PT1250313E - Mono-hidrato de cis-ciano-4-3-( ciclopentiloxi )-4-metoxifenil ciclo-hexanocarboxilato de lítio - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "MONO-HIDRATO DE CIS-CIANO-4-3-(CICLOPENTILOXI)-4-ΜΕΤΟΧΙFENIL CICLO-HEXANOCARBOXILATO DE LÍTIO" Área da Invenção

Esta invenção refere-se à preparação de um mono-hidrato do sal de litio de cis 4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexanocarboxilato e ao hidrato per se.

Antecedentes da Invenção

As fosfodiesterases nucleotidicas ciclicas (PDEs) representam uma família de enzimas que hidrolisam os segundos mensageiros intracelulares ubíquos, 3',5'-monofosfato de adenosina (cAMP) e 3', 5'-monofosfato de guanosina (cGMP) nos seus correspondentes metabolitos 5'-monofosfato inactivos. Crê-se que existam, pelo menos, dez classes distintas de isozimas PDE, possuindo, cada uma, características físicas e cinéticas únicas e representando, cada uma, um produto de uma família genética diferente. Estas distinguem-se utilizando algarismos Árabes 1-10.

Uma nova abordagem com vista ao aperfeiçoamento do perfil de efeitos adversos de inibidores de PDE consiste na concepção de uma nova geração de compostos que inibam apenas uma única isozima PDE, í. e., a isozima PDE que predomina no tecido da célula de interesse. A isozima PDE cAMP predominante em células imunitárias e inflamatórias é a PDE4. É igualmente um regulador 1 fundamental do teor de cAMP no músculo liso das vias respiratórias. Deste modo, a inibição selectiva de PdE4 eleva o teor de cAMP nas células imunitárias e inflamatórias, bem como no músculo liso das vias respiratórias. ). Isto conduz a efeitos anti-inflamatórios bem como a broncodilatação. Uma ou ambas destas acções terapêuticas são úteis no tratamento de uma variedade de doenças, incluindo, mas não limitadas a asma e COPD. Inibidores de PDE4, particularmente inibidores específicos de PDE4, são igualmente úteis no tratamento de outras doenças na área da inflamação (e. g., asma, doença pulmonar obstrutiva crónica, doença inflamatória intestinal, artrite reumatóide), efeitos relacionados com o factor de necrose tumoral e com a deterioração cognitiva (e. g., demência multienfarte, disfunção cognitiva ou apoplexia). Esta invenção refere-se a um composto que é melhor tolerado que inibidores de PDE4 anteriores, nomeadamente o ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexano-l-carboxílico. Mais especificamente, esta invenção proporciona o hidrato do sal de litio deste ácido.

Descrição das Figuras A Fig. 1 é um espectro ultravioleta do sal de Li mono-hidrato A Fig. 2 é um espectro infravermelho do sal de Li mono-hidrato. A Fig. 3 é um traçado de uma emissão MS do mono-hidrato de Fórmula (I) 2 A Fig. 4. é um fluxograma dos produtos de ionização MS do mono-hidrato de Fórmula (I).

Sumário da invenção

Esta invenção refere-se ao mono-hidrato cis 4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexanocarboxilato de litio o qual possui a estrutura representada pela Fórmula (I):

COjLi + HjjO d) e a um processo para a sua preparação, como abaixo descrito.

Exemplificação Específica

Um processo de preparação do ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexano-l-carboxílico é descrito em várias publicações. Ver, por exemplo, a patente U.S. 5552438 emitida a 3 de Setembro de 1996 e o pedido de patente PCT pendente número PCT/US98/02749 publicado a 13 de Agosto de 1998 como WO 98/34584 ou o pedido PCT US98/21-61 publicado a 22 de Abril de 1999 como WO 99/18793. Estas e outras publicações, explicam como preparar o sal de Li do referido ácido. Mas esses processos não resultam na preparação de um hidrato do sal de Li, incluindo um mono-hidrato. 3

Exemplo 1

Um lote de sal de lítio anidro do ácido foi preparado pelo processo detalhado nos supracitados pedidos PCT WO 98/34584 e WO 99/18793. 0 lote foi cristalizado a partir de 80 mL de acetonitrilo e 4 mL de água e enxaguado com 9,5 mL de acetonitrilo e 0,5 mL de água. 0 bolo de filtração foi, em seguida, cristalizado a partir de acetonitrilo e 4 mL de água e enxaguado com 9,50 mL de acetonitrilo e 0,5 mL de água. O material foi seco numa estufa de vácuo (50 °C, 20 polegadas) durante 48 horas para proporcionar o mono-hidrato.

Aparência: pó branco.

Espectroscopia Ultravioleta O espectro de absorção ultravioleta do mono-hidrato foi medido utilizando um espectrofotómetro Perkin-Elmer Lambda 7, para um solução de 0,0076 mg/mL em metanol. O espectro é dominado pelo cromóforo aromático e está em conformidade com outros compostos na série como apresentado na Tabela 1 e Figura 1. 4

Tabela 1 Bandas de Absorção Ultravioleta

Comprimento de onda (nm) ε Atribuição 206 38,400 XB (aromático) 231 9, 600 "La 280 3, 500 "Lb

Espectroscopia de Infravermelho 0 espectro de absorção infravermelho do sal de Li mono-hidratado foi obtido como um sedimento de brometo de potássio utilizando um espectrómetro Nicolet Magna 760 FT-IR. O espectro foi medido com uma resolução de 4 cm"1. O espectro possuía as atribuições de banda apresentadas na Tabela 2. O espectro de infravermelho é apresentado na Figura 2.

Tabela 2 Atribuições de Bandas no Infravermelho para o lote KW- 27173-68C0 Número de onda (cm-1) Atribuição 3573 alongamento O-H (água) 3319, 3208 alongamento O-H (água de hidratação) 3100-3000 alongamentos =C-H 3000-2800 alongamentos C-H 2230 alongamento nitrilo 5 1647 alongamento C=0 (ácido) 1566 alongamento C=0 (carboxilato) e alongamentos C=C 1517, 1505 alongamentos C=C 1425 deformação C-H e elongamentos C=C 1258, 1167, 1142 alongamentos C-0 811, 777, 734 deformações C-H aromáticas

Exemplo 2 — Titulação de Karl Fischer A água foi determinada por titulação de Karl Fischer. Utilizou-se um instrumento Mettler DL18 para realizar a determinação. Os reagentes foram obtidos de Cresent Chemical Co., Hauppauge, NY, EUA e ostentavam a denominação comercial Hydranal (padrão: tartarato de sódio -2-hidrato; titulante; e solvente) . Verificou-se que o teor de água era de 5,14% p/p, o qual concordou com o valor teórico para uma molécula de água (4,91% p/p).

Exemplo 3 -- Análise Termogravimétrica A análise TG do lote preparado no Exemplo 1 foi conduzida utilizando procedimentos padrão. Observou-se uma perda de peso total de 4,96% a aproximadamente 137 °C. A perda de peso é coerente com aquela de um mono-hidrato. 6

Exemplo 4

Espectroscopia NMR

Os espectros NMR de 1H e 13C do sal de lítio mono-hidrato foram medidos a 400,13 MHz e 100,63 MHz, respectivamente, utilizando um espectrómetro Bruker Instruments ΔΜΧ 400 mantido a 25 °C. A amostra foi preparada por dissolução de 20,1 mg em 0,8 mL de DMSO-d6 (% D atómica de 99,96, ISOTEC), e os espectros foram relacionados com tetrametilsilano como um solvente de referência secundário. Os espectros NMR de protão e 13C GASPE (edição de multiplicidade de 13C por meio de uma sequência de Eco de Spin Controlada) são apresentados nas Figuras 3 e 4, e os dados de 3H e 13C são coerentes com a estrutura de um sal de lítio mono-hidratado de Fórmula (I). A informação homonuclear bidimensional utilizada nas atribuições estruturais inclui dados COSY (Espectroscopia de Correlação) que foram utilizados na identificação dos membros de cada sistema de spin de protão e dados NOESY (Espectroscopia de

Efeito Overhauser Nuclear) que indicou interacções nOe espaciais. Os dados nOe auxiliaram no estabelecimento da relação espacial entre os sistemas de spin individuais e na definição da relação estereoquimica entre os substituintes 1 e 4. A informação heteronuclear bidimensional utilizada nas atribuições estruturais inclui dados HMQC (Coerência Heteronuclear Quântica Múltipla) que permitiram a atribuição dos sinais 13C protonados por meio de correlações de uma ligação e dados HMBC (Coerência Heteronuclear de Ligação Múltipla) que permitiram a atribuição de sinais 13C quaternários por meio de correlações de ligações múltiplas. Os dados HMBC serviram igualmente para verificar a totalidade das atribuições XH e 13C anteriores. As atribuições 7 dos desvios químicos para o sal mono-hidratado em DMS0-d6 estão sumariadas na Tabela 3.

Tabela 3

Posição 13C Desvio Químico 13C , δ (multiplicidade) Desvio Químico ΧΗ , δ (integração) Multiplicidade 1H (J=Hz) 5 178,9 (s) 4' 149,2 (s) 3' 147,0 (s) 1' 133,7 (s) CN 123,1 (s) 6' 117,5 (d) 6,99 (1H) dd (J=2,3, 9,2 Hz) 2' 112,7 (d) 7,00 (1H) d (J=2,3 Hz) 5' 112,2 (d) 6, 93 (1H) d (J=9,2 Hz) 1" 79,6 (d) 4,81 (1H) m ch3o 55,6 (q) 3,72 (3H) s 1 44,5 (d) 1, 96 (1H) m 4 43,0 (s) 3 36,5 (2C, t) 2,06 (2H) m 1,76 (2H) m 2" 32,2 (2C, t) 1,87 (2H) m 1, 69 (2H) m 2 27,5 (2C, t) 2,01 (2H) m 1, 63 (2H) m 3" 23,6 (2C, t) 1, 69 (2H) m 1,56 (2H) m

Exemplo 5

Espectrometria de Massa de Ionização por Desorção Química 0 espectro de massa de ionização por desorção química (DCI/MS) do sal de lítio mono-hidratadoo foi obtido utilizando um espectrómetro de massa de quadripolo triplo Nermag R30-10. Uma solução de metanol:cloreto de metileno a 1:1 do mono-hidrato foi preparada a uma concentração de 0,1 mg/mL. A amostra foi introduzida no espectrómetro de massa utilizando uma sonda DCI. A sonda foi aquecida a uma razão de 20 °C/s. O reagente gasoso foi amónia. O espectro de massa foi varrido desde 60 a 860 Da a uma razão de 1,0 varrimentos/s. O espectro de massa foi obtido utilizando um sistema de dados Mass Evolution EZScan e processado utilizando o software HP MS ChemStation (Figura 3).

Observaram-se os seguintes adutos iónicos moleculares: [M+H]+ a m/z 344 e [M+NH4]+ a m/z 361. As estruturas iónicas plausíveis para os fragmentos observados, coerentes com a estrutura do mono-hidrato de Fórmula (I), são dadas na Figura 4.

Lisboa, 3 de Janeiro de 2007 9

Claims (3)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto que é o mono-hidrato do sal de lítio de cis 4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexanocarboxilato.
2. 2. Preparação farmacêutica consistindo no mono-hidrato do sal de litio de cis 4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexanocarboxilato e num excipiente farmaceuticamente aceitável.
3. 3. Método de preparação do mono-hidrato do sal de litio de cis 4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil] ciclo- hexanocarboxilato, método esse que compreende o tratamento de uma alíquota de sal de litio anidro com acetonitrilo e água. Lisboa, 3 de Janeiro de 2007 1