PL21577B1

PL21577B1 - Sposób oczyszczania i wzbogacania hormonu cialka zóltego.

Info

Publication number: PL21577B1
Application number: PL21577A
Authority: PL
Filing date: 1933-03-17
Publication date: 1935-06-28

Description

Jak wynika z prac nowszych cialko zól¬ te (corpus luteum) zawiera hormon plcio¬ wy, który miedzy innemi przeprowadza sluzówke macicy, pobudzona zapomoca hor¬ monu pecherzykowego (rujowego), w postac charakterystyczna dla macicy ciezarnej.Dotychczas znane sposoby otrzymywa¬ nia hormonu cialka zóltego polegaja na trak¬ towaniu wyciagów z cialka zóltego roz- maitemi rozpuszczalnikami organicznemi albo na zastosowaniu reakcyj stracania.Sposób oczyszczania i wzbogacania hor¬ monu cialka zóltego wedlug wynalazku niniejszego polega na tern, ze w dowolnej fazie procesu oczyszczania stosuje sie za¬ bieg adsorbeji. W tym celu roztwory hor¬ monu, zwlaszcza surowe lub oczyszczone wstepnie wyciagi z corpus luteum w nie- mieszajacych sie z woda rozpuszczalnikach lub mieszaninach rozpuszczalników traktu¬ je sie jednym lub kilkoma srodkami chlon- nemi (adsorbcyjnemi) i z adsorbentu wy¬ ciaga hormon rozpuszczalnikami organicz¬ nemi lub ich mieszaninami, po ewentualnem usunieciu innych zanieczyszczen.Nieoczekiwanie udalo sie z roztworuwyjsciowego ta droga wyciagnac hormon cialka zóltego w ilosci, odpowiadajacej ilosci teoretycznej, przy jednoczesnem od¬ dzieleniu wielu nieczynnych zanieczyszczen, a nastepnie z adsorbentu udalo sie hormon odzyskac ponownie.Jako rozpuszczalnik hormonu wzgled¬ nie wyciagów, zawierajacych hormon, sto¬ suje sie celowo np. benzen, toluen, eter naf¬ towy, dwusiarczek wegla albo ich miesza¬ niny. Odpowiedniemi srodkami adsorbcyj- nemi sa: zierriia folarska, glinka, glinka wlók¬ nista, ziemia okrzemkowa, zel krzemionko¬ wy, kaolin, weglan wapnia, wegiel i inne i ciala.Adsorbeje dobrze jest uskuteczniac bez dostepu wilgoci, stosujac zupelnie suche rozpuszczalniki oraz srodki adsorbcyjne.Do wyciagania hormonu ciala zóltego z adsorbentów nadaje sie, zaleznie od rodza¬ ju srodka adsorbcyjnego, np. eter, alkohol, aceton, chloroform albo tez mieszaniny roz¬ puszczalników, jak np. alkohol metylowy z eterem naftowym.Sposób wedlug wynalazku niniejszego mozna przeprowadzic w ten sposób, ze roz¬ twór, zawierajacy hormony, miesza sie z nadmiarem srodka chlonnego. Mozna jed¬ nak srodek chlonny dodawac porcjami i poszczególne adsorbenty przerabiac dalej osobno. W ten sposób mozna oddzielic za¬ nieczyszczenia, ulegajace wchlanianiu stop¬ niowo coraz trudniej. Ten sam cel osiaga sie równiez, prowadzac roztwór powolnym strumieniem, np. wedlug zasad analizy ad- sorbcyjnej Wislicenus'a albo metody chro¬ matograficznej Tswetfa przez kolumne srodka chlonnego i wyciagajac osobno po¬ szczególne warstwy adsorbentu.Z adsorbentów, zawierajacych hormony, dalsze zanieczyszczenia daja sie czesto usu¬ wac w ten sposób, ze na podstawie róznego stopnia rozpuszczalnosci zanieczyszczen i hormonów, zanieczyszczenia te wyciaga sie np. rozpuszczalnikami wzglednie mieszanina¬ mi rozpuszczalników, niemogacemi rozpuscic hormonu, a dopiero nastepnie uskutecznia sie wlasciwe wyciaganie hormonu.Obróbke frakcjonowana mozna równiez celowo powtórzyc natychmiast albo po dal¬ szych stopniach oczyszczania.Przyklad I. 15 g wyciagu z cialka zóltego (corpus luteum), otrzymanego przez G. W. Corner'a i W. M. Allen'a (American Journal of Physiology, tom 88, 1929, str. 326) wyciaga sie zapomoca 300 cm3 dwu¬ siarczku wegla. Powstaly roztwór zadaje sie 50 g ziemi folarskiej i dobrze wstrzasa.Po odsaczeniu osadu zapomoca pompy ssa- i cej przemywa sie go stopniowo 150 cm3 dwusiarczku wegla i polaczone przesacze traktuje w taki sam sposób ponownie ziemia folarska. Przesacz, otrzymany po odparo¬ waniu, jest to olej, stanowiacy glówna czesc pierwotnego wyciagu, lecz zupelnie nieczyn¬ ny. Polaczone adsorbenty wyciaga sie dwu- lub trzykrotnie porcjami po 300 cm3 mie¬ szaniny alkoholu metylowego z eterem naf¬ towym (9:1), stosujac krótkotrwale goto¬ wanie i wstrzasanie. Pozostalosci kazdora¬ zowo odsacza sie i przemywa rozpuszczal¬ nikiem. Po odparowaniu otrzymanego wycia¬ gu pozostaje niewielka ilosc substancji, po¬ dobnej do stearyny i zawierajacej caly hor¬ mon cialka zóltego, znajdujacy sie w mate- rjale wyjsciowym.Przyklad II. 15 g wyciagu z cialka zóltego (corpus luteum), otrzymanego przez G. W. Corner'a i W. M. Allen'a (American Journal of Physiology tom 88, 1929, str. 326) oraz przez W. M. Allen'a (American Jour¬ nal of Physiology tom 92, 1930 str. 174), albo tez otrzymanego przez wymrozenie zanieczy¬ szczen z wodnego roztworu alkoholu metylo¬ wego i nastepnie oczyszczonego, rozpuszcza sie w 450 cm3 wysuszonego eteru naftowe¬ go. Powstaly roztwór przesacza sie zapo¬ moca pompy ssacej powoli przez kolumne z ziemia folarska, zwilzona wysuszonym eterem naftowym, nastepnie przemywa sie ja taka sama iloscia rozpuszczalnika. Otrzy¬ many przesacz, po odparowaniu tworzy du- - 2 —za ilosc jasm^ jfcdtffckfe mecaymiegor ol«i- ju. NttStepato^pora^ bfetihi wyciaga dickoUftu^ przez krcrtki czas cieplym alkoholem etylowym, za kazdym razem odsacza, przemywa, poszczególne po¬ zostalosci wyciaga jeszcze raz w taki sam sposób i z otrzymanych przesaczów odpedza sie rozpuszczalnik. Ptóp&ifct, otrzymany z górnych warstw, zawiera calkowita ilosc hormonu cialka zóltego (corpus luteum) uzytego wyciagu w postaci substancji, podob¬ nej do stearyny.Przyklad III. 10 g wyciagu z cialka zóltego, otrzymanego wedlug G. W. Cor- ner'a i W. M. Allen'a (tamze), rozpuszcza sie w 150 cm3 dwusiarczku wegla i dobrze wstrzasa z 10 g wysuszonego wegla aktyw¬ nego. Nastepnie odsacza sie, przemywa ad¬ sorbent 75 cm3 dwusiarczku wegla i zebra¬ ne przesacze w taki sam sposób traktuje 10 g, a wreszcie 3 g wegla. Tak otrzymany, slabo zólto zabarwiony roztwór tworzy po odparowaniu zupelnie nieczynny olej, sta¬ nowiacy glówna czesc materjalu wyjsciowe¬ go. Polaczone adsorbenty weglowe wyciaga sie dwukrotnie, kazdorazowo 150 cm3 mie¬ szaniny alkoholu etylowego z eterem nafto¬ wym (9 : 1), stosujac w tym celu krótkie gotowanie i mocne wstrzasanie. Kazdorazo¬ wo odsacza sie pozostalosc i przemywa ja zapomoca 75 cm3 cieplej mieszaniny rozpu¬ szczalników. Podczas odparowywania po¬ laczonych wyciagów pozostaje niewielka ilosc substancji, podobnej do stearyny. Za¬ wiera ona cala ilosc hormonu cialka zólte¬ go, zawarta w wyciagu produktu wyjscio¬ wego.Przyklad IV. 1 kg cialka zóltego (cor¬ pus luteum) wyciaga sie eterem naftowym.Otrzymany suchy roztwór wstrzasa sie mocno ze 100 g ziemi folarskiej, odsacza zapomoca pompy ssacej, przemywa adsor¬ bent eterem naftowym i zebrane przesacze traktuje sie jeszcze raz ziemia folarska w taki sam sposób. Otrzymany przytem rozt¬ wór po odparowaniu tworzy duza ilosc zu- pdbie^lriecryftnego oleju. Polaczone adsor¬ benty lraktiife si^Hdwukrotnie alkoholem nietykwyTitw aparadiff Sf^cfeth^airPb odpa¬ rowaniu tych wyciagów: otrzymujes*le' mala ilosc substancji w rodzaju' stóaoyhy. Zawieh ra ona calkowita ilosc hormonu cialka zól¬ tego (corpus luteum), zawarta w pierwot- nym wyciagu eteru naftowego, v Przyklad Vir? n5 g preparatu % cialka zól¬ tego, oczyszczonego wstepnie wedlug przy¬ kladu I, II lub IV, rozpuszcza sie w 75 cm3 octanu etylowego i mocno wstrzasa z 5 g wegla aktywnego. Po odsaczeniu na pompie ssacej przemywa sie adsorbent rozpuszczal¬ nikiem i traktuje przesacz jeszcze raz w ta¬ ki sam sposób, a nastepnie po raz trzeci, lecz juz tylko 2 g wegla. Przesadz zawiera tylko nieczynne skladniki materjalu wyj¬ sciowego.Wyciagajac polaczone adsorbenty weglo¬ we w ciagu 3 godzin w aparacie Soxleth'a alkoholem absolutnym, otrzymuje sie rozt¬ wór, który po odparowaniu tworzy ciemna mase, podobna do stearyny i równiez nie¬ czynna. Przy ponownem 3 godzinnem trak¬ towaniu adsorbentu weglowego w aparacie Soxleth'a mieszanina, skladajaca sie z 3 cze¬ sci objetosciowych chloroformu, 4 czesci objetosciowych metanolu i 1 czesci objeto¬ sciowej eteru naftowego, otrzymuje sie po odparowaniu wyciagu mala ilosc slabo za¬ barwionego oleju, krzepnacego podczas sta¬ nia w zimnie i bardzo czynnego. PL

Claims

Zastrzezenia patentowe. 1. Sposób oczyszczania i wzbogacania hormonu cialka zóltego, znamienny tern, ze roztwory tego hormonu, a zwlaszcza suro¬ we lub oczyszczone wyciagi cialka zóltego (corpus luteum) traktuje sie w rozpuszczal¬ nikach, mieszajacych sie z woda, lub-mie¬ szaninach takich rozpuszczalników jednym albo kilkoma srodkami adsorbcyjnemi, po- czem hormon wyciaga z adsorbentu, ewentu¬ alnie po ponownem usunieciu zanieczy- — 3 —szczen, rozpuszczalnikami organicznemi lub mieszaninami takich rozpuszczalników.
2. Odmiana sposobu wedlug zastrz. 1, znamienna tern, ze roztwory hormonu pod¬ daje sie adsorbeji czastkowej.
3. Sposób wedlug zastrz. 1 i 2, zna¬ mienny tern, ze z adsorbentu hormonowe¬ go usuwa sie zanieczyszczenia zapomoca obróbki wstepnej rozpuszczalnikami wzgled¬ nie mieszaninami rozpuszczalników, w któ¬ rych hormon pozostaje nierozpuszczony.
4. Sposób wedlug zastrz. 1, 2 i 3, zna¬ mienny tern, ze adsorbeje powtarza sie. Gesellschaft f ii r Chemische Industrie in Basel. Zastepca; M. Skrzypkowski, rzecznik patentowy. Druk L. Boguslawskiego i Ski, Warszawa. PL