PL198623B1 - Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów - Google Patents
Metoda wczesnego diagnozowania nowotworówInfo
- Publication number
- PL198623B1 PL198623B1 PL345407A PL34540799A PL198623B1 PL 198623 B1 PL198623 B1 PL 198623B1 PL 345407 A PL345407 A PL 345407A PL 34540799 A PL34540799 A PL 34540799A PL 198623 B1 PL198623 B1 PL 198623B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cell cycle
- cycle regulatory
- protein
- regulatory protein
- neoplasms
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 title 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 46
- 102100024458 Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 101710150974 Regulator of chromosome condensation Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 102100039977 Regulator of chromosome condensation Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 claims abstract description 18
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims abstract description 11
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 102100036464 Activated RNA polymerase II transcriptional coactivator p15 Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 229940126074 CDK kinase inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 102100034770 Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 101000945639 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 24
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 claims description 9
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 9
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 7
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000008385 Urogenital Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 claims 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 3
- 206010029107 Respiratory Tract Neoplasms Diseases 0.000 abstract 1
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 11
- 102000005483 Cell Cycle Proteins Human genes 0.000 description 9
- 108010031896 Cell Cycle Proteins Proteins 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 7
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 5
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 4
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 4
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 238000009595 pap smear Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 101100005789 Caenorhabditis elegans cdk-4 gene Proteins 0.000 description 3
- 101000767631 Human papillomavirus type 16 Protein E7 Proteins 0.000 description 3
- 102100040250 Transcription elongation factor A protein-like 1 Human genes 0.000 description 3
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 3
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400001093 PAK-2p27 Human genes 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 2
- 201000003565 cervix uteri carcinoma in situ Diseases 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 208000022159 squamous carcinoma in situ Diseases 0.000 description 2
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 2
- 208000022625 uterine cervix carcinoma in situ Diseases 0.000 description 2
- 208000024719 uterine cervix neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57488—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds identifable in body fluids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57411—Specifically defined cancers of cervix
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57423—Specifically defined cancers of lung
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
1. Sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów, znamienny tym, ze obej- muje ustalenie nadekspresji bia lka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce cia la, a bia lko regula- cyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zale znej od cykliny. 2. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze nowotwory s a nowotworami górnych dróg odde- chowych. 3. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze nowotwory s a nowotworami dróg odbytowo - p lciowych. 4. Sposób wed lug zastrz. 3, znamienny tym, ze nowotwór dróg odbytowo - p lciowych jest rakiem szyjki macicy. 5. Sposób wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze inhibitorem kinazy zale znej od cykliny jest bia lko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27. 6. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze próbk a cia la jest krew, wymazy, plwocina, mocz, ka l, p lyn, zó lc, szpik kostny, wydzielina zoladkowo-jelitowa, punktaty lub aspiraty z narz adów i biopsje, odpowiednio, i/albo limfa. PL PL PL PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wczesnego diagnozowania nowotworów, jak również ich stadiów wstępnych, a w szczególności nowotworów górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo płciowych.
Programy zapobiegawcze są oferowane dla większości różnorodnych nowotworów od połowy lat 50-tych. Jeśli chodzi o raka szyjki macicy, opierają się one głównie o badania morfologiczne i cytologiczne wymazów cytologicznych z szyjki macicy, co jest nazywane testem Pap, który wykonuje się na podstawie rutynowych badań ginekologicznych w regularnych odstępach czasu u kobiet powyżej dwudziestego roku życia. Na podstawie morfologii komórek wymazy dzieli się na różne stopnie nasilenia dysplastycznych zmian komórkowych. Zgodnie z Pap I - V, te stopnie nasilenia określa się jako stan normalny, łagodną dysplazję, dość poważną dysplazję, poważną dysplazję i nowotwór inwazyjny, odpowiednio. Jeżeli testy Pap prowadzą do widocznego wyniku, wykonuje się niewielką biopsję i poddaje się ją badaniu histopatologicznemu, na podstawie którego określa się rodzaj i intensywność dysplazji i klasyfikuje się jako powstawanie nowotworu śródbłonka szyjki macicy (CINI - III).
Pomimo wszystkich programów zapobiegawczych rak szyjki macicy, który prowadzi do 400000 nowych zachorowań na rok jest najczęściej występującym nowotworem u kobiet. Dzieje się tak między innymi dlatego, że co najmniej 30% wyników jest fałszywie ujemnych.
A zatem celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie sposobu, dzięki któremu nowotwory szyjki macicy mogą być diagnozowane wcześnie i wiarygodnie. Ponadto, możliwe powinno być rozróżnienie przy zastosowaniu tej metody łagodnych zmian zapalnych i zmian metaplastycznych przy dysplastycznych stanach przednowotworowych.
Istota wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów charakteryzujący się tym, że obejmuje ustalenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce ciała, a białko regulacyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zależnej od cykliny.
Korzystnie diagnozowane nowotwory są nowotworami górnych dróg oddechowych albo nowotworami dróg odbytowo - płciowych, w szczególności nowotwór dróg odbytowo - płciowych jest rakiem szyjki macicy. Korzystnie inhibitorem kinazy zależnej od cykliny jest białko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27. Korzystnie próbką ciała jest krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, szpik kostny, wydzielina żołądkowo - jelitowa, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje, odpowiednio i/albo limfa. Korzystnie nadekspresję ustala się na poziomie kwasu nukleinowego albo na poziomie białka, przy czym korzystnie do ustalania stosuje się przeciwciało skierowane przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zestaw do zastosowania sposobu według wynalazku charakteryzujący się tym, że zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, (b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufory, nośniki, markery, i ewentualnie (c) środki do kontrolowania reakcji.
Korzystnie odczynnik jest przeciwciałem skierowanym przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym białko regulacyjne cyklu komórkowego lub jego części. Równie korzystnie środek jest białkiem regulacyjnym cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym to białko lub jego części, albo środkiem jest preparat komórkowy albo komórki utrwalone na szkiełku.
Szczegółowe omówienie wynalazku
Niniejszy wynalazek jest oparty o odkrycie zgłaszającego, że w wielu nowotworach ma miejsce nadekspresja białek regulacyjnych cyklu komórkowego, na przykład w nowotworach górnych dróg oddechowych lub nowotworach dróg odbytowo - płciowych, a w szczególności nowotworach szyjki macicy i wczesnych stadiach tych nowotworów, odpowiednio. Przykładami białek regulacyjnych cyklu komórkowego są cykliny. W szczególności należy wspomnieć kinazy zależne od cyklin, które regulują cykliny. Jeszcze bardziej godne uwagi są inhibitory kinaz zależnych od cyklin, które z kolei regulują kinazy zależne od cyklin. Przykładami inhibitorów kinaz zależnych od cyklin są białka p14, p15, p16, p19, p21 i p27. Zgłaszający stwierdzili, że intensywność nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego koreluje ze stopniem dysplazji komórkowej.
PL 198 623 B1
Według wynalazku odkrycie zgłaszającego ma zastosowanie w metodzie wczesnego diagnozowania nowotworów i ich stadiów wstępnych, która obejmuje określenie nadekspresji białek cyklu komórkowego w próbce ciała.
Wyrażenie „nowotwory i ich stadia wstępne” obejmuje nowotwory dowolnego rodzaju i pochodzenia oraz ich stadia wstępne, odpowiednio. Przykładowo, mogą to być nowotwory górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo - płciowych.
Wyrażenie „nowotwory i ich stadia wstępne” obejmuje nowotwory dowolnego rodzaju i pochodzenia oraz ich stadia wstępne, odpowiednio. Przykładowo, mogą to być nowotwory górnych dróg oddechowych lub dróg odbytowo - płciowych, a w szczególności raka szyjki macicy. W przypadku tego ostatniego należy wspomnieć w szczególności jego stadia wstępne, tj. powstawanie nowotworu śródbłonka szyjki macicy (CINI - III), nowotwór in situ (CIS), itd.
Wyrażenie „białka regulacyjne cyklu komórkowego” obejmują białka regulacyjne cyklu komórkowego dowolnego rodzaju i pochodzenia. Przykładowo, białkami mogą być cykliny. W szczególności mogą to być kinazy zależne od cyklin, które regulują cykliny. Przykładami kinaz zależnych od cyklin są białka cdk4 i cdk6. Bardziej konkretnie, mogą być nimi inhibitory kinaz zależnych od cyklin, które z kolei regulują kinazy zależne od cyklin. Przykładami inhibitorów kinaz zależnych od cyklin są białka p14, p15, p16, p19, p21 i p27, przy czym najbardziej korzystne jest p16.
Wyrażenie „próbka ciała” obejmuje dowolne próbki ciała, w których można wykryć białka regulacyjne cyklu komórkowego. Przykładami takich próbek ciała są krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, wydzielina żołądkowo - jelitowa, limfa, szpik kostny, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje. W szczególności wskazane są wymazy i biopsje kiedy bierze się pod uwagę wykrywanie nowotworów odbytowo - płciowych, np. nowotworów szyjki macicy.
Wyrażenie „określenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego” obejmuje dowolny sposób, który jest odpowiedni do wykrywania ekspresji białek regulacyjnych cyklu komórkowego i kodujących je mRNA oraz amplifikacji odpowiadających im genów, odpowiednio. W celu określenia nadekspresji jest rzeczą oczywistą porównanie próbki ciała, która ma być badana z odpowiednią próbką ciała, która pochodzi od osoby zdrowej. Taka próbka może być obecna w postaci wystandaryzowanej. (Nad)ekspresję białek regulacyjnych cyklu komórkowego można wykryć na poziomie kwasu nukleinowego i na poziomie białka, odpowiednio. Jeśli chodzi o wykrywanie na poziomie białka, możliwe jest zastosowanie np. przeciwciał, które są skierowane przeciw 10 białkom cyklu komórkowego. Te przeciwciała można zastosować w najrozmaitszych metodach, takich jak analiza Western, ELISA lub immunoprecypitacja. Może być korzystne dla przeciwciał związanie z nośnikami stałymi, takimi jak paski testowe lub cząstki lateksu.
Dzięki niniejszemu wynalazkowi możliwe jest wczesne diagnozowanie nowotworów tj. w ich stadiach wstępnych.
Dalszy przedmiot niniejszego wynalazku dotyczy zestawu do zastosowania sposobu według wynalazku. Taki zestaw zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, np. przeciwciało skierowane przeciw takiemu białku lub kwas nukleinowy kodujący takie białko lub jego część, odpowiednio.
(b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufor, nośniki, markery itd., i ewentualnie (c) czynnik do kontrolowanie reakcji np. białko regulacyjne cyklu komórkowego, kwas nukleinowy kodujący takie białko lub jego część, odpowiednio, lub preparaty komórek np. skrawek tkanki lub komórki utrwalone na szkiełku.
Powyższe stwierdzenia znajdują zastosowanie odpowiednio do poszczególnych składników zestawu. Ponadto, może być obecny jeden lub kilka przedstawicieli poszczególnych składników.
Dzięki zastosowaniu niniejszego wynalazku możliwe jest wczesne diagnozowanie nowotworów. W szczególności można wcześnie wykrywać wstępne stadia nowotworów. Należy również podkreślić, że możliwe jest rozróżnienie łagodnych zmian zapalnych i zmian metaplastycznych przy dysplastycznych stanach przednowotworowych. Inną cechą jest to, że wyniki otrzymane metodą według wynalazku nie są przedmiotem subiektywnej oceny, a zatem można na przykład uniknąć fałszywie ujemnych i fałszywie dodatnich wyników uzyskiwanych odpowiednio, dla testów Pap lub preparatów histologicznych. Ponadto, niniejszy wynalazek wyróżnia się szybkością i łatwością przeprowadzania, tak, że może być zastosowany do szeroko zakrojonych badań przesiewowych, w szczególności również w krajach trzeciego świata. A zatem niniejszy wynalazek reprezentuje ważny wkład do dzisiejszej diagnostyki chorób nowotworowych.
PL 198 623 B1
Krótki opis rysunków
Figura 1 pokazuje wykrywanie nadekspresji cdk4 w komórkach raka szyjki macicy CaSki transformowanych HPV16. Oznaczenia 4 godz., 8 godz., 12 godz., 24 godz. dotyczą czasów pobrania ekstraktu komórkowego. Skrót co oznacza kontrolę, podczas gdy arr oznacza dodanie surowicy.
Figura 2 pokazuje wykrywanie nadekspresji cdk6 i p19 w komórkach NIH3T3 transformowanych HPV16. Skrót co oznacza kontrolę.
Wynalazek jest wyjaśniony przez następujące przykłady.
P r z y k ł a d 1:
Wykrywanie nadekspresji p16 w biopsjach szyjki macicy.
(A) Skrawki parafinowe o grubości od 3 do 5 pm otrzymano z 20 biopsji szyjki macicy, które obejmują wszystkie stopnie rozwoju dysplazji od tkanki normalnej (n=2) poprzez zmiany CIN I (n=4), II (n=4), III (n=5) do nowotworu inwazyjnego (n=5). Parafinę usuwa się ksylenem przez 2 x 10 min. i ponownie uwodorowuje przy zastosowaniu etanolu. Antygeny odsłania się w 10 mM buforze cytrynianiowym (pH 6,0) w autoklawie w 110°C przez 10 min. Następnie endogenne peroksydazy inaktywuje się przy zastosowaniu 0,25% H202 w PBS. Po zablokowaniu niespecyficznych miejsc wiązania surowicą końską (zestaw do wykrywania Vectastain ABC, Vector Laboratories, Burlingame, California, USA) w temperaturze pokojowej przez 20 minut, skrawki inkubuje się z przeciwciałem monoklonalnym specyficznym wobec p16 (Neomarkers, Fremont, California, USA) w obecności 3% płodowej surowicy cielęcej w temperaturze pokojowej przez 20 minut. Do wykrywania wiązania przeciwciało - p16 dodaje się następnie biotynylowane przeciwciało drugorzędowe (końskie anty-mysie IgG, zastaw Vectastain) na 30 minut. Następnie związane drugorzędowe przeciwciało wykrywa przy zastosowaniu odczynników według instrukcji zestawu Vectastain i dokonuje się barwienia kontrastowego przy zastosowaniu roztworu hemalum Mayera.
Pokazuje to, że w komórkach dysplastycznych istnieje nadekspresja p16. Pokazuje to również, że intensywność nadekspresji p16 koreluje ze stopniem dysplazji komórkowej.
(B) Ponadto, skrawki parafinowe przygotowano z 78 biopsji raka szyjki macicy. Biopsje odpowiadają od tkance normalnej (n=12), zmianom dysplastycznym w stadium CIN I (n=15), II (n=14), III (n=18), jak również nowotworom inwazyjnym (n=19). Skrawki parafinowe traktowano tak, jak opisano w (A). Otrzymano dane wskazane w Tabeli 1.
T a b e l a 1
Intensywność ekspresji p16
| histologia | n= | - | + | ++ | +++ |
| prawidłowa | 12 | 9 | 3 | ||
| CIN I | 15 | 10 | 3 | 2 | |
| CIN II | 14 | 1 | 4 | 9 | |
| CIN III | 18 | 9 | 9 | ||
| CxCa | 19 | 1 | 18 | ||
| razem | 78 | 20 | 10 | 21 | 27 |
Z danych w Tabeli 1 widać, że nadekspresja p16 ma miejsce w komórkach z dysplazjami i nowotworami inwazyjnymi, przy czym nadekspresja wzrasta wraz ze stopniem dysplazji w kierunku nowotworu inwazyjnego.
(C) Ponadto, skrawki parafinowe z 180 biopsji raka szyjki macicy traktowano tak, jak opisano w (A). Dodatkowo określono udział procentowy komórek, które reagują ze wspomnianym powyżej przeciwciałem specyficznym wobec p16. Dokonano również rozróżnienia pomiędzy dysplazjami HPV dodatnimi i HPV - ujemnymi oraz nowotworami inwazyjnymi, odpowiednio. Uzyskane dane pokazano w Tabeli 2.
PL 198 623 B1
T a b e l a 2
Procent komórek z nadekspresją p16
| n | Średni procent ± odchylenie standardowe | |
| CIN I | 32 | 54,9 ± 24,0 |
| HPV - ujemny | 17 | 54,0 ± 27,2 |
| HPV - dodatni | 15 | 55,9 ± 21,0 |
| CIN II | 32 | 70,8 ± 18,9 |
| HPV - ujemny | 14 | 76,0 ± 15,8 |
| HPV - dodatni | 18 | 66,8 ± 20,5 |
| CIN III | 60 | 92,4 ± 10,2 |
| HPV - ujemny | 9 | 94,4 ± 7,5 |
| HPV - dodatni | 51 | 92,1 ± 10,7 |
| Nowotwór inwazyjny | 58 | 97,8 ± 5,2 |
| HPV - ujemny | 5 | 96,4 ± 8,1 |
| HPV - dodatni | 53 | 97,9 ± 4,9 |
Dane z Tabeli 2 pokazują, że nadekspresją p16 ma miejsce zarówno w HPV - dodatnich i HPV ujemnych komórkach dysplastycznych, jak i nowotworach inwazyjnych. Wynik ten jest potwierdzony przez kontrolę normalnych tkanek. Dane te pokazują również, że udział procentowy komórek reagujących z p16 wzrasta wraz ze stopniem dysplazji w kierunku nowotworu inwazyjnego.
P r z y k ł a d 2:
Wykrywanie nadekspresji białek regulacyjnych cyklu komórkowego w komórkach transformowanych HPV.
(A) Komórki raka szyjki macicy CaSki, które były transformowane HPV16 hodowano w nieobecności surowicy przez 72 godz. Po dodaniu surowicy, ekstrakty komórkowe zbierano w różnym czasie, poddawano SDS-PAGE i przenoszono na filtry PVDF (Du Pont). Ekspresję cdk4 określano przy zastosowaniu poliklonalnej antysurowicy (1:1000) z Santa Cruz. Ponadto, ekspresję białka HPV16-E7 oceniano przy zastosowaniu przeciwciał monoklonalnych przeciw HPV16-E7 (1:50) z Triton. Poszczególne odpowiedzi immunologiczne określano przy zastosowaniu drugorzędowych przeciwciał połączonych z peroksydazą i chemiluminescencyjnego systemu wykrywania (NEN, Du Pont).
Okazuje się, że nadekspresja csdk4 ma miejsce (patrz Fig. 1).
(B) Komórki NIH3T3 transformuje się HPV16 tak, aby otrzymać ekspresję białka HPV16-E7. Otrzymuje się ekstrakty komórkowe z transformowanych komórek i traktuje tak, jak opisano w (A). Do wykrawania ekspresji cdk6 i p19, odpowiednio, stosuje się poliklonalne antysurowice (1:1000) z Santa Cruz. Jeżeli chodzi o wykrywanie ekspresji białka HPV16-E7 i wykrywanie poszczególnych odpowiedzi immunologicznych, odniesieniem są dane zawarte w punkcie (A).
Okazuje się, że ma miejsce nadekspresja cdk6 i p19 (patrz Fig. 2).
Claims (14)
1. Sposób wczesnego diagnozowania nowotworów i ich prekursorów, znamienny tym, że obejmuje ustalenie nadekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego w próbce ciała, a białko regulacyjne cyklu komórkowego jest inhibitorem kinazy zależnej od cykliny.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nowotwory są nowotworami górnych dróg oddechowych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nowotwory są nowotworami dróg odbytowo płciowych.
4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że nowotwór dróg odbytowo - płciowych jest rakiem szyjki macicy.
5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że inhibitorem kinazy zależnej od cykliny jest białko p14, p15, p16, p19, p21 albo p27.
6. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że próbką ciała jest krew, wymazy, plwocina, mocz, kał, płyn, żółć, szpik kostny, wydzielina żołądkowo - jelitowa, punktaty lub aspiraty z narządów i biopsje, odpowiednio, i/albo limfa.
7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nadekspresję ustala się na poziomie kwasu nukleinowego.
8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że nadekspresję ustala się na poziomie białka.
9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że do ustalania stosuje się przeciwciało skierowane przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
10. Zestaw do zastosowania sposobu według zastrz. od 1 do 9, znamienny tym, że zawiera:
(a) odczynnik do wykrywania ekspresji białka regulacyjnego cyklu komórkowego, (b) konwencjonalne czynniki wspomagające, takie jak bufory, nośniki, markery, i ewentualnie (c) środki do kontrolowania reakcji.
11. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że odczynnik jest przeciwciałem skierowanym przeciw białku regulacyjnemu cyklu komórkowego.
12. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że odczynnik jest kwasem nukleinowym kodującym białko regulacyjne cyklu komórkowego lub jego części.
13. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że środek jest białkiem regulacyjnym cyklu komórkowego albo kwasem nukleinowym kodującym to białko lub jego części.
14. Zestaw według zastrz. 10, znamienny tym, że środkiem jest preparat komórkowy albo komórki utrwalone na szkiełku.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19829473A DE19829473C2 (de) | 1998-07-01 | 1998-07-01 | Verfahren zur frühen Diagnose von Carcinomen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL345407A1 PL345407A1 (en) | 2001-12-17 |
| PL198623B1 true PL198623B1 (pl) | 2008-07-31 |
Family
ID=7872684
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL345407A PL198623B1 (pl) | 1998-07-01 | 1999-07-01 | Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6709832B1 (pl) |
| EP (1) | EP1092155B1 (pl) |
| JP (1) | JP3404020B2 (pl) |
| KR (1) | KR100646193B1 (pl) |
| CN (1) | CN1209627C (pl) |
| AT (1) | ATE230487T1 (pl) |
| AU (1) | AU749769B2 (pl) |
| BR (1) | BRPI9912227B8 (pl) |
| CA (1) | CA2336153C (pl) |
| CZ (1) | CZ292076B6 (pl) |
| DE (2) | DE19829473C2 (pl) |
| DK (1) | DK1092155T3 (pl) |
| ES (1) | ES2190820T3 (pl) |
| HU (1) | HUP0102744A2 (pl) |
| IL (1) | IL140550A (pl) |
| MX (1) | MXPA00012852A (pl) |
| NO (1) | NO328685B1 (pl) |
| PL (1) | PL198623B1 (pl) |
| RU (1) | RU2217761C2 (pl) |
| SK (1) | SK284056B6 (pl) |
| TR (1) | TR200003903T2 (pl) |
| WO (1) | WO2000001845A2 (pl) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7306926B2 (en) * | 1998-07-01 | 2007-12-11 | Mtm Laboratories Ag | Method for detecting carcinomas in a solubilized cervical body sample |
| AUPP991199A0 (en) * | 1999-04-21 | 1999-05-13 | University Of Sydney, The | Methods for diagnosing pre-cancerous and cancerous conditions |
| DE10006033B4 (de) * | 2000-02-10 | 2005-11-10 | Professor Dr. Magnus von Knebel Doeberitz Chirurgische Universitätsklinik Sektion für Molekulare Diagnostik und Therapie | Immunisierung eines Individuums gegen Carcinome und ihre Vorstufen |
| US20060057651A1 (en) * | 2000-12-08 | 2006-03-16 | Bowdish Katherine S | Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof |
| US7408041B2 (en) | 2000-12-08 | 2008-08-05 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof |
| US9249229B2 (en) | 2000-12-08 | 2016-02-02 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof |
| AUPR201500A0 (en) * | 2000-12-11 | 2001-01-11 | Biosceptre Pty Ltd | Methods for identifying pre-neoplastic and neoplastic states in mammals |
| DE10063179A1 (de) * | 2000-12-18 | 2002-06-20 | Bayer Ag | Verfahren zur spezifischen Detektion von Tumorzellen und ihren Vorstufen in Gebärmutterhalsabstrichen durch simultane Messung von mindestens zwei verschiedenen molekularen Markern |
| EP1961767B1 (en) * | 2001-01-17 | 2012-03-07 | Biosceptre International Limited | Diagnosis and treatment of cancers and other conditions |
| EP1369694A1 (en) * | 2002-04-09 | 2003-12-10 | MTM Laboratories AG | Method for discrimination of metaplasias from neoplastic or preneoplastic lesions |
| ES2215957T3 (es) * | 2002-08-01 | 2004-10-16 | Mtm Laboratories Ag | Metodo para diagnostico basado en una solucion. |
| EP1422526A1 (en) * | 2002-10-28 | 2004-05-26 | MTM Laboratories AG | Method for improved diagnosis of dysplasias |
| WO2004070062A2 (en) * | 2003-02-04 | 2004-08-19 | Wyeth | Compositions and methods for diagnosing and treating cancers |
| ATE458830T1 (de) * | 2003-02-26 | 2010-03-15 | Sysmex Corp | Verfahren zur untersuchung einer zelle |
| DE60300339T2 (de) * | 2003-08-25 | 2006-04-13 | Mtm Laboratories Ag | Verfahren zum Nachweis von Karzinomen in solubilisierten zervikalen Körperproben |
| AU2005228026B2 (en) * | 2004-03-24 | 2011-03-24 | Tripath Imaging, Inc. | Methods and compositions for the detection of cervical disease |
| JP4787153B2 (ja) * | 2004-05-31 | 2011-10-05 | シスメックス株式会社 | 癌の再発のしやすさの試験方法及び抗癌剤に対する感受性の試験方法 |
| EP1628135A1 (en) * | 2004-08-20 | 2006-02-22 | MTM Laboratories AG | Method for detecting medically relevant conditions in a solubilized LBC sample |
| US7892750B1 (en) * | 2004-12-23 | 2011-02-22 | University Of Notre Dame Du Lac | Cathepsin E as a marker of colon cancer |
| JP4766969B2 (ja) | 2005-09-14 | 2011-09-07 | シスメックス株式会社 | 組織性質判定装置 |
| US7972776B2 (en) * | 2005-11-15 | 2011-07-05 | Oncohealth Corporation | Protein chips for HPV detection |
| AU2007207764B2 (en) | 2006-01-12 | 2012-06-07 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies to OX-2/CD200 and uses thereof |
| US8067550B2 (en) * | 2006-10-10 | 2011-11-29 | Biosceptre International Limited | Hybridomas producing antibodies against non functional P2X7 receptor |
| US8968995B2 (en) * | 2008-11-12 | 2015-03-03 | Oncohealth Corp. | Detection, screening, and diagnosis of HPV-associated cancers |
| US8859218B2 (en) * | 2008-06-13 | 2014-10-14 | Oncohealth Corp. | In situ detection of early stages and late stages HPV infection |
| JP5111902B2 (ja) * | 2007-03-14 | 2013-01-09 | シスメックス株式会社 | 癌の診断支援装置 |
| EP2028600B1 (en) | 2007-08-24 | 2016-10-26 | Sysmex Corporation | Diagnosis support system for cancer, diagnosis support for information providing method for cancer, and computer program product |
| EP2201377B1 (en) | 2007-09-14 | 2012-01-18 | Biosceptre International Limited | Purinergic (p2x) receptors in extra-cellular body fluid |
| ES2619681T3 (es) | 2007-09-14 | 2017-06-26 | Biosceptre (Aust) Pty Ltd | Novedosos epítopos P2X7 |
| BRPI0915367B8 (pt) | 2008-07-04 | 2021-05-25 | Biosceptre International Ltd | peptídeo anti-p2x7 |
| CN102449479B (zh) * | 2009-05-07 | 2015-11-25 | 安科健康公司 | 鉴别高度或≥cin2用于人乳头瘤病毒(hpv)与hpv相关癌症的早期及晚期检测、筛检和诊断 |
| ES2557456T3 (es) | 2009-08-20 | 2016-01-26 | Biosceptre (Aust) Pty Ltd | Anticuerpos anti-receptor P2X7 y fragmentos de los mismos |
| JP5992831B2 (ja) | 2009-12-24 | 2016-09-14 | バイオセプター・（オーストラリア）・ピーティーワイ・リミテッド | 非機能性オリゴマーｐ２ｘ７受容体に対する抗体 |
| WO2011084598A1 (en) | 2010-01-08 | 2011-07-14 | Oncohealth Corporation | High throughput cell-based hpv immunoassays for diagnosis and screening of hpv-associated cancers |
| US8900813B2 (en) | 2010-08-17 | 2014-12-02 | Medical Diagnostic Laboratories, Llc | CIP2A as a biomarker in detection of cervical cancer |
| US9562094B2 (en) | 2010-09-10 | 2017-02-07 | Biosceptre (Aust) Pty Ltd | Companion animal treatments |
| US9551700B2 (en) | 2010-12-20 | 2017-01-24 | Milagen, Inc. | Device and methods for the detection of cervical disease |
| CA2840251C (en) | 2011-07-01 | 2023-09-12 | Biosceptre International Limited | Combination therapy of diseases that are associated with non-functional p2x7 receptor expression |
| US10527526B2 (en) | 2011-11-03 | 2020-01-07 | Tripath Imaging, Inc. | Methods and compositions for preparing samples for immunostaining |
| EP2780714B1 (en) | 2011-11-15 | 2017-08-16 | University Of Miami | Methods for detecting human papillomavirus and providing prognosis for head and neck squamous cell carcinoma |
| WO2019067499A1 (en) | 2017-09-27 | 2019-04-04 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | BIOMARKER SIGNATURE FOR PREDICTING A TUMOR RESPONSE TO ANTI-CD200 THERAPY |
| WO2019234176A1 (en) | 2018-06-07 | 2019-12-12 | Universitaet Des Saarlandes | Novel biomarkers for carcinoma diagnosis |
| CN108893534A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-11-27 | 华中科技大学鄂州工业技术研究院 | 泛癌症诊断标记物 |
| RU2707884C1 (ru) * | 2018-10-03 | 2019-12-02 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) (ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Се | Способ ранней диагностики почечно-клеточной карциномы по наличию антител к зрительному аррестину |
| FR3088640A1 (fr) | 2018-10-14 | 2020-05-22 | Smart Diagnostix Pharma | Nouveau polypeptide se liant specifiquement a la proteine p16 |
| CN111257565A (zh) * | 2018-12-03 | 2020-06-09 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种衰老细胞的检测试剂盒及其检测方法 |
| CN113295683A (zh) * | 2021-05-24 | 2021-08-24 | 烟台海关技术中心 | 过氧化苯甲酰检测方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4281061A (en) * | 1979-07-27 | 1981-07-28 | Syva Company | Double antibody for enhanced sensitivity in immunoassay |
| US5268463A (en) * | 1986-11-11 | 1993-12-07 | Jefferson Richard A | Plant promoter α-glucuronidase gene construct |
| DK0665886T3 (da) | 1992-10-16 | 2003-10-06 | Cold Spring Harbor Lab | Omlejring af cyklinkomplekser og anvendelser, der er relateret dertil |
| WO1994012881A2 (en) * | 1992-12-02 | 1994-06-09 | Hochstrasser Denis F | A METHOD FOR DETECTING GROWING CELLS USING TRANSLATIONALLY CONTROLLED TUMOR PROTEIN p21 |
| US5543291A (en) * | 1993-01-29 | 1996-08-06 | Dana Farber Cancer Institute | Method of detecting carcinoma |
| US6316208B1 (en) * | 1994-01-07 | 2001-11-13 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Methods for determining isolated p27 protein levels and uses thereof |
| CN1128049A (zh) * | 1994-03-18 | 1996-07-31 | 犹他大学研究基金会 | 多肿瘤抑制因子基因种系突变及检测该基因癌肿倾向性的方法 |
| RU2164419C2 (ru) * | 1994-03-18 | 2001-03-27 | Мириад Дженетикс, Инк. | Ген mts, мутации данного гена и способы диагностики злокачественных опухолей с использованием последовательности гена mts |
| US5763190A (en) * | 1994-09-21 | 1998-06-09 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods for the identification of compounds capable of inducing the nuclear translocation of a receptor complex comprising the glucocoticoid receptor type II and viral protein R interacting protein |
| US6033847A (en) * | 1995-02-06 | 2000-03-07 | St. Jude Children's Research Hospital | InK4c-p18 and InK4d-p19, inhibitors of cyclin-dependent kinases CDK4 and CDK6, and uses thereof |
| US5976799A (en) | 1996-03-21 | 1999-11-02 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Early detection of ovarian carcinoma using P16 gene products |
| US5851797A (en) * | 1996-06-19 | 1998-12-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Tie ligand-3, methods of making and uses thereof |
| US5858683A (en) * | 1996-08-30 | 1999-01-12 | Matritech, Inc. | Methods and compositions for the detection of cervical cancer |
| AU1230600A (en) * | 1998-10-28 | 2000-05-15 | President And Fellows Of Harvard College | Regulation of th2 cell activity by modulation of nfatp and nfat4 activity |
-
1998
- 1998-07-01 DE DE19829473A patent/DE19829473C2/de not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-07-01 RU RU2001102598/15A patent/RU2217761C2/ru active
- 1999-07-01 AT AT99945931T patent/ATE230487T1/de active
- 1999-07-01 PL PL345407A patent/PL198623B1/pl unknown
- 1999-07-01 TR TR2000/03903T patent/TR200003903T2/xx unknown
- 1999-07-01 CN CNB998079111A patent/CN1209627C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 MX MXPA00012852A patent/MXPA00012852A/es active IP Right Grant
- 1999-07-01 WO PCT/DE1999/002094 patent/WO2000001845A2/de not_active Ceased
- 1999-07-01 DE DE59903915T patent/DE59903915D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 SK SK2031-2000A patent/SK284056B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-07-01 HU HU0102744A patent/HUP0102744A2/hu unknown
- 1999-07-01 IL IL14055099A patent/IL140550A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-07-01 AU AU58487/99A patent/AU749769B2/en not_active Expired
- 1999-07-01 ES ES99945931T patent/ES2190820T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 KR KR1020017000026A patent/KR100646193B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 CA CA002336153A patent/CA2336153C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 CZ CZ20004922A patent/CZ292076B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-07-01 JP JP2000558235A patent/JP3404020B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 US US09/743,103 patent/US6709832B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 EP EP99945931A patent/EP1092155B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-01 BR BRPI9912227 patent/BRPI9912227B8/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-07-01 DK DK99945931T patent/DK1092155T3/da active
-
2000
- 2000-12-28 NO NO20006681A patent/NO328685B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-02-20 US US10/371,883 patent/US20030152993A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL198623B1 (pl) | Metoda wczesnego diagnozowania nowotworów | |
| US20230133528A1 (en) | Method for prediction of the progression risk of tumors | |
| US20210047697A1 (en) | Method for improved diagnosis of dysplasias | |
| JP5619336B2 (ja) | 可溶化身体サンプルにおける新形成疾患を検出するための方法 | |
| KR101976219B1 (ko) | 유방암의 바이오마커 | |
| EP1416278B1 (en) | Method for improved diagnosis of dysplasias | |
| Ussakli et al. | Serous versus high-grade endometrioid endometrial carcinoma: immunohistochemistry of RFP is not useful for differentiation | |
| EP3124974A1 (en) | Method for the normalization of immunological tests and kits for performing such tests | |
| HK1038609B (en) | Method for early diagnosis of carcinomas |