PT1563846E - Promotores da produção de factores endógenos de reparação - Google Patents

Promotores da produção de factores endógenos de reparação Download PDF

Info

Publication number
PT1563846E
PT1563846E PT03754060T PT03754060T PT1563846E PT 1563846 E PT1563846 E PT 1563846E PT 03754060 T PT03754060 T PT 03754060T PT 03754060 T PT03754060 T PT 03754060T PT 1563846 E PT1563846 E PT 1563846E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
disease
compound
preparation
prevention
agent
Prior art date
Application number
PT03754060T
Other languages
English (en)
Inventor
Akio Nishiura
Yoshiki Sakai
Teppei Ogata
Original Assignee
Ono Pharmaceutical Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ono Pharmaceutical Co filed Critical Ono Pharmaceutical Co
Publication of PT1563846E publication Critical patent/PT1563846E/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4406—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof only substituted in position 3, e.g. zimeldine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)

Description

DESCRIÇÃO
PROMOTORES DA PRODUÇÃO ENDÓGENA DE FACTORES DE
REPARAÇÃO
Domínio técnico A presente invenção tem por objecto um acelerador da produção de factores endógenos de reparação que compreende um agonista de prostaglandina (a seguir designado por "PG") 12. Técnica anterior A regeneração por tratamento médico tem chamado a atenção como uma terapia de regeneração, no caso de distúrbios de tecidos ou de células, tais como vasos sanguíneos, figado, rim, pulmão, pâncreas, ossos, células do músculo esquelético, células do miocárdio, células do nervo periférico e central e similares. 0 sistema de auto-reparação inclui um sistema que é atingido pela divisão celular de células maduras (sistema de duplicação simples) como a regeneração de muitos órgãos parenquimatosos, tais como figado e rim e um sistema mediado pela indução da proliferação e da diferenciação de células estaminais (células precursoras) (sistema de células-tronco), como a regeneração de células hematopoiéticas. Actualmente diz-se que estes dois sistemas estão presentes na regeneração de muitos tecidos e órgãos. Por exemplo, diz-se que estes dois sistemas estão presentes também na angiogénese (regeneração) e há um sistema de angiogénese à base do crescimento de células endoteliais vasculares vizinhas, células vasculares do músculo liso e similares, concretizado pela libertação de diversos factores endógenos 1 de reparação (p. ex., o factor de crescimento endotelial vascular (FCEV), o factor de crescimento de hepatócitos (FCH), vários factores de crescimento de fibroblastos (FCF a/b) , o factor beta de transformação do crescimento (FTC-β), o factor de crescimento derivado de plaquetas (FCDP), a angiopoietina, factor indutor de hipóxia (FIH), o factor de crescimento semelhante a insulina (FCI), a proteina morfogenética dos ossos (PMO) , o factor de crescimento do tecido conjuntivo (FCTC), o factor de crescimento epidérmico (FCE), etc., factores de crescimento das suas famílias e similares) de células endoteliais, células do músculo liso (vasculares), os fibroblastos, as células sinoviais, as células epiteliais, as plaquetas, os monócitos, os linfócitos, os macrófagos da região lesionada (vizinhança) e um sistema de vasculogénese em que a vaso sanguíneo é formada pela indução da diferenciação de células estaminais endoteliais vasculares a partir de células da medula óssea de um indivíduo maduro, efectuada pela libertação de varias citocinas inflamatórias (por exemplo, IL-1, IL-4, IL-8, FNT-α, IFN α/γ, G-CSF, GM-CSF, NO (monóxido de azoto), etc.) e vários factores de reparação endógenos.
No que diz respeito à presença de células estaminais (células precursoras), estão presentes não apenas em vasos sanguíneos, mas também em muitos tecidos, tais como hepatócitos, células pancreáticas (β), células do miocárdio, rim, pulmão, ossos, articulações, nervos, gordura, pele e similares e são induzidas a proliferar e a diferenciarem-se por vários factores endógenos de reparação e várias citocinas inflamatórias.
Quando a produção destes factores endógenos de reparação é acelerada, a formação de passagens de 2 circulação colateral é acelerada pelo efeito da angiogénese na região isquémica. Além disso, sabe-se que a prevenção e o tratamento (regeneração de reparação) de vários distúrbios dos órgãos são acelerados pela acção de indução da diferenciação de várias células estaminais de tecidos. Por exemplo, sabe-se que o FCH tem uma acção de aceleração do crescimento das células, uma acção de indução da morfogénese, uma acção de indução da diferenciação, uma acção de aceleração da reparação dos tecidos e uma acção anti-apoptose (ver, por exemplo, Biochem. Biophys. Res. Commun., 239, 639-644 (1997)). Sabe-se que estas acelerações da produção de factores endógenos de reparação são eficazes para a prevenção e/ou o tratamento, por exemplo, de doenças do figado (por exemplo, hepatite fulminante, hepatite aguda, cirrose hepática, figado gordo, transplante de figado), doenças do rim (por exemplo, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica), doenças pulmonares (por exemplo, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma), doenças do pâncreas (por exemplo, diabetes mellitus, pancreatite crónica), doenças ósseas (por exemplo, osteoartrite, reumatismo articular, osteo-porose, fractura óssea, traumatismo do periósteo), doenças dos órgãos do aparelho digestivo (por exemplo, úlcera gástrica, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn), doenças de degeneração dos nervos (por exemplo, acidente vascular cerebral, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal espinal, acidentes vasculares cerebrais, doença de Moyamoya), complicações diabéticas (por exemplo, perturbações nervosas, úlceras da pele, nefropatia, doença da retina), doenças das células endoteliais vasculares (por exemplo, restenose após ACTP (angioplastia coronária transluminal percutânea), arteriosclerose), doenças do coração (por exemplo, 3 taquiarritmias supraventriculares, insuficiência cardíaca congestiva, doença da artéria coronária, miocardiopatia súbita, miocardiopatia dilatada), doenças dos dentes (por exemplo, doença periodontal, ferida de extracção dentária, ferida oral, doença do tecido periodontal), decúbito, glaucoma e alopécia. A terapia de regeneração, mediada por factores endógenos de reparação, chama a atenção como uma terapia de angiogénese (regeneração) e uma terapia de geração de tecido no momento das doenças de órgãos e tecidos tais como fígado, pâncreas, rim, coração, nervos centrais/ periféricos, vasos sanguíneos, dentes, olhos, periósteo e ossos. Isto chama particularmente a atenção para uma terapia de regeneração de doenças isquémicas graves de órgãos para as quais não existem processos terapêuticos e examinam-se vários processos na arteriosclerose obliterante (a seguir designado por "ASO"), doença de Buerger, doença de Raynaud, doenças cardiovasculares (por exemplo, enfarte do miocárdio, angina de peito), neuropatia diabética, estenose do canal espinal, doença isquémica cerebral (por exemplo, acidente vascular cerebral, enfarte cerebral), hipertensão pulmonar, fractura óssea ou doença de Alzheimer.
Por exemplo, os doentes com doenças obstrutivas dos vasos sanguíneos periféricos, caracterizadas pela doença de ASO e pela doença de Buerger apresentam claudicação intermitente, dor em repouso e úlcera e necrose das pernas e, finalmente, torna-se inevitável que sofram amputação das pernas. No entanto, actualmente não existe nenhum processo terapêutico eficaz para estes doentes com ASO grave. Uma vez que a injecção intravenosa de PGE1 e um vasodilatador ou um inibidor da aglutinação das plaquetas como um agente 4 oral de cilostazol não mostram os seus efeitos em doentes com ASO grave, pode fazer-se um tratamento intravascular (dilatação com balão ou inserção de stent) e não se pode fazer a revascularização. Recentemente, uma terapia com genes em que se administra directamente um plasmido de genes do FCEV e um plasmido de genes de FCH, por injecção intramuscular no músculo-esquelético de zonas isquémicas das pernas desses doentes (ver Circulation, 97, 1114-1123 (1998) e Gene Therapy, 8, 181-189 (2001)) tem sido aplicada clinicamente e tem chamado a atenção para os seus efeitos. Além disso, as preparações de libertação lenta de uma proteina do factor de crescimento (por exemplo, uma folha de inclusão de gelatina) foram também submetidas a exames básicos (Circulation, 106, Suple 2, II 350 (2002)).
Por outro lado, a terapia de angiogénese em que se administrada directamente as células estaminais endoteliais vasculares, separadas da medula óssea ou do sangue periférico de um doente, na região isquémica de uma perna, por injecção intramuscular, tem chamando a atenção e está a ser utilizada em vários hospitais universitários, o que também está a chamar a atenção (ver THE LANCET, 360, 427-435 (1002)). A introdução destes genes e das células estaminais, directamente nas regiões isquémicas, utilizando um cateter vascular equipado com uma agulha pouco invasiva, tornou-se possível também no enfarte do miocárdio e na angina de peito e está em aplicação clínica como uma terapia de angiogénese. Por exemplo, já foi relatado que a isquémia melhora na angina instável por injecção de um plasmido de genes de FCEV directamente no músculo do coração (Circulation, 98, 2800-2804 (1998)). Além disso, considerou-se que o FCDP está envolvido na angiogénese após 5 o acidente vascular, porque se observou o seu aumento em células nervosas da região da fenanbla (o tecido não está morto por enfarte, mas não pode exercer a sua função) do foco do enfarte de um doente com enfarte cerebral fStroke, 28, 564-573 (1997)). A terapêutica genética utilizando um vector no cérebro, através do liquido cefalorraquidiano da cisterna cerebelomedular, também tem sido experimentada nos acidentes cerebrovasculares isquémicos. Estes tratamentos são uma terapia por angiogénese terapêutica (regeneração) que induz o desenvolvimento da passagem da circulação colateral para a região isquémica e é uma terapêutica de regeneração de tecidos por meio da indução da diferenciação das células estaminais de tecidos. No entanto, a aplicação clinica destas terapêuticas genéticas e da terapêutica celular tem muitos problemas em termos de ética, segurança (imunidade, infecções, cancro), flexibilidade e economia.
Como uma terapêutica de reabertura, no momento da obstrução de vasos sanguíneos na ASO, enfarte do miocárdio, angina de peito e arteriosclerose, a ACTP (angiopatia coronária transluminal percutânea) foi realizada com bons resultados. No entanto, sabe-se que a restenose é induzida pela lesão de células endoteliais vasculares em torno da obstrução devido à vasodilatação forçada por meio de um balão de dilatação e um stent permanente. Como um processo para a prevenção da restenose, administra-se um inibidor da aglutinação de plaquetas, mas isto está ainda num estado insatisfatório. Recentemente, têm sido desenvolvidos, com bons resultados, fármacos tais como antibióticos e agentes carcinostáticos (rapamicina, sirolimus, etc.) e um stent revestido com uma preparação de radioisótopo, tal como raios β, para a prevenção da restenose (N. Eng. J. Med., 346 (23), 1769-1771 (2002)). No entanto, estes processos também têm muitos problemas numa perspectiva de longo 6 prazo. Por conseguinte, a preocupação tem sido dirigida para um medicamento que aumente a acção inibidora da aglutinação de plaquetas em regiões lesionadas tópicas de células endoteliais vasculares e a acção de reparação pelo crescimento das células endoteliais.
Por outro lado, a prostaglandina (PG) é uma substância natural activa sob o ponto de vista fisiológico, biossintetizada a partir de PGH2 numa via metabólica em seres vivos, que é chamada a cascata do ácido araquidónico. As enzimas da biossintese a partir do ácido araquidónico com PGH2 são designadas por ciclo-oxigenase (COX) e actualmente conhece-se a COX-1, a COX-2 e a COX-3 (Proc. Natl. Acad. Sei., 99, 1371 (2002)). Além disso, os compostos que inibem estas enzimas são geralmente usados como agentes antipiréticos, analgésicos e anti-inflamatórios e agentes para a prevenção de doenças circulatórias do sistema de órgãos, como fármacos anti-inflamatórios não esteróide (FAINE). Em particular, a COX-2 induzida em regiões de inflamação está envolvida na biossintese de PG12 e PGE2. Estas PG biossintetizadas estão envolvidas no aparecimento de febre, dor e inflamação em regiões de inflamação e na sua cura. Isto é, as PG biossintetizadas nas regiões de inflamação actuam directamente como agentes causadores de inflamação, induzem uma variedade de citocinas inflamatórias, provocam inflamação e aceleram a sua cura.
Por outro lado, sabe-se que doentes que tomaram FAINE, durante um periodo prolongado de tempo, têm uma taxa de mortalidade significativamente baixa de cancro do intestino grosso e de cancro do pulmão (N. Eng. J Med., 328, 1313-1316 (1993)). Diz-se que esta acção tem uma acção inibidora do crescimento das células de cancro, pois a angiogénese 7 para o crescimento de tecido do cancro é inibida através da inibição da biossintese de PGI2, PGE2 pelos FAINE. Isto é, uma terapêutica anti-angiogénese que controla o crescimento e as metástases de tumores por meio da inibição da angiogénese está a chamar a atenção como uma nova estratégia de tratamento do cancro. Além disso, sabe-se que um inibidor selectivo de COX-2 não induz úlcera gástrica quando é administrado, mas prolonga a cicatrização da úlcera gástrica. Há um relatório afirmando que a sua causa é a inibição da acção de angiogénese para reparação de tecidos lesionados (Am. J. Med., 104, 43S-51S (1998)). Além disso, os inibidores selectivos de COX-2 controlam a angiogénese associada à inflamação (Jpn. J. Pharmacol., 75 105-114 (1997)). É sabido que a PGI2 tem uma acção inibidora da aglutinação das plaquetas marcadamente forte, assim como acções, tais como adesão de plaquetas, vasodilatação e inibição da secreção de ácido gástrico. Além disso, a administração de PGE2 acelera a acumulação de células inflamatórias, incluindo monócitos e a produção de citocinas inflamatórias (por exemplo, IL-1 (interleucina-1), IL-8, IL-6, IFN-oí (interferon-α) , FNT-a (factor de necrose do tumor) e NO (monóxido de azoto), e actua como um agente causador de inflamação. A patente japonesa JP-A-6-87811 descreve, na sua memória descritiva, que o derivado de oxima é útil para a prevenção e/ou o tratamento de trombose, arteriosclerose, doença isquémica do coração, úlcera gástrica e hipertensão porque inibe a aglutinação de plaquetas, a inibição da adesão plaquetária, a vasodilatação e acções de inibição de secreção de ácidos gástricos, mas não descreve nem sugere a acção de angiogénese, por exercer a acção em células endoteliais vasculares e uma acção do crescimento de células do músculo liso com base na acção de aceleração da produção do factor endógeno de reparação em várias doenças das células e dos órgãos (as doenças descritas antes para serem prevenidas e tratadas (regeneração reparação) por FCH) por indução da diferenciação de várias células estaminais causada por esta acção de aceleração da produção do factor endógeno de reparação.
Além disso, relata-se em Diabetologia., 4_0, 1053-1061 (1997) que o derivado de PGI2 Beraprost, (sal sódico do ácido (±)-(IR,2R,3aS,8bS)-2,3,3a,8b-tera-hidro-2-hidroxi-l-[(E)-(3 S,4RS)-3-hidroxi-4-metil-l-octen-6-inil]-lH-ciclo-penta[b]benzofuran-5-butanóico) aumenta a produção de FCH em células endoteliais vasculares in vitro e mostra a acção de crescimento de células endoteliais, mas não existem descrições sobre a acção de aceleração da angiogénese pela administração tópica da preparação persistente de Beraprost e sobre a sua utilidade para a prevenção e o tratamento de várias doenças de órgãos.
Além disso, a PGE2 é conhecida como um produto metabólico na cascata do ácido araquidónico e sabe-se que as suas acções têm diversas funções, tais como a acção de protecção de células, a acção da contracção uterina, a acção de produção da dor, a acção de aceleração do peristaltismo do órgão digestivo, a acção de estimulação, a acção de inibição da secreção do ácido gástrico, a acção de redução da pressão sanguínea e a acção diurética. A partir de estudos feitos nos últimos anos, tem sido revelado que subtipos que possuem funções diferentes, respectivamente, estão presentes no receptor de PGE2. Os subtipos conhecidos presentemente estão geralmente 9 divididos em quatro grupos e são respectivamente designados por EP1, EP2, EP3 e EP4 (J. Lipid Mediators Cell Signaling, 12, 379-391 (1995)). Ao examinar a sua quota de papéis e encontrando assim um composto que não se liga a outros subtipos de receptores, tornou-se possível a obtenção de um medicamento com menos efeitos secundários.
Por exemplo, a patente japonesa JP-A-11-193268 divulga, na sua memória descritiva, que um derivado de ómega-cicloalquil-prostaglandina EP2 é útil na prevenção e/ou no tratamento de doenças imunes (por exemplo, doença auto-imune, transplante de órgãos), asma, anomalia da osteogénese, morte das células nervosas, hepatopatia, parto prematuro, aborto, doenças do nervo da retina tais como glaucoma, mas não descreve nem sugere nada sobre a acção de libertação do factor endógeno de reparação, acção de indução de diferenciação de células estaminais e acção de aceleração da angiogénese.
Por exemplo, a patente WO 00/03980 descreve, na sua memória descritiva, que um composto derivado de fenil-prostaglandina E substituída em 5-tia-omega é útil na prevenção e/ou no tratamento de doenças, incluindo doenças imunitárias (esclerose lateral amiotrófica (ELA), esclerose múltipla, síndrome de Sjoegren, artrite reumatóide, doenças autoimunes, tais como lúpus eritematoso sistémico, rejeição após transplante de órgãos), asma, anomalias da osteogénese, morte dos nervos celulares, doença pulmonar, hepatopatia, hepatite aguda, glomerulonefrite, insuficiência renal, hipertensão, isquémia do miocárdio, síndrome da reacção inflamatória sistémica, dor das nádegas, septicémia, síndrome da hemofagocitose, síndrome de activação dos macrófagos, doença de Still, doença de Kawasaki, queimaduras, granuloma sistémico, colite 10 neoplásica, doença de Crohn, hipercitocinémia no momento da diálise, insuficiência de vários órgãos, choque, anomalias do sono e aglutinação de plaquetas mas não descreve nem sugere nada sobre a acção de libertação do factor endógeno de reparação, acção de indução da diferenciação de células estaminais e acção de aceleração da angiogénese.
Descrição da invenção
Na sequência do problema subjacente, a presente invenção tem por objecto providenciar um acelarador da produção de factores endógenos de reparação, um indutor de diferenciação de células estaminais (precursor do indutor de diferenciação celular) e um acelerador de angiogénese, que são úteis como agentes de prevenção e terapêuticos das doenças (isquémicas) de órgãos e têm menos efeitos colaterais. 0 referido problema é resolvido pelo ácido (E)—[5—[2— [1-fenil-l-(3-piridil)metilidenoaminoxi]etil]-7,8-di-hidro-naftalen-l-iloxi]acético (daqui para a frente referidos ocasionalmente como "composto 1") com a seguinte estrutura
O^COOH ou um seu sal, para ser utilizado como um acelerador da produção de um factor de crescimento endotelial vascular (FCEV) ou de um factor de crescimento de hepatócitos (FCH) 11 na prevenção e/ou no tratamento de arteriosclerose obliterante, doença de Buerger, doença de Raynaud, acidentes cerebrovasculares, enfarte cerebral, hepatite fulminante, hepatite aguda, cirrose hepática, figado gordo, transplante do figado, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma, diabetes mellitus, pancreatite crónica, osteoartrite, reumatismo articular, osteoporose, fractura óssea, lesões do periósteo, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn, acidente vascular, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal medular, doença de Moyamoya, distúrbio diabético dos nervos, úlcera diabética da pele, nefropatia diabética, doença diabética da retina, restenose após ACTP, taquiarritmia supraventricular, cardiomiopatia súbita, cardiomiopatia dilatada, doença periodontal, ferida da extracção de dentes, feridas orais, doença do tecido periodontal, decúbito ou glaucoma. A presente invenção também tem por objecto uma composição farmacêutica compreendendo ácido (E) — [5—[2 — [1 — fenil-1-(3-piridil)metilidenoaminoxi]etil]-7,8-di-hidro-naftalen-l-iloxi]acético ou um seu sal, para ser utilizada na prevenção e/ou no tratamento de arteriosclerose obliterante, doença de Buerger, doença de Raynaud, acidentes cerebrovasculares, enfarte cerebral, hepatite fulminante, hepatite aguda, cirrose hepática, fígado gordo, transplante de fígado, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma, diabetes mellitus, pancreatite crónica, osteoartrite, reumatismo articular, osteoporose, fractura óssea, traumatismo do periósteo, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn, acidente vascular 12 cerebral, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal raquidiano, doença de Moyamoya, perturbações diabéticas nervosas, úlceras diabéticas da pele, nefropatia diabética, doença diabética da retina, restenose após ACTP, taquiarritmias supraventriculares, cardiomiopatia súbita, cardiomiopatia prolongada, insuficiência cardíaca congestiva, doença da artéria coronária, miocardiopatia súbita, miocardiopatia dilatada, doença periodontal, ferida de extracção dentária, ferida oral, doença do tecido periodontal, úlcera de decúbito ou glaucoma.
As modalidades preferidas estão estabelecidas nas reivindicações dependentes.
Todos os sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacológico estão incluídos nos sais dos compostos da presente invenção. É preferível que os sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacológico não tenham toxicidade e sejam solúveis em água. Exemplos de sais apropriados do composto da presente invenção incluem sais de metais alcalinos (potássio, sódio, lítio), sais de metais alcalino-terrosos (cálcio, magnésio), sais de amónio (sal de tetrametilamónio, sal de tetrabutilamónio), sais de aminas orgânicas (trietilamina, metilamina, dimetilamina, ciclopentilamina, benzilamina, fenetilmina, piperidina, monoetanolamina, dietanolamina, tris(hidroximetil)metilamina, lisina, arginina, N-metil-D-glucamina) e sais de adição de ácido (sais de ácidos inorgânicos (cloridrato, bromidrato, iodato, sulfato, fosfato, nitrato), sais de ácidos orgânicos (acetato, trifluoroacetato, lactato, tartarato, oxalato, fumarato, maleato, benzoato, citrato, metano-sulfonato, etano-sulfonato, benzeno-sulfonato, tolueno-sulfonato, isetionato, glicuronato, gliconato). 13
Também estão incluídos nos sais dos compostos da presente invenção solvatos ou solvatos de metais alcalinos (alcalino-terrosos), sais de amónio, sais de aminas orgânicas e sais de adição de ácido dos compostos da presente invenção. É preferível que os solvatos não sejam tóxicos e sejam solúveis em água. Exemplos de solvatos apropriados incluem solvatos de água e sistemas de dissolventes alcoólicos (etanol). 0 composto da presente invenção converte-se nos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico por processos convencionais.
Um processo de produção do composto de acordo com a presente invenção; ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilidenoaminoxi]-etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético (composto 1) está descrito no exemplo 2 (g), da patente JP-A-6-87811
Toxicidade:
Dado que a toxicidade do agente activo da presente invenção é muito baixa, é suficientemente seguro para ser utilizado como um medicamento.
Aplicabilidade industrial
Aplicação a preparações farmacêuticas:
Uma vez que o composto 1 da presente invenção tem uma acção de aceleração da angiogénese, é útil como agente preventivo e/ou terapêutico para doenças isquémicas dos órgãos (por exemplo, arteriosclerose obliterante, doença de Buerger, doença de Raynaud, neuropatia diabética, estenose 14 do canal raquidiano, doenças isquémicas do cérebro (por exemplo, acidentes cerebrovasculares, enfarte cerebral), hipertensão pulmonar, fractura óssea, doença de Alzheimer). Além disso, dado que o composto 1 da presente invenção tem uma acção de aceleração da produção do factor endógeno de reparação, com base na sua acção para induzir a diferenciação das respectivas células estaminais para a reparação de tecidos, é útil como agente preventivo e/ou terapêutico para vários órgãos (por exemplo, doenças do figado (por exemplo, hepatite fulminante, hepatite aguda, cirrose hepática, figado gordo, transplante de figado) doenças do rim (por exemplo, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica), doenças do pulmão (por exemplo, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma), doenças do pâncreas (por exemplo, diabetes do tipo II, pancreatite crónica), doenças ósseas (por exemplo, osteoartrite, reumatismo articular, osteoporose, fractura óssea, lesão do periósteo) , doenças dos órgãos do aparelho digestivo (por exemplo, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn), doenças degenerativas dos nervos, (por exemplo, acidente vascular, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal raquidiano, acidentes cerebrovasculares, doença de Moyamoya), complicações diabéticas (por exemplo, distúrbios dos nervos, úlcera da pela, nefropatia, doenças da retina), doenças das células endoteliais vasculares (por exemplo, restenose após ACTP (angiopatia coronária transluminal percutânea), doenças do coração (por exemplo, taquiarritmia supraventricular, cardiomiopatia súbita, cardiomiopatia dilatada), doenças dentárias (por exemplo, doenças periodontais, feridas de extracção de dentes, feridas orais, doença do tecido periodontal) , úlcera de decúbito e glaucoma. 15 0 agente da presente invenção pode ser administrado como um fármaco concomitante, em combinação com outro agente para (1) complementar e/ou reforçar o efeito preventivo e/ou terapêutico do agente da presente invenção, (2) melhorar a cinética e a absorção do agente da presente invenção e reduzir a sua dose e/ou (3) aliviar os efeitos secundários do agente da presente invenção. 0 fármaco concomitante do agente da presente invenção com outro agente pode ser administrado sob a forma de uma combinação de fármacos, em que ambos os componentes são formulados numa preparação farmacêutica ou administrados como preparações farmacêuticas separadas. Quando administrado como preparação farmacêutica separada, inclui a administração simultânea e a administração em tempos diferentes. Além disso, a administração em tempo diferente pode ser efectuada, em primeiro lugar, administrando o agente da presente invenção e, em seguida, administrando o outro agente ou administrando primeiro o outro agente e, em seguida, administrando o agente da presente invenção e os respectivos processos de administração podem ser iguais ou diferentes uns dos outros. 0 outro agente pode ser um composto de baixo peso molecular, uma proteína de elevado peso molecular, um polipéptido, um polinucleótido (ADN, ARN ou um gene) , um anticorpo anti-paralelo ou de atracção ou uma vacina ou uma célula estaminal separada de um tecido. A dose do outro agente pode ser seleccionada, eventualmente, com base na dose utilizada clinicamente. Além disso, a proporção na mistura do agente da presente invenção com o outro agente pode ser selecionada, eventualmente, consoante a idade e o peso corporal do indivíduo a quem se vai aplicar o processo de administração, o período de administração, a doença a 16 ser tratada, os sintomas e a combinação. Por exemplo, pode-se utilizar de 0,01 a 100 partes em massa do outro agente com base em 1 parte em massa do agente da presente invenção. O outro agente pode ser administrado numa proporção opcional da combinação de uma ou duas ou mais espécies, eventualmente seleccionadas no grupo homólogo e no grupo heterogéneo que se mostra a seguir.
Exemplos do outro agente incluem um agente anti-trombótico, um agente de melhoramento da circulação, um dilatador do músculo liso brônquico, um fármaco anti-inflamatório, um anestésico local, um analgésico, um cimento ósseo, um lubrificante de articulações, um derivado da prostaglandina, uma proteína do factor endógeno de reparação, um gene do factor endógeno de reparação e várias células estaminais de órgãos.
Exemplos do agente anti-trombótico incluem preparações de heparina (heparina sódica, heparina cálcica, dalteparina sódica), anti-coagulantes orais (varfarina potássica), agentes anti-trombina (mesilato de gabexato, mesilato de nafamostato, argatrobano) , inibidores de aglutinação anti-plaquetária (aspirina, dipiridamol, cloridrato de ticlopidina, beraprost sódico, cilostazol, ozagrel sódico, cloridrato de sarpogrelato, eicosapentanoato de etilo), agentes trombolíticos (urocinase, tisocinase, alteplase, nateplase, monteplase, pamiteplase), inibidores do factor Xa e inibidores do factor Vila.
Exemplos do agente de melhoramento da circulação incluem tartarato de ifenprodilo, aniracetamo, cloridrato de donepezilo, cloridrato de amantadina, nicergolina, ibudilaste, um sistema de papaverina, um sistema de 17 nicotina, um antagonista de cálcio, um agonista do receptor β e um antagonista do receptor a.
Exemplos do dilatador do músculo liso brônquico incluem estimulantes β 2 (por exemplo, cloridrato de efedrina, sulfato de isiprenali, sulfato de salbutamol, cloridrato de tulobuterol), fármacos de teofilina (por exemplo, diprofilina, aminofilina, colina, teofilina) ou fármacos anti-colina (por exemplo, brometo de ipratrópio, brometo de flutrópio, brometo de oxitrópio) .
Exemplos de anestésicos locais incluem uma preparação de esteróides, procaina, cloridrato de cocaina, cloridrato de lidocaina e cloridrato de ropivacaína.
Exemplos inflamatórios indometacina, analgésicos pentazocina, eptazocina. de um analgésico incluem fármacos anti-não esteróides (FAINE) tais como aspirina, diclofenac, meloxicam e celecoxib, opióides tais como codeína e morfina, cloridrato de buprenorfina e bromidrato de
Exemplos do cimento ósseo incluem fosfato de cálcio.
Exemplos de lubrificante de articulações incluem suvenilo.
Exemplos de derivados de prostaglandina incluem PGE1, PGE2 e PGI2 ou os seus pró-fármacos, lipoPGEl, 6-oxoPGEl, derivados de 6-oxoPGEl, ornoprostilo, limaprostilo, enptostilo e misoprostol.
Exemplos de factor endógeno de reparação, de acordo com a "proteína do factor endógeno de reparação e o gene do 18 factor endógeno reparação" incluem o factor de crescimento endotelial vascular (FCEV), o factor de crescimento de hepatócitos (FCH), vários factores de crescimento de fibroblastos (FCF-a/b), factor β de transformação do crescimento (FTC-beta), factor de crescimento derivado de plaquetas (FCDP), angiopoietina, factor indutor de hipóxia (FIH), factor de crescimento semelhante à insulina (FCI), proteina morfogenética óssea (PMO), factor de crescimento do tecido conjuntivo (FCTC) e factor de crescimento epidérmico (FCE).
Quando o agente da presente invenção ou o fármaco concomitante do agente da presente invenção é usado com outro agente, para a finalidade descrita antes, é geralmente administrado sistemicamente ou topicamente numa forma oral ou parentérica. A sua dose varia consoante a idade, peso corporal, sintomas, efeito terapêutico, processo de administração, periodo de tratamento e similares, mas está geralmente dentro do intervalo de 1 ng a 100 mg por adulto e de uma só vez ou várias vezes por dia, por administração oral ou no intervalo de 0,1 ng a 50 mg por adulto, de uma só vez, de uma a várias vezes por dia, de uma a várias vezes por semana ou de uma a várias vezes em 3 meses, por administração parentérica, sob a forma de uma preparação persistente ou administrada continuamente na veia dentro do intervalo de 1 hora até 24 horas por dia. Dado que a dose varia sob várias condições, tal como descrito antes, existe um caso em que uma dose menor do que o intervalo anterior é suficiente ou um que requer uma administração que exceda o valor superior do intervalo. 19
Quando se administra o agente da presente invenção ou o fármaco concomitante com o agente da presente invenção com outro agente, ele é utilizado sob a forma de preparações sólidas para uso interno ou preparações liquidas para uso interno, para administração oral ou como injecções, injecções subcutâneas ou intramusculares, preparações externas, supositórios, gotas para os olhos, produtos para inalação e dispositivos clinico contendo preparações para administração parentérica. A preparação sólida para uso interno, para utilização na administração por via oral inclui comprimidos, pílulas, cápsulas, pós e grânulos. Estão incluídas nas cápsulas as cápsulas duras e as cápsulas moles.
Numa tal preparação sólida para uso interno, utiliza-se uma ou mais substâncias activas tal qual ou misturadas com um material de enchimento (lactose, manitol, glicose, celulose microcristalina, amido), um aglutinante (hidroxi-propilcelulose, polivinil-pirrolidona, aluminometassilicato de magnésio), um agente de desintegração (glicolato de celulose e cálcio), um lubrificante (estearato de magnésio), um agente estabilizador e um agente auxiliar de solubilização (ácido glutâmico, ácido aspártico) e usado, transformando a mistura numa composição farmacêutica. Se for necessário, pode ser revestido com um agente de revestimento (sacarose, gelatina, hidroxipropilcelulose, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose) ou revestido com duas ou mais camadas. Estão também incluídas outras cápsulas de uma substância absorvível tal como gelatina. A preparação líquida para uso interno, para utilização na administração por via oral inclui soluções, suspensões, emulsões, xaropes e elixires, aceitáveis sob o ponto de 20 vista farmacêutico. Nessa preparação liquida, dissolve-se, suspende-se ou emulsiona-se um ou mais princípios activos num diluente geralmente utilizado (água purificada, etanol, uma solução da sua mistura). Além disso, esta preparação líquida pode conter um agente humidificante, um agente de suspensão, um agente emulsionante, um adoçante, um aromatizante, um agente aromático, um conservante e um tampão.
As formas de dosagem para uso externo para utilização em administração parentérica incluem, por exemplo, pomadas, géis, cremes, fomentações, preparações adesivas, linimentos, gotículas para nebulização, produtos para inalação, produtos para pulverização, aerossóis, gotas para os olhos e gotas nasais. Além disso, podem estar selados com um polímero biodegradável e ser utilizados como dispositivos clínicos (sutura cirúrgica, um parafuso para uso no tratamento de fracturas ósseas) . Contêm um ou mais princípios activos e são preparados por um processo convencional conhecido ou com base em fórmulas geralmente utilizadas.
As pomadas são produzidas por um processo convencional conhecido ou com base numa fórmula geralmente utilizada. Por exemplo, são preparadas por suspensão ou fusão de um ou mais princípios activos numa base. A base da pomada seleciona-se entre as que são convencionalmente conhecidas ou geralmente utilizadas. Por exemplo, utiliza-se uma única substância ou uma mistura de duas ou mais substâncias, as quais se seleccionam entre ácidos gordos superiores ou ésteres de ácidos gordos superiores (ácido adípico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido oleico, éster do ácido adípico, éster do ácido mirístico, éster do ácido palmítico, éster do ácido esteárico, éster do ácido 21 oleico), ceras (cera de abelha, cera de baleia, ceresina), tensioactivos (éter alquílico de polioxietileno, éster de ácido fosfórico), álcoois superiores (cetanol , álcool estearilico, álcool cetoestearilico), óleo de silicone (dimetil-polissiloxano), hidrocarbonetos (vaselina hidrófila, vaselina branca, lanolina purificada, parafina liquida), glicóis (etileno-glicol, dietileno-glicol, propileno-glicol, polietileno-glicol, macrogol), óleos vegetais (óleo de ricino, azeite, óleo de sésamo, óleo de terebintina) , óleo animal (óleo de ricino, óleo de gema de ovo, esqualano, esqualeno), água, aceleradores de absorção e agentes que previnem erupções. Além disso, também podem estar contidos agentes que mantêm a humidade, conservantes, estabilizantes, antioxidantes e aromatizantes.
Os géis são produzidos por um processo convencional conhecido ou com base numa fórmula geralmente utilizada. Por exemplo, preparam-se por fusão de um ou mais princípios activos numa base. A base do gel seleciona-se entre as que são convencionalmente conhecidas ou geralmente utilizadas. Por exemplo, utiliza-se uma única substância ou uma mistura de duas ou mais substâncias que se seleccionam entre álcoois inferiores (etanol, álcool isopropilico), agentes de gelificação (carboximetil-celulose, hidroxietil-celulose, hidroxipropil-celulose, etil-celulose), agentes de neutralização (trietanolamina, di-isopropanolamina), tensioactivos (monoestearato de polietileno-glicol), gomas, água, aceleradores de absorção e agentes de prevenção de erupções. Além disso, podem conter conservantes, antioxidantes e aromatizantes.
Os cremes são produzidos por um processo convencional conhecido ou com base numa fórmula geralmente utilizada. Por exemplo, preparam-se por fusão ou emulsão de um ou mais 22 princípios activos numa base. A base do creme seleciona-se entre as que são convencionalmente conhecidas ou geralmente utilizadas. Por exemplo, utiliza-se uma única substância ou uma mistura de duas ou mais substâncias, as quais se seleccionam entre ésteres de ácidos gordos superiores, álcoois inferiores, hidrocarbonetos, álcoois poli-hídricos (propileno-glicol, 1,3-butileno-glicol) álcoois superiores (2-hexildecanol, cetanol), agentes emulsionantes (éteres alquílicos de polioxietileno, ésteres de ácidos gordos), água, aceleradores de absorção e agentes de prevenção de erupções. Além disso, podem conter conservantes, anti-oxidantes e aromatizantes.
As fomentações são produzidas por um processo convencional conhecido ou com base numa fórmula geralmente utilizada. Por exemplo, preparam-se pela fusão de um ou mais princípios activos numa base e, em seguida, espalham-se e revestem o material resultante amassado sobre um suporte. A base da fomentação seleciona-se entre as que são convencionalmente conhecidas ou geralmente utilizadas. Por exemplo, utiliza-se uma única substância ou uma mistura de duas ou mais substâncias que se seleccionam entre espessantes (ácido poliacrílico, polivinil-pirrolidona, acácia, amido, gelatina, metil-celulose), agentes de molhagem (ureia, glicerol, propileno-glicol), cargas de enchimento (caulino, óxido de zinco, talco, cálcio, magnésio), água, agentes de solubilização, agentes de viscosidade e agentes de prevenção de erupções. Além disso, podem conter conservantes, antioxidantes e aromatizantes.
As preparações adesivas são produzidas por um processo convencional conhecido ou baseiam-se numa fórmula normalmente utilizada. Por exemplo, preparam-se por fusão de um ou mais princípios activos numa base e depois são 23 espalhadas, de modo a revestir um suporte com este material. A base da preparação adesiva selecciona-se entre as bases conhecidas que são utilizadas convencionalmente. Por exemplo, utiliza-se uma única substância ou uma mistura de duas ou mais substâncias, que se seleccionam entre bases de polímeros, óleos e gorduras, ácidos gordos superiores, adesivos e agentes que previnem o exantema. Além disso, podem conter conservantes, antioxidantes e aromatizantes.
Os linimentos são produzidos por um processo convencional conhecido ou baseiam-se numa fórmula normalmente utilizada. Por exemplo, preparam-se por dissolução, suspensão ou emulsão de um ou mais princípios activos, numa substância única ou em duas ou mais substâncias seleccionadas entre água, álcoois (etanol, polietileno-glicol), ácidos gordos superiores, glicerol, sabão, emulsionantes e agentes de suspensão. Além disso, podem conter conservantes, antioxidantes e aromatizantes.
Para além dos diluentes geralmente utilizados, os nebulizadores e inaladores podem conter estabilizantes, tais como hidrogeno-sulfito de sódio e agentes-tampão capazes de conferir tonicidade, por exemplo, agentes de tonicidade tais como cloreto de sódio, citrato de sódio e ácido citrico. Os processos de produção de nebulizadores estão descritos, ilustrativamente, por exemplo, na patente norte-americana No. 2 868 691 e na patente norte-americana No. 3 095 355.
As soluções, suspensões, emulsões e injecções de sólidos que são utilizadas por dissolução ou suspensão num dissolvente antes da utilização estão incluídas nas preparações injectáveis para administração parentérica. As injecções são utilizadas por dissolução, suspensão ou 24 emulsão de um ou mais princípios activos num dissolvente. Estas injecções podem ser injectadas numa veia, uma artéria, num músculo, sob a pele, no cérebro, numa articulação, num osso e noutras regiões tópicas de órgãos ou são administradas directamente utilizando um cateter para vasos sanguíneos equipado com uma agulha. Como dissolvente utiliza-se, por exemplo, água destilada para injecção, soro fisiológico, óleo vegetal, álcoois tal como propileno-glicol, polietileno-glicol e etanol e as suas combinações. Além disso, essas injecções podem conter um estabilizante, um agente auxiliar de solubilização (ácido glutâmico, ácido aspártico, Polysorbate 80 (marca comercial registada)), um agente de suspensão, um agente emulsionante, um agente calmante, um agente tampão e um conservante. São produzidas por esterilização na fase final ou por uma operação asséptica. Além disso, é possível preparar uma preparação sólida asséptica, tal como uma preparação liofilizada e utilizá-la, por dissolução em água esterilizada ou destilada assepticamente ou outro dissolvente para injecção antes da sua utilização.
Os colírios, para administração parentérica, incluem uma solução oftálmica líquida, uma suspensão do tipo de líquido de colírio, uma emulsão líquida do tipo de colírio, um líquido de colírio do tipo do que se dissolve antes de ser utilizado e uma pomada oftálmica.
Estas gotas para os olhos são produzidas de acordo com um processo convencional conhecido. Por exemplo, utilizam-se por dissolução, suspensão ou emulsão de um ou mais princípios activos num dissolvente. Como dissolvente das gotas para os olhos utiliza-se, por exemplo, água purificada esterilizada, solução salina fisiológica, outros dissolventes aquosos ou dissolventes não aquosos para 25 injecção (por exemplo, óleo vegetal) e as suas combinações. Se necessário, as gotas para os olhos podem ainda conter substâncias selecionadas, opcionalmente, entre agentes de tonicidade (cloreto de sódio, glicerol concentrado), agentes-tampão (fosfato de sódio, acetato de sódio), tensioactivos (Polysorbate 80 (marca registada), estearato de polioxilo 40, óleo de ricino endurecido com polioxietileno), estabilizantes (citrato de sódio, edetato de sódio) e anti-sépticos (cloreto de benzalcónio, parabeno). São produzidos por esterilização, na fase final ou por uma operação asséptica. Além disso, é possível preparar uma preparação sólida asséptica, tal como uma preparação liofilizada e utilizá-la, por dissolução em água esterilizada ou destilada assepticamente ou outro dissolvente para injecção antes da sua utilização.
Como produtos de inalação para administração parentérica, podem incluir-se aerossóis, pós para inalação ou soluções para inalação e as referidas soluções para inalação podem estar sob a forma que é utilizada para dissolução ou suspensão em água ou noutro dissolvente apropriado, antes da sua utilização.
Estes produtos para inalação são produzidos de acordo com processos convencionais conhecidos.
Por exemplo, no caso das soluções para inalação, prepararam-se seleccionando eventualmente anti-sépticos (cloreto de benzalcónio, parabeno), agentes corantes, agentes-tampão (fosfato de sódio, acetato de sódio), agentes de tonicidade (cloreto de sódio, glicerol concentrado), espessantes (polímero de carboxivinilo) e aceleradores de absorção, se necessário. 26
No caso de pós para inalação, preparam-se seleccionando eventualmente lubrificantes (ácido esteárico e um seu sal), aglutinantes (amido, dextrina), agentes de enchimento (lactose, celulose), agentes corantes, anti-sépticos (cloreto de benzalcónio, parabeno) e aceleradores de absorção, se necessário.
Quando se administram soluções para inalação, normalmente utiliza-se um pulverizador (atomizador ou nebulizador) e geralmente utiliza-se um dispositivo de administração por inalação para pós quando se utilizam pós para inalação.
Nas composições para administração parentérica, incluem-se supositórios para administração rectal e pessários para administração vaginal que contêm um ou mais princípios activos e são formulados da maneira habitual.
Aplicação a regiões tópicas:
Quanto à administração tópica da presente invenção, o processo de administração não está particularmente limitado, desde que o agente da presente invenção ou um fármaco concomitante do agente da presente invenção com outro agente possa ser administrado topicamente às regiões com doença. Os respectivos exemplos incluem injecções e agentes de moldação para serem utilizados em músculos, sob a pele e na pele, vasos sanguíneos, músculo do coração, alvéolos, partes de articulações, vértebras, partes de ossos, parte da raiz de dentes e órgãos lesionados, dispositivos clínicos contendo preparações em que o agente da presente invenção ou um fármaco concomitante do agente da presente invenção com outro agente está contido num dispositivo clínico (espiras [stent], parafuso de fixação, 27 fixador, rosca) ou agentes de revestimento revestidos com eles, preparações sólidas tais como grânulos e pós, preparações adesivas, géis, pomadas, películas, preparação incluídas num polímero biodegradável ou incluídas em dispositivos clínicos.
Como preparação persistente da presente invenção, a preparação farmacêutica não está limitada, desde que o princípio activo possa ser administrado persistentemente a uma região de uma doença. Os respectivos exemplos incluem injecções de libertação prolongada (por exemplo, as preparações de microcápsulas, preparações de microesferas, preparações de nanoesferas), preparações de moldação (por exemplo, preparações de películas), pomadas, revestimentos em que o princípio activo está contido ou revestido num dispositivo clínico (stent, parafuso de fixação, fixador, sutura).
As preparações de microcápsulas, preparações de microesferas e preparações de nanoesferas da presente invenção são composições farmacêuticas de partículas finas com um polímero biodegradável, que contém, como ingrediente activo, um princípio activo .
Um polímero bioabsorvível está presente no sistema de libertação sustentada do fármaco da presente invenção, o que é conseguido por um polímero natural ou um polimero sintético. 0 mecanismo para controlar a sua taxa de libertação sustentada inclui assim um tipo de controlo da degradação, um tipo de controlo da dispersão ou um tipo de controlo de permeação da membrana.
Exemplos de um polímero natural tal como o polimero bioabsorvível da presente invenção, incluem polissacáridos 28 produzidos por plantas (por exemplo, celulose, amido, ácido alginico), polissacáridos e proteínas produzidos por animais (por exemplo, quitina, quitosano, colagénio, gelatina, albumina, glicosaminoglicano) e poliésteres e polissacáridos produzidos por microrganismos (por exemplo, poli-3-hidroxialcanoato, ácido hialurónico).
Além disso, exemplos de polímeros biodegradáveis incluem polímeros de ésteres de ácidos gordos ou os seus copolímeros, ésteres de ácidos poliacrílicos, ácidos poli-hidroxibutíricos, oxalatos de polialquileno, ésteres de poliorto, policarbonato e poliaminoácidos, que podem ser utilizados isoladamente ou como as suas misturas. Exemplos dos polímeros de ésteres de ácidos gordos ou os seus copolímeros incluem o ácido poliláctico, ácido poli-glicólico, ácido policítrico, ácido polimálico, succinato de polietileno, succinato de polibutileno, poli- -capro-lactona, adipato de tereftalato de polibutileno ou co-polímero de ácido láctico - ácido glicólico, que podem ser usados isoladamente ou como uma mistura. Para além destes, também se podem utilizar éster do ácido poli-a-ciano-acrílico, ácido poli^-hidroxi-butírico, oxato de politri-metileno, éster de poliorto, carbonato de poliorto, carbonato de polietileno, ácido ροΙί-γ-benzil-L-glutâmico, álcool polivinílico, carbonato de poliéster, anidrido de poliácido, acrilato de policiano, polifosfazina ou poli-L-alanina, isoladamente ou como uma mistura deles. Os preferidos são o ácido poliláctico, o ácido poliglicólico ou um copolímero de ácido láctico - ácido glicólico e, o mais preferido, é um copolímero de ácido láctico - ácido glicólico. 0 peso molecular médio destes polímeros biodegradáveis de elevado peso molecular, para serem usados na presente 29 invenção é, de preferência, de cerca de 2000 a cerca de 800 000, mais preferivelmente de cerca de 5000 a cerca de 200 000. Por exemplo, no caso de o ácido poliláctico, o seu peso molecular médio é de preferência de cerca de 5000 a cerca de 100 000. Mais preferivelmente é de cerca de 6000 a cerca de 50 000.No caso do copolimero de ácido láctico -ácido glicólico, a proporção entre as composições de ácido láctico e ácido glicólico é, de preferência, de cerca de 100/0 a cerca de 50/50 (p/p), em particular e preferencialmente de cerca de 90/10 a aproximadamente 50/50 (p/p). O peso molecular médio ponderado do copolimero de ácido láctico - ácido glicólico é, preferencialmente, de cerca de 5000 a cerca de 100 000. Mais preferivelmente é de cerca de 10 000 a cerca de 80 000. O copolimero de ácido láctico - ácido glicólico pode ser sintetizado de acordo com um processo de produção conhecido convencionalmente. Além disso, para controlar a proliferação inicial, podem adicionar-se aminoácidos básicos (por exemplo, ácido alginico).
De acordo com a descrição, o peso molecular médio ponderado é um peso molecular, com base no poliestireno, medido por cromatografia de permeação em gel (CPG). O polímero biodegradável descrito antes, com um peso molecular elevado, pode ser alterado, consoante a intensidade da actividade farmacológica do principio activo e a libertação do fármaco de interesse, desde que o objecto da presente invenção seja alcançado e, por exemplo, é utilizado numa quantidade de cerca de 0,2 a cerca de 10 000 vezes (proporção em peso), de preferência de cerca de 1 a cerca de 1000 vezes (proporção em peso), mais, de cerca de 1 a cerca de 100 vezes (proporção em peso) , com base na 30 referida substância activa sob o ponto de vista fisiológico.
As microesferas, microcápsulas e nanocápsulas da presente invenção podem ser produzidas, por exemplo, por um processo de secagem submersa (por exemplo, o processo de o/a, o processo de a/o, o processo de a/o/a), um processo de separação de fases, um processo de secagem por pulverização, um processo de granulação de fluidos supercriticos ou um processo correspondente. A seguir descrevem-se os processos de produção específicos de secagem submersa (processo de o/a) e de secagem por pulverização. (1) No processo de secagem submersa (processo de o/a) prepara-se, em primeiro lugar, uma solução de um polímero biodegradável num dissolvente orgânico. É preferível que o dissolvente orgânico que se utiliza na produção das microesferas, microcápsulas e nanocápsulas da presente invenção tenha um ponto de ebulição de 120 °C ou menos. Exemplos do dissolvente orgânico incluem hidrocarbonetos halogenados (por exemplo, di-clorometano, clorofórmio), ésteres alifáticos (por exemplo, acetato de etilo), éteres, hidrocarbonetos aromáticos e cetonas (acetona) . Dois ou mais deles podem ser utilizados em misturanuma proporção opcional. 0 dissolvente orgânico desejável é o diclorometano ou o acetonitrilo. O dissolvente orgânico é, de preferência, diclorometano. A concentração do polímero biodegradável na solução de dissolvente orgânico varia consoante o peso molecular do polímero biodegradável e o tipo de dissolvente orgânico, mas seleciona-se, geralmente, num intervalo de cerca de 0,01 a cerca de 80 % (v/p). É, de 31 preferência de cerca de 0,1 até cerca de 70 % (v/p) , mais preferencialmente, de cerca de 1 até cerca de 60 % (v/p).
Adiciona-se um principio activo, à solução de polímero biodegradável assim obtida, em dissolvente orgânico, e ele dissolve-se. A quantidade deste princípio activo a adicionar varia consoante o tipo de agente, a acção de angiogénese e o efeito persistente no período de tempo, mas é de cerca de 0,001 % até cerca de 90 % (p/p) , de preferência de cerca de 0,01 % a cerca de 80 % (p/p), mais preferencialmente de cerca de 0,3 % a 30 % (p/p), como concentração do polímero biodegradável de elevado peso molecular na solução de dissolvente orgânico.
Em seguida, a solução de dissolvente orgânico assim preparada é ainda adicionada a uma fase aquosa para formar uma emulsão de o/a, utilizando um agitador ou um emulsionante. 0 volume de fase aquosa, neste caso, seleciona-se, geralmente, entre cerca de 1 vez a cerca de 10 000 vezes o volume da fase oleosa. Selecciona-se, mais preferencialmente, entre cerca de 2 vezes a cerca de 5000 vezes. Selecciona-se, mais preferencialmente entre cerca de 5 vezes a cerca de 2000 vezes. Pode-se adicionar um agente emulsionante à fase aquosa, da fase exterior descrita antes. O agente emulsionante pode ser qualquer agente que possa, no geral, formar uma emulsão (o/a) estável. Exemplos do agente de emulsão incluem um agente tensioactivo aniónico, um tensioactivo não iónico, um derivado de óleo de rícino e polioxietileno, polivinil-pirrolidona, álcool polivinílico, carboxi-metilcelulose, lecitina e gelatina. Podem ser utilizados numa eventual combinação. A concentração do agente emulsionante, na fase aquosa externa, é, de preferência, de cerca de 0,001 % até cerca de 20 % (p/p). É, mais preferivelmente, de cerca de 0,01 % a 32 cerca de 10 % (p/p), em particular e preferencialmente de cerca de 0,05 % a cerca de 5 % (p/p).
Utiliza-se um processo geralmente utilizado para a evaporação do dissolvente na fase de óleo. O processo realiza-se à pressão normal ou reduzindo gradualmente a pressão, sob agitação, utilizando um agitador ou um agitador magnético ou utilizando um evaporador rotativo, ao mesmo tempo que se ajusta o grau de vácuo. Após o fraccionamento das microesferas assim obtidas, por centrifugação ou filtração, lava-se várias vezes, repetidamente, o principio activo livre, que emulsiona o agente que aderiu à superfície das microsferas com, por exemplo, uma solução de agente tensioactivo ou com um álcool e as microesferas resultantes são de novo dispersas em água destilada ou num meio de dispersão contendo um agente de enchimento (manitol, sorbitol, lactose) e liofilizam-se. Como processo de o/a descrito antes, as microesferas podem ser produzidas por um processo no qual se dispersa um principio activo numa solução de dissolvente orgânico de polimero biodegradável, nomeadamente um processo de d/o/a. (2) Quando se produzem microesferas por um processo de secagem por pulverização, pulveriza-se um dissolvente orgânico, no qual um polimero biodegradável e um principio activo estão dissolvidos ou uma emulsão dos mesmos, para dentro de uma câmara de secagem de um aparelho de secagem por pulverização (atomizador) utilizando uma agulheta e o dissolvente orgânico ou a água em goticulas de partículas finas evapora-se num período de tempo extremamente curto, para preparar as microesferas. Como agulheta, existe um tipo de agulheta de duplo fluido, um tipo de agulheta de pressão e um tipo de disco rotativo. Neste caso, com a finalidade de prevenir a agregação das microesferas, se necessário, é 33 eficaz pulverizar um dissolvente orgânico ou uma solução aquosa de um agente de prevenção da agregação (manitol, lactose, gelatina) por meio de outro injector, simultaneamente com a pulverização da emulsão de o/a. Como as microesferas assim obtidas, a remoção completa da água e do dissolvente nas microsferas é realizada a uma pressão reduzida, com aquecimento, se necessário.
Exemplos de preparações de películas incluem aquelas em que o polímero biodegradável descrito antes e o ingrediente activo, são dissolvidos num dissolvente orgânico e em seguida evaporam-se até à secagem para formar uma película ou em que o polímero biodegradável e o ingrediente activo são dissolvidos num dissolvente apropriado e, em seguida, são gelatinizados por adição de um agente de granulação (celuloses, policarbonatos).
As microesferas, microcápsulas e nanosferas da presente invenção podem ser feitas sob várias formas de dosagem da preparação farmacêutica, por exemplo, tal qual ou utilizando uma composição farmacêutica de forma esférica, em forma de haste, de agulha, de parafuso, filamentosa, granulada, de peliculas ou sob a forma de creme, tal como a substância material.
Além disso, a utilização desta preparação farmacêutica pode ser administrada como preparação parentérica para administração tópica (por exemplo, injecções e agentes de moldação utilizados no músculo, sob a pele e na pele, no músculo do coração, na cavidade abdominal, nos brônquios, nos vasos sanguíneos, alvéolos, região lesionada do endotélio vascular, cérebro, medula, no interior da dura-mater, fora da dura-mater, numa parte de uma articulação, 34 numa vértebra, parte do osso, parte periodontal e vários órgãos, preparações sólidas tais como grânulos e pós, preparações liquidas tais como suspensões, preparações adesivas, peliculas, pomadas, dispositivos clínicos contendo preparações nas quais o princípio activo está contido num dispositivo clínico (stent, parafuso, fio de sutura), agentes de revestimento revestindo-os). Além disso, podem ser administradas directamente, por exemplo, numa região isquémica do músculo cardíaco, usando um cateter nos vasos sanguíneos.
Por exemplo, quando se transformam as microesferas em injecções, na prática, as preparações farmacêuticas injectáveis podem obter-se preparando as microesferas sob a forma de suspensões aquosas em conjunto com um agente dispersante, um conservante, um agente de tonicidade, um agente tampão e um agente de ajuste de pH. Além disso, são transformadas em injecções que podem ser utilizadas, na prática, como suspensões oleosas por dispersão em conjunto com um óleo vegetal ou a sua mistura com fosfolípidos tal como lecitina ou um triglicérido de ácido gordo de cadeia média (por exemplo, Migliol 812). 0 tamanho de partícula das micro-esferas, por exemplo, quando usadas como injecções de suspensão, pode estar dentro de uma gama tal que o seu grau de dispersão e a limpeza da agulha sejam satisfeitos e uma gama de cerca de 0,1 a cerca de 300 ym, como dimensão média da partícula, pode ser exemplificativa. Estão, de preferência, dentro do intervalo de cerca de 1 a 150 ym, mais preferivelmente uma dimensão de partícula no intervalo de cerca de 2 a 100 ym. Como descrito antes, é preferível que a composição farmacêutica da presente invenção seja uma suspensão. É preferível que a composição farmacêutica da presente 35 invenção esteja sob a forma de partículas finas. A razão reside no facto de a composição farmacêutica não provocar nos doentes dor excessiva quando administrada através de uma agulha que é utilizada para injecções subcutâneas ou intramusculares. A composição farmacêutica da presente invenção é particularmente preferível sob a forma de injecções. Quando as microesferas são preparadas sob a forma de preparações estéreis, realiza-se um processo em que todas as etapas de produção são realizadas sob condições de assepsia, um processo em que são esterilizadas com raios gama, um processo em que se pode adicionar um agente antisséptico, embora não esteja particularmente limitado. A acção do ingrediente activo da composição farmacêutica da presente invenção tem uma propriedade de libertação sustentada e o período de libertação sustentada varia consoante o tipo e a quantidade de polímero biodegradável na mistura, tem um período de libertação sustentada, geralmente entre 1 semana e 3 meses, de modo que se pode usar como um acelerador de indução de diferenciação de células estaminais ou um acelerador de angiogénese através da aceleração da produção de vários factores endógenos de reparação (isquémia) de regiões doentes de órgãos.
Embora a dose da composição farmacêutica da presente invenção varie consoante o tipo e o teor do princípio activo, as formas de dosagem, o período de tempo de persistência da libertação do fármaco, o animal a que vai ser administrada, pode ser uma quantidade eficaz do princípio activo. Por exemplo, quando a composição é utilizada sob a forma de microesferas numa região isquémica, pode ser administrada numa dose de cerca de 36 0,001 mg a 500 mg, de preferência de cerca de 0,01 mg a 50 mg, de uma vez, de componente activo, por adulto (50 kg de peso corporal), de uma vez por dia a uma vez em 3 meses.
Além disso, para a sensação de frio, entorpecimento, claudicação intermitente, dor em repouso ou úlcera da pele dos membros no caso de ASO, doença de Buerger ou neuropatia diabética, é preferível efectuar uma administração intramuscular do agente da presente invenção ou a sua preparação persistente, por exemplo, na região doente ou na sua proximidade, continuadamente, durante um período de cerca de uma vez por dia até 4 semanas.
No caso de osteoporose, lesão tecidual periodontal, fractura óssea e osteoartrite, é preferível administrar o agente da presente invenção ou a sua preparação persistente isoladamente ou misturando-a com um cimento ósseo, um lubrificante de articulações, uma ferramenta protética ou a ligação, topicamente, na região doente ou na sua proximidade.
No caso da hipertensão pulmonar e DPOC, é preferível efectuar a inalação do agente da presente invenção ou a sua preparação persistente, sob a forma de soluções para inalação ou pós para inalação.
Breve descrição dos desenhos A fig. 1 mostra um resultado da medição da acção da aceleração da formação de órgão côncavo pelo composto 1, o ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilidenoaminoxi]-etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]-acético. 37 A fig. 2 mostra o resultado de um ensaio de libertação da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 1. A fig. 3 mostra o resultado de um ensaio de libertação da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2. A fig. 4 mostra o resultado de um ensaio de libertação da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 3. A fig. 5 mostra o resultado da medição das acções de aceleração da formação de órgãos ocos por parte do composto de referência 3 (ácido ((5Z,9β,11α,13E)-17,17-propano-11,16-di-hidroxi-9-cloro-20-norprost-5,13-dienóico) e do composto de referência 4 ((11α,13E,15a)-9-oxo-ll,15-di- hidroxi-16-(3-metoximetilfenil)-17,18,19,20-tetranor-5-tia-prost-13-enóico).
Melhor prática para a realização da presente invenção
Os ensaios farmacológicos são ilustrados a seguir como exemplos da presente invenção, mas destinam-se ao entendimento completo da presente invenção e não limitam o âmbito da presente invenção. Neste contexto, a melhoria da precisão da medição e a modificação da sensibilidade da medição foram aplicadas como se segue aos processos de medição para a avaliação dos compostos da presente invenção.
Exemplo 1
Medição da acção de aceleração da angiogénese (in vitro) : Método de ensaio: 38
Fez-se a cultura a partir de um estojo de angiogénese (fabricado pela Kurabo; constituído por células endoteliais vasculares humanas da veia do cordão umbilical e fibroblastos normais da pele humana) durante 3 horas e, em seguida, o meio de cultura (o meio para o uso em angiogénese, anexo ao estojo de angiogénese, foi usado como o meio de cultura e fez-se a cultura a 37 °C, num ambiente húmido com 5 % de dióxido de carbono e 95 % de ar e utilizou-se uma incubadora de dióxido de carbono BNA-121D) foi modificado e adicionou-se, a cada poço (0,5 ml/poço), o agente a ser ensaiado. A troca de meio foi realizado também nos 3o, 6o e 8o dias após o início da cultura e adicionou-se o agente de fresco a ser ensaiado. O tipo e a concentração do agente a ser ensaiado não foram tratados, dissolvente (DMSO) a 0,1 %, composto 1 10”9, 10“8 e 10”7 mole/1, FCEV-A 0,1, 1 e 10 ng/ml e FCH 0,1, 1 e 10 ng/ml e fez-se a cultura utilizando 3 poços para cada concentração. A fixação foi realizada 10 dias após o início da cultura e realizou-se a coloração do órgão oco com o anticorpo anti-CD31 usando um estojo de coloração de órgãos ocos (fabricado pela Kurabo). Como avaliação, montou-se uma rede de Chalkley (lentes de uma rede, fabricadas pela Kurabo) na ocular de um microscópio e avaliou-se a formação de órgãos ocos por contagem de intersecções dos pontos arranjados aleatoriamente da rede de Chalkley com o órgão oco formado (referindo ao processo de avaliação de J. Pathol., 177, 275-283 (1995)) . A contagem foi realizada em 12 posições por poço e calculou-se o total.
Como agente a ser ensaiado, o composto 1, (o ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilidenoaminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético) , isto é, o agente activo da presente invenção, foi dissolvido em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para se preparar soluções de 10‘4, IO”5 e 39 10 6 mole/1 que foram então utilizadas por diluição no tempo a 1/1000 com o meio de cultura.
Como FCEV A (factor de crescimento endotelial vascular A), a solução de 2 yg/ml de FCEV, contida no estojo da Kurabo de reagente de controlo da angiogénese, foi diluída com o meio de cultura e foi utilizada.
Como FCH (factor de crescimento de hepatócitos humanos) , diluiu-se a solução de 5 yg/ml de FCH, adquirida na R & D System-Funakoshi, com o meio de cultura e utilizou-se.
Processo de análise estatística:
As contagens da formação de órgãos ocos nos poços não tratadas foram comparadas com as dos poços tratados com as as concentrações respectivas das amostras de ensaio, pelo teste de Dunnett (ensaio de duas faces). 0 nível de significância foi fixado em 5 %. A este respeito, os dados foram apresentados em termos de valor médio de 3 poços e desvio padrão.
Os resultados do ensaio estão ilustrados na fig. 1. Resultados: 0 composto 1 acelerou a formação de órgãos ocos, de forma estatisticamente significativa, na ordem de 10”8 e 10“7 mole/1. Além disso, o FCEV-A e o FCH aceleraram a formação de órgãos ocos, numa concentração de 10 ng/ml. Com base nos resultados anteriores, foi revelado que o composto 1 tem um efeito de acelerar a angiogénese que tem uma força 40 equivalente à dos agentes de controlo positivo FCEV-A e FCH num sistema de co-cultura de células endoteliais vasculares humanas e fibroblastos humanos.
Exemplo 2
Medição da acção que produz proteína (in vitro) do factor endógeno de reparação (FCH, FCEV): Método de ensaio:
Fez-se a cultura a partir de um estojo de angiogénese (fabricado pela Kurabo; constituído por células endoteliais vasculares humanas da veia do cordão umbilical e fibroblastos normais da pele humana) durante 3 horas e, em seguida, mudou-se o meio de cultura (o meio para o uso da angiogénese, anexo ao estojo de angiogénese, foi usado como o meio de cultura e fez-se a cultura a 37 °C, num ambiente húmido, com 5 % de dióxido de carbono e 95 % de ar e utilizou-se uma incubadora de dióxido de carbono BNA-121D) e adicionou-se, a cada poço (0,5 ml/poço) o agente a ser ensaiado. O agente a ser ensaiado foi o dissolvente (DMSO) a 0,1 % e o composto 1 a 10~7 mole/1 e realizou-se a cultura utilizando 3 poços para cada um. Os sobrenadantes das culturas foram recolhidos antes do início da cultura e 1, 2, 6, 24, 48 e 72 horas após o seu início. As concentrações da proteína de FCH e de FCEV nos sobrenadantes da cultura foram medidas utilizando um estojo de ELISA (sistema de R % D - Funakoshi).
Como agente a ser ensaiado, dissolveu-se o composto 1, (ácido ((E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilidenoaminoxi]-etil]-7, 8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para se preparar uma solução de IO"4 mole/1 41 que foi então utilizada com uma diluição de 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Os resultados de todos os poços de controlo com dissolvente foram comparados com os dos poços tratados com o agente a ser ensaiado pelo ensaio de Dunnett (ensaio de duas faces). O nível de significância foi fixado em 5 %. A este respeito, os dados foram apresentados em termos de valor médio de 3 poços e desvio padrão.
Os resultados do ensaio, após 72 horas de cultura, estão ilustrados no quadro 1. QUADRO 1
Agente ensaiado FCH (pg/ml) FCEV (pg/ml) Dissolvente de controlo (DMSO) Composto 1 110 ± 16 518 ± 15*** 2004 ± 76 3034 ± 30*** ***: p < 0,001 vs. dissolvente de controlo
Resultados: O composto 1 acelerou a produção da proteína de FCH e da proteína de FCEV de uma forma estatisticamente significativa em comparação com o controlo do dissolvente, por meio de 72 horas de cultura a uma concentração de 10“7 mole/1.
Exemplo 3
Produção de preparações persistentes: 42
Exemplo de preparação 1
Preparou-se o composto 1 (5 mg) e uma solução em diclorometano (1 ml) de 100 mg de um copolímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico (a seguir designado por "PLGA") (ácido poliláctico : ácido glicólico =1:1 1 (mole %) , peso molecular ponderado de 40 000, PLGA5-1, fabricado pela Mitsui Kagaku). Preparou-se uma emulsão de O/A por adição da solução preparada antes a 300 ml de uma solução aquosa de álcool polivinilico a 0,1 % (Nacalai Tesque) (pH 3,0, ajustado com ácido clorídrico 1 N) , que se agitou a 5000 rpm utilizando um TK Robomix (Tokushu Kiki, do tipo MARK II 2.5) e agitou-se a mistura, à temperatura ambiente, durante 3 minutos. Agitou-se esta emulsão de O/A, à temperatura ambiente, durante 2 horas, para evaporar o diclorometano e solidificou-se a fase oleosa e depois centrifugou-se, a 3000 rpm, durante 10 minutos, utilizando uma centrifugadora (Hitachi, 05PR-22). O sobrenadante foi eliminado e o resíduo foi disperso em água destilada para injecção (35 ml) e em seguida centrifugado a 3000 rpm, durante 10 minutos, usando a centrifugadora. O sobrenadante foi eliminado e o resíduo foi disperso numa solução de Tween 80 a 0,2 % (35 ml) e em seguida centrifugado, a 3000 rpm, durante 10 minutos usando a centrifugadora. O sobrenadante foi eliminado e o resíduo foi disperso em água destilada para injecção (35 ml) e em seguida novamente centrifugado, a 3000 rpm, durante 10 minutos usando a centrifugadora. Finalmente, descartando o sobrenadante, o precipitado foi embebido em metanol e gelo seco, congelou-se e, em seguida, secou-se a pressão reduzida, produzindo desse modo uma preparação de microsferas do composto 1. 43
Exemplo de preparação 2
Preparou-se o composto 1 (5 mg) e uma solução em diclorometano (1 ml) de 100 mg de um copolímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico (a seguir designado por "PLGA") (ácido poliláctico : ácido glicólico = 1:1 (mole %) , peso molecular médio ponderado de 20 000, PLGA5020,
Wako Pure Chemical Industries). Depois disso, realizou-se a mesma operação do exemplo de preparação 1 para produzir uma preparação de microsferas do composto 1.
Exemplo de preparação 3
Preparou-se o composto 1 (5 mg) e uma solução em diclorometano (3 ml) de 100 mg de um copolímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico (a seguir designado por "PLGA") (ácido poliláctico : ácido glicólico = 1:1 (mole %) , peso molecular médio ponderado de 40 000, PLGA5-1, fabricado pela Mitsui Kagaku). Depois disso, realizou-se a mesma operação do exemplo de preparação 1 para produzir uma preparação de microsferas do composto 1.
Exemplo de preparação do ensaio 1
Medição da eficiência da inclusão:
As microesferas produzidas nos exemplos de preparação 1, 2 e 3 (cerca de 10 mg, respectivamente) foram misturadas com uma solução de acetonitrilo contendo um padrão interno adeguado e dissolveram-se mediante a realização de um tratamento com ultrassons. Mediu-se o teor de composto 1 de cada uma das soluções por cromatograf ia líquida de alta resolução e calculou-se a eficiência de inclusão do composto 1 na microsfera através da seguinte fórmula. 44
Eficiência da inclusão (%) = (teor encontrado/teor calculado x 100
Como resultado, a preparação de microesferas do exemplo de preparação 1 demonstrou uma eficiência de inclusão de 70,9 %, a preparação de microesferas do exemplo de preparação 2 demonstrou uma eficiência de inclusão de 100 % e a preparação de microesferas do exemplo de preparação 3 demonstrou uma eficiência de inclusão de 74,3 %.
Exemplo do ensaio de preparação 2: ensaio de libertação in vitro:
Adicionou-se, como agente, a cada uma das preparações de microsferas produzidas nos exemplos de preparação 1, 2 e 3, Tween 80 a 0,2 %, em tampão de fosfato 1/15 M, a pH 6,8 até a uma concentração de 100 pg/ml e dispersou-se uniformemente por tratamento com ultrassons usando um Vortex. Distribuiu-se por recipientes de 1 ml e colocou-se num forno a uma temperatura constante de 37 °C. Retiraram-se periodicamente as amostras dos recipientes e centrifugaram-se a 12 000 rpm, durante 5 minutos e mediu-se a quantidade residual de composto 1 nas microesferas da suspensão, por cromatografia liquida de alta resolução (CLAR).
Os resultados da preparação das microsferas produzidas no exemplo de preparação 1 estão ilustrados na fig. 2 e os resultados da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2 na fig. 3 e os resultados da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 3 na fig. 4. 45
Neste contexto, a taxa residual, nas figs. 2, 3 e 4, significa uma proporção entre o composto 1 remanescente nas microesferas e o composto inicial.
Como resultado, a preparação de microsferas do exemplo de preparação 1 libertou cerca de 40 % do agente durante 14 dias e a preparação de microsferas do exemplo de preparação 2 libertou a totalidade da quantidade durante cerca de 10 dias. A preparação de microsferas do exemplo de preparação 3 libertou cerca de 60 % durante 28 dias.
Exemplo 4
Ensaio de angiogénese (ensaio ín vivo) utilizando um modelo de isquémia de uma perna de rato (arteriosclerose obliterante (ASO)):
Preparou-se o modelo de isquémia da perna ligando a artéria femoral do rato. O fluxo sanguíneo nas patas traseiras foi medido por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) 2 semanas após a preparação e dividiram-se os animais em 6 grupos (n = 5), de tal forma que o valor médio do fluxo sanguíneo se tornou quase uniforme. A partir do dia seguinte ao do agrupamento administrou-se 0,1 ml/local, em 2 sitios, do agente a ser ensaiado, por injecção intramuscular no adutor femoral esquerdo, uma vez por semana, 4 vezes no total, sob a forma de uma solução a ser ensaiada. Uma semana após a conclusão da administração final, mediram-se os fluxos sanguíneos das patas traseiras por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) e os fluxos sanguíneos da perna tratada (perna esquerda) e da perna não 46 tratada (perna direita) foram comparados e analisados. Os resultados da perna tratada/perna não tratada (%) estão ilustrados no quadro 2. A este respeito, a preparação da solução a ser ensaiada é a que se segue. Grupo do dissolvente (controlo): solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml).
Grupo do polimero:
Fez-se uma suspensão do co-polímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico utilizado no exemplo de preparação 2, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml) . Neste contexto, a quantidade de copolímero de ácido poliláctico - ácido glicólico é idêntica à quantidade contida no composto 1 ME (1 mg).
Grupo do composto 1 (1 mg):
Fez-se uma suspensão do composto 1 (1 mg) numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml).
Grupo do composto 1 ME (0,01 mg): A preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,01 mg do composto 1 foi suspensa numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml).
Grupo das ME do composto 1 (0,1 mg): A preparação das microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,1 mg do composto 1, foi suspensa numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml). 47
Grupo das ME do composto 1 (1 mg): A preparação das microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 1 mg do composto 1, foi suspensa numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml). QUADRO 2
Solução a ser ensaiada Taxa de fluxo sanguíneo da perna tratada/perna não tratada (%) Controlo 67,3 ± 5,1 Polímero 68,7 ± 4,1 Grupo do composto 1 (1 mg) 76,2 ± 2,8**" Grupo do composto 1 ME (0,01 mg) 74,0 ±7,1 Grupo do composto 1 ME (0,1 mg) 78,3 ± 4, 6**" Grupo do composto 1 ME (1 mg) 89,0 ± 4,4**"“ **T: Diferença significativa do controlo a p < 0,01 (teste t de Student) ##: diferença significativa do polímero a p < 0,01 (teste t de Student) $$: diferença significativa do composto 1 (1 mg) a p < 0,01 (teste t de Student)
Resultados:
Embora a recuperação significativa do fluxo sanguíneo tenha sido observada em função do controlo, mesmo através da administração apenas do composto 1 (1 mg), observou-se ainda um efeito superior do fluxo sanguíneo do que com o composto 1 (1 mg) pela administração da preparação de microesferas (ME) (exemplo de preparação 2) do Composto 1.
Em comparação com o grupo de polímeros, verificou-se o efeito de melhoria do fluxo sanguíneo relacionado com a dose no composto 1 das ME e verificou-se uma acção do efeito significativo de melhoria do fluxo sanguíneo no Composto 1 nas ME (0,1 mg) e no composto das 1 em ME (1 mg) .
Exemplo 5 48
Ensaio de angiogénese utilizando um modelo de isquémia de uma perna de rato (arteriosclerose obliterante (ASO)); determinação da dose minima eficaz (ensaio in vivo):
Preparou-se o modelo de isquémia da perna ligando a artéria femoral esquerda do rato. 0 fluxo sanguíneo nas patas traseiras foi medido por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) 1 semana após a preparação e dividiram-se os animais em 4 grupos (n = 5) , de tal forma que o valor médio do fluxo sanguíneo se tornou quase uniforme. A partir do dia seguinte ao do agrupamento, administrou-se 0,1 ml/local, em 2 sitios, do agente a ser ensaiado, por injecção intramuscular no adutor femoral esquerdo (grupo de polímeros, grupo das ME do composto 1), uma vez por semana, 4 vezes no total, sob a forma de uma solução a ser ensaiada. Uma semana após a conclusão da administração final, mediram-se os fluxos sanguíneos das patas traseiras por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) e os fluxos sanguíneos da perna tratada (perna esquerda) e da perna não tratada (perna direita) foram comparados e analisados. Os resultados na perna tratada/perna não tratada (%) estão ilustrados no quadro 3. A este respeito, a preparação da solução a ser ensaiada é a que se segue.
Grupo do polímero:
Fez-se uma suspensão do co-polímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico, utilizado no exemplo de preparação 2, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 49 ml) . Neste contexto, a quantidade de copolímero de ácido poliláctico - ácido glicólico é idêntica à quantidade contida no composto 1 das ME (0,1 mg).
Grupo das ME do composto 1 (0,03 mg):
Fez-se uma suspensão da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,03 mg do composto 1, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml) .
Grupo das ME do composto 1 (0,1 mg):
Fez-se uma suspensão da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,1 mg do composto 1, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml).
Grupo das ME do composto 1 (0,3 mg):
Fez-se uma suspensão da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,3 mg do composto 1, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml). QUADRO 3
Solução a ser ensaiada Taxa de fluxo sanguíneo da perna tratada/perna não tratada (%) Polímero 57,3 1 4,5 Grupo do composto 1 em ME (0,03 mg) 65,1 1 3,7* Grupo do composto 1 em ME (0,1 mg) 68,4 ± 3,2** Grupo do composto 1 em ME (0,3 mg) 72,7 1 4,6** *: p< 0,05 vs. polímero (teste t de Student) **: p< 0,01 vs. polímero (teste t de Student)
Resultados:
Em comparação com o grupo de polímeros, verificou-se o efeito de melhoria do fluxo sanguíneo relacionado com a 50 dose na preparação de microesferas (ME) do composto 1 e verificou-se uma acção do efeito significativo de melhoria do fluxo sanguíneo nas ME do composto 1 (0,03 mg) . Assim, dado que não se verificou uma acção significativa do efeito de melhoria do fluxo de sangue nas ME do composto 1 (0,01 mg) do exemplo 4, foi sugerido que a dose eficaz minima fosse de 0,03 mg.
Exemplo 6
Ensaio de angiogénese utilizando um modelo de isquémia de uma perna de rato (arteriosclerose obliterante (ASO)); utilidade da administração tópica (ensaio in vivo):
Preparou-se o modelo de isquémia da perna ligando a artéria femoral do rato. O fluxo sanguíneo nas patas traseiras foi medido por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) , 1 semana após a preparação e dividiram-se os animais em 4 grupos (n = 5), de tal forma que o valor médio do fluxo sanguíneo se tornou quase uniforme. A partir do dia seguinte ao do agrupamento, administrou-se 0,1 ml/local, em 2 sitios, do agente a ser ensaiado, por injecção intramuscular em regiões isquémicas do adutor femoral esquerdo (grupo dos polímeros, grupo do composto 1, grupo das ME do composto 1) e na região normal do ombro e na parte superior do membro (grupo das ME do composto 1), uma vez por semana, 4 vezes no total, sob a forma de uma solução a ser ensaiada. Uma semana após a conclusão da administração, mediram-se os fluxos sanguíneos das patas traseiras por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) e os fluxos sanguíneos da perna tratada (perna esquerda) e da perna não 51 tratada (perna direita) foram comparados e analisados. Os resultados da perna tratada/perna não tratada (%) estão ilustrados no quadro 4.
Neste contexto, a preparação da solução a ser ensaiada é a que se segue.
Grupo do polímero:
Fez-se uma suspensão do co-polímero de ácido poliláctico - ácido glicólico utilizado no exemplo de preparação 2, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml) . Neste contexto, a quantidade de copolímero de ácido poliláctico - ácido glicólico é idêntica à quantidade contida nas ME com o composto 1 (1 mg).
Grupo do composto 1 (0,1 mg):
Fez-se uma suspensão do composto 1 (0,1 mg) numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml).
Grupo das ME do composto 1 (0,1 mg): A preparação das microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,1 mg do composto 1 foi suspensa numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml). QUADRO 4
Solução a ser ensaiada Taxa de fluxo sanguíneo da perna tratada/perna não tratada (%) Polímero”' 57,3 ± 4,5 52
Composto 1 (0,1 mg)a| 60,5 ±3,1 ME do composto 1 (0,1 mg) w 56,9 ± 5,6 ME do composto 1 (0,1 mg)al 68,4 ± 3,2* a) : Administração intramuscular na parte femoral esguerda isguémica b) : Administração intramuscular na parte superior do braço direito normal **: p < 0,01 vs, polímero (teste t de Student)
Resultados :
Embora não se verificasse um aumento significativo no fluxo sanguineo, após a administração intramuscular das ME do composto 1 (0,1 mg) na parte superior do braço direito normal, verificou-se um aumento significativo do fluxo sanguineo após a administração intramuscular da mesma dose na parte femoral esquerda isquémica. Com base nisto, foi sugerido que a eficácia do composto 1 não é mediada pelo fluxo de sangue, mas é importante a sua administração tópica, nas regiões isquémicas. Além disso, uma vez que não se observou um aumento significativo da acção do fluxo sanguineo com a administração tópica do composto 1 na região isquémica, foi sugerida a eficácia da preparação persistente (ME).
Exemplo 7
Ensaio de angiogénese utilizando um modelo de isquémia de uma perna de rato (arteriosclerose obliterante (ASO)); acção vasodilatadora e acção de aceleração da angiógenese (ensaio in vivo) :
Preparou-se o modelo de isquémia da perna ligando a artéria femoral do rato. O fluxo sanguineo nas patas traseiras foi medido por meio de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments), 1 semana após a preparação e dividiram-se os animais em 2 grupos (n = 5), 53 de tal forma que o valor médio do fluxo sanguíneo se tornou quase uniforme. A partir do dia seguinte ao do agrupamento, administrou-se a solução a ser ensaiado, por injecção intramuscular no adutor femoral esquerdo (grupo de polímeros, grupo das ME do composto 1), uma vez por semana, 4 vezes no total. 0 fluxo sanguíneo nas patas traseiras foi medido 3 dias após a segunda administração (no 10° dia após o agrupamento) e passada 1 semana e 2 semanas após a administração final estar completa, por meio da utilização de um gerador de imagens de ultrassonografia a laser (Moor Instruments) e comparou-se e examinou-se os fluxos sanguíneos da perna tratada (perna esquerda) e da perna não tratada (perna direita). Os resultados da perna tratada/perna não tratada (%) estão ilustrados no quadro 5.
Neste contexto, a preparação da solução a ser ensaiada é feita como se segue.
Grupo do polímero:
Fez-se uma suspensão do co-polímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico utilizado no exemplo de preparação 2, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,2 ml) . Neste contexto, a quantidade de copolímero de ácido poliláctico - ácido glicólico é idêntica à quantidade contida no composto 1 das ME (0,3 mg).
Grupo das ME do composto 1 (0,3 mg): A preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 0,3 mg do composto 1 foi suspensa numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,2 ml). 54 QUADRO 5
Solução a ser ensaiada Taxa de fluxo sanguíneo da perna tratada/perna não tratada (%) Antes da Ia administração 3 Dias depois da 2a administração 1 semana após a 4a administração 2 Semanas após a 4a administração Polímero 36,7 ± 4,2 49,8 ± 5,8 57,3 ± 4,5 61,3 ± 2,5 Grupo das ME do composto 1 (0,3 mg) 3 6,6 ± 4,3 59, 9 ± 3,7* 72,7 ± 4,6* 72,4 ± 5,7** *: p < 0,05 vs, polímero (teste t de Student) **: p < 0,01 vs, polímero (teste t de Student)
Resultados:
Em comparação com o grupo a que se administrou polimero, observou-se um aumento significativo do fluxo sanguíneo de cerca de 10 % na região isquémica por acção das ME do composto 1 (0,3 mg), mesmo no 10° dia após a Ia administração (3 dias após a 2a administração) . Dado que é necessário um periodo de cerca de 4 semanas para a angiogénese e o composto 1 é libertado na região isquémica tópica, 3 dias após a 2a administração, sugeriu-se que este efeito de melhoria é um efeito de aumento do fluxo sanguíneo através de acções directas, tais como acção vasodilatadora e a acção inibidora da aglutinação de plaquetas do composto 1 libertado lentamente. Além disso, observou-se uma acção significativa de aumento do fluxo sanguíneo de cerca de 11 % após 1 semana e 2 semanas, após o final da administração. Com base nisto, considerou-se que esta libertação do composto 1 a partir da preparação de microsferas tinha desaparecido completamente uma semana após a administração final e foi sugerido que este efeito não era uma acção directa do composto 1 (acção vasodilatadora, acção inibidora da aglutinação de plaquetas), mas um efeito pela acção da angiogénese.
Exemplo 3 55
Ensaio de angiogénese (ensaio in vivo) utilizando um modelo de transplante de esponja de murganho:
Sob anestesia, fez-se uma incisão na parte dorsal de um rato e incorporou-se ai um disco de uma esponja de uretano (cerca de 5 mm de espessura e 13 mm de diâmetro). A administração do agente foi realizada por administração tópica directamente na esponja, uma vez por dia durante um total de 14 vezes a partir do dia da preparação do modelo de transplante da esponja ou no dia da conclusão da operação e 7 dias depois. No 15 ° dia após o transplante de esponja, extraiu-se o tecido de granulação contendo a esponja e observou-se a olho nu e depois mediu-se a sua massa húmida. Depois, misturou-se com água destilada numa quantidade 4 vezes maior do que a quantidade de massa húmida, homogeneizou-se e centrifugou-se e, em seguida, submeteu-se o sobrenadante à medição do teor de hemoglobina usando hemoglobina β - ensaio Wako (fabricado pela Wako Pure Chemical Industries). Os resultados da medição do teor total de hemoglobina, nas esponjas extraídas estão ilustrados no quadro 6.
Neste contexto, a preparação da solução a ser ensaiada é a que se segue,
Grupo do polímero:
Fez-se uma suspensão do co-polímero de ácido poli-láctico - ácido glicólico utilizado no exemplo de preparação 2, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,05 ml) . Neste contexto, a quantidade de copolímero de ácido poliláctico - ácido glicólico é idêntica à quantidade de composto 1 contida nas ME (200 yg) , 56
Grupo do composto 1 (20 pg):
Fez-se uma solução de Tween suspensão 80 a 0,2 % do p/v composto 1 (0,05 ml). (20 pg) numa Grupo do composto 1 (40 pg) : Fez-se uma solução de Tween suspensão 80 a 0,2 % do p/v composto 1 (0,05 ml) . (40 pg) numa Grupo do composto 1 (200 pg) : Fez-se uma solução de Tween suspensão 80 a 0,2 % do p/v composto 1 (0,05 ml) , (200 pg) numa Grupo das ME do composto 1 (200 pg) : Fez-se uma suspensão da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 200 pg do composto 1, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,05 ml) .
Grupo das ME do composto 1 (400 pg):
Fez-se uma suspensão da preparação de microsferas produzidas no exemplo de preparação 2, contendo 400 pg do composto 1, numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v, (0,05 ml) ,
Grupo do composto de referência 3 (ácido (5 Z,9β,11α,13E)-17,17-propano-ll,16-di-hidroxi-9-cloro-20-norprost-5,13-dienóico) (20 pg): 57
Fez-se uma suspensão do composto de referência 3 (20 pg) numa solução de Tween 80 a 0,2 % p/v (0,05 ml) . QUADRO 6
Solução a ser ensaiada Peso da esponja húmida (g) Teor de hemoglobina (mg/g de tecido húmido) Polímero1” 0,4542 ± 0,0303 1,973 ± 0,564 Composto 1 (20 pg)a) 0,3343 ± 0,0681 2,403 ± 0,533 Composto 1 (40 pg)a) 0,5136 ± 0,0938 3,010 ± 0,808 Composto 1 (200 pg)1” 0,4123 ± 0,0320 1, 964 ± 0,289 ME do composto 1 (200 pg)bl 0,5317 + 0,1413 3,523 ± 0,482** ME do composto 1 (400 pg)b| 0,5655 ± 0,1130 4,822 ± 1,218** Composto de referência 3 (20 pg)al 0,5193 ± 0,0792 4,588 ± 0,488** a) : uma vez por dia, 14 dias de administração repetida b) : duas administrações a intervalos de 7 dias **: p < 0,01 vs, polímero (teste de Dunnett)
Resultados:
Verificou-se a formação de granulação nas esponjas administradas com as ME do composto 1 (200 pg) (duas administrações a intervalos de 7 dias) e ME do composto 1 (400 pg) (duas administrações a intervalos de 7 dias) que se tornaram vermelho claro, vermelho ou castanho-escuro. Além disso, quando se mediu a concentração de hemoglobina no tecido de granulação formado em cada esponja, observou-se um aumento significativo da concentração de hemoglobina, em comparação com o grupo do polimero, de modo que se confirmou o efeito da angiogénese. Por outro lado, no caso do composto 1 (20 pg) (14 dias de administração de doses repetidas) e do composto 1 (40 pg) (14 de administração repetida), a concentração de hemoglobina no tecido de granulação formado em cada esponja mostrou uma tendência de aumento, mas não um aumento significativo. Além disso, a concentração de hemoglobina no tecido de granulação formado na esponja não aumentou no caso do composto 1 (200 pg) (duas administrações a intervalos de 7 dias) . Com base 58 nisto, verificou-se que a preparação de libertação lenta do composto 1 (Isis do composto 1) é particularmente útil na indução da angiogénese. Além disso, verificou-se a formação de granulação na esponja administrada com o composto de referência 3 (20 yg) (14 dias após a administração de doses repetidas) e ficou vermelho claro, vermelho ou castanho-escuro. Além disso, quando se mediu a concentração de hemoglobina no tecido de granulação formado na esponja, observou-se um aumento significativo da concentração de hemoglobina, em comparação com o grupo do polimero, de modo que se confirmou o efeito da angiogénese,
Exemplo 9
Medição da acção de aceleração da angiogénese (in vitro): Método de ensaio:
Fez-se a cultura de um estojo de angiogénese (fabricado pela Kurabo; constituído por células endoteliais vasculares normais da veia de um cordão umbilical humano e fibroblastos normais de pele humana) durante 3 horas e, em seguida, mudou-se o meio de cultura (o meio para o uso da angiogénese, anexo ao estojo de angiogénese, foi usado como o meio de cultura e fez-se a cultura a 37 °C num ambiente húmido com 5 % de dióxido de carbono e 95 % de ar e utilizou-se uma incubadora de dióxido de carbono BNA-121D) e adicionou-se, a cada poço (0,5 ml/poço) , o agente a ser ensaiado. A troca de meio foi realizada também no 3o, 6o e 8o dias após o início da cultura e adicionou-se o agente de fresco a ser ensaiado. O tipo e a concentração do agente a ser ensaiado não foram tratados; DMSO: 0,1 %; a-CD: 0,0118, 0,118 e 1,18 mg/ml; PGE2-aCD: 1, 10 e 100 nmole/1; composto de referência 3 (agonista de EP2), composto de referência 4 59 (agonista de EP4), agonista de EP1 e agonista de EP3: 1, 10 e 100 nmole/1, FCEV: 0,1, 1 e 10 ng/ml; e FCH: 0,1, 1 e 10 ng/ml e fez-se a cultura utilizando 3 poços para cada concentração. A fixação foi realizada 10 dias após o inicio da cultura e realizou-se a coloração do órgão oco com o anticorpo anti-CD31 usando um estojo de coloração de órgãos ocos (fabricado pela Kurabo). Como avaliação, montou-se uma rede de Chalkley (lentes da rede, Kurabo) na ocular de um microscópio e avaliou-se a formação de órgãos ocos por contagem de intersecções dos pontos da rede de Chalkley arranjados aleatoriamente com o órgão oco formado (referindo o processo de avaliação de J. Pathol., 177, 275-283 (1995)) . A contagem foi realizada em 12 posições por poço e calculou-se o total.
Neste contexto, dissolveu-se o composto de referência 3, como agonista de EP2 (ácido (5Z,9β,11α,13E)-17,17-propano-11,16-di-hidroxi-9-cloro-20-norprost-5,13-dienóico) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar soluções a 10“4, 10"5 e 10"6 mole/1 que foram então utilizadas por diluição de 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se o composto de referência 4, como agonista de EP4 (ácido (11α,13E,15a)-9-oxo-ll,15-di-hidroxi-16-(3-metoximetilfenil)-17,18,19,20-tetranor-5-tiaprost-13-enóico) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar soluções a 10“4, 10“5 e 10"6 mole/1 que foram então utilizadas por diluição de 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se o agonista de EP1 (ácido (13E)-(11a,15S,17S)-2,5-etano-6,9-dioxo-ll,15-di-hidroxi-17,2 0-dimetilprost-13-enóico; o composto descrito no exemplo 1 na memória descritiva do documento JP-A-11-322709) em 60 sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar soluções a IO'4, 10"5 e 10~6 mole/1 que foram em seguida utilizadas diluindo-as 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se o agonista de EP3 (ácido 11a,15a-dimetoxi-9-oxoprost-5Z,13E-dienóico; o composto descrito no exemplo 1 da memória descritiva de W098/34916) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar soluções a 10"4, 10"5 e 10"6 mole/1 que foram em seguida utilizadas diluindo-as 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se PGE2-aCD em água destilada para injecção para preparar soluções a 10"4, 10'5 e 10'6 mole/1 que foram em seguida utilizadas diluindo 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Como FCEV (factor de crescimento endotelial vascular), diluiu-se, com o meio de cultura, a solução a 2 pg/ml de FCEV contida no estojo de reagente de controlo da angiogénese da Kurabo e utilizou-se.
Como FCH (factor de crescimento de hepatócitos humanos), diluiu-se com o meio de cultura a solução de 5 yg/ml de FCH, adquirida na R & D System-Funakoshi, e utilizou-se. Método de análise estatística:
As contagens da formação de órgãos ocos nos poços não tratadas foram comparadas com as dos poços tratados com as concentrações respectivas das amostras de ensaio, por meio do teste de Dunnett (ensaio de duas faces) . O nivel de significância foi fixado em 5 %. 61
Neste contexto, os dados foram apresentados em termos de valor médio de 3 poços e desvio padrão.
Os resultados do ensaio estão ilustrados na fig. 5. Resultados: 0 PGE2-aCD, o composto de referência 3 (agonista de EP2) e o composto 4 (agonista de EP4) acelerou de forma significativa a formação de órgãos ocos, em concentrações de 10 nmole/1 e 100 nmole/1. Além disso, o FCEV e o FCH aceleraram a formação de órgãos ocos a uma concentração de 10 ng/ml. No entanto, o agonista de EP1 e o agonista de EP3 e α-CD não exercem influência na formação de órgãos ocos.
Exemplo 10
Medição da acção de libertação do factor endógeno de reparação (in vitro) : Método de ensaio:
Fez-se a cultura de um estojo de angiogénese (fabricado pela Kurabo; constituído por células endoteliais vasculares normais da veia de um cordão umbilical humano e fibroblastos normais de pele humana) durante 3 horas e, em seguida, trocou-se o meio de cultura (o meio para o uso da angiogénese anexo ao estojo de angiogénese foi usado como o meio de cultura e fez-se a cultura a 37 °C num ambiente húmido com 5 % de dióxido de carbono e 95 % de ar e utilizou-se uma incubadora de dióxido de carbono BNA-121D) e adicionou-se, a cada poço (0,5 ml/poço) , o agente a ser ensaiado. As concentrações de FCH e FCEV nos sobrenadantes da cultura foram medidas 3 dias após o início da cultura. 62
Os tipos e as concentrações do agente a ser ensaiado não foram tratados; DMSO: 0,1 %; PGEl-aCD: 100 nmole/1; PGE2-aCD: 100 nmole/1; e o composto de referência 3 (agonista de EP2) e o composto de referência 4 (agonista de EP4) : 100 nmole/1 e fez-se a cultura utilizando 3 poços para cada concentração. As concentrações de FCH e de FCEV foram medidas utilizando um estojo de ELISA (sistema de R % D -Funakoshi).
Neste contexto, dissolveu-se o composto de referência 3, como agonista de EP2 (ácido (5 Z,9β,11α,13E)-17,17-propano-11,16-di-hidroxi-9-cloro-20-norprost-5,13-dienóico) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar uma solução a 10”4 mole/1 que foi então utilizada por diluição de 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se o composto de referência 4, como agonista de EP4 (ácido (11α,13E,15a)-9-oxo-ll,15-di-hidroxi-16-(3-metoximetilfenil)-1'1,18,19,20-tetranor-5-tiaprost-13-enóico) em sulfóxido de dimetilo (DMSO) para preparar soluções a 10”4 mole/1 que foi então utilizada por diluição de 1/1000 vezes com o meio de cultura.
Dissolveu-se o PGEl-aCD e PGE2-aCD em água destilada para injecção para preparar soluções a 10"4 mole/1 que foram em seguida utilizadas diluindo-as 1/1000 vezes com o meio de cultura. Método de análise estatistica:
As concentrações de FCH e FCEV nos sobrenadantes do grupo de controlo de dissolventes foram comparadas com os dos grupos tratados com o agente, por meio do teste de 63
Dunnett (ensaio pelas duas faces). 0 nível de significância foi fixado em 5 %.
Neste contexto, os dados foram apresentados em termos de valor médio de 3 poços e de desvio padrão.
Os resultados do ensaio, após 72 horas de cultura, estão ilustrados no quadro 7. QUADRO 7
Agente ensaiado FCH (pg/ml) FCEV (pg/ml) Não tratado 110 + 16 2004 + 76 PGEl-aCD 2043 ± 77*** 2710 ± 50*** PGE2-cxCD 1735 + 95*** 3032 ± 165**** Referência de agonista de EP2 (composto 3) 1865 + 48*** 2762 ± 51*** Referência de agonista de EP4 (composto 4) 379 + 12*** 2936 ± 69*** *** p < 0,01 vs. não tratado (teste de Dunnett)
Resultados: PGEl-aCD, PGE2-aCD, o composto de referência 3 (agonista de EP2) e o composto de referência 4 (agonista de EP4) aumentaram significativamente as concentrações de FCH e FCEV nos sobrenadantes, a uma concentração de 100 nmole/1.
Lisboa, 31 de Outubro de 2012. 64

Claims (12)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Ácido (E)-[ 5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilideno- aminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético ou um seu sal, caracterizado pelo facto de se utilizar como um acelerador da produção de factor de crescimento endotelial vascular (FCEV) ou de factor de crescimento de hepatócitos (FCH) , na prevenção e/ou no tratamento de arterioesclerose obliterante, doença de Buerger, doença de Rainaud, acidentes cerebrovasculares, enfarte cerebral, hepatite iluminante, hepatite aguda, cirrose hepática, figado gordo, transplante de figado, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma, diabetes mellitus, pancreatite crónica, osteoartrite, reumatismo articular, osteoporose, fractura óssea, lesões do periósteo, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn, acidente vascular cerebral, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal raquidiano, doença de Moyamoya, distúrbio nervoso diabético, úlcera diabética da pele, nefropatia diabética, doença diabética da retina, restenose após PTCA, taquiarritmia supraventricular, cardiomiopatia súbita, cardiomiopatia dilatada, doença periodontal, ferida da extracção de dentes, feridas orais, doença do tecido periodontal, úlcera de decúbito ou glaucoma.
  2. 2. Ácido (E)-[ 5-[ 2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilideno- aminoxi]etil]- 7,8-di-hidronaftalen-1- -iloxi]acético ou um seu sal, caracterizado pelo facto de se utilizar, de acordo com a reivindicação 1, na prevenção e/ou no tratamento de uma doença pulmonar selecionada entre 1 pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) ou asma.
  3. 3. Ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilideno- aminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético ou um seu sal, caracterizado pelo facto de se utilizar, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, na prevenção e/ou no tratamento de hipertensão pulmonar.
  4. 4. Ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilideno- aminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético ou um seu sal, caracterizado pelo facto de se utilizar, de acordo com a reivindicação 1 ou 2 na prevenção e/ou no tratamento de asma.
  5. 5. Ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)metilideno- aminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]acético ou um seu sal, caracterizado pelo facto de se utilizar, de acordo com a reivindicação 1, na prevenção e/ou no tratamento de insuficiência renal crónica.
  6. 6. Composição farmacêutica caracterizada pelo facto de compreender o ácido (E)-[5-[2-[1-fenil-l-(3-piridil)-metilidenoaminoxi]etil]-7,8-di-hidronaftalen-l-iloxi]-acético ou um seu sal, para se utilizar na prevenção e/ou no tratamento de arterioesclerose obliterante, doença de Buerger, doença de Rainaud, acidentes cerebrovasculares, enfarte cerebral, hepatite fulminante, hepatite aguda, cirrose hepática, figado gordo, transplante de figado, insuficiência renal aguda, insuficiência renal crónica, pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), asma, diabetes mellitus, 2 pancreatite crónica, osteoartrite, reumatismo articular, osteoporose, fractura óssea, lesões do periósteo, úlcera duodenal, colite ulcerosa, doença de Crohn, acidente vascular cerebral, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, estenose do canal raquidiano, doença de Moyamoya, distúrbio dos nervos dos diabéticos, úlcera diabética da pele, nefropatia diabética, doença diabética da retina, restenose após PTCA, taquiarritmia supraventricular, cardiomiopatia súbita, cardiomiopatia dilatada, doença periodontal, ferida da extracção de dentes, feridas orais, doença do tecido periodontal, úlcera de decúbito ou qlaucoma.
  7. 7. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo facto de a composição farmacêutica ser uma preparação persistente que ainda compreende um polimero biodegradável.
  8. 8. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo facto de a preparação persistente ser uma preparação de microesferas, uma preparação de microcápsulas ou uma preparação de nanoesferas.
  9. 9. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com uma qualquer das reivindicações 6 a 8, caracterizada pelo facto de essa utilização ser feita na prevenção e/ou no tratamento de uma doença pulmonar selecionada entre pneumonia aguda, fibrose pulmonar, hipertensão pulmonar, doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) ou asma.
  10. 10. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com uma qualquer das reivindicações 6 a 9, caracterizada 3 pelo facto de essa utilização ser feita na prevenção e/ou no tratamento de uma hipertensão pulmonar.
  11. 11. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com uma qualquer das reivindicações 6 a 9, caracterizada pelo facto de essa utilização ser feita na prevenção e/ou no tratamento de asma.
  12. 12. Composição farmacêutica para se utilizar de acordo com uma qualquer das reivindicações 6 a 8, caracterizada pelo facto de essa utilização ser feita na prevenção e/ou no tratamento de insuficiência renal crónica. Lisboa, 31 de Outubro de 2012. 4
PT03754060T 2002-10-10 2003-10-09 Promotores da produção de factores endógenos de reparação PT1563846E (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2002298079 2002-10-10
JP2002318830 2002-10-31
JP2003117604 2003-04-22

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT1563846E true PT1563846E (pt) 2012-11-13

Family

ID=32096713

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT03754060T PT1563846E (pt) 2002-10-10 2003-10-09 Promotores da produção de factores endógenos de reparação
PT110102860T PT2465537T (pt) 2002-10-10 2003-10-09 Microsferas compreendendo ono-1301

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT110102860T PT2465537T (pt) 2002-10-10 2003-10-09 Microsferas compreendendo ono-1301

Country Status (10)

Country Link
US (3) US7547715B2 (pt)
EP (2) EP1563846B1 (pt)
JP (2) JP4497320B2 (pt)
AU (1) AU2003272963A1 (pt)
DK (2) DK2465537T3 (pt)
ES (2) ES2584606T3 (pt)
HU (1) HUE029417T2 (pt)
PT (2) PT1563846E (pt)
TW (1) TW200413000A (pt)
WO (1) WO2004032965A1 (pt)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2465537T3 (en) * 2002-10-10 2016-09-19 Ono Pharmaceutical Co MICROSPHERE INCLUDING ONO-1301
WO2005072743A1 (ja) * 2004-01-30 2005-08-11 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 気管支拡張剤
US7799754B2 (en) 2004-10-14 2010-09-21 Biomimetic Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating bone
US7473678B2 (en) 2004-10-14 2009-01-06 Biomimetic Therapeutics, Inc. Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
WO2006103770A1 (ja) * 2005-03-30 2006-10-05 Osaka Prefectural Hospital Organization 血管新生制御方法
GB2444686B (en) * 2005-09-12 2010-08-25 Es Cell Int Pte Ltd Differentiation of pluripotent stem cells using p38 MAPK inhibitors or prostaglandins
NZ571113A (en) 2005-11-17 2012-02-24 Biomimetic Therapeutics Inc Maxillofacial bone augmentation using rhpdgf-bb and a biocompatible matrix
ZA200808123B (en) 2006-03-24 2010-03-31 Childrens Medical Center Method to modulate hematopoietic stem cell growth
US9161967B2 (en) 2006-06-30 2015-10-20 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating the vertebral column
ES2664229T3 (es) 2006-06-30 2018-04-18 Biomimetic Therapeutics, Llc Composiciones y métodos de biomatriz-PDGF para el tratamiento de lesiones del manguito rotador
US20080171972A1 (en) * 2006-10-06 2008-07-17 Stopek Joshua B Medical device package
ES2459743T3 (es) 2006-10-19 2014-05-12 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Preparación de liberación sostenida para terapia de regeneración tisular
AU2013213727B2 (en) * 2006-10-20 2016-03-17 Children's Medical Center Corporation Method to enhance tissue regeneration
WO2008070310A2 (en) 2006-10-20 2008-06-12 Children's Medical Center Corporation Method to enhance tissue regeneration
KR20090075864A (ko) * 2006-10-26 2009-07-09 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 첨부제
CA2668189C (en) 2006-11-03 2016-01-26 Biomimetic Therapeutics, Inc. Compositions and methods for arthrodetic procedures comprising a solution of platelet derived growth factor (pdgf) incorporated in a biocompatible matrix
WO2008058766A1 (en) * 2006-11-16 2008-05-22 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Ep2 and ep4 agonists as agents for the treatment of influenza a viral infection
JP2008195660A (ja) * 2007-02-14 2008-08-28 Kitasato Institute 中枢循環改善薬
AU2009212151C1 (en) 2008-02-07 2015-09-17 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for distraction osteogenesis
EP2135607A1 (en) 2008-06-18 2009-12-23 Pharnext Combination of pilocarpin and methimazol for treating Charcot-MarieTooth disease and related disorders
DK2292231T3 (en) * 2008-06-23 2015-12-14 Nippon Shinyaku Co Ltd THERAPEUTIC AGENT FOR SPINAL CHANNEL STENOSIS
BR122020000059B8 (pt) 2008-09-09 2021-06-22 Biomimetic Therapeutics Inc composição que compreende uma matriz biocompatível e um fator de crescimento derivado de plaqueta e kit
US9056085B2 (en) 2009-02-03 2015-06-16 Children's Medical Center Corporation Methods for enhancing hematopoietic stem/progenitor cell engraftment
WO2010091052A2 (en) 2009-02-03 2010-08-12 Children's Medical Center Corporation Methods for enhancing hematopoietic stem/progenitor cell engraftment
US20100267826A1 (en) 2009-04-20 2010-10-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Treatment of ischemic episodes and cerebroprotection through Prostaglandin E2 (PGE2) EP2 and/or EP4 receptor agonists
NZ596555A (en) * 2009-05-27 2014-01-31 Univ Osaka Pharmaceutical composition comprising prostaglandin derivatives for use in modulating claudin mediated functions and in the treatment of dermatological disorders
WO2010138539A2 (en) 2009-05-27 2010-12-02 Elan Pharma International Ltd. Reduction of flake-like aggregation in nanoparticulate active agent compositions
US8569279B2 (en) 2009-05-27 2013-10-29 Sucampo Ag Method for modulating claudin mediated functions
US9387206B2 (en) 2009-11-03 2016-07-12 Pharnext Therapeutic approaches for treating Alzheimer's disease
EP2322163A1 (en) * 2009-11-03 2011-05-18 Pharnext New therapeutics approaches for treating alzheimer disease
WO2011103598A1 (en) 2010-02-22 2011-08-25 Biomimetic Therapeutics, Inc. Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendinopathies
SG187653A1 (en) * 2010-07-30 2013-03-28 Allergan Inc Compounds and methods for skin repair
US20120142684A1 (en) * 2010-12-02 2012-06-07 Allergan, Inc. Compounds and methods for skin repair
CA2827615A1 (en) * 2011-02-17 2012-08-23 Dennis E. Van Epps Compositions and improved soft tissue replacement methods
EP2678022A2 (en) * 2011-02-23 2014-01-01 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
PL2796132T3 (pl) 2011-03-01 2018-10-31 Pharnext Terapia zaburzeń neurologicznych oparta na baklofenie i akamprozacie
US9241933B2 (en) 2011-03-01 2016-01-26 Pharnext Compositions for treating amyotrophic lateral sclerosis
US10010515B2 (en) 2011-03-01 2018-07-03 Pharnext Therapeutic approaches for treating Parkinson's disease
US9248111B2 (en) 2011-03-01 2016-02-02 Pharnext Therapeutic approaches for treating parkinson's disease
CA2857640C (en) 2011-12-02 2021-11-16 Fate Therapeutics, Inc. Enhanced stem cell composition
ES2682255T3 (es) 2011-12-02 2018-09-19 Fate Therapeutics, Inc. Métodos mejorados de tratamiento de isquemia
EP2898902B1 (en) 2012-09-21 2019-03-20 Osaka University Advanced heart failure treatment material as myocardial/cardiovascular regeneration device
US20150272874A1 (en) * 2012-10-29 2015-10-01 Cardio Incorporated Pulmonary disease-specific therapeutic agent
EP2919778A2 (en) * 2012-11-16 2015-09-23 Allergan, Inc. Skin wound healing and scar reduction with prostaglandin ep4 agonist combinations
EP2968416A4 (en) 2013-03-15 2016-08-17 Fate Therapeutics Inc BIOLOGICAL ACTIVITY TESTING OF CELLS FOR A THERAPEUTIC POTENTIAL
JP6449166B2 (ja) * 2013-10-15 2019-01-09 小野薬品工業株式会社 薬剤溶出性ステントグラフト
US9763911B2 (en) * 2013-12-12 2017-09-19 Mayo Foundation For Medical Education And Research Prostacyclin compositions for regulation of fracture repair and bone formation
US9918994B2 (en) 2016-03-04 2018-03-20 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compositions and methods for muscle regeneration using prostaglandin E2
EP3569249A4 (en) 2016-12-27 2020-11-11 Osaka University MEDICAL COMPOSITION FOR TREATMENT OF CONTINUOUS HEART DISEASE
JP7372911B2 (ja) * 2017-06-09 2023-11-01 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー 筋肉の状態を予防または治療するための組成物および方法
EP3718537A4 (en) 2017-11-27 2021-11-10 Osaka University SITE-SPECIFIC LIPOSOMAL FORMULATION
JP7233087B2 (ja) * 2019-03-18 2023-03-06 公立大学法人横浜市立大学 抗動脈硬化剤
EP4126054A1 (en) * 2020-03-31 2023-02-08 Ensysce Biosciences, Inc. Methods for treating viral infections with nafamostat
KR20220040169A (ko) * 2020-09-23 2022-03-30 (주)아이엠디팜 나파모스타트 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 경구투여용 제제

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE555319A (pt) 1956-03-21 1900-01-01
US3095355A (en) 1961-10-12 1963-06-25 Revlon Aerosol composition
JPS503362B1 (pt) 1970-06-10 1975-02-04
JPS5231404B1 (pt) 1971-04-28 1977-08-15
US3965143A (en) 1974-03-26 1976-06-22 G. D. Searle & Co. 16-Oxygenated prostanoic acid derivatives
US4132738A (en) 1978-02-23 1979-01-02 Miles Laboratories, Inc. Preparation of 15-deoxy-16-hydroxyprostaglandins
JPS54130543A (en) 1978-03-31 1979-10-09 Ono Pharmaceut Co Ltd Prostagladin i2 analog, and its preparation
IT1113341B (it) 1978-03-31 1986-01-20 Ono Pharmaceutical Co Analoghi della 6,9-metano-pgi2
JPS57156460A (en) 1981-03-20 1982-09-27 Ono Pharmaceut Co Ltd Stabilized composition of prostaglandin and prostaglandin mimic compound, and its preparation
US4650804A (en) 1984-03-30 1987-03-17 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Quinolizinone compounds and pharmaceutical composition comprising the same, useful as anti-ulcerative and anti-allergic agents
JPS6130519A (ja) 1984-07-23 1986-02-12 Dainippon Pharmaceut Co Ltd 脳神経細胞の酸素欠乏性疾患治療剤
JPS62134787A (ja) 1985-12-06 1987-06-17 株式会社クボタ 自動販売機の商品払出し装置
CA2100918C (en) * 1992-07-21 1997-01-21 Nobuyuki Hamanaka Oxime derivative
US5462968A (en) 1994-01-19 1995-10-31 Allergan, Inc. EP2 -receptor agonists as agents for lowering intraocular pressure
US5698598A (en) 1995-08-04 1997-12-16 Allergan EP2 -receptor agonists as agents for lowering intraocular pressure
UA59384C2 (uk) 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Похідні сульфонамідів та амідів як агоністи простагландину, фармацевтична композиція та способи лікування на їх основі
JP3162668B2 (ja) * 1997-02-04 2001-05-08 小野薬品工業株式会社 ω−シクロアルキル−プロスタグランジンＥ２誘導体
NO317155B1 (no) * 1997-02-04 2004-08-30 Ono Pharmaceutical Co <omega>-cykloalkyl-prostagladin-E<N>2</N>-derivater
PT1008588E (pt) 1997-02-10 2003-09-30 Ono Pharmaceutical Co Derivados da 11,15-o-diaklquil-prostaglandina e processo de producao dos mesmos e farmaco que os contem como ingrediente activo
WO1998058911A2 (en) 1997-06-23 1998-12-30 Pfizer Inc. Prostaglandin agonists
SE9702681D0 (sv) 1997-07-10 1997-07-10 Pharmacia & Upjohn Ab Method and composition for treatment of impotence
US6288113B1 (en) 1997-08-27 2001-09-11 Welfide Corporation Angiogenesis promoters
US6124314A (en) 1997-10-10 2000-09-26 Pfizer Inc. Osteoporosis compounds
UA67754C2 (uk) 1997-10-10 2004-07-15 Пфайзер, Інк. Агоністи простагландину, фармацевтична композиція на їх основі (варіанти), спосіб нарощення та збереження кісткової маси у хребетних та спосіб лікування (варіанти)
US5877211A (en) 1997-11-21 1999-03-02 Allergan EP2 receptor agonists as neuroprotective agents for the eye
US6262293B1 (en) 1997-12-25 2001-07-17 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. ω-Cycloalkly-prostaglandin e2 derivatives
EP1065233A1 (en) * 1998-02-27 2001-01-03 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Carrier polymers migrating into target organs and drug-containing polymers
JP4123568B2 (ja) 1998-05-06 2008-07-23 小野薬品工業株式会社 ６−オキソ−ｐｇｅ１化合物、それらの製造方法およびそれらを有効成分として含有するプロスタグランジンｅ２受容体作働薬
TWI249520B (en) * 1998-07-15 2006-02-21 Ono Pharmaceutical Co 5-Thia-omega-substituted phenyl prostaglandin E derivatives, method for producing the same and medicines containing the same as the active ingredient
US6235780B1 (en) 1998-07-21 2001-05-22 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. ω-cycloalkyl-prostaglandin E1 derivatives
JP2000086517A (ja) * 1998-09-16 2000-03-28 Ono Pharmaceut Co Ltd アロディニア治療剤
AUPP608898A0 (en) 1998-09-23 1998-10-15 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. New use of prostaglandin E2 antagonists
US6437146B1 (en) 1998-09-25 2002-08-20 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Oxazole compounds as prostaglandin e2 agonists or antagonists
CA2346031A1 (en) 1998-10-15 2000-04-20 Merck & Co., Inc. Methods for stimulating bone formation
JP2000239188A (ja) 1998-12-22 2000-09-05 Mitsubishi Chemicals Corp 育毛剤
WO2000038667A2 (en) 1998-12-24 2000-07-06 Alcon Laboratories, Inc. Prostaglandin e agonists for treatment of glaucoma
AU2183800A (en) 1998-12-24 2000-07-31 Alcon Laboratories, Inc. Prostaglandin e agonists for treatment of dry eye
AU2183900A (en) 1998-12-24 2000-07-31 Alcon Laboratories, Inc. Ep4 receptor agonists for treatment of dry eye
SE9900025D0 (sv) 1999-01-08 1999-01-08 Synphora Ab Method and composition for treatment of female sexual dysfunction
WO2000054808A1 (fr) 1999-03-16 2000-09-21 Toray Industries, Inc. Agoniste du recepteur ep4 de la prostaglandine et traitement correspondant
WO2000054809A1 (fr) 1999-03-16 2000-09-21 Toray Industries, Inc. Agent de maturation du col et procede correspondant
JP2003506404A (ja) 1999-08-10 2003-02-18 グラクソ グループ リミテッド 治療、とりわけ神経障害性疼痛および結腸癌の治療におけるｅｐ４受容体リガンドの使用
AUPQ253199A0 (en) 1999-08-30 1999-09-23 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Non-prostanoid prostaglandin I2-agonist
AP2002002555A0 (en) 1999-12-22 2002-06-30 Pfizer Prod Inc EP4 Receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis.
PT1132086E (pt) 2000-01-31 2006-09-29 Pfizer Prod Inc Utilizacao de agonistas selectivos para o receptor da prostaglandina (pge2) 4 (ep4) para o tratamento de falha renal aguda e cronica
US20010056060A1 (en) * 2000-02-07 2001-12-27 Cameron Kimberly O. Treatment of osteoporsis with EP2/EP4 receptor selective agonists
CN1366458A (zh) * 2000-03-31 2002-08-28 东丽株式会社 毛发生长和毛发形成调节剂
FR2812190B1 (fr) 2000-07-28 2003-01-31 Oreal Utilisation d'agonistes non prostanoiques des recepteurs des prostaglandines ep-2 et/ou ep-4 comme agent cosmetique permettant d'attenuer, de diminuer ou d'arreter la chute des cheveux et des poils
US6376533B1 (en) 2000-10-20 2002-04-23 Allergan Sales, Inc. Omega-cycloalkyl 17-heteroaryl prostaglandin E2 analogs as EP2-receptor agonists
US20020115695A1 (en) 2000-11-07 2002-08-22 Paralkar Vishwas M. Combination therapies for the stimulation of bone growth
AU2002210848A1 (en) 2000-11-27 2002-06-03 Pfizer Products Inc. EP4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis
GB0030541D0 (en) 2000-12-14 2001-01-31 Glaxo Group Ltd Medical uses
GB0103269D0 (en) 2001-02-09 2001-03-28 Glaxo Group Ltd Napthalene derivatives
IL161581A0 (en) 2001-10-23 2004-09-27 Applied Research Systems Pyrazolidinone derivatives and their use
ES2337887T3 (es) 2001-12-20 2010-04-30 Merck Serono Sa Derivados de pirrolidina en calidad de moduladores de prostaglandina.
DK2465537T3 (en) * 2002-10-10 2016-09-19 Ono Pharmaceutical Co MICROSPHERE INCLUDING ONO-1301
ES2459743T3 (es) 2006-10-19 2014-05-12 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Preparación de liberación sostenida para terapia de regeneración tisular

Also Published As

Publication number Publication date
DK2465537T3 (en) 2016-09-19
JP4497320B2 (ja) 2010-07-07
EP2465537B1 (en) 2016-06-29
JP5287761B2 (ja) 2013-09-11
WO2004032965A1 (ja) 2004-04-22
DK1563846T3 (da) 2012-12-17
US20080299089A1 (en) 2008-12-04
TW200413000A (en) 2004-08-01
ES2584606T3 (es) 2016-09-28
EP1563846A4 (en) 2009-11-04
JPWO2004032965A1 (ja) 2006-02-09
HUE029417T2 (en) 2017-02-28
ES2393321T3 (es) 2012-12-20
PT2465537T (pt) 2016-08-03
EP1563846A1 (en) 2005-08-17
US7547715B2 (en) 2009-06-16
AU2003272963A1 (en) 2004-05-04
US20060069018A1 (en) 2006-03-30
JP2010120964A (ja) 2010-06-03
EP1563846B1 (en) 2012-08-29
US20130225643A1 (en) 2013-08-29
US8436026B2 (en) 2013-05-07
US8642630B2 (en) 2014-02-04
EP2465537A1 (en) 2012-06-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PT1563846E (pt) Promotores da produção de factores endógenos de reparação
ES2733998T3 (es) Agente terapéutico específico de enfermedad pulmonar
US9597436B2 (en) Advanced heart failure treatment material as myocardial/cardiovascular regeneration device
ES2459743T3 (es) Preparación de liberación sostenida para terapia de regeneración tisular
EA038598B1 (ru) Способы репарации и регенерации тканей
ES2230624T3 (es) Composicion farmaceutica que comprende un compuesto que tiene actividad anti-xa y un compuesto antagonista de la agregacion plaquetaria.
US20050069518A1 (en) Method for treating occlusive vascular diseases &amp; wound healing
JPWO2002094321A1 (ja) 骨折治癒促進用組成物
JP2002501936A (ja) 低分子量ヘパリンをＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗物質と組合わせて使用する血小板凝集の抑制
EP1563845A1 (en) Remedies for allergic diseases
JP2010275242A (ja) 経口投与用リポソーム製剤およびその製造方法
WO2018124236A1 (ja) 難治性心疾患治療用医薬組成物
JP2006321740A (ja) 虚血後血管新生促進剤