PL228954B1 - Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu - Google Patents

Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu

Info

Publication number
PL228954B1
PL228954B1 PL416658A PL41665816A PL228954B1 PL 228954 B1 PL228954 B1 PL 228954B1 PL 416658 A PL416658 A PL 416658A PL 41665816 A PL41665816 A PL 41665816A PL 228954 B1 PL228954 B1 PL 228954B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
mineral
protein
soy
łock
mixture containing
Prior art date
Application number
PL416658A
Other languages
English (en)
Other versions
PL416658A1 (pl
Inventor
Krzysztof Makowski
Beata Gutarowska
Katarzyna Matusiak
Sebastian Borowski
Hieronim Burchardt
Original Assignee
Politechnika Lodzka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Lodzka filed Critical Politechnika Lodzka
Priority to PL416658A priority Critical patent/PL228954B1/pl
Publication of PL416658A1 publication Critical patent/PL416658A1/pl
Publication of PL228954B1 publication Critical patent/PL228954B1/pl

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu, takich jak Bacillus megaterium, Bacillus subtilis, Pseudomonas Enterococcus faecium, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum. Pożywkę stanowi mieszanina zawierająca koncentrat sojowy białkowo-mineralny, glukozę lub sacharozę, sól fosforanową w postaci diwodorofosforanu monopotasowego lub monowodorofosforanu dipotasowego oraz wodę, o pH 6,5-7, wysterylizowaną termicznie w temperaturze 121°C w czasie 20 minut.

Description

RZECZPOSPOLITA
POLSKA
Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12)OPIS PATENTOWY (i9)PL (n)228954 (13) B1 (51) Int.CI.
(21) Numer zgłoszenia: 416658 C12N 1/20 (2006.01)
C12N 1/38 (2006.01) C12R 1/11 (2006.01) (22) Data zgłoszenia: 29.03.2016 C12R 1/125 (2006.01)
C12R 1/25 (2006.01) C12R 1/39 (2006.01) C12R 1/01 (2006.01)
Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu
(73) Uprawniony z patentu: POLITECHNIKA ŁÓDZKA, Łódź, PL
(43) Zgłoszenie ogłoszono: (72) Twórca(y) wynalazku:
09.10.2017 BUP 21/17 KRZYSZTOF MAKOWSKI, Zgierz, PL
(45) O udzieleniu patentu ogłoszono: BEATA GUTAROWSKA, Łódź, PL KATARZYNA MATUSIAK, Ruda Bugaj, PL SEBASTIAN BOROWSKI, Łódź, PL HIERONIM BURCHARDT, Pleszew, PL
30.05.2018 WUP 05/18 (74) Pełnomocnik: rzecz, pat. Ewa Kaczur-Kaczyńska
'st m
σ>
oo
CM
CM
Q_
PL 228 954 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu, takich jak Bacillus megaterium, Bacillus subtilis, Pseudomonas fluorescens, Enterococcus faecium, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum.
Jednymi z najbardziej obiecujących metod dezodoryzacji odchodów drobiu są metody z wykorzystaniem preparatów biologicznych zawierających odpowiednio dobrane kultury drobnoustrojów zdolnych do usuwania związków odorowych. Zaletą tych metod jest niski koszt i brak toksycznych produktów ubocznych.
Znane jest wykorzystanie pojedynczych rodzajów aktywnych mikroorganizmów, jak Candida, Bacillus, Lactobacillus oraz Micrococcus do usuwania di- oraz trimetyloaminy z różnych odpadów czasopisma Biochemical Journal 132 (1973): 101-112, Conservation and Recycling 8 (1985): 47-71, Applied and Environmental Microbiology 31 (1976): 399-403.
W czasopismach Waste Management 25 (2005): 940-954 oraz Applied and Environmental Microbiology 53 (1987): 137-141 wykazano skuteczność bakterii Alcaligenes faecalis, Acinetobacter calcoaceticus, Arthrobacter flavescens, Corynebacterium glutamicum oraz Micrococcus sp. w degradacji lotnych kwasów tłuszczowych i fenoli w gnojowicy.
Znane są również sposoby usuwania odorantów, w tym lotnych kwasów tłuszczowych przez promieniowce - Streptomyces griseus oraz Streptomyces antibioticus (czasopismo Applied and Environmental Microbiology 36 (1978): 487-491).
Z czasopism Applied Microbiology and Biotechnology 62 (2003): 83-91 oraz Chemosphere 43 (2001): 1043-1050 wiadomo, iż szczepy z rodzaju Pseudomonas są zdolne do usuwania disiarczku metylu, natomiast z czasopism Water, Air and Soil Pollution 133 (2002): 335-348, Applied and Environmental Microbiology 55 (1989): 555-558 i Applied and Environmental Microbiology 59 (1993): 37843789 wiadomo, iż szczepy Thiobacillus sp. można stosować do usuwania takich związków siarki, jak siarkowodór, siarczek dimetylu, disiarczek dimetylu oraz metanotiol.
Z czasopism Journal of Animal Science, 1999, 77, 169-175, Przemysł Chemiczny, 2015, 94/12, 2263-2269 jest znane wykorzystanie preparatów biologicznych, zawierających odpowiednio dobrane kultury drobnoustrojów, do usuwania związków odorowych.
Z opisu patentowego P.393863 jest znany sposób otrzymywania preparatu do dezodoryzacji odchodów drobiu, zwłaszcza pomiotu kurzego przy użyciu szczepów bakterii, w którym wykorzystuje się szczepy bakterii Bacillus subtilis subsp. spizizenii ŁOCK 0962, Bacillus megaterium ŁOCK 0963, Pseudomonas sp. ŁOCK 0960, Pseudomonas sp. ŁOCK 0961, Psychobacter faecalis ŁOCK 0965, Lactobacillus brevis ŁOCK 0966, Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964, Streptomyces violaceoruber ŁOCK 0967, Candida inconspicua ŁOCK 0272, z których
- szczepy bakterii Bacillus subtilis subsp. spizizenii ŁOCK 0962, Bacillus megaterium ŁOCK 0963, Pseudomonas sp. ŁOCK 0961, Psychobacter faecalis ŁOCK 0965 hoduje się w podłożu płynnym zawierającym 17 mg peptonu kazeinowego, 3 mg peptonu z mąki sojowej, 5 mg chlorku sodu, 2,5 mg glukozy i 2,5 mg fosforanu potasu w 1 l wody destylowanej, o nazwie handlowej TSB,
- szczep bakterii Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964 hoduje się w podłożu płynnym zawierającym 10 mg peptonu z kazeiny, 8 mg ekstraktu mięsnego, 4 mg ekstraktu drożdżowego, 20 mg glukozy, 2 mg fosforanu dwupotasowego, 1 mg tween 80, 2 mg cytrynianu amonu, 5 mg octanu sodu, 0,2 mg siarczanu magnezu 7-wodnego i 0,05 mg siarczanu magnezu 4-wodnego w 1 l wody destylowanej, o nazwie handlowej MRS.
W Kolekcji Czystych Kultur ŁOCK - Szczepów Przemysłowych Instytutu Technologii Fermentacji i Mikrobiologii Politechniki Łódzkiej, która jest zarejestrowana w Kolekcji Światowej pod nr 1847, są zdeponowane jako szczepy bakterii:
- Bacillus megaterium oznaczony symbolem ŁOCK 0963, wyselekcjonowany z gleby,
- Bacillus subtilis oznaczony symbolem ŁOCK 0962, wyselekcjonowany z gleby,
- Pseudomonas fluorescens oznaczony symbolem ŁOCK 0961, wyselekcjonowany z gleby,
- Enterococcus faecium oznaczony symbolem ŁOCK 0965, wyselekcjonowany z pomiotu kurzego
- Leuconostoc mesenteroides oznaczony symbolem ŁOCK 0964, wyselekcjonowany z kiszonki,
PL 228 954 B1
- Lactobacillus plantarum oznaczony symbolem ŁOCK 0996, wyselekcjonowany z kiszonki.
Do namnażania drobnoustrojów stosowanych w biopreparatach dezodoryzujących poszukuje się pożywek konstruowanych na bazie ogólnodostępnych surowców pochodzenia naturalnego, często traktowanych jako odpad bez dużej wartości przemysłowej. Składniki tych pożywek muszą jednak spełniać pewne wymogi - umożliwiać pozyskanie odpowiedniej gęstości komórek, charakteryzować się innymi cechami ważnymi z punktu widzenia technologii i ciągłości produkcji. Oprócz niskiej ceny powinny być: dostępne przez cały rok, łatwe do odważania i dozowania, odporne na zmiany podczas przechowywania, odporne na wtórne zakażenia mikrobiologiczne. Wszystkie te wymogi sprawiają, że opracowanie odpowiedniego składu takiej pożywki jest procesem trudnym i pracochłonnym. Pożywka według wynalazku spełnia powyższe wymogi.
Pożywkę mikrobiologiczną do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu, takich jak Bacillus megaterium ŁOCK 0963, Bacillus subtilis ŁOCK 0962, Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961, Enterococcus faecium ŁOCK 0965, Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996, zawierającą źródło białka, składniki mineralne, cukier, źródło fosforu oraz wodę, według wynalazku stanowi mieszanina zawierająca 1-10% wagowych koncentratu sojowego białkowo-mineralnego, 1-10% wagowych glukozy lub sacharozy, 0,1-2% wagowych soli fosforanowej w postaci diwodorofosforanu monopotasowego lub monowodorofosforanu dipotasowego oraz wodę do 100%, o pH 6,5-7,0, wysterylizowana termicznie w temperaturze 121°C w czasie 20 minut. Stosuje się koncentrat sojowy białkowo-mineralny zawierający w procentach wagowych: białka 35-45%, tłuszczów <5 %, włókien lignocelulozowych <5%, lizyny nie mniej niż 2%, metioniny nie mniej niż 0,5%, fosforu <1%, wapnia <1%, magnezu <0,2%, wody do 100%. PH pożywki ustala się przy użyciu kwasu solnego, wodorotlenku sodu lub potasu.
Pożywkę do hodowli szczepu Bacillus megaterium ŁOCK 0963 stanowi mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% sacharozy i 2% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% glukozy i 1% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
Pożywkę do hodowli szczepu Bacillus subtilis ŁOCK 0962 stanowi mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 6,5 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 7,0.
Pożywkę do hodowli szczepu Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961 stanowi mieszanina zawierająca 1% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 2% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0 lub mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 1% wodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0.
Pożywkę do hodowli szczepu Enterococcus faecium ŁOCK 0965 stanowi mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
Pożywkę do hodowli szczepu Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964 stanowi mieszanina zawierająca 3% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0 lub mieszanina zawierająca 8% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 3% glukozy i 1% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 7,0.
Pożywkę do hodowli szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996 stanowi mieszanina zawierająca 2% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 6,5 lub mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
Hodowla wyżej podanych szczepów bakterii polega na przygotowaniu inokulum szczepów na tej pożywce w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin, na wstrząsarce obracającej się z prędkością 120 rpm a następnie na prowadzeniu hodowli produkcyjnej na tej pożywce, zaszczepionej inokulum użytym w ilości 10% objętościowych w stosunku do objętości pożywki, na wstrząsarce obracającej się z prędkością 120-300 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin, w warunkach tlenowych przy utrzymywaniu stężenia tlenu 30% w drodze regulacji szybkości obrotów mieszadła i szybkości przepływu powietrza, utrzymując podczas hodowli pH 6,5-7,0.
PL 228 954 B1
Przedmiot wynalazku ilustrują poniższe przykłady.
P r z y k ł a d 1
W celu przygotowania inokulum szczepu Bacillus megaterium ŁOCK 0963 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 5%, sacharoza 10%, diwodorofosforan monopotasowy 2%, woda do 100%, wysterylizowanej termicznie w temperaturze 121°C przez 20 minut, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny, utrzymując pH równe 7,0.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH równe 7,0 i stężenie tlenu równe 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy szybkości mieszadła i przepływu powietrza.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 9,5 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 2
W celu przygotowania inokulum szczepu Bacillus megaterium ŁOCK 0963 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 10%, glukoza 5%, wodorofosforan dipotasowy 1 %, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 6,5.
Do fermentera o pojemności całkowitej 200 l zawierającego 130 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 1,2 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 3
W celu przygotowania inokulum szczepu Bacillus subtilis ŁOCK 0962 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 5%, sacharoza 5%, diwodorofosforan monopotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 6,5.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy szybkości mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 1,9 x 109 jtk/ml.
P r z y k ł a d 4
W celu przygotowania inokulum szczepu Bacillus subtilis ŁOCK 0962 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 10%, glukoza 10%, wodorofosforan dipotasowy 2%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z krioPL 228 954 B1 banku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do fermentora o pojemności całkowitej 42 l zawierającego 25 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 7,0.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 3,4 x 109 jtk/ml.
P r z y k ł a d 5
W celu przygotowania inokulum szczepu Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 1%, sacharoza 5%, diwodorofosforan monopotasowy 2%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 7,0.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 8,9 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 6
W celu przygotowania inokulum szczepu Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 5%, glukoza 10%, wodorofosforan dipotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do fermentera o pojemności całkowitej 200 l zawierającego 130 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 1,1 x 1010 jtk/ml.
P r z y k ł a d 7
W celu przygotowania inokulum szczepu Enterococcus faecium ŁOCK 0965 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 5%, sacharoza 10%, diwodorofosforan monopotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze
PL 228 954 B1
30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 7,0.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziom 1,5 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 8
W celu przygotowania inokulum szczepu Enterococcus faecium ŁOCK 0965 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 10%, glukoza 5%, wodorofosforan dipotasowy 2%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 6,5.
Do fermentora o pojemności całkowitej 42 l zawierającego 25 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 8,6 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 9
W celu przygotowania inokulum szczepu Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 3%, sacharoza 5%, diwodorofosforan monopotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 7,0.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 6,1 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 10
W celu przygotowania inokulum szczepu Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 8%, glukoza 3%, wodorofosforan dipotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 7,0.
Do fermentora o pojemności całkowitej 42 l zawierającego 25 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 7,0 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 300 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 7,0.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 8,6 x 108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 11
W celu przygotowania inokulum szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 2%, sacharoza 5%, diwodorofosforan monopotasowy 1%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH
PL 228 954 B1
6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 6,5.
Do szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera o pojemności 5 l wypełnionej w 25% pożywką o składzie jak wyżej, wysterylizowaną w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 120 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 1,6 x108 jtk/ml.
P r z y k ł a d 12
W celu przygotowania inokulum szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996 do sterylnej pożywki o składzie w procentach wagowych: koncentrat sojowy białkowo-mineralny 5%, glukoza 10%, wodorofosforan dipotasowy 2%, woda do 100%, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych zawiesinę komórek bakterii z kriobanku. Pożywka stanowiła 25% wypełnienia szerokoszyjnej kolby Erlenmeyera. Hodowlę inokulum prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów 120 rpm w temperaturze 30°C przez 24 godziny utrzymując pH 6,5.
Do fermentora o pojemności całkowitej 200 l zawierającego 130 l pożywki o składzie jak wyżej, wysterylizowanej w warunkach jak wyżej, o pH 6,5 ustalonym za pomocą 1 N kwasu solnego lub 0,5 N wodorotlenku sodu, dodano w warunkach sterylnych pożywkę inokulum w ilości 10% objętości podłoża. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce przy szybkości obrotów do 300 rpm w temperaturze 30°C w czasie 24 godzin utrzymując stężenie tlenu na poziomie 30% dzięki stosowaniu zmiennych parametrów pracy mieszadła i przepływu powietrza, utrzymując pH na poziomie 6,5.
Po zakończeniu hodowli wykonano posiewy przyżyciowe i stwierdzono gęstość komórek na poziomie 8,6 x 108 jtk/ml.

Claims (8)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu, takich jak Bacillus megaterium ŁOCK 0963, Bacillus subtilis ŁOCK 0962, Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961, Enterococcus faecium ŁOCK 0965, Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996, zawierająca źródło białka, składniki mineralne, cukier, źródło fosforu oraz wodę, znamienna tym, że stanowi ją mieszanina zawierająca 1-10% wagowych koncentratu sojowego białkowo-mineralnego, 1-10% wagowych glukozy lub sacharozy, 0,1-2% wagowych soli fosforanowej w postaci diwodorofosforanu monopotasowego lub monowodorofosforanu dipotasowego oraz wodę do 100%, o pH 6,5-7, ustalonym przy użyciu kwasu solnego lub wodorotlenku sodu lub potasu, wysterylizowana termicznie w temperaturze 121°C w czasie 20 minut.
  2. 2. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że stosuje się koncentrat sojowy białkowo-mineralny zawierający w procentach wagowych: białka 35-45%, tłuszczów < 5%, włókien lignocelulozowych < 5%, lizyny nie mniej niż 2%, metioniny nie mniej niż 0,5%, fosforu < 1%, wapnia < 1%, magnezu < 0,2%, wody do 100%.
  3. 3. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Bacillus megaterium ŁOCK 0963 stanowi ją mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% sacharozy i 2% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% glukozy i 1% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
  4. 4. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Bacillus subtilis ŁOCK 0962 stanowi ją mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 6,5 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 7,0.
    PL 228 954 B1
  5. 5. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Pseudomonas fluorescens ŁOCK 0961 stanowi ją mieszanina zawierająca 1% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 2% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0 lub mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 1% wodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0.
  6. 6. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Enterococcus faecium ŁOCK 0965 stanowi ją mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0 lub mieszanina zawierająca 10% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
  7. 7. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Leuconostoc mesenteroides ŁOCK 0964 stanowi ją mieszanina zawierająca 3% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 7,0lub mieszanina zawierająca 8% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 3% glukozy i 1% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 7,0.
  8. 8. Pożywka według zastrz. 1, znamienna tym, że do hodowli szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0996 stanowi ją mieszanina zawierająca 2% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 5% sacharozy i 1% diwodorofosforanu monopotasowego, o pH 6,5 lub mieszanina zawierająca 5% preparatu sojowego białkowo-mineralnego, 10% glukozy i 2% wodorofosforanu dipotasowego, o pH 6,5.
PL416658A 2016-03-29 2016-03-29 Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu PL228954B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL416658A PL228954B1 (pl) 2016-03-29 2016-03-29 Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL416658A PL228954B1 (pl) 2016-03-29 2016-03-29 Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL416658A1 PL416658A1 (pl) 2017-10-09
PL228954B1 true PL228954B1 (pl) 2018-05-30

Family

ID=59996908

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL416658A PL228954B1 (pl) 2016-03-29 2016-03-29 Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL228954B1 (pl)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL450244A1 (pl) * 2022-08-17 2025-04-14 Uniwersytet Warszawski Podłoże do wytwarzania kompozycji zawierającej syderofory

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL450244A1 (pl) * 2022-08-17 2025-04-14 Uniwersytet Warszawski Podłoże do wytwarzania kompozycji zawierającej syderofory
PL248603B1 (pl) * 2022-08-17 2026-01-05 Univ Warszawski Podłoże do wytwarzania kompozycji zawierającej syderofory

Also Published As

Publication number Publication date
PL416658A1 (pl) 2017-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102583771B (zh) 难分解性废水的生物处理方法及废水处理剂
JP5383724B2 (ja) 油脂分解微生物、微生物固定化担体、廃水の処理方法、並びに、廃水処理システム
JP5630855B2 (ja) 油脂分解微生物、微生物固定化担体、廃水の処理方法、並びに、廃水処理システム
CN108048344B (zh) 两株除臭菌株及其在制备复合生物除臭剂中的应用
CN109385388A (zh) 嗜盐反硝化菌yl5-2及其应用
WO2010018210A1 (en) Microorganism capable of solubilizing phosphate and iron and its applications
CN109294937A (zh) 新型嗜热耐碱兼性厌氧菌株和用于降解牲畜尸体的包含上述菌株的微生物剂
TWI652015B (zh) 藉由微生物之家畜墊料的殺菌方法
JP2010011782A (ja) 微生物株を用いた消臭剤、及びそれを用いた悪臭の消臭方法
CN103204589A (zh) 用生物方法处理和稳定工业循环水水质的方法
Yee et al. The production of functional γ-aminobutyric acid Malaysian soy sauce koji and moromi using the trio of Aspergillus oryzae NSK, Bacillus cereus KBC, and the newly identified Tetragenococcus halophilus KBC in liquid-state fermentation
Moldagulova et al. Data on the isolation and identification of thermotolerant microorganisms from cow manure promising for organic waste processing
JP6346982B1 (ja) ラウルテラ属の微生物の単離方法及び植物性廃棄物処理剤の製造方法並びに植物性廃棄物処理方法
Siddiqi et al. Mesorhizobium denitrificans sp. nov., a novel denitrifying bacterium isolated from sludge
RU2482179C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus atropheus - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
CN104263682A (zh) 一株具有多环芳烃降解功能的植物促生内生细菌及其应用
Ouf et al. Evaluation of low-intensity laser radiation on stimulating the cholesterol degrading activity: Part I. Microorganisms isolated from cholesterol-rich materials
JP4654332B2 (ja) 新規ヤロウィア属酵母及び排水の生物学的処理方法
KR20150092874A (ko) 악취 제거용 미생물 제제
JP5445822B2 (ja) 有機廃棄物分解作用を示す微生物、微生物組成物、有機廃棄物の分解方法および堆肥の製造方法
PL228954B1 (pl) Pożywka mikrobiologiczna do hodowli szczepów bakterii stosowanych w biopreparatach do dezodoryzacji odchodów drobiu
JP2019103491A (ja) 枯草菌の単離方法、その枯草菌、枯草菌を含む微生物製剤、枯草菌単離用培地セット
CN118755645A (zh) 一株堆肥芽孢杆菌dfh-1及其应用
CN118389324A (zh) 一种暹罗芽孢杆菌、菌剂及其在农业废弃物资源化中的应用
CN102796687B (zh) 一种光合细菌菌株及其应用