PL224854B1 - Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna - Google Patents

Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna

Info

Publication number
PL224854B1
PL224854B1 PL405129A PL40512913A PL224854B1 PL 224854 B1 PL224854 B1 PL 224854B1 PL 405129 A PL405129 A PL 405129A PL 40512913 A PL40512913 A PL 40512913A PL 224854 B1 PL224854 B1 PL 224854B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
arg
pro
lys
dab
resin
Prior art date
Application number
PL405129A
Other languages
English (en)
Other versions
PL405129A1 (pl
Inventor
Aleksandra Misicka-Kęsik
Dagmara Tymecka
Bartłomiej Fedorczyk
Piotr Sosnowski
Beata Wileńska
Ewa Witkowska
Patrick Ladam
Gerard Y. Perret
Anna Starzec
Original Assignee
Univ Warszawski
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Warszawski filed Critical Univ Warszawski
Priority to PL405129A priority Critical patent/PL224854B1/pl
Priority to US14/913,380 priority patent/US10301352B2/en
Priority to EP14780911.5A priority patent/EP3036251B1/en
Priority to PCT/PL2014/050051 priority patent/WO2015026251A1/en
Publication of PL405129A1 publication Critical patent/PL405129A1/pl
Publication of PL224854B1 publication Critical patent/PL224854B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Ujawniono nowe peptydomimetyki o wzorze ogólnym 1 o aktywności antyangiogennej i ich kompozycje farmaceutyczne do leczenia nowotworów i przewlekłych stanów zapalnych.

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe peptydomimetyki o aktywności antyangiogennej, sposób ich otrzymywania, kompozycja farmaceutyczna oraz ich zastosowanie, zwłaszcza w leczeniu nowotworów i przewlekłych stanów zapalnych (w szczególności: reumatoidalnego zapalenia stawów, zapalenia jelita grubego), w łuszczycy, cukrzycy, chorobach zwyrodnieniowych oczu (ARMD), nefropatii i neuropatii, w szczególności w postaci wlewów lub zastrzyków dożylnych, lub implantów.
Angiogeneza to proces biologiczny polegający na tworzeniu nowych naczyń krwionośnych przez komórki śródbłonka, w obrębie istniejącego układu naczyniowego. Wytwarzanie naczyń kapilarnych może zachodzić zarówno w warunkach fizjologicznych, jak i w warunkach patologiczn ych. Nadmierne tworzenie się naczyń krwionośnych występuje w miejscach, gdzie toczy się stan zapalny, ch orobowy czy nowotworowy. Przykładowymi chorobami, w których udowodniono nadmierną aktywność angiogenezy są endometrioza, łuszczyca, choroba wrzodowa oraz reumatoidalne zapalenie stawów. W przebiegu powstawania nowotworu angiogeneza jest niezbędna zarówno do wzrostu guza powyżej 2-3 mm, jak i tworzenia przerzutów.
Najważniejszym czynnikiem proangiogennym stymulującym angiogenezę jest grupa białek nazywanych czynnikami wzrostu śródbłonka naczyniowego VEGF (ang. Vascular Endothelial Growth Factor). Najsilniejsze działanie wykazuje białko VEGF165, które łącząc się ze swymi receptorami przekazuje do komórek śródbłonka sygnał do proliferacji angiogenezy. Najważniejszym z receptorów VEGF165 jest receptor drugi (ang. VEGF Receptor 2), typu kinazy tyrozynowej, który w obecności białka występującego we krwi zwanego neuropiliną-1 (NRP-1) tworzy silne połączenie z VEGF165 i powoduje przekazanie silnego sygnału proangiogennego. Dlatego też substancje blokujące powstanie kompleksu VEGF165/VEGFR2/NRP-1 mogą stać się potencjalnymi lekami przeciwnowotworowymi. (Cook, KM and Figg, WD. Angiogenesis inhibitors: current strategies and future prospects. Cancer J. Clin. 60, 222, 2010, Folkman, J. Tumor angiogenesis; thereapeutic implications. N. Engl. J. Med. 285, 1182, 1976, Samant, RS. and Shevde, LA Recent advances in antiangiogenic therapy of cancer. Oncotarget 2, 122, 2011).
Jak dotąd wykazano zarówno w badaniach in vitro, jak i in vivo skuteczność blokowania angiogenezy przy wykorzystaniu peptydów działających jako inhibitory układu VEGF165/VEGFR2/NRP-1 (Starzec A., Vasy R., Martin A., Lecouvey M., Di Benedetto M., Crepin M., Perret GY Antiangiogenic and antitumour activities of peptide inhibiting the vascular endothelial growh factor binding to neuropilinl, Life Sci. 70, 2370, 2006).
Istnieje ciągłe zapotrzebowanie na związki, które mogłyby hamować angiogenezę.
Przedmiotem wynalazku są nowe peptydomimetyki o ogólnym wzorze:
gdzie:
i jest liczbą całkowitą od 1 do 9
PL 224 854 B1 n jest liczbą całkowitą od 1 do 4 m jest liczbą całkowitą 3 lub 4
Ri oznacza : -H, -NH2, -NH-CO-CH3, -NH-Cbz, lub -NH-Fmoc, gdzie: Fmoc = grupa 9-fluorenylometoksykarbonylowa, Cbz = grupa benzyloksykarbonyIowa R2 oznacza: -H, -CO-CH3, -Fmoc, lub -Cbz.
X oznacza jeden spośród następujących fragmentów cząsteczki od a) do e):
a)
albo:
b)
albo:
c)
albo:
d) 0 R3 „ i i. NH '''NH |J V
O R4 gdzie:
R3 i R4 oznaczają niezależnie grupę wybraną ze zbioru obejmującego łańcuchy boczne: glicyny, alaniny, kwasu 2,3-diaminopropanowego, kwasu 2,4-diaminobutanowego, ornityny, lizyny, proliny, przyłączone do atomu węgla o konfiguracji S lub R, albo:
e) -CO-NH-(CH2)k-CO-NH-, gdzie k stanowi liczbę całkowitą w przedziale 2-7, lub ich pochodne zawierające zredukowane wiązanie peptydowe, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
PL 224 854 B1
Korzystnie, przedmiotem wynalazku są związki o wzorze:
gdzie i, n, m, R1f R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone powyżej.
Korzystnie w związkach według wynalazku, co najmniej jedno z wiązań peptydowych oznaczonych jako A, B lub C na poniższym wzorze może zostać zredukowane:
przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone powyżej.
Korzystnie, przedmiotem wynalazku są związki ze zredukowanym wiązaniem peptydowym A o wzorze:
gdzie i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone powyżej.
PL 224 854 B1
Równie korzystnie, przedmiotem wynalazku są związki ze zredukowanym wiązaniem peptydowym B o wzorze:
gdzie i, n, m, R1f R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone powyżej.
Korzystnie, przedmiotem wynalazku są związki ze zredukowanym wiązaniem peptydowym C o wzorze:
gdzie i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone powyżej.
Szczególnie korzystnie, związek według wynalazku został wybrany z grupy obejmującej: Lys(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Lys(hArg)-Dap-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Dab-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Ala-Ala-Arg,
Lys(hArg)-Ala-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Ala-Arg,
Lys(11-Aun(g))-Pro-Dab-Arg,
Lys(7-Ahp(g))-Pro-Dab-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Dap-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Pro-Arg,
Lys(Dab(g))-Pro-Dab-Arg,
Dab(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Orn(Arg)-Pro-Dab-Arg,
Orn(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Lys(Arg)-Pro-Dab-Arg lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli, gdzie (g) oznacza grupę guanidynową, 11-Aun oznacza resztę kwasu 11-aminoundekanowego, 7-Ahp oznacza resztę kwasu 7-aminoheptanowego.
Korzystnie, związki według wynalazku mogą być w postaci soli, wodzianów lub innych farmaceutycznie dopuszczalnych kompleksów. Farmaceutycznie dopuszczalne sole obejmują sole addycyjne
PL 224 854 B1 z kwasami nieorganicznymi, jak kwas chlorowodorowy, bromowodorowy, siarkowy, fosforowy i podobne lub z kwasami organicznymi, jak octowy, propionowy, heksanowy, cyklopentanopropionowy, mlekowy, malonowy, maleinowy, fumarowy, cytrynowy, winowy i podobne.
Wynalazek dotyczy także kompozycji farmaceutycznej do leczenia nowotworów i chorób zapalnych, zawierającej jako substancję czynną nowe peptydomimetyki o aktywności antyangiogennej, o wyżej zdefiniowanym wzorze ogólnym 1 lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik.
Przed podaniem związki przygotowuje się korzystnie w postaci odpowiednich preparatów farmaceutycznych stosując znane dodatki, jak farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, rozcieńczalnik lub środek pomocniczy.
Związki według wynalazku można podawać jako wlew dożylny lub implant podskórny, lub implant do tkanek ciała gwarantujący najlepszy dostęp uwalnianego nowego peptydomimetyku o działaniu antyangiogennym do miejsca działania.
Związki według wynalazku mogą być podawane jako jedyny składnik aktywny kompozycji farmaceutycznej lub jako składnik wielolekowej kompozycji farmaceutycznej przeznaczonej do stosowania w terapii, zwłaszcza przeciwangiogennej i/lub przeciwnowotworowej.
P r z y k ł a d 1.
Synteza związków według wynalazku.
Ogólny schemat syntezy peptydomimetyków według wynalazku został przedstawiony na figurze 1.
Peptydomimetyki według wynalazku mogą być uzyskane powszechnie znaną metodą syntezy peptydów na nośniku polimerowym (Solid Phase Peptide Synthesis, SPPS), gdzie w blokach budulcowych grupy funkcyjne zabezpieczone są ortogonalnymi grupami ochronnymi usuwanymi w warunkach kwasowych lub zasadowych. Wszystkie stosowane grupy zabezpieczające powinny być stabilne w warunkach tworzenia wiązania peptydowego lub jego izosteru, natomiast ich usunięcie nie powinno powodować destrukcji wzrastającego łańcucha peptydowego ani racemizacji żadnego centrum chiralnego. Preferowane grupy N-a-zabezpieczające to: grupa 9-fluorenylometoksykarbonylowa (Fmoc) oraz grupa tert-butoksykarbonylowa (Boc). Inne grupy zabezpieczające proponowane do ochrony grup funkcyjnych w łańcuchach bocznych: grupa 2,2,4,6,7-pentametylodihydrobenzofurano-5-sulfonylowa (Pbf), grupa 2,2,5,7,8-pentametylo-chromano-5-sulfonylowa (Pmc), grupa 4-metoksy-2,3,6-trimetylofenylosulfonowa (Mtr), grupa p-toluenosulfonylowa (Tos), Boc, Fmoc, grupa 4-metylotritylowa (Mtt), grupa 4-metoksytritylowa (Mmt), grupa benzyloksykarbonylowa (Cbz, Z), grupa 1-(4,4-dimetylo-2,6-dioksocykloheks-1-ylideno)-3-metylobutylowa (ivDde), grupa 2-chlorobenzyloksy-karbonylowa (2-Cl-Z). W przypadku syntezy wszystkich peptydomimetyków C-końcowe aminokwasy są przyłączone do nośnika polimerycznego, który jest bierny chemicznie i nierozpuszczalny w stosowanych m ediach reakcyjnych. W strategii Fmoc preferowanym nośnikiem polimerycznym jest polistyrenowa żyw ica z linkerem 4-hydroksymetylo-fenoksymetylowym (żywica Wanga), natomiast w strategii Boc preferowanym nośnikiem polimerycznym jest żywica 4-chlorometylokopoli(stryrenowa 1% diwinylobenzen) (żywica Merrifielda). Wiązania peptydowe były otrzymywane z wykorzystaniem następujących odczynników sprzęgających: N,N-dicykloheksylokarbodiimid (DCC) z dodatkiem N-1-hydroksybenzotriazolu (HOBt), N,N-diizopropylokarbodiimid (DIC) z dodatkiem HOBt, heksafluorofosroran (O-benzotriazolo-1-iloksy)-N-N-N'-N'-tetrametylouroniowy (HBTU), tetrafluoroboran (O-benzotriazo-1-iloksy)-N-N-N'-N'-tetrametylouroniowy (TBTU), tetrafluorofosforan (O-azabenzotriazo-1-iloksy)-N-N-N'-N'-tetrametylouroniowy (HATU), heksafluorofosforan 1[(1-(cyjan-2-etoksy-2-oksoetylideno-aminooksy)dimetyloamino-morfolino)]uroniowy (COMU), heksafluorofosforan benzotriazo-1-iloksy-tris(dimetylo-amino)fosfoniowy (BOP). Ostatnim etapem syntezy jest odszczepienie peptydu od żywicy i w zależności od strategii postępowania preferowane jest wykorzystanie: ciekłego kwasu fluorowodorowego (HF) z dodatkiem anizolu lub mieszaniny kwasu trifluorooctowego/wody/triizopropylosilanu (95:2,5:2,5 v/v/v). Surowe produkty mogą być oczyszczone przy wykorzystaniu wysokosprawnej chromatografii cieczowej w odwróconym układzie faz na kolumnie z wypełnieniem C-12 lub C-18, w gradiencie 0% -15% (B) w 30 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H2O a faza (B) to 0,05% TFA w ACN.
Otrzymane produkty można ewentualnie przekształcić w żądaną farmaceutycznie dopuszczalną sól konwencjonalnym sposobem.
P r z y k ł a d 2.
Synteza związku o wzorze ogólnym 1, gdzie X jest wzorem opisanym podpunktem a.
PL 224 854 B1
Procedura syntezy tej grupy związków według wynalazku została omówiona poniżej na przykładzie syntezy H-Lys(hArg)-Pro-Dab-Arg-COOH:
160 mg żywicy Wanga z przyłączoną resztą argininy [Fmoc-Arg(Pbf)-Wang] o obsadzeniu równym 0,63 mmol/g było mieszane przez 4 godziny w 6 ml bezwodnego W,W-dimetyloformamidu. Po tym czasie żywicę odsączono, a następnie mieszano przez 5 minut w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF (v/v), po czym żywicę ponownie odsączono i dodano świeżą porcję (6 ml) 20% roztworu piperydyny w DMF i jeszcze mieszano przez 20 minut. Kolejnym etapem syntezy było trzykrotne naprzemienne jednominutowe wytrząsanie żywicy w 6 ml bezwodnego DMF i 6 ml izopropanolu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie, po 1 minucie, przemyta świeżą porcją bezwodnego DMF. Po sekwencji przemyć został wykonany test kolorymetryczny - test Kaisera. W tym celu do probówki, do której wkroplono równe objętości trzech roztworów [(A): 5 g ninhydryny w 100 ml etanolu; (B): 80 g fenolu w 20 ml etanolu; (C) 2 ml 0.001 M wodnego roztworu KCN w 98 ml pirydyny] dodano niewielką ilość żywicy i całość ogrzewano w łaźni wodnej w temperaturze 100°C przez 5 minut. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku (zabarwienie granatowe) przystąpiono do kolejnego etapu, w którym 88 mg (0,2 mmol) Fmoc-Dab(Boc)-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 51 μl (0,3 mmol) DIPEA rozpuszczono w 5 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną mieszano przez 10 minut a następnie dodano do żywicy i całość mieszano przez kolejne 10 minut, po czym dodano jeszcze 51 μl (0,3 mmol) DIPEA i mieszanie kontynuowano przez 4 godziny. Po upływie tego czasu żywicę odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) bezwodnego DMF, po czym ponownie został wykonany test Kaisera z wynikiem negatywnym (co oznaczało właściwy przebieg reakcji sprzęgania). Następnie żywicę mieszano przez 5 min w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF po czym żywicę ponownie odsączono i dodano świeżą porcję (6 ml) 20% roztworu piperydyny w DMF i jeszcze mieszano przez 20 min. Kolejnym etapem syntezy było trzykrotne naprzemienne jednominutowe wytrząsanie żywicy w 6 ml bezwodnego DMF i 6 ml izopropanolu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie, po 1 minucie, przemyta świeżą porcją bezwodnego DMF. Po sekwencji przemyć został wykonany test Kaisera. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku (zabarwienie granatowe) przystąpiono do kolejnego etapu, w którym 67 mg (0,2 mmol) Fmoc-Pro-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 51 μl DIPEA rozpuszczono w 5 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną mieszano przez 10 minut a następnie dodano do żywicy i całość mieszano przez kolejne 10 minut, po czym dodano jeszcze 51 μl DIPEA i mieszanie kontynuowano przez 4 godziny. Po upływie tego czasu żywicę odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) bezwodnego DMF, po czym ponownie wykonano test Kaisera (wynik negatywny). Następnie żywicę mieszano przez 5 minut w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF, po czym żywicę ponownie odsączono i dodano świeżą porcję (6 ml) 20% roztworu piperydyny w DMF i jeszcze mieszano przez 20 minut. Kolejnym etapem syntezy było trzykrotne naprzemienne jednominutowe wytrząsanie żywicy w 6 ml bezwodnego DMF i 6 ml 2-izopropanolu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie po 1 minucie przemyta świeżą porcją bezwodnego DMF. Po sekwencji przemyć został wykonany test kolorymetryczny w tym przypadku test chloranilowy. W tym celu do probówki, do której wkroplono równe objętości dwóch roztworów [(A): 2% roztwór acetaldehydu w DMF; (B): 2% roztwór chloranilu w DMF] dodano niewielką ilość żywicy i c ałość pozostawiono w temperaturze pokojowej na 5 minut. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku (zabarwienie granatowe ziaren) przystąpiono do kolejnego etapu, w którym 94 mg (0,2 mmol) Boc-Lys(Fmoc)-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 51 μl DIPEA rozpuszczono w 5 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną mieszano przez 10 minut a następnie dodano do żywicy i całość mieszano przez kolejne 10 minut, po czym dodano jeszcze 51 μl DIPEA i mieszanie kontynuowano przez 4 godziny. Po upływie tego czasu żywicę odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) bezwodnego DMF, po czym ponownie wykonano test chloranilowy (wynik negatywny, brak zabarwienia ziaren). Następnie żywicę mieszano przez 5 min w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF po czym żywicę ponownie odsączono i dodano świeżą porcję (6 ml) 20% roztworu piperydyny w DMF i jeszcze mieszano przez 20 minut. Kolejnym etapem syntezy było trzykrotne naprzemienne jednominutowe wytrząsanie żywicy w 6 ml bezwodnego DMF i 6 ml izopropan olu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie, po 1 minucie, przemyta świeżą porcją bezwodnego DMF. Po sekwencji przemyć został wykonany test Kaisera (wynik pozytywny). Następnie 94 mg (0,2 mmol) Boc-Lys(Fmoc)-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 51 μl DIPEA rozpuszczono w 5 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną mieszano przez 10 minut a następnie dodano do
PL 224 854 B1 żywicy i całość mieszano przez kolejne 10 minut, po czym dodano jeszcze 51 μΙ DIPEA i mieszanie kontynuowano przez 4 godziny. Po upływie tego czasu żywicę odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) bezwodnego DMF, po czym ponownie został wykonany test Kaisera (wynik negatywny). W celu usunięcia grupy Fmoc z łańcucha bocznego reszty lizyny żywicę mieszano przez 5 min w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF po czym żywicę ponownie odsączono i dodano świeżą porcję (6 ml) 20% roztworu piperydyny w DMF i jeszcze mieszano przez 20 minut. Kolejnym etapem syntezy było trzykrotne naprzemienne jednominutowe wytrząsanie żywicy w 6 ml bezwodnego DMF i 6 ml izopropanolu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie, po 1 minucie, przemyta świeżą porcją bezwodnego DMF. Po sekwencji przemyć został wykonany test Kaisera (wynik pozytywny). Kolejnym etapem syntezy było wprowadzenie grupy guanidynowej, w tym celu rozpuszczono 100 mg (0,5 mmol) azotanu 1-amidyno-3,5-dimetylopirazolu w 5 ml DMF a pH roztworu doprowadzono do wartości 11 za pomocą DIPEA. Tak przygotowaną mieszaninę dodano do peptydylożywicy i pozostawiono mieszając na 3 dni. Następnie żywicę przemyto trzykrotnie po 1 minucie świeżą porcją bezwo dnego DMF, po czym wykonano test Kaisera (wynik negatywny). Etapem poprzedzającym usunięcie peptydu z żywicy było pięciokrotne przemycie żywicy (po 1 minucie) kolejno dichlorometanem (5 ml), metanolem (5 ml) i eterem dietylowym (5 ml), a następnie umieszczenie jej w eksykatorze nad NaOH. Kompletne acydolitycznie odszczepienie peptydu od żywicy wraz z usunięciem pozostałych grup zabezpieczających nastąpiło po 5 godzinnym mieszaniu żywicy w mieszaninie TFA/TIS/H2O w stosunku 95 : 2.5 : 2.5 (v/v/v). Następnie żywicę odsączono a przesącz zatężono. Surowy produkt wytrącono za pomocą eteru dietylowego. Produkt syntezy został oczyszczony przy wykorzystaniu semi-preparatywnej wysokosprawnej chromatografii cieczowej w odwróconym układzie faz na kolumnie z wypełnieniem C-12, w gradiencie 0%-15% (B) w 30 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H2O a faza (B) to 0,05% TFA w ACN.
Uzyskano związek o wzorze:
[Lys(hArg)-Pro-Dab-Arg]
MS obliczone MS znalezione
[M+H]+ 670,45 670,05
[M+2H]2+ 335,73 335,60
[M+3H]3+ 224,15 223,95
HPLC : tR = 13,961 min w liniowym gradiencie 0%-15% (B) w 20 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H2O a faza (B) to 0,05% TFA w ACN.
W analogiczny sposób można uzyskać inne związki według wynalazku należące do omawianej grupy.
PL 224 854 B1
Przykładowo, analogicznym sposobem uzyskano Lys(hArg)-Dap-Pro-Arg o wzorze:
[Lys(hArg)-Dap-Pro-Arg]
MS obliczone MS znalezione
[M+H]+ 656,43 656,00
[M+2H]2+ 328,72 328,60
[M+3H]3+ 219,48 219,45
HPLC : tR = 10,553 min w liniowym gradiencie 0%-15% (B) w 20 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H-Ό a faza (B) to 0,05% TFA w ACN.
Podobnie, również przykładowo, analogicznym sposobem uzyskano Lys(hArg)-Dab-Pro-Arg o wzorze:
[Lys(hArg)-Dab-Pro-Arg]
MS obliczone MS znalezione
[M+H]+ 670,45 670,00
[M+2H]2+ 335,73 335,60
[M+3H]3+ 224,15 224,15
HPLC : tR = 10,057 min w liniowym gradiencie 0%-15% (B) w 20 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H2O a faza (B) to 0,05% TFA w ACN.
PL 224 854 B1
Przykładowo, analogicznym sposobem uzyskano peptydomimetyki wskazane w tabeli 1.
T a b e l a 1.
Właściwości chemiczne przykładowych związków według wynalazku.
Wzór peptydu MS obliczone MS znalezione
Lys(hArg )-Ala-Ala-Arg 615,40 [M+H]+ 308,21 [M+2H]2+ 615,00 [M+H]+ 308,10 [M+2H]2+
Lys(hArg)-Ala-Pro-Arg 641,42 [M+H]+ 321,21 [M+2H]2+ 641,10 [M+H]+ 321,15 [M+2H]2+
Lys(hArg)-Pro-Ala-Arg 641,42 [M+H]+ 321,21 [M+2H]2+ 214,48 [M+3H]3+ 641.10 [M+H]+ 321.10 [M+2H]2+ 214,40 [M+3H]3+
Lys(11-Aun(g))-Pro-Dab-Arg 725.51 [M+H]+ 363,26 [M+2H]2+ 242.51 [M+3H]3+ 725,10 [M+H]+ 363,25 [M+2H]2+ 242,40 [M+3H]3+
Lys(7-Ahp(g))-Pro-Dab-Arg 669,45 [M+H]+ 335,23 [M+2H]2+ 223,82 [M+3H]3+ 669,05 [M+H]+ 335,10 [M+2H]2+ 223,75 [M+3H]3+
Lys(hArg)-Pro-Dap-Arg 656,43 [M+H]+ 328,72 [M+2H]2+ 656,05 [M+H]+ 328,70 [M+2H]2+
Lys(hArg )-Pro-Pro-Arg 667,43 [M+H]+ 334,22 [M+2H]2+ 223,15 [M+3H]3+ 667,05 [M+H]+ 334,20 [M+2H]2+ 223,10 [M+3H]3+
Lys(Dab(g))-Pro-Dab-Arg 642,41 [M+H]+ 321,71 [M+2H]2+ 642,05 [M+H]+ 321,60 [M+2H]2+
Dab(hArg)-Pro-Dab-Arg 642,41 [M+H]+ 321,71 [M+2H]2+ 642,05 [M+H]+ 321,55 [M+2H]2+
Om(Arg)-Pro-Dab-Arg 642,41 [M+H]+ 321,71 [M+2H]2+ 641,95 [M+H]+ 321,55 [M+2H]2+
Om(hArg)-Pro-Dab-Arg 656,43 [M+H]+ 328,72 [M+2H]2+ 656,05 [M+H]+ 328,60 [M+2H]2+
Lys(Arg)-Pro-Dab-Arg 656,43 [M+H]+ 328,72 [M+2H]2+ 219,48 [M+3H]3 656,10 [M+H]+ 328,65 [M+2H]2+ 219,40 [M+3H]3+
Gdzie (g) oznacza grupę guanidynową, 11-Aun oznacza resztę kwasu 11-aminoundekanowego, 7-Ahp oznacza resztę kwasu 7-aminoheptanowego.
Przekształcenie dowolnego spośród wiązań peptydowych A, B lub C, wskazanych powyżej, w wiązanie zredukowane może być uzyskane znanym sposobem, przykładowo poprzez użycie w syntezie peptydomimetyków N-blokowanych α-aminoaldehydów. Przekształcenie N-blokowanego grupą Boc aminokwasu w aminoaldehyd, było wykonywane zgodnie z procedurą opisaną w: Fehrentz, J. A.; Castro, B. Synthesis 1983, 676-678, a następnie aminowanie redukcyjne na żywicy polimerycznej było przeprowadzane wg procedury opisanej w Mi-Sun P., Hyun-Sik O., Hyeongjin C., Keun-Hyeung L. Tetrahedron Letters 2007, 1053-1057.
Reakcje deprotekcji grupy aminowej i sprzęgania aminokwasów z udziałem promieniowania mikrofalowego były prowadzone według: Loffredo C., Assuncao N.A., Gerhardtb J., Machini Miranda T., J. Pept. Sci. 2009, 808-817.
P r z y k ł a d 3.
Synteza związku o wzorze ogólnym 1, gdzie X jest jednym z wariantów opisanych w podpunktach b, c lub d.
Sposób syntezy tej grupy związków według wynalazku została omówiona poniżej na przykładzie syntezy H-Lys(hArg)-Ala[CH2-NH]Ala-Arg-OH:
270 mg żywicy Merrifielda z przyłączoną resztą argininy [Boc-Arg(Tos)-Merrifield] o obsadzeniu równym 0,37 mmol/g było mieszane przez 0,5 godziny w 6 ml chlorku metylenu (DCM). Po tym czasie
PL 224 854 B1 żywicę odsączono, a następnie mieszano przez 5 minut w 6 ml 50% roztworu kwasu trifluorooctowego (TFA) w toluenie (v/v) w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Kolejnym etapem syntezy były przemycia: trzykrotne jednominutowe mieszanie żywicy w 6 ml DCM, następnie trzykrotne mieszanie żywicy w 6 ml izopropanolu (IPA), po czym żywica została trzykrotnie, po 1 minucie, przemyta DCM. Pozostałości TFA zostały zneutralizowane w 10% roztworze DIPEA w DMF (N,N-dimetyloformamid) (v/v) przez mieszanie żywicy dwukrotnie po 5 minut w świeżych porcjach roztworu. Obojętne pH żywicy uzyskano poprzez powtórzenie poprzednich przemyć DCM, IPA oraz DCM. W kolejnym kroku został wykonany test kolorymetryczny - test Kaisera. W tym celu do probówki, do której wkroplono równe objętości trzech roztworów [(A): 5 g ninhydryny w 100 ml etanolu; (B): 80 g fenolu w 20 ml etanolu; (C) 2 ml 0.001 M wodnego roztworu KCN w 98 ml pirydyny] dodano niewielką ilość żywicy i całość ogrzewano w łaźni wodnej w temperaturze 100°C przez 5 minut. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku (zabarwienie granatowe) przystąpiono do kolejnego etapu, w którym 38 mg (0,2 mmol) Boc-Ala-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 86 gl (0,5 mmol) DIPEA rozpuszczono w 3 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną dodano do żywicy i całość mieszano przez 15 minut w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Po upływie tego czasu żywicę ostudzono, odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) DCM, po czym ponownie został wykonany test Kaisera (wynik negatywny - brak zabarwienia żywicy). Następnie żywicę mieszano przez 5 minut w 6 ml 50% roztworu kwasu trifluorooctowego (TFA) w toluenie (v/v) w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Kolejnym etapem syntezy były przemycia: trzykrotne jednominutowe mieszanie żywicy w 6 ml DCM, następnie trzykrotne mieszanie żywicy w 6 ml izopropanolu (IPA), oraz trzykrotne mieszanie w 6 ml DCM. Pozostałości TFA zostały zneutralizowane w 10% roztworze DIPEA w DMF (N,N-dimetyloformamid) (v/v) przez mieszanie żywicy dwukrotnie po 5 minut w świeżych porcjach roztworu. Obojętne pH żywicy uzyskano poprzez powtórzenie poprzednich przemyć DCM, IPA oraz DCM. W kolejnym kroku został wykonany test Kaisera. Następnie 69 mg (0,4 mmol) świeżo otrzymanego Boc-Ala-H rozpuszczono w 5 ml 1% roztworu kwasu octowego w DMF. Tak przygotowaną mieszaninę reakcyjną dodano do żywicy i całość mieszano przez 3 minuty w temp. 80°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 150 W, po czym mieszaninę ostudzono i dodano roztworu zawierającego 25 mg (0,4 mmol) NaBH3CN w 1 ml DMF DIPEA. Mieszanie kontynuowano przez 6 minut w temp. 80°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 150 W. Po upływie tego czasu żywicę ostudzono, odsączono i przemyto czterokrotnie po 1 minucie świeżą porcją (po 6 ml) DCM, po czym ponownie wykonano test Kaisera. Następnie żywicę mieszano przez 5 minut w 6 ml 50% roztworu kwasu trifluorooctowego (TFA) w toluenie (v/v) w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Kolejnym etapem syntezy były przemycia: trzykrotne jednominutowe mieszanie żywicy w 6 ml DCM, następnie trzykrotne mieszanie żywicy w 6 ml 2-izopropanolu (IPA), oraz trzykrotne mieszanie w 6 ml DCM. Pozostałości TFA zostały zneutralizowane w 10% roztworze DIPEA w DMF (v/v) przez mieszanie żywicy dwukrotnie po 5 minut w świeżych porcjach roztworu. Obojętne pH żywicy uzyskano poprzez powtórzenie poprzednich przemyć DCM, IPA oraz DCM. W kolejnym kroku został wykonany test Kaisera. Następnie 94 mg (0,2 mmol) Boc-Lys(Fmoc)-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 86 gl DIPEA rozpuszczono w 3 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną dodano do żywicy i całość mieszano przez 15 minut w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Po upływie tego czasu żywicę ostudzono, odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) DCM, po czym ponownie wykonano test Kaisera. Następnie żywicę mieszano przez 5 minut w 6 ml 50% roztworu kwasu trifluorooctowego (TFA) w toluenie (v/v) w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Kolejnym etapem syntezy były przemycia: trzykrotne jednominutowe mieszanie żywicy w 6 ml DCM, następnie trzykrotne mieszanie żywicy w 6 ml izopropanolu (IPA), oraz trzykrotne mieszanie w 6 ml DCM. Pozostałości TFA zostały zneutralizowane w 10% roztworze DIPEA w DMF (v/v) przez mieszanie żywicy dwukrotnie po 5 minut w świeżych porcjach roztworu. Obojętne pH żywicy uzyskano poprzez powtórzenie poprzednich przemyć DCM, IPA oraz DCM. W kolejnym kroku został wykonany test Kaisera. Następnie 94 mg (0,2 mmol) Boc-Lys(Fmoc)-OH, 64 mg (0,2 mmol) TBTU oraz 86 gl DIPEA rozpuszczono w 3 ml bezwodnego DMF. Tak przygotowaną mieszaninę preaktywacyjną dodano do żywicy i całość mieszano przez 15 minut w temp. 60°C stosując promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Po upływie tego czasu żywicę ostudzono, odsączono i czterokrotnie po 1 minucie przemyto świeżą porcją (po 6 ml) DCM, po czym ponownie wykonano test Kaisera. W celu usunięcia grupy Fmoc z łańcucha bocznego reszty lizyny żywicę mieszano przez 5 minut w 6 ml 20% roztworu piperydyny w DMF (v/v) w temp. 60°C stosując
PL 224 854 B1 promieniowanie mikrofalowe o mocy P = 20 W. Kolejnym etapem syntezy były: trzykrotne jednominutowe mieszanie żywicy w 6 ml DCM, następnie trzykrotne mieszanie żywicy w 6 ml izopropanolu (IPA), oraz trzykrotne mieszanie w 6 ml DCM. W kolejnym kroku został wykonany test Kaisera. Kolejnym etapem syntezy było wprowadzenie grupy guanidynowej, w tym celu rozpuszczono 100 mg (0,5 mmol) azotanu 1-amidyno-3,5-dimetylopirazolu w 5 ml DMF a pH roztworu doprowadzono do wartości 11 za pomocą DIPEA. Tak przygotowaną mieszaninę dodano do peptydylożywicy i pozostawiono mieszając na 3 dni. Następnie żywicę przemyto trzykrotnie po 1 minucie świeżą porcją bezwo dnego DMF, po czym wykonano test Kaisera. Etapem poprzedzającym usunięcie peptydu z żywicy było pięciokrotne przemycie żywicy (po 1 minucie) kolejno dichlorometanem (5 ml), metanolem (5 ml) i eterem dietylowym (5 ml) a następnie umieszczenie jej w eksykatorze nad NaOH. Kompletne acydolitycznie odszczepienie peptydu od żywicy nastąpiło po 5 godzinnym mieszaniu żywicy w mieszaninie HF/anizol. Następnie naczynie przepłukano eterem dietylowym przenosząc na lejek schotta osad produktu razem z żywicą, po czym peptyd rozpuszczono w 50% kwasie octowym i zliofilizowano. Produkt syntezy został oczyszczony przy wykorzystaniu semi-preparatywnej wysokosprawnej chromatografii cieczowej w odwróconym układzie faz na kolumnie z wypełnieniem C-12, w gradiencie 0%-15% (B) w 20 minut, gdzie faza (A) to 0,05% TFA w H2O a faza (B) to 0,05% TFA w ACN
Otrzymywanie Boc-Ala-H
W 10 ml DCM nad mieszadłem magnetycznym rozpuszczono 190 mg (1,0 mmol) Boc-Ala-OH oraz 353 mg (1,1 mmol) TBTU, po czym do reakcji dodano 190 μl (1,1 mmol) DIPEA. Po 10 minutach dodano 107 mg (1,1 mmol) chlorowodorku N-metylo-N-metoksyaminy a następnie wkroplono kolejną porcję 205 μl (1,2 mmol) DIPEA. Przebieg reakcji kontrolowano za pomocą TLC w układzie heksan:octan etylu (1:1). Czas reakcji wynosił 1 godzinę. Po tym czasie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono dodatkową porcją 20 ml DCM, przeniesiono do rozdzielacza i przemyto trzykrotnie porcjami po 30 ml; 3M roztworem kwasu solnego, nasyconym roztworem NaHCO3 oraz nasyconym roztworem NaCl. Warstwę organiczną wysuszono nad bezwodnym MgSO4 i zatężono na wyparce uzyskując z wydajnością 80% 186 mg (0,8 mmol) produktu.
Następnie 186 mg (0,8 mmol) uzyskanego w poprzednim etapie Boc-Ala-N(OCH3)CH3 rozpuszczono w 20 ml świeżo destylowanego tetrahydrofuranu (THF) nad mieszadłem magnetycznym. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono w łaźni lodowej, po czym dodawano porcjami 123 mg (3,25 mmol) sproszkowanego LiAIH4. Reakcję kontrolowano za pomocą TLC w układzie heksan:octan etylu (1:1), zanik substratu zaobserwowano po 30 minutach. Po tym czasie dodano 442 mg (3,25 mmol) KHSO4 rozpuszczonego w 8 ml wody. Mieszaninę zatężono na wyparce a następnie ekstrahowano trzykrotnie eterem dietylowym porcjami po 15 ml. Połączone warstwy eterowe przemyto trzykrotnie porcjami po 20 ml; 3M roztworem kwasu solnego, nasyconym roztworem NaHCO3 oraz nasyconym roztworem NaCl. Warstwę organiczną wysuszono nad bezwodnym MgSO4 i zatężono na wyparce uzyskując z wydajnością 65% 90 mg (0,52 mmol) Boc-Ala-H.
W analogiczny sposób można uzyskać inne związki według wynalazku należące do omawianej grupy.
P r z y k ł a d 4.
Badanie aktywności biologicznej związków według wynalazku - właściwości inhibicyjne kompleksu VGEF165/NRP-1.
Działanie antyangiogenne badano w teście in vitro poprzez pomiar inhibicji wiązania VEGF165 z NRP-1. Test ten pozwala na oznaczenie % inhibicji badanego związku przy określonym stężeniu. Nowe związki były wyraźnie lepsze od wzorcowego peptydu A7R i wykazywały aktywność inhibitor ową przy stężeniach rzędu nM.
Oznaczania aktywności inhibitorowej badanych związków.
Badania efektu inhibitorowego peptydomimetyków prowadzono metodą enzymatyczną oznaczając spektrofotometrycznie wypieranie, przez badany związek, ligandu VEGF165 z wiązania do specyficznego receptora Neuropiliny-1. Badania prowadzono na polistyrenowych 96-dołkowych płytkach (Maxisorb, Nunc.).
Procedura
W każdym dołku umieszcza się 100 μl roztworu zawierającego 2 μg/ml przeciwciał anti-Fc IgG (Sigma-Aldrich) w buforze fosforanowym PBS (PBS, Sigma) i pozostawia się na noc w temp. 4°C. Następnego dnia dołki odmywa się i inkubuje w roztworze PBT zawierającym albuminę wołową (BSA, Sigma), w celu wyeliminowania oddziaływań niespecyficznych. Następnie, używając do wszystkich rozcieńczeń i licznych przemywań PBT, dodaje się kolejno:
PL 224 854 B1
- 20 ng/dołek oczyszczonego rekombinowanego szczurzego NRP1-Fc (R&D Systems, Abingdon, UK) w 50 μL PBS-BSA 0.1%-tween-80 0.005% (PBT),
- 50 μΙ roztworu badanego związku w PBT o końcowym stężeniu 100 μίν
- 50 μΙ biotynylowanego VEGF165, o końcowym stężeniu 1 nM (R&D Systems) rozpuszczonego w PBT zawierającym 2 μg/ml heparyny (Sigma).
Sumaryczna objętość dodawanych roztworów wynosi 150 μΙ.
Po całonocnej inkubacji w temp. 4°C, dołki przemywa się kilkakrotnie roztworem PBT, a następnie dodaje się polimer streptavidyna-HRP (horseradish peroxidase, Sigma), przemywa PBT i dodaje się substrat ABTS (2,2'-azinobis [3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid]diammonium salt) (Sigma).
Pomiary absorbancji wykonuje się przy długości fali 415 nM, w odniesieniu do 470 nm, po czasie od 15 minut do 2 h. W celu oznaczenia IC50 i Ki najlepszych związków pomiary wykonywano dla stężeń od 0,01 do 300 mM. W dołkach kontrolnych nie dodawano badanych związków, a jako pozytywną kontrolę na każdej płytce 96-dołkowej stosowano A7R (ATWLPPR), jako negatywną kontrolę używano PBT bez NRP-1.
Wyniki uzyskane dla przykładowych peptydomimetyków przedstawiono w tabeli 2.
T a b e l a 2.
Wyniki badań inhibicji uzyskane dla przykładowych peptydomimetyków
% inhibicji wiązania VEGF165 do NRP-1
Sekwencja Nazwa 30 μM 10 μM 3 μM 1 μM 0,3 μM 0,1 μM 0,03 μM
AlaThrTrpLeuProProArg A7R 85,5 76,9 61,2
Lys(hArg)-Pro-Dab-Arg Związek 2 100 98,3 93,6 82,6 62,2 35,4 13,7
Lys(hArg)-Dap-Pro-Arg Związek 3 99,7 96,8 93,4 82,0 59,4 33,0 11,6
Lys(hArg)-Dab-Pro-Arg Związek 4 100 98,5 91,4 82,4 47,8 21,6
Zastrzeżenia patentowe

Claims (8)

1. Związek o wzorze:
gdzie:
i jest liczbą całkowitą od 1 do 9 n jest liczbą całkowitą od 1 do 4 m jest liczbą całkowitą 3 lub 4
R1 oznacza : -H, -NH2, -NH-CO-CH3, -NH-Cbz, lub -NH-Fmoc,
PL 224 854 B1
R2 oznacza: -H, -CO-CH3, -Fmoc, lub -Cbz.
X oznacza jeden spośród następujących fragmentów cząsteczki od a) do e):
a) albo:
b) albo:
c) albo:
d) gdzie:
R3 i R4 oznaczają niezależnie grupę wybraną ze zbioru obejmującego łańcuchy boczne: glicyny, alaniny, kwasu 2,3-diaminopropanowego, kwasu 2,4-diaminobutanowego, ornityny, lizyny, proliny, przyłączone do atomu węgla o konfiguracji S lub R, albo:
e) -CO-NH-(CH2)k-CO-NH-, gdzie k stanowi liczbę całkowitą w przedziale 2-7, lub jego pochodna zawierająca zredukowane wiązanie peptydowe, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
PL 224 854 B1
2. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że jest związkiem o wzorze:
lub jego pochodną zawierającą zredukowane wiązanie peptydowe, przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone w zastrz. 1.
3. Związek według jednego z poprzednich zastrz., znamienny tym, że jest pochodną zawierającą zredukowane wiązanie peptydowe, przy czym zredukowane zostało co najmniej jedno z wiązań peptydowych oznaczonych jako A, B lub C na poniższym wzorze:
przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone w zastrz. 1.
4. Związek według jednego z poprzednich zastrz., znamienny tym, że jest związkiem o wzorze:
przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone w zastrz. 1.
PL 224 854 B1
5. Związek według jednego z zastrz. od 1 do 3, znamienny tym, że jest związkiem o wzorze:
przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone w zastrz. 1.
6. Związek według jednego z zastrz. od 1 do 3, znamienny tym, że jest związkiem o wzorze:
przy czym i, n, m, R1, R2, R3 i R4 posiadają znaczenie określone w zastrz. 1.
7. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że został wybrany z grupy obejmującej:
Lys(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Lys(hArg)-Dap-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Dab-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Ala-Ala-Arg,
Lys(hArg)-Ala-Pro-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Ala-Arg,
Lys(11-Aun(g))-Pro-Dab-Arg,
Lys(7-Ahp(g))-Pro-Dab-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Dap-Arg,
Lys(hArg)-Pro-Pro-Arg,
Lys(Dab(g))-Pro-Dab-Arg,
Dab(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Orn(Arg)-Pro-Dab-Arg,
Orn(hArg)-Pro-Dab-Arg,
Lys(Arg)-Pro-Dab-Arg lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli, przy czym (g) oznacza grupę guanidynową, 11-Aun oznacza resztę kwasu 11-aminoundekanowego, 7-Ahp oznacza resztę kwasu 7-aminoheptanowego.
8. Kompozycja farmaceutyczna, zwłaszcza do leczenia nowotworów i/lub chorób zapalnych, zawierająca substancję aktywną i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek określony w zastrz. 1 -7.
PL405129A 2013-08-23 2013-08-23 Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna PL224854B1 (pl)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL405129A PL224854B1 (pl) 2013-08-23 2013-08-23 Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna
US14/913,380 US10301352B2 (en) 2013-08-23 2014-08-23 Peptidomimetics with antiangiogenic activity
EP14780911.5A EP3036251B1 (en) 2013-08-23 2014-08-23 Novel peptidomimetics with antiangiogenic activity
PCT/PL2014/050051 WO2015026251A1 (en) 2013-08-23 2014-08-23 Novel peptidomimetics with antiangiogenic activity

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL405129A PL224854B1 (pl) 2013-08-23 2013-08-23 Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL405129A1 PL405129A1 (pl) 2015-03-02
PL224854B1 true PL224854B1 (pl) 2017-02-28

Family

ID=51660581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL405129A PL224854B1 (pl) 2013-08-23 2013-08-23 Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna

Country Status (4)

Country Link
US (1) US10301352B2 (pl)
EP (1) EP3036251B1 (pl)
PL (1) PL224854B1 (pl)
WO (1) WO2015026251A1 (pl)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL227443B1 (pl) * 2015-08-27 2017-12-29 Univ Warszawski Nowe cykliczne peptydomimetyki, kompozycje je zawierające oraz ich zastosowanie do leczenia chorób związanych z angiogenezą
PL231469B1 (pl) 2016-03-04 2019-02-28 Inst Biotechnologii I Medycyny Molekularnej Nowy związek, sposób jego otrzymywania, roztwór farmaceutyczny zawierający nowy związek, sposób określania obecności choroby nowotworowej, zestaw do wykrywania nowotworów oraz zastosowanie hydrolizy nowego związku do wykrywania nowotworów
US12590122B2 (en) 2019-06-13 2026-03-31 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) NRP-1 binding inhibitory peptides and uses thereof

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999047158A2 (en) 1998-03-13 1999-09-23 The University Of British Columbia Therapeutic chemokine receptor antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
US20160333047A1 (en) 2016-11-17
EP3036251A1 (en) 2016-06-29
US10301352B2 (en) 2019-05-28
EP3036251B1 (en) 2017-08-23
PL405129A1 (pl) 2015-03-02
WO2015026251A1 (en) 2015-02-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100225679B1 (ko) 노나펩티드 봄베신 길항제
CA2537158A1 (en) Cxcr4 antagonist and use thereof
JP3838656B2 (ja) ポリペプチドのボンベシン拮抗物質
PT2213680E (pt) Péptidos que possuem uma atividade farmacológica para o tratamento de distúrbios associados à migração de células alteradas, tais como o cancro
SK286581B6 (sk) Deriváty dolastatinu 15, farmaceutický prípravok s ich obsahom a ich použitie
CA2523197C (en) Peptide vectors
NO310465B1 (no) Peptider med anticancer aktivitet og farmasöytisk blanding derav
SK287880B6 (sk) Peptide LHRH-antagonists with improved solubility, pharmaceutical composition containing the peptides, method for the preparation of the peptides and their use and method for producing medicaments
US6479460B1 (en) Synthetic peptides and pseudopeptides having osteogenic activity and pharmaceutical compositions containing the same
KR101238133B1 (ko) 엡티피바타이드 및 관련 중간체 화합물의 제조 방법
PL224854B1 (pl) Nowy peptydomimetyk o aktywności antyangiogennej i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna
ES2305843T3 (es) Compuestos antitumorales basados en kahalalido f.
AU2002210713B2 (en) Vegf peptides and their use for inhibiting angiogenesis
KR100460165B1 (ko) 효과가향상된신규한lh-rh길항제
CN118541379A (zh) 五肽及其用途
JP2010150253A (ja) 肝癌を治療するための薬剤
EP1593686B1 (en) Antineoplastic peptides
CA2405724C (en) Substance p analogs for the treatment of cancer
PL227443B1 (pl) Nowe cykliczne peptydomimetyki, kompozycje je zawierające oraz ich zastosowanie do leczenia chorób związanych z angiogenezą
JP3040166B2 (ja) ノナペプチドのボンベシン拮抗薬
WO2008050161A2 (en) Peptides for activation of angiogenesis, pharmaceutical compounds containing same and use of these compounds
JPH0717999A (ja) ペプチド誘導体及びその用途