PT1651615E

PT1651615E - Piridazinil-piperazinas e sua utilização como ligandos de receptores h3 de histamina

Info

Publication number: PT1651615E
Application number: PT04738980T
Authority: PT
Inventors: Rolf Hohlweg
Original assignee: High Point Pharmaceuticals Llc
Priority date: 2003-07-29
Filing date: 2004-07-06
Publication date: 2010-04-29
Also published as: CN1829699A; US20060173012A1; JP4680903B2; WO2005009976A1; KR20060054392A; IL173161A0; DE602004026068D1; AU2004259263A1; ATE461178T1; MXPA06001053A; CA2532236C; DK1651615T3; PL1651615T3; JP2007500135A; EP1651615B1; RU2006101452A; NO20061003L; CN100584831C; EP1651615A1; AU2004259263B2

Description

ΡΕ1651615 1

DESCRIÇÃO "PIRIDAZINIL—PIPERAZINAS E SUA UTILIZAÇÃO COMO LIGANDOS DE RECEPTORES H3 DE HISTAMINA"

ÂMBITO DA INVENÇÃO A presente invenção relaciona-se com as novas piperazinas, com a utilização destes compostos nas composições farmacêuticas e com as composições farmacêuticas que compreendem os compostos. Estes compostos demonstram uma afinidade de ligação selectiva e elevada para os receptores H3 de histamina, indicando actividade agonista, antagonista ou agonistica inversa do receptor H3 de histamina. Como um resultado, os compostos são úteis para o tratamento de doenças ou de patologias relacionadas com o receptor H3 de histamina.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A existência do receptor H3 de histamina é conhecida há vários anos e o receptor é de interesse corrente para o desenvolvimento de novos medicamentos. Recentemente foi clonado o receptor H3 de histamina humano. 0 receptor H3 de histamina é um auto-receptor pré-sináptico localizado no sistema nervoso central e periférico, na pele e nos órgãos, tais como o pulmão, o intestino, provavelmente no 2 ΡΕ1651615 tracto gastrointestinal e no baço. A evidência recente sugere que o receptor H3 demonstra actividade constitutiva, intrínseca, in vitro bem como in vivo (i.e. é activo na ausência de um agonista). Os compostos que actuam como agonistas inversos podem inibir esta actividade. Demonstrou-se que o receptor H3 de histamina regula a libertação de histamina e também de outros neurotransmissores, tais como a serotonina e a acetilcolina. Por isso, pode ser expectável o agonista inverso ou antagonista do receptor H3 de histamina aumentar a libertação destes neurotransmissores no cérebro. Pelo contrário, o agonista do receptor H3 de histamina leva a uma inibição da libertação da histamina e também de outros neurotransmissores tais como a serotonina e acetilcolina.

Estas conclusões sugerem que agonistas, agonistas inversos e antagonistas do receptor H3 de histamina podem ser mediadores importantes da actividade neuronal. Concordantemente, o receptor H3 de histamina é um importante alvo para os novos medicamentos.

Compostos semelhantes aos compostos da presente invenção foram anteriormente descritos, cf. J. Med. Chem. 1999, 42,336, J. Med. Chem. 1992, 35, 2369, DE 2804096, J. Org. Chem. 1996, 61, 3849, Buli. Soc. Chim. Fr. 1969, 319, WO 00/66578, WO 99/21845, e J. Med. Chem, . 1968, 11(6), 1144-1150. Contudo estas referências não descrevem nem sugerem que estes compostos possam ter uma actividade de agonista ou antagonista do receptor H3 de histamina. 3 ΡΕ1651615

Algumas publicações descrevem a preparação e a utilização de agonistas e antagonistas de histamina H3. A maioria deles são derivados de imidazole. Contudo, foram descritos recentemente alguns ligandos imidazole-livre do receptor H3 de histamina (ver e.g. Linney et al., J. Med. Chem. 2000, 43, 2362-2370; US 6 316 475, WO 01/66534 e WO 01/74810). Contudo, estes compostos diferem estruturalmente dos compostos presentes.

Em Arch. Pharm. 332(1999), 389-98, estão descritos os novos benzotiazoles 2-substituidos como antagonistas de histamina H3 e mediu-se a actividade para os diferentes compostos no jejuno do porquinho-da-índia. Um composto específico envolvido é o 2-(4-etilpiperazin-l-il)benzo-tiazole (composto 3, quadro 1).

Do ponto de vista de interesse em matéria de agonistas, agonistas inversos e antagonistas de receptor H3 de histamina, os compostos novos que interagem com o receptor H3 de histamina deverão ser uma contribuição altamente desejável para a matéria. A presente invenção proporciona uma contribuição nesta matéria baseada nas observações de que uma nova classe de piperazinas tem uma afinidade específica e elevada para o receptor H3 de histamina.

Devido às suas interacções com o receptor H3 de histamina, os compostos presentes são úteis no tratamento 4 ΡΕ1651615 de uma larga gama de estados patológicos e patologias em que é benéfica uma interacção com o receptor H3 de histamina. Assim, os compostos podem encontrar utilização, e.g., no tratamento de doenças do sistema nervoso central, do sistema nervoso periférico, do sistema cardiovascular, do sistema pulmonar, do sistema gastrointestinal e do sistema endócrino.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A invenção relaciona-se com os compostos de acordo com a fórmula I

em que R1 é seleccionado a partir de fluoro, bromo, iodo, hidroxi, trif luorometoxi, C2-6-alcoxi, Ci_6-alqilo, amino, C2-6_alquilsulfanilo (-SH-C2-6~alquilo) , C2-6_alquilsulf inil (-SO-C2-6_alquilo) , C2-6~alquilsulfonilo (-S (=0) 2-C2-6-alquilo) , Ci-6-alquilamino, di-Ci-6-alquilamino, ciano, nitro, arilo, heteroarilo, e C3_8-cicloalquilo; e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis. A invenção também se refere à utilização dos referidos compostos na terapia, e em especial às composições farmacêuticas que compreendem os referidos compostos. 5 ΡΕ1651615

Uma quantidade eficaz de um ou mais compostos de acordo com a fórmula I pode ser administrada a um sujeito com necessidade dela.

Ainda numa forma de realização, a invenção relaciona-se com a utilização dos compostos de acordo com a fórmula I para o fabrico de medicamentos.

DEFINIÇÕES

Nas fórmulas estruturais aqui dadas e através da presente especificação, os termos seguintes têm o significado indicado: 0 termo "alquilo" tal como aqui utilizado representa um grupo de hidrocarboneto saturado, de cadeia linear ou ramificada com o número de átomos de carbono indicado. Assim, os termos "Ci-3-alquilo", Ci-6-alquilo" e C2-6-alquilo" como aqui utilizado representam grupos de hidrocarboneto saturado, de cadeia linear ou ramificada com desde 1 até 3 átomos de carbono, desde 1 até 8 átomos de carbono, e de 2 até 6 átomos de carbono, respectivamente. Tipicamente os grupos alquilo compreendem mas não estão limitados a, meti-lo, etilo, n-propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, hexilo, e outros semelhantes. 0 termo "C2-6-alcoxi " tal como aqui utilizado refere-se a um radical -0-C2-6-alquilo, em que C2-6-alquilo 6 ΡΕ1651615 está definido como acima. Os exemplos representativos são etoxi, n-propoxi, isopropoxi, butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, pentoxi, isopentoxi, hexoxi, iso-hexoxi e outros semelhantes. 0 termo "Ci_6-alquilamino" tal como aqui utilizado refere-se a um radical -NH-Ci-6-alquilo, em que Ci_6-alquilo está definido como acima. Os exemplos representativos são metilamino, etilamino, isopropilamino, n-propilamino, butilamino, pentilamino, hexilamino, e outros semelhantes. 0 termo "di-Ci-6-alquilamino" tal como aqui utilizado refere-se a um radical -N (Ci-6-alquilo) 2, em que C1-6-alquilo está definido como acima. Deverá ser entendido que os grupos Ci_6~alquilo podem ser iguais ou diferentes. Os exemplos representativos são dimetilamino, metiletilamino, dietilamino, diisopropilamino, di-n-propilamino, dibutil-amino, dipentilamino, di-hexilamino, e outros semelhantes. 0 termo "C3_6-cicloalquilo" tal como aqui utilizado representa um grupo carbociclico monociclico, tendo desde 3 até 8 átomos de carbono. Os exemplos representativos são o ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e outros semelhantes. 0 termo "C2-6-alquilsulfonilo" tal como aqui utilizado refere-se a um radical -S (=0) 2-C2-6-alquilo, em que C2-6-alquilo está definido como acima. Os exemplos representativos são o etilsulfonilo, isopropilsulfonilo, n-propil- 7 ΡΕ1651615 sulfonilo, butilsulfonilo, pentilsulfonilo e outros semelhantes . 0 termo "arilo" tal como aqui utilizado é considerado compreender sistemas de anéis aromáticos tais como fenilo, bifenilo, naftilo, antracenilo, fenantrenilo, fluo-renilo, indenilo, pentanilo, azulenilo e outros semelhantes. É também entendido o arilo compreender derivados parcialmente hidrogenados de sistemas carbocíclicos acima enumerados. Os exemplos não limitativos destes derivados parcialmente hidrogenados são 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, 1-4-dihidronaftilo e outros semelhantes. carbazolilo 0 termo "heteroarilo" tal como aqui utilizado é considerado compreender sistemas de anéis aromáticos hete-rociclicos que contêm um ou mais heteroátomos seleccionados a partir do azoto, oxigénio e enxofre tais como o furilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, iso-xazolilo, isotiazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, piranilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, 1,2,3-triazinilo, 1,2,4-triazinilo, 1,3,5-triazinilo, 1,2, 3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3, 4-oxadiazolilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazo-lilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tetrazolilo, tiadiazinilo, indolilo, isoindolilo, benzofurilo, benzotie-nilo, indazolilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, benzo-isotiazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, purinilo, quinazolinilo, quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo, pteridinilo, 8 ΡΕ1651615 azepinilo, diazepinilo, acridinilo e outros semelhantes. É também considerado o heteroarilo compreender os derivados parcialmente hidrogenados dos sistemas heterociclicos acima mencionados. Os exemplos não limitativos destes derivados parcialmente hidrogenados são o 2,3-dihidrobenzofuranilo, pirrolinilo, pirazolinilo, indanilo, indolinilo, oxazodi-nilo, oxazolinilo, oxazepinilo e outros semelhantes. 0 termo "tratamento" como aqui utilizado significa a gestão e o cuidar de um doente para o propósito de combater a doença, o distúrbio ou o estado patológico. É considerado o termo compreender o atraso da progressão da doença, do distúrbio ou do estado patológico, o alivio ou agravamento dos sintomas e complicações, e/ou a cura ou a eliminação da doença, do distúrbio ou do estado patológico. 0 doente a ser tratado é preferencialmente um mamífero, em especial um ser humano. 0 termo "quantidade eficaz" como aqui utilizado é considerado indicar uma quantidade de um composto (in casu um composto de acordo com a fórmula I) que quando administrado a um doente dá lugar a uma resposta tera-peuticamente relevante. A referida quantidade pode variar dependendo e.g. do sexo, da idade, do peso e do estado do doente. Isto cabe dentro dos parâmetros de um médico de clínica geral para determinar qual é a quantidade eficaz em qualquer tratamento em particular. ΡΕ1651615 9

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

Numa forma de realização, R1 representa bromo ou ciano

Os compostos da presente invenção interagem com o receptor H3 de histamina e são considerados concordantemente serem especialmente úteis no tratamento de uma variedade de doenças ou estados patológicos onde as interacções H3 de histamina são benéficas.

Num aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de acordo com a fórmula (I) numa composição farmacêutica. A composição farmacêutica pode num outro aspecto da invenção compreender, como uma substância activa, pelo menos um composto de acordo com a fórmula (I) juntamente com um ou mais veiculos ou excipientes farmaceuti-camente aceitáveis. Num outro aspecto, a invenção proporciona uma tal composição farmacêutica numa forma de dosagem unitária, que compreende desde de cerca de 0,05 mg até cerca de 1000 mg, e.g. desde de cerca de 0,1 mg até cerca de 500 mg, tal como desde de cerca de 0,5 mg até cerca de 200 mg, do composto de acordo com a fórmula (I).

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) como acima definido para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de doenças e estados patológicos em que a inibição do receptor de histamina H3 tem um efeito benéfico. 10 ΡΕ1651615

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica com actividade antagonística de histamina H3 ou actividade agonista inversa de histamina H3 .

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para a redução de peso.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de excesso de peso ou obesidade.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para a supressão do apetite ou para a indução de saciedade.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para a prevenção ou tratamento de patologias e doenças relacionadas com excesso de peso ou obesidade, tais como a dislipidemia, doenças coronárias cardíacas, doença da vesícula biliar, osteoartrite e diversos tipos de cancros tais como os do endométrio, da mama, da próstata, e do cólon. 11 ΡΕ1651615

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para prevenção e/ou tratamento de doenças de alimentação, tais como a bulimia ou o comer em excesso.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de IGT (tolerância à glucose deficiente).

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da diabetes do tipo 2.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o retardamento ou a prevenção da progressão de IGT (tolerância à glucose deficiente) para a diabetes do tipo 2.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o atraso ou prevenção da progressão da diabetes do tipo 2 que não requer a insulina para diabetes do tipo 2 que requer a insulina. 12 ΡΕ1651615

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de doenças ou distúrbios nos quais a estimulação do receptor H3 de histamina tem um efeito benéfico.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica com actividade agonística de histamina H3.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de rinite alérgica, da úlcera ou da anorexia.

Num outro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de doença de Alzheimer, narcolepsia, patologias de défice de atenção ou de insónia reduzida, ou para a regulação do sono.

Num outro aspecto, a invenção relaciona-se com a utilização de um composto de fórmula (I) para a preparação de uma preparação farmacêutica para o tratamento de distúrbios das vias aéreas, tais como a asma, para a regulação de secreção do ácido gástrico, ou para o tratamento de diarreia. 13 ΡΕ1651615

As doenças ou patologias relacionadas com o receptor H3 de histamina podem ser tratadas por administração a um sujeito com a necessidade dela, de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral (I) tal como acima definido, ou de uma composição farmacêutica que compreende este composto. No referido tratamento, a quantidade eficaz do composto da fórmula geral (I) tal como acima definido, está na gama de a partir de 0,05 mg até cerca de 2000 mg, preferencialmente a partir de 0,1 mg até cerca de 1000 mg, e mais preferencialmente a partir de 0,5 mg até cerca de 500 mg por dia.

Num aspecto, a invenção relaciona-se com os compostos que exibem actividade antagonista do receptor H3 de histamina ou actividade agonista inversa e que podem concordantemente ser úteis no tratamento de uma gama alargada de estados patológicos nos quais o bloqueio do receptor H3 de histamina é benéfico. A redução de peso pode ser conseguida por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I) tal como acima definido.

No tratamento de excesso de peso ou obesidade, o tratamento compreende a administração a um sujeito com necessidade dela, de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). 14 ΡΕ1651615 A supressão de apetite ou a indução de saciedade pode ser conseguida por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). A prevenção e/ou tratamento de patologias ou doenças relacionados com excesso de peso ou obesidade, tal como a dislipidemia, doenças coronárias cardiacas, doença da vesícula biliar, osteoartrite e diversos tipos de cancros tais como os do endométrio, da mama, da próstata, e do cólon pode ser obtida por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). A prevenção e/ou tratamento de doenças de alimentação, tais como a bulimia ou o comer em excesso pode ser obtido por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). 0 tratamento de IGT (tolerância à glucose deficiente) pode ser obtido por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). 0 tratamento da diabetes do tipo 2 pode ser obtido por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I).

0 atraso ou a prevenção da progressão de IGT 15 ΡΕ1651615 (tolerância à glucose reduzida) para a diabetes do tipo 2 pode ser obtido por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I). 0 atraso ou prevenção da progressão da diabetes do tipo 2 que não requer insulina para diabetes do tipo 2 que requer insulina pode ser obtido por administração a um sujeito com necessidade dela de uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I) .

Num outro aspecto, a invenção relaciona-se com os compostos que exibem a actividade agonista do receptor H3 de histamina e que podem concordantemente ser úteis no tratamento de uma gama alargada de estados patológicos e patologias nos quais a activação do receptor H3 de histamina é benéfica.

Os compostos da presente da invenção também podem ser utilizados para o tratamento de patologias das vias aéreas (como a asma), como anti-diarreia e para a modulação da secreção do ácido gástrico. Para além disso, os compostos da presente invenção também podem ser utilizados para o tratamento de doenças associadas à regulação do sono e à insónia e para o tratamento de narcolepsia e patologias de défice de atenção.

Adicionalmente, os compostos da invenção podem ser utilizados como estimulantes do SNC ou como sedativos. 16 ΡΕ1651615

Os compostos presentes também podem ser utilizados para o tratamento de estados patológicos relacionados com a epilepsia. Adicionalmente, os compostos da invenção podem ser utilizados para o tratamento de enjoo e vertigem do movimento. Para além disso, eles podem ser utilizados como reguladores da secreção do hipotálamo- hipófise, como anti-depressores, como moduladores da circulação cerebral, e no tratamento do síndrome do intestino irritável.

Além disso, os compostos presentes da invenção também podem ser utilizados para o tratamento de demência e da doença de Alzheimer.

Os compostos presentes da invenção também podem ser úteis para o tratamento da rinite alérgica, úlcera ou anorexia.

Os compostos presentes invenção adicionalmente podem ser úteis para o tratamento da enxaqueca [ver, e.g., McLeod et al., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 287 (1998), 43-50] e para o tratamento do enfarte do miocárdio [ver Mackins et al., Expert Opinion on Investigational Drugs 9(2000), 2537-2542].

Num aspecto adicional da invenção, combinou-se o tratamento de um doente com um composto da presente invenção com a dieta e/ou exercício. 17 ΡΕ1651615

Num aspecto adicional da invenção, um ou mais compostos da presente invenção é/são administrado/s em combinação com uma ou mais substâncias activas adicionais em qualquer/quaisquer proporção(ões) adequada(s). Estes agentes activos adicionais, por exemplo, podem ser selec-cionados a partir de agentes anti-obesidade, agentes anti-dislipidémicos, agentes anti-diabéticos, agentes anti-hi-pertensivos, agentes para o tratamento de complicações que resultam de ou associados com a diabetes, e agentes para o tratamento de complicações e patologias que resultam de ou associados com a obesidade.

Assim, num aspecto adicional da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes anti-obesidade ou agentes reguladores de apetite. Estes agentes podem, por exemplo, ser seleccionados a partir do grupo de agonistas CART (transcripto regulado pela anfetamina e cocaína), antagonistas de NPY (neuropéptido Y) , agonistas MC4 (melano-cortina 4), agonistas MC3 (melanocortina 3), antagonistas de orexina, agonistas TNF (factor de necrose tumoral), agonistas CRF (factor de libertação de corticotropina) antagonistas de CRF BP (proteína de ligação de factor de libertação de corticotropina) , agonistas urocortina, agonistas adrenérgicos β3 tal como CL-316243, AJ-9677, GW-0604, LY 362884, LY377267 ou AZ-40140, MSH (hormona estimulante de melanócitos), antagonistas de MCH (hormona de concentração de melanócitos), agonistas CCK (colescitoquinina), 18 ΡΕ1651615 inibidores de reabsorção de serotonina tais como a fluo-xetina, serotax ou a citalopram, inibidores de reabsorção de serotonina e da noradrenalina, compostos mistos de serotonina e de compostos noradrenérgicos, agonistas de 5HT (serotonina), agonistas da bombesina, antagonistas de gala-nina, hormona de crescimento, factores de crescimento tais como a prolactina ou o lactogen placentar, compostos gue libertam as hormonas de crescimento, agonistas TRH (hormona que liberta a trireotropina), moduladores de UCP 2 ou 3 (proteína 2 ou 3 não acoplada) , agonistas de leptina, agonistas DA (bromocriptina, doprexin), inibidores de lipa-se/amilase, moduladores de PPAR (receptor activado pelo proliferador do peroxisoma, moduladores de RXR (receptor X retinóide) agonistas PTR, inibidores de AGRP (proteína relacionada com Agouti), antagonistas opióides (tal como o naltrexone), exendin-4, factor neurotrófico ciliário e o GLP-1.

Numa forma de realização da invenção, um agente anti-obesidade administrado em combinação com um ou mais compostos da invenção é a leptina.

Numa outra forma de realização da invenção, um tal agente de anti-obesidade é a dexamfetamina ou a anfe-tamina.

Numa outra forma de realizaçao da invenção, um tal agente de anti-obesidade é a fenfluramina ou a dexfen-fluramina. 19 ΡΕ1651615

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um tal agente de anti-obesidade é a sibutramina.

Numa forma de realização adicional da invenção, um tal agente de anti-obesidade é o orlistat.

Numa outra forma de realização da invenção, um tal agente de anti-obesidade é omazindol ou a fentamina.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um tal agente de anti-obesidade é a fendimetrazina, o dietilpropion, a fluoxetina, o bupropion, o topiramate ou o ecopipam.

Ainda num outro aspecto da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes anti-diabéticos. Os agentes anti-diabéticos relevantes compreendem a insulina, os análogos e os derivados da insulina tais como os descritos na EP 0 792 290 (Novo Nordisk A/S), e.g. ΝεΒ29-tetradecanoílo des (B30) insulina humana, EP 0 214 826 e EP 0 705 275 (Novo Nordisk A/S), e.g. AspB28 insulina humana, US 5 504 188 (Eli Lilly), e.g. LysB28 ProB29 insulina humana, EP 0 368 187 (Aventis) , e.g. Lantus®, dos quais todos estão incorporados aqui por citação, derivados de GLP-1, tais como os descritos na WO 98/08871 (Novo Nordisk A/S), incorporados aqui por citação, bem como os agentes hipoglicémicos activos oralmente. 20 ΡΕ1651615

Os agentes hipoglicémicos activos oralmente compreendem preferencialmente as imidazolinas, as sulfonil-ureias, as biguanidas, as meglitinidas, oxadiazolidino-dionas, as tiazolidinodionas, os sensibilizadores de insulina, os inibidores de α-glucosidase, os agentes que actuam no canal de potássio ATP-dependente das células-β, e.g. os abridores do canal de potássio tais como os descritos na WO 97/26265, WO 99/03861 e na 00/37474 (Novo Nor-disk A/S) incorporado aqui por citação, ou a mitiglinida, ou um bloqueador de canal de potássio, tal como o BTS-67582, a nateglinida, os antagonistas de glucagon, tal como um dos descritos em WO 99/01423 e WO 00/39088 (Novo Nordisk A/S e Agouron Pharmaceuticals, Inc.) em que ambos estão incorporados aqui por citação, agonistas de GLP-1, tais como os descritos em WO 00/42026 (Novo Nordisk A/S e Agouron Pharmaceuticals, Inc.) incorporados aqui por citação, inibidores de DPP-IV (dipeptidil peptidase-IV), inibidores de PTPase (proteína tirosina fosfatase), inibidores de enzimas hepáticos envolvidos na estimulação de gluco-neogénese e/ou glicogenólise, os moduladores de reabsorção de glucose, os inibidores de GSK-3 (glicogénio sintase quinase-3), os compostos que modificam o metabolismo de lípidos tais como os agentes anti-lipidémicos, os compostos que diminuem o consumo de alimentos, agonistas de PPAR (receptor activado pelo proliferador de peroxisoma) e de RXR (receptor X retinóide), tais como o ALRT-268, LG-1268 ou o LG-1069. 21 ΡΕ1651615

Numa forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com a insulina ou um derivado ou análogo da insulina, tal como o N£B29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, AspB28 insulina humana, LisB28 ProB29 insulina humana, Lantus®, ou uma preparação mista que compreende um ou mais destes.

Numa forma de realização adicional da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com uma sulfonilureia, e.g. tol-butamida, clorpropamida, tolazamida, glibenclamida, glipi-zida, glimepiride, glicazida ou gliburide.

Numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com uma biguanida, e.g. o metformin.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com uma meglitinida, e.g. repa-glinida ou nateglinida.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um sensibilizador da insulina tiazolidinodiona, e.g. a troglitazona, a cigli-tazona, a pioglitazona, a rosiglitazona, a isaglitazona, a darglitazona, a englitazona, o CS-011/CI-1037 ou o T 174, 22 ΡΕ1651615 ou um composto descrito em WO 97/41097, WO 97/41119, WO 97/41120 e WO 98/45292 (Dr. Reddy's Research Foundation), os quais estão todos incorporados aqui por citação.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um sensibilizador de insulina, e.g. tal como o GI 262570, YM-440, MCC-555, JTT-501, AR-H039242, KRP-297, GW-409544, CRE-16336, AR-H049020, LY510929, MBX-102, CLX-0940, GW-501516, ou um composto descrito em WO 99/19313, WO 00/50414, WO 00/63191, WO 00/63192 ou WO 00/63193 (Dr. Reddy's Research Foundation), ou em WO 00/23425, WO 00/23415, WO 00/23451, WO 00/23445, WO 00/23417, WO 00/23416, WO 00/63153, WO 00/63196, WO 00/63209, WO 00/63190 ou WO 00/63189, (Novo Nordisk A/S), os quais estão todos incorporados aqui por citação.

Numa forma de realização adicional da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um inibidor de a-glucosidase, e.g. a voglibose, o emiglitate, o miglitol ou a acarbose.

Numa outra forma de realização adicional da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um agente que actua no canal de potássio ATP-dependente das células-β, e.g. a tolbutamida, glibenclamida, glipizida, glicazida, BTS 67582 ou a repaglinida. 23 ΡΕ1651615

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com a nateglinida.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um agente antihiperlipídico, ou agente antilipidico e.g. colestiramina, colestipol, clofi-brato, gemfibrozil, lovastatina, pravastatina, simvas-tatina, probucol ou a dextrotiroxina.

Ainda numa outra forma de realização da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um agente antilipidico, e.g. colestiramina, colestipol, clofibrate, gemfibrozil, lovastatina, pravastatina, simvastatina, probucol ou a dextrotiroxina.

Num outro aspecto da invenção, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com mais do que um dos compostos acima mencionados, e.g. em combinação com o metformin e uma sulfo-nilureia tal como a gliburide; uma sulf onilureia e acar-bose; nateglinida e metformina; acarbose e metformina; uma sulfonilureia, metformina e troglitazona; insulina e uma sulfonilureia; insulina e metformina; insulina, metformina e uma sulfonilureia; insulina e troglitazona; insulina e a lovastatina; etc. 24 ΡΕ1651615

Para além disso, um ou mais compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes anti-hipertensivos. Os exemplos de agentes anti-hipertensivos são os β-bloqueadores tais como o alpre-nolol, atenolol, timolol, pindolol, propanolol e meta-prolol, inibidores de ECA (enzima de conversão de angio-tensina) tais como o benazepril, captopril, enalapril, fosinopril, lisinopril, quinapril e ramipril, bloqueadores de canal de cálcio tais como a nifedipina, felodipina, nicardipina, isradipina, nimodipina, ditiazem e verapamil, e os α-bloqueadores tais como o doxazosin, o urapidil, o prazosina, e o terazosina. Pode ser feita referência adicional ao Remington: The Science and Pratice of Pharmacy, 19th Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995.

Deverá ser entendido que qualquer combinação de compostos de acordo com a invenção com dieta e/ou exercício, um ou mais dos compostos acima mencionados e opcionalmente uma ou mais das substâncias activas são consideradas no âmbito da presente invenção.

Para além disso, alguns compostos da presente invenção podem existir em diferentes formas tautoméricas, e é considerado que qualquer uma das formas tautoméricas que os compostos são capazes de formar está incluída no âmbito da presente invenção. A presente invenção também abrange os sais 25 ΡΕ1651615 farmaceuticamente aceitáveis dos compostos apresentados. Estes sais compreendem os sais de adição de ácido, sais de metais farmaceuticamente aceitáveis, sais de amónio e de amónio alquilado. Os sais de adição de ácido compreendem os sais de ácidos inorgânicos bem como os dos ácidos orgânicos. Os exemplos representativos de ácidos inorgânicos compreendem os ácidos: clorídrico, bromídrico, iodí-drico, fosfórico, sulfúrico, nítrico e outros semelhantes. Os exemplos representativos de ácidos orgânicos compreendem os ácidos: fórmico, acético, tricloroacético, trifluoro-acético, propiónico, benzóico, cinâmico, cítrico, fumárico, trifluoroacético, propiónico, glicólico, láctico, maleico, malónico, mandélico, oxálico, pícrico, pirúvico, salicí-lico, succínico, metanossulfónico, etanossulfónico, tartá-rico, ascórbico, pamóico, bismetileno salicílico, etanodis-sulfónico, glucónico, citracónico, aspártico, esteárico, palmítico, EDTA, glicólico, p-aminobenzóico, glutâmico, benzenossulfónico, p-toluenossulfónico e outros semelhantes. Os exemplos adicionais de sais de adição de ácidos orgânicos ou inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis enumerados em J. Pharm. Sei. 1977, 66, 2, que está incorporada aqui por citação. Os exemplos de sais de metais compreendem os sais de lítio, sódio, potássio, magnésio e outros semelhantes. Os exemplos de sais de amónio, e de amónio alquilado compreendem os sais de amónio, metil-amónio, dimetilamónio, trimetilamónio, etilamónio, hidroxi-etilamónio, dietilamónio, butilamónio, tetrametilamónio e outros semelhantes. 26 ΡΕ1651615

Também estão previstos como sais de adição de ácidos farmaceuticamente aceitáveis os hidratos que os compostos apresentados são capazes de formar.

Os sais de adição de ácido podem ser obtidos como produtos directos na síntese de compostos. Alternativamente, a base livre pode ser dissolvida num solvente adequado que contém o ácido apropriado, e o sal isolado por evaporação do solvente ou separando de outro modo o sal e o solvente. Os compostos da presente invenção podem formar solvatos com solventes de peso molecular baixo correntes utilizando métodos bem conhecidos dos especialistas na matéria. Estes solvatos também devem ser entendidos como estando no âmbito da presente invenção. É possível preparar os pro-fármacos dos compostos de fórmula I que seguem a administração de acordo com a conversão química por processos metabólicos antes de se tornarem substâncias farmacologicamente activas. Em geral, estes pro-fármacos serão os derivados funcionais dos compostos presentes que são facilmente convertíveis in vivo no composto de fórmula (I) pretendido. Os procedimentos convencionais para a selecção e preparação dos derivados pro-fármacos adequados estão descritos, por exemplo, em "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985. Também é possível preparar os metabolitos activos dos compostos de fórmula (I). 27 ΡΕ1651615

COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS

Os compostos da invenção podem ser administrados sós ou em combinação com veículos ou excipientes farma-ceuticamente aceitáveis, em doses quer única quer múltipla. As composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser formuladas com veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis, bem como qualquer um outro adjuvante e exci-piente conhecidos de acordo com as técnicas convencionais, tais como as descritas em Remington: The Science and Pratice of Pharmacy, 19th Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995. As composições farmacêuticas podem ser especificamente formuladas para administração por qualquer via adequada, tal como a oral, rectal, nasal, pulmonar, tópica (que compreende a bucal ou sublingual), transdérmica, intracisternal, intraperitoneal, vaginal ou parentérica (que compreende a subcutânea, intramuscular, intratecal, intravenosa e intradérmica) , sendo a preferida a via oral. Será apreciado que a via preferida dependa do estado geral e da idade do sujeito a ser tratado e da substância activa escolhida.

As composições farmacêuticas para a administração oral compreendem formas de dosagem sólidas tais como cápsulas, tabletes, drageias, comprimidos, losangos, pós e grânulos. Quando apropriado, estes podem ser preparados com revestimentos, tais como revestimentos entéricos, ou podem ser formulados para proporcionarem a libertação controlada da substância activa, tal como a libertação retardada ou 28 ΡΕ1651615 prolongada de acordo com os métodos bem conhecidos na matéria.

As formas de dosagem líquidas para administração oral compreendem soluções, emulsões, suspensões, xaropes e elixires.

As composições farmacêuticas para a administração parentérica compreendem soluções injectáveis aquosas e não-aquosas, dispersões, suspensões ou emulsões esterilizadas bem como os pós esterilizados para serem reconstituídas as soluções injectáveis ou as dispersões esterilizadas antes da utilização. As formulações injectáveis em depósito também devem ser consideradas como estando no âmbito da presente invenção.

As outras formas de administração adequadas compreendem os supositórios, as pomadas, os cremes, os geles, os inaladores, os pensos dérmicos, os implantes etc.

Uma dose oral típica está na gama de cerca de 0,001 até cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia, e mais preferencialmente de cerca de 0,01 até cerca de 50 mg/kg de peso corporal por dia, e ainda mais preferencialmente de cerca de 0,05 até cerca de 10 mg/kg de peso corporal por dia, administrado em uma ou mais doses, tais como de 1 até 3 doses. A dosagem exacta dependerá da frequência e modo de administração, sexo, idade, peso e estado geral do sujeito tratado, da natureza e da gravidade 29 ΡΕ1651615 do estado patológico tratado e de quaisquer doenças concomitantes a serem tratadas, e de outros factores evidentes para os especialistas na matéria.

As formulações podem ser convenientemente apresentadas na forma de dosagem unitária por métodos conhecidos dos especialistas na matéria. A forma de dosagem unitária típica para a administração oral uma ou mais vezes por dia, tal como 1 a 3 vezes por dia, pode conter de cerca de 0,05 até cerca de 1000 mg, preferencialmente de cerca de 0,5 mg até cerca de 200 mg de um composto (ou um sal ou outro seu derivado como acima indicado), de acordo com a invenção.

Para as vias parentéricas, tais como a intravenosa, intratecal, intramuscular e administração similar, as doses típicas são de ordem de cerca de metade da dose utilizada para a administração oral.

Os compostos desta invenção são geralmente utilizados como substâncias livres ou como respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis. Um exemplo é um sal de adição de ácido de um composto com uma funcionalidade de base livre. Quando um composto de fórmula (I) contém uma funcionalidade de base livre, estes sais são preparados de um modo convencional por tratamento de uma solução ou suspensão da base livre do composto de fórmula (I) com um equivalente químico (equivalente ácido-base) de um ácido farmaceuticamente aceitável. Os exemplos representativos de 30 ΡΕ1651615 ácidos orgânicos e inorgânicos relevantes estão mencionados acima. Os sais fisiologicamente aceitáveis de um composto da invenção com um grupo hidroxi compreendem o anião do referido composto em combinação com um catião adequado, tal como o ião sódio ou amónio.

Para a administração parentérica, as soluções dos novos compostos de fórmula (I) em solução aquosa esterilizada, podem utilizar o óleo de sésamo ou de amendoim aquoso ou propilenoglicol em solução aquosa. Estas soluções aquosas deverão ser adequadamente tamponadas se necessário, e em primeiro lugar o diluente liquido deve ser tornado isotónico com água salgada ou glucose suficiente. As soluções aquosas são particularmente adequadas para administração intravenosa, intramuscular, subcutânea e intraperitoneal. Os meios aquosos esterilizados utilizados estão facilmente disponíveis pelas técnicas correntes conhecidas dos especialistas na matéria.

Os veículos farmaceuticamente aceitáveis que compreendem os diluentes sólidos inertes ou os enchimentos, soluções aquosas e diversos solventes orgânicos esterilizados. Os exemplos de veículos sólidos são a lactose, terra alba, sacarose, ciclodextrina, talco, gelatina, agar, pectina, acácia, estearato de magnésio, ácido esteárico ou éteres alquílicos baixos de celulose. Os exemplos de veículos líquidos são o xarope, óleo de amendoim, azeite, fosfolípidos, ácidos gordos, aminas de ácidos gordos, polioxietilenos ou a água. Igualmente, o veículo ou o 31 ΡΕ1651615 diluente pode compreender qualquer substância de libertação controlada conhecida nesta matéria, tal como o mono-estearato de glicerilo ou o di-estearato, só ou misturado com uma cera. As composições farmacêuticas formadas por combinação dos novos compostos de fórmula (I) e de veículos farmaceuticamente aceitáveis são depois administrados facilmente em formas de dosagem variada adequadas para as vias de administração descritas. As formulações podem convenientemente ser apresentadas em formas de dosagem unitária por métodos conhecidos na arte farmacêutica.

As formulações da presente invenção adequadas para a administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas tais como cápsulas ou comprimidos, cada uma contendo uma quantidade pré-determinada da substância activa, e que pode incluir um excipiente adequado. Estas formulações podem estar na fórmula de pó ou grânulos, como uma solução, ou suspensão líquida aquosa ou não-aquosa, ou como uma emulsão óleo-em-água ou água-em-óleo.

Se for utilizado um veículo sólido para administração oral, a preparação pode ser comprimida, colocada numa cápsula de gelatina dura em pó ou esferas ou pode estar na forma de um trocisco ou pastilha. A quantidade de veículo sólido pode variar largamente, mas geralmente será de cerca de 25 mg até cerca de 1 g. Se for utilizado um veículo líquido, a preparação pode estar na forma de um xarope, emulsão, cápsula de gelatina mole ou de líquido 32 ΡΕ1651615 injectável esterilizado, tal como uma suspensão ou solução liquida aquosa ou não-aquosa.

Um comprimido típico, que pode ser preparada por técnicas convencionais de fazer comprimidos, pode conter: Núcleo: um ou 5, 0 mg 6 7,8 mg 31,4 mg 1,0 mg q.b.

Composto da invenção, e.g. de qualquer dos Exemplos 1-8 (como composto livre seu sal)

Lactose Ph. Eur.

Celulose, microcrist. (Avicel)

Amberlite®IRP88*

Magnesii stearas Ph.Eur._

Revestimento:

Hidroxipropil metilcelulose aprox. 9 mg

Mywacett 9-40 T**_aprox. 0,9 mg * Poliacrilina de potássio NF, desintegrante de comprimidos, Rohm and Hass. ** Monoglicérido acilado utilizado como plastificante para a película de revestimento.

Se desejado, a composição farmacêutica da invenção pode compreender o composto da fórmula I em combinação com uma ou mais das substâncias farmacologicamente activas, e.g. as substâncias escolhidas entre as descritas anteriormente. 33 ΡΕ1651615

EXEMPLOS

Nos exemplos, considera-se os termos seguintes terem os significados gerais seguintes: DIPEA: diisopropiletilamina DMSO: sulfóxido de dimetilo

NMR

Espectro de NMR obtido em instrumentos Bruker de 300 MHz e 400 MHz.

LC-MS A HPLC-MS foi realizada num aparelho Perkin-Elmer (API 100) . A coluna utilizada foi X-Terra C 18,5 μιη, 50 x 3 mm, e a eluição foi realizada a 1,5 mL/min à temperatura ambiente com um gradiente de 5-90% de acetonitrilo em água com o ácido trifluoroacético 0,01% durante um período de 7,5 min.

HPLC

As análises RP foram realizadas utilizando um sistema Alliance Waters adaptado com um detector Waters 2487 de banda dual. As detecções por UV foram realizadas utilizando uma coluna Symmetry C18, 3,5 μιη, 3,0 mm x 100 mm. A eluição foi feita com um gradiente linear que consistiu de 5-90% de acetonitrilo, 90-0% de água e 5% de ácido trifluoroacético aquoso a 1% durante um período de 8 minutos numa proporção de fluxo de 1,0 min/min. 34 ΡΕ1651615

Procedimento Geral (A)

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados pelo procedimento geral (A):

(Hal = halogéneo, nomeadamente Cl ou Br)

Agitou-se uma mistura de isopropilpiperazina (2,00 mmol), DMSO (1,0 mL) , uma halogenopiridazina (2,00 mmol), e uma base como a DIPEA (0,20 mL) durante uma hora a 100°C e depois durante 18 horas a 120°C. Adicionaram-se água e carbonato de potássio e extraiu-se a mistura com um solvente tal como o acetato de etilo (3 x 20 mL) . Os extractos combinados foram lavados com uma solução de cloreto de sódio saturada, secos sobre sulfato de magnésio, e concentrados a pressão reduzida. O resíduo pode ser convertido num sal apropriado, tal como o sal cloridrato, por co-evaporação com um ácido, tal como uma solução aquosa 1 molar de ácido clorídrico, etanol e tolueno, sendo o resíduo purificado depois por recristalização.

Procedimento Geral (B)

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados pelo procedimento geral (B):

35 ΡΕ1651615

Um composto de fórmula I pode ser preparado a partir de uma piperazina mono-substituída e uma bromo-piridazina adequada na presença de um catalizador adequado, tal como o tris(dibenzildenoacetona)di-paládio, num solvente adequado, como o tolueno, a uma temperatura adequada entre 0°C e 150°C.

Procedimento Geral (C)

As cloropiridazinas da fórmula geral (lia), (Ilb), ou (IIc) podem ser preparadas pelo procedimento geral (C):

36 ΡΕ1651615

Exemplo 1 4-[6-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-piridazin-3-il]benzonitrilo.

Uma suspensão de 4-(6-cloro-piridazin-3-il)-benzonitrilo (1 g, 4,64 mmol; preparada como descrito na US patent No 4 112 095), isopropilpiperazina (0,654 g, 5,1 mmol), DIPEA (1,199 g, 9,27 mmol) e 4-(dimetilamino)-piridina (0,057 g, 0,464 mmol) em DMSO (4 mL) foi agitada e aquecida até 100°C durante 20 h. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, a mistura foi agitada com dicloro-metano (25 mL) , e água (35 mL) e agitada durante 5 min. A fase orgânica foi separada, lavada com água (50 mL) e com uma solução aquosa de cloreto de sódio saturada (50 mL), e acidificada até pH 2 por adição de ácido clorídrico 1 N. A mistura foi extraída com água (30 mL) , e a fase aquosa foi lavada com diclorometano (10 mL) e concentrada in vacuo para dar um sólido, que foi recolhido e removido com etanol para dar o composto em epígrafe como um cloridrato cristalino (1,33 g, 76%). ΧΗ NMR(D20) δ 1,30 (d, 6H) , 3,26 (t largo, 2H) , 3,45-3,68 (m, 5H) , 4,52 (d largo, 2H) , 7,75 (d, 1H) , 7,77 (d, 2H) , 7,87 (d, 2H), 8,12 (d, 1H); HPLC-MS: m/z 308,2 (MH+) ; Rf: 1,76 min. 37 ΡΕ1651615

Exemplo 2 3-(4-Bromofenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina

Este composto foi preparado de acordo com o

Procedimento Geral (A), partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-cloro-6-(4-bromofenil)piridazina, preparada como descrito na US patent No 4 112 095. O composto foi isolado como sal cloridrato respectivo. NMR(D20) δ 1,30 (d, 6H) , 3,23 (t largo, 2H) , 3,47 (t largo, 2H) , 3,52-3,67 (m, 3H) , 4,52 (d largo, 2H) , 7,64 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 7,82 (d, 1H), 8,15 (d, 1H); HPLC: Rf: 3,4 9 min.

Exemplo 3 3-(4-Etanossulfonilfenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il) piridazina

Este composto foi preparado de acordo com o 38 ΡΕ1651615

Procedimento Geral (A), partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-cloro-6-(4-etanossulfonilfenil)piridazina, preparada de acordo com o Procedimento Geral (C). 0 composto foi isolado como sal cloridrato respectivo. ΤΗ NMR(d6- -DMSO) δ 1,15 (t, 3H) , 1 ,33 (d, 6H), 3,17 (m, 2H), 3,36 (q, 2H), 3,45-3,60 (m, 3H) , 3,67(t, 2H), 4,66 (d, 2H), 7,71 (d, 1H), 8,00 (d, 2H), 8,29 (d, 1H) , 8,33 (d, 2H) ; HPLC: Rf: 4,73 min.

Exemplo 4 3-(4-Etanossulfinilfenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina

/—\ n

H,C

Este composto foi preparado de acordo com o Procedimento Geral (A) , partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-cloro-6-(4-etanossulfinilfenil)piridazina, preparada de acordo com o Procedimento Geral (C). 0 composto foi isolado como respectivo sal cloridrato. XH NMR(de-DMSO) 3,05-3,24 (m, 4,64 (d largo, (d, 1H), 11,47 HPLC: Rf = 4,10 δ 1,06 (t, 3H), 3H), 3,46-3,59 2H), 7,75-7,83 (s largo, 1H); min. 1,32 (d, 6H) , (m, 3H) , 3,68 (m, 3H) , 8,26 2,83 (m, 1H), (t largo, 2H), (d, 2H), 8,32 39 ΡΕ1651615

Exemplo 5 3 - [ 4-(Butano-l-sulfonil)fenil]-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina

Este composto foi preparado de acordo com o Procedimento Geral (A), partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-[4-(butano-l-sulfonil)fenil]-6-cloropiridazina, preparado de acordo com o Procedimento Geral (C) . 0 composto foi isolado como respectivo sal cloridrato. ΤΗ NMR(ds-DMSO) δ 0,84(t, 3H) , l,33(d, 6H), 1,3-1,4(m, 2H), l,54(m, 2H) , 3,17(m, 2H) , 3,37(m, 2H) , 3,45-3,60 (m, 3H) , 3,6 7 (t largo, 2H), 4,66(d largo, 2H), 7,73(d, 1H), 8,03(d, 2H), 8,30(d, 1H), 8,34(d, 2H), ll,41(s largo, 1H); HPLC: Rf = 6,46 min.

Exemplo 6 3 - [ 4-(Butano-l-sulfinil)fenil]-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina

40 ΡΕ1651615

Este composto foi preparado de acordo com o Procedimento Geral (A) , partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-[4-(butano-l-sulfinil)fenil]-β-cloropiridazina, preparado de acordo com o Procedimento Geral (C) . O composto foi isolado como respectivo sal cloridrato. ΤΗ NMR(de-DMSO) δ 0,87(t, 3H) , l,26-l,50(m, 9H) , l,65(m, 1H) , 2,83(m, 1H), 3,02(m, 1H), 3,18 (m, 2H) , 3, 45-3,60 (m, 3H) , 3,68 (t largo, 2H) , 4,64(d largo, 2H) , 7, 74-7,86(m, 3H) , 8,26(d, 2H), 8,32(d, 1H), 11,41(s largo, 1H) f HPLC: Rf = 5, 52 min.

Exemplo 7 3-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-6-[4-(propano-l-sulfonil)-fenilJpiridazina

Este composto foi preparado de acordo com o Procedimento Geral (A), partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-cloro-6-[4-(propano-l-sulfonil)fenil]piridazina, preparada de acordo com o Procedimento Geral (C) . O composto foi isolado como respectivo sal cloridrato. 1H NMR(de-DMSO) δ 0,94(t, 3H) , l,33(d, 6H) , l,59(m, 2H) , 3,17 (m, 2H), 3,35(m, 2H) , 3,45-3,60(m, 3H), 3,68(t largo, 41 ΡΕ1651615 2Η), 4,67(d largo, 2H) , 7,74(d, 1H) , 8,02(d, 2H) , 8,81(d, 1H), 8,84(d, 2H), 11,44 (s largo, 1H); HPLC: Rf = 5,60 min.

Exemplo 8 3-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-6-[4-(propano-l-sulfinil)-fenil]piridazina HSC /=\ /=V ϋ /-CH» )-H l*~i f-\ /-s-7

H Q N~N •5

Este composto foi preparado de acordo com o Procedimento Geral (A), partindo de 1-isopropilpiperazina e 3-cloro-6-[4-(propano-l-sulfinil)fenil]piridazina, preparada de acordo com o Procedimento Geral (C) . O composto foi isolado como respectivo sal cloridrato. ΧΗ NMR(de-DMSO) δ 0,98(t, 3H) , l,33(d, 6H) , l,50(m, 1H) , 1, 70(m, 1H) , 2,82(m, 1H), 2,99(m, 1H) , 3,18(m, 2H), 3, 45 3,60(m, 3H) , 3,69 (t largo, 2H) , 4,65(d largo, 2H) , 7, 75 7,85 (m, 3H) , 8,26(d, 2H), 8,32(d, 1H), 11,47(s largo, 1H ); HPLC: Rf = 4, 76 min.

MÉTODOS FARMACOLÓGICOS A capacidade dos compostos para interagirem com o receptor H3 de histamina pode ser determinada pelos ensaios de ligação in vitro seguintes. 42 ΡΕ1651615

Ensaio de ligação I

Homogeneizou-se o córtex cerebral de rato em K-Hepes arrefecido em gelo, 5 mM de MgCl2 tampão de pH 7,1. Após duas centrifugações diferenciais o última pelete foi ressuspensa em tampão Hepes recente contendo lmg/mL de bacitracina. Incubaram-se as aliguotas da suspensão de membrana (400 μg/mL) durante 60 min a 25°C com 30 pM de [1251] — iodoproxifan (um antagonista de receptor H3 de histamina conhecido) e o composto ensaio em várias concentrações. A incubação parou por diluição com o meio arrefecido em gelo, seguida de filtração rápida através de filtros Whatman GF/B pré-tratados durante 1 hora com polietilenoimina a 0,5%. Mediu-se a radioactividade retida nos filtros utilizando um contador gama auto Cobra II. A radioactividade dos filtros é inversamente proporcional à afinidade de ligação do composto ensaiado. Os resultados foram analisados por análise de regressão não-linear.

Ensaio de ligação II

Incubou-se o ligando R-a-metil [3H] histamina (RAMHA) de agonista de receptor-H3 com células de membranas de córtex de rato isoladas a 25°C durante 1 hora, seguido de uma filtração do incubado através de filtros Whatman GF/B. Mediu-se a radioactividade retida nos filtros utilizando um contador beta. Foram decapitados ratos Male Wistar (150-200 g) , e o córtex cerebral foi rapidamente retirado por disse- 43 ΡΕ1651615 cação e congelado imediatamente em gelo seco. Guardou-se o tecido a -80°C até à preparação da membrana. Durante a preparação da membrana guardou-se o tecido em gelo durante todo o tempo. Homogeneizou-se o córtex cerebral de rato em 10 volumes (p/p) de tampão K-Hepes arrefecido em gelo, (20 mM de Hepes, 5 mM de MgCl2 de pH 7,1 (KOH) + 1 mg/mL de bacitracina) utilizando um homogeneizador Ultra-Turrax durante 30 segundos. Centrifugou-se o homogeneizado a 140 g em 10 min. Transferiu-se o sobrenadante para um novo tubo de ensaio e centrif ugou-se durante 30 min a 23 000 g. Ressuspendeu-se o pelete em 5-10 mL de tampão Hepes, homogeneizou-se e centrifugou-se durante 10 min a 23 000 g. Este passo de centrifugação curto foi repetido duas vezes. Após a última centrifugação, ressuspendeu-se o pelete no tampão Hepes 5-10 mL, e determinou-se a concentração da proteína. Diluíram-se as membranas para uma concentração de proteína de 5 mg/mL utilizando o tampão Hepes, retiram-se as alíquotas e guardaram-se a -80°C até à utilização.

Misturaram-se num tubo de ensaio 50 μΗ do composto de ensaio, 100 μΗ de membrana (200 μρ/πΛ) , 300 μΗ de tampão Hepes e 50 μΗ de R-a-metil [3H] histamina (1 nM) . Dissolveram-se os compostos a serem ensaiados em DMSO e depois em H2O para as concentrações desejadas. Diluíram-se as membranas e o radioligando em tampão Hepes + 1 mg/mL de bacitracina. Incubou-se a mistura a 25°C durante 60 min. A incubação terminou por adição de 5 mL de NaCl 0,9% arrefecido em gelo, seguida de filtração rápida através de filtros Whatman GF/B pré-tratados durante 1 hora com 44 ΡΕ1651615 polietilenoimina 0,5%. Os filtros foram lavados com 2x5 mL de NaCl arrefecido em gelo. A cada filtro adicionou-se 3 mL de um cocktail de cintilação, e mediu-se a radio-actividade retida nos filtros utilizando um contador beta Packard Tri-Carb.

Os valores de IC5o foram calculados por análise de regressão não-linear de curvas de ligação (mínimo de 6 pontos) utilizando um programa Windows GraphPad Prism, GraphPad software, USA.

Ensaio de ligação III O receptor H3 de ser humano foi clonado por PCR e sub-clonado num vector de expressão pcDNA3. As células que expressam estavelmente o receptor H3 são geradas por transfecção de vectores de expressão H3 em células HEK 293 e que utilizam o G418 para seleccionar para os clones H3. Os clones H3-HEK 293 humanos são cultivados em DMEM (GIBCO-BRL) com glutamax, soro bovino fetal 10%, penicilina/es-treptavidina 1% e 1 mg/mL de G 418 a 37°C e 5% de C02. Antes da colheita, as células confluentes são lavadas com PBS e incubadas com Versene (proteinase, GIBCO-BRL) durante aproximadamente 5 min. Passaram-se as células por um fluxo com PBS e DMEM e recolheu-se a suspensão das células num tubo e centrifugou-se durante 5-10 min a 1500 rpm numa Heraeus Sepatech Megafuge 1,0. Ressuspendeu-se o pelete no tampão Hepes 10-20 vol. [20 mM Hepes, 5 mM MgCl2, pH 7,1 (KOH)] e homogeneizou-se durante 10-20 segundos utilizando 45 ΡΕ1651615 um homogeneizador Ultra-Turrax durante 10-20 segundos. O homogeneizado foi centrifugado durante 30 min a 23 000 g. Ressuspendeu-se o pelete em 5-10 mL de tampão Hepes, homogeneizou-se durante 5-10 segundos utilizando um homogeneizador Ultra-Turrax e centrifugou-se durante 10 min a 23 000 g. A seguir a este passo de centrifugação, ressuspendeu-se o pelete de membrana em 2-4 mL de tampão Hepes, homogeneizou-se com uma seringa ou homogeneizador Teflon, e determinou-se a concentração de proteína. Diluíram-se as membranas para uma concentração de proteína de 1-5 mg/mL em tampão Hepes, retiram-se as alíquotas e guardaram-se a -80°C até à utilização.

Incubaram-se as alíquotas da suspensão de membranas durante 60 min a 25°C com 30 pM de [125I]-iodoproxifan (um composto conhecido com afinidade elevada para o recep-tor H3) e o composto de ensaio em diversas concentrações. Parou-se a incubação por diluição com o meio arrefecido com gelo, seguida de filtração rápida através de filtros Wha-tman GF/B pré-tratados durante 1 hora com polietilenoimina 0,5%. Mediu-se a radioactividade retida nos filtros utilizando um contador gama auto Cobra II. A radioactividade dos filtros é inversamente proporcional à afinidade de ligação do composto de ensaio. Os resultados foram analisados por análise de regressão não-linear. Quando ensaiados, os compostos presentes da fórmula (I) mostram geralmente uma afinidade de ligação elevada para o receptor H3 de histamina. 46 ΡΕ1651615

Preferencialmente, os compostos de acordo com a invenção têm um valor de IC50 como determinado por um ou mais dos ensaios de menos do que 10 μΜ, mais preferencialmente menos do que 1 μΜ, e ainda mais preferencialmente menos do que 500 nM, tal como menos do que 100 nM.

Ensaio Funcional I

Determinou-se a capacidade dos compostos para interagirem com o receptor H3 de histamina como agonistas, agonistas inversos e/ou antagonistas, por um ensaio funcional in vitro utilizando as membranas a partir de células HEK 293 que expressam os receptores H3 do ser humano. O receptor de H3 é clonado por PCR e sub-clonado no vector de expressão pcDNA3. As células que expressam estavelmente o receptor H3 são geradas por transfecção de vectores de expressão H3 em células HEK 293 e que utilizam o G418 para seleccionar para os clones H3. Os clones H3-HEK 293 humanos são cultivados em DMEM com glutamax, soro bovino fetal 10%, penicilina/estreptavidina 1% e 1 mg/mL de G 418 a 3 70C e 5% de C02.

As células que expressam o receptor H3 são lavadas uma vez com a solução tampão de fosfato (PBS) e recolhidas utilizando o Versene (GIBCO-BRL). Adicionou-se o PBS e centrifugaram-se as células durante 5 min a 188 g. Ressuspendeu-se o pelete das células em tampão de 47 ΡΕ1651615 estimulação para uma concentração de 1 x 106 células/mL. Mediu-se a acumulação de cAMP utilizando um ensaio Flash Plate® de cAMP (NEN™ Life Science Products) . 0 ensaio é geralmente realizado tal como descrito pelo fabricante. Resumidamente, adicionaram-se 50 μΡ de suspensão de células a cada poço da placa Flash que também continha 25 μΡ de isoprenalina 40 μΜ, para estimular a geração de cAMP, e 25 μΡ de composto de ensaio (quer agonistas ou agonistas inversos apenas, quer agonistas e antagonistas em combinação) . O ensaio pode ser realizado em "modo-agonista" no qual o composto de ensaio é adicionado, em concentração crescente de si próprio, às células, e é medido o cAMP. Se o cAMP aumenta, o composto em questão é um agonista inverso; se o cAMP não se altera, é um antagonista neutro, e se o cAMP diminui, é um agonista. O ensaio também pode ser realizado em "modo-antagonista" no qual o composto de ensaio é adicionado, em concentrações crescentes, juntamente com concentrações crescentes de um agonista de H3 conhecido (e.g. RAMHA). Se o composto de ensaio é um antagonista, as suas concentrações crescentes causam um desvio à direita nas curvas de resposta da dose de agonistas-H3. O volume final em cada poço é de 100 μΡ. Os compostos de ensaio estão dissolvidos em DMSO e diluídos em H20. A mistura é agitada durante 5 minutos, e deixada repousar durante 25 min à temperatura ambiente. A reacção é terminada com 100 μΕ de "Mistura de Detecção" por poço. As placas são depois seladas com plástico, agitadas durante 30 min, deixadas a repousar de um dia para outro, e finalmente a radioactividade é medida num contador "topcounter" gama Cobra II auto. Os valores de EC50 são calculados por 48 ΡΕ1651615 análise de regressão não-linear de curvas de resposta de dose (mínimo de 6 pontos) utilizando o GraphPad Prism. Os valores de Kb são calculados por análise de diagrama de Schild.

Ensaio Funcional II

Determinou-se a capacidade dos compostos para se ligarem e interagirem com o receptor H3 de histamina como agonistas, agonistas inversos e/ou antagonistas, por um ensaio funcional, designado ensaio [35S] GTPyS. 0 ensaio mede a activação de proteínas G por catálise da troca de gua-nosina 5'-difosfato (GDP) por guanosina 5'-trifosfato (GTP) na α-subunidade. As proteínas G ligadas-GTP dissociam-se em duas subunidades Gcigtp e ΰβγ, que por sua vez regulam as enzimas intracelulares e os canais de iões. A GTP é rapidamente hidrolisada pela Ga-subunidade (GTPases) e a proteína G é desactivada e pronta para um novo ciclo de troca de GTP. Para estudar a função de activação de receptor acoplado à proteína G de ligando-induzido por um aumento na troca de nucleótido guanina nas proteínas G, determinou-se a ligação de [35S]-guanosina-5 '-0-(3-tio) tri-fosfato[35S]GTPyS, um análogo de GTP não- hidrolisado. Este processo pode ser monitorizado in vitro por incubação de membranas celulares que contêm a proteína G acoplada ao receptor H3 com GDP e [35S]GTPyS. As membranas celulares são obtidas a partir de células CHO que expressam estavelmente o receptor H3 humano. As membranas das células foram lavadas duas vezes em PBS, recolhidas com PBS + 1 mM de 49 ΡΕ1651615 EDTA, pH 7,4 e centrifugadas a 1000 rpm durante 5 min. O pelete de células foi homogeneizado em 10 mL de tampão Hepes (20 mL Hepes, 10 mM de EDTA, pH 7,4 (NaOH) ) arrefecido em gelo, utilizando um homogeneizador Ultra-Turrax durante 30 segundos e centrifugado durante 15 min a 20 000 g. A seguir a este passo de centrifugação, suspendeu-se o pelete de membrana em 10 mL de tampão Hepes (20 mL Hepes, 0,1 mM de EDTA, pH 7,4 (NaOH)) arrefecido em gelo, homogeneizado tal como acima descrito. Repetiu-se este procedimento duas vezes excepto o último passo de homogeneização, determinou-se a concentração, e as membranas foram diluídas até uma concentração de proteína de 2 mg/mL, formaram-se as alíquotas e guardaram-se a -80°C até à utilização.

Para investigar a presença e a potência de um agonista inverso/antagonista, adicionou-se o ligando R-a-metil histamina (RAMHA) agonista do receptor H3. Mediu-se a capacidade do composto de ensaio para contrariar o efeito de RAMHA. Quando se estuda o efeito de um agonista, não é adicionado o RAMHA ao meio do ensaio. Diluiu-se o composto de ensaio no tampão de ensaio (20 mM Hepes, 120 mM de NaCl, 10 mM de MgCl2, pH 7,4 (NaOH) em diversas concentrações seguido da adição de 10~8 nM de RAMHA (apenas no caso em que é examinado um agonista inverso/antagonista), 3 μΜ de GDP, 2,5 μg de membranas, 0,5 mg de pérolas de SPA e 0,1 nM de [35S]GTPyS, e incubação durante 2 horas com agitação suave à temperatura ambiente. Centrifugaram-se as placas a 1500 rpm durante 10 min e mediu-se a radioactividade 50 ΡΕ1651615 utilizando um contador "Top-counter" . Os resultados foram analisados por regressão não-linear e determinado o valor de IC50. O RAMHA e os outros agonistas H3 estimulam a ligação de [35S]GTPyS às membranas que expressam o receptor H3. No ensaio agonista inverso/antagonista, mediu-se a capacidade de quantidades crescentes do composto de ensaio para inibir a ligação [35S]GTPyS aumentada por RAMHA 10~8 M como um decréscimo no sinal da radioactividade. O valor IC50 determinado para um antagonista é a capacidade deste composto de inibir de 50% o efeito de RAMHA 10-8 M. No ensaio de agonista, mediu-se a capacidade de quantidades crescentes do composto de ensaio como um aumento no sinal da radioactividade. O valor EC50 determinado para um agonista é a capacidade deste composto de aumentar em 50% o sinal máximo que é obtido por RAMHA 10~8 M.

Preferencialmente, os antagonistas e os agonistas de acordo com a invenção têm um valor de IC50/EC50 (como determinados por um ou mais dos ensaios acima descritos) de menos do que 10 μΜ, mais preferencialmente menos do que 1 μΜ, e ainda mais preferencialmente menos do que 500 nM , tal como menos do que 100 nM.

Modelo de Programa-alimentar de rato em gaiola aberta. A capacidade dos compostos presentes para reduzir o peso é determinada utilizando in vivo o modelo de Programa-alimentar de rato em gaiola aberta. 51 ΡΕ1651615

Compraram-se ao Mellegrad Breeding and Research Center A/S (Dinamarca) ratos machos Sprague-Dawley (SD) com a idade de 1 1/2 até 2 meses e um peso de cerca de 200-250 g. À sua chegada foi-lhes concedido alguns dias de adaptação antes de serem colocados em gaiolas de plástico individuais. Eles habituaram-se à presença de comida (comida para rato granulada Altromin) nas suas gaiolas caseiras durante apenas 7 horas por dia (desde 07,30 até às 14,30, sete dias por semana). A água está disponível ad libtium. Uma vez estabelecido o consumo do alimento após 7 a 9 dias, o animal está pronto a ser utilizado. Cada animal é utilizado apenas uma vez para evitar uma sobrecarga de efeitos entre os tratamentos. Durante as sessões de ensaio, o composto de ensaio é administrado por via intraperitoneal ou oralmente antes do início das sessões. Administrou-se o composto de ensaio a um grupo de animais em doses diferentes, e um grupo de controlo de animais recebeu o veículo. A tomada de alimento e de água foi monitorizada a 1, 2 e 3 horas após a administração.

Quaisquer efeitos colaterais (manifestados como barriga ondulante, pêlo espesso etc.) podem ser rapidamente detectados, dado que os animais estão em gaiolas de plástico transparente para permitir a monitorização permanente.

Lisboa, 22 de Abril de 2010

Claims

ΡΕ1651615 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de acordo com a fórmula I

i 9

[ij em que R1 é seleccionado independentemente a partir de fluoro, bromo, iodo, hidroxi, trifluorometoxi, C2-6-alcoxi, Ci-6-alqilo, amino, C2^6_alquilsulf anilo, C2-6~alquilsulf ini-lo, C2-6-alquilsulf onilo Ci-6-alquilamino, di-Ci-6-alquil- amino, ciano, nitro, arilo, heteroarilo, e C3_8-cicloal-quilo; e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 representa bromo ou ciano.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, seleccionado de entre: 4-[6-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-piridazin-3-il]benzo-nitrilo; 3-(4-Bromofenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina; 3-(4-Etanossulfonilfenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il) piridazina; 3- (4-Etanossulfinilfenil)-6-(4-isopropilpiperazin-l-il) piridazina; 2 ΡΕ1651615 3-[4-(Butano-l-sulfonil)fenil]-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina; 3-[4-(Butano-l-sulfinil)fenil]-6-(4-isopropilpiperazin-l-il)piridazina; 3-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-6-[4-(propano-l-sulfonil)-fenil]piridazina; 3-(4-Isopropilpiperazin-l-il)-6-[4-(propano-l-sulfinil)-fenil]piridazina
4. Combinação de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 e uma ou mais substâncias activas adicionais.
5. Composição farmacêutica que compreende, como uma substância activa, pelo menos um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 3 ou uma combinação de acordo com a reivindicação 4 conjuntamente com um ou mais veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.
6. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 5 em forma de dosagem unitária, que compreende desde cerca de 0,05 mg até cerca de 1000 mg, preferencialmente desde cerca 0,1 mg até cerca de 500 mg, mais preferencialmente desde cerca de 0,5 mg até cerca de 200 mg, de um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2.
7. Composto de acordo com a reivindicação 1 a 3, ou uma combinação de acordo com a reivindicação 4, ou uma composição de acordo com a reivindicação 5 ou 6. 3 ΡΕ1651615
8. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou de uma combinação de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de patologias e doenças relacionadas com o receptor H3 de histamina.
9. Utilização de acordo com a reivindicação 8 para a preparação de uma composição farmacêutica para a redução de peso.
10. Utilização de acordo com a reivindicação 8 para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de excesso de peso ou obesidade.
11. Utilização de acordo com a reivindicação 8 para a preparação de uma composição farmacêutica para a supressão de apetite ou indução de saciedade.
12. Utilização de acordo com a reivindicação 8 para a preparação de uma composição farmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de patologias e/ou doenças relacionadas com excesso de peso ou obesidade, para a prevenção e/ou tratamento de patologias da alimentação, tais como a bulimia ou vontade de comer, para o tratamento de IGT, para o tratamento de diabetes do tipo 2, para retardar ou prevenir a progressão da IGT para a diabetes do tipo 2, para retardar ou prevenir a progressão da diabetes de tipo 2 que não requerem a insulina, para a diabetes de 4 ΡΕ1651615 tipo 2 que requerem a insulina, para o tratamento da rinite alérgica, úlcera ou anorexia, ou para o tratamento da doença de Alzheimer, narcolepsia ou doenças de défice de atenção.
13. Composto, combinação ou composição de acordo com a reivindicação 7 para utilização num tratamento como definido em qualquer uma das reivindicações 8 a 12. Lisboa, 22 de Abril de 2010