PT593286E

PT593286E - Intermediarios para a sintese de compostos anti-folato e processos de os obter

Info

Publication number: PT593286E
Application number: PT93308177T
Authority: PT
Inventors: Charles Jackson Barnett; Thomas Michael Wilson
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1992-10-15
Filing date: 1993-10-13
Publication date: 2000-05-31
Also published as: EP0593286A3; EP0593286A2; KR100283539B1; CA2108204A1; DK0593286T3; MX9306396A; IL107229A; ES2140446T3; KR940009153A; HU220619B1; GR3032887T3; DE69327293T2; JPH06211854A; EP0593286B1; HU9302914D0; DE69327293D1; ATE187725T1; US5486614A; HUT68684A; TW274543B

Description

DESCRIÇÃO "INTERMEDIÁRIOS PARA A SÍNTESE DE COMPOSTOS ANTI-FOLATO E PROCESSOS DE OS OBTER"

Esta invenção enquadra-se nos domínios da química farmacêutica e orgânica, e revela novos intermediários que são úteis para a síntese de antimetabolitos do tipo anti-folato que são tetrahidropirido[2,3-d]pirimidinas (derivados de ácido tetrahidrofólico). Esta invenção também inclui a processos de síntese de taiss intermediários. Há bastantes anos que se usam anti-folatos que são tetrahidro-pirido[2,3-d]pirimidinas substituídas como agentes quimioterapêuticos, para tratamento do cancro. Um desses princ'pios activos, o metotrexato, é hoje um dos agentes mais utilizados contra o cancro; e têm sido sintetizados, testados e discutidos na literatura médica e química muitos outros compostos da família do ácido fólico. Estes compostos apresentam diversas actividades ao nível enzimático; inibem enzimas tais como a reductase do dihidrofolato, a sintetase poliglutamato folato, a formiltransferase ribonucleótido glicinamida, e a sintase do itimidilato.

Mais especificamente, um agente antitumoral relacionado com o ácido fólico, o ácido 5,10-dideaza-5,6,7,8-tetrahidrofólico, inibe a transformilase ribonucleótido glicinamida, que é uma enzima indispensável na fase iinicial da biosíntese de novo de purina. Veja-se a Patente E.U.A. N° 4.685.653; J. Med. Chenu 28:914 (1985). Contudo, ainda não se encontra optimizado o processo de síntese do lometrexol e dos seus análogos. -2-

Na EP-A-0 407 212 revelam-se intermediários para a síntese de derivados de lometrexol. A invenção presente proporciona um intermediário novo, e os processos de o sintetizar, que é útil para a optimização do processo de síntese de derivados de ácido tetrahidrofólico. A invenção presente diz respeito a compostos com a fórmula

em que R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) ou alcoxilo(CrC4); R1 é bromo, iodo ou COOR2; R2 é H, alquilo(Ci-C4), fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4), alcoxilo(Cr C4) ou benzilo; e ® é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(CrC4) e alcoxilo(Ci-C4); ou um seu sal. -3-

Esta patente também diz respeito a um processo de síntese de uma tetrahidropirido[2,3-d]pirimidinas com a fórmula -3-

formula III em que R1 e Θ têm o significado que lhes foi atribuído acima, o qual inclui

(a) fazer reagir um composto com a fórmula I

Rl H

formula I na qual R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter substituintes; e R1 é bromo, iodo ou COOR2; R2 é H, alquilo(Ci-C4), fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Cj-C4), alcoxilo(C]-C4) ou benzilo; e -4- ® é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(CrC4); ou um seu sal, com um agente sulfiirizante. (b) ciclizar o produto obtido na reacção (a) com guanidina; e (c) opcionalmente sintetizar um sal do produto obtido na reacção (b).

Um aspecto suplementar desta invenção inclui a utilização de apenas os passos (b) e (c) do processo descrito acima.

Para além disto, esta invenção diz respeito a um outro processo de sintetizar compostos com a fórmula III

na qual R1 é COOR2; R2 é H; e ® é um grupo arilo definido acima; ou um seu sal, o qual inclui

(a) fazer reagir um composto com a fórmula I

H formula I R02C ( em que R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) ou alcoxilo(Cr C4); R1 é COOR2; R2 é í-butilo; e O é um grupo arilo definido acima; ou um seu sal, com um agente de sulfurização;. (b) tratar o produto da reacção resultante do passo (a) com um ácido forte; (c) ciclizar o produto resultante do passo (b) com guanidina; e (d) sintetizar opcionalmente um sal do produto do passo (c) -6-

Um outro aspecto desta invenção diz respeito à utilização de apenas os passos (c) e (d) descritos no parágrafo imediatamente anterior.

Ainvenção presente diz respeito a novos compostos intermediários que são úteis na síntese de derivados de tetrahidropirido[2,3-d]pirimidinas, e a processos de os obter.

As tetrahidropirido[2,3-d]pirimidinas, e em particular os derivados de ácido 5,10-dideaza-5,6,7,8-tetrahidrofólico tais como o SSATHF (lometrexol, fórmula IV abaixo) têm efeito inibidor de um ou mais dos enzimas que utilizam como substrato o ácido fólico, e em particular derivados metabólicos do áacido fólico. Nos animais cujo crescimento depende desses enzimas, os neoplasmas podem ser tratados administrando a esses animais uma quantidade eficaz deste tipo de princípio activo. Por essa razão, tanto os compostos intermediários desta, v invenção como os processos de os sintetizar são úteis para a síntese de tetrahidropirido[2,3-d]pirimidinas que podem ser utilizadas no tratamento de neoplasmas que sejam susceptíveis a elas, em animais, em especial em humanos.

Mostra-se abaixo o sistema de numeração utilizado para o grrupo tetrahidropirimidina do composto com fórmula IV. Utiliza-se exactamente o mesmo sistema de numeração para compostos com a fórmula III.

-7- r E aparente da fórmula IV acima que a configuração do grupo ácido glutâmico está representada de forma não ambígua. Este grupo ácido glutâmico tem a configuração L em todos os compostos revelados neste documento. Existe adicionalmente um centro de quiralidade na posição 5 dos compostos com fórmulas I e II e na posição 6 dos compostos com fórmulas III e IV. Quando tal se tomar vantajoso, podem separar-se os enantiómeros individuais (compostos com fórmulas I-III) ou os diastereómeros (compostos com fórmula IV) pelos métodos de resolução habituais. Todos os enantiómeros e diastereómeros separáveis por esses métodos estão incluídos no âmbito desta invenção.

Existe ainda um centro de quiralidade na posição 3 dos compostos com fórmulas I e II. No entanto este centro de quiralidade é eliminado aquando da ciclização com guanidina, e a sua configuração inicial não afecta nem a direcção nem a eficiência do processo.

Os compostos com fórmulas III e IV existem em equilíbrio tautomérico com os correspondentes compostos 4(3H)-oxo. Mostra-se abaixo para efeito de ilustração esse equilíbrio para o sistema piridopirimidina:

OH

O

Representa-se por comodidade o tautómero 4-hidroxi para os compostos com fórmulas III e IV, e utiliza-se a nomenclatura correspondente todo ao longo deste documento. No entanto, deve entender-se que essas formas de referência se destinam a incluir ambas as formas tautoméricas, incluindo -8- portanto as formas 4(3H)-oxo.

Para além disso, os compostos com a fórmula II (incluindo os de fórmulas lia e Ilb, veja-se a Equação 2 adiante) existem em equilíbrio tautomérico com os compostos 2-mercapto correspondentes. Representa-se por conveniência na fórmula II a forma 2-tiocarbonilo, e utiliza-se a correspondente nomenclatura todo ao longo deste documento. No entanto deve entender-se que essas formas de referência se destinam a incluir ambas as formas tautoméricas, incluindo os compostos 2-mercapto. A expressão "alquilo(Ci-C4)" significa cadeias alifáticas lineares ou ramificadas com 1 a 4 átomosa de carbono, incluindo metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo e tert-butilo (í-butilo). A expressão "fenilo que pode opcionalmente ter substituintes" significa um grupo fenilo substituido ou não, podendo ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) ou alcoxilo(Cr c4). A expressão alcoxilo(Ci-C4) representa um grupo alquilo(Ci-C4) ligado através de uma ponte oxigénio, tal como, por exemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, e outros semelhantes. A expressão "um grupo arilo que pode ser substituído" tal como utilizada na descrição da estrutura em anel identificada como © nas formulas I, II, III e IV significa grupos aromáticos com 5 ou 6 membros, incluindo grupos heterocíclicos contendo não mais de três heteroátomos (por exemplo N, O e S), tais como, por exemplo, fenilo, tienilo, piridilo, furilo, e outros semelhantes. Destes grupos aromáticos são preferidos os 1,4-fenileno, 2,5-tiofeno e 2,5-furano. Esses grupos aromáticos podem opcionalmente ser substituídos, para além de com o grupo R1, com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(Ci-C4).

Os grupos protectores de carboxilo de R e R , quando R não é H, denotam grupos que em geral se não encontram nos compostos terapêuticos finais, mas que são intencionalmente introduzidos durante uma parte do percurso sintético para proteger grupos que de outra forma poderiam regir durante as transformações químicas operadas, e que são removidos mais adiante no percurso sintético. Uma vez que a maior importância dos compostos que tenham os referidos grupos é a de intermediários no processo sintético, (embora alguns destes derivados também exibam actividade biológica), não é factor crítico a sua estrutura detalhada. São descritas em diversos trabalhos de índole geral as várias reacções para introdução e remoção desses tipos de grupo, incluindo por exemplo "Protective Groups in Organic Chemistrv". Plenum Press, (Londres e Nova Iorque, 1973); Greene, Th.W., "Protective Groups in Organic Svnthesis". Wiley, (Nova Iorque, 1981); e "The Peptides". Vol. I, Scroõder e Lubke, Academic Press, (Londres e Nova Iorque, 1965).

Incluem-se nos exemplos representativos de grupos R protectores de carboxilo os grupos alquilo(Ci-C4) e fenilo, que pode ser substituído. Incluem-se nos exemplos representativos de grupos R quando R não é H, os grupos alquilo(Ci-C4), fenilo que pode ser substituído, ou benzilo. Estes grupos podem ser removidos de forma selectiva em condições suficientemente suaves para que não seja alterada a estrutura desejada do resstante da molécula. - 10-

<y

Quando R não é H é preferível que R e R não sejam o mesmo grupo. Assim, os grupos R preferidos são alquilo(Ci-C4), em especial etilo; quando R é etilo, o grupo R preferido é í-butilo. O processo e os compostos desta invenção incluem também sais dos compostos definidos pelas fórmulas acima. Os compostos desta invenção podem possuir um centro suficientemente ácido, ou suficientemente básico, e dessa forma reagir com uma de entre uma série de bases inorgânicas, e com ácidos orgânicos ou inorgânicos, para formar sais. Os ácidos mais habitualmente utilizados para formar sais de adição de ácido são ácidos inorgânicos tais como o ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido sulfurico, ácido fosfórico, e outros semelhantes, e ácidos orgânicos tais como o ácido /7-toluenos-sulfónico, ácido metanossulfónico, ácido oxálico, ácido /j-bromofenilsulfónico, ácido carbónico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido acético, e outros semelhantes. São portanto exemplos deste tipo de sais o sulfato, piros-sulfato, bissulfato, sulfito, bissulfito, fosfato, monohodrogenofosfato, dihidroge-nofosfato, metafosfato, pirofosfato, cloreto, brometo, iodeto, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formiato, isobutirato, caproato, heptanoato, propio-lato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebaciato, fumarato, maleato, butino-1,4-dioicato, hexino-l,6-dioicato, benzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dini-trobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilenossulfo-nato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato, gama-hidroxibu-tirato, glicolato, tartarato, metanossulfonato, propanossulfonato, naftaleno-1-sulfonato, naftaleno-2-sulfonato, mandelato, e outros semelhantes. Os sais de adição de ácido preferidos são os formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico e ácido bromídrico, e os formados com ácidos orgânicos tais como ácido maleico e ácido metanossulfónico.

Incluem-se nos sais de adição de base os obtidos de bases inorgânicas, tais como amoníaco, álcalis ou hidróxidos de metais alcalinoterrosos, carbonatod, bicarbonatos, e outros semelhantes. Incluem-se portanto no número dessas bases úteis para sintetizar os sais desta invenção os hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de amónio e carbonato de potássio.as formas salinas de sódio e de potássio são particularmente preferidas. É evidente que, quando as formas salinas dos compostos desta invenção venham a ser transformadas nos compostos finais, farmaceuticamente activos, também esses compostos finais poderão existir sob a forma de sais de adição, mas esses sais de adição deverão ser farmaceuticamente aceitáveis. São bem conhecidos dos entendidos na matéria os processos para síntese de sais de adição de ácido, de sais de adição de base, e de sais farmaceuticmente aceitáveis (salificação).

Incluem-se nas matérias primas preferidas para a síntese dos compostos da invenção presente as 2-oxo-3-(alquilo(Ci-C4))carboxi-5-[(4-bromo-ou 4-iodofenil)etil]piperidina, ou 2-oxo-3-(alquilo(Ci-C4))carboxi-5-[(4-carboxi-fenilo protegido)etil]piperidina, (todas com a fórmula I abaixo), na dependência do tipo de substituinte R1 que seja desejado. Incluem-se noutras matérias primas preferidas as 2-oxo-3-(alquilo(Ci-C4))carboxi-5-[(5-bromo- ou 5-iodotienil ou -furanil)etil]piperidina ou 2-oxo-3-(alquilo(Ci-C4))carboxi-5-[(5-carboxitienilo ou carboxifuranilo protegidojpiperidina, também correspondentes à fórmula I abaixo. Discute-se a seguir à Equação 2 o uso e a adequabilidade de utilização dos diversos substituintes R1, bromo, iodo, carboxilo ou carboxilo substituído. É conhecida, por constar da literatura química, a síntese destas matérias primas (veja-se, por exemplo, Bamet, et al., Tetrahedron Letters, 30: 6291-6294 (1989) e Bamett, et al., Patente E.U.A. N° 5.008.391, respectiva-mente).

Deve notar-se, em relação aos compostos com a fórmula I em que R1 é bromo ou iodo, que o halogéneo desejado está presente nesta matéria prima antes do primeiro passo da síntese de compostos com as fórmulas III ou IV, e que pode conservar a sua identidade antes do acoplamento dos compostos com a fórmula III com ácido L-glutâmico para se obterem os derivados de ácido tetrahidrofólico que saõ terapeuticamente activos.

De igual forma, também se encontram presentes naquela posição os grupos carilcarboxilo protegidos dos compostos com a fórmula I antes do Λ primeiro passo do processo. Incluem-se nos grupos protectores de carboxilo R os grupos alqilo(Ci-C4), fenilo, que pode ser substituído, ou benzilo. Tal como foi mencionado acima, os compostos com a fórmula I possuem um centro de quiralidade localizado na posição 5- do anel de piperidina, podendo os diastereómeros resultantes de diversa substituição nessa posição ser separados e purificados. Nas condições reaccionais utilizadas nos processos desta invenção, qualquer dos diastereómeros mantém a sua configuração tridimensional ao longo de todo o processo. Nestas condições, se se pretender obter o isómero 6R de um composto com a fórmula III ou com a fórmula IV, deve selecccionar-se como matéria prima o isómero 5R do correspondente composto de fórmula I..

Num dos processos, sulfuriza-se um composto com a fórmula I para se obter uma tiopiperidona (fórmula II), que é então ciclizada ao composto com a fórmula III. Este processo é novo e ilustra-se na equação 1.

Equação I

formula I (a) sulfurização

(b) ciclização formula II

formula III em que R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ser substituído; R1 é bromo, iodo ou COOR2; R2 é H, alquilo(Ci-C4), fenilo que ser substituído ou benzilo; ^ é um grupo arilo que pode ser substituido; ou um seu sal.Tal como se mencionou acima, podem opcionalmente salificar-se os compostos com a fórmula III utilizando processos bem conhecidos. O primeiro passo da Equação I é uma sulfurização de um composto com a fórmula I. Embora possam ser utilizados diversos agentes de sulfurização, tais como o reagente de Lawesson (veja-se, por exemplo, "Organic Svnthesis Higblights". Mulzer, et al., Weinheim, Nova Iorque, 1991) neste passo, leva-se a cabo esta sulfurização, de preferência, com pentassulfureto de fósforo.

Utiliza-se uma quantidade de agente de sulfurização apropriada a qual seja suficiente para efectuar a sustituição do grupo 2-carbonilo do anel de piperidona por um grupo tiocarbonilo. Em geral utiliza-se um equivalente de agente de sulfurização por equivalente de piperidona. De preferência utiliza-se um excesso de agente sulfiirizante. O primeiro passo ilustrado na Equação I é levado a cabo na presença de um solvente apropriadamente inerte ou substancialmente inerte, ou de uma mistura de solventes. Prefere-se um solvente tal como tetrahidrofurano. A temperatura a que este passo reaccional é conduzido deve ser suficientemente elevada para que a reacção de sulfurização seja completa. É típico que seja suficiente uma temperatura de entre cerca de 50°C e cerca de 70°C, enquanto que se prefere uma temperatura de cerca de 60°C. A duração deste passo de sulfurizaçaõ pode variar, a reacção pode levar desde uns poucos minutos até diversas horas. Pode determinar-se a duração óptima deste passo recorrendo às técnicas cromatográfícas habituais, tais como cromatografía em camada fina, cromatografia líquida de alta eficiência, ou cromatografia em coluna. -15-

No segundo passo da Equação 1, faz-se reagir a tiopiperidona de fórmula II com guanidina, num solvente apropriado,, formando-se um composto com a fórmula III. Para que ocorra esta ciclização pode fomecer-se a guanidina sob forma de um sal, mas este sal deve primeiro ser transformado na base livre por reacção com uma base. Portanto é preferível utilizar a guanidina sob forma de base livre neste passo da reacção. São solventes apropriados quaisquer solventes, ou misturas de solventes, que permaneçam inertes, ou substancialmente inertes, nas condições reaccionais. Incluem-se como exemplos típicos de solventes apropriados os álcoois alifáticos com um a quatro átomos de carbono, tais como metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol e 2-metil-2-propanol. Destes, prelere-se o etanol.

As quantidades apropriadas de guanidina são aquelas que sejam suficientes para reagir com a totalidade do composto com fórmula II proveniente do passo (a) da reacção ilustrada na Equação 1. Utiliza-se em geral entre uma quantidade de um equivalente a um excesso de guanidina, por equivalente de composto com fórmula II. De preferência utiliza-se um excesso de guanidina.

Este processo desenrola-se tipicamente durante períodos de tempo curtos a temperaturas elevadas, mas a duração do reacção variará com as condições experimentais utilizadas. Quando levada a cabo à temperatura preferida de cerca de 90°C, esta reacção leva entre cerca de 10 a cerca de 30 minutos. No entanto pode efectuar-se esta reacção a temperaturas entre cerca de 70°C e cerca de 100°C.

Cada passo do processo novo ilustrado na Equação 1 pode ser conduzido por forma a que o produto resultante seja isolado e purificado.Não só é - 16- ηοο ο proceso ilustrado na Equação 1, na sua íntegra, mas é também independentemente novo o processo ilustrado no segundo passo, no qual ocorre a ciclização de uma tiopiperidona com a fórmula II com guanidina [passo (b)]. É preferível levar a cabo ambos os passos ilustrados na Equação 1 num mesmo reactor e de seguida, num processo que envolve fazer-se reagir um composto com fórmula I com um agente sulfurizante, e ciclizar o produto resultante da reacção anterior (um composto com fórmula II) por reacção com guanidina. Os compostos com fórmula II são eles próprios novos, e são úteis como intermediários para a síntese de derivados de ácido tetrahidrofólico.

Em alternativa, prefere-se utilizar o processo novo ilustrado na Equação 2 abaixo quando se pretenda sintetizar intermediários com a fórmula II em que R1 seja COOR2 e R2 seja Η. A matéria prima preferida é neste caso um composto de fórmula I em que R1 é COOR2 e R2 é í-butilo. No entanto, ao comparar-se com o processo ilustrado na equação 1, verifica-se que neste caso é preferível incluir um passo suplementar.

Equação 2

• · 1 f 2 2 em que R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode ser substituído, R é COOR , R é /¾ /-butilo, ewéé um grupo arilo que pode ser substituído; - 17- (a) sulfurização

formula Illa - 18- em que © é um grupo arilo que pode ser substituído, ou um sal desse composto.O produto da reacção do passo (c) pode também ser salificado, como se referiu acima.

Os passos (a), (c) e (d) do processo ilustrado na Equação 2, incluindo os reagentes e condições reaccionais a utilizar em geral e os preferidos, são os mesmos que se utilizam nos passos (a), (b) e (c), respectivamente, descritos acima para a Equação 1. Na Equação 2 há contudo um passo adicional preferido que consiste na transformação da tiopiperidona de fórmula Ha na sua forma de ácido [passo (b)], dessa forma se obtendo compostos com a fórmula Ilb. Não é essencialmente necessário transformar as piperidonas protegidas com a fórmula lia nos correspondentes ácidos antes de efectuar a ciclização com guanidina. No entanto é preferível desproteger o grupo carboxilo antes de levar a cabo a ciclização porque o grupo carboxilo protegido com R poderá reagir com a guanidina conduzindo a resultados indesejáveis.

Por esta razão, a selecção do grupo f-butilo como substituinte R como se ilustra na equação 2, permite transformar o respectivo éster numa função ácido utilizando um catalisador ácido [passo (b)]. Os catalisadores ácidos apropriados podem ser quaisquer compostos orgânicos ou inorgânicos que facilitem a remoção do grupo protector í-butilo do grupo ácido benzóico do composto com fórmula lia. Esses catalisadores são bem conhecidos dos entendidos. Veia-se. por exemplo, "Protective Groups in Organic Chemistry". J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, ( Nova Iorque, 1973) e T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Svnthesis". John Wiley and sons, (Nova Iorque, 1981). No entanto o catalisador ácido preferido é o ácido trifluoroacético, em especial quando seja utilizado em excesso substancial por equivalente de substrato presente. -19-

Pode afirmar-se que, de forma geral, este passo da reacção ocorre quase instantaneamente, mas o período de tempo necessário dependerá da escolha feita quanto ao catalisador ácido e da eficácia que ele demonstrar relativamente ao processo.

Embora outros grupos alquilo(Ci-C4) também pudessem ser removidos por forma a obter-se o ácido correspondente, a presença de í-butilo 'y como substituinte R assegura que a referida remoção se possa dar sem outra hidrólise ou substituição, permanecendo incólume o substituinte R. Transformando o grupo R deixando o grupo R com a sua estrutura inicial favorece a ciclização no local desejado enquanto elimina a possibilidade potencial de reacção da guanidina com o grupo R .

Pode levar-se a cabo cada um dos passos deste processo novo por si só, isolando e purificando cada um dos produtos reaccionais sucessivamente obtidos. Prefere-se, no entanto, combinar as diversas transformações ilustradas na Equação 2 num processo que se vai desenrolando num só reactor, e que inclui a reacção de um composto com a fórmula I com um agente sulfurizante, o tratamento do produto da reacção anterior com um ácido forte, e a ciclização do produto do passo (b) com guanidina. A reacção de um composto com a fórmula Ilb com guanidina é, independentemente, um novo processo.

Pode facilmente transformar-se o produto da reacção final tanto da Equação 1 como da Equação 2, que é um composto com a fórmula III, por métodos conhecidos, num derivado terapeuticamente activo do ácido tetrahidrofólico.

Em geral, substitui-se o substituinte R1 dos compostos com fórmula III, quando R1 é bromo ou iodo, por um substituinte ciano, por reacção com um sal de cianeto tal como cianeto de cobre na presença de N-metilpirrolidina. Hidroliza-se então o grupo nitrilo para se obter um composto com a fórmula II com um grupo carboxilo ou carboxilo protegido (veja-se, por exemplo, a Patente E.U.A. N° 5.008.391).

Acopla-se o composto com fórmula III obtido com um derivado de ácido L-glutâmico protegido pelo processo descrito na Patente E.U.A. N° 4.684.653, utilizando técnicas de condensação habituais para formaação de ligações peptídicas. Hidroliza-se então o derivado de ácido L-glutâmico protegido para remover os grupos protectores ainda presentes.

Os exemplos seguintes ilustram em pormenor os novos compostos e os processos de os sintetizar, no âmbito desta invenção. Não se pretende que estes exemplos sejam limitativos do âmbito desta invenção nem deles se deve fazer uma interpretação nesse sentido.

As expressões ponto de fusão, espectro de ressonância magnética nuclear, espectro de massa de impacto electrónico, espectro de massa de desorção de campo, espectro infravermelho, espectro ultravioleta e análise elementar, nos exemplos seguintes, serão abreviados, respectivamente, para p.f., RMN, EM(IE), EM(DC), IV, UV, e Anal.. De um modo geral, listam-se os máximos de absorção com interesse e não necessariamente todod os máximos observados.

Obtiveram-se os espectros de RMN num instrumento General Electric QE-300 de 300 Mhz. Os desvios químicos são expressos como valores de δ (partes por milhão na direcção de campos mais baixos relativamente ao tetrametilsilano) Obtiveram-se os espectros de massa de desorção de campo num Espectrómetro Varian-MAT 731 usando emissores de dendrites de carbono. Obtiveram-se os espectros de massa de impacto electrónico num instrumento CEC 21-110 da Consolidated Electronics Corporation. Obtiveram-se os espectros -21 - de infravermelho num instrumento Perkin-Elmer 281. Obtiveraam-se os espectros de ultravioleta num instrumento Cary 118. Os pontos de fusão são não corrigidos.

Exemplo 1 (5AS',5J?)-2-Tioxo-3-(etilcarboxi-5-[2-(4-bromofenil)etil]piperidina

Aquece-se a 60°C até que a reacção se complete (cerca de 3 horas) uma mistura de 1,12 g (3,16 mmol) de (3/?5’,5i?)-2-oxo-3-etilcarboxi-5-[2-(4-bromofenil)etil]piperidina e 0,77 g (1,74 mmol) de pentassulfureto de fósforo em 20 mL de tetrahidrofurano. Evaporou-se a mistura a um resíduo que se purificou por cromatografia sobre silicagel. Eluiu-se o produto com acetato de etilo-hexano 1:1 para se obterem 0,729 g (61%) de (57?ó,,J/?)-2-tioxo-3-etilcarboxi-5-[2-(4-broinofenil)etil]piperidina (mistura de epímeros em C-3), p.f. 105-115°C, RMN de 'H (300 Mhz, CDC13) δ 9,47 (s, 1H), 7,41 (d, /=8,7 Hz, ); 7,39 (d, /=8,2 Hz, ), no total 2H; 7,02 (d, /=8,7 Hz, 2H), 4,20 (m, 2H)3,94 (m); 3,69 (m), no total 1H, 3,45 (m, 1H), 2,99, (m, 1H), 2,60 (m, 2H), 2,13 (m, 2H), 1,5-1,87 (m, 3H), 1,31 (t, /=7,1 Hz, ); 1,26 (t, /=7,1 Hz, ), no total 3H; IV (CHC13) 2983, 1731, 1540, 1489, 1373, 1073, 1012 cm'1; EM(DC) m/z 371 (100), 369 (75); UV (EtOH) 219,8 nm (ε 13 164), 281,4 (13 557); Anal. Calculado para C16H2oBrN02S: C, 51,90; H, 5,44; N, 3,78. Determinado C, 51,61; H, 5,38; N, 3,88.

Exemplo 2 /?-2-Amino-4-hidroxi-6-[(4-bromofenil)etil]-5,6,7,8--tetrahidropirido[2,3-d]pirimidina

Neutraliza-se uma suspensão de 740 mg (7,77 mmol) de cloreto de -22- guanidínio em 5 mL de etanol por adição de 950 mg (7,77 mmol) de tert-butóxido de potássio. Filtra-se o cloreto de potássio precipitado com um adjuvante de filtração e lava-se estte com mais 5 mL de etanol. Adiciona-se ao filtrado uma solução de 720 mg (1,94 mmol) de (5i?,S,5/?)-2-tioxo-3-(etilcarboxi-5-[2-(4-bromofenil)etil]piperidina em 5 mL de etanol e reduz-se o volume da mistura reaccional a uns 2-3 mL sob vazio. Aquece-se a solução em banho de óleo (T=90 °C) durante 2 h. Depois de arrefecer até à temperatura ambiente, concentra-se a mistura reaccional por evaporação em vazio. Suspende-se o sólido resultante em água, sonica-se para se obter uma suspensão uniforme, e neutraliza-se até pH 7 por adição de Hcl aquoso IN. Aquece-se a suspensão resultante a cerca de 90°C durante 15 min., depois arrefece-se à temperatura ambiente, e filtra-se. Seca-se o produto obtido em vácuo (10 torr) obtendo-se 544 mg (80%) de /?-2-Amino-4-hidroxi-6-[(4-bromofenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidropirido[2,3-d]piirimidina, p.f. 275-283°C, [a]589-30,9° (cl, DMF), RMN de ’H (DMSO-de) δ p,70 (s largo, 1H), 7,40 (d, 7=8,3 Hz, 2H ); 7,12 (d, 7=8,3 Hz, 2H ); 6,23 (d, 7=8,3 Hz, 2H), 5,96 (s, 2H), 3,15 (d largo, 7= 11 Hz, 1H), 2,45 (m, 2H), 1,78 (dd, 7= 8,6, 15,1 Hz, 1H), 1,50 (m, 3H), IV (KBr) 3400, 3343, 1678, 1642, cm'1; EM(IE) m/z 350 (78), 348 (72); 166 (100), 165 (90), 154 (31), 151 (68), 139 (19). O espectro de RMN era idêntico ao de uma amostra de (S)-(+)-3 obtida tal como descrito na Patente E.U.A. N° 5.008.391.

Exemplo 3 Éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-tioxo 3-etiI-carboxipiperidin-5-il]etil)benzóico

Aquece-se a 60°C até que a reacção se complete uma mistura de 3,75 g (10,0 mmol) de éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-oxo-3-etilcarboxipiperidin-5il]etil)benzóico e 2,44 g (5,5 mmol) de pentassulfureto de -23- fósforo em 70 mL de tetrahidrofurano. Evaporou-se a mistura a um resíduo que se purificou por cromatografia sobre silicagel obtendo-se o éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-amino-4(lH)-oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[2,3-d]pi rimidin-6-il] etil)benzóico

Exemplo 4 Éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-amino-4(lH)-oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[2,3-d]pirimidin-6-iI]etil)benzóico

Neutraliza-se uma suspensão de 764 mg (8,0 mmol) de cloreto de guanidínio em 5 mL de etanol por adição de 976 mg (8,0 mmol) de fórí-butóxido de potássio. Filtra-se o cloreto de potássio precipitado com um adjuvante de filtração e lava-se estte com mais 5 mL de etanol. Adiciona-se ao filtrado uma solução de 783 mg (2,0 mmol) de éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-tioxo-3-etilcarboxipiperidin-5-il]etil)benzóico em 5 mL de etanol e reduz-se o volume da mistura reaccional a uns 2-3 mL sob vazio. Aquece-se a solução em banho de óleo a cerca de 90 °C em corrente de azoto durante cerca de 2 h. Depois de arrefecer à temperatura ambiente, sujeita-se a mistura reaccional a nova evaporação em vazio. Suspende-se o sólido obtido em água, sonica-se, se necessário, por forma a obter-se uma suspensão uniforme, e neutraliza-se a pH 7 por adição de HC1 aquoso IN. Filtra-se suspensão resultante e seca-se, obtendo-se o éster 2,2-dimetiletílico do ácido 4-(2-[2-amino-4(lH)-oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[2,3-d]pirimidin-6-il]etil)benzóico.

Lisboa, 1 de Março de 2000

JORGE CRUZ

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA-

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Compostos com a fórmula II

em que R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) ou alcoxilo(Ci-C4); R1 é bromo, iodo ou COOR1; R1 é H, alquilo(C]-C4), fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(CrC4), alcoxilo(Cr C4) ou benzilo; e Θ é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(C]-C4); ou os seus sais. 1 Compostos da reivindicação 1, nos quais R é etilo, R1 é bromo e ® é 1,4-fenileno, 2,5-tiofeno, ou 2-5-furano. -2- -2- 3. H ou í-butilo, e 4. 5. • 1 eas·*** Compostos da reivindicação 1, nos quais R1 é COOR2, R2 é é ,4-fenileno, 2,5-tiofeno, ou 2-5-furano. Compostos da reivindicação 3 nos quais R2 é í-butilo Um processo de síntese de compostos com a fórmula III

na qual R1 é bromo, iodo ou COOR2; R2 é H, alquilo(Ci-C4), fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4), alcoxilo(Cr C4) ou benzilo; e ® é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(CrC4) e alcoxilo(Ci-C4); ou um seu sal, processo esse que inclui (a) fazer reagir compostos com a fórmula I -3-

na qual R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(Cr C4);R\ R2 e Θ têm o significado atribuído acima; ou os seus sais, com um agente sulfurizante; (b) ciclizar o produto obtido na reacção (a) com guanidina; e (c) opcionalmente salificar o produto obtido na reacção (b).
6. Um processo de síntese de compostos com a fórmula III

na qual R1 é bromo, iodo ou COOR2; R é H, alquilo(Ci-C4), fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4), alcoxilo(Cr C4) ou benzilo; e -4- © é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(Ci-C4); ou os seus sais, processo esse que inclui ciclizar compostos com a fórmula II

na qual R é alquilo(Ci-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(CrC4) e alcoxilo(CrC4); R1, R2 e Θ têm o significado atribuído acima; ou os seus sais, com guanidina; e opcionalmente salificar o produto da referida reacção de ciclização.
7. Um processo de síntese de compostos com a fórmula III

na qual Rl é COOR2; R2 é H; e 0 é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(Ci-C4); ou os seus sais, o qual inclui (a) fazer reagir compostos com a fórmula I

na qual R é alquilo(C|-C4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes seleccionados de entre halo, nitro, alquilo(CrC4) e alcoxilo(Ci-C4); R2 é t-butilo,e R\ e 0 têm o significado atribuído acima; ou os seus sais, com um agente sulfurizante; (b) tratar o produto do passo (a) com um ácido forte; -6-

(c) ciclizar o produto obtido na reacção (b) com guanidina; e (d) opcionalmente salificar o produto obtido na reacção (c).
8. Um processo de síntese de compostos com a fórmula III

na qual R1 é COOR2; R2 é H; e ® é um grupo arilo, proveniente de um anel aromático de 5- ou de 6- membros, incluindo heterocíclicos contendo três heteroátomos ou menos, e pode ser opcionalmente substituído com um ou dois grupos substituintes seleccionados de entre halo, hidroxilo, alquilo(Ci-C4) e alcoxilo(CrC4); ou os seus sais, o qual inclui a ciclização de compostos com a fórmula Ilb

na qual -7- R é alquilo(CrC4) ou fenilo que pode opcionalmente ter um ou dois substituintes de entre halo, nitro, alquilo(Ci-C4) ou alcoxilo(Ci-C4); e © é como acima definido; ou os seus sais, com guanidina; e opcionalmente salificar o produto da referida ciclização. Lisboa, 1 de Março de 2000

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 USBOA