PT100144B

PT100144B - Composicoes farmaceuticas contendo rapamicina e metodo para o tratamento de inflamacoes pulmonares utilizando-as

Info

Publication number: PT100144B
Application number: PT100144A
Authority: PT
Inventors: Robert Joseph Sturm; Laurel Moore Adams; Barry Michael Weichman
Original assignee: American Home Prod
Priority date: 1991-02-22
Filing date: 1992-02-20
Publication date: 1999-06-30
Also published as: WO1992014476A1; AU662735B2; EP0573584B1; AU1535692A; JP2673168B2; CA2103571A1; ZA921211B; PT100144A; IE920554A1; SG52403A1; KR930703000A; US5080899A; GR3031681T3; DE69229858T2; EP0573584A4; ES2135404T3; DK0573584T3; DE69229858D1; EP0573584A1; KR100201516B1

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

RESUMO

O presente invento diz respeito a uma composição farmacêutica destinada à prevenção de ou ao combate a inflamação pulmonar num mamífero que comprende rapamicina preparada por processos conhecidos per se e, caso seja desejado, um suporte, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis, sendo a referida composição adaptada para administração oral, parentérica, nasal ou intrabronquial. Em si mesma, a rapamicina é útil no alívio sintomático de doenças em que a inflamação pulmonar consconstitui uma componente, tais como asma, afecções pulmonares obstrutivas crónicas, efisema, síndroma da dificuldade respiratória aguda, bronquite e outras doenças análogas. 0 invento diz também respeito à utilização de rapamicina na preparação de um medicamento destinado ao referido tratamento.

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Este invento diz respeito a um método para o tratamento de inflamação pulmonar, bem como à preparação de composições farmacêuticas, em particular composições contendo rapamicina.

A asma foi recentemente reconhecida como sendo mediada por uma reacção inflamatória no tracto respiratório [DeMonchy, J., Am. Rev. resp. Dis. 131: 373-376 (1985)]. Descobertas recentes sugerem que os T-linfócitos humanos desempenham um papel importante na regulação da inflamação das vias respiratórias associada com a asma alérgica [Frew, A.J., J. Allergy Clin. Immunol. 85: 533-539 (1990)] e a afecção pulmonar obstructiva crónica [0'Connor, G.T., Am. Rev. Resp. Dis. 140: 225-252 (1989)].

Para além da infiltração de outras células inflamatórias no sistema pulmonar, os asmáticos e atópicos humanos que reagem dualmente (dual responders), i.e. que apresentam tanto reacções de fase inicial como de fase tardia, revelam uma infiltração pequena mas significativa de T-linfócitos após desafio por antigene [Frew, A.J. e Kay, A.B., J. Immunol. 141: 4158-4164 (1988)]. O que é mais importante, estes T-linfócitos recrutados são quase inteiramente do tipo CD4⁺ (T-helper ou T-auxiliares), e parece existir uma correlação directa entre o influxo de células CD4⁺, o influxo de eosinófilos e a reacção alérgica relacionada com IgE nestes indivíduos [Frew, A.J. e Kay, A.B., J. Immunol. 141: 4158-4164 (1988)]. No caso de asmáticos graves, estas células CD4⁺ parecem ser activadas [Corrigan, C.J. e Kay, A.B., Am. Rev. Resp. Dis. 141: 970-977 (1990)] em virtude do aumento do número de células positivas receptoras de IL-2. Assim, estas células são capazes de produzir citoquinas (tais como IL-3, IL-5 e factor de estimulação de colónia de macrófagos de granulócitos) que podem afectar directamente a diferenciação,

maturação e estado de activaçao dos eosinófilos e de outras células inflamatórias.

Mostrou-se que a rapamicina, um antibiótico trieno macrocíclico produzido por Streptomyces hyqroscopícus [Patente dos E.U.A. 3,929,992] evita a formação dos anticorpos humorais do tipo IgE como resultado da reacção a um desafio alérgico de albumina [Martel, R., Can. J. Physiol. Pharm. 55: 48 (1977)], inibe a activação de T-células murinas [Strauch, M., FASEB 3: 3411 (1989) ] e prolonga o período de sobrevivência de enxertos de

orgãos em roedores histo-incompatíveis [Morris, R., Mesd. Sei.

Res. 17: 877 (1989)].

Este invento proporciona uma composição farmacêutica para a prevenção ou inversão de inflamação pulmonar num mamífero que inclui rapamicina preparada por processos em si conhecidos e caso seja desejado um suporte, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável; estando tal composição adaptada para administração oral, parentérica, nasal ou intrabronquial. Como tal, a rapamicina é útil ao proporcionar o alívio sintomático de doenças em que a inflamação pulmonar constitui uma componente, tais como asma, afecção pulmonar obstructiva crónica, efisema, sindroma da dificuldade respiratória aguda, bronquite e outras análogas.

A prevenção e inversão de inflamação pulmonar por meio de rapamicina foi estabelecida pela inibição do influxo celular inflamatório pulmonar num procedimento experimental estandardizado in vivo emulando as alterações inflamatórias observadas clinicamente em asmáticos crónicos. 0 procedimento usado e os resultados obtidos são descritos a seguir.

Porquinhos-da-índia Hartley macho (400 - 700 g) que foram submetidos a jejum de um dia para o outro são

sensibilizados de acordo com uma modificação do método de Dunn et al. [Am. Rev. Resp. Dis. 137: 541 (1988)]. Os porquinhos-da-índia recebem 1 injecção i.m. em cada uma das pernas traseiras de 0,35 ml (volume total = 0,7 ml) de ovalbumina (OA; 50 mg/ml) em solução salina estéril isotónica. Após um período de sensibilização de 3 semanas, cada animal é pré-tratado (-1 h) com piril| amina (2,5 mg/kg i.p.) a fim de evitar colapso hipóxico e morte, e depois submetidos a um desafio com um aerosol de OA a 0,2% (em água destilada desionizada) durante 3 min usando um aparelho nebulizador DeVilbiss Ultra-Neb 100. Medicamentos ou veículo 8Tween 80 a 0,5%) são administrados oralmente num volume de 1 ml/500 g de peso corporal em momentos apropriados pré- e pós-desafio com OA. A rapamicina foi administrada por via oral -48 h, -24h, -lh e +4h relativamente ao aerosol de OA. Os animais de controlo positivo foram submetidos a desafio com o aerosol de OA, e os animais de controlo negativo foram submetidos a desafio com um aerosol constituído apenas por água destilada.

Vinte e quatro horas mais tarde, cada um dos animais foi sacrificado de forma não cruel com uma sobredose de uretano (60 mg/ml; aprox. 10 ml i.p.). A a traqueia de cada animal é isolada e os pulmões são lavados in situ com três porções de solução salina esterilizada isotónica. Todas as amostras são mantidas em gelo. Este fluido de lavagem broncoalveolar de cada animal é depois centrifugado durante 10 min a 400 x g a 5°C. 0 material sobrenadante é posto de parte, e cada grão de células é suspenso de novo em 3 ml de solução salina esterilizada isotónica. 0 número de células inflamatórias presente foi então determinado usando um aparelho de contagem de partículas ZM modelo Coulter.

Todos os valores sao corrigidos subtraindo o valor médio (x) do grupo de controlo negativo de todas as outras —5—

amostras individuais. Os valores percentuais de inibição para amostras individuais são calculados usando essas contagens de células corrigidas na seguinte fórmula:

x controlo pos.(corr.)-contagem cel.ind.(corr.) %Inibição=----------------------------------------------x 100 x controlo positivo (corrigido)

A inibição percentual média é determinada para cada grupo e expressa em termos de x% inibição + E.P. Os valores ED..-.

com limites de confiança de 95% são calculados [Lichtfield, S.T. e Wilcoxon, F.A., J. Pharmacol. Exp. Ther. 96: 99-113 (1949)].

quadro que se segue apresenta os resultados obtidos para porquinhos-da-índia tratados com diferentes doses de rapamicina (n = 12 animais por grupo de tratamento).

INIBIÇÃO DE INFLUXO CELULAR INFLAMATÓRIO PULMONAR

Rapamicina

Dose(mg/kg, p.o.)

Inibição percentual (média + erro padrão)

4,0	88,1	±	5,8
1,0	71,5	+	13,6
0,3	64,3	+	8,2
0,1	43,9	±	15,0
0,03	13,5	±	20,6

Os resultados deste procedimento experimental farmacológico estandardizado in vivo emulando as alterações celulares inflamatórias observadas clinicamente em asmáticos demonstram que a rapamicina apresenta uma inibição dependente da dose do influxo

celular inflamatório pulmonar com um valor calculado de ED.__rt (L.C. 95%) de 0,2 (0,08 — 0,60) mg/kg como reacção a um desafio antigénico, sendo por conseguinte útil na prevenção ou inversão de inflamação pulmonar e no tratamento de estados patológicos dos quais a inflamação pulmonar seja uma das componentes tais como asma, afecção pulmonar obstructiva crónica, efisema, sindroma da dificuldade respiratória aguda, bronquite e outros análogos.

Quando a rapamicina é usada no tratamento de inflamação pulmonar, pode ser formulada de modo a proporcionar foramas de dosagem oral tais como comprimidos, cápsulas e outras análogas. A rapamicina pode ser administrada isoladamente ou em combinação com suportes convencionais tais como carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau e outros suportes análogos. Podem ser usados diluentes, agentes aromatizantes, agentes de solubilização, lubrificantes, agentes de suspensão, agentes ligantes, agentes de desintegração de comprimidos e outros análogos. A rapamicina pode ser encapsulada com ou sem outros suportes. Em todos os casos, a proporção de ingredientes activos nas referidas composições tanto sólidas como líquidas será tal que pelo menos lhes proporcione a desejada actividade quando administradas oralmente. A rapamicina pode também ser injectada por via parentérica, sendo nesse caso usada sob a forma de uma solução esterilizada contendo outros solutos, por exemplo solução salina ou glucose de modo a tornar a solução isotónica. Para efeitos de administração por meio de inalação ou insuflação intranasal ou intrabronquial, a rapamicina pode ser formulada de modo a dar origem a uma solução aquosa ou parcialmente aquosa, que pode depois ser usada sob a forma de um aerosol.

-Ί-

Os requisitos em termos de dosagem variarão em função das composições específicas utilizadas, da via de administração, da gravidade dos sintomas e do indivíduo específico a ser tratado. Com base nos resultados obtidos no procedimento experimental farmacológico estandardizado, as doses diárias por via oral projectadas situar-se-iam entre 0,01 - 10 mg/kg, de preferência entre 0,1 e 10 mg/kg, e com maior preferência entre 0,3 - 4 mg/kg. O tratamento será de um modo geral iniciado com doses pequenas inferiores ao valor óptimo de dosagem do composto. Em seguida a dose será aumentada até se atingido o efeito óptimo nas circunstâncias existentes; as doses precisas para efeitos de administração oral, parentérica, nasal ou intrabronquial serão determinadas pelo médico assistente em função da sua experiência com o indivíduo específico que está a ser tratado. De um modo geral, a rapamicina é desejavelmente administrada a um valor de concentração que, de um modo geral, proporcionará resultados eficazes sem produzir quaisquer efeitos perniciosos ou deletérios, e pode ser administrada quer sob a forma de uma dose unitária ou, se tal for desejado, a dose pode ser dividida em subunidades convenientes administradas em momentos convenientes ao longo do dia.

Lisboa, 20 de Fevereiro de 1992

J. PEREIRA DA CRUZ

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 10-A 3.^a1200 LISBOA

Claims

REIVINDICAÇÕES

1~ - Composição farmacêutica para a prevenção de ou combate a inflamação pulmonar num mamífero, adaptada para administração oral, parentérica, intranasal ou intrabronqueal, caracterizada por compreender desde 0,7 mg até 700 mg de rapamicina preparada por processos conhecidos per se e, caso seja desejado, um suporte, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.
2 ⁴ - Utilização de rapamicina, caracterizada por a rapamicina ser empregue na preparação de um medicamneto para prevenir ou combater a inflamação pulmonar num mamífero necessitando desse tratamento, por administração por via oral, parentérica, intranasal ou intrabronquial.
3 ^a - Utilização de acordo com a Reivindicação 2, caracterizada por o medicamento se destinar a proporcionar alívio sintomático de asma, doenças pulmonares obstrutivas crónicas, efisema, síndroma da dificuldade respiratória aguda e bronquite aguda num mamífero necessitando de tal alívio.
4⁴ - Utilização de acordo com a Reivindicação 2 ou 3, caracterizada por o medicamento se destinar a administração de rapamicina numa dose diária situada entre 0,01 e 10 mg/kg.
5⁴ - Utilização de acordo com a Reivindicação 2 ou 3, caracterizada por o medicamento se destinar a administração de rapamicina numa dose diária situada entre 0,1 e 10 mg/kg.
6- - Utilização de acordo com a Reivindicação 2 ou 3, caracterizada por o medicamento se destinar a administração de rapamicina numa dose diária situada entre 0,3 e 4 mg/kg.