PL91158B1 - - Google Patents

Download PDF

Info

Publication number
PL91158B1
PL91158B1 PL1973167350A PL16735073A PL91158B1 PL 91158 B1 PL91158 B1 PL 91158B1 PL 1973167350 A PL1973167350 A PL 1973167350A PL 16735073 A PL16735073 A PL 16735073A PL 91158 B1 PL91158 B1 PL 91158B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
insulin
ala30
enzyme
des
leu
Prior art date
Application number
PL1973167350A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Imperial Chemical Industries Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Imperial Chemical Industries Ltd filed Critical Imperial Chemical Industries Ltd
Publication of PL91158B1 publication Critical patent/PL91158B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/62Insulins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01Peptide or protein sequence
    • Y10S930/26Containing cys-cys disulfide bridge between nonadjacent cysteine residues

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania poli¬ peptydów, a w szczególnosci polipeptydów otrzymanych przez modyfikacje insuliny swinskiej lub bydlecej.
Ogólniewiadomo, ze jako lekinsulina spelniapodstawo¬ wa role u ludzi chorych na cukrzyce. Insulina zwykle stosowana do tego celu otrzymywana jest badzze swin, tak zwana „insulina swinska", badzz krów, tak zwana „insuli¬ na bydleca". Wiadomo takze, ze podawanie zazwyczaj dostepnej insuliny swinskiej lub bydlecej wywoluje czesto reakcje immunologiczna, która u ludzi przyjmujacych lek przez dluzszy okres czasu moze powodowac koniecznosc zwiekszenia dawki terapeutycznej.
Stwierdzono, ze poddanie zazwyczaj dostepnej insuliny swinskiej lub bydlecej dzialaniu aminoendopeptydazy specyficznej wobec lizyny, to znaczy takiej peptydazy, która rozbija w polipeptydzie wiazanie peptydowe przy grupie aminowej lizyny, prowadzi do otrzymania produk¬ tów, które tak samo jak insulina swinska lub bydleca wywoluja reakcje hipoglikomiczna, lecz przy podawaniu powoduja powstawanie znacznie mniej przeciwcialwiaza¬ cych substancje insulinopodobne. Enzym usuwa dwupep- tyd L-lizylo-L-alanine z lancuchaB insulinyswinskiej lub bydlecej i tak otrzymane polipeptydy nie byly dotychczas opisane.
Polipeptydy wytwarzane sposobem wedlug wynalazku maja wzór przedstawiony na rysunku, w którym albo R1 oznacza treonine, a R2 oznacza izoleucyne, albo R1 oznacza alanine a R2 oznacza waline. Polipeptyd o podanym wzo¬ rze, w którym R1 oznacza treonine a R2 oznacza izoleucyne, rózni sie od insuliny swinskiej tylko tym, zew lancuchuB, to znaczy lancuchu dluzszym, brak jest reszt lizylowej i alaniiowej, tworzacychczlony 29 i 30wlancuchu B insuli¬ ny swinskiej. Polipetyd ten mozna zatem okreslic jako swinska des-Lis29-Ala30-insuline. W tym znaczeniu okresle¬ nie to bedzie stosowane w dalszej czesci opisu.
Podobnie polipeptyd o podanym wzorze, w którym R1 oznacza alanine a R2 oznacza waline, rózni sie od insuliny bydlecej tylko tym, ze w lancuchu B brak jest reszt lizylo¬ wej i alaniiowej. Mozna go zatem okreslic jako*bydleca des-Liz29-Ala30-insuline i w tym znaczeniu okreslenie to jest stosowane w dalszej czesci opisu.
Wedlug wynalazku, sposób wytwarzania swinskiej des- Liz29-Ala30-insuliny z insuliny swinskiej, lub bydlecej des-.
Liz29-Ala30-insuliny z insuliny bydlecej, polega na tym, ze swinska lub bydleca insuline poddaje sie w srodowisku wodnym dzialaniu aminoendopeptydazy specyficznej wo¬ bec lizyny, po czym oddziela sie swinska des-Liz"-Ala30- insuline lub bydleca des-Liz29-Ala30-insuline od pozostale¬ go enzymu i lizyloalaniny.
Przykladami odpowiedniej aminoendopeptydazy specy¬ ficznej wobec lizyny sa enzym AM-proteaza oraz enzym Al-1-proteaza II z miksobakterii.
AM-proteaze moznaotrzymac zdojrzalych owocujacych osobnikówgrzyba Armillariamellea,jakopisano w brytyj¬ skim opisie patentowym nr 1 263 956: dojrzale osobniki miele sie z woda w temperaturze 2°C, nastepnie straca niepotrzebne bialko dodajac do wodnego ekstraktu meta¬ nol w ilosciwynoszacej 1,5 objetosci ekstraktu, w tempera¬ turze 2°C i przy pH6, po czym z fazywodnej wyodrebniasie proteaze przez dodanie etanolu (1,5 cz. obj. na 1 cz. obj. 91 15891 158 ekstraktu) w -5°C i oddzielenie osadu, który chromatogra- fuje sie na karboksymetylocelulozie przy pH6, a nastepnie saczy przez zel przy pH 7. Enzym ten mozna równiez otrzymac w nieco zmodyfikowany sposób, mianowicie, chromatografowanie prowadzi sie w dwóch etapach: wpierwszym surowyenzym adsorbuje sie na karboksyme¬ tylocelulozie przez pH 4,5 i eluuje nastepnie buforem o pH ,5; w drugim etapie stezony eluat podaje sie na karboksy- metyloceluloze przy pH 6.
Enzym Al-1-proteaze II moznaotrzymac zmiksobakterii szczepu Al-1, jak to opisali Wingard, Matsueda i Wolfe w Journal of Bacteriology, 1.112, s.s. 940-949.
Poddanie insuliny swinskiej lub bydlecej dzialaniu ami- noendopeptydazy specyficznej wobec lizyny mozna prze¬ prowadzic z uzyciem enzymu rozpuszczonego w srodowi¬ sku wodnym, albo enzymu zwiazanego z nosnikiem rozpu¬ szczalnym lub nierozpuszczalnym w srodowisku wodnym. < Szybkosc i zakres reakcji, miedzy insulina uzyta jako sjufOfwec*^vyjs sj

Claims (14)

Zastrzezenia patentowe
1. Sposób wytwarzania polipeptydu o wzorze podanym na rysunku, w którym R1 oznacza treonine a R2 oznacza izoleucyne, takiego jak swinska des-Liz"-Ala30-insulina, Y91 158 znamienny tym, ze swinska insuline poddaje sie dzialaniu aminoendopeptydazy specyficznej wobec lizyny, w srodo¬ wisku wodnym, a nastepnie swinska des-Liz29-Ala30- insuline oddziela sie od pozostalego enzymu i lizylo-ala¬ niny.
2. Sposób wytwarzania polipeptydu o wzorze podanym na rysunku, w którym R1 oznacza alanine a R2 oznacza waiine, takiego jak bydleca des-Liz29-Ala30-insulina, zna¬ mienny tym, ze bydleca insuline poddaje sie dzialaniu aminoendopeptydazy specyficznej wobec lizyny, w srodo¬ wisku wodnym, a nastepnie bydleca des-Liz29-Ala-30- insuline oddziela sie od pozostalego enzymu i lizylo-ala¬ niny.
3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze stosuje sie zazwyczaj dostepna swinska des-Liz29-Ala30-insuline jako substancje wyjsciowa i oddziela sieswinskades-Liz29- Ala30-insuline od pozostalego enzymu, lizylo-alaniny i oli- gopeptydów.
4. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze stosuje sie zazwyczaj dostepna bydleca des-Liz29-Ala30-insuline jako substancje wyjsciowa i oddziela siebydlecades-Liz2V Ala30-insuline od pozostalego enzymu, lizylo-alaniny i oli- gopeptydów.
5. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze jako aminoendopeptydaze specyficznawobec lizyny stosu¬ je sie AM-proteaze.
6. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze jako aminoendopeptydaze specyficznawobec lizynystosu¬ je sie AL-1-proteaze II otrzymana z miksobakterii. 10 15 20 25 10
7. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze reakcje enzymatyczna prowadzi sie w roztworze o wartosci pH 3-10 i w temperaturze 10-60°C.
8. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze reakcje prowadzi sieprzy wartosci pH 7-9, wtemperaturze 30-50°C, przy stezeniu insuliny bliskimjej rozpuszczalnos¬ ci w srodowisku inkubacji i przy stosunku ilosciowym enzym/substrat 1/1 000-1/10 000.
9. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze reakcje enzymatyczna prowadzisie w roztworze o wartosci pH 4-10 w temperaturze 25-75°C i przy stosunku iloscio¬ wym enzym/substrat 1/1 000-1/10 000.
10. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze reakcje prowadzi sie w obecnosci jonów wapnia lub magnezu.
11. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze stosuje sie enzym w postaci zwiazanej z nosnikiem.
12. Sposób wedlug zastrz. 11, znamienny tym, zestosuje sie enzym AM-proteaza zwiazany z nosnikiem agaroza, przy uzyciu bromku cyjanu.
13. Sposób wedlug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze rozdzielenie prowadzi sie za pomoca filtracji zelowej na sicie molekularnym.
14. Sposób wedlug zastrz. 13, znamienny tym, ze jako sito molekularne stosuje sie poprzecznie usieciowany zel dekstranowy lub zel poliakryloamidowy nadajacy sie do frakcjonowania zwiazków o ciezarze czasteczkowym 5 000-10 000. S—S r: Gly.Ile.Val.Glu.Gln.Cv3.Cys.R.Ser.R.Ciis.Ser.Leu.V. Gln.Leu.Glu.Asn.Tyr.Cys.Asn i I S S I I s s I / Phe.Val.Asn.Gln.His.Leu.C^s.Gl>.Ser.His.Leu.\bl.Glu.Ala.Leu.Tvr.Leu.VoiLC^s.G^.GlLi - Arg.Gl^. Phe. Phe^r.Thr.Pro
PL1973167350A 1972-12-28 1973-12-15 PL91158B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB5974272 1972-12-28
GB438773*[A GB1426061A (en) 1972-12-28 1973-01-29 Polypeptides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL91158B1 true PL91158B1 (pl) 1977-02-28

Family

ID=26239087

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL1973167350A PL91158B1 (pl) 1972-12-28 1973-12-15

Country Status (18)

Country Link
US (1) US3903069A (pl)
JP (1) JPS5726760B2 (pl)
AT (1) AT348152B (pl)
AU (1) AU474971B2 (pl)
CA (1) CA1009974A (pl)
CH (1) CH599927A5 (pl)
DD (1) DD110490A5 (pl)
DE (1) DE2364883C2 (pl)
ES (1) ES421864A1 (pl)
FR (1) FR2212136B1 (pl)
GB (1) GB1426061A (pl)
HU (1) HU170437B (pl)
IE (1) IE38539B1 (pl)
IL (1) IL43751A (pl)
LU (1) LU69075A1 (pl)
NL (1) NL7317159A (pl)
PL (1) PL91158B1 (pl)
SE (1) SE404600B (pl)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0017938B1 (en) * 1979-04-13 1983-08-03 Shionogi & Co., Ltd. Process for preparing a b30-threonine insulin
JPS55138391A (en) * 1979-04-13 1980-10-29 Shionogi & Co Ltd New synthetic method of peptide derivative
EP0087238A1 (en) * 1982-02-08 1983-08-31 Biogen N.V. Am improved method for preparing human insulin from non-human insulin
DE3209184A1 (de) * 1982-03-13 1983-09-15 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren zur umwandlung von praeproinsulinanaloga zu insulinen
GB8610551D0 (en) * 1986-04-30 1986-06-04 Hoffmann La Roche Polypeptide & protein derivatives
US6673347B1 (en) 1986-04-30 2004-01-06 Gryphon Therapeutics Polypeptide and protein derivatives and process for their preparation
PH23446A (en) * 1986-10-20 1989-08-07 Novo Industri As Peptide preparations
US5716927A (en) * 1988-12-23 1998-02-10 Novo Nordisk A/S Insulin analogs having a modified B-chain
JPH04502465A (ja) * 1988-12-23 1992-05-07 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ ヒトインシュリン類似物質

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH471220A (de) * 1964-05-09 1969-04-15 Roehm & Haas Gmbh Verfahren zur Herstellung einer L-Leucinamid, Hypertensin und Oxytocin spaltenden Aminopeptidase

Also Published As

Publication number Publication date
AU6297973A (en) 1975-05-29
SE404600B (sv) 1978-10-16
NL7317159A (pl) 1974-07-02
LU69075A1 (pl) 1974-03-07
ATA1084473A (de) 1978-06-15
CH599927A5 (pl) 1978-06-15
GB1426061A (en) 1976-02-25
DE2364883A1 (de) 1974-07-04
DE2364883C2 (de) 1984-07-19
IL43751A0 (en) 1974-03-14
IL43751A (en) 1977-01-31
HU170437B (pl) 1977-06-28
AT348152B (de) 1979-02-12
AU474971B2 (en) 1976-08-05
IE38539B1 (en) 1978-04-12
US3903069A (en) 1975-09-02
DD110490A5 (pl) 1974-12-20
FR2212136B1 (pl) 1978-01-06
ES421864A1 (es) 1976-08-01
JPS4994698A (pl) 1974-09-09
IE38539L (en) 1974-06-28
JPS5726760B2 (pl) 1982-06-07
CA1009974A (en) 1977-05-10
FR2212136A1 (pl) 1974-07-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hugli Human anaphylatoxin (C3a) from the third component of complement. Primary structure.
Karlsson Chemistry of protein toxins in snake venoms
Yamaguchi et al. Complete amino acid sequences of a pair of fish (tilapia) prolactins, tPRL177 and tPRL188.
Simonds et al. Purification of the opiate receptor of NG108-15 neuroblastoma-glioma hybrid cells.
EP0308500B1 (en) Human somatomedin carrier protein subunits and process for producing them
Lai et al. Chemistry of cholera toxin: the subunit structure
US3847890A (en) Acidic monosaccharide-substituted proteins
JPH0764875B2 (ja) 血液凝固阻害作用を有する新規ポリペプチド
ANTONIADES et al. Studies on the state of insulin in blood: Properties of circulating “free” and “bound” insulin
Helle et al. Chromogranin A: secretion of processed products from the stimulated retrogradely perfused bovine adrenal gland
PL91158B1 (pl)
Kramer et al. Cocoonase: V. Structural studies on an insect serine protease
BREUER Stimulation of DNA Synthesis in Cartilage of Modified Placental Lactogen and Anabolic Hormones
RU2104285C1 (ru) Пептид-гелонин
Weare et al. Purification of human kidney angiotensin I converting enzyme using reverse-immunoadsorption chromatography
Free et al. Separation and properties of multiple components of bovine growth hormone
Pío et al. Identification, characterization, and physiological actions of factor H as an adrenomedullin binding protein present in human plasma
Kitabchi et al. Properties of Proinsulin and Related Polypeptide
Weber et al. Specific binding and degradation of somatostatin by membrane vesicles from pig gut
Yamaji et al. On the biosynthesis of insulin in anglerfish islets
KITAHARA et al. Reversed distribution of calpains and calpastatin in human pituitary gland and selective localization of calpastatin in adrenocorticotropin-producing cells as demonstrated by immunohistochemistry
Morishita et al. Effects of islet amyloid polypeptide (amylin) and calcitonin gene-related peptide (CGRP) on glucose metabolism in the rat
JPH0730114B2 (ja) インヒビン
Guarneri et al. A study of diazepam binding inhibitor (DBI) processing products in human cerebrospinal fluid and in postmortem human brain
KR101156523B1 (ko) 아토피성 피부염 유도 물질