PL162969B1 - Method of obtaining n-acyl derivatives of monomeric peptideglicane - Google Patents
Method of obtaining n-acyl derivatives of monomeric peptideglicaneInfo
- Publication number
- PL162969B1 PL162969B1 PL28448190A PL28448190A PL162969B1 PL 162969 B1 PL162969 B1 PL 162969B1 PL 28448190 A PL28448190 A PL 28448190A PL 28448190 A PL28448190 A PL 28448190A PL 162969 B1 PL162969 B1 PL 162969B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- pgm
- carboxylic acid
- formula
- monomeric
- acyl
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 claims description 2
- -1 alkyl carboxylic acid Chemical class 0.000 abstract description 12
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 abstract description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 abstract description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 abstract description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 229920006926 PFC Polymers 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 125000000400 lauroyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 125000003074 decanoyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- YQTCQNIPQMJNTI-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropan-1-one Chemical group CC(C)(C)[C]=O YQTCQNIPQMJNTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XOGXLUAMJUQURP-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-2h-1,3-benzothiazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)CSC2=C1 XOGXLUAMJUQURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 125000003696 stearoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisoindole-1,3-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)C(=O)C2=C1 CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJKVBYPPYRIGJH-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-(1,2,3-trimethyl-6-oxabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl)phenol Chemical class CC1C2(C)OC2CC1(C)C1=CC=C(C)C=C1O VJKVBYPPYRIGJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAAKPCRVMGNQOX-UHFFFAOYSA-N C(C(C)(C)C)(=O)O.C1(CCC(N1)=O)=O Chemical compound C(C(C)(C)C)(=O)O.C1(CCC(N1)=O)=O UAAKPCRVMGNQOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXYDCGHEALGDJD-UHFFFAOYSA-N C1(CCC(N1)=O)=O.C(C1=CC=CC=C1)(=O)O Chemical compound C1(CCC(N1)=O)=O.C(C1=CC=CC=C1)(=O)O YXYDCGHEALGDJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011749 CBA mouse Methods 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002001 anti-metastasis Effects 0.000 description 1
- 239000012964 benzotriazole Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- WHQLQYRFIHPMNA-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;oxolane Chemical compound C1CCOC1.CCOC(C)=O WHQLQYRFIHPMNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001031 immunopharmacological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEWVVVMGRBAXIU-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid;pyrrolidine-2,5-dione Chemical compound O=C1CCC(=O)N1.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O CEWVVVMGRBAXIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 125000002811 oleoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- KIDBBTHHMJOMAU-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CCCO KIDBBTHHMJOMAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
- C07K9/005—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure containing within the molecule the substructure with m, n > 0 and m+n > 0, A, B, D, E being heteroatoms; X being a bond or a chain, e.g. muramylpeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
1 . Sposób wytwarzania nowych N-acylo- wych pochodnych monomerycznego peptydo- glikanu o wzorze 1, w którym R oznacza grupe acylowa kwasu C 2-1 8-alkilokarboksylowego o lancuchu prostym, albo kwasu C5-18-alkilo- karboksylowego o lancuchu rozgalezionym, albo nienasyconego kwasu C1 2-1 8-alkenylo- karboksylowego, albo kwasu C 7-1 2-arylokarbo- ksylowego i ich farmakologicznie dopuszczal nych soli, znamienny tym, ze monomeryczny peptydoglikan o wzorze 2 acyluje sie za pomoca poddania go reakcji z kwasem o wzorze R- COOH, w którym R ma znaczenie zdefinio wane w odniesieniu do wzoru 1, przy czym kwas wystepuje w postaci zaktywowanej, w obecnosci zasady. Wzór 1 PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych N-acylowych pochodnych monomerycznego peptydoglikanu (PGM) i ich farmakologicznie dopuszczalnych soli, które są szczególnie wskazane jako immunomodulatory i immunoadiuwanty.
Wiadomo, że monomeryczny peptydoglikan (PGM) o wzorze 2 [Carbohydr. Res., 110, 320-325 (1982)] wykazuje aktywność immunomodulującą [Z.Immun. Forsch., 155,312-328 (1979)] jak i antymetastatyczną Eur. J. Cancer O col, 19,681-686 (1983); Cancer Immunol. Immunother., 15,84-86(1983); [Cancer Immunol. Immunother., 18,49-53 (1984)], jest nietoksyczny i apirogenny. Jest on dobrze rozpuszczalny w wodzie, lecz nierozpuszczalny w rozpuszczalnikach organicznych. Z powodu jego w wysokim stopniu hydrofitowego i lipofobowego charakteru nie jest on zdolny do przenikania przez lipofilowe błony organizmu. Rozmiar hydrofilowości i lipofilowości tych związków może znacząco wpływać na ich aktywność.
Celem wynalazku jest wytwarzanie nowych N-acylowych pochodnych monomerycznego peptydoglikanu o wzorze 1, w którym R oznacza grupę acylową kwasu C2-ie-alkilokarboksylowego o łańcuchu prostym, albo kwasu Cs-ie-alkilokarboksylowego o łańcuchu rozgałęzionym, albo nienasyconego kwasu Ci2-i8-alkenylokarboksylowego, albo kwasu C7-i2-arylokarboksylowego, albo ich farmakologicznie dopuszczalnych soli.
R oznaczający we wzorze 1 acyl, pochodzący z kwasu C2-ie-alkilokarboksylowego o łańcuchu prostym oznacza np. acetyl, aktanoil, dekanoil, lauroil, palmitoil i stearoil.
R oznaczający we wzorze 1 acyl, pochodzący z kwasu Cs-18-alkiiokarboksylowego o łańcuchu rozgałęzionym korzystnie oznacza piwaloil.
R oznaczający we wzorze 1 acyl pochodzący z nienasyconego kwasu Ci2-i8-alkenylokarboksylowego korzystnie oznacza oleoil.
R oznaczający we wzorze 1 acyl pochodzący z kwasu C7-i2-arylokarboksylowego korzystnie oznacza benzoil.
Farmakologicznie dopuszczalne sole nowych N-acylowych pochodnych monomerycznego peptydoglikanu (PGM) obejmują ich sole z zasadami tak nieorganicznymi jak i organicznymi, takie jak sole z metalami alkalicznymi, np. sole sodowe, sole potasowe, sole z metalami ziem alkalicznych, np. sole wapniowe, sole amoniowe i sole z zasadami organicznymi, np. solezetanoloaminą, sole z lrielanoloaminą, oraz inne fizjologicznie tolerowane sole.
Sposób wytwarzania nowych N-acylowych pochodnych PGM o wzorze l polega na tym, że stosuje się metody znane, jako takie, acylowania PGM o wzorze 2 za pomocą poddania go reakcji z odpowiednim kwasem o wzorze R-COOH, w którym R ma znaczenie zdefiniowane odnośnie do
162 969 wzoru 1, w obecności zasady, przy czym kwas występuje w postaci zaktywowanej, np. w postaci bezwodnika, a zwłaszcza w postaci aktywnego estru, np. estru utworzonego w przypadku wzajemnego oddziaływania kwasu z N-hydroksysukcynoimidem, N-hydroksybenzotriazolem, Nhydroksyftalimidem i podobnymi alkoholami. Wytworzenia estrów aktywnych dokonuje się w obecności czynnika odwadniającego, takiego jak dwucykloheksylokarbodwuimid (DCC) i inne zwykłe karbodwuimidy, jak opisano w piśmiennictwie, Ν,Ν-karbodwumidazol, p-toluenosulfonian i inne znane sulfoniany. Warunki reakcji w przypadku użycia tych czynników są opisane w piśmiennictwie. Korzystne są reakcje z udziałem karbodwuimidów, ponieważ przeprowadza się je w temperaturze 20-25°C, z dużą wydajnością. Acylowanie PGM np. bezwodnikiem octowym przeprowadza się w obecności zasady, takiej jak wodorowęglan sodowy, podczas gdy acylowanie odpowiednim estrem aktywnym przeprowadza się w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dwumetyloformamid (DMF) w obecności zasady organicznej jako katalizatora. PGM i estru aktywnego używa się w stosunku 1:1,3 do 1:2 (mol/mol), a PGM i rozpuszczalnika używa się w stosunku 1:30 do 1:100 (wag./obj.). Zasada organiczna występuje jako amina, np. trójetyloamina, a dodaje się ją do PGM w stosunku 1:2 do 1:5 (mol/mol). Reakcję przeprowadza się w temperaturze 20-25°C w ciągu 24 godzin. Przebieg reakcji obserwuje się z wykorzystaniem chromatografii cienkowarstwowej (TLC) w podłożu żelu krzemionkowego jako adsorbenta i w układzie rozpuszczalników odpowiednim do oddzielania produktów od wyjściowych substratów reakcji, takim jak układ rozpuszczalników n-propanol-woda 7:3 (obj./obj.) (układ A).
Produkt otrzymuje się przy dodaniu rozpuszczalnika organicznego, w którym nie jest on rozpuszczalny, takiego jak octan etylu (CH3COOC2H5). Oczyszcza się go zwykłymi metodami, takimi jak chromatografia kolumnowa na rozmaitych adsorbentach, np. żelu krzemionkowym z elucją wyżej wspomnianym układem A, lub na Sephadex z elucją wodą.
Dalszym celem wynalazku jest zapewnienie sposobu wytwarzania farmaceutyków zawierających czynną, ale jeszcze fizjologicznie tolerowaną dawkę nowej N-acylowej pochodnej monomerycznego peptydoglikanu o wzorze 1 lub jej farmakologicznie dopuszczalnej soli, wskazanych jako lecznicze preparaty immunomodulatorowe lub immunoadiuwantowe. Związki czynne można formułować w połączeniu z farmakologicznie dopuszczalnym nośnikiem. Środki farmaceutyczne korzystnie podaje się pozajelitowo.
Aktywność biologiczną związków wytwarzanych sposobem według wynalazku badano na 2-2,5 tygodniowych myszach-samcach CBA. Zwierzęta adaptowano do warunków laboratoryjnych w ciągu co najmniej tygodnia przed każdym badaniem. Skuteczność N-acylowej pochodnej PGM porównywano z wynikami osiągniętymi w kontrolnych grupach myszy, którym podawano fizologiczny roztwór soli (kontrola negatywna) i wyjściowy PGM (kontrola pozytywna). Wszystkie podawane substnacje wprowadzano do organizmu drogą dożylną (i.v.) w pojedynczej dawce 200j^{^//mysz, a odpowiednio lOmg/kg. Obserwowano następujące efekty aktywności immunofarmakologicznej: ciężar śledziony, ilość limfocytów i ilość komórek wytwarzających łysinki (PFC) w teście Jernego [w: Celi Bound Antibodies, Whister Institute Press, Philadelphia, str. 109 (1963)]. Ciężar śledziony wyrażano w mg. Ilość limfocytów śledziony wyrażano wilości absolutnej, podczas gdy PFC wyrażano jako ich ilość całkowitą i jako aktywność 106 limfocytów śledziony. Grupy badane i odpowiadające im grupy kontrolne obejmowały, każda, po 5-7 myszy. Aktywność każdej N-acylowej pochodnej PGM badano co najmniej trzy razy w różnych okresach.
Przeprowadzono analizę statystyczną używając testu t-Studenta i stosując oryginalny program komputerowy Stat Works. Istotność różnic oceniano w dwustronnym teście przy poziomic akceptacji równym lub niższym od 5%. Podsumowane wyniki dotyczące wpływu poszczególnych N-acylowych pochodnych PGM na odpowiedź immunologiczną wskazano w tabeli 1.
162 969
Tabela I
Aktywność immunologiczna N-acylowych pochodnych PGM
| N | Ciężar śledziony | l/p | llosc lunfoeyiow śledziony | l/p | PFC | l/p | PFC/raLhimfocyty/ | l/p | |
| i ; | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| Eksperyment Nr 1 Kontrola | 17 | IO9,1±17,34 | 37,7±7,36 | 745± 34,40 | 185,9X93,04 | ||||
| *< | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 17 | ll 1,7± 10,66 | 35,1 ±5,06 | 82,9±31.71 | 219,1 ±96,98 | ||||
| * | 102 | 93 | 112 | 118 | |||||
| Nr 1637 | 18 | 123,6118,63 | 7,37 | 37,8±6,90 | 93,4±3725 | 219,1±67,H | |||
| % | 113 | 0,05 | 100 | 126 | 118 | ||||
| Eksperyment Nr 2 Kontrola | 11 | 1033±1835 | 38,7±9,16 | J6J±2625 | 1Μ.3Χ742Ι0 | ||||
| 9t | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 11 | 107,5±9,40 | 35,0±6,01 | 762±32,95 | 206.9X11324 | 2,97 | |||
| 4 | 104 | 90 | 135 | 150 | 0,01 | ||||
| Kontrola | 18 | 99,8±I7,14 | 34,2X9.45 | 69,3±42,49 | 190,3±144,16 | ||||
| V | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| Nr 1640 | 19 | 1I3,4±22,28 | 34.119,56 | 95,7±28.45 | 223 | 282,1 ±142,64 | 1,78 | ||
| % | 114 | 100 | 138 | 0,05 | 142 | 0,1 | |||
| Eksperyment Nr 3 Kontrola | 16 | 1202± 17,83 | 38,8±8,19 | 55,7±40,52 | 122.1X80,16 | ||||
| ¢1 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 17 | 138,7± 11,72 | 3,54 | 472±99,53 | 2,71 | 88,8± 72,51 | 156,1 ±102,78 | ||
| 115 | 0,01 | 122 | 0,02 | 159 | 128 | ||||
| Nr 1645 | 18 | 120,4x12,36 | 46.1H 1.70 | 2,08 | 88,5±75,95 | 1542± 111,12 | |||
| <r | 100 | 119 | 0,05 | 159 | 126 | ||||
| Eksperyment Nr 4 Kontrola | 16 | 1202117,83 | 38,8±8,19 | 55,71^^,52 | 122.1180 16 | ||||
| Tc | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 17 | 138.6Χ 11,72 | 3,52 | 47,2X9,52 | 2,71 | 88,8±72,2O | 156.11 102,78 | ||
| % | 115 | 0,01 | 122 | 0,02 | 159 | 128 | |||
| Nr 1646 | 17 | 124,4± 16,54 | 42,1±10.55 | 81,6X79,80 | I69.91151,32 | ||||
| % | 103 | 109 | 147 | , H9 | |||||
| Eksperyment Nr 5 Kontrola | 15 | 121,31 16,3 | 57,1 ±21,44 | 77,5 ±28,59 | 163.6161,00 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 18 | 129,5± 11,80 | 49,5±8,98 | 1O7.7±57,78 | 190,4±79,53 | ||||
| <5 | 107 | 87 | 139 | 116 | |||||
| Nr 1647 | 18 | 135.5±22,6O | 452±8,50 | 2,16 | 125.4±68,45 | 2,49 | 2542x132,36 | 2,44 | |
| 7c | 112 | 79 | 0,05 | 162 | 0,02 | 155 | 0 05 | ||
| Eksperyment Nr 6 Kontrola | 21 | I28,9± 14,26 | 38,8±8,45 | 47,1 ±28,06 | 105,9± 54,24 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| PGM | 23 | I34,3± 13,9 | 43,8x7,82 | 2,04 | 56,0±23,14 | 117 1±48,37 | |||
| % | 104 | 113 | 0,05 | 119 | III | ||||
| Kontrola | 28 | 1^^,(Ot2O,93 | 35,9X9,13 | 57,8±40,45 | 152,5± 127,38 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | |||||
| Nr 164« | 28 | I23,4±23,I5 | 39,l±10,92 | 95,8±75,30 | 2,35 | 266,5±279,40 | 1,95 |
162 969
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | II |
| <7 | 104 | 109 | 166 | 0.05 | 175 | 0.1 | ||||
| Eksperyment Nr 7 | Kontrola | 18 | IO8.4± 16,71 | 41.23:1028 | 86.l±25,80 | 194,0±79.48 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | ||||||
| PGM | 18 | lll.8± 10.68 | 38.8±9.06 | 87.6± 29.76 | 214,4±95.6I | |||||
| ''r | 103 | 94 | 102 | III | ||||||
| Nr 1665 | 17 | 131.7± 14.40 | <41 | 42.3±7.96 | 97.1±41.86 | 210.8±88.40 | ||||
| «t | 121 | 0.01 | 103 | 113 | 109 | |||||
| Eksperyment Nr 8 | Kontrola | 17 | IO6,4± 12.49 | 43.8x10.39 | 77.Ut33.8I | 170,9±93.98 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | ||||||
| PGM | 17 | I12.7± 10.38 | 40.9±7.86 | 76.9±28.55 | 163.6± 72.39 | |||||
| % | 106 | 93 | 100 | 98 | ||||||
| Nr 1668 | 18 | I12.3± 12.08 | 41.9±5.6ć | 85.8±33.17 | 202.7±91.97 | |||||
| % | 106 | 96 | III | 119 | ||||||
| Eksperyment Nr 9 | Kontrola | 16 | 117.4±18,71 | 45.9± 10.47 | 692±23.72 | 139.1 ±50,43 | ||||
| % | 100 | 100 | 100 | 100 | ||||||
| PGM | 18 | 12I.6±I4.54 | 46.7x7.99 | 72.8±22 20 | I41.4±-W.57 | |||||
| % | 104 | 102 | 105 | 102 | ||||||
| Nr 1700 | 18 | 125 5± 19.44 | 42 9x9.82 | 76.4±24.94 | 163.Oi52.95 | |||||
| % | 107 | 94 | 110 | 118 |
W powyższej Tabeli 1 użyto następujących oznaczeń
1637 sól sodowa N-steMoikoRGM, l640*sól sodowa N-benzotioKjM. 1645 sól sodowa N-oktanoiloPGM. 1646 sól sodowa N-dekutotloPGM. 1647 sól sodowa N-lauroto-PjM. 1643 sól sodowa N-palmιiolicoPGM, 1665 sól sodowa N-olcdcoIPGM. 1668 sól sodowa N-acetylo-TOM. 1700 sól sodowa N-piwaJodo^M
Statystycznie istotny wzrost ciężaru śledziony stwierdzono po zastosowaniu soli sodowej N-stearoilo-PGM i soli sodowej N-oleoilo-PGM (odpowiednio 13 i 21% w porównaniu z wartościami kontrolnymi). Względny wzrost ciężru śledziony stwierdzono też po użyciu sok sodowej N-benzoilo-PGM, soli sodowej N-lauroilo-PGM, soli sodowej N-piwaloilo-PGM, ale różnice w porównaniu z wartościami kontrolnymi nie wzrosły w stopniu istotnym, aczkolwiek jasno wyrażają one tendencję do wzmagania aktywności tych pochodnych. Zmiany w ilości limfocytów śledziony (ilość absolutna w 1 ml) różniły się w odniesieniu do każdej z pochodnych. W grupie myszy, w której podano sól sodową N-lauroilo-PGM wykryto statystycznie istotne obniżenie o 20% w porównaniu z wartościami kontrolnymi. U myszy, na które działano solą sodową Noktanoilo-PGM doprowadziło to do statystycznie istotnego wzrostu ilości limfocytów śledziony (19%). 4-6% zmniejszenie ilości limfocytów śledziony wykryto u myszy po podaniu pochodnej piwoloilowej i acetylowej, podczas gdy 3-9% wzrost stwierdzono u myszy, na które działano oleilową, dekanoilową i palmitoilową pochodną PGM. Chociaż oczywiste były pewne tendencje w osiągniętych zmianach, te ostatnie nie były statystycznie istotne. Sole sodowe stearoilowej i benzoilowej pochodnej PGM nie wywierały wpływu na ilość limfocytów śledziony. Praktycznie wszystkie badane substancje wywoływały wzrost PFC, który różnił się od 10 do 66% ponad wartości kontiolne. Jednak statystycznie istotną różnicę stwierdzono tylko w przypadku soli sodowych N-benzoilowej, N-lauroilowej i N-palmitoilowej pochodnej PGM. Wszystkie użyte substancje wzmagały aktywność PFC, jak to było oczywiste w odniesieniu do ilości limfocytów śledziony, a która różniła się od 9 do 75% ponad wartości stwierdzone w kontrolnej grupie myszy. Statystycznie istotną różnicę stwierdzono w przypadku benzoilowej i acetylowej pochodnej PGM, gdzie różnice w porównaniu z wartościami kontrolnymi praktycznie osiągnęły poziom statystycznie istotny (0,5 < p < 0,1).
Na podstawie osiągniętych czynników można wyciągnąć wniosek, że wszystkie badane pochodne monomerycznego peptydoglikanu wykazują pewną aktywność immunostymulującą, ale poszczególne pochodne różnią się w swojej skuteczności. Jedna z możliwych interpretacji różnorodności osiągniętych różnic w ilości limfocytów i wzroście ciężaru śledziony może polegać na
162 969 odmiennych mechanizmach działania PGM i jego N-acylowych pochodnych wytwarzanych sposobem według wynalazku na komórkowy układ immunologiczny.
Inną możliwą przyczyną może być to, że pochodne PGM są podobne co do mechanizmu działania, ale różnią się co do aktywności własnej. Wpływ na odporność humoralną jest oczywisty, co wynika ze zmian aktywności PFC i różni się w pewnym rozmiarze od wpływu na ilość limfocytów śledziony. Znaczny wpływ na całkowitą aktywność PFC stwierdzono w przypadku benzoilowej, lauroilowej pochodnej PGM, które nie zmieniają zasadniczo lub nie obniżają ilości limfocytów w 1 mg tkanki śledzionowej.
Strukturalne modyfikacje w cząsteczce PGM doprowadziły do nowej i nieoczywistej aktywności biologicznej N-acylowych pochodnych PGM wytarzanych sposobem według wynalazku z wykazywanej na dwu odmiennych drogach: znaczny wpływ na komórkową odpowiedź immunologiczną, charakterystyczny dla lauroilowej i oktanoilowej pochodnej PGM, a z drugiej strony, benzoilowa, Iauroilowa i palmitoilowa pochodna PGM były jeszcze bardziej zaangażowane w odporności humoralnej. Otrzymane wyniki wykazały wyższość, pod względem aktywności, laurollowej pochodnej PGM, a to z powodu jej wpływu na odporność komórkową i humoralną. Oprócz tego, wykazuje ona wyższość, pod względem aktywności, w porównaniu z wyjściowym PGM, gdy podaje się ją w tym samym stężeniu.
Wynalazek objaśniają następujące przykłady.
Przykład I. Wytwarzanie soli sodowej N-acetylo-PGM.
Do roztworu 500 mg (0,495 mmola) PGM w 7 ml wody dodaje się 2,75 ml nasyconego wodnego roztworu wodorowęglanu sodowego (NaHCOa) i całość chłodzi na łaźni lodowej w temperturze 5°C. Do ochłodzonej mieszaniny wkrapla się 2,75 ml (29 mmoli) bezwodnika octowego i całość miesza się w ciągu 24 godzin w temperaturze 20°C. Następnie mieszaninę zatęża się przez odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymuje się 0,95 g oleistego osadu, który rozpuszcza się w 2,5 ml wody i rozdziela na kolumnie upakowanej 150 ml Sephadex G-25 fine, a następnie eluuje wodą. Frakcje zawierające produkt łączy się i lifilizuje. Wydajność 490 mg (92%).
Temperatura topnienia 196-188°C, UVmax(H2O) (nm):202; IRKBr(cm '1) :3400-3240, 1660, 1550,1410.1H NMR (D2O) (ppm): 1,90 (s, 3H CHaCONH^pm), 1,96 (s, 3H CHsCONH-G1c), 2,03 (s, 3H CHsCONH-Mur).
Skróty: A2pm — dwuaminopimelil; Mur = muraminoil, Gic — glukozaminyl.
Przykład II. Wytwarzanie N-stearoilo-PGM.
Do roztworu 1,546 mg (1,53 mmola) PGM w 26,6 ml DMF dodaje się 800 mg (2,09 mmola) stearynianu sukcynoimidu i 0,4 ml (2,18 mmola) trójetyloaminy (TEA) i miesza się w ciągu 20 godzin w temperaturze 20-25°C. Powstaje żelowata zawiesina, do której wkropla się przy mieszaniu 180 ml octanu etylu i mieszanie kontynuuje się w ciągu dalszych 5 godzin. Osad oddziela się za pomocą sączenia i suszy. Wydajność 2g. Produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na 25 g żelu krzemionkowego i elucji układem rozpuszczalników A. Frakcje zawierające produkt łączy się i zatęża przez odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem. Wydajność l,44g (57%).
Temperatura topnienia 217-220°C, UVmax(H2O) (nm):204; IRKB,(cm Ί): 3280, 2910, 2350. 1635,1530.
Przykład III. Wytwarzanie N-piwaloilo-PGM.
Do roztworu 500 mg (0,495 mmola) PGM w 10 ml DMF dodaje się 137 mg (0,688 mmola) piwalinianu sukcynoimidu i 0,13 ml (0,7 mmola) trójetyloaminy (TEA) i miesza się w ciągu 24 godzin w temperaturze 25°C. Do klarownego roztworu wkrapla się 50 ml octanu etylu, utworzony osad utrzymuje się przy mieszaniu w ciągu 2 godzin i odsącza się. Osad przemywa się 2 razy po 5 ml octanu etylu i suszy. Wydajność 550 mg. Produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej i clucji układem rozpuszczalników A. Frakcje zawierające produkt łączy się i zatęża za pomocą odparowania rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem. Wydajność 270 mg (49,8%).
Temperatura topnienia 202-204°C, UVmax(H2O) (nm):201; IRKBr(cm '1):3400, 3300, 3080, 3050,2980, 1650, 1540.
162 969
Przykład IV. Wytwarzanie N-oleilo-PGM.
Do roztworu 500 mg (0,495 mmola) PGM w 9 ml DMF dodaje się 258 mg (0,679 mmola) oleinianu sukcynoimidu i 0,13 ml (0,7 mmola) trójetyloaminy (TEA) i całość miesza się w ciągu 24 godzin w temperaturze 25°C. Wkrapla się 50 ml octanu etylu i utworzony osad utrzymuje przy mieszaniu w ciągu 3 godzin. Osad oddziela się za pomocą sączenia i suszy. Wydajność 680 mg. Osad oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym i elucji układem rozpuszczalników A. Frakcje zawierające produkt łączy się i zatęża za pomocą odparowania rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem. Wydajność 0,345 g (54,6%).
Temperatura topnienia 204-206°C, UVmax(H2O) (nm): 198; IRKBr(cm _1) :3300, 2950, 2875, 1640,1555.
Przykład V. Wytwarzanie N-benzoilo-PGM.
Do roztworu 1346 mg (1,33 mmola) PGM w 23,3 ml DMF dodaje się 400 mg (1,825 mmola) benzoesanu sukcynoimidu i 0,35 ml trójetyloaminy (TEA) i całość miesza się w ciągu 24 godzin w temperaturze 25°C. Wkrapla się 160 ml octanu etylu i utworzoną zawiesinę utrzymuje przy mieszaniu w ciągu 5 godzin. Osad oddziela się za pomocą sączenia, przemywa 2 razy po 10 ml octanu etylu i suszy. Wydajność 1,45 g. Produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym i elucji układem rozpuszczalników A. Frakcje zawierające produkt łączy się i zatęża za pomocą odparowania rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem. Wydajność l,04g (6,91%).
Temperatura topnienia 173-175°C. UVmax(H2O)(nim): 203,224 (sh); IRKBr(cm *) :3260,1680, 1515.
Przykład VI-IX. W sposób analogiczny do sposobu opisanego w przykładach II - V wytwarza się następujące pochodne PGM: oktanoilową, dekanoilową, lauroilową i palmitoilową. Główne fizycze cechy charakterystyczne tych pochodnych przedstawione są w tabeli 2.
Tabela 2
Główne cechy charakterystyczne N-oktanoilowej, N-dekanoilowej, N-lauroilowej i N-palmitoilowej pochodnej PGM
| N-acylo-PGM | Temperatura topnienia °C | UVmax(H2O) (nm) | IRKb (cm/ | ||||
| hetanoilo | 194-195 | 203 | 3280, | 2930, | 1655, | 1638, | 1545 |
| dekanoilo | 196-197 | 203 | 2990, | 1610, | 1580, | 1090, | |
| lauroilo | 203-205 | 204 | 3280, | 2920, | 2850, | 1655, | 1543 |
| palmitoilo | 205-208 | 203 | 3280, | 2920, | 2845, | 1635, | 1520 |
Przykład X. Wytwarzanie N-stearoilo-PGM.
Do roztworu 284,5 mg (1 mmola) kwasu stearynowego w 25 ml mieszaniny rozpuszczalników octan etylu- tetrahydrofuranu (1:1, obj./obj.) dodaje się 162,2 ml (1,2 mmola) N-hydroksybenzotiazolu (HOBt) i 247 mg (1,2 mmola) DCC i miesza się w ciągu 16 godzin w temperaturze 20-25°C. Otrzymany osad oddziela się za pomocą sączenia i przemywa na sączku 2 razy po 3 ml octanu etylu. Łączy się ług macierzysty i ekstrakty i odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem. 470 mg surowego produktu oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na 5 g żelu krzemionkowego i elucji układem rozpuszczalników chloroform-metanol (100:1, obj./obj.). Otrzymuje się 350 mg oczyszczonego stearynianu N-benzotriazolu, który rozpuszcza się w 20 ml DMF i dodaje 511 mg (0,499 mmola) PGM i 0,13 ml trójetyloaminy, po czym mieszaninę miesza się w ciągu 16 godzin w temperaturze 20-25°C. Powstaje żelowaty osad, do którego dodaje się 88 ml octanu etylu i kontynuuje się mieszanie w ciągu dalszej godziny. Osad oddziela się za pomocą sączenia, zawiesza ponownie w 45 ml octanu etylu, miesza w ciągu godziny i jeszcze raz odsącza i suszy. Wydajność 621 mg. Produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na 8g żelu krzemionkowego i elucji układem rozpuszczalników A. Frakcje zawierające produkt łączy się, odparowuje się rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy się produkt. Wydajność
542,5 mg (85%).
Produkt jest identyczny z produktem wytworzonym sposobem opisanym w Przykładzie II.
162 969
Przykład XI. Wytwarzanie soli sodowej N-stearoilo-PGM.
1276,5 mg (1 mmol) N-stearoilo-PGM dodaje się do 20 ml wody, w której rozpuszczono równomolową ilość wodorotlenku sodowego. Klarowny roztwór miesza się w ciągu godziny i liofilizuje. Wydajność 1281 mg.
Przykład XII. Wytwarzanie soli sodowej N-stearoilo-PGM.
Zgodnie ze sposobem z przykładu II, produkt surowy, otrzymany po wytrąceniu za pomocą dodania octanu etylu, zawiesza się w wodzie, zobojętnia za pomocą dodania wodorotlenku sodowego do pH 7, po czym klarowny roztwór nanosi się na kolumnę upakowaną Sephadex G-25 fine i eluuje wodą. Frakcje zawierające produkt, identyczny z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie XI, łączy się i liofilizuje.
W sposób analogiczny do sposobu opisanego w przykładach XI i XII wytwarza się dalsze farmakologicznie dopuszczalne sole.
CH^H CHjOH
J---Λ
NHOCCH
DCCHa NH0CCH, ć CH3 ó ch3chconhćhconhch-conh2 ch2 ćh2
CH2 CH3 CHj conhchconhćhconhćhcooh ch, ćh2 ch2
Wzór 1
R-HN CH CONH,
OH
OH / £ CH£HCONHĆI
NHOCCH3
HCONHCH-CONH2
CH2 ćH2 CH3 CH3
ĆONHCHCONHĆHCONHĆHCOOH
CH3 CH
Wzór 2
CH,
CH2 ch2
H-HN- CH-CONH2
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena l0 000 zł
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania nowych N-acylowych pochodnych monomerycznego peptydoglikanu o wzorze 1, w którym R oznacza grupę acylową kwasu C2-ie-alkilokarboksylowego o łańcuchu prostym, albo kwasu Cs-ie-alkilokarboksylowego o łańcuchu rozgałęzionym, albo nienasyconego kwasu Ci2-i8-alkenylokarboksylowego, albo kwasu C7-i2-arylokarboksylowego i ich farmakologicznie dopuszczalnych soli, znamienny tym, że monomeryczny peptydoglikan o wzorze 2 acyluje się za pomocą poddania go reakcji z kwasem o wzorze R-COOH, w którym R ma znaczenie zdefiniowane w odniesieniu do wzoru 1, przy czym kwas występuje w postaci zaktywowanej, w obecności zasady.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że kwas o wzorze R-COOH występuje w postaci bezwodnika lub estru.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| YU00626/89A YU62689A (en) | 1989-03-27 | 1989-03-27 | N-acyl derivatives of peptidoglican monomer, their pharmaceutically acceptable salts, process for preparing thereof and their use as immunity modulators and immunoadjuvant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL162969B1 true PL162969B1 (en) | 1994-01-31 |
Family
ID=25550749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL28448190A PL162969B1 (en) | 1989-03-27 | 1990-03-27 | Method of obtaining n-acyl derivatives of monomeric peptideglicane |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5153173A (pl) |
| EP (1) | EP0390039A3 (pl) |
| JP (1) | JPH04193898A (pl) |
| BG (1) | BG51456A3 (pl) |
| CA (1) | CA2013065A1 (pl) |
| CS (1) | CS149090A2 (pl) |
| DD (1) | DD296085A5 (pl) |
| HU (1) | HU202546B (pl) |
| PL (1) | PL162969B1 (pl) |
| RO (1) | RO105699B1 (pl) |
| RU (1) | RU1779258C (pl) |
| YU (1) | YU62689A (pl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0492478B1 (en) * | 1990-12-21 | 1995-07-19 | Pliva Farmaceutska, Kemijska, Prehrambena I Kozmeticka Industrija S P.O. | Tert-butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-peptidoglycan monomer and 125 I-labelled derivative thereof, their preparation and use |
| EP0600974A1 (en) * | 1991-08-15 | 1994-06-15 | PLIVA Handels GmbH | Preparation of medicaments containing the peptidoglycan monomer or its derivatives |
| IL137584A0 (en) | 1998-02-02 | 2001-07-24 | Univ Princeton | SUBSTRATE ANALOGS FOR MurG, METHODS OF MAKING SAME AND ASSAYS USING SAME |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| YU40472B (en) * | 1977-03-22 | 1986-02-28 | Pliva Pharm & Chem Works | Process for obtaining the basic repeated disaccharide-pentapeptide unit of peptidoglycane from the peptidoglycane complex generated in the submersion culturing of microorganisms |
| JPS58198496A (ja) * | 1982-05-14 | 1983-11-18 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | グルコサミニルムラミルペプチド誘導体 |
| YU45382B (en) * | 1986-11-19 | 1992-05-28 | Pliva Sour Zagreb | Process for preparing complex of n-acethyl-glucosis-aminyl-n-acethyl-muramoil-l-alanyl-d-izoglutaminyl-(l)-mezodiaminopimelyl-(d-amid)-(l)-al |
-
1989
- 1989-03-27 YU YU00626/89A patent/YU62689A/xx unknown
-
1990
- 1990-03-26 EP EP19900105723 patent/EP0390039A3/en not_active Withdrawn
- 1990-03-26 RU SU904743571A patent/RU1779258C/ru active
- 1990-03-26 HU HU901831A patent/HU202546B/hu not_active IP Right Cessation
- 1990-03-26 CA CA002013065A patent/CA2013065A1/en not_active Abandoned
- 1990-03-26 DD DD90339076A patent/DD296085A5/de not_active IP Right Cessation
- 1990-03-27 CS CS901490A patent/CS149090A2/cs unknown
- 1990-03-27 JP JP2075786A patent/JPH04193898A/ja active Pending
- 1990-03-27 PL PL28448190A patent/PL162969B1/pl unknown
- 1990-03-27 US US07/499,586 patent/US5153173A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-03-27 RO RO144579A patent/RO105699B1/ro unknown
- 1990-03-27 BG BG91592A patent/BG51456A3/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD296085A5 (de) | 1991-11-21 |
| RU1779258C (ru) | 1992-11-30 |
| US5153173A (en) | 1992-10-06 |
| HU901831D0 (en) | 1990-08-28 |
| CA2013065A1 (en) | 1990-09-27 |
| HUT53661A (en) | 1990-11-28 |
| EP0390039A2 (en) | 1990-10-03 |
| YU62689A (en) | 1991-02-28 |
| RO105699B1 (ro) | 1992-11-30 |
| BG51456A3 (en) | 1993-05-14 |
| CS149090A2 (en) | 1991-08-13 |
| JPH04193898A (ja) | 1992-07-13 |
| HU202546B (en) | 1991-03-28 |
| EP0390039A3 (en) | 1991-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0114787B1 (de) | Neue Peptidderivate | |
| GB1570625A (en) | Glucosamine derivatives and a process for their manufacture | |
| NZ225506A (en) | Polyethylene glycol carbamates, metal complexes thereof and pharmaceutical compositions | |
| NZ270828A (en) | Lipopeptide a1437 derivative and pharmaceutical compositions thereof | |
| CA2004190A1 (en) | New lysosphingolipid derivitives | |
| EP0041896B1 (en) | Immunologically active dipeptidyl 2-amino-1,2-dideoxy-d-glucose derivatives and methods of preparation | |
| Charon et al. | Chemical synthesis and immunological activities of glycolipids structurally related to lipid A | |
| US4310514A (en) | Immunologically active dipeptidyl 5-0,6-0-acyl-2-amino-2-deoxy-D-glucofuranose derivatives and methods of preparation | |
| Reddy et al. | Synthesis and biological evaluation of novel 2-azido muramyl dipeptide as NOD2 agonistic adjuvants | |
| PL162969B1 (en) | Method of obtaining n-acyl derivatives of monomeric peptideglicane | |
| DE69009795T2 (de) | Muramylpeptid-Derivate und diese enthaltende immunregulierende Zusammensetzungen. | |
| EP0060999B1 (de) | Galactopyranoside Verbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Antigene oder Immunadsorbentien | |
| US4851446A (en) | Immunosuppressing method | |
| US4764523A (en) | Novel carbonic acid esters | |
| AU611111B2 (en) | Urea derivatives of desferrioxamine B (and O-acylate and O-carbamoyl derivatives thereof) | |
| JPH0617350B2 (ja) | 新規なグルタミン酸誘導体及びそれらの塩類、それらの製造法、薬剤としての使用並びにそれらを含有する組成物 | |
| EP0410883A2 (en) | Di-lysogangliosides derivatives | |
| JPH0560474B2 (pl) | ||
| AU658277B2 (en) | Amino sugar derivatives | |
| US5905071A (en) | Glycosylamides of 2-aminoacylamino-2-deoxy sugars | |
| US5656601A (en) | Acylated splenopentins, methods for their synthesis and their use | |
| JPH0242052A (ja) | カルバモイル化ヒドロキサミン酸誘導体及びその製造方法 | |
| JPS61275299A (ja) | デオキシムラミルジペプチド誘導体 | |
| US5108990A (en) | Glutamic acid derivatives | |
| WO1991004268A1 (en) | [N-(η-GLUTAMYL)GLYCYL]ALANINE DERIVATIVES |