PT103326A

PT103326A - Método para obtenção de um concentrado natural rico em hidroxitirosol a partir de resíduos da produção de azeite utilizando tecnologias limpas

Info

Publication number: PT103326A
Application number: PT103326A
Authority: PT
Inventors: Manuel Luis De Magalhaes Nunes Da Ponte; Catarina Maria Martins Duarte; Joao Paulo Serejo Goulao Crespo; Svetlozar Gueorguiev Velizarov; Ana Alexandra Figueredo Matias; Jose Luis Cardador Dos Santos; Ana Vital Morgado Marques Nunes
Original assignee: Inst De Biolog Ex E Tecnologic
Priority date: 2005-07-27
Filing date: 2005-07-27
Publication date: 2007-01-31
Also published as: CA2617002A1; CA2617002C; AU2006273658A1; ZA200800880B; BRPI0614917B8; WO2007013032A2; TNSN08045A1; PL1910257T3; WO2007013032A3; ES2455999T3; EP1910257A2; US8066881B2; US20080179246A1; MA29748B1; BRPI0614917B1; PT1910257E; EP1910257B1; AU2006273658A2; BRPI0614917A2

Abstract

ESTA INVENÇÃO DESCREVE UM MÉTODO NO ÂMBITO DAS TECNOLOGIAS LIMPAS PARA A OBTENÇÃO DE UM CONCENTRADO NATURAL RICO EM HIDROXITIROSOL A PARTIR DE RESÍDUOS DERIVADOS DA PRODUÇÃO DE AZEITE. O PROCESSO DESENVOLVIDO CONSISTE NA UTILIZAÇÃO COMBINADA OU EM SEPARADO DE TECNOLOGIA DE MEMBRANAS E UTILIZAÇÃO DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS. O CONCENTRADO NATURAL OBTIDO POR ESTE MÉTODO APRESENTA PROPRIEDADES ANTIOXIDANTES E ANTI-MICROBIANAS COM POTENCIAL APLICAÇÃO NAS INDÚSTRIAS ALIMENTAR, COSMÉTICA E FARMACÊUTICA. O CONCENTRADO PODE SER APRESENTADO SOB A FORMA DE SÓLIDO, SOLUÇÃO AQUOSA, EMULSÃO OU NANOPARTÍCULAS DE BASE LIPÍDICA.

Description

1

DESCRIÇÃO "MÉTODO PARA OBTENÇÃO DE DM CONCENTRADO NATURAL RICO EM HIDROXITIROSOL A PARTIR DE RESÍDUOS DA PRODUÇÃO DE AZEITE, UTILIZANDO TECNOLOGIAS LIMPAS."

CAMPO DA INVENÇÃO 1. A presente invenção refere-se a um processo para a obtenção de um concentrado natural bioactivo a partir dos resíduos da produção de azeite, utilizando tecnologias limpas tais como extracção com solventes biocompatíveis, fraccionamento com fluídos supercríticos e/ou processos com membranas (nanofiltração e osmose inversa). 2. A presente invenção destina-se a ser utilizada na obtenção de um concentrado natural bioactivo a partir dos resíduos da produção de azeite, sendo as suas áreas de aplicação a utilização como aditivo para produtos alimentares, como composto bioactivo para formulação de cosméticos e/ou fármacos, e como nutracêutico. Os domínios industriais abrangidos são a indústria alimentar, farmacêutica e cosmética.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO 3. Nos últimos anos, estudos epidemiológicos têm correlacionado a dieta mediterrânica praticada nos países da bacia mediterrânica, com a baixa incidência de doenças coronárias, de aterosclerose e de alguns tipos de cancro. Uma das principais características desta dieta é o consumo diário de vegetais, frutas, peixe e de 2 azeite como gordura principal para a confecção dos alimentos. (Visioli et al., 2002, Owen et al., 2000) . 4. Estudos desenvolvidos sobre os biofenóis presentes na azeitona (e folhas da oliveira) têm levado os investigadores a reconhecer as suas propriedades biológicas, e a associar essas mesmas propriedades ao azeite. Desta forma, os compostos bioactivos presentes tanto nas azeitonas como no azeite são considerados como alvos importantes quer para a indústria farmacêutica, quer para a indústria alimentar (Schieber et al., 2001). No entanto, 98% destes biofenóis perdem-se durante a produção de azeite e permanecem nas águas de lavagem das azeitonas e/ou pastas resultantes (Rodis et al., 2002). 5. Os compostos presentes em concentrações mais elevadas nos resíduos sólidos são os secoiridoides glicosidados, enquanto que nas águas de lavagem são os derivativos dos secoiridoides, principalmente o hidroxitirosol e a oleuropeína (Mullinacci et al., 2001). 6. As propriedades dos resíduos obtidos durante a produção de azeite, bem como os extractos obtidos a partir deste, têm sido estudados (Visioli et al., 1999); em particular destacou-se a actividade anti-bacteriana (Ramos-Cormenzana e tal., 1996) associada quer à oleuropeína, quer ao hidroxitirosol, sendo este último considerado o composto mais bioactivo (Bisignano et al., 1999). 7. 0 hidroxitirosol tem sido referido como um potente agente quimiopreventivo (Manna e tal., 2000), e foi considerado como o componente com maior poder antioxidante presente nos resíduos da produção de azeite. As primeiras propriedades reconhecidas no hidroxitirosol foram a sua capacidade de previnir a oxidação da lipoproteína de baixa densidade (LDL) (Visioli, and Galli, 1998), e a agregação das plaquetas (Petroni e tal, 1995) . Manna et al (2000) provou que 3 este composto consegue proteger vários sistemas celulares humanos, da toxicidade induzida por espécies de oxigénio reactivas. As actividades do hidroxitirosol como composto que consegue induzir modificações no ADN e nos aminoácidos, têm sido também investigadas (Aruoma, et al. e Deiana et al, 1999). 8. Visioli et al (2000) demonstrou que, dependendo da dose, estes compostos biofenólicos são absorvidos nos humanos, e que seguidamente são excretados nas urina como conjugados glucurinados. 9. Hoje em dia, o azeite é obtido exclusivamente através de meios mecânicos e físicos, que consistem na prensagem do fruto (polpa e semente) e na sua lenta mistura até à obtenção de uma pasta homogénea, que é depois sujeita a um processo de separação de fases (extracção do azeite). 10. 0 processo tradicional de separação de fases utiliza um sistema de prensas hidráulicas, que tem vindo a ser substituído por um processo contínuo de centrifugação. O processo contínuo pode ser ainda designado por processo de 3 fases, quando se obtém o azeite, água ruça e bagaço como produtos finais, ou de 2 fases quando os produtos finais são apenas o azeite e o bagaço. 11. No sistema de 3 fases, adiciona-se água à pasta de azeitona, e faz-se passar esta mistura por uma centrífuga horizontal, onde é separada a parte sólida do mosto oleoso. O mosto passa depois por uma centrífuga vertical, onde se separa o azeite da água de vegetação. 12. Actualmente, o processo de duas fases é o mais utilizado, diferindo do de três fases pela menor adição de água. Como consequência, produz-se consideravelmente menos quantidade de águas residuais. Este processo utiliza decantadores de duas fases que separam o azeite e o bagaço, que por conter muito maior quantidade de humidade, se apresenta como um resíduo semi-sólido com 4 um aspecto semelhante a uma lama. 13. Existem já diversas patentes que apresentam métodos para a recuperação dos compostos fenólicos a partir destes resíduos. A patente US 6,361,803 descreve um método para a recuperação de compostos antioxidantes a partir de derivados da azeitona. Este método consiste numa extracção prévia com um solvente aquoso, sendo o extracto resultante alimentado a uma coluna de adsorção, por forma a reter os compostos com interesse. A posterior recuperação dos compostos faz-se através de eluição da coluna com um solvente orgânico. A patente US 6,849,770 descreve um método para obter hidroxitirosol através de um tratamento cromatográfico, e eluição com metanol ou com misturas água/etanol. A patente WO 0218310 descreve um método para obtenção de uma composição rica em hidroxitirosol a partir de águas ruças. 0 processo em questão consiste na extracção continua das águas ruças utilizando um método patenteado (Porocrit). As águas ruças passam num módulo de leito poroso de polipropileno através do qual entram em contacto com um fluido supercrítico. Adicionalmente, a patente US 5,714,150 descreve um método de extracção de oleuropeína a partir das folhas da oliveira utilizando apenas uma solução de água e etanol. 14. Os processos de filtração com membranas, e a sua integração com outros processos como a centrifugação, têm vindo a ser aplicados por vários grupos de investigação no tratamento de águas residuais provenientes do processo de produção de azeite. 15. Drouiche et al. (2004) descreve a utilização de um processo com membranas - ultrafiltração -, para remover grande parte dos sólidos e compostos orgânicos de águas residuais. Outro trabalho realizado por Turano et al. (2002), indica um processo integrado de centrifugação e 5 ultrafiltração para tratar as águas residuais da produção de azeite. Em termos do processo integrado, a centrifugação permite remover os sólidos em suspensão, e assim evitar a jusante problemas de colmatação na membrana, que conduzem a um declínio de fluxo de permeado. Além disso, apresenta uma vantagem do ponto de vista económico, pois é um equipamento que é normalmente utilizado no processo de produção do azeite. 16. Foi reportado um método analítico, desenvolvido por DellaGreca et al. (2004 e 2001), para a caracterização das águas residuais da produção de azeite. Este método envolve o fraccionamento das águas residuais através de um processo integrado de microfiltração, ultrafiltração, e osmose inversa. 17. Existem no mercado alguns concentrados ricos em hidroxitirosol, comercializados como suplemento dietético. Um deles é obtido pelo processo patenteado WO 0218310 já anteriormente referido, onde é reclamado que esse concentrado pode ser utilizado como um produto natural anti-bacteriano, anti-vírico e/ou anti-fúngico na agricultura, como agente terapêutico ou como aditivo alimentar.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Esta invenção pode ser ilustrada adicionalmente através dos desenhos que a acompanham:

Figura 1: Estrutura de alguns compostos fenólicos presentes no resíduo de 2 fases.

Figura 2: Esquema ilustrativo de uma possível combinação de processos que pode ser usada na execução desta invenção. Figura 3: Cromatogramas obtidos por HPLC de um concentrado 6 (a) obtido por extracção supercrítica e do respectivo extracto hidroalcoólico (b) , utilizado como alimentação. Para além de Hidroxitirosol, destacam-se pelo seu interesse biológico a luteolina, os ácidos hidroxicinâmicos como, o ácido cafeico e p-coumarico.

Figura 4: Comparação dos cromatogramas obtidos por HPLC do refinado obtido por extracção supercrítica (a) e do permeado obtido por nanofiltração (b), onde se destaca a o aumento da concentração do permeado realtivamente a hidroxitirosol e tirosol.

Figura 5: Gráfico obtido no decorrer de um teste antimicrobiano onde se verifica a redução na viabilidade das bactérias nas células infectadas com o aumento da concentração de hidroxitirosol presente no concentrado.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Esta invenção descreve um método no âmbito das tecnologias limpas para a obtenção de um concentrado natural rico em hidroxitirosol a partir de resíduos da produção de azeite. 0 processo desenvolvido consiste na utilização integrada de processos limpos que incluem a extracção com solventes biocompatíveis, fraccionamento com fluidos supercríticos e/ou utilização de tecnologia de membranas. O concentrado natural obtido por este método apresenta propriedades antioxidantes e anti-microbianas com potencial aplicação nas indústrias alimentar, cosmética e farmacêutica. 0 concentrado pode ser apresentado sob a forma de sólido, solução aquosa, emulsão ou nanopartícuias de base lipidica.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO 7 18. A principal vantagem e novidade da presente invenção consiste na utilização integrada de tecnologias limpas para recuperar selectivamente um ou mais dos solutos com potencial bioactivo presentes nos resíduos dos processos de produção do azeite. 19. Consideram-se resíduos da produção de azeite: i) as águas vegetativas e o resíduo sólido provenientes de lagares que utilizam o processo de três fases ii) o resíduo semi-sólido proveniente de lagares que utilizam o processo de duas fases iii) caroços de azeitona e folhas de oliveira. 20. A Figura 2 mostra um diagrama de uma unidade que inclui a integração dos seguintes processos: extracção com solventes biocompatíveis, fraccionamento com fluidos supercríticos e/ou utilização de tecnologia de membranas. O primeiro passo consiste na extracção (B) com água ou solventes biocompatíveis das lamas e resíduos do processo de produção de azeite (A). Ao extracto resultante poderão-se adicionar as águas ruças do processo de produção de azeite (C), sendo a mistura resultante centrigufada (D) por forma a remover os sólidos em suspensão. A corrente centrifugada poderá ser alimentada a um passo de separação por membranas, ou a um passo de separação por extracção supercrítica e membranas. O passo de separação por membranas é constituído pela nanofiltração (E), onde se separa o hidroxitirosol dos restantes compostos, e osmose inversa (F), onde se concentra o hidroxitirosol na corrente do retido. Do passo de separação por membranas resulta uma corrente rica em hidroxitirosol (G) , e água (H) que poderá ser reutilizada no processo. O passo de separação por extracção supercrítica e membranas é constituído por uma coluna de extracção supercrítica (I), onde se separa o hidroxitirosol dos demais compostos, e osmose inversa 8 (J), onde se concentra o hidroxitirosol no retido. Deste passo de separação resulta também uma corrente rica em hidroxitirosol (L) , e água (M) , que poderá ser também reutilizada no processo. 21. Para que o processo seja eficaz e a recuperação do(s) soluto(s) desejado(s) ocorra com rendimentos elevados e de forma selectiva, é necessário definir o conjunto: combinação de solventes biocompatíveis mais adequada na extracção/ membranas de nanofiltração e osmose inversa a utilizar/ condições óptimas de operação das instalações de membranas e de extracção supercritica. Só com esta abordagem integrada é possível realizar o processo de concentração do(s) soluto(s) desejado(s) com a selectividade desejada, de forma quantitativa, e com bons desempenhos de permeação / extracção. 22. Um solvente encontra-se no estado supercrítico quando está acima da sua temperatura e pressão crítica. Acima deste ponto, o equilíbrio líquido-vapor deixa de existir, surgindo uma única fase, fluida e densa. As propriedades destes fluidos assumem valores que se aproximam dos valores dos líquidos no que se refere à densidade, e dos valores dos gases no que se refere à viscosidade e difusividade. Para além disso, a possibilidade de alterar o poder solvente com pequenas alterações de temperatura e pressão, tornam a utilização deste tipo de fluidos muito interessante no que respeita à sua capacidade de fraccionamento de extractos. 23. A extracção de líquidos com fluidos supercríticos é efectuada numa coluna de separação que permite o contacto entre o fluido supercrítico e a matriz líquida. A mistura líquida é continuamente alimentada no topo da coluna por meio de uma bomba de líquidos, e o fluido supercrítico alimentado na base da coluna por meio de um compressor. O fluido supercrítico e os compostos nele 9 dissolvidos que deixam a coluna pelo topo, são separados num ciclone por expansão até aproximadamente 50 bar, e seguidamente o fluido supercritico é reciclado de novo para a coluna. A pressão dentro da coluna é controlada através de uma válvula pneumática localizada antes do ciclone de separação. Utilizando esta tecnologia, é possível processar directamente as águas ruças ou uma solução obtida através de uma pré-extracção a partir de resíduos da produção de azeite. Esta extracção preliminar deve ser efectuada utilizando solventes biocompatíveis, tais como água, etanol ou misturas água/etanol. 24. De acordo com a presente invenção, o passo de extracção supercrítica é efectuado num intervalo de temperaturas entre os 30°C e 200°C e a pressões entre 6MPa e 40MPa. 25. Qualquer fluido ou mistura de fluidos no estado supercritico ou no estado líquido sub-crítico pode ser utilizado na execução desta invenção. Preferencialmente, o fluido comprimido, ou a mistura destes fluidos, deve ser muito volátil, ou estar num estado gasoso às condições atmosféricas, de forma a facilitar a sua remoção por expansão e/ou evaporação, após o processo de extracção ter lugar. Por motivos de segurança, o fluido comprimido, ou a mistura destes fluidos, deve ainda ser não-tóxico e não-inflamável e deve poder ser reciclável para uso futuro. 26. A nanofiltração e a osmose inversa são processos de separação por membranas em fase líquida, em que a força motriz é definida pela diferença de pressão transmembranar entre o compartimento da alimentação e o do permeado. Se as membranas de nanofiltração e osmose inversa forem correctamente seleccionadas em termos das suas propriedades químicas e estrutura, é possível criar 10 condições que permitam o transporte do(s) soluto (s) desejado(s) de forma selectiva e com elevado fluxo de permeação. 27. Uma instalação típica de nanofiltração ou de osmose inversa é constituída por um vaso de alimentação, no qual se encontra a solução contendo o(s) soluto(s) que se pretende(m) recuperar. 0 conteúdo deste vaso é alimentado com uma bomba centrífuga ou de deslocamento positivo através de tubagem adequada ao módulo de nanofiltração ou osmose inversa, o qual é constituído por um compartimento de alimentação, pela membrana seleccionada através da qual o(s) soluto(s) desejado(s) permeiam, e pelo compartimento de permeado. 0 permeado pode ser encaminhado destas unidades de forma continua ou de forma descontínua, por abertura de válvulas ou por acção de bombas. Δ corrente de alimentação após contactar com a membrana pode ou não ser reintroduzida através de linhas de recirculação no vaso de alimentação. 28. A corrente de alimentação consiste numa solução aquosa ou hidroalcoólica proveniente do processamento de resíduos do processo de produção de azeite. 29. Os solutos que se pretendem recuperar compreendem compostos com potencial bioactivo. 30. A corrente de alimentação deverá estar preferencialmente a uma temperatura inferior a 150°C, no caso de se usarem membranas poliméricas sensíveis a temperaturas elevadas, mas poderá ser processada a temperaturas superiores no caso de se utilizarem membranas termicamente estáveis a temperaturas elevadas. 31. As membranas de nanofiltração e osmose inversa a utilizar deverão constituir uma barreira selectiva, de forma a evitar a permeação de qualquer constituinte da alimentação que não seja desejado, e deverão permitir a 11 permeação selectiva dos diferente solutos com potencial bioactivo presentes na alimentação inicial. As suas características devem permitir que os solutos que se pretendem recuperar tenham um fluxo de permeação elevado e que os solutos que não se pretendam recuperar tenham um fluxo de permeação baixo. 32. As membranas a utilizar poderão ser constituídas por diferentes tipos de materiais, podendo ser de natureza polimérica ou inorgânica. Podem igualmente incluir simultaneamente materiais poliméricos e materiais inorgânicos. Em relação à sua estrutura, podem ser homogéneas ou assimétricas, e podem igualmente ser compósitas, apresentando nesse caso diferentes camadas constituídas por diferentes materiais e/ou com estruturas morfológicas diferentes. Cada uma destas camadas pode ter uma espessura própria e diferente das outras camadas integrantes da membrana. 33. As membranas podem ter geometria plana ou tubular e podem estar inseridas em diferentes tipos de módulos, nomeadamente, módulos planos, módulos espirais, módulos de membranas tubulares, módulos de fibras capilares e módulos de fibras ocas. 34. A corrente de alimentação a processar pode ser alimentada aos módulos de membrana de forma contínua, semi-contínua, ou descontínua. 0 módulo de membranas pode estar submerso no tanque de alimentação, ou tanque reaccional, ou pode ser externo a este. Podem ser utilizados um ou mais módulos dispostos em série ou em paralelo. As membranas usadas em cada módulo podem ser iguais ou diferentes na sua natureza e a configuração do diferentes módulos pode ser idêntica ou diferente. 35. Em termos da sua natureza química, as membranas podem apresentar um carácter denominado hidrofóbico quando são permeáveis a espécies químicas com carácter hidrofóbico, 12 ou seja, espécies químicas que em solução aquosa apresentam um coeficiente de actividade a diluição infinita superior a 1. As membranas a utilizar podem igualmente apresentar um carácter denominado hidrofílico, quando são mais permeáveis a água do que a compostos orgânicos. 36. 0 valor da pressão no compartimento da alimentação que garante o transporte do(s) soluto(s) desejado(s) através das membranas de nanofiltração e osmose inversa, pode ser ajustado de forma a garantir uma força motriz adequada para obtenção do(s) fluxo(s) desejado(s) do(s) soluto(s) que se pretende(m) recuperar. Este valor de pressão absoluta deve preferencialmente situar-se entre os 5 e os 20 bar, para o caso da nanof iltração, e entre os 50 e 80 bar, para o caso da osmose inversa. 37. O concentrado rico em hidroxitirosol (G e L) a que se refere esta invenção, apresenta uma fracção em massa neste composto que pode variar de pelo menos 15% até 98%, preferencialmente e pode também conter outros compostos bioactivos que em conjunto com o hidroxitirosol apresentem efeitos sinérgicos, aumentando a actividade biológica do extracto. 38. 0 concentrado obtido pelos métodos ou combinação de métodos descritos anteriormente, pode ser utilizado numa variedade de aplicações. De entre essas aplicações podem-se referir: a) terapêutica/quimiopreventivo com aplicação na indústria farmacêutica e cosmética, devido às suas propriedades antioxidantes; b) Anti-microbiano (anti-bacteriano e anti-fúngico) com aplicações na indústria alimentar para aumento do tempo de vida do produto, na agricultura como controlo de pragas e como terapêutico no combate a infecções. 39. O concentrado obtido pode ser utilizado na forma de líquido, de sólido e de emulsão. Quando se refere 15 cultura de células infectadas com bactérias gram-negativas, Ehrlichia ruminantum. Após 48 h de contacto com as células, o concentrado demonstrou actuar no ciclo celular da bactéria, inibindo a sua total replicação e induzindo a morte das células infectadas. A figura 5 demonstra que a exposição da cultura infectada ao concentrado resulta na redução do número de bactérias.

REFERÊNCIAS

Patentes Estrangeiras US 6,361,803... Cuomo et al. US 6,849,770... Fernandez-Bolanos et al. US 5,714,150... Nashman WO 0218310... Crea

Outras Publicações

Allouche et al. "Toward a High Yield Recovery of Antioxidants and Purified Hydroxytyrosol from Olive Mill Wastewaters", J. Agric. Food Chem. 52(2) (2004) 267-273

Ryan et al. "Recovery of phenolic compounds from Olea europaea" Anal. Chim. Acta 445 (2001) 67-77

DellaGreca et al. "Low-molecular-weight components of olive oil mill waste-waters", Phytochem. Anal. 15 (2004) 184-188

DellaGreca et al. "Phytotoxicity of low-molecular-weight phenols from olive mill waste waters", Buli. Environ. Contam. Toxicol. 67 (2001) 352-359

Drouiche et al. "A compact process for the treatment of olive mill wastewater by combining UF and UV/H202 14 foi analisado por HPLC e o perfil cromatográfico é apresentado na figura 3. É possível verificar que o maior pico presente no cromatograma é o do hidroxitirosol e que a área correspondente a este composto e os seus derivados perfaz 35% da área total. Para além do hidroxitirosol é possível verificar ainda a presença de outros compostos fenólicos com interesse biológico e que em conjunto com o hidroxitirosol apresentam um efeito sinérgico positivo. Entre os outros polifenois presentes no extracto destacam-se pelo seu interesse biológico os ácidos hidroxicinâmicos como, o ácido cafeico e p-coumarico.

Exemplo 2:

Integração do processo de nanofiltração com o fraccionamento com fluidos supercríticos. 250 ml do refinado recolhido no processo descrito no exemplo 1 foi alimentado ao módulo de nanofiltração, onde foi processado a 10 bar de pressão transmembranar. Obtiveram-se 240 ml de permeado, com um rendimento de 70% relativamente ao hidroxitirosol, mas com composição global diferente do extracto obtido no exemplo 1. O permeado obtido foi ainda submetido a um passo de concentração por osmose inversa a 25 bar, e caracterizado pr HPLC. 0 respectivo cromatograma é apresentado na figura 4, onde se destaca a o aumento da concentração do permeado realtivamente a hidroxitirosol e tirosol.

Exemplo 3:

Caracterização da bioactividade de um dos extractos obtidos - Actividade Antimicrobiana

Um dos concentrados bioactivos obtidos de hidroxitirosol, foi adicionado em várias concentrações ao meio de uma 13 líquido, fala-se de uma solução aquosa, esta pode ou não ser liofilizada ou atomizada, dando origem a um sólido. Podem ser elaboradas formulações específicas com excipientes bio-aceitáveis e matrizes lipídicas, a fim de proteger a bioactividade associada ao composto mais activo, o hidroxitirosol. 40. Alternativamente, o concentrado pode ser utilizado sob a forma de emulsão tornando a sua aplicação na indústria alimentar mais facilitada. Podem ser obtidas formulações distintas com emulsionantes e surfactantes. Os emulsionantes podem ser ésteres de poliglicerol de ácidos gordos, ésteres de glicerois de ácidos gordos, lecitina ou combinações destes. As formulações podem ter uma fracção em volume de hidroxitirosol de 5 a 60%, mas preferencialmente entre 30 a 55%. Às formulações pode-se ou não adicionar ácido cítrico para estabilizar a emulsão. A invenção será ilustrada adicionalmente através dos três seguintes exemplos não limitativos.

Exemplo 1:

Obtenção de um concentrado de polifenois com hidroxitirosol através de um processo integrado de extracção com solventes biocompativeis e fraccionamento com fluidos supercríticos.

Extraíram-se 300 g de resíduo semi-sólido do processo de duas fases com 900 ml de uma solução hidroalcoólica numa razão v/v de 90:10 (etanol:água). O extracto foi centrifugado e a fase sobrenadante foi alimentada numa coluna de extracção com enchimento Sulzer, 4 m de altura e 4 cm de diâmetro interno. Fez-se contactar em contracorrente a matriz líquida com dióxido de carbono supercrítico. Recolheu-se 500 ml de extracto. O extracto 16 techniques", Desalination 169 (2004) 81-88

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Lisboa, 25 de Julho de 2005

Claims

1 Reivindicações 1. Processo que utiliza tecnologia limpa para obtenção de um concentrado rico em hidroxitirosol, a partir de resíduos da produção de azeite e produtos derivados da oliveira, caracterizado por compreender um ou mais dos seguintes processos: (a) extracção com solventes biocompativeis (b) extracção com um fluido supercritico (c) tecnologia de membranas.

2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de os solventes biocompativeis serem água ou etanol, ou misturas de ambos.

3. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a extracção supercrítica se processar numa coluna de enchimento, em que a alimentação é uma matriz liquida e o fluido utilizado é preferencialmente o dióxido de carbono.

4. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a extracção supercrítica se processar com pressões entre 6 e 40 MPa e num intervalo de temperaturas entre os 30°C e os 300°C.

5. Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo facto de a alimentação à coluna se efectuar pelo topo, e ser constituída por águas ruças ou extractos hidroalcoólicos de produtos ou sub-produtos da produção de azeite, e produtos derivados da oliveira.

6. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o extracto 2 hidroalcoólico apresentar uma razão águaretanol que pode variar entre 0-100%.

7. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a tecnologia de membranas compreender nanofiltração e/ou osmose inversa.

8. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a corrente de alimentação do processo de nanofiltração integrar águas ruças provenientes de lagares de três fases, extractos hidroalcoólicos de resíduos semi-sólidos provenientes de lagares de duas fases ou de folhas de oliveira ou extractos provenientes do processamento com fluidos supercríticos.

9. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de a gama de pressões utilizada se situar entre os 5 e os 20 bar para o caso da nanofiltração, e entre os 50 e 80 bar para o caso da osmose inversa.

10. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de as membranas utilizadas serem poliméricas ou inorgânicas, ou integrarem ambos os tipos de materiais.

11. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de as membranas serem homogéneas, ou assimétricas, ou compósitas.

12. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de as membranas terem geometria planar ou tubular, podendo estar dispostas em módulos planos, em módulos em espiral, em módulos capilares, em módulos de fibras ocas, ou em módulos tubulares.

13. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de se usar um ou mais 3 módulos de membrana, dispostos em série ou em paralelo.

14. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de o(s) módulo(s) de membrana estar(em) colocado(s) exteriormente em relação ao vaso de alimentação ou submerso(s) neste.

15. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de utilizar um ou mais vasos de alimentação, nos quais podem ser controladas de forma independente as suas condições ambientais.

16. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de as condições ambientais nos vasos de alimentação serem a temperatura e a pressão.

17. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de a corrente de alimentação ser introduzida no módulo de membranas de forma continua, semi-continua, ou descontinua.

18. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de os solutos presentes nas correntes de alimentação de qualquer integração de processos serem qualquer tipo de soluto com potencial bioactivo.

19. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o concentrado rico em hidroxitirosol possuir pelo menos 15% e no máximo 98% em massa de hidroxitirosol.

20. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o concentrado obtido poder ser utilizado na forma de liquido, sólido, solução aquosa, emulsão ou nanoparticulas de base lipidica. Lisboa, 25 de Julho de 2005