NO844494L - Konjugate makromolekulaere forbindelser paa hemoglobin, og deres fremstilling og preparater derav - Google Patents

Konjugate makromolekulaere forbindelser paa hemoglobin, og deres fremstilling og preparater derav

Info

Publication number
NO844494L
NO844494L NO844494A NO844494A NO844494L NO 844494 L NO844494 L NO 844494L NO 844494 A NO844494 A NO 844494A NO 844494 A NO844494 A NO 844494A NO 844494 L NO844494 L NO 844494L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
derivatives
hemoglobin
phosphates
contain
polymer
Prior art date
Application number
NO844494A
Other languages
English (en)
Inventor
K H Schmidt
H Feller
Original Assignee
Intermedicat Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Intermedicat Gmbh filed Critical Intermedicat Gmbh
Publication of NO844494L publication Critical patent/NO844494L/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
    • C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
    • C07K14/805—Haemoglobins; Myoglobins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/813—Carrier is a saccharide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin og som som makromolekyl inneholder et addukt av ett eller flere vannoppløselige, fysiologiske risikofrie polymerer på en anjonisk ligand samt renset, fra endogene ligander isolert humanhemoglobin A, hvorved makromolekylet alt efter kravene oppviser variabel molekylvektsfordeling på 400 til 500.000 dalton og reversibelt er bundet ikke-kovalent over liganden til det allosteriske bindingssentrum hos hemoglobin, en fremgangsmåte til fremstilling av slike kojugater samt legemidler som innholder slike konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin.
Blod- henholdsvis plasmatap ved operasjoner eller skader på det menneskelige legemet kan utlignes ved infusjon av fullblod eller, på grunn av de risiki som medfølger infusjon av full blod, ved infusjon av bloderstat-ningsmidler eller blodplasmafortynningsmidler som delvis også oppfyller oksygenoverførende funksjoner.
For tiden beskrives det i det vesentlige to forskjellige innfallsvinkler for utvikling av oksygenoverførende blod-erstatningsvæsker.
Således beskrives det f.eks. i "Med. Welt" 32, 1338 (1981) og "Med. Lab. Sei." 39, 45 (1982) fluorkarboner som blod-gasstransporterende bloderstatningsmiddel. Den mest bety-delige mangel ved fluorkarbonene som foreligger i form av emulsjoner, består i at de hverken helt og holdent kan skilles ut av organismen og heller ikke nedbygges de slik at de anrikes i organer som lever eller milt og kan påvises selv efter flere år. En generell anvendelse hindres og-så ved at det er nødvendig med en oksygenrik atmosfære for. ånding. I tillegg opptrer det åpenbart lagringsproblemer.
Den andre innfallsvinkel, nemlig hemoglobinholdige oppløs-ninger som bloderstatningsmiddel eller blodplasmafortyn ningsmiddel og med oksygenoverførende virkning på medi-sinsk anvendbar måte er gjenstand for tallrike publikasjoner. I denne sammenheng ble det allerede for lenge si-den funnet at oppløsninger av stromafritt hemoglobin ikke umiddelbart egner seg som bloderstatningsmiddel fordi ikke erotrozytbundet hemoglobin relativt hurtig nedbrytes til underenheter og disse, hvis molekylvekt er mindre enn 64500 dalton skilles raskt ut gjennom nyrene. Den intravasale oppholdstid utgjør omtrent 100 minutter.
For å forhindre dissosiasjon av hemoglobin i underenheter og derved å forlenge den intravasale halveringstid ble det forsøkt å fornette hemoglobin intramolekylært eller intermolekylært med egnede bifunksjonelle fornettningsmidler for derved å oppnå en molekylstørrelse som garanterer en lengre oppholdstid i kretsløpet.
Således beskrives det i DE-OS 24 17 619 et plasmaprotein-erstatningsmiddel som inneholder hemoglobin og hvis underenheter fornettes ved hjelp av dialkyldikarboksylsyreimi-dater til polymerisater med midlere molekylvekter mellom 68.000 og 600.000. En fornettning kan alternativt også skje intermolekylært mellom forskjellige hemoglobintetramerer eller samtidig skje både intra- og intermolekylært.
DE-OS 2607706 åpenbarer også vannoppløselige hemoglobiner hvis underenheter fornettes ved hjelp av egnede fornettningsmidler, f.eks. tiraziner, multisubstituerte fler-funksjonene benzenderivater, lineære eller cykliske mul-tifunksjonelle polyalkylenderivater, dikarboksylsyrederi-vater eller diadehyder, til polymerer med molekylvekter på 64.000 til 1.000.000. Også med den slags fornettningsmidler beskrives det en intermolekylær fornettningav hemoglobintetramerer seg imellom.
Gjenstand for EP-A 81 301 535.1 er en fremgangsmåte for fremstilling av kunstige røde blodceller som inneholder vandige, stromafrie hemoglobinoppløsninger i membraner av polymerisert hemoglobin. For polymerisering av hemoglobin og derved for beskyttelse mot rask nedbrytning i legemet anvendes de samme fornettningsmidler som i det nevnte DE-OS 2607706.
I en annen innfallsvinkel for å forhøye den intravasale halveringstid for stromafritt hemoglobin i organismen ble det forsøkt å binde hemoglobin til fysiologisk ubetenkelige høypolymere stoffer på kovalent måte. Som fysiologisk fordragelige polymerer beskrives hydroksyetylstivelse (DE-OS 2616086) og videre via broer kovalent bundne polysakkarider (DE-OS 3029307) inulin (EP-A 81302858.6) Dextran (S.Thamm, J.Blumenstein og J.T.Wong, "Proe. Nat. Acad. Sei." USA, 73, 2128 (1976); R. G .Humphries et al, "Proceedings of the B.P.S.", 191 (1981); J.E.Baldwin et al," Tetrahedron", 37, 1723 (1981) eller polyetylenglykoler med forskjellig molekylvekt (K. Ajisaka et al, "Biochemical and BiophysicalResearch Communications" 97., 1076 (1980); US-PS 4 301144).
I alle de nevnte publikasjoner beskrives hemoglobinholdige molekyler med delvis høy molekylvekt der hemoglobinets kovalente binding til fornetttningsmidlet henholdsvis til polymeren på uønsket vis endrer den for oksygentransport nødvendige naturlige kvartærstruktur til proteinandelen i hemoglobin og derved påvirker hemoglobinets naturlige egenskaper på ugunstig måte. Dette har til følge at deoksygenert hemoglobin riktignok binder oksygen men at oksygenert hemoglobin ikke lenger i tilstrek-kelig grad avgir bundet oksygen i det perifere vev. Denne forhøyelse av oksygenaffiniteten viser seg måleteknisk ved en forskyvning av middeldelen av oksygendissosiasjonskurven mot venstre, fig. 1 viser (a) oksygendissosiasjonskurven for naturlig hemoglobin og (b) den tilsvarende ved forhøyet oksygenaffinitet i henhold til den kjente
teknikk.
Da kvatærnærstrukturen til naturlig hemoglobin er forstyrret ved den kovalente binding av proteinandelen til fornettningsmidlet eller polymermolekylet, oppviser fornettet henholdsvis polymerbundet hemoglobin i tillegg redusert kooperativitet med henblikk på bindeevnen for oksygen. Et kvantitativt mål på denne virkning er reduk-sjonen av Hill-koeffisienten som synker fra 2,8 til lavere verdier. Måleteknisk kan dette erkjennes ved at den for funksjonelt intakt hemoglobin karakteristiske sigmoide kurveform, sammenlign fig. 1 a, for fornettede henholdsvis polymerbundne hemoglobinderivater mer og mer inntar hyperbelformen til myoglobin. I fig. 1 viser (b) kurven for hemoglobin med liten kooperativitet til under enhetene og (c) viser kurven for myoglobin.
Den ugunstige sammenheng mellom en ved fornetning eller anbindning av hemoglobin til polymerer fremkalte molekyl-forstørrelse og en uønsket og for anvendelse som bloderstatningsmiddel ugunstig forhøyelse av oksygenaffiniteten, kan ikke tilsidesettes ved at man til fosfat-bindesetene for fornettet hemoglobin binder allosteriske effektorer, og på denne måte søker å forbedre oksygenavgivelsesevnen for fornettet eller polymerbundet hemoglobin. Således beskrives det i DE-OS 2714252 fremgangsmåter for fremstilling av med de aldehyder fornettede hemoglobiner som i stedet for de naturlige til fosfatbindingssetene bundede alosteriske modelatorer 2.3-difosforglyserat, inneholder pyridoxal-5-fosfat.
I samme retning blir det i DE-OS 3144705 også beskrevet inositheksafosfat som allosterisk modulator. Selv om innføring av modelatoren medfører en tydelig forbedring av oksygenavgivelsesevnen opptrer dog også ved de allosterisk modifiserte hemoglobinpreparater mangler som oppstår ut fra en intramolekylær fornettning av hemoglobin underenhetene eller inter- og/eller intramolekylær fornettning av hemoglobintetramerene. For en bred terapeutisk anvendelse er heller ikke denslags preparater egnet ennu.
Oppgave for foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe et som C>2- og (X^-bærer egnet hemoglobinholdig bloderstat-ningmiddel som under naturlige betingelser er istand til å ta opp henholdsvis avgi oksygen, og som ikke oppviser de ovenfor nevnte mangler. Spesielt skal det undgås at de bindende vekselvirkninger for hemoglobinmonomerene seg imellom forstyrres ved fornettning eller binding til polymerer, og derved endrer den kooperative bindings-oppførsel for hemoglobinmonomerene med henblikk på bindingen til molekylært oksygen. På den annen side skal den intravasale oppholdstid være høyest mulig og en rask ut-skillelse via nyrene forhindres.
Denne oppgave løses ifølge oppfinnelsen ved at det til-bringes et hemoglobinholdig bloderstatningsmiddel hvori anjoniske ligander som kan bindes med vannoppløselige, fysiologiske risikofrie polymerstoffer, bindes til de naturlige fosfatbindingsseter i hemoglobin til hvilke det i naturlig hemoglobin er anleiret 2.3-disfosfoglyserat. Oksygenaffiniteten for denslags modifisert hemoglobin påvirkes dermed ikke over fornetteren eller bundne polymermolekyler men over makromolekyler som utelukkende er bundet til naturlig allosteriske bindingsseter på hemoglobin.
Gjenstand for oppfinnelsen er derved konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin som som makromolekyl inneholder et addukt av en eller flere vannoppløselige, fysiologisk ubetenkelige polymerer på en anjonisk ligant samt renset og fra endogene ligander isolert human-hemoglobin A, hvorved makromolekylene oppviser en alt efter de stilte krav oppviser en variabel molekylvektsfordeling på 400 til 500.000 d og som på ikke-kovalent måte reversibelt er bundet via liganden til det allosteriske bindingssentrum for hemoglobin.
Oppfinnelsen omfatter videre en fremgangsmåte for fremstilling av denslags konjugater samt medikamenter inneholdende disse.
Polymere, vannoppløselige fysiologisk ubetenkelige forbindelser eller derivater derav som er bestanddel av konjugatene ifølge oppfinnelsen inneholder pr. monomeren-het en eller flere polare grupper, fortrinnsvis hydroksy-amino- og/eller karboksylgrupper. Fortrinnsvis anvendes det for konjugatene ifølge oppfinnelsen naturlig forekommende polymerer, det kan imidlertid dog også anvendes syntetiske polymere derivater derav.
Ifølge oppfinnelsen inneholder de konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin polymerer fra gruppen polyvinylpolydon og derivater derav, dextran og derivater derav, polyvinylalkoholer eller polysakkarider, oppløseli-ge stivelser og derivater derav, hydroksyalkylstivelser med forskjellige substitusjonsgrad, mucopolysakkarider, polyetylenglykoler og polypropylenglykoler og blandingspolymerisater derav, proteiner og derivater derav, tensider, polyoler, polymetacrylater og polymetylacryla-ter, liposomer og emulsjoner av fett i vann.
Som polymerer egner seg spesielt dextran og derivater derav eller polyetylenglykoler og derivater derav, spesielt foretrukket er 3-brom-2-hydroksypropyldextran, alfa-omega-disubstituerte derivater av polyetylenglykol og diglysidyleter av polyetylenglykol.
Molekylvekten for de nevnte polymerer er spredd over et vidt område og kan ligge innenfor grensene 400 til 500.000 dalton hvorved polymerer med molekylvekter fra 400 til 50.000 d er foretrukket.
Ifølge oppfinnelsen blir polymerene fra den nevnte gruppe kjemisk forbundet med slike lavmolekylære stoffer som kan anleires på fosfatbindingssetet via. ikke-kovalente bindinger. Disse ligander tillater en styring av oksygen-af f initeten for hemoglobin.
Som polymerbundne ligandmolekyler som som oftest foreligger i anjonisk form, kommer i tillegg til de naturlige på hemoglobin bundede ligander også i betraktning sukkerfosfater og derivater derav, inositfosfater og derivater derav, inositsulfater og derivater derav, nukleotidfosfater og derivater derav, pyridoxalfosfat henholdsvis - sulfat og derivater derav, mucopolysakkarider og derivater derav, beta-naftenfosfat, salicylsyre henholdsvis p-hydroksybenzosyre og derivater derav, aromatiske aldehyder og derivater derav samt benzensulfonsyrer og derivater derav. Foretrukne ligandmolekyler er sukkerfosfater, nukleotidfosfater, pyridoxalfosfat eller inositfosfat.
Inositheksafosfat ansees som spesielt foretrukket ligand da denne forbindelse med hemoglobin danner en binding som er om en faktor 10 fastere binding enn den i intakte erotrozyter forekommende modulator 2.3-difosfoglyserat.
Der det er nødvendig kan polymermolekyl og ligand også være sammenbundet via en abstansholder. Som slike anvendes slike molekyler som i to ender bærer funksjonelle grupper som er egnet for en kobling og som tillater at det mellom ligand og polymermolekyl på kontrollert måte innstilles en bestemt avstand. Som avstandsmolekyler egner seg spesielt de aldehyder og de karboksylsyrer samt derivater derav, hvis funksjonelle grupper er forbundet via alkylenbroer med 1 til 4 atomkarboner. Foretrukne avstandsmolekyler ifølge oppfinnelsen er glutaraldehyd.
De av en vannoppløselig, ikkeladet, fysiologisk ubetenke-lig polymer og en av de nevnte anjoniske ligander oppbyggede makromolekyler reagerer spontant med isolert, stromafritt og fortrinnsvis desoksygenert hemoglobin, hvorved det danner seg polymer- ligand- hemoglobinkonjugater med høy bindingskonstant og stabilitet via ikke-kovalente bindinger mellom ligand og fosfatbindingssete i hemoglobinet.
Disse komplekser er i stand til på reversibel måte å binde og videre avgi oksygen hvorved man observerer en reduksjon av 0"2-af f initeten for det med adduktet modulerte hemoglobin. Dette påvises måleteknisk ved en forskyvning av middeldelen av oksygendisosiasjonskurven mot høyre, dvs. mot høyere C^-partialt trykk. Kooperativiteten for hemoglobin under enheten ved oksygenopptaket henholdsvis-avgivelsen forblir intakt, noe som viser seg i et sigmoid forløp av oksygendissosiasjonskurven.
Oppfinnelsens konjugate makrokonjugate forbindelser på hemoglobin merker seg altså ved at det uten koblings-eller fornetningsreaksjoner tilveiebringes et hemoglob-innholdig bloderstatnings- eller blodplasmafortynningsmiddel med oksygenoverførende funksjon som på grunn av for høyt molekylvekt oppviser en høyere intravasal oppholdstid, binder molekylært oksygen på reversibel måte og avgir dette lett igjen på grunn av en relativt lav O2affinitet, uten at man for å oppnå disse virkninger forstyrrer hemoglobintetramerstrukturen med fornettning eller kompleksdannelse.
Egenskapene for slike hemoglobinkonjugater kan på grunn av valg av tallrike parametere varieres innen vide grenser. Således kan den kjemiske art og egenskapene for den anvendte polymer, f.eks. molekylvektsfordelingen, oppløs-ligheten eller fornetningsgraden, endres for derved å styre oppholdstiden i kretsløpet. Videre kan bindings-fastheten for polymer- ligandadduktet til hemoglobin påvirkes ved antallet ladede grupper (fosfatgrupper) på
liganden.
Konsentrasjonen av liganden, dvs. graden av beladning. av polymeren med liganden, har virkninger på den mengde hemoglobin som maksimalt kan bindes i ikke-kovalent form. Via ligandkonsentrasjonen har man altså en direkte inflydelse på oksygentransportkapasiteten for det som bloderstatningsmiddel anvendte hemoglobin.
Konjugater med forskjellige egenskaper oppnås likeldes ved at man varierer avstanden mellom ligand og polymermolekyl samt arten av bindingen med hvilken man forbinder de to molekyler. Derved er en direkte forbindelse mulig også en via et avstandsmolekyl, hvorved også arten binding (eterbinding, fosfatsyrediesterbinding osv.),påvirker egenskapene for det dannede konjugat.
Til slutt kan det også til hvert polymermolekyl være bundet flere ligander (med eller uten avstandsmolekyl) og derved også flere hemoglobinmolekyler. Som muligheter skal nevnes et ligand- hemoglobinkonjugat i de to ender av et polymermolekyl eller også flere ligand- hemoglobinkonjugater på sidekjeder av en forgrenet polymer.
Oppfinnelsen omfatter likeledes to- eller likeledes flerfasepolymer- ligand- hemoglobinsystemer der et fast, uoppløselig polymermolekyl på overflaten, eventuelt under mellomkobling av et avstandsmolekyl, inneholder flere ligandmolekyler og derved også flere hemoglobinmolekyler på bundet måte. Eksempler på dette er liposomer eller emulsjoner til hvilke ligand-hemoglobinkonjugatet er bundet i ikke-vandig fase. Ligandene og også hemoglobin foreligger derved i den vandige fase, hvorved ligandene er forbundet via den ikke-vandige fase.
Selvfølgelig er det likeledes innenfor oppfinnelsens ramme også mulig i tillegg å modifisere hemoglobin med de vanlige bi- eller polyfunksjonelle fornettningsmidler. Ved denne forholdsregel endrer dog egenskapene til hemoglobinoppløsningen seg på den ifølge den kjente teknikk ugunstige måte, dvs. at oksygenaffiniteten sammen-lignet med ikke-fornettet preparat klart forhøyes, og kooperativiteten for hemoglobin under enhetene reduseres med henblikk på deres bindingsevne for molekylært oksygen. Konjugatdannelsen mellom polymermolekyl, modulerende ligand og hemoglobin, fører dog til en så tydelig reduksjon av oksygenaffiniteten og en gjenopprettelse av kooperativiteten for underenhetene, at ifølge oppfinnelsen modifiserte konjugater som imdidlertid inneholder fornedret hemoglobin klart er overlegne de ut fra den kjente teknikk kjente utelukkende fornettede hemoglobinholdige bloder-statningsmidler.
For fremstilling av oppfinnelsens konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin blir primært polymeren syntetisert eller kommersielt oppnådde polymerer modifisert kjemisk på i og for seg kjent måte. Således kan f.eks. ikke-modifisert polyetylenglykol eller også dennes glysidyleter eller de alfa-omega aminosubstituerte derivater anvendes.
De ifølge oppfinnelsen anvendbare polymerer omsettes under kontrollerte betingeler (pH-verdi, temperatur, konsentrasjon) i vandige oppløsninger, eventuelt under anvendelse av egnet buffer, med den angjeldende ligand. Som buffer anvendes fortrinnsvis natriumboratbuffer, pH 9,0 eller fosf atbuf f er, pH 7,2. Det er dog klart for fagmannen at også andre kjente buffersystemer kan anvendes.
Omsetningen mellom polymermolekyl og liganden kan hvis ønskelig skje under tilsetning av et egnet bifunksjonelt molekyl som avstandsmolekyl. Sluttproduktet er fysiologisk mottagbar, vannoppløselige makromolekyler med molekylvekter innen området 400 til 500.000 dalton til hvilket det terminalt som oftest er bundet fosfatholdige ligander. De resulterende anjoniske adukter av polymermolekyler på anjoniske ligander blir derefter renset på i og for seg kjent måte, f.eks. ved diafiltrering mot vann, hvorved man ved valg av en spesiell sperregrense for filtrasjonsmem-branet kan innstille en molekylvekt som tilsvarer de stilte krav.
Isolering av funksjonelt intakt hemoglobin, HbA, fra humant fullblod i større målestokk er beskrevet i f.eks. "Methods in Enzymology", bind 76, side 97 o.f. Det i henhold til den beskrevne metode oppnådde, rensede og for endogene ligander befridde eller strippede hemoglobin opp-slemmes i en vandig bufferoppløsning, fortrinnsvis i en fosfatbuffer med pH 7,4, og deoksygenert ved flere gangers evakuering av oppløsningen og derpå følgende vasking med renset nitrogen.
Den resulterende hemoglobinnholdige oppløsning blandes med vandige, eventuelt buffrede oppløsninger av de polymere ligandbærende substanser med pH-verdier mellom 5,0 og 8,0. Fortrinnsvis arbeides i surt pH-område. Derved danner det seg spontant via ikke-kovalente bindinger bundne, stabile konjugater av de makromolekylære forbindelser på hemoglobin .
De ifølge oppfinnelsen fremstilte buffrede oppløsninger av konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin oppviser i forhold til fornettet hemoglobin en tydelig for-bedret oksygenaffinitet. Således ble det ved funksjonsun-dersøkelser . funnet verdier for oksygenpartialtrykket ved 50% metning av det til de makromolekylære addukter hemoglobin (P50) som ^an sammenlignes med verdiene til naturlig, erotrozytbundet hemoglobin eller sogar overtreffe 3 disse.
Slik det fremgår av fig. 2 til 5 oppviser oppfinnelsens konjugater likeledes en høy kooperativitet for hemoglobin under enhetene med henblikk på binding henholdsvis fri-setting av molekylært oksygen. Dette viser seg i figurene ved den sigmoide form av oksygenbindingskurven og leses kvantitativt ut fra Hill-koeffisienter nær den naturlige verdi.
Ved konjugatbindingen blir likeledes den intravasale oppholdstid for hemoglobin i forhold til stromafritt hemoglobin forhøyet i vesentlig grad. Mens den for fritt, ikke-modifisert hemaglobin ligger ved ca. 85 til 100 min.
(J.E.Baldwin et al, "Med. Lab. Sei." 39, 45 (1982) holdes oppholdstiden for oppfinnelsens konjugater til opptil flere dager.
Også de andre egenskaper (kolloidosmotisk trykk, reologiske egenskaper, stabilitet, lagringsdyktighet) gjør oppfinnelsens konjugater fremragende egnet for anvendelse som bloderstatningsstoff eller blodplasmafortynningsmiddel med oksygenoverførende funksjon.
De for administrering av oppfinnelsens konjugater nødven-dige hjelpe- og tilsetningsstoffer, slik som f.eks. ringer-laktatoppløsning o.l., er kjent for fagmannen og krever ingen nærmere forklaring.
Oppfinnelsen skal beskrives nærmere under henvisning til de følgende eksempler.
EKSEMPEL 1
Syntese av et konjugat av adenosin- 5- trifosfat, ATP, og BHP- dextrat 70.
1 g lyofilisert BHP-dextran, 3-brom-2-hydroksypropyldes-tran, ble oppløst i 5 ml 0,1 M natriumboratbuf f er med pH 9,0 ved romtemperatur og pH-verdien ble innstilt til 11,0 med 0,5 M NaOH og holdt i 15 minutter. Man tilsatte 500
mol adenosintrifosfat, ATP, som var oppløst i 5 ml av den
samme buffer, korrigerte pH-verdien med fast NaHCOg til pH 10,0 og inkuberte det hele under omrøring yderligere 24 timer ved romtemperatur. Ikke-omsatte aktiverte grupper ble rørt i 10 timer med 0,1 m vandig glyserinoppløsning og derved blokkert og reaksjonsblandingen ble renset ved diafiltrering mot vann over et amikon HIP 10-hulfibermembran med sperregrense 10.000. Retentatet ble lyofilisert. Det hvite produkt i en mengde av 0,8 g oppviste et ATP-innhold på 0,18 m mol/g.
EKSEMPEL 2
Syntese av et koblingsprodukt av inositolheksafosfatnatriumsalt, IHP, på BHP- dextran 70.
I stedet for det i eksempel 1 anvendte ATP ble 5 mM inositolheksafosfatnatriumsalt (sigma) omsatt og opparbeidet med 1 g BHP-dextran. Man oppnådde 0,6 g av et hvitt produkt med et IHP-innhold på 0,095 mmol/g.
EKSEMPEL 3
Det ifølge eksemplene 1 og 2 fremstilte produkt ble opp-løst til en konsentrasjon på tilsvarende 1 mM ATP henholdsvis 10 mM IHP i lOOml 0,1 M fosfatbuffer pH 7,3 og blandet med desoksygenert og i henholdet til "Methods in Enzymology", bind 76, s.97 og følgende fremstilt human-hemoglobin HbA, slik at man oppnådde en sluttkonsentrasjon av HbA på 6%.
Oksygenbindingskurvene for disse blandinger, målt ved pH 7,4 og 37°C i bistris-buffer, er vist i fig. 2 og 3.P50-verdien for disse preparater lå ved:
EKSEMPEL 4
ATP henholdsvis IHP-konsentrasjonen for de dextranbundne ligander ble i et eksempel analogt eksempel 3 innstilt til følgende verdier:
Figurene 4 og 5 viser de dertil hørende oksygenbindings-kurver, målt ved pH 7,4 og 37°C i BIS-TRIS-buffer.
EKSEMPEL 5
200 ml av en 18%-ig HbA-oppløsning, oppløst i 0,1 m fosfatbuffer med pH 7,4, ble desoksygenert ved flere gangers evakuering og spyling med nitrogen. Man tilsatte 1,0 g av det ifølge eksempel 2 fremstilte BHP-IHP-konjugat, innstilte pH-verdien til 6,8 og tilsatte under beskyttelsesgass 7,2 ml av en 5%-ig glutardialdehydoppløs-ning, omrørte i 30 minutter og reduserte produktet ved tilsetning av 0,4 g NaBH4. Reaksjonsblandingen ble dia-filtrert over et ultrafiltreringsmembran med sperregrense 10.000 (Amicoin HlP10-hulfiber) under stadig tilsetning av 0,1 m fosfarbuf f er, pH 7,4, i 6 timer, og blandingen så innstilt en hemoglobinkonsentrasjon på 6%. Halvmettnings-trykket for dette preparat lå ved Pc5q=47,9 mbar.
EKSEMPEL 6
I henhold til det som er angitt av S.G.Cohan og H.C.Haas (JACS 75, 1733 (1953) ble 1 mmol polyetylenglykol 10.000 omsatt med 20 mg tinn-IV-klorid i 200 ml zylen med 2mmol epiklorhydrin og under utelatelse av det fraksjonerte de-stillasjonsskritt ble det hele opparbeidet. Man oppnådde 9,2 g diglycidyleter av polyetylenglykol som produkt. 1 g eller 0,2 mmol av dette materiale ble under de i eksempel 1 beskrevne betingelser omsatt i boratbuffer med 0,5 mmol ATP i 10 timer ved romtemperatur. Produktet ble renset ved 6 timers diafiltrering med vann over et H 1 P 5, amicon hulfiberultrafiltreringsmembran og lyofilisert. Som beskrevet i eksempel 3 ble 10 mmol av adduktet ATP-PEG blandet med desoksygenert HbA med sluttkonsentrasjon 6% og C>2 bindingskurven registrert. P^Q-verdien utgjorde 48,15 mbar.
EKSEMPEL 7
I henhold til det som er angitt av W. Kern et al, i "Makromol. Chem." 180, 2539-2542 (1979) fremstilte man først ut fra polyetylenglykol 400 via alfa-omega ditosylat og omsetning med etanolamin det ønskede alfa-omega diaminosubstituerte polyetylenglykol. 40 g eller 10 mmol av dette alfa-omega-diaminopolyetylenglykol ble oppløst 1.000 ml 0,1 m fosfatbuffer med pH 7,2 og ble tilsatt 8 g tilsvarende 30 mmol pyridoxalfosfat under omrøring. Man lot det hele reagere over natt ved romtemperatur og reduserte det hele i to timer med 1,9 g NaBH^ved romtemperatur. Rensingen av produktet skjedde også i dette tilfelle ved diafiltrering med vann over et hulfibermembran HIPI med sperregrense 1000 inntil det spektralfotometrisk ikke var påvisbar pyridoxalfosfat i ultrafiltratet. Produktet ble lyofilisert, utbyttet var 73%. Den ifølge eksempel 3 gjennomførte omsetning med deoksygenert HbA ga et produkt med en pH-konsentrasjon på 6% og en PEG (pyridoxalfosfat)2~konsentrasjon på 2,5 mM (10g/l), som oppviste en P^Q-verdi på 54,53 mbar.

Claims (14)

1. Konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin, karakterisert ved at de inneholder A) som makromolekyl et addukt av en eller flere vannoppløselige, fysiologisk ubetenkelige polymerer fra gruppen polyvinylpyrrolidon og derivater derav, dextran og derivater derav, polyvinylalkoholer, polysakkarider, oppløselige stivelser og derivater derav, hydroksyalkylstivelser med forskjellig substitusjonsgrad, mucopolysakkarider, polyetylenglykoler og polypropylenglykoler og blandingspolymerisater derav, proteiner og derivater derav, tensider, polyoler, polyakrelater og polymetylacrylat, liposomer og emulsjoner av fett i vann på B) en anjonisk ligand fra gruppen sukkerfosfater og derivater derav, inositfosfater og derivater derav, inositsulfater og derivater derav,nukleotidfosfater og derivater derav, pyridoxalfosfat henholdsvis -sulfat og derivater derav, mucopolysakkarider og derivater derav, beta-naftolfosfat, salicylsyre henholdsvis p-hydroksybenzosyre og deriater derav, aromatiske aldehyder og derivater der av og benzensulfonsyrer og derivater derav, samt C) renset, fra endogene ligander isolert human- hemoglobin A, hvorved makromolekylene oppviser en alt efter kravene varierbar molekylvektsfordeling på 400 til 500.000 dalton og ikke kovalent er bundet reversibelt via ligandene til det allosteriske bindingssete på hemoglobin.
2 . Konjugater ifølge krav 1, karakterisert ved at de som polymer inneholder dextran eller derivater derav eller polyetylenglykol og derivater derav.
3. Konjugater ifølge kravene 1 og 2, karakterisert ved at de som polymermolekyler inneholder 3-brom-2-hydroksypropyldextran, alfa-omega-disubstituerte derivater av polyetylenglykol eller diglysidyleter av polyetylenglykol.
4. Konjugater ifølge kraven 1 til 3, karakterisert ved at polymerene oppviser en molekylvektsfordeling på 400 til 50.000 dalton.
5. Konjugater ifølge kravene 1 til 4, karakterisert ved at de som til polymermolekyl bundet anjoniske ligand inneholder sukkerfosfater og derivater derav, nukliotidfosfater og derivater derav, pyridoxalfosfat og derivater derav, inositfosfater og derivater derav, acetylsalicylsyre og derivater derav eller benzensulfonsyrer og derivater derav.
6. Konjugater ifølge kravene 1 til 5, karakterisert ved at de som til polymermolekylet bundet anjoniske ligand inneholder inositheksafosfat-natrium, adenosintrifosfat, fruktose-1,6-difosfat, pyridoxalfosfat eller 4-isotiocyanat-benzensulfonsyre.
7. Konjugat ifølge kravene 1 til 6, karakterisert ved at bindingen mellom ligand og polymermolekyl i makromolekyler skjer via et avstandsmolekyl.
8. Konjugat ifølge kravene 1 til 7, karakterisert ved at de inneholder renset og fra endogene ligander isolert, deoksygenert humanhemoglobin A.
9. Konjugater ifølge kravene 1 til 8, karakterisert ved at de eventuelt inneholder med bi- og/eller polyfunksjonelle fornettningsmidler modifisert hemoglobin.
10. Fremgangsmåte for fremstilling av konjugate makromolekylære forbindelser på hemoglobin, karakterisert ved at man ved romtemperatur i vandig oppløsning adderer a) en polymer fra gruppen polyvinylpyrrolidon og derivater derav, som makromolekyl et addukt av en eller flere vannoppløselige, fysiologisk ubetenkelige polymerer fra gruppen polyvinylpyrrolidon og derivater derav, dextran og derivater derav, polyvinylalkoholer, polysakkarider, oppløselige stivelser og derivater derav, hydroksyalkylstivelser med forskjellig substitusjonsgrad, mucopolysakkarider, polyetylenglykoler og polypropylenglykoler og blandingspolymerisater derav, proteiner og derivater derav, tensider, polyoler, polyakrelater og polymetylacrylat, liposomer og emulsjoner av fett i vann på b) en anjonisk ligand fra gruppen sukkerfosfater en anjonisk ligand fra gruppen sukkerfosfater og derivater derav, inositfosfater og derivater derav, inositsulfater og derivater derav, nukleotidfosfater og derivater derav, pyridoxalfosfat henholdsvis -sulfat og derivater derav, mucopolysakkarider og deriater derav, beta-naftolfosfat, salicylsyre henholdsvis p-hydroksybenzosyre og derivater derav, aromatiske aldehyder og derivater derav og benzensulfonsyrer og derivater derav, c) renser det således vunnede addukt på i og for seg kjent måte og d) blander det oppnådde produkt med renset, fra endogene ligander isolert human-hemoglobin A.
11. Fremgangsmåte ifølge krav 10, karakterisert ved at man anvender renset, endogene ligander isolert, desoksygenert human-hemoglobin A.
12. Fremgangsmåte ifølge kravwene 10 og 11, karakterisert ved at man for rensing av den vandige oppløsning diafiltrerer adduktet.
13. Fremgangsmåte ifølge kravene 10 til 12, karakterisert ved at man arbeider i buffret vandig oppløsning.
14. Fremgangsmåte ifølge kravene 10 til 13, karakterisert ved at man arbeider ved en pH-verdi innen området 5,0 til 8,0, fortrinnsvis i det sure området.
NO844494A 1983-11-10 1984-11-09 Konjugate makromolekulaere forbindelser paa hemoglobin, og deres fremstilling og preparater derav NO844494L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19833340592 DE3340592A1 (de) 1983-11-10 1983-11-10 Konjugate makromolekularer verbindungen an haemoglobine, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende arzneimittel

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO844494L true NO844494L (no) 1985-05-13

Family

ID=6213907

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO844494A NO844494L (no) 1983-11-10 1984-11-09 Konjugate makromolekulaere forbindelser paa hemoglobin, og deres fremstilling og preparater derav

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4698387A (no)
EP (1) EP0142125A3 (no)
JP (1) JPS60123425A (no)
DE (1) DE3340592A1 (no)
DK (1) DK534984A (no)
ES (1) ES8607731A1 (no)
FI (1) FI844331L (no)
NO (1) NO844494L (no)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3501349A1 (de) * 1985-01-17 1986-07-17 Battelle-Institut E.V., 6000 Frankfurt Blutersatz
US4970300A (en) * 1985-02-01 1990-11-13 New York University Modified factor VIII
FR2600894B1 (fr) * 1986-07-02 1989-01-13 Centre Nat Rech Scient Conjugues macromoleculaires d'hemoglobine, leur procede de preparation et leurs applications
US4814098A (en) * 1986-09-06 1989-03-21 Bellex Corporation Magnetic material-physiologically active substance conjugate
DE3636590A1 (de) * 1986-10-28 1988-05-26 Braun Melsungen Ag Blutersatzmittel
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
US4900780A (en) * 1988-05-25 1990-02-13 Masonic Medical Research Laboratory Acellular resuscitative fluid
US5028657A (en) * 1988-07-18 1991-07-02 Industrial Research Technology Institute Use of plasma to immobilize protein on polymeric surfaces
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
US5386014A (en) * 1989-11-22 1995-01-31 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable, non-immunogenic red blood cell substitute
US5239061A (en) * 1990-06-20 1993-08-24 Research Corporation Technologies, Inc. Modified human hemoglobin, blood substitutes containing the same, and vectors for expressing the modified hemoglobin
US5464634A (en) * 1990-06-22 1995-11-07 The Regents Of The University Of California Red blood cell surrogate
US5306508A (en) * 1990-06-22 1994-04-26 The Regents Of The University Of California Red blood cell surrogate
US5114932A (en) * 1990-11-30 1992-05-19 Runge Thomas M Hyperosmolar oxyreplete hemosubstitute
DK130991D0 (da) * 1991-07-04 1991-07-04 Immunodex K S Polymere konjugater
US5344393A (en) * 1992-02-28 1994-09-06 Alliance Pharmaceutical Corp. Use of synthetic oxygen carriers to facilitate oxygen delivery
US6242417B1 (en) * 1994-03-08 2001-06-05 Somatogen, Inc. Stabilized compositions containing hemoglobin
US5865784A (en) 1995-06-07 1999-02-02 Alliance Pharmaceutical Corp. Method of hemodilution facilitated by monitoring oxygenation status
US5981507A (en) * 1995-12-14 1999-11-09 Advanced Magnetics, Inc. Polymeric carriers linked to nucleotide analogues via a phosphoramide bond
WO1998024417A1 (en) * 1996-12-05 1998-06-11 Geo-Centers, Inc. Endotoxin binding to lipid immobilized hemoglobin
US6018035A (en) * 1997-07-21 2000-01-25 Baxter International Inc. Reagents for isotropic size enhancement of a peptide, protein, nucleotide or other substrate
US5981710A (en) * 1997-07-21 1999-11-09 Baxter International, Inc. Therapeutic hemoglobin composition having isotropically increased size
IL135148A0 (en) * 1997-10-03 2001-05-20 Galenica Pharmaceuticals Inc A polysaccharide conjugate and pharmaceutical compositions containing the same
JP2002513028A (ja) 1998-04-28 2002-05-08 ガレニカ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ポリサッカリド抗原結合体
JP2002350447A (ja) * 2001-05-24 2002-12-04 Wako Pure Chem Ind Ltd 生理活性物質固定化担体及びその製造方法、固定化生理活性物質、試料中の対象成分分析方法、並びに試料中の対象成分分析用キット
CA2470524A1 (en) * 2001-12-21 2003-07-24 David S. Soane Use of oligomers and polymers for drug solublization, stabilization, and delivery
US20030232887A1 (en) * 2002-04-10 2003-12-18 Johnson Douglas Giles Preparation and use of a stable formulation of allosteric effector compounds
ATE536887T1 (de) * 2002-06-06 2011-12-15 Univ Washington Kovalente konjugate zwischen mit artemisinin verwandten endoperoxiden und eisentragenden proteinen und anwendungsverfahren
US20070259966A1 (en) * 2004-04-22 2007-11-08 Allos Therapeutics, Inc. Coadministration of Radiation, Efaproxiral Sodium, and Supplemental Oxygen for the Treatment of Cancer

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3925344A (en) * 1973-04-11 1975-12-09 Community Blood Council Plasma protein substitute
DE2616086C2 (de) * 1976-04-13 1986-04-03 Dr. Eduard Fresenius, Chemisch-pharmazeutische Industrie KG, 6380 Bad Homburg Substanz zur Verwendung in einem kolloidalen Blutvolumenersatzmittel aus Hydroxyethylstärke und Hämoglobin
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4421896A (en) * 1979-11-13 1983-12-20 The Dow Chemical Company Method of coupling a protein to a polymer particle containing hydrazide groups in a polymer latex and the products formed therefrom
JPS5716815A (en) * 1980-07-02 1982-01-28 Ajinomoto Co Inc Oxygen transporting agent for artificial blood
DE3029307A1 (de) * 1980-08-01 1982-03-04 Dr. Eduard Fresenius, Chemisch-pharmazeutische Industrie KG, 6380 Bad Homburg Haemoglobin enthaltendes blutersatzmittel
DE3144705C2 (de) * 1981-11-11 1983-12-08 Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt Verfahren zur Herstellung eines lagerstabilen, vernetzten Hämoglobinpräparates mit hoher Sauerstoff-Transportkapazität, sowie das nach diesem Verfahren hergestellte Hämoglobinpräparat
US4425334A (en) * 1982-04-02 1984-01-10 The Regents Of The University Of California Functional oxygen transport system

Also Published As

Publication number Publication date
EP0142125A2 (de) 1985-05-22
FI844331A0 (fi) 1984-11-05
DE3340592A1 (de) 1985-05-23
DK534984D0 (da) 1984-11-09
EP0142125A3 (de) 1986-05-28
ES8607731A1 (es) 1986-06-01
US4698387A (en) 1987-10-06
FI844331L (fi) 1985-05-11
DK534984A (da) 1985-05-11
ES537507A0 (es) 1986-06-01
JPS60123425A (ja) 1985-07-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO844494L (no) Konjugate makromolekulaere forbindelser paa hemoglobin, og deres fremstilling og preparater derav
RU2225222C2 (ru) Конъюгаты гемоглобина с полисахаридом
US5650388A (en) Fractionated polyalkylene oxide-conjugated hemoglobin solutions
EP0043675B1 (en) Modified hemoglobins suitable for use as oxygen carriers for blood substitutes
US5079337A (en) Macromolecular conjugates of hemoglobin, a procedure for their preparation and their uses
CA1298783C (en) Acellular red blood cell substitute
US5312808A (en) Fractionation of polyalkylene oxide-conjugated hemoglobin solutions
US5110909A (en) Macromolecular conjugates of hemoglobin, a procedure for their preparation and their uses
US5194590A (en) Acellular red blood cell substitute
US7005414B2 (en) Synthetic oxygen transport made from cross-linked modified human or porcine haemoglobin with improved properties, method for a preparation thereof from purified material and use thereof
NO165709B (no) Fremgangsmaate for fremstilling av bloderstatningsmiddel.
EP0912197A2 (de) Hämoglobin-hydroxyethylstärke-konjugate als sauerstoff-transport-mittel
US20040023851A1 (en) Method for the porduction of artificial oxygen carriers from covalently cross linking haemoglobin with improved functional properties of haemoglobin by cross- linking in the presence of chemically non- reacting effectors of the oxygen affinity of the haemoglobin
US6956025B2 (en) Mammalian haemoglobin compatible with blood plasma, cross-linked and conjugated with polyalkylene oxides as artificial medical oxygen carriers, production and use thereof
CA2060205A1 (en) Hemoglobin composition and its use
Sacco et al. Interaction of haemoglobin with dextran sulphates and the oxygen-binding properties of the covalent conjugates
WO2011106396A1 (en) Methods for preparing peg-hemoglobin conjugates using reduced reactant ratios
Baldwin et al. Synthesis of polymer-bound hemoglobin samples
JP2689023B2 (ja) ヘモグロビンオリゴマーに基づく組成物及びその製造方法
CA2266174A1 (en) Hemoglobin-antioxidant conjugates
JPS6075432A (ja) ネオカルチノスタチン誘導体及びその製造方法
JPS63208523A (ja) 酸素運搬剤
Razynska et al. Zero-link polymerization: a new class of polymeric hemoglobins
Dellacherie et al. Hemoglobin linked to polyanionic polymers as potential red blood cell substitutes
US5646252A (en) Hemoglobin composition and preparation thereof