PT1692516E - Método de terapia - Google Patents

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Description

1
DESCRIÇÃO "MÉTODO DE TERAPIA"
CAMPO DA INVENÇÃO
Muitas doenças têm sido associadas à produção de células reguladoras. A presente invenção refere-se à observação de que o sistema imunitário está a funcionar em ciclo nestas doenças. Com base nestas observações, a presente invenção proporciona métodos para tratamento de doenças, tais como, cancro e uma infecção por HIV. A presente invenção também se refere aos métodos para determinar quando uma terapia para tratar uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras deveria ser administrada a um doente.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
No passado, foram feitas tentativas para activar o sistema imunitário a construir uma resposta eficaz contra células malignas. Apesar do progresso promissor e significativo, uma tal resposta ainda tem de ser completamente obtida e muitas terapias de base imunológica revelaram-se desapontantes.
Muitos estudos utilizando ensaios celulares in vitro demonstram que os linfócitos citotóxicos possuem a capacidade de matar células tumorais. 0 facto desta destruição de base imunológica não controlar eficazmente o crescimento do tumor in vivo é um enigma. 0 doente com cancro também tem uma maior concentração de complexos imunitários circulantes, indicando que o sistema imunitário está activo, em particular contra determinados antigénios tumorais. 0 nível destes complexos imunitários pode aumentar com a progressão da doença (Horvath et al, 1982; Aziz et al, 1998) . 2
As células reguladoras (também referidas na técnica como células supressoras) têm sido implicadas na resposta imunológica de um indivíduo ao cancro (North e Awwad, 1990; WO 03/068257) . Como a maior parte dos antigénios do cancro são realmente produzidos pelo doente, eles são considerados como "próprios" pelo sistema imunitário. Devido à presença e/ou quantidade aumentada de antigénios tumorais, o sistema imunitário do hospedeiro constrói uma resposta caracterizada pela produção de células efectoras que abordam células que produzem o antigénio tumoral. Contudo, em muitos casos, estas células efectoras são reconhecidas pelo sistema imunitário como estando orientadas para as próprias células dos hospedeiros e, consequentemente, é produzida uma população de células reguladoras para regular negativamente a população de células efectoras. Assim, a produção destas células reguladoras limita a capacidade do sistema imunitário de remover eficazmente as células cancerosas.
Mais recentemente, as células reguladoras mostraram estar envolvidas na resposta imunológica dos indivíduos a uma infecção virai. A WO 02/13828 descreve a produção de células reguladoras durante a infecção retroviral e métodos para tratar tais infecções por regulação negativa da população de células reguladoras, enquanto mantém a população de células efectoras. Adicionalmente, Peterson et al (2002) observou que uma população de células reguladoras CD4+ estavam a suprimir a capacidade das células efectoras CD8+ de controlar infecções pelo retrovírus murídeo Friend em ratos.
As medições de determinadas concentrações de proteína no plasma em fase aguda podem ser de utilidade diagnóstica ou prognóstica em determinadas condições clínicas. A proteína 3 de fase aguda melhor conhecida é a proteína reactiva C (CRP) . A CRP é uma proteína do plasma que surge no sangue com a inflamação de determinadas condições. 0 nível de CRP no plasma sanguíneo pode aumentar tão alto quanto 1.000 vezes com a inflamação. As condições que geralmente conduzem a alterações marcadas na CRP incluem a infecção bacteriana e virai, traumatismo, cirurgia, queimaduras, condições inflamatórias, doença coronária e vascular e cancro avançado.
As proteínas da fase mais aguda são sintetizadas por hepatócitos, algumas são produzidas por outros tipos de células incluindo monócitos, células endoteliais, fibroblastos e adipócitos. As proteínas de fase aguda incluem a amilóide A de soro (SAA), CRP e componente P de amilóide de soro (SAP). A resposta imediata de CRP e SAA aos estímulos, em conjunto com sua gama de concentração ampla e facilidade de medição automatizada, conduziu a que os níveis de CRP e SAA no plasma fossem usados para seguir de modo exacto a gravidade da inflamação e a eficácia da gestão da doença durante determinadas condições patológicas. A WO 03/070270 descreve o uso de marcadores inflamatórios de fase aguda em regimes para o tratamento eficaz de HIV. Estes métodos assentam, pelo menos parcialmente, no "reajuste" do sistema imunitário por um tratamento tal como HAART, seguido da análise de proteínas inflamatórias de fase aguda como marcadores da expansão das células efectoras/reguladoras. O aparecimento de proteínas inflamatórias de fase aguda parece estar ligado à expansão da célula efectora, que ocorre antes da expansão da célula reguladora, e assim, o doente pode ser tratado com um 4 agente apropriado que permite que a população de células efectoras seja mantida, enquanto destrói, prevenindo a produção, ou reduz a actividade das células reguladoras. Em essência, ao retirar o tratamento com HAART, foi considerado que o sistema imunitário dos doentes trataria as partículas de HIV reemergentes como uma nova infecção e, consequentemente, seria produzida uma nova população de células efectoras.
De modo semelhante à WO 03/070270, a WO 03/068257 refere-se, pelo menos parcialmente, ao reajuste do sistema imunitário, contudo, neste caso, no contexto do tratamento do cancro. Novamente, o tratamento foca-se no reaparecimento inicial de células efectoras após uma redução na carga tumoral através de técnicas, tais como, cirurgia ou administração de fármacos antiproliferativos.
Nenhuma das WO 02/13828, WO 03/070270 ou WO 03/068257 compreende que a resposta imunológica está a funcionar em ciclo num doente com cancro ou com HIV, independentemente da administração de tratamento para estas doenças. A presente invenção baseia-se na constatação deste funcionamento em ciclo.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO O presente inventor constatou surpreendentemente que o sistema imunitário está a funcionar em ciclo durante estados patológicos caracterizados pela presença de células reguladoras. Este funcionamento em ciclo ocorre numa base regular de aproximadamente 14 a 15 dias nos seres humanos.
Embora não se pretenda ficar limitado pela teoria, parece que a expansão de células efectoras contra um antigénio alvo é seguida da expansão de células reguladoras dirigidas 5 contra as efectoras. Após o controlo das células efectoras pelas células reguladoras, os números e/ou actividade de ambos os tipos de células diminuem, o que por sua vez é seguido do mesmo ciclo devido à presença continua ou remoção incompleta do antigénio, o que resulta numa resposta imunológica oscilante persistente, porém, ineficaz, contra, por exemplo, o tumor ou virus. 0 conhecimento deste ciclo pode ser usado para tratar doenças onde se sabe que o aparecimento de células reguladoras é prejudicial para o doente. Exemplos de tais doenças incluem o cancro e as infecções persistentes, tais como, pelo vírus da imunodeficiência humana. Mais especificamente, o tratamento de um doente pode ser temporizado de modo a que o número de células efectoras contra um antigénio celular ou virai seja maximizado enquanto o número de células reguladoras é reduzido ou abolido.
De fato, o presente inventor observou que o tratamento de uma grande variedade de cancros com fármacos anticancerígenos resulta, em média, numa taxa de resposta completa na gama de 6,5 a 7%. Esta gama de 6,5 a 7% é coerente com um ciclo de cerca de 14 a 15 dias de expansão de células efectoras seguido de expansão de células reguladoras. Mais especificamente, quando não se leva em consideração o funcionamento em ciclo das células efectoras e reguladoras, um médico assistente tem cerca de 1 em 14,5 hipóteses (6,8%) de administrar um fármaco antiproliferativo numa altura em que o número de células efectoras é alto, mas o número de células reguladoras apenas começou a expandir-se e, consequentemente, são vulneráveis aos tratamentos que têm como alvo as células em divisão. Isto deixa um número elevado de células efectoras 6 que têm como alvo células cancerosas, resultando numa resposta completa à terapia.
Consequentemente, a presente invenção proporciona métodos e utilizações como definidos nas reivindicações apensas. A infecção pode ser provocada por qualquer tipo de agente infeccioso tal como, mas não se limitando a um virus, bactéria, protozoário, nemátodo, prião ou fungo.
Preferencialmente, o agente infeccioso provoca infecção crónica persistente caracterizada por o sistema imunitário do doente não ser capaz de eliminar o agente infeccioso. Exemplos de agentes infecciosos que provocam infecção crónica persistente são os virus tais como o HIV e o vírus da Hepatite C.
Embora não se pretenda ficar limitado pela teoria, parece que à medida que a carga de antigénio, por exemplo, de maior crescimento tumoral ou replicação virai, aumenta após a actividade de células reguladoras, o sistema imunitário do doente responde de modo semelhante à primeira exposição ao antigénio. Esta resposta imunológica inclui a produção de: marcadores inflamatórios de fase aguda, tais como, amilóide A de soro e proteína reactiva c.
Uma altura apropriado para administrar o agente situa-se entre a altura em que os níveis do marcador inflamatório de fase aguda alcançam o máximo e antes do marcador começar a aumentar no ciclo seguinte. Consequentemente, um marcador de sistema imunitário particularmente preferido é um marcador inflamatório de fase aguda. Mais preferencialmente, o marcador inflamatório de fase aguda é seleccionado, mas não se limita ao grupo consistindo de amilóide A de soro, amilóide P de soro e proteína reactiva 7 C .
Preferencialmente, o marcador do sistema imunitário reflecte o número e/ou actividade de células reguladoras, e/ou o número e/ou actividade de células efectoras.
Numa forma de realização, o doente é seguido em relação a um aumento no número e/ou actividade de células reguladoras por análise dos níveis de células T CD4+CD8. No que se refere a esta forma de realização, é preferido que o agente seja administrado aproximadamente ao mesmo tempo quando são detectadas células T CD4+CD8.
Noutra forma de realização, o doente é seguido em relação a um aumento no número e/ou actividade de células efectoras por análise dos níveis de células T CD8+CD4. No que se refere a esta forma de realização, é preferido que o agente seja administrado aproximadamente quando o número de células T CD8+CD4 tiverem alcançado o máximo.
Noutra forma de realização, a molécula associada à doença é um antigénio produzido por uma célula cancerosa ou um agente infeccioso. Nesta forma de realização, o agente é administrado aproximadamente quando os níveis da molécula associada à doença começam a diminuir.
Numa forma de realização adicional, a doença é cancro e o doente é seguido em relação a flutuações nos níveis de antigénio(s) tumoral/ais. No que se refere a esta forma de realização, é preferido que o agente seja administrado aproximadamente quando os níveis do antigénio tumoral começam a diminuir.
Ainda numa forma de realização adicional, a doença é provocada por um agente infeccioso e o doente é seguido em relação a flutuações nos níveis de antigénio(s) produzidos pelo agente infeccioso. No que se refere a esta forma de realização, é preferido que o agente seja administrado aproximadamente quando os níveis de antigénios, ou organismos infecciosos ou vírus (carga virai), começam a diminuir.
Noutra forma de realização, o marcador do sistema imunitário é a temperatura do corpo. No que se refere a esta forma de realização, é preferido que o agente seja administrado quando a temperatura do corpo tenha alcançado um máximo e antes da temperatura do corpo começar a aumentar no ciclo seguinte.
Como aqui delineado, o presente inventor observou que as flutuações em muitos factores indicam que o sistema imunitário está a funcionar em ciclo em doentes que sofrem de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras. Estes factores incluem marcadores inflamatórios de fase aguda, antigénios virais, antigénios cancerígenos e temperatura do corpo. Estes factores estão ligados, directa ou indirectamente, ao estado geral do sistema imunitário incluindo, mas não se limitando necessariamente à produção e/ou actividade de células efectoras, produção e/ou actividade de células reguladoras, e/ou produção e/ou actividade de células B.
Será compreendido por um especialista na técnica que doenças, tais como, cancro e SIDA possuem um efeito complexo no doente. Além disso, variações naturais entre os indivíduos ligadas a factores, tais como, o seu genótipo, alimentação, condição física, estados patológicos actuais e anteriores, influenciam todos o modo como um indivíduo 9 responde a um estado patológico. Assim, enquanto na maioria dos casos o ciclo será de cerca de 14 a 15 dias, em alguns indivíduos este pode ser ligeiramente mais curto ou mais longo. Além disso, como no ciclo menstrual, o período do ciclo pode variar ligeiramente num indivíduo devido a factores de variação natural e/ou ambiental. Assim, pode ser encontrada variação individual pelo menos em relação a, por exemplo: i) o periodo do ciclo, ii) o número absoluto de células efectoras ou reguladoras durante o ciclo ou iii) os niveis dos marcadores inflamatórios de fase aguda durante o ciclo. Tal variação pode ser exagerada em doentes com cancro ou infecção avançada, onde o sistema imunitário do doente foi desafiado por um periodo de tempo considerável.
Em consequência, será mais provavelmente desejável seguir o doente por um periodo de tempo suficiente para garantir que é entendida a dinâmica de funcionamento em ciclo do sistema imunitário num doente particular. Preferencialmente, o doente é seguido por um período de pelo menos 7 dias, mais preferencialmente pelo menos 14 dias, mais preferencialmente pelo menos 21 dias, mais preferencialmente pelo menos 28 dias, mais preferencialmente pelo menos 35 dias, mais preferencialmente pelo menos 42 dias e ainda mais preferencialmente pelo menos 49 dias.
Outro factor de complicação é que pelo menos os níveis de alguns marcadores inflamatórios de fase aguda mostraram que ciclizam em cerca de 7 dias (cerca da metade do tempo de um ciclo "completo" do sistema imunitário). Assim, parece que o suporte nestes tipos de marcadores melhorará as hipóteses de tratamento bem-sucedido em cerca de 6,8% (com base na administração aleatória do agente) a cerca de 50% (com base 10 na escolha da altura de administração correcta escolhendo aleatoriamente qual dos máximos está associado à altura apropriada para abordar as células reguladoras). Enquanto isto é um melhoramento nas técnicas correntes, é preferido que tais marcadores sejam seguidos em conjunto com outros marcadores (por exemplo, uma molécula associada à doença, células reguladoras/ou células efectoras) para optimizar a probabilidade de seleccionar a altura apropriada para administrar o agente.
Assim, noutra forma de realização, o doente é seguido em relação a um marcador inflamatório de fase aguda e a uma molécula associada a doença. No que se refere a esta forma de realização, o agente é administrado entre a altura em que os níveis do marcador inflamatório de fase aguda tenham alcançado um máximo e antes do marcador começar a aumentar no ciclo seguinte e a altura em que os níveis de uma molécula associada à doença começam a diminuir ou se preveja que começam a diminuir com base em análises anteriores da molécula.
Em geral, prefere-se que sejam seguidos vários factores ao mesmo tempo. Isto deve-se ao facto de que, devido aos factores descritos acima, é improvável que cada factor tenha um perfil de ciclo perfeito num período de 14/15 dias, em particular ao longo de vários ciclos, para proporcionar rotineiramente uma indicação clara da altura apropriada para administrar o agente. Embora a análise de vários factores por um período longo possa ser dispendiosa e possa também ser algo inconveniente para o doente, as doenças como o cancro e a SIDA são potencialmente fatais. Assim, vale a pena entender, tanto quanto possível, o funcionamento em ciclo do sistema imunitário de um dado doente antes do mesmo ser tratado. 11
Além disso, embora a análise de diferentes factores ciclicos em alguns doentes possa resultar em perfis complexos, dada a orientação aqui proporcionada, estará dentro do conhecimento de um médico assistente analisar os dados de seguimento para determinar a altura óptima para administrar o agente. É aqui proporcionado um exemplo da análise cuidadosa de factores múltiplos para determinar a altura apropriada para tratar eficazmente uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras.
Um factor de complicação adicional será se o doente adquiriu recentemente uma doença ou traumatismo não relacionado com o que está a ser tratado. Por exemplo, um doente a ser tratado para infecção por HIV também pode contrair o virus da gripe comum. A presença do virus da gripe resultará, por exemplo, num aumento dos marcadores inflamatórios de fase aguda independentemente do funcionamento em ciclo destes marcadores que ocorre devido à infecção por HIV. Outras doenças que podem originar complicações no seguimento do funcionamento em ciclo das células efectoras/reguladoras para utilização nos métodos da presente invenção incluem, artrite reumatóide, úlceras e doença crónica da gengiva. Consequentemente, é desejável seguir o doente em relação a quaisquer factores que possam resultar em niveis elevados de, por exemplo, marcadores inflamatórios de fase aguda para garantir que o factor que está a ser seguido reflecte claramente o funcionamento em ciclo das células efectoras/reguladoras resultante da doença a ser tratada.
Além do mais, é preferido que o doente seja seguido tão frequentemente quanto possível para garantir que o funcionamento em ciclo do sistema imunitário num dado doente é adequadamente caracterizado. Naturalmente, isto 12 assegurará que o agente é administrado na altura apropriada e que quaisquer pequenas variações, por exemplo, no número ou actividade das células efectoras/reguladoras, ou marcadores das mesmas, não são interpretados de forma errada. Preferencialmente, o doente é seguido pelo menos a cada 3 dias, mais preferencialmente pelo menos a cada 2 dias, e mais preferencialmente pelo menos a cada dia. 0 seguimento pode ocorrer mais frequentemente, por exemplo a cada 12 horas, quando o funcionamento em ciclo estiver alcançando um fase onde é provável que a altura seja a apropriada para administrar o agente. 0 agente inibe a produção, limita a função e/ou destrói as células τ reguladoras. 0 agente é seleccionado do grupo consistindo de fármacos anticancerigenos, tais como fármacos antiproliferativos, radiação, ARNds e anticorpos que inibem a produção e/ou actividade de células reguladoras. Preferencialmente, o fármaco antiproliferativo é seleccionado do grupo consistindo de, mas não se limitando a taxol, vincristina, vinblastina e vinblastina anidra.
No que se refere ao cancro, ao contrário da terapia farmacológica anticancerigena típica que é administrada às células tumorais alvo, o método de tratamento aqui descrito aborda realmente as células reguladoras. Isto permite que números apropriados de células efectoras produzam o efeito terapêutico desejado.
Exemplos de anticorpos preferidos incluem, mas não se limitam a anti-CD4+, anti-CTLA-4 (antigénio 4 associado ao linfócito citotóxico), anti-GITR (receptor do factor de necrose tumoral induzida por glucocorticóides), anti-CD28 e anti-CD25. 13
Preferencialmente, o doente não foi exposto a um tratamento para a doença durante pelo menos 14 dias, mais preferencialmente pelo menos 21 dias e ainda mais preferencialmente pelo menos 28 dias. 0 presente inventor também determinou que o tratamento para uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras pode ser melhorado (ou as possibilidades de tratamento bem sucedido podem ser aumentadas) quando a vacina é administrada na altura apropriada. Nestes casos, a vacina reforça a resposta imunológica inata contra a doença. Isto será muito provavelmente uma consequência do maior número e/ou actividade das células efectoras. Embora teoricamente as células reguladoras sejam ainda produzidas de forma final, o reforço do sistema imunitário permite que o doente controle apropriadamente a doença antes do aparecimento das células reguladoras. Este cenário explicaria a razão porque estudos anteriores mostraram que as vacinas anti-HIV e antitumorais têm sucesso apenas num pequeno número de doentes. Mais especificamente, existe apenas uma pequena probabilidade de que a vacina seja administrada na mesma altura em que está a ocorrer a resposta imunológica inata à doença. Outras alturas de administração na técnica anterior ocorrem quando existe um número e/ou actividade elevado das células reguladoras, ou em alturas que não acoplam com o funcionamento em ciclo natural do sistema imunitário.
Numa forma de realização, a vacina é administrada aproximadamente ao mesmo tempo em que estão a ser aumentados os niveis de células efectoras.
Noutra forma de realização, a vacina é administrada aproximadamente ao mesmo tempo em que começam a diminuir os 14 níveis de uma molécula associada à doença.
Numa forma de realização adicional, a vacina é administrada aproximadamente ao mesmo tempo em que começam a aumentar os níveis de um marcador inflamatório de fase aguda. Como delineado acima, constatou-se que pelo menos alguns marcadores inflamatórios de fase aguda variam em ciclo ao longo de um período de cerca de sete dias, onde apenas cada segundo máximo dos níveis de marcador inflamatório de fase aguda está associado ao número de células efectoras. Assim, nesta forma de realização, o seguimento necessitará provavelmente de ser combinado com a análise de outros factores aqui descritos. A observação de que o sistema imunitário está a funcionar em ciclo durante os estados patológicos que se caracterizam pela presença de células reguladoras também pode ser usada como um indicador da presença de tal doença. Estes procedimentos de diagnóstico seriam particularmente úteis para analisar um doente quanto a recorrência do estado patológico (tal como um tumor) após tratamento ou para analisar um doente que se determinou que era susceptível à doença (tal como nos casos onde o indivíduo foi anteriormente identificado como possuindo um gene de susceptibilidade ao cancro) quanto ao aparecimento da doença.
Também é aqui divulgado um método de diagnóstico de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras, compreendendo o método o seguimento do doente, ou de amostras obtidas do mesmo, em relação a pelo menos um de: a) número e/ou actividade de células efectoras, b) número e/ou actividade de células reguladoras, c) uma molécula associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema 15 imunitário, em que o funcionamento em ciclo de qualquer um de a) a d) indica que a doença pode estar presente.
Naturalmente, como delineado acima, o doente precisará de ser analisado quanto a outros estados patológicos, tais como infecções menores como gripe, etc. para garantir que qualquer funcionamento em ciclo observado (especialmente quando se analisa os marcadores inflamatórios de fase aguda) está directamente ligado à doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras.
Enquanto de modo ideal o seguimento deveria continuar indefinidamente, isto muito provavelmente não será prático na maioria das situações. Assim, o procedimento de diagnóstico pode ser realizado numa base intermitente com base na avaliação de risco do aparecimento ou reaparecimento do estado patológico. Como o especialista na técnica compreenderá das discussões aqui, o termo "base intermitente" significa que o método necessitará que seja analisado um número apropriado de amostras ao longo de um periodo de tempo, para determinar se está a ocorrer o funcionamento imunológico em ciclo (por exemplo, amostras obtidas a cada 3 dias durante um periodo de cerca de 14 dias), contudo, se o teste for negativo, este procedimento não precisa ser repetido (por exemplo) durante mais um ano.
Também é aqui divulgada a utilização de um ensaio que detecta um marcador do sistema imunitário para determinar quando um agente ou vacina deve ser administrado a um doente que sofre de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras.
Preferencialmente, o marcador é um marcador inflamatório de fase aguda. Mais preferencialmente, o marcador é um 16 marcador inflamatório de fase aguda positivo. Ainda mais preferencialmente, o marcador é seleccionado do grupo consistindo de, mas não se limitando a amilóide A de soro e proteína reactiva c.
Também é aqui divulgada a utilização de um ensaio que detecta número e/ou actividade de células efectoras para determinar quando deve ser administrado um agente ou vacina a um doente que sofre de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras.
Preferencialmente, o ensaio detecta o número de células T CD8+CD4-.
Também é aqui divulgada a utilização de um ensaio que detecta número e/ou actividade de células reguladoras para determinar quando deve ser administrado um agente ou vacina a um doente que sofre de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras.
Preferencialmente, o ensaio detecta o número de células T CD4+CD8-.
Também é aqui divulgada a utilização de um ensaio que detecta uma molécula associada a uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras para determinar quando deve ser administrado um agente ou vacina para tratar a doença.
Preferencialmente, o ensaio detecta um antigénio produzido por uma célula cancerosa ou um agente infeccioso.
Preferencialmente, o doente não foi exposto a um tratamento para a doença durante pelo menos 14 dias, mais 17 preferencialmente pelo menos 21 dias e ainda mais preferencialmente pelo menos 28 dias.
Conforme seria prontamente compreendido pelos especialistas na técnica, os métodos podem ser repetidos para proporcionar um tratamento mais completo.
Preferencialmente, o doente é um mamífero. Mais preferencialmente, o mamífero é um ser humano. Também é aqui divulgado um kit para determinar quando um agente ou vacina deve ser administrado a um doente que sofre de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras, compreendendo o kit pelo menos um reagente para seguimento do doente, ou de amostras obtidas do mesmo, em relação a pelo menos um de: a) número e/ou actividade de células efectoras, b) número e/ou actividade de células reguladoras, c) uma molécula associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema imunitário.
Preferencialmente, o kit compreende instruções por escrito para realizar um método da invenção incluindo uma referência ao número preferido de amostras a serem analisadas e ao tempo entre cada análise de amostra.
Conforme será evidente, as particularidades e características preferidas de um aspecto da invenção são aplicáveis a muitos outros aspectos da invenção.
Ao longo desta especificação, a palavra "compreendem," ou variações tais como "compreende" ou "compreendendo," será entendida como implicando a inclusão de um elemento, número inteiro ou etapa ou grupo de elementos, números inteiros ou etapas especificados, mas não a exclusão de qualquer outro elemento, número inteiro ou etapa ou grupo de elementos, 18 números inteiros ou etapas. A invenção será doravante descrita por meio dos Exemplos não restritivos que se seguem e por referência às figuras apensas.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS APENSOS
Figura l.A) Níveis da proteína reactiva c e do marcador tumoral CA125 ao longo de um período de 14 dias num doente com cancro do ovário. B) Níveis de amilóide A do soro no mesmo doente ao longo do mesmo período (níveis de proteína reactiva c de A) em duplicado).
Figura 2. Níveis de proteína reactiva c em resposta à retirada do primeiro doente humano com HIV do tratamento HAART.
Figura 3. Flutuações da carga virai e de CRP num segundo doente com HIV após o término de HAART.
Figura 4. Flutuações de CRP e C4 na Sra. OM ao longo de 32 dias mostram uma periodicidade distinta com uma oscilação repetida aproximada de 7/14 dias. As medições foram realizadas a cada segunda-feira, quarta-feira e sexta-feira. Nesse caso, a oscilação de C4 é mais regular. Observe a tendência crescente em ambos os parâmetros ao longo do período de 32 dias.
Figura 5. Flutuações de factores de complemento de soro C4 e C3 na Sra. OM ao longo de 32 dias mostram uma periodicidade quase síncrona e regular de aproximadamente 7/14 dias. Observe a tendência crescente em ambos os parâmetros ao longo do período de 32 dias. 19
Figura 6. Flutuações do factor de complemento de soro C4 e elevação dos níveis de CA125 com o avanço de doença na Sra. OM. Observe a tendência crescente em ambos os parâmetros ao longo do período de 32 dias.
Figura 7. Proteína Reactiva C vs. Tempo na Sra. OM, (dias) Eventos de Seguimento e Terapêuticos, 28 de Maio de 2004 (dia 1) - 9 de Agosto de 2004 (dia 74). O seguimento de CRP começou no dia 28 de Maio (dia 1) e aumentou continuamente com o avanço da doença. A oscilação da resposta imunológica de aproximadamente 14 dias foi derivada da interpretação combinada dos dados recolhidos do CRP, C4 e CA125 no soro (ver também Figura 4).
Legenda: A = início da radioterapia, dia 38 = 5 de Julho de 2004. B = Máximo de CRP previsto, dias 46, 47 e 48 = 13, 14 e 15 de Julho de 2004. C = Altura da primeira aplicação de quimioterapia, dia 49 = 16 de Julho de 2004. D = Máximo de CRP previsto, dias 63 e 64 = 28 e 29 de Julho de 2004. Pára a radioterapia. E = Altura da segunda aplicação de quimioterapia, dia 65 = 30 de Julho de 2004. F = Febre, dia 66 = 31 de Julho de 2004, hemorragia do tumor, dia 67 = 1 de Agosto de 2004. G = CRP cai para 62,7 mg/L, dia 69 = 4 de Agosto de 2004. H = Endoscopia sem evidência de tumor, dia 74 = 9 de Agosto de 2004.
Figura 8. Proteína reactiva c e amilóide de soro A vs. tempo na Sra. FO.
Figura 9. Amilóide A de soro e IL-2 vs. tempo na Sra. FO. 20
Figura 10. Amilóide A de soro e marcador de cancro CA125 vs. tempo na Sra. FO.
Figura 11. Proteína reactiva C e C3 vs. tempo na Sra. FO. Figura 12. Proteína reactiva C vs. tempo no Sr. GA. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Como aqui utilizados, os termos "tratando", "tratar" ou "tratamento" incluem a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um agente suficiente para reduzir ou eliminar pelo menos um sintoma da doença.
Como aqui utilizado, o termo "carga tumoral" refere-se geralmente ao número de células cancerosas num indivíduo numa dada altura. A medição do nível de antigénio tumoral no indivíduo pode ser considerada com uma indicação da carga tumoral.
Como aqui utilizado, o termo "carga virai" refere-se geralmente ao número de partículas virais num indivíduo em qualquer altura. A medição do nível de antigénio virai no indivíduo pode ser considerada com uma indicação da carga virai. "Células reguladoras" incluem, mas não se limitam necessariamente à subpopulação de células T CD4+. Tais células também podem ser referidas na técnica como "células supressoras". As células reguladoras podem actuar directamente nas células efectoras ou podem infligir os seus efeitos nas células efectoras através de outros mecanismos. 21
As células CD4+ expressam o marcador conhecido na técnica como CD4. Tipicamente, o termo "células T CD4+" como aqui utilizado não refere-se às células que também expressam CD8. Contudo, este termo pode incluir células T que também expressam outros marcadores antigénicos, tais como CD25.
As "células efectoras" incluem, mas não se limitam necessariamente à população de células T conhecida como células CD8+.
Como aqui utilizado, o termo "limita a função e/ou destrói" quando se refere à exposição das "células reguladoras" ao agente significa que o número e/ou actividade das células reguladoras é regulado negativamente pelo agente. Mais preferencialmente, o número e/ou actividade das células reguladoras é completamente erradicado pelo agente.
Como aqui utilizado o termo "doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras" refere-se a qualquer condição em que o número ou actividade das células reguladoras desempenha um papel no prolongamento do estado patológico. A doença é cancro ou uma infecção. 0 termo "marcador do sistema imunitário" refere-se geralmente a qualquer molécula ou factor que proporciona uma indicação do estado e/ou actividade do sistema imunitário. Estes marcadores podem estar directamente ligados à actividade e/ou produção de células reguladoras e/ou efectoras e/ou pode proporcionar uma indicação mais genérica da resposta total do sistema imunitário ao antigénio. Exemplos de um marcador apropriado do sistema imunitário incluem marcadores inflamatórios de fase aguda tais como proteína reactiva c e amilóide A de soro. Outro exemplo de um marcador do sistema imunitário são os 22 indicadores de destruição celular tais como, mas não se limitando ao colesterol e beta-2-microglobulina no soro. O colesterol e a beta-2-microglobulina são componentes integrais das membranas celulares. Em particular, a beta-2-microglobulina é a molécula acessória para o receptor de Histocompatibilidade Maior de Classe I ou MHC-I. Consequentemente, com o funcionamento em ciclo da resposta imunológica antipatológica em conjunto com a destruição da célula alvo, os níveis destas duas moléculas no soro de doentes com cancro são frequentemente elevados. Assim, oscilações nos indicadores de destruição celular, tais como colesterol e beta-2-microglobulina, também podem mostrar-se úteis na determinação do começo ou término do ciclo de resposta imunológica. Naturalmente, mediante a presente descoberta de funcionamento em ciclo do sistema imunitário numa doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras, um especialista pode prontamente identificar marcadores adicionais úteis nos métodos da invenção.
Como aqui utilizado, o termo "uma molécula associada à doença" refere-se a qualquer molécula que está ligada ao estado patológico. Numa forma de realização preferida, o marcador é uma proteína. Tais marcadores proteicos são bem conhecidos na técnica. São aqui descritos exemplos de marcadores de antigénio tumoral apropriados. Também são bem conhecidos marcadores adequados para, se não todas, as doenças infecciosas, por exemplo, proteínas gag ou env de hiv .
Como aqui utilizado o termo "infecção crónica persistente" refere-se à presença de um agente infeccioso no doente, que não é prontamente controlado pelo sistema imunitário do doente ou pelas terapias disponíveis. Exemplos incluem, mas não se limitam a infecções por Mycobacterium tuberculosis 23 (que provoca a tuberculose), HIV, o vírus da Hepatite B ou o vírus da Hepatite C. Para ser classificada como uma "infecção crónica persistente" é preferido que o doente tenha a infecção há pelo menos 3 meses, mais preferencialmente pelo menos 6 meses.
Para os fins desta invenção, o termo "anticorpo", a menos que de outra forma especificado, inclui fragmentos de anticorpos inteiros que mantém a sua actividade de ligação a um analito alvo. Tais fragmentos incluem fragmentos Fv, F(ab') e F(ab')2/ bem como anticorpos de cadeia simples (scFv). Além do mais, os anticorpos e seus fragmentos podem ser anticorpos humanizados, por exemplo, como descrito na ep-A-239400.
Como é conhecido na técnica, um cancro é geralmente considerado como um crescimento celular descontrolado. Os métodos da presente invenção podem ser usados para tratar qualquer cancro incluindo, mas não se limitando a carcinoma, blastoma, sarcoma e leucemia. Exemplos mais particulares de tais cancros incluem cancro de mama, cancro de próstata, cancro de cólon, cancro de células escamosas, cancro de pulmão de célula pequena, cancro de pulmão de célula não pequena, cancro do ovário, cancro cervical, cancro gastrointestinal, cancro pancreático, glioblastoma, cancro hepático, cancro de bexiga, hepatoma, cancro colorrectal, cancro uterino cervical, carcinoma endométrico, cancro de glândula salivar, mesotelioma, cancro de fígado, cancro vulvar, cancro da tiróide, carcinoma hepático, cancro de pele, melanoma, cancro do cérebro, neuroblastoma, mieloma, vários tipos de cancro de cabeça e pescoço, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielóide aguda, sarcoma de Ewing e neuroepitelioma periférico. 24 A "amostra" refere-se a um material suspeito de conter células reguladoras, células efectoras, marcadores do sistema imunitário e/ou uma molécula associada a doença. A amostra pode ser usada como obtida directamente da fonte ou após pelo menos uma etapa de purificação (parcial). A amostra pode ser preparada em qualquer meio conveniente que não interfira com o método da invenção. Tipicamente, a amostra é uma solução aquosa ou fluido biológico como descrito em mais detalhe a seguir. A amostra pode ser derivada de qualquer fonte, tal como um fluido fisiológico, incluindo sangue, soro, plasma, saliva, escarro, fluido da lente ocular, suor, fezes, urina, leite, fluido de ascite, mucosa, fluido sinovial, fluido peritoneal, exsudados transdérmicos, exsudados faringeos, lavagem broncoalveolar, aspirações da traqueia, fluido cerebrospinal, sémen, muco cervical, secreções vaginais ou da uretra, fluido amniótico e semelhantes. Preferencialmente, a amostra é sangue ou uma fracção do mesmo. 0 pré-tratamento pode envolver, por exemplo, preparação de plasma do sangue, diluição de fluidos viscosos e semelhantes. Os métodos de tratamento podem envolver filtração, destilação, separação, concentração, inactivação de componentes interferentes e adição de reagentes. A selecção e o pré-tratamento das amostras biológicas para ensaio é bem conhecido na técnica e não precisa ser aqui descrito adicionalmente. A menos que de outra forma indicado, o ADN recombinante e as técnicas imunológicas utilizadas na presente invenção são procedimentos padrão, bem conhecidos dos especialistas na técnica. Tais técnicas são descritas e explicadas na literatura em fontes tais como, J. Perbal, A Practical Guide to Molecular Cloning, John Wiley and Sons (1984), J. Sambrook et al, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbour Laboratory Press (1989), T. A. Brown 25 (editor), Essential Molecular Biology: A Practical Approach, Volumes 1 e 2, IRL Press (1991), D. M. Glover and B. D. Hames (editors), DNA Cloning: A Practical Approach, Volumes 1-4, IRL Press (1995 and 1996), e F. M. Ausubel et al (editors), Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates and Wiley-Interscience (1988, incluindo todas actualizações até o presente), Ed Harlow and David Lane (editors) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbour Laboratory, (1988), e J. E. Coligan et al (editores) Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (incluindo todas as actualizações até o presente) e são aqui incorporadas por referência.
Marcadores Inflamatórios de Fase Aguda
Alguns marcadores inflamatórios de fase aguda aumentam inicialmente durante a resposta imunológica (referidos doravante como marcadores inflamatórios de fase aguda positivos) enquanto outros diminuem inicialmente durante uma resposta imunológica (referidos doravante como marcadores inflamatórios de fase aguda negativos). Os marcadores inflamatórios de fase aguda são também referidos na técnica como reagentes de fase aguda ou proteínas de fase aguda. Os especialistas na técnica estarão cientes dos muitos ensaios que podem ser usados para seguir os marcadores inflamatórios de fase aguda.
Exemplos de marcadores inflamatórios de fase aguda positivos incluem, mas não se limitam a proteína reactiva c, amilóide A de soro, componente de amilóide P de soro, proteínas complemento como C2, C3, C4, C5, C9, B, inibidor de Cl e proteína de ligação a C4, fibrinogénio, factor de von Willebrand, antitripsina al, antiquimiotripsina al, antiplasmina a2, cofactor II de heparina, inibidor I do activador de plasminogénio, haptoglobina, hemopexina, 26 ceruloplasmina, manganês superóxido-dismutase, glicoproteína de ácido al, hemo oxigenase, proteína de ligação a manose, proteína I de leucócito, lipoproteína (a), proteína de ligação de lipopolissacárido e interleucinas tais como, IL-1, IL-2, IL-6, IL-10 e seus receptores.
Exemplos de marcadores inflamatórios de fase aguda negativos incluem, mas não se limitam a, albumina, pré-albumina, transferrina, apoAl, apoAll, a2 HS glicoproteína, inibidor inter-a-tripsina, glicoproteína rica em histidina. A amilóide A de soro (SAA) foi descoberta como uma componente do plasma que compartilha antigenicidade com a amilóide AA, o componente fibrilar principal em depósitos amilóides AA reactivos. A SAA mostrou ser um reagente de fase aguda cujo nível no sangue é aumentado 1.000 vezes ou mais como parte das respostas do corpo às várias lesões incluindo traumatismo, infecção e inflamação.
Os níveis de SAA podem ser determinados como conhecido na técnica, ver, por exemplo, Weinstein et al (1984), Liuzzo et al (1994), 0'Hara et al (2000), Kimura et al (2001) e 0'Hanlon et al (2002). A proteína reactiva C (CRP) é uma proteína de resposta de fase aguda positiva importante, e sua concentração no soro pode aumentar tanto quanto 1.000 vezes durante a resposta de fase aguda. A CRP é um pentâmero consistindo de cinco subunidades idênticas, possuindo cada um peso molecular de cerca de 23 500.
Os níveis de proteína reactiva C podem ser determinados usando técnicas conhecidas na técnica, estas incluem, mas 27 não se limitam às descritas em Senju et al (1983), Weinstein et al (1984), Price et al (1987), Liuzzo et al (1994), Eda et al (1998), Kimura et al (2001) e 0'Hanlon et al (2002).
As proteínas complemento são um grupo de pelo menos 20 componentes imunologicamente distintos. Elas normalmente circulam no sangue numa forma inactiva. São capazes de interagir sequencialmente com complexos de antigénio-anticorpo, entre si e com as membranas celulares de um modo complexo, porém adaptável para destruir vírus e bactérias e, patologicamente, até mesmo as próprias células do hospedeiro. Níveis anormais de proteínas complemento no soro podem ser devidos a doenças hereditárias ou adquiridas. Pelo menos os níveis circulantes de C3 e C4 reflectem um equilíbrio entre o consumo de complemento devido à formação do complexo imunitário e a síntese aumentada devido à resposta de fase aguda. Os métodos para medir os níveis de proteína do complemento são bem conhecidos na técnica.
Os níveis de interleucinas diferentes também podem ser determinados usando procedimentos conhecidos na técnica, tais como a utilização do kit de ensaio de citocina ProteoPlex™ (EMD Biosciences Inc., CA, EUA).
Agentes O agente resulta, selectiva ou não selectivamente, na destruição, inibição da produção ou redução da actividade de células reguladoras. Por exemplo, um anticorpo específico CD4+ podia ser usado para abordar especificamente células T CD4+. Contudo, em alguns casos, podia ser utilizado um agente não selectivo, tal como um fármaco antiproliferativo ou radiação, os quais destroem 28 ambos as células em divisão. Em particular, como com outros tipos de células, as células reguladoras são particularmente vulneráveis à destruição por fármacos antimitóticos (antiproliferativos) ou venenos de fuso (por exemplo, Vinblastina ou placitaxel) quando em divisão e especificamente na mitose. 0 termo "fármaco antiproliferativo" é um termo bem conhecido na técnica e refere-se a qualquer composto que destrói células em divisão ou as inibe de sofrerem proliferação adicional. Os fármacos antiproliferativos incluem, mas não se limitam a, mecloretamina, ciclofosfamida , ifosfamida, melfalano, clorambucil, hexametil-melamina, tiotepa, bussulfano, carmustina, lomustina, semustina, estreptozocina, dacarbazina, metotrexato, fluorouracilo, floxuridina, citarabina, mercaptopurina , tioguanina, pentostatina, vinblastina, vinblastina anidra, vincristina, etoposido, teniposido, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, bleomicina, plicamicina, mitomicina, L- -asparaginase, cisplatina, mitoxantrona, hidroxiureia, procarbazina, mitotana, aminoglutetimida, prednisona, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de medroprogesterona, acetato de megestrol, dietilestilbestrol, etinilestradiol, tamoxifeno, propionato de testosterona, isótopos radioactivos, cadeia de ricina A, taxol, toxina da difteria, colchicina e exotoxina A de pseudomonas.
Os agentes são geralmente administrados nas formas de dosagem que estão prontamente disponíveis para os clínicos especialistas e são geralmente administrados nas suas quantidades normalmente prescritas (como por exemplo, as quantidades descritas no Physician's Desk Reference, 55a Edição 2001, ou as quantidades descritas na literatura do 29 fabricante para a utilização do agente).
Numa forma de realização, o agente é administrado como uma injecção bolus simples. Noutra forma de realização, o agente é administrado por infusão. 0 período de infusão pode ser, por exemplo, de pelo menos 3 horas, pelo menos 12 horas ou pelo menos 24 horas.
Estudos recentes sugeriram que as células T CD4+CD25+ desempenham um papel importante na regulação das células imunitárias contra antigénios próprios (Salomon et al, 2000; Suri-Payer and Cantor, 2001). Além disso, a abordagem das células T CD4+CD25+ mostrou melhorar a capacidade de um animal de controlar o crescimento do tumor (Onizuka et al, 1999; Shimizu et al, 1999; Sutmuller et al, 2001) . Consequentemente, as células T CD4+CD25+ poderiam estar a actuar como células reguladoras como aqui utilizadas. A actividade das células T CD4+CD25+ pode ser regulada negativamente por anti-GITR, anti-CD28 e/ou anti-CTLA-4 (Read et al, 2000; Takahashi et al, 2000; Shimizu et al, 2002). Assim, estes anticorpos podem ser úteis como agentes para serem utilizados nos métodos da presente invenção.
Outro exemplo de um agente que pode ser administrado num método da invenção é o ARNds. O ARNds é usado na interferência de ARN (ARNi) que é um fenómeno que após introdução numa célula, o ARNm homólogo do ARNds é especificamente degradado, pelo que é suprimida a síntese dos produtos genéticos. Exemplos de um tal agente que origina ARNi inclui, mas não se limita à sequência possuindo pelo menos 70% de homologia com a sequência de ácido nucleico de um gene alvo ou uma sequência hibridisável sob condições estringentes, ARN contendo uma porção de cadeia dupla possuindo um comprimento de pelo 30 menos 10 nucleótidos ou variantes dos mesmos. Exemplos de genes alvo incluem, mas não se limitam a um gene necessário para replicação de uma célula reguladora, um gene necessário para sobrevivência de uma célula cancerosa ou um gene necessário para crescimento e/ou replicação de um agente infeccioso.
Pode utilizar-se ARNds possuindo um comprimento de cerca de 20 bases (por exemplo, representativamente 21 a 23 bases) ou menos de cerca de 20 bases, que é denominado ARNsi na técnica. A expressão de ARNsi nas células pode suprimir a expressão de um gene alvo do ARNsi. Noutra forma de realização, um agente capaz de originar ARNi pode ter uma estrutura de grampo curta possuindo uma porção pegajosa na extremidade 3' (ARNsh; ARN de grampo curto). Como aqui utilizado, o termo "ARNsh" refere-se a uma molécula de cerca de 20 ou mais pares de bases nos quais um ARN de cadeia simples contém parcialmente uma sequência palindrómica de bases e forma uma estrutura de cadeia dupla (isto é, uma estrutura de grampo). O ARNsh pode ser sintetizado artificialmente por via quimica. Alternativamente, o ARNsh pode ser produzido por cadeias mensageiras e antimensageiras de ligação de uma sequência de DNA em direcções inversas e por síntese de ARN in vitro com ARN polimerase de T7 usando o DNA como uma cadeia molde. O comprimento da porção de cadeia dupla não está particularmente limitado, mas é preferivelmente de cerca de 10 ou mais nucleótidos e, mais preferencialmente de cerca de 20 ou mais nucleótidos. A extremidade saliente 3' pode ser preferencialmente ADN, mais preferencialmente ADN de pelo menos dois nucleótidos de comprimento e, ainda mais preferencialmente, ADN de 2-4 nucleótidos de comprimento.
Um agente capaz de originar ARNi útil para a invenção pode 31 ser sintetizado artificialmente (química ou bioquimicamente) ou ocorrer naturalmente. Não existe diferença substancial entre os mesmos em termos de efeito da presente invenção. Um agente sintetizado quimicamente é preferencialmente purificado por cromatografia líquida ou semelhante.
Um agente capaz de originar ARNi usado na presente invenção pode também ser produzido in vitro. Neste sistema de síntese podem ser usados ARN polimerase de T7 e promotor T7 para sintetizar ARNs antimensageiro e mensageiro de ADN de cadeia molde. Estes ARNs são emparelhados e depois disso introduzidos na célula. 0 ARNds pode ser administrado ao doente usando quaisquer meios conhecidos na técnica. Exemplos de métodos de administração de ARNds a um doente são descritos, por exemplo, nas US 20040180357, US 20040203024 e 20040192629.
Planeamento da Exposição do Indivíduo ao Agente
Para o investigador que aplica aleatoriamente um tratamento único de quimioterapia antiproliferativa a um doente com cancro, existe uma probabilidade aproximada de 1 em 14, a 1 em 15, de ser efectuado na altura correcta. Uma probabilidade de um em catorze iguala a uma probabilidade de 7% de aplicar a terapia no dia correcto, quando as células reguladoras são vulneráveis à inactivação. Se isto for feito, o tumor devia regredir mediado por destruição imunológica. Mais especificamente, colocamos como hipótese que uma vez removidas as células reguladoras por intervenção terapêutica, a resposta imunológica contra o tumor ou vírus pode prosseguir sem impedimentos, conduzindo em última análise ao controlo da doença. 32
Embora não se pretenda ficar limitado pela teoria, julga-se que o número relativo de células efectoras se expande em resposta a um antigénio antes das células reguladoras. Consequentemente, a altura de administração do agente deve ser de modo a que o agente exerça proporcionalmente um maior efeito contra as células reguladoras do que contras as células efectoras. É claramente preferido que o agente seja administrado numa altura em que seja maior a razão do efeito contra as células reguladoras relativamente ao efeito contra as células efectoras.
Como delineado acima, a presente invenção assenta no fenómeno de que o sistema imunitário está a funcionar em ciclo ao longo de um período de cerca de 14 a 15 dias num doente que sofre de uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras. Na maior parte dos casos, o ponto no tempo em que o agente deve ser administrado tem ser determinado empiricamente nos indivíduos em etapas diferentes da doença uma vez que a cinética de sua resposta imunológica pode variar. Outros factores, tais como, o estado físico geral do indivíduo e/ou a constituição genética do mesmo também terão impacto na altura apropriada para administrar o agente.
Conforme será compreendido pelos especialistas na técnica, condições tais como, cancro e infecções persistentes crónicas são doenças sérias, de modo frequente potencialmente fatais. Devido a muitos factores, dos quais as variações naturais entre os indivíduos não é o menor de todos, será tipicamente necessário que o doente seja seguido durante um período de tempo razoável de modo a compreender a natureza do funcionamento imunológico em ciclo no indivíduo e a analisar um número de factores (tal como uma combinação de marcadores de fase aguda e 33 antigénios patológicos), para determinar finalmente a altura mais apropriada para administrar o agente de modo a optimizar a probabilidade de um tratamento eficaz.
Podem ser utilizadas técnicas conhecidas na matéria para seguir o crescimento da população de células efectoras e/ou reguladoras durante o "ciclo".
Podem ser recolhidas amostras de sangue sucessivas e analisadas quantitativamente em relação a todos os subconjuntos CD4+ por análise FACS. Este seguimento por FACS terá de ser mantido até as células reguladoras começarem a expandir clonalmente em resposta ao estado patológico, quer produzidas pelo tumor ou administradas ao indivíduo. Outros ensaios possíveis para seguir o crescimento populacional de células reguladoras incluem os ensaios de proliferação/activação de linfócitos e vários ensaios ao nível das citocinas (por exemplo, um ensaio para IL-4, IL-6 OU IL-10).
Também podem ser recolhidas amostras sucessivas de sangue e analisadas quantitativamente em relação a toda a actividade de células efectoras, tais como, mas não se limitando a CD8 + , CRP, SAA e várias citocinas. Tais marcadores de células efectoras precederão os marcadores de células reguladoras.
Quando a doença é cancro, outra via para determinar o ponto no tempo para administrar o agente é seguir a carga tumoral. Prevê-se que a carga tumoral diminua devido à actividade das células efectoras, contudo, o aumento subsequente nas células reguladoras levaria à regulação negativa das células efectoras, resultando num abrandamento da diminuição da carga tumoral. Consequentemente, o agente 34 poderia ser administrado aproximadamente antes do abrandamento da diminuição da carga tumoral. Técnicas conhecidas na matéria, por exemplo, RT-PCR ou detecção de anticorpo, de marcadores expressados pelo tumor, poderiam ser usadas para medir a carga tumoral nestas circunstâncias. Exemplos de ensaios de marcadores de antigénio tumoral apropriados incluem, mas não se limitam a ensaios para AFP (marcador para carcinoma hepatocelular e tumores das células embrionárias), CA 15-3 (marcador para vários cancros, incluindo cancro de mama), CA 19-9 (marcador para vários cancros incluindo cancro pancreático e tumores das vias biliares), CA 125 (marcador para vários cancros incluindo cancro do ovário), catecolaminas e metabolitos (feocromocitoma), CEA (marcador para vários cancros incluindo cancros colorrectais e outros cancros gastrointestinais), hCG/beta hCG (marcador para vários cancros incluindo tumores das células embrionárias e coriocarcinomas), 5HIAA na urina (sindrome carcinóide), PSA (cancro da próstata), serotonina (sindrome carcinóide) e tiroglobulina (carcinoma da tiróide). 0 seguimento pode ter de ser muito frequente, por exemplo, tão frequente quanto em poucas horas, para garantir que seja seleccionado o ponto correcto no tempo para administração do agente. Preferencialmente, o seguimento é realizado pelo menos a cada 48 horas. Mais preferencialmente, o seguimento é realizado pelo menos a cada 24 horas.
De forma óptima, o seguimento é continuo de modo a determinar o efeito do agente. Regulação negativa insuficiente, reaparecimento das células reguladoras ou aumentos, por exemplo, na carga tumoral significarão que o método da presente invenção deveria ser repetido. Tais 35 ciclos repetidos de tratamento podem gerar memória imunológica. Portanto, é possível gue a presente invenção, usada no modo repetitivo, possa proporcionar algum efeito profiláctico protector.
Vacinas
Como delineado acima, o inventor também observou, após uma pesquisa da literatura, que o tratamento de uma variedade de cancros com vacinas terapêuticas, produziu em média uma taxa de resposta completa de cerca de 10% (ver, por exemplo, Trefzer et al, 2004; Lotem et al, 2004; Smithers et al, 2003; Belli et al, 2002; Berd et al, 2001; Wittig et al, 2001). Isto implica uma janela de oportunidade de aplicação terapêutica de 1,5 dias a cada 14 dias (10%). Isto é semelhante e está bem dentro da esfera de probabilidade de taxas de resposta completa de aproximadamente 7% (1 dia em 14) observada na quimioterapia de cancro aqui relatada. Assim, um mecanismo semelhante está a funcionar no caso da vacina pelo que a inoculação de uma vacina contra cancro no doente no tempo correcto é suficiente para perturbar os mecanismos/células reguladores permitindo que as efectoras matem o tumor, resultando numa resposta completa.
Naturalmente, as vacinas usadas na presente invenção resultarão numa imunização contra uma doença que se caracteriza pela produção de células reguladoras. Uma tal vacina compreenderá pelo menos um antigénio ou um polinucleótido que codifica o referido antigénio. A vacina pode ser proporcionada como uma forma conhecida na técnica tal como, mas não se limitando a vacina de ADN, ingestão de um organismo transgénico que expressa o antigénio ou composição compreendendo o antigénio. 36
Como aqui utilizado, um "antigénio" é qualquer sequência de polipéptido que contém um epítopo que seja capaz de produzir uma resposta imunológica contra a doença.
Os antigénios que são capazes de aumentar uma resposta imunológica contra uma célula cancerosa são bem conhecidos na técnica. Determinados antigénios tumorais podem ser reconhecidos e abordados pelo sistema imunitário. Esta propriedade pode ser devida à sobreexpressão pelo tecido tumoral. Alguns destes antigénios podem ser detectados em tecido normal. Os antigénios tumorais abordados por células T são geralmente proteínas que são processadas intracelularmente e apresentadas como fragmentos de péptido curtos ligados na cavidade da molécula MHC de classe I do tumor para serem reconhecidos por linfócitos T citotóxicos CD8+. A mera presença de um antigénio tumoral não é sempre suficiente para desencadear uma resposta imunológica. Por vezes são necessárias moléculas co-estimuladoras tais como B7.1. Uma vez estimuladas as células T específicas para o antigénio, elas são capazes de reconhecer e destruir o tumor. As condições necessárias para a activação de células T específicas para os antigénios são estringentes, mas são abertas à manipulação genética de células tumorais alvo e células T.
Os antigénios que podem ser usados para tratar infecções, tais como HIV, são bem conhecidos na técnica. 0 antigénio pode ser proporcionado de qualquer modo conhecido na técnica que conduza a uma resposta imunológica. Um antigénio pode ser, por exemplo, nativo, recombinante ou sintético. Os antigénios nativos podem ser preparados, por exemplo, proporcionando lisados celulares de uma célula tumoral. 37
Podem ser preparadas vacinas de um ou mais antigénios. A preparação de vacinas que contém um antigénio é conhecida dos especialistas na técnica. Tipicamente, tais vacinas são preparadas como injectáveis ou orais, quer como soluções liquidas ou suspensões; também podem ser preparadas como formas sólidas apropriadas para dissolução ou suspensão num líquido antes da injecção ou para consumo oral. A preparação também pode ser emulsionada ou a proteína encapsulada em lipossomas. 0 antigénio é frequentemente misturado com veículos/excipientes que são farmaceuticamente aceitáveis e compatíveis com o ingrediente activo. Os veículos/excipientes apropriados são, por exemplo, água, soro fisiológico, dextrose, glicerol, etanol ou semelhantes, e combinações dos mesmos.
Além disso, se desejado, a vacina pode conter quantidades menores de substâncias auxiliares, tais como, humectantes ou emulsionantes, agentes de tamponamento de pH e/ou adjuvantes que melhoram a eficácia da vacina.
Tipicamente, as vacinas compreendem um adjuvante. Como aqui utilizado, o termo "adjuvante" significa uma substância que melhora não especificamente a resposta imunológica a um antigénio. Exemplos de adjuvantes que podem ser eficazes incluem, mas não se limitam a: N-acetil-muramil-L-treonil-D-isoglutamina (thr-MDP), N-acetil-nor-muramil-L-alanil-D-isoglutamina (CGP 11637, referida como nor-MDP), N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutaminil-L-alanina-2-(1—2— dipalmitoil-sn-glicero-3-hidroxi-fosforiloxi)-etilamina (CGP19835A, referida aqui como MTP-PE) e RIBI, que contém três componentes extraídos de bactérias, monofosforil-lípido A, dimicolato de trealose e esqueleto de parede celular (MPL+TDM+CWS) numa emulsão de esqualeno/Tween 80 a 2%. Exemplos adicionais de adjuvantes incluem hidróxido de 38 alumínio, fosfato de alumínio, sulfato de potássio alumínio (alum), endotoxina bacteriana, lípido X, Corynebacterium parvum (Propionobacterium acnes), Bordetella pertussis, polirribonucleótidos, alginato de sódio, lanolina, lisolecitina, vitamina A, saponina, lipossomas, levamisole, DEAE-dextrano, copolímeros bloqueados ou outros adjuvantes sintéticos. Tais adjuvantes são disponíveis comercialmente de várias fontes, por exemplo, Merck Adjuvant 65 (Merck and Company, Inc., Rahway, N.J.) ou Adjuvante Completo e Adjuvante Incompleto de Freund (Difco Laboratories, Detroit, Michigan). A proporção de antigénio e adjuvante pode variar numa gama larga desde que ambos estejam presentes em quantidades eficazes. Por exemplo, o hidróxido de alumínio pode estar presente numa quantidade de cerca de 0,5% da mistura de vacina (com base em AI2O3) . Convenientemente, as vacinas são formuladas para conter uma concentração final de polipéptido antigénico na gama de 0,2 a 200 μg/mL, preferencialmente 5 a 50 pg/mL, mais preferencialmente 15 pg/mL.
Após a formulação, a vacina pode ser incorporada num recipiente estéril que é então selado e armazenado a uma temperatura baixa, por exemplo, 4°C, ou pode ser liofilizada. A liofilização permite o armazenamento a longo prazo numa forma estabilizada.
As vacinas são convencionalmente administradas por via parentérica, por injecção, por exemplo, quer por via subcutânea ou intramuscular. Formulações adicionais que são apropriadas para outros modos de administração incluem supositórios e, em alguns casos, formulações orais. No caso de supositórios, os aglutinantes e veículos tradicionais 39 podem incluir, por exemplo, polialquileno glicóis ou triglicéridos; tais supositórios podem ser preparados de misturas contendo o ingrediente activo na gama de 0,5% a 10%, preferencialmente 1% a 2%. As formulações orais incluem excipientes normalmente utilizados tais como, por exemplo, qualidades farmacêuticas de manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, sacarina sódica, celulose, carbonato de magnésio e semelhantes. Estas composições tomam a forma de soluções, suspensões, comprimidos, pílulas, cápsulas, formulações de liberação prolongada ou pós e contêm 10% a 95% de ingrediente activo, preferencialmente 25% a 70%. Quando a composição de vacina é liofilizada, o material liofilizado pode ser reconstituído antes da administração, por exemplo, como uma suspensão. A reconstituição é preferencialmente efectuada em tampão.
As cápsulas, comprimidos e pílulas para administração oral a um doente podem ser proporcionadas com um revestimento entérico compreendendo, por exemplo, Eudragit "S", Eudragit "L", acetato de celulose, ftalato acetato de celulose ou hidroxipropilmetilcelulose. A vacinação com ADN envolve a introdução directa, in vivo, e ADN que codifica um antigénio nos tecidos de um indivíduo para expressão do antigénio pelas células do tecido do indivíduo. Tais vacinas são aqui designadas "vacinas de ADN" ou "vacinas à base de ácido nucleico". As vacinas de ADN são descritas nas US 5,939,400, US 6,110,898, WO 95/20660 e WO 93/19183, cujas divulgações são aqui incorporadas na sua totalidade por referência.
Até à data, a maioria das vacinas de ADN em sistemas de mamíferos têm confiado em promotores virais derivados de 40 citomegalovírus (CMV). Estes têm tido boa eficácia na inoculação de músculo e pele num número de espécies de mamíferos. Um factor que se sabe que afecta a resposta imunológica promovida pela imunização com ADN é o método de administração do ADN, por exemplo, vias parentéricas podem produzir taxas baixas de transferência de gene e produzir uma variabilidade considerável na expressão do gene. A inoculação de alta velocidade de plasmídeos, usando uma pistola de gene, melhorou as respostas imunológicas de ratos, presumivelmente devido a uma maior eficácia da transfecção do ADN e a uma apresentação de antigénio mais eficaz pelas células dendríticas. Vectores contendo a vacina à base de ácido nucleico da invenção também podem ser introduzidas no hospedeiro desejado por outros métodos conhecidos na técnica, por exemplo, transfecção, electroporação, microinjecção, transdução, fusão celular, dextrano DEAE, precipitação com fosfato de cálcio, lipofecção (fusão do lisossoma) ou um transportador de vector de ADN.
Pode produzir-se plantas transgénicas que produzem um polipéptido antigénico usando procedimentos bem conhecidos na técnica. Um número de vacinas comestíveis de origem vegetal estão presentemente a ser desenvolvidas para agentes patogénicos de animais e seres humanos. Também foram obtidas respostas imunológicas da imunização oral com plantas transgénicas que produzem partículas semelhantes a vírus (VLPs) ou vírus quiméricos de plantas que apresentam epítopos antigénicos. Foi sugerido que a forma particulada destes VLPs ou vírus quiméricos pode resultar numa maior estabilidade do antigénio no estômago, aumentando eficazmente a quantidade de antigénio disponível para absorção nos intestinos. 41
EXEMPLOS
Exemplo 1 A seguir são proporcionados exemplos de ensaios tipicos utilizados para seguir alguns marcadores inflamatórios de fase aguda, bem como o marcador de cancro do ovário CA125.
Proteína Reactiva c A Proteína Reactiva C foi medida usando um Analisador Químico DADE Behring Dimension RxL, com reagentes e calibradores fornecidos pela Dade Behring Diagnostics (Sydney, Austrália) (número Cat. do reagente: DF-34; número Cat. dos calibradores: DC-34). 0 método de CRP baseia-se numa técnica de imunoensaio turbidimétrico de partícula melhorado. As partículas de látex revestidas com anticorpo contra a Proteína Reactiva C agregam-se na presença da Proteína Reactiva C na amostra. 0 aumento da turvação que acompanha a agregação proporcional à concentração da Proteína Reactiva C. PRECISÃO INTRA-ENSAIO PRECISÃO DO INTER-ENSAIO Média mg/L CV N Média mg/L CV N 3,4 4, 3% 20 4, 6 5,6% 64 57, 5 2,3% 20 37, 0 3,0% 64 225, 8 2,0% 20
GAMA DE REFERENCIA: 0-5 mg/L GAMA ANALÍTICA: 0,5-500 mg/L
Antigénio Cancerígeno 125 (CA125)
AxSym CA 125 baseou-se na tecnologia de Imunoensaio de Enzima em Micropartículas (MEIA) realizada num AxSym da Abbott Diagnostics com reagentes e calibradores fornecidos pela Abbott Diagnostics (Pacote de reagente AxSym, número Cat. 3B41-22; número Cat. dos calibradores: 9C22-01). 42
Amostra, micropartículas revestidas com anti CA 125 e diluente de espécime são pipetados para um poço do recipiente de reacção. 0 CA125 liga-se às micropartículas revestidas com anti-CA 125 formando um complexo Ab-Ag. Uma aliquota da mistura de reacção contendo o complexo Ab-Ag ligado às microparticulas liga-se irreversivelmente à matriz de fibra de vidro. A célula matriz é lavada com tampão de lavagem para remover os materiais não ligados. 0 conjugado ALP especifico para a subunidade de anti-CA 125 é disperso sobre a célula de matriz e liga-se ao complexo de Ab-Ag. A célula matriz é lavada para remover o material não ligado. 0 substrato, fosfato de 4-metilumbeliferilo, é adicionado à célula de matriz e o produto fluorescente é medido pelo conjunto óptico MEIA.
As diluições são feitas com diluente de espécime Abbott CA 125 (número 3B41-50). O coeficiente de variação como avaliado a partir dos soros de controlo de qualidade de rotina a dois níveis (Abbott Tumour Marker Control (9C22-10 níveis 1, 2 e 3)) é como se MÉDIA DP cv% N NÍVEL 1 U/Ml 2,5 9,4 27 64 NÍVEL 2 U/mL 78 LO LO 7,1 64 NÍVEL 3 U/mL 211 21, 4 10, 2 54
GAMA DE REFERÊNCIA: 0-35 U/mL GAMA ANALÍTICA: 2-600 U/mL
Receptor de Interleucina 2(IL2R) O receptor da citocina interleucina 2 (IL2R) foi medido por um Imunoensaio Enzimático quimioluminescente automatizado comercial (EIA) utilizando um Analisador de Imulita da Diagnostic Products Corporation (Los Angeles, CA, EUA). 43
Este é um imunoensaio competitivo utilizando IL2R marcado com Fosfatase Alcalina como marcador e adamantildioxetano como substrato luminescente para a enzima ALP.
Todos reagentes e calibradores são fornecidos na forma de kit por DPC - número Cat. LKIPZ. Desempenho analítico: MÉDIA DP cv% NÍVEL 1 213 U/mL 13 6,1 NÍVEL 2 752 U/mL 49 6,5 NÍVEL 3 2463 U/mL 189 7,7 GAMA ANALÍTICA: 5-7.500 U/mL GAMA DE REFERÊNCIA: 223-710 U/mL* *Estudo realizado em 87 adultos aparentemente saudáveis.
Interleucina 6 A citocina interleucina 6 foi medida por um Imunoensaio Enzimático quimioluminescente automatizado comercial (EIA) empregando um Analisador de Imulita da Diagnostic Products Corporation (Los Angeles, CA, EUA).
Este é um imunoensaio competitivo utilizando IL-6 marcada com Fosfatase Alcalina como marcador e adamantildioxetano como substrato luminescente para a enzima ALP.
Todos reagentes e calibradores são fornecidos na forma de kit por DPC, número Cat. LK6PZ. Desempenho analítico: MEDIA DP CV% NÍVEL 1 88 pg/mL 4,5 5,1 NÍVEL 2 230 pg/mL 12,2 5,3 NÍVEL 3 638 pg/mL 46,6 7,3 GAMA ANALÍTICA: 2-1000 pg/mL GAMA DE REFERÊNCIA: <4,1 pg/mL* *Estudo realizado em 60 voluntários de laboratório aparentemente saudáveis. 44
Interleucina 10 A citocina interleucina 10 foi medida por um Imunoensaio Enzimático quimioluminescente automatizado comercial (EIA) utilizando um Analisador de imulita da Diagnostic Products Corporation (Los Angeles, CA, EUA).
Este é um imunoensaio competitivo empregando IL-10 marcada com Fosfatase Alcalina como marcador e adamantildioxetano como substrato luminescente para a enzima ALP.
Todos reagentes e calibradores são fornecidos na forma de kit por DPC, número Cat. LKXPZ. Desempenho analítico: MÉDIA DP CV% NÍVEL 1 18,2 pg/mL 1,8 9,9 NÍVEL 2 46,0 pg/mL 2, 2 4,8 NÍVEL 3 177 pg/mL 8, 0 4,5 GAMA ANALÍTICA: 5-1000 pg/mL GAMA DE REFERÊNCIA: <9,1 pg/mL* *Estudo realizado em 55 adultos aparentemente saudáveis.
Amilóide A de soro
Partículas de poliestireno revestidas com anticorpos contra a SSA humana são aglutinadas quando misturadas com amostras contendo SAA. A intensidade da luz difundida no nefelómetro depende da concentração de analito na amostra e, consequentemente, a sua concentração pode ser determinada por comparação com diluições de um padrão de concentração conhecida. IMPRECISÃO: CV 4,7% @ 192 mg/L N = 404 CV 2,8% @7,0 mg/L N = 40 GAMA DE REFERENCIA: Numa população com níveis de CRP no soro normais (95% = 5,0 mg/L N = 483) o percentil 95 para N Latex SAA foi
verificado com sendo de 6,4 mg/L GAMA ANALÍTICA: 3,0-200 mg/L
Complemento C3 45
Foi utilizado o método automatizado para medir a concentração de complemento C3 em amostras de soro por análise nefelométrica usando um analisador ProSpect da Dade Behring com reagentes e calibradores fornecidos pela Dade Behring Diagnostics (Sydney, Austrália). A solução de antigénio solúvel (amostra) e os anticorpos específicos (anti-soro, Cat. No. 0SAP15) são misturados nas cuvetes de reacção. Formam-se imediatamente complexos insolúveis de antigénio-anticorpo, que produzem turvação na mistura e aumentam a concentração de luz difundida pela solução. Após um período de incubação, a absorvância da solução é medida ao comprimento de onda analítico. IMPRECISÃO: CV 5,5% 0 1,05 g/L N = 61 CV 3,2% 0 2,70 g/L N = 61
GAMA DE REFERENCIA: 0,81 - 1,85 g/L GAMA ANALÍTICA: 0,10-3,50 g/L_
Complemento C4
Foi utilizado o método automatizado para medir a concentração do complemento C4 em amostras de soro por análise nefelométrica usando um analisador ProSpect da Dade Behring com reagentes e calibradores fornecidos pela Dade Behring Diagnostics (Sydney, Austrália). A solução de antigénio solúvel (amostra) e os anticorpos específicos (anti-soro, Cat. No. 0SA015) são misturados nas cuvetes de reacção. Forma-se imediatamente complexos insolúveis de antigénio-anticorpo, que produzem turvação na mistura e aumentam a concentração de luz difundida pela solução. Após um período de incubação, a absorvância da solução é medida ao comprimento de onda analítico. IMPRECISÃO: CV 4,7% @ 0,20 g/L N = 61 _ CV 3,8% 0 0,53 g/L_N = 61
GAMA DE REFERENCIA: 0,10 - 0,40 g/L GAMA ANALÍTICA: 0,03-1,50 g/L_ 46
Exemplo 2
Uma doente de certa idade com cancro do ovário foi seguida durante cerca de 12 dias em relação a flutuações nos níveis de proteína reactiva c, amilóide A de soro e marcador tumoral CA125. 0 seguimento foi realizado usando ensaios correntes de laboratório em amostras de sangue recolhidas em dias intercalados. A doente não tinha sido recentemente exposta a qualquer terapia anticancerígena. Além disso, não havia qualquer evidência de que a doente estivesse a sofrer de quaisquer outras doenças que não o cancro. 0 CA125 (um marcador de cancro do ovário) foi seguido com um indicador do estado da doença.
Conforme mostrado na Figura IA, os níveis de proteína reactiva c (CRP) atingiram um máximo no início do período de seguimento. Além disso, como se mostra na figura 1B, os níveis de amilóide A aumentaram ao mesmo tempo que o máximo de CRP.
Estes resultados indicam que: i) os níveis de proteínas inflamatórias de fase aguda variam num doente com cancro na ausência de quaisquer outros factores conhecidos que possam provocar estas flutuações, tais como infecção virai ou quimioterapia; ii) níveis elevados de proteínas inflamatórias de fase aguda estavam associados a níveis mais baixos de antigénios tumorais sugerindo a presença de células efectoras, e iii) níveis aumentados de antigénio tumoral estão associados a níveis mais baixos de proteínas inflamatórias de fase aguda, sugerindo que as células reguladoras contrabalançaram a actividade benéfica das células efectoras pelo que estas células já não são activas contra as células tumorais. 47
Exemplo 3
Um indivíduo humano que sofre de infecção por HIV foi submetido a terapia anti-retroviral altamente activa (HAART) durante pelo menos 6 meses e, em seguida, retirado o tratamento. Os níveis de proteína reactiva C foram determinados usando técnicas correntes em amostras obtidas durante e após o término da HAART.
Como se pode observar na Figura 2, os resultados mostram que após o término da HAART os níveis da proteína reactiva c começaram a entrar em ciclo, alcançando um máximo aproximadamente a cada 14 dias.
Exemplo 4 A CRP no soro foi utilizada para seguir a resposta imunológica em doentes com HIV que tinham parado a sua terapia anti-retroviral (Figura 3). Neste estudo, os níveis de CRP imitaram as flutuações da carga virai à medida que a resposta imunológica era activada e desactivada (Figura 3). É interessante observar que estas flutuações de CRP possuem um ciclo aproximado de 14 dias.
Exemplo 5 A base de dados "Pubmed" (http://www.ncbi,nlm.nih,gov/) foi pesquisada em relação a resumos de artigos científicos que descreviam os resultados de ensaios clínicos de Fase II ou Fase III utilizando agentes anticancerígenos (tais como, vinblastina e taxol) para o tratamento do cancro. Outros critérios que foram usados para seleccionar os "resumos" foram que o cancro estivesse numa fase avançada (fase III ou fase IV) e que a doença se tivesse disseminado. Alguns estudos usaram um único fármaco, enquanto outros usaram associações. Nenhum outro critério foi usado e os estudos com uma taxa de resposta completa atípica não foram 48 ignorados . A taxa de resposta completa (conforme indicado nos resumos) para cada experiência foi usada para determinar a taxa de resposta completa média de cada tipo de cancro. Os resultados são proporcionados no Quadro 1. Notavelmente, a taxa de resposta completa média variou apenas um pouco, nomeadamente, entre 5,1 a 8,2% para todos os cancros analisados. Os resultados proporcionados no Quadro 1 foram utilizados para determinar a taxa de resposta completa média total. Esta taxa de resposta completa média foi de 6,6% em relação a pelo menos 10 tipos diferentes de cancros, quando se consideraram as 144 experiências analisadas.
No que se refere especificamente aos dados proporcionados para o cancro do ovário, assinale-se que um estudo (Adachi et al., 2001) observou uma taxa de resposta completa de 25% que foi muito grande quando comparada às outras 143 experiências. Este estudo olhou para oito doentes, proporcionando dois doentes uma taxa de resposta completa. Embora isto esteja bem dentro dos limites da possibilidade, se o estudo for ignorado, a taxa de resposta completa total para os restantes estudos de cancro do ovário é de 7,1%.
As taxas de resposta completa são extraordinariamente coerentes entre os diferentes cancros e regimes de tratamento dos mesmos, sugerindo um factor subjacente relevante para todos os cancros e tratamentos dos mesmos. Como aqui descrito, esse factor é o de o sistema imunitário estar a funcionar em ciclo. Consequentemente, pode-se argumentar que as taxas de resposta completas proporcionadas no Quadro 1 são o resultado de o agente anticancerigeno ser administrado numa altura apropriada de 49 modo a que o número de células efectoras seja maximizado enquanto o número de células reguladoras é reduzido ou removido, ou a actividade está regulada negativamente ou comprometida, pelo agente anticancerigeno suficiente para promover uma resposta completa.
Quadro 1 - Taxas de Resposta Completa Resultantes de Ensaios Clínicos com Farmacos Anticancerígenos contra Vários Cancros Tipo do Cancro Taxa de resposta completa (%) Número de Ensaios Mesotelioma3 5,1 10 Gástricob 7, 33 15 Hepatocelular0 6,6 8 Pancreáticod 7, 35 4 Melanoma® 7,5 15 Próstata1 5, 15 7 Pulmonar NSC9 5, 85 6 Mamah 7, 36 19 Ovarino1 8,2 15 Colorretal^ 6, 85 28 Diversos14 6,0 17 a Tsavaris et al (1997), Monnet et al (2002), Pinto et al (2001), Kindler et al (1999), Yogelzang et al (1997), Planting et al (1995), Chahinian et al (1993), Raghavan et al (1990), Henss et al (1988) e Mbidde et al (1986). b Kollmannsberger et al (2000), Sugimachi et al (2000), Jeen et al (2001), Yamada et al (2001), Aitini et al (2001), Cho et al (2002),
Kornek et al (2002), Hofheinz et al (2002), Constenla et al (2002),
Kim et al (2002), Louvet et al (2002), Kikuyama et al (2002), Bar Sela et al (2002), Murad et al (1999) e Sakata et al (1998). c Porta et al (1995), Pohl et al (2001), Oon et al (1980), Choi et al (1984), Zeng et al 1998), Carr et al (1997), Patt et al (2003) e Leung et al (1999). d Murad et al (2003), Ashamalla et al (2003), Safran et al (2002) e Sherman et al (2001). e Retsas et al (1996), Nathan et al (2000), Bafaloukos et al (2002), Bafaloukos et al (2000), Buzaid et al (1998), Gibbs et al (2000),
Atkins et al (2002), Gundersen et al (1989), Johnson et al (1985), Nystrom et al (2003), Einzig et al (1991), Bedikian et al (1995), 50
Einzig et al (1996), Nathan et al (2000) e Chapman et al (2002). f Hudes et al (1997), Kelly et al (2001), Savarese et al (1999), Small et al (2001), Savarese et al (2001), Trivedi et al (2000) e Picus et al (1999) . 9 Mariotta et al (2002), Recchia et al (2002), Perng et al (2000),
Ginopoulos et al (1999), Paccagnella et al (1996) e Angelaki et al (2001). 11 Freyer et al (2003), Morabito et al (2003), Kosmas et al (2003), Gebbia et al (2003), Thomas et al (1994), Romero et al (1994),
Pectasides et al (2001), Frasci et al (2002), Stahopoulos et al (2002), Gomez-Bernal et al (2003), Freyer et al (2003), Kornek et al (1998), Michelotti et al (1996), Kakolyris et al (1999), Twelves et al (1994), Fumoleau et al (1993) e Ibrahim et al (1999) . 1 Li et al (2002), Sehouli et al (2002), Rose et al (2003), Dieras et al ( 2002), Adachi et al (2001), Sutton et al (1994), McClay et al (1995), Mannetta et al (1994), Guastalla et al (1994), Covens et al (1992) , Einzig AI. (1994), Kjorstad et al (1992) , Ozols et al ( 1984),
Planner et al (1996) e Amadori et al (1997). 9 Cassinello et al (2003), Glimelius et al (2002), Calvo et al (2002), Sheithauer et al (2002), Neri et al (2002), Falcone et al (2001),
Kouroussis et al (2001), Meropol et al (2001), Comella et al (2000), Cascinu et al (1999), Sobrero et al (1995), Gamelin et al (1998),
Romero et al (1998), Beerblock et al (1997), Blanke et al (1997), Grem et al (1993), Jeremie et al (1993), Posner et al (1992), Sinnige et al (1990), LoRusso et al (1989), Petrelli et al (1989), Valdivieso et al (1981), Cassinello et al (2003), Reina et al (2003), Comella et al (1999) , Neri et al (1998), Pyrhonen et al 91992) e Beck et al (1984) . k Os cancros incluíam o carcinoma de células renais, adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas, cancro uterino cervical, glioblastoma multiforme, osteossarcoma metastático, cancro urotelial e cancro endometrial. Descritos por Schornagel et al (1989), Liu et al (2001), Forastiere et al (1987), Okuno et al (2002), Takasugi et al (1984), Hurteloup et al (1986), Kakolyris et al (2002), Morris et al (1998), Takeuchi et al (1991), Fountzilas et al (1999), Rosenthal et al (2000) , Goorin et al (2002), Rodriguez-Galindo et al (2002), Ahmad et al (2002), DiPaola et al (2003) e Listoni et al (1996).
Se o ciclo típico do número de células efectoras/reguladoras for considerado como sendo de cerca de 15 dias, os dados no Quadro 1 sugerem uma janela de um 51 dia para administrar a terapia anticancerígena para se obter uma taxa de resposta completa. Taxas de respostas parciais da ordem de 30% são tipicamente observadas, sugerindo que também pode ser obtido um efeito benéfico se o agente for administrado num período de 24 a 36 horas de cada lado desta "janela de um dia".
Exemplo 6
Doente A doente tinha 75 anos de idade e foi denominada "Sra. OM". Histórico
Cirrose hepática, doença cardíaca isquémica, diabetes dependente de insulina. Diagnosticada com carcinoma de células escamosas do esófago inferior por endoscopia e biopsia/histologia em Maio de 2004. O cancro originou que o doente tivesse dificuldade de engolir.
Descrição do Tumor
Massa circunferencial de cinco centímetros na base do esófago, obstruindo parcialmente o lúmen. Penetração epitelial/mural desconhecida.
Regime de Terapia
Radioterapia de cerca de 33 cursos de 15 minutos de duração a cada dia da semana durante 6-8 semanas. Mais quimioterapia limitada devido a outras condições médicas subjacentes. O oncologista concordou em dar duas aplicações de quimioterapia (~8 horas de infusão de 5-Fluorouracilo e Carboplatina). A aplicação seria coordenada com o ciclo/oscilação da resposta imunológica do doente para 52 tentar a regulação negativa planeada das células reguladoras específicas para o tumor a variar em ciclo.
Seguimento e Intervenção Terapêutica A fim de detectar a oscilação da resposta imunológica, o seguimento da resposta imunológica do doente foi iniciado no dia 28/5/2004, dia 1, usando os seguintes ensaios: CRP, SAA, C3, C4 e CA125. O CA125 foi usado para seguir a progressão da doença, uma vez que foi descrito na literatura no caso de carcinoma de células escamosas do esófago.
Durante as fases iniciais de seguimento, a doente relatou uma maior dificuldade de engolir, muito provavelmente devido ao crescimento do tumor. Isto foi corroborado por um aumento coerente em todos os parâmetros medidos (ver Figuras 4 a 7).
De forma interessante, o CA125 em aumento progressivo parou brevemente durante um período de 24 horas (Figura 6, dias 12-14), apenas para aumentar a um gradiente mais íngreme além deste ponto. Isto foi interpretado como a activação da resposta imunológica da doente e modulação do crescimento do tumor e marcador (CA125), apenas para se desactivar devido a regulação imunológica no final do período de cerca de 24 horas.
Esse período aproximado de 24 horas estabeleceu o final de um ciclo de cerca de 14 dias e o começo do seguinte e portanto, um ponto de intervenção em potencial ou um ponto de referência para planear mais tarde outros pontos de intervenção.
Tendo assim definido o começo e o final do ciclo de ~14 53 dias, é agora possível antecipar e planear no futuro um número de dias para estimar melhor dois pontos potenciais de intervenção quimioterapêutica, separados de aproximadamente 2 semanas.
Foi decidido realizar medições/recolher sangue da doente na terça-feira, quarta-feira e quinta-feira (Figura 7, 13, 14 e 15 de Julho, dias 46, 47 e 48, assinalados como B) para definir com exactidão o ponto ou janela de intervenção terapêutica. Se o ciclo tiver sido determinado com exactidão, deveria ser observado um máximo seguido de uma queda na CRP ao longo dos dias em que foi realizada a análise (Figura 7) . Este padrão na CRP seria repetido aproximadamente 14 dias mais tarde e em harmonia com a periodicidade persistente da oscilação da resposta imunológica. Esse foi o caso (Figura 7).
Com base nos resultados da CRP, o inventor recomendou ao oncologista que administrasse a primeira aplicação de quimioterapia por volta de quarta-feira 14/7/2004 ou quinta-feira 15/7/2004. Contudo, a Sra. OM já tinha sido agendada para quimioterapia na sexta-feira 16/7/2004, e o oncologista decidiu não alterar o planeamento. Uma vez que esta data era imediatamente após o máximo na CRP (Figura 7, assinalada como C), o inventor teve a sensação de que a janela de oportunidade poderia ter sido perdida, porque a aplicação da terapia podia estar atrasada 24 horas. O inventor esperava que na altura de administração da terapia a CRP tivesse começado a aumentar novamente. Esta previsão provou ser correcta já que não se observou nenhum efeito no tumor após administração da quimioterapia.
Um segundo ponto de intervenção foi determinado/previsto e recolhido sangue na quarta-feira e quinta-feira (Figura 7, 54 dias 28 e 29 de Julho, dias 63 e 64 assinalados como D). A previsão foi confirmada por um máximo na análise de CRP indicando sexta-feira 30/7/2004, dia 65 (Figura 7, assinalado como E) como o ponto de intervenção óptimo para aplicação de quimioterapia. A quimioterapia foi administrada como uma infusão de 8 horas na sexta-feira. Nesta ocasião, o inventor previu que esta seria a altura apropriada para administrar a terapia já que a CRP ainda estaria a diminuir.
No sábado, a doente desenvolveu uma febre ligeira e não se sentiu bem. No começo da tarde de domingo, 1 de Agosto, dia 67 (Figura 7, assinalado como F), a doente teve hemorragia no local do tumor e consequentemente foi internada no hospital. A doente perdeu cerca de 150 mL de sangue e recebeu 2 unidades de sangue aquele dia e fluidos intravenosos/nutritivos durante os 9 dias seguintes. A CRP foi medida no dia 4/8/2004, dia 69 (Figura 7, assinalado como G) e verificou-se que tinha caido significativamente.
No último dia da hospitalização, o esófago da doente foi examinado endoscopicamente. Não era evidente qualquer tumor (Figura 7, assinalado como H).
Interpretação A resposta imunológica antitumoral oscilante da doente foi libertada da regulação pela abordagem planeada das células reguladoras especificas do tumor por administração única de agentes quimioterapêuticos no tempo certo indicado, isto ocorre quando as células reguladoras imunológicas estão clonalmente activas, na mitose e desse modo vulneráveis à regulação negativa. Uma vez libertada da regulação, a 55 resposta imunológica antitumoral resultou num episódio febril como relatado pela doente no dia 66 e destruição subsequente do tumor. A destruição do tumor mediada imunologicamente resultou em hemorragia devido ao envolvimento invasivo potencial do tumor no epitélio/parede do esófago.
As acções e observações acima demonstram o seguinte: - É possível detectar uma oscilação regular persistente no doente com cancro. - Esta oscilação está associada à carga tumoral. - A oscilação possui uma periodicidade aproximada de 14 dias com um subciclo de 7 dias. - 0 começo e o final do ciclo podem ser determinados por parâmetros diferentes tais como, mas não se limitando a CRP, SAA, C3, C4 e níveis de antigénio tumoral. - A janela estreita de oportunidade para a aplicação de uma administração única de quimioterapia pode ser determinada.
Uma única administração quimioterapêutica na altura correcta dirigida contra o sistema imunitário do doente com cancro pode conduzir a um resultado terapêutico bem-sucedido .
Exemplo 7 A doente era uma idosa de 71 anos aqui denominada "Sra. FO". A Sra. FO tinha sido anteriormente diagnosticada com cancro do ovário, passou por cirurgia e várias sessões de quimioterapia corrente. A doente apresentava CA125 elevado em 200U/mL antes do seguimento. A doente foi seguida (sangrando) a cada segunda-feira, quarta-feira e sexta-feira durante 4 semanas. A oscilação era regular, quase síncrona, bem descrita com uma 56 periodicidade de 7/14 dias mostrando uma correlação aproximada entre medições de CRP, SAA e IL-2 no soro (ver Figuras 8 e 9). De modo mais interessante, na Figura 10 que mostra CRP e CA125 vs. tempo, as oscilações de CRP e CA125 estão fora de fase, indicando uma relação inversa entre o sistema imunitário e o marcador de cancro. A Figura 11 mostra a relação com o tempo entre a SAA e o factor de complemento C3. Observe que os dois máximos principais de C3 estão afastados de aproximadamente 14 dias e coincidem com máximos alternados de SAA que são também estão separados de aproximadamente 14 dias. Isto sustenta a hipótese de que os máximos de 7 dias representam expansões clonais alternas de células T e B e os máximos principais de C3 estão associados a células B, assim como o complemento está associado a lise mediada por anticorpo. Esta observação pode ajuda a estabelecer o começo e o final do ciclo e, portanto, também pode ajudar a determinar o ponto de intervenção terapêutica.
Exemplo 8 O doente era um homem de 64 anos de idade aqui denominado "Sr. GA". O cancro da bexiga foi inicialmente diagnosticado em 1997, após o que o doente foi sujeito a cirurgia, quimioterapia e radioterapia. A recorrência pulmonar foi diagnosticada por biopsia de agulha em Fevereiro de 2004. O doente recebeu diagnóstico de múltiplas lesões e foi submetido a 12 sessões de quimioterapia. A última quimioterapia foi em Setembro de 2004. O varrimento mais recente identificava pelo menos uma lesão de 2 cm na parte superior do pulmão esquerdo. Actualmente, relativamente bem/activo (meados de Outubro de 2004) .
Foi recolhido sangue em dias intercalados (segunda, quarta 57 e sexta-feira) durante 15 dias. Mediu-se a CRP com o resultado a mostrar uma oscilação aproximada e regular de CRP de 7/14 dias.
Exemplo 9
Foi pedido a uma doente pós-menopáusica ooferectomizada (WB) com reaparecimento do tumor e niveis elevados de CA125 que registasse a frequência das ondas de calor ou episódios febris e os classificasse como ligeiros, moderados ou graves. A intensidade destes episódios foi combinada com a oscilação de CRP da resposta imunológica. Os episódios mais intensos e a sua frequência aumentada coincidiram com os grandes máximos. Assim, o registo da temperatura do corpo pode ser usado para ajudar a definir o inicio e ou final da oscilação da resposta imunológica para efeitos de planeamento da aplicação de terapia.
REFERÊNCIAS
Adachi, S., Ogasawara, T., Ito, K., Koyama, M. et al (2001) Oncol. Rep. 8: 285-288.
Agelaki, S., Bania, H., Kouroussis, C., Blazoyiannakis, G. et al (2001) Lung Câncer 4:S77-80.
Ahmad, S. A., Patel, S. R., Bailo, Μ. T., Baker, T. P. et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 521- 527.
Aitini, E., Rabbi, C., Mambrini, A., Cavazzini, G. et al (2001) Tumori 87: 20-24.
Amadori, D., Sansoni, E. and Amadori, A. (1997) Frontiers in Bioscience 2: 20-26.
Ashamalla, H., Zaki, B., Mokhtar, B., Colella, F. et al (2003) Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 55: 679-687. Atkins, Μ. B., Gollob, J. A., Sosman, J. A.,McDermott, D. F. et al (2002) Clin. Câncer Res. 8: 3075-3081.
Aziz, M., Akhtar, S. and Malik, A. (1998) Câncer Detect. Prev. 22: 87-99. 58
Bafaloukos, D., Aravantinos, G., Fountzilas, G.,
Stathopoulos, G. et al (2002) Oncology 63: 333-337.
Bafaloukos, D., Gogas, H., Georgoulias, V., Briassoulis, E. et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 420-425.
Bar Sela, G., Tsalic, M., Gaitini, D., Steiner, M. et al (2002) J. Chemother. 14: 623- 626.
Beck, T.M., Curtis, P. W., Woodard, D.A., Hart, N.E. et al (1984) Câncer Treat. Rep. 68: 647-650.
Bedikian, A. Y., Weiss, G. R., Legha, S.S., Burris, H.A. et al (1995) J. Clin. Oncol. 13: 2895-2899.
Beerblock, K., Rinaldi, Y., ere, T., Louvet, C. et al (1997) Câncer 79: 1100-1105.
Belli F, Testori A, Rivoltini L, Maio M, et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 4169-4180.
Berd D, Sato T, Cohn H, Maguire HC Jr, Mastrangelo MJ. (2001) Int. J. Câncer. 94:531- 539.
Blanke, C. D., Kasimis, B., Schein, P., Capizzi, R. et al (1997) J. Clin. Oncol. 15: 915- 920.
Buzaid, A. C., Colome, M., Bedikian, A., Eton, O. et al (1998) Melanoma Res. 8: 549- 556.
Calvo, E., Cortes, J., Rodriguez, J., Fernandez-Hidalgo, O. et al (2002) Clin. Colorectal Câncer 2: 104-110.
Carr, B. I., Zajko, A., Bron, K., Orons, P. et al (1997) Semin. Oncol. 24: S6-97-S6-99.
Cascinu, S., Silva, R.R., Labianca, R., Barni, S. et al (1999) Ann. Oncol. 10: 985-987.
Cassinello, J., Escudero, P., Salud, A., Marcos, F. et al (2003) Clin. Colorectal Câncer 3: 108-112.
Cassinello, J., Lopez-Alvarez, P., Martinez-Guisado, A.,
Valladares, M. et al (2003) Med. Oncol. 20: 37-43. Chahinian, A. P.,Antman, K., Goutsou, M., Corson, J. M. et al (1993) J. Clin. Oncol. 11: 1559-1165.
Chapman, P.B., Panageas, K.S., Williams, L., Wolchok, J.D. et al (2002) Melanoma Res. 12: 381-387. 59
Cho, E.K., Lee, W.K., Lim do, Y., Bang, S. M. et al (2002) J. Korean Med. Sei. 17: 348-352.
Choi, T.K., Lee, N. W. and Wong, J. (1984) Câncer 53: 401-405 .
Comella, P., De Vita, F., Mancarella, S., De Lucia, L. et al (2000) Ann. Oncol. 11: 1323-1333.
Comella, P., Lorusso, V., Casaretti, R., De Lucia, L. et al (1999) Tumori. 85: 465-472.
Constenla, M., Garcia-Arroyo, R., Lorenzo, I., Carrete, N. et al (2002) Gastric Câncer 5: 142-147.
Covens, A., 0'Connell, G., Rusthoven, J. and Mazurka, J. (1992) Eur. J. Gynaecol. Oncol. 13: 125-130.
Dieras, V., Bougnoux, P., Petit, T., Chollet, P. et al (2002) Ann. Oncol. 13: 258-266.
DiPaola, R.S., Rubin, E., Toppmeyer, D., Eid, J. et al (2003) Med. Sei. Monit. 9:P15-11.
Eda, S., Kaufmann, J., Roos, W.and Phol, S. (1998) J. Clin. Lab. Analysis 12: 137-144.
Einzig, A.I. (1994) Ann. Oncol. 6: S29-32.
Einzig, A.I., Hochster, H., Wiernik, P. H., Trump, D. L. et al (1991) Invest New Drugs 9: 59-64.
Einzig, A.I., Schuchter, L.M., Recio, A., Coatsworth, S. et al (1996) Med. Oncol. 13: 111-117.
Faivre, S., Le Chevalier, T., Monnerat, C., Lokiec, F. et al (2002) Ann. Oncol. 13: 1479-1489.
Falcone, A., Allegrini, G., Masi, G., Lencioni, M. et al (2001) Oncology 61: 28-35.
Forastiere, A.A., Gennis, M., Orringer, Μ. B. and Agha,F. P. (1987) J. Clin. Oncol. 5: 1143-1149.
Fountzilas, G., Karavelis, A., Capizzello, A., Kalogera-Fountzila, A. et al (1999) J. Neurooncol. 45: 159-165.
Frasci, G., D'Aiuto, G., Comella, P., Thomas, R. et al (2002) Oncology 62: 25-32.
Freyer, G., Delozier, T., Lichinister, M., Gedouin, D. et 60 al (2003) J. Clin. Oncol. 21: 35-40.
Fumoleau, P., Delgado, F. m., Delozier, T., Monnier, A. et al (1993) J. Clin. Oncol. 11: 1245-1252.
Gamelin, E., Boisdron-Celle, M., Delva, R., Regimbeau, C. et al (1998) J. Clin. Oncol. 16: 1470-1478.
Gebbia, V., Blasi, L., Borsellino, N., Caruso, M. et al (2003) Anticancer Res. 23: 765-771.
Gibbs, P., Iannucci, A., Becker, M., Allen, J. et al (2000) Melanoma Res. 10: 171-179.
Ginopoulos, P., Mastronikolis, N.S., Giannios, J.,Karana, A. et al (1999) Lung Câncer 23: 31-37.
Glimelius, B., Ristamaki, R., Kjaer, M., Pfeiffer, P. et al (2002) Ann. Oncol. 13: 1868-1873.
Gomez-Bernal, A., Cruz, J.J., Garcia-Palomo, A., Arizcun, A. et al (2003) Am. J. Clin. Oncol. 26:127-131.
Goorin, A. M., Harris, M.B., Bernstein, M., Ferguson, W. et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 426-433.
Grem, J.L., Jordan, E., Robson, Μ. E., Binder, R.A. et al (1993) J. Clin. Oncol. 11: 1737-1745.
Guastalla, J.P., Vermorken, j. B., wils, J.A., George, M. et al (1994) Eur. J. Câncer 30A: 45-49.
Gundersen, S. and Flokkmann, A. (1989) Câncer 64: 1617- 1619.
Henss, H., Fiebig, H.H., Schildge, J., Arnold, H. et al (1988) Onkologiell : 118-120.
Hofheinz, R. D., Hartung, G., Samel, S., Hochhaus, A. et al (2002) Onkologie 25: 255- 260.
Horvath, M.,Fekete, B. and Rahoty, P. (1982) Oncology 39: 20-22.
Hudes, G.R., Nathan, F., Khater, C., Haas, N. et al (1997) J. Clin. Oncol. 15: 3156- 3163.
Hurteloup, P., Armand, J.P., Cappelaere, P., Metz, R. et al (1986) Câncer Treat. Rep. 70: 731-737.
Ibrahim, N.K., Rahman, Z., Valero, V., Willey, J. et al 61 (1999) Câncer 86: 1251-1257.
Jeen, Y. T., Yoon, S. Y., Shin, S. W.,Kim, B.S. et al (2001) Câncer 91: 2288-2293.
Jeremie, B., Acimovic, L. and Mijatovic, L. (1993) Câncer 71: 2706-2708.
Johnson, D. H., Presant, C., Einhorn, L., Bartolucci, A.A. et al (1985) Câncer Treat. Rep. 69: 821-824.
Kakolyris, S., Kourousis, C., Koukourakis, M., eroulakis, N. et al (1999) Am. J. Clin. Oncol. 22: 568-572.
Kakolyris, S., Kouroussis, C., Koukourakis, M., Marvroudis, D. et al (2002) Oncology 63: 213-218.
Kelly, W. K., Curley, T., Slovin, S., Heller, G. et al (2001) J. Clin. Oncol. 19: 44-53.
Kikuyama, S., Inada, T., Oyama, R. and Ogata, Y. (2002) Anticancer Res. 22: 3633- 3636.
Kim, T. W., Kang, Y. K., Ahn, J. H., Chang, Η. M. et al (2002) Ann. Oncol. 13:1893-1898.
Kimura, M., Tomita, Y., Imai, T., Saito, T. et al. (2001) Câncer 92: 2072-2075.
Kindler, H. L., Belani, C. P., Herndon, J. E., Vogelzang, N. J. et al (1999) Câncer 86:1985-1991.
Kjorstad, K., Harris, A., Bertelsen, K., Slevin, M. et al (1992) Ann. Oncol. 3: 217-222.
Kollmannsberger, C., Quietzsch, D., Haag, C., Lingenfelser, T. et al (2000) Br. J. Câncer 83:458-462.
Kornek, G. V., Haider, K., Kwasny, w., Lang, F. et al (1998) Br. J. Câncer 78 : 673- 678.
Kornek, G. V., Raderer, M., Schull, B., Fiebiger, W. et al (2002) Br. J. Câncer 86: 1858-1863.
Kosmas, C., Tsavaris, N., Malamos, N., Stavroyianni, N. et al (2003) Br. J. Câncer 88: 1168-1174.
Kouroussis, C., Souglakos, J., Kakolyris, S., Mavroudis, D. et al (2001) Oncology 61: 36-41.
Leung, T.W., Patt, Y.Z., Lau, W.Y., Ho, S.K. et al (1999) 62
Clin. Câncer Res. 5: 1676- 1681.
Li, J. D., Guan, Z.Z., Liu, J. H., Xin, X.Y. et al (2002) Ai Zheng 21: 416-420.
Listoni, A., Zanetta, G., Losa, G., Gabriele, A. et al (1996) Ann. Oncol. 7: 861-863.
Liu, J. H., Yang, M.H., Fan, F. S., Yen, C. C. et al (2001) Urology 57: 650-654.
Liuzzo, G., Biasucci, L. M., Gallimore, J.R., Grillo, R. L. et al. (1994) New Engl. J. Med. 331: 417-424.
LoRusso, P., Pazdur, R., Redman, B.G., Kinzie, J. et al (1989) Am. J. Clin. Oncol. 12: 486-490.
Lotem M, Shiloni E, Pappo I, Drize O et al. (2004) Br J Câncer 90: 773-780.
Louvet, C., Andre, T., Tigaud, J.M., Gamelin, E. et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 4543- 4548.
Manetta, A., Boyle, J., Berman, M. L., DiSaia, P. J. et al (1994) Câncer 73: 196-199.
Mariotta, S., Sposato, B., Li Bianchi, E., Fiorucci, F. et al (2002) Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sei. 6: 49-54.
Mbidde, E.K., Harland, S.J., Calvert, A. H. and Smith, I. E. (1986) Câncer Chemother. Pharmacol. 18: 284-285.
McClay, E.F., Braly, P. D.,Kirmani, S., Plaxe, S. C. et al (1995) Am. J. Clin. Oncol. 18: 23-26.
Meropol, N.J., Niedzwiecki, D., Hollis, D., Schilsky, R.L. et al (2001) Câncer 91: 1256-1263.
Michelotti, A., Gennari, A.,Salvadori, B., Giannessi, P.G. et al (1996) Semin. Oncol. 23: 38-40.
Monnet, I., Breau, J.L., Moro, D., Lena, H. et al (2002)
Chest 121: 1921-1927.
Morabito, A., Filippelli, G., Palmeri, S., Cascinu, S. et al (2003) Breast Câncer Res. Treat. 78: 29-36.
Morris, M., Brader, K.R., Levenback, C., Burke, T.W. et al (1998) J. Clin. Oncol. 16: 1094-1098.
Murad, A.M., Guimaraes, R.C., Aragao, B. C., Rodrigues, 63 V.Η. et al (2003) Am. J. Clin. Oncol. 26: 151-154.
Murad, A.M., Petrioanu, A., Guimaraes, R. C., Aragao, B.C. et al (1999) Am. J. Clin. Oncol. 22: 580-586.
Nathan, F. E., Berd, D., Sato, T. and Mastrangelo, M. J. (2000) Câncer 88: 79-87.
Neri, B., Doni, L., Fulignati, C., Perfetto, F. et al (2002) Anticancer Drugs 13: 719-724.
Neri, B., Gemelli, M.T., Pantalone, D., Pernice, M. L. et al (1998) Anticancer Drugs 9: 599-602.
North, R. J. and Awwad, M. (1990) Immunology 71: 90-95. Nystrom, M. L., Steele, J.P., Shamas, J., Neville, F. et al (2003) Melanoma Res. 13: 197-199. 0'Hanlon, D. M., Lynch, J., Cormican, M. and Given, H. F. (2002) Anticancer Res. 22: 1289-1294. 0'Hara, R., Murphy, E.P., Whitehead, A.S., Fitzgearld, O. and Bresnihan, B. (2000) Arthritis Research 2: 142-144. Okuno, S.H., Mailliard, J. A., Suman, V.J., Edmonson, J.H. et al (2002) Câncer 94: 2224-2231.
Onizuka, S., Tawara,l., Shimizu, J., Sakaguchi, S. et al (1999) Câncer Res. 59: 3128- 3133.
Oon, C.J., Chua, E. J., Foong, W.C., Tan, L. K. et al (1980) Ann. Acad. Med. Singapore 9: 256-259.
Ozols, R.F., Speyer, J.L., Jenkins, J. and Myers, C.E. (1984) Câncer Treat. Rep. 68: 1229-1232.
Paccagnella, A., Favaretto, A., Oniga, F., Festi, G. et al (1996) Câncer 78: 1701-1707.
Patt, Y.Z., Hassan, M.M., Lozano, R.D., Brown, T.D. et al (2003) J. Clin. Oncol. 21: 421-427.
Pectasides, D., Dimopoulos, Μ. A., Aravantinos, G., Kalophonos, Η. P. et al (2001) Anticancer Res. 21: 3575-3580.
Perng, R. P., Shih, J. F., Chen, Y. M., Delgado, F. M. et al (2000) Am. J. Clin. Oncol. 23: 60-64.
Peterson, K. E., Stromes, I., Messer, R., Hasenkrug, K. and 64
Chesebro, B. (2002) J. Viriol. 76: 7942-7948.
Petrelli, N. J., Madejewicz, S., Rustum, Y., Herrera, L. et al (1989) Câncer Chemother. Pharmacol. 23: 57-60.
Picus, J. and Schultz, M. (1999) Semin. Oncol. 26: 14-18. Pinto, C., Marino, A., Guaraldi, M., Melotti, B. et al (2001) Am. J. Clin. Oncol. 24: 143-147.
Planner, R. S., Allen, D. G., Brand, A. H., Grant, P. T. et al (1996) Aust N.Z.J. Obstet. Gynecol. 36: 168-170. Planting, A.S., van der Burg, Μ. E., Goey, S. H., Schellens, J. H. et al (1995) Ann. Oncol. 6: 613-615.
Pohl, J., Zuna, I., Stremmel, W. and Rudi, J. (2001) Chemotherapy 47: 359-365.
Porta, C., Moroni, M., Nastasi, G. and Arcangeli, G. (1995) Oncology 52: 487-491.
Posner, M., Martin, A., Slapak, C. A., Clark, J.W. et al (1992) Am. J. Clin. Oncol. 15: 239-241.
Price, C.P., Trull, A.K., Berry, D. and Gorman, E.G. (1987) J. Immunol. Methods 99: 205-211.
Pyrhonen, S.O. and Kouri, M.O. (1992) Eur. J. Câncer 28A: 1828-1832.
Raghavan, D., Gianoutsos, P., Bishop, J., Lee, J. et al (1990) J. Clin. Oncol. 8:151- 154.
Read, S., Malmstrom, V. and Powrie, F. (2000) J. Exp. Med. 192: 295-302.
Recchia, F., Lombardo, M., De Filippis, S., Rosselli, M. et al (2002) Anticancer Res. 22: 1321-1328.
Reina, J.J., Aparicio, J., Salvador, J., Pica, J.M. et al (2003 in press) Câncer Chemother. Pharmacol.
Retsas, S., Mohith, A. and Mackenzie, H. (1996) Anticancer Drugs 7: 161-165.
Rodriguez-Galindo, C., Daw, N.C., Kaste, S.C., Meyer, W.H. et al (2002) J. Pediatr. Hematol. Oncol. 24: 250-255. Romero, A., Rabinovich, M.G., Vallejo, C.T., Perez, J.E. et al (1994) J. Clin. Oncol. 12: 336-341. 65
Romero, A.0., Perez, j. E., Cuevas, Μ. A., Laçava, J. A. et al (1998) Am. J. Clin. Oncol. 21: 94-98.
Rose, P.G., Blessing, J.A., Bali, H. G.,Hoffinan, J. et al (2003) Gynecol. Oncol. 88: 130-135.
Rosenthal, M.A., Gruber, M. L., Glass, J., Nirenberg, A. et al (2000) J. Neurooncol. 47: 59-63.
Safran, H., Dipetrillo, T.,Iannitti, D., Quirk, D. et al (2002) Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 54: 137-141. Sakata, Y., Ohtsu, A., Horikoshi, N., Sugimachi, K. et al (1998) Eur. J. Câncer 34: 1715-1720.
Salomon, B., Lenschow, D.J., Rhee, L., Ashourian, N. et al (2000) Immunity 12:431- 440.
Savarese, D., Taplin, M.E., Halabi, S., Hars, V. et al (1999) Semin. Oncol. 26: 39-44.
Savarese, D.M., Halabi, S., Hars, V., Akerley, W.L. et al (2001) J. Clin. Oncol. 19: 2509-2516.
Scheithauer, W.,Kornek, G. V., Raderer, M., Schull, B. et al (2002) Ann. Oncol. 13: 1583-1589.
Schornagel, J. H., Verweij, J., ten Bokkel Huinink, W.W., Klijn, J. G . et al (1989) J. Urol. 142: 253-256. Sehouli, J. , Stengel, D., Oskay, G., Camara, O. et al (2002) Ann. Oncol. 13: 1749- 1755. Senju, 0., Takagi, Y., Gomi, K., Ishii, N. et al. (1983)
Jap. J. Clin. Lab. Automation 8: 161-165.
Sherman, W.H. and Fine, R.L. (2001) Oncology 60: 316-321. Shimizu, J., Yamazaki, S. and Sakaguchi, S. (1999) J. Immunol. 163: 5211-5218.
Shimizu, J., Yamazaki, S., Takahashi, T., Ishida, Y. and Sakaguchi, S. (2002) Nature Immunol. 3: 135-142.
Sinnige, Η. A., Sleijfer, D. T., de Vries, E.G., Willemse, P.H. et al (1990) Eur. J. Câncer 26: 625-628.
Small, E.J., Bok, R., Reese, D.M., Sudilovsky, D. et al (2001) Semin. Oncol. 28: 71-76.
Smithers M, 0'Connell K, MacFadyen S, Chambers M, et al 66 (2003) Câncer Immunol Immunother. 52: 41-52.
Sobrero, A.F., Aschele, C., Guglielmi, A.P., Mori, A. M. et al (1995) Clin. Câncer Res. 1: 955-960.
Stathopoulos, G.P., Rigatos, S.K., Pergantas, N., Tsavdarides, D. et al (2002) J. Clin. Oncol. 20: 37-41. Sugimachi, K. and Maehara, Y. (2000) Surg. Today 30: 1067-1072.
Suri-Payer, E. and Cantor, H. (2001) J. Autoimmunity 16: 115-23.
Sutmuller, R.P., van Duivenvoorde, L. M., van Elsas, A., Schumacher, T. N. et al (2001) J. Exp. Med. 194: 823-832. Sutton, G.P., Blessing, J. A., Homesley, H. D. and Malfetano, J. H. (1994) Gynecol. Oncol. 53: 24-26. Takahashi, T., Tagami, T., Yamazaki, S., Uede, T. et al (2000) J. Exp. Med. 192: 303- 310.
Takasugi, B. J., Robertone, A.B., Salmon, S.E., Jones, S.E. et al (1984) Invest New Drugs 2: 387-390.
Takeuchi, S., Dobashi, K., Fujimoto, S., Tanaka, K. et al (1991) Gan to Kagaku Ryoho 18: 1681-1689.
Thomas, G. W., Muss, H.B., Jackson, D.V., McCulloch, J. et al (1994) Câncer Chemother. Pharmacol. 35: 165-168.
Trefzer U, Herberth G, Wohlan K, Milling A et al. (2004) Int J Câncer 110: 730-740.
Trivedi, C., Redman, B., Flaherty, L.E., Kucuk,0. et al (2000) Câncer 89: 431-436.
Tsavaris, N., Primikirios, N., Mylonakis, N., Varouchakis, G. et al (1997) Anticancer Res. 17: 3799-3802.
Twelves, C. J., Dobbs, N. A., Curnow, A., Coleman, R. E. et al (1994) Br. J. Câncer 70: 990-993.
Valdivieso, M., Bedikian, A. Y., Bodey, G.P. and Freireich, E. J.(1981) Câncer Treat. Rep. 65: 877-879.
Weinstein, P.S., Skinner, M., Sipe, J.D., Lokich, J.J. et al. (1984) Scand. J. Immunol. 19: 193-198.
Wittig B, Mtécnican A, Dorbic T, Weineck S, et al (2001) 67
Hum Gene Ther. 12: 267-278.
Yamada, Y.,Shirao, K., Ohtsu, A., Boku, N. et Ann. Oncol. 12: 1133-1137.
Yogelzang, N. J., Herndon, J. E., Cirrincione, D. C. et al (1997) Câncer 79: 2237-2242.
Zeng, Z.C., Tang, Z.Y., Liu, K.D., Lu, J.Z. et al Câncer Res. Clin. Oncol. 124: 275-280.
Lisboa, 25 de Fevereiro de 2011 al (2001) "., Harmon, (1998) J.

Claims (17)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Método de análise do ciclo do sistema imunitário para determinar quando um agente deveria ser administrado a um doente que sofre de uma doença caracterizada pela produção de células T reguladoras, compreendendo o método o seguimento de amostras obtidas do doente em relação a uma oscilação regular de pelo menos um de: a) número e/ou actividade de células T efectoras, b) número e/ou actividade de células T reguladoras, c) uma molécula marcadora associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema imunitário, em que o agente inibe a produção, limita a função e/ou destrói células T reguladoras e em que o agente é seleccionado do grupo consistindo de fármacos antiproliferativos, radiação, ARNds e anticorpos que inibem a produção e/ou actividade de células T reguladoras, e em que a doença é cancro ou uma infecção e onde a altura em que o agente deveria ser administrado é seleccionada de modo a que o agente exerça proporcionalmente um maior efeito contra as células T reguladoras do que contra as células T efectoras.
2. Utilização de um agente no fabrico de uma composição para o tratamento de doença caracterizada pela produção de células T reguladoras, em que um doente que sofre da doença é analisado em relação ao ciclo do sistema imunitário seguindo o doente em relação a uma oscilação regular de pelo menos um de: a) número e/ou actividade de células T reguladoras, b) número e/ou actividade de células T efectoras, c) uma molécula marcadora associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema imunitário, e 2 em que a altura de administração do agente para tratar a doença é seleccionada de modo a que o agente exerça um efeito proporcionalmente maior contra as células T reguladoras do que contra as células T efectoras, em que o agente inibe a produção, limita a função e/ou destrói células T reguladoras e em que o agente é seleccionado do grupo consistindo de fármacos antiproliferativos, radiação, ARNds e anticorpos que inibem a produção e/ou actividade de células T reguladoras, e em que a doença é cancro ou uma infecção.
3. Método da reivindicação 1 ou utilização da reivindicação 2, em que a infecção é uma infecção persistente crónica caracterizada por o sistema imunitário do doente não ser capaz de eliminar a infecção.
4. Método ou utilização da reivindicação 3, em que o doente está infectado com HIV ou virus da Hepatite C.
5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3 ou 4 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-4, em que o marcador do sistema imunitário reflecte o número e/ou actividade de células T reguladoras, e/ou o número e/ou actividade de células T efectoras.
6. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3 ou 4 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-4, em que o marcador do sistema imunitário é um marcador inflamatório de fase aguda.
7. Método ou utilização da reivindicação 6, em que o marcador inflamatório de fase aguda é seleccionado do grupo consistindo de amilóide A de soro, amilóide P de soro e 3 proteína reactiva c.
8. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-7 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-7, em que as células T reguladoras são células T CD4+CD8-.
9 12 1 4 16 19 21 23 26 28 30 Dias
9. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4, em que o agente é administrado aproximadamente ao mesmo tempo quando são detectadas células T CD4+CD8-.
10. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-9, em que as células T efectoras são células T CD8+CD4-.
11. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4, em que o agente é administrado aproximadamente quando o número de células T CD8+CD4-atingiu o máximo.
12. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-11, em que a molécula marcadora associada ao cancro é um antigénio produzido por uma célula cancerosa.
13. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-11, em que a molécula marcadora associada à infecção é um antigénio produzido por um agente infeccioso. 4
14. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4, em que o agente é administrado aproximadamente na altura em que os niveis da molécula marcadora associada ao cancro ou infecção começam a diminuir.
15. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3 ou 4 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-4, em que o doente é seguido em relação a um marcador inflamatório de fase aguda, e uma molécula marcadora associada ao cancro ou infecção.
16. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13 ou 15 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-15, em que o doente é seguido durante um periodo de pelo menos 21 dias.
17. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13, 15 ou 16 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-16, em que o doente é seguido pelo menos a cada 3 dias.
18. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13 ou 15-17 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-17, em que o fármaco antiproliferativo é seleccionado do grupo consistindo de taxol, vincristina, vinblastina e vinblastina anidra.
19. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13 ou 15-17 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-17, em que o anticorpo é seleccionado do grupo consistindo em: anti-CD4+, anti-CTLA-4 (antigénio-4 associado ao linfócito citotóxico), anti-GITR (receptor do factor de necrose tumoral induzida por 5 glucocorticóides), anti-CD28 e anti-CD25.
20. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13 ou 15-19 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-19, em que o doente não foi exposto a um tratamento para o cancro durante pelo menos 21 dias.
21. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3-8, 10, 12, 13 ou 15-20 ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 2-20, em que o doente é um ser humano.
22. Método para determinar quando uma vacina deveria ser administrada a um doente que sofre de uma doença caracterizada pela produção de células T reguladoras, compreendendo o método o seguimento de amostras obtidas do doente em relação a uma oscilação regular de pelo menos um de: a) número e/ou actividade de células T efectoras, b) número e/ou actividade de células T reguladoras, c) uma molécula marcadora associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema imunitário, e em que a doença é cancro ou uma infecção e onde a altura em que a vacina deveria ser administrada é seleccionada de modo a que a vacina reforce a resposta imunológica inata, produzindo um maior número e/ou actividade de células T efectoras, antes do aparecimento de células T reguladoras.
23. Utilização de uma vacina no fabrico de uma composição para o tratamento de doença caracterizada pela produção de células T reguladoras, em que um doente que sofre da doença é analisado em relação ao ciclo do sistema imunitário seguindo o doente em relação a uma oscilação regular de pelo menos um de: 6 a) número e/ou actividade de células T reguladoras, b) número e/ou actividade de células T efectoras, c) uma molécula marcadora associada a doença, e/ou d) um marcador do sistema imunitário, e em que a altura de administração da vacina para tratar a doença é seleccionada de modo a que a vacina reforce a resposta imunológica inata, produzindo um maior número e/ou actividade de células T efectoras, antes do aparecimento de células T reguladoras, e em que a doença é cancro ou uma infecção.
24. Utilização da reivindicação 23, em que a vacina é administrada aproximadamente na altura em que os niveis de células T efectoras estão a aumentar.
25. Utilização da reivindicação 23, em que a vacina é administrada aproximadamente na altura em que os niveis da molécula marcadora associada à doença começam a diminuir. Lisboa, 25 de Fevereiro de 2011 1/13
Figura ΙΑ 2/13
Figura 1B
cópias de ARN de Figura 2 4/13 CRF mgft
Figura 3 5/13 CRP & C4 vs tempo Sra. Qivl CRP rog/L
I ! C4 | g/L I ® a * « S t® « tt « tí 39 33 24 32 & 9$ «' Dias Figura 4 6/13 C4&C3vst $ra. O.M. 922 125 c 4 /\ cicio ~14 das 12 C3 g/L 1-15 A A I / \ / V- 021 IIÉ ' '\í 02 C4 9*t \%, \ . u A;ililllpll 0 CS 105 j, < imm * νΆ x 'h< A A ’ “ ' 4? *»‘ ?A J<, 919 8 2*6 10 VI U 16 18 26 22 24 26 Ϊ8 38 32 Dias Figura 5 7/13
Figura 6 8/13 ] \ CRP vs íernpo Sra. Q.fvi
Figura 7 9/13 flãjõ i 10,0 í 8,0 I ' i I 60 140 2,0 0,0
0 2 5 7 S 12 14 18 19 21 23 26 28 30 Dias
Figura 8 10/13
Figura 9 11/13
Doente #1 FO 12 14 16 IS 21 Dias 23 26 26 30
Figura 10 12/13
17 Doente #1 PO Γ CR? mg/lj i...... ~C 3 (j/t Figura 11 13/13 CRP mg/L
Figura 12
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WO (1) WO2005040816A1 (pt)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AUPS065002A0 (en) * 2002-02-20 2002-03-14 Immunaid Pty Ltd Strategy for retroviral immunotherapy
US20030228320A1 (en) * 2000-08-18 2003-12-11 Ashdown Martin Leonard Retroviral immunotherapy
AUPS054702A0 (en) * 2002-02-14 2002-03-07 Immunaid Pty Ltd Cancer therapy
DE10347710B4 (de) 2003-10-14 2006-03-30 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung
JP4931593B2 (ja) * 2003-10-24 2012-05-16 イミュネイド ピーティーワイ リミテッド 治療の方法
DK1805510T3 (da) * 2004-09-08 2012-04-30 Immunaid Pty Ltd Terapeutisk strategi til behandling af autoimmune og degenerative sygdomme
AU2005282218B2 (en) * 2004-09-08 2012-04-12 Biotempus Pty Ltd Therapeutic strategy for treating autoimmune and degenerative diseases
US8775207B2 (en) * 2005-02-02 2014-07-08 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Integrated treatment planning and scheduling system
DE102005046490A1 (de) 2005-09-28 2007-03-29 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen
WO2010096154A2 (en) * 2009-02-20 2010-08-26 Onconome, Inc. Compositions and methods for diagnosis and prognosis of colorectal cancer
EP2435825B8 (en) 2009-05-27 2015-09-02 Biotempus Limited Methods of treating diseases
SG168431A1 (en) * 2009-07-23 2011-02-28 Univ Singapore Cancer biomarker and the use thereof
ES2788869T3 (es) 2009-09-03 2020-10-23 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos anti-GITR
GB0920258D0 (en) * 2009-11-19 2010-01-06 Alligator Bioscience Ab New medical agents and use thereof
EP2513824A1 (en) * 2009-12-17 2012-10-24 Mayo Foundation for Medical Education and Research Determination of favorable time(s) for chemotherapy delivery
SG193553A1 (en) 2011-05-24 2013-10-30 Biontech Ag Individualized vaccines for cancer
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
DE202012012956U1 (de) 2011-10-21 2014-10-16 Abbvie Inc. Kombination aus mindestens zwei direkt wirkenden antiviralen Wirkstoffen für die Verwendung zur Behandlung von HCV, umfassend Ribavirin aber nicht Interferon
UY34401A (es) 2011-10-21 2013-05-31 Abbvie Inc Métodos para el tratamiento de hcv
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
WO2013143555A1 (en) 2012-03-26 2013-10-03 Biontech Ag Rna formulation for immunotherapy
EP2862111A4 (en) * 2012-06-18 2016-01-20 Mayo Foundation DETERMINATION OF EFFICIENT TIMES FOR THE ADMINISTRATION OF CHEMOTHERAPY
KR101534462B1 (ko) * 2012-07-31 2015-07-06 한림대학교 산학협력단 사이클린 ａ2 저해제를 포함하는 ｃ형간염 예방 및 치료용 조성물
CA2892391C (en) 2012-11-28 2023-10-17 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Individualized vaccines for cancer
WO2014180490A1 (en) 2013-05-10 2014-11-13 Biontech Ag Predicting immunogenicity of t cell epitopes
CN103941021B (zh) * 2014-05-09 2017-02-01 深圳市国赛生物技术有限公司 一种检测白细胞介素‑6的试剂盒以及非诊断目的检测白细胞介素‑6的方法
MA47849A (fr) 2014-05-28 2020-01-29 Agenus Inc Anticorps anti-gitr et leurs procédés d'utilisation
EP3936145A1 (en) * 2014-07-31 2022-01-12 The University Of Western Australia A method for the identification of immunotherapy-drug combinations using a network approach
WO2016045732A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Stable formulations of lipids and liposomes
CN107205645A (zh) * 2014-12-05 2017-09-26 生命循环科技私人有限公司 改善生理反应的方法和系统
WO2016128060A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Biontech Ag Predicting t cell epitopes useful for vaccination
JP2016148623A (ja) * 2015-02-13 2016-08-18 京都府公立大学法人 大腸がんの検出方法
WO2017059902A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh 3' utr sequences for stabilization of rna
US11447557B2 (en) 2015-12-02 2022-09-20 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
WO2017189978A1 (en) 2016-04-28 2017-11-02 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE7804231L (sv) * 1978-04-14 1979-10-15 Haessle Ab Magsyrasekretionsmedel
US5308626A (en) * 1985-06-28 1994-05-03 Toni N. Mariani Lymphokine activated effector cells for antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) treatment of cancer and other diseases
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
GB2189698A (en) * 1986-04-30 1987-11-04 Haessle Ab Coated omeprazole tablets
US5141867A (en) * 1987-02-02 1992-08-25 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequence encoding a human immunodeficiency virus antigen
US5057423A (en) * 1987-12-18 1991-10-15 University Of Pittsburgh Method for the preparation of pure LAK-active lymphocytes
DE3812605A1 (de) 1988-04-15 1990-06-07 Leskovar Peter Dipl Ing Dr Hab Immunregulative stoffe und stoffgemische zur aktiven beeinflussung des krankheitsverlaufes
US20020094542A1 (en) * 1988-04-15 2002-07-18 Peter Leskovar Drugs and methods for treating cancer
AU622926B2 (en) 1988-09-09 1992-04-30 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pyrimidine or purine cyclobutane derivatives
JP2994031B2 (ja) 1988-12-20 1999-12-27 クラリティ テクノロジーズ インコーポレイテッド Ｈｉｖ−１又はｈｉｖ−２抗体の存在又は量の確定方法、免疫特異的試薬、合成ペプチド、診断用キット、ｈｉｖ−１又はｈｉｖ−２抗体の調製方法、免疫原及び抗体
US6248574B1 (en) 1989-12-13 2001-06-19 Avigdor Shaffermann Polypeptides selectively reactive with antibodies against human immunodeficiency virus and vaccines comprising the polypeptides
US5204466A (en) * 1990-02-01 1993-04-20 Emory University Method and compositions for the synthesis of bch-189 and related compounds
US5925643A (en) 1990-12-05 1999-07-20 Emory University Enantiomerically pure β-D-dioxolane-nucleosides
IL102092A (en) 1991-06-11 1996-11-14 Microgenesys Inc Use of recombinant VIH protein wrapped in VIH abduction drug and a pharmaceutical preparation containing the accumulated protein
DE4120296A1 (de) 1991-06-28 1992-03-19 Regina Tilgner Rein pflanzliches kombinationspraeparat - gegen aids
US5643578A (en) 1992-03-23 1997-07-01 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of DNA transcription unit
EP1550729B1 (en) 1992-09-25 2009-05-27 Avipep Pty Limited Target binding polypeptide comprising an IG-like VL domain linked to an IG-like VH domain
US5358852A (en) * 1992-12-21 1994-10-25 Eastman Kodak Company Use of calcium in immunoassay for measurement of C-reactive protein
ES2348013T3 (es) 1994-01-27 2010-11-26 University Of Massachusetts Medical Center Inmunización por inoculación de una unidad de transcripción de adn.
MY115461A (en) 1995-03-30 2003-06-30 Wellcome Found Synergistic combinations of zidovudine, 1592u89 and 3tc
IL117574A0 (en) 1995-04-03 1996-07-23 Bristol Myers Squibb Co Processes for the preparation of cyclobutanone derivatives
AUPO591797A0 (en) 1997-03-27 1997-04-24 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation High avidity polyvalent and polyspecific reagents
US5939400A (en) * 1996-02-26 1999-08-17 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University DNA vaccination for induction of suppressive T cell response
AU3210997A (en) * 1996-05-24 1997-12-09 University Of Maryland At Baltimore Dna vaccines for eliciting a mucosal immune response
US20040203024A1 (en) 1996-06-06 2004-10-14 Baker Brenda F. Modified oligonucleotides for use in RNA interference
ZA975889B (en) * 1996-07-08 1998-02-23 Genentech Inc HIV envelope polypeptides and vaccine.
US6107020A (en) * 1996-09-20 2000-08-22 Roger Williams Hospital Model for protective and pathogenic roles of HIV-1 env-directed antibody dependent cellular cytotoxicity interaction with viral load, and uses thereof
US7030152B1 (en) * 1997-04-02 2006-04-18 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Systematic inflammatory markers as diagnostic tools in the prevention of atherosclerotic diseases and as tools to aid in the selection of agents to be used for the prevention and treatment of atherosclerotic disease
JPH11271304A (ja) * 1998-03-24 1999-10-08 Jcr Pharmaceuticals Co Ltd Ｈｉｖ感染の診断方法
WO1999064626A2 (en) * 1998-06-06 1999-12-16 Genostic Pharma Limited Probes used for genetic profiling
AU779494B2 (en) * 1999-07-28 2005-01-27 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Immunotherapy in HIV infected persons using vaccines after multi-drug treatment
US20040022787A1 (en) * 2000-07-03 2004-02-05 Robert Cohen Methods for treating an autoimmune disease using a soluble CTLA4 molecule and a DMARD or NSAID
AUPS065002A0 (en) * 2002-02-20 2002-03-14 Immunaid Pty Ltd Strategy for retroviral immunotherapy
US20030228320A1 (en) * 2000-08-18 2003-12-11 Ashdown Martin Leonard Retroviral immunotherapy
AUPQ948800A0 (en) * 2000-08-18 2000-09-07 Immunaid Pty Ltd A vaccine strategy
WO2002045735A2 (en) 2000-12-08 2002-06-13 University Technologies International, Inc. Nrp-derived peptides useful for treating insulin-dependent diabetes mellitus
AUPS054702A0 (en) * 2002-02-14 2002-03-07 Immunaid Pty Ltd Cancer therapy
US20060134713A1 (en) * 2002-03-21 2006-06-22 Lifescan, Inc. Biosensor apparatus and methods of use
JP5449639B2 (ja) * 2002-11-01 2014-03-19 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア ＨＩＦ−１アルファのｓｉＲＮＡ阻害に関する組成物及び方法
ATE443764T1 (de) * 2002-11-04 2009-10-15 Univ Massachusetts Allelspezifische rna-interferenz
WO2004069183A2 (en) 2003-01-31 2004-08-19 Albor Biologics, Inc. Immune regulation based on the targeting of early activation molecules
AU2003279088A1 (en) 2003-09-10 2005-04-27 Chiron Corporation Prion chimeras and uses thereof
JP4931593B2 (ja) 2003-10-24 2012-05-16 イミュネイド ピーティーワイ リミテッド 治療の方法
AU2005206746B2 (en) 2004-01-08 2008-08-28 Regents Of The University Of California Regulatory t cells suppress autoimmunity
US20070172496A1 (en) 2004-01-28 2007-07-26 Curix Aps Conjugates of amyloid proteins as vaccines for amyloid-related diseases
DK1805510T3 (da) * 2004-09-08 2012-04-30 Immunaid Pty Ltd Terapeutisk strategi til behandling af autoimmune og degenerative sygdomme
GB2436616A (en) * 2006-03-29 2007-10-03 Inverness Medical Switzerland Assay device and method
US8131325B2 (en) * 2009-02-27 2012-03-06 Research In Motion Limited Method, apparatus and system for battery resource management via traffic steering
EP2435825B8 (en) * 2009-05-27 2015-09-02 Biotempus Limited Methods of treating diseases

Also Published As

Publication number Publication date
EP1692516B1 (en) 2010-12-01
NZ546873A (en) 2010-09-30
CN1898569A (zh) 2007-01-17
US8524651B2 (en) 2013-09-03
EP2270511A3 (en) 2011-08-24
JP2007509078A (ja) 2007-04-12
BRPI0415533A (pt) 2006-12-26
DK1692516T3 (da) 2011-02-28
EP2270511A2 (en) 2011-01-05
PL1692516T3 (pl) 2011-05-31
CA2543490A1 (en) 2005-05-06
JP2012093366A (ja) 2012-05-17
US20140065644A1 (en) 2014-03-06
JP5616880B2 (ja) 2014-10-29
US20140051100A1 (en) 2014-02-20
US20070202119A1 (en) 2007-08-30
US20150377882A1 (en) 2015-12-31
JP4931593B2 (ja) 2012-05-16
IL175141A0 (en) 2006-09-05
ES2357430T3 (es) 2011-04-26
WO2005040816A1 (en) 2005-05-06
RU2006117793A (ru) 2007-12-10
DE602004030369D1 (de) 2011-01-13
ATE490470T1 (de) 2010-12-15
EP1692516A4 (en) 2008-09-24
EP1692516A1 (en) 2006-08-23
US20120156225A1 (en) 2012-06-21

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