PT2032551E - Compostos de dihidropiran-2-ona antitumorais - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "COMPOSTOS DE DIHIDROPIRAN—2—ONA ANTITUMORAIS"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos compostos antitumorais, composições farmacêuticas que os contêm e sua utilização como agentes antitumorais.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Em 1990, Gunasekera SP et al. relataram o isolamento de um nova lactona polihidroxilada, (+)-discodermolida, a partir da esponja de águas profundas do Caribe Discodermia dissoluta (Gunasekera SP et al. J. Org. Chem. 1990, 55, 4912-4915 e J. Org. Chem. 1991, 56, 1346).

Este composto revelou-se um agente anti-mitótico potente (Hung DT et al. Chem. Biol. 1996, 3, 287-293 e ter Haar E et al. Biochemistry 1996, 35, 243-250), que possui um modo de acção similar ao agente anticancro clinicamente provado: paclitaxel (Schiff PB et al. Nature 1979, 277, 665-667). Ambos os produtos naturais detêm o ciclo celular na fase M, promovem a formação de microtúbulos, e têm efeitos inibidores similares contra carcinoma de cancro de mama (CI5o de 2,4 nM e 2,1 nM, respectivamente).

Por outro lado, alguns dipéptidos lineares inusuais que contêm uma funcionalidade N-acilo enamida foram isolados de uma mixobactéria que pertence ao género 2

Chondromyces (Kunze B et al. J. Antibiot. 1994, 47, 881-886 e Jansen R et al. J. Org. Chem. 1999, 1085-1089). Especificamente, estes compostos são crocacinas A, B, C e D e são um grupo de inibidores do transporte de electrões.

Crocacina A; R = Ma Crocacina B; R = H

OMftÔMe Me O Crocacina C

Crocacina D

As crocacinas A-D inibem moderadamente o crescimento de algumas bactérias Gram positivas e são inibidores potentes de culturas de células animais e diversas leveduras e fungos. A mais activa é a crocacina D que mostrou um MIC de 1,4 ng/mL contra o fungo Saccharomyces cerevisiae e forte toxicidade (CI50 de 0,06 mg/L) contra culturas celulares de fibroblastos de ratinho L929. O cancro é uma das causas principais de morte em animais e seres humanos. Grandes esforços foram e ainda estão a ser empreendidos com a finalidade de se obter um agente antitumoral activo e seguro para ser administrado a doentes que sofrem de um cancro. O problema a ser resolvido pela presente invenção é proporcionar os compostos que são úteis no tratamento de cancro.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Num aspecto, a presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral I ou sais farmaceuticamente aceitáveis, tautómeros, ou estereoisómeros do mesmo 3

R41 R45 R47

em que

Ri é seleccionado de hidrogénio, 0Ra, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb, e NRaC(NRa)NRaRb; cada R2 e R3 são independentemente seleccionados de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído; cada R411 R42 λ R43, R44/ R45 , R46/ R47 e R48 são independentemente seleccionados de hidrogénio, alquilo Ci_ C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído; cada R5, Rõ, e R7 são independentemente seleccionados de hidrogénio, CORa, COORa, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído, ou R5 e R4g junto com o correspondente átomo de N e átomo de C ao qual estão unidos podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído; cada Ra e Rb são independentemente seleccionados de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído, alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e cada linha tracejada representa uma ligação adicional opcional.

Em outro aspecto, a presente invenção refere-se a ou

compostos de fórmula I sais farmaceuticamente 4 aceitáveis, tautómeros ou estereoisómeros do mesmo para utilização como um medicamento, em particular como um medicamento para tratar cancro.

Num aspecto adicional, a presente invenção também se refere à utilização de compostos de fórmula I ou sais farmaceuticamente aceitáveis, tautómeros, ou estereoisómeros do mesmo no tratamento de cancro, ou na preparação de um medicamento, preferentemente para o tratamento de cancro. Outro aspecto da invenção consiste em compostos para utilização nestes métodos.

Em outro aspecto, a presente invenção refere-se a composições farmacêuticas que compreendem um composto de fórmula I ou sais farmaceuticamente aceitáveis, tautómeros, ou estereoisómeros do mesmo junto com um veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitável. A presente invenção também refere-se ao isolamento dos compostos de fórmula I de um porífera da família Raspailiidae, género Lithoplocamia, espécie lithistoides, o processo para obtê-los e a formação de derivados destes compostos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DE FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERIDAS A presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral I como foram definidos anteriormente.

Nestes compostos os substituintes podem ser seleccionados de acordo com a seguinte directriz:

Os grupos alquilo podem ser ramificados ou não ramificados, e preferentemente têm desde 1 até aproximadamente 12 átomos de carbono. Uma classe mais preferida de grupos alquilo tem desde 1 até aproximadamente 6 átomos de carbono. Inclusive mais preferidos são os grupos alquilo que têm 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono.

Metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo, incluindo terc-butilo, sec-butilo e isobutilo são particularmente grupos alquilo preferidos nos compostos da presente 5 invenção. Outra classe preferida de grupos alquilo tem desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Heptilo, octilo e nonilo são os grupos alquilo mais preferidos desta classe.

Os grupos alcenilo e alcinilo preferidos nos compostos da presente invenção podem ser ramificados ou não ramificados, têm uma ou mais ligações insaturadas e desde 2 até aproximadamente 12 átomos de carbono. Uma classe mais preferida de grupos alcenilo e alcinilo tem desde 2 até aproximadamente 6 átomos de carbono. Inclusive mais preferidos são os grupos alcenilo e alcinilo que têm 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Outra classe preferida de grupos alcenilo e alcinilo tem desde 4 até aproximadamente 10 átomos de carbono, ainda mais preferentemente de 6 a aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono.

Os grupos arilo adequados nos compostos da presente invenção incluem compostos de anel simples e múltiplos, incluindo compostos de anel múltiplos que contêm grupos arilo separados e/ou condensados. Grupos arilo típicos contêm desde 1 até 3 anéis separados ou condensados e desde 6 até aproximadamente 18 átomos de anel de carbono. Preferentemente os grupos arilo contêm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de anel de carbono. Os grupos arilo especialmente preferidos incluem fenilo substituído ou não substituído, naftilo substituído ou não substituído, bifenilo substituído ou não substituído, fenantrilo substituído ou não substituído e antrilo substituído ou não substituído.

Os grupos heterocíclicos adequados incluem grupos heteroaromáticos e heteroalicíclicos que contêm desde 1 até 3 anéis separados ou fusionados e desde 5 até aproximadamente 18 átomos de anel. Preferentemente os grupos heteroaromático e heteroalicíclico contêm desde 5 6 até aproximadamente 10 átomos de anel. Os grupos heteroaromáticos adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ou S e incluem, por exemplo, coumarinilo incluindo 8-coumarinilo, quinolilo incluindo 8-quinolilo, isoquinolilo, piridilo, pirazinilo, pirazolilo, pirimidinilo, furilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, imidazolilo, indolilo, isoindolilo, indazolilo, indolizinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, oxa-diazolilo, tiadiazolilo, furazanilo, piridazinilo, triazinilo, cinolinilo, benzimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo e furopiridilo. Os grupos heteroaliciclico adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ou S e incluem, por exemplo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidrotiopiranilo, piperidilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tioxanilo, piperazinilo, azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, homopiperidilo, oxepanilo, tiepanilo, oxazepinilo, diazepinilo, tiazepinilo, 1,2,3,6-tetrahidropiridilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolinilo, indolinilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, dioxanilo, 1,3-dioxolanilo, pirazolinilo, ditianilo, ditiolanilo, dihidropiranilo, dihidrotienilo, dihidrofuranilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, 3-azabiciclo[3,1.0]hexilo, 3-azabiciclo[4.1.0]heptilo, 3H-indolilo, e quinolizinilo.

Os grupos mencionados anteriormente podem ser substituídos numa ou mais posições disponíveis por um ou mais grupos adequados tais como OR', =0, SR', SOR', S02R', N02, NHR', N(R')2, =N-R', NHCOR', N(C0R')2, NHS02R' , NR'C(=NR') NR'R', CN, halogéneo, COR', COOR', OCOR', OCONHR', 0C0N{R')2, OH protegido, arilo substituído ou não 7 substituído, e grupo heterocícli co substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, OH, no2, nh2, sh, CN, halogéneo, COH, COalquilo, co2h, alquilo Ci_Ci2 substituído ou nao substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído, alcinilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são por si substituídos, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior.

Os substituintes halogéneo adequados nos compostos da presente invenção incluem F, Cl, Br e I.

Os grupos protectores adequados para OH são bem conhecidos pela pessoa perita na especialidade. Uma revisão geral de grupos protectores em química orgânica é proporcionada por Wuts, PGM e Greene TW em Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a Ed. Wiley-Interscience, e by Kocienski PJ em Protecting Groups, 3a Ed. Georg Thieme Verlag. Estas referências proporcionam secções em grupos protectores para OH. Todas estas referências são incorporadas por referência em sua totalidade. Exemplos de tais OH protegidos incluem éteres, silil éteres, ésteres, sulfonatos, sulfenatos e sulfinatos, carbonatos e carbamatos. No caso de éteres o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de metilo, metoximetilo, metiltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo, benziloximetilo, p-metoxibenziloximetilo, [(3,4-dimetoxibenzil)oxi]metilo, p-nitrobenziloximetilo, o-nitnobenziloximetilo, [(R)-l-(2-nitrofenil)etoxi]metilo, (4-metoxiphe- noxi)metilo, guaiacolmetilo, [ (p-fenilfenil)oxi]metilo, t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo, siloximetilo, 2-metoxietoximetilo, 2-cianoetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2,2,2-tricloroetoximetilo, 2-(trimetilsilil) etoximetilo, menthoximetilo, o-bis(2- acetoxietoxi)metilo, tetrahidropiranilo, fluorous tetrahidropiranilo, 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo, 4-metoxitetrahidro- tiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo S,S-dióxido, 1-[ (2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-ilo, l-(2- fluorofenil)-4-metoxipiperidin-4-ilo, l-(4-clorofenil)-4-metoxipiperidin-4-ilo, 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a octahidro-7,8, 8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1 — {2 — cloroetoxi)etilo, 2-hidroxietilo, 2-bromoetilo, 1—[2 — (trimetilsilil)etoxi]etilo, 1-metil-l-metoxietilo, 1-metil-1-benziloxietilo, l-metil-l-benziloxi-2-fluoroetilo, 1-metil-l-fenoxietilo, 2,2,2-tricloroetilo, 1,1-dianisil-2,2,2- tricloroetilo, 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-fenilisopropilo, 1-(2-cianoetoxi)etilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(benziltio) etilo, 2-fenilselenil)etilo, t-butilo, ciclohexilo, 1-metil-l'-ciclopropilmetilo, allilo, prenilo, cinamilo, 2-fenallilo, prop- argilo, p-clorofenilo, p-metoxifenilo, p-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo, 2,3,5,6-tetrafluoro-4-(trifluorometil)fenilo, benzilo, p-metoxibenzilo, 3,4-dimetoxibenzilo, 2,6-dimetoxibenzilo, o-nitrobenzilo, p-nitrobenzilo, pentadienilnitrobenzilo, pentadienilnitropiperonilo, halobenzilo, 2,6-diclorobenzilo, 2,4-diclorobenzilo, 2,6-difluorobenzilo, p-cianobenzilo, fluorobenzilo, 4-fluoroalcoxibenzilo, trimetilsililxililo, p-fenilbenzilo, 2-fenil-2-propilo, p-acilaminobenzilo, p-azidobenzilo, 4-azido-3-clorobenzilo, 2-trifluorometilbenzilo, 4-trifluorometilbenzilo, p-(metilsulfinil)benzilo, p-siletanil- benzilo, 4-acetoxibenzilo, 4-(2-trimetilsilil)etoximetoxibenzilo, 2-naftilmetilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metil-2-picolilo N-óxido, 2-quinolinilmetilo, 6-metoxi-2-(4-metilfenil-4-quinolinemetilo, 1-pirenilmetilo, difenilmetilo, 4- 9 metoxidifenilmetilo, 4-fenildifenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, tris ( 4-t-butilfenil)metilo, α-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil) metilo, 4 —(4' — 4,4',4"-tris(4,5-4, 4 ' , 4 " -4, 4 ' , 4 " -4,4'-dimetoxi-3"-[N-4,4'-dimetoxi-3"-[N-bis(4-metoxifenil)-1'- bromofenaciloxi)fenildifenilmetilo, dicloroftalimidofenil)metilo, tris(levulinoiloxifenil)metilo, tris(benzoiloxifenil)metilo, (imidazolilmetil)Jtritilo, (imidazoliletil)carbamoil]tritilo, pirenilmetilo, 4-(17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenilmetil)-4,4"-dimetoxitritilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-feniltioxantilo, 9-(9-fenil-10-oxo) antrilo, 1,3- benzoditiolan-2-ilo, e 4,5-bis(etoxicarbonil)-[1,3]- dioxolan-2-ilo, benzisotiazolilo S, 5-dióxido. No caso de silil éteres o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de triisopropilsililo, dietilisopropilsililo, norbornildimetilsililo, trimetilsililo, trietilsililo, dimetilisopropilsililo, dimetilhexilsilil, 2- t-butildimetil- sililo, t- butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di-t-butilmetilsililo, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil)sililo, (2-hidroxistyril)dimetilsililo, (2-hidroxistyril)diisopropilsililo, t-butil- metoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3- tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxano-l-ilo, e fluorosililo. No caso de ésteres o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de formato, benzoilformato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, tricloroacetamidato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, fenilacetato, difenilacetato, 3-fenilpropionato, propanoilo tipo cadeia bisfluoro, 4-pentenoato, 4-oxopentanoato, 4,4- 10 (etileneditio)pentanoato, 5[3-bis(4-metoxifenil)hidroximetilfenoxi]levulinato, pivaloato, 1-adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2, 4,6-trimetilbenzoato, 4-bromobenzoato, 2, 5-difluorobenzoato, p-nitrobenzoato, picolinato, nicotinato, 2-(azidometil)benzoato, 4-azidobutirato, (2-azidometil)fenilacetato, 2-([(tritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-{[(4-metoxitritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-{[metil(tritiltio)amino]metil}benzoato, 2—{{[(4— metoxitritil)tio]metilamino}-metil}benzoato, 2-(alliloxi)fenilacetato, 2-(preniloximetil)benzoato, 6-(levuliniloximetil)-3-metoxi-2-nitrobenzoato, 6-(levuliniloximetil)-3-metoxi-4-nitrobenzoato, 4-benziloxibutirato, 4-trialquilsililoxibutirato, 4-acetoxi-2,2-dimetilbutirato, 2,2-dimetil-4-pentenoato, 2-iodobenzoato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometil) benzoato, 2-formilbenzenossulfonato, 4-(metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2-(cloroacetoximetil)benzoato, 2-[(2-cloroacetoxi)etil]benzoato, 2-[2-(benziloxi)etil]benzoato, 2-[2-(4-metoxibenziloxi)etil]benzoato, 2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monosuccinoato, (£)-2-metil-2-butenoato, o-(metoxicarbonil)benzoato, α-naftoato, nitrato, Ν,Ν,Ν,Ν-tetrametilfosforodiamidato de alquilo, e 2- clorobenzoato. No caso de sulfonatos, sulfenatos e sulfinatos o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de sulfato, alilsulfonato, metanossulfonato, benzilsulfonato, tosilato, 2-[(4-nitrofenil)etil)sulfonato, 2-trifluorometilbenzenossulfonato, 4-monometoxitritilsulfenato, alquilo 2,4-dinitrofenilsulfenato, 2,2,5,5-tetrametilpirrolidin-3-ono-1-sulfinato, borato, e dimetilfosfinotiolilo. No caso de 11 carbonatos o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de carbonato de metilo, carbonato de metoximetilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo, carbonato de etilo, carbonato de bromoetilo, carbonato de 2- (metiltiometoxi)etilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo, carbonato de 1,l-dimetil-2,2,2-tricloroetilo, carbonato de 2-(trimetilsilil)etilo, carbonato de 2-[dimetil(2- naftilmetil)silil]etilo, carbonato de 2-(fenilsulfonil) etilo, carbonato de 2-(trifenilfosfonio)etilo, carbonato de cis-[4-[[(metoxitritil)sulfenil]oxi]tetrahidrofuran-3-iljoxilo, carbonato de isobutilo, carbonato de t-butilo, carbonato de vinilo, carbonato de alilo, carbonato de cinamilo, carbonato de propargilo, carbonato de p-clorofenilo, carbonato de p-nitrofenilo, carbonato de 4-etoxi-l-naftilo, carbonato de 6-bromo-7-hidroxicoumarin-4-ilmetilo, carbonato de benzilo, carbonato de o- nitrobenzilo, carbonato de p-nitrobenzilo, carbonato de p-metoxibenzilo, carbonato de 3,4-dimetoxibenzilo, carbonato de antraquinon-2-ilmetilo, carbonato de 2-dansiletilo, carbonato de 2-(4-nitrofenil)etilo, carbonato de 2-(2,4-dinitrofenil)etilo, carbonato de 2-(2-nitrofenil)propilo, 2-(3,4-metilenedioxi-6-nitrofenil)propil carbonato de alquilo, carbonato de 2-ciano-l-feniletilo, carbonato de 2-(2-piridil)amino-l-feniletilo, carbonato de 2-[N-metil-N-(2-piridil)] amino-l-feniletilo, carbonato de fenacilo, carbonato de 3',5'-dimetoxibenzoino, ditiocarbonato de metilo, e tiocarbonato de S- benzilo. E no caso de carbamatos o grupo protector para o OH pode ser seleccionado de dimetiltiocarbamato, N-fenilcarbamato, N-metil-N-(o-nitrofenil)carbamato. A menção destes grupos não deve ser interpretado como uma limitação do âmbito da invenção, uma vez que foram mencionados como um mera ilustração de grupos protectores para OH, mas grupos adicionais que tem a dita função podem ser conhecidos pela 12 pessoa perita na especialidade, e são para ser entendidos também abrangidos pela a presente invenção. 0 termo "sais farmaceuticamente aceitáveis, " " refere-se a qualquer sal farmaceuticamente aceitável, éster, solvato, hidrato que, após a administração ao paciente é capaz de proporcionar (directamente ou indirectamente) um composto como é descrito no presente documento. No entanto, será apreciado que sais não farmaceuticamente aceitáveis também estão dentro do âmbito da invenção uma vez que aqueles podem ser úteis na preparação de sais farmaceuticamente aceitáveis. A preparação de sais podem ser levada a cabo por meio de métodos conhecidos no estado da técnica.

Por exemplo, sais farmaceuticamente aceitáveis de compostos proporcionados no presente documento são sintetizados a partir do composto parental, que contém um fracção básica ou ácida, por meio de métodos químicos convencionais. Geralmente, tal sais são, por exemplo, preparados fazendo reagir as formas de base ou ácido livre destes compostos com um quantidade estequiométrica de o ácido ou base apropriada em água ou num solvente orgânico ou numa mistura dos dois. Geralmente, meios não aquosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol ou acetonitrilo são preferidos. Exemplos dos sais de adição de ácido incluem mineral sais de adição de ácido tais como, por exemplo, cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, nitrato, fosfate, e sais de adição de ácido orgânicos tais como, por exemplo, acetato, trifluoroacetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, malato, mandelato, metanossulfonato e p-toluenossulfonato. Exemplos dos sais de adição de alcali incluem sais inorgânicos tal como, por exemplo, sódio, potássio, cálcio e amónio sais, e sais de álcali orgânicos tal como, por exemplo, etilenodiamina, etanolamina, N,N-dialquilenetanolamina, trietanolamina e sais de aminoácidos básicos. 13

Os compostos da invenção podem estar em forma cristalina ou como compostos livres ou como solvatos (por exemplo, hidratos) e pretende-se que ambas as formas estejam dentro do âmbito da presente invenção. Métodos de solvatação são geralmente conhecidos no estado da técnica.

Qualquer composto referido no presente documento está destinado a representar talcomposto especifico bem como certas variações ou formas. Em particular, os compostos referidos no presente documento podem ter centros assimétricos e portanto existem em diferentes formas enantioméricas. Todos os isómeros ópticos e estereoisómeros dos compostos referidos no presente documento, e misturas dos mesmos, são considerados dentro do âmbito da presente invenção. Assim qualquer dado composto referido no presente documento está destinado a representar qualquer um de um racemato, uma ou mais formas enantioméricas, uma ou mais formas diastereoméricas, uma ou mais formas atropisoméricas, e misturas das mesmas. Particularmente, os compostos da presente invenção representados pela fórmula I descrita anteriormente podem incluir enantiómeros dependendo de sua assimetria ou diaestereoisómeros. Estereoisomerismo ao redor da dupla ligação é também possível, portanto em alguns casos a molécula poderia existir como (E)-isómero ou (Z)-isómero. Se a molécula contém diversas duplas ligações, cada dupla ligação terá seu próprio estereoisomerismo, que poderia ser igual ou diferente do estereoisomerismo das outras duplas ligações da molécula. Os isómeros individuais e misturas de isómeros estão dentro do âmbito da presente invenção.

Além disso, os compostos referidos no presente documento podem existir como isómeros geométricos (isto é, cis e trans isómeros), como tautómeros, ou como atropisómeros. Especificamente, o termo tautómero refere-se a um de dois ou mais isómeros estruturais de um composto, que existem em equilíbrio e são facilmente convertidos de 14 uma forma isomérica a outra. Os pares tautoméricos comuns são amina-imina, amida-imida, ceto-enol, lactama-lactima, etc. Adicionalmente, qualquer composto referido no presente documento está destinado a representar hidratos, solvatos, e polimorfos, e misturas dos mesmos quando tais formas existem no meio. Além disso, os compostos referidos no presente documento podem existir em formas marcadas isotopicamente. Todos os isómeros geométricos, tautómeros, atropisómeros, hidratos, solvatos, polimorfos, e formas marcadas isotopicamente dos compostos referidos no presente documento, e misturas dos mesmos, são considerados dentro do âmbito da presente invenção.

Para proporcionar um descrição mais concisa, algumas das expressões quantitativas dadas no presente documento não são qualificadas com o termo "aproximadamente". Entende-se que, se o termo "aproximadamente" é utilizado explicitamente ou não, cada quantidade dada no presente documento significa que se refere ao valor dado real, e é também significa que se refere à aproximação a tal valor dado que seria inferido de maneira razoável com base na perícia comum na especialidade, incluindo equivalentes e aproximações devido às condições experimental e/ou de medição para tal dado valor.

Em compostos de fórmula geral I, o Ri particularmente preferido é hidrogénio, 0Ra e OCORa, em que Ra é seleccionado de hidrogénio e alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído. 0 Ra particularmente preferido é hidrogénio e alquilo C1-C12 substituído ou não substituído; e inclusive mais preferido é hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo, incluindo terc-butilo. Hidrogénio, OH e metoxi são os grupos mais preferido Ri.

Os R2 e R3 particularmente preferidos são hidrogénio e alquilo C1-C12 substituído ou não substituído. Os R2 e R3 mais preferidos são hidrogénio e alquilo Οι-Οβ substituído 15 ou não substituído, e inclusive mais preferidos são hidrogénio.

Os R4i, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R4s particularmente preferidos são hidrogénio e alquilo C1-C12 substituído ou não substituído. Os R4i, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R48 mais preferido são hidrogénio e alquilo Ci-Cô substituído ou não substituído, e inclusive mais preferidos é hidrogénio, metilo substituído ou não substituído, etilo substituído ou não substituído, propilo substituído ou não substituído, isopropilo substituído ou não substituído e butilo substituído ou não substituído, incluindo terc-butilo substituído ou não substituído, isobutilo substituído ou não substituído e sec-butilo substituído ou não substituído. Os substituintes preferidos dos ditos grupos são OR', =0, SR’, SOR', S02R', N02, NHR' , N(R')2, =N-R', NHCOR ' , N(C0R')2, NHS02R', NR ' C (=NR1NR1R' , CN, halogéneo, COR', COOR' , OCOR', OCONHR', 0C0N(R')2, OH protegido, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, OH, N02, NH2, SH, CN, halogéneo, COH, COalquilo, COOH, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são por si substituídos, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes inclusive mais preferidos dos mencionados anteriormente grupos são OH, SCH3, SH, NH2, NHC(=NH)NH2, C0NH2, COOH, fenilo, p-, m- ou o- hidroxifenilo, indolilo, incluindo 1-, 2-, e 3-indolilo, e imidazolilo, incluindo 4- e 5-imidazolilo. Hidrogénio, metilo, isopropilo, terc- butilo e benzilo são os grupos R41, R42, R43, R44, R45, R4ç, R47 e R4g mais preferidos. Os R42, R44, R45, R46, e R47 especif icamente, particularmente 16 preferidos são hidrogénio. Os R4i e R43 particularmente preferidos são metilo. E o R48 particularmente preferido é isopropilo, terc-butilo, ou benzilo.

Os R5 e Rg particularmente preferidos são hidrogénio e alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído. Os R5 e R6 mais preferidos são hidrogénio e alquilo Ci-Cõ substituído ou não substituído; e inclusive mais preferidos são hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo, incluindo terc-butilo. Hidrogénio é o mais preferido.

Em outra forma de realização da invenção, é também preferido que R5 e R48 junto com o correspondente átomo de N e átomo de C ao qual estão unidos formem um grupo heterocíclico substituído ou não substituído. 0 grupo heterocíclico preferido é pirrolidinilo, incluindo 1-, 2- e 3-pirrolidinilo. 0 R7 particularmente preferido é hidrogénio, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído e alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, e mais preferentemente é hidrogénio, alquilo Ci^Ci2 substituído e alcenilo C2_Ci2 substituído. 0 alquilo substituído e alcenilo substituído preferidos podem apresentar não somente um, mas dois ou mais substituintes. Os grupos alquilo mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Heptilo, octilo e nonilo são os grupos alquilo mais preferidos. Por outro lado, os grupos alcenilo mais preferido são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Octa-1,6-dienilo, octa-1,5-dienilo, octa-1,4-dienilo, octa-1,3-dienilo, nona-1,7-dienilo, nona-1,6-dienilo, nona-1,5-dienilo, nona-1,4-dienilo, nona-1,3-dienilo, hepta-1,5-dienilo, hepta-1,4-dienilo, hepta-1,3-dienilo são os mais preferidos alcenilo grupos. Os substituintes preferidos para os ditos grupos alquilo e alcenilo são OR', =0 SR', SOR', S02R', N02, NHR' , N(R')2, 17 =N-R', NHCOR', N(COR')2, NHS02R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halogéneo, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCON(R')2, OH protegido, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, OH, N02, NH2, SH, CN, halogéneo, COH, COalquilo, COOH, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são por si substituídos, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes mais preferidos para os grupos alquilo e alcenilo mencionados anteriormente são halogéneo, OR', =0 OCOR', OCONHR', 0C0N(R')2, e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é preferentemente seleccionado de hidrogénio, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, e arilo substituído ou não substituído. Os substituintes inclusive mais preferidos para estes grupos alquilo e alcenilo são halogéneo, OR', =0, OCONHR', 0C0N(R')2, e OH protegido em que o grupo protector para o OH é preferentemente seleccionado de trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexilsilil, 2- norbornildimetilsililo, t-butildimetilsililo, butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di-t-butilmetilsililo, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil) sililo, ( 2-hidroxiestiril)dimetilsililo, (2- hidroxiestiril)diisopropilsililo, t-butilmetoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3-tetraisopropil-3-[2- (trifenilmetoxi)etoxildisiloxano-l-ilo, e fluoro sililo, e em que cada um dos grupos R' é mais preferentemente 18 seleccionado de hidrogénio, alquilo C1-C6 não substituído, e arilo substituído ou não substituído. Cl, OH, =0, 0C0NH2, OCONHFenilo, e OH protegido em que o grupo protector para o OH é preferentemente seleccionado de trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexilsilil, 2-norbornildimetilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di- t-butilmetilsililo, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil)sililo, (2-hidroxiestiril)dimetilsililo, (2-hidroxiestiril)diisopropilsililo, t butilmetoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3-tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi) etoxi]disiloxano-l-ilo, e fluoro sililo, são os substituintes mais preferidos para estes grupos alquilo e alcenilo.

Particularmente preferida é a presença de uma ou mais ligações adicionais nos lugares indicados com uma linha tracejada. Mais preferida é a presença de uma ligação adicional em todos os lugares indicados com uma linha tracejada. Além disso, a estereoquímica de cada dupla ligação pode existir como (E) ou (Z) . Os isómeros individuais e misturas dos isómeros estão dentro do âmbito da presente invenção.

Mais particularmente, a invenção proporciona compostos de fórmula geral II ou sais farmaceuticamente aceitáveis, tautómeros, ou estereoisómeros dos mesmos

R41 R43 r5 0 em que (II) 19

Ri é seleccionado de hidrogénio, 0Ra, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb, e NRaC(NRa)NRaRb; cada R41, R43 e R4s são independentemente seleccionados de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído; cada R5, R6, e R7 são independentemente seleccionados de hidrogénio, CORa, COORa, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, ou R5 e R48 junto com o correspondente átomo de N e átomo de C ao qual estão unidos podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído; cada Ra e Rb são independentemente seleccionados de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2_ Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e cada linha tracejada representa uma ligação adicional opcional.

Em compostos de fórmula geral II, o Ri particularmente preferido é hidrogénio, 0Ra e OCORa, em que Ra é seleccionado de hidrogénio e alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído. 0 Ra particularmente preferido é hidrogénio e alquilo Ci-Cô substituído ou não substituído; e inclusive mais preferido é hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo, incluindo terc-butilo. Hidrogénio, OH e metoxi são os grupos Ri mais preferidos.

Os R4i, R43 e R48 particularmente preferidos são hidrogénio e alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído. Os R41, R43 e R48 mais preferido são hidrogénio e alquilo Ci_ Cg substituído ou não substituído, e inclusive mais preferido é hidrogénio, metilo substituído ou não substituído, etilo substituído ou não substituído, propilo 20 substituído ou não substituído, isopropilo substituído ou não substituído e butilo substituído ou não substituído, incluindo terc- butilo substituído ou não substituído, isobutilo substituído ou não substituído e sec-butilo substituído ou não substituído. Os substituintes preferidos dos ditos grupos são OR', =0, SR', SOR', SP2R', N02, NHR' , N(R')2, =N-R', NHCOR', N(C0R')2, NHS02R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halogéneo, COR', COOR', OCOR', OCONHR', 0C0N(R')2, OH protegido, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, OH, N02, NH2, SH, CN, halogéneo, COH, COalquilo, COOH, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são por si substituídos, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes inclusive mais preferidos dos grupos mencionados anteriormente são OH, SCH3, SH, NH2, NHC(=NH)NH2, C0NH2, COOH, fenilo, p-, m- ou o-hidroxifenilo, indolilo, incluindo 1-, 2-, e 3-indolilo, e imidazolilo, incluindo 4- e 5-imidazolilo. Hidrogénio, metilo, isopropilo, terc-butilo e benzilo são os grupos R4i, R43 e R48 mais preferidos. Especificamente, os R41 e R43 particularmente preferidos são metilo, e o R4g particularmente preferido é isopropilo, terc-butilo, ou benzilo.

Os R5 e Rg particularmente preferidos são hidrogénio e alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído. Os R5 e Rg mais preferidos são hidrogénio e alquilo Ci_Cg substituído ou não substituído; e inclusive mais preferidos são hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo, incluindo terc-butilo. Hidrogénio é o mais preferido. 21

Em outra forma de realização da invenção, é também preferido que R5 e R48 junto com o correspondente átomo de N e átomo de C ao qual estão unidos formem um grupo heterocíclico substituído ou não substituído. 0 grupo heterocíclico preferido é pirrolidinilo, incluindo 1-, 2- e 3-pirrolidinilo. 0 R7 particularmente preferido é hidrogénio, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído e alcenilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, e mais preferentemente é hidrogénio, substituído alquilo Ci_Ci2 e substituído alcenilo C2-C12. Os grupos alquilo mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Heptilo, octilo e nonilo são os grupos alquilo mais preferidos. Por outro lado, os grupos alcenilo mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e inclusive mais preferentemente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Octa-1,6-dienilo, octa-1,5-dienilo, octa-1,4-dienilo, octa-1,3-dienilo, nona-1,7-dienilo, nona-1,6-dienilo, nona-1,5-dienilo, nona-1,4-dienilo, nona-1,3-dienilo, hepta-1,5-dienilo, hepta-1,4-dienilo, hepta-1,3-dienilo são os grupos alcenilo mais preferidos. Os substituintes preferidos para os ditos grupos alquilo e alcenilo são OR', =0, SR', SOR', S02R', N02, NHR' , N(R')2, =N-R ' , NHCOR ' , N(C0R')2, NHS02R', NR ' C (=NR ' ) NR ' R ' , CN, halogéneo, COR', COOR', OCOR', OCONHR', 0C0N(R')2, OH protegido, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterociclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, OH, N02, NH2, SH, CN, halogéneo, COH, COalquilo, COOH, alquilo Ci_Ci2 substituído ou não substituído, alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e grupo heterociclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são por si 22

substituídos, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes mais preferidos para os grupos alquilo e alcenilo mencionados anteriormente são halogéneo, OR', =0, 0C0R~, OCONHR’, 0C0N(R')2, e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é preferentemente seleccionado de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, alcinilo C2_Ci2 substituído ou não substituído, e arilo substituído ou não substituído. Os substituintes inclusive mais preferidos para estes grupos alquilo e alcenilo são halogéneo, OR', =0, OCONHR', 0C0N(R')2, e OH protegido em que o grupo protector para o OH é preferentemente seleccionado de trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexilsilil, 2- norbornildimetilsililo, t-butildimetilsililo, t- butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di-t-butilmetilsililo, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil) sililo, ( 2-hidroxiestiril)dimetilsililo, (2- hidroxiestiril)diisopropilsililo, t-butilmetoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3-tetraisopropil-3-[2- (trifenilmetoxi)etoxi]disiloxano-l-ilo, e fluoro sililo, e em que cada um dos grupos Rr é mais preferentemente seleccionado de hidrogénio, alquilo Ci-Cgnão substituído, e arilo substituído ou não substituído. Cl, OH, =0, 0C0NH2, OCONHFenilo, e OH protegido em que o grupo protector para o OH é preferentemente seleccionado de trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexilsilil, 2-norbor- nildimetilsililo, t-butildimetilsililo, t- butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di-t-butilmetilsililo, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil)sililo, (2-hidroxiestiril)dimetilsililo, 23 (2-hidroxiestiril)diisopropilsililo, t-butilmetoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3-tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi) etoxi]disiloxano-1-ilo, e fluoro sililo, são os substituintes mais preferidos for estes grupos alquilo e alcenilo.

Particularmente preferida é a presença de uma ou mais ligações adicionais nos lugares indicados com uma linha tracejada. Mais preferida é a presença de uma ligação adicional em todos os lugares indicados com uma linha tracejada. Além disso, a estereoquímica de cada dupla ligação podem existir como (E) ou (Z). Os isómeros individuais e misturas dos isómeros estão dentro do âmbito da presente invenção.

Os compostos da invenção particularmente preferidos são os seguintes:

Cl

Composto 2 2 4

Composto 3 Λ

Composto 6

25 MeO

MeO Ο

NH2 Composto 7

O

Cl Composto 8

Os compostos 1-8 foram isolados de um porífera, da família Raspailiidae, género Lithoplocamia, espécie lithis-toides.

Uma amostra de Lithoplocamia lithistoides foi depositada no "Instituto de Ciências del Mar y Limnologia" da Universidad Nacional Autonoma de México em Mazatlan, em México, com o código de referência LEB-ICML-UNAM-11-2004. Esta esponja foi colhida manualmente usando mergulho com garrafa de oxigénio em Madagáscar (S 17° 06,071' / E 49° 51,385') numa profundidade variando entre 6 e 20 m, e sua descrição é a seguinte:

Família Raspailiidae: Raspailiidae Hentschel, 1923 são esponjas com formas de crescimento encrustante, massiva, lobada, em forma de leque ou ramificada, usualmente com um superfície muito híspida. Um esqueleto ectossomal especializado está tipicamente presente, que consiste em escovas de pequenos estilos finos (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 17) ou óxeas (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 5), ao redor de individual longos estilos finos ou óxeas. 0 esqueleto coanossomal varia desde um esqueleto axial comprimido, a plumo-reticulado ou exclusivamente estruturas reticuladas. As fibras de espongina usualmente encerram completamente espículas de núcleo (estilos coanossomais, 26 óxeas ou ambos). Um categoria especial de estilos espinhados (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 22), ou modificações para estilos (por exemplo, Figs 22-25, 28), fibras equinadas, protruem em ângulos rectos a partir das fibras. Microscleras são usualmente ausentes, embora ráfides individuais (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 109) ou feixes (tricodragmata; Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 110) podem ocorrer , em alguns gêneros. Raspailiids são amplamente distribuídos, variando desde águas rasas a pelo menos 2460 m em profundidade (Hartman 1982) . Género Lithoplocamia, espécie lithistoides são formas de crescimento encrustantes e massivas, o esqueleto coanossomal é um reticulação isodictial densa ou subisodictial irregular de acantostrongilos, em 1 ou 2 categorias de tamanho, sem condensação axial, sem acantóstiles equinados, com tractos radiais extra-axiais de estilos moles, e tipicamente sem um esqueleto ectossomal especializado raspailiid (embora quando estão presentes as espículas ectossomais são óxeas longas e delgadas); microescleras estão ausentes.

Amostras de Lithoplocamia lithistoides foram também colhidas em Quénia (S 04° 40' 5,5" / E 39° 26' 4,3", e S 03° 38' 36,5" / E 39° 53' 53,8") e Tanzânia (S 08° 55' 31,7" / E 39° 34' 53,5", e S 05° 24,200' / E 39° 47,730') numa profundidade variando entre 30 e 40 m.

Adicionalmente, os compostos da invenção podem ser obtidos por meio de síntese. Por exemplo, o composto 1 podem ser preparado juntando diferentes fragmentos como é indicado no Esquema 1. 27

OR"1 Γ r^hnA·^0 * nh2 r Cl Fragmento C Π Fragmento D Π d h2n co2h U· ORm Λ Rv'<j V Cl π o OR111 r Rvicr ¢=1 /S Rv,cr 11

Esquema 1 onde R, R1, RM, Ri:[I> RIV, Rv, RVI, RVI1 e RVm são o grupo desejado ou um grupo protector apropriado conforme seja necessário.

Este processo pode compreender as seguintes etapas chave: um) Amidação do derivado de iodoalcenilo (Fragmento D) com Fragmento C seguindo procedimentos da literatura padrão (Kozawa Y et al. Tetrahedron Lett. 2002, 43, 111) para proporcionar a correspondente enamida (fragmento CD), b) Reacção de acoplamento de Stille entre o Fragmento A e o Fragmento B seguindo procedimentos conhecidos em síntese 28 orgânica (Scott WJ et al. J. Am. Chem. Soc. 1984, 106, 4630; Labadie J W et al. J. Org. Chem. 1983, 48, 4634-4642; Farina V et ai. Organic Reactions 1998, Wiley) para obter o polieno linear (fragmento AB). c) Os fragmentos AB e CD podem ser acoplados seguindo procedimentos padrão (Bodanszky M e Bodanszky A, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, 1993) para obter o esqueleto de carbono do composto 1. d) A desprotecção do álcool 0RM seguida por lactonização pode ser conseguida de acordo com procedimentos conhecidos em síntese orgânica (Greene e Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a ed., Wiley-Interscience; Burke e Danheiser, Handbook of Reagents for Organic Synthesis: Oxidizing and Reducing Agents, Wiley; Pia D et al. J. Org. Chem. 2005, 70, 8231) . e) Finalmente, a desprotecção do álcool ORm seguida por formação do carbamato pode ser conseguida por meio de procedimentos da literatura padrão (Love B et al. Organic Syntheses, Coll. Vol. 5, p. 162; Vol. 48, p. 32; Muller E et ai. Methoden der Organischen Chemise (Houben-Weil), 4a ed., Vol. 8, G. Tieme, Stuttgart, 1952, p. 137) para obter o composto 1. A sequência de etapas pode ser intercambiada para obter o composto final. Por exemplo, o fragmento BC pode ser preparado num primeiro estágio e então o acoplamento sequencial com os fragmentos A e D proporciona o esqueleto de carbono de composto 1. Do mesmo modo, o composto 1 pode ser preparado pelo acoplamento sequencial dos fragmentos A, B, C, e D em qualquer ordem. Outra opção é realizar a formação da fracção lactona no fragmento A antes de seu acoplamento com qualquer outro fragmento.

Os análogos de composto 1 podem ser sintetizados por meio de um processo equivalente como aqueles descritos para o composto 1, pela escolha dos substituintes apropriados dos compostos intermediários em cada caso. 29

Quando for necessário, grupos protectores apropriados podem ser utilizados nos substituintes para assegurar que os grupos reactivos não são afectados. A síntese pode ser desenhada para empregar substituintes precursores que podem ser convertidos no estágio apropriado a um substituinte desejado. Saturação ou insaturação na estrutura de anel pode ser introduzida ou retirada como parte da síntese. Materiais de partida e reagentes podem ser modificados conforme seja desejado para assegurar síntese do composto pretendido. Além disso, os análogos também podem ser sintetizados a partir do composto 1 por meio de procedimentos usuais em química orgânica sintética que são conhecidos por um perito na especialidade.

As vias sintéticas mencionadas anteriormente podem ser modificadas conforme seja desejado para dar compostos estereoespecíficos bem como misturas de estereoisómeros. É possível sintetizar estereoisómeros específicos ou misturas específicas por meio de vários métodos incluindo a utilização de reagentes estereoespecíficos ou pela introdução de centros quirais nos compostos durante a síntese. É possível introduzir um ou mais estereocentros durante a síntese e também inverter estereocentros existentes. Além disso, é possível separar estereoisómeros uma vez que o composto tenha sido sintetizado por meio de técnicas de resolução padrão conhecidas pelo leitor perito.

Uma característica importante dos compostos descritos anteriormente de fórmula I e II é sua bioactividade e em particular sua actividade citotóxica e anti-mitótica.

Com esta invenção os inventores proporcionam composições farmacêuticas novas de compostos de fórmula geral I e II que possuem actividades citotóxica e anti-mitótica e sua utilização como agentes antitumorais. Assim a presente invenção proporciona ainda composições farmacêuticas que compreendem um composto desta invenção, um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente 30 aceitável do mesmo com um veículo farmaceuticamente aceitável.

Exemplos de composições farmacêuticas incluem quaisquer composições sólidas (comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos, etc.) ou líquidas (soluções, suspensões ou emulsões) para administração oral, tópica ou parentérica. A administração dos compostos ou composições da presente invenção podem ser por meio de qualquer método adequado, tal como infusão intravenosa, preparações orais, e administração intraperitoneal e intravenosa. Os inventores preferem que tempos de infusão de até 24 horas sejam utilizados, mais preferentemente 1-12 horas, com 1-6 horas o mais preferido. Tempos de infusão curtos que permitam que o tratamento seja levado a cabo sem uma estadia durante a noite em hospital são especialmente desejáveis. No entanto, a infusão podem ser de 12 a 24 horas ou inclusive mais longos se for necessário. A infusão podem ser levada a cabo em intervalos adequados de 1 a 4 semanas. As composições farmacêuticas que contêm compostos da invenção podem ser administradas por meio de encapsulamento em lipossoma ou nanosfera, em formulações libertação sustentada ou por outro meio de administração padrão. A dosagem correcta dos compostos variará de acordo com a formulação particular, o modo de aplicação, e o particular local, hospedeiro e tumor a ser tratado. Outros factores como idade, peso corporal, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de excreção, condição do hospedeiro, combinações de fármacos, sensibilidades de reacção e gravidade da doença devem ser levados em consideração. A administração podem ser levada a cabo continuamente ou periodicamente dentro da dose máxima tolerada.

Os compostos e composições desta invenção podem ser utilizados com outros fármacos para proporcionar uma 31 combinação terapêutica. Os outros fármacos podem formar parte da mesma composição, ou ser proporcionados como uma composição separada para administração ao mesmo tempo ou em momentos diferentes.

Actividades antitumorais destes compostos incluem, mas não são limitadas, cancro de pulmão, cancro de cólon, cancro de mama e cancro de colo de útero.

EXEMPLOS

EXEMPLO 1: DESCRIÇÃO DO ORGANISMO MARINHO E LOCAL DE COLHEITA

Lithoplocamia lithistoides foi colhida manualmente usando mergulho com garrafa de oxigénio em Madagáscar (S 17° 06,071' / E 49° 51,385') a uma profundidade variando entre 6 e 20 m. 0 material animal foi identificado por Jose Luis Carballo (Universidad Autonoma de Mejico). Uma amostra do espécime foi depositada no "Instituto de Ciências del Mar y Limnologia" da Universidad Nacional Autonoma de México em Mazatlan, em México, com o código de referência LEB-ICML-UNAM- 11-2004. EXEMPLO 2: ISOLAMENTO DO COMPOSTO 1 0 espécime congelado do Exemplo 1 (61 g) foi cortado em cubos e extraído com H2O (3 x 200 mL) e então com uma mistura de MeOH: Diclorometano (1:1, 3 x 200 mL) a temperatura ambiente. Os extractos orgânicos combinados foram concentrados para proporcionar um produto bruto de 1,11 g. Este material foi submetido a VLC em Lichroprep RP-18 com um gradiente escalonado desde H2O até MeOH. 0 composto 1 (1,6 mg) foi isolado das fracções eluindo com MeOH por meio de HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C18 7 pm, 7,8 x 150 mm, gradiente H20:MeCN desde 35 até 100% de MeCN em 30 min, Detecção de UV, fluxo de 2,5 mL/min, tr 14,4 min.).

Composto 1: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z 606,2940 [M+H ] + (Calcd. para C3iH4535ClN307 606,2946 ) ; ΧΗ (500 MHz) e 13C NMR (125 MHz) veja-se o Quadro 1. 32

Quadro 1. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 1 (CDCI3) 32 N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 _ 161,6 18 6,84 (br dd, 10,8, 9,7) 124,5 2 - 145,2 19 4,80 (m) 105, 0 3 5,63 (dd, 6,5, 2,6) 108,2 20 2,46 (m) 2,09 (ddd, 14,1, 8,4, 8,1) 30,7 4 2,45 (ddd, 17,3, 11,5, 2,6) 2,37 (ddd, 17,3, 6,5, 4,1) 26,1 21 4,41 (m) 74, 9 5 4,24 (ddd, 11,5, 7,1, 4,1) 81,9 22 2,33 (m), 2H 33,0 6 2,85 (ddq, 9,8, 7,1, 6,7) 37, 1 23 5,61 (t 1, 6,8) 122, 4 33 (cont.) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° 1H (Multiplicidade, J) 13C 7 5,29 (d, 9,8) 134, 1 24 - 132,0 8 - 133,7 25 2,06 (s), 3H 21,0 9 6,17 (d, 11,6) 140,2 26 3,66 (s), 3H 55,4 10 7,30 (dd, 11,6, 11,6) 124, 6 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16,3 11 6,91 (dd, 11,6, 11,6) 137, 6 28 1,82 (s), 3H 17,1 12 5,70 (d, 11,6) 120, 7 29 - 34, 7 13 - 166,3 30 1,04 (s), 3H 26,7 14 6,51 (d, 9,5) - 31 1,04 (s), 3H 26,7 15 4,41 (d, 9,5) 60, 8 32 1,04 (s), 3H 26,7 16 - 168,2 33 - 157, 2 17 8,78 (d, 10,8) -

Um segundo grupo de amostras de Lithoplocamia lithistoides (7,66 kg) foi triturado e exaustivamente extraído com uma mistura de MeOH:Diclorometano (1:1, 14 L, 2 x 5 L, 4 L) . 0 solvente foi retirado a vácuo e a solução aquosa restante foi extraída com EtOAc (12 L, 3 x 8 L) . A camada orgânica foi evaporada para proporcionar um produto bruto de 21,71 g.

Este material foi submetido a cromatografia em coluna RP-18 com um gradiente escalonado desde H20:Me0H (4:6) até MeOH. As fracções eluídas com H20:Me0H (2:8, 430 mg) foram agrupadas e submetidas a HPLC preparativa (Atlantis dCis, OBD, 5 μπι, 19 x 150 mm, H20 isocrática:MeOH (39:61), fluxo: 20 mL/min, Detecção de UV) para proporcionar os compostos puros 1 (160,8 mg), 2 (13,2 mg), e 7 (1,8 mg), e misturas

34 de 3 e 4 (11,4 mg) e 5 e 6 (10,0 mg). Os compostos puros 3 (5,1 mg) e 4 (2,6 mg) foram obtidos após um purificação final da mistura por meio de HPLC semipreparativa (X-Terra Prep RP-18, 10 μπι, 10 x 150 mm, gradiente de H20:Me0H desde 50 até 70 % de MeOH em 70 min, fluxo: 2,5 mL/min, Detecção de UV) . Os compostos 5 (3,6 mg) e 6 (1,0 mg) foram separados de uma maneira similar por meio de HPLC semipreparativa (X-Terra Prep RP- 18, 10 μπι, 10 x 150 mm, H20 isocrática:MeOH (45:55), fluxo: 2,5 mL/min, Detecção de UV) .

Composto 2: sólido branco amorfo. MS (ES) m/z 606,3 [M+H]+, 628.3 [M+Nal + ; 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 2.

Composto 3: sólido branco amorfo. ( + )HRESIMS m/z 628,2774 [M+Na] + (Calcd. para C3iH4435ClN307Na 628,2760); XH (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 3.

Composto 4: sólido branco amorfo. ( + )HRESIMS m/z 594,3152 [M+Na]+ (Calcd. para C3iH45N307Na 594,3150); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 4.

Composto 5: sólido branco amorfo. MS (ES) m/z 592,3 [M+H]+, 614.3 [M+Na ] +; XH (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 5.

Composto 6: sólido branco amorfo. MS (ES) m/z 592,3 [M+H]+, 614.3 [M+Na ] +; 3H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 6.

Composto 7: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z 427,2207 [M+Nal+ (Calcd. para C22H32N205Na 427,2203); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 7.

Quadro 2. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 2 (CPC13) N° "ή (Multiplicidade, J) 13C N° 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161,5 18 6,83 (ddd, 10,8, 8,9, 124, 1,2) 4 2 - 145,2 19 4,80 (m) 105, 5 3 5,61 (dd, 6,4, 3,1) 108, 1 20 2,43 (m) 2,12 (m) 30,6 35(cont.) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 4 2,41 (ddd, 17,1, 11,3, 3,0) 2,34 m 26,6 21 4,50 (m) 74, 9 5 4,18 (ddd, 11,3, 7,8, 4,3) 81,6 22 2,36 (m), 2H 33,2 6 2,88 (ddq, 10,0, 7,8, 6,7) 37, 4 23 5,61 (t 1, 6,5) 122, 2 7 5,46 (br d, 10,0) 136,5 24 - 132, 1 8 _ 135,6 25 2,07 (d, 1,0), 3H 21,0 9 6,41 (d, 15,5) 145, 0 26 3,65 (s), 3H 55, 4 10 7,60 (dd, 15,5, 11,4) 124,2 27 1,16 (d, 6,7), 3H 16,5 11 6,49 (dd, 11,4, 11,3) 142,5 28 1,86 (d, 1,0), 3H 13,1 12 5,63 (d, 11,3) 119, 0 29 - 34,6 13 _ 166,5 30 1,05 (s), 3H 26,6 14 6,39 (d, 9,4) _ 31 1,05 (s), 3H 26,6 15 4,44 (d, 9,4) 60,7 32 1,05 (s), 3H 26,6 16 - 168,3 33 - 157, 0 17 8,50 (br d, 10,8) - Ο

Quadro 3. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 3 (CDCI3) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161,5 18 6,83 (br dd, 10,7, 9,6) 124 , 4 36(cont.) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 2 - 145,3 19 4,81 (m) 105 , 4 3 5,61 (dd, 6,3, 3,0) 108, 1 20 2,47 (m) 2,10 (m) 30, 8 4 2,39 (m) 2,37 (m) 26,3 21 4,43 (m) 75, 0 5 4,21 (ddd, 10,9, 7,6, 4, 7) 81,7 22 2,34 (m), 2H 33, 0 6 2,90 (ddq, 10,0, 7,6, 6,6) 37, 4 23 5,62 (t 1, 6,5) 122 , 4 7 5,46 (br d, 10,0) 136,4 24 - 132 ,0 8 - 135,1 25 2,07 (s), 3H 21, 0 9 6,51 (d, 15,3) 144, 1 26 3,65 (s), 3H 55, 4 10 6,27 (dd, 15,3, 11,1) 125,2 27 1,15 (d, 6,6), 3H 16, 6 11 7,25 (dd, 14,8, 11,1) 141,9 28 1,83 (d, 1,0), 3H 12, 9 12 5,96 (d, 14,8) 122,9 29 - 35, 1 13 - 166, 0 30 1,03 (s), 3H 26, 6 14 6,39 (d, 9,3) - 31 1,03 (s), 3H 26, 6 15 4,43 (d, 9,3) 60,8 32 1,03 (s), 3H 26, 6 16 - 168,3 33 - 157 ,9 17 8,82 (d, 10,7) - 37

Quadro 4, Dados de RMN 1H e 13C do Composto 4 (CDCls) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161,6 18 6,82 (ddd, 10,4, 9,1, 0,9) z24,2 2 _ 145,2 19 4,82 (m) 105, 8 3 5,63 (dd, 6,6,2,7) 108,2 20 2,46 (m) 2,12 (ddd, 14,1, 8,0, 8,0) 30,9 4 2,44 (m) 2,39 (m) 26,1 21 4,45 (m) 75,6 5 4,25 (ddd, 11,3, 7,0, 4, 0) 81, 9 22 2,35 (m), 2H 31,4 6 2,85 (ddq, 9,9, 7,0, 6,7) 37, 1 23 5,40 (m) 124,9 7 5,29 (d, 9,9) 134, 1 24 5,60 (m) 127, 1 8 _ 133,8 25 1,63 (dd, 6,8, 1,0), 3H 13,0 9 6,15 (d, 11,6) 140,2 26 3,66 (s), 3H 55,4 10 7,31 (dd, 11,6, 11,6) 124, 4 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16,4 11 6,90 (dd, 11,6, 11,6) 137,5 28 1,82 (s), 3H 17, 1 12 5,72 (br d, 11,6) 120,8 29 _ 34, 8 13 - 166,3 30 1,04 (s), 3H 26,7 14 6,53 (d, 9,6) _ 31 1,04 (s), 3H 26,7 15 4,44 (d, 9,6) 60,7 32 1,04 (s), 3H 26,7 16 - 168,2 33 - 157,6 17 8,69 (d, 10,4) -

Composto 4 38 Quadro 5. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 5 (CDCI3) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C No ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 _ 161, 7 17 8,69 (d, 10,7) _ 2 - 145, 1 18 6,84 (ddd, 10,7, 9,8, 0,9) 124,5 3 5,64 (dd, 6,6, 2,6) 108,3 19 4,80 (m) 105,2 4 2,48 (ddd, 17,4, 12,0, 2,6) 2,37 (ddd, 17,4, 6,6, 3,9) 26,0 20 2,45 (m) 2,10 (ddd, 15,0, 7,1, 6,2) 30,7 5 4,28 (ddd, 12,0, 6,6, 3,9) 81,9 21 4,44 (m) 74, 8 6 2,85 (ddq, 9,7, 6,6, 6,7) 37, 0 22 2,33 (m), 2H 33,0 7 5,31 (d, 9,7) 134,1 23 5,60 (t 1, 7,1) 122, 4 8 _ 133,6 24 _ 132,0 9 6,17 (d, 11,5) 140,3 25 2,06 (s), 3H 21,0 10 7,31 (dd, 11,5, 11,5) 124,5 26 3,66 (s), 3H 55, 4 11 6,93 (dd, 11,5, 11,5) 137,6 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16,2 12 5,73 (d, 11,5) 120,5 28 1,82 (s 1), 3H 17, 1 13 _ 166,5 29 2,22 (m) 31,1 14 6,54 (d, 9,2) - 30 1,00 (d, 6,8), 3H 19,3 15 4,46 (dd, 9,2, 6,4) 58,5 31 0,96 (d, 6,8), 3H 18, 0 16 - 169, 1 32 - 157, 4

25

Composto 5

Quadro 6. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 6 (CDCI3) N° "ή (Multiplicidade, J) 13C N° "ή (Multiplicidade, J) 13C 1 _ 161,5 17 8,59 (d, 10,8) _ 2 _ 145,2 18 6,84 (dd 1, 10,8, 8,7) 124,5 3 5,61 (dd, 6,8, 2,8) 108,2 19 4,81 (m) 105,5 4 2,41 (m), 2H 26,6 20 2,42 (m) 2,13 (ddd, 14,1, 7,5, 7,2) 30,6 39(cont) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 5 4,18 (ddd, 11,6, 7,7, 4,2) 81,6 21 4,49 (m) 74, 7 6 2,88 (ddq, 10,0, 7,7, 6,6) 37, 4 22 2,35 (m), 2H 33,1 7 5,47 (dl, 10,0) 136,5 23 5,61 (m) 122,3 8 _ 135,5 24 _ 132,1 9 6,41 (d, 15,4) 145,0 25 2,07 (s), 3H 21,0 10 7,61 (dd, 15,4, 11,3) 124,2 26 3,65 (s), 3H 55,4 11 6,49 (dd, 11,3, 11,3) 142,5 27 1,15 (d, 6,6), 3H 16,5 12 5,63 (d, 11,3) 118,9 28 1,86 (s), 3H 13,1 13 _ 166,6 29 2,20 (m) 30,9 14 6,34 (d, 8,9) _ 30 1,01 (d, 6,7), 3H 19,3 15 4,42 (dd, 8,9, 7,1) 58,6 31 0,98 (d, 6,8), 3H 18,2 16 - 169,0 32 - 157, 0 Ο

Composto 6

Quadro 7. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 7 (CDCI3) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161,5 2 _ 145,3 3 5,62 (dd, 6,1, 3,2) 108, 1 4 2,43 (m) 2,38 (m) 26,3 5 4,21 (ddd, 12,0, 7,0, 4, 8) 81,8 40 (cont.) N° 1H (Multiplicidade, J) 13C 6 2,86 (ddq, 9,9, 7,0, 6,6) 37, 4 7 5,29 (d, 9,9) 134,2 8 - 134, 1 9 6,17 (d, 11,6) 140,2 10 7,26 (dd, 11,6, 11,5) 124, 1 11 6,90 (dd, 11,5, 11,5) 137, 4 12 5,67 (d, 11,5) 120,8 13 _ 166,2 14 6,22 (d, 9,2) - 15 4,34 (d, 9,2) 59,8 16 _ 172,5 17 3,66 (s), 3H 55,4 18 1,17 (d, 6,6), 3H 16,7 19 1,85 (s), 3H 17,2 20 — 34,5 21 1,05 (s), 3H 26,6 22 1,05 (s), 3H 26,6 23 1,05 (s), 3H 26,6

Composto 7 EXEMPLO 4: ISOLAMENTO DO COMPOSTO 8

Uma fracção que contêm o composto 1 (61,6 mg) vinda do procedimento de extracção revelado no Exemplo 3 foi purificada adicionalmente por meio de HPLC semipreparativa (Symmetryprep C-18, 7 pm, 7,8 x 150 mm, H,0 isocrática:CH3CN (55:45), fluxo: 2,3 mL/min, Detecção de UV) e 0,9 mg do Composto 8 foram obtidos numa forma pura.

41 Composto 8: sólido branco amorfo. MS (ES) m/z 606,2 [M+H ] +, 628,3 [M+Na ] +; ΧΗ (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja-se o Quadro 8. Quadro 8. Dados de RMN 1H e 13C do Composto 8 (CDCI3) N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C N° ‘H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161,6 18 6,83 (ddd, 10,8, 8,7, 1,0)) 124,4 2 _ 145,2 19 4,80 (m) 105,2 3 5,66(t 1,4,6) 108,4 20 2,11 (ddd, 14,2, 8,1, 7,8) 2,45 (m) 30, 7 4 2,45 (m), 2H 26,6 21 4,46 (m) 75, 0 5 4,21 (ddd, 7,7, 7,7, 7,7) 81,7 22 2,34 (t, 6,7), 2H 33, 0 6 2,85 (ddq, 10,0, 7,7, 6,7) 37, 4 23 5,60 (td, 7,8, 1,2) 122,3 7 5,35 (d, 10,0) 135,1 24 _ 132,0 8 _ 134,6 25 2,06 (s), 3H 21, 0 9 6,16 (d, 11,7) 140,6 26 3,66 (s), 3H 55, 4 10 6,06 (dd, 11,7, 11,7) 125,6 27 1,17 (d, 6,7), 3H 16,6 11 7,71 (dd, 14,7, 11,7) 137, 9 28 1,91 (d, 0,7), 3H 17, 0 12 5,95 (d, 14,7) 124,5 29 - 34, 8 13 _ 166, 0 30 1,04 (s), 3H 26,6 14 6,35 (d, 9,5) _ 31 1,04 (s), 3H 26,6 15 4,47 (d, 9,5) 61,0 32 1,04 (s), 3H 26,6 16 _ 168,3 33 _ 157, 1 17 8,65 (d,10,8) -

Composto 8 42

EXEMPLO 5: SÍNTESE DO FRAGMENTO A O Esquema 2 proporciona diversos exemplos de síntese do fragmento A, de acordo com a nomenclatura proporcionada no Esquema 1.

TBSO.

TBSO

Ph3PCH2l, I TBSO

TBSO

NaHMDS 12 13 0-P(OEt>2 X^COjMe PPTS HO.

TBSO S03Pyr O,

TBSO 14 15 C02Me

TBSO

HCI

MeOH

17a X=OMe 17b X=H

16a X=OMe 16b X=H

Esquema 2 Síntese do Intermediário 9 TBSO.

TBSO 43 A uma solução a 0 °C de (2S,3S)-3,5-Bis{[(ferf-butil)dimetilsilil]oxi}-4-metilpentan-l-ol (P. Phukan, S. Sasmal e M.E. Maier Eur. J. Org. Chem. 2003, 1733-1740) (50 g, 0,14 mol) numa mistura de Diclorometano/DMSO (331mL/149 mL) , Et3N (96,1 mL, 0,69 mol) foi adicionado via funil de adição. Após 10 min, S03Pyr (54,8 g, 0,34 mol) foi adicionado em porções e a solução foi agitada durante outras 2 h a 0 °C. Então, foi diluída com diclorometano (800 ml) e extinta com HC1 (0,5 N, 800 mL) . A camada orgânica foi decantada, seca em MgS04 e concentrada a vácuo. A purificação por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 100:0 a 10:1) proporcionou 45 g (rendimento: 90%) de aldeído 9. RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 9, 79 (s, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,65 (m, 2 h), 2,51 (m, 1H) , 1, 69 (m, . 2 h), 1,04 (d, 3H, J = 6,9 Hz) 00 OO 0 1 LO OO 0 (m, 18H) , 0 ,03-0, 07 (m, 12H) . 13C- -RMN (CDCI3, 75 MHz) 8: : 205, 4, 69, 4, 59, 6, 51,7, 37,5, 26, 1, 26,0, 18 ,4, 18,2, 8, 0, -4, 3, -4,5, -5, 2. Síntese do intermediário 10 C02Et

TBSO

TBSO

Sobre uma solução de aldeído 9 (45 g, 0,12 mol) em tolueno (625 mL) Carboetoxietilideno-trifenilfosforano (113 g, 0,31 mol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 60°C ao longo de 17 h. Então, o solvente foi retirado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 100:0 a 10:1) proporcionando 53,3 g (rendimento: 96%) de composto de éster 10. 1H-RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6,71 (dd, 1H, J = 1,5, 10,2 Hz), 4,19 (m, 2 h) , 3,77 (m, 1H) , 3,66 (m, 2 h) , 2,61 (m, 1H) , 1,85 (d, 3H, J = 1,5 Hz), 1,68 (m, 2 h), 1,30 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 0,98 (d, 3H, 6,9 Hz), 0,90 (m, 18H) , 0,05 (m, 12H) . 44 13C-RMN (CDC13, 75 MHz) 8: 168,3, 145, 4, 126, 7, 72,2, 60, 4, 59,7, 38,4, 38,0, 25,9, 18,2, 18,1, 14,3, 14,3, 12,6, -4,4, -4,6, -5,4. Síntese do intermediário 11

TBSO

Sobre uma solução arrefecida a -78 °C de éster 10 (46,7 g, 0,105 mol) em THF anidro (525 mL) sob atmosfera de árgon, Hidreto de diisobutilalumínio (DIBAL) 1 M em tolueno (231 mL, 0,231 mol) foi adicionado ao longo de um período de 10 min e a mistura foi agitada a -78°C. Após 4 horas a reacção foi extinta com MeOH (10 mL) e um solução saturada de tartrato de sódio e potássio foi adicionada (800 mL) e diluida com EtOAc (1000 mL). Esta mistura foi agitada durante 2 h e então a camada orgânica foi decantada. O resíduo aquoso foi extraído com EtOAc adicional (2 x 400 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2S04) e o solvente foi evaporado. O óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 20:1 a 10:1) proporcionando 32,5 g (rendimento: 77%) de álcool 11. 1H-RMN (CDCI3, 300 MHz) 6: 5,31 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3,98 (m, 2 h), 3,66 (m, 3H) , 2,49 (m, 1H) , 1,67 (s, 3H) , 1,70- 1,62 (m, 2 h) , 0,91 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,88 (m, 18H) , 0, 03 (m, 12H) . 13C-RMN (CDC1s, 75 MHz) Ô: 133,9, 129, 8, 73, 1, 69, 1, 59,9, 37, 8, 37, 5, 25, 9, 18,3, 18, 1, 15, 9, 13,9, -4, 4, -4, 4, -5, 3. Síntese do intermediário 12 ,0 TBSO.

TBSO

Sobre uma solução de álcool 11 (31,2 g, 77,5 mmol) em éter etílico (387 mL) sob atmosfera de árgon, MnC>2 (101 g, 45 45 1,16 mol) foi adicionado e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Esta mistura foi filtrada sobre um coluna de silica gel eluindo com EtOAc (3L) e a solução resultante foi seca sob pressão reduzida para proporcionar 29,1 g (rendimento: 94 %) de aldeído 12. 1H-RMN (CDCla, 300 MHz) δ: 9,37 (s, 1H ) , 6, 44 (d, 1H, J = 9,6 Hz) , 3,82 (dd , 1H, J = 6,3, 10, 8 Hz) r 3,6 i 5 (m, 2 h) , 2,82 (m , 1H), 1, 74 (s, 3H) , 1,67 (m, 2 h) , 1 , 02 (d, 3H, J = 6,9 Hz) , 0,86 (s, 18H) , 0, 04-0,01 (m, 1 2H) . 13c-rmn (CDCla, 75 MHz) Ô: 195,4, 157, 8, 13 8, 3, 134, 5, 72, 0, 59,5, 36,7, 37 ,5, 25, 8, , 18,2, 18 ,1, 14 ,3, 9 ,4, -4,4, - 4,5, -5,4. Síntese do intermediário 13

TBSO

TBSO A uma suspensão de iodeto de iodometilo trifenilfosfónio (Gilbert Stork, KZ. Tetrahedron letters 1989, 30 (17), 2173) (96,3 g, 181,7 mmol) em THF (727 mL) a 0 °C, um 1 M de solução de hexamet ildisilazano de sódio (NaHMDS) (181,7 mL, 181,7 mmol) foi lentamente adicionado, via funil de adição, ao longo de um período de 10 min. Após agitar durante 5 min adicionais, a solução foi arrefecida até -78°C e 1,3-Dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona (DMPU) (43,9 mL, 363,4 mmol) foi então adicionado via cânula, seguida pela adição de aldeído 12 (29,1 g, 72,7 mmol) dissolvido em THF (727 mL). A temperatura foi mantida a -78 °C enquanto a mistura de reacção foi agitada durante 2 horas. Hexano (1 L) foi adicionado e a suspensão resultante foi filtrada sobre celite e lavada com hexano adicional (3 L). O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna 46 46 (hexano/EtOAc de 100:0 a 20:1) proporcionando 32 g (rendimento: 84%) de iodeto 13. ^-RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 6,73 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 6,09 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 5,57 (dd, 1H, J = 9,6, 1, 2 Hz) , 3,63-3,71 (m, 3H) , 2,58 (m, 1H) , 1,90 (s, 3H), 1,70 (m, 2 h), 0,96 (dd, 3H, J = 6,6, 1,2 Hz), 0,88 (s, 18H), 0,04 (m, 12H) . 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 142,3, 138,1, 131,8, 74,6, 72,9, 59,8, 38,1, 37,9, 26, 0, 18,3, 18,2, 15, 7, 15, 7, -4, 4, -5,2, -5,2. Síntese do intermediário 14

HO

TBSO A uma solução de iodeto 13 (12 g, 22,9 mmol) em EtOH (114 mL) foi adicionado p-toluenossulfonato de piridínio (PPTS) (2,01 g, 8,0 mmol) e a mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 25 horas. Então o solvente foi retirado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc 10:1) proporcionando 8,7 g (rendimento: 93%) de álcool 14. 1H-RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6,69 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,12 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 3,67-3,87 (m, 4H) , 2,71 (m, 1H) , 1,89 (s, 3H) , 1, 73-1,86 (m, 2 h) , 1,01 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,91 (s, 9H) , 0,087-0,115 (m, 6H) . 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 142, 4, 136,4, 132,6, 75, 8, 75, 2, 60,0, 38,1, 36,4, 26,1, 18,2, 17,1, 16,0, -4,1, -4,2. Sintese do intermediário 15

TBSO A uma solução a 0 °C de álcool 14 (8,7 g, 21,2 mmol)

numa mistura de Diclorometano/DMSO (50,9 mL/22,9 mL), Et3N 47 (14,8 mL, 106 mmol) foi adicionado via funil de adição. Após 10 min, SC>3Pyr (8,43 g, 53,0 mol) foi adicionado em porções e a solução foi agitada durante outras 2 h a 0 °C. Então, foi diluída com Diclorometano (800 mL) e extinta com HC1 (0,5 N, 50 mL) . A camada orgânica foi decantada, seca em MgS04 e concentrada a vácuo. A purificação por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc 10:1) proporcionou 6,9 g (rendimento: 80%) de aldeído 15. 47

TBSO RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 9, 89 (t, 1H, J = 1,5 Hz), 6,67 (d, 1H, J = 8, 4 Hz ) , 6, 13 (d, 1H, J = 8, 4 Hz) , 5,43 (d, 1H, J = = 10 ,2 Hz), 3,98 (m , 1H) , 2, 59-: 2,69 (m, 3H), 1,85 (s, 3H) , 1, 01 (d, 3H, J = ( 5,6 Hz) , 0 , 86 (s, 9H) , 0,06 (s, 3H) , 0,03 (s , 3H) . 13c- -RMN (CDCI3, 75 MH z) δ: 201 ,8, 141 ,9, 135, 2 , 133,3, 76,3, 71, 9, 49,3, 39 ,3, 25 ,8, 18 ,0, 16, 7, 15, 9 , -4, 4, -4,5. Síntese do intermediário 16a A uma solução de Dietil(metoxi[metoxicarbonil]metil)fosfonato (5,51 g, 14,45 mmol) e 18-coroa-6 (11,5 g, 43,34 mmol) em THF seco (390 mL) agitada sob atmosfera de árgon a -78 °C, um solução de 0,5 Mde bis(trimetilsilil) amida de potássio (KHMDS) (43,34 mL, 21,67 mmol) foi adicionada gota a gota. Após 15 min o aldeído 15 (5,9 g, 14,45 mmol) em THF seco foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 30 min e agitado a -78 °C durante 90 min. Então, a reacção foi extinta com um solução de NH4CI saturada (200 mL), aquecida até temperatura ambiente e diluída com Diclorometano (1000 mL) . A fase orgânica foi seca (Na2S04) e evaporada a pressão reduzida. A purificação por meio de cromatografia em coluna (hexano/Et20 20:1) proporcionou 4,2 g (59%) de (E)-16a puro. 48 1H-RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6 ,70 (d, 1H, J = N 00 6,08 (d, 1H, J = 8, 4 Hz), 5,47 (d , 1H, J = 9,9 H z) , 5,37 (t , 1H, J = 7,2 Hz) , 3 ,78 (s, 3H), 3 ,60 (s, 3H) , 3, 60 (m, 1H), 2, 79 (m, 1H) , 2,52- 2,67 (m, 2 h), 1,83 (s , 3H) r 0, 99 (d, 3H , J = 6,6 Hz) , 0,89 (s, 9H), 0,05 (s, 3H), 0,04 ( s, 3H) . 13C- •RMN (CDCI3 , 75 MHz) Ô: 163,7, 145, 9, 142,1, 137,3, 132 ,1, 110,4, 00 LO 55,4, 51,9, 38 ,1 , 32,3, 25,9, 18,1, 16,5, 15,7, -4,3, -4,5. Síntese do intermediário 16b

TBSO A uma solução de [bis(2,2,2-trifluoroetoxi)fosfinil]acetato de etilo (0,16 mL, 0,66 mmol) e 18-coroa-6 (350 mg, 1,32 mmol) em THF seco (2,4 mL) agitada sob atmosfera de árgon a 0 °C, KHMDS (1,23 mL, 0,62 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 30 min, o aldeído 15 (180 mg, 0,44 mmol) em THF seco foi adicionado gota a gota e agitado a -78 °C durante 60 min. Então, a reacção foi extinta com solução de NH4C1 saturada, aquecida até temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi seca (Na2SC>4) e evaporada a pressão reduzida. A purificação por meio de cromatografia em coluna (hexano/ EtOAc de 100:1 a 15:1) proporcionou 172 mg (rendimento: 82 %) de (Z) -16b • XH -RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 6, ,70 (d, 1H, J = 8,7 Hz) , 6, 44- 6, 36 (m, 1H) , 6,09 (d, 1H, J = 8,7 Hz) , 5,86- -5, 81 (m, 1H ) , 5, 47 (d, 1H, J = 9 ,9 Hz), 4, 14 (q, 2 h, J = 7,2 Hz) , 3, 69- 3, 64 (m, 1H) , 3,06 -3,00 (m, 1H), 2,85-2,75 (m, 1H) , 2, 59- 2, 51 (m, 1H) , 1,84 (s, 3H), 1,28 (t, 3H, J = = 7,2 Hz) , , 1 , 00 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,89 (s, 9H) , 0,06 (s, 3H) , 0,05 (s, 3H). MS (ES) m/z 501,0 [M+Na]+ Síntese do intermediário 17a 49

A uma solução de éster 16a. (4,15 g, 8,39 mmol) em MeOH (125 mL) a temperatura ambiente, HC1 a 37% (1,04 mL) foi adicionado e a mistura de reacção foi agitada durante 6 horas. Então a mistura foi neutralizada com uma solução saturada de NaHC03 (pH 7-8) e o solvente orgânico foi evaporado sob pressão reduzida. A suspensão resultante foi extraída com Diclorometano (3 x 200 mL) , seca e evaporada. A filtração por meio de cromatografia em coluna (hexano/ EtOAc de 10:1 a 2:1) proporcionou 2,76 g (rendimento: 94%) de lactona 17a. 1H-RMN (500 1 MHz, CDCI3) δ: 6,68 (d, 1H, J = 9, 0 Hz) í 6 , 20 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 5, 63 (dd, 1H, J = 2,5, 6, 5 Hz) , 5 ,43 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4, r 19 (m, 1H) , 3,65 (s, 3H) , 2, 84 (m, 1H) , 2, 55 (m , 1H) , 2,43 (dc, J = 1H , 3,0, 12, ,0, 15, 0 , 1 8,0 Hz) , 1, 87 (s, r 3H) , 1,16 (d, 3H, J = 6,5 Hz). 13C- -RMN (125 MHz , CDCI3 ) δ: 161,6, 145,2, 141, 8, 134 ,4, 132 ,7, 108,3 , 81 7 77 r ' r 1 ' ; ,4, 55, 4, 3' 7,1, 26,6 r 16,5, 16 ,1. Síntese do intermediário 17b

A uma solução de éster 16b (172 mg, 0,36 mmol) em MeOH (4,5 mL) a temperatura ambiente, HC1 a 37% (0,03 mL) foi adicionado e a mistura de reacção foi agitada durante 3 horas. Então a mistura foi neutralizada com uma solução saturada de NaHC03 (pH 7-8) e o solvente orgânico foi evaporado sob pressão reduzida. A suspensão resultante foi extraída com diclorometano, seca e evaporada. A filtração por meio de cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 10:1 a 5: 1) proporcionou 70 mg (rendimento: 61%) de lactona 17b. 1H-RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6,91-6,85 (m, 1H), 6,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 6,62 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 6, 02 (dd, , 1H, J = 2,7, 9,6 Hz; ), 5,45 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4, 19 (m, 1H) , 3,65 (s, 3H) , 4, 26-4,18 (m, 1H) r 2,92-2,79 (m, 1H) , 2,57- -2, 48 50 (m, 1H), 2,39-2,28 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,17 (d, 3H, J = 6,6 Hz).

EXEMPLO 6: SÍNTESE DO FRAGMENTO D

O Esquema 3 proporciona diversos exemplos de síntese do fragmento D, de acordo com a nomenclatura proporcionada em Esquema 1. ^—"''"OTBS 18

iJmCPBA, DCM

OTBS

BuU. BF3OEt2. THF 19

20 ii){R,R)Co-saten AcOH, H20

Sc(OTf)3 CH2Cl2

21a R=PMB 21b R«TBDPS i) CpjZrHCI, Tol

ii) NCS

BAIB / TEMPO CHjClj

PPh3CH2l,l

NaHMDS ΠΉΡ -7B*C

OR

22a R=PMB, Y=CI 22b R=TBDPS, Y=H

OR

24a R=PMB, Y=CI 24b R=TBDPS, Y=H 23a R=PMB, Y=CI 23b R=TBDPS, Y=H 25a R=PMB,Y=CI 25b R=TBDPS, Y=H 25c R»TBS, Y- Cl

Esquema 3 Síntese do intermediário 19 o„

OTBS 51 A uma solução de intermediário 18 {12,3 g) em diclorometano (DCM) (918 mL) a temperatura ambiente ácido 3-cloroperbenzóico (m-CPBA) (100 g, 0,58 mol) foi adicionado em porções, e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 18 h. 0 precipitado branco foi extinto com solução saturada de NaHC03 extraído com DCM (3 x 250 mL) e lavado de novo com solução saturada aguosa de NaHC03 (3 x 250 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2S04 e concentradas a vácuo. 0 óleo resultante foi purificado sobre sílica gel (Hexano-AcOEt; 15:1) proporcionar epóxido como um óleo incolor (64,5 g, 82%). A uma solução de epóxido racémico (30 g) em THF anidro (7,5 mL) complexo de (R,R)Co(II) (448 mg, 0,74 mmol) foi adicionado, seguido por AcOH (0,14 mL) . A solução foi arrefecida até 0 °C e água (1,2 mL) foi adicionado gota a gota. A reacção foi permitida que aquecesse até temperatura ambiente e agitasse durante 18 h. Após esse tempo os materiais voláteis foram concentrados a vácuo e o produto bruto foi directamente carregado sobre uma coluna de sílica gel. Cromatografia flash utilizando Hexano/EtOAc (de 15:1 a 12:1) como eluente, proporcionou epóxido quiral (+)-19 (13,6 g, rendimento: 46%) como um óleo incolor.

[a] D = +14,1 (c = 1, CHC13) . 3Η RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 3,74 (t, 2 h, J = 6 ,3 Hz) , 3,01 (m, 1H) , 2,74 (t, 1H, J = 4,6 Hz) , 2,48 (dd, 1H, J = 5,1, 3,1 Hz) , 1,70 (m, 2 h) , 0,87 (s, 9H), 0,04 (s, 6H) . 13 C RMN (CDC13 , 75 MHz) δ: 60,2, 50,2, 47,3, 36,1, 26,1, 18,4, -5,2. Sínteses do intermediário 20

OTBS

Propino foi condensado a -78 °C e dissolvido em THF anidro (165 mL). n-Butillítio foi adicionado gota a gota sob Ar ao longo de 30 min, e a suspensão branca resultante foi 52 agitada durante 30 min adicionais a -78 °C. Uma solução de (+) (R)-2-[2-(ferf-butildimetilsililoxi)etil]oxirano 19 (23,7 g) em THF anidro (125 mL) foi então adicionada gota a gota seguida por adição de BF3OEt2. A mistura foi agitada durante 1 h a - 78 °C e durante uma hora adicional a 0 °C. A reacção foi extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 (150 mL) e extraida com Et20 (3 x 150 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram secas em NaS04 filtradas e concentradas. A cromatografia flash (hexano/EtOAc de 10:1 a 1:1) proporcionou 22,7 g, (rendimento: 80%) de álcool 20 como um óleo incolor. [um]D = +5,6 (c = 0,1, CHC13) . 1H-RMN (500 MHz, CDC13) δ: 3,75-3,90 (m, 3H) , 3,47 (d, 1H, J = 2,7 Hz, OH), 2,34 (m, 2 h), 1,79, (t, 3H, J = 2,4 Hz), 1,75 (m, 2 h), 0,89 (s, 9H), 0,07 (s, 6H). 13C-RMN (125 MHz, CDC13) δ: 77, 8, 75, 8, 70, 7, 62,4, 37, 6, 27, 6, 26,1, 18,3, 3,7, -5, 3, -5, 4. MS (ES) m/z 243,2 [M+H]+, 265,2 [M+Na]+ Síntese do intermediário 21a

OTBS

Uma solução de intermediário 20 (22, 7 g) e p- metoxibenziltricloroacetimidato (PMBTCA) em DCM foi tratada com Sc(OTf)3. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h (verificação por meio de TLC) e a reacção foi concentrada a vácuo e purificada por meio de cromatografia em coluna (hexano/ EtOAc de 50:1 a 15:1) para dar 21a como óleo amarelo (18, 3 g; rendimento: 55 %) . ΧΗ RMN (CDC13 300 MHz ) δ: 7,25 (d, 2 h, J = 8,7 Hz) , 6,90 (d, 2 h , J = 8,7 Hz ), 4, 45 (m, 2 h) , 3,80 (s, 3H), 3, 6 5 (m, 3H) , 2, 40 (m; , 2 h) r 1,82 (m, 2 h), 1,79 (t, 3H, J = 2,4 Hz) , 0, 92 (s, 9H) r 0, 05 (s , 6H) . Síntese do intermediário 21b 53 53

OTBS

Uma solução de álcool 20 (2,88 g, 11,9 mmol), cloreto de terc-butildifenilsililo (4,39 mL, 16,89 mmol), e 4- (dimetilamino)piridina (43,6 mg) em N,N-dimetilformamida (DMF) (14 mL) foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com água e extraída com Et20, e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na2S04, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (Hex/EtOAc, 9 5:1) deu o éter sililíco 21b (5 ,3 g, rendimento: 93 %) como um líquido incolor. RMN (CDC1 3, 300 MHz) ( δ: 7,70-7 ,66 (m, 4H) f 7,4 0- 7, 34 (m, 6H) , 3,99-3, 95 (m, 1H) , 3,70-3,62 (m, 2 h) , 2 , 23- 2, 22 (m , 2 h) , 1,84-1,8 1 (m, 2 h) , 1,69 (t, 3H, J = 2, 7 Hz) r 1, 05 (s, 9H) , 0,84 (s r 9H) , 0, 01 (s, 6H). 13C- -RMN (CDC13, 75 MHz) δ : 136,1; 134, 6; 129, 7 ; 12 7, 8; 77 ,8; 76, 2; 69,9; 60 ,i; 39,6; 27,5; 27, , 2; 26, 2; 19 , 6; 18 ,5 ; 3 ,7; -5,1. Síntese do intermediário 22a

OPMB

A uma solução de 21a em tolueno anidro, sob Ar e a 0 °C reagente de Schwartz (Bis(ciclopentadienil) zircónio(IV) cloreto hidreto, Cp2ZrHCl) foi adicionado e a reacção foi agitada durante 5 min a temperatura ambiente. A reacção temperatura foi aumentada até 50 °C ao longo de um período de 20 min e agitada a 50 °C durante 2:30 h. Durante este tempo a solução de reacção mudou de cor laranja. A reacção foi arrefecida até 0 °C e N-clorosuccinimida foi adicionada numa porção. A agitação continuou durante 30 min a temperatura ambiente e a reacção foi diluída com Hexano/EtOAc (95:5; 500 mL). A retirada do sólido por meio de filtração e evaporação de agentes voláteis proporcionou 54 22a como óleo amarelo que foi utilizado sem purificação adicional (15,1 g; rendimento: 86 %) .

[a] D = +20,5 (c = 1, CHC13) . 3H RMN ( CDCI3, 300 MHz) δ: 7,25 (d, 2 h, J = Γ ΟΟ Hz) , 6 00 (d, 2 h, J = 8,7 Hz), 5,64 (td, 1H, J = 7, 8, 0,9 Hz) , 4 ,45 (q, 2 h, J = 11,1 Hz), 3,80 (s, 3H), 3, 70 (m, 2 h) , 3 , 62 (m, 1H ) , 2,27 (t, 2 h, J = 6,9 Hz), 2,03 (s, 3H) , 1, 70 (m, 2 h) r 0, 89 (s , 9H) , 0,05 (s, 6H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) Ô: 159,4, 130 ,9, 130, ' 7, 129 , 6, 124, 2, 114,0, 75, 2, 71, 4, 59, 8, 55, 5, 37,7, 33 ,8, 26 ,1, 21,2 r 18 ,5, - 5,1. Síntese do intermediário 22b

OTBDPS

Um balão que contêm uma mistura de 21b (4,73 g, 9,85 mmol), quinolino (0,582 mL, 4,92 mmol) e catalisador de lindlar (2,18 g) em acetato de etilo foi evacuado e esguichado com H2. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente sob H2 (1 atm) durante 2 h e então filtrada através de um tampão de celite. 0 tampão foi enxaguado com acetato de etilo e os filtrados combinados foram lavados com 0,1 % de HC1. A camada orgânica foi seca em Na2S04, filtrada e concentrada para proporcionar o intermediário 22b (4,27 g, rendimento: 90%) como um óleo incolor que foi utilizado sem purificação adicional. ΧΗ RMN (CDCI3, 300 MHz) δ : 7,70-7,67 (m , 4H) , 7,44-7,36 (m, 6H) , 5, 48 (m, 1H) , 5,36- -5,27 (m, 1H), 3,95- -3,87 (m, 1H) , 3, 71 -3, 55 (m, 2 h) , 2,16 (dd, 2 h, J = 6,9, 6,3 Hz), 1, 73- 1,66 (m, 2 h) , 1, 41 (dd, , 3H, J = 6,6 , 1,2 Hz), 1,05 (s, 9H) , 0, 84 (s, 9H) , -0,02 (s, 6H). 13c-rmn (CDCI3, 75 MHz) δ: 136,2; 134,8; 129,8; 127,8; 126 ,4; 125, 8; 70 9 * f J r 60,4 39,6 ; 3 4,8; 27,3; 26,2 ; 19,7; 18 ,5; 13,1; -5,1. 55 Síntese do intermediário 23a

55 OPMB

A uma solução de 22a (23 g) em THF anidro sob Ar e a 0 °C uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio (TBAF) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 20 min (a solução tornou-se vermelha). A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, e então foi extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 (200 mL) . As camadas combinadas foram separadas e a fase aquosa foi extraído meticulosamente com EtOAc (3 x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas em NaS04, filtradas e concentradas. A cromatografia flash (hexano /EtOAc de 4:1 a 1: 1) proporcionou 23a como um óleo incolor (11,9 g; rendimento: 73 %). ΧΗ RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7,25 (d, 2 h, J = 8,7 Hz), 6,86 (d, 2 h, J = 8,7 Hz), 5,62 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,45 (m, 2 h) , 3,80 (s, 3H) , 3,70 (m, 3H) , 2,35 (m, 2 h) , 2,03 (s, 3H) , 1, 75 (m, 2 h) . Síntese do intermediário 23b

OTBDPS OH PPTS (837,7 mg, 3,33 mmol) foi adicionado numa porção a uma solução de 22b (4 g, 8,33 mmol) em etanol (80 mL) . A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 7 h e então foi concentrada. O resíduo foi diluído em DCM e lavado com uma solução saturada de NaHCCb A camada orgânica foi extraída, seca em Na2S04, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (Hex/ EtOAc, 95:1) deu o éter sililíco 23 b (2,12 g, rendimento: 69%) como um óleo incolor. 56 XH RMN (CDC13, 300 ΜΗζ) δ: 7, 73-7, 69 (m, 4Η) , 7, 44-7, 36 (πι, 6Η), 5, 44-5, 38 (m, 1Η) , 5,21-5,17 (m, 1Η) , 4,01-3,94 (m, 1Η), 3,84-3,76 (m, 1Η), 3,69-3,64 (m, 1Η), 2,32-2,14 (m, 2 h) , 1,89-1, 78 (m, 1Η), 1, 70-1,60 (m, 1Η), 1,37 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,07 (s, 9H) . 13C-RMN (CDCI3, 75 ΜΗζ) δ: 136,2; 134,1; 130,0; 127,8; 126,3; 125,9; 72,3; 60,1; 37,7; 34,3; 27,2; 19,5; 13,0. Síntese do intermediário 24a OPMB Cl

(Diacetoxiiodo)benzeno (BAIB) (11,5 g, 35,7 mmol) foi adicionado a uma solução de álcool 23a (9,2 g, 32 4 mmol) e 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina 1-oxilo (TEMPO) (515 mg, 3,3 mmol) em diclorometano anidro (92 mL). A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 20 h até que o álcool não foi mais detectável (TLC), e então foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com DCM (3 x 100 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/ EtOAc de 4:1 a 1:1) para proporcionar 24a como óleo incolor (6,3 g; rendimento: 70%) XH RMN (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 9,78 (s, 1H) , 7,25 (d, 2 h, J = 00 Hz) , 6 , 85 (d, 2 h, J = 8, 7 Hz ), 5, 64 (t, 1H, 00 l> II >"0 Hz) , 4, 45 (q. 2 h , J = 11, 1 Hz) , 4, 02 (m, 1H) , 3,80 (s, 3H) , 2, 60 (m, 2 h) , 2,35 (m, 2 h) , 2,03 (s, 3H) . 13C RMN (CDCI3, 75 ΜΗζ) δ : 201, 159 ,6, 132,1 , 130, 1, 129,7, 122 ,8, 114 ,1, 73,3 , 71,5, 55 ,5, , 48, 3, 33 ,5, 21,3. Síntese do intermediário 24b

OTBDPS

O 57 ΒΑΙΒ (1,97 g, 6,11 mmol) foi adicionado a uma solução de álcool 23b (2,05 g, 5,56 mmol) e TEMPO (86,87 mg, 0,56 mmol) em 25 mL de DCM. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 16-18 h até que o álcool não foi mais detectável (TLC), e então foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/DCM de 5:1 a 1:2) para dar 24b (1,733 mg, rendimento: 79%) como um óleo incolor. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 9,72 (t, ΧΗ, J = 2,7 Hz), 7,74-7,67 (m, 4H) , 7, 48-7,37 (m, 6H), 5,56-5, 45 (m, 1H), 5,32-5,23 (m, 1H), 4,29-4,20 (m, 1H), 2,51-2,48 (m, 2 h), 2,31-2,27 (m, 2 h), 1,43 (dd, 3H, J = 6,9, 1,5 Hz), 1,06 (s, 9H) . 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 202,3; 136,1; 134,0; 130,1; 127,9; 127,4; 125,1; 69,4; 50,1; 35,1; 27,2; 19,5; 13,1. Síntese do intermediário 25a

OPMB

A uma suspensão de iodometiltrifenilfosfónio iodeto (16,6 g; 31 mmol) em THF anidro (126 mL) , a temperatura ambiente, um 1 M de solução de NaHMDS em THF (31,27 mL) foi lentamente adicionado. Após agitar durante 2 min, a mistura amarela foi arrefecida até -78 °C e uma solução de 24a (6,3 g, 22 mmol) em THF (82 mL) foi então adicionada. A mistura de reacção foi agitada a -78 °C durante 2 h, e a temperatura ambiente durante 5 min, diluída com hexano e filtrada através de um tampão de celite. O tampão foi enxaguado com hexano e os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna 58 58 (Hexano/EtOAc de 12:1 a 8:1) proporcionando 25a como óleo amarelo (5,6 g; rendimento: 62%). *H RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7,25 (d, 2 h, J = 8,7 Hz) , 6,85 (d, 2 h, J = 8,7 Hz), 6,25 (m, 2 h) 5,64 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,42 (m, 2 h), 3,80 (s, 3H), h), 2,25 (m, 2 h), 2,03 (s, 3H). 3, 55 (m, 1H), 2,40 (m, 2 Síntese do intermediário 25b

OTBDPS

A uma suspensão de iodometiltrifenilfosforano (3,32 g, 6,38 mmol) em THF (60 mL) a temperatura ambiente 6,83 mL de um 1 M de solução de NaHMDS (6,38 mmol) em THF foi lentamente adicionado. Após agitar durante 2 min, a mistura amarela foi arrefecida até -78 °C e uma solução de 24b (1,67 g, 4,56 mmol) em THF (40 mL) foi então adicionada. A mistura de reacção foi agitada a -78 °C durante 90 min, então a temperatura ambiente durante 5 min, diluída com hexano e filtrada através de um tampão de celite/Si02 O tampão foi enxaguado com Hexano/ EtOAc (de 10:1 a 5:1) para proporcionar o composto 25b (2 g, rendimento: 89%) como um óleo incolor que foi utilizado sem purificação adicional. xh : RMN (CDCI3, 300 MHz) δ : 7, ,70-7,66 (m, 4H) , 7,45- -7, 34 (m, 6H) , 6, 21-6,31 (m, 2 h), 5, 49-5,43 1 :m, 1H) , 5,35- 5, 27 (m, 1H) , 3, 94-3,75 (m, 1H), 2 ,30 -2,27 (m, 2 h), 2,24-2, , 04 (m , 2 h) , 1,43 (d, 3H, J = 6,6 Hz) , 1,06 (s , 9H) . 13C- -RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 138,2; 136,2; 134, 3 t 129 ,9; 127 ,8; 126,4; 126, 0; 84, i; 71,9; 41 ,6; 34, 5; 27, 2; 19 , 6; 13,2. Síntese do intermediário 25c

OTBS ( 59 2,3-Dicloro-5,6-diciano-p-benzoquinona (DDQ) (3,6g, 16 iranol) foi adicionada a uma solução de 25a (5 g; 12 mmol) em DCM-H20 (20: 1) sob atmosfera de Ar a temperatura ambiente. Após 1:30 h (TLC Hexano/EtOAc 4:1 não mostrou material de partida) a reacção foi extinta deitando em Et20 (200 mL) e lavagem com 1 M de NaOH (3 x 50 mL) e salmoura (50 mL) . A fase orgânica foi seca em Na2S04, filtrada e concentrada. A separação cromatográfica de p-metoxibenzaldeído foi facilitada por meio de redução a álcool p-metoxibenzílico. Para esta finalidade, uma solução do resíduo obtido em MeOH com NaBH4 sob atmosfera de Ar foi mantida a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reacção foi então extinta vertendo em Et20 (100 mL) e lavagem com 1 M de HC1 (40 mL) e salmoura (40 mL) . A fase orgânica foi seca em Na2S04, filtrada e concentrads. O óleo resultante foi purificado em sílica gel (Hexano/EtOAc de 10: 1 a 4:1) proporcionou o álcool secundário como óleo incolor. (2,8 g; rendimento: 80 %). A uma solução de álcool secundário (2,8 g; 10 mmol) em DCM anidro, sob Ar e a 0 °C 2,6-lutidina foi adicionada gota a gota, seguida por adição de trifluorometanossulfonato de terc-Butildimetilsililo (TBSOTf) (TLC Hexano/DCM 4:1 não mostrou material de partida). Neste ponto a mistura bruta foi extinta com 0,5 M de HC1 (25 mL) e extraída com DCM (2 x 25 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução saturada aquosa de NaHC03 e salmoura. A fase orgânica foi seca em NaS04, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (Hexano /EtOAc de 100: 1 a 20:1) proporcionou 25c como um óleo incolor (3,14 g; rendimento: 80%). XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6,25 (m, 2 h) 5,64 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 3,82 (m, 1H), 2,38 (t, 2 h, J = 6,0 Hz), 2,20 (t, 2 h, J = 6,3 Hz), 2,03 (s, 3H), 0,86 (s, 9H) , 0,05 (s, 6H) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) δ: 137, 7, 130,9, 124,3, 84,6, 70,6, 42,5, 36,6, 25,9, 21,3, 18,2, -4,4. 60 EXEMPLO 7: SÍNTESE DO FRAGMENTO BCD O esquema 4 proporciona diversos exemplos de síntese do fragmento BCD, de acordo com a nomenclatura proporcionada no Esquema 1. 60

R* r,hn^Ynh* o

OR 200 °C

Cu! IK2CO3 NN-DMEDA DMF / S0*C

O 25a R«PMB, Y»CI 25b R=TBOPS, Y=H 25c R»TBS, Y* Cl 26a R-TBS, Y=CI, Rt= Boc, R2~ *8« 26b R-TBDPS, Y*H, R,* Boc, R2«‘Bu 26c R=TBS, Y= Cl, Boc, R2*»Pr 26d R«TBS, Y» Cl, R,= H, R2=CH2Ph

/=\ BujSrt COjH HATU HOAt, Dl PE A DCM, DMF

Bu3Sn

η O R? „ H O

27a R=TBS, Y=CI, Rj« fBu 27b R=TBOPS, Y=H, R2**©u 27cR»TBS>Y*CI,Ra*,Pr (Z}*28a R<*TBS, Y=Cí, Ra* ’Bu (2)-28b R»TBDPS, Y-H, R^Bu {2)-28c R-TBS, Y* Cl, R2= lPr (2)-28d R=TBS, Y» Cl, R2=CH2Ph (E)-28e R«TBS, Y*CI, R2= lBu

4

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (148 mg, 0,78 mmol), carbonato de potássio (1,076 g, 7,78 mmol) e Boc-terc-LeuCONH2 (preparados seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (0,96 g, 4,15 mmol), evacuado e preenchido com árgon. N,N'-Dimetiletilenodiamina (DME-DA) (0,166 mL, 1,55 mmol), iodeto de vinilo 25c (1,04 g, 2,59 mmol) e DMF seca (15 mL) foram adicionados sob árgon. 61 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90 °C durante 16-18 h e arrefecido até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluida com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca em Na2S04. O solvente foi retirado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel (Hexano/ EtOAc, de 20:1 a 15:1) . O intermediário 26a (670 mg, rendimento , 53%) foi obtido como um óleo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7, 72 (d, 1H , J = 9,9 Hz ), 6,70 (t, 1H, J = 9, 6 Hz), 5,54 (t, 1H , J = 7 , 8 Hz) , 5,35 (d, 1H, J = 9,0 Hz) , 4 ,76 (q, 1H, J = 7, 8 Hz) , 3,89 ( d, 1H, J = 9, 0 Hz) , 3, 73-3,68 (m, 1H) , 2,12 (m , 4H) , 1,98 (s, 3H) , 0,971 (s, 9H) , 0,84 (s, 9H), 0, 02 (s, 3H) , 0, 01 (s, 3H) . 13c RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 168, 9, 156, 0 131,1, 123,9, 122,6, 108 ,2, 79,9, 71,6, 62,5 , 36 ,5, . 34, 8, 33,8 , 28,1, 26,7, 25,9, 21,2, 18,3, -4,3, - 4,4. Síntese do intermediário 26b

OTBDPS

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (232,4 mg, 1,22 mmol), carbonato de potássio (1,688 g, 12,23 mmol) e Boc-terc-LeuCONH2 (2,474 g, 6,12 mmol), evacuado e preenchido com árgon. N,N-Dimetil-etilenodiamina (0,26 mL, 2,45 mmol), iodeto de vinilo 25b (2 g, 4,08 mmol) e DMF seca (35 mL) foram adicionados sob árgon. O tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90 °C durante 16-18 h e arrefecido até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca em Na2S04. O solvente foi retirado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em 62 sílica gel (Hexano/ EtOAc, de 20:1 a 15:1). O intermediário 26b (1,06 g, rendimento: 44 %) foi obtido como um óleo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ : 7, 70 -7, 67 (m, 4H) , 7,43-7,35 (m, 6H), 7, 13 (d, 1H, J = 10, 5 Hz) , 6, 67 (dd, 1H, J = 10,2, 9,6 Hz), 5, 56- 5, 45 (m, 1H), 5 ,36-5, 28 (m, 2 h) , 4 , 86-4, 78 (m 1, 2 h), 3,88-3 ,77 (m, 1H), 2, 26-2,04 (m, 4H) , 1,' 44 (d, 3H, J = 6,9 Hz) , 1 ,43 (s, 9H), 1, 06 (s, 9H) , 0,96 (s, 9H) . Síntese do intermediário 26c

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (40,4 mg, 0,213 mmol), carbonato de potássio (294 mg, 2,13 mmol) e Boc-Val-CONH2 (preparados seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (230 mg, 1,06 mmol), evacuado e preenchido com árgon. N, N'-Dimetiletilenodiamina (45 pL, 0,426 mmol), iodeto de vinilo 25c (283 mg, 0,71 mmol) e DMF seca (35 mL) foram adicionados sob árgon. O tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90 °C durante 16-18 h e arrefecido até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca em Na2S04. 0 solvente foi retirado sob pressão reduzida e o residuo foi purificado por meio de cromatografia flash em si 1 ica gel (Hexano/EtOAc , de 7 : 1 a 3:1) • 0 intermediário 26c (27 0 g, rendimento: 77 %) foi obt i do como um óleo. XH RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 7, 80 (d, 1H, J = 9 ,3) , , 6,79- 6,73 (m, 1H ), 5,58 (t, 1H, J = 7,5 Hz) , 5, 02 (s 1, 1H) , 4 , 85- 4, 76 (m, 1H), 3,93 (dd, 1H, J = = 8,4 , 6, 0 Hz) , 3,: 80-3, 73 (m, 1H) , 2 ,12-2,22 (m, 5H) , 2, 02 (s, 3H) , 1,45 (s, 9H) f 0,98 (d, 3H , J = 6 ,9 Hz), 0,93 (d, 3H, J = 6,9 Hz) , 0, 89 (s, 9H) , 0, ,0 7 (s, 3H), 0,06 (s, 3H)

OTBS

63 13C RMN (CDC13, 75 MHz) δ: 169,3, 131, 1, 124,0, 122, 7, 108,9, 71,6, 36,5, 33,8, 30,6; 28,5, 26,1, 21,3, 19,6, 18,3, 17,9, -4,3, -4,4. Síntese do intermediário 26d

OTBS

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (14,2 mg, 0,075 mmol), potássio -carbonato (104 mg, 0,75 mmol) e Fmoc-Phe-CONH2 (preparados seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (145 mg, 0,375 mmol), evacuado

e preenchido com árgon. N, N'-Dimetiletilenodiamina (16 pL, 0,15 mmol) iodeto de vinilo 25c (100 mg, 0,25 mmol) e DMF seca (2,5 mL) foram adicionados sob árgon. 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90 °C durante 16-18 h e arrefecido até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca em Na2S04. O solvente foi retirado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel (Hexano/EtOAc, de 4:1 a 1:1). 0 intermediário 26d (46 mg, rendimento: 42 %) foi obtido como um óleo. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 9,19 (d, 1H, J = 11,1 Hz), 7,36- 7,21 (m, 5H) , 6,77 (ddd, 1H, J = 10,2, 9,3, 0,9), 5,60 (t 1, 1H, J II > OO H 2 0 , 1 CM OO 4,7 8 m, 1H), 3 ,79· -3, 71 (m , 1H) 3,67 (dd, 1H, J = 9,6 , 3,9 Hz) r 3,32 (dd, 1H, J = 13, 8, 3, Hz) , 2,6S ) (dd, 1H , J ' = 13 ,8, 9 ,6 Hz), 2 ,20 -2, 11 (m , 4H) 1,99 (s, 3H), 0, 89 (s , 9H), 0, 05 (s, 3H), 0, C 14 (s, 3H ) · 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 17 1,9, 137, 9, 13 0,9, 129,5 129, 1, 12 : 7,2, 124, 1, 122,5 , li 07, •9, 71,4, 56, 6, 40 9 r J r 36,3 33,6 , 26, 1, 21,3 f 18, 3, -4, 4, -4 ,5. MS (ES) m ./z 437, 1 [M+H]+, 459, 0 [M+Na]+ 64 Síntese do intermediário 27a

64 OTBS

Uma solução de derivado protegido de amino 26a (670 mg, 1,33 mmol) em etileno-glicol (30 mL) foi aquecido a 200 °C durante 10-20 min. A mistura de reacção foi então arrefecida a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e deitada em água. Algumas gotas de 3 M de NaOH foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída meticulosamente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas a vácuo para proporcionar a amina primária 27a (510 mg, rendimento: 95 %) como um óleo amarelo que foi utilizado sem purificação adicional. XH RMN (CDC13, 30 0 MHz) δ: Γ" [^ co (d, 1H, J = 9,9 Hz) , 6 ,71 (t, 1H, J = 9 ,6 Hz ;), 5 , 56 (t, 1H, J = 7,8 Hz) , 4, 71 (m, 1H) , 3, 72 (m, 1H ) , 3,1' 1 (ε U 1H) , 2, . 14 (m, 4H) , 1, 97 (s, 3H) , o, 97 (s, 9H) r 0,84 (s, 9H) , 0,02 (s, 6H) . 13c RMN ( CDC1; 3r 75 MHz ) δ : 171 ,2, 131 ,0, 124, 122 ,5, 107 ,1, 71 ,5, 64, 3, 36, 2, 34,5, 33, 8, 26,5 , 26 ,0, 21 r 2 , 18,2, -4,4, -4,5. Síntese do intermediário 27b

OTBDPS

h2

O

Uma solução de derivado protegido de amino 26b (847 mg, 1,43 mmol) em etileno-glicol (50 mL) foi aquecido a 200 °C durante 10-20 min. A mistura de reacção foi então arrefecida a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e deitada em água. Algumas gotas de 3 M de 65

NaOH foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída meticulosamente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, filtradas e concentradas a vácuo para proporcionar a amina primária 27b (435 mg, 62%) como uma espuma branca após a purificação por meio de cromatografia flash (Hexano/ EtOAc de 10:1 a 1:2). ΧΗ RMN (CDCI3, 300 MHz) δ : 8, 50 (d, 1H, J = 10,8 Hz ) , l 0 Γ- r- 7, 66 (m, 4H) , 7,45- -7,33 (m, 6H ), 6 ,67 (dd, 1H, J = 11,1, 9, 3 Hz) , 5,48- -5, 40 (m, 1H) , 5, 36-5 ,28 (m, 1H) , 4 ,79 (dd, 1H , J : = 16,2, 7,5 Hz) , 3,8 7-3, , 79 (m, 1H) , 3,08 (s, 1H) , 2, 22-2, 14 (m, 4H) , 1, 43 (d, 3H, J = 6,9 Hz) , 1,05 (s, 9H) , 0, 97 (s , 9H) . 13c-rmn (CDC13 , 75 MHz) δ: 17 '1,0; 136,1; 134,5; : 1 29,8; 12 7,8; 126,3; 126,2 ; 122 , i; 107 ,6; 72,6 ; 6 4 ,4; 34, 0; 34,4; 32,8; 27,2; 26,9; 19,6; 13,2. Síntese do intermediário 27c

OTBS

Uma solução de derivado protegido de amino 26c (255 mg, 0,52 mmol) em etileno-glicol (15 mL) foi aquecida a 200 °C durante 10-20 min. A mistura de reacção foi então arrefecida a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e deitada em água. Algumas gotas de 3 M de NaOH foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída meticulosamente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas a vácuo para proporcionar a amina primária 27c (170 mg, 85%) como um óleo amarelo que foi utilizado sem purificação adicional. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 9,27 (d, 1H, J = 10,2), 6,76 (dd, 1H, J = 11,1, 9,6 Hz), 5,61 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,80-4,72 (m, 1H), 3,81-3,73 (m, 1H) , 3,31 (d, 1H, J = 3,6 Hz) 6 6 2, 44-2,33 (m, 1H), 2,20-2,16 (m, 4H), 2,03 (s, 3H) , 1,59 (s 1, 2 h) , 1,00 (d, 3H, J = 6, 9 Hz), 0,89 (s, 9H) , 0, 82 (d 3H, J = 6,9 Hz), 0,05 (s, 6H) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) δ: 172,1, 131, 1, 124, 1 , 122 ,5 107 ,4, 71,5, 36,5, 33 ,7, 30, 8, 26,0, 21, ,3, 20,0, 16,1, r 4,3 , -4, r 4 . Síntese do intermediár io 28a

OTBS

A uma solução de amina 27a (918 mg, 2,27 mmol) em DCM/DMF (10:1, 39,6 mL) , uma solução de ácido (Z)—3 — tributilstannilproprenóico (1028 mg, 2,84 mmol) em DCM seco foi adicionada, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. Diisopropiletilamina (DIPEA) (0,6 mL, 3,4 mmol), l-Hidroxi-7-azabenzotriazole (HOAt) (310 mg, 2,27 mmol), e hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-l-il)urónio (HATU) (860 mg, 2,27 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacçao foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4CI, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) para dar a amida 28a (1 110 mg; rendimento 66%) como um óleo. 1E RMN ( CDCI3, 300 MHz) δ: 7,63 (d , 1H, J = = 10,5 Hz), 6,97 (d, 1H, J = 12 1,3 Hz) , 6,75 (d, 1H , J = = 12, ,3 Hz), 6,72 (t, 1H, J = 9,5 Hz ), 6,50 (d, 1H, J = 9, 0 H z) , 5,56 (t, 1H, J = 6,6 Hz), 4, 83 (q, 1H, J = 9,0 Hz ) , 4, 41 (d, 1H, J = 9,6 Hz) 3,76 (m, 1H) , 2,17 (m, 4H), 2, 01 (s, 3H) , 1,45 (m, 6H) , 1,25 (m, 8H) , 1,0 (s, 9H), 0,8 8 (s, 9H) , 0,84 (m, 1 3H) , 0,06 (s, 6H) . 67 Síntese do intermediário 28b

67 OTBDPS

A uma solução de amina 27b (575 mg, 1,17 mmol) em DCM/DMF (4:1, 12,5 mL) , uma solução de ácido (Z) —3 — tributilstannilproprenóico (505,6 mg, 1,4 mmol) em DCM seco foi adicionada, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (0,243 mL, 1,76 mol), 7- hidroxibenzotriazole (HOBt) (189,2 mg, 1,4 mmol), e HATU (532,28 mg, 1,4 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) para dar a amida 28b (780, 4 mg; rendimento: 77%) como uma espuma branca. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7, 70-7, 68 (m, 4H) , 7, 43-7, 36 (m, 6H), 7,02 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,66 (t, 1H, J = 9,3 Hz), 6,26 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5,57-5,34 (m, 1H), 5,38-5,28 (m, 1H), 4,83 (dd, 1H, J = 16,5, 7,8 Hz), 4,31 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3, 89-3, 82 (m, 1H) , 2,26-2, 02 (m, 4H) , 1,50-1, 42 (m, 6H) , 1,43 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,33-1,20 (m, 6H), 1,06 (s, 9H), 0,96 (s, 9H), 0,95-0,83 (m, 15H). 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 168,0; 166,2; 153,8; 136,3; 136,1; 134,3; 130,0; 127,8; 126,7; 126,0; 121,6; 109,0; 72,6; 60,7; 35,7; 34,0; 32,7; 29..5; 27,7; 27,2; 26,7; 19,5; 14,0; 13,2; 11,8. Síntese do intermediário 28c 68

(10:1, 7,7 mL), uma solução de ácido (Z)-3- tributilstannilproprenóico (197,2 mg, 0,546 mmol) em DCM seco foi adicionada, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (0,11 mL, 0,655 mmol), HOAt (59,4 mg, 0,437 mmol), e HATU (166 mg, 0,437 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/ EtOAc de 20:1 a 15:1) para dar a amida 28c (250 mg, rendimento: 78%) como uma espuma branca. XH RMN (CDC13, 300 MHz ) δ : 7, 94 (d, 1H, J = 10,8 : Hz) f 7 0 0 (d, 1H, J = 12 ,3 Hz) , 6, 75 1 (d, 1H, J = 12,3 Hz) , 6, 72 (t, 1H, J = 9,5 Hz) , 6 ,50 (d, 1H, J = 9 ,0 Hz; ) , 5, 56 (t , J = 6,6 Hz, 1H) , 4,83 (q, 1H, J = 9,0 Hz) , 4,4 :1 (t ., 1H, J = 9, 0 Hz) , 3, 76 (m, 1H) , 2, 17 (m, 4H ) , 2,01 (s, 3H) , 1, 45 (m, 7H) , i, 25 (m, 8H) , 0, 88 (s, 9h; ) , 0,84 (m, 19H) , 0, 06 (s, 6H) • 13C- -RMN (CDCI3, 75 MHz) Ô: 16! 3,2, - 166 ,8, 153,8 f 13 6 ,2, 131 ,1, 123,9, 122 108 ,7, 71, 6, 59,2, 36, 5, 33, ,7, 3 1 ,4, 29, 5, 29,4, 27, 6, 26,1 , 2 1,3, 19 ,5, 18,5, , 18, 3, 14 , 0, 1 1 ,8, -4,3, -4,4. Síntese do intermediário 28d 69

OTBS

A uma solução de amina 26d (44 mg, 0,1 mmol) em DCM/DMF (10:1, 1,3 mL) , uma solução de ácido (Z)-3-tributilstannilproprenóico (45 mg, 0,125 mmol) em DCM seco foi adicionado, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (26 pL, 0,15 mmol), HOAt (13,6 mg, 0,1 mmol), e HATU (38 mg, 0,1 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) para dar a amida 28d (60 mg, rendimento: 80%) como um óleo. XH ] RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7 ,43 (d, 1H, J = ] L0,8 ! H 2 0, 7, 34- 7,22 (m, 5H), 7,02 (d, 1H, J = 12,3 Hz) , 6, 70 (d, 1H, J = 12, 3 Hz), 6,66 (dd, 1H, J = 9,9, 9, 3 Hz) 1 , 6, 34 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 5,51 (dd, 1H, J = 8,1, 7, 5 Hz ) , 4 , 81 -4, 71 (m , 2 h) , 3,68-3,59 (m, 1H), 3,18 (dd, 1H , J = = 13, 5, 6 Hz), 2 ,69 (dd , 1H, J = 13,5, 8,4 Hz) , 2,11-2 ,04 (m, 2 h ) , 2, 01 (s, 3H) , 1,96-1,87 (m, 1H) , 1, 80-1,70 (m, 1H) , 1, 53- 1, 43 (m, 8H) , 1,31-1,24 (m, 10H) , 0, 89-0,85 (m, 9H) , 0, 88 (s, 9H), O O 4 (s, 3H), 0,01 (s, 3H). 13c RMN (CDCI3 75 MH 2 0 δ: : 168,5, 16 ( 5,5, 15· 4,4 , 136 ,7, 135 ,9, 131,0, 129, 5, 1 .29,1 , 127,4, r 12' 4,0, 12 2,3 , 108 ,8, 71, 5, 55,1, 38 , 8, 36,6, 33,3 :, 29,5, 29,4 , 27, , 6, 26, 0, 21 ,3, 18, 2, 14,0, l: 1,8, -4,3 , -4 ,5. MS (ES) m/ z 78 1,2 [M+H]+, 803,2 [M+Na]+ Síntese do intermediário 28e

70 OTBS

A uma solução de amina 27a (30 mg, 0,075 mmol) em DCM/DMF (10:1, 1 mL), uma solução de ácido (E)-3- tributilestanilproprenóico (33,5 mg, 0,095 mmol) em DCM seco foi adicionada, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (19 pL, 0,11 mol), HOAt (10 mg, 0,075 mmol), e HATU (27,5 mg, 0,075 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc 6:1) para dar a amida 28e (25 mg, rendimento: 45%) como um óleo. ΧΗ RMN (CDCI3, 300 MHz; 1 δ: 7 ,68 (d, 1H, J = 9,2 Hz) , 7 , 52 (d, 1H, J = 18 , 9 Hz ) , 6,73 (t, 1H, J = = 9, 2 Hz) , 6, 28 (d, 1H, J = 10, 8 Hz ) t 6, 25 (d, 1H, J = 18 ,9 Hz) , 5,60 (t, 1H , J = 7,2 H z) , 4,83 (q, 1H , J = 9,2 Hz) , 4, 40 (d, 1H , J 9,6 Hz), 3, 77 (m, 1H) , 2, 17 (m, 4H) , 2, , 01 (s , 3H) , 1, 45 (m, \—1 ÍÍG 25 (m, 8H) , 1, 0 (s, 9H) , 0, 88 (s, - 9H) , 0, 84 (m, 13H), 0 , 06 (s, 6H) . EXEMPLO 8 O esquema 5 proporciona a síntese de diversas compostos da invenção. 71

CuTC, NiMiP i? <Z)-2Sa «=T8S, Y=Cf, R2~ lBu (Z)-28b R=T8DPS, Y^H, R2-(2)-28c R=T8S, Y~ Cf» R2- ‘Pr {Z)-2Sd R-TSS, Y“ Cf» R2=CH2Ph (E}*2Se RsTSS, Y~Gi, Rj^Bu

{?E,9Z,1l2)~29b RaTBOPS, R2~!i«, X*ÕMe, Y«H (7E.92,112)-290 RwTBS, R^Pr, X«CMe, Y~Ci (TE.SZ.HZhZad R=TBSf CH#h> X=€XWet Y=Cf (7Ê»92,11 E}-2®® R=TBS, %=*8ΐί, X=OWe, Y=C! (7E,92,11Z)-29f R-TBS, R2= 'Bu, Χ^Η, YsÇÍ

T8AF ΪΝΡ

CljCCONCO, DCM AI2O3

{7E,9211Z)-30a R2“ *Bu, X=ON5«, Y=CS {7E,9Z,11Z)-30b 83* *8«, X-OSte» Y=H {?E,92t12>3Ge R2^Pr, X^OSfe, YaCI {7E,92,112|-38el CH#h, X«OMe, Y«Cl í7E,9Zri£).3£ki X-O&te» Y=CI {7ET9Z,1t2}-30f %= *Bu, X=H» Y=C1

{7E.92,tlZ)- Composto 1 R2= *Bu, X^OUfte, Y~Cf Í7B.9ZMZ)- Composto 4 «2= 'Bu, X^Ô!Ye, Y«H Í7E(SZ,11ZJ~ Composto 5 RasJpr, XaQMe, Y*C1 |7Ε.3Ζ,11Ζ^ Composto 31 R2-CH2Ph( X“OMe, Y-Cf ξ7Ε,9Ζ,11Ε)- Composto 8 R2= *6«, XOÃte, Y=Ci 72

Esquema 5 Síntese do Composto 29a

A uma solução de alquenilestanano 28a (1,1 g, 1,47 mmol) e 17a (0,62 g, 1,77 mmol em 1-met il-2-pirrolidinona (NMP) (14,7 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (CuTC) (422 mg, 2,2 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,5 N (3x15 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de5: 1 a 1:1) para dar trieno 29a (0,66 g, rendimento: 66%) como um óleo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7,89 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,22 (dd, 1H , J = 12,3, 11 ,4 Hz), 6 ,86 (dd, 1H, J = 11,7 , 11,4 Hz) , 6, 7 0 (dd, , 1H, J = 9,9 , 9, 3 Hz), 6,35 (d , 1H , J = 9,3 Hz) , 6, 13 (d, 1H, J = 11, 4 Hz) , 5,66 (d, 1H, J = 11, 4 Hz) , 5,60 (dd, 1H, J = 5 , 4, 3,9 Hz) , 5,55 (t 1 , 1H, , J = = 7, 8 Hz) , 5, 26 (d , 1H, J = 10 ,2 Hz) , 4, 84 -4,76 (m, 1H) , 4,3 (d, 1H, J = 9, 3 Hz), 4, 20-4,: 16 (m, 1H) , 3,77-3,69 (m, 1H) , 3, 63 (s, 3H) , 2, 89-2,77 (m, 1H), 2, 41-2 ,33 (m, 2 h) , 2,19 -2, 13 (m, 4H) , 2, 0 0 (s, 3H) , 1,82 (s, . 3H) , 1,13 (d. , 3H, J = 6, 9 Hz) , 1, 02 (s , 9H), 0,86 (s, 9H) , 0,4 (s, 3H), 0,03 (s, 3H) • 13c-rmn (CDCI3 ;, 75 MHz) δ : 168,5; 166, 4; 161, E 5; 145,4; 140, 3, 137,3; 134, 4; 134, 3; 131,0, 124 ,3; 124, : 1, 122,4; 121, 2; 108,7; 108, 4; 82,0; 71, 6; 6 0,6; 55,6 ; 37 ,5; 36,5, 35,1; 33,8; 26,5; 26,0; 21,3, 18,3, 17,4, 16,9, -4,3, -4,4. Síntese do Composto 29b 73

A uma solução de alquenilestanano 28b (780,4 mg, 0,904 mmol) e 17a (377, 4 mg, 1,085 mmol) em NMP (9 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (258,5 mg, 1,36 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/ Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,5 N (3 x 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 5:1 a 1:1) para dar o trieno 29b (459,7 mg, rendimento: 66%) como um óleo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7, 66-7, 64 (m, 4H) , 7, 43-7, 32 (m, 7H) , 7,23 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,85 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,62 (dd, 1H, J = 10,5, 9,3 Hz), 6,41 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 6,11 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,60 (dd, 1H, J = 5,7, 5,1 Hz), 5,49-5,41 (m, 1H), 5,32-5,27 (m, 1H), 5,25 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,83-4,75 (m, 1H), 4,32 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,22-4,15 (m, 1H), 3,83-3,78 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 2,86-2,78 (m, 1H), 2,40-2,35 (m, 2 h), 2,20-2,04 (m, 4H) , 1,81 (s, 3H) , 1,40 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,13 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,03 (s, 9H), 0,97 (s, 9H). 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 168,3; 166,3; 161,8; 145,4; 140,2, 137,3; 136,1; 134,8; 134,4; 134,3; 129,9; 127, 8,-126, 4; 126,1; 124,4; 121,7; 121,2; 108,4; 109,1; 82,0; 72,6; 60,6; 55,6; 37,5; 35,2; 32,7; 31,1; 27,2; 26,8, 26,5; 19,5; 17,4; 16,9; 13,1. Síntese do Composto 29c 74

A uma solução de alquenilestanano 28c (250 mg, 0,34 mmol) e 17a (142 mg, 0,409 mmol) em NMP (2,5 mL) a 0 °C, Tiof enocarboxilato de cobre (97 mg, 0,51 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/ Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 a 0,5 N (3 x 10 mL). A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 10:1 a 6:1) para dar 0 trieno 29c (150 mg, rendimento: 67%) como um ó leo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 8 ,21 (d, 1H, J = 10,8 Hz) , 7, 28 (t, 1H, J = 1 1/ 7 Hz) , 6,88 (dd , 1H, J = 11,7, 11, 4 Hz ) , 6,72 (dd, 1H, J = = 10,2, 9,3 Hz) , 6,42 (d, 1H, J = = 8,4 Hz ) , 6,15 (d, 1H, J = 11. 7 Hz) , . 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz) , 5, 61 (dd, 1H, J = 5 ,7, 3,6 H z) , 5 , 56 (t 1, 1H, J = 8, 1 Hz) , 5, 27 (d, 1H, J = 9, 9 Hz) , 4 , 85-4, , 77 (m, 1H), 4,30 (dd , 1H, J = 8,1, 7,5 Hz) , 4, 24-4,1 6 (m, 1H) , 3,79-3,72 (m, 1H) , 3, 6 6 (s, 3H), 2,88- -2, 8 0 (m, 1H) , 2, 42-2,37 (m, 2 h) , 2, 18- -2, 14 (m, 5H), 2,00 (s , 3H) , 1,83 (s, 3H), 1,14 (d, 3H J = = 6 ,9 Hz) , 0,97 (d, 3H , J = 6,6 f lz) , 0,96 (d, 3H, J = 6, 6 Hz ) , 0, 86 (s, 9H), 0,4 (s, 6H) . 13C-RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 169,2 166,8; 161,8; 145,4; 140,5, 137,7; 134,6; 134,3; 131,0, 124,3; 124,2, 122,6; 121,2; 108,6; 108,4; 82,0; 71,5; 58,9; 55,6; 37,5; 36,4; 33,8; 30,8, 26,5; 26,1; 21,3, 19,6, 18,5, 18,3, 17,4, 16,9, -4,3, -4,4. Síntese do Composto 29d 75

A uma solução de alquenilestanano 28d (60 mg, 0,08 mmol) e 17a (32,4 mg, 0,09 mmol) em NMP (1 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (22 mg, 0,12 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50: 50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,5 N (3 x 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 4:1 a 1:1) para dar o trieno 29d (13 mg, rendimento: 25%) como um óleo. RMN (CDC13, 300 MHz) Ô: 7,59 (d , 1H, J = 11, 1 Hz) , 7 ,33- 7, 24 (m, 5H) , 7,23 (t, 1H, J = 11 , 7 Hz ) , 6, 90 (dd, 1H, J = 11 , 7 11 f r 4 Hz) f 6, 66 (dd, 1H, J = 10,5, 9 Hz ) , 6, 24 (d, 1H, J = 7,2 H z) , 6 ,,17 (d, 1H, J = 12, 0 Hz) , 5 , 63 -5, 58 ! (m, 2 h) , 5, 51 (td, 1H, J = 7,8, 1,2 Hz ), 5 ,28 (d, 1H , J = : 10,8 Hz) , 4, 79 -4,67 (m, 2 h) , 4,24-4,17 (m, 1H) , 3, 66 (s, 3H) , 3 , 65- 3, 62 (m, 1H) , 3,22 (dd, 1H, J = 13,5, 6 ,3 Hz) , 3, 04 (dd, 1H r J = : 13,8, 8,4 Hz) , 2,89-; 2, 81 (m, 1H) r 2,43- 2,37 (m, 2 h) r 2, 11- -2,04 (m, 2 h) , 2,00 (s, 3H) , 1, 84 (s, 3H) , 1 ,93- 1, 72 (m, 2 h), 1,16 (d, 3H, J = 6, 9 Hz) , 1 0,86 (s, 9H) , 0,03 (s, 3H), 0,01 (s, 3H). 13c RMN (CDCI3, 75 MH z) Ô: 168,4, 166, 5, 161,7, 145, 5, 140 ,8, 138, 1, 136,8, 134, 5, 134,3, 131, 0, 129,5, 129, 1, 127 ,4, 124, 2, 124,1, 122 ,3, 120,4 , 108 , 7, 108,3, 82, 0, 71, 4, 55,7, 54, 9, 38,3, 37 ,5, 36,6, 33,4, 26, ,5, 26,0 , 21, 3, OO \—1 2, 17,4, x—1 OO 1 CD -4 ,4. MS (ES ) m/z 711 ,2 [M+H] + 76 Síntese do Composto 29e

A uma solução de alquenilestanano 28e (50 mg, 0,067 mmol) e 17a (28 mg, 0,08 mmol) em NMP (1 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (19,1 mg, 0,10 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,5 N (3 x 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 5:1 a 1: 1) para dar o trieno 29e (33 mg, rendimento O LO %) c :omo um óleo • 1H RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7, 73 (d , 1H, J = 11,4 Hz) , 7,70 (dd, 1H, J = 1 .4,1, 11,7 Hz ) , 6, 71 (dd , 1H J = = 9,9 , 9, 7 Hz), 6,30 (d, 1H, , J = 9,3 Hz), 6, 13 (d , 1H, J = 12,9 Hz) , 6,04 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz) , 5,93 l :d, 1H, J = 15, 0 Hz) , 5, 63 (t 1, 1H, J = 4,5 Hz) , 5 , 58-5 , 53 (m, 1H) , 5, 34 ( :d, ih, J = 9,9 Hz), 4, 85-4, 78 ( m, 1H) , 4, 41 (d, 1H, J = 9,3) , 4,24 -4,16 (m, 1H), 3,77-3 ,72 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2,90- OO CM (m, 1H), 2,45-2,41 (: m, 2 h) , 2, 19-2,12 (m, 4H) , 2,01 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1, 16 (d, 3H, J = 6,6 Hz) , 1, 02 (s, 9H) , 0,87 (s, 9H), 0,06 (s , 3H), 0 ,04 (s, 3H) . 13C RMN (CDC1 3, 75 MHz) δ: 168, 5, 166,1, 161, 8, 145,4, 140, 7, 138,0, 135,3, 134 ,9, 131, 1, 125,8, 124, 9, 124,0, 122, 4, 108,7, 108,5, 81,9 71,6, 60 ,9, 55,f 5, 3 7,6, 36,5, 77 35,2, 33,8, 29,9, 26,8, 26,1, 21,3, 18,3, 17,3, 16,9, -4,3, -4,4. Síntese do Composto 29f

A uma solução de alquenilestanano 28a (60 mg, 0,083 mmol) e 17b (29 mg, 0,09 mmol) em NMP (0,9 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (24 mg, 0,12 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/ Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,5 N (3 x 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 5:1 1 a 1: 1) para dar a amida 29f (27 mg, rendimento: 50%) como um óleo. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 7 ,62 (d, 1H, J = 10,5 Hz ) , 7,25 (dd, 1H , J = 12,6, 11,4 Hz) , 6,94-6, 84 (m , 2 h), 6, 73 (dd, 1H, J = : 10,5, 9,0 Hz) , 6,23 (d, 1H, J = _ ( 9,3 Hz) , 6 , 17 (d, 1H, J = 11, 4 Hz) , 6,06- 6,01 (m, 1H), 5, 66 (d, 1H , J = 11, 4 Hz) , 5, 60-5,55 (m, 1H) , 5,29 (d, 1H, J = = 9 ,9 Hz), 4, 88- 4, 80 (m, 1H) , 4,34 (d, 1H, J = 9, 3 Hz), 4, ,27- 4, 19 (m, 1H) , 3 ,79- 3, 72 (m , 1H) , 2,90 -2,81 (m, 1H), 2,3 16-2 ,3i 0 (m, 2 h) , 2 ,21- 2, 13 (m , 4H) , 2,03 (s, 3H) , 1,85 (s, 3H ) , 1,17 ( d, 3H, J = 6, 6 Hz) , 1,03 (s, 9H) , 1 0,89 (s, 9H), 0, C >8 (s, 3H) , 0 , 06 (s, 3H) . Síntese do Composto 30a 78

A uma solução de 29a (275 mg, 0,41 mmol) em THF (6 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (0,82 mL, 0,82 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com uma solução saturada aquosa de NH4CI e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 30a (175 mg; rendimento: 76 %) como um sólido branco. ΧΗ RMN (CDCI3, 300 MHz ) δ : 9,0 0 (d , 1H, J = 10, 2 Hz ) , 7, 25 (dd, 1H, J = 12,0, 11 ,4 1 Hz) , 6, 86 (dd, 1H, J = 11, 7, 11, 4 Hz) , 6,72 (dd , 1H, J = 9 ,6, 8 ,7 H: z) , 6 ,68 (d, 1H, . J = 8,7 Hz) , 6,13 (d, 1H, J = 11, 7 Hz) , 5, 68 (d ·, 1H, J = 11 , 4 Hz) , 5, 63 -5,58 (m, 2 h) , 5 i, 27 (d, 1H, J = 10,2 Hz) , 4, 85- 4, 76 (m, 1H), 4,42 (d, 1H, J = 9,3 Hz ) , 4, 25- -4, 17 (m, 1H) , 3 ,70- 3,69 (m, 1H), 3,63 (s , 3H), 3 ,48 (s 1, 1H) , 2, 89-2 ,75 (m, 1H) , 2,42-2,36 (m, 2 h) , 2,22 -2 , i: I (m, 4H) , 2, 04 ( s, 3H) , 1, 82 (s, 3H), 1,14 (d, 3H , J = 6 , 6 Hz) , 1, 03 (s, 9H) • O isómero (21S)- do Composto 30a foi obtido quando o processo sintético foi realizado partindo do fragmento racémico D. A mistura de isómeros final [(21S)-Composto 30a e (21R)-Composto 30a] foi separada por meio de HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C 18 7 μπι, 7,8 x 150 mm, gradiente H20:MeCN desde 50 até 60% de MeCN em 30 min, Detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((21 S)-30a): 15,4 min, tr ((21 R)-30a) :14,7 min]) e (21 S)-Composto 30a foi obtido em forma pura: 79

XH RMN (CDC13, 300 ΜΗζ) δ: 8,62 (d, 1Η, J = 10,2 Hz), 7,28- 22 (m, 1H), 6,93- hD OO to 1 (m, 1H) , 6, 81-6, 75 (m, 1H) , 6, 32 (d, 1H, J = = 9,0 Hz) , 6, 17 (d, 1H, J : = 11, 7 Hz) , 5,68 -5, 58 (m, 3H) , 5, 28 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4, 93-4 ,84 (m, 1H) , 4, 32 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25- 4,17 (m, 1H) , 3, 78-3,67 (m, 1H) , 3 ,66 (s, 3H) , 2,89-2, 81 (m , 1H), 2, 43- -2,38 (m, 2 h) , 2,28-2 ,20 (m, 4H) , 2,08 (s , 3H) , 1,84 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H J = 6,9

Hz), 1,02 (s, 9H). Síntese do Composto 30b

A uma solução de 29b (586 mg, 0,76 mmol) em THF (7,5 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (1,53 mL, 2 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1 e extraído com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 30b (320 mg, rendimento: 80 %) como um sólido branco. XH RMN (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 8,95 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,25 (t, 1H, J = 12,0 Hz), 6,85 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,73 (t, IH, J = 9,6 Hz), 6,57 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,12 (d, 1H, J = II, 4 Hz), 5,67 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,61 (dd, 1H, J = 5,4, 80 3,9 Hz) , 5,63- 5, 58 (m, 1H), 5, 44-! 5, 35 (m, 1H), 5,26 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4 ,86 (q, 1H, J = 8,1 Hz) , 4, 38 (d, 1H, J = 9,3 Hz) , 4, 24-4,16 (m, 1H), 3,81-3,71 (m , 1H) , 3,64 ( s, 3H), 2, 96 -2, 92 (m, 1H) , 2,86-2,79 (m, 1H) , 2, 41- 2,37 (m , 2 h), 2, 28 -2, 14 (m, 4H) , 1,82 (s, 3H) , 1,61 (d, , 3H, J = 6 ,6 Hz), 1, 14 (d , 3H, J = 6, 6 Hz), 1, 02 (s, , 9H) . 13c-rmn (CDCI3, , 75 MHz) δ: 168, 7; : L 6 6, 6; 161,8; 145,4; 140, 3; 137,5; 134, 4; 134,3 ; 127 , 7; 126 ,0; 124,4; 123,7; 121, i; 108,9; 108, 4; 82,0; 72,1; 60, 9; 55, 7; 3 7,6 ; 35,0; A uma solução de 29c (150 mg, 0,23 mmol) em THF (4,8 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (0,45 mL, 0,45 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 30c (90 mg, rendimento: 73 %) como um sólido branco. χη : RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 9, 16 (d, 1H, J = = 10, 2 Hz) , 7, 26 (dd , 1H J = 12,0, 11, 1 Hz) , 6, 87 (dd, 1H, J = : 11,7, 11 , 4 Hz) , 6, 79-6,70 (m, 2 h) , 6,14 (d, 1H , J = : 11, 7 Hz) , 5, 68 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5, , 63-5, 58 (m, 2 h), ! 5,27 (d, 1H , J = 9,6 Hz) , 4,85- -4, 76 (m, 1H), 4 , 35 (dd, 1H, J = 8, 4, 7,5 Hz) , 4,24-4, 17 (m, 1H) , 3, 70- 3,69 (m, 1H) , 3,63 (s, 3H), 3, 43 (s 1, 1H) , 2, 89- 2,76 (m, 1H), : 2,42-2,36 (m, 2 h) , 2,21 -2, 14 (m, 4H) , 2, 03 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1, 13 (d, 3H J = = 6 ,9 Hz) , 0, 96 (d, 6H, J = 6, 6 Hz) 34,8; 33,2; 26,9; 26,5; 17,4; 16,9; 13,3. Síntese do Composto 30c

81 h-1 LO 0 1 RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 169,7, 167, 1, 161,8, 145, 4, 140 ,5, 137,8, 134, 6, 134,2, , 131,6, 124 ,4, 123,9, 123, 8, 120 ,7, 108,5, 108, 4, 82,0, 59, 1, 55, -7, 37, 5, 36,4, , 33, 5, 31,0, 26,5, 21,3, 19,5, 18,7, 17,4, 16,8. MS (ES) m/z 549,0 [M+H]+, 571,1 [M+Na]+ Síntese do Composto 30d

mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (0,03 mL, 0,03 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álco ol 3 Od (6 mg, rendimento: 65%) como um sc ilido branco • 1H RMN (CDCI3, 300 MHz ) δ: 8, 54 (d , 1H, , J = 9,9 Hz) , 7, 34- 7, 23 (m , 5H) , 7,20 (t, 1H, J = 11, .7 Hz), 6,89 (dd, 1H, J = 11, 7 , 1 1,4 Hz ), 6,72 (dd, 1H, J = = 9,9, 9,3 Hz) , 6 ,27 (d, 1H, J = : 8,1 H z), 6,17 (d, 1H J = = 11,7 Hz) , 5,63-5 , 53 (m, 3H) , 5, 28 (d, 1H, J = = 10 r 2 Hz) , 4,84-4, . 76 (m, 1H) , 4, 75- 4, 68 (m, 1H), 4 :, 25-4, 17 (m, 1H), 3, 6 6 (s, 3H) , 3,67-3 , 65 (m, 1H) , 3, 18 (dd , 1H, J = 13,8 , 6,3 Hz) , 3, 06 (dd, 1H, . J = 13,8 , 8 ,1 Hz), 2,89-2, 81 ( m, 1H) , 2,43-2, 38 ( m, 2 h) , 2, 15- 2, 10 (m, 3H) , 2,06 (: 3, 3H), 1,92 !-l,87 (m, 1H), 1 , 84 (s, 3H) , 1, 16 (d, 3H, J = 6,6 Hz) . 13C RMN (CDC1 3, 75 MHz) Ô: 168, 6, 166 , 6, 160,8, 145 ,8, 140, 8, 138,1, 136,8, 134 , 6, 134, 2 , 129 , 6, 129,0, 127 ,2, 124, 1, 124,0, 123,4, 120,4 , i 08,3, 108,2, 82, 0, 71,6 , 55 ,7, 82

55,0, 38,4, 37,5, 36,4, 33,0, 26,5, 21,3, 17,4, 16,9. MS (ES) m/z 597,2 [M+H]+. Síntese do Composto 30e

A uma solução de 29e (32 mg, 0,047 mmol) em THF (1 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (0, 094 mL, 0,094 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 30e (14 mg, rendimento: 55%) como uma espuma branca. ΧΗ RMN (CDCI3, 500 MHz) δ : 8 ,97 (d, 1H, J = 10, 2 Hz) t 7, 71 (dd, 1H J = 14 :,7, 11,7 Hz ) , 6,74 (dd, 1H J = = 9, 3, 9, 9 Hz ) , 6,57 (d , 1H, J = 9,0 Hz) , r 6 ,15 (d, 1H, J = 11, 7 Hz) t 6, 03 (dd, 1H l, J = 11,7, 11,4 Hz ), 5,95 (d, 1H, J : 14, 7 Hz ) , 5, 65 -5, 58 (m, 2 h) , 5,35 (d, 1H, J = 9,9 Hz) , 4, 87-4, 78 ( m, 1H) , 4, 42 (d, 1H, J = 9, - 3) , 4,25- 4, 18 (m, 1H) r 3,72· -3, 68 (m, 1H) , 3,65 (s, 3H), 3, , 25 (s 1, 1H) , 2,87 -2, 79 (m r 1H) , 2, 45 -2, 40 (m, 2 h), 2,23- -2, 12 (m, 4H) , 2,04 (s r 3H) t 1, 89 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H, J = 6, 6 Hz).1 ,03 ( s, 9H). 13c RMN (CDCI3 , 75 MHz) Ô: 168,8, 166 ,5, 161 ,6 8, 1' 15, 3, 140, 9, 138,2, 135 ,4, 134 ,7, 132,0 , 125 ,68, 12 4, 6, 1; 23, 9, 123, 6, 108,6, 108 ,4, 81, 9, 71,7, 61,3, 55, 7, 37 ,5, 36, 5, 36,3 , 3 4,9, 33 ,3, 26,9, 2 6,7 , 21,3, 17, 0 , 16, 7 . MS ( ES) m/z 56 3,3 [M+H]+, 58 5,2 [M+Na]+ Síntese do Composto 30f 83

A uma solução de 29f (28 mg, 0,04 mmol) em THF (lmL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (0,09 mL, 0,09 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 30f (17 mg; rendimento: 75 %) como um sólido branco. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 9,05 (d, 1H, J = 10, 2 Hz) , 7 , 35 (m, 2 h), 7,0 (dd, 1H, J = 11, 7, 11,4 Hz), 6,73 (dd, 1H , J = 9, 6, 8, 7 Hz ), 6, 56 (d, 1H, J = 8,7 Hz) 1 , 6, 05 (m, 3H) , 5, 63 -5, 58 (m, 2 h) , 5 ,30 (d, 1H, J = 10, 2 Hz ) , 4, 78 (m, 1H) , 4, 50 (d, 1H, J = 9,3 Hz ), 3,68 (m, 1H) , 3 ,48 (s 1, 1H) , 2, 45 (m, 1H) , 2,42-2, 36 (m, 2 h) , 2, 22-2, 11 (m, 4H) , 2, 04 (s t 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1, ,14 (d, 3H J = 6, 6 Hz) , 1 , 03 (s, 9H). Síntese do Composto 1

A uma solução de 30a (300 mg, 0,53 mmol) em Diclorometano (7,5 mL) a 0 °C, isocianato de tricloroacetilo (TCAI) (76 μΐ, 0,64 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de 84 alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. O produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 2:1 a 1:2). O composto 1 (0,26 g, rendimento: 81%) foi obtido como um sólido branco e exibiu caracteristicas físicas e espectroscópicas (XH, 13C RMN e MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 2. 0 isómero (21S)— do Composto 1 foi obtido por qualquer destes dois métodos: A. - seguindo o mesmo procedimento partindo da mistura de isómeros (21R)- e (2 IS)-Composto 30a e separação final de (21 S)-Composto 1 por meio de HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C18 7 pm, 7,8 x 150 mm, gradiente H20:Me0H desde 50 até 100% de MeOH em 30 min, Detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [rt ( (21S)—1) : 19,2 min, rt ((21R)-1): 19,8 min]). B. - seguindo o mesmo procedimento como revelado para o composto 1, mas partindo de (21 S)-Composto 30a puro.

(21S)-Composto 1 XH RMN (CDC13, 500 MHz) δ: 8,69 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 7,30 (t, 1H, J = 11 , 5 Hz :), 6,90 (t, 1H, J = 11 . 5 Hz), 6,86 - 6,82 (m, 1H) f 6,34 (d, 1H, J = 9,0 Hz) , 6, 17 (d, 1H, J = 11,5 Hz) , 5, 6 6 (d, 1H, J = 11, 5 Hz ), 5,64- -5,62 (m, 1H) , 5 ,59- 5,56 (m r 1H) , 5,29 (d, 1H, J = 9,5 Hz) , 4,81 -4,77 (m, 1H) , 4, 50 -4, 45 (m, 1H) , 4,42 (d, r 1H, , J = 9, 5 Hz) , 4,25-4,2 0 (m, 1H) , 3, 6 6 (s, 3H) , 2,89-2, , 81 (m, 1H) , , 2,44- -2,31 (m, 5H) , 85 2,24-2,17 (m, 1H), 2,06 (s, J = 6,5 Hz), 1,04 (s, 9H). 13C-RMN (125 MHz, CDC13) δ: 145, 2, 140,2, 137, 4, 134, 1, 122, 4, 120,7, 108, 1, 104, 7, 34, 8, 32,5, 30,3, 26,7, 26,2, Síntese do Composto 4 ), 1 ,84 (s, 3H) KD \—1 \—1 (d, 3H 168, 4, 166, 1, 157,2, 148 ,3 134, 0, 132, ,0, 124,7, 124 ,2 00 \—1 O LO 60, 8, 55,4 , 37 ,2 21,0 17 1 16, 6 .

A uma solução de 30b (56 mg, 0,105 mmol) em Diclorometano (lmL) a 0 °C, isocianato de tricloroacetilo (15 pL, 0,126 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. 0 produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatograf ia em coluna (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). 0 composto 4 (57,6 mg, rendimento: 96%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características físicas e espectroscópicas (1H, 13

C RMN MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 3. Síntese do Composto 5

86 A uma solução de 30c (115 mg, 0,21 mmol) em Diclorometano (2 mL) a 0 °C, isocianato de tricloroacetilo (27 | 1, 0,23 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. 0 produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatograf ia em coluna (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) . O composto 5 (71 mg, rendimento: 57%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características físicas e espectroscópicas ^H, 13C RMN e MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 3. A mistura final de isómeros (15 mg) foi separada por meio de HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C 18 7 |m, 7,8 x 150 mm, gradiente H20:Me0H desde 50 até 70% de MeOH em 75 min, Detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [rt ( (15R)—7) : 18,15 min, rt ( (15S)—7]) : 19,62 min) e foi obtido 3,1 mg de (15R)-Composto 7 puro e 2,9 mg de (15S)-Composto 7 puro: 0 isómero (21S)- do Composto 5 foi isolado quando 5 foi purificado por meio de HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C8, gradiente H20:MeCN desde 45 até 50% de MeCN em 30 min, Detecção de UV, fluxo 4, 7 mL/min, [tr ((21S)-5): 21,6 min, rt ((21R)-5): 23,6 min). Partindo de uma amostra (50 mg) que continha ambos os isómeros, após separação a mencionada anteriormente foi obtido 39 mg de (21 R)-Composto 5 puro e 6,1 mg de (21 S)-Composto 5 puro.

(21 S)-Composto 5 87 1H RMN (CDC13 , 500 MHz ) δ: 8 ,74 (d, 1H, J = 10 ,5 Hz) , 7, 29 (dd, 1H , J = 11, 7, 11 ,4 Hz) , 6, 94 (dd, 1H, , J = 11,7, 11 ,4 Hz) , 6, 84 (dd, 1H, J = = 10,5 , 9, 3 Hz), 6 , 22 (m f 2 h), 5, 68 (d, 1H, J = ] L1,5 H z) , 5, 63 (m, 2 h), 5, 42 (d, 1H, J = 9 ,3 Hz) , 4, 81 (m, 1H) , 4,52 (m, 1H) ; 4, 41 (m. , 1H) r 4, 23 (m l, 1H) , 3,66 (s , 3H) , 2,91 (m, 1H) , 2,49 -2, 38 (m. , 3H) r 2, 35-2, 31 ( m, 2 h) , 2 ,24-2, 17 (m, . 2 h), 2, . 05 (s, 3H) , 1, 82 ( s, 3H) , 1, 15 (d, 3H J = 6, 6 Hz) , 0, 99 (d, 3H, J = 6,9 Hz) 0, 96 (d, 3H, J = 6, 9 H z) . MS (ES) m/ z 592,3 [M+H]+ Síntese dos compostos 31

A uma solução de 30d (5 mg, 0, 008 mmol) em Diclorometano (0,7 mL) a 0 °C, isocianato de tricloroacetilo (1,1 |1, 0, 009 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. 0 produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatograf ia em coluna (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). O composto 31 (3,5 mg, rendimento: 66%) f. oi obtido como um sólido branco RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: : 8,43 (d , 1H, J = 10,5 Hz) , 7,2 ! 9 — 7 ,19 (m, 6H,) , 6, 91 (< dd, 1H, J = 11,7, 11 ,4 Hz) , 6 ,77 (dd 1, 1H, J = 10,2 , 9, 6 Hz ) , 6,51 (d, 1H, J = 8,1 Hz) , 6,16 (d, 1H , J = 11,4 H z) , 5, 69· -5, 63 (m, 2 h) , 5, 59 -5, 54 (m, 1H) , 5, 31 (d, 1H, J = 9,3 Hz) , 5, •12 (s 1, 1H, ) , 4 ,91 -4, 84 (m, 1H) , 4, 76- 4,70 (m, 1H) , 4, 31- -4,13 (m, 2 h, CH- -5) , 3,66 (s, 3H) , 3 ,20 (dd, 1H, J = 13 ,5, 6,9 Hz) , 3,09 (dd, r 1H, J = 13, 5, 6,6 88

Hz), 2,89-2,81 (m, 1H), 2,48-2,35 (m, 2 h), 2,28-2,23 (m, 3H) , 2,05 (s, 3H), 2,01-1,90 (m, 1H) , 1,81 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H, J = 6,6 Hz). 13C RMN (CDC13, 75 MHz) δ: 168,9, 166,5, 161,9, 157, 1 145,4, 140,6, 137,9, 136,4, 134,4, 133,9, 132,1, 129, 7 128,8, 127,2, 124,6, 124,6, 122,7, 120,7, 108,5, 105, 6 82,1, 74, 8, 55, 7, 54,6, 38,7, 37,2, 33,1, 30, 5, 26,2, 21,2 17,3, 16,4.

A uma solução de 30e (13 mg, 0,023 mmol) em Diclorometano (1,7 mL) a 0 °C, isocianato de tricloroacetilo (3 μΐ, 0,025 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. O produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo para para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatograf ia em coluna (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). 0 composto 8 (14,3 mg, rendimento: 100%) foi obtido como um sólido branco e exibiu características físicas e espectroscópicas (XH, 13C RMN e MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 4. EXEMPLO 9 O Esquema 6 representa um processo sintético para diversos compostos da invenção.

89 TBSO TBSO 12

ElOjC'

MeO

Owe

TBSO

COjEt TBSO 32

TBSO 33

DMP DCM

TBSO 34

Oip(OEl>2 MeO^COsMe

TBSO

1) LiOH, Diox:H20 2) HCI/MeOH 35

OTBS

TBAF THF

TCAI OCONH2

Composto 3

Esquema 6 Síntese do intermediário 32 90

TBSO A uma solução de 4-fosfonocrotonato de trietilo (3,7 g, 14,66 mmol) e 18-coroa-6 (6,2 g, 23,46 mmol) em THF seco (59 mL) agitada sob atmosfera de árgon a -78 °C KHMDS (28,1 ml, 14,07 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 15 min, o aldeído 12 (2,35 g, 5,86 mmol) foi adicionado gota a gota e agitado durante 20 horas a temperatura ambiente. Então, a reacção foi extinta com solução de NH4C1 saturada (200 mL), e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi seca (Na2SC>4) e evaporada a pressão reduzida. A purificação por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 20:1 a 10:1) proporcionou 2,7 g (rendimento: 93 %) do trieno 32. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) δ: 7,31 (dd, 1H, J = 11,2, 15,3

Hz) , 6, 53 (d, 1H, J = = 1! d, 0 Hz), 6, 21 (dd, 1H, J = 11 ,7 13, 8 Hz ) , 5, 84 (d, 1H , J = 15,1 Hz) , 5, 61 (d, 1H, J = 9, Hz) , 4, 17 (m, 2 h) , 3 ,72 (m, 1H), 3 , 63 (m, 2 h) , 2,61 (m 1H) , 1, 78 (s, 3H) , 1, 67 (m, 2 h) r 1,26 (m, 3H), 0, 94 (d 3H, J = 6, 7 Hz: ), 0, 87 (s, 18H), 0, 01 (m, 12H) . Síntese do intermediário 33

HO

TBSO A uma solução de 32 (3,75 g, 7,54 mmol) em EtOH (38 mL) , p-toluenossulfonato de piridínio (663 mg, 2,64 mmol) foi adicionado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 17 horas. Então o solvente foi retirado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 4:1 a 1:1) proporcionando 2,11 g (rendimento: 73%) do álcool 33. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) Ô: 7,31 (dd, 1H, J = 10,8, 15,0 Hz), 6,52 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,23 (dd, 1H, J = 11,1, 15,0 Hz), 5,86 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 5,52 (d, 1H, J = 9,9 91

Hz), 4,18 (q, 2 h, J = 7,5 Hz), 3,72 (m, 3H), 2,73 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,68 (m, 2 h), 1,28 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,88 (s, 9H), 0,08 (m, 6H). Síntese do intermediário 34

TBSO O álcool 33 (130 mg, 0,34 mmol) foi agitado a temperatura ambiente em DCM (3,4 mL) sob uma atmosfera inerte e periodinano (DMP) (288,5 mg, 0,68 mmol) foi adicionado numa porção. A reacção foi agitada até conclusão (TLC, aproximadamente 1 hora) e então foi extinta com NaHCCb. (solução saturada), extraído com DCM, lavada com salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. O produto foi purificado por meio de cromatografia em coluna eluindo com EtOAc/Hexano 1:4 para proporcionar aproximadamente 125 mg (rendimento: 96%) de aldeído 34 como um óleo incolor. 1 H-RMN (300 MHz, CDC13) δ: S 1,79 (s, 1H) r 7,3 1 (dd, 1H, J = 11,1, 15, 3 Hz), 6,52 (d, 1H, J = 15, 3 Hz) t 6,25 (dd, 1H, J = 11,1, 15,3 Hz), 5, 87 (d, 1H, J = 15, 3 Hz) , 5, 48 (d, 1H, J = 10 ,5 Hz), 4,19 (q, 2 h , J = ' 7, 2 Hz) t 4, 03 (m, 1H) , 2,69 (m, 1H) , 2,54 (m, 2 h) , 1, 80 (s r 3H) r 1,29 (t, 3H, J = 6, ,9 Hz ), 1,01 (d, 3H, J = 6,9 Hz) t 0,88 (s, 9H), 0,06 (m, 6H). Síntese do intermediário 35

C02Me § I TBSO A uma solução de fosfonato (170 mg, 0,67 mmol) e 18-coroa-6 (357 mg, 1,35 mmol) em THF seco (10 mL) agitada sob atmosfera de árgon a - 78 °C KHMDS (1,34 ml, 0,67 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 15 min uma solução de aldeído 34 (170 mg, 0,45 mmol) em THF seco (8,5 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 30 min e agitada a - 92 78 °C durante 90 min. Então, a reacção foi extinta com solução de NH4C1 saturada, aquecida até temperatura ambiente e diluida com Diclorometano. A fase orgânica foi seca (Na2S04) e evaporada a pressão reduzida. A purificação por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 20:1 a 10:2) proporcionou 170 mg (rendimento: 82%) de (E)-35. 1H- RMN (300 MHz, CDC13) δ: 7,29 (dd, 1H, J OO 0 \—1 II 15, 3 Hz ) , 6,50 (d, 1H, J = 15, 3 Hz), 6,19 (dd, 1H, J = 10, 8 t 15 ,0 Hz) , 5, 83 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 5 ,48 (d, 1H, J = = 10, 2 Hz ), 5, 33 (t, 1H, J ' = 7 ,2 Hz) , 4,17 (m, 2 h) f 3,71 (s , 3H) f 3, 61 (m, 1H) , 3,58 (s, 3H) , 2,73 (m, 1H) , 2, 57 (m, 2 h) f 1, 71 (s, 3H) , 1,25 (m, 3H) , 0,97 (d, 3H, J = 6,7 Hz) , 0, 88 ( s, 9H) , 0,03 (m, 6H) .

Sintese do intermediário 36

LiOH (15,8 mg, 0,66 mmol) foi adicionado a uma solução de éster 35 (140 mg, 0,30 mmol) em 20 % de água/Dioxano (7 mL) e a mistura foi agitada durante 4 horas a 60 °C. A mistura foi arrefecida, diluida com DCM e lavada com HC1 (0,5 N, 10 mL) . A fase aquosa foi repetidamente extraído com DCM e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e evaporadas para proporcionar o produto bruto di-ácido que foi utilizado na seguinte etapa sem purificação adicional. HC1 concentrado (43 pL) foi adicionado a uma solução de produto bruto em MeOH (5,2 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora a temperatura ambiente. Então o solvente foi retirado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 1:4 a EtOAc/MeOH 5:1) proporcionando 72 mg (rendimento: 70%) de ácido 36 como um óleo incolor. 93 1H-RMN (300 MHz, CDC13) δ: 7,40 (dd, 1H, J = 10,8, 15,0

Hz), 6,57 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 6,31 (dd, 1H, J = 11,4, 15,3 Hz), 5,89 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 5,60 (m, 1H) , 5,52 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4,22 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 2,90 (m, 1H), 2,38 (m, 2 h), 1,84 (s, 3H), 1,15 (d, 3H, J = 6,9 Hz). Síntese do Composto 37

A uma solução de amina 27a (37,6 mg, 0,093 mmol) em DCM/DMF (10:1, 1,3 mL), uma solução de ácido 36 (30 mg, 0,103 mmol) em DCM seco foi adicionado, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (26 pL, 0,14 mmol), HOAt (12,7 mg, 0,093 mmol), e HATU (35,4 mg, 0,093 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 3 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4CI, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 2:1 a 1:4) para dar a amida 37 (34,7 mg, rendimento: 55%) como um óleo. XH RMN (CDCI3, 500 MHz) δ: 7 OO OO (d, 1H J 10, 5 Hz) t 7,26 (dd, 1H J = 14,4, 11, 4 Hz) , 6i , 72 (dd, 1H, J = 9, 9, 9,6 Hz) , 6, 50 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6, 31-6, 22 (m, 2 h) t 5, 94 (d, 1H, J = 14 :,7 Hz), 5 ,61-5 ,54 (m, 2 h)( - 5, 44 (d , 1H, J = 9,9 Hz) f 4, 87- -4, 79 (m, 1H) , 4,45 (d, 1H , J = 9, 3) , 4 ,24- 4, 16 (m f 1H) , 3,77- -3, 44 (m, 1H) , 3, 64 (s , 3H), 2, 96- -2, 2.81 (m, 1H) r 2,39- -2,35 (m, 2 h) , 2, 16- 2, 15 (m, 4H) , 2, 01 (s, 3H) , 1, 82 (s, 3H) , 1,14 (d, 3H, J = = 6,6 Hz) .1, 02 (s t 9H) , 00 0 (s 9H) , 0,06 (s, 3H), 0,05 (s, 3H) . 94 Síntese do Composto 38

A uma solução de 37 (28 mg, 0,04 mmol) em THF (0,6 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, TBAF 1 M em THF (83 pL, 0,08 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraído com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) para dar o álcool 38 (22 mg, rendimento: 96%) como um sólido branco. XH RMN (CDC13, 500 MHz) δ: 9 , 06 (d, 1H, J = 9, 9 Hz) t 7 ,24 (dd, 1H f J = 14 ,7, 10,5 Hz), 6,76 (d, r 1H , J = = 9, 6 Hz) r 6 ,74 (dd, 1H f J = 9, 6 ; 9,6 Hz), 6 , 50 (d, 1H, J = 15, 3 Hz) r 6 , 25 (dd, 1H J = 1 .5,3 , 11,1 Hz) , 5, 99 (d, 1H, J : 14, 7 H z) , 5,65 -5, 60 (m, 2 h) , 5,45 (d, 1H, J = 9,9 Hz) , 4, 87 '-4, 81 (m, 1H) , 4, 45 i (d, 1H, J = 9,3), 4,2 4-4, , 16 (m, 1H) r 3, 74- 3 ,64 (m, 1H) f 3,64 (s, 3H), 3,22- -3,17 ' (m , 1H), 2 ,95 -2 ,2. 82 (m, 1H) , 2, 40 -2,35 (m, 2 h), 2,23-2, 16 (m, 4H) , 2, 05 (s f 3H) , 1, 81 (s r 3H) , 1 ,13 (d, 3H, J = 6, 6 H; 7-) , 1, 03 (s, 9H) . Síntese do Composto 3

A uma solução do Composto 38 (20 mg, 0,04 mmol) em Diclorometano (0,35 ml) a 0 °C, isocianato de

tricloroacetilo (5,1 pL, 0,04 mmol) foi adicionado. A 95 reacção foi agitada a 0 °C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida numa almofada de óxido de alumínio. O produto foi retirado por lavagem utilizando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (Hexano/EtOAc de 1:1 a 1:3). O composto 3 (13,6 mg, rendimento: 63%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características físicas e espectroscópicas ^H, 13C RMN e MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 3. EXEMPLO 10 O Esquema 7 representa um processo sintético para o composto 7.

pyr 39

40 41

HATU, HOAt DIPEA DCM/DMF

MeO

CuTC,17a

NMP O'

NH2 O Composto 7

Esquema 7 Síntese do intermediário 40 96 H2f

NH2 O A uma solução de Boc-terc-LeuCONH2 39 (preparados seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (1,9 g, 8,26 mmol) em MeOH, 66 mL de uma solução 1,25 M de HC1 em MeOH foi adicionada. A mistura de reacção foi agitada durante 2 horas a temperatura ambiente e então foi concentrada a pressão reduzida. 0 sólido foi então suspenso em MeOH e neutralizada com concentrados hidróxido de amónio. 0 solvente foi retirado por meio de evaporação giratória e o produto bruto foi dissolvido em diclorometano. A solução foi seca em Na2S04, filtrada e concentrada para dar 730 mg (rendimento: 68%) do intermediário 40 como um sólido branco. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6,65-6,55 (s 1, 1H) , 5,65-5,55 (s 1, 1H), 3,18 (s, 1H), 1,65-1,55 (s 1, 2 h) , 1,05 (s 9H) . Síntese do intermediário 41

A uma solução de amina 40 (100 mg, 0,77 mmol) em DCM/DMF (10:1, 7,7 mL), uma solução de ácido (Z)-3- tributilestannil- proprenóico (306 mg, 0,85 mmol) em DCM seco foi adicionada, sob atmosfera de árgon, e então foi arrefecida a 0 °C. DIPEA (0,27 mL, 1,54 mmol), HOAt (115,6 mg, 0,85 mmol), e HATU (323 mg, 0,85 mmol) foram adicionados à solução e após 30 min o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada 97 aquosa de NH4C1, deitada em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 10:1 a 1:1) para dar a amida 41 (228 mg, rendimento: 63%) como uma espuma branca. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 6 , 99 (d, 1H, . J = 12,3 Hz) 1 , 6 ,77 (d, 1H, J = = 12,3 Hz) , 6 ,47 (d, 1H, J = 9,6 Hz) , 6 , 3 í 3 (s 1, 1H) , 6, 12 (s 1, 1H) , 4 , 46 (d, 1H, J = = 9,9 Hz) , 1, 48-1 ,40 (m, 6H) , 1 ,31-1,19 (m, 12H) , 1 , 00 (s, 9H) , , 0,89 -0, 83 (m, 9H) . 13C : RMN (CDCI3, 75 MHz) δ: 173, 4, 16 6,6 , 153, 4, 136 , 6, 60, 0, 3 5,0, 29,6, 27 ,6, 26,8 , iz 1,0, 11, 7 . Síntese do Composto 7

A uma solução de alquenilestanano 41 (227,6 mg, 0,48 mmol) e 17a (200,9 mg, 0,58 mmol) em NMP (5 mL) a 0 °C, Tiofenocarboxilato de cobre (19,1 mg, 0,10 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a 0 °C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura bruta foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/ Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HC1 0,1%. A solução orgânica foi seca e evaporada para dar o produto bruto que foi purificado por meio de cromatografia em coluna (diclorometano/MeOH de 100:1 a 10:1) para dar Composto 7 (65,7 mg, rendimento: 34%) como uma espuma branca. Este produto sintético exibiu características físicas e espectroscópicas (ΧΗ, 13C RMN e MS) equivalentes a aquelas observadas no Exemplo 3. O isómero (15R)- do Composto 7 foi obtido quando uma mistura racémica do aminoácido (Boc- ferf-LeuCONH2) foi utilizado para levar a cabo estas reacções. A mistura final 98 de isómeros (15 mg) foi separada por meio de HPLC de fase reversa semi- preparativa (SymmetryPrep C 18 7 μπι, 7,8 x 150 mm, gradiente H20:Me0H desde 50 até 70% de MeOH em 75 min, Detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((15R)-7): 18,15 min, rt ( (15S) —7] ) : 19,62 min) e foi obtido 3,1 mg de (15R)-Composto 7 puro e 2,9 mg de (15S)-Composto 7 puro: 1H RMN (MeOD, 500 MHz) δ: 7,23 (dd, 1H, J = 12,5, 11,5 Hz), 6,94 (dd, 1H, J = 12,5, 11,5 Hz), 6,18 (d, 1H, J = 12,0 Hz), 5,91-5,88 (m, 1H), 5,86 (t, 1H, J = 4,5 Hz), 5,34 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,33-4, 28 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2,92- 2,88 (m, 1H), 2,47-2,44 (m, 2 h) , 1,85 (s, 3H) , 1,17 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,02 (s, 9H). 13C RMN (MeOD, 125 MHz) δ: 175,3, 168,6, 164, 0, 146,0, 140,8, 138,2, 135,4, 135,4, 125,5, 121,9, 111,1, 83,5, 61, 8, 55,9, 38,4, 35, 0, 27, 2, 27, 1, 17, 3, 16,8.

Me"

o (15J?)-Composto 7 EXEMPLO 11 O esquema 8 representa os processos para obter os compostos 42 e 43. 99

PhNCO

DMP, DCM

43

Esquema 8 Síntese do Composto 42

100 A uma solução de álcool 30a (5 mg, 8,8 |mol) em piridina (0,45 mL) , fenilisocianato (29 mL, 0,27 mmol) foi adicionado. A reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 20 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4C1 e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (Hexano/EtOAc de 20:1 a 1:1) para dar o composto 42 (2,7 mg, rendimento: 44%) como um sólido branco. XH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 8,81-8,77 (m, 1H) , 7, 46-7, 43 (m, 2 h), 7,34-7,23 (m,3H), 7,11-7,06 (m, 2 h), 6,88-6,77 (m, 2 h) , 6,39 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 6,10 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,67-5,57 (m, 3H), 5,27 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,85-4,78 (m, 1H), 4,62-4,56 (m, 1H), 4,54 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25-4,17 (m, 1H), 3,66 (s, 3H) , 2, 87-2,80 (m, 1H) , 2,41-2,38 (m, 5H) , 2,21-2,13 (m, 1H) , 2,08 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H J = 6,6 Hz), 1,07 (s, 9H). Síntese do Composto 43

O álcool 30a (5 mg, 8,88 pmol) foi agitado a temperatura ambiente em DCM (0,1 mL) sob uma atmosfera inerte e periodinano (7,5 mg, 0,018 mmol) foi adicionado numa porção. A reacção foi agitada até a conclusão (TLC, aproximadamente 1 horas) e então foi extinta com NaHC03 (solução saturada), extraída com DCM, lavada com salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. 0 produto foi purificado por meio de cromatografia em coluna eluindo com EtOAc/Hexano 1:1 para proporcionar 101 aproximadamente 4,5 mg (rendimento: 90%) de cetona 43 como um óleo incolor. 1H RMN ( CDC1; 3, 300 MHz) < 5: 8, 32 (d, 1H, , J = 9,9 H z) , 7 ,31- 7, 23 (m V 1H) , 6,9: L (dd, 1H, J = = 11, 7, 11, 4 Hz) , 6,8 4 (dd, 1H, J = = 9, 9, 8,7 Hz) , 6 , 26 (d, 1H, J = 8 , 7 Hz) , 6, 18 (d, 1H, J = 11 ,4 Hz) , 5,78-5 ,73 (m, 1H) , , 5 ,68 (d , 1H, J = 11, 4 Hz) , 5, 64- 5, 61 (m , 1H) , 5-3 0-5, ,21 (m, 1H ) , 4,94 -4, 86 (m, 1H) , 4, 41 (d , 1H, J = 9, 0 Hz ) , 4,25· -4, 17 ( ;m, 1H) , 3, 6 6 (s, 3H) , 3, 18 (dd, 4H , J = 18,3 , 7 ,2 Hz), 2, 89· -2,75 (m r 1H) , CM -2, 38 (m, , 2 h) , 2,04 (s, 3H) , 1, 84 (s, 3H), 1, 16 (d , 3H J = 6,9 Hz ) , 1,05 (s, 9h; 1 .

EXEMPLO 12: BIOENSAIOS PARA A DETECÇÃO DE ACTIVIDADE ANTITUMORAL O objectivo deste ensaio é avaliar a actividade citostática (capacidade de atrasar ou deter crescimento de célula tumoral) ou citotóxica (capacidade de matar células tumorais) in vitro das amostras sendo testadas.

LINHAS CELULARES

Nome N° de ATCC Espécie Tecido Características A549 CCL-185 humano pulmão carcinoma de pulmão (NSCLC) HT29 HTB-38 humano cólon adenocarcinoma colorrectal MDA-MB-231 HTB-26 humano mama adenocarcinoma de mama

AVALIAÇÃO DE ACTIVIDADE CITOTÓXICA UTILIZANDO O ENSAIO COLORIMÉTRICO SBR

Um tipo de ensaio colorimétrico, utilizando reacção sulforodamina B (SRB) foi adaptado para uma medição quantitativa de crescimento e viabilidade celular (seguindo a técnica descrita por Skehan P et al. J. Natl. Câncer Inst. 1990, 82, 1107-1112). 102

Esta forma de ensaio emprega microplacas de cultura de célula de 96 poços padrão SBS-standard (Faircloth et ai. Methods in cell Science, 1988, 11(4), 201-205; Mosmann et al, Journal de. Immunological. Methods, 1983, 65(1-2), 55-63) . Todas as linhas celulares utilizadas neste estudo, derivadas de diferentes tipos de cancro humano, foram obtidas da Colecção Americana de Culturas Celulares (ATCC).

As células foram mantidas em Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) complementado com 10% de Soro bovino fetal (FBS), 2 mM de L-glutamina, 100 U/mL de penicilina e 100 U/mL estreptomicina a 37 °C, 5% CO2 e 98% de humidade. Para as experiências, as células foram colhidas de culturas subconfluentes utilizando tripsinização e ressuspensas em meio fresco antes de contagem e inoculação em placa.

As células foram semeadas em placas de microtitulação de 96 poços a 5 x 103 células por poço em alíquotas de 150 pL, e permitidas que se unissem à superfície da placa durante 18 horas em meio livre de fármaco. Uma placa controlo (não tratada) de cada linha de célula foi fixa (como é descrito a seguir) e utilizada para valor de referência de tempo zero. Depois disso, as amostras de teste foram adicionadas às culturas em dez diluições seriadas, em alíquotas de 50 pL, variando desde 10 até 0,00262 pg/mL. Após 48 horas de exposição, o efeito antitumoral foi estimado por meio do método SRB: Brevemente, as células foram lavadas duas vezes com PBS, fixas durante 15 min em 1% de solução de glutaraldeído, enxaguadas duas vezes em PBS, e coradas em 0,4% de solução de SRB durante 30 min a temperatura ambiente. As células foram então enxaguadas diversas vezes com 1% de solução ácido acético e secas ao ar. SRB foi então extraído em 10 mM de solução de base trizma e a absorbância medida num leitor de placa espectrofotométrica automático a 490 nm. A sobrevivência celular foi expressa como percentagem de crescimento em relação às células controlo. O efeito final 103 da amostra sendo testada foi estimado aplicando o algoritmo NCI (Boyd MR e Paull KD. Fármaco Dev. Res. 1995, 34, 91-104) .

Utilizando a média ± DP de culturas triplicadas, uma curva dose-resposta foi automaticamente gerada utilizando análise de regressão não linear. Três parâmetros de referência foram calculados (algoritmo NCI) por meio de interpolação automática: GI50 = concentração que produz 50% inibição de crescimento; TGI = inibição de crescimento total (efeito citostática) e LC50 = concentração que produz 50% morte celular liquida (efeito citotóxico).

PROTOCOLO DE ENSAIO ANTI-MITÓTICO A razão mitótica das culturas celulares (percentagem de células paradas na fase de mitose) foi estimada utilizando um imunoensaio de microplaca de 96 poços especifico que detecta quantitativamente um marcador mitótico específico. As células HeLa (carcinoma de colo do útero-h, ATCC# CCL-2) foram incubadas durante 18 horas na presença ou ausência das amostras a serem testadas. Depois disso, as células foram lavadas com PBS e lisadas em gelo em 75 pL de tampão de lise recém preparado (1 mM de EGTA (pH 7,5), 0,5 mM de PMSF e 1 mM de NaVCh) durante 3 0 min. Uma aliquota do extracto celular (60 pL) foi transferida a uma placa de ELISA de superfície de ligação alta e seca num speed-vac durante 2 h a temperatura ambiente. As placas foram então bloqueadas em 100 pL. PBS-1% de BSA durante 30 min a 30 °C e sequencialmente incubadas com anticorpo monoclonal primário anti-MPM2 de ratinho (Upstate Biotechnology, n° de cat 05-368) durante 18 h a 4 °C e anticorpo secundário conjugado com peroxidase apropriado durante 1 h a 30 °C. Após a lavagem intensiva em 0,02% de Tween-20, a reacção de peroxidase foi realizada utilizando 30 pL de TMB (3,3',5,5'-tetrametil-benzidina) durante 30 min a 30 °C. A reacção foi interrompida pela adição de 30 pL de uma solução de H2S04 a 4%. O ensaio foi quantificado 104 pela medição da D. O. a 450 nm num espectrof otómetro de microplaca. Os resultados foram expressos como CI50, a concentração de amostra que produz 50% de paragem mitótica em culturas de células tratadas, em comparação com o controlo, culturas não tratadas.

Quadros 9 e 10 ilustram dados sobre a actividade biológica dos compostos da presente invenção.

Quadro 9. Ensaio de citotoxicidade - Dados de Actividade (Molar) _

Composto 1 Composto 2 Composto 3 Composto 4 MDA- MB-231 GIso 4,45E-10 9,85E-09 9,24E-10 6,13E-10 TGI 9,90E-10 2,15E-08 2,47E-09 1,49E-09 LC50 2,80E-09 7,20E-08 9,57E-09 8,23E-09 HT29 GIso 4,62E-10 8,31E-09 4,45E-10 < 4,31E-10 TGI 6,10E-10 1,09E-08 7,59E-10 9,28E-10 LCso 9,90E-10 1,72E-08 > 1,6 5E-0 7 1,12E-09 A5 49 GIso 3,79E-10 8,63E-09 1,02E-09 5,95E-10 TGI 1,09E-09 2,37E-08 4,29E-09 2,45E-09 LCso > 1,6 5E-0 7 1,65E-05 > 1,6 5E-0 7 > 1,6 4E-06

Quadro 9. (cont.)

Composto 5 Composto 6 Composto 7 Composto 8 MDA- MB- GIso 1,03E-10 4,90E-10 4,20E-07 3,46E-09 231 TGI 4,56E-10 3,21E-09 8,41E-07 1,01E-08 LCso 4,90E-09 1,55E-08 2,45E-06 4,12E-08 HT29 GIso 4,39E-11 5,91E-10 4,20E-07 2,14E-09 TGI 1,28E-10 1,01E-09 5,44E-07 3,13E-09 LCso > 1,6 9E-0 7 4,90E-09 8,16E-07 6,27E-09 A5 49 GIso 6,08E-11 7,60E-10 6,18E-07 3,63E-09 105 TGI 3,21E-10 > 1,6 4E-06 1,19E-06 1,30E-08 LCso > 1,6 9E-0 7 > 1,6 4E-06 > 2,47E-06 > 1,6 5E-0 6

Quadro 9. (cont.)

Composto Composto Composto Composto 29a 29d 29e 30a MDA- GI50 1,18E-06 1,10E-06 1,14E-06 1,95E-09 MB-231 TGI 2,80E-06 1,39E-06 1,48E-06 9,41E-09 LC5 0 6,20E-06 1,83E-06 2,07E-06 8,52E-08 GI50 6,05E-07 8,29E-07 2,07E-06 1,35E-09 HT29 TGI 1,42E-06 8,72E-07 2,21E-06 2,13E-09 LC5 0 4,43E-06 9,28E-07 2,36E-06 1,01E-08 GI50 8,86E-07 4,64E-07 1,15E-06 2,31E-09 A5 49 TGI 3,40E-06 8,01E-07 1,77E-06 1,37E-07 LC5 0 8,56E-06 1,38E-06 2,66E-06 > 1,78E-06

Quadro 9. (cont.)

Composto Composto Composto Composto 30b 30c 3 Od 30f MDA- GIso 2,08E-08 9,83E-10 3,10E-10 6,94E-07 MB-231 TGI 5,11E-07 5,83E-09 7,03E-10 1,07E-06 LC5 0 5,11E-06 5,28E-08 > 1,6 7E-0 8 1,61E-06 GI50 9,84E-09 4,74E-10 1,32E-10 4,88E-07 HT29 TGI 9,27E-08 8,38E-10 2,51E-10 7,13E-07 LC5 0 4,73E-06 > 1,8 2E-0 7 > 1,6 7E-0 8 1,05E-06 GIso 2,27E-08 7,10E-10 3,18E-10 4,88E-07 A5 49 TGI 3,22E-07 3,10E-09 1,06E-09 6,57E-07 LC5 0 > 1,89E-05 > 1,82E-07 > 1,6 7E-0 8 9,19E-07

Quadro 9. (cont.) 106 Composto 3 Oe Composto 31 Composto 37 Composto 38 MDA- MB-231 GIso 2,31E-08 7,50E-11 3,10E-06 6,04E-08 TGI 6,57E-08 1,50E-10 5,61E-06 > 1,78E-07 LCso 2,66E-07 3,59E-10 > 1,48E-05 > 1,78E-07 HT29 GIso 1,35E-08 4,06E-11 1,92E-06 3,91E-08 TGI 2,13E-08 1,02E-10 2,95E-06 6,39E-08 LCso 4,44E-08 > 1,56E-0 8 1,00E-05 > 1,78E-07 A5 49 GIso 3,55E-0 8 9,22E-11 3,54E-06 4,62E-08 TGI 3,02E-07 2,19E-10 6,6 4E-0 6 6,75E-08 LC5 0 3,55E-06 > 1,56E-0 8 1,39E-05 > 1,78E-07 Quadro 9. (cont.)

Composto ( 21S) -1 Composto ( 21S) -5 Composto (15R)-7 Composto (21 S) -30a MDA- MB- GIso 1,65E-09 4,56E-09 7,66E-07 2,49E-09 231 TGI 5,77E-09 1,86E-08 2,47E-06 2,13E-08 LC5 0 3,46E-08 1,03E-07 > 2,47E-05 2,84E-07 HT29 GI50 8,91E-10 2,53E-09 3,46E-07 2,66E-09 TGI 1,63E-09 2,87E-09 5,93E-07 3,02E-09 LCso 2,31E-08 3,88E-09 1,31E-06 > 1,63E-06 A5 49 GIso 2,14E-09 6,92E-09 1,04E-06 3,73E-09 TGI 4,29E-08 2,87E-08 3,46E-06 1,95E-07 LCso > 1,6 5E-0 6 > 1,6 9E — 0 6 > 2,47E-05 > 1,63E-06

Quadro 10. Ensaio Anti-mitótico - Dados de Actividade (Molar) dos compostos 1 e 2.

Cl 5 0 Composto 1 2,64E-8 Composto 2 2,64E-8 107

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Literatura não relacionada com patentes referida na descrição • Gunasekera SP et al. J. Org. Chem., 1990, vol. 55, 4912-4915 [0002] • J. Org. Chem., 1991, vol. 56, 1346 [0002] • Hung DT et al. Chem. Biol., 1996, vol. 3, 287-293 [0003] • ter Haar E et al. Biochemistry, 1996, vol. 35, 243-250 [0003] • Schiff PB et al. Nature, 1979, vol. 277, 665-667 [0003] • Kunze B et al. J. Antibiot., 1994 , vol. 47, 881-886 [0004] • Jansen R et al. J. Org. Chem., 1999 , 1085-1089 [0004] • Wuts, PGM; Greene TW. Protecting Groups in Organic

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Claims (42)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de fórmula geral I

em que Ri é seleccionado a partir de hidrogénio, 0Ra, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb, e NRaC (NRa) NRaRb; cada R2 e R3 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído; cada R41, R-42f R-43? R44, R45, R46? R47 θ R48 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído; cada R5, Rô, e R7 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, CORa, COORa, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído e alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído, ou R5 e R48 juntamente com o correspondente átomo de N e átomo de C ao qual estão unidos podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído; cada Ra e Rb é independentemente seleccionado a partir de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-Ci2Substituído ou não substituído, alcinilo C2-C12 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e cada linha tracejada representa uma ligação adicional opcional; 2 ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Um composto de acordo com a reivindicação 1, que tem a seguinte fórmula II

R41 R43 Rs 0 (II) em que Ri, R41, R43 e R48, R5, Rõ, e R7 são como definidos na reivindicação 1, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R2 e R3 são seleccionados independentemente cada um a partor de hidrogénio e alquilo Ci^C6 substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Um composto de acordo com a reivindicação 3, em que R2 e R3 são hidrogénio, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, em que Ri é seleccionado a partor de hidrogénio, 0Ra e OCORa, em que Ra é seleccionado a partir de hidrogénio e alquilo Ci-Cõ substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Um composto de acordo com a reivindicação 5, em que Ri é hidrogénio ou metoxi, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo. 3

7. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 e 3 — 6, em que os grupos R42, R44, R45, R46, e R47 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio e alquilo Ci_C6 substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Um composto de acordo com a reivindicação 7, em que os grupos R42, R44, R45, R46/· R47 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, metilo substituído ou não substituído, isopropilo substituído ou não substituído e terc-butilo substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Um composto de acordo com a reivindicação 8, em que R42f R44/· R45, R46Í e R47 são hidrogénio, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, em que os grupos R41, R43, e R48 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio e alquilo Ci_C6 substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Um composto de acordo com a reivindicação 10, em que os grupos R4i, R43, e R48 são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, metilo substituído ou não substituído, isopropilo substituído ou não substituído e terc-butilo substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo. 4

12. Um composto de acordo com a reivindicação 11, em que R4i e R43 são metilo, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

13. Um composto de acordo com a reivindicação 11 ou 12, em que R48 é seleccionado a partir de isopropilo, terc-butilo, e benzilo, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

14. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, em que R5 e R6 são seleccionados independentemente cada um a partir do grupo que consiste em hidrogénio e alquilo Ci_C6 substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Um composto de acordo com a reivindicação 14, em que R5 e Rç são hidrogénio, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

16. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, em que R7 é seleccionado a partir de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído e alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Um composto de acordo com a reivindicação 16, em que R7 é seleccionado a partir de hidrogénio e alcenilo C2-C12 substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

18. Um composto de acordo com a reivindicação 17, em que R7 é um grupo alcenilo que é substituído numa ou mais posições com halogéneo, OR', = 0, 0C0R', 0C0NHR', 0C0N(R')2 5 e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é independentemente seleccionado a partir de hidrogénio, alquilo C1-C12 substituído ou não substituído, alcenilo C2-C12 substituído ou não substituído, alcinilo C2-Ci2 substituído ou não substituído, e arilo substituído ou não substituído, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, em que uma ligação adicional está presente em todos os lugares indicados com uma linha tracejada, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

20. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

Cl O MeO

Cl 6

7

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

22. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula O

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo. 8

23. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

24. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

25. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

26. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula 9 9

ou um sal aceitável do mesmo.

27. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

28. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

29. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula 10

11

12

13

Ο Cl 14

15

νη2

16

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

30. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

31. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

32. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula 17

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

33. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

34. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

35. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula 18

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

36. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

37. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

38. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que tem a seguinte fórmula 19

ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

39. Uma composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

40. Um composto ou composição de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 39, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização como um medicamento.

41. Um composto ou composição de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 39, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização no tratamento de cancro.

42. Utilização de um composto ou composição de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 39, ou um sal, tautómero, ou estereoisómero farmaceuticamente aceitável do mesmo, no fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro.