PL190385B1 - Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego - Google Patents
Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowegoInfo
- Publication number
- PL190385B1 PL190385B1 PL97332873A PL33287397A PL190385B1 PL 190385 B1 PL190385 B1 PL 190385B1 PL 97332873 A PL97332873 A PL 97332873A PL 33287397 A PL33287397 A PL 33287397A PL 190385 B1 PL190385 B1 PL 190385B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hyaluronic acid
- solution
- salt
- benzydamine
- bupivacaine
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
1. Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania
miejscowego, znamienny tym, ze zawiera stcchiomctrycznie obojętną sól kwasu
hialuronowego z benzydaminą lub bupiwakainą, w której 50%-90% grup karboksylowych
kwasu hialuronowego przekształconych jest w sól z benzydaminą lub bupiwakainą,
a reszta grup karboksylowych przekształconych jest w sól z metalem alkalicznym lub metalem
ziem alkalicznych, przy czym ciężar cząsteczkowy kwasu hialuronowego wynosi
50-350 lub 500-730 lub 750-1200.
Description
W powyższym opisie przedstawiono znaczenie tej doskonałej biodostępności w dziedzinie weterynarii, w odniesieniu do podawania środków chemioterapeutycznych W opisie wymieniono ponadto działanie miotyczne, przeciwzapalne, przyspieszające gojenie się ran i przeciwdrobnoustrojowe w zastosowaniach okulistycznych, zarówno w dziedzinie weterynarii, jak i medycyny
Obecnie stwierdzono, ze jeśli stosuje się środki znieczulające o działaniu miejscowym, a konkretnie zasadowe, organiczne środki znieczulające zawierające grupy aminowe w postaci stechiometrycznie obojętnych soli z kwasem hialuronowym, lub stechiometiycznie obojętnych soli kwasu hialuronowego, uzyskanych w wyniku częściowego przekształcania tego kwasu w sól ze wskazanymi wyżej związkami aminowymi oraz przekształcania pozostałych grup karboksylowych kwasu w sole z zasadami nieorganicznymi pochodzącymi od metali alkalicznych lub metali ziem alkalicznych, uzyskuje się nie tylko korzyści polegające na zwiększonej biodostępności i doskonałej tolerancji, ale również wyjątkowy wzrost działania znieczulającego. Takie działanie ma bardzo duze znaczenie w okulistyce, z tym ze może być również wykorzystywane w innych dziedzinach. Stanowi ono określony efekt techniczny w porównaniu z korzyściami, które opisano w wyżej wspomnianym opisie patentowym.
Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z benzydaminą lub bupiwakainą, w której 50%-90% grup karboksylowych kwasu hialuronowego przekształconych jest w sól z benzydaminą lub bupiwakamą, a reszta grup karboksylowych przekształconych jest w sól z metalem alkalicznym lub metalem ziem alkalicznych, przy czym ciężar cząsteczkowy kwasu hialuronowego wynosi 50-350 lub 500-730 lub 750-1200
Spośród soli metali alkalicznych i metali ziem alkalicznych korzystnymi solami jednowartościowymi są sole sodowe, a korzystnymi solami dwuwartościowymi są sole wapniowe
Korzystnie grupy karboksylowe kwasu hialuronowego są przekształcone w sól z benzydaminą lub bupiwakainą w zakresie 70-90%, korzystniej w około 75%.
Zgodnie z wynalazkiem stwierdzono, ze aktywność soli kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym może zmieniać się w zależności od ciężaru cząsteczkowego kwasu hialuronowego. W przypadku benzydaminy, stwierdzono, ze produkt ma najkorzystniejszą charakterystykę, gdy wytworzy się sól z frakcją kwasu hialuronowego o niskim cięzarze cząsteczkowym
Korzystnie ciężar cząsteczkowy kwasu hialuronowego wynosi w tym przypadku 50-350.
W przypadku innego środka znieczulającego, bupiwakainy, stwierdzono, ze produkt ma najkorzystniejszą charakterystykę, gdy wytworzy się sól z frakcją kwasu hialuronowego o wysokim cięzarze cząsteczkowym.
W innym aspekcie przedmiotem wynalazku jest lek do podawania miejscowego jak określony powyżej do stosowania w okulistyce
Ponadto, przedmiotem wynalazku jest lek do podawania miejscowego jak określony powyżej do stosowania w leczeniu procesów zapalnych w jamie ustnej lub głównych drogach oddechowych, w tym kataru, zapalenia śluzówki spowodowanego radio- lub chemioterapią, intubacją przeprowadzoną podczas operacji chirurgicznej lub w celach diagnostycznych, taką jak bronchoskopia, w leczeniu stanów zapalnych ozębnej i dziąseł, w procesach zapalnych zewnętrznego przewodu słuchowego, w różnego pochodzenia zapaleniu spojówki, w zapaleniu sromu, pochwy i zapaleniu cewki moczowej, lub w zastosowaniach doodbytniczych
W kolejnym aspekcie przedmiotem wynalazku jest lek do podawania miejscowego do stosowania jako środek znieczulający.
Lek według wynalazku może mieć postać płynu do oczu, płukanki do jamy ustnej, aerozolu, kremu lub roztworu dopochwowego
W znaczeniu użytym w opisie określenie „kwas hialuronowy” oznacza oczyszczony kwas hialuronowy. dostępny na rynku lub opisany w literaturze albo w patentach, taki jak kwasy ekstrahowane ze źródeł zwierzęcych lub fermentacyjnych, pochodzenia biotechnologicznego, albo cząsteczkowe frakcje kwasów hialuronowych, podobnie oczyszczone, takie jak frakcje opisane w europejskim opisie patentowym nr 0138572 (produkty handlowe znane jako Hyalastine i Hyalectin) lub kwasy hialuronowe o wyzszym cięzarze cząsteczkowym, takie jak
190 385 frakcja znana jako Hyaloftil. opisana w EP 0535200 Al, bądź tez inne produkty dostępne na rynku Poza opisanym powyżej kwasem hialuronowym można także stosować jego częściowe estry uzyskane sposobem opisanym w EP 0216453 BI
Środki znieczulające o działaniu miejscowym do stosowania przy wytwarzaniu soli z kwasem hialuronowym według mniejszego wynalazku stanowią zasadniczo środki opisane w literaturze i/lub dostępne na rynku lub stosowane w celach klinicznych, zawierające alifatyczne i/lub aromatyczne grupy aminowe (z 12-30 atomami węgla), które można przekształcić w sól z kwasem. Jakkolwiek sole kwasu hialuronowego z lidokainą, dibukainą i benzokainą są znane, gdyż zostały opisane w wyżej wspomnianym europejskim opisie patentowym EP 0197718 Bl, sole kwasu hialuronowego z następującymi środkami znieczulającymi typu aminowego o działaniu miejscowym są nowe: tetrakaina, amylokaina, bukrikaina, bupiwakama, siarczan butakainy, butanilikaina, butoksykaina, kartikaina, chloroprokaina, klibukaina. chlormekaina, cyklometykaina, chlorowodorek dimetizokwinu, diperodon, diklokaina. benzoesan etylo-p-piperydynoacetyloaminy, etidokaina, heksylkaina, fenakaina, fomokaina, hydroksyprokaina, hydroksytetrakaina, ketokaina, oksetazaina, oksybuprokaina, paretoksykaina, piperokaina, pirydokaina, pirokaina, pramoksyna, prilokaina, prokaina, propanokaina, propipokaina, propoksykaina, proksymetakaina, ropiwakaina, tolikaina, trimekaina, wadokaina oraz, w szczególności, benzydamina, lek o właściwościach przeciwzapalnych i miejscowym działaniu znieczulającym.
Sole kwasu hialuronowego o silnym działaniu znieczulającym według wynalazku stanowią stechiometrycznie obojętne sole z benzydamina lub bupiwakainą, czyli sole polisacharydu z zasadami aminowymi. W solach częściowych polisacharydu z takimi zasadami aminowymi stopień przekształcenia w sól może zmieniać się w szerokim zakresie, tj jak wskazano powyżej od 50 do 90%, przy czym pozostałe grupy karboksylowe polisacharydu są w postaci soli z jednym z wyżej wspomnianych jonów metalu alkalicznego lub metali ziem alkalicznych.
Zaobserwowano, ze sole tego rodzaju nie tylko wykazują o wiele silniejsze i dłużej trwające działanie znieczulające niż benzydamina lub jej chlorowodorek, ale również silniejsze działanie przeciwzapalne oraz nieoczekiwanie zmniejszone działanie podrażniające, dzięki czemu poszerza się przedział pomiędzy stężeniem lub dawką aktywną i podrażniającą Wiadomo bowiem, ze środek znieczulający i przeciwzapalny, benzydamina, wykazuje pewne wady, takie jak krótkotrwałość działania miejscowego, gdyż lek szybko przenika z miejsca zastosowania do układu, oraz pojawienie się działania drażniącego, które występuje przy dawkach niezbyt oddalonych do dawek wymaganych w celu osiągnięcia żądanego skutku.
Sole benzydaminy według wynalazku są, jak juz wspomniano powyżej, nowymi lekami o bardzo szerokim zakresie stosowania, który obejmuje, poza zaburzeniami i chorobami juz wymienionymi, stany zapalne jamy ustnej, zapalenie migdałków, zapalenie tchawicy, choroby uzębienia i dziąseł obejmujące problemy z ząbkowaniem u dzieci, choroby proktologiczne, procesy urazowe i zwyrodnieniowo-zapalne stawów, poród oraz ogólnie - choroby zapalne każdego rodzaju
Efekt techniczny nowych soli kwasu hialuronowego według wynalazku można wykazać wynikami następujących doświadczeń, w odniesieniu do ich silniejszego działania znieczulającego w porównaniu z działaniem składnika znieczulającego zastosowanego samodzielnie (tabele 1-6), w suchym zapaleniu oka królika. Sole benzydaminy wykazują również zmniejszenie działania podrażniającego (tabela 7).
Testy biologiczne
Ocena działania znieczulającego rogówkę królika wywołanego przez sole kwasu hialuronowego ze środkami znieczulającymi o działaniu miejscowym.
Sposoby
Znieczulenie rogówki
Znieczulenie rogówki oceniano metodą Camougisa i Tankmana (Camougis i inni (1971), „Methods in Pharmacology tom 1, 5 red. A. Schwartz. Appleton-Century-Crofts, New York, str. 1). mierząc odruch mrugania u królika 50 ml roztworu wkroplono do worka spojówkowego Odruch mrugania, badany na rzęsie, mierzono przed wkropleniem oraz co
190 385
5-10 minut po wkroplemu, w ciągu 1 godziny. Każdorazowo stopień znieczulenia wyrażano jako stopień w skali do 10, oznaczający liczbę pobudzeń przed wystąpieniem odruchu mrugania. Następnie ogólne działanie znieczulające dla danego związku określano ilościowo jako powierzchnię pod krzywą (AUC) stopnia znieczulenia w funkcji czasu
Wyniki
Jak pokazują wyniki w tabeli 1, sole z kwasem hialuronowym lidokainy. bupiwakainy i benzydaminy wykazują silniejsze działanie miejscowe niz ich odpowiednie chlorowodorki Można zaobserwować, ze efekt silniejszego działania środków znieczulających zmienia się w zależności od jonu metalu alkalicznego/metali ziem alkalicznych; obecność wapnia, w przeciwieństwie do sodu, jest selektywnie korzystniejsza dla lidokainy niz bupiwakainy lub benzydaminy
Tabela 1
Działanie hialuronianu lidokainy, bupiwakainy i benzydaminy (FID 60 20XX) i ich odpowiednich chlorowodorków znieczulające oko królika
| Związek | Dawka§ (stężenie) | Działanie znieczulające (AUC)$ |
| Lidokama HCl | 1% | 100 |
| FID 60 2070 (100% lidokainy) | 1% | 167 |
| FID 60 2071 (50% lidokainy - 50% Na) | 1% | 244 |
| FID 60 2072 (50% lidokainy - 50% Ca) | 1% | 222 |
| FID 60 2088 (50% lidokainy - 50% K) | 1% | 200 |
| Bupiwakama HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 2082 (100% bupiwakainy) | 0,125% | 165 |
| FID 60 2083 (50% bupiwakainy - 50% Na) | 0,125% | 205 |
| FID 60 2084 (50% bupiwakainy - 50% Ca) | 0,125% | 112 |
| Benzydamina HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 2083 (50% benzydaminy - 50% Na) | 0,125% | 153 |
| FID 60 2083 (50% benzydaminy - 50% Ca) | | 0,125% | 110 |
* W przypadku soli kwasu hialuronowego podano procent substancji czynnej i procent jonu metalu alkalicznego lub metali ziem alkalicznych § Dawkę odniesiono we wszystkich przypadkach do substancji czynnej w postaci chlorowodorku $ Działanie znieczulające w oparciu o AUC wyliczono przyjmując wartość dla produktu odniesienia jako 100
Stwierdzono, ze selektywność jonów jest również zależna od ciężaru cząsteczkowego stosowanego kwasu hialuronowego. Jak to wynika z tabeli 2, selektywność jonów występuje jedynie w przypadku kwasu hialuronowego o niskim ciężarze cząsteczkowym, w szczególności o cięzarze cząsteczkowym w zakresie 50-350 (pochodne FID 60 20XX), a nie w przypadku kwasu hialuronowego o wysokim ciężarze cząsteczkowym, w zakresie 500-730 i 750-1200 (odpowiednio pochodne FID 6l.20XX i FID 62.20XX).
Tabela 2
Działanie soli hialuromanowych bupiwakainy znieczulające oko królika w zalezności od cięzaiu cząsteczkowego kwasu hialuronowego i przeciwjonu metalu alkalicznego lub ziem alkalicznych
| Związek* | Dawka§ | Działanie znieczulające (AUC)$ |
| 1 | 2 | 3 |
| FID 60 2082 (100% bupiwakainy) | 0,125% | 100 |
| FID 60 2083 (50% bupiwakainy - 50% Na) | 0,125% | 123 |
190 385 cd tabeli 2
| 1 | 3 | |
| FID 60 2084 (50% beolwckelnv - 50% Cc) ' | 0,125% | 84 |
| FID 6.1 2082 (100% beplwckciny) | 0,125% | 100 |
| FID 61 2083 (50% beolwckclny - 50% Nc) | 0,125% | 96 |
| FID 61 2084 (50% beoiwekciny - 50% Cc) | 0,125% | 104 |
| FID 62 2082 (100% beplwckcmy) | 0,125% | 100 |
| FID 62 2083 (50% beplwckciny - 50% Nc) | 0,125% | 116 |
| FID 62 2084 (50% bepiwckeiny - 50% Cc) | 0,125% | 110 |
* W przypadku soli kwasu hialuronowego podano procent substancji czynnej i procent jonu metalu alkalicznego lub ziem clkcliczeych § Dcwkę oOmecinan we wczyctkich orzyjcOkcch Oo cubctcncji czynnej w jocacci chlorowoOoike $ Dzielenie znieczulające w ojcrciu o AUC wyliczono przyjmując wartość Olc produktu oOniecienic jako 100
Jck to wynikc z tcbeli 3, stopień cktywności zclezy tck ze oO cięzcru cząsteczkowego zectncnwcnegn kwccu hielurnnnwegn.
T c b e 1 a 3
Dziclcnie coli hieleromcnowych buolwckeley znieczulcnące oko królikc w zcleznnścl oO cięzcru cząsteczkowego kwccu hlelerpnpwego
| Związek* | Dcwkc§ | Dzicłeme zmeczeląjące (AUC)$ |
| Beplwckeme HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 2083 (50% buolwckemy - 50% Cc) | 0,125% | 123 |
| FID 61 2083 (50% beplwckclny - 50% Nc) | 0,125% | 169 |
| FID 62 2083 (50% beplwckcley - 50% Nc) | 0,125% | 168 |
| Bepiwekeme HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 2084 (50% beplwckclny - 50% Cc) | 0,125% | 102 |
| FID 61 2084 (50% beplwekciny - 50% Cc) | 0,125% | 180 |
| FID 62 2084 (50% bepiwekeiny - 50% Cc) | 0,125% | 205 |
* W przypadku soli kwacu hieluronowego opOeno procent sebctencJi czynnej i procent jonu metclu alkc licznego lub ziem clkclicznych § Dcwkę oOmeciono we wczyctkich orzypcOkech Oo cebctcncjl czynnej w oocteci chlorowodorku $ Dziclcnie zmeczeląjące w opcrciu o AUC wyliczono przyjmując wcrtość Olc oroOekau oOniecleele jako 100 SpośroO coli neOnnwcrtnścinwych metcli elkeliczeych nejckayweiensze poc^One uzyckuje cię w orzyocOku coli snOnwych, co moznc ctwierOzić nc onOstcwle tcbeli 4, w której zc mleszcznnn Onne Olc poc^Onych liOnkemy z kwccem hielurnnnaaym o cięzcrze cząsaeczknwym w zekresie 50-350
190 385
Tabela 4
Działanie soli hialuromanowych lidokainy i ich soli z metalami alkalicznymi znieczulające oko kiólika
| Związek* | Dawka § | Działanie znieczulające (AUC)$ |
| Lidokaina HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 20S7 (50% lidokainy - 50% Li) | 0,125% | 197 |
| FID 61 2083 (50% lidokainy - 50% Na) | 0,125% | 244 |
| FID 62 2083 (50% lidokainy - 50% K) | 0,125% | 173 |
* W przypadku soli kwasu hialuronowego podano procent substancji czynnej i procent jonu metalu alka licznego § Dawkę odniesiono we wszystkich przypadkach do substancji czynnej w postaci chlorowodorku $ Działanie znieczulające w oparciu o AUC wyliczono przyjmując wartość dla produktu odniesienia jako 100 Stopień przekształcenia w sól wpływa na aktywność biologiczną, co można stwierdzić na podstawie tabeli 5, w której podano wyniki dla częściowych soli bupiwakainowo-sodowych kwasu hialuronowego o ciężarze cząsteczkowym w zakresie 500-730 w porównaniu z wynikami dla chlorowodorku i soli całkowitych, oraz na podstawie tabeli 6, w której porównano wyniki dla częściowych soli benzydamino-sodowych kwasu hialuronowego o cięzarze cząsteczkowym 50-350 i chlorowodorku.
Tabela 5
Działanie soli hialuronianowych bupiwakainy znieczulające oko królika w zalezności od stopnia przekształcenia w sól
| Związek* | Dawka§ | Działanie znieczulające (AUC)$ |
| Bupiwakaina HCl | 0,125% | 100 |
| FID 61 2110 (25% bupiwakainy - 75% Na) | 0,125% | 171 |
| FID 61 2083 (50% bupiwakamy- 50% Na) | 0,125% | 169 |
| FID 61 2109 (75% bupiwakainy- 25% Na) | 0,125% | 221 |
| FID 61 2082 (100% bupiwakainy) | 0,125% | 314 |
* W przypadku soli kwasu hialuronowego podano procent substancji czynnej i procent jonu metalu alka licznego § Dawkę odniesiono we wszystkich przypadkach do substancji czynnej w postaci chlorowodorku $ Działanie znieczulające w oparciu o AUC wyliczono przyjmując wartość dla produktu odniesienia jako 100
Tabela 6
Działanie soli hialuiomanowych benzydaminy znieczulające oko królika w zalezności od stopnia przekształcenia w sól
| Związek* | Dawka§ | Działanie znieczulające (AUC)S |
| i | 2 | 3 |
| Benzydamina HCl | 0,125% | 100 |
| FID 60 2102 (10% benzydaminy - 90% Na) | 0,125% | 143 |
| FID 60 2101 (25% benzydaminy - 75% Na) | 0,125% | 148 |
| FID 60 2096 (50% benzydaminy - 50% Na) | 0,125% | 153 |
190 385 cd tabeli 4
| 1 | 2 | 3 |
| FID 60 2108 (75% benzydaminy - 25% Na) | 0,125% | 197 |
| FID 61 2107 (90% benzydaminy- 10% Na) | 0,125% | 181 |
* W przypadku soli kwasu hialuronowego podano procent substancji czynnej i procent jonu metalu alka licznego § Dawkę odniesiono we wszystkich przypadkach do substancji czynnej w postaci chlorowodorku $ Działanie znieczulające w oparciu o AUC wyliczono przyjmując wartość dla produktu odniesienia jako 100
B Ocena zmniejszenia działania drażniącego benzydarniny na łapę szczura
Metody
Drażnienie
Po 0,1 ml każdego z badanych roztworów (1% w/v, chlorowodorek) wstrzykiwano w tylną łapę szczura Objętość łapy mierzono pletyzmometrem przed wstrzyknięciem i w 30-60-120-240 i 480 minut po wstrzyknięciu. Obrzęk i związane z nim działanie drażniące wyznaczano na podstawie wzrostu objętości łapy. Działanie drażniące przedstawiano jako sumę wzrostów objętości dla różnych czasów wykonywania pomiarów
Wyniki
Potwierdziło się, ze sól kwasu hialuronowego wywołuje mniejsze działanie drażniące niż chlorowodorek, na co wskazuje zmniejszony obrzęk (tabela 7).
Tabela 7
Działanie drażniące chlorowodorku benzydaminy i FID 60 2108 na łapę szczura
| Związek | liczba | Obrzęk, średnia sumaryczna objętość (ml) |
| Benzydamina HCl, mg | 20 | 529 |
| FID 60 2108,1 mg (75% benzydaminy, 25% Na) | 20 | 389 |
W przypadku FID 60.2108 podano procent substancji czynnej i procent jonów Na. Wszystkie dawki odniesiono do substancji czynnej w postaci chlorowodorku.
Sposoby wytwarzania
Rodzaje kwasu hialuronowego i zasadowych środków znieczulających stosowanych jako materiały wyjściowe są znane i związki te można wytwarzać znanymi sposobami, jak to opisano poniżej. Wynalazek ilustrują następujące przykłady.
Przykład 1
Sól sodową kwasu hialuronowego (ciężar cząsteczkowy 50-350) rozpuszczono w wodzie do uzyskania stężenia 16 mg/ml. Kolumnę wypełniono żywicą Bio-Rad AG50W-X8 w postaci kwasowej, potraktowaną wstępnie IN HCl, stosując szklaną kolumnę z płaszczem, przez który przepływał płyn o temperaturze 4°C, 5 ml żywicy w postaci kwasowej wprowadzono do kolumny i przemyto wodą do obojętnego pH, po czym przez żywicę przepuszczono roztwór soli sodowej kwasu hialuronowego i uzyskany roztwór zebrano w pojemniku z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C.
Przepływ przez kolumnę regulowano pompą perystaltyczną dołączoną do wylotu kolumny Po przejściu całego roztworu przez kolumnę żywicę przemyto wodą w celu ograniczenia do minimum strat produktu i produkty z przemywania dodano do roztworu kwasu hialuronowego, otrzymując w ten sposób końcowy roztwór o stężeniu 11,8 mg/ml, w przeliczeniu na kwas hialuronowy
Przykład 2
Sól sodową kwasu hialuionowego (ciężar cząsteczkowy 500-730) rozpuszczono w wodzie do uzyskania stężenia 5,0 mg/ml Kolumnę wypełniono żywicą Bio-Rad AG50W-X8
190 385 w postaci kwasowej, potraktowaną wstępnie IN HCl, stosując szklaną kolumnę z płaszczem, przez który przepływał płyn o temperaturze 4°C; 5 ml żywicy w postaci kwasowej wprowadzono do kolumny i przemyto wodą do obojętnego pH, po czym przez żywicę przepuszczono loztwór soli sodowej kwasu hialuronowego i uzyskany roztwór zebrano w pojemniku z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C
Przepływ przez kolumnę regulowano pompą perystaltyczną dołączoną do wylotu kolumny. Po przejściu całego roztworu przez kolumnę żywicę przemyto wodą w celu ograniczenia do minimum strat produktu i produkty z przemywania dodano do roztworu kwasu hialuronowego, otrzymując w ten sposób końcowy roztwór o stężeniu 3,78 mg/ml, w przeliczeniu na kwas hialuronowy.
Przykład 3
Sól sodową kwasu hialuronowego (ciężar cząsteczkowy 750-1200) rozpuszczono w wodzie do uzyskania stężenia 3,0 mg/ml.
Kolumnę wypełniono żywicą Bio-Rad AG50W-X8 w postaci kwasowej, potraktowaną wstępnie IN HCl, stosując szklaną kolumnę z płaszczem, przez który przepływał płyn o temperaturze 4°C; 5 ml żywicy w postaci kwasowej wprowadzono do kolumny i przemyto wodą do obojętnego pH, po czym przez żywicę przepuszczono roztwór soli sodowej kwasu hialuronowego i uzyskany roztwór zebrano w pojemniku z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C
Przepływ przez kolumnę regulowano pompą perystaltyczną dołączoną do wylotu kolumny. Po przejściu całego roztworu przez kolumnę żywicę przemyto wodą w celu ograniczenia do minimum strat produktu i produkty z przemywania dodano do roztworu kwasu hialuronowego, otrzymując w ten sposób końcowy roztwór o stężeniu 2,36 mg/ml, w przeliczeniu na kwas hialuronowy.
Przykład 4 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,77 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha 4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z benzydaminą.
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób następujący. 3,0 g chlorowodorku benzydaminy rozpuszcza się w wodzie do stężenia 50 mg/ml Dodaje się równomolową ilość iN NaOH, plus 5% nadmiar, tak aby uzyskać wodny roztwór o pH 10-11.
W tych warunkach zostaje uwolniona benzydaminą w postaci zasady, która wytrąca się z wody jako olej Mieszaninę tę miesza się z eterem dietylowym (2 porcje po 50 ml) w celu całkowitego wyekstrahowania zasady. Fazy eterowe łączy się, osusza bezwodnym siarczanem sodu i odparowuje się do sucha, a oleistą pozostałość suszy się pod próżnią. Czystość otrzymanego produktu oznacza się metodąTLC (chromatografii cienkowarstwowej) (eluent: octan etylu/metanol 70:30; Rf = 0,14).
Przykład 5 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,58 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego, wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór me zawierał zawieszonego osadu, dodano 0,62 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
190 385
Roztwór pizesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (75%), a częściowo w postaci soli sodowej (25%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w pizykładzie 4
Przykład 6 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C 0,39 g benzydaminy lozcieńczono 10 ml tert-butanoiu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4
Przykład 7 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,39 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 92,6 mg Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano przez kilka godzin
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%), a częściowo w postaci soli wapniowej (50%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4
Przykład 8
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2, o stężeniu 3,78 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,39 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego, wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 10 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%)
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4.
Przykład 9
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2, o stężeniu 3,78 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,39 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do
190 385 roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 92,6 mg Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano przez kilka godzin.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%). a częściowo w postaci soli wapniowej (50%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4.
Przykład 10
400 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego. otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3, o stężeniu 2,36 mg/ml. umieszczono w 500 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,39 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego, wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 10 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4
Przykład 11
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3, o stężeniu 2,36 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,39 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 10 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 92,6 mg Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano przez kilka godzin.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (50%), a częściowo w postaci soli wapniowej (50%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4.
Przykład 12 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,72 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano przez kilka godzin. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z bupiwakainą.
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób następujący· 3,0 g chlorowodorku bupiwakainy rozpuszcza się w wodzie w stężeniu 25 mg/ml. Dodaje się równomolową ilość IN NaOH, plus 5% nadmiar, tak aby uzyskać wodny roztwór o pH 1(0-11. W tych warunkach zostaje uwolniona bupiwakaina w postaci zasady, która wytrąca się z wody jako osad. Osad odsącza się na filtrze Goocha G4, przemywa się kilka razy wodą i suszy pod próżnią Czystość otrzymanego produktu oznacza się na podstawie pomiaru temperatury topnienia (107-108°C) i metodą TLC (eluent octan etylu/metanol 70.30: Rf = 0.79)
Przykład 13 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano
190 385 w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0.54 g bupiwakainy. zasady w postaci stałej i całość wytrząsano Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 0.62 ml lN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut. Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (75%), a częściowo w postaci soli sodowej (25%) '
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
Przykład 14 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego. otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1. o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml lN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą(50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%).
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
Przykład 15 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytiząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 46,3 mg lN Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą(50%), a częściowo w postaci soli wapniowej (50%).
Bupiwakainę stosowanąjako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
Przykład 16
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2, o stężeniu 3,78 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,72 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano przez kilka godzin Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z bupiwakainą
Bupiwakainę stosowanąjako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
Przykład 17
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2, o stężeniu 3,78 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,54 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 0,62 ml lN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha 4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą(75%), a częściowo w postaci soli sodowej (25%).
Bupiwakainę stosowanąjako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
190 385
Przykład 18
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego. otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2, o stężeniu 3.78 mg/ml. umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%).
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
Przykład 19
250 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 2. o stężeniu 3,78 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 46,3 mg Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szklą i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (50%), a częściowo w postaci soli wapniowej (50%).
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
Przykład 20
400 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3, o stężeniu 2,36 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,72 g bupiwakainy zasady w postaci stałej i całość wytrząsano przez kilka godzin. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób stechiometryczme obojętną sól kwasu hialuronowego z bupiwakainą.
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
Przykład 21
400 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3, o stężeniu 2,36 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie. Roztwói wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,54 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawiera! zawieszonego osadu, dodano 0,62 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (75%), a częściowo w postaci soli sodowej (25%).
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
Przykład 22
400 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3, o stężeniu 2,36 mg/ml, umieszczono w 500 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór me zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
190 385
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (50%). a częściowo w postaci soli sodowej (50%)
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
Przykład 23
400 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 3. o stężeniu 2,36 mg/ml. umieszczono w 500 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0.36 g bupiwakainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 46,3 mg Ca(OH)2 i wytrząsanie kontynuowano. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (50%), a częściowo w postaci soli wapniowej (50%)
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12
Przykład 24 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,59 g lidokainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano przez kilka godzin. Reakcję powstawania soli uznano za zakończoną, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuro nowego z lidokainą
Lidokainę stosowanąjako substancję wyjściową można otrzymać w sposób następujący 3,0 g chlorowodorku lidokainy rozpuszcza się w wodzie do stężenia 25 mg/ml. Dodaje się równomolową ilość IN NaOH, plus 5% nadmiar, tak aby uzyskać wodny roztwór o pH 10-11. W tych warunkach zostaje uwolniona lidokaina w postaci zasady, która wytrąca się z wody jako osad Osad odsącza się na filtrze Goocha G4, przemywa się szereg razy wodąi suszy pod próżnią Czystość otrzymanego produktu oznacza się na podstawie temperatury topnienia (68-69°C) i metodąTLC (eluent: octan etylu/metanol 70:30, Rf = 0,81)
Przykład 25 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,44 g lidokamy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 0,62 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z lidokainą(75%), a częściowo w postaci soli sodowej (25%).
Lidokainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 24
Przykład 26 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. Do roztworu dodano 0,29 g lidokainy, zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szklą i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z lidokamą(50%), a częściowo w postaci soli sodowej (50%)
Lidokainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 24.
190 385
Przykład 27 ml woOnegn roztworu kwccu hlelernnnwegn, otrzymeeegn w spnsób noiseey w orzykleOzle 1, o ctęzeniu 11.8 mg/ml, emieszcznen w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząseen w lcźni z aermnsactem ncctcwlnnym nc temperaturę 4°C. Do roztworu OnOern 0.44 g liOnkeiny, zeseOy w onsaeci saclen i cclość wyarząscen. Po kilku gnOzincch, gOy roztwór nie zewleral zewleszneegn nseOe, OnOeon 23 mg Ce(OH)2 i wytrzącenie knntynenwenn. Reckcję pnwstewenie coli uznenn zc zckończoną gOy roztwór nie zcwiercl zcwiecznnegn nceOu
Roztwór orzecącznnn wówczes przez filtr Gooche G4, rnzOzielnnn Oo butelek z zóltego czklc i linfiliznweoo. Otrzymcen w ten spnsób obojętną cól. częściowo w pnsaecl coli z liOnkeieą(75%), c częściowo w pnsacci coli wconinwen (25%)
LiOnkemę sancnweną jcko substencJę wyjściową moznc narzymcć w cpnsób nolseny w przyklcOzie 24.
Przykład 28 ml wnOnego roztworu kwese hiclernnowego, oarzymcnego w consób opiccny w orzykleOzie 1, o saęzenie 11,8 mg/ml, umieszcznnn w 100 ml kolbie. Roztwór wytrzącenn w lcźni z termnstetem nccaewionym nc temperaturę 4°C. Do roztworu OnOcnn 0,29 g liOokciny, zeccOy w oncacci stelej i cdość wytrząsaao. Po kilku gnOzincch, gOy roztwór nie zewleral zewieszneegn nscOe, OoOeen 46,3 mg Cc(OH)2 i wytrząceme knntynenweno. Reckcję powstewcnie coli uzecnn zc zeknńcznną, gOy roztwór nie zcwiercl zcwiecznnegn occOu
Roztwór orzecącznnn wówczcc przez filtr Gnnche G4. rozOzielnen Oo butelek z zóltego czklc i linflliznweno. Otrzymenn w ten concób obojętną cól, częściowo w pnctecl coli z liOnkciną (50%), c częściowo w pncacci coli wconinwej (50%)
LiOnkeinę sancoweną jcko subsacncnę wyjściową moznc otrzymeć w cpnsób nplscny w orzykleOzle 24.
Przykład 29 ml wsOnegn roztworu kwesu hiclurnenwegn, ntrzymcnegn w spnsób npiseey w przykleOzie 1, o ctęzeniu 11,8 mg/ml, umieszcznnn w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsenn w lcźni z termostctem eecacwinnym nc temperaturę 4°C. Do roztworu OnOeen 0,29 g li0nkCl iny, zeccOy w pnsaeci ctclej i cclość wytrząceno. Po kilku gnOzincch, gOy roztwór nie zewiercl zcwiesznnegn nseOu, OnOcnn 36,5 mg Mg(OH)2 i wytrząsenie knntynunwenn. Reekcnę onwsteweeie coli ezncnn zc zckończoną, gOy roztwór nie zcwiercl zcwlecznnegn occOu.
Roztwór orzesącznnn wówczes przez filtr Gnnche G4, rozOzielnno Oo butelek z zóltego czkic i linfiliznween Otrzymenn w ten cpo^h obojętną cól, częściowo w onstecl coli z liOnkemą(50%), c częściowo w pnsteci coli megneznwen (50%)
LiOnkcleę stncowcną nekn cubstcncnę wyjściową moznc narzymeć w cpncób npiceny w orzykleOzie 24
Przykład 30 ml wsOeego roztworu kwccu hicluronowegn, oarzymeoegn w cpncób noiceey w pizykleOzie 1, o ctęzeniu 11,8 mg/ml, emleczczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząccnn w lcźni z termnstetem ncctewionym nc temperaturę 4°C Do roztworu OoOcen 0,29 g hOnkeiny, zeseOy w onstcci i cciość wytrząseno. Po kilku goOzincch, gOy roztwór nie zcwiercl zcwieszoeego nseOu, powoli OoOcen 1,25 ml IN LiOH i wytrząsenie knntynuowcnn przez 30 minut
Roztwór olzecącznno wówczes przez filtr Gooche G4, rozOzielono Oo butelek z zóltego czkN i llnfiliznweno Otrzymeen w ten sonsób obojętną cól, częściowo w oocteci coli z liOokeiną (50%), c częściowo w ooctecl coli litowej (50%).
LiOskelnę cancnwcną jeko cebcacncję wyjściową moznc oarzymeć w cpo^h oolceny w orzykleOzle 24.
Przykład 31 ml wsOnego roztwora kwccu hleleronowego, otrzymcnegn w cpochO nplseey w orzykleOzle 1. o ctęzeniu 11,8 mg/ml, emleczczonn w 100 ml kolbie Roztwór vaytrząseen w lcźni z termnstetem nectcwloeym nc temperaturę 4°C. Do roztworu OnOe no 0,29 g l10nkel iny. zeccOy w osstccl ctclej i ^lość wytrząscnn Po kilku goOzincch, gOy roztwór nie zewieral zewieczoeego nseOe, powoli OnOeen 1,25 ml IN KOH i wytrząceme koeaynunwcno przez 30 minut
190 385
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z lidokainą(50%). a częściowo w postaci soli potasowej (50%)
Lidokainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 24 Przykład 32 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C 0,69 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego, wytrąci! się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 0,25 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (90%), a częściowo w postaci soli sodowej (10%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4.
Przykład 33 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C. 0,19 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego, wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydarniny przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,87 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
’ Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (25%), a częściowo w postaci soli sodowej (75%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4.
Przykład 34 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C 0,08 g benzydaminy rozcieńczono 10 ml tert-butanolu i roztwór ten powoli wkroplono do roztworu kwasu hialuronowego; wytrącił się biały osad, który zniknął po kilku godzinach. Pojemnik stosowany do odważania benzydaminy przemyto dwoma porcjami po 5 ml tert-butanolu, który następnie dodano do roztworu kwasu hialuronowego. Po laiku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 2,24 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut.
Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek z żółtego szkła i liofilizowano. Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z benzydaminą (10%), a częściowo w postaci soli sodowej (90%).
Benzydaminę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 4
Przykład 35 ml wodnego roztworu kwasu hialuronowego, otrzymanego w sposób opisany w przykładzie 1, o stężeniu 11,8 mg/ml, umieszczono w 100 ml kolbie. Roztwór wytrząsano w łaźni z termostatem nastawionym na temperaturę 4°C Do roztworu dodano 0,18 g bupiwakainy. zasady w postaci stałej i całość wytrząsano. Po kilku godzinach, gdy roztwór nie zawierał zawieszonego osadu, dodano 1,87 ml IN NaOH i wytrząsanie kontynuowano przez 30 minut Roztwór przesączono wówczas przez filtr Goocha G4, rozdzielono do butelek
190 385 z żółtego szkła i liofilizowano Otrzymano w ten sposób obojętną sól, częściowo w postaci soli z bupiwakainą (25%), a częściowo w postaci soli sodowej (75%).
Bupiwakainę stosowaną jako substancję wyjściową można otrzymać w sposób opisany w przykładzie 12.
| Preparaty farmaceutyczne | |
| Preparat 1 | |
| Wytwarzanie płukanki do jamy ustnej, zawierającej hialuronian benzydaminy (75%) | |
| 100 ml roztworu zawiera· | |
| - Hialuronian benzydaminy | 357 mg |
| (odpowiada 134,4 mg benzydaminy w postaci zasady) Substancje pomocnicze | |
| - Gliceryna | 5000 mg |
| - Alkohol etylowy 95° | 77>^2i mg |
| - Sacharyna | 30 nm |
| - p-Hydroksybenzoesan metylu | 110 mg |
| - p-Hydroksybenzoesan propylu | 20 mg |
| - Aromat mięty pieprzowcowej | 42,66 mm |
| - Środek barwiący Quinoline yellow (E104) | 0,87 nm |
| - Środek barwiący Blue patent V (E131) | 0,14 mm |
| - Woda oczyszczona w ilości uzupełniającej do | 100 ml |
| Preparat 2 | |
| Wytwarzanie preparatu do rozpylania, zawierającego hialuronian benzydaminy (75%) | |
| 100 ml roztworu zawiera: | |
| - Hialuronian benzydaminy | 337n^m |
| (odpowiada 134,4 mg benzydaminy w postaci zasady) Substancje pomocnicze | |
| - Gliceryna | 5000 nm |
| - Alkohol etylowy 95° | 7922 mm |
| - Sacharyna | 33 mm |
| - p-Hydroksybenzoesan metylu | 110 nm |
| - p-Hydroksybenzoesan propylu | 20 nm |
| - Aromat mięty pieprzowcowej | 42,62 nm |
| - Woda oczyszczona w ilości uzupełniającej do | 10110 1 |
| Preparat 3 | |
| Wytwarzanie kremu doodbytniczego zawieiającego hialuronian benzydaminy (75%) | |
| 100 ml kremu zawiera · | |
| - Hialuronian benzydaminy | 1119 mm |
| (odpowiada 448 mg benzydaminy w postaci zasady) Substancje pomocnicze | |
| - Wazelina | 8000 mg |
| - Olej wazelinowy | 4000 mg |
| - Lanolina | 11000 mg |
| - Polysorbate 80 | 5500 nm |
| - Glikol propylenowy | 6000 nm |
| - P-Hydroksybenzoesan metylu | 93,5 nm |
| - P-Hydroksybenzoesan propylu | 33 nm |
| Esencja lawendowa | 42 mg |
| Woda oczyszczona w ilości uzupełniającej do | 100 ml |
Preparat 4
Wytwarzanie roztworu ginekologicznego zawierającego hialuronian benzydaminy (75%)
100 ml roztworu zawiera.
- Hialuronian benzydaminy 223 mg
- Substancje pomocnicze
190 385
- p-Toluenosulfonian trimetyloacetyloamoniowy 100 mg
- Zapach z czerwonej róży 0.1 mg
- Woda oczyszczona w ilości uzupełniającej do 100 ml
Z powyzszego opisu wynalazku wyraźnie wynika, ze podane sposoby można zmodyfikować różnymi sposobami. Takich modyfikacji nie należy uważać jako odstępstwa od istoty i celów wynalazku, staną się one oczywiste dla specjalisty po zapoznaniu się z zakiesem poniższych zastrzezeń
Claims (10)
1 Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego, znamienny tym, ze zawiera stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z benzydaminą lub bupiwakainą, w której 50%-90% grup karboksylowych kwasu hialuronowego przekształconych jest w sól z benzydaminą lub bupiwakainą, a reszta grup karboksylowych przekształconych jest w sól z metalem alkalicznym lub metalem ziem alkalicznych, przy czym ciężar cząsteczkowy kwasu hialuronowego wynosi 50-350 lub 500-730 lub 750-1200.
2. Lek według zastrz. 1, znamienny tym, ze metal alkaliczny stanowi sód.
3 Lek według zastrz. 1, znamienny tym, ze metal ziem alkalicznych stanowi wapń.
4 Lek według zastrz. 1, znamienny tym, ze grupy karboksylowe kwasu hialuronowego są przekształcone w sól z benzydaminą lub bupiwakainą w zakresie 70-90%.
5. Lek według zastrz. 4, znamienny tym, ze grupy karboksylowe kwasu hialuronowego są przekształcone w sól z benzydaminą w około 75%.
6. Lek według zastrz. 5, znamienny tym, ze ciężar cząsteczkowy kwasu hialuronowego wynosi 50-350.
7. Lek do podawania miejscowego jak określony w zastrz. 1 do stosowania w okulistyce.
8. Lek do podawania miejscowego jak określony w zastrz. 1 do stosowania w leczeniu procesów zapalnych w jamie ustnej lub głównych drogach oddechowych, w tym kataru, zapalenia śluzówki spowodowanego radio- lub chemioterapią, przy intubacji podczas operacji chirurgicznej lub w celach diagnostycznych, stanów zapalnych ozębnej i dziąseł, w procesach zapalnych zewnętrznego przewodu słuchowego, w różnego pochodzenia zapaleniu spojówki, w zapaleniu sromu i pochwy oraz zapaleniu cewki moczowej, lub w zastosowaniach doodbytniczych.
9. Lek do podawania miejscowego jak określony w zastrz. 6 do stosowania jako środek znieczulający.
10. Lek według zastrz. 1 albo 7 albo 8 albo 9, znamienny tym, ze ma postać płynu do oczu, płukanki do jamy ustnej, aerozolu, kremu lub roztworu dopochwowego.
Przedmiotem wynalazku jest lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego, a konkretnie preparaty zawierające stechiometrycznie obojętną sól kwasu hialuronowego z benzydaminą lub bupiwakainą, przy czym część grup karboksylowych kwasu hialuronowego może być przekształcona w sól z metalem alkalicznym lub metalem ziem alkalicznych.
W europejskim opisie patentowym nr 0197718 BI, z 15 grudnia 1993, opisano zalety zastosowania kwasu hialuronowego i jego frakcji cząsteczkowych jako nośników substancji lekowych do stosowania miejscowego, oraz wykazano, ze połączenia kwasu hialuronowego ze znanymi lekami z różnych dziedzin medycyny wykazują lepsze działanie niz te same leki podawane samodzielnie. W opisie tym podkreślono przede wszystkim, ze stopień biodostępności jest większy od uzyskiwanego w przypadku środków farmaceutycznych stosowanych w przeszłości, przy czym zaletę tą zilustrowano zwłaszcza w dziedzinie okulistyki, gdzie zaobserwowano znaczącą kompatybilność z nabłonkiem rogówki, z doskonałą tolerancją i brakiem efektów uczulających, z tworzeniem się jednorodnych i trwałych błon, idealnie przezroczystych, o doskonałej przyczepności, gwarantujących przedłuzoną biodostępność leku
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT96PD000254A IT1287967B1 (it) | 1996-10-17 | 1996-10-17 | Preparazioni farmaceutiche per uso anestetico locale |
| PCT/IB1997/001288 WO1998017285A1 (en) | 1996-10-17 | 1997-10-17 | Pharmaceutical preparations comprised of salts of hyaluronic acid with local anaesthetics |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL332873A1 PL332873A1 (en) | 1999-10-25 |
| PL190385B1 true PL190385B1 (pl) | 2005-12-30 |
Family
ID=35788361
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL97332873A PL190385B1 (pl) | 1996-10-17 | 1997-10-17 | Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL190385B1 (pl) |
-
1997
- 1997-10-17 PL PL97332873A patent/PL190385B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL332873A1 (en) | 1999-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6224857B1 (en) | Pharmaceutical preparations comprised of salts of hyaluronic acid with local anaesthetics | |
| ES2894802T3 (es) | Activadores de Tie-2 para su uso en el tratamiento de la presión intraocular | |
| CA2096036C (en) | Method for stimulating intracellular synthesis of glutathione using esters of l-2-oxothiazolidine-4-carboxylate | |
| JP2002534400A (ja) | 血管損傷剤としてのコルヒノール誘導体 | |
| CN104640841A (zh) | 用于治疗剂递送制剂的脂质 | |
| ES2664951T3 (es) | Composiciones que comprenden glicosaminoglicanos de baja viscosidad y uso de dicha composición en terapia de cistitis crónica | |
| PL212105B1 (pl) | Farmaceutyczna sól tramadolu, środek leczniczy, zastosowanie soli tramadolu oraz postacie aplikacyjne | |
| JP2016514141A (ja) | Ｂ２−ブラジキニン受容体媒介の血管浮腫の治療方法 | |
| BR112014030285B1 (pt) | Uso de 3-metanosulfonilpropionitrila | |
| NZ537186A (en) | Nasal compositions comprising a mucopolysaccharide and propylene glycol | |
| CN115279731A (zh) | 带电的离子通道阻滞剂及其使用方法 | |
| CN104224691A (zh) | 一种盐酸莫西沙星的外用制剂及其制备方法 | |
| JP5102506B2 (ja) | 抗炎症用医薬組成物 | |
| JPS58131962A (ja) | 新規アミノ酸誘導体の製法 | |
| PL190385B1 (pl) | Lek zawierający sól kwasu hialuronowego ze środkiem znieczulającym do podawania miejscowego | |
| RU2326681C2 (ru) | Средство для лечения гнойно-воспалительных процессов кожи и слизистых оболочек различной этиологии | |
| RU2481834C2 (ru) | Антимикробная композиция для лечения ран и ожогов | |
| WO2019072478A1 (en) | SPECIFIC ACETYL-COA CARBOXYLASE INHIBITORS FOR USE IN THE TREATMENT AND / OR PREVENTION OF ACNE | |
| JPH06329538A (ja) | 皮膚疾患処置用薬剤 | |
| CZ431399A3 (cs) | Způsob výroby farmaceutického prostředku | |
| RU2481835C2 (ru) | Ранозаживляющее средство для местного применения | |
| CN101962323B (zh) | 2-丙烯酰x基-3-取代苯基丙酸类化合物及其用途 | |
| JP2530176B2 (ja) | 眼科治療用組成物 | |
| RU2697411C2 (ru) | Композиция для лечения болезни Паркинсона | |
| JP6842073B2 (ja) | 有効成分としてピラゾール誘導体を含有する、掻痒症を予防又は治療するための医薬組成物、及びそれを検出するスクリーニング方法 |