PL225283B1 - Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie - Google Patents
Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanieInfo
- Publication number
- PL225283B1 PL225283B1 PL408981A PL40898114A PL225283B1 PL 225283 B1 PL225283 B1 PL 225283B1 PL 408981 A PL408981 A PL 408981A PL 40898114 A PL40898114 A PL 40898114A PL 225283 B1 PL225283 B1 PL 225283B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- anhydro
- deoxy
- general formula
- fluorouridine
- trifluoroethyl
- Prior art date
Links
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 title description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- -1 1,2-difluoroethyl Chemical group 0.000 claims abstract description 29
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 125000004206 2,2,2-trifluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C(F)(F)F 0.000 claims abstract description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims abstract description 8
- 125000004776 1-fluoroethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(F)* 0.000 claims abstract description 5
- 125000004778 2,2-difluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])(F)F 0.000 claims abstract description 5
- 125000006002 1,1-difluoroethyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 125000004777 2-fluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(F)C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 4
- 125000005004 perfluoroethyl group Chemical group FC(F)(F)C(F)(F)* 0.000 claims abstract description 4
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 claims abstract description 3
- 125000001028 difluoromethyl group Chemical group [H]C(F)(F)* 0.000 claims abstract 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 17
- 125000003854 p-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Cl 0.000 claims description 14
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 13
- YLMXBNACRIGGFX-UHFFFAOYSA-N C=1[C-]=NNN=1 Chemical compound C=1[C-]=NNN=1 YLMXBNACRIGGFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 10
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 8
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 claims description 5
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 5
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 5
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 claims description 5
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000001449 anionic compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910001412 inorganic anion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000006337 tetrafluoro ethyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 238000002483 medication Methods 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 12
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 8
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical class OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- ZTUJDPKOHPKRMO-UHFFFAOYSA-N hydron;2,2,2-trifluoroethanamine;chloride Chemical compound Cl.NCC(F)(F)F ZTUJDPKOHPKRMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 150000003510 tertiary aliphatic amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- CCZMQYGSXWZFKI-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-4-dichlorophosphoryloxybenzene Chemical compound ClC1=CC=C(OP(Cl)(Cl)=O)C=C1 CCZMQYGSXWZFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(diethylamino)-3-(diethyliminiumyl)-3h-xanthen-9-yl]-5-sulfobenzene-1-sulfonate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRRZGBOZBIVMJT-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroethanamine;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCCF YRRZGBOZBIVMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFQOIIOEXZGRKT-UHFFFAOYSA-N 4-oxo-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidine-3-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)N1C(=O)CSC1=S KFQOIIOEXZGRKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NSPMIYGKQJPBQR-UHFFFAOYSA-N 4H-1,2,4-triazole Chemical compound C=1N=CNN=1 NSPMIYGKQJPBQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTCWWBNODPRQA-UHFFFAOYSA-N 5-(1h-1,2,4-triazol-5-yl)-1h-1,2,4-triazole Chemical compound N1C=NC(C=2NC=NN=2)=N1 HDTCWWBNODPRQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001451 cardiotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229960000961 floxuridine Drugs 0.000 description 1
- 238000000806 fluorine-19 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 230000010224 hepatic metabolism Effects 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- DDCNVJPAOIIZTE-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;1h-1,2,4-triazole Chemical compound C=1N=CNN=1.OP(O)(O)=O DDCNVJPAOIIZTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940029284 trichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 125000004205 trifluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C(F)(F)F 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/42—Phosphorus; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
- C07F9/24—Esteramides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/073—Pyrimidine radicals with 2-deoxyribosyl as the saccharide radical
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny, o ogólnym wzorze 1 gdzie R oznacza grupę trifluorometylową, 2,2,2-trifluoroetylową difluorometylową, perfluoroetylową, 1-fluoroetylową, 2-fluoroetylową, 1,1-difluoroetylową, 1,2-difluoroetylową, 2,2-difluoroetylową, 1,1,2-trifluoroetylową, 1,2,2-trifluoroetylową, 1,1,2,2-tetrafluoroetylową, 1,2,2,2-tetrafluoroetylową. W drugim aspekcie przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania pochodnych 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1. W trzecim aspekcie przedmiotem wynalazku jest zastosowanie pochodnych 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1, w terapii przeciwnowotworowej raka piersi, raka szyjki macicy, raka płuca oraz raka nosogardzieli.
Description
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny, 5 sposób ich wytwarzania oraz zastosowanie jako środków cytotoksycznych.
Choroby nowotworowe stanowią jeden z głównych problemów zdrowotnych ludzi, charakteryzując się najwyższym współczynnikiem umieralności oraz postępującą liczbą zachorowań, związaną głównie ze wzrostem długości oraz stylem życia. Terapia chorób nowotworowych jest trudna, kos ztowna i w wielu przypadkach mało efektywna. Z tego powodu pilnie poszukiwane są nowe substancje o działaniu cytostatycznym. Ich źródłem mogą być produkty naturalne i ich pochodne oraz związki syntetyczne.
Bardzo ważną grupą syntetycznych cytostatyków są pochodne oraz analogi zasad pirymidyn owych czy purynowych oraz modyfikowane nukleozydy. Do nich należą m. in. 5-fluorouracyl oraz jego pochodne np. 5-fluoro-2'-deoksyurydyna (floksurydyna). Zarówno 5-fluorouracyl jak i 5-fluoro-2'-deoksyurydyna wykazują zbliżoną aktywność cytostatyczną i są od wielu lat zarówno samodzielnie jak i w kombinacjach z innymi lekami stosowane w terapii nowotworów m.in. piersi, żołądka, jelita grubego, jajników i innych, 5-fluoro-2'-deoksyurydyna jest także dzięki lepszemu niż 5-fluorouracyl metabolizmowi wątrobowemu stosowana w terapii raka wątroby. Problemy terapii z wykorzystaniem 5-fiuorouracylu oraz 5-fluoro-2'-deoksyurydyny związane są z pojawiającą się opornością komórek rakowych wobec tych leków w wyniku ich długotrwałego stosowania. Istotnym ograniczeniem w stosowaniu 5-fluorouracylu jest jego stosunkowo wysoka toksyczność skutkująca m.in., działaniem neurotoksycznym oraz kardiotoksycznym, 5-fluorouracyl oraz 5-fluoro-2'-deoksyurydyna nie wykazują selektywności w stosunku do komórek rakowych i zdrowych, co stanowi istotne utrudnienie w stosowaniu tych związków w terapii.
Jak wykazały badania Srivastav'a 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyna wykazuje słabe działanie przeciwwirusowe wobec wirusa HBV i znikomą aktywność cytotoksyczną wobec linii Huh-7 (IC50>200 pg/mL) (Srivastav, M. Mak, B. Agrawal, D. L. J. Tyrrell, R. Kumar Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010,20, 6790-6793).
Celem wynalazku było opracowanie nowych związków cytotoksycznych pochodnych 2,3'-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o wysokiej selektywności w stosunku do komórek rakowych oraz ich zastosowanie w terapii nowotworów.
Przedmiotem wynalazku są pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1.
gdzie:
- Ar oznacza grupę fenylową. 4-chlorofenylową, 1-naftylową, 2-naftylową lub grupę fenylową podstawioną w pozycji para, meta lub orto: jednym atomem F, Cl, Br lub I, podstawnikiem alkilowym zawierającym od 1 do 12 atomów węgla,
- R oznacza grupę trifluorometylową, 2,2,2-trifluoroetylową dinuorometylową, pertluoroetylową, 1-fluoroetylową, 2-fluoroefylową, 1,1-difluoroetylową, 1,2-difluoroetylową, 2,2-difluoroetylową, 1,1,2-trifluoroetylową, 1,2,2-trifluoroetylową, 1,2,2,2-tetrafluoroetylową.
W drugim aspekcie przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania pochodnych 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1
PL 225 283 B1
gdzie Ar i R mają podane wyżej znaczenie, polegający na reakcji triazolidu o ogólnym wzorze 2, w którym
Ar oznacza grupę fenylową, 4-chlorofenylową, 1-naftylową, 2-naftylową lub grupą fenylową podstawioną w pozycji para, meta lub orto: jednym atomem F, Cl, Br lub I, podstawnikiem alkilowym zawierającym od 1 do 12 atomów węgla;
z fluorowanymi aminami o ogólnym wzorze 3 w którym
R-NH2 (3)
R oznacza grupę trifluorometylową, 2,2,2-trifluoroetylową difluorometylową. perfluoroetylową, 1-fluoroetylową, 2-fluoroetylową, 1,1-difluoroetylową, 1,2-difluoroetylową, 2,2-difluoroetylową, trifluoroetylową, 1,2,2-trifluoroetyIową, 1,1,2,2-tetrafluoroetylową, 1,2,2,2-tetrafluoroetylową lub solami amin o ogólnym wzorze 4,
R-NH3+X- (4) w którym R ma wyżej podane znaczenie, a X- oznacza anion nieorganiczny z grupy Cl-, Br-, hso4 -, so42- no3- w obecności amin alifatycznych, korzystnie trietyloaminy.
Reakcja przebiega po dodaniu do roztworu zawierającego triazolid o ogólnym wzorze 2, fluorowanej aminy o wzorze ogólnym 3 w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do triazolidu, a najkorzystniej 3 równoważniki. Alternatywnie reakcje triazolidu o wzorze ogólnym 2 można prowadzić z solami fluorowanych amin o wzorze ogólnym 4, najkorzystniej chlorowodorkami. W takim przypadku do roztworu zawierającego triazolid dodaje się sól fluorowanej aminy alifatycznej o wzorze ogólnym 4, w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do triazolidu, najkorzystniej 3 równoważniki oraz trzeciorzędowej aminy alifatycznej lub pirydyny, najkorzystniej trietyloaminy, w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do triazolidu, najkorzystniej 3 równoważniki. Dalszy sposób prowadzenia reakcji jest identyczny, niezależnie czy stosuje się aminę o wzorze ogólnym 3 bądź jej sól o wzorze ogólnym 4. Reakcję prowadzi się w czasie od 10 minut do 10 godzin, najkorzystniej 2 godziny. Środowiskiem reakcji są rozpuszczalniki z grupy niższych nitryli alifatycznych, bezwodny DMF lub DMSO. Najkorzystniej stosuje się acetonitryl. Reakcja przebiega w temperaturze od 0°C do 70°C, jednak najkorzystniejsze ze względów praktycznych jest prowadzenie reakcji w temperaturze pokojowej. Otrzym any produkt izoluje się z mieszaniny poreakcyjnej poprzez usunięcie z mieszaniny rozpuszczalników i oczyszcza za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, korzystnie stosując jak fazę ruchomą mieszaninę chloroform-metanol zawierającą od 0,5% do 50% objętościowych metanolu, najkorzystniej 1%.
Korzystnym ze względu na oszczędność czasu oraz dostępność handlowych reagentów wariantem syntezy pochodnych 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1 jest prowadzenie wszystkich reakcji w jednym naczyniu reakcyjnym. W takim przypadku synteza składa się
PL 225 283 B1 z trzech kroków realizowanych jeden po drugim bez konieczności izolacji produktów pośrednich, według schematu 1.
W kroku 1, poddaje się reakcji arylodichlorofosforan o wzorze ogólnym 5.
w którym Ar oznacza grupę fenylową, 4-chlorofenylową, 1-naftylową, 2-naftylową lub grupę fenylową podstawioną w pozycji para, meta lub orto: jednym atomem F, Cl, Br lub I, podstawnikiem alkilowym zawierającym od 1 do 12 atomów węgla, grupą alkoksylową zawierającą od 1 do 12 atomów węgla, grupą nitrową lub trifluorometylową; lub grupę fenylową podstawioną w dowolnej pozycji dwoma takimi samymi lub różnymi podstawnikami z grupy F, Cl, Br lub I, podstawnik alkilowy zawier ający od 1 do 12 atomów węgla, grupa alkoksylowa zawierająca od 1 do 12 atomów węgla, grupa nitrowa lub trifluorometylowa, z 1,2,4-triazolem w ilości od 2 do 4 równoważników, najkorzystniej z trzema równoważnikami w obecności trietyloaminy w ilości od 2 do 4 równoważników, najkorzystniej 2,5 równoważników w rozpuszczalniku z grupy niższych nitryli alifatycznych, bezwodnym DMF lub DMSO, najkorzystniej w acetonitrylu, np. stosując procedurę opisaną w Lewandowska, M., Ruszkowski, P., Baraniak, D., Czarnecka, A., Kleczewska, N., Celewicz, L. (2013) Eur. J. Med. Chem., 2013, 67, 188-195. W jej wyniku tworzy się bis-triazolid o wzorze ogólnym 6.
w którym Ar ma podane wyżej znaczenie.
PL 225 283 B1
W kroku 2, otrzymany bistriazolid o wzorze ogólnym 6 reaguje z 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyną (AdFU) prowadząc do wytworzenia triazolidu o ogólnym wzorze 2, w którym Ar ma podane wyżej znaczenie.
Ten krok prowadzi się wprowadzając do mieszaniny reakcyjnej 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydynę (AdFU) w ilości od 0,1 do 1 równoważnika, a najkorzystniej 0,66 równoważnika stosunku do użytego w kroku pierwszym arylodichlorofosforanu o wzorze ogólnym 5. Koniecznym dodatkiem stosowanym w tym kroku, poprawiającym rozpuszczalność AdFU jest amina, najkorzystniej pirydyna, stosowana w ilości od 1 do 3 równoważników w stosunku do AdFU, najkorzystniej w ilości 2 równoważników. Ten etap procesu prowadzi się w czasie od 10 minut do 10 godzin, korzystnie 3 godziny a najkorzystniej godzinę.
W kroku trzecim, wytworzony w etapie drugim triazolid o wzorze ogólnym 2 reaguje z fluorowanymi aminami o wzorze ogólnym 3 bądź ich solami o wzorze ogólnym 4, najkorzystniej chlorowodorkami, w obecności trietyloaminy dając docelowy produkt o wzorze ogólnym 1. Ten krok prowadzi się wprowadzając do mieszaniny reakcyjnej zawierającej wytworzony związek o wzorze ogólnym 2 fluorowaną aminę o wzorze ogólnym 3 w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do ilości użytej w kroku drugim 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny (AdFU), a najkorzystniej 3 równoważniki. Alternatywnie w trzecim kroku, reakcję triazolidu o wzorze ogólnym 2 można prowadzić z solami fluorowanych amin o wzorze ogólnym 4, najkorzystniej chlorowodorkami. W takim przypadku do roztworu zawierającego triazolid o wzorze ogólnym 2 dodaje się sól fluorowanej aminy alifatycznej o wzorze ogólnym 4, w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do w stosunku do ilości użytej w kroku drugim 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny (AdFU), najkorzystniej 3 równoważniki oraz trzeciorzędowej aminy alifatycznej lub pirydyny, najkorzystniej trietyloaminy, w ilości od 0,1 do 5 równoważników w stosunku do 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny (AdFU), najkorzystniej 3 równoważniki. Dalszy sposób prowadzenia reakcji jest identyczny niezależnie czy stosuje się aminę o wzorze ogólnym 3 czy jej sól o wzorze ogólnym 4. Reakcję prowadzi się w czasie od 10 minut do 10 godzin, najkorzystniej 2 godziny, w temperaturze od 0°C do 70°C, jednak najkorzystniejsze ze względów praktycznych jest prowadzenie reakcji w temperaturze pokojowej. Otrzymany produkt izoluje się z mieszaniny poreakcyjnej poprzez usunięcie z mieszaniny rozpuszczalników i oczyszcza za pomocą chromatografii k olumnowej na żelu krzemionkowym, korzystnie stosując jak fazę ruchomą mieszaninę chloroform metanol zawierającą od 0,5% do 50% objętościowych metanolu, najkorzystniej 1%.
W trzecim aspekcie przedmiotem wynalazku jest zastosowanie pochodnych 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1, w którym Ar oznacza para-chlorofenyl lub fenyl zaś R oznacza -CF3 lub -CF2-CF3), w szczególności 5’-[N'-(2,2,2-trifluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforanu 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny - FEAdFU, według wynalazku w terapii przeciwnowotworowej raka piersi, raka szyjki macicy, raka płuca oraz raka nosogardzieli. Badania przeprowadzone in vitro wobec linii komórek nowotworowych raka piersi, raka szyjki macicy, raka płuca oraz raka nosogardzieli potwierdziły silne działanie cytotoksyczne przewyższające swą aktywnością stosowane w terapii 2'-deoksy-5-fluorourydynę (SFdU) oraz 5-fluorouracyl, badane w tych samych warunkach. Dodatkowo związek FEAdFU charakteryzuje korzystny, wysoki współczynnik selektywności (SI), który wskazuje na jego selektywną wysoką cytotoksyczność wobec komórek rakowych przy niewielkiej toksyczności wobec komórek zdrowych.
Badania aktywności cytotoksycznej przeprowadzono na liniach komórek nowotworowych: MCF-7 (rak piersi), HeLa (rak szyjki macicy), A549 (rak płuca) i KB (rak nosogardzieli) oraz komórkach prawidłowych - fibroblastach skóry ludzkiej (HDF) pochodzących z kolekcji ECACC - European Collection of Cell Cultures.
Testy cytotoksyczności prowadzono za pomocą standardowego oznaczenia z wykorzystaniem sulforodaminy B. Polegały na 72 godzinnej inkubacji linii komórek nowotworowych znajdujących się w fazie wzrostu logarytmicznego z badanym związkiem a następnie oznaczeniu stopnia zahamowania wzrostu komórek z wykorzystaniem adsorpcji barwnika - sulforodaminy B wiążącego się z białkami komórkowymi za pomocą pomiaru spektrofotometrycznego. Oznaczenia prowadzono według procedury opisanej w pracy: Vichai, V., Kirtikara, K, Nature Protocols, 2006, 1, 1112.
Oznaczanie cytotoksyczności
Przygotowanie komórek do badania:
Komórki badanej linii komórkowej w fazie logarytmicznego wzrostu wysiano na 24-studzienkowe płytki w ilości 20 tys. komórek/2 mL pożywki na studzienkę, a następnie inkubowano w cieplarce w temperaturze 37°C, w atmosferze 5% CO2 przez 24 godziny.
PL 225 283 B1
Roztwory badanych związków przygotowano w DMSO w stężeniach: 0,05; 0,1; 0,5; 1; 5; 10; 50;
100; 500 μΜ.
W komorze laminarnej, zapewniającej sterylne warunki pracy, komórki testowanych linii traktowano roztworami badanego związku w ten sposób, że: trzy pierwsze studzienki stanowiły kontrolę zawierały tylko 20 μL DMSO, do następnych studzienek dodano kolejne roztwory badanego związku (20 μ^ począwszy od najniższego stężenia - po trzy studzienki na każde stężenie. Następnie płytkę umieszczono w inkubatorze o temperaturze 37°C na 72 godziny. Po zakończonej inkubacji przyklejone komórki utrwalono przez dodatek 500 μL zimnego (4°C) 50% kwasu trichlorodowego (TCA) i inkubowano w 4°C przez 1 godzinę. Następnie każdą studzienkę płukano sterylną wodą i suszono. Operację płukania powtarza się pięciokrotnie. Utrwalone komórki wybawiono się przez 30 minut poprzez dodatek 500 μL 0,4% roztworu barwnika sulforodaniny B rozpuszczonej w 1% kwasie octowym. Niezwiązany barwnik usuwa się zlewając go z płytki a komórki płucze się 4 razy 1% kwasem octowym. Następnie płytkę suszono na powietrzu przez ok. 5 minut. Związany barwnik rozpuszczono poprzez dodanie do każdej studzienki 1500 μL 10 mM buforu Tris-base (trishydroksymetyloam i nometan) i mieszano przy użyciu wytrząsarki orbitalnej przez 5 minut. Następnie przeniesiono po 200 μL roztworu z każdej studzienki do dwóch studzienek na nowej płytce 96-studzienkowej oraz oznaczano absorpcję roztworów spektrofotometrycznie przy długości fali 490-530 nm za pomocą czytnika płytek. Stopień zahamowania wzrostu komórek w % wobec badanego związku obliczono przyjmując absor pcję roztworu kontrolnego za 100%.
Testy cytotoksyczności dla pozostałych związków i linii komórkowych zostały wykonane w identyczny sposób.
W zależności od rodzaju linii komórkowej stosowano następujące media hodowlane:
Linia MCF-7 była namnażana w medium Dulbecco'sModifiedEagle's Medium (DME) firmy Sigma (nr kat. D5796) natomiast linie HeLa, A549 oraz KB były namnażane w medium RPMI-1640 firmy Sigma (nr kat. R8758).
Dla wszystkich badanych pochodnych wyznaczono wskaźnik IC50, który oznacza stężenie związku potrzebne do zahamowania wzrostu komórek o 50%. Pochodne wykazujące IC50 < 4 μg/mL są powszechnie uznawane za aktywne (w skrócie: A, ang. active), pochodne mieszczące się W przedziale IC50 = 4-30 μg/mL za związki o średniej aktywności (w skrócie: MA, ang. medium active), natomiast pochodne, dla których IC50 > 30 μg/mL za związki nieaktywne (w skrócie: NA, ang. non-active).
Dla porównania analogiczne badania przeprowadzono z użyciem znanych środków cytotoksycznych a mianowicie: 5-fluoro-2'-deoksyurydyny i 5-fluorouracylu.
Dodatkowo dla związku FEAdFU obliczono współczynniki selektywności (SJ), zdefiniowane jako: SI = IC50 linii komórek zdrowych (fibroblasty HDF)/IC50 linii komórek rakowych. Korzystny, wysoki współczynnik selektywności (SI) wskazuje, że efektywność działania związku wobec komórek rak owych jest wyższa niż jego toksyczność wobec komórek zdrowych.
Wyniki badań aktywności cytotoksycznej związków o wzorze ogólnym 1 przedstawione są w tabeli 1. Podane wartości uśredniono z trzech niezależnych oznaczeń
T a b e l a 1.
| Aktywność cytotoksyczna IC« | ||||||||||||||
| linia MCF-7 (rak piersi) | HeLa (rak szyjki macicy) | A549 (rak płuca | KB (rak nosogardzieli) | Fibroblasty (HDF) | ||||||||||
| związek | [pg/mL] | [pM] | SI | [pg/mL] | [pM] | SI | [pg/mL] | [pM] | SI | [pg/mL] | [pM] | SI | [pg/m M] | [pM] |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 |
| FEAdFU | 0,12 (A) | 0,24 | 50 | 0,18 (A) | 0,36 | 33,3 | 0,2 (A) | 0,4 | 30 | 0,2 (A) | 0,4 | 30 | 6,0 | 12,0 |
| MFEAdFU | 11,8 (MA) | 25,4 | 3,7 | 16,0 (MA) | 34,5 | 2,7 | - | - | - | 12,2 (MA) | 26,3 | 3,5 | 43,1 | 92,9 |
| 2,3'-anhydro- 2'-deoksy-5- -fluorourydyna (AdFU) | 3,7 (A) | 16,2 2 | - | 11,0 (MA) | 48,21 | - | - | - | - | 11,0 (MA) | 48,2 1 | - | - | - |
PL 225 283 B1 ciąg dalszy tabeli 1
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 |
| 5-fluoro-2'- deoksyurydy- na | 2,81 (A) | 11,4 | - | 3,20 (A) | 13,0 | - | 3,30 (A) | 13,4 | - | 3,37 (A) | 13,7 | - | - | - |
| 5-fluorouracyl | 2,37 (A) | 18,2 | - | 2,73 (A) | 21,0 | - | 2,78 (A) | 21,4 | - | 2,86 (A) | 22,0 | - | - | - |
Cytotoksyczność 5'-[W-(2,2,2-trifluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforanu 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny (FEAdFU) będącego przedmiotem zgłoszenia mieści się w zakresie wysokiej aktywności. Związek ten charakteryzuje wysoki współczynnik selektywności SI (zdefiniowany wyżej) wskazujący na wysoce selektywne działanie wobec komórek nowotworowych i niewielkie działanie wobec komórek zdrowych (fibroblastów).
Cytotoksyczność i współczynnik selektywności pochodnej MFEAdFU w której Ar oznacza para-chlorofenyl a R oznacza -CH2CH2F, są znacząco niższe w stosunku do związku FEAdFU.
Przedmiotem wynalazku jest w szczególności zastosowanie związku FEAdFU do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka piersi. Badania potwierdziły, że związek FEAdFU jest bardzo aktywny wobec komórek raka piersi (linii MCF-7), IC50 = 0,24 pM, przewyższając o ponad 47 razy aktywność 5 FdU oraz o ponad 75 razy aktywność 5 FU. Wykazuje także ponad 67 razy wyższą aktywność niż wyjściowa 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyna (AdFU). Związek ten wykazuje także bardzo wysoki współczynnik selektywności SI = 50 wskazujący na efektywne działanie wobec komórek raka tej linii.
W kolejnym aspekcie przedmiotem wynalazku jest w szczególności zastosowanie związku FEAdFU zastosowanie do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka szyjki macicy. Badania potwierdziły, że związek FEAdFU jest bardzo aktywny wobec komórek raka szyjki macicy (linii HeLa), IC50 - 0,36 pM, przewyższając cytotoksyczności 5 FdU o ponad 36 razy, 5 FU o ponad 58 razy oraz AdFU o ponad 133 razy. Związek ten wykazuje także bardzo wysoki współczynnik selektywności SI - 33 wskazujący na efektywne działanie wobec komórek raka tej linii.
W kolejnym aspekcie przedmiotem wynalazku jest w szczególności zastosowanie związku FEAdFU do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka płuca. Badania potwierdziły, że związek FEAdFU jest bardzo aktywny wobec komórek raka płuc (linii A549), IC50 = 0,4 pM, przewyższając cytotoksyczność 5 FdU o ponad 33 razy i 5 FU o ponad 53 razy. Związek ten wykazuje także bardzo wysoki współczynnik selektywności SI = 30 wskazujący na efektywne działanie wobec komórek raka tej linii.
W kolejnym aspekcie przedmiotem wynalazku jest w szczególności zastosowanie związku FEAdFU do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka nosogardzieli. Badania potwierdziły, że związek FEAdFU jest bardzo aktywny wobec komórek raka nosogardzieli (linii KB), IC50 = 0,4 pM, przewyższając cytotoksyczności 5 FdU o ponad 34 razy, 5 FU o 55 razy oraz AdFU o 120 razy. Związek ten wykazuje także bardzo wysoki współczynnik selektywności SI - 30 Wskazujący na efektywne działanie wobec komórek raka tej linii.
Przedmiot wynalazku jest objaśniony przykładami wykonania, które ilustrują ale nie ograniczają wynalazku.
Rozpuszczalniki oraz pozostałe odczynniki chemiczne pochodziły z firm Aldrich, Merck i POCh i były stosowane bez dodatkowych operacji. Chromatografię kolumnową wykonywano stosując jako fazę stacjonarną żel krzemionkowy 60 H (0,045-0,075 mm/200-300 mesh) firmy Merck.
Widma H NMR, C NMR, F NMR związków zarejestrowano na spektrometrze Varian-Gemini (300 MHz) oraz Bruker Avance (600 MHz) w zastosowaniem jako wzorców wewnętrznych; tetrametylosilanu (TMS) przy rejestracji widm H NMR i C NMR oraz trichlorofluorometanu (CFCl3) w widmach 19F NMR.
PL 225 283 B1
P r z y k ł a d 1 Synteza FEAdFU
F
Do roztworu 4-chlorofenylodi(1,2,4-triazolo)fosforanu (1,07 mmol, 0,332 g) w acetonitrylu (4 mL) dodano 2,3’-anhydro-2’-dideoksy-5-fluorourydynę (1,07 mmol, 0,244 g) i pirydynę (4 mL). Całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę po czym do mieszaniny reakcyjnej dodano 270 chlorowodorek 2,2,2-trifluoroetyloaminy (5,35 mmol, 0,725 g) oraz trietyloaminę (2,0 mL) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Postęp reakcji kontrolowano przy pomocy chrom atografii cienkowarstwowej TLC, stosując jako eluent CHCI3/MeOH w stosunku 10:1. Po całkowitym przereagowaniu substratów do mieszaniny reakcyjnej dodano nasycony roztwór NaHCO3 (10 mL), a następnie przeprowadzono ekstrakcję chloroformem. Fazę organiczną suszono nad bezwodnym MgSO4, a następnie odparowano dwukrotnie z toluenem w celu usunięcia resztek pirydyny. Otrzym any produkt oczyszczono na kolumnie chromatograficznej na żelu krzemionkowym stosując jako eluent mieszaninę chloroform/metanol w stosunku 100:1 (v/v). Wydajność 40%.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 2,33-2,40 (m, 2H, N-CH2); 2,49-2,53 (m, 2H, H-2', H-2''); 3,03 (m, 1H, H-4'); 3,46 (m, 2H, H-5',H-5); 4,22-4,35 (m, 1H, 11-3'); 5,93 (pseudo t, 1H, J = 5,8 Hz, H-1'); 6,45 (m, 1H, NH-C-C); 7,23, 7,27 (d, 2H, J = 8,7 Hz. 4-CIPh); 7,43, 7,48 (d, 2H, J = 8,7 Hz. 4-CIPh); 8,14, 8,17 (d, 1H, J = 5,2 Hz, H-6).
13C NMR (DMSO-d6): δ 31,26, 43,42, 59,38, 77,52, 85,42, 87,34, 122,12, 122,58, 125,59, 129,72, 139,18, 144,27, 149,12, 151,70, 162,93.
19F NMR (DMSO-d6): δ -158,26 (d. 1F, J = 5,0 Hz); -71,40. -71,36 (t, 3F, J = 10,0 Hz, N-C-CF3).
31P NMR (DMSO-d6) δ 5,05; 5,20.
MS-ESI m/z: 500, 502 (M + H]; 522, 524 [M + Na]+;538, 540 [M + K]+; 498,500 (M - H]-, 534, 536, 538 [M + CI]-.
P r z y k ł a d 2
Synteza FEAdFU - procedura one pot
ClDo roztworu 4-chlorofenylodichlorofosforanu (1,84 mmol, 0,452 g) w acetonitrylu (4,5 mL) dodano 1,2,4-triazoI (5,53 mmol, 0,382g) oraz trietyloaminę (0,62 ml.). Całość mieszano przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Po zakończeniu pierwszego etapu do mieszaniny reakcyjnej dodano 2,3'-anhydro-2'-dideoksy-5-fluorourydynę (0,88 mmol, 0,200 g) i pirydynę (4,5 mL). Całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Po wskazanym czasie do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorowodorek 2,2,2-trifluoroetyloaminy (2,64mmol, 0,120 g) oraz trietyloaminę (1,5 ml.) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Postęp reakcji kontrolowano przy pomocy chromatografii cienkowarstwowej TLC, stosując jako eluent CHCl3/MeOH w stosunku 10:1. Po całkowitym przereagowaniu substratów do mieszaniny reakcyjnej dodano nasycony roztwór NaHCO3 (10 mL), a następnie przeprowadzono ekstrakcję chloroformem. Fazę organiczną suszono nad bezwodnym MgSO4, a następnie odparowano dwukrotnie z toluenem w celu usunięcia resztek pirydyny. Otrzym any produkt oczyszczono na kolumnie chromatograficznej na żelu krzemionkowym stosując jako eluent mieszaninę chloroform/metanol w stosunku 100:1 (v/v). Wydajność 42%.
Produkt wykazuje identyczną charakterystykę spektralną z produktem opisanym w przykładzie 1.
PL 225 283 B1
P r z y k ł a d 3 Synteza MFEAdFU
Stosując procedurę identyczną jak w przykładzie 2, przeprowadzono reakcję fosforylowanej 2,3’-anhydro-2’-dideoksy-5-fluorourydyny (0,88 mmol, 0,200 g) oraz chlorowodorku 2-fluoroetyloaminy (263 mg; 2,64 mmol). Po oczyszczeniu chromatograficznym otrzymano produkt MFEAdFU z wydajnością 34%.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 2,56-2,75 (m, 2H, H-2', H-2''), 3,00-3,23 (m, 2H, N-CH2C), 3,87-420 (m, 1H, H-4'), 4,54 (m, 2H, H-5', H-5''), 4,68-4,79 (m, 2H, N-C-CH2), 5,54 (m, 1H, H-3'), 6,04 (pseudo t, J = 6,2 Hz, 1H, H-U), 6,72 (m, 1H, NH-C-C), 7,24, 7,28 (d, 2H, J = 8,6 Hz, 4-CIPh), 7,44, 7,48 (d, 2H, J = 8,6 Hz, 4-CIPh), 8,15, 8,18 (d, 1H, J = 5,6 Hz, H-6), 11,99 (brs, 1H, 3-NH).
13C NMR (DMSO-d6) 6: 33,12, 45,51,63,89, 77,12, 82,48, 83,24, 87,58, 121,74, 125,97 (d, JC-F = 37,3 Hz), 128,12, 131,07, 143,74 (d, JC-F = 232,3 Hz), 149,05, 151,48, 162,99 (d, JC-F = 26,0 Hz).
19F NMR (DMSO-d6) δ: -71,17 (m, IF),-158,19 (m, IF).
31P NMR (DMSO-d6) δ 5,96; 6,01.
MS-ESI m/z: 464, 466 [M + H]+; 486, 488 [M + Na]+; 502, 504 [M + K]+; 462, 464 [M - H]-'; 498, 500, 502 [M + Cl]-.
Claims (7)
1. Pochodne 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1.
gdzie:
- Ar oznacza grupę fenylową, 4-chlorofenylową, 1-naftyIową, 2-naftylową lub grupę fenylową podstawioną w pozycji para, meta lub orto: jednym atomem F, Cl, Br lub I, podstawnikiem alkilowym zawierającym od 1 do 12 atomów węgla, grupą alkoksylową zawierającą od 1 do 12 atomów węgla.
- R oznacza grupę trifluorometylową, 2,2,2-trifluoroetylową, difluorometylową, perfluoroetylową, 1-fluoroetylową, 2-fluoroetylową, 1,1-difluoroctyIową, 1,2-difluoroetylową, 2,2-difluoroetylową, 1,1,2-trifluoroetylową, 1,2,2-trifluoroetylową, tetrafluoroetylową, 1,2,2,2-tetrafluoroetylową.
2. Sposób wytwarzania pochodnych 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1
PL 225 283 B1 gdzie Ar i R mają znaczenie; podane w zastrzeżeniu 1, znamienny tym, że polegający na reakcji triazolidu o ogólnym wzorze 2, w którym
- Ar oznacza grupę fenylową, 4-chlorofenylową, 1-naftyIową, 2-naftylową lub grupę fenylową podstawioną w pozycji para, meta lub orto: jednym atomem F, Cl, Br lub I, podstawnikiem alkilowym zawierającym od 1 do 12 atomów węgla, grupą alkoksylową zawierającą od 1 do 12 atomów węgla;
z fluorowanymi aminami o ogólnym wzorze 3 w którym
R-NH2 (3)
R oznacza grupę trifluorometyIową, 2,2,2-trifluoroctylową difluorometylową, perfluoroetylową, 1-fluoroety Iową, 2-fluoroetylową, 1,1-difluoroetylową, 1,2-difluoroetylową, 2,2-difluoroetyIową, 1,1,2 --trifluoroetylową, 1,2,2-trifIuoroetyIową, tetrafluoroetylową, 1,2,2,2-tetrafluoroetylową, lub solami amin o ogólnym wzorze 4,
R-NH3+ X- (4) w którym R ma wyżej podane znaczenie, a X- oznacza anion nieorganiczny z grupy Cl-, Br-, hso4 -, so42-, no3- w obecności amin alifatycznych, korzystnie trietyloaminy.
(1)
3. Zastosowanie pochodnych 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny o ogólnym wzorze 1, w którym Ar oznacza para-chlorofenyl lub fenyl zaś R oznacza -CF3 lub -CF2-CF3, do przygotowania preparatów leczniczych stosowanych w terapii przeciwnowotworowej.
4. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka piersi stosuje się 5'-[W-(2,2,2-trifluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforan 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny.
5. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka szyjki macicy stosuje się 5'-[W(2,2,2-trifluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforan 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny.
6. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka płuca stosuje się 5'-[W-(2,2,2-tnfluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforan 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny.
7. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka nosogardzieli stosuje się 5'-[W-(2,2,2-trifluoroetylo)-O-(4-chlorofenylo)]fosforan 2,3'-anhydro-2'-deoksy-5-fluorourydyny.
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL408981A PL225283B1 (pl) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
| PCT/PL2014/050050 WO2015050468A1 (en) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 2,3'-Anhydro-2'-deoxy-5-fluorouridine derivatives with cytotoxic activity, a manufacturing process and application |
| PL14772458T PL3172216T3 (pl) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
| JP2015544030A JP5894351B2 (ja) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 細胞毒性活性を有する２，３’−アンヒドロ−２’−デオキシ−５−フルオロウリジン誘導体、その製造プロセスおよび使用 |
| CA2887025A CA2887025C (en) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 2,3'-anhydro-2'-deoxy-5-fluorouridine derivatives with cytotoxic activity, a manufacturing process and application |
| CN201480002600.XA CN105722845A (zh) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 2,3′-脱水-2′-脱氧-5-氟尿苷衍生物与细胞毒活性、制备方法及应用 |
| EP14772458.7A EP3172216B1 (en) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 2,3'-anhydro-2'-déoxy-5-fluorouridine derivatives with cytotoxic activity, a manufacturing process and use thereof |
| US14/420,487 US9260468B1 (en) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | 2,3′-anhydro-2′-deoxy-5-fluorouridine derivatives with cytotoxic activity, a manufacturing process and application |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL408981A PL225283B1 (pl) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL408981A1 PL408981A1 (pl) | 2015-06-22 |
| PL225283B1 true PL225283B1 (pl) | 2017-03-31 |
Family
ID=52778964
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL408981A PL225283B1 (pl) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
| PL14772458T PL3172216T3 (pl) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL14772458T PL3172216T3 (pl) | 2014-07-24 | 2014-08-22 | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9260468B1 (pl) |
| EP (1) | EP3172216B1 (pl) |
| JP (1) | JP5894351B2 (pl) |
| CN (1) | CN105722845A (pl) |
| CA (1) | CA2887025C (pl) |
| PL (2) | PL225283B1 (pl) |
| WO (1) | WO2015050468A1 (pl) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114644651A (zh) * | 2022-04-13 | 2022-06-21 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 芳氧基磷酰化氨基酸酯化合物的制备方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102464688A (zh) * | 2010-11-19 | 2012-05-23 | 医影生物医药科技(上海)有限公司 | 胸苷环磷酸酯化合物及其抗肿瘤用途 |
| US9095599B2 (en) * | 2011-01-03 | 2015-08-04 | Nanjing Molecular Research, Inc. | O-(substituted benzyl) phosphoramidate compounds and therapeutic use |
| DK2681227T3 (da) * | 2011-03-01 | 2016-02-22 | Nucana Biomed Ltd | Phosphoramidatderivater af 5-fluor-2'-deoxyuridin til anvendelse i behandlingen af cancer |
-
2014
- 2014-07-24 PL PL408981A patent/PL225283B1/pl unknown
- 2014-08-22 JP JP2015544030A patent/JP5894351B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-08-22 US US14/420,487 patent/US9260468B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-08-22 CN CN201480002600.XA patent/CN105722845A/zh active Pending
- 2014-08-22 PL PL14772458T patent/PL3172216T3/pl unknown
- 2014-08-22 EP EP14772458.7A patent/EP3172216B1/en not_active Not-in-force
- 2014-08-22 CA CA2887025A patent/CA2887025C/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-08-22 WO PCT/PL2014/050050 patent/WO2015050468A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2887025A1 (en) | 2015-04-09 |
| EP3172216B1 (en) | 2018-10-10 |
| PL408981A1 (pl) | 2015-06-22 |
| JP2015537040A (ja) | 2015-12-24 |
| CN105722845A (zh) | 2016-06-29 |
| JP5894351B2 (ja) | 2016-03-30 |
| EP3172216A1 (en) | 2017-05-31 |
| CA2887025C (en) | 2016-01-05 |
| PL3172216T3 (pl) | 2019-04-30 |
| WO2015050468A1 (en) | 2015-04-09 |
| US20160024133A1 (en) | 2016-01-28 |
| US9260468B1 (en) | 2016-02-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2022506887A (ja) | 窒素含有縮合複素環系ｓｈｐ２阻害剤化合物、製造方法及び使用 | |
| EP2940014B1 (en) | 2,3-dihydro-isoindole-1-on derivative as btk kinase suppressant, and pharmaceutical composition including same | |
| US8450293B2 (en) | Synthesis and characterization of C8 analogs of c-di-GMP | |
| EP3705480B1 (en) | Class of amino-substituted nitrogen-containing fused ring compounds, preparation method therefor, and use thereof | |
| CN102858754A (zh) | Raf抑制剂化合物及其使用方法 | |
| EP3632906B1 (en) | Azaaryl derivative, preparation method therefor, and application thereof for use in pharmacy | |
| EP3348550B1 (en) | Substituted benzothiazoles and therapeutic uses thereof for the treatment of human diseases | |
| CN102666498A (zh) | Raf抑制剂化合物及其使用方法 | |
| JP2023145548A (ja) | Ｃｄ７３阻害剤、その製造方法と応用 | |
| PL225283B1 (pl) | Pochodne 2,3’-anhydro-2’-deoksy-5-fluorourydyny o działaniu cytotoksycznym, sposób wytwarzania i zastosowanie | |
| EP3105243B1 (en) | 2',3'-dideoxy-5-fluorouridine derivatives, a process for the manufacture thereof and application thereof | |
| CA2888015C (en) | 2',5'-dideoxy-5-fluorouridine derivatives having cytotoxic activity, a process for the manufacture thereof and application thereof | |
| Schroeder et al. | Synthesis and biological evaluation of 6-ethynyluracil, a thiol-specific alkylating pyrimidine | |
| CN114634521A (zh) | Dna-pk选择性抑制剂及其制备方法和用途 | |
| EP3907221A1 (en) | Fluorine-containing substituted benzothiophene compound, and pharmaceutical composition and application thereof | |
| CN111808080B (zh) | 取代的吡啶或嘧啶化合物、其制备方法及其在医药上的应用 | |
| AU2015373422B2 (en) | New imidazo[1,2-a]quinoxalines and derivates thereof for the treatment of cancer | |
| CN101716178B (zh) | 用于抗肿瘤的药物 | |
| CN116947821A (zh) | 一种化合物及其在制备jak激酶抑制剂中的用途 | |
| CN101703507B (zh) | 用于抗肿瘤的药物 | |
| CN116063325A (zh) | 具有btk调节作用的大环化合物及其用途 | |
| PL210118B1 (pl) | Nowe podstawione N,N-bis(2-hydroksyetylo)hydrazonoformamidu, ich zastosowanie oraz sposób ich otrzymywania |