PT1583524E - Compostos bis ( tio-hidrazida amida ) para o tratamento do cancro resistente a múltiplos fármacos - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "COMPOSTOS BIS(TIO-HIDRAZIDA AMIDA) PARA O TRATAMENTO DO CANCRO RESISTENTE A MÚLTIPLOS FÁRMACOS"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Presentemente, existem muitos fármacos para se utilizarem no tratamento do cancro. Contudo, em muitos casos o cancro ou falha na resposta à terapia anticancerosa ou retarda-se apenas o seu desenvolvimento e a sua propagação. Dessa forma, continuam a ser necessários novos compostos anticancerosos.

Mesmo quando, inicialmente, um tumor responde a uma terapêutica anticancerosa mediante redução do tamanho ou mesmo entrando em remissão, o tumor desenvolve frequentemente resistência ao fármaco. Os tumores resistentes aos fármacos caracterizam-se pela reassunção do seu desenvolvimento e/ou reexpressão após conveniente ocorrência de eliminação rumo à remissão, não obstante a administração de doses crescentes de um fármaco anticanceroso.

Por essa razão, os oncologistas administram ao doente, geralmente, associações de fármacos anticancerosos. É menos provável que os tumores cancerosos desenvolvam resistência quando confrontados com uma profusão de diferentes fármacos, exibindo cada um deles um modo de acção diferente. Infelizmente, porém, muitos tumores desenvolvem resistência, mesmo quando tratados simultaneamente com uma série de diferentes fármacos anticancerosos. Os cancros que atingem esse fase designam-se por "cancros resistentes a múltiplos fármacos" ("multi-drug resistent cancers"), ou simplesmente 2 "cancros MDR". Pouco se pode fazer para interromper ou retardar a desmedida progressão da doença, logo que o cancro de um doente se torna resistente a múltiplos fármacos. Dessa forma, existe uma necessidade premente de novos fármacos que se possam utilizar no tratamento de cancros resistentes a múltiplos fármacos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Presentemente, tem-se observado que determinados compostos bis[tio-hidrazida amida] são significativamente citotóxicos para as células cancerosas, incluindo as células cancerosas que se tornaram resistentes a múltiplos fármacos. Por exemplo, o Composto 1 apresentou uma CI5o de 0,005, 0,05 e 0,01 μΜ contra as linhas de células resistentes a múltiplos fármacos MES-SA/DX5, HL-60/TX1000 e Bowes/0V2, respectivamente (ver Exemplo 15}. Para as mesmas linhas de células, as CI50 dos fármacos anticancerosos taxol e vincristina foram, quanto à ordem de grandeza, duas ou três vezes maiores (ver Exemplo 15). Seguidamente, apresenta-se a estrutura do Composto (1):

Composto (1)

Além disso, as CI50 dos Compostos bis[tio-hidrazida amida] (2) a (18) variam entre 0,05 e 0,005 μΜ contra MES--SA/DX5 (ver Exemplo 16). Na Figura 1, apresentam-se as estruturas dos Compostos (2) a (18). Além do mais, a dimensão dos tumores MES-SA/DX5 resistentes a múltiplos fármacos em camundongos nus tratados com o Composto bis[tio-hidrazida 3 amida] (16) foi significativamente reduzida em comparação com a de tumores em camundongos tratados apenas com o veiculo (ver Exemplo 17). Seguidamente apresenta-se a estrutura do Composto (16): 3

Tem-se observado também que os compostos referidos reforçam a actividade anticancerosa de outros compostos anticancerosos, como o Epotilone D (Exemplo 18). Com base nesses resultados, referem-se na presente invenção, medicamentos para o tratamento de um indivíduo com um cancro, incluindo cancros que se tornaram resistentes a múltiplos fármacos.

Uma forma de realização preferida da presente invenção consiste em um medicamento para o tratamento de um indivíduo com um cancro resistente a múltiplos fármacos. Esse medicamento consiste em uma quantidade eficaz de um composto representado pela Fórmula Estrutural (I):

0 símbolo Y representa uma ligação covalente ou um grupo hidrocarbilo de cadeia linear substituída ou insubstituída, ou Y, considerado conjuntamente com ambos os grupos >C=Z aos quais se encontra ligado, representa um grupo aromático 4 substituído ou insubstituído. Preferivelmente, Y representa uma ligação covalente ou um grupo de fórmula geral -C(R7R8) ~·

Os símbolos Rx a R4 representam, independentemente, -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído, ou Rx e R3, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais se encontram ligados, e/ou R2 e R4, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais se encontram ligados, formam um anel heterocíclico não aromático eventualmente fundido com um anel aromático. Preferivelmente, Rx e R2 são iguais e R3 e R4 são iguais.

Os símbolos R5 e Re representam, independentemente, -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído. Preferivelmente, R5 e Rg são iguais.

Os símbolos R7 e Rg representam, cada um, independentemente, -H, um grupo alifático ou alifático substituído, ou R7 representa -H e Rg representa um grupo arilo substituído ou insubstituído, ou, R7 e Rg, considerados conjuntamente, representam um grupo alquileno C2~C6 substituído ou insubstituído. 0 símbolo Z representa =0 ou =S.

Uma outra forma de realização preferida da presente invenção consiste em um medicamento para o tratamento de um indivíduo com cancro. Esse medicamento consiste em uma quantidade eficaz de um composto representado pela Fórmula Estrutural (I) . 0 composto representado pela Fórmula

Estrutural (I) administra-se sob a forma de monoterapia (isto 5 é, como o único fármaco anticanceroso administrado a esse indivíduo). Eventualmente, co-administra-se ao indivíduo um segundo composto anticanceroso, com a condição desse segundo composto anticanceroso não ser nem o taxol nem um seu análogo. Quando o ser a tratar é um camundongo, então o composto não é nenhum dos seguintes: 5

;ou

Consequentemente, esse medicamento utiliza-se normalmente em seres vivos desde que não sejam camundongos. Preferivelmente o ser vivo é o homem.

Geralmente, o medicamento referido pode utilizar-se no tratamento de cancros, incluindo cancros que se tornaram resistentes a múltiplos fármacos. Geralmente, o medicamento descrito pode, portanto, utilizar-se no tratamento de cancros em que outros modos de tratamento medicamentoso ou falharam ou se tornaram ineficazes. Uma vez que os compostos utilizados são relativamente não tóxicos, induzem efeitos secundários mínimos e podem utilizar-se em doses relativamente elevadas.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

As Figuras IA a 1D apresentam uma lista de estruturas dos Compostos (2) a (18) que se exemplificam no medicamento referido. A Figura 2 representa um gráfico que mostra o tamanho médio do tumor em camundongos nus (CD-I nu/nu) ao longo do tempo após terem sido tratados com o veiculo (·) ou o Composto (16) (♦) . 0 volume do tumor apresenta-se em imtiJ e o tempo apresenta-se em dias após o inicio do tratamento. Os tumores provêm do sarcoma uterino humano MES-SA/DX5 resistente a múltiplos fármacos. A Figura 3 representa um gráfico que mostra o volume médio do tumor em mililitros ao longo do tempo (em dias) em camundongos nus (CD-I nu/nu) tratados com o veiculo (·) ; o Epotilone D (5 mg/Kg) (♦) ; e o Composto (1) (50 mg/Kg) e o Epotilone (5 mg/Kg) (O) . Os tumores geraram-se a partir da linha de células do tumor da mama humano MDA-435. A Figura 4 representa um gráfico que mostra a alteração média do peso, em percentagem, dos camundongos nus (CD-I nu/nu) ao longo do tempo após terem sido tratados com o veículo (·) ; o Epotilone D (5 mg/Kg) (♦) ; e o Composto 1 (50 mg/Kg) e o Epotilone D (5 mg/Kg) (O). Os camundongos trataram-se dos tumores gerados a partir da linha de células do tumor da mama humano MDA-435.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Em uma primeira forma de realização preferida, o símbolo Y na Fórmula Estrutural (I), considerado conjuntamente com 7 ambos os grupos de fórmula geral >C=Z aos quais se encontra ligado, representa um grupo arileno substituído ou insubstituído e o composto é representado pela Fórmula Estrutural (II):

(Π)

Na Fórmula Estrutural (II) Ri a R6 têm os significados descritos antes na Fórmula Estrutural (I). 0 símbolo Ar representa um grupo arileno substituído ou insubstituído. Preferivelmente, Ar representa um grupo heteroarileno que comporta um átomo de azoto. Seguidamente apresentam-se exemplos:

0 Anel A é substituído ou insubstituído.

Em uma segunda forma de realização preferida, Y representa, na Fórmula Estrutural (I), uma ligação covalente, um grupo hidrocarbilo de cadeia linear substituída ou insubstituída ou um grupo fenileno. Preferivelmente, Y representa uma ligação covalente, -C(R7R8)-, -(CH2CH2)-, trans-(CH=CH)-, cis~(CH=CH)-, -(CC)- ou um grupo 1,4-fenile-no. Os símbolos R7 e R8 têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I). Todavia, mais preferivelmente Y representa uma ligação covalente ou -C(R7R8)-. 8

Em uma forma de realização de maior preferência, Y representa, na Fórmula Estrutural (I), uma ligação covalente ou —C (R7Rg) — e o composto utilizado no medicamento da presente invenção é representado pela Fórmula Estrutural (III):

Os simbolos Ri a R6 têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I). 0 símbolo Y' representa uma ligação covalente ou -C (R7R8) e R7 e Re, iguais ou diferentes, representam: i) cada um, independentemente, -H, um grupo alifático ou alifático substituído (preferivelmente alquilo, mais preferivelmente metilo); ii) R7 representa -H e Rg representa um grupo alifático substituído ou insubstituído (preferivelmente alquilo, mais preferivelmente metilo) ou um grupo arilo substituído ou insubstituído (preferivelmente tienilo, tienilo substituído, fenilo, fenilo substituído, benzilo ou benzilo substituído) ; ou iii) R7 e Re, considerados conjuntamente, representam um grupo alquileno C2-C6 substituído ou insubstituído (preferivelmente propileno ou butileno).

Em uma forma de realização ainda mais preferida, o composto utilizado no medicamento da presente invenção é representado pela Fórmula Estrutural (IV): 9

Em um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Y' representa uma ligação covalente ou -C(R7R8)- e Ri a R4 e R7 a R8 têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I).

Em um primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Ri e R2 representam, cada um, um grupo arilo substituído ou insubstituído; R3 e R4 representam, cada um, um grupo alifático substituído ou insubstituído; R7 representa -H; e R8 representa -H, um grupo alifático ou um grupo alifático substituído. Preferivelmente, no composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Ri e R2 representam, cada um, um grupo arilo substituído ou insubstituído; R3 e R4 representam, cada um, um grupo alquilo; e R7 representa -H e Rg representa -H ou um grupo metilo. Ainda mais preferivelmente, em um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Ri e R2 representam, cada um, um grupo fenilo substituído ou insubstituído; R3 e R4 representam, cada um, um grupo metilo ou etilo; e R7 representa -H e R8 representa -H ou um grupo metilo. Substituintes apropriados para um grupo arilo representado pelos símbolos Ri e R2 e um grupo alifático representado por R3, R4 e Rg são os descritos seguidamente para os grupos arilicos e alifáticos. 10

Em um segundo exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo ou fenilo substituído, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, etilo, fenilo, ou tienilo, e R7 e R8 têm os significados descritos no primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV) . Quando Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo ou fenilo substituído e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, etilo, fenilo, ou tienilo, então preferivelmente R7 e Rg, considerados conjuntamente, representam um grupo propileno ou butileno.

Em um terceiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Rx e R2 representam ambos um grupo alifático ou alifático substituído (preferivelmente um grupo alquilo substituído ou insubstituído, incluindo um grupo cicoalquilo substituído ou insubstituído, como um grupo ciclopropilo substituído ou insubstituído); R3 e R4 representam ambos um grupo arilo ou um grupo arilo substituído, e R7 e R8 têm os significados descritos no primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV).

Em um outro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Rx e R2 representam ambos grupos alifáticos substituídos ou insubstituídos, R3 e R4 representam ambos um grupo alquilo inferior ou um grupo alquilo inferior substituído, e R7 e Rs têm os significados descritos no primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV); preferivelmente, Rx e R2 representam ambos grupos alquilo substituídos ou insubstituídos (mais preferivelmente grupos cicloalquilo substituídos ou insubstituídos), R3 e R4 representam ambos 11 -H, ou um grupo metilo ou etilo, R7 representa -H e R8 representa -H ou um grupo metilo.

Ainda em um outro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Ri e R2 representam ambos um grupo cicloalquilo C3-Cg ou cicloalquilo C3-C8 substituído e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, etilo, fenilo, ou tienilo, e Ri e Rg têm os significados descritos no primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV) (preferivelmente, R7 e R8 representam: 1) ambos um grupo metilo; 2) considerados conjuntamente, um grupo propileno ou butileno; ou 3) R7 representa -H e Rg representa um grupo alquilo inferior, tienilo, fenilo ou benzilo).

Ainda em um outro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV), Ri e R2 representam ambos um grupo alquilo inferior ou um grupo alquilo inferior substituído, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, etilo, ou fenilo, e R7 e Rg têm os significados descritos no primeiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (IV).

Os exemplos seguintes são específicos de compostos representados pela Formula Estrutural (IV): R3 e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo etilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, e R7 e Rs representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2--tienilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, e R7 e R8 representam ambos um grupo metilo; R4 e R2 representam ambos um grupo 4-cianofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rg representa um grupo metilo; Ri 12 e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Re representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e P.8 representa um grupo benzilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo etilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo n--butilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifeni-lo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Re representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Re representa um grupo isopropilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3-nitrofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 4-clorofeni-lo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rg representa um grupo 3-tienilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 considerados conjuntamente representam um grupo propileno; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,3-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rs representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-cloro-5-metoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,5-difluorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,5-diclorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e R8 13 representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,β-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rs representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetilfenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rg representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 representa -H, e Rs representa um grupo metilo, e Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dietoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa -H, e Rg representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; Rs representa ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopro-pilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Y' representa uma ligação; Ri e R2 representam ambos um grupo 1--metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo e Rg representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilci-ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo etilo e Rs representa -H; Rx e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo n--propilo e Re representa -H; Rj e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 14 representam ambos um grupo etilo; R? e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilcíclopropilo; R3 representa um grupo metilo, e R4 representa um grupo etilo; R7 e Rs representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-fenilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-fenilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclobutilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopentilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclo-hexilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclo-hexilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 representam ambos um grupo t-butilo; R7 e R8 representam ambos -H; Rj e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo t-butilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo etilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo n-propilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H. Nesses exemplos o símbolo Y representa preferivelmente um grupo de fórmula geral -C(R7R8)-. 15

Em uma outra forma de realização preferida, o composto utilizado no medicamento da presente invenção é representado pela Fórmula Estrutural (V):

Na Fórmula Estrutural (V) os símbolos Ri a R4 têm o significado descrito na Fórmula Estrutural (1) . Y' ' representa uma ligação covalente ou um grupo -CH2-.

Em um primeiro exemplo um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , R3 e R4 representam ambos um grupo alifático substituído ou insubstituído, preferivelmente representam ambos um grupo alquilo substituído ou insubstituído e mais preferivelmente, representam ambos um grupo metilo ou etilo. Quando R3 e R4 representam ambos, na Fórmula Estrutural (V) , um grupo alifático substituído ou insubstituído, então: 1) Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo alifático substituído ou insubstituído (por exemplo, um grupo alquilo substituído ou insubstituído e, preferivelmente, um grupo cicloalquilo C3-C8 substituído ou insubstituído como um grupo ciclopropilo substituído ou insubstituído); ou 2) Rx e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo arilo substituído ou insubstituído (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído ou um grupo fenilo substituído ou insubstituído); ou 3) Ri representa preferivelmente um grupo alifático substituído ou insubstituído (preferivelmente, um grupo cicloalquilo substituído ou insubstituído como um grupo ciclopropilo substituído ou insubstituído); e R2 representa preferivelmente um grupo arilo substituído ou insubstituído 16 (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído ou um grupo fenilo substituído ou insubstituído.

Em um segundo exemplo um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , R3 e R4 representam ambos um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído. Quando R3 e R4 na Fórmula Estrutural (V) representam ambos um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído, então: 1) Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo fenilo substituído ou insubstituído; 2) Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído; 3) Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo alifático substituído ou insubstituído (preferivelmente, um grupo alquilo substituído ou insubstituído e mais preferivelmente um grupo cicloalquilo substituído ou insubstituído como um grupo ciclopropilo substituído ou insubstituído); ou 4) Rx representa preferivelmente um grupo alifático substituído ou insubstituído (preferivelmente, um grupo cicloalquilo C3-C8 substituído ou insubstituído); e R2 representa preferivelmente um grupo arilo substituído ou insubstituído (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído ou um grupo fenilo substituído ou insubstituído).

Em um terceiro exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo substituído ou insubstituído. Quando R3 e R4, na Fórmula Estrutural (V) , representam ambos um grupo fenilo substituído ou insubstituído, então: 1) Rx e R2 representam ambos preferivelmente um grupo fenilo substituído ou insubstituído; 2) Ri e R2 representam ambos preferivelmente um grupo heteroarilo substituído ou insubstituído; 3) Rx e R2 17 representam ambos um grupo alifático substituído ou insubstituido (preferivelmente um grupo alquilo substituído ou insubstituido e mais preferivelmente um grupo cíclico alifático C3-C8 substituído ou insubstituido como um grupo ciclopropilo substituído ou insubstituido); ou 4) Ri representa um grupo alifático substituído ou insubstituido (preferivelmente um grupo cicloalquilo substituído ou insubstituido como um grupo ciclopropilo); e R2 representa um grupo arilo substituído ou insubstituido (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituido ou um grupo fenilo substituído ou insubstituido).

Em um quarto exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , Ri e R2 representam ambos um grupo arilo substituído ou insubstituido (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituido ou um grupo fenilo substituído ou insubstituido). Mais preferivelmente, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo.

Em um quinto exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , Ri e R2 representam ambos um grupo alifático substituído ou insubstituido, preferivelmente representam ambos um grupo alquilo substituído ou insubstituido, incluindo um grupo cicloalquilo C3-C8 comportando eventualmente como substituinte pelo menos um grupo alquilo (por exemplo, metilo, etilo, n-propilo, n-buti-lo, n-pentilo, ciclopropilo, 1-metilciclopropilo, 2-metilci-clopropílo, ciclobutilo, ciclopentilo, ou ciclo-hexilo). Quando Ri e R2, na Fórmula Estrutural (V) , representam ambos um grupo alifático ou um grupo alifático substituído, então R3 e R4 representam ambos preferivelmente: 1) um grupo arilo substituído ou insubstituido (por exemplo, um grupo heteroarilo substituído ou insubstituido ou um grupo fenilo 18 substituído ou insubstituído); ou 2) um grupo alifático substituído ou insubstituído (preferivelmente um grupo alquilo substituído ou insubstituído).

Em um sexto exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V) , Ri e R2 representam ambos um grupo cicloalquilo substituído ou insubstituído, preferivelmente representam ambos um grupo ciclopropil-alquilo substituído ou insubstituído e R3 e R4 têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I).

Em um sétimo exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V), Ri representa um grupo alifático substituído ou insubstituído e 1¾ representa um grupo arilo substituído ou insubstituído e R3 e R4 têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I).

Os exemplos seguintes são específicos dos compostos representados pela Fórmula Estrutural (V) : Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo o-CH3-fenilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 0-CH3C (0) 0-fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo n-propilo; R% e R2 representam ambos um grupo p-cianofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo p-nitrofeni-lo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo n- 19 -butilo; Ri e R2 representam ambos um grupo p-clorofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3-nitrofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3-cianofenilo, e R3 e R,; representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3-fluorofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-furanilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-metoxifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3-metoxifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,3-dimeto-xifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-metoxi-5-clorofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,5-dif luorofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,5-dicloro-fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetilfenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-metoxi-5-clorofenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 3,6-dime-toxifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo 2-etilfenilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-metil-5-piridilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; ou Rx representa um grupo fenilo; R2 representa 2,5-dimetoxifenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo metilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo p-CF3-fenilo; Rx e R2 representam ambos um grupo metilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo o-CH3-fenilo; Rx e R2 representam ambos um grupo -(CH2)3COOH; 20 e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; a seguinte fórmula estrutural representa ambos os símbolos Ri e R2:

O e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo n-butilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo n--pentilo, R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo 2-piridilo; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclo-hexilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo 2-etilfenilo; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo e R3 e R4 representam ambos um grupo 2,6-diclo-rofenilo; Ri a R4 representam todos grupos metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo e R3 e R4 representam ambos um grupo t-butilo; Rx e R2 representam ambos um grupo etilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo t-butilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 2-metilciclopropilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 1-fenilciclopropi-lo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 2-fenilciclopropilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos 21 um grupo ciclobutilo e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopentilo e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Rx representa um grupo ciclopropilo, R2 representa um grupo fenilo, e R3 e R4 representam ambos um grupo metilo. Nesses exemplos, Y'' representa preferivelmente um grupo -CH2~.

Em uma outra forma de realização preferida, Y o composto utilizado no medicamento da presente invenção é representado pela Fórmula Estrutural (VI):

Os símbolos Ri a R6 na Fórmula Estrutural (VI) têm os significados descritos na Fórmula Estrutural (I) . 0 símbolo Y'' representa uma ligação covalente ou -CH2-.

Em um exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (VI), R5 e R6 representam ambos um grupo alquilo (preferivelmente metilo) ou um grupo fenilo. Quando R5 e R6 representam ambos um grupo alquilo ou um grupo fenilo, então Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo fenilo ou fenilo substituído e R3 e R4 representam ambos preferivelmente um grupo alquilo.

Em um segundo exemplo de um composto representado pela Fórmula Estrutural (V), R5 e Rg representam ambos um grupo alquilo (preferivelmente metilo) ou um grupo fenilo. Quando R5 e R6 representam ambos um grupo alquilo ou um grupo fenilo, então Ri e R2 representam ambos, preferivelmente, um grupo alquilo ou alquilo substituído e R3 e R4 representam 22 ambos preferivelmente um grupo fenilo ou fenilo substituído. Alternativamente, quando R5 e R6 representam ambos um grupo alquilo ou um grupo fenilo, Ri e R2 representam ambos um grupo alquilo ou um grupo alquilo substituído e R3 e R4 representam ambos um grupo alquilo ou alquilo substituído.

Os exemplos seguintes são os mais específicos dos compostos da presente invenção: Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, R5 e R6 representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, R5 e R6 representam ambos um grupo n-hexilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e Rg representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e R6 representam ambos um grupo metilo, e R7 representa -H e R8 representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos -H, R5 e R6 representam ambos um grupo fenilo, R7 representa -H e R8 representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 4-clorofenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e R6 representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, R5 e Rg representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo, Rs e R6 representam ambos um grupo n-hexilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e R6 representam ambos um grupo metilo, e R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um 23 grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e Re representam ambos um grupo metilo, e R7 representa -H e Re representa um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo, R3 e R4 representam ambos -H, R5 e Rg representam ambos um grupo fenilo, R7 representa -H e Re representa um grupo metilo; Rx e R2 representam ambos um grupo 4-clorofenilo, R3 e R4 representam ambos um grupo metilo, R5 e R6 representam ambos um grupo metilo, e R7 e Rs representam ambos -H.

Nas Fórmulas Estruturais (I) a (VI), Ri e R2 são iguais ou diferentes; e/ou R3 e R4 são iguais ou diferentes; e/ou R5 e R6 são iguais ou diferentes. Preferivelmente, Ri e R2 são iguais, R3 e R4 são iguais e R5 e R6 são iguais.

Um "grupo hidrocarbilo de cadeia linear" representa um grupo alquileno, isto é -(CH2)X-, com um ou mais (preferivelmente um) grupo(s) metileno interno(s) eventualmente substituído (s) por um grupo de ligação, o símbolo x representa um número inteiro positivo (por exemplo, entre 1 e 10) , preferivelmente entre 1 e 6 e mais preferivelmente 1 ou 2. Um "grupo de ligação" refere-se a um grupo funcional gue substitui um grupo metileno em um grupo hidrocarbilo de cadeia linear. Exemplos de grupos de ligação apropriados incluem um(a) cetona (-C(O)-), alceno, alcino, fenileno, éter (-0-), tio-éter (-S-), ou amina [-N(Ra)]~, em que Ra é definido seguidamente. Um grupo de ligação preferido é um grupo de fórmula geral -C(R7R8)-, em que R7 e R8 têm os significados definidos antes. Substituintes apropriados para um grupo alquileno e um grupo hidrocarbarilo são aqueles que realmente não interferem com a actividade anti-cancerosa dos compostos referidos. Os símbolos R7R8 são substituintes 24 preferidos para um grupo alquileno ou hidrocarbiio representado pelos símbolos Y ou Y'.

Um grupo alifático é um hidrocarboneto não aromático de cadeia linear, ramificado ou cíclico que se apresenta completamente saturado ou que contem uma ou mais unidades de insaturação. Peculiarmente, um grupo alifático de cadeia linear ou ramificada tem entre 1 e 20 átomos de carbono, preferivelmente entre 1 e 10, e um grupo alifático cíclico tem entre 3 e 10 átomos de carbono, preferivelmente entre 3 e 8. Um grupo alifático é preferivelmente um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada, por exemplo, um grupo metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, sec-butilo, ter-bu-tilo, pentilo, hexilo, pentilo ou octilo, ou um grupo cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono. Um grupo alquilo C1-C20 de cadeia linear ou ramificada ou um grupo alquilo C3--Cs cíclico designa-se também por grupo "alquilo inferior".

Grupos aromáticos incluem grupos aromáticos carbocíclicos como fenilo, naftilo, e antracilo, e grupos heteroarilo como imidazolilo, tienilo, furanilo, piridilo, pirimidilo, piranilo, pirazolilo, pirrolilo, pirazinilo, tiazolo, oxazolilo, e tetrazolo.

Grupos aromáticos incluem também sistemas de anéis aromáticos policíclicos fundidos em que um anel aromático carbocíclico ou um anel heteroarílico se funde com um ou mais outro(s) anel(éis) heteroarílico(s). Exemplos incluem benzotienilo, benzofuranilo, indolilo, quinolinilo, benzotiazolo, benzo-oxazolo, benzimidazolo, quinolinilo, isoquinolinilo e isoindolilo. 25 0 termo "arileno" refere-se a um grupo arilo que se liga ao resto das moléculas através de duas outras ligações. A título de exemplo, apresenta-se seguidamente a estrutura de um grupo 1,4-fenileno: 'VWV'

ΛΑΛΑΛ»

Os substituintes para um grupo arileno são iguais aos descritos seguidamente para um grupo arilo.

Anéis heterocíclicos não-aromáticos são anéis carbocíclicos não aromáticos que incluem no anel um ou mais heteroátomo(s) como azoto, oxigénio ou enxofre. 0 anel pode comportar cinco, seis, sete ou oito membros. Exemplos incluem tetra-hidrofuranilo, tetra-hidrotiofenilo, morfolino, tiomorfolino, pirrolidinilo, piperazinilo, piperidinilo, e tiazolidinilo.

Substituintes apropriados de um grupo alifático (incluindo um grupo alquileno), um grupo heterocíclico não aromático, um grupo benzilico ou arilo (carbociclico e heteroarílico) são aqueles que realmente não interferem com a actividade anti-cancerosa dos compostos referidos. Um substituinte interfere realmente com a actividade anti-cance-rosa quando reduz essa actividade em mais de aproximadamente 50% comparando um composto com esse substituinte com um outro sem o mesmo substituinte. Exemplos de substituintes apropriados incluem -OH, átomos de halogéneo (-Br, -Cl, -I e -F) , -ORa, -O-COR3, -CORa, -CN, -N02, -COOH, -S03H, -NH2, 26 -NHRa, -N (RaRb) , -C00R3, -CHO, -CONH2, -CONHR3, -COM (RaRb) , -NHCOR3, -NRCORa, -NHCONH2, -NHCONRaH, -NHCON (RaRb) , -NRcCONH2, ~NRcCONRaH, -NRcCON (RaRb) , -C (=NH) -NH2, -C (=NH) -NHR% -C (=NH) -N(RaRb) , -C (=NRC)-NH2, -C (=NRc) -NHRa, -C (=NRC) -N (RaRb) , -NH-C (=NH) -NH2, -NH-C (=NRC) -NH2, -NRdH-C (=NH) -NH2, -NRd-C (=NRC) -NH2, -NH-C (=NH) -NHRa, -NH-C (=NRC) -NHRa, -NRd-C (=NH) -NHRa, -NRd-C (=NRC) -NHRa, -NH-C (=NH) -N (RaRb) , -NH-C (=NRC) -N (RaRb) , -NRd-C (=NH) -N (RaRb) , -NRd-C (=NRC) -N (RaRb) , -NHNH2, -NHNHR3 NHRaRb, -S02NH2, -S02NHRa, -S02NRaRb, -CH=CHRa, -CH=CRaRb, -CRc=CRaRb, -CRc=Ra, -CRc=CRaRb, -CCRa, -SH, -SOKRa (k representa zero ou o número inteiro 1 ou 2) e -NH-C(=NH)-NH2. Ra a Rd representam, cada um, independentemente, um grupo alifático, alifático substituído, benzilo, benzilo substituído, arilo ou arilo substituído, preferivelmente um grupo alquilo, benzílico ou arilo. Além disso, -N(RaRb), considerados conjuntamente, podem formar também um grupo heterocíclico não aromático substituído ou insubstituído. Um grupo heterocíclico não aromático, um grupo benzílico ou um grupo arilo podem possuir também como substituinte um grupo alifático ou alifático substituído. Um grupo alifático substituído pode possuir também como substituinte um anel heterocíclico não aromático, um anel heterocíclico não aromático substituído, um grupo benzilo, benzilo substituído, arilo ou arilo substituído. Um grupo heterocíclico não aromático, alifático substituído, um grupo arilo substituído, ou um grupo benzilo substituído pode possuir mais do que um substituinte. Exemplos de substituintes preferidos para os grupos representados pelos símbolos Ra a Rd e -N(RaRb), considerados conjuntamente, incluem amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, halogéneo, alquilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquilaminocar- 27 boniloxi, dialquilaminocarboniloxi, alcoxi, nitro, ciano, carboxilo, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, hidroxi, halogenoalcoxi, ou halogenoalquilo.

Substituintes preferidos para um grupo cicloalquilo, incluindo grupos cicloalquilo representados pelos símbolos Ri e R2, são grupos alquilo, como um grupo metilo ou etilo. Também incluídos na presente invenção encontram-se os sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico dos compostos descritos na presente memória descritiva. Os compostos referidos na presente memória descritiva que possuem grupos suficientemente ácidos, suficientemente alcalinos, ou ambos os grupos funcionais, e consequentemente podem reagir com um (a) qualquer de uma série de bases orgânicas ou inorgânicas, e de ácidos inorgânicos e orgânicos, para formarem um sal. Ácidos comummente utilizados para formarem sais de adição de ácidos a partir de compostos com grupos alcalinos são ácidos inorgânicos como o ácido clorídrico, o ácido bromídrico, o ácido iodídrico, o ácido sulfúrico, o ácido fosfórico, e similares, e ácidos orgânicos como o ácido p-toluenossulfónico, o ácido metanossulfónico, o ácido oxálico, o ácido p-bromofenil-sulfónico, o ácido carbónico, o ácido succínico, o ácido cítrico, o ácido benzóico, o ácido acético, e similares. Exemplos desses sais incluem sulfato, pirossulfato, bissulfato, sulfito, bissulfito, fosfato, mono--hidrogenofosfato, di-hidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato, cloreto, brometo, iodeto, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formato, isobutirato, caproato, heptanoato, propionato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, maleato, butin-1,4--dioato, hexino-1,6-dioato, benzoato, clorobenzoato, metil- 28 benzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilenossulfonato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato, gama-hidro-xibutirato, glicolato, tartarato, metanossulfonato, propanossulfonato, naftaleno-l-sulfonato, naftalialeno-2-sul-fonato, mandelato, e similares.

Sais de adição de bases incluem derivados de bases inorgânicas, como hidróxidos de amónio ou de metais alcalinos ou alcalino-terrosos, carbonatos, bicarbonatos, e similares. Essas bases úteis na preparação de sais de acordo com a presente invenção incluem portanto hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de amónio, carbonato de potássio, e similares.

Um "indivíduo" é um mamífero, preferivelmente o homem, mas pode ser também um animal que necessita de tratamento veterinário, por exemplo, animais de companhia (por exemplo, cães, gatos, e similares), animais de quinta (por exemplo, vacas, carneiros, porcos, cavalos, e similares) e animais de laboratório (por exemplo, ratos, camundongos, cobaias, e similares).

Como mencionado antes, a presente invenção está direccionada para o tratamento de indivíduos com cancro. A expressão "tratamento de um indivíduo com cancro" inclui a conquista, parcial ou total, de um ou mais dos seguintes aspectos: controlo do crescimento ou da propagação de um cancro, redução da extensão de um cancro (por exemplo, reduzindo a dimensão do tumor ou reduzindo o número de sítios afectados), diminuição da velocidade de crescimento de um cancro, e melhorando ou auxiliando a melhorar qualquer 29 sintoma clínico ou indicador associado a um cancro (como componentes dos tecidos ou do soro).

Cancros que se podem tratar ou prevenir pelos métodos da presente invenção incluem sarcomas e carcinomas humanos, por exemplo, fibrossarcoma, mixossarcoma, lipossarcoma, condrossarcoma, osteossarcoma, cordoma, angiossarcoma, endo-teliossarcoma, linfangiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiossarcoma, rabdomiossarcoma, carcinoma do cólon, cancro pancreático, cancro da mama, cancro ovárico, cancro da próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma de células basais, adenocarcinoma, carcinoma das glândulas sudoríparas, carcinoma das glândulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, adenocarcinoma quístico, carcinoma medular, carcinoma broncogénico, carcinoma de células renais, hepatoma, carcinoma do canal biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionário, tumor de Wilms, cancro cervical, tumor testicular, carcinoma pulmonar, carcinoma pulmonar de pequenas células, carcinoma da bexiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma; leucemias, por exemplo, leucemia linfocítica aguda e leucemia mielocítica aguda (leucemia mieloblástica, promielocítica, mielomonocítica, monocítica e eritroleucemia); leucemia crónica (leucemia mielocítica crónica (granulocítica) e leucemia linfocítica crónica); e policitemia vera, linfoma (linfoma de Hodgkin e linfoma não Hodgkin), mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenstrobm, e doença da cadeia pesada. 30

Outros exemplos de leucemias incluem leucemias agudas e/ou crónicas, por exemplo, leucemia linfocitica (por exemplo, como exemplificado pela linha de células (murina) p388), leucemia de grandes linfócitos granulares, e leucemia linfoblástica; leucemias de células T, por exemplo, leucemia de células T (por exemplo, como exemplificada pelas linhas de células CEM, Jurkat, e HSB-2 (aguda), YAC-1 (murina)), leucemia T linfocitica, e leucemia T linfoblástica; leucemia de células B (por exemplo, como exemplificado pela linha de células SB (aguda), e leucemia B-linfocitica; leucemias de células mistas, por exemplo, leucemia de células B e T e leucemia linfocitica B e T; leucemias mielóides, por exemplo, leucemia granulocitica, leucemia mielocitica (por exemplo, como exemplificado pela linha de células HL-60 (pró-mielóci-to), e leucemia mielógena (por exemplo, como exemplificado pela linha de células K562 (crónica)); leucemia neutrofílica; leucemia eosinofílica; leucemia monocitica (por exemplo, como exemplificado pela linha de células THP-1 (aguda)); leucemia mielomonocítica; leucemia mielóide do tipo Naegeli; e leucemia não linfocitica. No Capítulo 60 de The Chemotherapy Sourcebook, Michael C. Perry Ed., Williams & Williams (1992) e na Secção 36 de Holland Frie Câncer Medicine 5a Ed., Bast et al. Editores, B.C. Decker Inc. (2000) estão descritos outros exemplos de leucemias.

Em uma forma de realização, pensa-se que o medicamento descrito é especialmente eficaz no indivíduo em tratamento com tumores não sólidos como mieloma múltiplo. Em uma outra forma de realização, pensa-se que o medicamento referido é especialmente eficaz contra a leucemia T (por exemplo, como exemplificado pelas linhas de células Jurkat e CEM); a leucemia B (por exemplo, como exemplificado pela linha de células SB) ; pró-mielócitos (por exemplo, como exemplificado 31 pela linha de células HL-60); o sarcoma uterino (por exemplo, como exemplificado pela linha de células MES-SA); a leucemia monocitica (por exemplo, como exemplificado pela linha de células THP-1 (aguda)); e um linfoma (por exemplo, como exemplificado pela linha de células U937); mais preferivelmente, essa forma de realização do método utiliza o Composto (1). 0 medicamento referido é especialmente eficaz em indivíduos em tratamento cujos cancros se tornaram "resistentes a múltiplos fármacos". Um cancro que inicialmente respondeu a um fármaco anti-canceroso torna-se resistente a esse fármaco quando o mesmo fármaco deixa de ser eficaz no tratamento do indivíduo com o citado cancro. Por exemplo, muitos tumores responderão inicialmente ao tratamento com um fármaco anti-canceroso diminuindo em tamanho ou entrando mesmo em remissão, apenas até ao momento em que desenvolvem resistência ao fármaco. Os tumores resistentes a um fármaco caracterizam-se pela ressunção do seu crescimento e/ou reexpressão após terem entrado de um modo conveniente em remissão, apesar da administração de doses crescentes do fármaco anti-canceroso. Cancros que desenvolveram resistência a dois ou mais fármacos anti-cancerosos designam-se por "resistentes a múltiplos fármacos". Por exemplo, é comum aos cancros tornarem-se resistentes a três ou mais compostos anti-cancerosos, frequentemente cinco ou mais compostos anti-cancerosos e às vezes dez ou mais compostos anti-cancerosos.

Uma "quantidade eficaz" é a quantidade de composto pela qual se alcança um efeito clínico benéfico quando se administra um composto a um indivíduo com um cancro. Um "efeito clínico benéfico" inclui a redução da massa tumoral, 32 a redução da metástase, a redução da gravidade dos sintomas associados ao cancro e/ou ao aumento da longevidade do indivíduo em comparação com uma situação de ausência de tratamento. A quantidade exacta do composto administrada a um indivíduo dependerá do tipo e da gravidade da doença ou do estado de saúde e das características do indivíduo, como a saúde na generalidade, a idade, o sexo, o peso corporal e a tolerância aos fármacos. Dependerá também da origem, da gravidade e do tipo de cancro. Um perito experimentado será capaz de determinar as doses apropriadas dependentes desses e de outros factores. Quantidades eficazes dos compostos referidos variam peculiarmente entre 1 mg/mm2 por dia e 10 g/mm2 por dia, e preferivelmente entre 10 mg/mm2 por dia e 5 g/mm2 por dia.

Os compostos referidos administram-se através de uma qualquer via apropriada, incluindo, por exemplo, a via oral em cápsulas, suspensões ou comprimidos ou através de administração parentérica. A administração parentérica pode incluir, por exemplo, a administração sistémica, como uma injecção intramuscular, endovenosa, subcutânea, ou intraperitoneal. Esses compostos podem também administrar-se por via oral (por exemplo, na alimentação) , topicamente, por inalação (por exemplo, intrabronquial, intranasal, gotas para inalação oral ou intranasal), ou por via rectal, dependendo do tipo de cancro a tratar. A administração oral ou a parentérica constitui o modo de administração preferido.

Os compostos referidos podem administrar-se a um indivíduo em associação com um veículo aceitável em farmácia fazendo parte de uma composição farmacêutica para o tratamento do cancro. A formulação do composto a administrar variará de acordo com a via de administração escolhida (por 33 exemplo, uma solução, uma emulsão, uma cápsula). Os veículos farmacêuticos apropriados podem conter componentes inertes que não interagem com o composto. Podem utilizar-se técnicas convencionais de formulação farmacêutica, como as descritas em Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Veículos farmacêuticos apropriados para administração parentérica incluem, por exemplo, água estéril, soro fisiológico, solução aquosa bacteriostática de cloreto de sódio (solução aquosa de cloreto de sódio contendo aproximadamente 0,9% em mg/ml de álcool benzilico), soro fisiológico tamponado com um fosfato, solução de Hank, lactato de Ringer e similares. Na arte (Baker, et al., "Controlled Release of Biological Active Agents", John Wiley and Sons, 1986) conhecem-se métodos para acondicionar composições (como quando se fornecem em cápsulas de gelatina dura ou através de ciclodextranos).

Eventualmente, os compostos referidos podem co-adminis-trar-se com outros agentes anti-cancerosos como Adriamicina, Dactinomicina, Bleomicina, Vimblastina, Cisplatina, acivicina; aclarrubicina; cloridrato de acodazole; acronina; adozelesina; aldesleucina; altretamina, ambomicina; acetato de ametantrona; aminoglutetimida; ansacrina; anastrozole; antramicina; asparaginase; asperlin; azacitidina; azetepa; azotomicina; batimastat; benzodepa; bicalutamida; cloridrato de bisantreno; dimesilato de bisnafide; bizelesin; sulfato de bleomicina; brequinar sódio; bropirimina; bussulfam; cactinomicina; calusterone; caracemida; carbetimer; carboplatina; carmustina; cloridrato de carrubicina; carzelesin; cedefingol; clorambucil; cirolemicina; cladribine; mesilato de crisnatol; ciclofosfamida; citarabina; dacarbazina; cloridrato de daunorrubicina; decitabine; dexomaplatina; dezaguanina; mesilato de 34 dezaguanina; diaziquone; doxorrubicina; cloridrato de doxorrubicina; droloxifene; citrato de droloxifene; propionato de dromostanolona; duazomicina; edatrexato; cloridrato de eflornitina; elsamitrucin; enloplatina; empromate; epipropidina; cloridrato de epirrubicina; erbulozole; cloridrato de esorrubicina; estramustina; fosfato de estramustina sódio; etanidazole; etoposido; fosfato de etoposido; etoprine, cloridrato de fadrozole; fazarabine; fenretinide; floxuridina; fosfato de fludarabina; fluorouracilo; flurocitabine; fosquidone; fostriecin sódio; gemcitabine; cloridrato de gemcitabine; hidroxiureia; cloridrato de idarrubicina; ifosfamida; ilmofosina; interleucina II (incluindo a interleucina II recombinante, ou rIL2), interferão alfa-2a; interferão alfa-2b; interferão alfa-nl; interferão alfa-n3; interferão beta-la; interferão gama-Ib; iproplatina; cloridrato de irrinotecan; acetato de lanreotide; letrozole; acetato de leuprolida; cloridrato de liarozole; lometrexol sódio; lomustina, cloridrato de losoxantrone; masoprocol; maitansine; cloridrato de mecloretamina; acetato de megestrol; acetato de melengestrol; melfalam; menogaril; mercaptopurina; metotrexato; metotrexato sódio; metoprine; meturedepa; mitindomida; mitocarcin; mitocromin; mitogilin; mitomalcin; mitomicina; mitosper; mitotano; cloridrato de mitoxantrona; ácido micofenólico; nocodazole; nogalamicina; ormaplatina; oxisuran; pegaspargase; peliomicina; pentamustina; sulfato de peplomicina; perfosfamida; pipobroman; piposulfan; cloridrato de piroxantrona; plicamicina; plomestane; porfimero sódio; porfirromicina; prednimustina; cloridrato de procarbazina; puromicina; cloridrato de puromicina; pirazofurin; riboprine; rogletimide; safingol; cloridrato de safingol; semustine; simtrazene; esparfosato sódio; esparsomicina; cloridrato de espirogermanio; espiromustina; espiroplatina; estreptonigrin; 35 estreptozocina; sulofenur; talisomicina; tecogalan sódio; tegafur; cloridrato de teloxantrona; temoporfin; teniposido; teroxirone; testolactona; tiamiprina; tioguanina; tiotepa; tiazofurin; tirapazamina; citrato de toremifene; acetato de trestolone; fosfato de tricirribina; trimetrexato; glucuronato de trimetrexato; triptorelina; cloridrato de tubulozole; uracilo mostarda; uredepa; vapreotide; verteporfin; sulfato de vimblastina; sulfato de vincristina; vindesina; sulfato de vindesina; sulfato de vinepidina; sulfato de vinglicinato; sulfato de vinleurrosina; tartarato de vinorelbina; sulfato de vinrosidine; sulfato de vinzolidine; vorozole; zeniplatina; zinostatina; cloridrato de zorrubicina.

Outros fármacos anti-cancerosos incluem: 20-epi-l,25 di--hidroxivitamina D3; 5-etiniluracilo; abirraterone; aclarrubicina; acilfulvene; adecipenol; adozelesin; aldesleucin; antagonistas de ALL-TK; altretamina; ambamustina; amidox; amifostine; ácido aminolevulinico; amrubicin; amsacrina; anagrelide; anastrozole; andrografolide; inibidores da angiogénese; antagonistas D; antagonistas G; antarrelix; proteína morfogenética anti-dor-salização 1 (anti-dorsalizing morphogenetic protein-1); antiandrogénios, carcinoma prostático; antiestrogénios; antineoplaston; oligonucleótidos anti-senso; glicinato afidicolin; moduladores dos genes da apoptose; reguladores da apoptose; ácido apurínico; ara-CDP-DL-PTBA; arginina desaminase; asulacrina; atamestano; atrimustine; axinastatina 1; axinastatina 2; axinastatina 3; azasetron; azatoxina; azatirosina; derivados de bacatin III; balanol; batimastat; antagonistas BCR/ABL; benzocloro; benzoilestauroesporina; derivados beta-lactâmicos; beta-aletine; betaclamicina B; ácido betulínico; inibidor bFGF; bicalutamida; bisantreno; 36 bisaziridinilespermina; bisnafide; bistratene A; bizelesin; breflate; bropirimina, budotitane; butionine sulfoximine; calcipotriol; calfostin C; derivados de eamptotecin; canaripox IL-2; capecitabine; carboxamida-amino-triazolo; carboxiamidotriazolo; CaRest M3; CARN 700; inibidor derivado de cartilagens; carzelesin; inibidores de caserna quinases (ICOS); castanoespermina; cecropin B; cetrorrelix; iões cloro; cloroquinoxalina sulfonamida; cicaprost; cis-porfiri-na; cladribina; análogos do clomifeno; clotrimazol; colismicina A; colismicina B; combretastatina A4; análogo da combretastatina; conagenina; crambescidina 816; crisnatol; criptoficina 8; derivados da criptoficina A; curacin A; ciclopentantraquinonas; cicloplatam; cipemicina; octofosfato de citarabina; factor citolitico; citostatina; dacliximab; decitabina; desidrodidemnin B; deslorrelin; dexametasona; dexifosfamida; dexrazoxano; dexverapamil; diaziquone; didemnin B; didox; dietilnorespermina; di-hidro-5-azacitidi-na; 9-dioxaitvicina; difenil espiromustina; docosanol; dolasetron; doxifluridina; droloxifene; dronabinol; duocarmicina SA; ebselen; ecomustina; edelfosine; edrecolomab; eflornitina; elemene; emitefur; epirrubicina; epristeride; estrogénios; análogo de estramustina; agonistas de antagonistas de estrogénios; etanidazole; fosfato de etoposido; exemestane; fadrozole; fazarabine; fenretinide; filgrastim; finasterida; flavopiridol; flezelastine; fluasterone; fludarabina; cloridrato de fluorodaunorrunicina; forfenimex; formestano; fostriecin; fotemustina; gadolínio texafirin; nitrato de gálio; galocitabine; ganirrelix; inibidores da gelatinase; gemcitabine; inibidores da glutationa; hepsulfam; heregulin; hexametileno bisacetamida; hipericina; ácido ibandrónico; idarrubicina; idoxifene; idramantona; ilmofosine; ilomastat; imidazoacridonas; imiquimod; péptidos imunoestimulantes; 37 inibidor dos receptores do factor de crescimento semelhante à insulina 1; agonistas dos interferões; interferões; interleucinas; iobenguano; iododoxorrubicina; ipomeanol-4; iroplact; irsogladine; isobengazole; isohomohalicondrin B; itasetron; jasplacinolide; cahalalide F; triacetato de lamelarin-N; lanreotide; leinamicina; lenograstim; sulfato de lentinan; leptolestatina; letrozole; factor inibidor das leucemias; interferão alfa leucocitário; leuprolida+estrogénio+progesterona; leuprorrelina; levamisole; liarozole; análogo linear de poliaminas; péptidos dissacáridos lipofilicos; compostos de platina lipofilicos; lissoclinamida 7; lobaplatina; lombricina; lometrexol; lonidamina; losoxantrona; lovastatina; loxorribine; lurtotecan; lutécio texafirin; lisofilina; péptidos liticos; maitansine; manostatina A; marimastat; masoprocol; maspin; inibidores de matrilisin; inibidores da matriz metaloproteinase; menogaril; merbarone; meterelin; metioninase; metoclopramida; inibidor MIF; mifepristone; miltefosine; mirimostim; ARN de cadeia dupla malpareada ("mismatched") ; mitoguazona; mitolactol; análogos da mitomicina; mitonafide; factor de crescimento dos fibroblastos mitotoxina-saporin; mitoxantrona; mofarotene; molgramostim; anticorpo monoclonal; gonadotrofina coriónica humana; monofosforilo lipido A+sk da parede celular do mycobacterium; mopidamol; inibidores genéticos da resistência a múltiplos fármacos; terapia com base em um supressor tumoral múltiplo; compostos anticancerosos da mostarda; micaperóxido B; extracto das paredes celulares de micobaetérias; miriaporone; N-acetildinaline; benzamidas N--substituídas; nafarelin; nagrestip; naloxona+pentazocine; napavin; nafterpin; nartograstim; nedaplatina; nemorrubicina; ácido neridrónico; endopeptidase neutral; nilutamida; nisamicina; moduladores do óxido de azoto; antioxidante óxido 38 de azoto; nitrulin; 06-benzilguanina; octreotida; ocicenona; oligonucleótidos; onapristone; ondansetrom; oracin; indutores orais das citocinas; ormaplatina; osaterone; oxaliplatina; oxaunomicina; palauamina; palmitoilrizoxina; ácido pamidrónico; panaxitriol; panomifene; parabactin; pazeliptine; pegaspargase; peldesine; pentosan polissulfato de sódio; pentostatin; pentrozolo; perflubron; perfosfamida; álcool perililico; fenazinomicina; fenil-acetato; inibidores da fosfatase; picibanil; cloridrato de pilocarpina; pirarrubicina; piritrexim; placetin A; placetin B; inibidor dos activadores do plasminogénio; complexo de platina; compostos de platina; complexo platina-triamina; porfimero sódio; porfiromicina; prednisona; propil-bis-acridona; prostaglandina J2; inibidores da proteasme; imunomodulador baseado na proteína A; inibidor da proteino-quinase C; inibidores da proteino-quinase C, microalgal; inibidores da proteino-tirosina fosfatase; inibidores da purina nucleósido fosforilase; purpurinas; pirazoloacridina; conjugado hemoglobina polioxietileno piridoxilado; antagonistas raf; raltitrexed; ramosetron; inibidores da ras farnesil proteino--transferase; inibidores ras; inibidor ras-GAP; reteliptine desmetilado; rénio Re 186 etidronato; rizoxin; ribozimas; retinamida RII; rogletimida; roitucine; romurtide; roquinimex; rubiginone Bl; ruboxil; safingol; saintopin; SarCNU; sarcofitol A; sargramostim; compostos miméticos Sdi 1; semustine; inibidor 1 derivado da senescência; oligonucleótidos senso; inibidores da transdução de sinais; moduladores da transdução de sinais; proteína de ligação aos antigénios de cadeia simples; sizofiran; sobuzoxane; borocaptato de sódio; fenilacetato de sódio; solverol; proteína de ligação à somatomedina; sonermin; ácido esparfósico; espicamicina D; espiromustine; esplenopentin; espongistatin 1; esqualamina; inibidor das células-tronco; 39 inibidores da divisão das células-tronco; estipiamida; inibidores de estromelisin; sulfinosine; antagonista superactivo dos péptidos intestinais vasoactivos; suradista; suramin; swainsonine; glicosaminoglicanos de sintese; talimustina; metiodeto de tamoxifeno; tauromustine; tazarotene; tecogalan sódio; tegafur; telurrapirílio; inibidores da telomerase; temoporfin; temozolomida, teniposido; tetraclorodecaóxido; tetrazomine; taliblastine; tiocoraline; trombopoietina; compostos miméticos da trombopoietina; timalfasin; agonista dos receptores da timopoietina; timotrinan; hormona estimulante da tiróide; estanho etilo etiopurpurina; tirapazamina; bicloreto de titanoceno; topsentin; toremifene; factor das células-tronco totipotente; inibidores da tradução; tretinoina; triacetiluridina; tricirribine; trimetrexato; triptorrelin; tropísetron; turosteride; inibidores da tirosina-quinase; tirfostins; inibidores de UBC; ubenimex; factor inibitório do crescimento derivado do seio urogenital; antagonistas dos receptores da uroquinase; vapreotide; variolin B; terapêutica genética com eritrócitos, sistema vector; velarresol; veramina; verdins; verteporfin; vinorelbina; vinxaltine; vitaxin; vorozole; zanoterone; zeniplatina; zilascorb; e zinostatina estimalamero. Fármacos anti-cancerosos adicionais preferidos são o 5-fluorouracilo e o leucovirin.

Exemplos de anticorpos terapêuticos que se podem utilizar incluem HERCEPTIN® (Trastuzumab) (Genentech, CA) que é um anticorpo monoclonal anti-HER2 humanizado para o tratamento de doentes com cancro da mama metastático; REOPRO® (abciximab) (Centocor) que é um receptor anti-glicoproteínas Ilb/IIIa da superfície das plaquetas para a prevenção da formação dos coágulos; ZENAPAX® (daclizumab) (Roche Pharmaceuticals, Suíça) que é um anticorpo monoclonal anti- 40 -CD25 humanizado, imunossupressor para a prevenção da rejeição aguda de aloenxertos renais; PANOREX™ que é um anticorpo IgG2a murino dos antigénios da superfície celular anti-17-ΙΑ (Glaxo Wellcome/Centocor); BEC2 que é um anticorpo IgG anti-idiotipo (epitopo GD3) murino (Sistema ImClone); IMC-C225 que é um anticorpo IgG anti-EGFR quimérico (Sistema ImClone); VITAXIN™ que é um anticorpo da família das integrinas anti-aV^3 humanizado (Applied Molecular Evolution/Medlmmune); Campath 1H/LDP-03 que é um anticorpo IgGl anti-CD52 humanizado (Leukosite) ; Smart M195 que é um anticorpo IgG anti-CD33 humanizado (Protein Design Lab/Kanebo); RITUXAN™ que é um anticorpo IgGl anti-CD20 quimérico (IDEC Pharm/Genentech, Roche/Zettyaku); LYMPHOCIDE™ que é um anticorpo IgG anti-CD22 humanizado (Immunomedics); LYMPHOCIDE™ Y-90 (Immunomedics); Lymphoscan (marcado com Tc--99m; radioimagiologia; Immunomedics); Nuvion (contra CD3; Protein Design Lab); CM3 é um anticorpo anti-ICAM3 humanizado (ICOS Pharm); IDEC-114 é um anticorpo anti-CD80 adaptado aos primatas (IDEC Pharm/Mitsubishi); ZEVALIN™ é um anticorpo murino anti-CD20 radiomarcado (IDEC/Schering AG); IDEC-131 é um anticorpo anti-CD40L humanizado (IDEC/Eisai) ; IDEC-151 é um anticorpo anti-CD4 adaptado aos primatas (IDEC); IDEC-152 é um anticorpo anti-CD23 adaptado aos primatas (IDEC/Seikagaku); SMART anti-CD3 é uma IgG anti-CD3 humanizada (Protein Design Lab); 5G1.1 é um anticorpo anti--factor 5 complemento (C5) humanizado (Alexion Pharm); D2E7 é um anticorpo anti-TNF-α humanizado (CAT/BASF); CDP870 é um fragmento Fab anti-TNF-α humanizado (Celltech); IDEC -151 é um anticorpo IgGl anti-CD4 adaptado aos primatas (IDEC Pharm/SmithKline Beecham); MDX-CD4 é um anticorpo IgG anti--CD4 humano (Medarex/Eisai/Genmab); CD20-esreptdavidin (+biotina-ítrio 90; NeoRx); CDP571 é um anticorpo IgG4 anti- 41 -TNF-α humanizado (Celltech); LDP-02 é um anticorpo 3ηύί-α4β7 humanizado (LeukoSite/Genentech); OrthoClone 0KT4A é um anticorpo IgG anti-CD4 humanizado (Ortho Biotech); ANTOVA™ é um anticorpo IgG anti-CD40L humanizado (Biogen); ANTEGREN™ é um anticorpo IgG anti-VLA-4 humanizado (Elan); e CAT-152 é um anticorpo anti-TGF-p2 humano (Cambridge Ab Tech).

Compostos quimioterapêuticos que se podem utilizar nas composições da invenção incluem agentes alquilantes, antimetabolitos, produtos naturais, ou hormonas. Exemplos de agentes alquilantes úteis para o tratamento ou a prevenção de malignidades das células T presentes nas composições desta invenção incluem mostardas azotadas (por exemplo, mecloroetamina, ciclofosfamida, clorambucil, etc.), alquil--sulfonatos (por exemplo, bussulfam), nitroureias (por exemplo, carmustina, lomusitne, etc.), ou triazenos (decarbazine, etc.). Exemplos de antimetabolitos úteis para o tratamento ou a prevenção de malignidades de células T presentes nas composições desta invenção incluem análogos do ácido fólico (por exemplo, metotrexato) , ou análogos da pirimidina (por exemplo, Citarabina), análogos da purina (por exemplo, mercaptopurina, tioguanina, pentostatina). Exemplos de produtos naturais úteis para o tratamento ou a prevenção de malignidades das células T presentes nas composições desta invenção incluem alcaloides da vinca (por exemplo, vimblastina, vincristina), epipodofilotoxinas (por exemplo, etoposido), antibióticos (por exemplo, daunorrubicina, doxorrubicina, bleomicina), enzimas (por exemplo, L-aspara-ginase), ou modificadores da resposta biológica (por exemplo, interferão alfa).

Exemplos de agentes alquilantes úteis para o tratamento ou a prevenção de cancro presentes nas composições desta 42 invenção incluem mostardas azotadas (por exemplo, mecloroetamina, ciclofosfamida, clorambucil, melfalam, etc.), etilenimina e metilmelaminas (por exemplo, hexametilmelamina, tiotepa), alquil-sulfonatos (por exemplo, bussulfam), nitroureias (por exemplo, carmustina, lomusitne, semustine, estreptozocin, etc.), ou triazenos (dacarbazina, etc.). Exemplos de antimetabolitos úteis para o tratamento ou a prevenção de cancro presentes nas composições desta invenção incluem análogos do ácido fólico (por exemplo, metotrexato) , ou análogos da pirímidina (por exemplo, fluorouracilo, floxouridina, Citarabina), análogos da purina (por exemplo, mercaptopurina, tioguanina, pentostatina). Exemplos de produtos naturais úteis para o tratamento ou a prevenção de cancro presentes nas composições desta invenção incluem alcaloides da vinca (por exemplo, Vimblastina, vincristina), epipodofilotoxinas (por exemplo, etoposido, teniposido), antibióticos (por exemplo, actinomicina D, daunorrubicina, doxorrubicina, bleomicina, plicamicina, mitomicina) , enzimas (por exemplo, L-asparinase), ou modificadores das respostas biológicas (por exemplo, interferão alfa). Exemplos de hormonas e de antagonistas úteis para o tratamento ou a prevenção de cancro presentes nas composições desta invenção incluem adrenocorticoesteróides (por exemplo, prednisona), progestinas (por exemplo, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de megestrol, acetato de medroxiprogesterona), estrogénios (por exemplo, dietilestibestrol, etinil-estradi-ol), antiestrogénio (por exemplo, tamoxifeno), androgénios (por exemplo, propionato de testosterona, fluoximesterona) , antiandrogénio (por exemplo, flutamida), análogos das hormonas libertadoras de gonadotropina (por exemplo, leuprolida). Outros compostos que se podem utilizar nas composições da presente invenção para o tratamento ou a prevenção de cancro incluem complexos de coordenação da 43 platina (por exemplo, cisplatina, carboplatina), antracenediona (por exemplo, mitoxantrona), ureia substituída (por exemplo, hidroxiureia), derivados da metil-hidrazina (por exemplo, procarbazina), supressores adrenocorticais (por exemplo, mitotano, aminoglutetimida).

Acredita-se que os compostos referidos na presente invenção são especialmente eficazes quando co-administrados com compostos anti-cancerosos que actuam mediante o controlo das células nas fases G2-M devido aos microtúbulos estabilizados. Assim, o medicamento referido inclui preferivelmente fármacos anti-cancerosos co-administrados que actuam por esse mecanismo. Contudo, o taxol e os seus análogos excluem-se da presente invenção excepto quando se procede ao tratamento de um cancro resistente a múltiplos fármacos. Exemplos de compostos anti-cancerosos que actuam mediante o controlo das células nas fases G2-M devido aos microtúbulos estabilizados incluem os seguintes fármacos comercializados e fármacos em desenvolvimento: Erbulozole (também conhecido por R-55104), Dolastatin 10 (também conhecido por DLS-10 e NSC-376128), Isotionato de Mivobulin (também conhecido por CI-980), Vincristina, NSC-639829, Discodermolide (também conhecido por NVP-XX-A-296), ABT-751 (Abbott, também conhecido por E-7010), Altorhirtins (como Altorhirtin A e Altorhirtin C) , Spongistatins (como Spongistatin 1, Spongistatin 2, Spongistatin 3, Spongistatin 4, Spongistatin 5, Spongistatin 6, Spongistatin 7, Spongistatin 8, Spongistatin 9), Cloridrato de Cemadotin (também conhecido por LU-103793 e NSC-D-669356), Epotilones (como Epotilone A, Epotilone B, Epotilone C (também conhecido por desoxiepotilone A ou dEpoA), Epotilone D (também conhecido por KOS-862, dEpoB, e desoxiepotilone B), Epotilone E, Epotilone F, Epotilone B N-óxido, Epotilone A N-óxido, 16- 44 -aza-epotilone B, 21-aminoepotilone B (também conhecido por BMS-310705), 21-hidroxiepotilone D (também conhecido por Desoxiepotilone F e dEpoF), 2β-fluoroepotilone), Auristatin PE (também conhecido por NSC-654663), Soblidotin (também conhecido por TZT-1027), LS-4559-P (Pharmacia, também conhecido por LS-4577), LS-4578 (Pharmacia, também conhecido por LS-477-P), LS-4477 (Pharmacia), LS-4559 (Pharmacia), RPR--112378 (Aventis), sulfato de Vincristina, DZ-3358 (Daiichi), FR-182877 (Fujisawa, também conhecido por WS-9885B), GS-164 (Takeda), GS-198 (Takeda), KAR-2(Hungarian Academy of Sciences), BSF-223651 (BASF, também conhecido por ILX-651 e LU-223651), SAH-49960 (Lilly/Novartis), SDZ-268970 (Lilly/Novartis), AM-97 (Armad/Kyowa Hakko), AM-132 (Armad), AM-138 (Armad/Kyowa Hakko), IDN-5005 (Indena), Criptoficin 52 (também conhecido por LY-355703), AC-7739 (Ajinomoto, também conhecido por AVE-8063A e CS-39.HC1), AC-7700 (Ajinomoto, também conhecido por AVE-8062, AVE-8062A, CS-39-L-Ser.HC1, e RPR-258062A), Vitilevuamida, Tubulisin A, Canadensol, Centaureidin (também conhecido por NSC-106969), T-138067 (Tularik, também conhecido por T-67, TL-138067 e TI-138067), COBRA-1 (Parker Hughes Institute, também conhecido por DDE--261 e WHI-261), H10 (Kansas State University), H16 (Kansas State University), Oncocidin AI (também conhecido por BTO-956 e DIME), DDE-313 (Parker Hughes Institute), Fijianolide B, Laulimalide, SPA-2 (Parker Hughes Institute), SPA-1 (Parker Hughes Institute, também conhecido por SPIKET-P), 3-IAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, também conhecido por MF-569), Narcosine (também conhecido por NSC-5366), Nascapine, D-24851 (Asta Medica), A-105972 (Abbott), Hemiasterlin, 3-BAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, também conhecido por MF-191), TMPN (Arizona State University), acetilacetonato de Vanadocene, T-138026 (Tularik), Monsatrol, Inanocine (também conhecido por NSC- 45 -698666), 3-IAABE (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine), A-204197 (Abbott), T-607 (Tularik, também conhecido por T-900607), RPR-115781 (Aventis), Eleuterobins (como Desmetileleuterobin, Desetileleuterobin, Isoeleuterobin A, e Z-Eleuterobin), Caribaeoside, Caribaeolin, Halicondrina B, D-64131 (Asta Medica), D-68144 (Asta Medica), Diazonamida A, A-293620 (Abbott), NPI-2350 (Nereus) , Taccalonolide A, TUB-245 (Aventis), A-259754 (Abbott), Diozostatina, (-)-Fenilahistin (também conhecido por NSCL-96F037), D-68838 (Asta Medica), D-68836 (Asta Medica), Mioseverin B, D-43411 (Zentaris, também conhecido por D-81862), A-289099 (Abbott), A-318315 (Abbott), HTI-286 (também conhecido por SPA-110, trifluoroacetato) (Wyethy), D-82317 (Zentaris), D-82318 (Zentaris), SC-12983 (NCI), Resverastatina fosfato de sódio, BPR-0Y-007 (National Health Research Institutes), e SSR--250411 (Sanofi). O Taxol, também designado por "Paclitaxel", é um fármaco anti-canceroso bem conhecido que actua inibindo a formação dos microtúbulos. Conhecem-se muitos análogos de taxol, incluindo o taxotere, que se designa também por "Docetaxol". As patentes de invenção norte-americanas co-pendentes com os Nos de série 10/193 075 e 10/193 639, ambas intituladas TAXOL ENHANCER COMPOUNDS e ambas depositadas em 10 de Julho de 2002, descrevem outros análogos do taxol. Um "análogo do taxol" define-se na presente invenção como significando um composto que apresenta o esqueleto taxano básico e a capacidade de controlar células nas fases G2-M devido aos microtúbulos estabilizados. 0 esqueleto taxano básico apresenta-se seguidamente na Fórmula Estrutural (VII): 46

No esqueleto taxano representado pela Fórmula Estrutural (VII) omitiram-se as ligações duplas nos anéis de ciclo-hexa-no. Compreenda-se que o esqueleto taxano básico pode incluir zero ou uma ligação dupla em um ou ambos os anéis de ciclo--hexano. Além disso, uma grande variedade de substituintes pode decorar o esqueleto taxano sem afectar desfavoravelmente a actividade biológica. Na Fórmula Estrutural (VII) omitiu-se uma série de átomos para indicar os sítios em que, entre os análogos do taxol, ocorre geralmente a variação estrutural. Por exemplo, a substituição no esqueleto taxano com somente um átomo de oxigénio indica que nesse sítio encontra-se geralmente um hidroxilo, acilo, alcoxi ou outro substituinte que contenha um átomo de oxigénio. Compreenda-se que essas e outras substituições no esqueleto taxano podem também ocorrer sem perder a capacidade de reforçar e de estabilizar a formação de microtúbulos.

Os compostos referidos podem preparar-se de acordo com os métodos descritos nos Exemplos 1 a 14 e também de acordo com os métodos descritos na patente de invenção norte-americana co-pendente com o N° de série 10/193 076, intitulada SYNTHESIS OF TAXOL ENHANCERS, depositada a 10 de Julho de 2002. 47

Os dados que mostram a eficácia dos compostos referidos são fornecidos nos Exemplos 15 a 18. Nas patentes de invenção norte-americanas co-pendentes com os Nos de série 10/193 075 e 10/193 639, ambas intituladas TAXOL ENHANCER COMPOUNDS e ambas depositadas a 10 de Julho de 2002, apresentam-se outros dados dos referidos compostos anti-cancerosos. A presente invenção ilustra-se através dos exemplos seguintes.

EXEMPLIFICAÇÃO

Exemplo 1 s

R

Através de uma ligeira modificação na técnica anterior, preparou-se a N-metil-hidrazida do ácido tiobenzóico com um rendimento de 88% (Acta Chem. Scand. 1961, 1087-1096); RMN 1H (CDC13) δ 3,3(s,3H), 6,0(s,2H), 7,3-7,4(m,5H); ESMS calculado (C8Hi0N2S) : 166,1; encontrado: 167,1 (M+H)\

Exemplo 2 0

48

Preparação da N-fenil-hidrazida do ácido tiociclo-hexanóíco

Em um balão de 250 ml, de fundo redondo, dissolveram-se 5,4 g (50 mmoles) de fenil-hidrazina em 50 ml de diclorometano anidro. Adicionaram-se em seguida, com agitação à temperatura de 0 °C, 10,9 g (50 mmoles) de dicarbonato de di-ter-butilo. A solução resultante agitou-se em seguida durante 3 horas à temperatura de refluxo. A remoção dos componentes voláteis sob pressão reduzida forneceu um sólido incolor, que se lavou com hexano e secou sob vazio. Obtiveram-se 10 g (rendimento 96%) do produto sob a forma de um sólido incolor, que se podem utilizar na fase seguinte sem purificação adicional. Dissolveram-se 2,5 g (12 mmoles) desse material em 5 ml de piridina anidra. Lentamente, adicionaram--se em seguida, à temperatura de 0 °C, 2,0 ml (15 mmoles) de cloreto de ciclo-hexanocarbonilo. Durante meia hora, agitou--se a solução vermelha à temperatura de 0 °C e, durante 3 horas, agitou-se a suspensão amarela resultante à temperatura ambiente antes de a verter para o seio de gelo-H20 (100 ml) . Separou-se o produto precipitado por filtração e lavou-se perfeitamente com H20. Após uma recristalização em EtOH/H20, obtiveram-se 3,63 g (rendimento 95%) de N-fenil-N-ciclo-he-xil-N'-tert-butoxicarbonil-hidrazida sob a forma de um pó branco; P.F. 141-143 °C; RMN ΧΗ (CDC13) δ 0,9-2,3[m,11H], 1,4(s,9H), 6,9(br,1H), 7,4(m,5H) ppm. A uma solução de 1,1 g (3,46 mmoles) de N-fenil-N-ciclo--hexil-N'-tert-butoxicarbonil-hidrazida em 6 ml de diclorometano adicionaram-se, à temperatura de 0 °C, 6 ml de ácido trifluoroacético. Agitou-se a solução resultante durante meia hora à temperatura de 0 °C. Removeram-se em seguida os componentes voláteis, sob pressão reduzida, para se obter um xarope, que passou a sólido mediante repouso; 49 durante alguns minutos, misturou-se esse material rapidamente, à temperatura de 0 °C, com 5 ml de NaOH 2N frio. Separou-se em seguida o produto sólido por filtração e recristalizou-se em hexano para se obter 0,6 g (rendimento 80%) de N-fenil-hidrazida do ácido ciclo-hexanóíco sob a forma de um pó branco; RMN ±H (DMSO-dg) δ 0,8-3,2 (m, 1H) , 5,3 (s, 2H) , 7,0-7,7 (m, 5H) ; ESMS calculado (C13Hi8N20) : 218,3; encontrado: 241,1 (M+Na)+. À temperatura de refluxo, agitou-se durante 1 hora uma mistura de 0,25 g (1,15 mmoles) de N-fenil-hidrazida do ácido ciclo-hexanóico e 0,46 g (1,15 mmoles) de Reagente de Lawesson em 20 ml de tolueno anidro. Antes de se arrefecer até à temperatura ambiente, filtrou-se a mistura através de uma curta coluna com 5 g de gel de silica que se lavou previamente com benzeno. A remoção do benzeno forneceu o produto bruto sob a forma de um sólido que se purificou por cromatografia em coluna sobre gel de silica utilizando hexano/EtOAc (4:1 v/v) como eluente. Obteve-se 0,15 g (rendimento 60%) de N-fenil-hidrazida do ácido tiociclo-hexa-nóico sob a forma de um sólido esbranquiçado. RMN 1H (CDC13) δ 0,8-2,4(m,11H), 5,65(br,lH), 7,1-7,6(m,5H); ESMS calculado (Ci3Hi8N2S) : 234,1; encontrado: 235,1 (M+H)+.

Exemplo 3 H RCOOH; DCC; DMAP (caí) r

H,C NH €K,c: r t θ é, ~ _ λ;· -«a

I

Re sc;er. ~ e ce I_R*'es5or. h3c nh2

hAC

Preparação da N-metil-hidrazina do ácido 2,5-dimetoxi-tiobenzóico: A uma solução de 3,6 g (20 moles) de ácido 2,5- 50 -dimetoxibenzóico, 1,2 ml (23 mmoles) de metil-hidrazina e 30 ml de DMAP como catalisador em 60 ml de CH2CI2 arrefecidos em um banho de gelo, adicionaram-se, de uma só vez, 4,5 g (21,8 mmoles) de DCC. Agitou-se a mistura reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Durante 1 hora, arrefeceu-se a pasta resultante à temperatura de -20 °C e filtrou-se. Evaporou-se a solução de CH2CI2 e secou-se o residuo sob vazio. Dissolveu-se o produto bruto resultante em 50 ml de tolueno. A essa solução adicionaram-se 5,8 g (14 mmoles) de reagente de Lawesson. Aqueceu-se a mistura, durante 40 minutos, à temperatura de refluxo, arrefeceu-se até à temperatura ambiente, e submeteu-se directamente a uma cromatografia em coluna de gel de sílica (eluente: 25% a 35% de acetato de etilo em hexano) para se obterem 3,7 g (rendimento 82%) da N-metil-hidrazida do ácido 2,5-dimetoxi-tiobenzóico sob a forma de um sólido esbranquiçado. RMN 1H (300MHz, CDCI3) δ 6, 88-6, 80 (m,3H) , 5,46(s,2H), 3,84(s,3H), 3,82(s,3H), 3,28(s,3H).

Exemplo 4 s % R2 : N + hoyV R, 0 0

DCC, DMF

Me-odo A

Preparação da N-malonil-bis[Ν'-metil-N'-(tiobenzoil)hi-drazida]: A uma solução agitada de 0,166 g (10 mmoles) de N--metil-hidrazida do ácido tiobenzóico, 0,15 g (11 mmoles) de H0BtH20 e 0,052 g (5 mmoles) de ácido malónico em 2 ml de DMF, adicionaram-se, à temperatura de 0 °C, 0,22 g (10,7 mmoles) de DCC. Agitou-se a suspensão resultante durante 1 hora à temperatura de 0 °C e durante 3 horas à temperatura ambiente. Separou-se o material precipitado por filtração e lavou-se com 3x15 ml de EtOAc. Reuniram-se os filtrados e as 51 lavagens, lavaram-se sucessivamente com 2x20 ml de H2O, 20 ml de ácido citrico a 5%, 20 ml de H20, 20 ml de uma solução saturada de NaHC03 e 20 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem sobre Na2SC>4, eliminou-se o solvente sob pressão reduzida para se obter um produto bruto sob a forma de um sólido amarelo, que se lavou com EtOAc aquecido. Obteve-se 0,16 g (rendimento 80%) do produto puro sob a forma de um pó amarelo. Rf 0,3 (Hexano/EtOAc 1:1 v/v) ; RMN 1H (CDCI3) δ 3,1-3,8(m,6H), 3,4(s,2H), 7,1-7,45(m,10H), 9,5-10,5 (m, 1H) ppm; ESMS calculado (C19H20N4O2S2) : 400,1; encontrado: 399,1 (M-H)+.

Preparação da N-(2-metilmalonil-bis{Ν'-metil-N'-[(2,5-dimetoxi)tiobenzoil]-hidrazida}:

A uma solução de 3,7 g (16,4 mmoles) de N-metil-hidrazi-da do ácido 2,5-dimetoxitiobenzóico e de 2 g (17 mmoles) de ácido 2-metilmalónico em 20 ml de DMF adicionaram-se, com agitação à temperatura de 0 °C, 4 g (19 mmoles) de DCC.

Agitou-se a mistura reaccional durante 1 hora à temperatura ambiente. À temperatura de -20 °C arrefeceu-se a pasta resultante durante 1 hora e filtrou-se. Diluiu-se o filtrado com 300 ml de EtOAc, lavou-se com 3x50 ml de água, secou-se com Na2S04. Concentrou-se a solução de EtOAc até um volume mínimo, e submeteu-se a uma cromatografia em uma coluna de gel de sílica (eluente: 1:4 a 2:1, acetato de etilo:hexanos) para se obterem 3,5 g (rendimento 80%) do composto do título sob a forma de um pó amarelo. RMN (CDC13) δ 10,12-

52 2,82-2,62(m,1H), 1,12-0,11(m,3H); ESMS calculado (C24H30N4O6S2) : 534,16; encontrado: 535,1 (M+H) .

Preparação_da_2-Metilmalonil-bis (2-amino-2,3-di-hidro- isoindole-l-tiona)

À temperatura ambiente, agitaram-se durante 4 horas 150 mg (1 mmole) de 2-carboxibenzaldeído e 132 mg (1 mmole) de ácido carbázico em 40 ml de metanol. A essa solução adicionaram-se 60 mg (que contêm 50% de H2O) de Pd/C, conservando a mistura .reaccional sob atmosfera de H2 durante 3 horas. Filtrou-se a mistura reaccional, e evaporou-se o solvente. Submeteu-se o resíduo resultante a uma cromatografia em uma coluna de gel de sílica (eluente: 20% a 50%, EtOAc em hexanos) para se obterem 50 mg do produto. RMN XH (300MHz, CDCI3) : 8,71-7,45 (m, 4H) , 4,78(s,2H), l,61(s,9H). Dissolveu-se o produto resultante em 5 ml de CF3COOH, agitou--se durante 30 minutos. Evaporou-se o CF3COOH, e submeteu-se o resíduo a uma cromatografia em coluna com gel de sílica (eluente: 50% a 0%, hexanos em EtOAc) para se obterem 26 mg de 2-amino-2,3-di-hidro-isoindol-l-ona sob a forma de um sólido branco. RMN XH (300MHz, CDC13) : 7,85-7,39 (m,4H), 4,54(s,2H). MS: 149 (M+H). Uma tiolação subsequente com o reagente de Lawesson e o acoplamento da DCC com o ácido 2-me-tilmalóico sob as condições descritas antes forneceram a 2--metilmalonil-bis(2-amino-2,3-di-hidro-isoindole-l-tiona) sob a forma de um pó amarelo. RMN 1H (CDCI3) δ 10,35(s,2H), 8,21-7,51(m,8H) , 5,15(s,4H),1,62 (s,3H); ESMS calculado ESMS calculado (C20H18N4O2S2) : 410,09; encontrado: 411,1 (M+H). 53

Exemplo 5 53

i

W 0 0

R, 0 0 Ri

Preparação da N-malonil-bis[Ν'-metil-N'-(tiobenzoil)--hidrazlda] : A uma solução de 10 g de N-metil-hidrazina do ácido tiobenzóico agitada à temperatura de 0 °C adicionaram--se subsequentemente 8,5 ml de trietilamina e 3,05 ml de dicloreto de malonilo. Agitou-se a mistura reaccional durante 10 minutos, lavou-se com 3x50 ml de água, secou-se sobre sulfato de sódio e concentrou-se. A purificação por recristalização em 35 ml de dicloreto de metileno forneceu 9,0 g (rendimento 75%) de um produto sob a forma de cristais ligeiramente amarelos, idêntico ao produto obtido no Exemplo 6.

Exemplo 6

Ri ietodo 3

Preparação da N-malonil-bis[Ν'-metil-N'-(tiobenzoil)--hidrazida]: Durante 72 horas, aqueceu-se até à temperatura de refluxo uma solução agitada de 1,66 g (10 mmoles) de N-me-til-hidrazida do ácido tiobenzóico e de 1,30 g (5,08 mmoles) de malonato de difenilo em 100 ml de THF anidro. Eliminaram--se seguidamente os componentes voláteis sob pressão reduzida. Purificou-se o produto bruto por cromatografia em 54 coluna sobre gel de sílica utilizando uma mistura de hexano e de EtOAc como eluente (gradiente desde 4:1 v/v até 1:1 v/v). Obtiveram-se 1,07 g (rendimento 51%) do produto N-malonil--bis[Ν'-metil-N'-(tiobenzoil)hidrazida] puro sob a forma de um pó amarelo. 0 carácter físico apresentou-se idêntico ao obtido no Exemplo 5.

Exemplo 7

DCC, DMF

O O

HO

À temperatura de 0 °C, agitou-se durante 3 horas uma pasta de 1,0 g (6 mmoles) de N-metil-hidrazida do ácido tiobenzóico, 1,0 ml (6 mmoles) de malonato de mono-ter-buti-lo, 0,98 g (7,2 mmoles) de HOBt.HaO, e 1,34 g (6,5 mmoles) de DCC em 5 ml de DMF e em seguida durante 3 horas à temperatura ambiente. Separou-se o material precipitado por filtração e lavou-se com 3x20 ml de EtOAc. Lavou-se o conjunto do filtrado e das lavagens, sucessivamente, com 2x20 ml de H2O, 20 ml de ácido cítrico a 5%, 20 ml de H20, 20 ml de uma solução saturada de NaHC03 e 20 ml de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Após secagem sobre Na2S04, eliminou-se o solvente sob pressão reduzida para se obter um 55 produto bruto sob a forma de um sólido, que se lavou com Et20. Obteve-se 0,94 g (rendimento 51%) do produto éster ter--butílico do ácido N'-metil-N'-tiobenzoil-hidrazinocarbonil)--acético puro sob a forma de um pó amarelo. RMN XH (CDCI3) δ 1,6-1,7 (ds,9H), 3, 1-4,1(m,5H), 7,3-7,7(m,5H), 9,7-10,3 (ds, 1H) ppm; ESMS calculado (C15H20N2O3S) : 308; encontrado: 307 (M-H) + . A uma temperatura entre 10 °C e 15 °C, agitou-se durante 12 horas uma solução de 0,19 g (0,6 mmole) de éster ter-butí-lico do ácido N'-metil-N'-tiobenzoil-hidrazinocarbonil)-acético e de 0,12 ml (1,6 mmoles) de TFA em 10 ml de DCM anidro (monitorizou-se a reacção por CCF). Eliminaram-se os componentes voláteis sob pressão reduzida (temperatura do banho inferior a 5 °C). Após secagem sob vazio, adicionaram--se 3 ml de DMF e seguidamente 0,13 g (0,6 mmole) de DCC, 93 mg (0,7 mmole) de H0BtH20 e 0,13 g (0,57 mmole) de N-metil--hidrazida do ácido tio-2,5-dimetoxibenzóico. Agitou-se a solução resultante durante 30 minutos à temperatura de 0 °C e em seguida durante 3 horas à temperatura ambiente. Separou-se o material precipitado por filtração e lavou-se com 3x10 ml de EtOAc. Sucessivamente, lavou-se o conjunto do filtrado e das lavagens com 2x10 ml de Η20, 10 ml de ácido cítrico a 5%, 10 ml de H20, 20 ml de uma solução saturada de NaHC03 e 20 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem sobre Na2S04, eliminou-se o solvente sob pressão reduzida para se obter um produto bruto sob a forma de um óleo, que se purificou por CGS (4:1 hexano/EA até 2:1 EtOAc/hexano) Obteve-se 0,14 g (rendimento 53%) do produto puro sob a forma de um pó amarelo. RMN 1H (CDC13) δ 3, 1-3, 9 (m, 18H) , 6,7-7,4 (9H) ppm; ESMS calculado (C2iH24N404S2) : 460, 1; encontrado: 461,1 (M+H)+. 56 Exemplo 8

;77 0,V'tJo: QrN'a «

1. anidrido HCIO4

2. Na2S; HCI S^R2

Q Q I

H %

Rt

Preparação da N-malonil-bis [Ν'-fenil-N' , (^A.ga.cetA^ -hidrazida]

Durante a noite, aqueceu-se até à temperatura de refluxo uma mistura de 30 ml de fenil-hidrazina e de 150 ml de malonato de etilo (em xileno). Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente. Separaram-se os precipitados por filtração e lavaram-se com etanol para se obterem 14 g de N-malonil-bis(Ν'-fenil-hidrazida) sob a forma de um sólido branco. Suspenderam-se 3,4 g de hidrazida em 30 ml de anidrido acético e arrefeceram-se em um banho de gelo. Gota a gota, adicionaram-se 3 ml de ácido perclórico a 57% em água. Inicialmente, a mistura reaccional virou solução límpida e em seguida solidificou rapidamente. Após repousar durante 1 hora à temperatura ambiente, adicionaram-se 50 ml de éter. Filtrou-se a pasta resultante e lavou-se com 2x00 ml de éter para se obterem 5,7 g de percloratos sob a forma de 57 um sólido branco. Trataram-se os percloratos com acetona e adicionaram-se, sob a forma de uma pasta ao longo de 5 minutos, a 90 ml de uma solução aquosa 0,6 M de Na2S agitada à temperatura ambiente. Decorridos 30 minutos, acidificou-se a mistura reaccional com HC1 (c) para se obter uma pasta amarela. Separou-se o sólido por filtração e lavou-se com 20 ml de água e 2x25 ml de éter para se obterem 3,6 g de N-malo-nil-bis[Ν'-fenil-N'-(tioacetil)hidrazida] sob a forma de um sólido esbranquiçado. RMN ΧΗ (DMSO-de) : δ 11,5(m,2H); 7,5(m,10H); 3,2(m,2H); 2,6(s,3H); 2,5(s,3H). MS calculado 400,1; encontrado: 423,1 (M+Na).

Exemplo 9

fi H *3^2 H f MeOH,DEÀD :--/ 2 : f u

Ri O O Ft|

Preparação de N-malonil-bis[N-metil-N'-fenil-N'-(tiobenzoil)--hidrazida calculado

ESMS A uma solução agitada de 180 mg (0,34 mmole) de N-malo-nil-bis[Ν'-fenil-N'-(tiobenzoil)-hidrazida] , 22 μΐ de MeOH e 200 mg (0,64 mmole) de trifenilfosfina em 10 ml de THF anidro adicionou-se, gota a gota, uma solução de 0,12 ml de DEAD em 3 ml de THF. À temperatura ambiente, agitou-se durante 12 horas a solução resultante cor de laranja. Após eliminação dos componentes voláteis, purificou-se o produto bruto por CGS (3:1 hexano/EtOAc) para se obterem 98 mg (rendimento 52%) do composto do titulo sob a forma de xarope. RMN XH (CDCI3) δ 3,3-4,5(m,8 Η), 7,1-7,8(m,20Η) ppm; (C31H28N4O2S2) : 552; encontrado: 551 (M-H)+. 58

Exemplo 10

Reagente de Lawessen

PhH, Temp. de refluxo, 1 hora

Durante 1 hora, aqueceu-se até à temperatura de refluxo uma mistura agitada de 0,1 g (0,25 mmole) do composto inicial N-malonil-bis[Ν'-fenil-N'-(tioacetil)-hidrazida] e de 0,15 g (0,37 mmole) de reagente de Lawesson em 20 ml de benzeno anidro. Depois de arrefecida até à temperatura ambiente, filtrou-se a mistura através de uma camada de gel de sílica, lavou-se com 2x15 ml de THF. Reuniram-se o filtrado e as lavagens e concentraram-se sob pressão reduzida. Uma cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (hexano até 4:1 hexano/EtOAc até 2:1 hexano/EtOAc) forneceu 16 mg (rendimento 15%) de N-bistiomalonil-bis[Ν'-fenil-N'-(tioacetil) -hidrazida sob a forma de um xarope límpido. RMN 1H (CDC13) δ 3, 80-3, 95(m,8H), 7,02-7,30(m,10H). ESMS calculado (C19H20N4S4) : 432,06; encontrado: 433,0 (M+H) + .

Exemplo 11

p2%> benzeno

Temp. de refluxo

A uma solução agitada de 0,1 g (0,45 mmole) de N-fenil- 59 -hidrazida do ácido ciclo-hexanóico em 5 ml de benzeno anidro adicionou-se 0,2 g (0,45 mole) de P2S5. Durante 3 horas aqueceu-se até à temperatura de refluxo a suspensão resultante. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, diluiu-se a mistura com 5 ml de benzeno e filtrou-se através de uma coluna curta de 2 g de gel de sílica, lavou-se com benzeno e hexano/EtOAc (2:1) (15 ml cada). Reuniram-se o filtrado e as lavagens e concentraram-se para se obter um sólido. Cristalizou-se no hexano para se obter a N-fenil-hi-drazida do ácido tiociclo-hexanóico intermédia sob a forma de um sólido esbranquiçado; RMN 1U (CDC13) δ 0,8-2,4(m,11H), 5, 65 (br, 1H) , 7,1-7,6 (m,5H) ; ESMS calculado (Ci3Hi8N2S) : 234,1; encontrado: 235,1 (M+H)+.

Colocaram-se 4,8 g (40 mmoles) de brometo de ciclopropilo no seio de 50 ml de uma solução anidra de THF contendo 1,1 g (45 mmoles) de magnésio em pó, agitaram-se durante 30 minutos, e aqueceram-se à temperatura de refluxo durante mais 30 minutos. Após arrefecimento, verteu-se a solução reaccional límpida no seio de dissulfureto de carbono (4 ml, 67 mmoles) à temperatura de 0 °C, e agitou-se durante 30 minutos à temperatura ambiente. Seguidamente, verteu-se a mistura reaccional no seio de 8 ml (150 mmoles) de metil-hi-drazina à temperatura de 0 °C, e agitou-se durante mais 2 horas. A essa solução adicionaram-se 40 ml de água e extraíram-se com 3x60 ml de EtOAc. Concentrou-se a solução 60 orgânica até um volume minimo, e submeteu-se a uma cromatografia em coluna com gel de sílica (acetato de etilo:hexanos a 1:1; acetato de etilo) para se obterem 2,8 g (rendimento 55%) da N1-metil hidrazida do ácido tiociclopropil-carboxílico. RMN XH (300MHz, CDCI3) : δ 5,21(br,2H), 3, 62(s,3H),1,91(m,1H), 1,25(m,2H), 0,98(m,2H).

ESMS calculado (C5H10N2S) : 130,1; encontrado: 131,1 (M+H)+. A 40 ml de uma solução de 2,8 g (22 mmoles) de hidrazida em EtOAc contendo 2,2 g (22 mmoles) de TEA, adicionaram-se 4 ml de uma solução de cloreto de malonilo (1,6 g, 11 mmoles) em EtOAc à temperatura de 0 °C, e agitou-se a mistura reaccional durante 20 minutos à temperatura ambiente. Para interromper a reacção adicionaram-se 20 ml de água, e lavou-se a camada de EtOAc, continuamente, duas vezes com água (20 mlx2). Concentrou-se a solução de EtOAc até um volume mínimo, e submeteu-se a uma cromatografia em coluna com gel de sílica (eluente: hexanos:acetato de etilo a 1:1-1:2) para se obterem 2,1 g (rendimento: 60%) de SBR-11-5685. RMN 1H (300MHz, CDC13) : δ 10,01-8,95(m,2H), 3,78-3,41(m,6H), 2,34- 0,82(m, 10H) . ESMS calculado (C13H20N4O2S2) : 328,1; encontrado: 327 (M-H)+.

Exemplo 13

Preparação de 2-metilmalonil-bis(2-amino-2,3-di-hidro-isoin-dole-l-tiona)

À temperatura ambiente, agitaram-se durante 4 horas 150 mg (1 mmole) de 2-carboxibenzaldeído e 132 mg (1 mmole) de ácido carbázico em 40 ml de metanol. A essa solução adicionaram-se 60 mg de Pd/C (contendo 50% de H2O), e 61 conservou-se a mistura reaccional sob atmosfera de H2 durante 3 horas. Filtrou-se a mistura reaccional, e evaporou-se o solvente. Submeteu-se o resíduo resultante a uma cromatografia em coluna com gele de sílica (eluente: 20% a 50%, EtOAc em hexanos) para se obterem 50 mg de produto. RMN 1H (300MHz, CDC13) : δ 8,71-7,45(m,4H) , 4,78 (s,2H), l,61(s,9H). Dissolveu-se o produto resultante em 5 ml de CF3COOH, agitou-se durante 30 minutos. Evaporou-se o CF3COOH, e submeteu-se o resíduo a uma cromatografia em coluna contendo gele de sílica (eluente: hexanos em EtOAc, 50% a 0%) para se obterem 26 mg da 2-amino-2,3-di-hidro-isoindol-l-ona sob a forma de um sólido branco. RMN (300MHz, CDC13) : δ 7,85-7,39(m,4H), 4,54(s,2H) . MS: 149 (M+H) . Uma tiolação

subsequente com reagente de Lawesson e o acoplamento de DCC com o ácido 2-metilmalóico nas condições descritas antes forneceram a 2-metilmalonil-bis(2-amino-2,3-di-hidroisoindo-le-l-tiona) sob a forma de um pó amarelo. RMN ΧΗ (CDCI3) : δ 10,35(s,2H), 8,21-7,51(m,8Η), 5,15(s,4H), l,62(s,3H); ESMS calculado (C20H18N4O2S2) : 410,09; encontrado: 411,1 (M+H).

Exemplo 14

Os compostos apresentados seguidamente prepararam-se pelas técnicas descritas antes. Fornecem-se os dados analíticos desses compostos.

HN

RMN 1H (CDCI3) δ 3,1-3,8(m,6H), 3,4(s,2H), 7,1-7,45(m,10H), 9,5-10,5 (m, 1H) ppm; ESMS calculado (C19H20N4O2S2) : 400,1; encontrado: 399,1 (M-H)T. 62 s

RMN Ή (CDC13) δ 1,0-1,35(m,6H), 3,0-4,3(m,6H), 7,05- 7,40 (m, 10H) , 9,1-10,1 (m, 2H) ; ESMS calculado (C21H24N4O2S2) : 42 8,8; encontrado: 427 (M-H)+. Análise elementar Calculado para C21H24N4O2S2 (428,13) : C, 58,85; H, 5, 64; N, 13,07; S, 14,96. Encontrado: C, 58,73; H, 5,62; N, 12,97; S, 14,96.

RMN (CDCI3) δ 0,7-1,0(m,6H), 1,4-1,9(m,4H), 3,1-4,2(m,6H), 7,1-7,4 (m, 10H) , 8,9-10,2 (m,2H) ppm; ESMS (C23H28N4O2S2) : 456, 1; encontrado: 455,1 (M-H)+. p.e. 141-143

Análise ESMS ÍC25H32N4O2S2) : 4 8 4,2; encontrado: 483, 1 (M-H) elementar Calculado para C25H32N4O2S2 (484,2) C, 61, 95; H, 6,65; N, 11,56; S, 13,23. Encontrado: C, 61,98; H, 6,52; N, 11,26; S, 13,16. 63

RMN XH (DMSO-de) δ 0,4-0,9(dd,3H,J=7) , 2,7(q,lH), 3,1-

3,6(m,6H), 7,1-7,5(m,10H) , 10,9(br,2H) ppm; ESMS (C20H22N4O2S2) : 414; encontrado: 413 (M-H)+.

RMN XH (CDCI3) δ 0,5(t,3H,J=7), 1,1-1,6(m,2H), 2,7(t,1H,J=7), 3,1-3,3(m,6H), 7,0-7,3(m,10H), 10,25(s,2H) ppm; MS (C21H24N4O2S2) : 428,1; encontrado: 427,1 (M-H)+.

RMN ΧΗ (CDC13) δ 0,5 (d, 6H, J=7 ) , 0,9-1,2(m,1H) ,3,0-41(m,7H), 7,1-7,4 (m, 10H) , 10,3(s,2H) ppm; ESMS (C22H26N402S2) : 442,1; encontrado: 441,1 (M-H)+.

RMN ΧΗ (CDC13) δ 0,4-1,3(m,5H), 1,5-1,8(m,2H), 3, 0-3,7(m,6H), 7,1-7,5 (m, 10H) ,11 (s,2H) ppm; MS (C23H28N4O2S2) : 456, 1; encontrado: 455,1 (M-H)+. 64 64 ppm;

RMN lE (CDC: 6, 8-7,4(m,15H), 11(s,2H) encontrado: 489,1 (M-H)+. 3,1-3,5(m,6H), MS (C26H26N402S2) : 490,1;

RMN 1H (CDC13) δ 0,4(d,3H,J=7), 1,0-1,4(m,6H), 2,75(q,lH), 3, 0-4,3(m,4H), 7,1-7,4(m,10H), 10,6(s,2H); ESMS calculado para (C22H26N4O2S2) : 442,1; encontrado: 441,1 (M-H)+; Análise elementar para C22H26N4O2S2 (442,15) C, 59, 70; H, 5,92; N, 12,66; S, 14,49. Encontrado: C, 59,64; H, 5,92; N, 12,59; S, 14,47.

RMN XH (DMSO-d6) δ 0,9-1,8(m,22H), 3,1-3,5(m,2H), 7,2- 7,6(m,10H) , 11,1-11,7(ms,2H) ppm; ESMS calculado (C29H36N4O2S2) : 536, 3; encontrado: 537,3 (M-H) + .

65 RMN 1H (DMSO-de) δ 3,20(br,2H), 7,1-7,6 (m, 20H) , ll,5(s,2H) ppm; ESMS calculado (C29H24N4O2S2) : 524,1; encontrado: 523,1 (M-H)+.

RMN XH (CDCI3) δ 3,0-4,3(m,14H), 6,6-7,5(m,8H)10,4<s,2H) ppm; ESMS calculado (C21H24N4O2S2) : 460,2; encontrado: 461,2 (M+H)+. RMN ESMS H) +.

calculado (CX9H18CI2N4O2S2) :

O

, 7,2-7,4(m,8H), ll,l(br,2H); 468,0; encontrado: 467,9 (M-

RMN XH (CDCI3) δ 0,4(d,3H,J=7), 2,7(q,1H,J=7), 3,0-3,8(m,6H), 7,2-8,2(m,8H), 10,5-10,7(ms,2H) ppm; ESMS calculado (C20H20CI2N4O2S2) : 482,0; encontrado: 481,0 (M-H)+.

RMN XH (CDCI3) δ 2,9-3,8(m,6H), 7,3-7,7(m,4H), 8,0-8,3(m,4H), 10,9 (s,2H) ; ESMS calculado (CioHi8N606S2) : 490, 0; encontrado: 489, 0 (M-H)+. 66

RMN "H (CDC13) δ 3,1-3,9(m,14H), 6, 7-7,8(m,8H), 9, 0-10(m,2H) ppm; ESMS calculado (C21H24N4O4S2) : 4 60, 1; encontrado: 459,1 (M-H) +.

(SBR-11-5032): RMN XH (CDC13) δ 3,0-3,9(m,14H), 6,7- 7,3 (m, 8H) , 9,0-10 (m, 2H) ppm; ESMS calculado (C21H24N4O4S2) : 460,1; encontrado: 459,1 (M-H)+.

RMN XH (acetona-d6) δ 3,5(s,2H), 6,45 (d, 2H, J=5) , 6,9(d,2H,J=5), 7,2-7,6(m,12H), 10,6(s,2H) ppm; ESMS calculado (C25H20N4O4S2) : 504,1; encontrado: 503,1 (M-H)+.

RMN XH (DMSO-d6) δ 2,60(s,6H), 3,05(s,6H), 3,40 (s,2H), 7,15- 7,50 (m, 8H) ppm; ESMS calculado {C21Hz^l2^eOiS2) : 630, 1; encontrado: 629, 1 (M-H) +. 67'"o s

Η7'νυΌγ 1 Ο ο

RMN ΧΗ (CDC13) δ 10,06-8,82 (2Η) , 7,16-6,81 (m, 6Η) , 4,01- 3,81(m,6Η), 3,78-3,11(m,6Η) , 2,81-2,58(m,2Η) : ESMS calculado (C23H28N4O6S2) : 520,15; encontrado: 521 (Μ+Η)

Η 1 ο ο 1

RMN ιΗ (CDCls) δ 10,38-9,01 (2Η) , 7,12-6, 82 (m, 6Η) , 3,92- 3,78(m,12Η), 3,75-3,06(m,6Η), 2,61-2,51(m,2Η); ESMS calculado (C23H28N4O6S2) : 520,15; encontrado: 521 (Μ+Η).

RMN (CDCI3) δ 9,45-8,63(2H), 7,18-6,81(m,6Η), 4,01- 3,80(m,6Η), 3, 78-3,24(m,6Η), 2,62-2,50(m,1Η) , 1,74- 0,11 (m, 3Η) ; ESMS calculado (C24H30N4O6S2) : 534,16; encontrado: 535 (M+H).

Ν'Νγ^γΝ'Ν

68 RMN XH (CDC13) δ 10,19-8,61(2H), 7,26-6,52 (m,6H), 3,81- 3,08 (m, 8H) , 3, 01-2,88 (m, 12H) . ESMS calculado (C23H30N6O2S2) : 486,19; encontrado: 487 (M+H).

RMN XH (CDCI3) δ 9,92-8,80(2H), 7,41-6,72(m,6H) , 4,01- 3,81(m,6H), 3,80-3,15(m,6H) , 2,76-2,42(m,2H); ESMS calculado (C21H22CI2N4O4S2) : 528,05; encontrado: 529 (M+H).

S '"O

Cl RMN XH (CDCI3) δ 10,21-9,02(2H), 7,60-6,81(m,6H), 4,14- 3,88(m,6H), 3,87-3,18(m,6H), 2,84-2,65(m,lH), 1,10- 0,16 (m, 3H) ; ESMS calculado (C22H24CI2N4O4S2) : 542,06; encontrado: 543 (M+H).

RMN (CDC13) δ 10,02-9,20 (2H) , 7,63-7,01 (m, 6H) , 4,21- 3,22 (m, 6H) , 1,88-1,36 (m,2H) ; ESMS calculado (Ci9H16F4N402S2) : 472,07; encontrado: 473 (M+H).

F 69

RMN XH ÍCDCI3) δ 7,93-7,61(2H), 7,40-6,92(m,6H), 3,98- 3,41 (m, 6H) , 2,19-0, 93 (m, 4H) ; ESMS calculado (C20H18F4N4O2S2) : 486,08; encontrado: 487 (M+H).

Cl Cl RMN XH (CDC13) δ 10,12-9,21(2H), 7,67-7,23(m,6H), 3,94- 3,22 (m, 6H) , 2,01-1,21 (m, 2H) ; ESMS calculado (C19H16CI4N4O2S2) : 535,95; encontrado: 537 (M+H).

RMN XH (CDCI3) δ 7,78-7,23 (2H) , 4,56-3,10 (m, 6H) , 2,34- 1,12 (m, 4H) ; ESMS calculado (C20H18CI4N4O2S2) : 54 9, 96; encontrado: 551 (M+H).

O o

H N

S O

70 RMN XH (CDC13) δ 9,92-9,01(2H), 7,38-7,15(m,3H), 6,66- 6,51(m,3H), 3,98-3,75(m,12H), 3,72-3,21(m,6H), 2,01- 0,42 (m, 4H) ; ESMS calculado (C24H30N4O6S2) : 534,16; encontrado: 535 (M+H).

RMN XH (CDCI3) δ 10,51-9,82 (2H), 7,42-6, 80(m,6H), 3,92- 3,04 (m, 6H) , 2,60-1,21 (m, 14H) ; ESMS calculado (C23H28N402S2) : 456,17; encontrado: 457 (M+H).

RMN XH (CDCI3) δ 10,51-5,82(2H), 7,11-6,89(m,6H), 3,81- 3,02 (m, 6H) , 2,40-1,02 (m, 16H) ; ESMS calculado (C24H30N4O2S2) : 470,18; encontrado: 471 (M+H). Ό 8

RMN XH (CDCI3) δ 9,86-8,42 (2H) , 7,01-6, 6 (m, 6H) , 4, 18- 3,51(m,16H), 3,22-2,26(2H), 1,40-1,04(m,6H); ESMS calculado (C25H32N4O6S2) : 54 8,18; encontrado: 547 (M-H) . 71

RMN (CDC13) δ 9,99-8,41(2H), 7,01-6,68(m,6Η), 4,18- 3,56 (m, ΙβΗ) , 1,40-0, 02 (m, 10Η) ; ESMS calculado (C26H34N4O6S2) : 562,19; encontrado: 561 (M-H).

RMN ΧΗ (CDC13) δ 10,12-8,82 (2H), 7,03-6, 62(m,6H), 4,21- 3,87(m,8H), 3,84-3,01(m,6H), 2,71-2,42(m,2H), 1,56- 1,21 (m, 12H) ; ESMS calculado (C27H36N406S2) : 576,21; encontrado: 577 (M+H).

RMN XH (CDC13) δ 9, 81-8,79 (2H) , 3,81(m,8H), 3,80-3,22(m,6H), 7,01-6,64(m,6H), r Ι, 54-1,20(m,13H) 4,21- 1, ΟΧ 72 0,16(m,3H); ESMS calculado (C28H38N4O6S2) : 590,22; encontrado: 591 (M+H).

RMN XH (DMSO-dg) : δ 8,25(d,J=8,1,Hz,4H), 7,50(d,J=8,1Hz,4H), 3,7-3,3 (m, 8H) ; ESMS calculado para Ci9H18N606S2: 490,1; encontrado: 489,0 (M-H).

RMN XH (CDCI3) : δ 3,6-3,4(m,8H), 2,7-2,5(m,6H); ESMS calculado para C9Hi6N402S2 : 276, 1; encontrado: 274,9 (M-H).

RMN XH (CDCI3) : δ 10,25(m,2H), 7,7-7,4(m,8H), 3,7(m,2H), 3,35 (m, 6H) ; ESMS calculado para C2iHi8N602S2: 4 50,1; encontrado: 449,0 (M-H).

73 RMN XH (CDC13) : δ 8,2(s,2H), 7,7-7,5 (m, 4H) , 3,7-3,4 (m, 8H) , 2,9-2,8 (m, 6H) ; ESMS calculado para C19H22N6O2S2: 430, 1; encontrado: 431,1 (M+H).

CN CN

Η H RMN *Η (CDCI3) : δ 10,0-9,2 (m, 2H) , 7,9-7,45 (m, 8H) , 4,0- 3,4 (m, 8H) ; ESMS calculado para C2iH18N602S2: 450, 1; encontrado: 451,0 (M+H).

H RMN XH (CDC13) : δ 10,1-9,4(2H), 7,5-7,2(m,8H), 3, 9-3,3(m,8H); ESMS calculado para C19H18F2N4O2S2: 436, 1; encontrado: 437,1 (M+H).

74 RMN XH (CDC13) : δ 3,3 (s,2H) , 3,6 (s, 6H) , 5,25(s,4H) , 7,05-

7,3(m,16H), 7,6 (s,2H), 7,9(d,2H, J=6) , 10,56(s,2H) ppm; ESMS calculado (C37H34N6O2S2) : 658,2; encontrado: 659,2 (M+H)T.

ESMS calculado (C18H18N4O2S2) : 386, 9; encontrado: 387,1 (M+H).

RMN (CHC13) δ 9,48-8,55(2H), 7,56-7,20(m,10H), 3,80- 3,31 (m, 6H) , 2,88-2,22 (m, 4H) . ESMS calculado (C20H22N4O2S2) : 414,12; encontrado: 415,1 (M+H).

RMN ΧΗ (300 MHz, CDC13) δ 10,21-9,91(m,2H), 8,06-7,32(m,14H), 3,91-3,56 (m, 6H) . ESMS calculado (C24H22N4O2S2) : 4 62,12; encontrado: 4 63 (M+H) .

75 RMN XH (300 MHz, DMSO-d6) δ 11, 60-11,40 (m,2H) , 7,48- 6,46 (m, 12H) , 3, 64-3, 30 (m, 6H) . ESMS calculado (C20H20N4O2S2) : 412,10; encontrado: 413 (M+H).

S RMN XH (300 MHz, CDC13) δ 7,58-7,20(m,12H), 3,68-3,20(m,6H). ESMS calculado (C20H20N4O2S2) : 412,10; encontrado: 413 (M+H).

RMN XH (300 MHz, CDC13) δ 9, 65-8,70 (2H) , 8,01-7,21(m,14H), 3,84-3, 40 (m, 6H) . ESMS calculado (C24H22N4O2S2) : 462,12; encontrado: 463 (M+H). V o o ^ ‘

H H- l,25(s,18H). MS 383,1 (M+Na)- RMN XH (CDCI3) : δ 2,63(s,2H), 2,18(s,6H), calculado para C15H28N4O2S2: 360,2; encontrado:

76 RMN ΧΗ (CDC13) : δ 7,3 (m,10H), 3,2(m,2H), 2,45(t,J=7,4Hz,4H), 2,21 (t, J=7,4Hz, 4H) , 1, 90 (m, 8H) . MS calculado para C25H28N4O6S2: 544,15; encontrado: 567,2 (M+Na).

RMN XH (CDCI3) : δ 7,4-1 (m, 18H) , 3,3 (br s, 2H) , 2,5 (br s, 6H) . MS calculado para C31H28N4O3S: 536,2; encontrado: 537,2 (M+H) .

RMN (CDCI3) : δ 7,2(m,18H), 3,5(br s,2H), 2,4(br s, 6H) . MS calculado para C31H28N4O2S2: 552,2; encontrado: 553,2 (M+H).

RMN XH (CDCI3) : δ 7,8-7,4 (br s,8H), 3,75-3,5 (m, 2H) , 3,95- 3,8(m,4H), 2,58(s,6H), 1,4(m,6H). ESMS calculado para C23H28N4O2S2: 456, 2; encontrado: 479, 2 (M+Na).

77f-kC^O

V

Ο ο“<βΛΛ>

RMN ΧΗ (CDC13) : δ 7,5 (br s, 18Η) , 3,4 (br s,2H), 2,45 ( ESMS calculado para C33H28N4O6S2: 640, 1; encontrado: (M+H). ,6H) , . 641,1

RMN XH (CDCI3) : δ 8,3-8,05(m,4H), 7,75(t,J=8,0Hz,2H), s,2H), 3,74(s,2H), 2,38(s,6H). ESMS calculado

Ci7H18N602S2: 402, 1; encontrado: 403, 1 (M+H). 7,1 (br para

RMN XH (CDCI3) : δ 7,7-7,2(m,6H), 3,2(s,2H), 2,58 2,15 (s, 3H) . ESMS calculado para C19H16CI4N4O3S: encontrado: 520,9 (M+H). (s,3H), 519,9;

78

RMN XH (CDCI3-D2O) : δ 7,45-7,15 (m, 20Η) , 1,6 (br s,6H). ESMS calculado para C31H28N4O2S2: 552,2; encontrado: 553,2 (M+H) .

RMN XH (DMSO-dg) : δ 11,3 (s,2H) , 7,75 (d, J=6,0Hz, 2H) ,7,5- 7,4 (m, 12H) , 6, 9 (m, 2H) ; . ESMS calculado para C27H28N4O2S4: 564,1; encontrado: 565,2 (M+H).

RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 10,18-8,60 (m, 2H) , 7,26-6,46(m,8H), 3,80-3,02(m,6H), 3,00-2,80(m,12H), 1,78-1, 56(m,2H) . ESMS calculado (C23H30N4O2S2) : 486, 19; encontrado: 487 (M+H).

O

RMN XH (300MHz, DMSO): δ 10,90-10,81(m,2H), 7,50-7,21(m,10H), 7,78-3,36(m,6H), 2,64-0,50(m,10H). ESMS calculado (C20H28N4O2S2) : 456, 17; encontrado: 457 (M+H).

79 RMN XB (300MHz, CDC13) : δ 10,00-9,71(m,2H), 7,72-7,21(m,8H), 3,80-3,26 (m, 6H) . ESMS calculado (C2oHi6N602S2) : 436, 08; encontrado: 437 (M+H).

RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 10,60-9,41(m,2H), 7,15-6,23(m,6H), 3, 89-3,28 (m, 6H) , 7,76(s,12H). ESMS calculado (C22H28N406S2) : 506,13; encontrado: 507 (M+H).

RMN XH (300MHz, DMSO) : δ 7,40-7,12(m,10H) , 3,70-2,80(m,6H) , 1,84-0,72 (m, 16H) . ESMS calculado (C26H34N402S2) : 498,21; encontrado: 499 (M+H).

RMN XH (300MHz, CDCI3) : δ 10,42-9, 53 (m, 2H) , 7,55-6, 87(m, 8H) , 3,99-3,28 (m, 6H) . ESMS calculado (C18H1oN4F202S2) : 422,07; encontrado: 423 (M+H).

80 RMN XH (300MHz, DMSO): δ 12,08(br,2H), 8,27-7,24(m,8H), 3,70-3,15 (m, 6H) . ESMS calculado (CieHi6N606S2) : 476, 06; encontrado: 477 (M+H).

RMN (300MHz, CDC13) : δ 10,12-9,83(m,2H) , 7,15-6,63(m,6H), 3,99-2, 91 (m, 6H) . ESMS calculado (C22H26N406S2) : 506, 13; encontrado: 507 (M+H).

RMN XH (300MHz, DMSO): δ 11,12-10,54(m,2H), 8,27-7,18(m,10H), 4,26-3,72(m,2H), 3,37-3,18(m,2H). ESMS calculado (C17H16N4O2S2) : 372,07; encontrado: 371 (M-H) .

RMN XH (300MHz, DMSO): δ 11,52(br,2H), 7,95-7,33(m,10H), 3,42-3,22 (m, 6H) , 2,48 (m, 2H) . ESMS calculado (C23H20N4O2S4) : 512,05; encontrado: 513 (M+H).

81

RMN 1H (300MHz, CDC13) : 5 7,81-7,28(m,8H), 3,82(s,6H). ESMS calculado (C22H18N4O2S4) : 498,03; encontrado: 499 (M+H).

RMN 1H (300MHz, CDC13) : δ 10,02-9,11(m,2H), 8,16-7,28(m,8H), 3,99-3,08(m,6H), 2,90-1,20(m,2H). ESMS calculado (C23H24N4O6S2) : 516,11; encontrado: 517 (M+H).

RMN XH (300MHz, DMSO): δ 7,99(m,8H), 8,16-7,28(m,8H), 3,80- 3,14 (m, 6H) , 1, 80-1,21 (m, 2H) . ESMS calculado (C2iH2oN406S2) : 488,08; encontrado: 487 (M-H).

RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 10, 82-10,55(m,2H), 7,91- 7,29(m,10H), 3, 64-3,11(m,6H), 1, 90-1,40(m,2H) . ESMS calculado (C19H20N4O2S2) : 400, 19; encontrado: 399 (M-H).

RMN XH (CDCI3) : δ 7,38 (m, 10H) , 2,40 (s, 6H) , 1,5-1, 6(6H) . ESMS calculado para C2iH24N402S2: 564,1; encontrado: 565,2 (M+H). 82 RMN 7,6(m,10H),

11,1-11,7(ms,2H) ESMS pprti. calculado (C29H36N4O2S2) : 53 6, 3; encontrado: 537,3 (M-H)

O o H

RMN 1H (CDCI3) : δ 3,6-3, 4 (m, 8H) , 2,7-2,5 (m, 6H) . ESMS calculado para C9H16N4O2S2: 27 6,1; encontrado: 27 4,9 (M-H)+. SY' o o "•'f5

RMN ΧΗ (CDC13) : δ 2,63(s,2H), 2,18(s,6H), l,25(s,18H). MS calculado para C15H28N4O2S2: 360,2; encontrado: 383,1 (M+Na)+.

OH RMN ΧΗ (CDC13) : δ 7,3(m,10H), 3,2(m,2H), 2,45(t,J=7,4Hz,4H), 2,21 (t, J=7,4Hz, 4H) , 1,90 (m, 8H) . MS calculado para CzsHasN-jOeSz : 544,15; encontrado: 567,2 (M+Na)+.

Yc% oSYCH3

83 RMN XH (CDC13) : δ 7,8-7,4(br s,8H), 3,75-3,5(m,2H), 7,95- 3,8(m,4H), 2,58(s,6H), 1,4(m,6H). ESMS calculado para C23H28N4O2S2: 456, 2; encontrado: 479,2 (M+Na) .

RMN 1H (CDCI3) : δ 8,3-8,05(m,4H), 7,75(t, J=8,0Hz,2H), 7,1(br s,2H), 3,74(s,2H), 2,38(s,6H). ESMS calculado para C17HX8N6O2S2: 402, 1; encontrado: 403,1 (M+H)+.

RMN (CDCI3) : δ 7,38(m,10H), 2,40(s,6H), 1,5-1,6(6H). ESMS calculado para C21H24N4O2S2: 564,1; encontrado: 565,2 (M+H) + .

RMN XH (300MHz, DMSO) : δ 11,95(s,2H), 7,48-7,07(m,10H) , 3,52 (s, 6H) . ESMS calculado (C18H18N4O2S2) : 386, 09; encontrado: 387 (M+H) +.

s s 84 RMN ΧΗ (300MHz, CDCl3) : δ 9,ββ-8,83(m,2H), 3,73-3,23(m,6H), 2,10-1,20 (m, 20H) . ESMS calculado (C15H28N402S2} : 360,17; encontrado: 359 (M-H)T.

RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 3,66-3,42(m,6H), 2,84-2,58(m,4H), 1,40-1,19 (m, 6H) . ESMS calculado (C11H20N4O2S2) : 304,10; encontrado: 303 (M-H)+.

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13) : δ 4,15-3,40(m,6H), 2,00-1,01(m,14H) . ESMS calculado (C14H22N4O2S2) : 342,12; encontrado: 341 (M-H)+.

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13) : δ 3,90-3,18(m,6H), 3, 11-0,91(m,10H) . ESMS calculado (Ci2Hi8N402S2) : 314,09; encontrado: 313 (M-H)+.

85 RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 10,08-9,01(m,2H), 3, 68-3,20(m,6H), 2,59-1,12 (m, 16H) . ESMS calculado (Ci5H24N402S2) : 356, 13; encontrado: 355 (M-H)+.

N RMN XH (300MHz, CDC13) : δ 10,22-9,41(m,2H), 7,48-7,20(m,5H), 3,82-3,02(m,6H), 2,38-0,82(m,7H). ESMS calculado (Ci6H2oN402S2) : 364,10; encontrado: 363 (M-H}+.

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13) : δ 10,03-9, 02(m,2H), 3,71-3,42(m,6H), 2,80-0, 81 (m, 16H) . ESMS calculado (C13H24N4G2S2) : 332,13; encontrado: 331 (M-H}+.

RMN (300MHz, CDC13) : δ 3,78-3,08(m,6H), 1,90-0,81(m,18H) . ESMS calculado (C15H24N4O2S2) : 356, 13; encontrado: 355 (M-H)+. 86

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13) : δ 10,00-8,79(m,2H), 3, 65-3,07(m,6Η), 2,79-1,08 (m, 24Η) . ESMS calculado (C19H32N4O2S2) : 412,20; encontrado: 411 (M-H}+.

RMN (300MHz, CDCI3) : δ 9,79(br,2H), 3,79-3,41(m,6H), 1,60-0,75 (m, 18H) . ESMS calculado (Ci5H24N402S2) : 356, 13; encontrado: 355 (M-H)+.

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13) : δ 10,03-9,14(m,2H), 4,21-3,39(m,4H), 2,20-0,76 (m, 18H) . ESMS calculado (C15H24N4O2S2) : 356, 13; encontrado: 355 (M-H)+.

2,95 (m, 6H) , 1,96-0,81 (m, 10H) . ESMS calculado (C2iH36N402S2) : 44 0,13; encontrado: 439 (M-H)+. 87

Ν Η

RMN ΧΗ (300MHz, CDC13 2,04-1,22(m,20Η). encontrado: 383 (Μ-Η) ESMS + δ 10,09-8,95(m,2H) , 3, 78-3,05(m,6Η) , calculado (C17H28N4O2S2) : 384,17;

RMN ΧΗ (300MHz, CDCI3) : δ 10,09-8,51(m,2H), 7,41-7,01(m,10H), 3, 62-3,02(m,6H), 1, 78-1,03(m,10H) . ESMS calculado (C25H28N4O2S2) : 480,17; encontrado: 479 (M-H)+.

ESMS calculado 3,80-3,06(m,6H), 2,92-1,53(m,10H). (C25H28N4O2S2) : 480, 17; encontrado: 479 (M-H)

Exemplo 15 O Composto (1) Demonstra In Vitro Actividade Específica Contra Cancros Resistentes a Múltiplos Fármacos 88 88

Η

Composto (1) Ά actívidade ín vitro dos compostos avaliou-se em um grupo seleccionado de linhas de células de cancros humanos. Para identificar novos e potentes compostos anti-tumorais que são capazes de superar a resistência a múltiplos fármacos, utilizaram-se três pares de linhas de células tumorais (não resistente/resistente). HL-60, um modelo de leucemia mielóide, obteve-se na ATCC (ATCC CCL-240); e HL60/TX1000 isolou-se in vitro subcultivando HL-60 em concentrações progressivamente superiores de Taxol. As células HL-60/TX1000 superexpressam mARN da mdr-1 e p-glicoproteina (PGP), como determinado pela técnica de western blot e marcação com imunofluorescência com anticorpos anti-PGP. As células apresentam resistência cruzada aos compostos taxol, vincristina, adriamicina, etoposido e doxorrubicina. MES-SA, um modelo de sarcoma uterino, é sensível a uma série de fármacos utilizados em quimioterapia, incluindo doxorrubicina, dactinomicina, mitomicina C, taxol e bleomicina, mas resistente à vimblastina e à cisplatina. MES--SA/DX5 foi estabelecida na presença de concentrações crescentes de doxorrubicina. As células expressam concentrações elevadas de mARN da mdr-1 e de p-glicoproteina e exibem resistência cruzada a mais de quinze fármacos utilizados em quimioterapia incluindo taxol, etoposido, mitomicina C, colquicina, vimblastina, dactinomicina, 5-fluo-rouracilo, metotrexato e outros. MES-SA e MES-SA/Dx5 89 adquiriram-se ambas na ATCC (ATCC CRL-1976 e ATCC CRL-1977, respectivamente).

Bowes é uma linha de células de melanoma; e Bowes/OV2 é uma linha Bowes de células de melanoma resistente à vincristina.

As linhas de células mantiveram-se em RPMI1640 (GIBCO) suplementado com 10% de FCS, 100 unidades/ml de penicilina, 100 pg/ml de estreptomicina, e 2 mM de L-glutamina. Separaram-se as células de três em três dias e diluiram-se até uma concentração de 2xl05 células/ml um dia antes da experiência. As experiências realizaram-se todas em uma cultura de células em crescimento exponencial. Em todas as experiências com excepção das especificas, as densidades das células eram 2,5xl04 células/ml.

Preparou-se uma solução base ("stock) do Composto (1), taxol (controlo positivo) e vincristina (controlo positivo), dissolvendo o composto a uma concentração de 1 mM em 100% de DMSO. As concentrações finais obtiveram-se diluindo a solução de reserva directamente no meio de cultura dos tecidos. Durante 72 horas, incubaram-se as células com concentrações variáveis dos compostos e determinaram-se as CI50 por análise MTS (isto é, brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-dife-nil tetrazólio). A CI50 é a concentração do composto necessária para inibir 50% do crescimento celular tumoral. No Quadro 1 apresentam-se os resultados. 90

Quadro 1 - Inibição do Crescimento de Linhas de Células de Tumores Resistentes a Múltiplos Fármacos por Fármacos Anti--cancerosos e Composto (1) CI50 (μΜ) MES-SA MES-SA/DX5 HL-60 HL- 60/TX1000 Bowes Bowes/OV2 Taxol 0, 005 5 0,002 5 0, 005 5 Vincristina 0,004 5 0,002 5 0,002 5 Composto (D 0,05 0,005 0,4 0,05 0, 2 0,01

Como se pode observar a partir dos dados do Quadro 1, o Taxol e a Vincristina demonstraram actividade anti-cancerosa significativamente elevada (CI50: 0,002-0,005 μΜ) contra linhas de células de cancros normais (MES-SA, HL-60, Bowes). Contudo, esses fármacos anti-cancerosos foram significativamente menos eficazes (CI50: 5 μΜ) contra as linhas de células resistentes a múltiplos fármacos (MES--SA/DX5, HL-60/TX1000, Bowes/OV2). Por outro lado, o Composto 1 exibiu, surpreendentemente, elevada actividade anti-cancerosa contra todas as três linhas de células resistentes a múltiplos fármacos (MDR). A especificidade foi 10 (=0,05/0,005), 8(=0,4/0,05), e 20(=0,2/0,01) contra MES-SA/DX5, HL60/TX1000, e Bowes/OV2, respectivamente.

Exemplo 16

Os Compostos (2) a (18) Demonstram Elevada Actividade Anti--Cancerosa In Vitro Contra MES-SA/DX5 Resistentes a Fármacos Múltiplos

Para testar os Compostos (2) a (18) na investigação sobre a actividade inibitória do crescimento das células cancerosas pela MES-SA/DX5 que é uma linha de células de 91 sarcoma uterino resistente a múltiplos fármacos, utilizou-se o protocolo descrito no Exemplo 15. Os resultados apresentam--se seguidamente no Quadro 2.

Quadro 2 - Inibição do Crescimento da Linha de Células

Tumorais MES-SA/DX5 Resistentes a Múltiplos Fármacos pelos Compostos (2) a (18) .

Composto CI50 (μΜ) MES/DX5 Taxol 5 2 0,005 3 0,05 4 0,005 5 0,05 6 0, 005 7 0,01 8 0,005 9 0,005 10 0,005 11 0,005 12 0,005 13 0, 05 14 0,01 15 0, 005 16 0,05 17 0,005 18 0,01

Como se pode observar a partir dos dados do Quadro 2, os Compostos (2) a (18) demonstraram significativa actividade anti-cancerosa (Cl 50: 0,05-0,005 μΜ) contra a linha de células MES-SA/DX5 resistente a múltiplos fármacos, enquanto o taxol mostrou uma actividade anti-cancerosa muito fraca 92 (CI50: 5 μΜ) contra a mesma linha de células resistente a múltiplos fármacos.

Exemplo 17-0 Composto (16) Demonstra, em Camundongos Nus, Actividade Anti-Cancerosa Contra Tumores MES/SA-DX5 de Sarcomas Uterinos Humanos Resistentes a Múltiplos Fármacos

PROCEDIMENTO

Preparou-se um meio suplementado a partir de DMEM a 50%/Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (Glucose elevada), RPMI 1640 a 50%, FBS a 10%/Soro Bovino Fetal (ensaiado em um Hibridoma; Filtrado estéril), L-glutamina a 1%, Penicilina a 1%-Estreptomicina, piruvato de sódio de MEM a 1% e MEM aminoácidos não essenciais a 1%. 0 soro bovino fetal foi fornecido por Sigma Chemical Co. e os outros componentes foram fornecidos por Invitrogen Life Technologies, USA). Aqueceram-se os meios suplementados até à temperatura de 37 °C e adicionaram-se 50 ml desses meios a um balão para cultura de tecidos (175 cm2) .

No ensaio utilizaram-se células MES-SA/DX-5 de sarcomas uterinos humanos e resistentes a múltiplos fármacos cedidas pela American Type Culture Collection. Da reserva ("stock") de células congeladas em azoto líquido removeu-se 1 frasco--ampola de células MES-SA/DX-5. Colocou-se o frasco-ampola contendo as células congeladas, imediatamente, em um banho de 93 água à temperatura de 37 °C e centrifugou-se suavemente até descongelamento. Secaram-se os frascos-ampola congelados com etanol a 70% e pipetaram-se as células imediatamente para um balão de cultura de 17 5 cm2 de tecido contendo meios suplementados. Incubaram-se as células durante a noite e eliminaram-se os meios e no dia seguinte substituiram-se por meios recentes suplementados. Incubou-se o balão até as células se tornarem aproximadamente 90% confluentes. Em qualquer circunstância essa acção levou entre 5 e 7 dias.

Lavou-se o balão com 10 ml de soro fisiológico tamponado com um fosfato (PBS) estéril e à temperatura ambiente. Submeteram-se as células à acção da tripsina vertendo para o balão com as citadas células, 5 ml de Tripsina-EDTA (Invitrogen). Incubaram-se seguidamente as células durante 2 a 3 minutos à temperatura de 37 °C até as mesmas começarem a se distanciarem da superfície do balão. Ao balão adicionou-se um volume igual de meios suplementados (5 ml) . Reuniram-se todas as células em um tubo de 50 ml, e centrifugaram-se a 1000 rpm durante 5 minutos à temperatura de 20 °C. Aspirou-se o sobrenadante e suspendeu-se novamente o pequeno aglomerado esférico ("pellet") em 10 ml de meios suplementados e contaram-se as células. Em 5 a 7 balões de cultura de tecidos (175 cm2) semearam-se 1 a 3 milhões de células/balão. Cada balão continha 50 ml de meios suplementados. Incubaram-se os balões até aproximadamente 90% de confluência. Repetiu-se a passagem das células até se terem desenvolvido células suficientes para implantação tumoral.

Para a tripsinação e centrifugação das células seguiu-se o procedimento anterior. Aspirou-se o sobrenadante e suspendeu-se novamente o pequeno aglomerado esférico ("pellet") de células em 10 ml de PBS estéril e contaram-se 94 as células. Centrifugaram-se as células e suspenderam-se novamente em um volume apropriado de PBS estéril para injecção de um número correcto de células necessárias para implantação tumoral. Suspenderam-se 100 milhões de células com 2,0 ml de PBS estéril até uma concentração final de 50 milhões de células/ml de modo a injectar 5 milhões de células em 0,1 ml/camundongo.

Subcutaneamente, injectaram-se cinco milhões de células MES-SA/DX5 no flanco (área lateral) de um camundongo fêmea CB.17/SCID (Idade 6-7 semanas). Esses camundongos foram fornecidos por Taconic, Germantown, NY, (Nomenclatura: C.B--Igh-lbIcrTac-Prkdcscid) GB. 17/SCID (FOX CHASE SCID) e são homozigóticos relativamente ao gene autossómico recessivo scid (grave imunodeficiência em associação) e não possuem ambas as células T e B devido a um defeito na recombinação V(D)J. Consequentemente, aceitam facilmente transplantes de tecidos estranhos. Permitiu-se que esses tumores se desenvolvessem até atingirem uma dimensão aproximada de 200 a 300 mm3 antes de sofrerem excisão e prepararam-se como uma simples suspensão celular. Semearam-se em seguida essas células em balões de cultura de tecidos. As células atravessaram duas passagens in vitro antes de se separarem as células tumorais.

Charles River Laboratories forneceu os camundongos (CD-I nu/nu): nomenclatura Cri:CD-l-nuBR, Idade:6-8 semanas. Permitiu-se aos camundongos aclimatarem-se durante 1 semana antes de se utilizarem na técnica experimental. A implantação da suspensão das células tumorais MES--SA/DX5 teve lugar no flanco lateral de um camundongo fêmea CD-I nu/nu. Injectaram-se cinco milhões de células tumorais 95 em 0,1 ml de PBS utilizando uma agulha 27 G (1/2 polegada). Duas a 3 semanas depois da implantação Desenvolveram-se tumores MES-SA/DX5.

Prepararam-se soluções base ("stock") dos compostos dissolvendo o composto em DMSO (sulfóxido dimetílico) de grau apropriado para a cultura de células, na concentração pretendida. Essa solução de reserva em DMSO submeteu-se a sonicação em um banho de água ultra-sónico até à dissolução total do pó.

Preparou-se o Solvente da Formulação do seguinte modo: Cremophore RH40 a 20% (Polioxol 40 óleo de rícino Hidrogenado fornecido por BASF corp.) em água preparou-se aquecendo inicialmente Cremophore RH40 a 100% em um banho de água a uma temperatura entre 50 e 60 °C até se apresentar liquefeito e tornar-se límpido. Em um tubo cónico de centrífuga contendo 40 ml de água estéril, colocou-se uma alíquota de 10 ml de Cremophore RH40 a 100% (diluição a 1:5 de Cremophore RH40). Aqueceu-se novamente a solução a 20% de Cremophore RH40, até a mesma se tornar novamente límpida, e misturou-se mediante inversão do tubo diversas vezes. Essa solução de Cremophore RH40 a 20% armazenou-se à temperatura ambiente, e conservou--se durante mais de 3 meses.

Preparação da Solução Dosagem para a Administração dos Compostos: Diluiu-se a solução base ("stock") dos compostos a 1:10 com Cremophore RH40 a 20%: 1) Prepararam-se 2,0 ml de uma solução de dosagem a 10 mg /ml do Composto (16) diluindo uma solução base ("stock") do composto a lOOmg/ml com 1,8 ml de uma solução aquosa de Cremophore RH40 a 20%. A formulação final da solução de dosagem foi 10% de DMSO, 18% de Cremophore RH40 e 72% de água. 96

Por via endovenosa, injectou-se a Solução de dosagem (Volume de dosagem: 0,01 ml/g = 10 ml/Kg) em camundongos portadores de um tumor de sarcoma humano MES-SA/DX-5.

PROTOCOLO

Grupo Compostos (Dose) 1 Veículo apenas 2 Composto (16) (15 mg/Kg)

Plano de Dosagem: 3 vezes por semana (segunda, Quarta, Sexta) durante 3 semanas utilizaram-se 5 camundongos para cada grupo

RESULTADOS A Figura 2 mostra os efeitos do Composto (16) sobre a inibição do desenvolvimento tumoral de MES/SA-DX5. Como se pode observar a partir da mesma Figura, o Composto (16) inibe significativamente o crescimento tumoral sem qualquer toxicidade óbvia como a supressão do peso corporal e alterações de comportamento.

Exemplo 18-0 Tratamento Com a Combinação do Composto (1) e de Epotilone D Demonstrou Actividade Anti-tumoral Contra o Carcinoma da Mama Humano MDA-435 em Camundongos Nus

PROCEDIMENTO

Preparou-se um meio suplementado a partir de DMEM a 50%/Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (Glucose elevada), RPMI 1640 a 50%, FBS a 10%/Soro Bovino Fetal (Ensaiado em um Hibridoma; Filtrado estéril), L-glutamina a 1%, Penicilina a 1%-Estreptomicina, piruvato de sódio de MEM a 1% e MEM 97 aminoácidos não essenciais a 1%. 0 soro bovino fetal foi fornecido por Sigma Chemical Co. e os outros componentes foram fornecidos por Invitrogen Life Technologies, USA). Aqueceram-se os meios suplementados até à temperatura de 37 °C e adicionaram-se 50 ml desses meios a um balão para cultura de tecidos (175 cm2) .

No ensaio utilizaram-se células MDA-435 de Carcinoma da mama humano cedidas pela American Type Culture Collection. Da reserva ("stock") de células congeladas em azoto liquido removeu-se 1 frasco-ampola de células MDA-435. Colocou-se o frasco-ampola contendo as células congeladas, imediatamente, em um banho de água à temperatura de 37 °C e centrifugou-se suavemente até descongelamento. Secaram-se os frascos-ampola congelados com etanol a 70% e pipetaram-se as células imediatamente para um balão de cultura de tecidos de 17 5 cm2 contendo meios suplementados. Incubaram-se as células durante a noite e eliminaram-se os meios e no dia seguinte substituíram-se por meios recentes suplementados. Incubou-se o balão até as células se tornarem aproximadamente 90% confluentes. Em qualquer circunstância essa acção levou entre 5 e 7 dias.

Lavou-se o balão com 10 ml de soro fisiológico tamponado com um fosfato (PBS) estéril e à temperatura ambiente. Submeteram-se as células à acção da tripsina vertendo para o balão que as contém 5 ml de Tripsina-EDTA (Invitrogen). Incubaram-se seguidamente as células durante 2 a 3 minutos à temperatura de 37 °C até as mesmas começarem a se distanciarem da superfície do balão. Ao balão adicionou-se um volume igual de meios suplementados (5 ml). Reuniram-se todas as células em um tubo de 50 ml, e centrifugaram-se a 1000 rpm durante 5 minutos à temperatura de 20 °C. Aspirou-se o 98 sobrenadante e suspendeu-se novamente o pequeno aglomerado esférico ("pellet") em 10 ml de meios suplementados e contaram-se as células. Em 5 a 7 balões de cultura de tecidos (175 cirt) semearam-se 1 a 3 milhões de células/balão. Cada balão continha 50 ml de meios suplementados. Incubaram-se os balões até aproximadamente 90% de confluência. Repetiu-se a passagem das células até se terem desenvolvido células suficientes para implantação tumoral.

Para a tripsinação e centrifugação das células seguiu-se o procedimento anterior. Aspirou-se o sobrenadante e suspendeu-se novamente o pequeno aglomerado esférico ("pellet") de células em 10 ml de PBS estéril e contaram-se as células. Centrifugaram-se as células e suspenderam-se novamente em um volume apropriado de PBS estéril para injecção de um número correcto de células necessárias para implantação tumoral. No caso de MDA-435, suspenderam-se 100 milhões de células com 2,0 ml de PBS estéril até uma concentração final de 50 milhões de células/ml de modo a injectar 5 milhões de células em 0,1 ml/camundongo.

Charles River Laboratories forneceu os camundongos (CD-I nu/nu): nomenclatura Cri:CD-l-nuBR, Idade:6-8 semanas. Permitiu-se aos camundongos aclimatarem-se durante 1 semana antes de se utilizarem na técnica experimental. A implantação da suspensão das células tumorais MDA-435 teve lugar no corpo adiposo de um camundongo fêmea CD-I nu/nu. Esse corpo gordo localiza-se na víscera abdominal ventral do camundongo. Implantaram-se as células tumorais subcutaneamente no corpo gordo localizado no quadrante direito do abdómen na junção das coxas (osso pélvico) e dos fémures. Injectaram-se 5 milhões de células MDA-435 em 0,1 ml 99 de PBS estéril utilizando uma agulha 27 G (1/2 polegada). Duas a 3 semanas depois da implantação, desenvolveram-se tumores MDA-435.

Prepararam-se soluções base ("stock") dos compostos dissolvendo o composto em DMSO (sulfóxido dimetilico) de grau apropriado para a cultura de células, na concentração pretendida. Essa solução de reserva em DMSO submeteu-se a sonicação em um banho de água ultra-sónico até à dissolução total do pó.

Preparou-se o Solvente da Formulação do seguinte modo: Cremophore RH40 a 20% (Polioxol 40 óleo de rícino Hidrogenado fornecido por BASF corp.) em água preparou-se aquecendo inicialmente Cremophore RH40 a 100% em um banho de água a uma temperatura entre 50 e 60 °C até se apresentar liquefeito e tornar-se límpido. Em um tubo cónico de centrífuga contendo 40 ml de água estéril, colocou-se uma alíquota de 10 ml de Cremophore RH40 a 100% (diluição a 1:5 de Cremophore RH40) . Aqueceu-se novamente a solução a 20% de Cremophore RH40, até a mesma se tornar novamente límpida, e misturou-se mediante inversão do tubo diversas vezes. Essa solução de Cremophore RH40 a 20% armazenou-se à temperatura ambiente, e conservou--se durante mais de 3 meses.

Preparação da Solução Dosagem para a Administração dos Compostos: Diluiu-se a solução base ("stock") dos compostos a 1:10 com Cremophore RH40 a 20%: 1) Prepararam-se 2,0 ml de uma solução de dosagem a 10 mg/ml do Composto (1) diluindo uma solução base ("stock") do composto de 100 mg/ml com 1,8 ml de uma solução aquosa a 20% de Cremophore RH40; e 2) obteve-se a solução de dosagem que consiste em 2,0 ml de Epotilone Dal mg/ml e de Composto (1) a 5 mg/ml, misturando 100 0,1 ml da solução base ("stock) do Composto (1) em DMSO (50 mg/ml) e 0,1 ml da solução base ("stock") de Epotilone D em DMSO (10 mg/ml) e diluindo com 1,8 ml da solução aquosa a 20% de Cremophore RH40. A formulação final da solução de dosagem foi 10% de DMSO, 18% de Cremophore RH40 e 72% de água.

Por via endovenosa, injectou-se a Solução de dosagem (Volume de dosagem: 0,01 ml/g = 10 ml/Kg) em camundongos portadores de um tumor da mama humano MDA-435.

PROTOCOLO

Grupo Compostos (Dose) 1 Veículo apenas 2 Epotilone D (5 mg/Kg) 3 Epotilone D (5 mg/Kg)tComposto (1)(50 mg/Kg)

Plano de Dosagem: 3 vezes por semana (segunda, Quarta, Sexta) durante 3 semanas utilizaram-se 5 camundongos para cada grupo

RESULTADOS A Figura 3 mostra os efeitos do Composto (1) sobre o reforço da actividade anti-tumoral de Epotilone D. Como se pode observar a partir da Figura 3, o Composto (1) reforça significativamente a actividade anti-tumoral do Epotilone D sobre o tumor humano MDA-435 da mama em camundongos nus. A Figura 4 mostra os efeitos do tratamento do Epotilone D e da combinação do Composto (1) e do Epotilone D sobre o peso corporal de camundongos nus que transportam um tumor humano MD-435 da mama. Como se pode observar na Figura 4, o Composto 101 (1) reforçou a actívidade anti-tumoral do Epotilone D sem aumento da toxicidade.

Exemplo 19: O Composto (1) Apresenta Actívidade Anti--leucémica in vitro A actívidade in vitro dos compostos determinou-se em um grupo seleccionado de linhas de células de leucemia humanas. CEM (leucemia de células T) , Jurkat (leucemia de células T) , K562 (mielocítica crónica), THP-1 (monocítica), SB (leucemia de células B), U937 (linfoma) adquiriram-se na ATCC. A linha de células de leucemia H2 foi cedida por Harvard Medicai School.

Mantiveram-se as linhas de células em RPMI 1640 (GIBCO) suplementado com FCS a 10%, penicilina a 100 unidades/ml, estreptomicina a 100 pg/ml, e L-glutamina a 2 mM. Separaram--se as células de 3 em 3 dias e diluíram-se, um dia antes da experiência, até uma concentração de 2xl0s células/ml. Todas as experiências se realizaram sobre uma cultura de células em desenvolvimento exponencial. Em todas as experiências, as densidades das células foram 2,5xl04 células /ml. 0 Composto (1) preparou-se dissolvendo um composto em uma concentração de 10 mM em DMSO a 100%. As concentrações finais 10, 1, 0,1, 0,01 e 0,001 μΜ obtiveram-se diluindo a solução base ("stock") directamente no meio de cultura dos tecidos. As células incubaram-se com concentrações variáveis de compostos durante 72 horas e a CI50 determinou-se por análise MTS (isto é, brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio). A CI50 é a concentração necessária para inibir 50% do crescimento celular tumoral. O Quadro 3 102 mostra os resultados in vítro da citotoxicidade da CI50 (μΜ) do Composto (1) versus a vincristina e o taxol.

Tabela 3: Citotoxicidade In Vitro (CI5q, μΜ) do Composto (1) versus a Vincristina e o Taxol

Linha de Células Espécies Tipo de Célula Composto (D Vincristina Taxol 39SK Humana Fibroblasto normal >10 1 1 Jurkat Humana Leucemia de células T 0, 005 0,001 0,001 CEM Humana Leucemia de células T 0,01 0, 005 0, 01 K-562 Humana Mielócito crónico 0, 05 0, 005 0, 005 THP-1 Humana Monócito 0,01 0,005 0,005 U937 Humana Linfoma 0, 05 0, 005 0,005 SB Humana Leucemia de células B 0,005 0,001 0,001 H2 Humana Leucemia 0, 005 0, 005 0,005

Exemplo 20: O Composto 1 inibe o desenvolvimento da leucemia de células T (linha de células CEM) A linha de células da leucemia de células T humana, CEM, obteve-se na American Type Culture Collection. Camundongos SCID fêmeas, de oito semanas, adquiriram-se em Charles Rive Laboratories (Wilmington, MA). HLA-A,B,C anti-humanas conjugadas com FITC obtiveram-se em BD ParMingen (Cat N° 32294X). O tampão de lise ACK obteve-se em BioWhittaker. 103

Implantaram-se células CEM (lxlO6 células em 100 μΐ de soro fisiológico), por via endovenosa, em camundongos fêmeas SCID através da veia da cauda. Administraram-se intraperitonealmente o veículo e o Composto (1) (25 mg/Kg) duas vezes por dia e durante 3 semanas. Após três semanas de tratamento, colheram-se amostras de sangue a partir dos seios retro-orbitais do camundongo no 33° dia. Lisaram-se parcialmente as células vermelhas do sangue com tampão de lise ACK. Durante uma hora à temperatura de 4 °C, coraram-se as células com o anticorpo HLA-A,B,C anti-humano conjugado com FITC. Para quantificar a quantidade de células CEM no sangue realizou-se uma análise por FACS. Durante a análise por FACS retiveram-se células brancas do sangue. Os resultados mostraram que se detectaram aproximadamente 37,7%, 4,6%, e 1,07% de células CEM nas células brancas do sangue a partir do grupo tratado com o veículo, tratado com o Composto (1), e não tratado, respectivamente (Quadro 4).

Quadro 4 Resumo da Quantificação de Células CEM no 33° Dia

Tratamento Células de leucemia % relativa ao circulantes (%) veículo Veículo (n=5) 37,7 100 Composto (1) 4, 6 12,2 (n=5) Camundongos não 1,07 2,8 tratados (n=2)

Lisboa, 10 de Novembro de 2006

Claims (34)

1 Reivindicações 1. Utilização de um composto representado pela seguinte fórmula estrutural:

ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, na qual: Y representa uma ligação covalente ou um grupo hidrocar-bilo de cadeia linear substituída ou insubstituída, ou Y, considerado conjuntamente com ambos os grupos de fórmula geral >C=Z, aos quais se encontra ligado, representa um grupo aromático substituído ou insubstituído; Ri a R4 representam, independentemente, -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo ari-lo ou um grupo arilo substituído, ou Ri e R3, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais estão ligados, e/ou R2 e R4, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais estão ligados, formam um anel heterocíclico não aromático eventualmente fundido com um anel aromático; Rs a R6 representam, independentemente, -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído; e Z representa =0 ou =S; para a produção de um medicamento para o tratamento de um indivíduo com um cancro resistente a múltiplos fármacos. 2

2. Utilização de acordo com a reivindicação 1., em que e R.2 são iguais e R3 e R4 são iguais.

3. Utilização de acordo com a reivindicação 2., em que Y, considerado conjuntamente com ambos os grupos de fórmula geral >C=Z aos quais se encontra ligado, representa um grupo arileno substituído ou insubstituído.

4. Utilização de acordo com a reivindicação 3., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:

representa um grupo -CH- ou -N-.

5. Utilização de acordo com a reivindicação 2., em que Y representa uma ligação covalente, um grupo hidrocarbilo de cadeia linear substituída ou insubstituida ou um grupo fenileno.

6. Utilização de acordo com a reivindicação 5., em que Y representa uma ligação covalente, um grupo -(CH2CH2)-, trans--(CH=CH)-, cis-(CH=CH)-, -(CC)- ou 1,4-fenileno.

7. Utilização de acordo com a reivindicação 2., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural: % O O

3 na qual Y' representa uma ligação covalente ou um grupo de fórmula geral -C(R7R8)- e R7 e R8 representam, cada um, independentemente, -H, um grupo alifático ou alifático substituído, ou R7 representa -H e R8 representa um grupo alifático substituído ou insubstituído ou um grupo arilo substituído ou insubstituído, ou, R7 e Re, considerados conjuntamente, representam um grupo alquileno C2-C6 substituído ou insubstituído.

8. Utilização de um composto representado pela seguinte fórmula estrutural:

ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, na qual: Y' representa uma ligação covalente ou um grupo de fórmula geral -C(R7R8)-; Ri e R2 representam, cada um, um grupo arilo substituído ou insubstituído; R3 e R4 representam, cada um, um grupo alifático substituído ou insubstituído; R7 representa -H, e R8 representa -H, um grupo alifático ou um grupo alifático substituído; ou produção de um medicamento para o tratamento de um indivíduo com um cancro resistente a múltiplos fármacos. 4

9. Utilização de acordo com a reivindicação 8., em que Ri e R2 são iguais e R3 e R4 são iguais.

10. Utilização de acordo com a reivindicação 9., em que R3 e R4 representam, cada um, um grupo alquilo e R8 representa -H ou um grupo metilo.

11. Utilização de acordo com a reivindicação 10., em que Ri e R2 representam, cada um, um grupo fenilo substituído ou insubstituído e R3 e R4 representam, cada um, um grupo metilo ou etilo.

12. Utilização de acordo com a reivindicação 11., em que o grupo fenilo representado pelo símbolo Ri e o grupo fenilo representado pelo símbolo R2 comportam, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) de entre -OH, -Br, -Cl, -I, -F, -ORa, -O-CORa, -CORa, -CN, -N02, -COOH, -S03H, -NH2, -NHRa, -N(RaRb), -COORa, -CHO, -CONH2, -CONHRa, -CON(RaRb), -NHCORa, -NRCORa, -NHCONH2, -NHCONRaH, -NHCON(RaRb), -NRcCONH2, -NRcCONRaH, -NRcCON(RaRb), -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NHRa, -C(=NH)-N(RaRb), -C(=NRc)-NH2, -C(=NRc)-NHRa, -C(=NRc)-N(RaRb), -NH-C(=NH)-NH2, -NH-C(=NH)-NHRa, -NH-C(=NH)-N(RaRb), -NH-C(=NRc)-NH2, -NH-C(=NRc)-NHRa, -NH-C(=NRc)-N(RaRb), -NRdH-C(=NH)-NH2, -NRd-C(=NH)-NHRa, -NRd-C(=NH)-N(RaRb), -NRd-C(=NRc}-NH2, -NRd-C(=NRc)-NHRa, -NRd-C (=NRc) -N (RaRb) , -NHNH2, -NHNHRa, -NHRaRb, -S02NH2, -S02NHRa, -S02NRaRb, -CH=CHRa, -CH=CRaRb, -CRc=CRaRb, -CRc=CHRa, -CRc=CRaRb, -CCRa, -SH, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, um grupo heterocíclico não aromático, um grupo heterocíclico não aromático substituído, um grupo benzilo, um grupo benzilo substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído, em que Ra a Rd representam, cada um, independentemente, um grupo alquilo, um grupo alquilo substituído, um grupo benzilo, 5 benzilo substituído, aromático ou aromático substituído, ou, -N(RaRb), considerados conjuntamente, formam um grupo heterocíclico não aromático substituído ou insubstituído.

13. Utilização de acordo com a reivindicação 1., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural: R

S S na qual Y' ' representa uma ligação covalente ou um grupo -CH2-; e Ri e R2 representam ambos um grupo alifático substituído ou insubstituído.

14. Utilização de acordo com a reivindicação 13., em que Rx e R2 representam ambos um grupo cicloalquilo C3-C8 comportando eventualmente como substituinte pelo menos um grupo alquilo.

15. Utilização de acordo com a reivindicação 14., em que R3 e R4 representam ambos um grupo alquilo substituído ou insubstituído.

16. Utilização de acordo com a reivindicação 15., em que Rx e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo ou 1-metilciclo-propilo.

17. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 13. ou de um composto representado pela seguinte fórmula estrutural: 6

ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, em que: Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 4-cianofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; Rg representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 4-metoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; Rg representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 4-cianofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R? e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo; R3 7 e R4 representam ambos um grupo metilo; R-; representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 3-cianofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 3-fluorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 4-clorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 3-metoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,3-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,3-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; Rg representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-difluorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-difluorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R? representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-diclorofenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rs representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetilfenilo; R3 8 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Re representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rs representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo fenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2,5-dimetoxifenilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; Y' representa uma ligação; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo metilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo etilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; 9 R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 representa um grupo n-propilo; R8 representa -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos um grupo metilo; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo etilo; R7 e Re representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-metilciclopropilo; R3 representa um grupo metilo, e R4 representa um grupo etilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2-metilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 2-fenilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo 1-fenilciclopropilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclobutilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclopentilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo ciclo-hexilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo ciclo-hexilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 repre- 10 sentam ambos um grupo metilo; R7 e Re representam ambos -H; Rx e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 representam ambos um grupo t-butilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo metilo; R3 e R4 representam ambos um grupo fenilo; R7 e R8 representam ambos -H; Ri e R2 representam ambos um grupo t-butilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos ~H; Ri e R2 representam ambos um grupo etilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; ou Ri e R2 representam ambos um grupo n-propilo; R3 e R4 representam ambos um grupo metilo; R7 e Rg representam ambos -H; para a produção de um medicamento para o tratamento de um indivíduo com um cancro resistente a múltiplos fármacos.

18. Utilização de um composto representado pela seguinte fórmula estrutural:

ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, em que: Y representa uma ligação covalente ou um grupo hidrocar-bilo de cadeia linear substituída ou insubstituída, ou 11 Y, considerado conjuntamente com ambos os grupos de fórmula geral >C=Z, aos quais se encontra ligado, representa um grupo aromático substituído ou insubstituído; Ri a R4 representam, independentemente, um átomo de -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído, ou Ri e R3, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais estão ligados, e/ou R2 e R4, considerados conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto aos quais estão ligados, formam um anel heterocíclíco não aromático eventualmente fundido com um anel aromático; R5 e R6 representam, independentemente, um átomo de -H, um grupo alifático, um grupo alifático substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído; e Z representa =0 ou =S; para a produção de um medicamento, eventualmente em associação com um segundo agente para o tratamento do cancro sem ser o taxol ou um análogo do taxol; para o tratamento de um animal com cancro sem ser um camundongo.

19. Utilização de acordo com a reivindicação 18., em que Ri e R2 são iguais e R3 e R4 são iguais.

20. Utilização de acordo com a reivindicação 19., em que Y, considerado conjuntamente com ambos os grupos de fórmula geral >C=Z aos quais se liga, representa um grupo arileno substituído ou insubstituído.

21. Utilização de acordo com a reivindicação 20., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural: 12

em que o Anel A é substituído ou insubstituído e X representa um grupo -CH- ou -N-.

22. Utilização de acordo com a reivindicação 19., em que Y representa uma ligação covalente, um grupo hidrocarbilo de cadeia linear substituída ou insubstituída ou um grupo fenileno.

23. Utilização de acordo com a reivindicação 22., em que Y representa uma ligação covalente, ou um grupo -(CH2CH2)-, trans-(CH=CH)cis-(CH=CH)-(CC)- ou 1,4-fenileno.

24. Utilização de acordo com a reivindicação 19., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:

S R5 Re S na qual Y' representa uma ligação covalente ou um grupo de fórmula geral -C(R7R8)- e R7 e R8 representam, cada um, independentemente, -H, ou um grupo alifático ou alifático substituído, ou R7 representa -H e R8 representa um grupo arilo substituído ou insubstituído, ou, R7 e R8, considerados conjuntamente, representam um grupo alquileno C2-C6 substituído ou insubstituído. 13

25. Utilização de acordo com a reivindicação 24., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:

na qual Y' representa uma ligação covalente ou um grupo de fórmula geral -C(R7R8)-; Ri e R2 representam, cada um, um grupo arilo substituído ou insubstituído; R3 e R4 representam, cada um, um grupo alifático substituído ou insubstituído; R7 representa -H; e Re representa -H, ou um grupo alifático ou alifático substituído .

26. Utilização de acordo com a reivindicação 25., em que Ri e R2 são iguais e R3 e R4 são iguais.

27. Utilização de acordo com a reivindicação 26., em que R3 e R4 representam, cada um, um grupo alquilo e Re representa -H ou um grupo metilo.

28. Utilização de acordo com a reivindicação 27., em que Ri e R2 representam, cada um, um grupo fenilo substituído ou insubstituído e R3 e R4 representam, cada um, um grupo metilo ou etilo.

29. Utilização de acordo com a reivindicação 28., em que o grupo fenilo representado pelo símbolo Ri e o grupo fenilo representado pelo símbolo R2 comportam, eventualmente, um ou 14 mais substituinte(s) escolhido(s) de entre -OH, -Br, -Cl, -I, -F, -ORa, -O-CORa, -CORa, -CN, -N02, -COOH, -S03H, -NH2, -NHRa, -N(RaRb), -COORa, -CHO, -CONH2, -CONHRa, -CON(RaRb), -NHCORa, -NRCORa, -NHCONH2, -NHCONRaH, -NHCON(RaRb), -NRcCONH2, -NRcCONRaH, -NRcCON(RaRb), -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NHRa, -C(=NH)-N(RaRb), -C(=NRc)-NH2, -C(=NRc)-NHRa, -C(=NRc)-N(RaRb), -NH-C(=NH)-NH2, -NH-C(=NH)-NHRa, -NH-C(=NH)-N(RaRb), -NH-C(=NRc)-NH2, -NH-C(=NRc)-NHRa, 14 -NH-C(=NRc)-N(RaRb), -NRd-C(=NH)-N(RaRb), -NRdH-C(=NH)-NH2, -NRd-C (=NRc)-NH2, -NRd-C(=NH)-NHRa, -NRd-C(=NRc)-NHRa, -NRd-C(=NRc)-N(RaRb), -NHNH2, -NHNHRa, -NHRaRb, -S02NH2, -S02NHRa, -S02NRaRb, -CH-CHRa, -CH=CRaRb, -CRc=CRaRb, -CRc=CHRa, -CRc=CRaRb, -CCRa, -SH, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, um grupo heterociclico não aromático, um grupo heterociclico não aromático substituído, um grupo benzilo, um grupo benzilo substituído, um grupo arilo ou um grupo arilo substituído, em que Ra a Rd representam, cada um, independentemente, um grupo alquilo, um grupo alquilo substituído, um grupo benzilo, benzilo substituído, aromático ou aromático substituído, ou, -N(RaRb), considerados conjuntamente, formam um grupo heterociclico não aromático substituído ou insubstituído.

30. Utilização de acordo com a reivindicação 18., em que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:

na qual Y''representa uma ligação covalente ou um grupo -CH2-; e 15 Ri e R2 possuem ambos um grupo alifático substituído ou insubstituído.

31. Utilização de acordo com a reivindicação 30., em que Ri e R2 representam ambos um grupo cicloalquilo C3-Cg comportando eventualmente como substituinte pelo menos um grupo alquilo.

32. Utilização de acordo com a reivindicação 31., em que R3 e R4 representam ambos um grupo alquilo substituído ou insubstituído.

33. Utilização de acordo com a reivindicação 32., em que Rx e R2 representam ambos um grupo ciclopropilo ou 1-metilciclo-propilo.

35. Utilização de acordo com a reivindicação 18., em que o composto é: