PT1558627E - Reduçao estereoespecífica de sapogen-3-onas - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "REDUÇÃO ESTEREOESPECÍFICA DE SAPOGEN-3-ONAS"

Campo da invenção A presente invenção diz respeito à sintese estereoespecífica de 3-hidróxi-5β-Η sapogeninas esteróides e dos seus derivados.

Antecedentes da invenção

Foi demonstrado que determinadas sapogeninas e os seus derivados (em especial sapogeninas com um átomo de hidrogénio 5β, e, ainda mais especificamente, compostos com um grupo 3-hidróxi e um átomo de hidrogénio 5β, como, por exemplo, a sarsasapogenina, a episarsasapogenina, a esmilagenina e a epiesmilagenina) são úteis no tratamento da disfunção cognitiva e de outras doenças. Essa actividade está descrita, por exemplo, nas patentes WO-99/48482, W0- 99/48507, WO-01/49703, WO-02/079221 e WO-01/23406, cujas divulgações são incorporadas por referência na presente. O esquema adoptado para atribuir o nome ao sistema anelar e às posições do carbono usado na presente é o indicado nestas publicações anteriores. A literatura descreve métodos para a sintese de 3-hidróxi esteróides e de 3-hidróxi sapogeninas esteróides. Por exemplo, a sintese de 3β-ϊιίάΓ0χί-5α-Η esteróides a partir dos 3-ceto-5a-H esteróides correspondentes foi realizada com borohidreto de sódio em tetrahidrofurano e metanol ou mediante a utilização de hidreto de aluminio e litio em éter dietilico (Helv. Chim. Acta, 66, 192-217 (1983)). 2 A patente US Patent No. 3,875,195 (1975), cuja divulgação é aqui incorporada por referência, descreve a redução catalítica de 3-θθίο-5β-Η esteróides para 3β-)ιίά^χί-5β-Η esteróides num ácido carboxílico mais baixo com níquel Raney e hidrogénio sob pressão. Estes investigadores referem que a redução de Meerwein-Ponndorf-Verley (MPV) dá origem a misturas de 3ot-hidróxi esteróides e 3p-hidróxi esteróides em partes iguais. A separação dessas misturas é reportada como sendo difícil.

Desde a introdução da família de agentes redutores à base de borohidretos-tri-alquílicos extremamente impedidos, vulgarmente conhecidos por Selectrides®, no início da década de 1970 (Brown et al. , J. Am. Chem. Soc. 94, 7159-7161 (1972)), foram divulgadas várias publicações em que estes agentes redutores foram aplicados em determinados métodos sintéticos esterólicos. Por exemplo, em Steroids, 36, 299-303 (1980), Steroids, 45,39-51 (1985), J. Chem. Soc. Commun. 1239-1240 (1982), Tetrahedron, 40, 851-854 (1984),

Helv. Chim. Acta, 66, 192-217 (1983), a patente US Patent

No 6,150,336 (2000) e Tetrahedron, 45, 3717-3730 (1989), cujas divulgações são incorporadas na presente por referência, são descritas reduções de selectrides estereoespecíficas de determinados 3-οβίο-5β esteróides e 3-ceto-5a esteróides para os seus respectivos esteróis 3β-OH, 5β-Η e 3α-ΟΗ,5α-Η.

No tocante a sapogeninas esteróides, o estado da técnica descreve a síntese da esmilagenina através da redução de esmilagenona com isopropóxido de alumínio em álcool isopropílico, a redução de MPV (Marker et al, J Amer. Chem. Soc., 62, 2525 (1940)). Marker reportou a redução de MPV de 3 sarsasapogenona para obter uma mistura de sarsasapogenina com episarsasapogenina (Marker and Rohrmann, J. Amer. Chem. Soc., 61, 943 (1939)). As divulgações dessas publicações são incorporadas na presente por referência. 0 estado da técnica também reportou determinadas hidrogenações catalíticas, como as que são exemplificadas pela preparação de Blunden de epitigogenina a partir de tigogenona utilizando a hidrogenação sobre um catalisador Adams (óxido (IV) de platina) em ácido acético glacial contendo ácido hidroclórico a 2% (J. Nat. Prod. 42, 478-482 (1979); Onderstepoort J. Vet. Res., 61, 351-359 (1994)). Marker reportou a hidrogenação de sarsasapogenona utilizando um catalisador Adams em etanol para obter episarsasapogenina (Marker and Rohrmann, J. Amer. Chem. Soc., 61, 943 (1939)). 0 estado da técnica também reportou a redução de borohidreto de sódio, como exemplificada pela preparação de Miles de episarsasapogenina a partir de sarsasapogenona utilizando borohidreto de sódio (J. Agric. Food Chem., 41, 914-917 (1993)). 0 estado da técnica também reportou uma redução de hidreto de alumínio e lítio, conforme exemplificada pela preparação de Djerassi de epiesmilagenina a partir de esmilagenona (J. Am. Chem. Soc., 74, 422-424, (1952)) e a preparação de Lajis de episarsasapogenina a partir de sarsasapogenona (Steroids, 58, 387-389 (1993)) . As divulgações dessas publicações são incorporadas na presente por referência.

As patentes US Patent Nos 5,703,052 (1997), 5,807,834 (1998) e 5,939,398 (1999), cujas divulgações são aqui incorporadas por referência, reportam métodos de síntese de 3ot-hidróxi-5ot-H sapogeninas utilizando K-Selectride® a baixas temperaturas. 4 A patente WO-02/079221 (publicada no dia 10 de Outubro de 2002) descreve no Exemplo 6 uma Síntese da episarsasapogenina através da redução de sarsasapogenona utilizando tri-terc-butóxi hidreto de alumínio e lítio. No entanto, esta publicação não é considerada estado anterior da técnica em todos os países. A presente invenção propõe-se divulgar uma síntese estereoespecífica melhorada de 3β-hidróxi,5β-Η sapogeninas definidas e descritas nas referidas publicações WO-99/48482, WO-99/48507, WO-01/49703, WO-02/079221 e WO-01/23406, bem como dos seus derivados, como, por exemplo, as correspondentes saponinas e outras formas fisiologicamente aceitáveis as quais são sais e ésteres, que podem servir de pró-fármacos.

Numa forma de realização extremamente preferencial, a presente invenção propõe-se divulgar uma síntese estereoespecífica eficiente da sarsasapogenina e da esmilagenina.

Descrição resumida da invenção A presente invenção divulga, num primeiro aspecto, um método de preparação estereoespecífica de uma 3p-hidróxi-5β-Η sapogenina esteróide, ou de um derivado da mesa, que inclui a redução de uma 3-ceto-5p-H sapogenina esteróide utilizando um agente redutor com um organoborano impedido ou um hidreto do organoalumínio. A 3β-1ιίάΓ0χί-5β-Η sapogenina esteróide formada inicialmente pela referida redução estereoespecífica pode então ser convertida na forma derivada pretendida utilizando-se, por exemplo, técnicas de derivação bem conhecidas do estado da 5 técnica. Essa conversão pode ter lugar in situ ou num sistema de reacção diferente, e pode ser realizada tanto em simultâneo com a redução, como depois da mesma.

Tal como utilizado na presente, a expressão "organoborano impedido" refere-se a agentes redutores à base de trialquil ou de triaril borohidretos metalo-alquílicos, como, por exemplo, tri-sec-butilborohidreto de litio, trisiamil borohidreto de litio ou trifenil-borohidreto de litio, ou os agentes redutores correspondentes em que o litio foi substituído por potássio ou por sódio. De preferência, os grupos alquílicos devem conter entre 3 e 7 átomos de carbono. De preferência, os grupos arílicos devem conter 6 a 12 átomos de carbono, e podem ser substituídos por alquilos. Por vezes, esses agentes redutores são colectivamente denominados agentes redutores "Selectride", embora seja importante perceber que, tal como usado na presente, o termo "Selectride" não tem qualquer pretensão de limitar a invenção a um agente redutor obtido de um fabricante ou origem específicos, podendo ser utilizados agentes redutores de qualquer fabricante ou origem. Para uma abordagem mais profunda, consulte "Reductions by the Alumino- and Borohydrides in Organic Synthesis", by J. Seyden-Penne (VCH Publishers, Inc.). Os organoboranos impedidos a que é dada preferência na presente invenção são o tri-sec-butilborohidreto de litio (L-Selectride) , o tri-sec-butilborohidreto de potássio (K-Selectride) , o tri-sec-butilborohidreto de sódio (N-Selectride), o trisiamil borohidreto de litio (LS-Selectride) , o trisiamil borohidreto de potássio (KS-Selectride), o trifenil-borohidreto de potássio e o trifenil-borohidreto de litio. 6

Através da selecção adequada do agente redutor, o método possibilita a preparação de uma grande variedade de 3β-1ιίάηόχί,5β-Η sapogeninas em forma substancialmente ou, pelo menos, predominantemente, estereoisomericamente pura com um rendimento global bom ou mesmo excelente (ou seja, acima de uma conversão de aprox. 80%) a partir de um material inicial comercialmente disponível ou facilmente preparável, evitando-se geralmente a difícil separação de misturas de isómeros. A utilização de agentes redutores organoboranos impedidos ainda nunca tinha sido aplicada a 3-οβ^-5β-Η sapogeninas esteróides. A preparação de Miles (J Agric. Food Chem., 41, 914-917 (1993)) de episarsasapogenina utilizou borohidreto de sódio como o reagente redutor, apesar de na altura em que este trabalho foi divulgado já ser conhecido o reagente mais selectivo tri-terc-butóxi hidreto de alumínio e lítio (LTBA).

Dado o agente redutor ser um organoborano com um impedimento relativamente elevado (grupos orgânicos com mais de dois átomos de carbono), a sapogenina obtida é predominantemente uma 3β-ίιίάηόχί, 5β-Η sapogenina. A expressão 3-οβ^,5β-Η sapogenina é aqui utilizada por conveniência, para referir o material inicial para a redução, e não implica necessariamente a saturação ou a ausência de grupos ceto noutras partes da molécula, ou seja, fora do anel A, conquanto, se necessário, quaisquer pontos indesejavelmente reactivos noutras partes da molécula estejam adequadamente protegidos. O material inicial 3-οβΡο,5β-Η sapogenina pode ser diferente do produto final pretendido noutras partes da molécula que não a posição 3 7 no anel A; se for esse o caso, serão feitas as conversões ou conversão necessárias, de forma já conhecida pelos técnicos, como parte da via sintética global que dá origem ao produto final pretendido. 0 material inicial 3-ceto,5p-H sapogenina esteróide pode ser preparado de forma adequada por oxidação da correspondente 3-OH sapogenina. Por exemplo, foi preparada sarsasapogenona por oxidação com dicromato de piridínio, conforme descrito por Miles (J. Agric Food Chem., 41, 914-917 (1993) ) , oxidação de Jones, conforme descrito por Blunden (J. Nat. Prod., 42, 478-482 (1979)) e conforme descrito na patente WO-98/07741, cujas divulgações são incorporadas na presente por referência. Foi produzida esmilagenona a partir de diosgenona (ela própria preparada pela oxidação da diosgenina) utilizando a redução da dupla ligação da cetona a,β-insaturada [Marker et al., J. Am. Chem. Soc. 2525 (1940), Irismetov & Goryaev, Izv. Akad. Nauk Kaz. SSR, Ser. Khím., 2, 47-52 (1981)].

Numa forma de realização preferencial desta invenção, o material inicial 3-ceto,5p-H sapogenina esteróide é preparado por hidrogenação catalítica heterogénea de uma A4,3-ceto sapogenina esteróide correspondente, por exemplo diosgenona. A hidrogenação catalítica heterogénea converte a A4,3-ceto sapogenina esteróide predominantemente no produto 5β-Η 3-cetona correspondente, esmilagenona, por exemplo, que é então reduzido de acordo com o primeiro aspecto desta invenção. A hidrogenação catalítica heterogénea pode ser realizada de forma adequada utilizando-se hidrogénio e um catalisador de paládio num solvente orgânico. O catalisador de paládio 8 deverá estar preferencialmente presente num suporte como, por exemplo, o sulfato de bário, o carbonato de cálcio, a grafite ou o carbono. 0 paládio deverá ser utilizado, de preferência, numa forma pré-reduzida.

Sempre que o material inicial for a diosgenona e a hidrogenação catalítica for seguida de redução da esmilagenona mediante utilização de um agente redutor à base de organoborano impedido, o produto obtido é a esmilagenina.

Considerada na sua totalidade, a presente invenção fornece um procedimento para a síntese de sapogeninas esteróides úteis, como, por exemplo, a esmilagenina ou a epiesmilagenina, a partir de materiais já existentes, como a diosgenina, por exemplo, utilizando reduções selectivas para controlar a estereoquímica, conforme se pode ver representado para estes compostos específicos no diagrama 1 abaixo:

BíostíKSiass

PhCOCI/Firffijia ICCJencI^ 1965, 24* 59

H axmaA*® »s *ΜΚ11ΜΜΜΜ*. 9

Os métodos da presente invenção podem ser utilizados para a preparação de uma 3p-hidróxi 5β-Η sapogenina esteróide, como a sarsasapogenina e a esmilagenina. Podem ser preparados pró-fármacos e outras formas fisiologicamente aceitáveis de sapogeninas (ou seja, ésteres e sais, ver acima) a partir dos compostos de 3-OH da forma normal, conforme descrição mais detalhada abaixo.

Descrição detalhada da invenção

Os produtos finais da sapogenina 0 método da presente invenção é utilizado para preparar produtos finais de sapogenina, seleccionados de compostos com a seguinte fórmula geral: R2 Ru

*7 R^Ra em que Ri, R2, R3, R4, R5, Re/ R7/ Re e R9 são, independentemente uns dos outros, H, C1-4 alquilo, OH ou OR (em que R = C6-i2 arilo ou C1-4 alquilo) , ou em que R5 e R6 juntos podem representar a = 0 (carbonilo) ou um grupo de carbonilo protegido, a estereoquímica no centro de carbono 3 (ou seja, o carbono do anel A a que o grupo Rio está ligado) tanto pode ser R como S, e 10

Rio pode ser β-ΟΗ, um grupo de açúcar β-Ο-ligado ou qualquer grupo de éster β-orgânico (que inclui ésteres de ácido alifático e de aminoácido).

Salvo especificação em contrário na fórmula acima através da utilização da convenção de cunhas e traços, e excepto na medida em que a estereoespecif icidade for uma caracteristica desta invenção, a estereoquimica da fórmula não está especificada, incluindo-se todas as misturas de isómeros e estereoisómeros. A expressão "sais fisiologicamente aceitáveis" significa os sais de adição ácidos relativamente não tóxicos, inorgânicos e orgânicos, e os sais de adição básicos, de compostos da presente invenção. Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e a purificação finais dos compostos ou através da reacção separada do composto purificado. Consulte, por exemplo, S. M. Berge et al, Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci.r 66: p.1-19 (1977), que se incorpora na presente por referência. benzoato, A expressão "éster orgânico", tal como usada na presente invenção, refere-se a qualquer éster passível de ser formado por reacção do composto em que Rio é OH com um ácido orgânico formador de éster ou um derivado activado do mesmo. O ácido orgânico pode, por exemplo, ser um ácido carboxílico alifático ou um aminoácido. Sem qualquer tipo de limitação, o grupo de ésteres orgânicos pode ser seleccionado, por exemplo, de: catilato (etoxicarboniloxi), acetato, succinato, propionato, n-butirato, i-butirato, valerato, isovalerato, n-caproato, iso-caproato, dietilacetato, octanoato, decanoato, laurato, miristato, palmitato, estearato, benzoato, fenilacetato, 11 fenilpropionato, cinamato, ftalil, glicinato, alaninato, valinato, fenilalaninato, isoleucinato, metionato, argininato, aspartato, cisteinato, glutaminato, histidinato, lisinato, prolinato, serinato, treoninato, triptofanato, tirosinato, fumerato, maleato, alifático substituído, como, por exemplo, cloroacetato, metoxiacetato, grupos de ésteres aminoácidos protegidos, como, por exemplo, boc-aminoglicinato (boc = t-butóxi-carbonilo), boc-aminovalinato, CBZ-aminoglicinato (CBZ = benziloxicarbonilo), CBZ-aminoalinato, e grupos de ésteres aromáticos substituídos, como, por exemplo, p-bromobenzoiloxi, m-bromobenzoiloxi, p-metoxibenzoiloxi, clorobenzoato, como, por exemplo, p-clorobenzoiloxi, diclorobenzoato, como, por exemplo, 2,4-diclorobenzoiloxi, nitrobenzoato, como, por exemplo, p-nitrobenzoiloxi ou 3,5-dinitrobenzoiloxi, etc. 0 termo "açúcar", conforme usado na presente, refere-se de modo particular a mono-, di- ou tri-sacarídeos e a formas acilatadas dos mesmos. Sem qualquer limitação, um açúcar desses pode ser, por exemplo, uma mono-aldose ou uma mono-cetose com 5 ou 6 átomos de carbono, de preferência sob a forma de furanose ou de piranose ciclizadas, seja como o anómero α ou como o anómero β, e tendo isomerismo óptico D ou L. Os exemplos de açúcares adequados incluem a glucose, a manose, a fructose, a galactose, a maltose, a celobiose, a sucrose, a ramnose, a xilose, a arabinose, a fucose, a quinovose, a apiose, a lactose, a galactose-glucose, a glucose-arabinose, a fucose-glucose, a ramnose-glucose, a glucose-glucose-glucose, a glucose-ramnose, a manose- glucose, a glucose-(ramnose)-glucose, a glucose-(ramnose)-ramnose, a glucose-(glucose)-glucose, a galactose- 12 (ramnose)-galactose e derivados acilatados (ou seja, acetilados) dos mesmos. 0 primeiro aspecto da invenção A 3-ceto,5p-H sapogenina esteróide, o material inicial para o passo que resulta na preparação da sapogenina pretendida de acordo com o primeiro aspecto da presente invenção, deverá corresponder, de preferência, à sapogenina pretendida em todos os pontos da molécula com excepção do grupo da posição 3. No entanto, se for necessário ou desejável, podem ser aplicados grupos protectores adequados para a redução, os quais terão de ser posteriormente removidos para ser produzida a sapogenina pretendida. A expressão "grupos protectores" aqui utilizada refere-se a grupos utilizados para proteger grupos funcionais reactivos, como, por exemplo, grupos de hidróxi ou de carbóxi, sempre que a sua presença seja desejável no produto final, para evitar a sua participação indesejada nas reacções. Podem ser utilizados grupos protectores convencionais, de acordo com a prática normal, consulte T.W. Green e P.G.M. Wuts na publicação "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991; e J.F.W McOmie na publicação "Protective Groups in Organic Chemistry" Plenum Press, 1973, para se inteirar de exemplos.

Como se pode ver no quadro 1 abaixo, foram descobertos vários reagentes para efectuarem a selectividade de forma a se obter esmilagenina ou epiesmilagenina, (as percentagens de selectividade referem-se a componentes no produto em bruto). Surpreendentemente, constatámos que a utilização de K-, L- ou N-Selectride® (tri-sec-butilborohidreto de potássio, lítio ou sódio), ou do trifenil-borohidreto 13 correspondente, dá azo à formação de 3p-hidróxi, por exemplo, esmilagenina, de uma forma extremamente estereoselectiva. A utilização do agente redutor trietil-borohidreto de litio menos impedido dá azo à formação do 3ot-hidroxil, por exemplo, epiesmilagenina, de uma forma extremamente estereoselectiva.

Na redução estereoselectiva de 3-ceto,5p-H sapogeninas esteróides de acordo com a presente invenção, constatámos que é possivel obter no produto final um rácio molar do 3-hidróxi esteróide predominante, obtido em vez do 3-epímero alternativo, de, pelo menos, cerca de 10:1, com exemplos de, pelo menos, cerca de 15:1. 14

Quadro 1 Selectividade na redução de esmilagenona.

Reagente Tenp./ °C Solvente Esmilageni- na/% Epiesmi- lagenina/% Esmilagenona/ % LiAlH (CfBu) 3 TA THF 5,0 95,0 - LiBHEt3 -78 THF 22,8 74,3 - *A1H3 0 THF 14,4 83,1 - *bh3 0 THF 11,8 83,9 - * 9-BBN -78 THF 10,4 51,4 37,5 *NaBH4/CeCl3 -78 THF 4,4 89,5 - L-selectride® -78 THF 91,1 3,4 4,7 L-selectride® -5 THF 92,7 4,2 2,5 L-selectride® 20 THF 92,7 4,8 2,2 L-selectride® -78 Tolueno 90,8 5,5 2,5 L-selectride® -78 DEM 54,0 4,0 41,1 L-selectride® 20 Ciclohexano 74,9 13,9 8,5 N-selectride® -78 THF 97,3 1,6 0,2 N-selectride® -5 THF 94,2 2,6 0,5 K-selectride® -78 THF 96,5 2,0 0,3 K-selectride® -10 THF 93,6 4,0 0,6 K-selectride® -78 MTHF 92,2 6,3 - LS-selectride® -78 THF 91,5 4,4 3,2 KS-selectride® -78 THF 95,5 2,4 0,3 KBH(Ph)3 -78 THF 91,0 4,6 1,7 * = reacções de comparação

Constatámos, surpreendentemente, que não são essenciais temperaturas baixas (isto é, por volta dos -78°C) para o método da presente invenção. Regra geral, a redução pode ser realizada a uma temperatura entre os -100°C e os 25°C, de preferência dos -40°C aos 25°C e, ainda mais preferível, a cerca de -10°C a 10°C, e adequadamente num solvente seleccionado entre tetrahidrofurano (THF), 2-metiltetrahidrofurano (MTHF), tolueno, 1,4-dioxano, terc- 15 butil metil éter, e entre misturas destes solventes, mas sobretudo THF, o nosso preferido.

Numa forma de realização preferencial desta invenção, o material inicial 3-ceto,5p-H sapogenina esteróide, esmilagenona, por exemplo, é preparado por hidrogenação catalítica heterogénea de uma A4,3-ceto sapogenina esteróide correspondente, como, por exemplo, diosgenona. 0 ideal será esta A4,3-ceto sapogenina esteróide, diosgenona, por exemplo, ser, ela própria, preparada por uma oxidação da As,3-hidróxi sapogenina esteróide correspondente, diosgenina, por exemplo, para se obter a cetona αβ-insaturada. Importa notar que a redução directa de diosgenina utilizando-se como catalisador paládio em carbono produz predominantemente o 5a-produto, tigogenina.

Marker (Marker et al, J. Am. Chem. Soc., 62, 2525 (1940)) demonstrou que a redução da diosgenona para esmilagenona pode ser obtida com um catalisador de sulfato de bário com paládio em solução de éter sob hidrogénio. A baixa concentração (500 volumes; os volumes de processamento normais situam-se entre os 5 e os 30 volumes) e uma carga de catalisador elevada (1000%; as cargas de catalisador normais situam-se entre 1 e 20%) tornam o processo, tal como descrito, irrealizável e muito oneroso para um trabalho em grande escala. Por outro lado, também não nos podemos esquecer de que, por motivos de segurança, o éter não é indicado para trabalhos em grande escala.

Outros investigadores também investigaram a redução da diosgenona para esmilagenona. Djerassi reduziu diosgenona 16 (10 g) em etanol (450 mL) sobre Pd-C a 10% pré-reduzido (0,8 g) à pressão atmosférica. A esmilagenona em bruto foi isolada por precipitação com água, tendo voltado a ser cristalizada de clorofórmio/metanol para fornecer esmilagenona pura (7,2 g, 72%) com um ponto de fusão de 179 a 183°C. O rendimento não sofreu alterações quando a reacção foi realizada em presença de hidróxido de potássio (3 g) . Uma amostra analiticamente pura fundiu-se de 186 a 188°C (Djerassi, Yashin and Rosenkranz, J. Am. Chem. Soc., 74, 422 (1952)). Este processo padece de uma diluição reduzida devido à baixa solubilidade da diosgenona em etanol.

Na série do pregnano, Suvorov concluiu que a piridina exerce um efeito extremamente relevante sobre o resultado de reacções de hidrogenação deste tipo. Por norma, neste trabalho o catalisador de eleição foi o paládio a 10% em carbonato de cálcio (Pd-CaC03) . Nesses casos concluiu-se que a selectividade era muito superior à das reacções realizadas em solventes alcoólicos, mesmo com a adição de um cáustico (Suvorov and Yaroslavtseva, Steroids, 1270 (1961)). O tratamento final empregue neste estudo envolveu o arrefecimento rápido em ácido hidroclórico diluído e a extracção do produto para clorofórmio. O extracto orgânico foi lavado com ácido hidroclórico diluído, solução aquosa de bicarbonato de sódio a 8% e água, até se apresentar neutra ao papel-tornesol. Esses métodos resultaram na produção de grandes quantidades de resíduos aquosos com piridina e solventes halogenados que exigem eliminação, aumentando o custo do processamento.

Irismetov demonstrou que se podia alcançar uma selectividade elevada na redução de diosgenona para 17 esmilagenona. Neste trabalho a diosgenona (1 g) foi hidrogenada sobre Pd-CaCC>3 a 5% (1 g) em piridina (30 mL) à pressão atmosférica. Após filtração para remover o catalisador e evaporação do solvente, o residuo foi cristalizado a partir do álcool para se obter uma fusão do sólido de 209 a 211°C. Não é indicado qualquer rendimento (Irismetov and Goryayev, Izv. Akad. Nauk Kaz. SSR, Ser. Khim. , 2, 47 (1982)) . Para uma produção em larga escala este trabalho padece de cargas de catalisador elevadas (100%) e de soluções diluídas. A piridina é um solvente nocivo e, normalmente, é mais utilizado em quantidades estoiquiométricas como um destruidor de ácidos em trabalho de grande escala. A patente US Patent No 736,818 divulga uma reivindicação para a redução de 3-keto-A4-esteróides para 5β-Η esteróides com um catalisador de paládio, em presença de uma base inorgânica e de um meio anídrico. O solvente preferencial é o metanol e a base preferencial é o hidróxido de potássio. A diosgenona não é exemplificada. Em nossa opinião, a diosgenona dilui-se mal em álcoois (e, especificamente, em etanol), que fariam com que este processo ficasse muito diluído. Além disso, este método também exige um procedimento extractivo final. A patente US Patent No. 763,301 refere a utilidade de alcalis (ou seja, hidróxido de potássio ou de sódio) para aumentar a quantidade de produto 5β-Η na redução de 3-ceto-A4-esteróides. Esta patente divulga uma reivindicação específica para a utilidade da trietilamina neste contexto. Dos solventes seleccionados são citados o etanol, o éter, o acetato de etilo e o metilciclohexano, sendo o 1,4-dioxano o solvente de eleição. 18

Fizemos a surpreendente descoberta de que a utilização de paládio num suporte como o sulfato de bário (Pd-BaSCu) ou o carbonato de cálcio (Pd-CaCC>3) num solvente adequado possibilita um processo económico e ampliável. Especificamente, descobrimos processos que operam a concentrações comercialmente viáveis, utilizando cargas de catalisador baixas. Também chegámos à surpreendente conclusão de que as formas reduzidas destes catalisadores são mais selectivas do que as formas não reduzidas, como se pode ver no Quadro 2 abaixo.

Quadro 2: Estudos gerais de rastreio

Solvente/catali-sador Esmilage- nona/% Tigoge- nona/% Diosge- nona/% Tigoge- nina/% Pd-BaS04 (r)/THF/ 95,7 2,1 <0,1 1,2 Pd-BaS04 (u)/THF 84,0 13,1 - - Pd-CaC03 (r)/THF 91,4 6,9 - 1,7 Pd-CaC03 (u)/THF 81,1 14,2 - 1,7

Nota: (r) indica a forma reduzida do catalisador e (u) indica a forma não reduzida.

Pd/grafite a 5% (Johnson Matthey do tipo 450) e Pd/C a 10% (Johnson Matthey do tipo 39) também são catalisadores adequados para o processo.

Os solventes adequados podem ser escolhidos entre o tetrahidrofurano (THF), o 2-metiltetrahidrofurano, o tolueno, o 1,4-dioxano, o acetato de etil, a metil iso-butilcetona, sendo que o preferido é o THF. Somos de opinião que estes solventes são preferíveis à piridina. Com estes solventes, o processo pode ser operado a uma concentração de 1 volume a 50 volumes, de preferência de 3 19 a 30 volumes e, idealmente, de 3 a 10 volumes. A carga de catalisador situa-se entre 1 e 25%, de preferência entre 1 e 10% e, idealmente, entre 1 e 5%.

Surpreendentemente, descobrimos que um aumento da pressão resultava numa menor selectividade para o processo. A reacção deve ser operada de preferência a uma pressão de hidrogénio de 1 a 5 bar e, idealmente, de 1 a 2 bar.

Também concluímos que uma temperatura mais alta diminuía a selectividade. De preferência, a reacção deve ser operada a temperaturas de 15 a 75°C, ou, preferencialmente, de 20 a 50°C e, idealmente, de 20 a 30°C.

Quando comparado com o etanol e outros possível solventes de substituição do éter, como, por exemplo, o dietoximetano e o terc-butil metil éter, o THF proporcionou uma maior solubilidade da diosgenona. Isto assegura uma maior produtividade e um processo mais económico. Quando comparado com o sistema de hidróxido de sódio aquoso/etanol, este processo permitiu um tratamento final mais simples.

Esse tratamento final consistiu na concentração da mistura da reacção e no isolamento da esmilagenona. Se se quiser, o solvente pode ser reciclado.

Foram vários os solventes que se revelaram eficazes em conseguir a purificação da esmilagenona, incluindo o ciclohexano, a 2-butanona, a acetona, o 2-propanol e o metanol; o Quadro 3 abaixo mostra exemplos. 20

Quadro 3: Recristalização de esmilagenona em bruto

Solvente Volu mes Rendimento/ % Esmilagenona/ % Tigoge-nona % Dios- genona/% Tigoge- nina/% Introd. - 91,35 5,15 1,71 1,27 2-butanona 5 70 97,77 1,20 0,39 0,51 Ciclo-hexano 8 72 97,71 1,10 0,33 0,57 2-propanol 12 60 97,40 1,35 0,37 0,71

Um aspecto preferencial da invenção passa por retirar uma solução de esmilagenona em THF da hidrogenação directamente para a redução de acordo com o primeiro aspecto da presente invenção. Isto evita a necessidade de um tratamento final, isolamento e secagem da esmilagenona intermédia, permitindo poupar tempo e reduzir o desgaste do equipamento sendo, por conseguinte, expectáveis reduções dos custos de fabrico. Também foi para nós uma surpresa constatar que as impurezas geradas por este processo (principalmente epitigogenina e epiesmilagenina) podem ser removidas por recristalização da esmilagenina em bruto.

Recuperação do composto obtido 0 composto preparado de acordo com qualquer um dos aspectos desta invenção pode ser recuperado da mistura da reacção por meios convencionais. Por exemplo, os compostos podem ser recuperados por eliminação do solvente da mistura da reacção por destilação ou, se necessário após a eliminação do solvente da mistura da reacção por reacção, por vazamento dos resíduos em água, seguido da extracção com um solvente orgânico imiscível em água e da eliminação do solvente do extracto por destilação. Além disso, o produto pode, se assim se entender, ser ainda mais purificado mediante o recurso a várias técnicas bem conhecidas, como a recristalização, a reprecipitação ou as várias técnicas de 21 cromatografia, designadamente a cromatografia em coluna ou a cromatografia preparativa de camada fina.

Exemplos

Os exemplos que se seguem ilustram, sem qualquer tipo de limitação, a síntese da esmilagenina, utilizando reduções selectivas para controlar a estereoquimica. Os exemplos comparativos também ilustram a conversão estereoespecifica de 3f-hidróxi,5β-Η sapogeninas para 3β-hidróxi, 5β-Η sapogeninas e derivados das mesmas, e a síntese da episarsasapogenina e da epiesmilagenina.

Exemplo 1

Síntese da esmilagenina a partir da esmilagenona com L-Selectride® a -10°C A esmilagenona (657 g) foi dissolvida em tetrahidrofurano (4000 mL) e a solução foi purgada com nitrogénio e arrefecida para assegurar uma temperatura interna de cerca de —10 °C. Foi adicionado L-Selectride® (2400 mL 1M em THF) durante cerca de 50 minutos, e a mistura obtida foi agitada durante 90 minutos. Foi adicionada lentamente uma solução de ácido cítrico (600 g) em água (2000 mL) , mantendo a temperatura abaixo dos 0°C. A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos. A camada aquosa foi separada e extraída com diclorometano (2000 mL) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (1500 mL) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água (4000 mL) e secados sobre MgS04. Os extractos orgânicos foram evaporados até ficarem secos para produzir a esmilagenina. 22

Exemplo 2

Síntese da esmilagenina a partir da esmilagenona com K-S electride® a -15°C

Foi adicionado K-Selectride® (1600 mL; 1M em THF) a uma solução de esmilagenona (500 g) em THF (3500 mL) a cerca de -15°C numa atmosfera de nitrogénio. A mistura da reacção foi agitada a esta temperatura durante 30 minutos e rapidamente arrefecida com ácido cítrico aquoso (393 g em 1300 mL de água), mantendo a temperatura interna em cerca de 0°C. A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente e o THF evaporado à pressão atmosférica até uma precipitação sólida. O sólido foi removido por filtração e secado na bomba. 0 sólido foi dissolvido em diclorometano (DCM) (6000 mL), secado (MgSCU) e evaporado até ficar um sólido branco, que foi recristalizado a partir de álcool isopropílico (IPA) (5000 mL) para produzir esmilagenina.

Exemplo 3

Síntese da esmilagenina a partir da esmilagenona com N-Selectride® a -78°C

Foi adicionado N-Selectride® (0,64 mL, 1M em THF) a uma solução de esmilagenona (206 mg) em THF (10 mL) durante 10 minutos a -78°C. A mistura foi agitada e arrefecida rapidamente com ácido cítrico aquoso a 10% (2 g em 20 mL de água) e o produto foi extraído para DCM (2 x 50 mL), secado (MgS04) e evaporado até um óleo incolor. 0 óleo foi introduzido em acetona (20 mL) e foi adicionada água (50 mL). 0 precipitado foi recolhido por filtração e secado para produzir esmilagenina (200 mg; 97%) . 23

Exemplo 4 Síntese da esmilagenona a partir da diosgenona

Foi dissolvida diosgenona (500 g) em tetrahidrofurano (THF) (2500 mL) a 40 a 45°C e tornada inerte com nitrogénio. Foi adicionado Pd-BaSC>4 a 5% (reduzido) (100 g) ; o frasco foi purgado com hidrogénio e agitado numa atmosfera de hidrogénio durante cerca de 6 horas e 30 minutos. O frasco foi arrefecido até à temperatura ambiente e o catalisador foi removido por filtração através de um filtro de Celite (50 g). 0 solvente foi evaporado para produzir esmilagenona em bruto sob a forma de resíduo sólido.

Este processo foi repetido e os dois lotes combinados (902,8 g) e impregnados novamente em ciclohexano (2260 mL) à temperatura ambiente numa atmosfera de nitrogénio durante cerca de 30 minutos. O sólido foi recolhido por filtração e secado numa mufla de vácuo a cerca de 40°C, de um dia para o outro, para produzir esmilagenona purificada (749,1 g; 75%) .

Exemplo 5 Síntese da esmilagenona a partir da diosgenona

Foi dissolvida diosgenona (700 g) em tetrahidrofurano (THF) (4500 mL) e tornada inerte com nitrogénio. A mistura foi tratada com carvão activado (35 g) e hidrogenada sobre Pd-BaSCd a 5% (reduzido) (35 g) a 25°C e a uma pressão de hidrogénio de 2,5 bar. O catalisador foi removido por filtração e a mistura foi concentrada até ficar com cerca de H do seu volume. Foi adicionada água (3000 mL) durante cerca de 30 minutos e o sólido resultante foi filtrado. O 24 sólido foi lavado com metanol (560 mL) e secado sob vácuo de 40 a 50°C para produzir esmilagenona (630 g, 90%) .

Exemplo 6

Redução das reacções de hidrogenação e de redução

Foi dissolvida diosgenona (500 g) em tetrahidrofurano (2500 mL) e tornada inerte com nitrogénio. Foi adicionado Pd-BaS04 a 5% (reduzido) (100 g) ; o frasco foi purgado com hidrogénio e agitado numa atmosfera de hidrogénio durante cerca de 5 horas. O catalisador foi removido por filtração através de um filtro de Celite (20 g). O resíduo foi lavado com tetrahidrofurano (1000 mL) e a solução foi utilizada directamente na fase seguinte.

Foi adicionado K-Selectride® (1600 mL; 1M em tetrahidrofurano) à solução de esmilagenona (500 g) em tetrahidrofurano de acima a cerca de -15°C numa atmosfera de nitrogénio. A mistura da reacção foi agitada a esta temperatura durante 30 minutos e rapidamente arrefecida com ácido cítrico aquoso (393 g em 1300 mL de água), mantendo a temperatura interna em cerca de 0°C. A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente e o tetrahidrofurano foi evaporado à pressão atmosférica até uma precipitação sólida O sólido foi removido por filtração e secado na bomba.

O sólido foi dissolvido em diclorometano (6000 mL), secado (MgS04) e evaporado até ficar um sólido branco, que foi recristalizado a partir de 2-propanol (5000 mL) . O sólido foi submetido a nova recristalização a partir de acetona (5000 mL) . O sólido foi submetido a nova recristalização a partir de acetona (3500 mL) . O sólido foi secado a 80°C 25 numa mufla de vácuo para produzir esmilagenina pura (154,5 g) - mp 184,7 a 187,0°C; [a] D20 = -73,3°; IR vmax 3456, 2928, 1451, 1376, 1050, 979, 896 cm-1; ESI-MS m/z 417 [M+l]+; 2Η NMR (CDC13, 300 MHz) : inter alia δ 4,39 (1H, br q, J = 8 , 4,10 (1H, br s) t—1 vo 00 br dd, J = 11 Hz), 3,39 (1H J = 11 Hz) , 0,98 (3H, s), 0 ,97 (3H, d, J = 1 Hz) , 0,79 , d, J = 7 Hz) , 0,76 (3H, s) ppm; 13C NMR (CDCI3, 126 MHz) : δ 14,47 , 16,43, 17,10 , 20,83, 23,86, 26,48, 26,50, 27,75, 28,73, 29,89, 30,24, 31,32, 31,73, 33,46, 35,21, 35,21, 36,45, 39,78, 40,24, 40,63, 41,54, 56,41, 62,19, 66,79, 66,98, 80,87, 109,20 ppm; C 77 ,94%; H 10,75% (valor teórico para C27H44O3: C 77,84%; H 10,64%).

Exemplo 7

Redução das reacções de hidrogenação e de redução

Foi adicionado L-Selectride® (527 mL; 1M em tetrahidrofurano) a uma solução de esmilagenona (156 g) em tetrahidrofurano (obtido através da hidrogenação de diosgenona) a cerca de -10°C numa atmosfera de nitrogénio. A mistura da reacção foi agitada a esta temperatura durante 30 minutos, deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A mistura foi arrefecida rapidamente através da adição de ácido cítrico aquoso (311 g em 3800 mL de água) e diclorometano (2200 mL), mantendo a temperatura interna abaixo de 30°C. A fase aquosa foi separada e re-extraída com diclorometano (400 mL) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com ácido cítrico aquoso (160 g em 2200 mL de água) e destilados até ficarem com um volume reduzido. Foi adicionado 2-propanol 26 (3000 mL) e a mistura foi redestilada até ficar com cerca de ^ do volume. Foi adicionado 2-propanol adicional (1500 mL) e a mistura foi destilada até ficar com cerca de ^ do volume. A mistura foi aquecida até ao ponto de refluxo e deixada arrefecer. A mistura continuou a ser arrefecida até uma temperatura de 0 a 10°C e filtrada. O sólido foi secado numa mufla de vácuo de 60 a 65°C para se obter a esmilagenina. O rendimento foi de 94,0 g.

Exemplo comparativo 8

Redução da esmilagenona para epiesmilagenina

Foi adicionado tri-terc-butóxi hidreto de alumínio e lítio (1M em tetrahidrofurano, 99 mL), gota a gota, a uma solução de esmilagenona (32,0 g, 77,2 mmol) em tetrahidrofurano (800 mL) a uma taxa tal que foi mantida uma temperatura de 14 a 16°C. Concluída a adição, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 2 h. 0 agente redutor remanescente foi arrefecido rapidamente através da adição cuidadosa de solução de cloreto de amónio (30 g em 400 mL de água) . A mistura foi filtrada e o sólido lavado com diclorometano (300 mL). Os filtrados combinados foram evaporados e o residuo foi dividido entre diclorometano (300 mL) e água (300 mL). A camada aquosa foi submetida a nova extracção com diclorometano (2 x 300 mL) . As substâncias orgânicas combinadas foram secadas (MgSCU) e evaporadas para produzirem um sólido branco (25,7 g) . O sólido foi recristalizado a partir de acetona (1250 mL) e o sólido resultante (19,0 g) foi secado numa mufla de vácuo a 40 °C de um dia para o outro. O sólido foi ainda mais purificado através do aquecimento de uma suspensão em acetona (1425 mL) . O sólido resultante foi secado numa mufla de vácuo a 40°C de um dia para o outro. Finalmente, o 27 sólido foi purificado por recristalização a partir de 2-propanol (300 mL) e a solução foi filtrada a quente para remover quaisquer substâncias inorgânicas. O filtrado foi arrefecido, o sólido filtrado e secado a 60°C numa mufla de vácuo de um dia para o outro, para produzir a epiesmilagenina (9,0 g). mp 223-227°C; [a]D25 = -64 ° (c = 5 g l"1, CHC13) ; IR vmax (KBr) 3392, 2937, 1451, 1369, 1051, 982, 864 cm'1; ESI-MS m/z 417 [M+1]+; XH NMR (CDC13, 300 MHz) : inter alia δ 4,40 (1H, br q, J = 8 Hz), 3,62 (1H, septeto, J = 10, 10, 5, 5 Hz), 3,48

(1H, br dd, J = 11 Hz) , 3,37 (1H, t, J = 11 Hz), 0, 97 (3H, d, J = 7 Hz) , 0,95 (3H, s) , 0,79 (3H [, d, J = 7 Hz), 0,75 (3H, s) ppm; 13C NMR (CDC13, 75 MHz) inter alia: δ 14,91, 16,85, 17,55, 20,99, 23,18, 27,08, 27,49, 30,68, 31,75, 32,18, 35,09, 35,75, 35,85, 40,62, 40,91, 41,04, 41,99, 42,39, 56,74, 62,59, 67,23, 72,10, 81,30, 109,64 ppm; C 77,77%; H 10,59% (valor teórico para C27H44O 3: C 77 ,84%; H 10,64%).

Exemplo comparativo 9 Síntese de benzoato de esmilagenina a partir da epiesmilagenina

Foi adicionada uma solução de diisopropilazodicarboxilato (0,81 g, 4,0 mmol) em THF seco (2 mL) a uma solução agitada de epiesmilagenina (0,83 g, 2,0 mmol), trifenilfosfina (1,05 g, 4,0 mmol) e ácido benzóico (0,49 g, 4,0 mmol) em THF seco (20 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente e monitorizada por cromatografia de camada fina. Depois de 2 h o material inicial tinha sido todo consumido. O solvente foi removido em vácuo, o xarope residual foi 28 dissolvido em éter (30 mL) e a solução foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio saturado aquoso (25 mL) . A camada orgânica foi secada sobre MgSC>4 e filtrada através de um filtro de sílica pequeno, filtro esse lavado com éter Os filtrados e as lavagens combinados foram concentrados em vácuo para produzir benzoato de esmilagenina sob a forma de um sólido branco.

Exemplo comparativo 10 Síntese de benzoato de sarsasapogenina a partir da episarsasapogenina

Foi adicionada uma solução de diisopropilazodicarboxilato (0,81 g, 4,0 mmol) em THF seco (2 mL) a uma solução agitada de episarsasapogenina (0,83 g, 2,0 mmol), trifenilfosfina (1,05 g, 4,0 mmol) e ácido benzóico (0,49 g, 4,0 mmol) em THF seco (20 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente e monitorizada por cromatografia de camada fina. Depois de 2 h o material inicial tinha sido todo consumido. O solvente foi removido em vácuo, o xarope residual foi dissolvido em éter (30 mL) e a solução foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio saturado aquoso (25 mL) . A camada orgânica foi secada sobre MgSCd e filtrada através de um filtro de sílica pequeno, filtro esse lavado com éter Os filtrados e as lavagens combinados foram concentrados em vácuo para produzir benzoato de sarsasapogenina sob a forma de um sólido branco. mp 173-175 °C; ΧΗ NMR (500 MHz, CDC13) : δ 0,77 (3H, s, 18- CH3), 1,00 (3H, d, J = 6,7 Hz, 21- CH3) , 1,04 (3H, s, 19- CH3), 1,08 (3H, d, J = 7,0 Hz, 27-CH3) , 1, 1-2, 1 (27H, multipleto complexo, alifáticos) , 3,31 (1H, br, d, J = 10,9

Hz, 26- OCflH), 3,96 (1H, br, dd, J= 10,9, 2,0 Hz, 26-OCHff), 29 4,42 (1H, m, 16-OCH), 5,34 (1H, br, s , H-3), 7,44 (2H, br, t, J = 7,6 Hz, H aromático), 7,55 (1H, br, t, J = 7, 6 Hz, H aromático), 8, 05 (1H, br, d, J = 7,6 Hz, H aromático) ppm; 13C NMR (125,6 MHz, CDC13) : δ 14,56, 16,28, 16,71, 21,17, 24,28 , 25,41, 26, 01, 26, 19, 26, 69, 27,31, 31,02, 31,33, 31, 98 , 35,37, 35,57, 37,92, 40,28, 40,48, 40,91, 42,36, 56, 63 (C-l4), 62,33 (C —17) , 65,36 (C-2 6), 71,54 (C — 3) , 81,22 (C-16) , 109,94 (C—22 ) , 128,54 (C aromático), 129,73 (C aromático), 131,39 (C aromático), 132,9 (C aromático), 166,13 (carbonilo) ppm.

Exemplo comparativo 11 Síntese da episarsasapogenina a partir da sarsasapogenona

Foi adicionada uma solução de tri-terc-butóxi hidreto de alumínio e litio em THF (1M, 41,71 kg) (durante cerca de 2 horas) a uma solução agitada de sarsasapogenona (17,38 kg,) em THF seco (cerca de 70 kg) de -23 a -30°C em nitrogénio seco. A linha do processo foi lavada com THF e a mistura foi agitada de -23 a -30°C durante cerca de 3 horas. A solução resultante foi cuidadosamente arrefecida rapidamente com solução aquosa de sulfato de sódio (5,67 kg em 28,67 kg de água). Os sais inorgânicos foram removidos por filtração e lavados com THF (184 kg) . Foi adicionada água (63,18 kg) e a maior parte do THF foi removida por destilação. Foi adicionada água adicional (126,44 kg) e o produto foi isolado por filtração. O produto foi lavado com água (2 x 17,38 kg) e acetona (4 x 13,73 kg). O produto foi secado de 35 a 40 °C para produzir a episarsasapogenina (14,48 kg).

Lisboa, 30 de Abril de 2010

Claims (18)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Método de preparação estereoespecífica de uma 3β-ύύάηόχί-5β-Η sapogenina esteróide, ou de um derivado da mesma, que compreende a redução de uma 3-θθ^-5β-Η sapogenina esteróide mediante utilização de um agente redutor com um organoborano seleccionado de um trialquil ou triaril borohidreto metalo-alquílico, e em que a 3β-hidróxi-5β-H sapogenina esteróide, ou um derivado da mesma, é um composto com a seguinte fórmula geral

em que Ri, R2, R3, R4, Rs, Re, R7, Rs e R9 são, independentemente uns dos outros, H, C1-4 alquilo, OH, ou OR, em que R = C6-12 arilo ou C1-4 alquilo, ou em que Rs e R6 juntos podem representar a = 0 (carbonilo) ou um grupo de carbonilo protegido, Rio representa β-ΟΗ, um grupo de açúcar β-0-ligado ou qualquer grupo de éster β-orgânico, em que o agente redutor é o reagente organoborano cujos grupos orgânicos contêm mais de dois átomos de carbono e a sapogenina obtida é predominantemente uma 3β-ύίάηόχί,5β-Η sapogenina. 2

2. Um método de acordo com a reivindicação 1, em que o organoborano é seleccionado entre o tri-sec-butilborohidreto de litio, o tri-sec-butilborohidreto de potássio, o tri-sec-butilborohidreto de sódio, o trisiamil borohidreto de litio, o trisiamil borohidreto de potássio, o trifenil-borohidreto de potássio e o trifenil-borohidreto de litio.

3. Um método de acordo com a reivindicação 2, em que o organoborano é tri-sec-butilborohidreto de litio.

4. Um método de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que o rácio molar da sapogenina predominante, obtida em vez do 3-epímero alternativo, é de, pelo menos, cerca de 10:1.

5. Um método de acordo com a reivindicação 4, em que o rácio é de, pelo menos, 15:1.

6. Um método de acordo com uma das reivindicações anteriores, quando realizado num solvente orgânico seleccionado entre tetrahidrofurano, tolueno, terc- butil metil éter, dietoximetano, 1,4-dioxano, 2-metiltetrahidrofurano e qualquer mistura dos mesmos.

7. Um método de acordo com a reivindicação 6, em que o solvente orgânico é essencialmente constituído por tetrahidrofurano.

8. Um método de acordo com a reivindicação 6, em que o solvente orgânico é essencialmente constituído por tolueno. 3

9. Um método de acordo com a reivindicação 6, em que o solvente orgânico é essencialmente constituído por 1,4-dioxano.

10. Um método de acordo com a reivindicação 6, em que o solvente orgânico é essencialmente constituído por 2-metiltetrahidrofurano.

11. Um método de acordo com a reivindicação 1, em que a sapogenina é seleccionada entre a sarsasapogenina, a esmilagenina e ésteres das mesmas.

12. Um método de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que um material inicial de 3-οβόο,5β-Η sapogenina esteróide é preparado por hidrogenação catalítica heterogénea de uma A4,3-ceto sapogenina esteróide correspondente para converter a A4,3-ceto sapogenina esteróide, pelo menos predominantemente, na referida 5β-Η,3-cetona.

13. Um método de acordo com a reivindicação 12, em que a hidrogenação catalítica heterogénea é realizada utilizando hidrogénio e um catalisador de paládio num solvente orgânico.

14. Um método de acordo com a reivindicação 13, em que o catalisador de paládio está presente num suporte. Um método de acordo com uma das reivindicações 12 a 14, em que a A4,3-ceto sapogenina esteróide é diosgenona.

15. 4

16. Um método de acordo com a reivindicação 15, em que a diosgenona é obtida por oxidação da diosgenina.

17. Um método para a síntese da esmilagenina de acordo com a reivindicação 1, compreendendo a hidrogenação catalítica da diosgenona seguida da redução da 3-ceto,5B-H sapogenina esteróide resultante utilizando um organoborano seleccionado de um trialquil ou triaril borohidreto metalo-alquílico.

18. Um método de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que uma sapogenina inicialmente formada é subsequentemente convertida num éster ou num sal do mesmo. Lisboa, 30 de Abril de 2010