PL41178B1 - - Google Patents

Description

Pierwszenstwo: 19 sierpnia 1993 r. dla zastrz. 1-4 (Dania Znane jest wytwarzanie insuliny o zwiekszo¬ nej zawartosci cynku zarówno krystalicznej jak i bezpostaciowej przez wprowadzenie Insuliny do srodowiska wodnego o pH=6-7, w którym jest ona trudno rozpuszczalna i które zawiera sól cynkowa i ewentualnie dodatek do 9% wagowych acetonu, w celu rozpuszczenia bezpostaciowej insuliny i ulatwienia jej krystalizacji.Znane jest równiez przygotowywanie zawiesin lub roztworów do zastrzyków z insuliny cynko¬ wej jak i insuliny globinowej, protaminowej, metyloalbuminowej o róznych zawartosciach cyn¬ ku, wychodzac przy tym z insuliny bezpostacio¬ wej lub krystalicznej.W srodowisku wodnym o pH odpowiadajacym pH krwi produkt jest trudno rozpuszczalny i dla¬ tego nadaje sie do zastosowania w leczeniu, gdy pozadane jest opóznione dzialanie insuliny. Za¬ wiesine czasteczek insuliny bezpostaciowej lub krystalicznej o zwiekszonej zawartosci cynku, (rozpuszczajaca sie nieznacznie przy pH orga¬ nizmu i dlatego slabo resorbowana) mozna sto¬ sowac bezposrednio do zastrzyków. Roztwór mo¬ ze byc izotoniczny z krwia.Stwierdzono, ze mozna wytwarzac insuline cynkowa praktycznie z ilosciowa wydajnoscia, jezeli na bezpostaciowa lub krystaliczna insuline bedzie sie dzialalo w organicznym srodowisku np. w srodowisku slabych zasad organicznych, fenoli, krezoli, kwasów organicznych, jak lodo¬ watego kwasu octowego, kwasu mlekowego, gli- kolowego, pzopionowego lub mrówkowego, alko¬ holi jedno- lub wielowodbrotlenowych lub ich zwiazków i pochodnych jak estrów i eterów, ketonów 1 chlorowce- lub tio-pochodnych wy¬ mienionych substancji, zwiazkami cynku rozpuz- czonymi w jednym lub kilku z wymienionych srodków.Wedlug wynalazku korzystne jest, aby roztwory zwiazków cynku w wymienionych srodkach za¬ wieraly wode.Równiez korzystna jest praca w srodowisku, w którym insulina rozpuszcza sie, przy czym insu¬ line stosuje sie w roztworze jednej lub kilku z wymienionych substancji.Nadto wedlug wynalazku korzystne jest dopro¬ wadzenie insuliny do reakcji z jednym ze wspom¬ nianych roztworów cynku w postaci stalej przez zawieszenie jej w roztworze. Krystaliczne lub bezpostaciowe czastki insuliny lacza sie z latwos¬ cia z rozpuszczonymi zwiazkami cynku.Jezeli pracuje sie w srodowisku wodnym wów¬ czas korzystne jest dodanie substancji takiej jak np. NHs — NH4 Cl, w celu nie dopuszczenia do wytracenia sie wodorotlenku cynkowego.Caly proces mozna przeprowadzic oczywiscie w warunkach sterylnych.Sposobem wedlug wynalazku, w przeciwien¬ stwie do dotychczasowych metod, mozna w spo¬ sób niezawodny i prosty kontrolowac ilosc cynku zwiazana przez insuline, a zwlaszcza mozna otrzymac produkt o zwiekszonej zawartosci cynku.Zwykla insulina zawiera taka ilosc grup karbo- ksylowych, ze mozna przylaczyc maksymalnie 2,72% cynku w stosunku do ilosci insuliny. W preparatach otrzymanych sposobem wedlug wy¬ nalazku prawdopodobnie czesc cynku przylaczona jest do grup karboksylowych, podczas gdy ewentualny nadmiar cynku polaczony jest w in¬ ny sposób z insulina, poniewaz w sposobie wedlug wynalazku nie moze tworzyc sie wodorotlenek cynku.Do nadajacej siej do zastrzyków zawiesiny insuliny cynkowej, mozna wedlug wynalazku do¬ dac jony cynku, wapnia lub magnezu.Przyklad I. 1 g insuliny wprowadza sie do 100 ml absolutnego alkoholu etylowego za¬ wierajacego w 1 ml 5 mg cynku w postaci roz¬ puszczalnej soli cynkowej.Powstala zawiesine miesza sie przez dwie go¬ dziny, po czym krystaliczny osad odfiltrowuje sie, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysz¬ taly zawieraja okolo 5% cynku.Krysztaly mozna oddzielac równiez przez od¬ wirowanie.Przyklad II. 1 g krystalicznej insuliny wprowadza sie do 100 ml absolutnego alkoholu etylowego zawierajacego w 1 ml 2,5' mg cynku w postaci rozpuszczalnej soli cynkowej. Powstala zawiesine miesza sie przez dwie godziny, po czym krystaliczny osad odfiltrowuje sie, prze¬ mywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 4,0% cynku.Przyklad III. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml absolutnego alkoholu etylowego zawierajacego w 1 ml 0,5 mg cynku w postaci rozpuszczalnej soli cynkowej.Po dwu godzinach mieszania oddziela sie krysz¬ taly jak wyzej, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Zawieraja one okolo 3,5% cynku.Przyklad IV. Z 1 g insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml absolutnego alkoholu etylo¬ wego zawierajacego w 1 ml 0,3 mg cynku w po¬ staci rozpuszczalnej soli cynkowej. Po dwugo¬ dzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem elylowym i suszy. Zawieraja one okolo 3% cynku.Jezeli w 1 ml alkoholu znajduje sie tylko 0,1 mg cynku, wówczas otrzymuje sie krysztaly o zawairtosci okolo 1,5% cynku.Przyklad V. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 g stopionego, bez¬ wodnego fenolu zawierajacego 1% cynku w po¬ staci Zn CI2. Po dwugodzinnym mieszaniu dodaje sie taka sama objetosc alkoholu etylowego, od¬ dziela krysztaly w sposób podany powyzej, prze¬ mywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 1,5% cynku.Przyklad VI. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml alkoholu benzy¬ lowego, zawierajacego 20 mg cynku w postaci Zn CI2. Po dwugodzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób powyzej podany, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 2% cynku.Przyklad VII. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml acetonu za¬ wierajacego w 1 ml 5 mg cynku w postaci roz¬ puszczalnej soli cynkowej. Po dwugodzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób po¬ dany powyzej, przemywa acetonem i suszy.Krysztaly zawieraja okolo 5% cynku.Przyklad VIII. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml pirydyny, zawierajacej w 1 ml 10 mg cynku, w postaci roz¬ puszczalnej soli cynkowej. Po dwugodzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem i suszy. Kry¬ sztaly zawieraja okolo 3% cynku.Przyklad IX. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml lodowatego kwasu octowego, zawierajacego w 1 ml 5 mg cyn¬ ku w postaci rozpuszczalnej soli cynkowej. Po dwugodzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 5% cynku.Przyklad X. Z Ig krystalicznej Insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody zawierajacej 35% objetoscio¬ wych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 10 mg cynku w postaci chlorku cynkowego.Roztwór posiada pH = 4,5. Po dwugodzinnym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób po¬ dany powyzej, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 3,5% cynku.Jezeli mieszanina alkoholu i wody zawiera 20% objetosciowych alkoholu etylowego oraz w 1 ml 1 mg cynku i jezeli reakcja przebiega przy pH roztworu = 4,7, to krysztalki insuliny zawieraja okolo 1,7% cynku.Przyklad XI. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody, zawierajacej 15% objetoscio¬ wych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 10 mg cynku w postaci chlorku cynko¬ wego. Po dwugodzinnym mieszaniu oddzie¬ la sie krysztaly w sposób podany powyzej, prze¬ mywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 2% cynku.Przyklad XII. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody, zawierajacej 5t)% objetoscio¬ wych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 10 mg cynku w postaci chlorku cynko¬ wego. Do mieszaniny dodaje sie roztworu NHt — NHa Cl w celu uzyskania pH = 7. Po dwugodzin¬ nym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem etylowym 1 suszy. Krysztaly zawieraja okolo 7% cynku.Przyklad XIII. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody zawierajacej 35% objetoscio¬ wych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 10 mg cynku w postaci chlorku cynko¬ wego. Do mieszaniny dodaje sie roztworu NHi — NHa Cl w celu uzyskania pH—7. Po dwugodzin¬ nym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja Qkolo 5,5% cynku.Przyklad XIV. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody, zawierajacej 15% objetoscio¬ wych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 10 mg cynku w postaci chlorku cynko¬ wego. Do mieszaniny dodaje sie roztworu NHi — NHa Cl w celu otrzymania pH=7. Po dwugodzin¬ nym mieszaniu oddziela sie krysztaly w sposób podany powyzej, przemywa alkoholem etylowym i suszy. Krysztaly zawieraja okolo 5% cynku.We wszystkich przytoczonych przykladach mozna zastosowac insuline bezpostaciowa zamiast krystalicznej.Przyklad XV. Z 1 g krystalicznej insuliny sporzadza sie zawiesine w 100 ml mieszaniny alkoholu i wody zawierajacej 30% wagowych alkoholu etylowego. Mieszanina zawiera w 1 ml 2,3 mg cynku w postaci rozpuszczalnej soli cyn¬ kowej. PH srodowiska wynosi 4,4. Insulina prze¬ chodzi czesciowo do roztworu. Nierozpuszczona czesc krysztalów oddziela sie przez odsaczenie, przemywa alkoholem i suszy. Zawieraja one 2,2% cynku. Przesacz doprowadza sie do wartosci pH = 6,3. Wytracona insuline bezpostaciowa, przemywa sie alkoholem i suszy. Bezpostaciowa insulina zawiera okolo 4,5% cynku. PL

Claims (5)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania insuliny cynkowej o zwiekszonej zawartosci cynku, znamienny tym, ze na insuline bezpostaciowa lub krystaliczna dziala sie w srodowisku organicznym, np. w srodowisku slabych zasad organicznych, fenoli, krezoli, kwasów organicznych, alkoholi jedno- lub wielowodorotlenowych, lub ich zwiazków albo pochodnych, ketonów, jak tez w srodo¬ wisku chlorowco- lub tio-pochodnych wymie¬ nionych zwiazków, zwiazkami cynku rozpusz¬ czonymi w jednej lub kilku z wymienionych substancji.
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze do roztworów zwiazków cynku dodaje sie wody.
3. 3. Sposób wedlug zastrz. 1 — 2, znamienny tym, ze insuline stosuje sie w roztworze jednej lub kilku z wymienionych substancji, w którym jest ona rozpuszczalna.
4. 4. Sposób wedlug zastrz. 1 — 2, znamienny tym, ze insuline doprowadza sie w postaci stalej do reakcji z jednym z wymienionych roztworów cynku.
5. 5. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze dodaje sie substancji przeciwdzialajacej wy¬ tracaniu sie wodorotlenku cynkowego. Roskilde Medical Company Ltd (R. M. C.) Danske A n d e 1 s s 1 a g t e r i e r s Konservesfabrik A. m. b. A. Zastepca: Kolegium Rzeczników Patentowych PL