PL198623B1 - Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów - Google Patents

Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów

Info

Publication number
PL198623B1
PL198623B1 PL345407A PL34540799A PL198623B1 PL 198623 B1 PL198623 B1 PL 198623B1 PL 345407 A PL345407 A PL 345407A PL 34540799 A PL34540799 A PL 34540799A PL 198623 B1 PL198623 B1 PL 198623B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
cell cycle
cycle regulatory
protein
regulatory protein
neoplasms
Prior art date
Application number
PL345407A
Other languages
English (en)
Other versions
PL345407A1 (en
Inventor
Knebel Doeberitz Magnus Von
Dimitry Spitkovsky
Original Assignee
Deutsches Krebsforsch
Knebel Doeberitz Magnus Von
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Deutsches Krebsforsch, Knebel Doeberitz Magnus Von filed Critical Deutsches Krebsforsch
Publication of PL345407A1 publication Critical patent/PL345407A1/xx
Publication of PL198623B1 publication Critical patent/PL198623B1/pl

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5758—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites
    • G01N33/57585—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites involving compounds identifiable in body fluids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5752—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer of the lungs
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5755—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer of the uterine cervix, uterine corpus or endometrium
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57557—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer of other specific parts of the body, e.g. brain

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

1. Sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów, znamienny tym, ze obej- muje ustalenie nadekspresji bia lka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce cia la, a bia lko regula- cyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zale znej od cykliny. 2. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze nowotwory s a nowotworami górnych dróg odde- chowych. 3. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze nowotwory s a nowotworami dróg odbytowo - p lciowych. 4. Sposób wed lug zastrz. 3, znamienny tym, ze nowotwór dróg odbytowo - p lciowych jest rakiem szyjki macicy. 5. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze inhibitorem kinazy zale znej od cykliny jest bia lko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27. 6. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze próbk a cia la jest krew, wymazy, plwocina, mocz, ka l, p lyn, zó lc, szpik kostny, wydzielina zoladkowo-jelitowa, punktaty lub aspiraty z narz adów i biopsje, odpowiednio, i/albo limfa. PL PL PL PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wczesnego diagnozowania nowotworów, jak również ich stadiów wstępnych, a w szczególności nowotworów górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo płciowych.
Programy zapobiegawcze są oferowane dla większości różnorodnych nowotworów od połowy lat 50-tych. Jeśli chodzi o raka szyjki macicy, opierają się one głównie o badania morfologiczne i cytologiczne wymazów cytologicznych z szyjki macicy, co jest nazywane testem Pap, który wykonuje się na podstawie rutynowych badań ginekologicznych w regularnych odstępach czasu u kobiet powyżej dwudziestego roku życia. Na podstawie morfologii komórek wymazy dzieli się na różne stopnie nasilenia dysplastycznych zmian komórkowych. Zgodnie z Pap I - V, te stopnie nasilenia określa się jako stan normalny, łagodną dysplazję, dość poważną dysplazję, poważną dysplazję i nowotwór inwazyjny, odpowiednio. Jeżeli testy Pap prowadzą do widocznego wyniku, wykonuje się niewielką biopsję i poddaje się ją badaniu histopatologicznemu, na podstawie którego określa się rodzaj i intensywność dysplazji i klasyfikuje się jako powstawanie nowotworu śródbłonka szyjki macicy (CINI - III).
Pomimo wszystkich programów zapobiegawczych rak szyjki macicy, który prowadzi do 400000 nowych zachorowań na rok jest najczęściej występującym nowotworem u kobiet. Dzieje się tak między innymi dlatego, że co najmniej 30% wyników jest fałszywie ujemnych.
A zatem celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie sposobu, dzięki któremu nowotwory szyjki macicy mogą być diagnozowane wcześnie i wiarygodnie. Ponadto, możliwe powinno być rozróżnienie przy zastosowaniu tej metody łagodnych zmian zapalnych i zmian metaplastycznych przy dysplastycznych stanach przednowotworowych.
Istota wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów charakteryzujący się tym, że obejmuje ustalenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce ciała, a białko regulacyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zależnej od cykliny.
Korzystnie diagnozowane nowotwory są nowotworami górnych dróg oddechowych albo nowotworami dróg odbytowo - płciowych, w szczególności nowotwór dróg odbytowo - płciowych jest rakiem szyjki macicy. Korzystnie inhibitorem kinazy zależnej od cykliny jest białko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27. Korzystnie próbką ciała jest krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, szpik kostny, wydzielina żołądkowo - jelitowa, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje, odpowiednio i/albo limfa. Korzystnie nadekspresję ustala się na poziomie kwasu nukleinowego albo na poziomie białka, przy czym korzystnie do ustalania stosuje się przeciwciało skierowane przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zestaw do zastosowania sposobu według wynalazku charakteryzujący się tym, że zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, (b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufory, nośniki, markery, i ewentualnie (c) środki do kontrolowania reakcji.
Korzystnie odczynnik jest przeciwciałem skierowanym przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym białko regulacyjne cyklu komórkowego lub jego części. Równie korzystnie środek jest białkiem regulacyjnym cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym to białko lub jego części, albo środkiem jest preparat komórkowy albo komórki utrwalone na szkiełku.
Szczegółowe omówienie wynalazku
Niniejszy wynalazek jest oparty o odkrycie zgłaszającego, że w wielu nowotworach ma miejsce nadekspresja białek regulacyjnych cyklu komórkowego, na przykład w nowotworach górnych dróg oddechowych lub nowotworach dróg odbytowo - płciowych, a w szczególności nowotworach szyjki macicy i wczesnych stadiach tych nowotworów, odpowiednio. Przykładami białek regulacyjnych cyklu komórkowego są cykliny. W szczególności należy wspomnieć kinazy zależne od cyklin, które regulują cykliny. Jeszcze bardziej godne uwagi są inhibitory kinaz zależnych od cyklin, które z kolei regulują kinazy zależne od cyklin. Przykładami inhibitorów kinaz zależnych od cyklin są białka p14, p15, p16, p19, p21 i p27. Zgłaszający stwierdzili, że intensywność nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego koreluje ze stopniem dysplazji komórkowej.
PL 198 623 B1
Według wynalazku odkrycie zgłaszającego ma zastosowanie w metodzie wczesnego diagnozowania nowotworów i ich stadiów wstępnych, która obejmuje określenie nadekspresji białek cyklu komórkowego w próbce ciała.
Wyrażenie „nowotwory i ich stadia wstępne” obejmuje nowotwory dowolnego rodzaju i pochodzenia oraz ich stadia wstępne, odpowiednio. Przykładowo, mogą to być nowotwory górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo - płciowych.
Wyrażenie „nowotwory i ich stadia wstępne” obejmuje nowotwory dowolnego rodzaju i pochodzenia oraz ich stadia wstępne, odpowiednio. Przykładowo, mogą to być nowotwory górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo - płciowych, a w szczególności raka szyjki macicy. W przypadku tego ostatniego należy wspomnieć w szczególności jego stadia wstępne, tj. powstawanie nowotworu śródbłonka szyjki macicy (CINI - III), nowotwór in situ (CIS), itd.
Wyrażenie „białka regulacyjne cyklu komórkowego” obejmują białka regulacyjne cyklu komórkowego dowolnego rodzaju i pochodzenia. Przykładowo, białkami mogą być cykliny. W szczególności mogą to być kinazy zależne od cyklin, które regulują cykliny. Przykładami kinaz zależnych od cyklin są białka cdk4 i cdk6. Bardziej konkretnie, mogą być nimi inhibitory kinaz zależnych od cyklin, które z kolei regulują kinazy zależne od cyklin. Przykładami inhibitorów kinaz zależnych od cyklin są białka p14, p15, p16, p19, p21 i p27, przy czym najbardziej korzystne jest p16.
Wyrażenie „próbka ciała” obejmuje dowolne próbki ciała, w których można wykryć białka regulacyjne cyklu komórkowego. Przykładami takich próbek ciała są krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, wydzielina żołądkowo - jelitowa, limfa, szpik kostny, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje. W szczególności wskazane są wymazy i biopsje kiedy bierze się pod uwagę wykrywanie nowotworów odbytowo - płciowych, np. nowotworów szyjki macicy.
Wyrażenie „określenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego” obejmuje dowolny sposób, który jest odpowiedni do wykrywania ekspresji białek regulacyjnych cyklu komórkowego i kodujących je mRNA oraz amplifikacji odpowiadających im genów, odpowiednio. W celu określenia nadekspresji jest rzeczą oczywistą porównanie próbki ciała, która ma być badana z odpowiednią próbką ciała, która pochodzi od osoby zdrowej. Taka próbka może być obecna w postaci wystandaryzowanej. (Nad)ekspresję białek regulacyjnych cyklu komórkowego można wykryć na poziomie kwasu nukleinowego i na poziomie białka, odpowiednio. Jeśli chodzi o wykrywanie na poziomie białka, możliwe jest zastosowanie np. przeciwciał, które są skierowane przeciw 10 białkom cyklu komórkowego. Te przeciwciała można zastosować w najrozmaitszych metodach, takich jak analiza Western, ELISA lub immunoprecypitacja. Może być korzystne dla przeciwciał związanie z nośnikami stałymi, takimi jak paski testowe lub cząstki lateksu.
Dzięki niniejszemu wynalazkowi możliwe jest wczesne diagnozowanie nowotworów tj. w ich stadiach wstępnych.
Dalszy przedmiot niniejszego wynalazku dotyczy zestawu do zastosowania sposobu według wynalazku. Taki zestaw zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, np. przeciwciało skierowane przeciw takiemu białku lub kwas nukleinowy kodujący takie białko lub jego część, odpowiednio.
(b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufor, nośniki, markery itd., i ewentualnie (c) czynnik do kontrolowanie reakcji np. białko regulacyjne cyklu komórkowego, kwas nukleinowy kodujący takie białko lub jego część, odpowiednio, lub preparaty komórek np. skrawek tkanki lub komórki utrwalone na szkiełku.
Powyższe stwierdzenia znajdują zastosowanie odpowiednio do poszczególnych składników zestawu. Ponadto, może być obecny jeden lub kilka przedstawicieli poszczególnych składników.
Dzięki zastosowaniu niniejszego wynalazku możliwe jest wczesne diagnozowanie nowotworów. W szczególności można wcześnie wykrywać wstępne stadia nowotworów. Należy również podkreślić, że możliwe jest rozróżnienie łagodnych zmian zapalnych i zmian metaplastycznych przy dysplastycznych stanach przednowotworowych. Inną cechą jest to, że wyniki otrzymane metodą według wynalazku nie są przedmiotem subiektywnej oceny, a zatem można na przykład uniknąć fałszywie ujemnych i fałszywie dodatnich wyników uzyskiwanych odpowiednio, dla testów Pap lub preparatów histologicznych. Ponadto, niniejszy wynalazek wyróżnia się szybkością i łatwością przeprowadzania, tak, że może być zastosowany do szeroko zakrojonych badań przesiewowych, w szczególności również w krajach trzeciego świata. A zatem niniejszy wynalazek reprezentuje ważny wkład do dzisiejszej diagnostyki chorób nowotworowych.
PL 198 623 B1
Krótki opis rysunków
Figura 1 pokazuje wykrywanie nadekspresji cdk4 w komórkach raka szyjki macicy CaSki transformowanych HPV16. Oznaczenia 4 godz., 8 godz., 12 godz., 24 godz. dotyczą czasów pobrania ekstraktu komórkowego. Skrót co oznacza kontrolę, podczas gdy arr oznacza dodanie surowicy.
Figura 2 pokazuje wykrywanie nadekspresji cdk6 i p19 w komórkach NIH3T3 transformowanych HPV16. Skrót co oznacza kontrolę.
Wynalazek jest wyjaśniony przez następujące przykłady.
P r z y k ł a d 1:
Wykrywanie nadekspresji p16 w biopsjach szyjki macicy.
(A) Skrawki parafinowe o grubości od 3 do 5 pm otrzymano z 20 biopsji szyjki macicy, które obejmują wszystkie stopnie rozwoju dysplazji od tkanki normalnej (n=2) poprzez zmiany CIN I (n=4), II (n=4), III (n=5) do nowotworu inwazyjnego (n=5). Parafinę usuwa się ksylenem przez 2 x 10 min. i ponownie uwodorowuje przy zastosowaniu etanolu. Antygeny odsłania się w 10 mM buforze cytrynianiowym (pH 6,0) w autoklawie w 110°C przez 10 min. Następnie endogenne peroksydazy inaktywuje się przy zastosowaniu 0,25% H202 w PBS. Po zablokowaniu niespecyficznych miejsc wiązania surowicą końską (zestaw do wykrywania Vectastain ABC, Vector Laboratories, Burlingame, California, USA) w temperaturze pokojowej przez 20 minut, skrawki inkubuje się z przeciwciałem monoklonalnym specyficznym wobec p16 (Neomarkers, Fremont, California, USA) w obecności 3% płodowej surowicy cielęcej w temperaturze pokojowej przez 20 minut. Do wykrywania wiązania przeciwciało - p16 dodaje się następnie biotynylowane przeciwciało drugorzędowe (końskie anty-mysie IgG, zastaw Vectastain) na 30 minut. Następnie związane drugorzędowe przeciwciało wykrywa przy zastosowaniu odczynników według instrukcji zestawu Vectastain i dokonuje się barwienia kontrastowego przy zastosowaniu roztworu hemalum Mayera.
Pokazuje to, że w komórkach dysplastycznych istnieje nadekspresja p16. Pokazuje to również, że intensywność nadekspresji p16 koreluje ze stopniem dysplazji komórkowej.
(B) Ponadto, skrawki parafinowe przygotowano z 78 biopsji raka szyjki macicy. Biopsje odpowiadają od tkance normalnej (n=12), zmianom dysplastycznym w stadium CIN I (n=15), II (n=14), III (n=18), jak również nowotworom inwazyjnym (n=19). Skrawki parafinowe traktowano tak, jak opisano w (A). Otrzymano dane wskazane w Tabeli 1.
T a b e l a 1
Intensywność ekspresji p16
histologia n= - + ++ +++
prawidłowa 12 9 3
CIN I 15 10 3 2
CIN II 14 1 4 9
CIN III 18 9 9
CxCa 19 1 18
razem 78 20 10 21 27
Z danych w Tabeli 1 widać, że nadekspresja p16 ma miejsce w komórkach z dysplazjami i nowotworami inwazyjnymi, przy czym nadekspresja wzrasta wraz ze stopniem dysplazji w kierunku nowotworu inwazyjnego.
(C) Ponadto, skrawki parafinowe z 180 biopsji raka szyjki macicy traktowano tak, jak opisano w (A). Dodatkowo określono udział procentowy komórek, które reagują ze wspomnianym powyżej przeciwciałem specyficznym wobec p16. Dokonano również rozróżnienia pomiędzy dysplazjami HPV dodatnimi i HPV - ujemnymi oraz nowotworami inwazyjnymi, odpowiednio. Uzyskane dane pokazano w Tabeli 2.
PL 198 623 B1
T a b e l a 2
Procent komórek z nadekspresją p16
n Średni procent ± odchylenie standardowe
CIN I 32 54,9 ± 24,0
HPV - ujemny 17 54,0 ± 27,2
HPV - dodatni 15 55,9 ± 21,0
CIN II 32 70,8 ± 18,9
HPV - ujemny 14 76,0 ± 15,8
HPV - dodatni 18 66,8 ± 20,5
CIN III 60 92,4 ± 10,2
HPV - ujemny 9 94,4 ± 7,5
HPV - dodatni 51 92,1 ± 10,7
Nowotwór inwazyjny 58 97,8 ± 5,2
HPV - ujemny 5 96,4 ± 8,1
HPV - dodatni 53 97,9 ± 4,9
Dane z Tabeli 2 pokazują, że nadekspresją p16 ma miejsce zarówno w HPV - dodatnich i HPV ujemnych komórkach dysplastycznych, jak i nowotworach inwazyjnych. Wynik ten jest potwierdzony przez kontrolę normalnych tkanek. Dane te pokazują również, że udział procentowy komórek reagujących z p16 wzrasta wraz ze stopniem dysplazji w kierunku nowotworu inwazyjnego.
P r z y k ł a d 2:
Wykrywanie nadekspresji białek regulacyjnych cyklu komórkowego w komórkach transformowanych HPV.
(A) Komórki raka szyjki macicy CaSki, które były transformowane HPV16 hodowano w nieobecności surowicy przez 72 godz. Po dodaniu surowicy, ekstrakty komórkowe zbierano w różnym czasie, poddawano SDS-PAGE i przenoszono na filtry PVDF (Du Pont). Ekspresję cdk4 określano przy zastosowaniu poliklonalnej antysurowicy (1:1000) z Santa Cruz. Ponadto, ekspresję białka HPV16-E7 oceniano przy zastosowaniu przeciwciał monoklonalnych przeciw HPV16-E7 (1:50) z Triton. Poszczególne odpowiedzi immunologiczne określano przy zastosowaniu drugorzędowych przeciwciał połączonych z peroksydazą i chemiluminescencyjnego systemu wykrywania (NEN, Du Pont).
Okazuje się, że nadekspresja csdk4 ma miejsce (patrz Fig. 1).
(B) Komórki NIH3T3 transformuje się HPV16 tak, aby otrzymać ekspresję białka HPV16-E7. Otrzymuje się ekstrakty komórkowe z transformowanych komórek i traktuje tak, jak opisano w (A). Do wykrawania ekspresji cdk6 i p19, odpowiednio, stosuje się poliklonalne antysurowice (1:1000) z Santa Cruz. Jeżeli chodzi o wykrywanie ekspresji białka HPV16-E7 i wykrywanie poszczególnych odpowiedzi immunologicznych, odniesieniem są dane zawarte w punkcie (A).
Okazuje się, że ma miejsce nadekspresja cdk6 i p19 (patrz Fig. 2).

Claims (14)

1. Sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów, znamienny tym, że obejmuje ustalenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce ciała, a białko regulacyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zależnej od cykliny.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nowotwory są nowotworami górnych dróg oddechowych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nowotwory są nowotworami dróg odbytowo płciowych.
4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że nowotwór dróg odbytowo - płciowych jest rakiem szyjki macicy.
5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że inhibitorem kinazy zależnej od cykliny jest białko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27.
6. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że próbką ciała jest krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, szpik kostny, wydzielina żołądkowo - jelitowa, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje, odpowiednio, i/albo limfa.
7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nadekspresję ustala się na poziomie kwasu nukleinowego.
8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nadekspresję ustala się na poziomie białka.
9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że do ustalania stosuje się przeciwciało skierowane przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
10. Zestaw do zastosowania sposobu według zastrz. od 1 do 9, znamienny tym, że zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, (b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufory, nośniki, markery, i ewentualnie (c) środki do kontrolowania reakcji.
11. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że odczynnik jest przeciwciałem skierowanym przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
12. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że odczynnik jest kwasem nukleinowym kodującym białko regulacyjne cyklu komórkowego lub jego części.
13. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że środek jest białkiem regulacyjnym cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym to białko lub jego części.
14. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że środkiem jest preparat komórkowy albo komórki utrwalone na szkiełku.
PL345407A 1998-07-01 1999-07-01 Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów PL198623B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19829473A DE19829473C2 (de) 1998-07-01 1998-07-01 Verfahren zur frühen Diagnose von Carcinomen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL345407A1 PL345407A1 (en) 2001-12-17
PL198623B1 true PL198623B1 (pl) 2008-07-31

Family

ID=7872684

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL345407A PL198623B1 (pl) 1998-07-01 1999-07-01 Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów

Country Status (22)

Country Link
US (2) US6709832B1 (pl)
EP (1) EP1092155B1 (pl)
JP (1) JP3404020B2 (pl)
KR (1) KR100646193B1 (pl)
CN (1) CN1209627C (pl)
AT (1) ATE230487T1 (pl)
AU (1) AU749769B2 (pl)
BR (1) BRPI9912227B8 (pl)
CA (1) CA2336153C (pl)
CZ (1) CZ292076B6 (pl)
DE (2) DE19829473C2 (pl)
DK (1) DK1092155T3 (pl)
ES (1) ES2190820T3 (pl)
HU (1) HUP0102744A2 (pl)
IL (1) IL140550A (pl)
MX (1) MXPA00012852A (pl)
NO (1) NO328685B1 (pl)
PL (1) PL198623B1 (pl)
RU (1) RU2217761C2 (pl)
SK (1) SK284056B6 (pl)
TR (1) TR200003903T2 (pl)
WO (1) WO2000001845A2 (pl)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7306926B2 (en) * 1998-07-01 2007-12-11 Mtm Laboratories Ag Method for detecting carcinomas in a solubilized cervical body sample
AUPP991199A0 (en) * 1999-04-21 1999-05-13 University Of Sydney, The Methods for diagnosing pre-cancerous and cancerous conditions
DE10006033B4 (de) 2000-02-10 2005-11-10 Professor Dr. Magnus von Knebel Doeberitz Chirurgische Universitätsklinik Sektion für Molekulare Diagnostik und Therapie Immunisierung eines Individuums gegen Carcinome und ihre Vorstufen
US9249229B2 (en) 2000-12-08 2016-02-02 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
US7408041B2 (en) 2000-12-08 2008-08-05 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
US20060057651A1 (en) * 2000-12-08 2006-03-16 Bowdish Katherine S Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
AUPR201500A0 (en) * 2000-12-11 2001-01-11 Biosceptre Pty Ltd Methods for identifying pre-neoplastic and neoplastic states in mammals
DE10063179A1 (de) * 2000-12-18 2002-06-20 Bayer Ag Verfahren zur spezifischen Detektion von Tumorzellen und ihren Vorstufen in Gebärmutterhalsabstrichen durch simultane Messung von mindestens zwei verschiedenen molekularen Markern
EP1360203B1 (en) * 2001-01-17 2008-12-24 Intreat Pty Limited Antibodies to non-functional p 2 x 7 receptor diagnosis and treatment of cancers and other conditions
EP1369694A1 (en) 2002-04-09 2003-12-10 MTM Laboratories AG Method for discrimination of metaplasias from neoplastic or preneoplastic lesions
DE60200248T2 (de) * 2002-08-01 2005-01-27 Mtm Laboratories Ag Verfahren für Lösung-basierte Diagnose
EP1422526A1 (en) * 2002-10-28 2004-05-26 MTM Laboratories AG Method for improved diagnosis of dysplasias
WO2004070062A2 (en) * 2003-02-04 2004-08-19 Wyeth Compositions and methods for diagnosing and treating cancers
US7501257B2 (en) * 2003-02-26 2009-03-10 Sysmex Corporation Molecular diagnostic method of a cancer tissue or a cancer cell
DE60300339T2 (de) * 2003-08-25 2006-04-13 Mtm Laboratories Ag Verfahren zum Nachweis von Karzinomen in solubilisierten zervikalen Körperproben
ATE549625T1 (de) * 2004-03-24 2012-03-15 Tripath Imaging Inc Verfahren und zusammensetzungen zum nachweis einer zervixerkrankung
US8921057B2 (en) 2004-05-31 2014-12-30 Sysmex Corporation Method of assessing properties of mammalian cells, and method of diagnosing cancer using the same
EP1628135A1 (en) * 2004-08-20 2006-02-22 MTM Laboratories AG Method for detecting medically relevant conditions in a solubilized LBC sample
US7892750B1 (en) * 2004-12-23 2011-02-22 University Of Notre Dame Du Lac Cathepsin E as a marker of colon cancer
JP4766969B2 (ja) 2005-09-14 2011-09-07 シスメックス株式会社 組織性質判定装置
US7972776B2 (en) * 2005-11-15 2011-07-05 Oncohealth Corporation Protein chips for HPV detection
HUE028179T2 (en) 2006-01-12 2016-12-28 Alexion Pharma Inc Antibodies to OX-2 / CD200 and their use
JP2010505426A (ja) * 2006-10-10 2010-02-25 バイオスセプター インターナショナル リミテッド 非機能性ｐ２ｘ７受容体に対する抗体を産生するハイブリドーマ
US20100003704A1 (en) * 2008-06-13 2010-01-07 Shuling Cheng IN SITU detection of early stages and late stages HPV infection
US8968995B2 (en) * 2008-11-12 2015-03-03 Oncohealth Corp. Detection, screening, and diagnosis of HPV-associated cancers
JP5111902B2 (ja) * 2007-03-14 2013-01-09 シスメックス株式会社 癌の診断支援装置
EP2028600B1 (en) 2007-08-24 2016-10-26 Sysmex Corporation Diagnosis support system for cancer, diagnosis support for information providing method for cancer, and computer program product
AU2008299594B2 (en) 2007-09-14 2013-10-03 Biosceptre International Limited Purinergic (P2X) receptors in extra-cellular body fluid
AU2008299593B2 (en) 2007-09-14 2013-04-18 Biosceptre International Limited Novel P2X7 epitopes
BRPI0915367B8 (pt) 2008-07-04 2021-05-25 Biosceptre International Ltd peptídeo anti-p2x7
EP2427763A4 (en) 2009-05-07 2013-08-21 Oncohealth Corp IDENTIFICATION OF A HIGH CIN2 DEGREE FOR THE DETECTION OF EARLY AND LATE TADIES AND FOR THE SCREENING AND DIAGNOSIS OF HUMAN PAPILLOMA (HPV) AND ASSOCIATED CANCER DISORDERS
ES2904911T3 (es) 2009-08-20 2022-04-06 Biosceptre Aust Pty Ltd Anticuerpos anti-receptor P2X7 y fragmentos de los mismos
JP5992831B2 (ja) 2009-12-24 2016-09-14 バイオセプター・（オーストラリア）・ピーティーワイ・リミテッド 非機能性オリゴマーｐ２ｘ７受容体に対する抗体
WO2011084598A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Oncohealth Corporation High throughput cell-based hpv immunoassays for diagnosis and screening of hpv-associated cancers
US8900813B2 (en) 2010-08-17 2014-12-02 Medical Diagnostic Laboratories, Llc CIP2A as a biomarker in detection of cervical cancer
CN106310245A (zh) 2010-09-10 2017-01-11 生物权威(澳大利亚)有限责任公司 陪伴动物治疗
US9551700B2 (en) 2010-12-20 2017-01-24 Milagen, Inc. Device and methods for the detection of cervical disease
US9566318B2 (en) 2011-07-01 2017-02-14 Biosceptre (Aust) Pty Ltd Combination therapy
WO2013067268A1 (en) 2011-11-03 2013-05-10 Tripath Imaging, Inc. Methods and compositions for preparing samples for immunostaining
WO2013074793A1 (en) * 2011-11-15 2013-05-23 University Of Miami Methods for detecting human papillomavirus and providing prognosis for head and neck squamous cell carcinoma
US11761963B2 (en) 2017-09-27 2023-09-19 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Biomarker signature for predicting tumor response to anti-CD200 therapy
WO2019234176A1 (en) 2018-06-07 2019-12-12 Universitaet Des Saarlandes Novel biomarkers for carcinoma diagnosis
CN108893534A (zh) * 2018-06-26 2018-11-27 华中科技大学鄂州工业技术研究院 泛癌症诊断标记物
RU2707884C1 (ru) * 2018-10-03 2019-12-02 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) (ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Се Способ ранней диагностики почечно-клеточной карциномы по наличию антител к зрительному аррестину
FR3088640A1 (fr) 2018-10-14 2020-05-22 Smart Diagnostix Pharma Nouveau polypeptide se liant specifiquement a la proteine p16
CN111257565A (zh) * 2018-12-03 2020-06-09 上海细胞治疗集团有限公司 一种衰老细胞的检测试剂盒及其检测方法
CN113295683A (zh) * 2021-05-24 2021-08-24 烟台海关技术中心 过氧化苯甲酰检测方法

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4281061A (en) * 1979-07-27 1981-07-28 Syva Company Double antibody for enhanced sensitivity in immunoassay
US5268463A (en) * 1986-11-11 1993-12-07 Jefferson Richard A Plant promoter α-glucuronidase gene construct
EP0665886B1 (en) 1992-10-16 2003-06-11 Cold Spring Harbor Laboratory Cyclin complex rearrangement and uses related thereto
AU5694694A (en) * 1992-12-02 1994-06-22 Denis F. Hochstrasser A method for detecting growing cells using translationally controlled tumor protein p21
US5543291A (en) * 1993-01-29 1996-08-06 Dana Farber Cancer Institute Method of detecting carcinoma
US6316208B1 (en) * 1994-01-07 2001-11-13 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods for determining isolated p27 protein levels and uses thereof
RU2164419C2 (ru) * 1994-03-18 2001-03-27 Мириад Дженетикс, Инк. Ген mts, мутации данного гена и способы диагностики злокачественных опухолей с использованием последовательности гена mts
CN1128049A (zh) * 1994-03-18 1996-07-31 犹他大学研究基金会 多肿瘤抑制因子基因种系突变及检测该基因癌肿倾向性的方法
US5763190A (en) * 1994-09-21 1998-06-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for the identification of compounds capable of inducing the nuclear translocation of a receptor complex comprising the glucocoticoid receptor type II and viral protein R interacting protein
US6033847A (en) * 1995-02-06 2000-03-07 St. Jude Children's Research Hospital InK4c-p18 and InK4d-p19, inhibitors of cyclin-dependent kinases CDK4 and CDK6, and uses thereof
US5976799A (en) 1996-03-21 1999-11-02 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Early detection of ovarian carcinoma using P16 gene products
US5851797A (en) * 1996-06-19 1998-12-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Tie ligand-3, methods of making and uses thereof
US5858683A (en) * 1996-08-30 1999-01-12 Matritech, Inc. Methods and compositions for the detection of cervical cancer
AU1230600A (en) * 1998-10-28 2000-05-15 President And Fellows Of Harvard College Regulation of th2 cell activity by modulation of nfatp and nfat4 activity

Also Published As

Publication number Publication date
ATE230487T1 (de) 2003-01-15
CA2336153C (en) 2005-12-20
WO2000001845B1 (de) 2000-04-20
CZ292076B6 (cs) 2003-07-16
CN1209627C (zh) 2005-07-06
NO328685B1 (no) 2010-04-26
EP1092155B1 (de) 2003-01-02
DE19829473A1 (de) 2000-01-13
MXPA00012852A (es) 2003-09-11
CN1307681A (zh) 2001-08-08
DE59903915D1 (de) 2003-02-06
RU2217761C2 (ru) 2003-11-27
JP2002519681A (ja) 2002-07-02
PL345407A1 (en) 2001-12-17
NO20006681D0 (no) 2000-12-28
SK20312000A3 (sk) 2001-10-08
DK1092155T3 (da) 2003-03-24
KR20010074632A (ko) 2001-08-04
US6709832B1 (en) 2004-03-23
DE19829473C2 (de) 2000-08-10
AU5848799A (en) 2000-01-24
TR200003903T2 (tr) 2001-06-21
EP1092155A2 (de) 2001-04-18
IL140550A (en) 2005-08-31
ES2190820T3 (es) 2003-08-16
WO2000001845A3 (de) 2000-02-17
CA2336153A1 (en) 2000-01-13
BRPI9912227A (pt) 2001-04-24
SK284056B6 (sk) 2004-08-03
CZ20004922A3 (cs) 2001-07-11
KR100646193B1 (ko) 2006-11-17
HUP0102744A2 (hu) 2001-11-28
BRPI9912227B8 (pt) 2021-07-06
WO2000001845A2 (de) 2000-01-13
JP3404020B2 (ja) 2003-05-06
US20030152993A1 (en) 2003-08-14
BRPI9912227B1 (pt) 2013-08-20
AU749769B2 (en) 2002-07-04
NO20006681L (no) 2001-02-26
HK1038609A1 (zh) 2002-03-22
IL140550A0 (en) 2002-02-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL198623B1 (pl) Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów
US20230133528A1 (en) Method for prediction of the progression risk of tumors
US20210047697A1 (en) Method for improved diagnosis of dysplasias
JP5619336B2 (ja) 可溶化身体サンプルにおける新形成疾患を検出するための方法
KR101976219B1 (ko) 유방암의 바이오마커
Lomnytska et al. Diagnostic protein marker patterns in squamous cervical cancer
EP1416278B1 (en) Method for improved diagnosis of dysplasias
Ussakli et al. Serous versus high-grade endometrioid endometrial carcinoma: immunohistochemistry of RFP is not useful for differentiation
EP3124974A1 (en) Method for the normalization of immunological tests and kits for performing such tests
HK1038609B (en) Method for early diagnosis of carcinomas