PL145455B1 - Method of obtaining novel derivatives of l-2,3-diaminopropanic acid which are characterized by structure of dipeptides - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania nowych pochodnych kwasu L-2,3-diaminopro- panowego o strukturze dipeptydów o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym R jest reszta alaniny, metioniny, waliny, norwaliny, leucyny, norieucyny, kwasu°C-aminomaslowego lub feny- loalaniny. Dotychczas z J. Antibiot 25, 137 - 140, 1972 - B.B. Molloy et al znany Jest anty¬ biotyk o symbolu kodowym A 19009. bedacy N^-fumaranoilo^i-2,3-diaminopropanoilo-L-alanina, otrzymywany na drodze fermentaoji. Antybiotyk ten wykazuje slaba aktywnosc biologiczna w sto¬ sunku do niektóryoh grzybów, natomiast nieznana jest jego aktywnosc przeciwko grzybom z ro¬ dzaju Candida. Pochodne kwasu L-2,3-diaminopropanowego o strukturze dipeptydów sa dotychczas nieznane.Sposób otrzymywania nowych pochodnych kwasu L-2,3-diaminopropanowego o strukturze dipep¬ tydów o wzorze ogólnym przedstawionym na rysunku, w którym R ma podane wyzej znaczenie, we¬ dlug wynalazku charakteryzuje sie tym, ze monoester metylowy kwasu fumarowego aktywuje sie i poddaje reakoji z sola sodowa kwasu N -t-butoksykarbonylo-L-2,3-diaminopropanowego w srodo¬ wisku polarnego rozpuszczalnika organicznego lub jego mieszaniny z woda, uzyskany kwas N -t-butoksykarbonylo, N^-4-metoksyfumarylo-L-2f3-diaminopropanowy przeprowadza sie w ester aktywny, którym aoyluje sie aminokwas jednoaminojednokarboksylowy, zas po uplywie 10 f 12 go¬ dzin uzyskany N-chroniony dipeptyd wydziela sie z mieszaniny poreakcyjnej, usuwa ochrone grupy aminowej, a produkt koncowy w postaci soli izoluje np. przez krystalizacje i ewentual¬ nie przeprowadza w wolny kwas* Czynnikiem aktywujacym monoester alkilowy kwasu fumarowego i kwasu N2-t-butokeykarbonylo, N5-4-metoksyfumarylo-L-2,3-diaminopropanowy jest N-hydroksysukoynoimid. Jako polarny rozpusz¬ czalnik organiozny stosuje sie tetrahydrofuran lub mieszanine jednowodorotlenowego alkoholu alifatycznego o dlugosoi lancucha C1 ^ C5 z woda. Tozsamosc uzyskanych pochodnych stwierdzono przy pomocy spektrometrii masowej, analizy elementarnej i spektroskopii protanowego rezonansu magnetycznego. Wartosc jonów masowych okreslono przy pomooy spektrometrii masowej technika 145 4552 145 455 desorpoji polem - field desorption. Przedmiotowe pochodne wykazuja aktywnosc przeoiwdrobno- ustrojowa, w tym nleoozeklwanie wysoka aktywnosc przeciwgrzybowa wobeo Candida albicane.^Oznaczenie aktywnosci przeciwgrzybowej wykonano metoda rozcienozen seryjnych w podloza plyn¬ nym YNB (Yeetet Nitrogen Base), zawierajacym 2% flukozy, w temperaturze 30°C, czas odczytu 48 godzin.Zaleta wynalazku jest mozliwosc otrzymania nietoksycznych lub malo toksycznych zwiazków o aktywnosci przeciwdrobnoustrojowej. Uzyskane pochodne oprócz aktywnosci przeciwbakteryj- nej wykazuja zwlaszcza aktywnosc przeciwgrzybowa, a ioh dzialanie polega na specyficznej inhibicji syntezy glukozaniny, co prowadzi do zahamowania biosyntezy sciany komórkowej drobnoustroju* Brak aktywnosci inhibioyjnej w uzyskanych przez nas zwiazkach w stosunku do innych enzymów wplywa na to9 ze przedmiotowe pochodne nie sa toksyozne dla organizmów zwie- rzeoych. Ponadto, zwiazki przeoiwgrzybowe dzialajace w oparciu o inne mechanizmy sa tok¬ syozne z np, zwiazki blonowoczynne, makro1idy pollenowe, inhibitory syntezy chitynowej - - np. antybiotyk poliokeyna, inhibitory biosyntezy storoli - np. pochodne imidarolu jak ketoconazole. Poza tym, znane zwiazki dzialajace na synteze glukozaminowa lecz niespecy¬ ficzne, dzialajace równiez na inne enzymy - np. azoseryna, DON itp. sa silnie toksyczne.Poohodne kwasu L^2,3-diaminopropanowego o strukturze dipeptydów oraz sposoby ich otrzymy¬ wania ilustruja podane nizej przyklady.Przyklad I* 6*12 g (30 mil) kwasu N -t-butoksykarbonylo-L-2,3-diaminopropano- wego rozpuszcza sie w mieszaninie 60 ml wody i 20 ml metanolu oraz dodaje 2,52 g (30 mM) kwasnego weglanu sodu* Mieszanine schladza sie do 0°C i przy silnym mieszaniu dodaje 6.81 g (30 mM) eetru N-hydroksysukoynoinidowo-metylowego kwasu fumarowego. Reakcje prowa¬ dzi sie przez 4 godziny, a po tym czasie metanol odparowuje sie pod zmniejszonym cisnie¬ niem, pozostalosc zalewana 1 N kwasem solnym do pH-2. Uzyskany produkt kilkakrotnie ekstra¬ huje sie octanem etylu, warstwe organiczna przemywa JO% roztworem chlorku sodu, suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszozalnik i krystalizuje z mieszaniny octanu z heksanem. Uzyskuje sie 7*2 g kwasu N2-t-butoksykarbonylo, N^-4-metokeyfumarylo-L-2,3-di- aminopropanowego o tt. 72 - 74°C, oo etanowi 76$ wydajnosci teoretycznej. 3.16 g (10mM) kwa¬ su H -t-butoksykarbonylo, N*-4^etok8yfumaiylo-L-2,3^iaminopropanowego i 1.15 g (lOmM) N-hy- droksysukcynoimidu rozpuszcza sie w 50 ml tetrahydrofuranu, chlodzi do 0°C i dodaje 2*25 g (11 mM) dlcykloheksylokarboiimidu w 20 ml tetrahydrofuranu. Reakcje prowadzi sie przez 1 godzine w temperaturze 0 C, a nastepnie przez 24 godziny w temperaturze pokojowej.Po tym czasie odsacza sie dicykloheksylomocznik, zas filtrat odparowuje do suoha pod zmniej¬ szonym olsnieniem. Otrzymuje sie 3.92 g eatru N-liydroksysukcynoimidowego kwasu N2-t-buto~ ksykarbonylo, N*-4^etoksyfumai7lo-L-2,3-diaminopropanowegof co stanowi 95JI wydajnosci teo¬ retycznej. Do schlodzonego roztworu 0,74 g (5 mM) L-metioniny i 0*42 g (5 mM) kwasnego we¬ glanu sodu w 10 ml wody dodaje sie przy silnym mieszaniu 2.065 g (5 mM) estru N-hydroksy- sukoynoimldowego kwasu H -t-butoksykarbonylo, N*-4-metokeyfuraa:ttflo-L-2,3-diamidopropanowego w 10 ml tetrahydrofuranu i pozostawia na 10 godzin. Nastepnie odparowuje sie rozpuszczalnik, pozostalosc rozpuszcza sie w 10 ml wody 1 zakwasza 1 N kwasem solnym do pH s 2, a produkt reakcji kilkakrotnie ekstrahuje octanem etylu* Warstwe organiczna przemywa sie woda, suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje. Pozostalosc kzystalizuje sie z octanu etylu i heksanu. Otrzymuje sie 1,96 g N -t-butoksykarbonylo, N*-4-metoksyfumarylo L-2,3-diamino- propanoilo-L-metioniny, co stanowi 99$ wydajnosci teoretycznej. 8,89 g (2 mM) N2-t-butoksy- karbonylo, N*-4^etoksyfumaxylo-L-2,3-diamlnopropanoilo-L-metioniny rozpuszcza sie w 20 ml 2N chlorowodoru w dioksanie i pozostawia na 3 godziny w temperaturze pokojowej, do utworze¬ nia chlorowodorku N^-4-metoksyfumaiylo-L-2,3-diaminopropanoilo-L-*Qetioniny. Nastepnie odpa¬ rowuje sie chlorowodór i dioksan, pozostalosc krystalizuje sie z mieszaniny metanolu 1 ete¬ ru etylowego. Otrzymuje sie 0,55 g chlorowodorku N^-4-metok3yfurmarylo-L-2,3-diaminopropa- noilo-L-*ietioniny o tt. 170 - 172°C, co stanowi 82fi wydajnosci teoretycznej. MIC = 3,2^g/ml, Przyklad II- VII. Analogicznie jak w przykladzie I otrzymano nastepujace po¬ chodne kwasu L-2,3"diaminopropanowego o strukturze dipeptydów, przedstawione w ponizszej tabelis145455 3 Tabela 1 Przyklad II III IV V VI VII Nazwa pochodnej N*-4-me toksyfumary lo-L-2, 3-diaminopropa- noilo-L-walina N*-4-me toksyfumarylo-L-2,3-diaminopropa- noilo-L-norwalina N*-4 -me toksyfumarylo-L-2,3-diaminopropa- noilo-L-leucyna N*-4-*ietoksyfumarylo-L-2,3-diaminopropa- noilo-L-norleuoyna kwaa N-/N*-4-metoksyfumary lo-L-2,3-diamino- propanoilo-L-2-aminobutanowy kwas H*-4-«ietoksyfumarylo-L-2,3-diaminopro- panoilo-L-fenyloalaniny Otrzym. zgodnie z przykl.I I I I I I Temperatura topnienia 172 - 174°C 189 - 190°C 175 - 178°C 178 - 180°C 180 - 182°C 183 - 185°C Zastrzezenie patentowe Sposób otrzymywania nowych pochodnych kwasu L-2,3-diaminopropanowego o strukturze di- peptydów o wzorze ogólnym przedstawionym na rysunku, w którym R jest reszta alaniny, metio- niny, waliny, norwaliny, leucynyt norleucyny. kwasu oC -aminoraaslowego lub fenyloalaniny, znamienny tym, ze monoester metylowy kwasu fumarowego aktywuje sie N-bydroksy- sukcynolmldem i poddaje reakoji z sola sodowa kwasu N-t-butoksykarbonylo-L-2,3-diaminopro- panowym w srodowisku tetranydrofuranu lub mieszaniny jednowodorotlenowego alkoholu alifa¬ tycznego o dlugosci lancucha C1 f C5 z woda i uzyskany kwas N^-t-butoksykarbonylo, N^-4-me- toksyfumarylo-L-2,3-<3iaminopropanowy aktywuje sie N-hydroksysukoynoimidem i aoyluje nim aminokwas jednoaminojednokarboksylowy, zas po uplywie 10 f 12 godzin uzyskany H-chroniony dipeptyd wydziela sie z mieszaniny poreakcyjnej, usuwa ochrone grupy aminowej, a produkt koncowy w postaci soli izoluje korzystnie przez krystalizacje i ewentualnie przeprowadza w wolny kwas.HN-C0-OKH-C00CH, HJKH-COR PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób otrzymywania nowych pochodnych kwasu L-2,3-diaminopropanowego o strukturze di- peptydów o wzorze ogólnym przedstawionym na rysunku, w którym R jest reszta alaniny, metio- niny, waliny, norwaliny, leucynyt norleucyny. kwasu oC -aminoraaslowego lub fenyloalaniny, znamienny tym, ze monoester metylowy kwasu fumarowego aktywuje sie N-bydroksy- sukcynolmldem i poddaje reakoji z sola sodowa kwasu N-t-butoksykarbonylo-L-2,3-diaminopro- panowym w srodowisku tetranydrofuranu lub mieszaniny jednowodorotlenowego alkoholu alifa¬ tycznego o dlugosci lancucha C1 f C5 z woda i uzyskany kwas N^-t-butoksykarbonylo, N^-4-me- toksyfumarylo-L-2,3-<3iaminopropanowy aktywuje sie N-hydroksysukoynoimidem i aoyluje nim aminokwas jednoaminojednokarboksylowy, zas po uplywie 10 f 12 godzin uzyskany H-chroniony dipeptyd wydziela sie z mieszaniny poreakcyjnej, usuwa ochrone grupy aminowej, a produkt koncowy w postaci soli izoluje korzystnie przez krystalizacje i ewentualnie przeprowadza w wolny kwas. HN-C0-OKH-C00CH, HJKH-COR PL