PT103839B - Composições farmacêuticas contendo a enzima ciprosina, uma peptidase aspártica de cynara cardunculus, e a sua inclusão em formulações antitumurais - Google Patents
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Abstract
É OBJECTO DA PRESENTE INVENÇÃO A UTILIZAÇÃO DUMA PREPARAÇÃO DE UMA FITEPSINA, MAIS PRECISAMENTE DE UMA CIPROSINA, CONTENDO O HETERODÍMERO, O SEU PROPÉPTIDO N-TERMINAL, PÉPTIDO MADURO N-TERMINAL E PÉPTIDO MADURO C-TERMINAL, ASSIM COMO OUTRAS ESPÉCIES PRECURSORAS, PRODUTOS DE PROCESSAMENTO E ESPÉCIES AGREGADAS, ISOLADAS OU EM QUALQUER COMBINAÇÃO DAS MESMAS, NATIVA, EXTRAÍDA A PARTIR DA PLANTA CYNARA CARDUNCULUS, OU RECOMBINANTE, EXTRAÍDA DO SOBRENADANTE DE UMA CULTURA DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE, MODIFICADA GENETICAMENTE PARA A PRODUÇÃO HETERÓLOGA DA CIPROSINA, PARA FINS TERAPÊUTICOS, MAIS PRECISAMENTE PARA A SUA APLICAÇÃO COMO AGENTE ANTITUMORAL.
Description
1- Composições farmacêuticas caracterizadas por conterem a proteína ciprosina.
Claims (17)
- 2- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas pela proteína ciprosina ser extraída, com ou sem purificação, directamente a partir de uma fonte natural, mais precisamente, mas não limitada a Cynara cardunculus.
- 3- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas pela sequência de DNA codificante para a enzima ciprosina, ou qualquer fracção da mesma, ser recombinante, e consequentemente o produto, ou produtos, da tradução e processamento após tradução ser/em extraído/s e purificado/s a partir de um microrganismo detentor da/s sua/s expressão/ões heteróloga/s, mais precisamente a partir de, mas não limitado/s a Sacharomyces cerevisiae ou Escherichia coli.
- 4- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas pela sequência de DNA codificante para a enzima ciprosina, ou qualquer fracção da mesma, ser recombinante, e consequentemente, o produto, ou produtos da tradução e processamento após tradução ser/em extraído/s e purificado/s a partir da cultura de uma linha celular geneticamente manipulada, como sejam, mas não limitadas a, linhas celulares de insecto e linhas celulares de mamífero tais como linhas celulares humanas.
- 5- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 1 a 4, caracterizadas por conterem a holoenzima, todos os lobos/cadeias polipeptidicas/subunidades, precursoras finais, constituintes da holoenzima, sob a forma combinada ou isolada, quer numa mistura contendo qualquer combinação e mesmas, quer numa composição proporção das única entidade polipeptidica, produto contendo uma da tradução do transcrito derivado do gene da ciprosina e/ou do posterior processamento do produto traduzido.
- 6- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações1 a 5, caracterizadas por conterem o prépropéptido da ciprosina e/ou o propéptido da ciprosina contendo a extremidade N-terminal e/ou o lobo/cadeia/subunidade madura N-terminal e/ou o propéptido da ciprosina contendo o C-terminal e/ou o dominio PSI, específico das fitepsinas vegetais e/ou o lobo/cadeia polipeptídica/subunidade madura N-terminal e/ou o polipéptido isolado contendo o domínio PSI e/ou qualquer outro produto secundário derivado do processamento ou degradação do pré-propéptido inicial.
- 7- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 1 a 6 caracterizadas pela sequência de nucleótidos do DNA codificante para a enzima ciprosina, ou qualquer fracçâo da mesma, ter sido modificada por técnicas de engenharia genética de forma a alterar a sequência de amino ácidos do respectivo produto, ou produtos, da expressão da sequência alterada.
- 8- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 1 a 7, caracterizadas por conterem um ou mais péptidos, de qualquer dimensão, cuja sequência de amino ácidos se pode/m deduzir da sequência do prépropéptido da ciprosina, derivado ou não duma sequência de DNA previamente modificada, obtido/s através da degradação ou digestão peptidica do pré-propéptido, ou produtos do processamento natural do mesmo, ou sintético/s, obtido/s por síntese química.
- 9- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 1 a 8, caracterizadas por conterem qualquer espécie das anteriormente descritas, conjugadas com elementos de interacção com o sistema imunitário, como sejam anticorpos ou qualquer um dos seus lobos/cadeias/subunidades ou fracções das mesmas, imunoestimulantes de qualquer natureza, antigénios, linfócitos-T com actividade citotóxica e/ou células dendríticas.
- 10- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 1 a 9, caracterizadas pela sua administração em combinação, conjugação, ou inseridas em moléculas transportadoras, ou veículos, como sejam, mas não limitadas a, nanoparticulas encapsuladoras.
- 11- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1 a 10, caracterizadas por serem administradas em combinação, ou conjugação, como aditivos, diluentes, solventes, filtros, lubrificantes, excipientes ou estabilizadores.
- 12- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicações 1 a 11, caracterizadas por serem administradas em animais, preferencialmente mamíferos, nomeadamente em humanos.
- 13- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 12, caracterizadas por serem administradas de forma sistémica ou localizada, por via intravenosa, oral, ou por qualquer outra via.
14- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 12 e 13, caracterizadas por terem actividade anti-tumoral. 15- Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por terem actividade anti- tumoral in vitro, em linhas celulares como sejam, mas não limitadas a, uma linha epitelial humana derivada de um carcinoma do colon (HCT), uma linha epitelial humana derivada de um adenocarcinoma (HeLa), uma linha epitelial humana derivada de um fibrosarcoma (HT) e uma linha epitelial humana derivada de um meduloblastoma (TE). - 16- Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por inibir em 50% o crescimento de linhas tumorais como sejam, mas não limitadas a, uma linha epitelial humana derivada de um carcinoma do colon (HCT), uma linha epitelial humana derivada de um adenocarcinoma (HeLa), uma linha epitelial humana derivada de um fibrosarcoma (HT) e uma linha epitelial humana derivada de um meduloblastoma (TE), a uma concentração de preparação de ciprosina que pode variar entre 1 e 100 ug/ml.
- 17- Composição farmacêutica, de acordo com as reivindicação 14, caracterizada por ter capacidade de inibir em 50% o crescimento de linhas tumorais humanas a uma concentração de preparação de ciprosina que pode variar entre 0,001 e 1 ug/ml.
- 18- Utilização das composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 14 a 18, caracterizados por serem aplicadas em terapias contra formas de cancro.
- 19- Utilização das composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 18, caracterizada pela forma de cancro se poder incluir dentro do grupo constituído pelo cancro do colo do recto, cancro do intestino, cancro do colo do útero, cancro do ovário, cancro da próstata, cancro do estômago, cancro da mama, cancro da bexiga, linfoma, sarcoma, cancro do pâncreas, melanoma, glioma, neuroblastoma, cancro do pulmão, cancro da boca, cancro da cabeça e pescoço, cancro do figado, cancro de origem cervical, e cancros de origem hematológica.
- 20- Composições farmacêuticas, de acordo com as reivindicações 12 a 13, caracterizadas por serem utilizadas para diminuir a velocidade de progressão, minimizar os efeitos malignos, promover o tratamento ou cura de condições fisiológicas ou patologias humanas, nomeadamente, mas não limitadas a, hipertensão arterial, infecção retroviral, degradação da hemoglobina e problemas digestivos.28 de Setembro de 2007FIG. 1/5FIG iFIG. 2/5A. $Si ;4í!B,V'.;>vLog [cípmsSfsal fu^nL).·£La$ [£φίΌ5ί·Ϊ3] (ug/ml)D.
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