o qual foi usado na reacção seguinte.

Passo 2 (E)-2-(2-Furan-3-il-vinil)-5-nitro-lH-benzoimidazole

Uma mistura de 4-nitro-l,2-fenilenodiamina (1,53 g; 10 mmol) e hidrocloreto de 2-furan-acriloimidato (2,21 g; 11 mmol) em etanol (50 ml) foi submetida a refluxo durante 4 horas. A solução foi concentrada até à secura. O resíduo foi dissolvido em MeOH e foi tratado com carvão, para se obter 660 mg (rendimento de 25%) do composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 230-233° C. Anal. Cale. para Q3H9N3O3: C, 61,18; H, 3,55; N, 16,46. Encontrados: C, 60,97; H, 3,29; N, 16,15. Espectro de massa: (EI, M*) m/z 255. *H RMN (DMSO-d^; 400 MHz) δ 13,2 (s amplo, 1H), 8,4 (s amplo, 1H), 8,1 (dd, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,62-7,8 (m, 2H), 6,92-7,0 (d, 1H), 6,88 (d, 1H), 6,6 ppm (d, 1H).

Lisboa, 19 de Outubro de 2001

ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims (21)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Um composto da fórmula I ou II:

   em que R é furilo, piridilo, fenilo ou fenilo substituído com alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono; Ri e R2 são hidrogénio, halogénio, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono; R3 é hidrogénio ou benzilo substituído com alcoxicarbonilo com de 2 a 6 átomos de carbono; R4 e R5 são hidrogénio ou metilo; contanto que na fórmula I, Ri, R2 e R3 não sejam todos hidrogénio e contanto que quando R seja fenilo ou piridilo, um de entre Ri e R2 não é nitro quando o outro hidrogénio, e contanto que o composto da fórmula I não seja 2-[2-(3,4-dimetoxifenilo)-vinil]]-5-nitro-lH-benzimidazole ou 2-[2-(4-metoxifenil)-vinil]-5-nitro-1 H-benzimidazole.
2. 2. Um composto da fórmula I que é

   em que Rt e R2 são hidrogénio, halogénio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono, contanto que Ri e R2 não sejam ambos hidrogénio e contanto que um de entre R] e R2 não seja nitro quando o outro é hidrogénio; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
3. 3. Um composto que é (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
4. 4. Um composto que é 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5-meto-xi-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. 5. Um composto que é {2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazol-5-il}-fenil-metanona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6. 6. Um composto que é 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Um composto que é éster metílico de ácido (E)-2-[2-(3,4- dimeloxifenil)-vinil]-lH-beiiz,uimidazole-5-caibox.ílico ou um seu sal fariuaceu-ticamente aceitável.
8. 8. Um composto que é ácido (E)-2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-lH-benzoimidazole-5-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
9. 9. Um composto que é éster metílico de ácido 4-{2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetilbenzoimidazol-l-ilmetil}-benzóico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. 10. Um composto que é 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-5,6-dimetil-lH-benzoimidazol-4,7-diona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11. 11. Um composto que é (E)-5-nitro2-(2-piridin-4-il-vinil]-1H-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
12. 12. Um composto que é (E)-2-(2-furan-3-il-vinil]-5-nitro-lH-benzoimidazole ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. 13. Um composto da fórmula I ou II:

    em que R é fenilo ou fenilo substituído com halogénio, hidroxilo, alcoxi -4- com de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, trifluorometilo, ou R é furilo, piridilo ou quinolinilo; Ri e R2 são hidrogénio, halogénio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono; R3 é hidrogénio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, ou benzilo substituído facultativamente com alcoxicarbonilo com de 2 a 6 átomos de carbono; Rt e R5 são hidrogénio ou alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, contanto que na fórmula I quando R seja fenilo, furan-3-ilo, ou pirid-3-ilo, Rt, R2 e R3 não são todos hidrogénio, e quando R é fenilo substituído e um de entre Ri ou R2 é hidrogénio, cloro ou nitro e o outro é hidrogénio, então R3 não é hidrogénio, metilo ou benzilo, e ainda contanto que quando R3 seja benzilo, R não é estiril benzimidazole ou 2,4-diclorostiril benzimidazole; e contanto que quando Rj ou R2 seja H, nitro ou cloro e R3 seja hidrogénio, então R não é fenilo cloro-substituido, e contanto que quando um de entre Ri ou R2 seja bromo e R3 seja hidrogénio então R não é fenilo ou fenilo substituído com 2-,2,6- ou 4-cloro, 2- ou 4-hidroxilo, 3-nitro ou 3-metoxi-4-hidroxi; e ainda contanto que quando R seja 2-furilo e um de entre Ri ou R2 seja nitro, então R3 não é hidrogénio, para utilização no tratamento de mamíferos.
14. 14. Um composto da fórmula: 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole; ou éster metílico de ácido 4-[2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6- dimctilbcnzoimidazol-1 -ilmctilj-bcnzóico; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento de mamíferos.
15. 15. Um composto de acordo com a reivindicação 13 ou 14 para utilização no tratamento de doenças ou condições relacionadas com proliferação de células musculares lisas.
16. 16. Um composto de acordo com a reivindicação 15 em que a referida proliferação de células musculares lisas se manifesta como restenose a seguir a angioplastia.
17. 17. Utilização de um composto da fórmula I ou II:

    em que R é fenilo ou fenilo substituído com halogénio, hidroxilo, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, trifluorometilo, ou R é furilo, piridilo ou quinolinilo; Ri e R2 são hidrogénio, halogénio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi com de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo com de 2 a 7 átomos de carbono ou ariloxicarbonilo com de 7 a 12 átomos de carbono; -6- R-3 é lildrogéiiio, alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono, ou benzilo substituído facultativamente com alcoxicarbonilo com de 2 a 6 átomos de carbono; R4 e R5 são hidrogénio ou alquilo com de 1 a 6 átomos de carbono; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para a prevenção de proliferação de células musculares lisas num mamífero.
18. 18. Utilização de um composto da fórmula: 2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vmil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetil-lH-benzoimidazole; ou éster metílico de ácido 4-{2-[2-(3,4-dimetoxifenil)-vinil]-4,7-dimetoxi-5,6-dimetilbenzoimidazol-l-ilmetil}-benzóico; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para a prevenção de proliferação de células musculares lisas num mamífero.
19. 19. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 17 ou 18, em que a referida proliferação de células musculares lisas se manifesta como restenose a seguir a angioplastia.
20. 20. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula I ou II de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
21. 21. Um processo para a preparação de um composto da fórmula I ou II tal como é definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 18, que compreende: (a) fazer reagir um nitrilo da fórmula 1 -7- .CN 1 fórmula 2: com um álcool e cloreto de hidrogénio para formar o composto da NH R'/V^'OMe * HCI 2 (b) fazer reagir um composto da fórmula 2 com um composto da fórmula 3:

    na presença de um álcool para formar o composto da fórmula 4: N t N H —<' (c) fazer reagir o composto da fórmula 4 com R3-haleto na presença de um agente de alquilação para formar o composto da fórmula I: R^-<r N

    R. Rj I I *3 (d) e facultativamente fazendo reagir o composto da fórmula 5: -8- OMe Nyk,R4 R^Ti ΓΓ Rí Rj 0Me com (NH4)2Ce(N)3)6 na presença de ácido acético para formar o composto da fórmula II: R3 o II Lisboa, 19 de Outubro de 2001

    ALBERTO CANELAS Agente Oficia! da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA