PT2066324E - Derivados de cicloalcanopirrolocarbazole e sua utilização como inibidor de parp, vegfr2 e mlk3 - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO DERIVADOS DE CICLOALCANOPIRROLOCARBAZOLE E SUA UTILIZAÇÃO COMO INIBIDOR DE PARP, VEGFR2 E MLK3

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos compostos multicíclicos e a sua utilização. Mais particularmente, a presente invenção refere-se a novos compostos e a sua utilização multicíclicos, por exemplo, para a mediação da atividade da enzima.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Poli (ADP-ribose) polimerase (PARP, também chamada poli (ADP-ribose) sintetase, ou PARS) é uma enzima nuclear que catalisa a síntese de cadeias de poli (ADP-ribose) a partir de NAD+, em resposta a quebras de ADN de cadeia simples como parte do processo de reparação do ADN (de Murcia et al. Trends Biochem. Sei. 1994, 19.172; Alvarez-Gonzalez et al. Mol. Cell. Biochem. 1994, 138, 33). Os substratos de proteínas associadas com cromatina para a ribosilação do ADP, que incluem histonas, enzimas que metabolizam o ADN e próprio PARP, são modificados nos resíduos de glutamato superficiais. A PARP catalisa a ligação de uma unidade de ADP-ribose com a proteína (iniciação), seguido por polimerização de cerca de 200 monómeros de ADP-ribose (alongamento) , através de ligações de 2'-l" glicosídicas. Além disso, a PARP catalisa a ramificação do polímero a uma frequência menor. O papel da PARP no processo de reparação de ADN não está completamente definido. Sugere-se a ligação da PARP para o ADN de fita dupla cortado para facilitar o processo de 1 reparação pelo bloqueio transitório da replicação do ADN ou recombinação. A subsequente poli (ADP-ribosil)ação da PARP e histonas pode resultar na introdução de uma carga substancialmente negativa, causando repulsão das proteinas modificadas do ADN. A estrutura da cromatina é então proposta para relaxar, aumentando o acesso das enzimas reparadoras de ADN ao local do dano.

Ativação excessiva da PARP, em resposta ao dano celular ou stress tem a hipótese de resultar em morte celular (Sims et al. Biochemistry 1983, 22, 5188; Yamamoto et al. Nature 1981, 294, 284) . A ativação da PARP por quebras no ADN pode ser mediada pelo óxido nítrico (NO) ou vários intermediários reativos de oxigénio. Quando o grau de dano do ADN é grande, a PARP pode catalisar uma quantidade massiva de poli (ADP-ribosil)ção, esgotando os níveis da célula de NAD+. À medida que a célula tenta manter a homeostase por resintetização do NAD+, os níveis de ATP podem diminuir precipitadamente (uma vez que a síntese de uma molécula de NAD+ requer quatro moléculas de ATP) e a célula pode morrer através da depleção das suas reservas de energia. A ativação de PARP foi avaliada para desempenhar um papel na morte celular numa série de estados de doença, sugerindo que os inibidores de PARP teriam efeito terapêutico nessas condições. Tem sido observada que poli (ADP-ribosil)ção reforçada após isquemia cerebral focal no rato, é consistente com a ativação de PARP no acidente vascular cerebral (Tokime et al. J. Cereb. Blood Flow Metab. 1998, 18, 991) . Um substancial corpo de dados farmacológicos e genéticos publicados suporta a hipótese de que os inibidores da PARP seriam neuroprotectores a seguir 2 a uma isquemia cerebral ou acidente vascular cerebral. Os inibidores de PARP protegiam contra NMDA ou NO neurotoxicidade induzida em culturas corticais cerebrais de rato (Zhang et al., Science 1994, 263, 687; Eliasson et al. Nature Med. 1997, 3, 1089) . O grau de neuroprotecção observado para a série de compostos tem paralelo diretamente com a sua atividade como inibidores de PARP.

Os inibidores da PARP também podem exibir eficácia neuroprotectora em modelos animais de acidente vascular cerebral. O potente inibidor de PARP DPQ (3,4-di-hidro-5-[4 -(1-piperidinil) butoxi]-l (2H)-isoquinolinona) (Suto et al., Patente US 5177075) proporcionou uma redução de 54% no volume de enfarte num modelo de rato de isquemia cerebral focal (MCAO permanente e 90 minutos de oclusão bilateral da artéria carótida comum) após a administração ip (10 mg/kg), duas horas antes e duas horas após o inicio do isquemia (Takahashi et al. Brain Res. 1997, 829, 46). A administração intracerebroventricular de um inibidor da PARP menos potente, 3-aminobenzamida (3-AB), produziu um decréscimo de 47% no volume de enfarte em ratos após uma oclusão de duas horas da MCA pelo método do fio de sutura (Endres et al. J. Cereb. Blood Flow Metab. 1997, 17, 1143). O tratamento com 3-AB também aumentou a recuperação funcional 24 horas após a isquemia, atenuou a diminuição do nivel de NAD+ nos tecidos isquémicos, e diminuiu a síntese de polímeros de poli (ADP-ribose), tal como determinado por imuno-histoquímica. Do mesmo modo, a 3-AB (10 mg/kg) reduziu significativamente o volume de enfarte num modelo de oclusão por sutura de isquemia focal no rato (Lo et al. Stroke 1998, 29, 830). O efeito neuroprotector de 3-AB (3-30 mg/kg, icv) também foi observado no modelo da oclusão 3 média permanente da artéria cerebral de isquemia em ratos (Tokime et al. J. Cereb. Blood Flow Metab.1998, 18, 991). A disponibilidade de ratinhos nos quais o gene PARP foi tornado não funcional (Wang, Genes Dev. 1995, 9, 509) também ajudou a validar o papel da PARP na neurodegeneração. A neurotoxicidade, devido à NMDA, NO, ou privação de oxigénio-glicose foi praticamente abolida em culturas primárias cerebrais corticais de PARP_/” em ratos (Eliasson et al. Nature Med. 1997, 3, 1089). No modelo de fio de sutura de isquemia no rato, uma redução de 80% no volume de enfarte foi observada em PARP-/~ em ratos, e uma redução de 65% foi observado em PARP+/“ em ratos. Em Endres et al. (1997), foi reportada uma redução de 35% no volume de enfarte em PARP-/~ em ratos e uma redução de 31% em PARP+/“ em animais. Além da neuroproteção, a PARP_/” em ratos demonstrou uma melhoria nos resultados neurológicos e exibiu niveis de NAD+ aumentados após a isquemia.

Também existe evidência pré-clinica, que sugere que os inibidores da PARP podem ser eficazes no tratamento da doença de Parkinson. Isso ocorre porque a perda de neurónios dopaminérgicos da substância negra é uma caracteristica da doença de Parkinson. O tratamento experimental de animais ou humanos com a neurotoxina 1-metil-4-fenil-l,2,3,6-tetra-hidropiridina (MPTP) replica a perda de neurónios dopaminérgicos e os sintomas motores da doença de Parkinson. A MPTP ativa a PARP na substância negra e os ratinhos a que falta PARP são resistentes aos efeitos neurodegenerativos de MPTP (Mandir et al. Proc. Nat. Acad. Sei. 1999, 96, 5774) . De igual modo, o inibidor de PARP 3-aminobenzamida é relatado atenuar a 4 perda de NAD+ no corpo estriado, após a administração de MPTP a ratinhos (Cosi et al. Brain Res. 1998, 809, 58). A ativação da PARP foi implicada nos défices funcionais que podem resultar de uma lesão cerebral traumática e lesão da medula espinal. Num modelo de impacto cortical controlado de lesão cerebral traumática, a PARP_/“ em ratos exibia função motora e cognitiva significativamente melhorada em comparação com PARP+/+ em ratos (Whalen et al. J. Cereb. Blood Flow Metab. 1999, 19, 835) . A produção de peroxinitrito e a ativação da PARP também têm sido demonstrados em ratos feridos no cordão espinhal (Scott et al. Ann. Neurol. 1999, 45, 120). Estes resultados sugerem que os inibidores da PARP podem proporcionar proteção contra a perda da função seguinte a traumas cerebrais ou da coluna vertebral. O papel da PARP como mediadora da morte celular após isquemia e reperfusão não pode ser limitado ao sistema nervoso. Neste contexto, uma publicação recente relatou que uma variedade de inibidores da PARP estruturalmente distintos, incluindo 3-AB e compostos relacionados, reduz o volume do enfarte após isquemia cardiaca e reperfusão no coelho (Thiemermann et al. Proc. Nat. Acad. Sei. 1997, 94, 679) . No modelo de coração de coelho perfundido isolado, a inibição de PARP reduziu o volume do enfarte e disfunção contráctil após isquemia global e reperfusão. A necrose do músculo-esquelético após isquemia e reperfusão também foi atenuada por inibidores de PARP. Efeitos cardioprotetores de 3-AB similares num modelo de isquemia/reperfusão do miocárdio de ratos foram relatados por Zingarelli e colegas de trabalho (Zingarelli et al. Cardiovascular Research 1997, 36, 205). Estes resultados 5 in vivo são ainda apoiados por dados de experiências em ratos miócitos cardíacos em cultura (Gilad et al. J. Mol. Cell Cardiol. 1997, 29, 2585). Os inibidores da PARP (3-AB e nicotinamida) protegem os miócitos das reduções na respiração mitocondrial observadas após o tratamento com oxidantes, tais como peróxido de hidrogénio, peroxinitrito ou doadores de óxido nítrico. 0 rompimento genético da PARP em ratinhos foi demonstrado recentemente proporcionar proteção contra lesões celulares retardadas e a produção de mediadores da inflamação após isquemia do miocárdio e reperfusão (Yang et al. Schok 2000, 13, 60) . Estes dados suportam a hipótese de que a administração de um inibidor da PARP pode contribuir para um resultado positivo após enfarte do miocárdio. Uma aplicação particularmente útil de um inibidor da PARP pode envolver a administração concomitante com um tratamento concebido para reperfundir a área afectada do coração, incluindo a angioplastia ou a um fármaco de dedissolução tal como tPA. A atividade da PARP também está implicada na lesão celular que ocorre numa variedade de doenças inflamatórias. A ativação de macrófagos por estímulos pró-inflamatórias pode provocar a produção de óxido nítrico e anião superóxido, que se combinam para produzir peroxinitrito, resultando na formação de quebras de ADN de cadeia simples e a ativação de PARP. O papel da PARP como mediadora da doença inflamatória é suportado pelas experiências que empregam PARP_/” em ratos ou inibidores da PARP num número de modelos animais. Por exemplo, as articulações de ratos submetidos a artrite induzida por colagénio contêm nitrotirosina, consistente com a produção de peroxinitrito (Szabo et al. J. Clin. Invest. 1998, 100, 723). O inibidor da PARP 5-iodo-6-amino-l,2-benzopirona reduz a incidência e gravidade 6 da artrite nestes animais, diminuindo a gravidade da necrose e hiperplasia da sinovia, como indicado pelo exame histológico. No modelo de inflamação local aguda, a pleurisia induzida pelo carragenano, a 3-AB inibiu a lesão histológica, a formação de exsudado pleural e a infiltração celular mononuclear caracteristica do processo inflamatório (Cuzzocrea et al. Eur. J. Pharmacology 1998, 342, 67).

Os resultados de modelos de roedores de colite sugerem que a ativação da PARP pode estar envolvida na patogénese da doença inflamatória do intestino (Zingarelli et al. Gastroenterology 1999, 116, 335). A administração de ácido oftrinitrobenzene sulfónico para o lúmen do intestino provoca a erosão da mucosa, a infiltração de neutrófilos e o aparecimento de nitrotirosina. A deleção do gene da PARP ou inibição da PARP por 3-AB diminuiu os danos no tecido e atenuou a infiltração de neutrófilos e a formação de nitrotirosina, sugerindo que os inibidores da PARP podem ser úteis no tratamento da doença inflamatória do intestino.

Um papel para a PARP na patogénese da disfunção do endotélio em modelos de choque endotóxico também foi proposto (Szabo et al. J. Clin. Investir. 1997, 100, 723). Isto é porque a inibição da PARP ou deleção genética da PARP pode proteger contra a diminuição da respiração mitocondrial que ocorre após o tratamento de células endoteliais com peroxinitite. A ativação da PARP está envolvida na indução de diabetes experimental, iniciada pela toxina seletiva da célula beta estreptozocina (SZ) . A Auebra substancial do ADN pode ser 7 induzida pela SZ, resultando na ativação dA PARP e depleção das reservas de energia da célula, como descrito acima em Yamamoto et aL. (1981) . Em células derivadas de PARP_//” em ratos, a exposição a produtos intermediários reativos de oxigénio resulta na depleção atenuada de NAD+ e reforçada viabilidade celular relativa às células do tipo selvagem (Heller et al. J. Biol. Chem. 1995, 270, 11176).

Efeitos semelhantes foram observados em células do tipo selvagem tratadas com 3-AB. Estudos posteriores em ratinhos tratados com SZ indicaram que a deleção do gene PARP proporciona proteção contra a perda de células beta (Burkart et al. Nature Med. 1999, 5, 314; Pieper et al.

Proc. Nat. Acad. 1999, 96, 3059). Estas observações sustentam a hipótese de que um inibidor de PARP pode ter utilidade terapêutica no tratamento de diabetes do tipo I.

Outra utilidade terapêutica potencial dos inibidores da PARP envolve o aumento da atividade anti-tumoral de agentes quimioterapêuticos ou radiação que danificam o ADN (Griffin et al. Biochemie 1995, 77, 408). Uma vez que a poliADP ribosilação ocorre em resposta a estes tratamentos e é parte do processo de reparação do ADN, um inibidor da PARP pode ser esperado proporcionar um efeito sinérgico. Como a PARP, as proteínas quinases desempenham um papel crítico no controle de células. Em particular, as quinases são conhecidas por estarem envolvidas no crescimento e diferenciação celular. A expressão aberrante ou as mutações nas proteínas quinases têm sido mostradas conduzir a proliferação descontrolada de células, tais como o crescimento de tumor maligno e diversos defeitos nos processos de desenvolvimento, incluindo a migração celular e a invasão, e a angiogénese. Proteína quinases são, por conseguinte, críticas para o controlo, regulação, e 8 modulação da proliferação celular nas doenças e desordens associadas com a proliferação celular anormal. A proteína quinase, também tem sido implicada como alvo em distúrbios do sistema nervoso central tais como a doença de Alzheimer, distúrbios inflamatórios tais como a psoríase, doenças ósseas, tais como osteoporose, aterosclerose, restenose, trombose, doenças metabólicas como a diabetes e as doenças infecciosas, tais como as infecções por vírus e fungos.

Uma das vias mais estudadas, envolvendo a regulação da quinase é uma sinalização celular a partir de receptores na superfície da célula para o núcleo. Geralmente, o padrão de expressão, disponibilidade de ligando e o conjunto de vias de transdução de sinal a jusante que são ativados por um receptor particular, determinam a função de cada receptor. Um exemplo de uma via inclui a cascata de quinases na qual os membros dos receptores de quinases do factor de crescimento de tirosina proporcionam sinais através da fosforilação de outras quinases, tais como tirosina-quinase Src e famílias de serina/treonina-quinase Raf, Mek e Erk. Cada uma destas quinases representada por diversos membros da família desempenha papéis distintos mas funcionalmente relacionados. A perda de regulação do factor de crescimento da via de sinalização é uma ocorrência frequente no cancro bem como outros estados de doença (Fearon, Genetic Lesions in Human Câncer, Molecular Oncology 1996, 143-178).

Um receptor da via de sinalização da tirosina quinase inclui a quinase do receptor do factor de crescimento endotelial vascular (VEGF). Tem sido mostrado que a ligação de VEGF ao receptor VEGFR2 afecta a proliferação celular. Por exemplo, a ligação de VEGF ao receptor VEGFR- 9 2/flt-l, que é expresso principalmente em células endoteliais, resulta na dimerização do receptor e iniciação de uma cascata complexa que resulta no crescimento de novos vasos sanguíneos (Korpelainen e Alitalo, Curr. Opin. Cell. Biol. 1998, 10, 159). A supressão da formação de novos vasos sanguíneos através da inibição das quinases de tirosina de VEGFR teria utilidade numa variedade de doenças, incluindo o tratamento de tumores sólidos, retinopatia diabética e outras síndromes neovasculares intra-oculares, degeneração macular, artrite reumatóide, psoríase e endometriose.

Uma transdução de sinal da quinase adicional é a via da quinase da proteína ativada pelo (SAPK) (Ip e Davis Curr. Opin. Cell Biol. 1998, 10, 205). Em resposta a estímulos, tais como citocinas, choque osmótico, choque térmico, ou outras tensões ambientais, a via é ativada e é observada a dupla fosforilação de resíduos Thr e Tyr dentro do motivo Thr-Pro-Tyr das cinases de N-terminal c-Jun (JNKs). A fosforilação ativa os JNKs para a fosforilação subsequente e a ativação de vários fatores de transcrição, incluindo c-Jun, ATF2 e ELK-1.

As JNKs são proteínas quinases ativadas por mitogénio (MAPKs) que são codificadas pelos três genes distintos, jnkl, jnk2 e jnk3, que podem ser alternativamente emendados para originar uma variedade de diferentes isoformas JNK (Gupta et al., EMBO J. 1996, 15, 2760) . As isoformas diferem na sua capacidade de interagir e fosforilar os seus substratos alvo. A ativação de JNK é realizada por duas quinases ΜΑΡΚ (ΜΑΡΚΚ) , MKK4 e MKK7. MKK4 é um ativador de JNK assim como uma MAPK adicional, p38, enquanto MKK7 é um ativador seletivo de JNK. Uma série de quinases MAPKK são 10 responsáveis pela ativação de MKK4 e MKK7, incluindo a família MEKK e a quinase de linhagem mista, ou da família MLK. A família MLK é composta por seis membros, incluindo MLK1, MLK2, MLK3, MLK6, dupla quinase de leucina (DLK) e quinase de leucina produzindo fecho (LZK). A MLK2 é também conhecida como MST (Katoh, et al. Oncogene, 1994, 10, 1447) . Várias quinases são propostas para ser a montante das MAPKKKs, incluindo mas não limitado a quinase do centro germinal (GCK), cinase progenitora hematopoiética (HPK) e Rac/cdc42. A especificidade dentro da via é contribuída, pelo menos em parte, pelas proteínas andaime que se ligam a membros selecionados da cascata. Por exemplo, a interação JNK da proteína-1 (JIP-1) liga-se a HPK1, DLK ou MLK3, MKK7 e INK, resultando num módulo que aumenta a ativação de JNK (Dickens et al. Science 1997, 277, 693). A manipulação da atividade da via SAPK pode ter uma ampla gama de efeitos, incluindo a promoção tanto da morte celular e sobrevivência celular em resposta a vários estímulos pró-apoptóticos. Por exemplo, a sub-regulação da via pela ruptura genética do gene que codifica JNK3 no ratinho proporciona proteção contra as convulsões induzidas por ácido caínico e impediu a apoptose dos neurónios do hipocampo (Yang et al. Nature 1997, 389, 865). Do mesmo modo, os inibidores da via JNK, tais como JIP-1, inibem a apoptose (Dickens, supra). Em contraste, a atividade da via JNK parece ser protetora em algumas instâncias. Os timócitos em que MKK4 foi apagada exibem um aumento da sensibilidade à apoptose mediada por CD95 e CD3 (Nishina et al. Nature 1997, 385, 350). A sobre expressão de MLK3 conduz a uma transformação de fibroblastos NIH 3T3 (Hartkamp et al. Câncer Res. 1999, 59, 2195). 11

Uma área da presente invenção é dirigida diretamente para a identificação de compostos que modulam os membros MLK da via SAPK e promovem quer a morte celular quer a sobrevivência celular. Os inibidores dos membros da familia MLK seriam antecipados para levar à sobrevivência celular e demonstram atividade terapêutica numa variedade de doenças, incluindo as doenças neurodegenerativas crónicas tais como a doença de Alzheimer, doença de Parkinson e doença de Huntington e doenças neurológicas agudas, tais como a isquemia cerebral, lesão cerebral traumática e lesão na coluna vertebral. Os inibidores dos membros MLK que levam à inibição da via SAPK (atividade JNK) também apresentam atividade em doenças inflamatórias e cancro.

Um membro adicional da familia MAP quinase de proteínas é a quinase ρ38. A ativação desta quinase foi implicada na produção de citocinas pró-inflamatórias, tais como IL-1 e TNF. A inibição desta quinase pode, portanto, oferecer um tratamento para estados de doença em que a produção desregulada de citocinas está envolvida.

Os sinais mediados por quinases também foram exibidos para controlar o crescimento celular, morte celular e na diferenciação da célula, regulando os processos do ciclo celular. Uma família de quinases chamadas quinases dependentes da ciclina (CDK), controla a progressão através do ciclo da célula eucariótica. A perda de controlo da regulação CDK é um evento frequente em doenças hiperproliferativos e cancro.

Os inibidores de quinases envolvidas na mediação ou na manutenção de estados de doença particulares representam 12 novas terapias para estas desordens. Exemplos de tais quinases incluem Src, raf, as quinases dependentes de ciclina (CDK) 1, 2 e 4 e as quinases de ponto de verificação Chkl e cdsl no cancro, CDK2 ou quinase PDGF-R na reestenose, quinases CDK5 e GSK3 na Doença de Alzheimer, quinase c-Src na osteoporose, quinase GSK3 em pacientes com diabetes tipo 2, quinase p38 na inflamação, quinases VEGFR 1-3 e TIE-1 e 2 na angiogénese, quinase UL97 em infecções virais, quinase CSF-1R no osso e doenças hematopoiéticas e cinase Lck em doenças autoimunes e rejeição de transplantes.

Uma variedade de compostos que são descritos como inibidores da PARP ou quinase têm sido relatados na literatura, incluindo Banasik et al. J. Biol. Chem. 1992, 267, 1569 e Banasik et al. Mol. Cell. Biochem. 1994, 138, 185. Muitos outros compostos inibidores da PARP foram sujeitos a patentes. Por exemplo, os compostos que são descritos como inibidores de PARP são revelados nas WO 99/08680, WO 99/11622, WO 99/11623, WO 99/11624, WO 99/11628, WO 99/11644, WO 99/11645, WO 99/11649, WO 99/59973, WO 99/59975 e na Patente 5587384.

Compostos estruturalmente relacionados, que são descritos como possuindo outras atividades de inibição de PARP, são revelados nas WO 99/47522, EP 0695755 e WO 96/28447. Outros compostos estruturalmente relacionados, as suas sinteses e precursores são descritos em Piers et al. J. Org. Chem. 2000, 65, 530, Berlinck et al. J. Org. Chem. 1998, 63, 9850, McCort et al. Tetrahedrom Lett. 1999, 40, 6211, Mahboobi et al. Tetrahedrom 1996, 52, 6363, Rewcastle et al. J. Med. Chem. 1996, 39, 918, Harris et al. Tetrahedrom Lett. 1993, 34, 8361, Moody et al. J. 13

Ohno et al.

Org. Chem. 1992, 57, 2105, Ohno et al. Heterocycles 1991, 32, 1199, Eitel et al. J. Org. Chem. 1990, 55, 5368, krutoíková et al. Coll. Czech. Chem. Commun. 1988, 53, 1770, Muchowski et al. Tetrahedrom Lett. 1987, 28, 3453, Jones et al. J. Chem. Soc., Perkin Trans. I 1984, 2541, Noland et al. J. Org. Chem. 1983, 48, 2488, Jones et al. J. Org. Chem. 1980, 45, 4515, Leonard et al. J.

Am. Chem. Soc. 1976, 98, 3987 , Rashidan et al. Arm.

Khim. Zh. 1968, 21, 793, Abrash et al. Biochemistry 1965, 4, 99, Patentes US 5728709, 4912107, EP 0768311, JP 04230385, WO 99/65911, WO 99/41276, WO 98/09967 e WO 96/11933.

Devido ao papel potencial no tratamento terapêutico de doenças neurodegenerativas, o cancro e outras doenças relacionadas com PARP e quinase, inibidores de PARP e quinase são uma classe importante de compostos que requerem mais descoberta, exploração e desenvolvimento. Embora, sejam conhecidas uma ampla variedade de inibidores da PARP e quinase, muitos sofrem de problemas, tais como toxicidade, fraca solubilidade e eficácia limitada, que impedem a utilização terapêutica prática e impedem o desenvolvimento de fármacos eficazes. Assim, existe uma necessidade corrente e imediata de novos inibidores de PARP e quinase para o tratamento de doenças relacionadas com PARP e quinase. A presente invenção é dirigida a este, bem como outros fins importantes.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção é dirigida, em parte, a novos compostos multiciclicos. Especificamente, numa forma de realização, são proporcionados compostos de fórmula geral Illa: 14 R2

em que: cada um de A e B é, independentemente, C (= 0); E e F, em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados, formam: um grupo cicloalquilo C5 substituído ou não substituído; R1 é hidrogénio; R2 representa alquilo Ci~Ce tendo pelo menos um substituinte J4; J é, independentemente, em cada ocorrência: J3- (J2) n_ (J1) m~ em que cada um de n e m é, independentemente, 0 ou 1; cada J1 e J2 é, independentemente, carbonilo, alquilcarbonilo Ci-C6, arilcarbonilo Cg-Cio, carboniloxi, amino, alquilamino Ci-C6, dialquilamino C1-C6, amido, alquilamido Ci-C6, dialquilamido Ci-C6, alcoxi Ci-C6, alquilo Ci~Ce, cicloalquilo C3 a C7, heterocicloalquilo, arilo C6-C10, ou um anel de 5 a 10 átomos heteroarilo; e 15 hidrogénio, halo, hidroxi, ciano, NO2, carboxilo, alquilo Ci-Cô, ariloxicarbonilo C6-C10, alquiloxicarbonilo C1-C20/ um anel de 5 a 10 átomos de heteroarilo, ou heterocicloalquilo; e J4 é dimetilamino, dietilamino, 4-morfolin-4-il, ou 4-metilpiperazin-l-il; e X1 e X2, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam: um grupo fenilo substituído ou não substituído, em que o referido grupo fenilo substituído tem pelo menos um substituinte de J; ou um grupo heteroarilo de anel de 5 a 10 átomos substituído ou não substituído em que o o referido grupo heteroarilo substituído tem pelo menos um substituinte J e em que o referido heteroarilo é piridina ou piridina-N-óxido, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável e um veículo farmaceuticamente aceitável.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de Fórmula Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para a inibição de atividade de PARP, VEGFR2 ou MLK3 . 16

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de Fórmula Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento ou prevenção de uma doença neurodegenerativa, por exemplo, doença de Parkinson, doença de Huntington ou doença de Alzheimer.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de Fórmula Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento de lesões traumáticas do sistema nervoso central ou prevenir a degradação neuronal associada a lesões traumáticas no sistema nervoso central.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de fórmula geral Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento da isquemia cerebral, isquemia cardíaca, inflamação, choque endotóxico ou diabetes.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de fórmula geral Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para suprimir a formação de vasos sanguíneos num mamífero.

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de Fórmula Illa ou um sal farmacologicamente aceitável, para o tratamento de distúrbios proliferativos celulares, por exemplo, em que as referidas desordens proliferativas celulares estão relacionadas com tumores sólidos, retinopatia diabética, síndromas neovasculares intraoculares, degeneração macular, artrite reumatóide, psoríase ou endometriose. 17

Num outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de Fórmula Illa ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento de cancro.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A Figura 1 mostra um diagrama esquemático de um composto, incluído no âmbito da presente invenção e os precursores do mesmo. A Figura 2 mostra uma estratégia de síntese geral para a preparação de compostos dentro do âmbito da presente invenção. A Figura 3 mostra uma outra para a preparação de compostos invenção. A Figura 4 mostra ainda outra para a preparação de compostos invenção. A Figura 5 mostra ainda outra para a preparação de compostos invenção. A Figura 6 mostra ainda outra para a preparação de compostos invenção. A Figura 7 mostra uma est: preparação de derivados de be da presente invenção. A Figura 8 mostra uma est: preparação de compostos dentro estratégia de síntese geral dentro do âmbito da presente estratégia de síntese geral dentro do âmbito da presente estratégia de síntese geral dentro do âmbito da presente estratégia de síntese geral dentro do âmbito da presente ratégia de síntese para a izimidazole dentro do âmbito ratégia de síntese para a do âmbito da invenção. 18 A Figura 9 mostra a estratégia de sintese para a preparação de compostos dentro do âmbito da presente invenção.

DESCRIÇÃO DAS FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERENCIAIS A presente invenção é dirigida, em parte, a novos compostos multiciclicos que podem ser extremamente úteis em ligação com a inibição de PARP, VEGFR2, MLK3 ou outras enzimas. Os novos compostos são descritos com mais detalhe abaixo.

Especificamente, numa forma de realização, a presente invenção refere-se a novos compostos multiciclicos de fórmula geral Illa:

R illa em que: cada um de A e B é, independentemente, C (= 0); E e F, em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados, formam: um grupo cicloalquilo C5 substituído ou não substituído; R1 é hidrogénio; R2 representa alquilo Ci-C6 tendo pelo menos um substituinte J4; 19 J é, independentemente, em cada ocorrência: J3- (J2) n- (J1) m_ em que cada um de n e m é, independentemente, 0 ou 1; cada J1 e J2 é, independentemente, carbonilo, alquilcarbonilo C1-C6, arilcarbonilo C6-C10, carboniloxi, amino, alquilamino C1-C6, dialquilamino C1-C6, amido, alquilamido Ci-Cê, dialquilamido Ci-C6, alcoxi Ci~Ce, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3 a C7, heterocicloalquilo, arilo C6-Cio, ou um anel de 5 a 10 átomos heteroarilo; e hidrogénio, halo, hidroxi, ciano, NO2, carboxilo, alquilo Ci-C6, ariloxicarbonilo C6-C10, alquiloxicarbonilo C1-C20/ um anel de 5 a 10 átomos de heteroarilo, ou heterocicloalquilo; e J4 é dimetilamino, dietilamino, 4-morfolin-4-il, ou 4-metilpiperazin-l-il; e X1 e X2, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam: um grupo fenilo substituído ou não substituído, em que o referido grupo fenilo substituído tem pelo menos um substituinte de J; ou um grupo heteroarilo de anel de 5 a 10 átomos substituído ou não substituído em que o o referido grupo heteroarilo substituído tem pelo menos um substituinte J e em que o referido heteroarilo é piridina ou piridina-N-óxido, ou um seu sal farmacologicamente aceitável. 20 0 composto da invenção tal como aqui descrito, em que X e X2, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam um grupo fenilo com pelo menos um substituinte J. 1 2 0 composto da invenção tal como aqui descrito em que J e J é, de forma independente, carbonilo, amino, carboniloxi, alquilamino inferior, dialquilamino inferior ou alcoxi inferior. 3 ✓ 0 composto da invenção tal como aqui descrito em que J e hidrogénio, halo, hidroxilo, ciano, Ν02ί alquilo inferior, heteroarilo ou heterocicloalquilo. 0 composto da invenção tal como aqui descrito, onde J representa um grupo alcoxi inferior. 0 composto da invenção tal como aqui descrito em que J4 é metilaminodimetil, metilaminodietil, 4-metilmorfolina ou 4-metilpiperazinil-CH2. 0 composto da invenção tal como aqui descrito em que J4 é 4-metilpiperazinil-CH2. 0 termo "alquilo", tal como aqui utilizado, salvo especificação em contrário, refere-se a um hidrocarboneto linear, ramificado ou ciclico saturado de C2 a C2o- Os grupos alquilo incluem, mas não estão limitados a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, t- butilo, n-pentilo, ciclopentilo, isopentilo, neopentilo, n- 21 hexilo, isohexilo, ciclohexilo, ciclooctilo, adamantilo, 3-metilpentilo, 2,2-dimetilbutilo e 2,3-dimetilbutilo. 0 termo "alquilo inferior", tal como é aqui utilizado e salvo especificação em contrário, refere-se a um um hidrocarboneto linear, ramificado ou ciclico saturado de Ci a C6. Os grupos alquilo inferior incluem, mas não estão limitados a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, t-butilo, n-pentilo, ciclopentilo, isopentilo, neopentilo, n-hexilo, isohexilo, ciclohexilo, 3 -metilpentilo, 2,2-dimetilbutilo, e 2,3-dimetilbutilo.

Os termos "cicloalquilo" e "cicloalquilo C n" são entendidos para se referir a um grupo de hidrocarboneto monociclico saturado ou parcialmente insaturado. 0 termo "Cn", neste contexto, em que n é um número inteiro, indica o número de átomos de carbono compreendendo o anel do grupo cicloalquilo. Por exemplo, cicloalquilo C6 indica um anel de seis membros. As ligações que ligam os átomos de carbono endociclico de um grupo cicloalquilo podem ser simples ou ser parte de um grupo aromático fundido, desde que o grupo cicloalquilo não seja aromático. Exemplos de grupos cicloalquilo incluem, mas não estão limitados a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo e cicloheptilo.

Os termos "heterocicloalquilo" ou " heterocicloalquilo Cn" são entendidos como referindo-se a um ciclico radical monociclico saturado ou parcialmente insaturado, que, para além de átomos de carbono, contém pelo menos um heteroátomo como membro do anel. Tipicamente, os heteroátomos incluem, mas não estão limitados a, átomos de oxigénio, azoto, 22 enxofre, selénio e fósforo. Neste contexto, o termo "Cn", onde n é um número inteiro, indica o número de átomos de carbono compreendendo o anel, mas não é indicativo do número total de átomos no anel. Por exemplo, heterocicloalquilo C4 inclui anéis com cinco ou mais membros, em que quatro dos membros do anel são de carbono e os restantes membros do anel são heteroátomos. Além disso, as ligações que ligam os átomos endociclicos de um grupo heterocicloalquilo podem ser parte de um grupo aromático fundido, desde que o grupo heterocicloalquilo não seja aromático. Exemplos de grupos heterocicloalquilo incluem, mas não estão limitados a, 2-pirrolidinilo, 3-pirrolidinilo, piperidinilo, 2-tetra-hidrofuranilo, 3-tetrahidrofuranilo, 2-tetrahidrotienilo e 3-tetra-hidrotienilo. 0 termo "arilo", tal como aqui utilizado e salvo especificação em contrário, refere-se a um sistema de anel aromático mono-, di-, tri- ou multinuclear de 6 a 10 átomos de anel. Exemplos não limitativos incluem fenilo, naftilo, antracenilo e fenantrenilo. O termo "heteroarilo", como aqui utilizado, refere-se a um sistema de anel aromático com 5 a 10 átomos no anel compreendendo carbono e, pelo menos, um heteroátomo como membro do anel, tais como oxigénio, azoto ou enxofre. O heteroátomo de azoto pode ser opcionalmente oxidado, por exemplo, piridina-N-óxido ou 1-oxi-piridinilo. Exemplos não limitativos são pirrilo, piridinilo, furilo, 1,2,4-tiadiazolilo, pirimidilo, tienilo, isotiazolilo, imidazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, pirimidilo, quinolilo, isoquinolilo, benzotienilo, isobenzofurilo, 23 pirazolilo, benzimidazolilo indolilo, , isoxazolilo e acridinilo. purinilo carbazolilo 0 termo "aralquilo", tal como aqui utilizado, pretende referir-se a radicais alquilo aril-substituidos tais como benzilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, feniletilo, e difeniletilo. 0 termo "aralquilo inferior", como aqui utilizado, pretende referir-se a radicais arilo substituídos com alquilo inferior. Exemplos não limitativos incluem benzilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, feniletilo, e difeniletilo. 0 termo "aralcoxi", tal como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RO- em que R é um grupo aralquilo, tal como definido acima. 0 termo "aralcoxilo inferior", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RO- em que R é um grupo aralquilo inferior tal como definido acima. 0 termo "alcoxi", como aqui utilizado, pretende referir-se a RO- em que R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "alcoxi inferior", tal como aqui utilizado, pretende referir-se a RO-, em que R é um grupo alquilo inferior como acima definido. Exemplos não limitativos incluem metoxilo, etoxilo e tert-butiloxi. 24 0 termo "ariloxi", como aqui utilizado, pretende referir-se a RO-, em que R é um grupo arilo tal como definido acima.

Os termos "alquilamino inferior" e "dialquilamino inferior" referem-se a um grupo amino que tem um ou dois substituintes de alquilo inferior, respectivamente. 0 termo "amido”, e "carbonilamino", como aqui utilizado, pretende referir-se a -C(0)N(H)-. 0 termo "alquilamido", como aqui utilizado, pretende referir-se a -C(0)NR- em que R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "dialquilamido", como aqui utilizado, pretende referir-se a -C(0)NR'R" em que R' e R" são, independentemente, grupos alquilo, tal como definidos acima. 0 termo "alquilamido inferior", como aqui utilizado, pretende referir-se a -C(0)NR- em que R é um grupo alquilo inferior como acima definido. 0 termo " dialquilamido inferior ", como aqui utilizado, pretende referir-se a -C(0)NR'R" em que R' e R" são, independentemente, grupos alquilo inferior, como definido acima. 25

Os termos "alcanoílo" e "alquilcarbonilo", como aqui utilizado, referem-se a RC(0)- em que R é um grupo alquilo tal como definido acima.

Os termos "alcanoílo inferior" e "alquilcarbonilo inferior" tal como aqui utilizado, referem-se a RC(0) - em que R é um grupo alquilo inferior como acima definido. Exemplos não limitativos de tais grupos alcanoílo incluem acetilo, trifluoroacetilo, hidroxiacetilo, propionilo, butirilo, valerilo e 4-metilvalerilo. 0 termo "arilcarbonilo" como empregue aqui, refere-se a RC(0)- em que R é um grupo arilo tal como definido acima. 0 termo "ariloxicarbonilo", como aqui utilizado, pretende referir-se a ROC(O)- em que R é um grupo arilo tal como definido acima. 0 termo "halo", como aqui utilizado, refere-se a flúor, cloro, bromo, ou iodo. 0 termo "alquilsulfonilo", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RS02, em que R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "arilsulfonilo", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RS02, em que R é um grupo arilo tal como definido acima. 26 0 termo "alquiloxicarbonilamino", tal como é aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo R0C(0)N(H)- em que R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo " alquiloxicarbonilamino inferior", tal como é aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo R0C(0)N(H)- em que R é um grupo alquilo inferior como acima definido. 0 termo "ariloxicarbonilamino", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo R0C(0)N(H)- em que R é um grupo arilo tal como definido acima. 0 termo "sulfonilamido", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo -SCg-C(0)NH-. 0 termo "alquilsulfonilamido", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RS02C(0)NH- em que R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "arilsulfonilamido", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RS02C(0)NH- em que R é um grupo arilo tal como definido acima. 0 termo "éster de alquilo inferior de ácido fosfórico," tal como é aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo -P (0) (OR') (OR") em que R' e R" são alquilo inferior, como definido acima. 27 0 termo "éster arilo de ácido fosfónico", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo -P(0)(OR')(OR") em que R' e R" são arilo como definido acima. 0 termo "aminocarboniloxi", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo RR'N-C(0)-0- em que R e R' é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "arilarninocarboniloxi", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo Ar-N(R)-C(0)-0- em que Ar é arilo, como definido acima, e R é um grupo alquilo tal como definido acima. 0 termo "heteroarilaminocarboniloxi", como aqui utilizado, pretende referir-se ao grupo het-Ar-N(R)-C(0)-0- em que het-Ar é heteroarilo, como acima definido, e R é um grupo alquilo tal como definido acima.

Tal como aqui utilizado, o termo "aminoácido" significa uma molécula que contém tanto um grupo amino como um grupo carboxilo. Ele inclui um "α-aminoácido" que é bem conhecido dos especialistas na técnica como um ácido carboxilico que tem uma funcionalidade amino no carbono adjacente ao grupo carboxilo. Os aminoácidos podem ser de ocorrência natural ou de ocorrência não natural. "Aminoácidos protegidos", tal como aqui utilizados referem-se a aminoácidos, tal como descrito acima, compreendendo grupos protetores. Por exemplo, o grupo amino de um aminoácido pode ser protegido com um grupo t- 28 butoxicarbonilo ou benziloxicarbonilo. Além disso, o grupo carboxilo do aminoácido pode ser protegido como ésteres de alquilo e de aralquilo. Além disso, os grupos de álcool dos aminoácidos podem ser protegidos como éteres de alquilo, éteres de aralquilo e éteres de sililo. 0 termo "compreendendo endociclicamente" pretende descrever uma porção química cíclica que inclui um grupo químico especificado como um elemento de formação de anel. Como um exemplo, um grupo furanilo compreende endociclicamente um átomo de oxigénio, porque o átomo de oxigénio é um membro da estrutura do anel. No contexto da presente descrição, os grupos E e F podem ser combinados em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados para formar um grupo heterocicloalquilo. Este grupo heterocicloalquilo pode compreendee endociclicamente o grupo químico G, o que significa que pelo menos um átomo do grupo G é um elemento de formação do anel. Como um exemplo de referência ilustrado abaixo, E e F podem ser combinados em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados para formar o grupo heterocicloalquilo compreendendo endociclicamente o grupo G, em que G, neste caso, é N(CH3) . R*

Tal como aqui utilizado, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" pretende referir-se a uma quantidade de composto da presente invenção que vai 29 provocar um efeito ou resposta terapêutico ou profiláctico desejado, quando administrado de acordo com o regime de tratamento desejado.

Tal como aqui utilizado, o termo "contacto", significa juntar, quer diretamente quer indiretamente, uma ou mais moléculas com outra, facilitando, assim, as interações intermoleculares. Esse contacto pode ocorrer in vitro, ex vivo ou in vivo.

Tal como aqui utilizado, o termo "desordens proliferativas celulares" pretende referir-se a populações de células malignas, bem como não malignas, que diferem do tecido circundante tanto morfologicamente como genotipicamente. Os tipos de doenças proliferativas celulares incluem, por exemplo, tumores sólidos, cancro, retinopatia diabética, síndromas neovasculares intraoculares, degeneração macular, artrite reumatóide, psoríase e endometriose.

Todos os outros termos utilizados na descrição dos compostos da presente invenção têm o significado tal como é bem conhecido na técnica. A presente descrição apresenta métodos para a preparação dos compostos multiciclicos aqui descritos que são úteis como inibidores da PARP, VEGFR2 e MLK3. 0 método consiste numa sintese de etapas múltiplas começando com os compostos heterocíclicos necessários. Por exemplo, a Figura 1 descreve a síntese geral dos compostos da presente invenção para o caso em que o material de partida heterocíclico é um indol. Especificamente, um indol A, que é substituído ou 30 não substituído nas posições 4-7 no anel de indol, é tratado em série, por exemplo, com butil-lítio, dióxido de carbono, t-butil-lio e uma cetona B (possuindo os substituintes E e F) para proporcionar um 2-indolilo álcool terciário C substituído. Este álcool terciário é eliminado, por exemplo, sob condições ácidas, usando ácido clorídrico ou o ácido toluenossulfónico, para se obter um derivado de 2-vinilindole, cicloadição de D. Diels-Alder de D com um dienófilo, tal como, mas não limitado a, maleimida (E) originando a cicloadição do intermediário F. A aromatização da cicloadição do intermediário, por exemplo, com oxigénio na presença de um catalisador, tal como paládio ou platina ou com um oxidante, tal como DDQ ou tetracloroquinona, produz G carbazole. 0 tratamento posterior de G com um reagente de alquilação ou de acilação dá derivados de carbazole imida-N-substituídos da presente invenção como mostrado na Figura 2. 0 tratamento de carbazole G (ou das lactamas de carbazole na Figura 5) com vários electrófilos, tais como R+, proporciona derivados de 3-carbazole substituído como mostrado na Figura 3. Deste modo, os grupos de halogéneo ou acilo podem ser introduzidos e o halogéneo pode ser deslocado por vários nucleófilos, incluindo ciano, como mostrado na Figura 5. 0 halogénio pode também ser substituído por vários grupos alquilo, arilo e heteroalquilo. 0 substituinte 3-ciano pode ser reduzido para dar o substituinte 3-aminometilo, que pode ser alquilado ou acilado no grupo amino. 31

Quando o carbazole G contém bromoacetilo ou substituintes de 2-bromoacilo substituído, como mostrado na Figura 4, o bromo pode ser deslocado por vários nucleófilos para dar mais formas de realização da presente invenção. Em alternativa, o grupo 2-bromoacilo pode ser feito reagir com várias tioamidas para dar tiazoles substituídos.

Como discutido, usando índoles substituídos como material de partida proporcionam-se derivados funcionalizados de G; no entanto, uma reação de Wittig intramolecular, pode também ser utilizada para preparar índoles D de vinil substituídos. Além disso, dienófilos, com exceção da maleimida (E) , podem ser utilizados na reação de Diels-Alder, e incluem, por exemplo, fumarato de dialquilo, ácido fumárico, maleato de dialquilo, ácido maleico, anidrido maleico, dialquil-acetilenodicarboxilato ou 3-alquilcianoacrilato. Os intermediários resultantes da cicloadição com estes dienófilos dão imidas, ou os lactâmicos correspondentes, como mostrado na Figura 5. Por exemplo, anidridos, obtidos a partir da cicloadição de anidrido maleico ou por desidratação de diácidos, dão imidas quando tratados com bis(trimetilsilil)amina ou ureia. Os anidridos proporcionam hidrazonas com seis membros, quando tratados com hidrazina. Os lactâmicos lactamas são obtidos através da separação dos isómeros de éster de ciano, aromatização de cada isómero, e redução do éster de ciano no lactâmico, como mostrado na Figura 5. As imidas podem também ser reduzidas para lactâmicos por métodos bem estabelecidos conhecidos dos peritos na técnica.

Compostos do tipo índole são preparados de acordo com o esquema mostrado na Figura 6. Aqui, os materiais de 32 partida, vinil pirrole substituído, são preparados por reação de um pirrole com uma enamina de uma cetona, como descrito na literatura (Heterocycles 1974, 2, 575-584). Um pirrole 2-vinil substituíduo reage com vários dienófilos, tais como os descritos acima, para produzir um intermediário de cicloadição que é um precursor de formas de realização da presente invenção. Um grupo protetor de azoto tal como um grupo protetor sililo, especialmente triisopropil de sililo, podem ser utilizados, conforme ilustrado na Figura 6.

Outros precursores heterocíclicos podem ser preparados por reações análogas. Por exemplo, 5-vinil-imidazol substituído é feito reagir com vários dienófilos, tais como os descritos acima, para produzir um intermediário de cicloadição que pode ainda ser modificado por reações bem conhecidas dos peritos na técnica para dar precursores de benzimidazole. Da mesma forma, por exemplo, um derivado de 5-vinil-l,2,3-triazol ou 4-vinil-tiazole pode ser feito reagir com várias dienófilos como acima, para dar intermediários de cicloadição que conduzem, também, a formas de realização da invenção. Os compostos do tipo benzimidazole da presente invenção também podem ser preparados de acordo com o método mostrado na Figura 7, em que benzimidozoles pré-formados servem como materiais de partida.

Além disso, como mostrado na Figura 8, opcionalmente, um 2-vinil benzofurano substituído ou 2-vinil benzotiofeno podem ser feitos reagir com várias dienófilos, tais como os listados previamente, para originar um intermediário de cicloadição. A modificação do intermediário de cicloadição 33 pode conduzir a imidas, lactâmicos e compostos relacionados da presente invenção.

Em certas formas de realização preferidas, os compostos da presente invenção são inibidores de PARP. A potência do inibidor pode ser testada pela medição da atividade da PARP in vitro ou in vivo. Um ensaio preferido monitoriza a transferência de unidades de ADP-ribose radiomarcadas a

O O I partir de [ P]NAD para um aceitador de proteína, tal como a histona ou a própria PARP. Os ensaios de rotina para a PARP são revelados em Purnell e Whish, Biochem. J. 1980, 185, 775, aqui incorporado por referência.

Em outras formas de realização preferidas, os compostos da presente invenção são também inibidores da VEGFR2 ou MLK3. A potência do inibidor pode ser testada medindo a atividade de VEGFR2 ou MLK3 in vitro ou in vivo. Um ensaio preferido para a atividade da quinase VEGFR2 envolve a fosforilação de um substrato proteico imobilizado numa placa de microtitulação. O resíduo de fosfotirosina resultante é detectado com um anticorpo anti-fosfotirosina conjuqado com um quelato de európio, permitindo a quantificação do produto por fluorometria resolvida no tempo. Métodos de ensaio semelhantes foram empregues para a detecção da tirosina quinase c-src, como descrito em Braunwalder et al. Anal. Biochem. 1996, 238, 159, aqui incorporado por referência. Um método de ensaio preferido para a MLK3 utiliza a fosforilação de um substrato da proteína, tais como a proteína básica de mielina, com [Y_32P]ATP, seguida pelo isolamento do produto insolúvel em ácido 32P fosfoproteína numa placa de filtração. Métodos análogos foram empregues para o ensaio de proteína quinase C, como 34

Screening 1996, 1 reportado em Pitt e Lee, J. Biomol. 47, aqui incorporado por referência.

Composto para uso em métodos para a inibição de atividades enzimáticas de PARP, VEGFR2 e MLK3 são também contemplados pela presente invenção. A atividade enzimática pode ser reduzida ou inibida por contacto da enzima com, pelo menos, um composto aqui descrito. 0 contacto pode ocorrer in vitro, in vivo ou ex vivo. 0 contacto também pode ser promovido pelo uso de meios de contacto que aumentam a velocidade de mistura de enzima e inibidor. Os meios preferidos incluem água, soluções à base de água, soluções tamponadas, solventes misciveis em água, soluções de solubilização de enzima, e qualquer combinação das mesmas. As células de contacto contendo a enzima in vivo, de preferência, empregam o inibidor a ser entregue na proximidade da enzima associada com a célula num meio biologicamente compatível. Meios biologicamente compatíveis preferidos incluem água, soluções à base de água, solução salina, fluidos biológicos e secreções, bem como qualquer outro material não tóxico que possa fornecer de forma eficaz o inibidor num sistema biológico na proximidade da enzima.

Os compostos aqui descritos podem ser utilizados para prevenir ou tratar o inicio ou a progressão de qualquer doença ou patologia relacionada com a atividade da PARP em mamíferos, especialmente humanos. Tais condições incluem a lesão traumática do sistema nervoso central, tais como lesões cerebrais e da medula espinhal, e a degradação neuronal associada com lesão traumática do sistema nervoso central. Condições relacionadas e doenças tratáveis pelos métodos da presente invenção incluem derrames vasculares, 35 isquemia cardíaca, isquemia cerebral, doenças cerebrovasculares, tais como esclerose múltipla, e doenças neurodegenerativas como a doença de Alzheimer, doença de Huntington e doença de Parkinson. Outras condições relacionadas com a PARP ou doenças tratáveis pelos compostos aqui descritos incluem inflamações, tais como, pleurisia e colite, choque endotóxico, diabetes, cancro, artrite, isquemia cardíaca, isquemia da retina, envelhecimento da pele, dor crónica e aguda, choque hemorrágico, e outras. Por exemplo, a seguir aos sintomas de um acidente vascular cerebral, pode ser administrado a um doente um ou mais dos compostos aqui descritos para prevenir ou minimizar os danos no cérebro. Pacientes com sintomas de doença de Alzheimer, doença de Huntington, doença de Parkinson ou doença podem ser tratados com os compostos da presente invenção para impedir a progressão da doença ou aliviar os sintomas. Os inibidores da PARP também podem ser utilizados para tratar pacientes que sofrem de cancro. Por exemplo, a pacientes com cancro podem ser administrados compostos da presente invenção de modo a aumentar os efeitos antitumorais da quimioterapia.

Os compostos aqui descritos podem ser utilizados para prevenir ou tratar a progressão de qualquer doença ou condição relacionada com a atividade da quinase (tal como atividades de VEGFR2 ou MLK3) em mamíferos, especialmente humanos. Por exemplo, os compostos aqui descritos podem ser utilizados para tratar condições relacionadas com a atividade de MLK3, tais como, as doenças neurodegenerativas crónicas como, por exemplo, a doença de Alzheimer, doença de Parkinson e doença de Huntington e doenças neurológicas agudas, tais como a isquemia cardíaca, isquemia cerebral, bem como, lesões crânio-encefálicas e na coluna vertebral. 36

Além disso, os compostos aqui descritos, podem também ser úteis no tratamento de doenças inflamatórias e cancro relacionadas com a atividade da MLK3. Do mesmo modo, os compostos aqui descritos, podem ser utilizados para inibir a VEGFR2 o que pode levar à supressão da formação de novos vasos sanguíneos. Tais compostos podem, portanto, ser úteis no tratamento de condições associadas com formações de novos de vasos sanguíneos, tais como, por exemplo, tumores sólidos, retinopatia diabética e outras síndromas neovasculares intraoculares, degeneração macular, artrite reumatóide, psoriase e endometriose.

Os compostos aqui descritos são de preferência administrados a mamíferos numa quantidade terapeuticamente eficaz. A dosagem pode variar dependendo do composto, da potência do composto, do tipo de doença e do estado de doença do paciente, entre outras variáveis. A quantidade de dosagem pode ser medida por meio de administração de dosagem pré-medida ou unidades de dosagem sob a forma de comprimidos, cápsulas, supositórios, pós, emulsões, elixires, xaropes, unguentos, cremes ou soluções.

No uso terapêutico ou profiláctico, os inibidores da PARP ou da quinase podem ser administrados por qualquer via pela qual os fármacos são convencionalmente administrados. Tais vias de administração incluem a via intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, subcutânea, intratecal, intraqueal, intraventricular, oral, bucal, rectal, parentérica, intranasal, transdérmica ou intradérmica. A administração pode ser sistémica ou localizada. 37

Os compostos aqui descritos podem ser administrados na forma pura, combinados com outros ingredientes ativos ou combinados com excipientes não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis ou veículos. As composições orais geralmente incluem um transportador diluente inerte ou um veículo comestível. Agentes de ligação farmaceuticamente compatíveis e/ou materiais adjuvantes podem ser incluídos como parte da composição. Os comprimidos, pílulas, cápsulas, trociscos e semelhantes podem conter qualquer um dos seguintes ingredientes, ou compostos de natureza semelhante: um ligante tal como celulose microcristalina, goma de tragacanto ou gelatina; um excipiente tal como amido ou lactose; um agente de dispersão tal como ácido algínico, Primogel, ou amido de milho; um lubrificante, tal como estearato de magnésio; um deslizante tal como dióxido de silício coloidal; um agente edulcorante tal como a sacarose ou a sacarina; ou um agente aromatizante tal como hortelã-pimenta, salicilato de metilo, ou aroma de laranja. Quando a forma de dosagem unitária é uma cápsula, ela pode conter, em adição aos materiais do tipo acima, um veículo líquido tal como um óleo gordo. Além disso, as formas de dosagem unitária podem conter vários outros materiais que modificam a forma física da unidade de dosagem, por exemplo, revestimentos de açúcar, goma-laca ou agentes entéricos. Além disso, um xarope pode conter, em adição aos compostos ativos, sacarose como um agente edulcorante e certos conservantes, corantes, colorantes e aromas.

Preparações para administração alternativa incluem soluções estéreis aquosas ou não aquosas, suspensões e emulsões. Exemplos de solventes não aquosos são o dimetilsulfóxido, álcoois, propileno glicol, polietileno glicol, óleos vegetais tais como azeite e ésteres orgânicos injetáveis 38 tais como oleato de etilo. Os veículos aquosos incluem misturas de álcoois e água, meios tamponados e salinos. Os veículos intravenosos incluem reabastecedores de fluídos e nutrientes, reabastecedores de electrólitos, tais como aqueles baseados em dextrose de Ringer, e semelhantes. Conservantes e outros aditivos podem também estar presentes, tal como, por exemplo, agentes antimicrobianos, anti-oxidantes, quelantes, gases inertes, e afins.

Os métodos preferidos de administração dos presentes compostos a mamíferos incluem injeção intraperitoneal, injeção intramuscular, intravenosa e infusão. Várias formulações líquidas são possíveis para estes métodos de administração, incluindo soro fisiológico, álcool, DMSO e soluções à base de água. A concentração do inibidor pode variar de acordo com a dose e o volume a ser administrado e pode variar de cerca de 1 a cerca de 1000 mg/mL. Outros constituintes das fórmulas líquidas podem incluir conservantes, sais inorgânicos, ácidos, bases, tampões, nutrientes, vitaminas ou outros medicamentos, como analgésicos ou inibidores da PARP e quinase adicionais. As formulações particularmente preferidas para a administração dos compostos presentes são detalhadas nas publicações seguintes que descrevem a administração de inibidores da PARP conhecidos e são aqui incorporadas por referência na sua totalidade; Kato, T. et al. Anticancer Res. 1988, 8 (2), 239, Nakagawa, K. et al. Carcinogenesis 1988, 9, 1167, Brown, D.M. et al. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 1984, 1665, Masiello, P. et al. Diabetologia 1985, 28 (9), 683 , Masiello, P. et al. Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 1990, 69 (1), 17, Tsujiuchi, T. et al. Jpn. J. Câncer Res. 1992, 83 (9), 985, e Tsujiuchi, T. et al. Jpn. J. Câncer Res. 1991, 82 (7), 739. 39

Os compostos da presente invenção também podem assumir a forma de um sal farmacologicamente aceitável, hidrato, solvato, ou metabolito. Os sais farmacologicamente aceitáveis incluem sais básicos de ácidos inorgânicos e orgânicos, incluindo, mas não limitado a, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido málico, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido maleico, ácido salicílico, ácido benzóico, ácido fenilacético, ácido mandélico e semelhantes. Quando os compostos da invenção incluem uma função ácida, tal como um grupo carboxilo, então os pares de catiões farmaceuticamente aceitáveis adequados para o grupo carboxi são bem conhecidos dos peritos na técnica e incluem catiões alcalinos, alcalino-terrosos, amónios, amónio quaternários e similares.

Os peritos na técnica apreciarão que diversas alterações e modificações podem ser feitas nas formas de realização preferidas da invenção e que estas alterações e modificações podem ser feitas sem afastamento do espirito da invenção. É, por conseguinte, pretendido que as reivindicações anexas cubram todas essas variações equivalentes que caiam dentro do verdadeiro espírito e âmbito da invenção. EXEMPLOS Exemplo 1

Medição da atividade enzimática de PARP A atividade da PARP foi monitorizada por meio de transferência de unidades de ADP-ribose radiomarcadas a partir de [32P]NAD+ para um aceitador de proteína, tal como 40 histona ou a própria PARP. As misturas de ensaio continham 100 mM de Tris (pH 8,0), 2 mM de DTT, 10 mM de MgCl2, 20 ug/ml de ADN (cortado por ultra-sons) , 20 mg/ml de histona Hl, 5 ng de PARP humana recombinante e inibidor ou DMSO (<2,5% (v/v)) num volume final de 100 uL. As reações foram iniciadas pela adição de 100 μΜ de NAD+ suplementado com 2 uCi de [32P]NAD+/mL e mantidas à temperatura ambiente durante 12 minutos. Os ensaios foram terminados pela adição de 100 μΜ de 50% de TCA e o precipitado radiomarcado foi recolhido numa placa de filtro de 96 poços (Millipore, MADP NOB 50), lavado com TCA a 25%. A quantidade de radioatividade insolúvel em ácido, o que corresponde à proteina poliADP-ribosilatada, foi quantificada num contador de cintilação Wallac MicroBeta.

Exemplo 2

Medição atividade enzimática de VEGFR2 quinase

Uma placa de 96 poços FluoroNUNC MaxiSorp foi revestida com 100 pL/poço de solução de substrato PLC-y/GST recombinante humana a uma concentração de 40 pg/mL em solução salina tamponada com Tris (TBS). A atividade de VEGFR2 foi testada numa mistura de ensaio de 100 pL contendo 50 mM de HEPES (pH 7,4), 30 pM de ATP, 10 mM de MnCl2, 0,1% de BSA, 2% de DMSO, e 150 ng/mL de baculovirus recombinante humano expressando o domínio citoplasmática de VEGFR2 humana (prefosfotilatada durante 60 min a 4°C na presença de 30 pM de ATP e 10 mM de MnCl2, antes de usar) . A reação da quinase foi deixada prosseguir a 37°C durante 15 min. A detecção do anticorpo anti-fosfotirosina marcado com európio foi adicionada numa diluição de 1:5000 em tampão de bloqueio (3% de BSA em TBST) . Após 1 hora de incubação a 37°C, 100 pL de solução de melhoramento (Wallac # 1244-105) foi adicionado e a placa foi agitada suavemente. Após 5 min, a fluorescência resolvida no tempo da solução 41 resultante foi medida utilizando o BMG Polarstar (Modelo # 403) utilizando excitação e emissão de comprimentos de onda de 340 nm e 615 nm, respectivamente, um atraso de recolha de 400 ys e um tempo de integração de 400 ys.

Exemplo 3

Medição da atividade enzimática de MLK3 O ensaio de actividade para a MLK3 foi executado em placas Millipore Multiscreen. Cada mistura de ensaio de 50 yL continha 50 mM de HEPES (pH 7,0), 1 mM de EGTA, 10 mM de MgCl2, 1 mM de DTT, 25 mM de β-glicerofosfato, 100 yM de ATP, 1 yCi de [γ~32Ρ]ΑΤΡ, 0,1% de BSA, 500 yg/ml de proteína básica de mielina, 2% de DMSO, várias concentrações de compostos de ensaio, e 2 yg/mL de domínio quinase de ofbaculoviral humano GST-MLK1. As amostras foram incubadas durante 15 min a 37 °C. A reação foi parada pela adição de 50% TCA gelado e as proteínas foram deixadas precipitar durante 30 min a 4°C. As placas foram deixadas a equilibrar durante 1-2 horas antes da contagem no contador de cintilação Wallac MicroBeta 1450.

Exemplo 4

Determinação de IC50 para os inibidores.

Dados de inibição de ponto único foram calculados comparando a atividade de PARP, VEGFR2 ou MLK3 na presença de inibidor da atividade na presença de apenas DMSO. As curvas de inibição para os compostos foram geradas através da representação gráfica de percentagem da inibição versus logio da concentração do composto. Os valores de IC50 foram calculados por regressão não linear, utilizando a equação dose-resposta sigmoidal (declive variável) em GraphPad Prism como segue: 42 y fundo + (topo-fundo)/(1+10 (log iC50-x)*Hillslope onde y é a % de atividade a uma dada concentração do composto, x é o logaritmo da concentração do composto, fundo é a % de inibição da menor concentração do composto testado, e topo é a % de inibição da mais alta concentração do composto analisado. Os valores de fundo e de topo foram fixados em 0 e 100, respectivamente. Os valores de IC50 foram reportados como a média de pelo menos três determinações separadas.

Os seguintes Exemplos 5 a 10 apresentam dados de inibição de PARP, VEGFR2 e MLK3 para os compostos da presente invenção. Os valores de IC50 foram determinados como descrito nos Exemplos 1 e 2. Para alguns compostos, os dados de inibição são apresentados como percentagem de inibição a uma concentração especificada. Os compostos estão tabelados em conjunto com o número do composto, substituintes e dados de inibição da enzima.

Exemplo 5

Dados inibidores de PARP para os compostos la a lv de Fórmula IV em que BéCO, J é Η, V é NR1 e E e F, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam um grupo ciclopentilo. A, R2 e R1 variam conforme listado abaixo

R* I

43

Tabela 1 (exemplos de referência indicados por *)

No. A R1 R2 PARP IC50 (nM) 1a* co H H 36 1b* co H -(CH2)3OCH2Ph 720 1c* co H -(CH2)3CN 38% @ 10 μΜ 1d* co H -(CH2)3CI 64% @ 10 μΜ 1e* co H "(CH2)3OH 946 1f* co H -(CH2)3-piperidine 68% @ 10 μΜ 1g* co H -(CH2)3-morpholine 67% @ 10 M 1h* co H (CH2)3-NEt2 819 1i* co H -(CH2)4-NHCOCH3 10% @ 10 μΜ 1j* co H -S02Ph 250 1k* co H Lysine (2 HCI) 22 11* co H β-Alanine (HCI) 160 1m* co H Glycine (HCI) 38 1n* co H -(CH2)2OCH2Ph 1600 1o co H -(CH2)2NEt2 12% @ 10 μΜ 1p* co H -CH2COOCH2Ph 14% @ 10 μΜ 1q* co H -CH2COOH 52% @ 10 μΜ 1r* co H -ch2conh2 63% @ 10 μΜ 1s* co H -CH2-phthalimide 25% @ 10 μΜ 1t* ch2 ch3 H 800 1u* ch2 (BOC)2Lys H 1500 1v* ch2 Lys H 1400 44

Exemplo 6

Dados inibidores de PARP para os compostos 2a a 5g de Fórmula IV em que B é CO, R2 é Η, V é NH e E e F, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam um grupo ciclopentilo. A e J variam conforme listado abaixo 45 bela 2 (exemplos de referência)

No. A J {3-Substituent) j PARP IC50(nM) 2 a co Br j 25 2b co CS j 39 I 2c | co F i 39 ] | 2d | co CH3CO- ! 17 ! | 2o | co BrCHjCO- i 13 i 1 2f | co CHjBrCHCO' | 21 i | 2g j co SV-Meihy!pSpenzino-CH2CO- i 16 i | 2h j co Μθ)·ρΙΐ:θΐ!ηο-ΟΗ200·· i 13 j 1 2i j co Piperidíno-CH2CO·· j 20 | 2j j co Díethylamíno-CH2CO- | 2-1 i 1 2k j co tBil02CCH2N{CH3)CH2C0- i 19 ! I 21 | co HO;;CCH2N(CH3)CH2CO- i 8 ! | 2m I co ho2cch2ch2co- i 3 | j 2n | co 1,2,4-Triazo!-2-y!CHjCO- ! 15 i | 2o | co -CN | 14 | 2p j co NH2CH2- | 13 | 2q | co Hex3hydrocycSopení[a:]pyrroiot3,4-c]c3rbazole-7{6H}-on8-3-NHCH2- ! 167 | | 2r j co ch3conhch2- ! 13 i | 2s j co CH3CH2CONHCH2- ; 28 ! I 2t | co CH3CHzCH2CONHCHr j 44 i | 2u | co Benzoyl-NHCH2- i 37 I I 2v | co B0C-NHCH2C0NHCHr I 33 i | 2w | co BOC-NH(CH2)3CONHCH2- | 33 | | 2.x | co H2NCH2CONHCH2- | 45 | 2y j co H2N(CH2)3CONHCH2- I 54 | ! 2z | co CH302C(CH2)2C0NHCHr j 10 | | 2sâ j co CH302C(CH2)3C0NHCHr j 9 i | 2ab | co HQ2C{CH2)2CONHCHr i 50 i | 2ac | co H02C(CH2)3CONHCH2- i 48 ! | 2ad | co boc-nhch2- i 93 i | 2ae | co -so3h i 8 i I 2af I CHj Cl | 120 | | 2ag i ch2 -co2h | 80 | | 2a h i ch2 -co2ch3 I 59 | | 2a i j ch2 -CONHCH2CH2NMe2 | 165 | | 2aj | CH, -CONHCH2CH2NC4HsO i 162 ! I 2a k ch2 -CONC4HeO ! 83 i | 2a I CH;; -CON{CH3)CH2(4-Pyf) ! 65 i | 2am I CHa -CON(CH3}CH2CH2(1-imida2ole) ! 161 i | 2a n | ch2 -CON(CH3)CH2(2-Pyr) j 237 | 46

No, A J (3-Substituent) PARP ie50 (nM) 2ao CO -OH 27 2ap co ~och3 32 2aq CO -och2ch2oh2ch3 59 2a r co -OCHjCHjNEÍj. 88 2a s co -OCH2CH2CH2NMe2 100 2at co -och2ch2nc4h8o 22 2au co -OAc 33 2av co -CHO 29 2aw co -CH2OH 22 2ax co -CHOHCH3 102 2ay CH-OH H 408 2az CO -ch2ch3 116 2ba co -coco2ch3 12 2bb co -coco2h 5 2bc co -ch2cn 24 2bd co -co2h 85 2be co -ch2ch2nh2 36 2bf co -ch3 82 2bg co -CH2OCOCH2NMô2 31 2 b h co -conh2 31 2bi co -co2ch3 27 2bj co -CH2NMe2 29 2bk co -CH2WHEl 32 2bl co ~CB2N!,Pr 16 2bm co -CH2NEt2 17 2 b n co -CH2N;lBu2 28 2bo co -CH2N(CH2Ph)2 293 2 b p co -CHjNHnBu 25 2bq co -CH2NHCH2Ph 26 2br co -CHjNHPr 25 2bs co -Cri;.,N:Pr:, 25 2bt co -CH2NHMe 25 2bu co -CH2NMe3 73 2bv co -ch2nc4h3o 32 2bw co -CH2NcC4Ha 35 2bx co 'CH2NcC5H10 35 2by co -CH 2NHCOCH2( 1 -tetrazofe) 14 2bz co -CH2NHC0{CH2)2C02CH3 62 47

No. A J {3-Substítuent) PARP IC50 (nM) 2ca CO -CH2NHC0(CH2}2NHC02tBu 95 2cb co -CH2NHCO(CH2)2NH2 75 2cc CO -ch2nhso2ch3 29 2cd co -CH2NHS02Ph 39 2ce co -CH2NHCHO 34 2cf CHOH -ch2nhcho 124 2cg CO -CONHCH2CH2NMe2 31 2ch CO -CONHCH2CH2CH2NMe2 33 2c i CO -CONHCH2(4-Pyr) 13 2cj CO -CONHCH2CH2(4-imidazole) 15 2ck co -CONH(CH2)sNMe2 51 2c f co -CONHCH2(3-Pyr) 21 2cm co -CONHCH2CH2NCgH10 148 2cn co -CONHCH2CH2NÓ4HaO 26 2co co -CONH(CH2)2OCH3 18 2cp co -CONC4HeO 12 2cq co -CONC4H8NCH3 12 2cr co -CONHCH2(.2-THF) 14 2cs co -conhnc4nch3 42 2ct co -CONMeCH2CH2CH2NMe2 89 2cu co -CONMeCH2CH2NMe2 151 2cv co -CONHCH2CH2(2'Pyr) 18 2cw co -CON MeCH2CH2(2-Py r) 24 2cx co -CONMeCH2(4-Pyr) 10 2cy co -CONMeCH2(4-Piperdinyl) 23 2cz co -C02CH2CH2NMe2 30 2da co -CONH{CH2)2OH 15 2db co -CONC4HsC(ethy!eneketa!) 11 2dc co -CONH[(CH2)2OH]2 18 2dd co -conc4h8co 14 2de co -CH2OEt 43 2df co -CH2OCH2CH2(2-Pyr> 104 3a co 2-Aminoíhiazoi-4-yl- 25 3b co 2- Methy íth iazol-4-y I- 40 3c co 2-Methyl-5-bromothiazol-4-yl- 84 3d co 2-Amino-5'methylthiazol'4-yl- 50 3e co 2-[(B0CNH)CH(C02tBu){CH2)3NH] thiazol-4-yl- 46 3f co 2-[NH2CH(C02H)(CH2)3NH] thiazol-4-yl- 22 48

No, A J (3-Subsíituent) PARP ICS0 (nM) 3g CO 2-Guanidinoíhiazo!-4-yí- 19 3h co 2-(MethySam:inc}thiazol-4-yl- 54 3i CO 2-{Acetamína)thía20í-4-y!- 54 3j co 2~ (Pti CH2CON H CH 2}thia20i-4-y í- 20 3k co 2-(Amínometby,l)thiazoI-4-yl- 42 31 co 2'(Acetamino)imidazoi~2--yl· 47 3m co 2“(Methanesuifonylaminomethyl) thiazol-4-yl- 16 3n co 2-(Acetaminomeíhyl)thíazol-4-yl- 20 30 co 2-{EíNHCONHCH2)íhiazoi-4-yi- 20 3p co 2-(íBuS02CH2)ihiazoí-4-yl- 21 3q co 2-(tBu02CCH2)thiazol-4-yl- 29 3r co 2-(isapentanoyíNHCH2)ihiazol-4-yl- 56 3s co 2-(PropanoylNHGH2)thiazo!-4-yl- 56 3t co 2-{lsobutanoylNHCH2)thiazoí-4-y!- 32 3u co 2-ÍButanoy IN HC H a)th iazol-4-y S- 42 3v co 2-{PentenoylNHCHa)thiazoí-4-yl· 56 3w co 2-{CyclopropanecarbonylNHCH?)-thiazol-4-yl- 49 3x co 2-(Cyç|opentansc.arttonylNHCH2)-ihiazol-4-yl- 52 3y co 2-{tButylC02CH2)thíazol-4-yl- 60 3z co 2-íCH3S02CH2)thiazol-4-yl- 38 3aa co 2-(Oxazol-5-yl)íhiazol-4-yS- 66 3ab co 2-(G 1 ucosa mino)thiazol-4-y 1- 17 4a co 2-{CH302C) pyrrolid in e-C H2CO- 12 4b co 2-(tBu02C)pyrrolidine-CH2CO- 12 4c co 2-(H02C)pyrroíidine-CH2CO- 7 4d co íBoc:NH(CH2}2NHCO(CH2)2CO- 16 4e co H2N(CH2}2NHCO(CH2)2CO- 22 4f co Morphoiino-CO(CH2)CO- 13 4g co HO(CH2)2NHCO{CH2)2CO- 9 4h co 2-(tBu02C)pyiT0Íidín-1-yl-C0{CH2}C0- 7 4i co Et2NCO{CH2)2CO- 12 4j co 2-(H02C)pyri'o!idin-1-yl-CO(CH2}2CO- 2 4k co 3-(H02C)pyrazin-2-yl-C0- 1 4I co 6-Keto-4,5-díhydropynd3zin-3-yi- 17 4m co 8-Keto' 1 ~m etb y 1-4,5-d ib ydropy ridazin ~ 3~yl- 12 4n co H02C(CH2)3C0- 2 4o co 2-(H2NCO)pytTolídin-1'yí~CO(CH2)2CO- 13 4p co Píperidi n-1 -y !-CO(CH2}2CO- 10 49

No. A J (3-Substituent) PARP IC50 (nM) 4q co 4-BOC-Piperazin-1-yi-CO(CH2)2CO- 10 4c co Piperazin-1-yl-CO(CH2)2CO- 15 4s co Octahydroazocin-1-yl-CO{CH2)2CO- 26 4t co Pyrrolidin-1-yl-CO(CH2)2CO- 16 5a ch2 H 108 5b ch2 -Br 30 5c ch2 -CN 18 5d ch2 -CH2NH2 27 5e ch2 -ch3 800 5f CHZ (BOC)2:Lys-NHCH2- 670 5g ch2 Lys-NHCB2- 80

Exemplo 7

Dados inibidores de PARP para os compostos la, 5a, e 6b-p de fórmula IV em que V é NR1

Tabela 3 (exemplos de referência)

No A B E F I J R1 R2 PARP IC90 (nM) 1a CO CO (CH2)3 H H H 36 5a ch2 CO (CH2)3 H H H 108 6b co co ch3 ch3 H H H 700 6e co co (CHz}3 3-Br H Lys 69 6f co co (CH2)3 3-Ci H Lys 62 6g co co (CH2)3 3-F H Lys 48 6h CHZ co (CH2)3 H H -CHO 3000 6i ch2 co (ch2)3 3-Br Lys H (35% @ 3 uM] 6j CH2 co (CH2)3 3-CN Lys H 460 6k co co (ch2)3 H H -CHO 78 61 co co (CH2)3 H H -CH2OH 138 6n CO-NH co (CH2)3 H H H 60% (10 μΜ) 6o CH-OH/CO CO/CH-OH (CH2}3 co2h H H 287 6p co co (CH2)3 CH2NMe2 CH2OH H 55 50

Exemplo δ

Dados Inlbidores de PARP para os compostos 8b-j de fórmula Ilb, em que R1 é H, e R2 é H R* !

Tabela 4 (exemplos de referência)

No. A B D1 D2 E,F PARP IC50 (nM) 8b CO CO CH CH (CH2)3 40 8c co CO Br-C CH (CH2)3 5 8d CO co NC-C CH (CH2)3 6 8e CONH co CH CH (CH2)3 1820 8f CO co C-Br C-Br (CH2)3 20 8g CO co C-CH2NH2 H (CH2)3 89 8h CO co C-CH=CH-HC=N-C (CH2)3 3 8i CO co C-CH=CH-CH=N(CH3)-C (ch2)3 1523 8J ch2 ch2 C-HC=CH-CH=CH-C (CH2)3 42% (10 uM) 8k CO co C-CH=CH-C(CH3)=N-C (-ch2)3 2

Exemplo 9

Dados de inibição de VEGFR2 e MLK3 para os compostos 11a a 13b de fórmula IV em que V é NR1 A Tabela 5 contém dados de percentagem de inibição de enzimas de VEGFR2 e MLK3 nas concentrações indicadas, a menos que indicado em contrário. Para algumas entradas, é avaliado um valor de IC50. 51

Tabela 5 (exemplos de referência) 5E c o o eo ® & CM cc Lu ϋ LU > 2 c N- N- tt 3> O 2 c <0 05 C£ O ifi O £T O O @ # o Έ cc N» h- Λ g c to to X" g o co co 1 S sr LO tO o tf; g Tf CM CM 27% @ 10 uM O I £ VEGFR2 @ 300 nM CM CM Tf CM to CM CO τ— o> o T— co s C 4 05 g tn £ •± r· (§) s? X £ 05 τ— <£3 CM to MT CM LO tO 0O CM <D to T— Tf N- Tf CO Tf LO to O Tf CM T* Έ T" © co -J £ L0 T~ to CO O Tf CM CO CM CO co co N* CM QC X X X X X X X X X X X X O | ~s* S'. í o § x ·: i O X I ™ Q |o CM X O (M X O « X o LLÍ o o CM X o ÍM x: O 1 >1 CM è α X O o C-.J X α ΓΜ X O z o CN X o CM X o C m O X c cú ô X Tf X X Q£ X I X o X Q X X X X X X X X X XI X X X X X X X c m O X 4 X X “> X 1 X X X X X X X X X X X X “3 X X X X X X X <*> X Q cO cr< X O 1 LU <r> I o *1 "^CN x: O i2 4^ X 5}' "In X o X o il X o X o il X o CM X u cm X o o X υ li X o ô o X CJ II X o X o fl X o 2: II X O X Q tl X o X il X o X fl X o X II X o X o It X o Z I) X O X X o o Ϊ) il X X ο I o X : Z il j II X : X O I o LU X o li X o z t> X o X o li X o z II X o X o II X o z II X o X o II X o z II X o X o II X u z II X o X o II X O z II X o X o B X O z il X o X o II X o z II X O X o II X υ z II X O LU yj m C'J X o o o O O o Q o o o o o o o υ O O CM X o o o o o υ X o X o o i o o j υ co o o o υ o o o o o o O O O υ O O O O < o o o o o o O o o o o o o o o o O O o o o Cm X o CM X o o o ο ί o O ] o < o o o o o o o o o o O O o o o Q O O O 2 re t·· T“ Λ 'í" *»* o r* r*“ Ό Φ 'Ç— T“ **-» τ» T~ CS +“ v*· JZ CS CM T“* * ÍN O M t* Ό CM **** φ *»» CM CM T- T- O Z CS CM r* JZ CM t** ÍN t* <\T Jj£ CM T“ CM r* E CM ÍZ CM ·*** o CM r< 52 s c o o t·} (V CC LL O Ui >

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Exemplo 10

Dados de inibição PARP, VEGFR2 e MLK3 para os compostos 14 e 15 da fórmula IV, em que J é H, e R2 é H

Tabela 6 (exemplos de referência)

No. A B E, F V PARP % @10 μΜ MLK3 % @ 1 μΐη 14 CO CO (CH2)3 s 19 18 15 CO CO (CH2)3 0 18 13

Exemplo 10a

Dados de inibição de PARP para os compostos 14a e 14b de fórmula IV em que R2 é H

Tabela 7 (exemplos de referência)

No. A B E,F J V PARP IC50 (nM) 14a CO CO (CH2)3 2-OCH3 NH 224 14b CO CO (CH2)3 4-OCH3 NH 19

Exemplo 10b

Dados de inibição de PARP para os compostos 15a-15m de fórmula IV em que B é CO, V é NH, R2 é H, e E-F = (CH2)3 54

Tabela 8 (exemplos de referência)

Example A J PARP IC50 (nM) 15a CO -3-OCONC4H80 35 15b co -3-OCONC4H8NCH3 51 15c CO -3-OCONH(CH2)2OCH3 40 15d co -3-OCONH(CH2)3(1-imidazol) 32 15e co -3-OCONH(CH2)3(1-butyrolactam) 28 15f co -3-OCONHCH2(3-pyridyl) 34 15g co -3-OCONH(CH2)2(2-pyridyl) 36 15h co -3-OCONCH3(CH2)2(2-pyridyl) 39 15i co -3-OCONCH3 [CH2(4-pyridyl)] 30 15 j co -3-OCONHCH2(5-tetrazole) 16 15k co -3-0C0NHNC4H80 20 151 co -3-OCONC4H8N(CH2)2OH 15 15m co -3-OCONH(CH2)2(2-pyridyl) 31

Exemplo 11 Síntese de materiais de partida e intermediários. Métodos e materiais utilizados na síntese de materiais de partida, intermediários, e inibidores são como se segue. Foi realizada cromatografia de camada fina em placas de sílica gel (MK6F 60A, tamanho de 1 x 3 polegadas, espessura da camada 250 mm; Whatman Inc., Whatman House, RU) . Foi realizada cromatografia em camada fina preparativa em placas de sílica gel (tamanho 20 x 20 polegadas, espessura da camada 1000 micron; Analtech, Newark, NJ) . Foi realizada cromatografia em coluna preparativa utilizando Merck, Whitehouse Station, NJ, sílica gel, 40-63 mm, 230-400 mesh. Foi realizada HPLC sob as seguintes condições: 1) solventes A = 0,1% de TFA em água, B = 0,1% de TFA em acetonitrilo (10 a 100% de B em 20 min ou 10 a 95% de B em 20,5 min), 2) coluna: Zorbax Rx-C8 (4,6 mm x 15 cm), 3) taxa de fluxo: 55 1,6 mL/min 0 espectro NMR foi registado num instrumento GE QE Plus (300 MHz) utilizando tetrametilsilano como padrão interno. Os espectros de massa de electropulverização foram registados num instrumento VG plataform II (Fisons Instruments). A Figura 1 descreve a síntese de intermediários, precursores e materiais de partida para os compostos da presente invenção. A síntese de la é também descrita nela. O intermediário C foi preparado da maneira seguinte. A uma solução arrefecida (-78°C) de indol (A, 20 g, 171 mmol) em THF seco (80 mL) foi lentamente (ao longo de 30 min) , adicionado 2,5 M de nBuLi em hexanos (68,40 mL, 171 mmol). A mistura foi agitada a -78°C durante mais 30 minutos, levada até à temperatura ambiente e agitada durante 10 min e arrefecida novamente até -78°C. O dióxido de carbono foi em seguida borbulhado na mistura de reação durante 15 min, seguido de agitação adicional por 15 min. O excesso de CO2 (com alguma perda concomitante de THF) foi removido, à temperatura ambiente do balão de reação por aplicação de uma câmara de vácuo. Foi adicionada THF seco adicional (25 mL) à mistura de reação que foi de novo arrefecida a -78°C. 1,7 M t-BuLi (100,6 mL, 171 mmol) foi lentamente adicionado à mistura de reação durante 30 min. A agitação foi continuada durante 2 h a -78°C, seguido pela adição lenta de uma solução de ciclopentanona (B, 15,79 g, 188 mmol) em THF seco (80 mL) . Depois de uma agitação adicional de 1 hora a -78°C, a mistura de reação foi extinta por adição gota a gota de água (10 mL) seguido de solução saturada de NH4CI (100 mL) . Foi adicionado éter etílico (300 mL) ao balão e a mistura foi agitada durante 10 min à temperatura ambiente. A camada orgânica foi separada, seca (MgSCq) , 56 concentrada e triturada com éter etílico (40 mL). O sólido separado foi filtrado, lavado com éter frio e seco sob alto vácuo para dar 22,40 g do composto C, como um sólido branco. Outra dose de 4,88 g foi obtida a partir de licor mãe e lavagens As propriedades físicas incluem mp 133- 141 °C, Rt 8,68 min; 1H-NMR (DMSO- d6) δ 8,46 (br. s, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,36 (d, 1H) , 7,17 (t, 1H), 7,09 (t, 1H) , 6,34 (s, 1H) , 2,2-1,6 (m, 8H) . Uma amostra analítica foi recristalizada a partir do refluxo de metanol-água. Anal. Cal. para C13H15NO: C, 77,58; H, 7,51; N, 6,96.

Encontrado: C, 77,13; H, 7,12; N, 6,96. O intermediário D foi preparado do seguinte modo. A uma solução do composto C (20 g, 99,50 mmol) em acetona (150 mL) adicionou-se lentamente 2 N de HC1 (20 mL) durante um período de 10 min. A mistura foi agitada durante mais 10 min e foi adicionada água (300 mL) . Em repouso, apareceu lentamente um precipitado. O precipitado foi filtrado, lavado com uma mistura de água-acetona (2:1, 3 x 50 mL) e seco sob vácuo, para produzir 13,57 g de D, que foi utilizado no passo seguinte sem qualquer purificação adicional. O licor mãe combinado e as lavagens, em repouso, geraram um outro 3,72 g de sólido branco. As propriedades físicas para D incluem: mp 166-167°C; 1H-NMR (DMSO-de) δ 8,12 (br. s, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,16 (t, 1H), 7,06 (t, 1H), 6,42 (s, 1H) , 6,01 (s, 1H) , 2,79 (m, 2H) , 2,60 (m, 2H) , 2,08 (quinteto, 2H) . Uma amostra analítica foi purificada por cromatografia em gel de sílica (hexanos-éter, 80:20). Anal. Cal. para C13 H13N: C, 85,21; H, 7,15; N, 7,64. Encontrado: C, 85,08; H, 7,16; N, 7,64. O intermediário F foi preparado da seguinte maneira. Uma mistura do composto D (13,57 g, 74,20 mmol) e E (14,4 g, 57 148 mmol) foi misturado e aquecido puro a 190 °C num tubo selado durante 1 hora, arrefecido até à temperatura ambiente, triturado com metanol frio e filtrado. O residuo foi lavado várias vezes com metanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 10,30 g do composto F, que foi utilizado no passo seguinte sem qualquer purificação adicional. O composto F caracterizado como um sólido amorfo amarelo, 1H-NMR (DMSO-de) δ 11,15 (s, 1H) , 10,89 (s, 1H) , 7, 65 (d, 1H), 7,23 (d, 2H), 6, 91 (m, 2H) , 424 (d, 1H) , 3,30 (m, 2H) , 2,60 (m, 1H) , 2,14 (m, 1H) , 1, 92 (m, 1H) , 1,45 (m, 3H) , 1, 13 (m, 1H) . MS m/e 279 (M-H) O composto G (la, 5,7, 8, 9, 10, 11-hexahidrociclopent [a] pirrolo[3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona) foi preparado do modo seguinte. Uma mistura do composto F (10,20 g, 36,42 mmol), DDQ (20,7 g, 91,18 mmol), e tolueno (100 mL) foi aquecida a 60°C num tubo selado durante a noite, arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi lavado várias vezes com metanol (volume total de 250 mL) para remover todos os subprodutos. A secagem sob alto vácuo gerou 7,8 g do composto G (la), que foi utilizado sem qualquer purificação adicional. O Composto G, também identificado como la, ocorre como um sido amorfo amarelo apresentando Rt 10,90 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 11,80 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H) , 8,70 (s, 1H ), 7,50 (m, 2H) , 7,20 (t, 1H) , 3,25 (2 conjuntos, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , MS m/e 275 (ΜΗ) .

Os exemplos que se seguem são preparados de precursores e compostos dentro do âmbito da presente invenção (Exemplos 202 (16b), 203-208) e os exemplos de referência (Exemplos 12-201, 202 (16c)). 58

Exemplo 12 Preparação de lb A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,016 g, 0,4 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,1 g, 0,36 mmol) em DMF seco (3 mL). Depois da libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado éter benzil-3 mesilpropil (0,11 g, 0,45 mmol) em DMF seco (1 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 60°C durante 1,5 h, vertida água gelada (cerca de 10 g) e extraida com acetato de etilo (2 x 15 mL) . A camada orgânica combinada foi lavada com água (1 x 10 mL) , salmoura (1 x 10 mL) e concentrada para dar um residuo que foi triturado com éter-hexano (1; 1, 5 mL) para dar um sólido. O sólido foi lavado com metanol e seco para dar 0,046 g de lb. 0 Composto lb é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt 17, 92 min; 1H-NMR (DMSO- d6) δ 11,90 (s, 1H) , 8, 70 (d 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t , IH), 7,10 (m, - 5H) , 4, 30 (s 2H) , 3,70 (t, 2H) , 3, 50 (t, , 2H), 3,25 (2 conjuntos de t 4H) , 2,25 (m, 2H) , 1,80 (m, 2H), MS m/e 423 (M-H).

Exemplo 13 Preparação de lc A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,016 g, 0,4 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,1 g, 0,36 mmol) em DMF seco (3 mL). Depois da libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado éter benzil 4-bromobutironitrilo (0,08 g, 0,54 mmol) em DMF seco (1 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 60°C durante 1,5 h, vertida numa mistura de água e gelo (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo foi lavado com metanol e seco para dar 0,08 g de lc. lc é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; R, 14,31 min; 1H-NMR (DMSO-dô) δ 11,90 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t, 1H) , 59 3,70 (t, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,50 (t, 2H) , 2,25 (m, 2H) , 1,90 (m, 2H) , MS m/e 342 (M-H) .

Exemplo 14 Preparação de ld. A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,088 g, 2,2 mmol) em DMF seco (4 mL) foi adicionado lentamente la (0,55 g, 2 mmol) em DMF seco (3 mL). Depois da libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado l-cloro-3- iodopropano (0,49 g, 0,54 mmol) em DMF seco (3 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 100°C durante 6 h, concentrada a um volume menor e vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 20 g) e filtrada. O residuo foi lavado com metanol e seco para dar 0,4 g de ld. O Composto 1D é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 16,59 min; 1H-NMR (DMSO-d6) 8 11,90 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t, 1H) , 3,70 (m, 4H) , 3,25 (2 conjuntos de

t, 4H) , 2,25 (m, 2H) , 2,10 (m, 2H) , MS m/e 351 e 353 (M-H para diferentes isótopos de cloro).

Exemplo 15 Preparação de le

Uma solução de lb (0,042 g, 0,1 mmol) em DMF (10 mL) foi hidrogenada num aparelho Parr na presença de Pd(0H)2 (0,020 g) e 1 gota de HC1 concentrado. HC1 a 40 psi durante 2 h. A mistura de reação foi então filtrada através de uma almofada de Celite ® e concentrada para dar um residuo que foi triturado com metanol para gerar 0,018 g de le. O Composto le é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt 12,18 min; 1H-NMR (DMSO-d6; ) δ 11,90 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t, 1H) , 3,70 (t, 2H) , 3,50 (t, 2H), 3,40 (largo , 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m, 2H), 1,80 (m, 2H), MS m/e 333 (M-H). 60

Exemplo 16 Preparação de lf

Uma mistura de ld (0,062 g, 0,18 mmol) e piperidina (0,06 g, 0,7 mmol) em etanol (4 mL) foi aquecida (80-85°C) num tubo selado durante 3 dias. Após o arrefecimento, a mistura reacional foi vertida sobre uma mistura de gelo e água (cerca de 20 g) e filtrada. O resíduo foi seco, dissolvido em metanol (5 mL) e tratado com negro de fumo. A filtração e evaporação do solvente geraram 0,005 g de lf. O Composto lf é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,63 min; MS mie 402 (Μ + H).

Exemplo 17 Preparação de lg

Uma mistura de ld (0,066 g, 0,19 mmol) e excesso de morfolina em etanol (2 mL) foi aquecida (80-85°C) num tubo selado durante 3 dias. Após o arrefecimento, a mistura reacional foi concentrada, tomada em metanol (3 mL) e arrefecida a 0°C. A adição gota a gota de água à solução anterior, em seguida, gerou um sólido que foi filtrado e redissolvido em acetato de etilo. A secagem e evaporação do solvente deu 0,019 g de lg. O Composto lg é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 12,91 min 1H-NMR (DMSO-d e) δ 11, 90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H) , 7,50 (m 2H) , 7,25 (t, 1H) , 3, 70 (t, 2H) , 3,25 (m, 6H) , 2,25 (m 10H), 1,80 (m, 2H); MS mie 404 (Μ + H).

Exemplo 18 Preparação de lh

Uma mistura de ld (0,052 g, 0,15 mmol) e excesso de dietilamina em etanol (2 mL) foi aquecida (80-85°C) num tubo selado durante 3 dias. Após o arrefecimento, a mistura reacional foi vertida sobre uma mistura de gelo e 61 água (cerca de 20 g) e filtrada. O resíduo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,015 g de lh. O licor mãe combinado e as lavagens, em repouso, produziram outro 0,014 g de lh. O Composto lh é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,47 min; 1H-NMR (CDC13) δ 9,00 (d, 1H) , 8,30 (s, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7.25 (t, 1H), 3,70 (t, 2H) , 3,30 (t, 2H) , 3,10 (t, 2H) , 2.25 (m, 6H) , 2,30 (m, 2H) , 1,90 (m, 2H) , 1,00 (t, 6H) ; MS mie 390 (Μ + H).

Exemplo 19 Preparação de lj A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,008 g, 0,2 mmol) em DMF seco (1 mL) foi adicionado lentamente la (0,05 g, 0,18 mmol) em DMF seco (2 mL) . Depois da libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado cloreto de fenilsulfonilo (0,035 g, 0,2 mmol) em DMF seco (3 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 60°C durante 1 h, vertida em água gelada (cerca de 20 g) e filtrada. O resíduo foi lavado sucessivamente com água e metanol e seco para dar 0,036 g de 1j. O Composto lj é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 16,19 min; 1H-NMR (DMSO-d6) 12,10 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,10 (d, 2H), 7,70 (m , 3H) 7,50 (m, 2H) , 7,30 (t, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) 2,25 (m, 2H), MS m/e 415 (MH).

Exemplo 20 Preparação de lk A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,048 g, 1,2 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,3 g, 1,1 mmol) em DMF seco (4 mL) e a mistura foi agitada durante 30 min. Num frasco separado, uma mistura de Boc-Lys (Boc) de sal diciclohexilamina (1,16 mmol, 2,2 62 mmol) , TBTU (0,71 g, 2,2 mmol) , NMM (0,22 g, 2,2 mmol) em DMF seco (5 mL) foi agitada durante 30 min e adicionada ao primeiro frasco de reação. A mistura foi agitada durante 1 h (HPLC mostrou 70% de um produto novo), vertida para uma mistura de gelo e água (cerca de 20 g) e filtrada. O residuo foi lavado várias vezes com água, seco sob alto vácuo, dissolvido em dioxano (3 mL) e a ele adicionado 4 N de HC1 em dioxano (3 mL) . Após agitação durante 1 h à temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada e o residuo foi lavado várias vezes com dioxano, seguido por éter. A secagem sob alto vácuo gerou 0,1 g de lk. O Composto lk é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 5,93 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 8,80 (d, 1H) , 8,70 (largo, 3H), 8,00 (largo , 3H), 7,60 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 5,00 (largo, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,70 (largo, 2H), 2,25 (m, 2H) , 2,00 (2 conjuntos de largo, 2H) , 1,50 (m largo, 4H); MS mie 406 (M +2 H).

Exemplo 21 Preparação de 11.

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito antes para a síntese de lk. Assim, partindo de 0 , i g de la e 0, 14 g de Boc-beta- -alanina, foi obtido 0,025 g de 11. c ) 11 caracteriza-se como um sólido amorfo amarelo; Rt 7,45 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (S, 1H), 8,70 (d, 1H) , 8,00 (largo, 3H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H) , 3,30 (t, 2H) , 3,25 (m, 6H) , 2,25 (m, 2H) ; MS mie 348 (Μ + H) . Exemplo 22 Preparação de lm Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito antes para a síntese de lk. Assim, 63 partindo de 0,1 g de la e 0,13 g de Boc-glisina, foi obtido 0,028 g de lm. O Composto lm é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,14 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 8,30 (largo, 3H), 7, 60 (m, 2H) , 7,30 (t, 1H) , 4,30 (s, 2H) , 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H) ; MS mie 334 (M + H) .

Exemplo 23 Preparação de lp. A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,08 g, 2 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,5 g, 1,8 mmol) em DMF seco (4 mL) . Depois da libertação de gás H2_ ter cessado, foi adicionado 2-bromoacetato de benzilo (0,46 g, 2 mmol) em DMF seco (2 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 60°durante 1 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 20 g) e filtrada. O resíduo bruto foi então purificado por cromatografia flash em coluna (20% de THF em tolueno) para gerar 0,2 g de lp. O composto lp é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 14,59 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H), 8,50 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (m, 6H), 5,10 (s, 2H) , 4,50 (s, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H); MS mie 423 (M-H).

Exemplo 24 Preparação de ln A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,029 g, 0,73 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,17 g, 0,6 mmol) em DMF seco (3 mL). Depois da libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado éter benzílico de 2-bromoetilo (0,16 g, 0,73 mmol) em DMF seco (1 mL) ao balão de reação. A mistura foi agitada a 60°C durante 4 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo bruto foi então purificado por 64 cromatografia flash em coluna (20% de THF em tolueno) para gerar 0,13 g de ln. O composto ln é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 14,62 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 11, 90 (s, 1H) , 8,50 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,20 (m, 6H) , 4,50 (s, 2H) , 3,70 (dd sobrepostos, 2H) , 3,60 (dd sobrepostos, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H); MS m/e 409 (M-H).

Exemplo 25 Preparação de lo

Uma solução de ln (0,1 g, 0,24 mmol) em DMF (8 mL) foi hidrogenada num aparelho Parr na presença de Pd(OH)2 (0,025 g) e 1 gota de HC1 concentrado. HC1 a 45 psi durante 16 h. A mistura de reação foi então filtrada através de uma almofada de Celite® e concentrada para dar 0,077 g do produto desbenzilado correspondente a um sólido amarelo amorfo; Rt 10,37 min; 1H-NMR (DMSO-d6) d 11,90 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 4,80 (t, 1H), 3,60 (m, 4H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m, 2H). MS m/e 319 (M-H). O produto acima (0,052 g, 0,163 mmol) foi convertido, na presença de cloreto de p-toluenossulfonilo (0,214 g, 1,122 mol) e piridina (3 mL) para um derivado de p-toluenossulfonilo correspondente (0,07 g) . Uma solução deste composto (0,05 g) em THF (2 mL) e o excesso de dietilamina foram então submetidos a refluxo num tubo selado durante 2 dias. O excesso de solvente e reagente foram removidos. O resíduo foi lavado várias vezes com metanol e seco sob alto vácuo para gerar 0,20 g de lo. O composto lo é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,06 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 11,90 (s, 1H) , 8,75 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t, 1H) , 3,60 (t, 2H) , 3,25 (2 conjuntos 65 de t, 4H) , 2,60 (t, 2H) , 2,50 (q, 4H) , 2,25 (m, 2H) , 0,80 (t, 6H); MS mie 376 (Μ + H).

Exemplo 26 Preparação de lq

Uma solução de lp (0,030 g, 0,071 mmol) em MeOH-DMF (1:1, 10 mL) foi hidrogenada num aparelho Parr na presença de 10% de Pd-C (tipo Degussa, 50% de teor de água) a 40 psi durante 15 min. A mistura de reação foi então filtrada através de uma almofada de Celite® e concentrada para dar 0,025 g de lp. O Composto ip é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,36 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 8,75 (d, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 7,25 (t, 1H) , 4,25 (s, 2H) , 4, 00-3, 00 (largo, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m , 2H) ; MS mie 333 (M-H).

Exemplo 27 Preparação de lr.

A uma solução de lq (0,20 g, 0,060 mmol) em DMF seco (2 mL) a 0°C, foi adicionada EDCI (0,012 g, 0,063 mmol). A mistura foi agitada durante 10 min e a ela adicionou-se complexo de amoniaco HOBt (0,017 g, 0,112 mmol,; 1,12 g do complexo foi preparado por reação de 1,30 g de HOBt e 1,1 mL de hidróxido de amónio a 28% em 10 mL de acetona, seguido por remoção dos solventes) . O banho de gelo foi removido e a mistura foi agitada durante a noite. Foi então vertida sobre uma mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,012 g de lr. O Composto lr é caracterizado como um sólido amarelo; Rt 9,28 min; MS m/e 332 (M-H). 66

Exemplo 28 Preparação de ls A uma suspensão de hidreto de sódio (60% em óleo, 0,016 g, 0,4 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado lentamente la (0,1 g, 0,36 mmol) em DMF seco (3 mL), Após a libertação de gás H2- ter cessado, foi adicionado N-bromometilftalimida (0,096 g, 0,4 mmol) em DMF seco (1 mL) ao balão da reação. A mistura foi agitada a 60°C durante a noite, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,1 g de ls. ls é caracterizado como um sólido amarelo; Rt 13 ,07 min; 1H- -NMRM (DMSO-de) δ 12 O O V (s, 1H), 8 ,75 (d, 1H), 7, 80 (m, 4H), 7, 50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 5,50 (s, 2H), 3, 25 (m, 4H), 2, 25 (m. , 2H) ; MS mie 434 (M-H). Exemplo 29 Preparação de lt ll-Metil-5-,7,8,9,10,llhexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c] carbazole-7(6H)-ona. O Composto 5a (20 mg, 0,076 mmol) em DMF (0,2 mL) foi tratado com Mel (11,4 mg, 0,08 mmol) e NaH (8,1 mg de 60%, 0,2 mmol) durante 18 h. Foi adicionado água (1 mL) . O precipitado resultante foi submetido a refluxo com acetona, arrefecido, e o precipitado foi recolhido para dar o produto como um sólido branco (9 mg, 43% de rendimento) . MS mie 277 (M + H) + . NMR (DMSO-d6) δ 8,45 (s, 1H) , 7,95 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,55 (t, 1H), 7,30 (t, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,12 (s, 3H), 3,52 (t, 2H), 3,40 (t, 2H), 2,25 (quinteto, 2H) . 67

Exemplo 30 Preparação de lu

Foi preparado bis (t-butoxicarbonil)-lisil derivado tal como descrito para lk, e purificado por cromatografia (CH2CI2-Et20) para dar um vidro amarelo. MS mie 613 (M + Na)+.

Exemplo 31 Preparação de lv ll-L-lisil-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo [3,4-c]carbazole-7(6H)-ona.

Os grupos BOC de lu foram hidrolisados com 2 M de HC1 em dioxano para dar o produto como um sólido acastanhado. MS mie 391 (M + H)+, 263 (M + H-lisil) + . NMRM (DMSO-d6) δ 12,1 (s, 1H) , 8,6 (s, 3H) , 8,4 (s, 3H) , 8,08 (1H, d), 8,0 (s, 3H) , 7,62 (d, 1H) , 7,50 (t, 1H) , 7,32 (t, 1H) , 5,35 (s, 2H) , 5,15 (m, 1H) , 3,85 (m, 1H) , 2,75 (m, 2H) , 2,2-1,5 (m, 6H) .

Exemplo 32 Preparação de 2a

Uma mistura de la (1 g, 3,6 mmol), N-bromossuccinimida (0,64 g, 3,62 mmol) e DMF seco (20 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi então vertida em metanol (100 mL) e filtrada. O sólido precipitado foi lavado várias vezes com metanol e seco sob alto vácuo para gerar 0,97 g de 2a. O produto caracteriza-se como um sólido amorfo amarelo, com propriedades; Rt 12,39 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 8,70 (s, 1H) , 7,60 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , MS mie 353 e 355 (M-H para diferentes isótopos de bromo). 68

Exemplo 33 Preparação de 2b

Uma mistura de la (0,20 g, 0,72 mmol) , N-clorossuccinimida (0,106 g, 0,75 mmol) e DMF seco (5 mL) foi aquecida num tubo selado a 60°C durante 1 h. Após o arrefecimento, a mistura reacional foi vertida para metanol (10 mL) e filtrada. O sólido precipitado foi lavado várias vezes com metanol e seco sob alto vácuo para gerar 0,11 g de 2b. O Composto 2b é um sólido amarelo amorfo; Rt 14,06 min; 1H-NMR (DMSO-dg) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 8,70 (s, 1H) , 7,50 (m, 2H ), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , MS mie 309 e 301 (M-H para diferentes isótopos de cloro) .

Exemplo 34 Preparação de 2c

Começando com 5-fluoroindole, este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento de múltiplos passos conforme

descrito para a sintese de la a partir de indol. O composto 2c é caracterizado como um sólido laranja amorfo;

Rt 11,50 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 8,50 (d, 1H) , 7,50 (m, 1H) , 7,30 (t, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 293 (M-H).

Exemplo 35 Preparação de 2d A uma suspensão de AICI3 (0,072 g, 0,54 mmol) em 1,2-dicloroetano (2 mL) a 0°C foi adicionado cloreto de acetilo (0,042 g, 0,54 mmol). Uma suspensão de la (0,050 g, 0,18 mmol) em 1,2-dicloroetano (4 mL) foi adicionada lentamente ao balão de reação. O banho de arrefecimento foi removido e a mistura foi agitada durante 4 h, vertida sobre uma mistura de gelo (cerca de 10 g) e 2 N de HC1 (10 mL) e 69 filtrada. 0 resíduo foi lavado com água, agitado durante a noite numa mistura de metanol-água (4:1, 5 mL) e filtrado. Foi lavado com pequenos volumes de metanol e éter, respectivamente, e seco sob vácuo para gerar 0,023 g de 2d. O Composto 2d é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,82 min (largo); 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,25 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (largo em, 2H); MS mie 317 (M-H).

Exemplo 36 Preparação de 2e

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito antes para a síntese de 2d. Assim, partindo de 0,050 g de la e 0,10 g de brometo de bromoacetilo, foi obtido 0,045 g de 2e. 2e é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,76 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,30 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 4,80 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H). MS mie 396 (M-H).

Exemplo 37 Preparação de 2f

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito antes para a síntese de 2e. Com base em 0,2 g de material de partida la, foi obtido 0,2 g de 2f. O composto 2f é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,96 min; 2H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,50 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 5, 70 (q, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , 1,80 (d, 3H). MS mie 410 (M-H) 70

Exemplo 38 Preparação de 2g

Uma mistura de 2e (0,036 g, 0,09 mmol), trietilamina (0,010 g, 0,10 mmol) e N-metilpiperizina (0,010 g, 0,10 mmol) em DMF seco (2 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 0,5 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,010 g de 2g. O composto 2g é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt 5,77 min; 1H-MNR (DMSO-de) δ 12,25 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,50 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,70 (s, 2H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,50 (largo, 4H), 2,25 (m largo, 6H), 2,10 (t, 3H). MS mie 417 (Μ + H).

Exemplo 39 Preparação de 2h

Uma mistura de 2e (0,040 g, 0,10 mmol), trietilamina (0,011 g, 0,11 mmol) e morfolina (0,0096 g, 0,11 mmol) em DMF seco (2 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O resíduo foi lavado várias vezes com água e

seco sob alto vácuo para produzir 0,019 g de 2h. O

Composto 2h é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; 6,50 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,25 (s, 1H) , 11,00 (s, , 9,50 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 3,70 (s, , 3,50 (largo, 4H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,40 (largo, 4H), 2,25 (m largo, 2H); MS mie 404 (Μ + H).

Exemplo 40 Preparação de 21

Uma mistura de 2e (0,040 g, 0,1 mmol), trietilamina (0,01 g, 0,11 mmol) e piperidina (0,009 g, 0,11 mmol) em DMF seco (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 0,5 h, 71 vertida sobre uma mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O resíduo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,034 g de 2i. O Composto 2i é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,32 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,25 (largo, 1H) , 11,00 (largo, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,50 (d, 1H) , 3,50 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,40 (largo, 4H) , 2,25 (m largo, 2H), 1,50 (largo, 4H); 1,30 (largo, 2H). MS mie 402 (Μ + H).

Exemplo 41 Preparação de 2j

Uma mistura de 2e (0,040 g, 0,1 mmol), trietilamina (0,012 g, 0,12 mmol) e dietilamina (0,009 g, 0,12 mmol) em DMF seco (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O resíduo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,026 g de 2j. O Composto 2j é caracterizado como um sólido amorfo castanho-escuro; Rt, 7,04 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,25 (largo, 1H) , 11,00 (largo, 1H) , 9,50 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,70 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,60 (q, 4H), 2,25 (m largo, 2H), 1,00 (t, 6H). MS mie 390 (Μ + H).

Exemplo 42 Preparação de 2k.

Uma mistura de 2e (0,050 g, 0,13 mmol), trietilamina (0,028 g, 0,27 mmol) e cloridrato do éster t-butílico de sarcosina (0,025 g, 0,135 mmol) em DMF seco (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 72 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O resíduo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,035 g de 2k. O Composto 2k é caracterizado como 72 um sólido amarelo amorfo; Rt 9, 20 min (largo) ; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H), 8,20 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 4,10 (s, 2H) , 3,40 (s, 2H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,40 (s, 3H) , 2,25 (m largo, 2H), 1,40 (s, 9H); MS mie 461 . (M + H) . Exemplo 43 Preparação de 2L Uma mistura do composto 2k (0,018 g, 0,039 ' mmo1) e ácido trifluoroacético (0,3 mL) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Ácido trifluoroacético em excesso foi removido e foi adicionado acetato de etilo (5 mL) ao balão da reação. Lentamente, um sólido que apareceu foi filtrado, lavado várias vezes com acetato de etilo e seco sob alto vácuo para gerar 0,016 g de 21. O Composto 21 é caracterizado como um sólido amorfo amarelo; Rt 6,34 min (largo); 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 4,70 (s, 2H) 3,70 (s, 2H) , 3,50 (largo, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t 4H) , 2,70 (s, 3H), 2,25 (m largo, 2H); MS mie 406 (Μ + H) .

Exemplo 44 Preparação de 2m A uma suspensão de A1C13 (2,89 g, 21,7 mmol) em 1,2- dicloroetano (5 mL) a 0°C foi adicionado anidrido succinico (1,086 g, 10,86 mmol) em 1,2-dicloroetano (5 mL) . Uma suspensão de la (1 g, 3,62 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 mL) foi adicionada lentamente ao balão de reação. O banho de arrefecimento foi removido e a mistura foi agitada durante 5 h, vertida sobre uma mistura de gelo (cerca de 10 g) e 2 N de HC1 (10 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água, agitado durante a noite numa mistura de metanol-água (4:1, 10 mL) e filtrada. 0 produto foi lavado com 73 pequenos volumes de água e éter, sequencialmente, e seco sob vácuo para gerar 1,16 g de 2m. 0 composto 2m é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,17 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,30 (s, 1H) , 12,10 (largo, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,50 (d, 1H) , 3,40 (m, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,60 (m, 2H) , 2,25 (m largo, 2H). MS mie 375 (M-H).

Exemplo 45 Preparação de 2n. A uma solução do composto 2e (0, 040 g, 0,1 mmol) em DMF seco (2 mL) foi adicionado derivado de sódio de 1,2,4-triazol, (0,014 g, 0,14 mmol). A mistura foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 10 g) e filtrada. O residuo foi lavado várias vezes com água e seco sob alto vácuo para produzir 0,024 g de 2n. O Composto 2n é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,28 min; 1H-NMR (DMSO-de) 8 12,50 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8, ,50 (s, 1H) 8,20 (d, 1H) , 8,00 (s, 1H), 7,50 (d, 1H) , 6, 00 (s, 2H) 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) ; MS m/e ' 38 (Μ + H) .

Exemplo 4 6 Preparação de 2o. seco Método de CuCN: Uma mistura de 2a (0,1 g, 0,28 mmol), CuCN (0,075 g, 0,85 mmol) e l-metil-2-pirrolidinona (4 mL) foi aquecida a 175°C num tubo selado durante a noite, arrefecida para a temperatura ambiente, passada através de uma almofada de silica, concentrada até um pequeno volume e vertida em água (20 ml). O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água, seco e purificado por 74 cromatografia em coluna (eluente: EtOAc) para produzir 0,006 g de 2o. Método de Zn(CN)2: Uma mistura de 2a (2,33 g, 6,56 mmol) e Zn(CN)2 (1,56 g, 13,3 mmol) foram dissolvidos em DMF (22 mL) sob azoto. Foi adicionado Pd(Ph3P)4 (1,17 g, 0,10 mmol, 15% mol) , e a mistura foi agitada a 125°C durante 80 min. A solução quente foi filtrada a vácuo através de Celite® e a almofada lavada com DMF quente. 0 filtrado foi diluído com dois volumes de água. O precipitado resultante foi recolhido, seco, e triturado com acetato de etilo e lavado com acetato de etilo, depois com éter, obtendo-se o produto ligeiramente impuro como um sólido castanho-alaranjado (2,17 g). Este poderia ser purificado por cromatografia de coluna, como acima. O composto 2o é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,51 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,40 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,00 (s 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t 4H), 2,25 (m largo, 2H); MS mie 300 (MH).

Exemplo 47 Preparação de 2p 3-(aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona hidrocloreto. 3-ciano-5-,7,8,9,10,11 hexahidrociclopent[a]pirrolo [3,4-c] carbazole-5(6H),7-diona 2o (580 mg) foi dissolvido em DMF (58 ml ). A solução foi saturada com amónia e hidrogenada a 55 psi W-2 níquel de Raney preparado de fresco (R. Mozingo, Org. Synth. 1955 3, 181-183) (2,4 g) , durante 7 dias. 0 níquel Raney adicional foi adicionado conforme necessário. 0 precipitado, que contém o catalisador e algum produto foi removido e o solvente evaporado do filtrado para proporcionar o produto bruto de cor laranja (408 mg). 0 produto em bruto foi suspenso em água (70 mL) 75 e 1 M de HC1 (1,5 mL) e misturado com Celite® 521 e, em seguida, filtrado. 0 residuo foi liofilizado para dar o produto como um sólido amarelo (288 mg, 44% de rendimento). NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,02 (s, 1H) , 8,85 (s, 1H) , 8,36 (s largo, 3H), 7,65 (m, 2H), 4,19 (s largo, 2H), 4,00 (s, 2H) , 3,28 (t, 2H), 3,21 (t, 2H), 2,31 (quinteto, 2H) . NMR (D20) d 7,58 (s, 1H) , 7,24 (d, 1H) , 7,03 (d, 1H) , 4,07 (s, 2H) , 2,10 (m, 2H) , 1,90 (m, 2H) , 1,65 (m, 2H) . MS mie 289 (M + H-NH3+' 306 (Μ + H) +' Anal. Cale. para Ci8Hi5Na02_ 2,1 HCI -1,6 H20: C, 52, 64; H, 4,98; N, 10,23 Cl; 18,13. Encontrado: C, 52,38; H, 4,61; N, 10,03; Cl, 18,29.

Exemplo 48 Preparação de 2q

Bis-[5 (6H),7-dioxo-5-,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c]carbazole-3-il-metil] amina. O o-ciano-5-,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona 2o (115 mg) dissolvido em DMF foi hidrogenada como acima, mas na ausência de amónia, o HPLC indicou uma mistura 60:40 do dimero 2q e do monómero 2p. A mistura foi agitada com 0,01 M de HCI (50 mL) e filtrada. O precipitado foi extraído com DMF (15 mL) para dar o produto como um sólido amarelo. NMR (DMSO-de) δ 10,09 (s, 2H) , 9,31 (s, 2H) , 8,03 (d, 2H) , 7,73 (d, 2H) , 4,13 (s largo, 4H) , 3,28 (t, 4H) , 3,21 (t, 4H) , 2,30 (quinteto, 4H). MS mie 594 (Μ + H)+.

Exemplo 49 Preparação de 2r 3-(acetilaminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c] carbazole-5(6H),7-diona. EDCI (30 mg, 0,156 mmol) foi adicionado a uma suspensão de 3-(aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrol 76 [3,4-c] carbazole-5(6H),7-diona (2p, 31 mg 0,10 mmol) , NMM (15 ul, 13 mmol), H0BT-H20 (16 mg, 0,10 mmo1) ), e ácido acético (10 mg, 0,17 mmo 1) em DMF (0,5 mL) . Todos os sólidos se dissolveram em 10 min. Após 2 dias, foi adicionado água (4 ml) . 0 precipitado foi recolhido e lavado com água, saturado com NaHC03, água, 1 M de HC1 e água, depois seco para se obter o produto (2r, 23 mg, 73% de rendimento) como um sólido castanho dourado. NMR (DMSO-d6) δ 11,92 (s, 1H) , 10,95 (s, 1H) , 8,71 (s, 1H) , 8,43 (t, 1), 7,54 (d, 1H), 7,43 (d, 1H), 4,43 (d, 2H) , 3,27 (t, 2H) , 3,19 (t, 2H) , 2,30 (quinteto, 2H) , 1,91 (s, 3H) . MS m/e 346 (M-H)".

Exemplo 50 Preparação de 2s 3-(Propanoilaminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona.

Preparado a partir de 2p e ácido propiónico por um procedimento semelhante ao utilizado na preparação de 2r. NMR (DMSO -d6) δ 11 ,93 (s, 1H) , 10,96 (s, 1H) , 8,71 (s, 1H) , 8,40 (t, D, 7, 52 (d, 1H) , - 7, 44 (d, 1H) , 4,42 (d, 2H), 3, 30 (t, 2H) , 3,22 (t, 2H) , 2, . 35 (quinteto, 2H) , 2,22 (q, 2H) , 1,11 (t, 3H) . MS m/e 360 (M- ΗΓ.

Exemplo 51 Preparação de 2t 3-(Butanoilaminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona.

Preparado a partir de 2p e ácido butirico por um procedimento análogo para a preparação de 2r. NMR (DMSO-d6) δ 11,90 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,40 (t, 1), 7,52 (d, 1H) , 7,42 (d, 1H) , 4,42 (d, 2H) , 3,35 (t, 2H) , 77 3,26 (t, 2H) , 2,28 (quinteto, 2H) , 2,15 (t, 2H), 1,60 (m, 2H), 0,89 (t, 3H). MS m/e 374 (M-H)'.

Exemplo 52 Preparação de 2u 3-(benzoilaminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo[3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona.

Preparado a partir de 2p e ácido benzóico por um procedimento semelhante ao descrito para a preparação de 2r. NMR (DMSO- -d6) δ 11, 94 (s, - 1H), r 10,95 (s, \—1 9,18 (t, \—1 9, 82 (s, 1H) , 7, 95 (d, 1H) , £ O LO r-~ 6H) , 4, 67 (d, 2H) , 3, 27 (t, 2H) , 3,19 (t, cu 2,30 (quinteto, 2H) . MS m/e 408 (M- -ΗΓ

Exemplo 53 Preparação de 2v

Preparado a partir de 2p e BOC-glicina por um procedimento semelhante ao descrito para a preparação de 2r. NMR (DMSO-d6) δ 11,93 (s, 1H) , 10,96 (s, 1H) , 8,71 (s, 1H) , 8,38 (t, 1), 7,54 (d, 1H), 7,46 (d, 1H) , 6,96 (s largo, 1H) , 4,45 (d, 2H) , 3,61 (d, 2H) , 3,27 (t, 2H) , 3,19 (t, 2H) , 2,33 (quinteto, 2H), 1,40 (s, 9H). MS m/e 461 (M-H)“.

Exemplo 54 Preparação de 2w

Preparado a partir de 2p e ácido BOC-4-aminobutírico por um procedimento semelhante ao descrito para o 2r. NMRM (DMSO-d6) δ 11,87 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H) , 8,70 (s, 1H) , 8,36 (t, 1), 7,52 (d, 1H) , 7,43 (d, 1H) , 6,77 (s largo, 1H) , 4,41 (d, 2H), 3,24 (t, 2H) , 3,17 (t, 2H) ; 2,93 (q, 2H) , 2,29 (quinteto, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,65 (quinteto, 2H) , 1,37 (s, 9H) . MS m/e 489 (M-H) 78

Exemplo 55 Preparação de 2x

Este composto foi preparado por tratamento de 2v com 2 M de HC1 em dioxano. NMR (D20) δ 7,40 (s, 1H) , 7,07 (d, 1H) , 6,89 (d, 1H), 4,32 (s largo, 2H), 3,90 (s largo, 2H), 3,76 (m, 4H) , 1,99 (m, 4H) , 1,65 (m, 2H) . MS m/e 363 (M + H) + .

Exemplo 56 Preparação de 2y 3-(N-(4-(amino)butanoil)aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo-[3,4-c]carbazol-5(6H),7-diona

Este composto foi preparado por tratamento de 2w com 2 M de HC1 em dioxano NMR (D20) δ 7,36 (s, 1H) , 7,03 (d, D , 6, 85 (d , 1H) , 4,26 (s , 2H) , 3,84 (t, 2H) , 3,76 (m, 2H) , 3, 68 (t , 2H) , 3,09 (t , 2H) , 2,45 (t, 2H) , 2,02 (m, 4H) . 2, 15 (t, 2H), 1 , 61 (m, 2H) . MS m/e 391 (M + H)+.

Exemplo 57 Preparação de 2z

Preparado a partir de 2p e succinato de monometilo por um procedimento semelhante ao descrito para a preparação de 2r. MS m/e 418 (M-H)'.

Exemplo 58 Preparação de 2aa 3-(N-(4-(Metoxicarbonil(butanoil)aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[ajpirrolo-[3,4-c]carbazol-5(6H),7-diona

Preparado a partir de 2p e metilglutarato por um procedimento semelhante ao descrito para a preparação de 2r. MS m/e 432 (M-H)'. 79

Exemplo 59 Preparação de 2ab 3-(N-(4-(Carboxil(propanoil)aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo-[3,4-c]carbazol-5(6H),7-diona

Foi adicionado anidrido succinico (3,1 mg, 0,031 mmol) a uma suspensão de 3-(aminometil)-5, 7,8, 9,10,11- hexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona (9,8 mg, 0,029 mmol) e NMM (9 ul, 0,082 mmol) em DMF (0,2 mL). Dissolveu-se o sólido em 30 min, e em seguida formou-se um novo precipitado. Após 1 h, foi adicionado 1 M de HCl. 0 precipitado foi recolhido, lavado com água e, em seguida seco para se obter o produto 2ab (11,4 mg, 98% de rendimento) como um sólido amarelo. MS m/e 404 (M-H)“.

Exemplo 60 Preparação de 2ac 3-(N-(4-(Carboxil(butanoil)aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo-[3,4-c]carbazol-5(6H),7-diona

Preparado a partir de anidrido glutárico por um procedimento semelhante ao descrito para 2ab. MS m/e 418 (M-H)”.

Exemplo 61 Preparação de 2ad 3-(N-Boc-aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahydrociclopent[a] pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona.

Foi adicionado NMM (14 mg, 0,14 mmol) a uma mistura de 3-(aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo [3,4-c]carbazole-5(6H),7-diona (2p, 15 mg, 0,045 mmol) e di-t-butilo carbonato (18 mg, 0, 082 mmol) em DMF (1 mL) . Após 2 h, a mistura foi filtrada, e foi adicionado água (5 mL). O precipitado foi recolhido e lavado com 3% de ácido cítrico, NaHCCb saturado, e água, em seguida seco para se 80 obter o produto (12 mg, 6 7 % de rendimento) como um sólido castanho dourado. Este sólido pode ser purificado por cromatografia sobre gel de silica (EtOAc) para dar um sólido amarelo. NMR (CDC13) δ 8,78 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,49 (m, 1H) , 7,31 (m, 1H) , 5,00 (m, 1H) , 4,51 (s, 1H), 3,40 (t, 2H), 3,16 (t, 2H) , 2,39 (quinteto, 2H) , 1,53 (s, 9H). MS m/e 404 (M- ΗΓ.

Exemplo 62 Preparação de 2ae.

A uma suspensão de 5a (0,1 g, 0,36 mmol) em cloreto de metileno (2 mL) a 0°C, foi adicionado lentamente ácido clorossulfónico (0,05 g, 0,4 mmol). A mistura de reação foi agitada a 0°C durante mais 30 min, em seguida agitada à temperatura ambiente durante a noite e filtrada. 0 residuo foi lavado, sucessivamente, com cloreto de metileno e éter. Foi depois purificado por HPLC preparativa para produzir 0,008 g de 2ae. O composto 2ae é um sólido amarelo amorfo; Rt 4,89 min (largo); 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,50 (s, 1H) , 2,25 (m largo, 2H) ; MS m/e 355 (M-H).

Exemplo 62a Preparação de 2af A uma solução do exemplo 5a (26 mg, 0,10 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada N-clorossuccinimida (15 mg, 0,11 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h antes de ser adicionada gota a gota a um balão de água com agitação (10 ml) . O precipitado resultante foi recolhido por filtração por sucção, lavado com água (3x5 mL) e seco até ao peso constante para dar 15mg (52%) do composto em 81 epígrafe como um sólido esbranquiçado. MS: m/e = 295/297 (M + H) + .

Exemplo 62b Preparação de 2ag

Uma suspensão do exemplo 5c (305 mg, 1,06 mmol) em 1,4-dioxano (15ml) e ácido clorídrico concentrado (15) foi aquecida ao refluxo durante 72h. 0 dioxano foi removido por evaporação rotativa e o produto foi recolhido por filtração por sucção, lavado com água até à neutralidade e seco ao ar até ao peso constante para dar 315mg (97%) do composto do título na forma de um sólido escuro ou castanho claro. MS: m/e = 305 (M-H)+'

Exemplo 62c Preparação de 2ah A uma solução do exemplo 2ag (75mg, 0,25 mmol) em DMF (5 mL) e etanol (1 mL) foi adicionada uma solução de (trimetilsilil) diazometano (2 M em hexanos, 0,6 mL, 1,2 mmol). Depois de ter sido agitada durante 4 h foi adicionadas algumas gotas de ácido acético glacial, os solventes foram removidos sob vácuo, e o resíduo foi suspenso em água (5 ml) e liofilizado para proporcionar 11 mg (91%) do composto do título como um sólido escuro ou castanho claro. MS: m/e = 319 (M-H)+'

Exemplo 62d Preparação de 2al A uma solução do exemplo 2ag (20 mg, 0.065mmol) em DMF (3 mL) foi adicionado 1-hidroxibenzotriazole (HOBt, 13 mg, 0,098) e hevafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris (dimetilamino) fosfónio (BOP, 43 mg, 0.098mmol). A mistura foi agitada durante 2 horas foi adicionado, N,N- 82 dimetietilenediamina (9 mg, 0.098mmol) e a agitação foi continuada durante 1-3 h ou até considerada completa por análise de HPLC. A mistura foi concentrada até um resíduo oleoso, lavada muito bem com éter, dissolvido em 0,5 N DE HC1 (5 ml), filtrada para clarificar e liofilizada para dar 25 mg (93%) do composto do título. MS: m/e = 377 (M + H)+'

Exemplo 62e Preparação de 2aj

Este composto foi preparado de acordo com o procedimento descrito acima para o Exemplo 2ai. De 2ag (20 mg, 0.065mmol) e 4-(2-aminoetil) morfolina (13 mg, 0.098mmol) foi obtido 29 mg (97%) do composto do título. MS: m/e = 419 (M + H)+.

Exemplo 62f Preparação de 2ak

Este composto foi preparado de acordo com o procedimento descrito acima para o exemplo 2ai excepto que o isolamento do produto foi obtido por diluição da mistura de reação com acetato de etilo (15 mL) e o precipitado resultante lavado com acetato de etilo (2x5 mL) e éter (5 ml) . Do exemplo 2ag (20 mg, 0.065mmol) e morfolina (7 mg, 0.078mmol) foi obtido 4 mg (17%) do composto do título na forma de um sólido acastanhado. MS: 376 (M + H)+.

Exemplo 62g Preparação de 2al

Este composto foi preparado de acordo com o procedimento descrito acima para o Exemplo 2ai excepto que o isolamento do produto foi obtido por evaporação do DMF, agitado o resíduo com metanol (3 ml) e lavagem do precipitado resultante com 50% de metanol/éter (5 mL) e éter (5 mL) . 83

Do exemplo 2ag (20 mg, 0.065mmol) e 4-(N-metil-aminometil) piridina (12 mg, 0.098mmol) foi obtido 18 mg (67%) do composto do titulo como um sólido castanho claro. MS: 411 (M + H) + .

Exemplo 62h Preparação de 2am

Este composto foi preparado de acordo com o procedimento descrito acima para o Exemplo 2ai excepto que o isolamento do produto foi obtido por evaporação do DMF, agitando-se o resíduo com 50% de metanol/éter (2 ml) e lavagem do precipitado resultante com éter (2x3ml). Do exemplo 2ag (20 mg, 0.065mmol) e dicloridrato de N-metil-histamina (21 mg, 0.104mmol) foi obtido 5 mg (19%) do composto do título como um sólido castanho claro. MS: 414 (M + H)+.

Exemplo 62±

Preparação de 2an

Este composto foi preparado de acordo com o procedimento descrito acima para o Exemplo 2ai. Do exemplo 2ag (20 mg, 0.065mmol) e 2-(N-metilaminometil)piridina (13 mg, 0.104mmol) foi obtido 27 mg (99%) do composto do título na forma de forma de um sólido castanho claro. MS: m/e 411 (M + H) + .

Exemplo 62j Preparação de 2ao

Uma mistura de 5-tri-isopropilsililoxi-2-(1-

hidroxiciclopentil) indol (0,4 g, 1 mmol) e maleimida (0,15 g, 1,6 mmol) em ácido acético foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada a pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno, lavado com uma solução de NaHCCh a 10% e seco (MgSCg) · O 84 agente de secagem foi removido por filtração e o solvente foi concentrado para dar 0,31 g MS: m/e 451 (M-H) + . O aducto de Diels-Alder (1,2 g, 2,6 mmol) em HOAc (60 mL) foi adicionado a 30% de H202 (15 mL) , seguido por aquecimento durante 90 minutos a 50°C. A mistura foi concentrada, em seguida a água adicionada e um sólido castanho recolhido, 1,07 g, MS: m/e 447 (M-H)+. O carbazole anterior (0,3 g, 0,66 mmol) e TBAF (1,67 mL de um 1 M de solução, 1,67 mmol) em CH3CN (40 mL) foram agitados durante 0,5 horas à temperatura ambiente. 0 solvente foi concentrado a pressão reduzida e o residuo foi repartido entre acetato de etilo e água. A camada de acetato de etilo foi seca (MgSCq) e concentrada para dar 0,13 g de 2ao. MS: m/e 291 (M-H)~.

Exemplo 62k Preparação de 2ap

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 2ao ou la iniciando com ácido 5-metoxi-2-(1-hidroxiciclopentil) indol para dar 2ap. MS m/e = 305 (M-H).

Exemplo 621 Preparação de 2aq

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 2ao ou la começando com 5-etoxietoxi-2-(1-hidroxiciclopentil) indol para dar 2aq. MS m/e = 363 (ΜΗ) .

Exemplo 62m Preparação de 2ar

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 2ao ou la começando com 5- 85 dietilaminoetiloxi-2-(1-hidroxiciclopentil) indol para dar o composto do titulo. MS m/e = 392 (M-H)+.

Exemplo 62n Preparação de 2as

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 2ao ou la começando com 5-dimetilaminoetiloxi-2-(1-hidroxiciclopentil) indol para dar o composto do titulo. MS m/e = 378 (Μ + H).

Exemplo 62o Preparação de 2at

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 2ao ou la começando com 5-morfolinoetoxi-2-(1-hidroxiciclopentil) indol para dar o composto do titulo. MS m/e = 406 (Μ + H).

Exemplos 62p-62x Dados para 2au-2bc 86

Tabela 9

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 62p 2an 333 (M-H)' 62q 2av 303 (M+H)+ 62r 2aw 305 (M-H)' 62s 2ax 319 (M-H)' 62t 2 ay 279 (M+H)+ 62u 2az 303 (M-H)" 62v 2ba 361 (M-H)' 62w 2bb 347 (M-H)" 62x 2bc 314 (M-H)'

Exemplo 62y Preparação de 2bd

Foi seguido o procedimento de carboxilação de Neubert e Fishel [Org. Synth. Col. vol. 7, 420-424 (1990)]. Foi adicionado cloreto de oxalilo (1,0 mL) , 1,45 g, 11,4 mmol) a uma suspensão agitada de cloreto de aluminio (1,50 g, 11,3 mmol) em 1,2-dicloroetano (20 mL) a 20°C. Após 1 min, foi adicionado la (1,00 g, 3,62 mmol) e a mistura foi agitada durante 40 min, depois vertida para 20 g de gelo e água (a evolução de gás) e agitada durante 10 min. O precipitado foi recolhido por filtração sob vácuo e enxaguado com água, 1M de HCI, água e, em seguida, seco para dar 1,11 g (95% de rendimento) de 2bd em bruto contaminado com 17% da cetona dimérica. Uma amostra pura de 2bd foi obtida por suspensão em solução aquosa diluida de Na2CC>3 e filtração seguida de acidificação com HCI.

Depois de vários dias, o gel resultante produziu um precipitado sólido o qual foi recolhido e seco. MS m/e 319 (M-H)'; XH NMR (DMSO-d6) δ 2,29 (2H, m) , 3,18 (2H, t) , 3,26 87 (2Η, t), 7,62 (1H, d), 8,11 (1H, d), 9,48 (1H, s) , 11,02 (1H, s) , 12,27 (1H, s) .

Exemplos 62z-62ad Dados para 2be-2bi

Tabela 10

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 62z 2be 320 (M+H)+ 62aa 2bf 289 (M-H)" 62ab 2bg 392 (M+H)+ 62ac 2bh 318 (M-H)- 62ad 2bi 333 (M-H)-

Exemplo 62ae Preparação de 2bj

Foi adicionado NaBH3CN (60 mg, 0,95 mmol) a uma solução do sal cloridrato de 2p (300 mg, 0,88 mmol) e formaldeido aquoso (0,10 mL, 37%, 1,23 mmol) em água (6 ml). Após 2,5 h, a solução foi basificada com solução saturada de Na2C03. O precipitado foi recolhido, lavado com água, e seco para se obter 2bj (207 mg, 71% de rendimento) . MS m/z 334 (M + H)+, 289 (M-Me2N)+; NMR (DMSO-d6) δ 2,30 (2H, m) , 3,18 (2H, t), 3,26 (2H, t), 4,08 (2H, br.), 7,58 (2H, Abq) , 8,82 (1H, s), 10,95 (1H, s), 12,01 (1H, s).

Exemplos 62af-62as

Procedimento geral para a preparação de 2bk-2bx 88

Tabela 11

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 62af 2bk 334 (M+H)+ 62ag 2bl 390 (M+H)+ 62ah 2bm 362 (M+H)+ 62ai 2bn 418 (M+H)+ 62aj 2bo 486 (M+H)+ 62ak 2bp 362 (M+H)+ 62al 2bq 396 (M+H)+ 62am 2br 348 (M+H)+ 62an 2bs 418 (M+H)+ 62ao 2bt 320 (M+H)+ 62ap 2bu 348 (M+H)+ 62aq 2bv 376 (M+H)+ 62ar 2bw 360 (M+H)+ 62as 2bx 374 (M+H)+

Exemplos 62at-62ba

Procedimento geral para a preparação de 2by-2cf 89

Tabela 12

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 62at 2by 416 (M+H)+ 62ay 2bz 448 (M+H)+ 62av 2 ca 475 (M-H)~ 62aw 2cb 377 (M-H)- 62ax 2cc 482 (M-H)' 62ay 2cd 444 (M-H)' 62az 2ce 356 (M+Na) 62ba 2cf 336 (M+H)

Exemplo 62bb Preparação de 2cg

Foi adicionado cloreto de oxalilo (0,010 mL, 14,5 mg,

0,114 mmol) a 2bd em bruto (28 mg, 0,0875 mmol) em DMF (0,28 mL) a 0°C. Após 1 h, a 20°C, o excesso de HC1 foi removido com uma corrente de azoto, e foi adicionado 2- (N, N-dimetilamino) etilamina (24 mg, 0,27 mmol) . Após 1 h, o precipitado foi recolhido, seco, e suspenso em 0,5 mL de 0,1 M de HC1. 0 precipitado (consistindo em cetona dimérica no material de partida em bruto) foi descartado e o sobrenadante foi liofilizado para dar 0 cloridrato de 2cg. MS m/z 391 (M + H)+; NMR (DMS0-d6) δ 2,31 (2H, m) , 2,88 (6H, d), 3,20 (2H, t), 3, 27 (2H, t ) , 7, 62 (1H, d) , 8,04 (1H, d), 8,71 (1H, br. S), 9,37 (1H, s) , 9, 65 (1H, br. s), 11,02 (1H, s), 12,24 (1H, s).

Exemplos 62bc-62ca

Procedimento geral para a preparação de 2ch-2df 90

Tabela 13

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 62bc 2ch 405 (M+H) 62bd 2ci 41 (M+H) 62be 2cj 414 (M+H) 62bf 2ck 451 (M+H) 62bg 2cl 411 (M+H) 62bh 2 cm 431 (M+H) 62bi 2cn 433 (M+H) 62bj 2co 376 (M-H) 62bk 2cp 388 (M-H) 62bl 2cq 403 (M+H) 62bm 2cr 404 (M+H) 62bn 2cs 388 (M+H) 62bo 2ct 418 (M+H) 62bp 2 cu 405 (M+H) 62bq 2cv 425 (M+H) 62br 2cw 439 (M+H) 62bs 2cx 425 (M+H) 62bt 2cy 431 (M+H) 62bu 2cz 392 (M+H) 62bv 2 da 392 (M+H) 62bw 2db 446 (M+H) 62bx 2dc 408 (M+H) 62by 2dd 400 (M-H) 62bz 2 de 333 (M-H) 62ca 2df 412 (M+H) 91

Exemplo 63 Preparação de 3a

Uma mistura de 2e (0,03 g, 0,08 mmol) , tioureia (0,006 g, 0,08 mmol) e etanol (1 mL) foi aquecida a 70 °C num tubo selado durante 1 hora. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e éter, respectivamente, e seco sob alto vácuo para produzir 0,025 g de 3a. O Composto 3a é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 6,68 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,50 (d, 1H) , 7,00 (s, 1H) , 3,50 (largo, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 375 (M+H).

Exemplo 64 Preparação de 3b

Uma mistura de 2e (0,05 g, 0,13 mmol), tioacetamida (0,01 g, 0,13 mmol) e etanol (1 mL) foi aquecida a 70°C num tubo selado durante 1 hora. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e éter, respectivamente, e seco sob alto vácuo para produzir 0,025 g de 3b. O Composto 3b é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,14 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (m largo, 2H); MS m/e 374 (Μ + H).

Exemplo 65 Preparação de 3e

Uma mistura de 2e (0,03 g, 0,07 mmol), Boc-L-thiocitruline-OtBu (0,01 g, 0,13 mmol) e etanol (1 mL) foi aquecida a 70°C num tubo selado durante 1 hora. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,010 g de 92 3e. 0 Composto 3e é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 12,23 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H), 9, 20 (s, 1H) , 8,20 (largo , 3H) , 8,00 (d, 1H), 7,80 (largo, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,50 (largo, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H), 1,70 (largo, 4H); MS m/e 646 (Μ + H).

Exemplo 66 Preparação de 3c

Uma mistura de 3b (0.05.1 g, 0,136 mmol), N-

bromossuccinamida (0,027 g, 0,152 mmol) e DMF (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 72 h, vertida sobre MeOH frio (6 mL) e filtrada. O sólido precipitado foi lavado várias vezes com pequenas porções de metanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,041 g de 3c. O

Composto 3c é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt 12,90 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H), 8,00 (d, 1H) , 7,60 (s , 1H) , 3,25 (2 conj untos de t, 4H) , 2,70 (s, 3H), 2,25 (m largo, 2H); MS m/e 452 e 454 (Μ + H para diferentes isótopos de bromo).

Exemplo 67 Preparação de 3d

Uma mistura do Exemplo 2f (0,1 g, 0,24 mmol), tioureia (0,03 g, 0,4 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado durante a noite. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e éter e seco sob alto vácuo para produzir 0,075 g de 3d. O Composto 3d é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 8,07 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,00 (s, 1H) , 8,80 (b , 2H) , 7,70 (dd, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,40 (s, 3H) , 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 389 (Μ + H). 93

Exemplo 68 Preparação de 3f

Uma mistura de 3e (0,060 g, 0,093 mmol), ácido trifluoroacético (1 mL) e água (2 gotas) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Os reagentes em excesso foram removidos e o resíduo foi triturado com acetato de etilo (5 mL) para produzir um sólido. A filtração e secagem sob alto vácuo geraram 0,048 g de 3f. O Composto 3f é caracterizado como um sólido amorfo amarelo. Rt 6.64 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 10 , 90 (s, 1H) , 9,20 (s, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 7, 60 (d, 1H) , 6, 90 (s, 1H) , 3, 70 (largo, 1H), 3,60 (largo, 4H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , 1,70 (largo, 4H); MS m/e 490 (Μ + H) .

Exemplo 69 Preparação de 3g.

Uma mistura de 2e (0,053 g, 0,133 mmol), 2-imino-4-tiobiureto (0,017 g, 0,144 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 7 0 °C num tubo selado durante a noite. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,055 g de 3g. 0 composto 3g é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 8,25 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H) , 9, 30 (s, 1H) , 8,20 (largo, 4H) , 8,00 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 7,50 (s, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo , 2H) ; MS m/e 417 (M + H) .

Exemplo 70 Preparação de 3h

Uma mistura de 2e (0,05 g, 0,126 mmol), metiltiourea (0,016 g, 0,133 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado por 1 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado 94 que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para gerar 0,03 g de 3h. O Composto 3h é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,92 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,10 (s 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H), 7 ,00 (s, 1H) , 3,75 (largo 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,40 (s, 3H) , 2,25 (: largo, 2H). MS m/e 389 (Μ + H) .

Exemplo 71 Preparação de 31

Uma mistura de 2e (0,05 g, 0,126 mmol), acetiltiourea (0,012 g, 0,133 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado por 1 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0, 044 g de 3i. 0 Composto 3i é caracterizado como um sólido amarelo amorfo ; Rt 10, 57 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H), 12,00 (s, 1H), 11, 00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 7,40 (s, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H), 2,10 (s, 3H). MS m/e 415 (M-H).

Exemplo 72 Preparação do 3j

Uma mistura de 2e (0,037 g, 0,093 mmol), N-benziloxitioglicinamida (0,028 g, 0,125 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado por 1 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado e lavado com éter para dar 0, 029 g de 3j . 0 Composto 3j ' caracterizado como um sólido castanho amorfo. Rt 12,81 min 1H-NMN (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H), 11, 00 (s, 1H) , 9, 30 (s 1H), 8, 30 (t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7, 80 (S, 1H) , 7, 60 (d 1H) , 7,30 (m, 5H) , 5,00 (s, 2H) , 4,50 (largo, 2H) , 3,25 (2 95 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H) . MS m/e 545 (M + Na), 523 (Μ + H).

Exemplo 73 Preparação de 3k

Uma mistura de 3j (0,06 g, 0,115 mmol) e 30% de HBr em HOAc (0,8 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. 0 excesso de reagente foi removido e o residuo foi triturado com éter para dar 0,052 g de 3k. O Composto 3k é caracterizado como um sólido amarelo amorfo. Rt 7,36 min; 1H-NMR (DMS0-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H), 8,60 (largo, 3H), 8,10 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,50 (largo, 2H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 389 (Μ + H).

Exemplo 7 4 Preparação de 31

Uma mistura de 2e (0,2 g, 5,037 mmol), acetilguanidina (0,153 g, 1,51 mmol) e DMF (3 mL) foi aquecida a 60°C num tubo selado por 1.5 h, concentrada sob alto vácuo e

triturada com água para dar 0,189 g de um material bruto. Este material foi lavado com etanol quente (3 x 75 mL) e seco sob alto vácuo para produzir 0,039 g de 31. O

Composto 31 é caracterizado como um sólido amorfo castanho;

Rt 7,41 min; 1H-NMN (DMSO-d6) δ 11,80 (s, 1H) , 11,60 (s, 1H), 11,30 (s, 1H), 10,80 (s, 1H), 9,10 (s, 1H) , 7,80 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,20 (s, 1H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H), 2,10 (s, 3H). MS m/e 400 (M + H) .

Exemplo 75 Preparação de 3m A uma mistura de 3k (0,015 g, 0,032 mmol) e trietilamina (0,007 g, 0,07 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente 96 foi adicionado cloreto de metanossulfonilo (0,004 g, 0,035 mmol). A mistura foi agitada durante 30 min, vertida sobre água gelada (1 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,005 g de 3 m. O Composto 3m é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,95 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H), 8,10 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,50 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,40 (s, 3H) , 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 489 (M + Na), 467 (Μ + H).

Exemplo 7 6 Preparação de 3n A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de acetilo (0,007 g, 0,09 mmol). A mistura foi agitada durante 30 min, vertida sobre água gelada (1 mL) e filtrada. O residuo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,01 g de 3n. O composto 3n é caracterizado como um sólido amarelo amorfo ; Rt 9,31 min 1H-NMR (DMSO-dg) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s 1H) , 8,70 (t, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,80 (s, 1H) , 7,60 (d 1H) , 4,60 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (i largo, 2H] , 1,90 (s , 3H). MS m/e 453 (M + Na) , 431 (Μ + H)

Exemplo 77 Preparação de 3o A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,01 g, 0,094 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado isocianato de etilo (0,0066 g, 0,09 mmol). A mistura foi agitada durante 30 min, vertida sobre água gelada (1 mL) e filtrada. O residuo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0, 008 g de 3o. O Composto 3o é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,38 min; 97 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,60 (d, 1H) , 7,40 (largo, 1H) , 6,70 (largo, 1H) , 4,50 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de

t, 4H), 3,10 (q, 2H), 2,25 (m largo, 2H), 1,00 (t, 3H). MS m/e 482 (M + Na), 460 (Μ + H).

Exemplo 78 Preparação de 3p

Uma mistura de 2e (0,05 g, 0,126 mmol) , 2-(t- butanossulfonilo) de tioacetamida (0,026 g, 0,132 mmol) e etanol (2 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado

durante a noite. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com acetato de etilo e éter e seco sob alto vácuo para gerar 0,02 g de 3p. O

Composto 3p é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt 11,73 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 8,00 (s, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 5,00 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, r 4H) , 2,25 (m largo, 2H) H) . , i, 30 (s, 9H) . MS m/e 516 (M + Na) , 494 (M +

Exemplo 7 9 Preparação de 3q

Uma mistura de 2e (0,05 g, 0,126 mmol), 2-(t- butoxicarbonil) de tioacetamida (0,024 g, 0,137 mmol) e etanol (2 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado durante a noite. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com acetato de etilo e éter e seco sob alto vácuo para gerar 0,02 g de 3q. O Composto 3q é um sólido amarelo amorfo; Rt 14,48 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,90 (s, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 5,50 (s, 2H) , 98 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H), 1,20 (s, 9H). MS m/e 496 (M + Na), 474 (Μ + H).

Exemplo 80 Preparação de 3r A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de isovalerilo (0,011 g, 0,094 mmol) . A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. 0 residuo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,019 g de 3r. O Composto 3r caracteriza-se como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,25 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 11/ 00 (s, 1H) , 9, 30 (s, 1H) , 8, 70 (t, 1H), 8,00 (d, 1H) , 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4, 60 (d, 2H) , 3,25 (2 conj untos de t, 4H) , 2,20 (m, 3H) , , 2 ,00 (largo, 2H) , 0, 90 (d, 6H) . MS m/e 495 (M + Na) , . 473 (M + H) .

Exemplo 81 Preparação de 3s A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de propionilo (0,009 g, 0,094 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O residuo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,019 g de 3s. O Composto 3s é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9, 97 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,70 (t, : 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4, 60 (d, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 4H) , 1,00 (d, 3H). MS m/e 467 (M + Na) , 445 (M + H) 99

Exemplo 82 Preparação de 3t A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de isobutirilo (0,010 g, 0,094 mmol) . A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,007 g de 3t. O Composto 3t é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,52 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (t largo, 1H) , 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4,60 (d, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 3,00 (m, 1H) , 2,25 (m largo , 2H) , 1,00 (d, 6H) . MS m/e 481 (M + Na) , 458 (M + H) .

Exemplo 83 Preparação de 3u A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de butirilo (0,010 g, 0,094 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,019 g de 3u. O Composto 3u é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10 , 64 min; NMR (DMSO-de) 8 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9, 30 (s, 1H) , 8,70 (largo t, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d , 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H), 2,10 (t, 2H), 1,50 (m, 2H), 0,70 (t, 3H). MS m/e 481 (M + Na), 458 (Μ + H). 100

Exemplo 84 Preparação de 3v A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de valerilo (0,011 g, 0,094 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,021 g de 3v. O Composto 3v é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,40 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,70 (t, 1H) , 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H) , 7,50 (d, , 1H), 4,60 (d, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H), 2,10 (t, 2H) , 1,50 (m, 2H) , 1, 20 (m, 2H), 0, 70 (t, 3H). MS m/e 495 (M + Na) , 473 (Μ + H) • Exemplo 85 Preparação de 3w A uma mistura de 3k (0 ,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmo1) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de ciclopropanocarbonilo (0,010 g, 0,094 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,017 g de 3w. O Composto 3w é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rf 10,34 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 9,00 (t largo, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,75 (s, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 4,60 (d, 2H) , 3,25 (m, 4H) , 2,25 (m largo, 2H) , 1,60 (m, 1H) , 0,70 (largo, 4H) . MS m/e 479 (M + Na), 457 (Μ + H) . 101

Exemplo 86 Preparação de 3x A uma mistura de 3k (0,04 g, 0,085 mmol) e trietilamina (0,019 g, 0,18 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de ciclopentanocarbonilo (0,012 g, 0,094 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, concentrada num evaporador rotativo, triturada com água (1 mL) e filtrada. O residuo foi lavado com água e éter e seco para produzir 0,016 g de 3x. O Composto 3x é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,59 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 8,70 (t largo, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,75 (s, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4,50 (d, 2H) , 3,25 (m, 4H) , 2,60 (m, 1H) , 2,25 (m largo, 2H) , 1,80-1,30 (m, 8H) . MS mie 507 (M + Na), 485 (M + H) .

Exemplo 87 Preparação de 3y

Uma mistura de 2e (0,042 g, 0,106 mmol), 2-(t- butilcarboniloxi)tioacetamida (0,022 g, 0,126 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado durante 2 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado e lavado várias vezes com etanol frio. O filtrado combinado e as lavagens foram concentrados sob vácuo elevado para gerar 0,018 g de 3y. O Composto 3y é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 15,67 min; 1H-NMR (DMSO-de ) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9, 30 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , . 7, 90 (s, 1H) , 7, 60 (d, 1H) , 5,50 (s, 2H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,25 (m largo, 2H) , 1,20 (s, 9H). MS m/e 472 (M-H). 102

Exemplo 88 Preparação de 3z

Uma mistura de 2e (0,04 g, 0,1 mmol), 2-(metilsulfonil) de tioacetamida (0,019 g, 0,12 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado durante 2 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,033 g de 3z. O Composto 3z é caracterizado como um sólido amarelo amorfo ; Rt 11,24 min; 1H-NMR (DMSO- •d6) δ 12 ,00 (s, 1H), 11, 00 (s, 1H) , 9, 40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 8, 00 (s, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 5,20 (s, 2H) , 3,60 (s, 3H) , 3, 25 (2 conjuntos de t, 4H) , 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 450 (M-H).

Exemplo 89 Preparação de 3aa

Uma mistura de 2e (0,044 g, 0,1108 mmol), isoxazol-5-tiocarboxamida (0,017 g, 0,1328 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75-80°C num tubo selado durante 2 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,036 g de 3aa. 0 Composto 3aa é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 13,77 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,80 (s, 1H) , 8,20 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 7,20 (s, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de largo, 4H) , 2,25 (m largo, 2H) . MS m/e 425 (M-H).

Exemplo 90 Preparação de 3ab

Uma mistura de 2e (0,044 g, 0,1108 mmol), N-[3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)tetra-hidro-2H-piran-2-il]-tioureia (0,032 g, 0,1344 mmol) e etanol (3 mL) foi aquecida a 75- 103 80°C num tubo selado durante 2 h. Ao arrefecer, apareceu um precipitado que foi filtrado, lavado várias vezes com etanol frio e seco sob alto vácuo para produzir 0,053 g de 3ab. O Composto 3ab é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 6,88 min; 1H-NMR o espectro (DMSO-dô) é complexo. MS m/e 537 (Μ + H).

Exemplo 91 Preparação de 4a

Uma mistura de 2e (0,042 g, 0,106 mmol), L-prolina cloridrato do éster metilico (0,028 g, 0,169 mmol) e N-metilmorfolina (0,032 g, 0,32 mmol) em DMF seco (3 mL) foi agitada a 60°C durante 4 h, vertida numa mistura de gelo e água (cerca de 20 g) e filtrada. O filtrado foi, em seguida, extraído com acetato de etilo-THF (1:1, 2 x 20 mL). A camada orgânica combinada foi seca (MgSCM) e concentrada para dar um resíduo, o qual por trituração com acetato de etilo (4 mL) gerou 0,008 g de 4a. O Composto 4a é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 8,82 min (largo); 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4,30 (d, 1H) , 4,10 (d, 1H) , 3,60 (m, 1H) , 3,50 (s, 3H) , 3,25 (2 conjuntos de t, 4H), 2,70 (q, 1H), 2,25 (m largo, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,70 (m, 4H); MS m/e 446 (Μ + H) .

Exemplo 92 Preparação de 4b

Uma mistura de 2e (0,1 g, 0,25 mmol), L-Pro-OtBu (0,048 g, 0,28 mmol), trietilamina (0,028 g, 0,28 mmol) em DMF (2 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, vertida sobre água gelada (4 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter, respectivamente, e seco sob alto vácuo para produzir 0,068 g de 4b. O Composto 4b é caracterizado 104 como um sólido amarelo amorfo; 9,73 min; 1H-NMR (DMSO-de) 12 ,20 δ (s, 1H), 11 , 00 (s , 1H) , 9,50 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H) 7, 60 (d, 1H), 4,20 (dd, 2H) , 3,50 (m, 1H) , 3,30 (m, 1H) 3, 25 (2 conj untos de t, 4H) , 3,00 (m, 1H) , 2,80 (m, 1H) 2, 25 (m largo, 2H) , 2,00 (m, 1H) , 1,80 (m, 2H) , 1,30 (s 9H). MS m/e 488 (Μ + H).

Exemplo 93 Preparação de 4c

Uma mistura de 4b (0,063 g, 0,13 mmol) e TFA (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. 0 reagente em excesso foi removido e o residuo foi triturado com acetato de etilo para gerar 0,05 g de 4c. O Composto 4c é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 6,64 min, 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,80 (dd, 2H), 4,20 (largo, 1H) , 3,50 (largo, 1H) , 3, 40-2, 80 (m, 6H) , 2,25 (m largo, 2H), 2,00 (m, 4H). MS m/e 432 (Μ + H).

Exemplo 94 Preparação de 4d

Uma mistura de 2m (0,02 g, 0,053 mmol), NMM (0,011 g, 0,1 mmol), TBTU (0, 034 g, 0,1 mmol) em DMF seco (2 mL) foi agitada durante 5 min. Uma solução de H2N (CH2)2NHtBoc (0,01 g, 0,054 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionada ao frasco de reação e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Foi então vertida em água (5 mL) e filtrada. O residuo foi lavado com pequenos volumes de água e éter, respectivamente, e seco sob alto vácuo para produzir 0,015 g de 4d. O Composto 4d é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,19 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 8,00 (largo, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,70 (largo, 1H), 3,40-2,70 105 (uma série de m, 8H) , 2,50 (m, 4H) , 2,25 (m largo, 2H) , 1.20 (s, 9H). MS m/e 517 (M-H).

Exemplo 95 Preparação de 4e

Uma mistura de 4d (0,012 g, 0,02 mmol) e 4 N de HC1 em dioxano (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e filtrada. O residuo foi lavado com pequenos volumes de dioxano e éter e seco sob alto vácuo para produzir 0,008 g de 4e. O composto 4e é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rf 7,23 min; 1H-NMR (DMSO-d6) 12,30 δ (s, 1H) , 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 8.20 (t largo, 1H), 8,00 (largo, 3H) , 7,60 (d, 1H) , 3,40 -2.50 (série de m, 12H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 417 (ΜΗ) .

Exemplo 96 Preparação de 4f

Este composto foi preparado por um procedimento similar ao descrito para o 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,05 g) e morfolina (0,015 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,012 g de 4f. O Composto 4f é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 9,84 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 3,70-3, 00 (série de m, 14H) , 2,70 (m, 2H) , 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 444 (M-H).

Exemplo 97 Preparação de 4g

Este composto foi preparado da mesma maneira como descrito para o 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,05 g) e etanolamina (0,011 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,027 g de 4g. O composto 4g é caracterizado como 106 um amarelo sólido amorfo; Rt 7,62 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ

12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) . 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 7, 90 (largo, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (t, 1H), 3,50- •3, 00 (série de m, 10H), 2,50 (t, 2H), 2,25 (m largo, 2H) . MS m/e 418 (M-H).

Exemplo 98 Preparação de 4h

Este composto foi preparado da mesma maneira como descrito para 4d. Consequentemente, a reação entre 2 m (0,05 g) e L-Pro-OtBu (0,030 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,058 g de 4 h. O Composto 4h é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 11,58 min; 1H-NMR (DMSO-dô) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4,60 e 4,20 (2 conjuntos de m rotamérico, 1H), 3,70-1,70 (série de m, 16H), 1,50 e 1,30 (2 conjuntos de s rotamérico, 9H). MS m/e 528 (M-H).

Exemplo 99 Preparação de 41

Este composto foi preparado da mesma maneira que para 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,05 g) e dietilamina (0,013 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram o, 030 g de 41. 0 Composto 41 é caracterizado como um sólido amorfo amarelo; Rt 9,95 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,50-3 , 00 (série de m, 10H) , 2,70 (m, 2H) , 2,20 (m, 2H) , 1,20 e 1, 00 (2 conjuntos de t rotamérico, 6H) . MS m/e 430 (M-H). 107

Exemplo 100 Preparação de 4j

Uma mistura de 4 h (0,05 g, 0,09 mmol), TFA (1 mL) e H20 (2 gotas) foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. Os reagentes em excesso foram removidos e o resíduo foi triturado com metanol. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com éter e seco sob alto vácuo para produzir 0,017 g de 4j. 0 Composto 4j é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,99 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11, 00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 4,60 e 4,20 (2 conjuntos de m rotamérico, 1H) , 3, ΙΟΙ, 70 (série de m, 16H). MS m/e 472 (M-H).

Exemplo 101 Preparação de 4k A uma suspensão de AICI3 (0,8 g, 0, 006 mol) em 1,2-dicloroetano (5 mL) a 0°C foi adicionado anidrido 2,3-pirazinedicarboxílico (0,49 g, 0,0033 mol) e a mistura foi agitada durante 5 min. Uma suspensão de la (0,3 g, 0,0011 mol) em 1,2-dicloroetano (15 mL) foi adicionada lentamente ao balão de reação. O banho de arrefecimento foi removido e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite; TLC da mistura reacional mostrou materiais de partida gue não reagiram. A mistura de reação foi então aguecida a 80°C durante 72 h, vertida sobre uma mistura de gelo (cerca de 10 g) e 2 N de HC1 (10 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter, respectivamente, e seco sob vácuo para produzir 0,372 g de 4k. O Composto 4k é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,29 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,30 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,20 (s, 1H) , 9,00 (s, 2H) , 8,00 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H) , 3,25 (2 conjuntos de m, 4H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 425 (M-H). 108

Exemplo 102 Preparação de 41

Uma mistura de 2m (0,05 g, 0,133 mmol), hidrazina (0,006 g) e etanol foi aquecida a 80°C num tubo selado durante a noite, arrefecida até 0°C e filtrada. O residuo foi lavado com etanol frio e éter, respectivamente, e seco sob alto vácuo para produzir 0,023 g de 41. O Composto 41 é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 8,03 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,00 (s, 1H) , 10,90 (s, 1H) , 10,80 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,50 (d, 1H) , 3, 40-3,25 (3 conjuntos de t, 6H) , 2,50 (t, 2H) , 2,25 (m largo, 2H) . MS m/e 371 (M-H).

Exemplo 103 Preparação de 4m

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito para 41. Deste modo, a reação entre 2 m (0,05 g) e metil-hidrazina (0,012 g) em etanol geraram 0,017 g de 4m. 0 Composto 4m é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,21 min, 1H-NMR (DMSO-de) δ 12, 10 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,20 (s, 1H), 8,00 (d, 1H) , 7, 50 (d, 1H) , 3,40 -3.25 (m, 6H) , 2, 60 (t, 2H) , 2,50 (s, 3H) , 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 385 (M-H).

Exemplo 104 Preparação de 4n A uma suspensão de AICI3 (0, 667 g, 0,005 mol) em 1,2-dicloroetano (5 mL) a 0°C foi adicionado anidrido glutárico (0,57 g, 0,005 mol) e a mistura foi agitada durante 5 min. Uma suspensão de la (0,276 g, 0,001 mol) em 1,2-dicloroetano (15 mL) foi lentamente adicionada ao balão da reação. O banho de arrefecimento foi removido e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite; TLC da 109

mistura reacional mostrou materiais de partida que não reagiram. A mistura de reação foi então aquecida a 80°C durante 24 h, vertida sobre uma mistura de gelo (cerca de 10 g) e 2 N de HC1 (10 mL) e filtrada. O resíduo foi lavado com água e éter, respectivamente, e seco sob vácuo para produzir 0,243 g de 4n. O Composto 4n é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 8,84 min; 1H-NMR (DMSO-dg) δ 12,30 (s, 1H) , 12,00 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,50-3,25 (m, 6H) , 2,30 (t, 2H), 2,25 (m largo, 2H) , 2,00 (m, 2H) . MS m/e 389 (M- H) .

Exemplo 105 Preparação de 4o

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento que para 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,03 g) e L-Pro-NH2 (0,016 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,007 g de 4o. 0 composto 4o é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,61 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 7,20 (d, 1H) , 6,80 (s, 1H) , 4,40 e 4,20 (2 conjuntos de m rotamérico, 1H) , 3,70-2,50 (série de m, 10H), 2,25 (m largo, 2H), 1,80 (m, 4H). MS m/e 471 (M-H).

Exemplo 106 Preparação de 4p

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento que para 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,03 g) e piperidina (0,009 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,011 g de 4p. 0 Composto 4p é caracterizado como um amarelo sólido amorfo ; Rt 11,61 min; ΧΗ- NMR (DMSO-de) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9, 40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,50 (m, 2H) , 3, 30- 3, 00 (m, 8H) , 2,60 (m, 110 2Η) , 2,25 (m largo, 2H), 1,60 (m largo, 4H), 1,40 (m largo, 2H). MS m/e 442 (M-H).

Exemplo 107 Preparação de 4q

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento tal como descrito para 4d. Por conseguinte, a reação entre 2 m (0,1 g) e 4-t-Butoxicarbonilpiperizina (0,1 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,112 g de 4q. O Composto 4q. é caracterizado como um sólido amarelo amorfo;

Rt H,8 7 : min; 1H-NMR (DMS0-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H), 9, 40 (s, 1H), 8 ,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H) , 3,50- 2,70 (série de m, 16H), 2, . 25 (m largo , 2H) , 1, 40 (s, 9H) . MS m/e 543 (M-H).

Exemplo 108 Preparação de 4r

Uma mistura de 4q (0,1 g, 0,184 mmol) e 4 N de HC1 em dioxano (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e filtrada. O residuo foi lavado com pequenos volumes de dioxano e éter e seco sob alto vácuo para produzir 0,071 g de 4r. O Composto 4r é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 6,68 min; 1H-NMR (DMSO-dg) 12,20 δ (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 9,30 (2 conjuntos de largo, 2H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,70- 2,80 (uma série de m, 16H), 2,25 (m largo, 2H). MS m/e 443 (M-H).

Exemplo 109 Preparação de 4s

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento como descrito para 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,05 g), e heptametilenoimina (0,02 g) na presença de TBTU 111 e NMM em DMF geraram 0,037 g de 4s. O Composto 4s é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 12,95 min; 1H-NMR (DMS0-d6) δ 12,20 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,50 (m, 2H) , 3,30-3,00 (m, 8H) , 2,60 (m, 2H) , 2,25 (m largo, 2H) , 1,80 (m largo, 2H), 1,60 (2 conjuntos de m, 8H). MS m/e 470 (M-H).

Exemplo 110 Preparação de 4t

Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento como descrito para 4d. Consequentemente, a reação entre 2m (0,05 g) e pirrolidina (0,013 g) na presença de TBTU e NMM em DMF geraram 0,033 g de 4t. O Composto 4t é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 10,18 min; 1H-NMR (DMSO- d6) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,50 (m, 2H) , 3,30-3,00 (m, 8H) , 2,60 (m, 2H) , 2,25 (m largo, 2H) , 1,80 (2 conjuntos de m, 4H) . MS m/e 428 (M-H).

Exemplo 111

Preparação de Precursores para 5a 5-ciano-l-,2,3,4,5,lOhexahidrociclopenta[a]carbazole4-carboxilato de etilo e 4-ciano-l-,2,3,4,5,10 hexahidrociclopenta [a] carbazole-5-carboxilato.

2-(ciclopenten-l-il)indol (13,6 g, 74 mmol), acetato de cis-3-cianoacrilato (17,8 g, 142 mmol) e BHT (70 mg) foram aquecidos a 180°C sob azoto durante 30 min. Os voláteis foram removidos por destilação de Kugelrohr a 110°C e 0,8 mm, para se obter 19,7 g de um alcatrão castanho-âmbar. A adição de éter (50 mL) proporcionou um precipitado de um único isómero de acetato branco cristalino 4-ciano-l-2,3,4,5,10 hexahidrociclopenta [a]carbazol-5-carboxilato de etilo (1,89 g, 8,2% de rendimento); mp 192-195°C. NMR 112 (CDC13) δ 7, 91 (s, 1H), 7,46 (d, 1H) , 7,34 (d, 1H) , 7,12 (m, 2H) , 4,31 (d, 1H0, 4,32 (m, 2H) , 4, 20 (d, 1H) , 3,46 (t, 1H) , 3, 30 (q, 1H), 2,80 (m, 1H) , 2,3 - 1,4 (m, 6H) , 1,34 (t, 3H) Anal. Cale. para C19H20N2O2 : C, 74.00 ; H, 6.54; N, 9.08. Encontrado: C, 73,84; H, 6,53; N, 9,03. 0 filtrado foi cromatografado sobre 500 g de gel de silica (éter-hexano, 50:50 a 60:40) para se obter 6,4 g (28% de rendimento) de etil diastereomérico 5-ciano-l,2,3,4,5,10-hexahidrociclopenta[a]carbazole-4-carboxilato sob a forma de um vidro amarelo, um único isómero cristalino branco dos quais (1,07 g, 4,7% de rendimento) pode ser obtido por precipitação a partir de éter (20 mL) ; mp 164-167 °C. MS m/e 309 (M + H) + . NMR (CDCI3) δ 8,08 (s, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,33 (d, 1H) , 7,20 (m, 2H) , 4,40 (d, 1H0, 4,32 (m, 2H) , 3,16 (q, 1H) , 3, 02 (q, 1H), 2,80 (dd, , 1H), 2,1 (m, 3H), 1.9 - 1,4 (m, 7H), 1 ,39 (t, 3H) Análise calculada para C19H20N2O2-0.3Et20: C, 73,39; H, 7,01; N, 8,47. Encontrado: C, 73,43; H, 6,54; N, 8,04. A eluição adicional (éter-hexano, 60:40) produziu mais do que 1,5 g (6,6%) de acetato de diastereomérico 4-ciano-l-2,3,4,5,10 hexahidrociclopenta[a]carbazol-5-carboxilato de etilo. MS m/e 309 (M + H)+.

Exemplo 112

Preparação do Precursor para 5a 5-ciano-l,2,3,10-tetra-hidro [a]carbazol-4-carboxilato de etilo

DDQ (1,35 g, 5,95 mmol) foi adicionada a uma solução de 5-ciano-1-,2,3,4,5,1Ohexahidrociclopenta[a]carbazol-4-carboxilato (820 mg, 2,66 mmol) em tolueno (12 mL) . A 113 solução imediatamente virou castanho-escuro, e foi agitada a 60°C durante 3 horas. A mistura foi arrefecida a 20°C durante a noite e filtrada. 0 precipitado foi lavado duas vezes com hexanos para dar 2,04 g de um sólido verde-claro. Este foi suspenso em metanol (8 mL), filtrado e o precipitado lavado com metanol (3 ml, em porções), e éter para dar 603 mg (rendimento de 75%) do produto como um sólido verde- claro, mp 233-234°C. NMR (CDCI3) δ 8,80 (d, 1H) , 8,20 (s, 1H) , 7,52 (m, 2H) , 7,38 (t, 1H) , 4,52 (q, 2H) , 3, 42 (t, 2H) , 3,19 (t, 2H) , 2,31 (quinteto, 2H) , 1 ,51 (t, 3H) . Anal. Calculado para C19H16N2O2 0,2 H20: C, 74.11; H, 5.37; N, 9.10. Encontrado: C, 74.03; H, 5.06; N, 9.04.

Exemplo 113 Preparação de 5a 5,7,8,9,10,11-Hexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c] carbazol-7(6H)-ona. 5-ciano-l,2,3,10-tetra-hidro[a] carbazol-4-carboxilato (950 mg) em DMF (60 mL) foi hidrogenada a 55 psi sobre niquel de Raney W2 durante duas semanas. Um total de 15 g de niquel de Raney foi adicionado em porções, durante a hidrogenação, até o material de partida ter sido consumido. 0 catalisador foi removido por filtração e o DMF foi evaporado in vácuo. O resíduo sólido foi submetido a refluxo durante 10 min com 30 mL de água e arrefecido. O precipitado foi lavado com 5 mL de acetona para dar o produto (640 mg, 78% de rendimento) como um sólido branco, mp 326-327°C. NMR (DMSO- d6) δ 11, 6 (s, 1H) , 7,96 (d, 1H) , 7,56 (d, 1H) , 7,43 (t, 1H) , 7,24 (t, 1H) , 4,79 (s, 2H) , 3,30 (t, 2H) , 3, 11 (t, 2H) , 2,26 (quinteto, 2H) . Anal. Calculada para C17H14N2O: c, 77,84; H, 5,38; N, 10,68. Encontrado: c, 77.35; H, 5.36, N, 10.57. 114

Exemplo 114 Preparação 5b 3-Bromo-5-,7,8,9,10,11 hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c] carbazole-7(6H)-ona. N-bromossuccinimida (190 mg, 1,07 mmol) foi adicionado a 5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c] carbazol-7 (6H)-ona (250 mg, 0,954 mmol) dissolvido em DMF (7,5 mL). Após 24 h, o solvente foi evaporado e o residuo foi submetido a refluxo com água (5 mL) durante 5 min. Após o arrefecimento até 20°C, o precipitado foi recolhido, obtendo-se o produto (328 mg, 100% de rendimento) como um sólido amarelo, mp ~ 350°( 3 (d) MS m/e 341, 343 (M + H) + . NMR (DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H) , 8,29 (s, 1H) , 8,07 (s, 1H), 7,51 (ABq, 2H) , 4,80 (s, 2H) , 3,32 (t, 2H) ; 3,20 (t, 2H) , 2,30 (quinteto, 2H) . Anal. Calculada para Ci7Hi3N2-OBr 0,75 H20: C, 57,56; H, 4,12; N, 7,90. Encontrado: C, 57,55; H, 3,89; N, 8,08.

Exemplo 115 Preparação de 5c 3-Ciano-5-,7,8,9,10,ll hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c] carbazole-7(6H)-ona

Tetraquis (trifenilfosfina) paládio (70 mg, 0,061 mmol) foi adicionado sob azoto a uma mistura de 3-bromo-5,7,8,9,10,11 hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c] carbazole- 7 (6H) —

ona (140 mg, 0,42 mmol) e Zn(CN)2, (100 mg, 0,85 mmol) suspenso em DMF (2 mL). (Ver, DM Tschaen, R Desmond, A.O. King, M.C. Fortin, B. Pipik, S. King, e T.R. Verhoeven. Synth. Commun. 1994, 24, 887). A mistura foi aquecida a 125°C durante 2 horas, arrefecida a 20°C, e depois filtrada através de uma mistura de terra de diatomáceas e gel de silica. O filtrado foi diluido com 3 volumes de água. O precipitado foi recolhido e triturado duas vezes com éter para dar o produto (116 mg, 99% de rendimento) como um 115 sólido amarelo, mp 369-370°C. NMR (DMSO-d6) δ 12,19 (s, 1H) , 8,49 (s, 1H), 8,40 (s, 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,69 (d, 1H), 4,85 (s, 2H) , 3,30 (t, 2H) , 3,12 (t, 2H) , 2,26 (quinteto, 2H). MS m/e 288 (M + H)+.

Exemplo 116 Preparação de 5d 3-(aminometil)-5,7,8,9,10,11-bexahidrociclopent [a] pirrolo (3,4-c]carbazole-7(6H)-ona. 3-ciano-5,7,8,9,10,11 hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4— c] carbazole-7(6H)-ona (95 mg, 0,33 mmol) dissolvido em DMF (3 mL) foi hidrogenado a 55 psi sobre níquel de Raney W-2 preparado de fresco (R. Mozingo, Org. Synth. Col. 1955, 3, 181-183) (310 mg) durante 20 horas. O catalisador foi removido e o solvente evaporado para dar um resíduo que foi suspenso em água para dar o produto em bruto (58 mg, 60% de rendimento). NMR (DMSO-d6) δ 11,59 (s, 1H) , 8,29 (s, 1H) , 7,96 (s, 1H) , 7,53 (ABq, 2H) , 4,75 (s, 2H) , 4,00 (s, 2H) , 3,35 (t, 2H) , 3,18 (t, 2H) , 2,25 (quinteto, 2H) . MS m/e 275 (M+H-NH3)+, 292 (M + H) + . Uma porção do produto bruto (12 mg) foi agitada com 0,1 M de HC1 (120 ml) e o filtrado foi liofilizado para dar o sal cloridrato (9 mg).

Exemplo 117 Preparação de 5e 3-Metil-5,7,8,9,10,ll hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c]carbazole-7(6H)-ona.

Tetraquis (trifenilfosfina) paládio (14 mg, 0,012 mmol) foi adicionado sob azoto a uma mistura de 3-bromo-57,8,9,10,11 hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c] carbazole-7(6H)-ona (59 mg, 0,17 mmol) e tetrametilestanho (38 mg, 0,20 mmol) em DMF (2 mL). A mistura foi aquecida a 140°C durante 4 h, arrefecida a 20°C, e depois filtrada através de uma mistura 116 de terra de diatomáceas e gel de sílica. 0 solvente foi evaporado do filtrado, e o produto, um sólido amarelo, foi isolado por cromatografia (EtOAc-EtOH, 75:25). MS m/e 211 (M + H) + .

Exemplo 118 Preparação de 5f

Sal de Di(Boc)-L-lisina diciclohexilamina (70 mg, 0,133 mmol), hidrato de HOBT (15 mg, 0,098 mmol) , e reagente BOP (60 mg, 0,136 mmol) foram adicionados a 3-(aminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c] carbazol-7 (6)-ona (25 mg, 0,0859 mmol) dissolvido em DMF (0,6 mL).

Após 5 horas, foi adicionado água (2,5 mL). O precipitado foi suspenso em acetato de etilo (10 mL) e o filtrado resultante foi lavado com 1 M de HC1, água e Na2C03 saturado, depois NaCl saturado. A evaporação do solvente seguido por cromatografia (EtOAc-EtOH 100:0 até 95:5) deu o produto como um sólido amarelo claro (12 mg, 22% de rendimento). MS m/e 620 (M + H)+.

Exemplo 119 Preparação de 5g 3 - (L-Lisilaminometil)-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c]-carbazol-7 (6H)-ona, dicloridrato

Os grupos BOC de 5f foram hidrolisados com 2 M de HC1 em dioxano para dar o produto como um sólido bege (94% de rendimento). NMR (DMSO-de) δ 11,67 (s, 1H) , 9,70 (t, 1H), 8,45 (s largo, 3H), 8,37 (s, 1H), 8,05 (s largo, 3H) , v ,87 (s, 1H) , 7,52 (d, 1H), 7, 47 (d, 1H) , 4,75 (s, 2H) , , 4, 00 (d, 2H) , 3, 86 (m, 1H) , 3,32 (t, 2H) , 3,12 (t, 2H) , 2, 79 (m, 2H) , 2, 25 (quinteto, 2H), 1,85 (m, 2H) , 1,78 (m, 2H) , i ,45 (m, 2H) . MS m/e 420 (M + H) + . 117

Exemplo 120 Preparação de 6a 5,6,7,10-tetra-hidropirrolo [3,4-c]carbazol-7(6H)-ona

Preparado a partir de 2-vinilindole (U. Pindur e M. Eitel, Helv. Chim. Acta, 1988, 71, 1060; M. Eitel e U. Pindur,

Synthesis 1989, 364-367) por um procedimento semelhante ao descrito para a síntese de la. NMR (DMSO-dg) δ 12,10 (s largo, 1H) , 11,15 (s largo, 1H) , 8,83 (d, 1H) , 7,94 (m, 2H), 7,60 (m, 2H), 7,32 (t, 1H). MS m/e 237 (M + H)+.

Exemplo 121 Preparação de 6b 8,9-Dimetil-5,7-di-hidropirrolo[3,4-c] carbazol-5(6H),7 (10H)-diona 2 - (but-2-en-2-il)indol (87 mg, 0,51 mmol, preparado de acordo com M. Eitel, e U. Pindur, Synthesis, 1989, 364-367) foi misturado com maleimida (97 mg, 1,0 mmol), e aquecido a 190-200°C num tubo selado durante 0,5 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e o sólido resultante foi lavado com água quente (10 x 5 ml) para dar o aducto de Diels-Alder (91 mg, 68%, MS m/e 267 (M-H)~). O aducto foi seco em vácuo durante 3 horas e adicionou-se à solução de DDQ (2,5 eq) em 5 ml de tolueno. A solução castanha escura foi agitada a 40 °C durante 7 horas e a 20 °C durante a noite, depois evaporada até à secura. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 saturado (5x5ml), H20, NaCl saturado, e seco sobre MgSCq. O produto em bruto foi triturado com EtOAc para dar 17 mg (28%) do produto

como um sólido amarelo. 1HNMR (DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H) 10, 98 (s , 1H) , 8,76 (d, 1H) , 7,54 (d, 1H) , 7,48 (t, 1H) 7,23 (t, 1H), 2 , 69 (s, 3H), 2,53 (s, 3H) . MS m/e 263 (M H)“. 118

Exemplo 122 Preparação de 6e

Este composto foi preparado de acordo com o mesmo procedimento que para lk utilizando, em vez disso, 2a como material de partida. 0 Composto 6e é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 6,77 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,60 (s, 1H) , 8,80 (s, 1H), 8,60 (largo, 3H), 8,00 (largo, 3H), 7.70 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,00 (largo, 1H) , 3,25 (m, 4H) , 2.70 (largo, 2H) , 2,25 (m, 2H), 2,00-1,70 (uma série de m, 6H). MS m/e 483 e 485 (M + 2 H para isótopos de bromo).

Exemplo 123 Preparação de 6f

Este composto foi preparado de acordo com o mesmo procedimento que para lk utilizando, em vez disso, 2b como material de partida. O composto 6f é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; Rt 7,13 min; 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,60 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,60 (largo, 3H), 8,00 (largo, 3H), 7,70 (dd, CM 5, 00 (largo, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,70 (largo, 2H) , 2,25 (m, 2H) , 2,00 (2 conjuntos de largo, 2H), 1,50 (largo m, 4H). MS m/e 439 e 441 (M + 2 H, para isótopos de cloro) .

Exemplo 124 Preparação de 6g

Este composto foi preparado de acordo com o mesmo procedimento que para lk utilizando, em vez disso, 2c como material de partida. O Composto 6g é caracterizado como um sólido amarelo amorfo; R 6,72 min; 1H-NMR (DMSO-d6) δ 12,50 (s, 1H) , 8,50 (largo, 3H) , 8,50 (d, 1H), 8,00 (largo, 3H), 7.70 (m, 1H), 7,50 (t, 1H), 5,00 (largo, 1H), 3,25 (m, 4H), 2.70 (largo, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,00 (2 conjuntos de largo, 2H), 1,50 (m largo, 4H). MS m/e 423 (M + 2 H). 119

Exemplo 125 Preparação de 6h 6-Formil-5,7,8,9,10,11 hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c] carbazol-7(6H)-ona. POCI3 (65,8 mg, 0,43 inmol) e DMF (200 uL, 2,59 mmol) foram agitados durante 30 min e adicionados a 5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent [a] pirrolo [3,4-c]carbazol-7(6H)-ona (39 mg, 0,15 mmol) suspenso em DMF (200 uL). Após agitação de 1 hora a 20 °C e 1 hora a 60 °C, adicionou-se 4 mL de água. 0 precipitado (36 mg) foi recolhido e submetido a refluxo com acetona (40 mL). A evaporação do filtrado proporcionou o produto (18 mg, 42% de rendimento) como um sólido castanho-amarelado, mp> 300 0 C. MS m/e 289 (M-H)“. NMR (DMS0-d6) δ 11,6 (largo, s, 1H) , 9,22 (s, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,56 (d, 1H) , 7,43 (t, 1H) , 7,24 (t, 1H) , 5,20 (s, 2H) .

Exemplo 126 Preparação de 6i 3-Bromo-ll-L-lisil-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c] carbazol-7(6H)-ona. 0 derivado de bis (t-butoxicarbonil)-lisil foi preparado a partir de 5b como descrito para lk, e purificado por cromatograf ia (CH2Cl2-EtOAc 75:25) para dar um vidro amarelo-laranja. Os grupos Boc foram hidrolisados por tratamento com 2 M de HC1 em dioxano durante 2,5 horas para dar o produto como um sólido bronzeado. Rt 8,43 min. MS m/e 469 e 471 (M + H)+, 341 e 343 (M + H-lisil)+. 120

Exemplo 127 Preparação de 6j 3-Ciano-ll-L-lisil-5,7,8,9,10,11-hexahidrociclopent[a] pirrolo [3,4-c] carbazol-7(6H)-ona. 0 derivado de bis (t-butoxicarbonil)-lisil foi preparado a partir de 5c, tal como descrito para lk. Os grupos Boc foram hidrolisados por tratamento com 2 M de HC1 em dioxano durante 2,5 horas, para proporcionar o produto. Rt 7,40 min. MS m/e 416 (M + H)+, 310 (M + H-lisil)+.

Exemplo 127a-127f Dados para 6k-6p

Tabela 14

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 127a 6k 325 (M-H, +Na) 127b 61 275 (M-CH20H) 127c 6m 334 (M+H+) 127d 6n 290 (M-H)' 127e 6o 321 (M-H) 127f 6p 364 (M+H)+

Exemplo 128

Preparação do Precursor para 8b 2-(ciclopenten-l-il)pirrole e 3-(ciclopenten-l-il)-pirrol

Foi utilizada uma modificação de um procedimento anteriormente relatado (M. Tashiro, Y. Yiru, e O. Tsuge, Heterocvcles, 1974, 2, 575-584). Pirrole (20 g, 300 mmol) e 1- (ciclopenten-l-il) pirrolidina (20 g, 150 mmol, preparado a partir de ciclopentanona e de pirrolidina, tal como descrito (M.E. Kuehne, J. Amer. Chem. Soc.1989, 81, 121 5400-5404) foram aquecidos a 145°C durante 5 h. Os componentes voláteis foram removidos por destilação a 40 -45°C e 12 mm Hg, depois o produto foi destilado em Kugelrohr a 100-140°C e 1 mm Hg para se obter 12,9 g (65%) de uma mistura 2:1 dos isómeros 2- e 3-. As amostras analíticas foram obtidas por cromatografia (hexanos-éter, 90:10 a 85:15). 2-(ciclopenten-l-il)-pirrole: Sólido branco (escurece em contacto com o ar), mp 68-71°C. NMR (CDCI3) δ 8,24 (s largo, 1H) , 6,74 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 6,17 (s, 1H) , 5,73 (s, 1H) , 2,64 (t, 2H) , 2,51 (t, 2H) , 1,99 (quinteto, 2H) .

Anal. Cale. para CgHnN-0,2H2O: C, 79, 02 H, 8,40; N, 10,24. Encontrado: C, 79.00; H, 8.12; N, 10.09. 3-(ciclopenten-l-il)-pirrole: Óleo amarelo claro (escurece rapidamente em contacto com o ar). NMR (CDCI3) δ 8,10 (s largo, 1H) , 6,74 (s, 2H), 6,37 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 2,58 (t, 2H), 2,45 (t, 2H); 1,99 (quinteto, 2H).

Exemplo 129

Preparação de Precursores para 8b 2-(ciclopenten-l-il)-1-(triisopropilsilil) pirrole e 3-(ciclopenten-l-il)-1-(triisopropilsilil) pirrole.

Hidreto de sódio (7,0 g, 60% em óleo mineral, 176 mmol) foi lavado com hexano e suspenso em éter (150 mL) e arrefecido a 0°C. Foram adicionados cloreto de triisopropilsililo (23,3 g, 121 mmol), uma mistura 2:1 de 2-(ciclopenten-l-il) pirrole e 3 - (ciclopenten-l-il)-pirrole (3,0 g, 22,5 mmol) e DMF (2 mL) . A mistura foi agitada sob um condensador de refluxo. Após a libertação de hidrogénio ter cessado, a reação foi agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi 122 vertida em água gelada, lavada com água e NaCl saturado seca, e concentrada para se obterem os derivados de triisopropilsililo (35,0 g, rendimento bruto de 104%). Isómero 2: NMR (CDCI3) δ 6,83 (s, 1H) , 6,26 (s, 1H) , 6,19 (s, 1H) , 5,70 (s, 1H) , 2,66 (t, 2H) , 2,48 (t, 2H) , 1,94 (quinteto, 2H) , 1,53 (m, 3H) , 1,11 (d, 18H) . Isómero 3: NMR como relatado em P. Kozikowski e X. M. Cheng, J. Org. Chem. 1984, 49, 3239-3240.

Exemplo 130

Preparação de Precursor para 8b

Dlmetil 1-(triisopropilsilil)-1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g] indol-4 ,5-dicarboxilato

Uma mistura 2:1 de 2-(ciclopenten-l-il)-1- (triisopropilsilil) pirrole e 3-(ciclopenten-l-il-1-(triisopropilsilil) pirrole (6,2 g, 21,4 mmol) e acetilenodicarboxilato de dimetilo (6,2 g, 43,7 mmol) foram aquecidos a 110°C durante 22 h. Foi adicionado mais acetilenodicarboxilato de dimetilo (6,2 g, 43,7 mmol) e o aquecimento foi continuado durante mais 6 h. 0 óleo cor de laranja-castanho resultante foi dissolvido em éter (25 mL) e depois tratado com hexanos (50 mL). O mesmo processo foi repetido mais 3 vezes com o precipitado. As fracções solúveis combinadas de éter-hexano foram evaporadas sob vácuo, em seguida aquecidas sob vácuo para remover o excesso de acetilenodicarboxilato de dimetilo. 0 resíduo (3,3 g) foi cromatografado (hexano-éter 75:25) para dar 490 mg (5,3% de rendimento) do produto como um óleo laranja claro. O mesmo produto foi obtido com 10% de rendimento a partir de 2-(ciclopenten-l-il)-1-(triisopropilsilil) pirrole puro. NMR (CDC13) δ 7,44 (d, 1H) , 7, 05 (d, 1H) , 3,97 (s, 3H) , 3,92 (s, 3H) , 3,20 (t, 2H) , 3, 11 (t/ 3H) , 2,09 (quinteto, 2H), 1,70 (septeto, 3H) , 1/14 (d, 18H) . MS m/e 430 (Μ + H) +. Anal. Cale. para C 24H35NO4SÍ-O, 5 H20: C, 123 65,71; Η, 8,27; Ν, 3,19. Encontrado: C, 65,51; Η, 8,14; Ν, 2,83.

Exemplo 131

Preparação do Precursor para 8b

Dletil 1-(triisopropilsilil)-1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g] indol-4,5-dicarboxilato

Uma mistura 2:1 de 2-(ciclopenten-l-il)-1- (triisopropilsilil) pirrole e 3-(ciclopenten-l-il)-1-(triisopropilsilil) pirrole (1,16 g, 4,01 inmol) e fumarato de dietilo ( 0,75 g, 4,36 mmol) foram aquecidos sob azoto a 150 °C durante 64 horas, proporcionando o aducto bruto de Diels-Alder como um óleo âmbar. O aducto puro de Diels-Alder pode ser isolado por cromatografia em gel de silica (hexano-éter 90:10). NMR (CDC13) δ 6,68 (d, 1H) , 6,16 (d, 1H) , 4,20 (m, 4H) , , 3, 95 (d, 1H) , 2,91 (t, 2H) , 2,49 (m, 1H) , 2,09 (m, 1H) , 1,73 (m, 2H) , 1,48 (septeto, 3H) , 1,30 (21, 6H) , 1,27 (d, 9H) , 1 ,07 (d, 9H). MS m/e 462 (M + H) + . DDQ (2,2 g, 9,7 mmol) foi adicionado, em três porções, a uma solução de benzeno (16 ml) do aducto bruto de Diels-Alder a 50°C até que nenhum material de partida permanece-se (TLC e NMR) . Após 8 horas, a mistura foi filtrada através de Celite®. O precipitado foi lavado com benzeno, e o filtrado foi evaporado para dar 1,52 g de um sólido preto. Este foi cromatografado sobre gel de silica (hexano-éter 15:85 a 20:80) para dar o produto (380 mg, 21% de rendimento, 35% de rendimento a partir do isómero 2) como um óleo incolor. NMR (CDC13) δ 7,42 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 4,40 (2q, 4H) , 3,20 (t, 2H) , 3,12 (t, 2H) , 2,17 (quinteto, 2H) , 1,67 (septeto, 3H) , 1,39 (t, 3H) , 1,36 (t, 3H), 1,20 (d, 18H). MS m/e 458 (M + H)+. 124

Exemplo 132

Preparação do Precursor para 8b 1.6.7.8- tetrahidrociclopent [g] indol-4 ,5-dicarboxilato

Uma mistura de dietil 1-(triisopropilsilil)-1, 6, 7,8-tetrahidrociclopent[g]indol-4,5-dicarboxilato de dimetilo (400 mg, 0,875 mmol) e de 10 M de NaOH (0,4 mL) em etanol (5 mL) foi submetida a refluxo sob azoto durante 3 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo castanho foi dissolvido em água e extraído três vezes com éter. A camada aquosa foi acidificada com HC1 e extraída três vezes com EtOAc, e o extracto orgânico combinado foi seco sobre MgSCh para dar o produto em bruto (205 mg, 96%) como um sólido castanho, mp 311-312°C. NMR (DMSO-de) δ 12,55 (s largo, 2H) , 11,37 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,70 (d, 1H), 3,08 (t, 2H) , 3,02 (t, 2H), 2,14 (quinteto, 2H) . Anal. Cale. para C13H11NO4: C, 63, 67; H, 4,52; N, 5,71. Encontrado: C, 63,15; H, 4,46; N, 5,39. A hidrólise do éster de dimetilo com NaOH em metanol a refluxo durante 3 dias proporcionou o mesmo produto.

Exemplo 133

Preparação do Precursor para 8b 1.6.7.8- tetrahidrociclopent[g]indol-4,5-dicarboxílico anidrido.

Uma suspensão do diácido (184 mg) em anidrido acético (3 mL) foi aquecida a 73°C durante 1 h, depois arrefecida a 0°C. O precipitado foi recolhido e lavado com 2 ml de éter para dar o produto como um sólido amarelo (112 mg, 66%), mp 320 °C (sublima). NMR (CD3COCD3) δ 7,80 (d, 1H) , 6,94 (d, 1H), 3,30 (t, 2H), 3,24 (t, 2H), 2,38 (quinteto, 2H). 125

Exemplo 134

Preparação do Precursor para 8b

Dietil 1-(triisopropilsilil)-1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g]indol-4,5-dicarboxilato.

Uma mistura 2:1 de 2-(ciclopenten-l-il)-1- (triisopropilsilil) pirrole e 3-(ciclopenten-l-il)-1- (triisopropilsilil) pirrole (1,16 g, 4,01 mmol) e fumarato de dietilo ( 0,75 g, 4,36 mmol) foi aquecida sob azoto a 150°C durante 64 horas, proporcionando o aducto bruto de Diels-Alder como um óleo âmbar. O aducto puro de Diels-Alder pode ser isolado por cromatografia em gel de silica (hexano-éter 90:10) . NMR (CDCI3) δ 6,68 (d, 1H) , 6, 16 (d, 1H) , 4,20 (m, 4H) , 3, 95 (d, 1H) , 2,91 (t, 2H) , 2, 4 9 (m, 1H) , 2,09 (m, 1H) , 1,73 (m, 2H) , 1,48 (septe ítO, 3H) , 1,30 (21, 6H) , 1,27 (d, 9H), 1 ,07 (d, 9H). MS m/e 462 (M + H) + . DDQ (2,2 g, 9,7 mmol) foi adicionado, em três porções, a uma solução de benzeno (16 ml) do aducto bruto de Diels-Alder, a 50°C até que nenhum material inicial permanecesse (TLC e NMR). Após 8 horas, a mistura foi filtrada através de Celite ®. O precipitado foi lavado com benzeno, e o filtrado foi evaporado para dar 1,52 g de um sólido preto. Este foi cromatografado sobre gel de silica (hexano-éter 15:85 a 20:80) para dar o produto (380 mg, 21% de rendimento, 35% de rendimento a partir do isómero 2) como um óleo incolor. NMR (CDCI3) δ 7,42 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 4,40 (2q, 4H), 3,20 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 2,17 (quinteto, 2H), 1,67 (septeto, 3H) , 1,39 (t, 3H), 1,36 (t, 3H), 1,20 (d, 18H). MS m/e 458 (M + H)+.

Exemplo 135

Preparação do Precursor para 8b 1,6,7,8-tetrahidrociclopent[g] indol-4,5-dicarboxilato.

Uma mistura de dietil 1-(triisopropilsilil)-1,6,7,8-tetrahidrociclopent[g] indol-4,5-dicarboxilato de dimetilo 126 (400 mg, 0, 875 mmol) e de 10 M de NaOH (0,4 mL) em etanol (5 mL) foi submetida a refluxo sob azoto durante 3 horas. 0 solvente foi evaporado e o resíduo castanho foi dissolvido em água e extraído três vezes com éter. A camada aquosa foi acidificada com HC1 e extraída três vezes com EtOAc, e o extracto orgânico combinado foi seco sobre MgSC>4 para dar o produto em bruto (205 mg, 96%) como um sólido castanho, mp 311-312°C. NMR (DMSO-de) δ 12,55 (s largo, 2H) , 11,37 (s, 1H) , 7,43 (d, 1H) , 6,70 (d, 1H) , 3,08 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,14 (quinteto, 2H). Anal. Cale. para C13H11NO4: C, 63, 67; H, 4,52; N, 5,71. Encontrado: C, 63,15; H, 4,46; N, 5,39. A hidrólise do éster de dimetilo com NaOH em metanol a refluxo durante 3 dias proporcionou o mesmo produto.

Exemplo 136 Preparação de 8b 1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g] indol-4,5-dicarboxilato de imida.

Uma mistura de hexametildisilazano (1,38 mL, 1,06 g, 6,56 mmol) e metanol (0,135 mL, 107 mg, 3,33 mmol) foi

adicionada a 1, 6, 7, 8-tetrahidrociclopent [g] indol-4,5-dicarboxílico anidrido foi dissolvida em DMF (3 mL) . A mistura foi aquecida a 73°C durante 4 h, depois arrefecida. O solvente foi evaporado e o resíduo foi agitado com ácido clorídrico diluído. O precipitado foi recolhido e lavado com EtOAc para dar o produto (132 mg, 88% de rendimento) como um sólido amarelo, mp> 350°C. NMR (DMSO-de) δ 11,81 (s largo, 1H), 10,71 (s largo, 1H), 7,67 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 3,18 (t, 2H), 3,10 (t , 2H), 2,22 (quinteto, 2H). MS m/e 225 (M-H)-. Anal. Cale. para C13H10N2O2-O-2H2O: C, 67,94; H, 4,46; N, 12,19. Encontrado: C, 67,81; H, 4,50; N, 12,04. 127

Exemplo 137 Preparação de 8c 3-Bromo-l,6,7,8-tetrahidrociclopent[g]indol-4,5-dicarboxilato de imida.

Perbrometo brometo de piridínio (60 mg, 0,187 mmol) foi adicionado a uma suspensão de 1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g] indol-4,5-dicarboxilato de imida (40 mg, 0,177 mmol) em DMF (0,9 mL). Foi adicionado água (3,5 mL) após 50 min. O precipitado foi recolhido, lavado com água, e seco para dar o produto (54 mg, 100% de rendimento) como um sólido amarelo, mp> 350°C. NMR (DMSO-de) δ 12,18 (s largo, 1H) , 10,71 (s largo, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 3,18 (t, 2H) , 3,10 (t, 2H), 2,22 (quinteto, 2H) . MS m/e 303 e 305 (M-H)”. Anal. Cale. para C9Hi3N202Br: C, 51,17; H, 2,97; N, 9,18,; Br, 26,19. Encontrado: C, 50,91; H, 3,19; N, 8,99; Br, 26,40.

Exemplo 138 Preparação de 8d 3-Ciano-l,6,7,8-tetrahidrociclopent[g]indol-4,5-dicarboxilato de imida.

Uma mistura de 3-bromo-l,6,7,8-tetrahidrociclopent[g] indol-4,5-dicarboxilato de imida (36 mg) e CuCN (31 mg) em DMF (0,4 mL) foi aquecida a 155°C durante 4 horas, e arrefecida a 20°C. O precipitado cinzento que contêm o produto e os sais de cobre foi cromatografado sobre gel de silica (2 x 0,5 cm) com DMF. O eluente evaporado foi fervido com água durante 5 min, e o precipitado dourado foi recolhido. Rendimento: 8 mg, 27%. mp> 350 °C. H1 NMR (DMSO-dg) δ 12,86 (s largo, 1H) , 10,94 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H), 3,17 (m, 4H), 2,24 (quinteto, 2H). MS m/e 250 (M-H)-. Produto adicional eluido com DMSO. Anal. Cale. para Ci4H9N302-1,2 H20: C, 61,63; H, 4,21; N, 15,40. Encontrado: C, 61,33; H, 3,60; N, 14,93. 128

Exemplo 139 Preparação de 8e l,6,7,8-tetrahidrociclopent[g] indol-4,5-dicarboxilato de hidrazida.

Dimetil 1-(triisopropilsilil)-1,6,7,8-tetrahidrociclopent [g] indol-4,5-dicarboxilato de dimetilo (34 mg, 0,079 mmol) e hidrato de hidrazina (83 mg, 1,23 mmol) foram submetidos a refluxo em etanol (0,6 mL) durante 24 h. Após evaporação do solvente, o residuo foi suspenso em EtOAc, lavado com água, 1 M de HCl e solução saturada de NaCl, depois seco. O solvente foi evaporado e o residuo foi suspenso em clorofórmio, produzindo um precipitado do produto (2 mg, 10% de rendimento), mp> 250°C. NMR (acetona-dô) δ 7,56 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 3,60 (1, 2H) , 3,19 (t, 3H) , 2,86 (s largo. 2H), 2,23 (quinteto, 2H). MS m/e 242 (M + H)+.

Exemplo 139a-139b Dados para 8f-8g

Tabela 15

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 139a 8f 383, 385, 387 (M-H) ” 139b 8g 250 (M-H)-

Exemplo 139c Preparação de 8h 2-(1-ciclopentenil)-7-azaindole (500 mg, 2,72 mmol), maleimida (527 mg, 5,44 mmol) e YbBr3 (113 mg) em tolueno (10 mL) foram agitados sob refluxo, sob azoto, durante 1,5 horas. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, o produto foi recolhido, lavado com metanol e seco para dar 420mg (55%) . MS m/e 380 (M-l) . 0 tetrahidrocarbazole 129 intermediário (20 mg, 0,07 mmol) foi suspenso em ácido acético, foi adicionado DDQ (80 mg, 0,36 mmol) e a mistura mantida a 55°C durante 12 horas. 0 solvente foi removido a pressão reduzida, o residuo foi triturado com MeOH e o produto recolhido para dar 16 mg (84%) de 8h na forma de um sólido avermelhado. 1H-NMR (DMSO-de) δ 12,50 (s, 1H), 11,02 (s, 1H) , 9,0 (m, 1H), 8,55 (m, 1H) , 7,35 (m, 1H) , 3,21 (m, 4H), 2,28 (m largo, 2H). MS m/e 276 (M-H).

Exemplo 139d Preparação de 8i 0 Composto 8h (200 mg) e CH3I (2 ml) em DMF (10 mL) foi aquecido num reator tubular selado a 110°C durante 3 horas. Após o arrefecimento da mistura até à temperatura ambiente, o produto foi precipitado com a adição de Et20, recolhido e seco para dar 300 mg de 8i (100%) . MS m/e 294 (Μ + H) .

Exemplo 139e Preparação de 8j A uma solução do exemplo 1 (100 mg, 0,36 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado BH3-THF (1 mL de 1 mol de solução), seguido por aquecimento durante 2 horas a 60°C. Um adicional de 2 ml de BH3THF foi adicionado e o aquecimento continuou durante 12 horas. A solução foi concentrada a pressão reduzida até dar um sólido. Foi adicionado de 2N de HCl ao residuo e agitado durante 2 horas. O produto foi recolhido e seco para dar 35 mg (39%) de um sólido branco. MS m/e 249 (Μ + H). 130

Exemplo 139f Preparação de 8k

Foi preparado 8k de um modo semelhante ao descrito no Exemplo 139c para dar o composto do titulo. MS m/e 301 (M + H) .

Exemplo 140

Preparação do Precursor de 11 4-ciano-l,2,3,10-tetra-hidro [a] carbazol-5-carboxilato de etilo. DDQ (39 mg, 0,17 mmol, 220 mol%) foi adicionado à solução de acetato de 4-ciano-l,2,3,4,5,lOhexahydrocyclopenta [a] carbazol-5-carboxilato de metilo (24 mg, 0,078 mmol) em tolueno (12 ml). A solução imediatamente virou castanho-escuro, e foi agitada a 20°C durante 1,5 horas. O solvente foi evaporado. O residuo foi dissolvido em EtOAc e lavado com ácido ascórbico aquoso diluído e duas vezes com solução saturada de NaHC03. A evaporação do solvente proporcionou o produto bruto (21 mg) o qual foi recristalizado a partir de EtOAc proporcionando o produto (9 mg, 38% de rendimento) como um sólido bege, mp 229-231°C. NMR (CDCI3) δ 8,28 (s, 1H) , 7,49 (s, 2H) , 7,26 (s, 2H) , 4, 64 (q, 2H) , 3,30 (t, 2H) , 3,20 (t, 2H), 2,36 (quinteto, 2H) , 1,54 (t, 3H).

Exemplo 141 Preparação de 11a 5,7,8,9,10,11-Hexahidrociclopent[a]pirrolo[3,4-c] carbazol-5(6H)-ona 4-ciano-l,2,3,10-tetra-hidro [a] carbazol-5-carboxilato (14 mg) em DMF (1,6 mL) foi hidrogenado a 55 psi sobre níquel de Raney W2 (150 mg) durante 2,5 dias. 0 catalisador foi removido por filtração e o DMF foi evaporado in vácuo para dar o produto (12 mg, 100% de rendimento) como cristais 131

castanhos-claros. Uma amostra foi recristalizada a partir de DMF, fervida com etanol, arrefecida e filtrada para dar o produto como um sólido esbranquiçado, mp> 300 ° C. NMR (DMSO- -d6) δ 11,45 (s, 1H) , 9, 06 (d, 1H), 8,47 (s, 1H). 7,51 (d, 1H) , 7,40 (t, 1H) , 7,16 (t, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,21 (t, 2H) , 3,04 (t, 2H) , 2,30 (quinteto, 2H) Anal. Cale. para C17H14N2O: c, 77,84; H, 5-38; N, 10,68.

Encontrado: C, 77.40; H, 5.66; N, 10.49.

Exemplo 142 Preparação 11b 5,7,9,10,11,12-Hexahidrociclohexano [a] pirrolo [3,4-c] carbazol-5 (6H),7 (8H)-diona.

Preparado a partir de 2-(ciclohexen-l-il)indol por um processo semelhante ao descrito para a síntese de 5a. NMR (DMSO-d6) δ 11,73 (s largo, 1H) , 10,90 (s largo, 1H) , 8,77 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,51 (t, 1H), 7,27 (t, 1H) , 3,22 (t, 2H) , 3,03 (t, 2H) , 1,90 (m, 2H) . MS m/e 289 (M-H)".

Exemplo 143 Preparação de 11c 9-Etil-8-propil-5,7-di-hidropirrolo [3,4-c] carbazol-5 (6H),7(10H)-diona.

Preparado a partir de 2-(hepta-3-en-3-il)indol de acordo com o procedimento geral descrito para a síntese de 8,9-dimetil-5,6,7,10-tetra-hidropirrolo [3,4-c] carbazol-7 (6H)-ona. Purificado por TLC preparativa (10% de MeOH em CH2CI2 ) para dar 38 mg (40%) de produto . 2H NMR (CDCI3) δ 11,77 (s, 1H), 10,91 (Sj , 1H) , 8,77 (d, 1H) , 7,58 (m, 2H) , 7,25 (m, 1H) , 3,10-3,30 (m, 4H) , 1,56 (m, 2H) , 1,05 (t, 3H), 1,16 (t, 3H). MS m/e 305 (M-H)'. 132

Exemplo 144 Preparação de lld 0 Composto lld foi preparado a partir de 2-(ciclohexen-1-il)-1-metilindole por um procedimento semelhante ao descrito para a síntese de la, mp 242°C. MS m/e 303 (M-H)-.

Exemplo 145 Preparação de llf 5,7,10,ll-tetra-hidrofurano[a-3, 2] pirrolo [3,4-c] carbazol-5 (6H),7(9H)-diona.

Preparado a partir de 2-(2,3-di-hidrofuran-4-il)indol de acordo com o procedimento geral descrito para a síntese de 8,9-dimetil-5,6,7,10-tetra-hidropirrolo [3,4-c] carbazol-7 (6H)-ona. Purificado por TLC preparativa (10% de MeOH em CH2CI2) para produzir 0,15 mg (~ 1%) de produto. 2H NMR (CD3 COCD3) 8 9, 08 (d, 1H) , 7,68 (d, 1H) , 7,48 (t, 1H) , 7,26 (t, 1H), 3,58 (m, 2H), 2,30 m, 2H). MS m/e 277 (M-H)".

Exemplo 146 Preparação de llg 5,7-di-hidrofurano [a-3,2] pirrolo [3,4-c] carbazol-5 (6H), 7 (11H)-diona.

Preparado a partir de 2-(furano-3-il)indol de acordo com o procedimento geral descrito para a síntese de 8,9-dimetil-5, 6, 7, 10-tetra-hidropirrolo[3,4-c]carbazol-7(6H)-ona. Purificado por TLC preparativa (10% de MeOH em CH2CI2) para produzir 0,57 mg (~ 1%) do produto. 1R NMR (DMSO-de) δ 12,0 (s, 1H) , 10,9 (s, 1H) , 8,9 (d, 1H) , 7,9 (d, 1H) , 7,8 (d, 1H) , 7,6 (d, 1H) , 7,58 (t, 1H) , 7,26 (t, 1H) . MS m/e 275 (M-H)". 133

Exemplo 147 Preparação de 12a A uma solução de indol (10,72 g, 92,5 mmol) em THF (400 mL) a -78°C foi adicionado 2,0 M de n-BuLi (48,0 mL, 96 mmol). Após agitação durante 25 min, fez-se borbulhar C02 através da solução durante 12 min. A mistura foi aquecida até à TA, e o solvente (e excesso de C02) foi reduzido em 50% por meio de evaporação rotativa. THF adicional (200 mL) foi adicionado, e a solução foi arrefecida até -78°C antes da adição de 1,7 M-BuLi (54 mL, 91,8 mL) . Após agitação durante 2 h, foi adicionada uma solução de benzil 4-oxo-l-piperidinocarboxilato de etilo (23,3 g, 99,9 mmol) em THF (30 mL). Após 1 h, a reação foi temperada com água (10 mL) e vertida para uma solução aquosa a 10% de NH4C1 (200 mL) . A mistura foi extraída em EtOAc, e a camada orgânica foi separada e lavada com salmoura. Após secagem sobre MgS04, a filtração seguida por evaporação rotativa proporcionou um sólido que foi triturado com éter (3 x 25 mL) e proporcionou o correspondente álcool (18,5 g, 57%). A uma solução do produto de adição acima (11,2 g, 32,0 mmol) em acetona (300 mL) foi adicionado 2 N de HC1 (2,0 mL). Após agitação durante 3 h, foi adicionado mais 2 N de HC1 (1 mL) . Após 1 h, foi adicionada uma solução aquosa saturada de NaHC03 e o solvente foi reduzido por evaporação rotativa. O resíduo foi extraído em CH2CI2, lavado com água e seco sobre Na2S04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi triturado com éter para dar o dieno correspondente como um sólido branco (9,5 g, 89%).

Uma mistura do dieno acima (1,02 g, 3,1 mmol) e maleimida (0,59 g, 6,1 mmol) em xilenos (20 mL) foi aquecida a 134 refluxo durante 18 h. A mistura arrefecida foi filtrada e o sólido foi lavado sucessivamente com água (3 x 20 mL) , éter (3x5 mL) e mais água (3 x 10 mL). Após secagem sob vácuo proporcionou o ciclo-aducto 1,35 g (100%).

Uma mistura do ciclo-aducto acima (325 mg, 0,76 mmol) e Pd a 10% sobre carbono (375 mg) em di- (etilenoglicol) éter dietilico (10 mL) foi aquecida a refluxo durante 3 h. A mistura arrefecida foi filtrada através de um tampão de celite e o bolo de filtração foi lavado com DMF (3 x 15 ml) . O filtrado foi evaporado até à secura e o resíduo resultante foi triturado com éter para dar o composto do título (175 mg, 81%) na forma de um pó verde pálido. αΗ NMR (DMSO -d6) δ 13,2 (s, 1H) , 11,32 (s, 1H), 10, -19 (s, 1H), 8, 92 (d, J = 7,9, 1H) , 8,81 (d, J = 5, 8, 1H), 8,51 (d, J = 5,8, 1H) , 7,78 (d, , J = = 7,9, 1H) , 7,60 (aprox. t, J = 7,3, 1H) , 7,41 (aprox. t, J = 7,3 , 1H) . MS m/e 288 (M + H) + .

Exemplo 148 Preparação de 12b

Uma mistura de imida 12a (28,5 mg, 0,10 mmol), pó de Sn (31,2 mg, 0,26 mmol), HOAc (4 mL) e HC1 concentrado (2 mL) foi aquecida até ao refluxo. Mais Sn foi adicionado depois de 20 h (42,5 mg, 0,35 mmol) e 26 h (65,0 mg, 55 mmol). A solução foi decantada e o resíduo metálico foi enxaguado com DMF. O sobrenadante, evaporou-se e triturou-se com NaHC03 aquoso e água. O sólido resultante foi suspenso em DMSO e filtrado. O filtrado foi extraído com EtOAc e lavado com água (3 x 10 mL) e seco sobre MgSCU. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi triturado com éter para produzir uma mistura de lactâmicos (1,1 mg, 4%) . NMR (DMSO-dô) δ 13,0 (s largo, 1H) , 10,4 (s, 0,65 H) , 10,13 (s, 0,35 H) , 8,88 135 (d, 0,35 Η), 8,70 (m, 1.65H) , 8,51 (d, 0,35 Η), 8,44 (d, 0,65 Η), 8,27 (d, 0,35 Η), 8,11 (d, 0,65 Η), 7,76 (m, 1H) , 7,53 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) , 4,97 (s, 2H) . MS mie 274 (M + H) + .

Exemplo 149 Preparação de 12c A uma mistura de hidroxilactama foi adicionado 12d (5,2 mg, 0,018 mmol) em CH2CI2 (4 mL) EtsSiH (123 ul) e TFA (297 ul) . A mistura foi agitada durante 20 h, e 0 solvente foi removido por evaporação rotativa repetida a partir de IPrOH. A trituração com éter proporcionou 0 produto lactama (2,3 mg, 45%). NMR (DMSO-de) δ 12 ,90 (s, 1H) , 10,40 (s, 1H), 8,70 (m, 2H), 8,44 (d, J = 5, 65, 1H) , 8,11 (d, J = 7,8, 1H) , 7,76 (d, J = 8,3, 1H) , 7,53 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) , 4, 97 (s, 2H) . MS m/e 274 (M + H) + .

Exemplo 150 Preparação de 12d A uma mistura de imida 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) em acetona (7 ml) foi adicionado Ipri (200 uL). Após agitação durante a noite, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o residuo foi retomado em MeOH (10 mL) e tratado com NaBH4 (22,4 mg, 0,59 mmol) . Após agitação durante a noite, a reação foi extinta com 1 N de HC1 (5 mL) e aquecida até 50°C. A mistura foi neutralizada com solução aquosa de NaHCCd, extraida com EtOAc, lavada sucessivamente com água e salmoura e seca sobre MgS04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o residuo foi purificado por HPLC preparativa com 25% de MeCN/H20, contendo 0,1% de TFA para dar o produto hidroxilactama (7,0 mg, 25%). 13C NMR (DMSO-d6) δ 170,5, 148, 6, 145, 3, 144,0, 140,1, 136, 6, 126, 7, 124,5, 123, 8, 121, 9, 121,0, 117,4, 136 116, 1, 1: 16, 0 , 115, 8, 112 ,4, 78,3. NMR (DMSO-d6 ) δ 12, 90 (s, 1H) , 10, 37 (s , 1H) , 8,95 (s, 1H), 8, 70 (s, 1H) , 8,44 (s, 1H) , 8,37 (d, J = 7 ,9, 1H), 7,73 (d, , J = 8 ,2 , 1H) , 7,52 (aprox. t, J = 7,4, 1H), 7,33 (aprox. t, J = 7,4, 1H) , 6, 63 (d, J = = 10,0 , 1H), 6,40 (d, J = 10, 0, 1H) . MS mie 290 (M + H) + e mie 273 (M -OH)+.

Exemplo 151 Preparação de 12e

A uma mistura de imida 12a (50,1 mg, 0,17 mmol) em MeCN (5,0 mL) foi adicionado acrilato de etilo (50 uL) e DBU (50 ul) . A reação foi aquecida até ao refluxo durante 20 h, arrefecida e diluída com água (10 ml) . O produto sólido foi recolhido por filtração e lavado com 50% de EtOH aquoso (2x5 mL) e EtOH a 95% (3x1 mL) e seco sob vácuo (32 mg, 49 %) · 13C NMR (DMSO-d6; I δ 171 ,1, 169, 3, 168,8 :, 149 >,2, 145,3, 14 0,7, 138,7 , 129,2, 12 : 8,1 , 125, 6, 124,7, 121, ,8, 121,2, 12 1,0, 118,3, , 116,2, 114 , 6, 112,8, 60, ,7, 34 ,0, 33,2, 14,4. NMR (DMSO- d6) 8 13, 19 (s, 1H), 10 ,1 0 (s, 1H) , 8,83 (d, J = 8,0, 1H) , 8,76 (d, J = = 5, 8, 1H), 8, 42 (d, , J = 5, 8 , 1H), 7, 73 (d, J = = 8,0, 1H , 7 ,59 (aprox. t , J = 7,2, 1H) , 7,39 (aprox . t, J = 7,2, 1H), 4,00 (q, J = 7,1, 2H) , 3, 88 (t, J = 7,0, 2H) , 2,73 (t, J = = 7, 0, 2H), 1, 07 (t, , J = 7,1 , 3H) . MS m/e 388 (M + H)+.

Exemplo 152 Preparação de 12f A uma solução de imida 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) em DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (60%, 5,1 mg, 0,13 mmol) . Após

agitação durante 15 min., foi adicionado (3-bromopropoxi)-t-butildimetilsilano (30 uL) e a reação foi aquecida a 50°C durante 2 h. A solução foi arrefecida, vertida em solução aquosa a 10% de NH4C1 (10 mL) e extraída com EtOAc. A 137 camada orgânica foi separada e lavada sucessivamente com água, NaHC03 aquoso e salmoura, e seca sobre Na2S04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi retomado em MeOH (10 mL) e tratado com AcCl (90 uL) . Após 1 h, o solvente foi removido por evaporação rotativa e o resíduo do produto foi triturado com éter (2 x 1 mL) e seco sob vácuo (21,7 mg, 57%). 1R (DMSO-dg) δ 13,54 (s, 1H) , 10,16 (s, 1H) , 8, 89 (d, J = 9,5, , 1H) , 8, 84 (d, J = 6,7, 1H) , 8,71 (d , J = 6/ 7, 1H), 7, 77 (d, 8. 2, 1H) , 7 , 63 (aprox. t, J = 7,2 , 1H), 7 ,43 (aprox. t, J = 7 ,2, 1H) , 5 , 00 (m, 1H) , 3,72 (t, J = 7, 0, 2H) , 3,48 (d, J = 7 .0, 2H) , 1 , 82 (P, J = 7,4, 2H) . MS ml e 404 (M + Na) +.

Exemplo 153 Preparação de 12g A uma solução de imida 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) em DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (60%, 5,1 mg, 0,13 mmol). Após agitação durante 15 min., foi adicionado (3-bromoetoxi)-t-butildimetilsilano (30 uL) e a reação foi aquecida a 50°C durante 2 h. A solução foi arrefecida, vertida em solução

aquosa a 10% de NH4C1 (10 mL) e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi separada e lavada sucessivamente com água, NaHCCL aquoso e salmoura e seca sobre Na2S04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi retomado em MeOH (10 mL) e tratado com AcCl (90 uL) . Após 1 h, o solvente foi removido por evaporação rotativa e o resíduo do produto foi triturado com éter (2 x 1 mL) e seco sob vácuo (6,5 mg, 20%) . 1H (DMSO-dg) δ 13,51 (s, 1H) , 10,21 (s, 1H), 8,93 (d, J = 8,8, 1H) , 8,81 (d, J = 5,7, 1H) , 8,52 (d, J = 5,7, 1H) , 7,79 (d, 8.8, 1H) , 7,62 (aprox. t, J = 7,2, 1H), 7,43 (aprox. t, J = 7,2, 1H) , 4,87 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,67 (m, 2H). MS m/e 332 (M + H)+. 138

Exemplo 154 Preparação de 12h A uma solução de imida 12a (28,7 mg, 0,1 mmol) em DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (60%, 5,2 mg, 0,13 mmol) . Após agitação durante 15 min., foi adicionado bromoacetato de etilo (14 uL) e a reação foi aquecida até 60°C durante 1 h. Foi adicionado mais NaH (5,8 mg) seguido por mais bromoacetato de etilo (15 uL). Esta mistura foi agitada a 60°C durante 1 h. A solução foi arrefecida, vertida em solução aquosa a 10% de NH4C1 (10 mL) e extraida com EtOAc. A camada orgânica foi separada e lavada sucessivamente com água, NaHCCp aquoso e salmoura e seca sobre Na2SC>4. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o residuo foi triturado com MeOH (2x1 mL) . O produto foi seco sob vácuo (18,2 mg, 48%). XH (DMSO-d6) δ 13,35 (s, 1H) , 10,16 (s, 1H) , 8,83 (m, 2H) , 8,52 (d, J = 5,9, \—1 7,79 (d, J = 8,2, 1H) , 7, 63 (aprox . t, J = 8,2, 1H) , 7,43 (aprox. t, J = 8,2, 1H), 4,51 (s, 2H) , 4,14 (q, J = 7 1 2H) , 1,20 (t, J = 7,1, 3H) MS m/e 374 (M + H) + .

Exemplo 155 Preparação de 12i A uma solução de imida 12a (28,7 mg, 0,1 mmol) em DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (60%, 12,8 mg, 0,32 mmol) . Após agitação durante 15 min., foi adicionado hidrocloreto de cloreto de 2-picolilo (19,6 mg, 0,12 mmol) e a reação foi aquecida até 65°C durante 3 h. A solução foi arrefecida, vertida em solução aquosa a 10% de NH4CI (10 mL) e 0 produto foi recolhido por filtração. Depois de lavar com água (5 mL) e MeOH (2 x 1 mL), 0 produto foi seco sob vácuo (20,5 mg, 54%). XH (DMSO-d6) δ 13,38 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 8, 87-8,80 (m, 2H), 8,50 (s, 1H), 8,41 (s, 1H) , 7,76 (m, 2H) , 7, 61 (aprox. t, J = 7,4, 1H) , 7,47 (d, J = 7 7 139

1Η) , 7,39 (aprox. t, J = 7,4, 1H) , 7,25 (aprox. t, J 5,4), 4,99 (s, 2H) . MS mie 379 (M + H) + .

Exemplo 156 Preparação 12j A uma solução de éster de 12e (2,1 mg, 0,005 mmol) em EtOH (4,0 mL) foi adicionado 1 N de NaOH (300 uL) , e a mistura foi aquecida a 70°C durante 0,5 h. Depois a reação foi arrefecida, o solvente foi removido por evaporação rotativa. 0 resíduo foi retomado em água (1 ml) e acidificado a pH 3 com 1 N de HC1 aquoso. 0 solvente foi removido por evaporação rotativa e o resíduo triturado com água. O produto foi seco sob vácuo (1,1 mg, 56%) (DMSO- d6 ) δ 12, 78 (s, 1H) , 9,35 (s, 1H) , 8,78 - . 8,53 (m, 2H) , 8, 39 (d, J = = 5, 5, 1H) , 8,14 (d, J = 7,9, 1H) , , 7,70 (d, J = 7, 9, 1H) , 7, 49 (aprox . t, J = 7 ,8, 1H), Ί, ,25 (aprox. t, J = 7, 8, 1H) , 3, 54 (t, J = =, 2H), 2, 57 (t, J = 7,1 , 2H). MS mie 360 (M + H)+.

Exemplo 157 Preparação de 12k A uma mistura de imida 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) em MeCN (5,0 mL) foi adicionado acrilonitrilo (50 uL) e DBU (5 ul) . A reação foi aquecida até ao refluxo durante 15 h, arrefecida e diluída com água (10 ml). O produto sólido foi recolhido por filtração e lavado com 50% de EtOH aquoso (2x5 mL) e EtOH a 95% (3x1 mL) . O filtrado foi evaporado e triturado com água (2x1 mL) e éter (2x1 mL) e seco sob vácuo (4,0 mg, 12 %) . 1R NMR (DMSO-de) δ 13,3 (s, 1H), 10,20 (s, 1H) , 8,93 (d, J = 7,9, 1H) , 8, 83 (d, J = 5,8, 1H) , 8,53 (d, J = 5.8,1 H) , 7,80 (d, J = 7,9, 1H), 7,63 (aprox. t, J = 7,2, 1H), 7, 44 (aprox. t, J = 7,2, 1H), 3,97 (t, J = 7,1, 2H) , 3,00 (t, J = 7,0, 2H) . MS m/e 341 (M + H) + . 140

Exemplo 158

Preparações de 121 e 12m A uma solução de imida a partir do Exemplo 12a (28,6 mg, 0,1 mmol) em DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (60%, 5,0 mg, 0,13 mmol). Após agitação durante 15 min., foi adicionado p-(t-butildimetilsiloxi) cloreto de benzilo (29,7 mg), e a reação foi aquecida até 60°C durante 4 h. A solução foi arrefecida, vertida em água (5 mL) e filtrada. O sólido foi retomado em MeOH (10 mL) e tratado com AcCl (50 uL) . Após 1 h, o solvente foi removido por evaporação rotativa e o resíduo foi triturado com MeOH (2x1 mL) para dar o produto mono-alquilado (121), que foi seco sob vácuo (8, 9 mg, 23%) . 3H (DMSO- d6) δ 13,24 (s, 1H) , 10,16 (s, 1H) , 9, 37 (s, 1H) , 8,88 (d, J = 8,0, 1H), 8,78 (s , 1H), 8,47 (d, J = 5,7, 1H), 7,75 (d, J = 8,2, 1H), 7,60 (aprox. t, J = 7,8, 1H), 7,40 (ap t, J = 7,8, 1H), 7,21 (d, , J = 8,2, 2H) , 6,69 (d, J = 8,2, 2H) , 4,72 (s, 2H) . A evaporação das lavagens com MeOH deixou um resíduo que foi fraccionado por HPLC preparativa (45% de MeCN/H20 p/0,1% de TFA) para se obter o produto di-alquilado (12m, 8,2 mg, 16%). 1H (DMSO- d6 ) δ 10 ,28 (s, 1H) r 9,36 (s , 2H) , 9, 14 (d, J = 8, 0, 1H) , 8, 63 (s, 1H) , 8 , 35 (d , J = 5, 7, 1H) , 7,93 (d, J = = 8, 4, 1H) , 7, 66 (aprox. t, J = 7 ,4, 1H), 7,49 (aprox . t, J = = 7, 4, 1H) , 7, 22 (d, J = 8, 2, 2H) , 6, 83 (d, J = = 8.2, 2H) , 6, 69 (d, J = 8, 2, 2H) , 6, 61 (d, J = 8,2, 2H) , LO \—1 LO (s, 2H) , 4 ,75 (s, 2H) .

Exemplo 159 Preparação de 12n O procedimento descrito para 12a foi repetido com 5- metilindole em vez de indol. 13C NMR (DMSO-de) δ 171,3 170,6, 149,3, 145,1, 139,0, 138,8, 130, 6, 130,2, 129,4 125,8, 124,4, 121,6, 121,1, 119,3, 116,2, 114,2, 112,3 21, 6. 1R NMR (DMSO-d6) 8 13, 07 (s, 1H) , 11,27 (s, 1H) 141 10,12 (s, 1H) , 8,75 (d, J = 5,8, 1H) , 8,63 (s, 1H) , 8,44 (d, J = 5,8, 1H) , 7,61 (d, J = 8,3, 1H) , 7,39 (d, J = 8,3, 1H), 2,50 (s, 3H).

Exemplo 160 Preparação de 12o A síntese descrita para 12a foi realizada com 7-metilindole em vez de indol para a preparação de 12o. 1H NMR (DMSO-de) δ 12,37 (s, 1H), 11,18 (s, 1H) , 10,04 (s, 1H), 8,69 (d, J = 5,7, 1H) , 8, 63-8,50 (m, 2H) , 7,29 (d, J = 6,9, 1H) , 7,20 (aprox. t, J = 7,6, 1H) , 2,53 (s, 3H) . MS m/e 302 (M + H) + .

Exemplo 161 Preparação de 12p A uma mistura de imida 12a (496 mg, 1,73 mmol) em DMF (30 mL) foi adicionado NBS (341 mg, 192 mmol) , e a reação foi aquecida até 60°C durante 2 h. Foi adicionado mais NBS (85 mg, 0,48 mmol) e o aquecimento continuou durante 1 h. Foi adicionado mais NBS (25 mg, 0,14 mmol) e o aquecimento continuou durante 1 h. A mistura de reação foi arrefecida, e o solvente foi removido por evaporação rotativa. 0 residuo foi triturado com EtOH a 95% (3 x 10 mL) e seco sob vácuo (479 mg, 76%) . NMR (DMSO-d6) δ 13,25 (s, 1H) , 11,33 (s, 1H), 10,08 (s, 1H) , 8,88 (s, 1H) , 8,77 (d, J = 5, 6, 1H) , 8,38 (d, J = = 5. 6,1 H) , 7,64 (s, 2H) .

Exemplo 162 Preparação de 12q

Uma mistura de composto brometo de 12p (17,1 mg, 0,047 mmol), PdCl2 (PPh3)2 (3,2 mg, 0,005 mmol), NaOAc (22,5 mg) e metoxietanol (2 mL) foi purgado com CO e aquecida até 150°C durante 2 h. A mistura de reação foi arrefecida, filtrada 142 através de uma almofada de celite com o auxílio de MeOH (3 x 1 mL), e o filtrado foi reduzido por evaporação rotativa. 0 resíduo foi triturado com água (3 x 10 mL) , seco sob vácuo, e purificado por HPLC preparativa (30% de MeCN/H20 p/0,1% de TFA, 3,1 mg, 17%) NMR (DMSO-d6) δ 13,77 (s, 1H) , 11,41 (s, 1H) , 10,18 (s, 1H) , 9,66 (s, 1H) , 8,88 (d, J = 5,6, 1H) , 8,67 (d, J = 5,6, 1H) , 8,21 (d, J = 7.5,1 H) , 7,88 (d, J = 7,4, 2H) , 4,44 (m, 2H) , 3,65 (m, 2H) , 3,34 (s, 3H). MS mie 390 (Μ + H)+.

Exemplo 163 Preparação de 12r A uma mistura do composto de imida 12q (20,1 mg, 0,052 mmol) , em THF (2 mL) foi adicionada uma solução de 2M de LiBH4 em THF (200 ul) . Após 2 h, a mistura reacional foi parada com MeOH, em seguida com água, em seguida com 1 N de HC1 (5 gotas) . Esta mistura foi neutralizada com uma solução aquosa de NaHC03 e extraída em EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução salina, seca sobre Na2SC>4, e o solvente foi removido por evaporação rotativa. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (25% de MeCN/H20 p/0,1% de TFA, 2,0 mg, 10%) XH NMR (DMSO-d6) δ 13, 18 (s r 1H) , 10,39 (s, 1H) , 8,90 (s, 1H) , 8,85 (s, 1H) 8, 60 (d, j = 5, 6, 1H), 8 ,32 (d, J = = 5,6, 1H) , 7,97 (d, J 7.5,1 H) r 7.68 (d, J = 7,4, 2H), 6, 44 (d, J = 6,5, 1H) 6,33 (d, J = 6,5, 1H) , 4,30 (m, 2H) , 3,51 (m, 2H) , 3,16 (s, 3H). MS mie 392 (Μ + H)+.

Exemplo 164 Preparação de 12s

Uma mistura de composto de brometo 12p (21,2 mg, 0,058 mmol ) , PdCl2 (PPh3)2 (4,6 mg, 0, 0 07 mmol) , 2- (tributilestanil) tiofeno (75 uL) e DMF (2 mL) foi aquecida 143 até 100 °C durante 20 h. A mistura de reação foi arrefecida, filtrada através de uma almofada de celite com a ajuda de DMF (3x1 mL) e o filtrado foi reduzido por evaporação rotativa. O resíduo foi triturado com éter (3 x 3 mL) e pentano (2 x 10 mL) e seco sob vácuo (8,1 mg, 38%) λΆ NMR (DMSO-d6) δ 13,26 (s, 1H) , 11,43 (s, 1H) , 10,16 (s, 1H) , 9, 16 (s, 1H) , , 8,80 (d, J = 5,7, 1H) , , 8,47 (d 1H) , 7, 91 (d, J = \—1 OO OO 7,78 (d, J = 8,3, 2H) J = 4,9, 1H) , 7,48 (d, J = 3,0, 1H) , 7,16 (aprox. t, J = 4,2, 1H).

Exemplo 165 Preparação de 12t

Uma mistura de composto de brometo 12p (15,1 mg, 0,041 mmol), PdCl2 (PPh3)2 (4,6 mg, 0,007 mmol), 2- (tributilestanil)-1-metilpirrol (55 uL) e DMF (2 mL) foi aquecida a 100°C durante 3h. A mistura de reação foi

arrefecida, filtrada através de uma almofada de celite com a ajuda de DMF (3x1 mL) e o filtrado foi reduzido por evaporação rotativa. O resíduo foi triturado com éter (3 x 3 mL) e pentano (2 x 10 mL) e purificado por cromatografia (sílica gel, 7% de MeOH em CH2CI2) , (3,8 mg, 25%) 1R NMR (DMSO-de) δ 13,26 (s, 1H) , 11,43 (s, 1H) , 10,24 (s, 1H) , 9, 03 (s, 1H) , 8, 86 (d, 1H) , 8,57 (d, 1H) , 7,85 (d, 1H) , 7, 71 (dd, 1H) , 6, 91 (s, 1H) , 6, 24 (dd, 1H) , 6,14 (dd, 1H) , 3, 75 (s, 3H) . MS m/e 367 (M + H) + .

Exemplo 166 Preparação de 12u

Uma mistura de composto de brometo 12p (21,5 mg, 0.059mmol), PdCl2 (PPh3) (4, 6 mg, 0, 007 mmol), 4- (tributilestanil) piridina (100 uL) e DMF (2 mL) f oi aquecida a 110°C por 12h A mistura de reação foi 144 arrefecida, filtrada através de uma almofada de celite com a ajuda de DMF (3x1 mL) e o filtrado foi reduzido por evaporação rotativa. 0 residuo foi purificado por cromatografia (sílica gel, 20% de MeOH em CH2C12), (1,8 mg, 8%) 2H NMR (DMSO-d6) δ 13,18 (s, 1H) , 11,20 (s, 1H) , 10,01 (s, 1H) , 9,13 (s, 1H) , 8,65 (d, 1H) , 8,46 (m, 2H) , 8,33 (d, 1H), 7,83 (dd, 1H), 7,52 (d 1H) , 7,66 (m, 2H) . MS mie 365 (M + H) + .

Exemplos 166a-166d Preparação de 12v-12y

Os compostos seguintes 12v-12y foram preparados de um modo semelhante ao descrito nos Exemplos 147-166.

Tabela 16

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 166a 12v 402 (M+H) 166b 12w 386 (M+H) 166c 12x 427 (M+H) 166d I2y 385 (M+H)

Exemplo 166e Dados para 12z O composto 12z foi preparado de um modo semelhante ao descrito nos Exemplos 147-166 1H-NMR (DMSO-de) δ 13,4 (1H, s), 11,4 (1H, s) , 10,2 (1H, s) , 9,1 (s, 1H), 8, 86 (d, J = 5,7 Hz, 1H) , 8,54, (d, J = 5,7 Hz, 1H) , 7,84 (s, 1H), 7 , 83- 7, 67 (m, 2H) , 7, 66 (d, J = 15, 8 1H), 7,0 (m, 1H) , 6,70 (d, J = 15,8 Hz, 1H) . 145

Exemplo 166f Dados para 12aa 0 composto 12aa foi preparado de um modo semelhante ao descrito nos Exemplos 147-166 1H-NMR (DMSO-de) δ 13,5 (1H, s), 11,4 (1H, s), 10,2 (1H, s) , 9,1 (s, 1H) , 8,86 (d, J = 5,8 Hz, 1H) , 8,53, (d, J = 5,8 Hz, 1H) , 8,0-7,3 (m, 2H) , 6,98 (m, 1H), 6,4 (d, J = 16,6 Hz, 1H) .

Exemplo 166g Dados para 12ab 0 composto 12ab foi preparado de um modo semelhante ao descrito nos Exemplos 147-166 1H-NMR (DMSO-de) δ 13,3 (1H, s), 11,4 (1H, s), 10,2 (1H, s), 9,1 (s, 1H) , 8,85 (d, J = 5, 6 Hz, 1H) , 8,54, (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 10,1 1H) , 7, 92 (d, J = 16, 1 Hz, 1H) , 7, 84-7,80 (m, 2H) , 7,65 (d J = 8,0, 1H), 7,34 (d, J = 16, 1 Hz, 1H), 7,28 (m, 1H) .

Exemplo 166h Dados para 12ac O composto 12ac foi preparado de um modo semelhante ao descrito nos Exemplos 1 47-166 1H-NMR (DMSO-de) δ 13,4 (1H, s) , 11,4 (1H, s) , 10,2 (1H, s), 9,1 (s, 1H), 8,86 (d, J = 5, 8 Hz, 1H) , 8, 61· -8,50 (m, 2H) , 8,0 1 (d, J = 10,1, 1H) , 7,85 (d, J = 10,1, 1H) , 7,80- - 7,25 (m , 5H) .

Exemplo 167 Preparação de 13a A uma mistura de imida 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) em acetona (7 mL) foi adicionado Mel (250 ul) . Após agitação durante a noite, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi retomado em MeOH (7 mL) e tratado com NaBH4 (15,2 mg, 0,4 mmol). Após agitação durante a noite, a reação foi extinta com 1 N de HC1 (5 mL) e aquecida até 146 50°C. A mistura foi neutralizada com solução aquosa de NaHC03, extraida com EtOAc, lavada sucessivamente com água e salmoura e seca sobre MgS04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o residuo foi triturado com éter (3x3 mL) e seco sob vácuo (14,9 mg, 49%) . NMR (DMSO· -d6) δ 11,84 (s, 1H) , 10,96 (s, 1H) , 8,74 (d, J = 7,8, 1H) , 7,54 (d, J = 7,8, 1H) , 7,49 (aprox. t, J = 7,3 , 1H) , 7,25 (aprox. t, J = 7,3, 1H) , 3,95 (s, 2H) ,

3,25-3, 00 (m, 2H) , 2,85-2, 65 (m, 2H) . 2,41 (s, 3H) . MS mie 306 (M + H)+.

Exemplo 168 Preparação de 13b A uma mistura de imida 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) em acetona (7 ml) foi adicionado brometo de benzilo (300 uL) . Após agitação durante a noite, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o residuo foi triturado com éter (3 x 2 mL). Este sólido foi retomado em MeOH (7 mL) e tratado com NaBH4 (15,2 mg, 0,4 mmol). Depois de se agitar 3,5 h, a reação foi extinta com 1 N de HC1 (5 mL) e aquecida até 50°C. A mistura foi neutralizada com solução aquosa de NaHC03, extraída com EtOAc, lavada sucessivamente com água e salmoura e seca sobre MgS04. Após filtração, o solvente foi removido por evaporação rotativa, e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (45% de MeCN/H20 p/0,1% de TFA, 6,5 mg, 17%) . 1H NMR (DMSO-de) 11, 87 δ (s, 1H) , 10, 93 (s, 1H) , 8,74 (d, J = 7,8, 1H) , 7,54 (d, J = 7,8, 1H) , 7, 60 -7,20 (séries de m, 8H) , 4,05 (s, 2H) , 3,74 (s, 2H) , 3, 44 - 3: 10 (m, 2H) , 2,85-2, 65 (m, 2H) MS mie 382 (M + H)\ 147

Exemplo 169 Preparação de 14

Benzofurano foi tratado com butil-lítio em éter seguido por ciclopentanona. 0 álcool resultante é desidratado com ácido toluenossulfónico em tolueno para se obter 2-ciclopenteno-l-ilbenzofurano. 0 tratamento com maleimida deu um ciclo-aducto que foi aromatizado por tratamento com tetracloroquinona. 1H NMN (DMSO-dô) δ 11,29 (s, 1H) , 8,60 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,66 (t, 1H), 7,52 (t, 1H), 3,23 (m, 4H), 2,30 (quinteto, 2H). MS m/e 276 (M-H)".

Exemplo 169a Preparação de 14a 14a foi preparado de um modo semelhante ao descrito no

Exemplo 62 j, começando com 6-metoxi-2-(1- hidroxiciclopentil) indol para dar o composto do titulo. MS m/e 305 (m-l)+.

Exemplo 169b Preparação de 14b 14b foi preparado de um modo semelhante ao descrito no

Exemplo 62 j, começando com 4-metoxi-2-(1- hidroxiciclopentil)indol para dar o composto do titulo. MS m/e 305 (M-H).

Exemplo 170 Preparação de 15

Este composto foi sintetizado a partir de benzotiofeno de acordo com o mesmo procedimento descrito para o composto 14. NMR (DMSO-d6) δ 11,36 (s, 1H) , 9,60 (d, 1H) , 8,13 (d, 1H) , 7,63 (m, 2H) , 3,11 (m, 4H) , 2,31 (quinteto, 2H) . MS m/e 2 92 (M-H) '. 148

Exemplos 170a-170m Preparação de 15a-15m

Carbonato Intermediário: 0 composto 2ao (0,55 g, 1,9 mmol) e bis (4-nitrofenil) carbonato (1.1.4g, 3,76 mmol) foram misturados num tubo de reação selado e aguecido a 140 °C durante 20 minutos. O sólido foi triturado com éter e recolhido para 0,83 g. MS m/e 456 (M-H).

Carbamatos: Uma mistura de amina (0,09 mmol) e carbonato de nitrofenilo intermediário (0,18 mmol) em THF seco (2 mL) sob azoto foi aquecida a 80°C durante 6 horas. O solvente foi concentrado a pressão reduzida e o resíduo triturado com éter e o produto recolhido.

Tabela 17

Exemplo Composto Massa Esp. (m/e) 170a 15a 404 (M-H) 170b 15b 417 (M-H) 170c 15c 392 (M-H) 170d 15d 442 (M-H) 170e 15e 459 (M-H) 170f 15f 425 (M-H) 170g 15g 439 (M-H) 170h 15h 453 (M-H) 170i 15i 425 (M-H) 170 j 15 j 402 (M-H) 170k 15k 419 (M-H) 1701 151 447 (M-H) 170m 15m 439 (M-H) 149

Exemplo 171 Preparação de 81

Uma mistura de 8h (8,7 g, 0,031 m) e MCPBA (19,34 g, 0,078 m) em ácido acético (500 mL) foi aquecida a 80°C durante 20 horas. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, um sólido amarelo foi recolhido, lavado com ácido acético, uma solução de bicarbonato de sódio, salmoura e seco (8,5 g rendimento 92%); 1H NMR (DMSO-de) δ 7,33-7,37 (t, 1H) , 8,48-8,49 (d, 1H) , 8,62 (d, 1H) , 8,64 (s, 1H) , 11,14 (m, 1H), MS (m/z) = 292 (M-H).

Exemplo 172 Preparação de 8m

Uma mistura de 8i (50 mg, 0,15 mmol) e metóxido de sódio (40 mg, 0,74 mmol) em DMSO anidro (0,4 mL) foi aquecida a 80°C durante 3 horas. A solução foi diluída com água (5 mL) e ajustada a pH 3 dando um sólido castanho. Este material foi submetido a refluxo em metanol, filtrado e o filtrado evaporado. Após a trituração do resíduo com DCM e água, foi obtido um sólido amarelo (6 mg, rendimento de 12%); NMR (DMS0-d6) δ 2,22-2,26 (m, 2H) , 4,09 (s, 3H) , 150 6,97 (s, 1H), 8,50-8,52 (d, 1H), 10,92 (s, 1H), MS (m/z) 325 (M +).

Exemplo 173 Preparação de 8n

Uma mistura de 81 (15 mg, 0,05 mmol) , anidrido trifluoroacético (0,2 mL) e DMF anidro (0,5 mL) foi aquecida a 70°C durante 5 horas. 0 solvente foi evaporado, em seguida foram adicionados THF (1 mL) e 3 N de HC1 (0,2 mL) ao residuo e aquecido a 70°C durante 0,5 horas. O solvente foi decantado e o residuo triturado com água para proporcionar um sólido amarelo (10 mg, 65% de rendimento), NMR (DMSO-d6) δ 2,23-2,27 (t, 2H) , 3,60 (t, 2H) , 6,57 (d, 1H) , 8,76-8, 78 (d, 1H) , 10,89 (s, 1H) , 12,13 (s, 1H) , MS (m/z) + 294 (M +).

Exemplo 174 Preparação do 8o

Uma mistura de 81 (20 mg, 0,068 mmol) e sulfato de dimetilo (0,5 mL) foi aquecida a 140°C durante 10 horas. Após arrefecimento, foi recolhido um sólido cinzento, lavado com 151 sulfato de dimetilo e depois com éter. 0 sólido foi submetido a refluxo em THF, em seguida, etanol para proporcionar um sólido castanho-amarelado (17 mg, 68% de rendimento) ; NMR (DMSO-dg) δ 2,34-2,35 (m, 2H), 3, 23- 3,25 (m, 4H) , 4,52 (s, 3H) , 7,83-7,85 (m, 1H) , 9,40 (m, 2H) , 11,38 (s, 1H), MS (m/z) = 308 (M +).

Exemplo 175 Preparação de 8p

Uma mistura de 8o (20 mg, 0, 068 mmol) e NBS (24 mg, 0,14 mmol) em THF (6 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. Após evaporação do solvente, foi adicionada água ao residuo e um sólido foi recolhido (18 mg, 65% de rendimento); ΧΗ NMR (DMSO-de) δ 2,24 (m, 2H) , 8,98 (s, 1H), 10,97 (s, 1H), 12,33 (s, 1H), MS (m/z) = 371 (M+) ·

Exemplo 176 Preparação de 8q e 8r

Uma mistura de 81 (20 mg, 0,068 mmol), cloreto de metanossulfonilo (0,1 mL, 0,68 mmol), cloreto de litio (44 152 mg, 1,0 mmol) e DMF anidro (0,3 mL) foi aquecida a 80°C durante 16 horas. Foi adicionado cloreto de metanossulfonilo adicional (0,1 mL, 0,68 mmol) e aquecida outras lOh. A mistura foi evaporada e o residuo foi agitado com solução de bicarbonato de sódio a 10% para proporcionar um sólido consistindo em isómeros 8q e 8r (18 mg) ; NMR (DMS0-dÊ ;) δ 2,28 (m, 2H) , 7,39' -7, 44 (m, 2H) 8,46 (d, 1H) , 8,47 (d, 1H) , 8,96 (d, 1H) , 8, 98 (d, 1H) 9, 18 (s, 1H) , 10, 95 (s, 1H) , 11,02 (s, 1H) , 11 , 08 (s, 1H) 12,74 (s, , 1H) , 12,91 (s, 1H) ; MS (m/z) = 312 (m + ) ·

Exemplo 177 Preparação de 8s

Uma mistura de 8n (20 mg, 0,068 mmol) e N-clorosuccinimida (36 mg, 0,27 mmol) em THF anidro (6 mL) foi submetida a refluxo durante 4 horas. A mistura foi evaporada e o residuo foi agitado com água, depois THF para proporcionar um sólido castanho-amarelado (4 mg, rendimento de 18%); NMR (DMSO- -d6) δ 2,25 (m, 1H) , 8,82 (s, 1H), 10, 97 (s, 1H), 12, 33 (m, 1H); MS (m/z) = 328 (m+) . 153

Exemplo 178 Preparação de 8t e 8u

Foi adicionado ácido nítrico (fumante) (5 mL) a uma solução de 81 (0,5 g, 0,0016 m) em TFA (5 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. Após a evaporação do TFA, foi adicionada água fria ao resíduo que dá um sólido (0,5 g, 75% de rendimento) constituído pelos isómeros 8t e 8u; 1HNMR (DMSO-de) δ 2,25-2,33 (m, 2H), 7,83 -7.85 (d, 1H), 7,88-7, 97 (d, 1H), 9,26-9,28 (d, 1H) , 11,10 (s, 1H) , 14,00 (m, 1H) ; MS (m/z) = 339 (m+) .

Exemplo 179

Preparação de 8vi e 8vii

O

8vii 8vi

Uma mistura de isómeros 8t e 8u (25 mg, 0,074 mmol) e di-hidrato de cloreto de estanho (50 mg, 0,22 mmol) em ácido acético foi aquecida a 40°C durante 2 horas. A reação foi vertida em água e o pH ajustado para 5 para dar um sólido. A mistura foi aquecida a 60°C em ácido acético, e arrefecida, foi recolhido um sólido castanho (11 mg, rendimento de 4 6 %); 2H NMR (DMSO-de) δ 2,25-2,35 (m, 2H) , 154 6,72 (d, 1H) , 6,78 (d, 2H) , 8,11 (d, 1H) , 8,19 (d, 1H) , 11,27 (s, 1H), 11,39 (s, 1H), 11,83 (s, 1H), 12,00 (s, 1H) , MS (m/z) = 325 (m+) .

Exemplo 180 Preparação de 8w

Este composto foi preparado utilizando o procedimento descrito para o 141 a partir de 5-metoxi-lH-pirrolo [2,3 —b] piridina. 1HRMN (DMS0-d6) 12,32 (s, 1H) , 11,00 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 8,33 (s, 1H) , 3,93 (s, 3H) , 3,24 (m, 2H) , 3,15 (m, 2H), 2,29 (m, 2H); MS (m/z) 308 (Μ + H). A Figura 9, que se segue, descreve a sintese do Exemplo 181 (composto 8x).

Exemplo 181 Preparação de 8x

155

Passo 1. A uma solução de 7-azaindolo (32,0 g, 271mmol) em 1,2-dimetoxietano (500 mL) foi adicionado ácido 3-cloroperoxibenzóico (93,5g de 70% de grau de tecnologia, 379mmol). Depois de ser agitada durante duas horas à temperatura ambiente, o precipitado resultante foi recolhido por filtração por sucção para um funil de vidro sinterizado, lavado com éter (3 x 100 mL) e seco ao ar para dar 50,7 g, tal como o sal de 3-clorobenzoato. O sal foi dissolvido em água (400 ml) , foi adicionado carbonato de potássio aquoso saturado para pH 9 (~ 50 mL) e a solução homogénea foi arrefecida a 5°C durante 18-24 horas. O precipitado foi recolhido para dar 20,3 g como um sólido branco, MS (m/z) 135 (Μ + H).

Passo 2. Uma mistura de lH-pirrolo [2,3-b] piridin-7-óxido (passo 1) (10,0 g, 74.5mmol) em oxicloreto de fósforo (50 mL) foi aquecida até ao refluxo. Após 12 h, o excesso de oxicloreto de fósforo foi evaporado sob pressão reduzida e o residuo foi agitado em bicarbonato de sódio saturado aquoso (250 mL) durante uma hora. O sólido foi recolhido por filtração por sucção, lavado com água até à neutralidade e seco ao ar para se obter 9,8 g de 4-choro-7-azaindole como um sólido esbranquiçado MS (m/z) 153/155 (M + H) .

Passo 3. Uma solução de hidróxido de sódio (llg) em metanol (250 mL) foi agitada com 4-cloro-lH-pirrolo [2,3-b] piridina (passo 2) (12,2 g, 80 mmol) a 140°C num reator selado durante 16 h. Depois de ser arrefecida até à temperatura ambiente, a mistura foi concentrada e o residuo foi arrastada em água (100 mL) durante uma hora. O sólido foi recolhido por filtração com sucção e lavado com água até à neutralidade. Depois de ser seco até ao peso 156 constante, 6,5 g de 4-metoxi-7-azaindole foi obtido como um sólido castanho-amarelado, MS (m/z) 149 (Μ + H).

Passo 4. A uma mistura de 4-metoxi-7-azaindole (6,4 g, 43,2 mmol) em diclorometano (200 mL) e hidróxido de sódio aquoso a 50% (200 mL) foi adicionado cloreto de benzenossulfonilo (6, 1 ml, 47,5 mmo1) e brometo de tetrabutilamónio (1,4 g, 4,3 mmol). A mistura foi agitada vigorosamente à temperatura ambiente durante 18 horas. A fase orgânica foi lavada com água e salmoura, seco (MgSCh) , filtrado e concentrado. O produto em bruto foi recristalizado a partir de acetato de etilo e hexanos para dar 9,2 g de 1-benzenossulfonil-4-metoxi-7-azaindole como um sólido amarelo. XH NMR (DMSO-d6) δ 8,30 (d, J = 5 Hz, ao \—1 00 Ή \—1 (d, 1 Hz, 1H), 7,58 (m, 2H) , 7,47 (m, 2H) , 6, 67 (d, 4 Hz, 1H) , 6,61 (d, 4 Hz, 1H) , 3, 94 (s, 3H). MS (m/z) 289 (Μ + H) .

Passo 5. A uma solução de l-benzenossulfonil-4-metoxi-lH-pirrolo [2,3 —b] piridina (1,0 g, 3,47 mmol) em THF (50 mL), arrefecida num banho de gelo seco-acetona, foi adicionado n-BuLi (2,1 M em hexanos, 2,0 mL) . A mistura foi agitada durante 20 minutos, aguecida a 0°C e agitada durante um adicional de 30 minutos, em seguida arrefecida até -78°C. Uma solução de iodo (1,06 g, 4,16 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada gota a gota durante 5 minutos e a mistura foi aquecida a 0°C e agitada durante uma hora. Foi adicionada água (10 mL) seguida por 10% de Na2S2C>3 aquoso (10 mL) e agitada durante 5 minutos. 0 acetato de etilo (50 mL) foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com água, solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, seco (MgS04) , filtrado e concentrado para proporcionar 1,0 g de 1-benzenossulfonil-2-iodo-4-metoxi- 7-azaindole na forma de 157 um sólido amarelo, o qual foi levado avante sem purificação adicional. MS m/z 415.

Passo 6. Uma mistura de l-benzenossulfonil-2-iodo-4-metoxi-lH-pirrolo [2,3-b] piridina (1,1 g, 2,65 mmol), tributil-ciclopent-l-enil-estanano (1,9 g, 5,31 mmol), e cloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II) cloreto de (93 mg) em DMF (10 mL) foi aquecida num tubo selado a 90°C durante sete horas. A mistura foi lavada com hexanos (2 x 10 mL) e a fase de DMF foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (gradiente de eluição de 10-35% de EtOAc/ hexanos) para dar 0,61 g de 1-benzenossulfonil-2-ciclopent-l-enil-4-metoxi-7-azaindole como um sólido amarelo MS (m/z) 355 (Μ + H).

Passo 7. Uma solução de 1-benzenossulfonil-2-ciclopent-l-enil-4-metoxi-lH-pirrolo [2,3-b] piridina (500 mg, 1,41 mmol) em etanol (50 mL) foi tratada com 10% de sódio aquoso solução de hidróxido de (5 mL) e aquecida ao refluxo durante uma hora. O etanol foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo aquoso foi diluído com água (10 ml) . A lama resultante foi filtrada, lavada com água até pH 7 e seca até ao peso constante para se obterem 263 mg; MS (m/z) 215 (Μ + H).

Passo 8. Uma mistura de 2-ciclopent-l-enil-4-metoxi-lH-pirrolo [2,3-b] piridina (1,8 g, 8,4 mmol), maleimida (8,15 g, 84 mmol), e YbBr3 (350 mg; 0,84 mmol) em tolueno foi aquecida ao refluxo durante 29 horas e concentrada. O resíduo foi agitado em água (75 mL) durante 30 minutos, filtrado, lavado com água (3 x 20 mL) , hexanos e, 158 finalmente, éter antes de ser seco até ao peso constante para dar 2,4 g do tetrahidrocarbazole imida como um sólido cinzento; MS (m/z) 312 (Μ + H).

Passo 9. Exemplo 181 (composto 8x): A uma solução de imida do passo 8 (1,3 g, 4,2 mmol) em ácido acético glacial (45 mL) foi adicionado DDQ (2,0 g, 8,8 mmol) . A mistura foi aquecida a 70°C durante 22 horas, um adicional de 0,50 g de DDQ foi adicionado e a mistura foi agitada durante mais 18 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o residuo foi agitado durante uma hora em 10% de MeOH/EtOAc (50 mL) , filtrado, lavado com 10% de MeOH/EtOAc (50 mL) e EtOAc antes de ser seco até ao peso constante para dar 1,1 g de 8x. MS m/e 308; NMR (DMSO-d6) δ 12,4 (s, 1H), 10,7 (s, 1H) , 8,43 (d, J = 4 Hz, 1H) , 6,97 (d, J = 4 Hz, 1H) , 4,08 (s, 3H) , 3,27 (t, J = 7 Hz, 2H) , 3,17 (t, J = 7 Hz, 2H), 2,27 (m, 2H); MS (m/z) 308 (Μ + H).

Exemplo 182 Preparação de 8y

Este composto foi preparado tal como descrito para 8x. A partir do tetrahidrocarbazole imida (75 mg, 0,23 mmol) e DDQ (162 mg, 0,71 mmol) em ácido acético glacial, a 70°C durante 48 horas, foi obtido 43 mg de 8y como um sólido castanho claro. (DMSO-de) δ 12,5 (s, 1H) , 10,8 (s, 1H) ,

8,44 (d, J = 4 Hz, 1H) , 6,90 (d, J = 4 Hz, 1H) , 4,35 (q, J 159 = 7Ηζ, 2Η) , 3,35 (m, 2Η) , 3,20 (m, 2Η) , 2,35 (m, 2Η) , 1,55 (t, J = 7 Hz, 3H). MS m/e 322.

Exemplo 183 Preparação de 8z:

Passo 1: A uma solução de 4-cloro-7-azaindole (304 mg, 2,0 mmol) em THF (10 mL) , arrefecida até -78°C foi adicionada uma solução de 1,5 M n-BuLi em hexano (1,5 mL, 2,2 mmol). A mistura foi agitada durante 20 minutos, purgada com um fluxo de CO2 durante 20 minutos e agitada durante mais 20 minutos. A mistura foi reduzida para cerca de metade do seu volume sob vácuo para remover o residual de CO2, foi adicionado THF (5 mL) e a mistura foi arrefecida a -78°C. Uma solução 1,5 M de t-BuLi em pentano (1,5 mL, 2,2 mmol) foi adicionada, gota a gota e a mistura foi agitada durante 45 minutos. Uma solução de ciclopentanona (195 uL, 2,2 mmol) em THF (1 mL) foi adicionada e a mistura foi agitada durante 45 minutos e vertida em 2N de HC1 (15 mL) . A fase aquosa foi extraida com éter (2 x 10 mL), a fase aquosa foi ajustada a pH 9 (NaOH 4N) e extraida com acetato de etilo (2 x 25 mL) . A fase de acetato de etilo combinada foi lavada com salmoura, seca (MgS04) , filtrada e concentrada. TLC preparativa (50% EtOAc/hexanos) originou 36 mg do álcool terciário como um sólido branco. Este foi aquecido com ácido acético glacial a 100°C durante 1,5 horas e concentrado para se obter 32 mg de 4-cloro-2-ciclopent-l- 160 enil-lH-pirrolo [2,3-b] piridina como um sólido branco; MS m/e 219; ΧΗ NMR (CDC13) δ 8,10 (d, J = 5 Hz, 1H) , 7,10 (d, J = 5 Hz, 1H) , 6,45 (s, 1H) , 6,21 (s, 1H) , 2,78 (t, J = 7 Hz, 2H) , 2,62 (t, J = 7 Hz, 2H) , 2,10 (m, 2H) .

Passo 2: A uma solução de 4-cloro-2-ciclopent-l-enil-lH-pirrolo [2,3-b] piridina (passo 1) (20 mg, 0,09 mmol) em cumeno foi adicionado 88 mg (0,9 mmol) de maleimida e 8 mg de YbBr3. A mistura foi aquecida a refluxo durante 48 horas, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida, e o residuo foi agitado em água, filtrado, lavado com água e seco para dar 15 mg do tetrahidocarbazole; MS m/e 316.

Passo 3. Ao tetrahidrocarazole do passo 2 (15 mg, 0,05 mmol) em ácido acético glacial foi adicionado 24 mg (0,1 mmol) de DDQ. A mistura foi aquecida a 90°C durante 48 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o residuo foi lavado com 20% de MeOH/EtOAc (3x5 mL) e seco para dar 10 mg de 8z como um sólido castanho claro. 1H NMR (DMSO-d6) δ 12,9 (s, 1H) , 10,9 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) , 7,40 (s, 1H); MS m/e 310 (M-H)+.

Exemplo 184 Preparação de 8aa

Este composto foi preparado tal como descrito para 8x. A partir de 7-(2-metoxi-etoxi)-tetra-hidrocarbazol-4, 6-diona (100 mg, 0,28 mmol) e DDQ (134 mg, 0,59 mmol), foi obtido 161 33 mg de 8aa como um sólido acastanhado. (DMSO-dg) δ 12,5 (s, 1H), 10,8 (s, 1H), 8,44 (d, J = 4 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 4 Hz, 1H) , 4,45 (m, 2H) ; 4,05 (m, 2H) , 3,35 (s, 3H) , 3,25 (m, 2H), 2,35 (m, 2H), 2,05 (m, 2H). MS (m/e) 352.

Exemplo 185 Preparação de 8ab

H3C

Este composto foi preparado tal como descrito para 8x. A partir de 7-(2-Etoxi-etoxi)-tetra-hidrocarbazol-4,6-diona (150 mg, 0,41 mmol) e DDQ (319 mg, 1,40 mmol) , foi obtido 21 mg de 8ab como um sólido acastanhado. (DMSO-dg) δ 12,7 (s, 1H), 10,8 (s, 1H), 8,40 (d, J = 4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 4 Hz, 1H) , 4,45 (m, 2H) ; 3,95 (m, 2H) , 3,60 (q, J = 7 Hz, 2H) , 3,25 (m, 2H) , 2,25 (m, 2H) , 2,05 (m, 2H) , 1,10 (t, J = 7 Hz, 3H). MS m/e 366.

Exemplo 186 Preparação de 8ac

H

Este composto foi preparado utilizando o mesmo procedimento geral como descrito para la a partir de 4-dimetilamino-7- 162 azaindolo. Um frasco de 25 ml de fundo redondo, contendo uma barra de agitação magnética, equipado com um condensador de refluxo e uma torneira de três vias conectada a um balão de árgon, foi carregado com (2- ciclopent-l-enil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-4-il)-dimetilamina (12 mg, 0,05 mmol) seguido de tolueno (2 mL), maleimida (157 mg, 0,79 mmol) e de itérbio (III), brometo de (19 mg, 0,04 mmol). A mistura de reação foi submetida a refluxo durante 1 hora e evaporou-se o tolueno sob vácuo. O material em bruto foi triturado com metanol (10 mL), filtrado e lavado com metanol. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de gel de silica para se obter o tetrahidrocarbazole (15 mg, 88% de rendimento) . Um balão redondo de 25 mL de fundo, seco em estufa, contendo uma barra de agitação magnética, foi carregado com 7-dimetilamino-l, 2,3,3 a,3b,6a,11,11 b-octa-hidro-5,10,11-triaza-benzo [a] trindene-4,6-diona (15 mg, 0,04 mmol) seguido por acetonitrilo (4 ml). Foi adicionado DDQ (35 mg, 0,15 mmol) a 15°C e em seguida agitado à temperatura ambiente durante 1 hora e em refluxo durante 6 h. 0 acetonitrilo foi evaporado sob vácuo e dissolvido em acetato de etilo, em seguida lavado com bicarbonato de sódio saturado, salmoura, seco (MgSCg) e concentrado para dar um material em bruto. 0 material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel para dar 8ac (2,3 mg, 15% de rendimento). MS (m/z): 321 (M +1).

Exemplo 187 Preparação de 14c 163 Η

Ο Composto 14c foi preparado utilizando o mesmo procedimento geral como descrito para la e 2ao usando a adição de 4-triisopropilsililoxiindol ciclopentanona ao álcool, desidratação para o dieno, reação de Diels-Alder com maleimida e oxidação ao carbazol com DDQ. Para o TIPS de carbazole protegido (20 mg, 0,044 mmol) em THF anidro (1,5 mL) foi adicionado 1 M de TBAF (0,1 mL) a 10°C e agitado à temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente foi evaporado, o residuo diluido com água (2 mL) e recolhido um sólido castanho-amarelado (11 mg, 83% de rendimento), NMR (DMSO-d6) δ 2,18-2,29 (m, 2H) , 3,14- 3,26 (m, 2H) , 6, 58-6, 60 (d, 1H) , 7,00-7,01 (d, 1H) , 7,35 (t, 1H) , 12,13 (s, 3H) , MS (m / z) = 291 (M ") .

Exemplo 188 Preparação de 14d

Passo 1: Foi preparado 2-Ciclopent-l-enil-lH-indol-4-ol a partir de 4-triisopropilsililoxi-lH-indol e ciclopentanona como descrito para 14c. 164

Passo 1: A 3,1 g (8,29 mmol) de álcool intermediário foi adicionado 100 ml de AcOH e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reação foi então concentrada, dividida entre EtOAc e H20, lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada sob vácuo para se obter 3 g de 2-ciclopent-l-enil-4-triisopropilsililoxi-lH-indol. Para 3,1 g (8,76 mmol) do intermediário sililo em 20 ml de THF a 0°C foi adicionado 10 mL de TBAF (1 M THF). Após 30 minutos a 0°C, a reação foi concentrada, dividida entre EtOAc e H20, a camada de EtOAc foi lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) e concentrada. O produto foi purificado por cromatografia em coluna (CH2C12) para se obter 2 g de 2- ciclopent-l-enil-lH-indol-4-ol sob a forma de um sólido branco. Este material foi agitado numa mistura de hexano-ciclo-hexano (1:1) durante a noite, recolhido e seco.

Passo 2: A 100 mg (0,503 mmol) do intermediário 2-ciclopent-l-enil-lH-indol-4-ol em 2 mL de CH3CN foi adicionado 819 mg (2.51mmol, 5 eq) de carbonato de césio, 94 mg (0,503 mmol) de 4-(2-cloroetil)-morfolina e uma quantidade catalítica de Nal. A mistura de reação foi aquecida a 50°C durante 3 h, dividida entre EtOAc e H20, lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada sob vácuo para se obter 81 mg (52%) de 2-ciclopent- l-enil-4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-lH-indol.

Passo 3: A 81 mg (0,26 mmol) do dieno intermediário do passo 2 em 2 ml de AcOH adicionou-se 50 mg (0,519 mmol, 2 eq) de maleimida e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada, dividida entre EtOAc e H20. A camada de EtOAc foi lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e 165 concentrada sob vácuo para se obterem 64 mg do intermediário tetrahidrocarbazole como um óleo escuro (64%) .

Passo 4: A 64 mg (0,166 mmol) do intermediário imida do passo 3 em 2 mL de tolueno e 0,5 ml de AcOH adicionou-se 77 mg (0,34 mmol, 2.05eq) de DDQ a 0°C e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi depois concentrada, adicionou-se EtOAc e agitou-se com solução aquosa de ácido ascórbico durante 30 minutos. A solução foi extraida com EtOAc e a camada orgânica foi lavada com uma solução 2N de Na2C03, H20, solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada. O produto foi purificado por cromatografia em placa preparativa (5-10% de MeOH/CH2Cl2) . O produto foi recolhido e, em seguida, triturado com MeOH para dar 11 mg de 14d como um sólido amarelo (16%) . 1H NMR (DMSO-dg) δ 11,95 (s largo, 1H) , 10,65 (s largo, 1H) , 7,43 (t, J= 8,1 Hz, 1H), 7,13 (d, J= 8,1 Hz, 1H) , 6,78 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 4,30 (t, J = 6,3 Hz, 2H) , 4,08 (m, 2H) , 3,56 (m, 4H) , 3,30 (m, 2H) , 3,17 (m, 4H) , 2,96 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,27 (m, 2H); MS 406 (m/z) (M + H)+.

Os Exemplos 14e-14h foram preparados como descrito para 14d.

Exemplo 189 Preparação de 14e: 166 Η

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 14d. 1HNMR (DMSO-dg) δ 11,93 (s, 1H) , 10,67 (s, 1H) , 7,43 (t, J= 8,1 Hz, 1H) . 7,12 (d, J= 8,1

Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,26 (m largo, 2H), 3,36 (br m, 4H) , 3,17 (m largo, 2H) , 2,63 (br m, 4H) , 2,28 (m largo, 2H), 1,1 (br m, 6H); MS (m/z) 392 (M + H)+.

Exemplo 190 Preparação de 14f

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 14d: XH NMR (DMSO-de) δ 11,94 (s, 1H) , 10, 66 (s, 1H) , 7,42 (t, J = 8, 1 Hz, 1H) , 7,13 (d, J = 8, Hz, 1H) , 6, 77 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 4,31 (t, J = 5,3 Hz 2H) , 3,92 (t, J = 5,3 Hz, 2H) , 3,29 (br m , 5H), 3,17 (t, = 7 ,5 Hz, 2H) , 2,28 (m, 2H); MS (m/z) 349 (M-H).

Exemplo 191 Preparação de 14g: 167 ο Η H3C'

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 14d. 1HNMR (DMSO-de) δ 11,90 (s, 1H) , 10,63 (s, 1H) , 7,41 (t, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 6,74 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 4,24 (m, 2H) , 4,08 (m, 2H) , 3,17 (m, 2H) , 2,28 (m, 2H) , 1,50 (t, J= 6,8 Hz, 3H) ; MS ((m/z)) 319 (Μ - H).

Exemplo 192 Preparação de 14h:

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como descrito para 14d. 1HNMR (DMSO-d6) δ 11,89 (s, 1H) , O \—1 61 (s, 1H) , 7,41 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7, 07 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 6,76 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 4,86 (m, 1H) , 3,30 (m, 2H) , 3,15 (m, 2H) , 2 ,28 (m, 2H), 1,43 (d, J = 6,1 Hz, 6H) ; MS (m/z) 333 (Μ - H) .

Exemplo 193 Preparação de 141: 168

Passo 1: A 500 mg (1,41 mmol) de 2-ciclopent-l-enil-4-triisopropilsililoxi-lH-indol (14d do passo 1) em 5 mL AcCN foi adicionado 255 mg (1,68 mmol, 1,2 eq) de CsF e 479 uL (4,23 mmol, 3 eq) de éter 2-bromoetiletil. A reação foi aquecida a 60°C durante a noite, em seguida arrefecida até à temperatura ambiente, diluida com CHC1 2 e filtrada através de celite e concentrada. 0 resíduo foi partilhado entre éter e H2O, a camada de éter foi então lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgSCg) , e concentrada sob vácuo para se obter 282 mg (74%) de 2-ciclopent-l-enil-4 -(2-etoxi-etoxi)-lH-indol.

Passo 2: Para o dieno intermediário do passo 1 e 2 eq de maleimida em 2 mL de AcOH foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada, dividida entre EtOAc e H20. A camada de EtOAc foi lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgSCg) , e concentrada sob vácuo para se obter o tetrahidrocarbazole.

Passo 3: A 323 mg (0, 878 mmol) de imida intermediáriA do passo 2 em 20 ml de AcOH foi adicionado 432 mg (1,76 mmol, 2 eq) de cloranilo e a reação foi aquecida a 95°C durante 1,5 h. A mistura de reação foi, em seguida, concentrada, dissolvida em EtOAc e agitada com solução aquosa de ácido ascórbico durante 30 minutos e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com uma solução 2N de Na2C03, H20, solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada. O 169 produto foi purificado por cromatografia em gel de silica (5-10% de MeOH/CH2Cl2) seguido por trituração do produto com éter para dar 14i como um sólido amarelo; 1H NMR (DMSO-

d6) δ 11, 92 (s, 1H) , 1 0, 65 (s, 1H) , 7,42 (t, J = 8, 1 Hz 1H) , 7,13 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 6,1 '8 (d, J = 8,1 Hz, 1H) 4,29 (m, 2H) , 3 , 96 (m, 2H) , 3 , 53 (m, 2H) , 3,17 (m, 4H) 2,28 (m, 2H), 1, 10 (t, J = 7,1 Hz, 3H); MS 363 ((m/z) ) (M H) .

Exemplo 194 Preparação 14j

Este composto foi preparado pelo mesmo procedimento geral como em 14i. 1HNMR (DMSO-d6) δ 11, 92 (s, 1H) , . 10 ,65 (s, 1H), 7, 42 (t, = 8 ,1 Hz, 1H) , 7, 13 (d, J = = 7,É 3 Hz , 1H) , 6,77 (d, J = 8, Hz, 1H), 4 ,26 (m, 2H) , 3 , 95 (m, 2H) , , 3, 65 (m, 1H), 3, 28 (m 2H) , 3,17 (m, 2H) , 2,26 (m, 2H) , 1, 09 (d, J = 3,8 Hz , 6H) MS ((m/z)) 377 (M - H) .

Exemplo 195 Preparação de 14k

170 (0,845 mmol) a 300 mg de 2-ciclopent-l-enil-4-triisopropilsililoxi-lH-indole (14d Passo 1) em 3 mL de AcCN foi adicionado 154 mg (1,01 mmol, 1,2 eq) de CsF e 282 uL: Etapa 1 (2,54 mmol, 3 eq) , bromoacetato de etilo e a reacção foi agitada a 50 0 C durante a noite. A reacção foi diluída com CH 2 Cl 2 e filtrou-se através de celite. A camada de CH 2 Cl 2 foi lavada com uma solução 2N de Na 2 CO 3, h2o, solução aquosa de NaCl, secou-se (Na 2 SO 4>, e concentrada in vacúolo para originar 239 mg (99%) de (2-ciclopent- l-enil-lH-indol-4-iloxi)-acético, éster etílico, como um óleo escuro.

Passo 2: A 216 mg (0,758 mmol) do éster do passo 1 em 5 mL de THF a 0°C foi adicionado 455 uL (0,91 mmol, 1,2 eq) de uma solução de LiBH4 (1 M THF) e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi temperada com IN DE HC1, extraída com EtOAc, lavada com H20, solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada in vácuo para se obter 167 mg (91%) de 2-(2-ciclopent-l-enil-lH-indol-4-iloxi)-etanol.

Passo 3: O dieno intermediário do passo 2 e 2 eq de maleimida em 2 mL de AcOH foram agitados à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada, dividida entre EtOAc e H20. A camada de EtOAc foi lavada com solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada sob vácuo para se obter o tetrahidrocarbazole.

Passo 4: A 125 mg (0,368 mmol) da imida do passo 3 em 2 mL de MeOH a 0°C foi adicionado 171 mg (0,754 mmol, 2.05eq) de DDQ. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, depois concentrada, agitada com MeOH gelado, 171 filtrada e seca para se obter 29 mg (23%) 14k. 2H NMR (DMSO-de) 12,15 (s, 1H) , 10,77 (s, 1H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,15 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 6,76 (d, J = 8,1 Hz, 1Η) , 4,20 (m, 2H) , 3,93 (m, 2H) , 3,51 (m largo, 1H) , 3,28 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 2,28 (m, 2H); MS (m/z) 335 (Μ - H).

Exemplo 196 Preparação de 141

H

MeO

H

Passo 1: A 4,5-dimetoxiindole (241 mg, 1,36 mmol) em 5 mL de THF a 0°C foi adicionado 82 mg (2,04 mmol, 1,5 eq) de hidreto de sódio, seguido por cloreto de benzenossulfonilo (260 ul, 2,04 mmol; 1,5 eq). A reação foi aquecida até à temperatura ambiente ao longo de 5 h, em seguida, temperada com H20 e concentrada. O residuo foi dissolvido em CH2C12 e extraido com NaHCC>3, H20, NaCl aquoso, seco (Na2SC>4) , e concentrado. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de silica (7/3 hexano/EtOAc) para dar 369 mg de 1-benzenossulfonil-4,5-dimetoxi-lH-indole (86%).

Passo 2: A 541 mg (1,71 mmol) do indol protegido do passo 1 em 20 mL de THF seco a -20°C foi adicionado 269 uL (1,8 mmol, 1,05 eq) de TMEDA, em seguida, LDA (1,1 mL, 2,22 mmol, 1,3 eq) gota a gota. A reação foi agitada durante 45 minutos e iodo (879 mg, 3,42 mmol, 2 eq) em 4 ml de THF foi adicionado lentamente, e agitado durante 45 minutos adicionais a -20°C. A reação foi então temperada com H20, concentrada e repartida entre EtOAc e solução de 2N de 172

Na2C03. A camada de EtOAc foi lavada com H20, NaCl aquoso, seca (MgS04) , e concentrada sob vácuo para se obter 750 mg de 1-benzenossulfonil-2-iodo-4,5-dimetoxi-lH-indole.

Passo 3: A 539 mg (1,22 mmol) do intermediário iodo a partir do passo 2 em 5 mL de DMF seca foi adicionado 43 mg (0,061 mmol, 5 mol%) de PdCl2 (PPh3)2, seguido por 870 mg (2,44 mmol; 2eq) de tributilstannilciclopenteno. A reação foi aquecida a 90°C durante 4 h, concentrada, dissolvida em EtOAc e filtrada através de celite. A camada de EtOAc foi lavada com H20, solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada. 0 produto foi purificado por cromatografia em gel de silica (5-15% de EtOAc/hexano) para se obter 302 mg de 1-benzenossulfonil-2-ciclopent-l-enil-4,5-dimetoxi-lH-indole ( 65%) .

Passo 4: A 291 mg (0,76 mmol) da fenilsulf onamida intermediário do passo 3 em 50 mL de EtOH foram adicionados 5 mL de solução de NaOH a 10%. A reação foi aquecida a refluxo durante a noite e depois concentrada. O resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com solução 2N de Na2C03, H20, solução aquosa de NaCl, seca (MgS04) , e concentrada sob vácuo para se obter 180 mg de 2-ciclopent-l-enil-4,5 -dimetoxi-lH-indole (97%).

Passo 5: A reação de Diels-Alder, utilizando 2-ciclopent-l-enil-4,5-dimetoxi-lH-indole (passo 4) e maleimida como descrito para 14k. A purificação utilizando cromatografia em gel de sílica (4% de MeOH /CH2CI2) originou 46 mg do tetrahidrocarazole imida (18%). 173

Passo 6: 46 mg (0,135 mmol) do intermediário do passo 5 em 0,5 ml de AcOH adicionou-se 61 mg (0,27 mmol, 2 eq) de DDQ e a reação foi aquecida a 70°C durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada, agitada com MeOH durante a noite, seca, e recolhida para dar 8 mg de 141 (18%). XH NMR (DMSO- d6) δ 13,5 (s largo, 1H) , 10,8 (s largo, 1H) , 6,01 (m largo, 2H) , 3,86 (s largo, 6H) , 3,19 (br m, 4H) , 2,22 (m largo, 2H); MS (m/z) 335 (Μ - H).

Exemplo 197 Preparação de 14m

A uma solução do exemplo 14b (500 mg, 1,63 mmol) em DMF (40 mL) , arrefecida num banho de água gelada foi adicionado gota a gota, uma solução de perbrometo de hidrobrometo piridinio (522mg, 1,63 mmol) em DMF (10 mL) ao longo de 5 -10 minutos. A mistura foi agitada enquanto foi deixada a aquecer lentamente até à temperatura ambiente ao longo de duas horas e, em seguida, adicionada a um recipiente de agitação de água (100 ml) . O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco até ao peso constante para se obter 600 mg de 14m como um sólido amarelo pálido; NMR (DMSO-d6) δ 11,80 (s, 1H) , 10,70 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7 Hz, 1H) , 6,75 (d, J = 7 Hz, 1H) , 4,00 (s, 3H) , 3,30 (m, 4H) , 2,25 (m, 2H). MS m/e 385/386. 174

Exemplo 198 Preparação de 14n

A uma solução do exemplo 14b (500 mg, 1,63 mmol) em diclorometano (70 mL) e metanol (30 mL) foi adicionado carbonato de cálcio (500 mg) seguido de cloreto de cloreto de benziltrimetilamónio-iodónio (625 mg, 1.80mmol), com agitação. Depois de 22 horas foi adicionado um adicional de 50 mg de cloreto de cloreto de iodónio de benziltrimetilamónio e a mistura foi agitada durante seis horas antes de ser lavada com tiossulfato de sódio aquoso a 10% (50 mL) . A fase orgânica foi concentrada e o resíduo foi agitado em água (100 ml), acidificado com 1 N de ácido clorídrico (50 mL), filtrado e lavado com água até à neutralidade e seco até ao peso constante para se obter 770 mg de 14n como um sólido amarelo; XH NMR (DMSO-d6) δ 11,40 (s, 1H) , 10,70 (s, 1H) , 7,80 (d, J = 7 Hz, 1H) , 6,65 (d, J = 7 Hz, 1H) , 4,00 (s, 3H) , 3,30 (m, 4H) , 2,25 (m, 2H) ; MS m/e 433.

Exemplo 199 Preparação de 14o

H

175

Uma mistura de 14n (250 mg, 0,58 mmol) e cianeto de cobre (I) (266 mg, 1,7 mmol) em HMPA (4 mL) foi agitada enquanto era aquecida a 110°C durante 24 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, adicionado, gota a gota, 3N de ácido clorídrico (25 mL) e filtrada. O produto bruto foi depois purificado por cromatografia preparativa em camada fina em gel de sílica (5% de MeOH/DCM) para dar 185 mg de um semissólido castanho o qual foi transformado em pasta em éter/MeOH (1/1, 5 mL), filtrado, lavado com éter/MeOH (1/1, 5 mL) e seco até ao peso constante para se obterem 68 mg de 14o como um sólido amarelo mostarda; NMR (DMS0-d6) δ 12,65 (s, 1H) , 10,80 (s, 1H) , 7,95 (d, J = 8 Hz, 1H) , 6,95 (d, J = 8 Hz, 1H) , 4,05 (s, 3H) , 3,30 (m, 4H), 2,25 (m, 2H). MS (m/e) 332.

Preparação de 15n-15p 15n-15p foram preparados pelo procedimento geral descrito para 15a-15m utilizando o intermediário carbonato.

Exemplo 200a Preparação de 15n

Este composto foi preparado pelo procedimento geral descrito para 15a-15m utilizando o intermediário coarbonate. Preparado a partir do intermediário 3 —(4 — nitrofenilcarbonato) (40 mg, 0,087 mmol) e 3-2'-amino-etil-1 ,2,4-triazol dicloridrato (19 mg, 0,17 mmol) em TFA (2 176 mL) ; 2H NMR (DMSO-d6) δ 2,28-2,31 (m, 2H) , 3,14-3,24 (m, 2H) , 3, 51-3,52 (m , 2H), 4,17- 4, 20 (m, 2H) / 4,33-4 ,36 (m, 2H ) , 7,24 -7,26 (d, 1H), 7 ,54-7, 56 (d, 1H) , 7, 90 (m, 1H) , 8, 43 (s, 1H) , 8,46 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H) , io, 96 ( s, 1H) , 11, 97 (s, 1H) ; MS (m/z) = 429 (M-H) •

Exemplo 200b Preparação de 15o

Este composto foi preparado pelo procedimento geral descrito para 15a-15m utilizando o intermediário coarbonate. Preparado a partir do intermediário 3 —(4 — nitrofenilcarbonato) (40 mg, 0,087 mmol) e 1,4,7-trioxa-10-azaciclodecano (30 mg, 0,17 mmol); 1H NMR (DMS0-d6) 2,28- 2,32 δ (m, 2H), 3,17-3,18 (m, 2H), 3,87-3,89 (m, 2H), 7,26-7,29 (d, 1H) , 7,54-7,57 (d, 1H), 8,47-8,48 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 11,97 (s, 1H); MS (m/z) = 492 (M-H).

Exemplo 200c Preparação de 15p

Este composto foi preparado pelo procedimento geral descrito para 15a-15m utilizando o intermediário 177 coarbonato. Preparado a partir do intermediário 3 —(4 — nitrofenilcarbonato) (35 mg, 0,076 mmol) e piperidina (13 mg, 0,15 mmol) ; NMR (DMSO-de) δ 2,28-2,32 (m, 2H) 7,28 (d, 1H) , 7,54-7,56 (d, 1H), 8,45-8,46 (d, 1H) (d, 1H), 11, 97 (s, 1H); MS (m/z) = 401 (M-H) •

Exemplo 201 Preparação de 16a

A uma suspensão de 14b (15 mg, 0,049 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado paraformaldeído (42 mg, 0,05 mL) , morfolina (160 mg, 1,9 mmol) e aquecida a 70°C durante 18 horas. A mistura foi evaporada. O resíduo foi triturado com hexano, em seguida dissolvido em CH2C12, filtrado e evaporado. 0 resíduo foi triturado com Et20 e 16a e recolhido como um sólido amarei o (5 mg, 20%) ; XNMR (DMSO-de) 7,52 (t, 1H), 7,39 (d , 1H), 6, 82 (d, 1H), 5, 0 (s, 2H) , 4,46 (s, 2H) , 3,98 (s, 3H) , 3,56 (s, 6H) , 3,49 (s , 4H) , 2,50 (s, 6H) , 2,49 (s, CM 45 (m, 2H) ; MS m/z 505 (M + H) . 178

Exemplo 202

Preparação de 16b e 16c

A uma suspensão de 14b (50 mg, 0,16 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado paraformaldeido (73 mg, 0,81 mmol), dietilamina (84 mL, 0,81 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante 1 dia. A reação foi evaporada e o residuo triturado com hexano e < evaporado para se obter dois produtos , como um óleo, (proporção 6- -1, 16b:16c). 1H-NMR (DMSO-de) 0, 98 (t, 3H), 1,11 (t, 3H), 2,27 (m, 2H), 2,53 (m, 8H) , 2,57 (m, 15H), 3,17 (t, 2H) , 3,50 (m, 1H) , 3,97 (s, 3H), 4, 14 (d , 2H), 4,71 (d, 2H) , 6, 82 (t, 2H) , 6,75 (d, 2H) , 7,13 (d, 2H) , 7,33 (m, 1H) , 7,46 (t, 3H), 7,52 (m, 1H) , 11, 95 (s, 1H) 0,16 b : MS m/z 392 . 16c MS m/z 476.

Exemplo 203 Preparação de 16d

179 A uma suspensão de 14b (50 mg, 0,16 mmol) em etanol (10 mL) foi adicionado paraformaldeido (72 mg, 0,8 mmol), morfolina (100 g, 1,1 mol) e aquecida a 50°C durante 5 horas. A reação foi evaporada, adicionada água (15 mL) e recolhido um sólido amarelo (59 mg) . 1H NMR (DMSO-de) 11,98 (s, 1H) , 7,45 (t, 1H) , 7,13 (d, 1H) , 6,75 (d, 1H) , 4,44 (s, 2H) , 3,97 (s, 3H) , 3,56 (s, 4H) , 3,18 (t, 2H) , 2,29 (t, 2H) . MS m/z 406 (Μ + H).

Exemplo 204 Preparação de 16e

r

A uma suspensão de 14b (10,0 g, 30 mmol) e N- metilpiperazina (12,4 g, 124 mmol) em etanol (950 mL) adicionou-se paraformaldeido (5,60 g, 62,4 mmol) em 0,5 horas e agitou-se 24 h. A pasta foi evaporada até à secura. Ao resíduo foi adicionado hexano (500 ml), sonicado por 15 min., agitado por 1,5 h. e arrefecido a 0°C durante 15 min. Um sólido amarelo foi recolhido e lavado com hexano frio. Este produto foi dissolvido em THF quente (250 ml) e filtrado. 0 filtrado foi adicionado gota a gota a hexano (3 L) , agitado durante 15 min. e 16e e o precipitado recolhido e lavado com hexano (12,0 g, 96% de rendimento). NMR (DMSO-dô) 2,12 (s, 3H) , 2,35 (m, 8H) , 180 2,53 (m, 4H) , 3,18 (m, 2H) , 4,44 (s, 3H) , 6,70 (d, 1H) , 7,10 (d, 1H), 7,40 (t, 1H), 11,96 (s, 1H). MS m/z 419 (M + H) .

Exemplo 205 Preparação de 16f

Uma solução de 8x (90 mg, 0,3 mmol) em DMF (5 mL) foi tratada com N-metilpiperazina (30 uL, 0,3 mmol) e paraf ormaldeído (10 mg, 0,1 mmol) e aquecida a 60°C com agitação. Após 24 horas, a mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, foi adicionado 50% de ácido glucónico aquoso (p/p, 186mL, 0,6 mmol) com agitação seguido por água desionizada (25ml) . A mistura foi filtrada e seca por congelação para dar 234 mg de 16f como o sal de ácido di-glucónico; XH NMR (DMSO-d6) : 12,5 (largo, 2H) , 10,80 (s, 1H) , 8,35 (d, J = 5 Hz, 1H) , 6,85 (d, J = 5 Hz, 1H) , 4,40 (s, 2H) , 4,25 (m, 2H) , 4,10 (m, 4H) , 3,90 (s, 3H) , 3,60 (m, 4H) , 3,35 (m, 4H) , 3,25 (m, 2H) , 2,75 (m, 4H) , 2,70 (m, 4H), 2,35 (m, 2H), 2,20 (s, 3H); MS m/z 420 (Μ + H). 181

Exemplo 206 Preparação de 16g

A uma pasta de 14f (2,0 g, 5,7 mmol) e N-metilpiperazina (2,28 g, 22,8 mmol) em etanol (100 mL) a 55°C, foi adicionado paraformaldeído (1,02 g, 11,4 mmol) em 10 min e agitada durante 5 h. A lama foi arrefecida até 10°C e 16g recolhido como um sólido amarelo, lavado com etanol frio e seco (2 ,5 g, 94%) . NMR (DMS0-d6) 2, 12 (s, 3H) , 2, r 30 (m, 8H) , 2, 58 (s, 3H) , 3, 17 (t, 2H) , 3, 91 (t, 2H) , 4, 31 (t, 2H) , 4, 44 (s, 2H) , 6, 79 (d, 1H) , 7, 14 (d, 1H) , 7, 44 (t, 1H) , 11 , 98 (s, 1H) ; MS m/ z 463 (M + H) .

Exemplo 207 Preparação de 16h h3c

„CH, 182 A uma suspensão de 141 (2,4 g, 6,6 mmol) e N- metilpiperazina (2,64 g, 26,3 mol) em etanol (100 mL) a 55°C, foi adicionado paraformaldeido (1,18 g, 13,1 mmol) em 10 min e agitada durante 5 h. A suspensão foi concentrada e arrefecida a 10°C. O sólido amarelo foi recolhido, lavado com etanol frio e seco (2,77 g, 88% de rendimento). ΧΗ NMR (DMSO-dg) 1,10 (t, 3H) , 2,12 (s, 3H) , 2,29 (m, 6H) 2, 59 (m, 4H) , 3,17 (t, 2H) , 3,50 (m, 4H) , 3, 95 (t, 2H) 4, 30 (t, 2H) , 4,46 (s, 2H) , 6,79 (d, 1H) , 7,14 (d, 1H) 7, 44 (t, 1H), 11,98 (s, 1H); MS m/z 477 (M + H) .

Exemplo 208 Preparação de 161

HX 3rN-CH3

Este composto foi preparado utilizando o procedimento de 16h usando la, dimetilamina HC1, e paraformaldeido. 1H NMR (DMS0-d6) 2,35 (m, 2H) , 280 (s, 6H) , 3,2-3,4 (m, 4H) ; 4,9 (s, 3H) , 7,3 (d, 1H) , 76 (m, 1H) , 8,8 (d, 1H) , 12,1 (s, 1H); MS m/z 334 (Μ + H). 183

Tabela 18 (os exemplos de referência são indicados por *)

Exemplo N° PARP IC50 171* 81 38 172* 8m 17 173* 8n 6 174* 8o 4 175* 8p 20 176* 8q/8r 3 177* 8s 14 178* 8t/8u 6 179* 8vi/8vii 14 180* 8w 4 181* 8x 4 182* 8y 5 183* 8 z 9 184* 8aa 10 185* 8ab 11 187* 14c 176 188* 14d 441 189* 14e 526 190* 14 f 25 191* 14g 56 192* 14h 207 193* 14i 36 194* 14 j 70 195* 14k 83 196* 141 21 197* 14m 67 198* 14n 126 199* 14o 7 200a* 15n 38 200b* 15o 76 200c* 15p 82 184

Exemplo N° PARP IC50 201 16a 10 202 16b/l6c 13 203 16d 11 204 16e 14 208 16i 53 185

Claims (22)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula Illa: R2 I

   em que: cada um de A e B é, independentemente, C (= 0); E e F, em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados, formam: um grupo cicloalquilo C5 substituído ou não substituído; R1 é hidrogénio; R2 representa alquilo C1-C6 tendo pelo menos um substituinte J4; J é, independentemente, em cada ocorrência: J3- (J2) n- (J1) m- em que cada um de n e m é, independentemente, 0 ou 1; 1 cada J1 e J2 é, independentemente carbonilo, alquilcarbonilo Ci-C6, arilcarbonilo C6-C10, carboniloxi, amino, alquilamino C1-C6, dialquilamino Ci-C6, amido, alquilamido Ci-C6, dialquilamido Ci-C6, alcoxi C1-C6, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3 a C7, heterocicloalquilo, arilo C6-C10, ou um anel de 5 a 10 átomos heteroarilo; e hidroqénio, halo, hidroxi, ciano, NO2, carboxilo, alquilo C1-C6, ariloxicarbonilo C6-Cio, alquiloxicarbonilo C1-C20, um anel de 5 a 10 átomos de heteroarilo, ou heterocicloalquilo; e J4 é dimetilamino, dietilamino, 4-morfolin-4-il, ou 4-metilpiperazin-l-il; e X1 e X2, em conjunto com os átomos aos quais eles estão liqados, formam: um qrupo fenilo substituído ou não substituído, em que o referido grupo fenilo substituído tem pelo menos um substituinte de J; ou um grupo heteroarilo de anel de 5 a 10 átomos substituído ou não substituído em que o o referido grupo heteroarilo substituído tem pelo menos um substituinte J e em que o referido heteroarilo é piridina ou piridina-N-óxido, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
2. 2. Composto da Reivindicação 1, em que X1 e X2, em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam um 2 grupo fenilo com pelo menos um substituinte de J, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
3. 3. Composto da Reivindicação 2, em que J é alcoxi Ci-C6, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
4. 4. Composto da Reivindicação 1, em que J4 é 4-metilpiperazin-l-ilo, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
5. 5. Composto da Reivindicação 4, em que X1 e X2' em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, formam um grupo fenilo com pelo menos um substituinte de J, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
6. 6. Composto da Reivindicação 5 em que J é alcoxi Ci-C6, ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
7. 7. Composto da Reivindicação 1 selecionado a partir de:

   ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
8. 8. Composto da Reivindicação 1 selecionado a partir de: 3

   R2 R2I I

   ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
9. 9. Composto selecionado a partir de:

   ou um seu sal farmacologicamente aceitável. 4
10. 10. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 9 ou um seu sal farmacologicamente aceitável e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
11. 11. Composto da Reivindicação 1 ou um seu sal farmacologicamente aceitável para a inibição de atividade PARP, VEGFR2 ou MLK3.
12. 12. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento ou prevenção de uma doença neurodegenerativa.
13. 13. Composto da Reivindicação 12, ou um seu sal farmacologicamente aceitável, em que a referida doença neurodegenerativa é a doença de Parkinson, doença de Huntington ou doença de Alzheimer.
14. 14. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento de lesões traumáticas no sistema nervoso central ou prevenir a degradação neuronal associada a lesões traumáticas no sistema nervoso central.
15. 15. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento da isquemia cerebral, isquemia cardíaca, inflamação, choque endotóxico ou diabetes.
16. 16. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para suprimir a formação de vasos sanguíneos num mamífero.
17. 17. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento de doenças proliferativas celulares. 5
18. 18. Composto da Reivindicação 17, ou um seu sal farmacologicamente aceitável em que as referidas desordens proliferativas celulares estão relacionados com tumores sólidos, retinopatia diabética, síndromas neovasculares intraoculares, degeneração macular, artrite reumatóide, psoríase ou endometriose.
19. 19. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal farmacologicamente aceitável para o tratamento de cancro.
20. 20. Composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula geral:

    ou um seu sal farmacologicamente aceitável.
21. 21. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a reivindicação 20 ou um seu sal, farmacologicamente aceitável, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
22. 22. Composto da reivindicação 20, ou um seu sal, farmacologicamente aceitável, para o tratamento de cancro. 6