NO312416B1 - Sulfonsyre- eller sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)- azaheterocyklylamidforbindelser - Google Patents

Sulfonsyre- eller sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)- azaheterocyklylamidforbindelser Download PDF

Info

Publication number
NO312416B1
NO312416B1 NO19992853A NO992853A NO312416B1 NO 312416 B1 NO312416 B1 NO 312416B1 NO 19992853 A NO19992853 A NO 19992853A NO 992853 A NO992853 A NO 992853A NO 312416 B1 NO312416 B1 NO 312416B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
sulfonic acid
oxopyrrolidin
ylmethyl
methoxynaphthalene
chloro
Prior art date
Application number
NO19992853A
Other languages
English (en)
Other versions
NO992853D0 (no
NO992853L (no
Inventor
Yong Mi Choi-Sledeski
Henry W Pauls
Jeffrey N Barton
William R Ewing
Daniel M Green
Michael R Becker
Original Assignee
Aventis Pharm Prod Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aventis Pharm Prod Inc filed Critical Aventis Pharm Prod Inc
Publication of NO992853D0 publication Critical patent/NO992853D0/no
Publication of NO992853L publication Critical patent/NO992853L/no
Publication of NO312416B1 publication Critical patent/NO312416B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system having sulfur as a ring hetero atom, e.g. ticlopidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Oppfinnelsens område
Forbindelsene med formel I utøver nyttig farmakologisk aktivitet, og følgelig innlemmes de i farmasøytiske sammensetninger og anvendes i behandlingen av pasienter som lider av visse medisinske forstyrrelser. Nærmere bestemt er de inhibitorer av faktor Xa. Foreliggende oppfinnelse er rettet på forbindelser med formel I, farmasøytiske sammensetninger inneholdende forbindelser med formel I, og deres anvendelse ved fremstilling av et medikament for å behandle en pasient som lider av, eller utsettes for, tilstander som kan lindres ved administrering av en inhibitor av Faktor Xa.
Faktor Xa er det penultimate enzym i koaguleringskaskaden. Både den frie faktor Xa og faktor Xa bundet i protrombinasekomplekset (Faktor Xa, Faktor Va, kalsium og fosfolipid) inhiberes av forbindelser med formel I. Hemming av faktor Xa oppnås ved direkte kompleksdannelse mellom inhibitoren og enzymet og er derfor uavhengig av plasma-kofaktoren antitrombin III. Effektiv hemming av faktor Xa oppnås ved administering av forbindelsene enten ved oral administrering, kontinuerlig intravenøs infusjon, intra-venøs bolusadministrering eller en annen parenteral rute slik at den ønskede virkning oppnås, nemlig å forhindre faktor Xa-indusert dannelse av trombin fra protrombin.
Antikoagulant-terapi er påkrevet for behandling og profy-lakse av flere forskjellige trombotiske tilstander av både den venøse og den arterielle vaskulatur. I det arterielle system er abnorm trombusdannelse primært forbundet med arteriene i den koronare, cerebrale og perifere vaskulatur. Sykdommene forbundet med trombotisk okklusjon av disse kar innbefatter prinsipielt akutt myokardialt infarkt (AMI), ustabil angina, tromboembolisme, akutt karlukning forbundet med trombolytisk terapi og perkutan transluminal koronar angioplasti (PTCA), transiente iskemiske angrep, slag, intermittent klaudikasjon og "bypass"-implantering av de koronare (CABG) eller perifere arterier. Kronisk antikoagulant-terapi kan også være velgjørende når det gjelder å forhindre karenes luminale innsnevring
(restenose) som ofte opptrer etter PTCA og CABG, og når det gjelder å opprettholde vaskulær tilgangspatens i langtidshemodialysepasienter. Vedrørende den venøse vaskulatur, opptrer patologisk trombusdannelse hyppig i årene i de lavere ekstremiteter etter abdomen-, kne- og hoftekirurgi (dyp venetrombose, DVT). DVT utsetter videre pasienten for en høyere risiko for pulmonar tromboembolisme. Systemisk, disseminert intravaskulær koagulopati (DIC) opptrer vanligvis i begge vaskulære systemer under septisk sjokk, visse virale infeksjoner og kreft. Denne tilstand karakteriseres ved et raskt forbruk av koagulasjonsfaktorer og deres plasmainhibitorer, hvilket resulterer i at det dannes livstruende klumper i hele mikrovaskulaturen i flere organsystemer. Indikasjonene omtalt ovenfor innbefatter noen, men ikke alle, mulige kliniske situasjoner hvor antikoagulerende terapi er på sin plass. Personer med erfaring på dette område er vel vitende om omstendighetene som krever enten akutt eller kronisk profylaktisk antikoagulerende terapi.
Oppsummering av oppfinnelsen
Denne oppfinnelse er rettet på den farmasøytiske anvendelse av en forbindelse med formel I nedenfor for behandling av en pasient som lider av en fysiologisk forstyrrelse som kan moduleres ved å hemme aktiviteten av Faktor Xa, hvor formel - I er som følger:
er et bicyklisk heteroaryl valgt blant isokinolyl, kinolyl, dihydrokinolyl, tetrahydroisokinolyl, benzimidazolyl, kinazolinyl, tienopyrimidinyl, furopyridyl, imidazopyridyl eller pyrrolopyridyl;
Z er Ci-Ce-alkylenyl;
Ri er hydrogen eller Ci-C6-alkyl;
R2 er R3S(0)p-;
R3 er eventuelt med Ci-C6-alkoksy subsitutert naftyl, eventuelt med halogen substituert benzotienyl, eventuelt med fenoksy substituert fenyl hvor fenoksygruppen eventuelt kan være substituert med halogen og/eller N02, eventuelt med pyridyl substituert tienyl eller tienopyridyl;
Xi og Xla er H;
X2 og X2a tatt sammen danner okso;
X3 er H;
X4 er H;
X5, <X>5a og <X>5b er uavhengig valgt fra H, R5ReN- eller R70-, og en av X5, <X>5aQg x5b ^an være okso som substiterer den distale ring av
i en posisjon alfa til et nitrogenatom derav;
R5 og R6 er H;
R7 er H eller Ci-C6-alkyl;
m er 1;
p er 2 ;
et farmasøytisk akseptabelt salt derav, et N-oksid derav, et hydrat derav eller et. solvat derav.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
Anvendt ovenfor og gjennom hele beskrivelsen av oppfinnelsen, bør det være underforstått at følgende uttrykk, hvis intet annet er sagt, har følgende betydninger:
Definisjoner
"Pasient" innbefatter både mennesker og andre pattedyr.
"Ci-C6-Alkyl" betyr en alifatisk hydrokarbongruppe som kan være rett eller forgrenet og ha 1 til 6 karbonatomer i kjeden. Forgrenet betyr at en eller flere lavere alkyl-grupper så som metyl, etyl eller propyl er bundet til en lineær alkylkjede.
"Ci-C6-Alkoksy" betyr en alkyl-O-gruppe hvor alkylgruppen er som tidligere beskrevet. Eksempler på alkoksygrupper innbefatter metoksy, etoksy, n-propoksy, i-propoksy, n-butoksy, heptoksy og t-butoksy.
"Ci-C6-Alkylenyl " betyr f .eks. en metylenyl, etylenyl eller propylenylgruppe.
"Halogen" betyr fluor, klor, brom eller jod. Foretrukket er fluor, klor eller brom, og mer foretrukket er fluor eller klor.
Foretrukne utførelsesformer
Et foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori Z er metylenyl.
Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori
er isokinolinyl; mer foretrukket er isokinolylgruppen bundet til Z i 7-stillingen derav. Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori
er kinolyl; mer foretrukket er kinolylgruppen
bundet til Z i 7-stillingen derav.
Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori er kinazolinyl; mer foretrukket er kinazolinyl-
gruppen bundet til Z i 7-stillingen derav.
Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori
er en gruppe valgt blant tienopyrimidinyl,
furopyridyl, imidazopyridyl eller pyrrolopyridyl,
mer foretrukket er gruppen bundet til Z gjennom 5-ringen, og ytterligere foretrukket er gruppen bundet til Z gjennom 5-ringen i 2-posisjonen derav.
Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori en av X5, X5aQg <X>5b er H, hydroksy eller amino som er substituert på den proksimale ring av
i en posisjon som er tilstøtende mot posisjonen i den proksimale ring til hvilken Z er bundet; mer foretrukket er en av X5, <X>5aQg x5b Pa ^en omtalte proksimale ring hydroksy eller amino.
Et annet foretrukket forbindelsesaspekt av oppfinnelsen er forbindelsen med formel I hvori en av X5, X5aQg <X>5b som substituerer den distale ring av i posisjonen alfa til et nitrogen derav, er H eller amino.
Forbindeler i henhold til oppfinnelsen er valgt fra gruppen bestående av: 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidhydro-klorid;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R)-yl]-amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-hydroksyisokino-lin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amid;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-metylamidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metylamidtrifluoracetat;
benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(l-amino-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-hydroklorid;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid;
4- (2-Klor-6-nitofenoksy)benzen-sulfonsyre-[1-(1-amino-6- metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diaminoiso-kinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diamino-isokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] - amidtrifluoracetat;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)yl]-amidtrifluoracetat; 6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metyl-amidtrifluoracetat,•
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-hydroksykinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metyl-amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-hydroksykinolin-5- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-hydroksykinolin-6- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid; 7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(lH-benzimidazol-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[2-(lH-benzimidazol-5-yletyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amidtrif luoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminokinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamidtrif luoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[2, 3-d]pyrimidin-6-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] - amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[2-(6-aminotieno [2,3-d]pyrimidin-6-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] - amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-aminotieno[2, 3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amid-trif luoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-hydroksytieno-[2,3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] - amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S) -yl] - amidtrifluoracetat;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-hydroksytieno-[3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3- (R,S) - yl]-amidtrifluoracetat;
benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3 , 2-c] - pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl] -amid-trif luoracetat .
Mer foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er valgt fra gruppen bestående av
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrif luoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R)-yl]-amidtrif luoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]metylamidtrifluoracetat;
benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(l-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat ;
6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diaminoiso-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre[1-(1,6-diaminoiso-kinolin-7-yl-metyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid-trif luoracetat ;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ;
6- klor-benzo [b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat ;
7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno [3,2-c] pyridin-2-ylmetyl)-2-okso-3-yl] -amidtrifluoracetat; benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3,2-c]-pyridin-2-ylmetyl)-2-okso-3-yl]-amidtrifluoracetat; 5-pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
5-pyridin-3-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat;
benzotiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat;
6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid;
7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo-[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ;
6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl] - amidtrifluoracetat;
6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl] - amidtrifluoracetat; og
tieno[3,2-b]pyridin-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidditrifluoracetat.
Denne oppfinnelse omfatter også alle kombinasjoner av foretrukne aspekter av oppfinnelsen beskrevet her.
En forbindelse med formel I kan fremstilles ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder, hvorved menes metoder som er anvendt tidligere eller er beskrevet i litteraturen.
En preparativ utførelsesform ifølge oppfinnelsen for å fremstille en forbindelse med formel I hvori Arlr Rlf R2, X3< X4, X5/ X5a, X5b/ Z og m er som definert ovenfor, Xi og Xia er H, og X2 og X2a, tatt sammen danner okso, kan fremstilles ved å omsette en forbindelse med formel II
hvori X3, X4 og m er som definert ovenfor, Xx og Xia er H, X2 og X2a tatt sammen danner okso, og Px er et (alkyl, aralkyl eller aryl) karbamat, med en forbindelse med formel III hvori Arlf X5, X5a, X5b og Z er som definert ovenfor, og en av X5, X5a, X5b er H, klor, brom eller aryloksy i posisjonen alfa i forhold til nitrogenet i den distale ring av Arlt og L er en avgående gruppe så som klor, brom, jod, eller eventuelt substituert lavere alkylsulfonyloksy eller aryl-sulfonyloksy, for å oppnå en forbindelse med formel IV
En forbindelse med formel IV omdannes til en forbindelse med formel I ved metodene beskrevet heri.
En forbindelse med formel III kan fremstilles ved å omsette en forbindelse med formel V, hvori X5c er H, R5R6N-,
R70-,
R5R6NCO-, R5R6NS02-, R7CO-, halogen, cyano, nitro eller R8 (0) C (CH2) q-, og hvori en amino- eller hydroksygruppe derav er passende beskyttet med en amino- eller hydroksybeskyt-tende gruppe, n er 0 til 2, og Ar2 er Arif med en passende malonsyre i et polart løsningsmiddel så som pyridin eller etanol og en base så som piperidin eller pyridin ved til-bakeløp for å oppnå en forbindelse med formel VI hvori R12 er H, X5c bundet til karboksymetylidengruppen er H, X5c bundet til er som beskrevet ovenfor. En forbindelse med formel XI, så som forbindelser med formel IX og X,
hvori Ari, X5, X5a og X5b er som definert i ovenfor, og en av X5, X5a og X5b er klor ved posisjonen alfa i forhold til nitrogenet i den distale ring av Ari, og metylgruppen er bundet til den proksimale ring av Ari, kan behandles med
NaBr eller en arylhydroksygruppe så som fenol og kaliumhydroksid for å oppnå en forbindelse med formel XI hvori kloratomet ved posisjonen alfa i forhold til nitrogenet i den distale ring av Ari erstattes med brom eller aryloksy ved den posisjonen.
Metylgruppen i en forbindelse med formel XI, hvori Ari# X5, X5a og X5b er som definert ovenfor, forutsatt at hvori X5, X5a og X5t er hydroksy eller et amino som bærer et hydrogen, da er hydroksy-og aminogruppen beskyttet med passende hydroksy- og/eller aminobeskyttende grupper, kan halo-generes under anvendelse av standard betingelser så som N-halogensuccinimid og benzoylperoksid i et inert løsnings-middel så som karbontetraklorid for å oppnå den tilsvarende halogenmetylforbindelse med formel III hvori L er brom, klor, eller jod, og en av X5, X5a og X5b er klor, brom eller aryloksy ved posisjonen alfa i forhold til nitrogenet i den distale ring av Arx.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er nyttige i form av den frie base eller syre eller i form av et farma-søytisk akseptabelt salt derav. Alle former er innenfor oppfinnelsens omfang.
Hvor forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse er substituert med en basisk gruppe, dannes syreaddisjonssalter, og de er simpelthen en mer bekvem anvendelsesform; og i prasis betyr anvendelse av saltformen uvegerlig anvendelse av den frie baseform. Syrene som kan anvendes til å fremstille syreaddisjonssaltene, innbefatter fortrinnsvis de syrer som tilveiebringer, kombinert med den frie base, farmasøytisk akseptable salter, dvs. salter hvis anioner er ikke-toksiske for pasienten i farmasøytiske doser av saltene, slik at de velgjørende hemmende virkninger på aktiviteten av Faktor Xa som er inherent i den frie base, ikke forringes av bivirkninger som kan tilskrives anionene. Skjønt de farmasøytisk akseptable salter av nevnte basiske forbindelser er foretrukket, er alle syreaddisjonssalter nyttig som kilder for den frie baseform selv om det spesielle, i seg selv er ønskelig bare som mellomprodukt, som for eksempel når saltet dannes bare for rensingen skyld og for identifisering, eller når det anvendes som mellomprodukt ved fremstilling av et farmasøytisk akseptabelt salt ved ionebytterprosedyrer. Farmasøytisk akseptable salter innenfor omfanget av oppfinnelsen er salter som er avledet fra følgende syrer: mineralsyrer så som saltsyre, svovelsyre, fosforsyre og sulfaminsyre; og organiske syrer så som eddiksyre, sitronsyre, melkesyre, vinsyre, malonsyre, metansulfonsyre, etansulfonsyre, benzensulfonsyre, p-toluensulfonsyre, cyklo-heksylsulfaminsyre, kininsyre og lignende. De tilsvarende syreaddisjonssalter omfatter de følgende: Hydrohalogenider, f.eks. hydroklorid og hydrobromid, sulfat, fosfat, nitrat, sulfamat, acetat, citrat, laktat, tartarat, malonat, oksalat, salicylat, propionat, succinat, fumarat, maleat, metylen-bis-B-hydroksynaftoater, gentisater, mesylater, isetionater og di-p-toluoyltartratmetansulfonat, etan-sulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat, cykloheksyl-sulfamat henholdsvis kinat.
Ifølge et ytterligere trekk av oppfinnelsen fremstilles syreaddisjonssalter av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse ved omsetning av den frie base med en passende syre, ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder. For eksempel fremstilles syreaddisjonssaltene av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse enten ved å oppløse den frie base i vandig eller vandig-alkoholisk oppløsning eller andre egnede løsningsmidler inneholdende en passende syre og isolere saltet ved inndamping av løsningen, eller ved å omsette den frie base og syre i et organisk løsningsmiddel, hvorved saltet separere direkte eller kan erholdes ved konsentrering av løsningen.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan regenereres fra syreaddisjonssaltene ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder. For eksempel kan moderforbindelsene av oppfinnelsen regenereres fra sine syreadditionssalter ved behandling med et alkali, f.eks. vandig natriumbikarbonat-løsning eller vandig ammoniakkkkløsning.
Hvor forbindelsen ifølge oppfinnelsen er substituert med en sur gruppe, kan baseaddisjonssalter dannes, og de er simpelthen en mer bekvem anvendelseform; og i praksis utgjør anvendelse av saltformen uvegerlig anvendelse av den frie syreform. Basene som kan anvendes til å fremstille baseaddisjonssaltene, innbefatter fortrinnsvis de baser som tilveiebringer, kombinert med den frie syre, farmasøytisk akseptable salter, dvs. salter hvis kationer er ikke-toksiske for den animalske organisme i farmasøytiske doser av saltene, slik at de velgjørende inhibitoriske virkninger på aktiviteten av Faktor Xa som er inherent i den frie syre, ikke forringes av bivirkninger som kan tilskrives kationene. Farmasøytisk akseptable salter, inklusive for eksempel alkali- og jordalkalimetalsalter, er innenfor omfanget av oppfinnelsen de salter som er avledet fra følgende baser: natriumhydrid, natriumhydroksid, kaliumhydroksid, kalsiumhydroksid, aluminiumhydroksid, litiumhydroksid, magnesiumhydroksid, sinkhydroksid, ammoniakk, etylendiamin, N-metyl-glucamin, lysin, arginin, ornitin, cholin, N,N'-dibenzyletylendiamin, klorprocain, dietanolamin, procain, N-benzylfenetylamin, dietylamin, piperazin, tris(hydroksymetyl)aminometan, tetrametyl-ammoniumhydroksid og lignende.
Metallsalter av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan erholdes ved å bringe et hydrid, hydroksid, karbonat eller en lignende reaktiv forbindelse av det valgte metall i et vandig eller organisk løsningsmiddel i kontakt med den frie syreform av forbindelsen. Det vandige løsningsmiddel som anvendes kan være vann, eller det kan være en blanding av vann og et organisk løsningsmiddel, fortrinnsvis en alkohol så som metanol eller etanol, et keton så som aceton, en alifatisk eter så som tetrahydrofuran, eller en ester så som etylacetat. Slike reaksjoner utføres vanligvis ved omgivelsestemperatur men de kan, hvis ønskelig, utføres med oppvarming.
Aminsaltene av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan erholdes ved å bringe et amin i et vandig eller organisk løsningsmiddel i kontakt med den frie syreform av forbindelsen. Egnede vandige løsningsmidler innbefatter vann og blandinger av vann med alkoholer så som metanol eller etanol, etere så som tetrahydrofuran, nitriler så som acetonitril, eller ketoner så som aceton. Aminosyresaltene kan fremstilles på lignende måte.
Baseaddisjonssaltene av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan regenereres fra saltene ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder. For eksempel kan moderforbindelsene av oppfinnelsen regenereres fra sine baseaddisjonssalter ved behandling med en syre, f.eks. saltsyre .
Saltformene ifølge oppfinnelsen innbefatter også forbindelser som har et kvaternisert nitrogen. De kvater-niserte salter dannes ved metoder så som alkylering av et sp<3-> eller sp<2->hybridisert nitrogen i forbindelsene.
Det vil være innlysende for en fagkyndig person at noen av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse ikke danner stabile salter. Imidlertid er det mest sannsynlig at syreaddisjonssalter dannes av forbindelser ifølge denne oppfinnelse hvilke har en nitrogen-holdig heteroarylgruppe og/eller innehar en aminogruppe som substituent. Foretrukne syreaddisjonssalter av forbindelsene ifølge oppfinnelsen er de salter hvori det ikke foreligger en labil syregruppe.
I tillegg til å være nyttige i seg selv som aktive forbindelser er salter av forbindelsene ifølge oppfinnelsen nyttige for å rense forbindelsene, for eksempel ved å utnytte solubilitetsforskjellene mellom saltene og moderforbindelsene, biproduktene og/eller utgangsmaterialene ved teknikker som er velkjent for fagkyndige personer.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan inneholde asymmetriske sentre. Disse asymmetriske sentre kan uavhengig være i enten (R)- eller (S)-konfigurasjon. Det vil også være åpenbart for fagkyndige personer at visse forbindelser med formel I kan utøve geometrisk isomeri. Geometriske isomerer innbefatter cis- og trans-formene av forbindelsene ifølge oppfinnelsen som har en alkenylgruppe. Foreliggende oppfinnelse omfatter de individuelle geometriske isomerer og stereoisomerer og blandinger derav.
Slike isomerer kan separeres fra sine blandinger ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder, for eksempel kromatografiske teknikker og omkrystalliseringsteknikker, eller de fremstilles separat fra de passende isomerer av sine mellomprodukter, for eksempel ved anvendelse eller tilpasning av metoder beskrevet heri.
Utgangsmaterialene og mellomproduktene fremstilles ved anvendelse eller tilpasning av kjente metoder, for eksempel metoder som beskrevet i referanseeksemplene eller deres åpenbare kjemiske ekvivalenter.
Foreliggende oppfinnelse er ytterligere eksemplifisert, men ikke begrenset av de påfølgende eksempler som illustrerer fremstillingen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen.
I de nuklære magnetiske resonansespektre (NMR) er de kjemiske forskyvninger er uttrykt i ppm i relasjon til tetra-metylsilan. Forkortelsene har følgende signifikans: s=singlett; d=dublett; t=triplett; m=multiplett; dd=dublett av dubletter; ddd=doublett av dubletter av dubletter; dt=dublett av tripletter, b=bred, bs=bred singlett, g=kvartett, AB=AB-mønster.
EKSEMPEL 1
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3( R. S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 3- p- Tolyl- akryloylklorid.
Tionylklorid (9,44 ml, 129,5 mmol) tilsettes dråpevis til en løsning av 3-p-tolyl-akrylsyre (2 0 g, 123,3 mmol) i benzen (50 ml) ved 0°C. Den resulterende løsning får oppvarmes til romtemperatur, deretter oppvarmes til tilbakeløp i 2 timer. Blandingen konsentreres til tørrhet på en rotovap for å oppnå råproduktet (22,3 g, 123,3 mmol) som tas til neste trinn.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 7,80 (d, 1H) , 7,50 (d, 2H) , 7,26 (d, 2H), 6,58 (d, 1H), 2,40 (s, 3H).
B. 3- p- Tolyl- akryloylazid.
3-p-Tolyl-akryloylklorid (22,3 g, 123,3 mmol) i dioksan (50 ml) tilsettes langsomt til en iskjølt løsning av natriumazid (16 g, 246,6 mmol) i vann/dioksan (50 ml, l/l, v/v) slik at temperaturen holdes mellom 5-10°C. Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, deretter ble den hellet over 300 g is. Det resulterende faste stoff ble filtrert og vasket med ytterligere vann. Det faste stoff (20,72 g, 110,7 mmol) ble tørket over P205 under vakuum over natten og anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 7,73 (d, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 6,38 (d, 1H), 2,38 (s, 3H). EI MS, [M]<+>=187. C. 1-( 2- Isocyanato- vinyl)- 4- metyl- benzen.
3-p-Tolyl-akryloylazid (20,72 g, 110,7 mmol) i benzen (100 ml) oppvarmes langsomt til 75°C i 3,5 timer deretter konsentreres for å oppnå en brun olje (ca. 20 g) . Dette
material ble tatt til det neste trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 7,18 (d, 2H) , 7,12 (d, 2H) , 6,53 (d, 1H) , 6,40 (d, 1H) , 2,32 (s, 3H) . EI MS, [M]<+>=159.
D. 7- Metyl- 2H- isokinolin- l- on.
Jod (0,63 g, 2,51 mmol) tilsettes til en løsning av 1-(2-isocyanato-vinyl)-4-metyl-benzen (ca. 20 g, 125,6 mmol) i o-diklorbenzen (125 ml) , deretter oppvarmes til tilbakeløp (180°C) over natten. Blandingen avkjøles til romtemperatur, deretter konsentreres til tørrhet. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 40% EtOAc/heksaner. Produktet (6,23 g, 39,1 mmol) erholdes som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 12,25 (bs, 1H) , 8,21 (s, 1H) , 7,42 (bs, 2H) , 7,14 (d, 1H), 6,50 (d, 1H) , 2,46 (s, 3H) . EI MS, [M]<+>=159.
E. l- Klor- 7- metylisokinolin.
7-Metyl-2H-isokinolin-l-on (2,1 g, 13,2 mmol) i fosforoksyklorid (3 0 ml) oppvarmes til tilbakeløp i 13 timer. Blandingen avkjøles til romtemperatur, deretter konsentreres til et mindre volum. Residuet fortynnes med isvann, og pH-verdien justeres til ca. 8 ved langsom tilsetning av 10 N NaOH. Den vandige løsning ekstraheres med metylenklorid (4 x 20 ml), og de kombinerte organiske lag vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Den resulterende mørke olje renses ved kolonnekromatografi under eluering med 25% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (1,6 g, 9 mmol) som et lysegult fast stoff.
<l>H NMR (CDCI3, 3 00 MHz) 5 8,18 (d, 1H) , 8,05 (d, 1H) , 7,71 (d, 1H) , 7,55 (m, 2H) , 7,55 (s, 3H) . EI MS, [M ]+=177, 179, Cl-mønster.
F. 7- Brommetyl- l- klor- isokinolin.
N-Bromsuccinimid (1,10 g, 6,19 mmol) og benzoylperoksid (0,39 g, 1,13 mmol) tilsettes til en løsning av l-klor-7-metylisokinolin (lg, 5,63 mmol) i karbontetraklorid (70 ml). Den resulterende blanding oppvarmes til tilbakeløp i 6 timer, deretter avkjøles til romtemperatur og fortynnes med metylenklorid. Det organiske lag vaskes med IN NaOH og saltvann, deretter tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/heksaner til 25% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (1,4 g, 5,46 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8,31 (s, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 7,86 (d, 1H), 7,77 (dd, 1H), 7,58 (d, 1H), 4,69 (s, 2H). EIMS, [M]<+>=255, 257, Cl, Br-mønster.
G. ( 2- Oksopyrrolidin- 3-( S)- yl)- karbaminsyre- tert- butylester.
(S)-Boc-Diaminosmørsyre (25 g, 115 mmol), trietylamin (35 g, 344 mmol), og hydroksybenzotriazol (19,3 g, 143 mmol) oppløses i THF (300 ml). 1-(3-Dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiimidhydroklorid (27,4 g, 143 mmol) tilsettes til løsningen. Løsningen oppvarmes til 60 °C i 15 minutter. Et hvitt presipitat dannes, og løsningen holdes ved 60 °C i 4 timer. Etter denne tid filtreres løsningen, og den oppsamlede væske konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i i en gradient av 1% MeOH/ CH2C12 til 3% MeOH/ CH2C12 for å oppnå tittelforbindelsen (19,6 g, 98 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6,17 (bs, 1H) , 5,08 (bs, 1H) , 4,12 (m, 1H), 3,33 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,00 (m, 1H), 1,42 (s, 9H).
H. Tl- ( l- Klor- isokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3 ( S) - yl 1 - karbaminsyre- tert- butylester.
Natriumhydrid (0,24 g, 6,05 mmol, 60% mineraloljedispersjon) tilsettes til en løsning av [2-oksopyrrolidin-3(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (1,18 g, 5,89 mmol) i THF/DMF (62 ml, 9/1, v/v) ved 0°C. Blandingen omrøres i 2 minutter, deretter tilsettes en løsning av 7-brommetyl-1-klor-isokinolin (1,4 g, 5,46 mmol) i THF (10 ml) dråpevis via en kanyle. Den resulterende gule løsning omrøres i 1 time ved 0°C, deretter ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonen undertrykkes med mettet ammoniumkloridløsning, deretter fortynnes med EtOAc. Det organiske lag vaskes med vann og saltvann, deretter tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 50% EtOAc/heksaner til 70% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (1,67 g, 4,44 mmol) som et skumlignende hvitt fast stoff.
<2>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,25 (d, 1H) , 8,12 (s, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 7,68 (dd, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 5,55 (bs, 1H) , 4,71 (AB, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 2,60 (m, 1H), 1,98 (m, 1H) , 1,46 (s, 9H) . EI MS, [M+H]<+>=376, 378, Cl-mønster. I. 3- ( S) -Amino-1- ( l- klor- isokinolin- 7- ylmetyl) - pvrrolidin-2- on- hydroklorid.
Til en løsning av [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3 (S) -yl] -karbaminsyre-tert-butylester (2,1 g, 5,6 mmol) i EtOAc (170 ml) ved 0°C bobles HCl-gass i 5 minutter. Løsningen omrøres ved 0°C i 15 minutter, deretter fjernes isbadet, og løsningen får anta romtemperatur. Etter 4 timer ved romtemperatur konsentreres løsningen, og det gjenværende faste stoff vaskes med eter for å oppnå tittelforbindelsen (1,74 g, 5,6 mmol) som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) 5 8,64 (d, 3H) , 8,31 (d, 1H) , 8,18 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 4,71 (AB, 2H), 4,10 (rn, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,41 (m, 1H), 1,98 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>=276.
J. 7- Metoksynaftalen- 2 - sulfonylklorid.
Til en suspensjon av 7-hydroksynaftalen-2-sulfonsyre, natriumsalt (15 g, 60,9 mmol) i H20/etanol (150 ml, 2:1) tilsettes fast NaOH (2,68 g, 67 mmol) ved romtemperatur. Blandingen omrøres inntil en homogen løsning dannes, og dimetylsulfat (6,34 ml, 67 mmol) tilsettes deretter. Et presipitat dannes langsomt, og blandingen omrøres over et tidsrom på 16 timer. Råblandingen konsentreres in vacuo, og residuet omrøres i absolutt EtOH (100 ml) som en oppslemming i 2 timer. Presipitatet filtreres og tørkes. Det faste stoff oppvarmes ved tilbakeløp i 95% EtOH (100 ml) i 2 h, får avkjøles til romtemperatur, filtreres og tørkes for å oppnå 12,6 g ubehandlet 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-natriumsalt. En blanding av sulfonsyre, natriumsalt (12,6 g, 48,6 mmol) i fosforoksyklorid (20 ml) og fosfor-pentaklorid (13,2 g, 63,2 mmol) oppvarmes langsomt til 60°C inntil en homogen løsning dannes og deretter oppvarmes ved 12 0°C i 4 timer. Den resulterende blanding avkjøles i , og en blanding is/isvann tilsettes langsomt med omrøring. Blandingen fortynnes med vann og ekstraheres med CHC13 (2 x 100 ml) . De kombinerte organiske lag vaskes suksessivt med vann, mettet NaHC03-løsning og mettet NaCl. Den organiske fase tørkes over vannfritt MgS04, filtreres og konsentreres for å oppnå 10 g av en råolje. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi i en gradient av 5% EtOAc/heksaner til 30% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen (3,8 g, 14,8 mmol) som et hvitt krystallinsk fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 6 8,49 (d, 1H) , 7,96 (d, 1H) , 7,85 (d, 2H) , 7,39 (dd, 1H) , 7,29 (d, 1H), 3,99 (s, 3H) . EI MS, K. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- klor- isokinolin- 7-ylmetvl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
3-(S)-Amino-1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid (1,74 g, 5,6 mmol) suspenderes i CH3CN (120 ml). Til denne løsning tilsettes trietylamin (2,35 ml, 16,9 mmol) etterfulgt av 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid (1,52 g, 5,93 mmol). Blandingen omrøres over natten, deretter konsentreres til tørrhet. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (2,7 g, 5,4 mmol) som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,35 (d, 1H) , 8,27 (d, 1H) , 8,08 (s, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,74 (dd, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 5,42 (d, 1H), 4,63 (AB, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,78 (m, 1H), 3,25 (m, 2H) , 2,60 (m, 1H) , 2,08 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 496, 498, Cl-mønster. L. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- fenoksy- isokinolin-7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( R. S)- yl]- amid.
Fenol (6,81 g, 72,4 mmol) og kaliumhydroksid (0,41 g, 7,31 mmol) tilsettes til 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S)-yl]-amid (1,8 g, 3,6 mmol) og oppvarmes til 90°C inntil en homogen blanding erholdes. Blandingen omrøres over natten ved 90°C, deretter avkjøles til romtemperatur og fortynnes med metylenklorid (100 ml) og vann. Det vandige lag nøytrali-seres til pH 7 under anvendelse av 1 N HC1, deretter separeres de to lag, og det vandige lag ekstraheres med ytterligere metylenklorid. De kombinerte organiske lag vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 30% EtOAc/heksaner til 60% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (1,66 g, 3 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,40 (s, 1H) , 8,20 (s, 1H) , 7,94 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,15-7,30 (m, 7H), 5,80 (bs, 1H), 4,60 (AB, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,82 (m, 1H), 3,20 (m, 2H), 2,52 (m, 1H), 2,04 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 554. M. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- aminoisokinolin- 7-yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( R. S)- yl] - amidtrifluoracetat.
I en rundbunnet kolbe utstyrt med en vannkjøler oppvarmes 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(l-fenoksy-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,318 g, 0,574 mmol) og ammoniumacetat (5 g, 65 mmol) til 160°C. Etter ca. 6 timer avkjøles den homogene blanding til romtemperatur, og blandingen renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen i racemisk form (0,157 g, 0,266 mmol) som et hvitt fast stoff.
^■H NMR (DMSO-d6, 3 00 MHz) 8 8,95 (bs, 2H) , 8,39 (s, 1H) , 8,23-8,29 (m, 2H), 8,02 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,74 (dd, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 4,56 (AB, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,60 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 477.
EKSEMPEL 2
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amidhydroklorid.
I en rundbunnet kolbe utstyrt med en kald fingerkjøler smeltes fenol (0,569 g, 6 mmol) og 7-metoksy-naftalen-2-sulfonsyre-[1- (l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,2 g, 0,4 mmol) ved 70°C. Blandingen omrøres i 5 minutter, deretter tilsettes ammoniumacetat (0,462 g, 6 mmol) og oppvarmes ved 115°C i 2 timer. Etter denne tid tilsettes ytterligere ammoniumacetat (0,462 g, 6 mmol). Etter 2 timer avkjøles reaksjonsblandingen til romtemperatur, deretter fordeles den mellom EtOAc og 0,5N NaOH. Det organiske lag separeres, vaskes med vann og saltvann, deretter tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres. Det resulterende residu renses partielt ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende fraksjoner konsentreres in vacuo. Det faste stoff som utfelles fra løsningen, filtreres deretter, tørkes og renses igjen ved kolonnekromatograf i under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2. Dette produkt tritureres deretter med kald MeOH, og det oppsamlede faste stoff suspenderes i MeOH og avkjøles til 0°C. HC1(g) bobles gjennom blandingen i noen få minutter, og under denne tid oppløses alt det faste stoff i løsningen. Løsningsmiddelet fjernes in vacuo, og tittelproduktet (0,11 g, 0,214 mmol) vaskes med eter og tørkes.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,30 (bs, 1H) , 9,18 (bs, 2H) , 8,32 (s, 1H), 8,25 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,85-7,91 (m, 2H) , 7,60-7,80 (m, 3H), 7,50 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H) , 7,18 (d, 1H), 4,51 (AB, 2H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,12 (m, 2H), 1,95 (m, 1H), 1,65 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 477. Smeltepunkt: 187-192°C.
Den enantiomere renhet er 88% ee bestemt med analytisk Chiralpak AD reversfase-HPLC.
EKSEMPEL 3
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles ved oppløsning av den race-miske forbindelse beskrevet i EKSEMPEL 1, Del M under anvendelse av en Chiralpak AD HPLC-kolonne (55% EtOH/hep-tan(0,1% TFA)).
<X>H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) 8 8,95 (bs, 2H), 8,39 (d, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,74 (dd, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 4,56 (AB, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,05 (ra, 1H), 1,60 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 477.
Den enantiomere renhet er 96,3% ee bestemt med analytisk Chiralpak AD-reversfase-HPLC. [a]D+3,16° (MeOH).
EKSEMPEL 4
7- Metoksynaf talen- 2- sulf onsyre- [ 1- ( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( R) - vi] - amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles ved oppløsning av den race-miske forbindelse beskrevet i EKSEMPEL 1, Del M under anvendelse av en Chiralpak AD HPLC-kolonne (55% EtOH/heptan (0,1% TFA)).
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,95 (bs, 2H), 8,39 (d, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,77 (d, 1H) , 7,74 (dd, 1H) , 7,65 (d, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,35 (dd, 1H) , 7,24 (d, 1H) , 4,56 (AB, 2H) , 4,20 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,05 (m, 1H) , 1,60 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+>= 477.
Den enantiomere renhet er 90,7% ee bestemt med analytisk Chiralpak AD-reversfase-HPLC. [a]D-3,89° (MeOH).
EKSEMPEL 5
7- Metoksynaf talen- 2- sul f onsyre- Tl- ( 1- hydroksyisokinolin-7ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3 ( R. S)- yl]- amid.
7-Metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid (0,07 g, 0,14 mmol) , fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K,
behandles med dioksan (1 ml) og 10% aq. NaOH (3 ml) og oppvarmes til tilbakeløp i 4 8 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, surgjort med 1 N HC1 og ekstrahert med CH2C12. Det organiske lag separeres, tørkes og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 2,5 % MeOH/ CH2C12. Produktfraksjonene oppsamles, konsentreres og utfelles med fortynnet HCl/eter hvilket gir tittelforbindelsen (0,041 g, 0,086 mmol).
*H NMR (CD3OD, 300 MHz) 8 8,41 (s, 1H) , 8,25 (d, 1H) , 8,06 (bs, 1H) , 7,93 (d, 1H) , 7,85 (d, 1H) , 7,76 (d, 1H) , 7,58 (AB, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,24 (dd, 1H), 7,17 (d, 1H), 6,66 (bs, 1H), ), 4,55 (AB, 2H) , 4,20 (m, 1H) , 3,92 (s, 3H) , 3,19 (m, 2H), 2,20 (m, 1H) , 1,59 (m, 1H), 1,70 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>=478. Elementanalyse beregnet med 1,6 mol H20: C=58,42%, H=4,71%, N=8,18%; funnet C=59,30%, H=5,04%, N=7,96%.
EKSEMPEL 6
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- fl-( l- amino- isokinolin- 7-ylmetvl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( R. S)- yl]- metylamidtrifluoracetat .
A. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- Tl-( l- klor- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metvl- amid.
Til en løsning av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,151 g, 0,304 mmol) i aceton (20 ml) tilsettes kalium-karbonat (0,084 g, 0,608 mmol) etterfulgt av metyljodid (0,12 ml, 1,93 mmol). Den resulterende blanding oppvarmes til tilbakeløp over natten, deretter avkjøles til romtemperatur og fortynnes med metylenklorid. Løsningen vaskes med mettet NaHC03-løsning, vann og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå produktet (0, 093 mg, 0,18 mmol) som en olje.
ZH NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,41 (s, 1H) , 8,04 (s, 1H) , 8,23-8,26 (m, 2H), 8,07 (s, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 7,90 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,28 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 4,63 (AB, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,24 (m, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,32 (m, 1H), 2,05 (m, 1H).
B. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- fenoksy- isokinolin-7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( R, S)- yl]- metylamid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del L under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,45 (s, 1H) , 8,20 (s, 1H) , 7,90 (d, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,54 (dd, 1H) , 7,38-7,45 (m, 3H) , 7,14-7,30 (m, 6H) , 5,00 (m, 1H), 4,62 (AB, 2H) , 3,88 (s, 3H), 3,25 (m, 2H) , 2,81 (s, 3H), 2,30 (m, 1H), 2,01 (m, 1H). C. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- Tl-( l- amino- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( R. S)- yl]- metylamidtrifluoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del M under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-fenoksy-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-metyl-amid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre- [1-(1-fenoksy-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amid.
<X>H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) 8 9,00 (bs, 2H) , 8,40 (s, 1H) , 8,26 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,90-7,95 (m, 2H), 7,79 (d, 1H), 7,71 (dd, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,21 (d, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,54 (AB, 2H), 3,86 (s, 3H) , 3,20 (ra, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,75 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>=491.
Elementanalyse beregnet med 1,5 mol H20: C=53,25%, H=4,79%, N=8,87%, funnet C=53,43%, H=4,50%, N=8,58%.
EKSEMPEL 7
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- Tl-( l- amino- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metylamidtrifluoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles ved oppløsning av den race-miske forbindelse beskrevet i EKSEMPEL 6, del C under anvendelse av en Chiralpak AD-reversfase-HPLC-kolonne (55% EtOH/heptan(0,1% TFA)).
^ NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,5 (bs, 1H) , 9,20 (bs, 2H) , 8,40 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,90-8,00 (m, 2H) , 7,79 (d, 1H), 7,71 (dd, 1H), 7,65 (d, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,34 (dd,lH), 7,23 (d, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,54 (AB, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,20 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,05 (m, 1H) , 1,80 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>=491. Den enantiomere renhet er 92,6% ee bestemt med analytisk Chiralpak AD-reversfase-HPLC.
EKSEMPEL 8
Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- amino- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylklorid.
Til en løsning av tianaftalen (11,8 g, 88,1 mmol), i THF (4 00 ml) ved -78°C tilsettes n-BuLi (55 ml av en 1,6 M løsning i heksaner, 88,1 mmol). Etter 15 minutter tilsettes løsningen via en kanyle til en på forhånd avkjølt (-78°C) løsning av S02 (2 00 g) i THF (100 ml) . Etter avkjølingen får løsningen oppvarmes til omgivelsestemperaturen. Etter 0,5 h konsentreres løsningen. Residuet suspenderes i heksaner (400 ml) og avkjøles til 0°C. Til løsningen tilsettes S02C12 (12,5 g, 92,5 mmol). Etter omrøring i 15 minutter konsentreres løsningen. Residuet oppløses i EtOAc. Den organiske løsning vaskes med mettet NH4C1 (aq.), H20 og mettet NaCl (aq.). Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet oppløses i CH2C12 og filtreres gjennom en propp av silikagel. Den organiske løsning konsentreres deretter. Det resulterende faste stoff tritureres med heksan for å oppnå tittelforbindelsen (12,1 g, 3 8 mmol).
<*>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,16 (s, 1H) , 7,97 (m, 2H) , 7,57 (m, 2H).
B. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- klor- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid.
XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,29 (d, 1H) , 8,12 (s, 1H) , 7,93 (S, 1H), 7,84-7,92 (m, 2H), 7,82 (d, 1H), 7,54-7,62 (m, 2H), 7,46-7,52 (m, 2H), 5,50 (d, 1H), 4,66 (AB, 2H), 3,95 (m, 1H), 3,25 (m, 2H) , 2,65 (m, 1H), 2,15 (m, 1H) .
FAB MS, [M+H]<+>=472, 474, Cl-mønster.
C. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- amino- isokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen ble fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 2 under anvendelse av benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid som utgangsmaterial. Ingen ekstraksjon utføres. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 5 9,00 (bs, 2H), 8,65 (d, 1H) , 8,30 (s, 1H) , 8,07-8,15 (m, 3H) , 8,05 (d, 1H) , 7,94 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,45-7,58 (m, 2H), 7,22 (d, 1H), 4,55 (AB, 2H), 4,31 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,73 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+>=453.
EKSEMPEL 9
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- amino- isokinolin-7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. l- Klor- 3-( 2, 2- dimetoksy- etyl- sulfanvl)- benzen.
Til en løsning av 3-klortiofenol (2,4 g, 16,6 mmol) i THF (2 00 ml) ved 0°C tilsettes bromacetaldehyd-dimetyl-acetal (2,8 g, 16,6 mmol). Til løsningen tilsettes natriumhydrid (0,70 g, 17,4 mmol, 60% mineraloljedispersjon). Reaksjonsblandingen omrøres i 16 timer, deretter undertrykkes reaksjonen ved tilsetning av mettet NH4C1 (aq.). Løsningen fortynnes med EtOAc. Det organiske lag vaskes med mettet NaCl (aq.). Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med heksaner. Tittelforbindelsen (3,7 g, 15,9 mmol) erholdes som en olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 7,32 (m, 1H) , 7,25 (m, 1H) , 7,12 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 3,02 (s, 3H).
B. 4- Klor- benzo[ b]- tiofen og 6- klor- benzo[ b]- tiofen.
En løsning inneholdende polyfosforsyre (8 g) og klorbenzen (50 ml) oppvarmes til tilbakeløp. En løsning inneholdende l-klor-3-(2,2-dimetoksy-etyl-sulfanyl)-benzen (2,7 g, 11,6 mmol) i klorbenzen (5 ml) tilsettes dråpevis til den til-bakeløpende polyfosforsyreløsning. Etter 6 timer avkjøles løsningen til omgivelsestemperatures. Løsningen fortynnes med CH2C12 vaskes med vann og mettet NaCl (aq.) . Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med heksaner hvilket gir tittelforbindelsen (2,4 g, 9 mmol) som en 1:1 isomer blanding.
<1>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 7,88 (m, 1H) , 7,75 (m, 2H) , 7,42 (m, 2H). EI MS, [M] += 168, 170, Cl-mønster.
C. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylklorid
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 8, del A under anvendelse av 4-klor-benzo[b]-tiofen og 6-Klor-benzo[b]-tiofen istedenfor tianaftalen. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med heksaner hvilket gir tittelforbindelsen samt 4-klorbenzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid som hvite fast stoff.
6-Klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,11 (s, 1H) , 7,88 (m, 2H) , 7,50 (m, 1H) .
4-Klorbenzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,32 (m, 1H) , 7,81 (m, 1H) , 7,53 (m, 2H). D. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- klor- isokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yll - amid. Tittelforbindelsen fremstilles som i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,29 (d, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,91 (s, 1H) , 7,87 (m, 1H), 7,83 (d, 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,60 (d, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,42 (dd, 1H), 5,50 (d, 1H), 4,65 (AB, 2H), 3,95 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,15 (m,
1H) .
FAB MS, [M+H]<+>= 506, 508, Cl-mønster.
E. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- amino- isokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 2 under anvendelse av 6-Klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] - amid som utgangsmaterial. Ingen ekstraksjon utføres. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H2O (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,00 (bs, 2H) , 8,71 (d, 1H) , 8,29 (bs, 2H) , 8,05 (s, 1H) , 8,01 (d, 1H), 7,94 (d, 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,65 (d, 1H) , 7,55 (dd, 1H) , 7,21 (d, 1H) , 4,58 (AB, 2H), 4,30 (m, 1H) , 3,20 (m, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,75 (m, 1H).
FAB MS, [M+H]<+>=487,489, Cl-mønster.
EKSEMPEL 10
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- amino- 6- metoksyisokinolin- 7ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidhydro-klorid.
A. 6- Metoksy- 7- metyl- 2H- isokinolin- 1- on
3-(3-Metoksy-4-metylfenyl)propensyre (5,33 g, 27,7 mmol)
(fremstilt ifølge prosedyren beskrevet i J. Med. Chem. 1991, 34, 1662-1668) suspenderes i benzen (30 ml) og behandles dråpevis med tionylklorid (2,22 ml, 30,5 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen oppvarmes til tilbakeløp og holder der i 1 time. De flyktige stoffer fjernes in vacuo, og det resulterende faste stoff oppløses i dioksan og tilsettes dråpevis til en blanding av natriumazid (3,6 g, 55,4 mmol) i vann/dioksan (3 0 ml, 1:5) ved 0°C. Etter omrøring i 1 time helles løsningen over is-vann, presipitatet oppsamles og vaskes med vann. Det faste stoff tørkes under vakuum over P205 (24 timer) , oppløses i benzen (30 ml) og oppvarmes til tilbakeløp langsomt i ca. 4 timer. Benzenet fjernes for å oppnå 2-(3-metoksy-4-metyl-fenyl)vinyliso-cyanat som en brun olje. Oljen tas opp i o-diklorbenzen, behandles med jod og oppvarmes til tilbakeløp i 3,5 timer. De flyktige stoffer fjernes, og residuet blandes med 2,5 % MeOH/CH2Cl2 (10 ml), deretter får det stå over natten ved romtemperatur. Det resulterende faste stoff oppsamles vaskes med heksan og eter, og tørkes for å oppnå tittelforbindelsen (2,67 g, 14,1 mmol).
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 11,80 (bs, 1H) , 8,18 (s, 1H) , 7,16 (d, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,51 (d, 1H), 3,94 (s, 3H), 2,35 (s, 3H). EI MS, [M] <+>=189.
B. l- Klor- 6- metoksyisokinolin- 7ylmetyl bromid
6-Metoksy-7-metyl-2H-isokinolin-l-on (2,6 g, 13,7 mmol) omdannes til 6-metoksy-7-metyl-2-klorisokinolin (2,45 g,
11,8) med metoden beskrevet i EKSEMPEL 1, del E. En porsjon av dette material (1,20 g, 5,8 mmol) omdannes til 7-brommetyl-l-klor-6-metoksy-isokinolin (0,8 g, 2,8 mmol) med metoden beskrevet i EKSEMPEL 1, del F.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,30 (s, 1H) , 8,22 (d, 1H) , 7,49 (d, 1H) , 7,10 (s, 1H) , 4,70 (s, 2H), 4,06 (s, 3H) . EIMS, [M] +=285, 287, Cl-mønster. C. [ 1-( l- Klor- 6- metoksyisokinolin- 7vlmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester. Natriumhydrid (0,057 g, 1,4 mmol, 60% mineraloljedispersjon) suspenderes i vannfritt THF (5 ml) og behandles med en løsning av (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester (0,223 g, 1,1 mmol) og 7-brommetyl-l-klor-6-metoksy-isokinolin (0,32 g, 1,1 mmol) i THF/DMF (10 ml,
6:1) ved 0°C. Reaksjonsblandingen oppvarmes til omgivelsestemperatur, omrøres i 3 timer, undertrykkes ved tilsetning av mettet NH4C1 og fortynnes med EtOAc. Lagene separeres. Det organiske lag vaskes med mettet NaCl, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres for å oppnå et hvitt fast stoff. Det faste stoff oppsamles, vaskes med litt EtOAc og rikelige mengder av Et20 hvilket gir tittelforbindelsen (0,18 g, 0,47 mmol).
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,22 (d, 1H) , 8,06 (s, 1H) , 7,51 (d, 1H) , 7,11 (s, 1H) , 5,20 (bs, 1H) , 4,68 (AB, 2H) , 4,23 (m, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,21 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,46 (s, 9H). FAB MS, [M+H] <+>=387.
D. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- klor- 6- metoksyisokinolin- 7ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid
[1-(l-Klor-6-metoksyisokinolin-7ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (0,15 g, 0,37 mmol) omdannes til 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(l-klor-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-
amid (0,08 g, 0,15 mmol) med metoden beskrevet i EKSEMPEL 1, del I og K.
<X>H NMR (CDCI3/CD3OD, 300 MHz) 8 8,40 (s, 1H) , 8,14 (d, 1H) , 7,99 (s, 1H), 7,95 (d, 1H) , 7,83 (d, 1H), 7,78 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,0 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,89 (dd, 1H), 3,2-3,4 (m, 2H), 2,52 (m, 1H), 2,07 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>=526.
E. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- [ 1- ( l- amino- 6- metoksyisokinolin- 7ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amidhy-droklorid.
7-Metoksynaf talen-2-sul f onsyre- [1- (l-klor-6-metoksyisokinolin-7ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] -amid (0, 080 g, 0,15 mmol) og fenol (0,430 g, 4,6 mmol) smeltes sammen med omrøring ved 7 0 °C i 5 minutter. Ammoniumacetat (0,354 g, 4,6 mmol) tilsettes, og reaksjonsblandingen oppvarmes til 115 °C i ca. 5 timer. Ytterligere ammoniumacetat (0,177 g, 2,3 mmol) tilsettes, og reaksjonsblandingen oppvarmes i ytterligere 3 timer. Reaksjonsblandingen avkjøles og fordeles mellom 0,5 N NaOH og CH2C12. Det organiske lag tørkes over Na2S04 og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2. Produkt fraksjonene oppsamles og konsentreres til et lite volum, deretter surgjøres residuet med IN HCl/eter for å oppnå et beige fast stoff (0,046 g, 0,095 mmol),
<X>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 8 8,38 (s, 1H) , 8,05 (s, 1H) , 7,88 (d, 1H) , 7,80 (d, 1H), 7,73 (dd, 1H) , 7,44 (d, 1H), 7,32 (d, 1H) , 7,30 (s, 1H), 7,23 (dd, 1H) , 7,07 (d, 1H), 4,53 (AB, 2H), 4,23 (t, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 3,30 (m, 2H) , 2,22 (m, 1H) , 1,89 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>=478. Elementanalyse beregnet med 1,4 mol H20: C=54,96%, H=5,29%, N=9,86%; funnet C=54,81%, H=5,12%, N=9,71%.
EKSEMPEL 11
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre[ 1-( 6- metoksyisokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
En suspensjon av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid i metanol/CH2Cl2 (35 ml, 6:1) behandles med THF (5 ml), AcOH (5 ml) og 10% Pd på karbon (0,04 g) . Suspensjonen omrøres under en atmosfære av hydrogen i 7 timer. Suspensjonen filtreres, deretter konsentreres filtratet, og residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 90% CH3CN/H20 (0,1% TFA). De passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (0,325 g, 0,66 mmol)
<2>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 5 9,37 (s, 1H) , 8,40 (d, 1H) , 8,38 (d, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,77 (dd, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,27 (dd, 1H) , 4,66 (AB, 2H) , 4,28 (t, 1H) , 4,12 (s, 3H) , 3,92 (s, 3H), 3,40 (m, 2H), 2,35 (m, 1H), 1,92 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>=492. Elementanalyse beregnet med 1,2 mol H20: C=53,66%, H=4,57%, N=6,70%; funnet C=53,62%, H=4,38%, N=6,67%.
EKSEMPEL 12
4- ( 2- Klor- 6- nitofenoksy) benzen- sulfonsyre-[ 1-( l- amino- 6-metoksyisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yll - amidtrifluoracetat.
[1- (l-Klor-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (0,845 g, 2 mmol) omdannes til [1-(l-amino-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (0,314 g, 0,081 mmol) med metoden beskrevet i EKSEMPEL 10, del E. En porsjon av dette material (0,285 g, 0,7 mmol)
avbeskyttes som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I hvilket gir [1-(l-amino-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amin dihydroklorid (0,28 g, 0,78 mmol) og coupled med 4-(2-klor-6-nitofenoksy)benzensulfonylklorid (0,35 g, 1 mmol) som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Materialet erholdt ved ekstraksjonsopparbeidelse og kolonnekromatografi renses ytterligere ved RP HPLC for å oppnå tittelforbindelsen (0,04 g, 0,067 mmol).
<X>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 5 8,14 (s, 1H) , 8,07 (d, 1H) , 7,92-7,98 (m, 3H), 7,53-7,60 (m, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,05 (d, 2H), 4,63 (AB, 2H), 4,18 (t, 1H), 4,06 (s, 3H) , 3,36 (m, 2H), 2,32 (m, 1H), 1,87 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] + = 598, 600, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet med 1,5 mol H20: C=47,13%, H=3,82%, N=9,48%; funnet C=47,07%, H=3,66%, N=9,24%.
EKSEMPEL 13
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1, 6- diamino- isokinolin-7- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 3-( 3- Acetamido- 4- metylfenyl) propensyre.
Til en løsning av 3-acetamido-4-metylbenzaldehyde (14 g, 79 mmol) i pyridin (210 ml) tilsettes piperidin (3,9 ml, 39,4 mmol) og malonsyre (15,26 g, 146,6 mmol). Blandingen oppvarmes til 100°C i 4 timer, deretter omrøres ved romtemperatur over natten. Løsningen konsentreres in vacuo, deretter fortynnes med vann. Kald 1 N HC1 tilsettes til oppslemmingen inntil pH er ca. 4. Det faste produkt (16,178 g, 73,8 mmol) oppsamles, vaskes grundig med vann. Tittelforbindelsen (16,178 g, 73,8 mmol) tørkes deretter over P205 under vakuum over natten hvilket gir et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 8 12,30 (bs, 1H) , 9,30 (bs, 1H) , 7,65 (s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,25 (d, 1H), 6,42 (d, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,09 (s, 3H). EI MS [M+H] <+>= 220.
B. 3-( 3- Acetylamino- 4- metyl- fenyl)- akryloylazid.
Til en oppslemming av 3-(3-acetamido-4-metylfenyl)propensyre (20,11 g, 91,7 mmol) i aceton (450 ml) ved 0°C tilsettes trietylamin (12,8 ml, 91,8 mmol) etterfulgt av dråpevis tilsetning av etylklorformiat (11,8 ml, 123 mmol) over en 10 minutters periode. Den resulterende gule oppslemming omrøres under anvendelse av en mekanisk rører i 1,5 timer, deretter tilsettes en løsning av natriumazid (8,94 g, 138 mmol) i vann (25 ml) langsomt slik at temperaturen holdes under 5°C. Den tykke blanding omrøres ved 0°C i 1 time, deretter fjernes isbadet, og reaksjonsblandingen får anta romtemperatur. Suspensjonen helles over vann (800 ml) og filtreres deretter. Det gjenværende faste stoff vaskes grundig med vann og tørkes under vakuum over P205 over natten for å oppnå produktet som et lysegult fast stoff (21,40 g, 87,6 mmol).
<X>K NMR (CDC13, 300 MHz) 6 8,10 (s, 1H) , 6,71 (d, 1H) , 7,22 (m, 2H), 6,95 (bs, 1H), 6,38 (d, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,21 (s, 3H) . EI MS [M ] += 244 . C. N-( 7- Metyl- l- okso- l. 2- dihydro- isokinolin- 6- yl)- acetamid.
Til en løsning av difenyleter (250 ml) og tributylamin (11,9 ml, 49,9 mmol) ved 220-240°C tilsettes en oppslemming av 3-(3-acetylamino-4-metyl-fenyl)-akryloylazid (12,2 g, 49,9 mmol) i difenyleter. Etter 2 timer avkjøles den gule løsning til romtemperatur og helles over heksan (800 ml) . Et brunt fast stoff utfelles, og tittelproduktet (3,56 g, 16,5 mmol) erholdes som et lysegult fast stoff ved omkrystallisering fra DMF/MeOH.
<*>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) 8 11,0 (bs, 1H) , 9,35 (s, 1H) , 7,98 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,05 (m, 1H), 6,45 (d, 1H), 2,32 (s, 3H) , 2,12 (s, 3H) . EI MS [M ]+= 216. D. 6- Amino- 7- metyl- 2H- isokinolin- 1- on.
N-(7-Metyl-l-okso-l,2-dihydro-isokinolin-6-yl)-acetamid (0,366 g, 1,69 mmol) og kons. HC1 (0,5 ml) oppvarmes til tilbakeløp i EtOH (0,84 ml). Etter 6 timer konsentreres blandingen til tørrhet, deretter fortynnes med vann og gjøres basisk under anvendelse av 1 N NaOH inntil pH er ca. 10. Den vandige løsning ekstraheres med metylenklorid (4 x 50 ml), og de organiske lag kombineres, vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 3% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet (0,200 g, 1,15 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,90 (bs, 1H) , 8,06 (s, 1H) , 6,90 (m, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,28 (d, 1H), 4,05 (bs, 2H), 2,20 (s, 3H) . EI MS [M-] += 174.
E. 1- Klor- 7- metyl- isokinolin- 6- ylamin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del E under anvendelse av 6-amino-7-metyl-2H-isokinolin-l-on som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med en gradient av 5% MeOH/- CH2C12 til 10% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et gult fast stoff.
XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,05 (d, 1H) , 8,00 (s, 1H) , 7,30 (d, 1H), 6,90 (S, 1H), 4,25 (bs, 2H), 2,40 (s, 3H). EI MS [M]<+>= 192,194, Cl-mønster.
F. Benzhydryliden- ( 1- klor- 7- metyl- isokinolin- 6- yl) - amin.
Til en løsning av l-klor-7-metyl-isokinolin-6-ylamin (0,1 g, 0,52 mmol) i MeOH (5 ml) ved 0°C bobles HCl-gass i 1 minutt, fjernes deretter løsningsmiddelet in vacuo. Det gjenværende hvite faste stoff fortynnes med 1,2 dikloretan, og benzofenonimin (0,15 ml, 0,89 mmol) tilsettes. Den resulterende suspensjon oppvarmes til tilbakeløp i 48 timer, deretter avkjøles til romtemperatur og konsentreres til tørrhet. Råmaterialet fortynnes med CH2C12, vaskes med mettet NaHC03 løsning og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under anvendelse av 10% EtOAc/heksaner som eluent for å oppnå tittelforbindelsen (0,159 g, 0,4 5 mmol) som en gul olje.
<1>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,05 (m, 2H), 7,80 (m, 2H), 7,45-7,55 (m, 4H), 7,20-7,30(m, 3H), 7,10 (m, 2H), 6,75 (s, 1H), 2,50 (s, 3H). FAB MS, [M+H] <+>= 357, 359, Cl-mønster.
G. Benzhydrylidene-( 7- brommetyl- 1- klor- isokinolin- 6- yl)-amin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av benzhydrylidene-(l-klor-7-metylisokinolin-6-yl)-amin som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som en olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,33 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,84 (m, 2H) , 7,41 (m, 4H) , 7,32 (m, 4H) , 7,20 (d, 1H), 6,66 (s, 1H), 4,79 (s, 2H). FAB MS, [M+H] <+>= 435, 437, Cl, Br-mønster. H. { l- T6-( Benzhydrylidene- amino)- l- klor- isokinolin- 7- yl-metyll- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl}- karbaminsyre- tert- butylester .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av benzhydrylidene-(7-brommetyl-1-klor-isokinolin-6-yl)-amin istedenfor 7-brommetyl-l-klor-isokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/heksaner til 3 0% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet som et skumaktig gult fast stoff.
<X>H NMR (CDCl3f 300 MHz) 8 8,09 (d, 1H) , 8,01 (s, 1H) , 7,80 (m, 2H) , 7,20-7,45 (m, 9H), 6,70 (s, 1H) , 5,30 (d, 1H), 4,65 (AB, 2H), 4,21 (m, 1H) , 3,32 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), I, 95 (m, 1H), 1,46 (s, 9H). FAB MS, [M+H] <+>= 555, 557, Cl-mønster. I. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre[ 1-( 6- amino- l- klor- isokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amid.
{l- [6- (Benzhydrylidene-amino) -l-klor-isokinolin-7-ylmetyl] - 2- oksopyrrolidin-3 - (S) -yl}-karbaminsyre-tert-butylester avbeskyttes som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I hvilket gir 3- (S)-amino-1-(6-amino-l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid og kobles med 7-metoksynaf talen- 2 -sul f onylklorid som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Materialet erholdt ved ekstraksjonsopparbeidelse renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 3 0% EtOAc/heksaner til 60% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet.
<2>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,34 (s, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,93 (s, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,72 (dd, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,61 (bs, 1H), 4,93 (bs, 2H), 4,49 (AB, 2H), 3,92 (s, 3H) , 3,85 (m, 1H), 3,20 (m, 2H), 2,52 (m, 1H), 2,05 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H] + = 511, 513, Cl-mønster.
J. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre [ 1-( 1, 6- diamino- isokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid- trifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 2 under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre[1-(6-amino-1-klor-isokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) - yl]-amid som utgangsmaterial. Ingen ekstraksjon utføres. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<2>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 8 12,25 (bs, 1H), 8,34-8,38 (d, 2H) , 8,24 (d, 1H), 7,95 (d, 1H) 7,90-7,93 (d, 2H), 7,68 (dd, 1H) , 7,53 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H) , 6,83 (d, 1H), 6,78 (s, 1H) , 6,49 (bs, 2H) , 4,26 (AB, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,06 (m, 2H), 2,00 (m, 1H), 1,60 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+> = 492.
EKSEMPEL 14
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre[ 1-( 1, 6- diamino- isokinolin- 7 - yl - metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre[ 1-( 6- amino- l- klor-isokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amid.
{l- [6- (Benzhydrylidene-amino) -l-klor-isokinolin-7-ylmetyl] - 2- oksopyrrolidin-3- (S) -yl}-karbaminsyre-tert-butylester avbeskyttes som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I hvilket gir 3- (S) -amino-1- (6-amino-1-klor-isokinolin-7-ylmetyl) - pyrrolidin-2-on-hydroklorid og omsettes med 6-klor-benzo-[b]tiofen-2-sulfonylklorid som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Materialet erholdt ved ekstraksjonsopparbeidelse renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2 0% EtOAc/heksaner til 60% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet.
*H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,05 (d, 1H) , 8,02 (s, 1H) , 7,98 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,86 (d, 1H) , 7,81(d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 6,82 (s, 1H), 5,40 (d, 1H) , 4,90 (bs, 2H), 5,42 (AB, 2H), 3,95 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,05 (m, 1H) .
Ione-spray MS, [M+H] + = 521, 523, Cl-mønster.
B. 6- Klor- benzo [ b] tiof en- 2- sulf onsyre [ 1- ( 1, 6- diamino- isokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 2 under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre[1-(6-amino-1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2 -oksopyrrolidin-3 -
(S)-yl]-amid som utgangsmaterial. Ingen ekstraksjon ut-føres. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN/H20. De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 5 12,05 (bs, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 8,35 (bs, 2H), 8,20 (s, 1H), 8,00-8,05 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 7,51 (d, 1H) , 7,38 (m, 1H), 6,71-6,80 (m, 2H), 6,51 (bs, 2H), 4,30 (m, 3H), 3,20 (m, 2H) , 2,15 (m, 1H), 1,71 (m, 1H) .
Ione-spray MS, [M+H] + = 502, 504, Cl-mønster.
EKSEMPEL 15
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 7- Metyl- lH- kinolin- 2- on og 5- metyl- lH- kinolin- 2- on.
Tittelforbindelsene fremstilles fra m-toluidin og cin-namoylklorid ifølge prosedyren beskrevet i Synthesis 1975, 73 9. Den erholdte ubehandlede faste rest tritureres i Et20/heksaner og filtreres for å oppnå en blanding av produkt-isomers i et forhold av 1,5:1 av 7-metyl-lH-kinolin-2-on til 5-metyl-lH-kinolin-2-on som et beige fast stoff. Flere forsøk på rensing ved fraksjonell krystalli-sering i metanol ga bare en beriket 2:l-blanding av isomerer som anvendes i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,85 (d, 1H) , 7,53 (d, 1H) , 7,09 (s, 1H), 7,01 (d, 1H), 6,42 (d, 1H), 2,38 (s, 3H) for den vesentlige isomer (7-metyl); og 5 8,03 (d, 1H), 7,38 (dd, 1H), 7,17 (S, 1H), 7,01 (d, 1H), 6,51 (d, 1H), 2,50 (s, 3H) for minor isomer (5-metyl).
B. 2- Klor- 7- metyl- kinolin og 2- klor- 5- metyl- kinolin.
Tittelforbindelsene fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del E under anvendelse av en 2:1 blanding av 7-metyl-1H-kinolin-2-on og 5-metyl-lH-kinolin-2-on istedenfor 7-metyl-2H-isokinolin-l-on. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med en gradient av 5% EtOAc/- CH2C12 til 10% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå 2:l-blanding av 2-klor-7-metyl-kinolin til 2-klor-5-metyl-kinolin som et beige fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,02 (d, 1H) , 7,78 (s, 1H) , 7,68 (d, 1H), 7,39 (m, 1H), 7,30 (d, 1H), 2,56 (s, 3H) forden vesentlige isomer (7-metyl); og 5 8,25 (d, 1H), 7,86 (d, 1H), 7,60 (dd, 1H), 7,39 (m, 2H), 2,65 (s, 3H) for den mindre forekommende isomer (5-metyl). C. 7- Brommetyl- 2- klor- kinolin og 5- brommetyl- 2- klor- kinolin.
Tittelforbindelsene fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av en 2:l-blanding av 2-klor-7-metyl-kinolin og 2-klor-5-metyl-kinolin istedenfor 1-klor-7-metyl-isokinolin. Råblandingen av de erholdte isomerer renses partielt ved triturering i EtOAc/heksaner hvilket gir 7-brommetyl-2-klor-kinolinet som et beige fast stoff (7,4 g, 38%).
<1>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,10 (d, 1H) , 8,00 (s, 1H) , 7,82 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,67 (s, 2H).
En beriket 2:1-blanding av 5-brommetyl-2-klor-kinolin og 7-brommetyl-2-klor-kinolin isoleres som et beige fast stoff (6,8 g) fra det konsentrerte filtrat ved fraksjonell omkrystallisering i Et20/heksaner/EtOAc.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,43 (d, 1H) , 8,09 (dd, 1H) , 8,03 (m, 1H), 7,68 (ra, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,88 (s, 2H) for den vesentlige isomer (5-brommetyl). D. [ 1-( 2- Klor- kinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)-yl]- karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 7-brommetyl-2-klor-kinolin istedenfor 7-brommetyl-l-klor-isokinolin. Råproduktet tritureres i 20% EtOAc/heksaner og filtreres for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,10 (d, 1H), 7,83 (s, 1H) , 7,80 (d, 1H) , 7,46 (d, 1H) , 7,40 (d, 1H) , 5,17 (bs, 1H) , 4,68
(AB, 2H), 4,25 (m, 1H) , 3,26 (m, 2H), 2,64 (m, 1H) , 1,88 (m, 1H) , 1,46 (s, 9H) .
E. 7-( 3-( S)- Amino- 2- oksopyrrolidin- 1- ylmetyl)- 2- klor- kino-1inh<y>droklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) 8 8,75 (bs, 2H) , 8,47 (d, 1H) , 8,06 (d, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 4,69 (AB, 2H), 4,15 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 2,43 (m, 1H), 2, 04 (m, 1H) .
F. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 7-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-2-klor-kinolinhydroklorid istedenfor 7-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-1-klor-isokinolinhydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 1, del J. Råproduktet tritureres i 20% EtOAc/heksaner og filtreres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,38 (s, 1H) , 8,08 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,76 (m, 3H), 7,38 (d, 1H), 7,36 (dd, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,25 (m, 1H), 5,44 (s, 1H), 4,61 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,78 (m, 1H), 3,23 (m, 2H), 2,60 (m, 1H), 2,10 (m, 1H). FAB MS, [M+H] += 496, 498, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet C=60,54%, H=4,47%, N=8,47%, Cl=7,15%, funnet C=60,44%, H=4,18%, N=8,45, Cl=7,19%.
G. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid omdannes til tittelforbindelsen ved oppvarming ved 125°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råproduktet renses partielt ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 60% CH3CN/H2O (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner konsentreres in vacuo, filtreres og triturated med MeOH som tidligere beskrevet for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<2>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,62 (bs, 2H), 8,38 (s,lH),
8,31 (d, 1H) , 8,25 (d, 1H) , 8,03 (d,1H), 7,94 (d, 1H) , 7,86 (d, 1H) , 7,72 (d, 1H) , 7,55 (s, 1H) , 7,43 (s, 1H) , 7,32 (dd, 1H), 7,27 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 4,50 (AB, 2H), 4,11 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,09 (m, 2H), 2,00 (m, 1H) , 1,58 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H] <+>= 477. Elementanalyse beregnet C=54,93%, H=4,27%, N=9,49%, funnet C=54,69%, H=4,24%, N=9,30%. Den enantiomere renhet er 81,9% ee bestemt med analytisk Chiralpak AS RP-HPLC.
EKSEMPEL 16
6- Klor- benzo Tb] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre- [ 1-( 2- klor- kinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN fra 7- (3-(S) -amino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-2-klor-kinolin-hydroklorid som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K, under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 9, del A, B og C, istedenfor 7-metoksynaf talen- 2 -sul f onylklorid. Råproduktet tritureres fra
EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,77 (d, 1H) , 8,42 (d, 1H) , 8,27 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,52 (dd, 1H), 7,48 (d, 1H), 4,55 (AB, 2H), 4,28 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 2,18 (m, 1H), 1,71 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H] <+>= 506, 508, Cl-mønster.
B. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S) - yl] - amidtrifluoracetat.
6- Klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid omdannes til tittelf orbindelsen ved oppvarming ved 12 0°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (DMS0-d6, 500 MHz) 8 8,73 (d, 1H) , 8,34 (d, 1H) , 8,29 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,89 (d, 1H), 7,54 (dd, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,04 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 6,42 (d, 1H), 4,53 (AB, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 2,18 (m, 1H), 1,72 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 487.
EKSEMPEL 17
Benzo Tb] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7- ylmetyl)- 2-oksopyrrolidin- 3- ( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CHC13 istedenfor CH3CN fra 7- (3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl)-2-klor-kinolin-hydroklorid som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 8, del A istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid. Råproduktet tritureres fra CH2C12 for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>K NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,08 (d, 1H) , 7,95 (d, 1H) , 7,88 (m, 2H), 7,99 (d, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,39 (m, 2H), 5,62 (s, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,95 (m, 1H), 3,27 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,16 (m, 1H).
B. Benzo Tb] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid omdannes til tittelforbindelsen ved oppvarming ved 130°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 60% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 500 MHz) 8 8,68 (d, 1H), 8,35 (d, 1H) , 8,09 (dd, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,02 (dd, 1H), 7,90 (d, 1H), 7.52 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,04 (d, 1H), 4.53 (AB, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,17 (m, 2H), 2,18 (m, 1H) , 1,72 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H] <+>= 453.
EKSEMPEL 18 og 19
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- vil- metyl- amidtrifluoracetat og 7- metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- metyl-[ 2- okso- l-( 2- okso- l, 2- dihvdro- kinolin- 7- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)-yll- amid.
A. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metyl amid.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,4 g, 0,81 mmol), fremstilt som i EKSEMPEL 15, del F, oppløses i DMF (20 ml) og avkjøles til 0°C. Til løsningen tilsettes metyljodid (0,28 g, 2,01 mmol) og natriumhydrid (34 mg, 0,85 mmol, 60% mineraloljedispersjon). Isvannbadet fjernes, og blandingen omrøres ved romtemperatur i 3 timer. Den resulterende løsning helles i en skilletrakt og fortynnes med EtOAc (100 ml). Det organiske lag vaskes med IN HC1, H20 og mettet NaCl. Den organiske fase tørkes deretter over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 10% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (0,36 g, 0,71 mmol) som et fast stoff.
<X>U NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,44 (s, 1H) , 8,09 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,82 (dd, 1H), 7,78 (m, 3H), 7,42 (dd, 1H), 7,40 (d, 1H) , 7,28 (dd, 1H), 7,26 (s, 1H), 5,00 (m, 1H) , 4,62 (AB, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,23 (m, 2H), 2,84 (s, 3H), 2,33 (m, 1H) , 2,03 (m, 1H) .
B. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metyl- amidtrifluoracetat og 7- metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- metyl-[ 2- okso- l-( 2- okso- l, 2- dihydro- kinolin- 7- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)-yl]- amid.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid omdannes til tittelforbindelsene ved oppvarming ved 125°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råblandingen av produkter renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metyl-amidtrifluoracetat som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,42 (s, 1H) , 8,33 (d, 1H) , 8,04 (d, 1H), 7,96 (d, 1H) , 7,87 (d, 1H), 7,70 (dd, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,02 (d, 1H) , 4,93 (m, 1H) , 4,51 (AB, 2H) , 3,89 (s, 3H) , 3,18 (m, 2H) , 2,70 (s, 3H) , 2,02 (m, 1H) , 1,78 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H] += 491. Elementanalyse beregnet med 1,8 mol H20 beregn. C=52,79%, H=4,84%, N=8,80%, funnet C=52,80%, H=4,35%, N=8,55%.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-metyl-[2-okso-l-(2-okso-l,2-dihydro-kinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid isoleres også fra reaksjonsblandingen som biprodukt.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,42 (s, 1H) , 8,04 (d, 1H) , 7,97 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,45 (d, 1H) , 4,90 (m, 1H) , 4,40 (AB, 2H) , 3,89 (s, 3H) , 3,15 (m, 2H), 2,71 (s, 3H), 2,01 (m, 1H), 1,76 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H] <+>= 492.
EKSEMPEL 20
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolinS- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. Tl-( 2- Klor- kinolin- 5- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S) - yll- karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av en 2:l-blanding av 5-brommetyl-2-klor-kinolin til 7-brommetyl-2-klor-kinolin, som fremstilt i EKSEMPEL 15, del C, istedenfor 7-brommetyl-1-klor-isokinolin. Råproduktet blanding renses ved kolonnekromatografi under eluering med 1% MeOH i 25% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå den hovedsakelige tittelforbindelse som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,53 (d, 1H) , 7,98 (d, 1H), 7,69 (dd, 1H) , 7,50 (d, 1H), 7,41 (d, 1H), 5,59 (d, 1H) , 4,89 (AB, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 1,86 (m, 1H), 1,45 (s, 9H).
B. 5-( 3-( S)- Amino- 2- oksopyrrolidin- l- ylmetyl)- 2- klor-kinolinhydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(2-klor-kinolin-5-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMS0-d6, 300 MHz) 8 8,63 (d, 1H), 8,59 (bs, 3H), 7,94 (d, 1H) , 7,81 (m, 1H) , 7,65 (m, 2H) , 4,89 (s, 2H), 4,08 (m, 1H), 3,24 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 1,94 (m, 1H) . C. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 5-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 5-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-2-klor-kinolinhydroklorid istedenfor 7-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-1-klor-isokinolinhydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 1, del J. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 25% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (CDC13( 300 MHz) 6 8,36 (d, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,98 (d, 1H) , 7,91 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,25 (dd, 1H), 5,40 (s, 1H), 4,82 (AB, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,71 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 1,98 (m, 1H) . EI MS, [M] <+>= 495, 497, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet C=60,54%, H=4,4 7%, N=8,47%, Cl=7,15%, funnet C=59,79%, H=4,70%, N=7,88, Cl=7,21%. D. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin5-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid omdannes til tittelforbindelsen ved oppvarming ved 125 °C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råproduktet renses partielt ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produkt f raks joner konsentreres in vacuo, filtered, triturated med MeOH og renses deretter ytterligere ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 3% MeOH/- CH2C12 hvilket gir tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,48 (d, 1H), 8,37 (s,lH), 8,23 (d,lH), 8,03 (d, 1H), 7,93 (d, 1H) , 7,72 (m, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,07 (d, 1H), 4,71 (AB, 2H), 4,11 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,00 (m, 2H) , 1,94 (m, 1H) , 1,48 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] += 477. Elementanalyse beregnet med 2,5 mol H20 beregn. C=50,98%, H=4,14%, N=8,38%, funnet C=50,96%, H=4,14%, N=8,38%. Den enantiomere renhet er 84,5% ee bestemt med analytisk Chiralpak AS RP-HPLC.
EKSEMPEL 21 og 22
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin- 5- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] - metyl- amidtrifluoracetat og 7- metoksynaf talen- 2- sul f onsyre- metyl- [ 2- okso- l- ( 2- okso-1, 2- dihydro- kinolin- 5- ylmetyl) - pyrrolidin- 3 - ( S) - yl] - amid.
A. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 5-ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - metyl amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som i EKSEMPEL 18 og 19, del A under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 50% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
2H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,42 (s, 1H) , 8,38 (s, 1H) , 7,97 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,78 (m, 2H), 7,66 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,30 (d, 1H), 7,25 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 4,80 (AB, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,08 (m, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,22 (m, 1H) , 1,80 (m, 1H) .
B. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin- 5-ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - metyl- amidtrif luoracetat og 7- metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- metyl-[ 2- okso- l-( 2- okso- l, 2- dihydro- kinolin- 5- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)-yl]- amid.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid omdannes til tittelforbindelsene ved oppvarming ved 12 0°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin- 5 -ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metyl-amidtrifluoracetat som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,46 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,03 (d,lH), 7,96 (d,lH), 7,70 (m, 2H), 7,60 (d, 1H), 7,58 (S, 1H), 7,36 (dd, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,06 (d, 1H), 4,90 (m, 1H), 4,71 (AB, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,11 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 1,95 (m, 1H), 1,68 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 491. 7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-metyl-[2-okso-1- (2-okso-l,2-dihydro-kinolin-5-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid isoleres også fra reaksjonsblandingen som biprodukt .
<*>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,39 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,98 (d,lH), 7,94 (d,1H), 7,68 (d, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,34 (dd, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,46 (d, 1H) , 4,88 (m, 1H) , 4,60 (AB, 2H), 3,89 (s, 3H) , 3,08 (m, 1H), 2,97 (m, 1H) , 2,63 (s, 3H), 1,96 (m, 1H) , 1,65 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>= 492.
EKSEMPEL 23 og 24
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin- 6- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yll- amid og 7- metoksvnaftalen-2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( 2- okso- l. 2- dihydro- kinolin- 6- ylmetyl) - pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
A. 6- Metyl- lH- kinolin- 2- on.
Tittelforbindelsen fremstilles fra p-toluidin og cin-namoylklorid ifølge prosedyren beskrevet i Synthesis 1975, 73 9. Det erholdte råprodukt tritureres i Et20/heksaner og filtreres for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff som anvendes i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (DMSO-d6> 300 MHz) 5 11,60 (bs, 1H) , 7,82 (d, 1H) , 7,41 (s, 1H), 7,30 (d, 1H), 7,18 (d, 1H), 6,45 (d, 1H), 2,30 (s, 3H).
B. 2- Klor- 6- metyl- kinolin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del E under anvendelse av 6-metyl-lH-kinolin-2-on istedenfor 7-metyl-2H-isokinolin-l-on. Råproduktet ble utfelt under nøytraliseringen av den vandige opparbeidelse, og det faste stoff filtreres og tørkes. Råproduktet omkrystalliseres i MeOH for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,02 (d, 1H), 7,92 (d, 1H) , 7,60 (S, 1H) , 7,58 (d, 1H), 7,33 (d, 1H) , 2,53 (s, 3H) .
C. 6- Brommetyl- 2- klor- kinolin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 2-klor-6-metyl-kinolin istedenfor l-klor-7-metyl-isokinolin. Det erholdte råprodukt omkrystalliseres fra 50% EtOAc/heksaner hvilket gir 7,4 g (38%) av 6-brommetyl-2-klor-kinolinet som et beige fast stoff
XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,08 (d, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,83 (s, 1H), 7,77 (dd, 1H), 7,40 (d, 1H) , 4,65 (s, 2H) . EI MS, [M] += 256, 258, Cl-mønster. D. [ 1-( 2- Klor- kinolin- 6- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)-yl1 - karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 6-brommetyl-2-klor-kinolin istedenfor 7-brommetyl-1-klor-isokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2% MeOH/CH2Cl2 til 4% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,08 (d, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,69 (S, 1H) , 7,61 (dd, 1H) , 7,40 (d, 1H) , 5,23 (bs, 1H) , 4,67 (AB, 2H), 4,25 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
E. 6-( 3-( S)- Amino- 2- oksopyrrolidin- l- ylmetyl)- 2- klor- kino-linhydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(2-klor-kinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,74 (bs, 3H), 8,48 (d, 1H), 8,00 (S, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,64 (AB, 2H), 4,11 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 2,42 (m, 1H) , 2, 09 (m, 1H) .
F. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- klor- kinolin- 6-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-(3-(S)-amino-2 -oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-2-klor-kinolinhydroklorid som utgangsmaterial og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid. Råproduktet tritureres i CH2C12 og filtreres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,36 (s, 1H) , 8,03 (d, 1H) , 7,97 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,75 (dd, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,25 (dd, 1H), 5,43 (s, 1H), 4,58 (AB, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,76 (m, 1H), 3,22 (m, 2H), 2,59 (m, 1H), 2,09 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 496, 4 98, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet C=60,54%, H=4,47%, N=8,47%, Cl=7,15%, funnet C=60,43%, H=4,17%, N=8,37, Cl=7,06%.
G . 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 2- aminokinolin6-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid og 7- metoksynaf talen- 2 - sulf onsyre- [ 2- okso- l-( 2- okso- l, 2- dihydro-kinolin- 6 - ylmetyl) - pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-klor-kinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -metylamid omdannes til tittelforbindelsene ved oppvarming ved 13 0°C som beskrevet i EKSEMPEL 2. Råblandingen av produktene renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 60% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner konsentreres in vacuo og renses deretter ytterligere ved kolonnekromatografi under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2 hvilket gir 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 6 8,38 (s, 1H) , 8,23 (d, 1H) , 8,03 (d,lH), 7,93 (d,lH), 7,80 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,55 (S, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 7,25 (d, 1H), 6,73 (d, 1H), 6,43 (bs, 2H), 4,37 (AB, 2H), 4,10 (m, 1H), 3,88 (S, 3H), 3,04 (m, 2H), 1,96 (m, 1H), 1,51 (m, 1H). FAB MS, [M+H] += 477. Elementanalyse beregnet med 0,6 mol H20 beregn. C=61,58%, H=5,22%, N=ll,49%, funnet C=61,59%, H=5,08%, N=ll,14%. Den enantiomere renhet er 87,0% ee bestemt med analytisk Chiralpak AS RP-HPLC.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(2-okso-l, 2-dihydro-kinolin-6-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid isoleres også fra reaksjonsblandingen som et ubetydelig biprodukt.
<*>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 11,70 (bs, 1H) , 8,37 (s, 1H) , 8,21 (d,lH), 8,01 (d,lH), 7,93 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,25 (m, 1H), 6,47 (d, 1H), 4,35 (s, 2H), 4,12 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,06 (m, 2H), 1,97 (m, 1H), 1,53 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 478.
EKSEMPEL 25
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( lH- benzoimidazol- 5-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. [ 1-( 4- Nitrobenzyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 4-nitrobenzylbromid istedenfor 7-brommetyl-l-klor-isokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/CH2Cl2 til 25% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et gult fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 6 8,20 (d, 2H) , 7,43 (d, 2H) , 5,18 (bs, 1H), 4,58 (AB, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 1,93 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
B. 3- ( S)- Amino- 1-( 4- nitrobenzyl)- pyrrolidin- 2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(4-nitrobenzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) 8 8,65 (bs, 3H) , 8,22 (d, 2H) , 7,57 (d, 2H), 4,59 (AB, 2H), 4,10 (m, 1H), 3,32 (m, 2H), 2,40 (m, 1H), 2,03 (m, 1H). C. 2, 2, 2- Trifluor- N-[ 1-( 4- nitrobenzyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- acetamid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-(S)-amino-1-(4-nitrobenzyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial og trifluoreddiksyreanhydrid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid. Råproduktet konsentreres in vacuo og anvendt i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,24 (d, 2H) , 7,43 (d, 2H) , 7,25 (bs, 1H) , 4,60 (AB, 2H) , 4,44 (m, 1H) , 3,35 (m, 2H) , 2,80 (m, 1H), 2,01 (m, 1H). D. N-[ 1-( 4- Acetylamino- 3- nitrobenzyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S) - vi]- 2, 2. 2- trifluoracetamid.
Til en løsning av 2,2,2-trifluor-N-[1-(4-nitrobenzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-acetamid (0,75 g, 2,27 mmol) i AcOH (12 ml) tilsettes eddiksyreanhydrid (1 ml) og en katalytisk mengde av 10% palladium på aktivert karbon. Den heterogene blanding hydrogeneres ved romtemperatur i et Parr-apparat under 70 p.s.i. H2. Etter 4,5 h filtreres reaksjonsblandingen gjennom en propp av celitt, vaskes med CH2C12 og deretter MeOH. Råproduktet konsentreres in vacuo hvilket gir 1,2 g ubehandlet N-[1-(4-acetylamino-benzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-2,2,2-trifluoracetamid som en rest (våt med HOAc). En løsning av det råe N-[1-(4-acetylamino-benzyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-2,2,2-trifluoracetamid (1,2 g, vått med AcOH) i AcOH (12 ml) avkjøles ved 0°C, og eddiksyreanhydrid (1 ml) tilsettes. Den resulterende blanding behandles med en katalytisk mengde av NaN02, etterfulgt av dråpevis tilsetning av rykende HN03 (3,8 ml) . Reaksjonsblandingen omrøres ved 0°C i 1,5 timer, deretter ved romtemperatur i 1,5 timer. Etter avkjøling på nytt til 0°C tilsettes en blanding is/isvann langsomt med omrøring. Blandingen fortynnes ytterligere med vann og ekstraheres med EtOAc (3 x 50 ml) . De kombinerte organiske lag vaskes to ganger med vann. Den organiske fase tørkes over vannfritt MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 25% EtOAc/CH2Cl2 til 50% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (0,65 g, 1,67 mmol) som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 10,27 (s, 1H) , 8,77 (d, 1H) , 8,08 (s, 1H) , 7,54 (m, 1H) , 7,40 (bs, 1H), 4,51 (AB, 2H) , 4,46 (m, 1H), 3,34 (m, 2H) , 2,78 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 1,98 (m, 1H) for hovedkomponenten av en blanding av rotamerer.
E. 3-( S) - Amino- 1-( 4- amino- 3- nitrobenzyl)- pyrrolidin- 2- on.
Til en løsning av N-[1-(4-acetylamino-3-nitrobenzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-2,2,2-trifluoracetamid (0,65 g, 1,67 mmol) i EtOH (4 ml) tilsettes 1 N NaOH-løsning (6 ml). Den gule blanding oppvarmes ved 50°C i 3 timer idet en brun løsning resulterte. Reaksjonsblandingen får avkjøles og konsentreres deretter in vacuo. Den ubehandlede rest fortynnes med vann og 1 N NaOH 10 ml), og den vandige fase ekstraheres med CHC13 (4 x 50 ml). De kombinerte organiske lag tørkes over vannfritt Na2S04, filtreres og konsentreres for å oppnå tittelf orbindelsen (0,22 g, 0,88 mmol) som et gult fast stoff som anvendes som det er er i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,98 (s, 1H) , 7,30 (dd, 1H) , 6,79 (d, 1H) , 6,12 (bs, 2H), 4,36 (AB, 2H), 3,67 (m, 1H), 3,19 (m, 2H), 2,43 (m, 1H), 1,71 (m, 1H).
F. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- 3- nitro-benzyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-(S)-amino-1-(4-amino-3-nitrobenzyl)-pyrrolidin-2-on istedenfor 7-(3- (S)-amino-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl)-1-klor-iso-kinolinhydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 1, del J. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 20% EtOAc/CH2Cl2 til 50% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 6 8,37 (s, 1H) , 7,94 (s, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,82 (d, 1H) , 7,75 (dd, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,25 (dd, 1H), 7,19 (dd, 1H) , 6,77 (d, 1H), 6,12 (bs, 2H), 5,38 (bs, 1H), 4,30 (AB, 2H) , 3,94 (s, 3H), 3,73 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 2,58 (m, 1H), 2,05 (m, 1H).
G. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( lH- benzoimidazol- 5-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Til en løsning av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-amino-3-nitrobenzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,38 g, 0,82 mmol) i 88% HC02H (15 ml) tilsettes en katalytisk mengde av 10% palladium på aktivert karbon. Den heterogene blanding hydrogeneres ved romtemperatur i et Parr-apparat under 70 p.s.i. H2 i 1 time. Reaksjonsblandingen filtreres gjennom en propp av celitt, vaskes med EtOAc og MeOH, og filtratet konsentreres in vacuo. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen (0,17 g, 0,30 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,38 (bs, 1H) , 8,38 (s, 1H) , 8,25 (d, 1H), 8,03 (d, 1H) , 7,95 (d, 1H), 7,78 (d, 1H) , 7,72 (dd, 1H), 7,66 (bs, 1H) , 7,56 (s, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 4,48 (AB, 2H), 4,09 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,06 (m, 2H) , 1,96 (m, 1H) , 1,53 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>= 451. Elementanalyse beregnet med 1,2 mol H20 beregn. C=51,19%, H=4,37%, N=9,55%, funnet C=51,19%, H=3,95%, N=9,36%.
EKSEMPEL 26
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 2-( lH- benzoimidazol- 5-yletyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. Boc- L- Asp( H)- OBn.
Boc-L-Asp-OBn (15 g, 46,4 mmol) oppløses i THF (50 ml) og avkjøles til -10°C. Løsningen behandles med N-metylmorfolin (4,9 g, 48,7 mmol) og omrøres i 5 minutter. Til løsningen tilsettes dråpevis isobutylklorformiat (6,3 g, 46,4 mmol). Etter at tilsetningen er fullstendig, omrøres blandingen i 1 minutt og deretter filtreres gjennom en propp av celitt. Filtratet avkjøles til -10°C. Til løsningen tilsettes natriumborhydrid (2,63 g, 70 mmol) som på forhånd er opp-løst i vann (50 ml). Den resulterende løsning omrøres i 2 minutter. Løsningen helles i en skilletrakt og fortynnes med EtOAc (800 ml). Det organiske lag vaskes med vann og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Residuet tilsettes til en løsning av oxalylklorid (30 ml, 60 mmol, 2M løsning i CH2C12) , og metylsulfoksid (7,25 g, 92,8 mmol) i CH2C12 (250 ml) ved - 78°C. Blandingen omrøres ved -78°C i 40 minutter, deretter tilsettes trietylamin (14 g, 140 mmol). Reaksjonsblandingen omrøres ved -78°C i 1 time og deretter omrøres ved romtemperatur i 3 0 minutter. Løsningen helles i en 2 0% citronsyre/vannløsning (200 ml). Den resulterende blanding helles i en skilletrakt, og lagene separeres. Det organiske lag vaskes med vann og mettet NaCl. Den organiske fase tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Den ubehandlede rest renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/heksaner til 3 0% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen (12,0 g, 39 mmol) som en olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 9,68 (s, 1H) , 7,32 (m, 4H) , 5,42 (bs, 1H), 5,16 (s, 2H), 4,62 (m, 2H), 3,05 (ddd, 2H), 1,40 (s, 9H) .
B. { l- f2-( 4- Nitrofenyl)- etyl]- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl}-karbaminsyre- tert- butylester.
Til en løsning av Boc-L-Asp(H)-OBn (3,3 g, 10,7 mmol) oppløst i metanol (50 ml) tilsettes 4Å molekylsikt, 4-nitrofenetylaminhydroklorid (4,35 g, 21,5 mmol) og trietylamin (2,25 g, 22,2 mmol). Løsningen omrøres ved romtemperatur i 45 minutter, og deretter behandles blandingen med natriumcyanoborhydrid (0,72 g, 11,5 mmol). Reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur i 16 timer. Etter denne tid tilsettes 1 N NaOH (10 ml) etterfulgt av vann (25 ml). Den resulterende blanding omrøres i 30 minutter, og deretter konsentreres in vacuo til et mindre volum. Løsningen fortynnes med EtOAc (250 ml), filtreres gjennom en propp av celitt, vaskes med vann og EtOAc. Løsningen helles i en skilletrakt og lagene separeres. Det vandige lag ekstraheres med EtOAc. De kombinerte organiske lag vaskes med IN HC1, H20, mettet NaHC03-løsning og mettet NaCl. Den organiske fase tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Den ubehandlede rest renses ved kolonnekromatografi under eluering med 50% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (1,46 g, 4,18 mmol) som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,17 (d, 2H) , 7,39 (d, 2H) , 5,12 (bs, 1H), 4,09 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H), 3,25 (m, 2H) , 2,99 (t, 2H), 2,62 (m, 1H), 1,83 (m, 1H), 1,44 (s, 9H). C. 3-( S)- Amino- 1-[ 2-( 4- nitrofenyl)- etyl]- pyrrolidin- 2- on-hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av {l-[2-(4-nitrofenyl)-etyl]-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl}-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3/CD3OD, 300 MHz) 8 8,77 (bs, 1H) , 8,72 (bs, 1H), 8,16 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 4,15 (m, 1H), 3,59 (t, 2H), 3,38 (m, 2H), 2,98 (t, 2H), 2,58 (m, 1H), 2,37 (m, 1H) . D. 2, 2, 2- Trifluor- N-{ l-[ 2-( 4- nitrofenyl)- etyl]- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl}- acetamid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-(S)-amino-1-[2-(4-nitrofenyl)-etyl]-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial og trifluoreddiksyreanhydrid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid. Råproduktet konsentreres in vacuo og anvendes som det er i det på-følgende trinn.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,17 (d, 2H), 8,15 (bs, 1H), 7,39 (d, 2H), 4,40 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,34 (m, 2H), 2,99 (t, 2H), 2,68 (m, 1H), 1,96 (m, 1H) .
E. N-{ l-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- nitrofenyl)- etyl]- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- 2, 2, 2- trifluoracetamid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 25, del D under anvendelse av 2,2,2-trifluor-N-{l-[2-(4-nitro-fenyl)-etyl]-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl}-acetamid som utgangsmaterial. Det rå mellomprodukt konsentreres in vacuo hvilket gir N-{l-[2-(4-acetylamino-fenyl)-etyl]-2-oksopyrrolidin-3- (S)-yl]-2,2,2-trifluoracetamid som en rest
(våt med HOAc) som også anvendes direkte i nitrerings-trinnet. Den salpetersure reaksjonsblanding får oppvarmes til romtemperatur og omrøres i 18 timer. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 25% EtOAc/CH2Cl2 til 50% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 10,24 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H) , 7,98 (bs, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,26 (bs, 1H), 4,43 (m, 1H), 3,58 (m, 2H), 3,38 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 2,06 (s, 3H) , 1,98 (m, 1H) for hovedkomponenten av en blanding av rotamerer.
F. 3-( S)- Amino- 1-[ 2-( 4- amino- 3- nitrofenyl)- etyl]- pyrrolidin- 2- on.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 25, del F under anvendelse av N-{1-[2-(4-acetylamino-3-nitro-fenyl)-etyl]-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-2,2,2-trifluor-acetamid som utgangsmaterial. Reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur i 18 timer. Etter lignende opparbeidelse konsentreres den organiske fase in vacuo for å oppnå tittelforbindelsen som et gult fast stoff som anvendes som det er i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 7,90 (s, 1H) , 7,25 (d, 1H) , 6,80 (d, 1H), 6,24 (bs, 1H), 3,48 (m, 3H), 3,26 (m, 2H), 2,77 (t, 2H), 2,40 (m, 1H), 2,25 (bs, 3H), 1,69 (m, 1H).
G. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-{ 1-[ 2-( 4- amino- 3- nitro-fenyl)- etyl]- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl}- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-(S)-amino-1-[2-(4-amino-3-nitrofenyl)-etyl]-pyrrolidin-2-on istedenfor 7-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl)-1-klor-isokinolinhydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 1, del J. Etter lignende opparbeidelse konsentreres den organiske fase in vacuo for å oppnå tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff som anvendes som det er i det påfølgende trinn.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,36 (s, 1H) , 7,87 (d, 1H) , 7,83 (S, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,72 (dd, 1H), 7,27 (dd, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,13 (dd, 1H), 6,68 (d, 1H), 6,04 (bs, 2H), 5,33 (bs, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,68 (m, 1H), 3,44 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 2,68 (t, 2H), 2,49 (m, 1H), 1,98 (m, 1H).
H. 7- Metoksvnaftalen- 2- sulfonsyre-{ 1-[ 2-( lH- benzoimidazol-5- yl)- etyl] - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
7-Metoksynaftalen-2-sulfonsyre-{1-[2-(4-amino-3-nitro-fenyl)-etyl]-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl}-amid omdannes til tittelforbindelsen som beskrevet i EKSEMPEL 25, del H. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H2O (0,1% TFA) til 60% CH3CN/H2O (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,38 (bs, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,13 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,69 (s, 1H) , 7,65 (d, 1H) , 7,55 (s, 1H), 7,38 (d, 1H) , 7,32 (dd, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,39 (m, 2H), 3,11 (m, 2H), 2,88 (t, 2H), 1,94 (m, 1H), 1,47 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 465. Elementanalyse beregnet med 1,4 mol H20 beregn. C=51,68%, H=4,65%, N=9,27%, funnet C=51,68%, H=4,25%, N=8,93%.
EKSEMPEL 27
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- acetyl-[ 2- okso- l-( 2- pyrrolo[ 3, 2- b] pyridin- 1- yletyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. lH- Pvrrolo [ 3, 2- c] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 3-pikolin-N-oksid ifølge prosedyren beskrevet i Tetrahedron 1993, 2885. Det erholdte råprodukt oppløses i EtOH og avfarvende karbon tilsettes. Blandingen filtreres gjennom en stor kolonne av Si02-gel under eluering med EtOH for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<2>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 10,92 (bs, 1H) , 8,98 (s, 1H) , 8,31 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 6,66 (d, 1H).
B. Pyrrolo[ 3, 2- c] pyridin- l- yl- eddiksyre- tert- butvlester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin som beskrevet i EKSEMPELS 18 og 19, del A under anvendelse av tert-butyl-bromacetat istedenfor metyljodid. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 3% MeOH/CH2Cl2 til 6% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som en olje.
<*>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,93 (s, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 6,65 (d, 1H), 4,75 (s, 2H), 1,45 (s, 9H) .
C. Pyrrolo[ 3, 2- c] pyridin- 1- yl- eddiksyre.
Til en løsning av pyrrolo[3,2-c]pyridin-l-yl-eddiksyre-tert-butylester (0,44 g, 1,89 mmol) i CH2C12 (10 ml) ved 0°C tilsettes trifluoreddiksyre (1 ml). Etter 15 minutter, får løsningen oppvarmes til romtemperatur og omrøres i 18 timer. Reaksjonsblandingen konsentreres in vacuo og destilleres deretter azeotropt med toluen for å oppnå 0,5 g av tittelf orbindelsen som en rest (vått med overskudd av TFA) som anvendes som det er i det påfølgende trinn
<X>H NMR (CDCI3 + CD3OD, 300 MHz) 6 9,09 (s, 1H) , 8,34 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,08 (d, 1H), 5,18 (s, 2H) . D. 2- ( S) - Benzyloksykarbonylamino- 4- ( 2- pyrrolo [ 3 , 2- c] pyridin- 1- yl- acetylamino) - smørsyremetylester. Pyrrolo[3,2-c]pyridin-1-yl-eddiksyre (0,50 g, 1,89 mmol), 2- (S) -benzyloksykarbonylamino-4-amino-smørsyremetylester-trifluoracetat (0,93 g, 2,45 mmol), 4-metylmorfolin (0,75 g, 7,41 mmol), og 1-hydroksybenzotriazolhydrate (0,36 g, 2,65 mmol) oppløses i DMF (11 ml), og den resulterende blanding avkjøles til 0°C. 1-(3-Dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiiimidhydroklorid (0,80 g, 4,17 mmol) tilsettes til løsningen. Isbadet fjernes, og reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur. Etter 18 timer fortynnes løsningen med en mettet løsning av NH4C1 og ekstraheres to ganger med EtOAc. De kombinerte organiske lag vaskes med H20, mettet NaHC03 og mettet NaCl. Den organiske fase tørkes over Mg-S04, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i i en gradient av 3% MeOH/CH2Cl2 til 10% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen (0,33 g, 0,78 mmol) som et fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,95 (s, 1H) , 8,35 (d, 1H) , 7,34 (m, 3H), 7,27 (m, 3H), 7,17 (d, 1H), 6,73 (d, 1H), 6,44 (bs, 1H) , 5,45 (d, 1H) , 4,93 (s, 2H) , 4,78 (s, 2H) , 4,08
(m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,67 m, 1H) , 2,90 (m, 1H), 2,03 (m, 1H) , 1,58 (m, 1H) .
E. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- acetyl-[ 2- okso- l-( 2-pyrrolo[ 3, 2- blpyridin- 1- yletyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid-trif luoracetat .
Til en løsning av 2-(S)-benzyloksykarbonylamino-4-(2-pyrrolo[3,2-c]pyridin-1-yl-acetylamino)-smørsyre-metylester (0,51 g, 1,20 mmol) i THF (5 ml) tilsettes diboran (5 ml, 0,500 mmol, 1 M løsning i THF). Den resulterende blanding omrøres ved romtemperatur i 4 timer og, deretter konsentreres in vacuo. Residuet suspenderes i EtOAc (10 ml), behandles med 10 dråper H20, 5 dråper 1 N NaOH, og ytterligere undertrykkes reaksjonen med mettet NH4Cl-solution. Blandingen konsentreres in vacuo til ca. 1/2 volum, fordeles mellom EtOAc og 10% Na2C03-løsning, og lagene separeres. Det vandige lag ekstraheres med EtOAc. De kombinerte organiske faser vaskes med mettet NaCl, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Det erholdte råprodukt renses partielt ved kolonnekromatografi i en gradient av 2% MeOH/CH2Cl2 til 10% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå
[2-okso-l- (2-pyrrolo [3 , 2-c] pyridin-1-yl-etyl) -pyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-benzylester. FAB MS, [M+H] <+>= 379. Til en løsning av denne rå [2-okso-l-(2-pyrrolo[3,2-c]pyridin-1-yl-etyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-benzylester i MeOH (10 ml) og AcOH (3 ml) tilsettes en katalytisk mengde av 10% palladium på aktivert karbon. Den heterogene blanding omrøres ved romtemperatur under en ballong med H2 i 18 timer. Reaksjonsblandingen filtreres gjennom en propp av celitt vaskes med MeOH (3x). Råproduktet konsentreres in vacuo og deretter destilleres azeotropt med toluen for å oppnå 3-(S)-amino-1-(2-pyrrolo[3,2-c]pyridin-1-yl-etyl)-pyrrolidin-2-on-acetat som en rest (vått med overskudd av HOAc). FAB MS, [M+H] += 245. Tittelforbindelsen fremstilles i CH2C12 istedenfor CH3CN som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av ovennevnte 3-(S)-amino-1-(2-pyrrolo[3,2-c]pyridin-l-yl-etyl)-pyrrolidin-2-on-acetat istedenfor 7-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl)-1-klor-isokinolinhydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som fremstilt i EKSEMPEL 1, del J.
Råproduktet renses partielt ved kolonnekromatografi under
eluering i en gradient av 3% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2. Den erholdte rest renses videre ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 6 9,24 (s, 1H) , 8,58 (s, 1H) , 8,48 (d, 1H), 8,20 (d, 1H) , 8,08 (d, 1H) , 8,00 (d, 1H), 7,98 (s, 1H) , 7,75 (dd, 1H) , 7,61 (s, 1H) , 7,42 (dd, 1H) , 7.03 (d, 1H), 4,87 (m, 1H), 4,56 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,63 (m, 2H) , 3,30 (m, 2H) , 2,27 (m, 1H) , 2,15 (s, 3H) , 2.04 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>= 507.
EKSEMPEL 2 8
7- Metoksynaf talen- 2- sulf onsyre- [ 1- ( 4 - amino- kinazol in- 6- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metylamidtrifluoracetat.
A. 6- Metyl- 3H- kinazolin- 4- on.
Natriumhydrid (2,6 g, 65 mmol, 60% mineraloljedispersjon) tilsettes til dioksan (100 ml) ved 0°C. Til løsningen tilsettes 2-amino-5-metyl benzosyre (7,6 g, 50 mmol) etterfulgt av [3-(dimetylamino)-2-azoprop-2-en-l-yliden] dime-tylammoniumklorid (9,9 g, 60 mmol). Etter avkjølingen oppvarmes løsningen til tilbakeløp. Tilbakeløpoppvarmingen fortsettes i 16 timer. Reaksjonsblandingen avkjøles til omgivelsestemperatur, og metanol (3 ml) tilsettes etterfulgt av AcOH (10 ml) . Løsningen oppvarmes deretter under tilbakeløpe i 3 timer. Løsningen avkjøles til omgivelsestemperatur. Løsningen konsentreres. Det resulterende faste stoff fortynnes med vann (60 ml). PH-verdien av den resulterende løsning justeres til 7. Løsningen filtreres. Det resulterende faste stoff tørkes under vakuum for å oppnå tittelforbindelsen (6,0 g, 38 mmol).
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,03 (s, 1H) , 7,89 (s, 1H), 7,57 (m, 2H), 2,41 (s, 3H). EI MS, [M+H] <+>= 507.
B. 4- Klor- 6- metyl- kinazolin.
6-Metyl-3H-kinazolin-4-on (1,1 g, 6,9 mmol) oppløses i toluen (70 ml). Til løsningen tilsettes trietylamin (1,82 g, 18 mmol) og P(0)C13 (1,06 g, 6,9 mmol). Løsningen oppvarmes til tilbakeløp. Etter 3 h helles løsningen i vann (100 ml). Løsningen fortynnes med EtOAc (2 00 ml). Lagene separeres. Det organiske lag vaskes med vann, mettet NaHC03 (aq.) og mettet NaCl (aq.). Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Tittelforbindelsen erholdes som en olje (0,75 g, 4,2 mmol).
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,98 (s, 1H) , 8,04 (s, 1H) , 7,98 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 2,62 (s, 3H).
C. 6- Brommetyl- 4- klor- kinazolin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 4-klor-6-metyl-kinazolin istedenfor l-klor-7-metylisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 5% EtOAc/heksaner til 10% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 9,08 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,00 (dd, 2H), 4,68 (s, 2H) . D. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-( 2- oksopyrrolidin- 3-( S)-yl)- amid.
Til en løsning av trifluoreddiksyre/CH2Cl2 (20 ml) ved 0°C tilsettes (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester (0,4 g, 2 mmol), fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 1, del G. Den resulterende løsning får oppvarmes til omgivelsestemperatur og omrøres i 12 timer. Løsningen konsentreres deretter. Den resulterende olje konsentreres på nytt fra toluen. Oljen oppløses deretter i CH3CN (6 ml) . Til løsningen tilsettes CH2C12 (6 ml) . Den resulterende løsning avkjøles til 0°C, og trietylamin (0,67 g, 6,6 mmol) etterfulgt av 7-metoksynaftalensulfonylklorid (0,64 g, 2,5 mmol), fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 1, del J, tilsettes. Løsningen omrøres i 6 timer. Etter denne tid konsentreres løsningen. Det resulterende rå faste stoff tritureres med EtOAc. Det rå faste stoff renses deretter ytterligere ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2,5% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (0,40 g, 1,25 mmol) som et hvitt skum.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,35 (s, 1H) , 7,88 (d, 1H) , 7,78 (d, 1H), 7,28 (m, 2H), 5,65 (bs, 1H), 5,34 (bs, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,32 (m, 2H), 2,62 (m, 1H), 2,21 (m, 1H) .
E. 7- Metoksynaf talen- 2- sulf onsyre- metyl- ( 2- oksopyrrolidin-3-( S)- yl)- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 6, del A under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-(2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-amid istedenfor 7-metoksynaf talen- 2 -sulf onsyre- [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amid. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 40% EtOAc/CH2Cl2 til 60% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,39 (s, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 7,76 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,42 (bs, 1H), 4,82 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,32 (m, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,31 (m, 1H), 2,05 (m, 1H) .
F. 7- Metoksvnaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- kinazolin- 6-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metylamid.
Til en løsning av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-metyl-(2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-amid (0,35 g, 1,04 mmol) i THF (7 ml) ved 0°C tilsettes LiN(SiMe3)2 (1 ml, 1 mmol, 1 M løsning i THF) . Løsningen omrøres ved 0°C for 4 0 minutter. Etter denne tid tilsettes 6-brommetyl-4-klor-kinazolin (0,24 g, 0,94 mmol). Den resulterende løsning omrøres i 4 timer. Reaksjonen undertrykkes ved tilsetning av en mettet NH4C1-solution. Løsningen fortynnes med EtOAc og vann. Lagene separeres. Det organiske lag vaskes med vann og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres . Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 20% EtOAc/CH2Cl2 til 40% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen (0,25 g, 0,49 mmol) som et hvitt fast stoff.
^ NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 9,03 (s, 1H) , 8,40 (s, 1H) , 8,03 (m, 2H) , 7,89 (d, 1H) , 7,81 (m, 3H) , 7,28 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 4,75 (AB, 1H), 4,50 (AB, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,22 (m, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,38 (m, 1H), 2,03 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 511.
Q. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- kinazolin- 6-yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- metylamidtrifluoracetat .
Til 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-kinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid (0,05 g, 0,1 mmol) suspendert i EtOH (10 ml) tilsettes trietylamin (0,02 g, 0,2 mmol) og ammoniumacetat (0,08 g, 1 mmol). Reaksjonsblandingen oppvarmes til 80°C. Løsningen konsentreres. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen (0,03 g, 0,05 mmol) som et hvitt fast stoff. <X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 5 9,78 (bs, 2H) , 8,78 (s, 1H) , 8,36 (S, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,92 (d, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,68 (m, 2H), 7,56 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,32 (dd, 1H), 4,93 (m, 1H), 4,50 (AB, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,62 (s, 3H), 2,02 (m, 1H), 1,78 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 4 92.
EKSEMPEL 29
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno[ 2, 3- d]-pyrimidin- 6- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amidtrifluoracetat.
A. 2- Amino- 5- metyltiofen- 3- karboksylsyremetylester.
Til en løsning av metylcyanoacetat (19,8 g, 200 mmol) i DMF (25 ml) tilsettes trietylamin (10,9 g, 108 mmol). Til løsningen tilsettes svovel (6,4 g, 200 mmol). Løsningen oppvarmes til 60°C. Over en 20 minutters periode tilsettes propionaldehyde (11,6 g, 200 mmol) dråpevis. Etter av-kjøling får løsningen avkjøles til omgivelsestemperatur i en 1 time. Løsningen omrøres i 16 timer. Reaksjonsblandingen helles i vann (300 ml). Den resulterende løsning ekstraheres med Et20 (2x 200 ml). De kombinerte Et20-erkstrakter vaskes med vann og mettet NaCl (aq.). Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Det resulterende råprodukt omkrystalliseres fra MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen (13,7 g, 80 mmol) som et gult fast stoff.
<X>K NMR (CDC13, 300 MHz) 5 6,58 (s, 1H) , 5,78 (bs, 2H) , 3,78 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).
B. 2- Amino- 5- metyltiofen- 3- karboksylsyre.
Til en løsning av 2-amino-5-metyltiofen-3-karboksylsyremetylester (13,7 g, 80 mmol) i MeOH/H20/THF (400 ml, 1:1:1) tilsettes LiOH H20 (16 g, 400 mmol) . Løsningen oppvarmes til 50°C. Etter 4 timer konsentreres løsningen. Det resulterende residu oppløses i vann. PH-verdien i løsningen justeres til mellom 5-6 under anvendelse av 1 N HC1. Presipitatet oppsamles ved filtrering, vaskes med litt vann og tørkes under vacuum. Tittelforbindelsen (12 g, 76 mmol) erholdes som et gult fast stoff.
EI MS, [M] <+>= 157.
C. 6- Metyl- tieno[ 2. 3- d] pyrimidin- 4- ol.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del A under anvendelse av 2-amino-5-metyltiofen-3-karboksylsyre istedenfor 2-amino-5-metyl benzosyre. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2% MeOH/CH2Cl2 til 6% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
EI MS, [M] <+>= 165.
D. 4- Klor- 6- metyl- tieno[ 2, 3- d] pyrimidin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del B under anvendelse av 6-metyl-tieno[2,3-d]pyrimidin-4-ol istedenfor 6-metyl-3H-kinazolin-4-on. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av CH2C12 til 5% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,84 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H) , 2,68 (s, 3H).
E. 6- Brommetyl- 4- klor- tieno\ 2 . 3- d] pyrimidin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 4-klor-6-metyl-tieno[2,3-d]pyrimidin istedenfor l-klor-7-metylisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 70% CH2Cl2/heksaner til 100% CH2C12 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,84 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H) , 4,72 (s, 2H).
F. [ 1-( 4- Klor- tieno[ 2, 3- d] pyrimidin- 6- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 6-brommetyl-4-klor-tieno[2,3-d]pyrimidin istdenfor 7-brommetyl-l-klorisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2 0% EtOAc/CH2Cl2 til 3 0% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt skum.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,80 (s, 1H) , 7,31 (s, 1H) , 5,15 (bs, 1H), 4,75 (AB, 2H), 4,18 (m, 1H), 3,36 (m, 2H), 2,62 (m, 1H), 1,96 (m, 1H), 1,42 (s, 9H).
G. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- tieno[ 2, 3-d] pyrimidin- 6- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(4-klor-tieno[2,3-d]pyrimidin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester istedenfor [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester. Det resulterende produkt anvendes deretter direkte som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 3 0% EtOAc/CH2Cl2 til 40% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,80 (s, 1H) , 8,32 (s, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,76 (m, 2H), 7,24 (m, 3H), 5,51 (bs, 1H), 4,68
(s, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,78 (m, 1H), 3,32 (m, 2H), 2,62 (m, 1H) , 2,12 (m, 1H) .
H. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno[ 2, 3-dlpyrimidin- 6- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del G under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-tieno[2,3-d]pyrimidin-6-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-kinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,33 (m, 2H), 8,21 (d, 1H), 8,02 (m, 2H) , 7,91 (d, 1H) , 7,70 (dd, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,43 (S, 1H), 7,30 (dd, 1H), 4,58 (AB, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,17 (m, 2H), 1,98 (m, 1H), 1,55 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 4 84.
EKSEMPEL 3 0
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 2-( 6- amino- tieno[ 2, 3-d] pyrimidin- 6- yl- metyl)- 2- oksopvrrolidin- 3-( S)- yll amid-trif luoracetat .
A. 4- Klor- 7- metyl- tieno[ 3, 2- d] pyrimidin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del B under anvendelse av 7-metyl-tieno[2,3-d]pyrimidin-4-ol istedenfor 6-metyl-3H-kinazolin-4-on. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av CH2C12 til 10% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et fast stoff.
<*>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 9,02 (s, 1H) , 7,68 (s, 1H) , 2,51 (s, 3H).
B. 7- Brommetyl- 4- klor- tieno[ 3, 2- d] pyrimidin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 4-klor-7-metyl-tieno[3,2-d]-pyrimidin istedenfor l-klor-7-metylisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 5% EtOAc/heksaner til 10% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13< 300 MHz) 8 9,04 (s, 1H) , 8,08 (s, 1H) , 4,77 (s, 2H). C. [ 1-( 4- Klor- tieno[ 3, 2- d] pyrimidin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester. Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 7-brommetyl-4-klor-tieno[3,2-d]pyrimidin istedenfor 7-brommetyl-l-klorisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 20% EtOAc/CH2Cl2 til 30% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt skum.
<:>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,95 (s, 1H) , 8,06 (s, 1H) , 5,18 (bs, 1H), 4,76 (AB, 2H), 4,13 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 1,42 (s, 9H). D. 7- Metoksylnaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- tieno[ 3. 2-d] pyrimidin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- vi] amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(4-klor-tieno[3,2-d]pyrimidin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester istedenfor [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester. Det resulterende produkt anvendes deretter direkte som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 3 0% EtOAc/CH2Cl2 til 4 0% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,92 (s, 1H) , 8,32 (s, 1H),7,96 (s, 1H), 7,86 (d, 1H), 7,74 (m, 2H), 7,28 (d, 1H), 7,19 (d, 1H), 5,64 (bs, 1H), 4,71 (AB, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,72 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,05 (m, 1H) .
E. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 2-( 4- amino- tieno[ 3, 2-d] pyrimidin- 7- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del G under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-tieno[3,2-d]pyrimidin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre- [1-(4-klor-kinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,55 (s, 1H), 8,35 (bs, 3H), 8,14 (d, 1H), 8,00 (m, 2H), 7,93 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,52 (s, 1H) , 7,32 (dd, 1H) , 4,49 (AB, 2H), 4,09 (m, 1H) ,
3,90 (s, 3H), 3,18 (m, 2H), 1,96 (m, 1H), 1,54 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 483. Elementanalyse beregnet med 1,5 mol H20 og 1,5 mol trifluoracetat beregn. C=44,75%, H=3,83%, N=10,44%, funnet C=44,75%, H=3,77%, N=ll,12%.
EKSEMPEL 31
7- Metoksvnaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 7- amino- tieno [ 2, 3-clpyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid-trif luoracetat .
A. 3- Brommetyl- 7- klor- tieno[ 2, 3- c] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 7-klor-3-metyl-tieno[2,3-c]-pyrimidin istedenfor l-klor-7-metylisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 5% EtOAc/heksaner til 10% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<1>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,38 (d, 1H) , 7,73 (s, 1H) , 7,71 (d, 1H) , 4, 72 (s, 2H) .
B. [ 1-( 7- Klor- tieno\ 2 . 3- c] pyridin- 3- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3- ( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 3-brommetyl-7-klor-tieno [2,3-c]pyridin istedenfor 7-brommetyl-l-klorisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 20% EtOAc/CH2Cl2 til 4 0% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt skum.
<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,28 (d, 1H) , 7,74 (d, 1H) , 7,64 (s, 1H), 5,18 (bs, 1H), 4,68 (AB, 2H), 4,17 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 2,54 (m, 1H), 1,86 (m, 1H), 1,42 (s, 9H) . C. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 7- klor- tieno [ 2, 3-c] pyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(7-klor-tieno[2,3-c]pyridin-3-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester istedenfor [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -karbaminsyre-tert-butylester. Det resulterende produkt anvendes deretter direkte som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med en gradient av 3 0% EtOAc/- CH2C12 til 4 0% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) 8 833 (s, 1H) , 8,30 (d, 1H) , 8,16 (d, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,92 (d, 1H), 7,78 (d, 1H) , 7,67 (d, 1H) , 7,51 (d, 1H) , 7,28 (dd, 1H), 4,58 (AB, 2H), 4,08 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 1,89 (m, 1H), 1,48 (m, 1H) . D. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre- fl-( 7- amino- tieno[ 2, 3-c] pyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del G under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-klor-tieno[2,3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre- [1-(4-klor-kinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produktf raks joner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (DMS0-d6, 300 MHz) 8 8,90 (bs, 3H), 8,34 (s, 1H), 8,16 (d, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 7,82 (d, 1H), 7,68 (d, 1H) , 7,62 (d, 1H), 7,34 (m, 3H), 7,23 (dd, 1H), 4,64 (AB, 2H), 4,08 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,09 (M, 2H), 2,11 (m, 1H), 1,60 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 483.
EKSEMPEL 32
7- Metoksvnaftalen- 2- sulf onsyre- [ 1- ( 7- hydroksy- tieno [ 2 , 3-cl pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yll amidtrifluoracetat.
A. 7- Metoksynaf talen- 2- sulf onsyre- [ 1- ( 7- hydroksy- tieno [ 2 , 3-cl pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 28, del G under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-klor-tieno[2,3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3 - (S) -yl] amid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre- [1- (4-klor-kinazolin-6-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produktf raks joner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 8 8,36 (s, 1H) , 8,18 (d, 1H) , 8,01 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,86 (s, 1H) , 7,68 (d, 1H), 7,52 (S, 1H), 7,28 (m, 3H), 6,62 (d, 1H), 4,42 (AB, 2H), 4,00 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,04 (m, 2H), 1,89 (m, 1H), 1,44 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 484.
EKSEMPEL 33
7- Metoksvnaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno [ 3. 2-c] pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amid-trif luoracetat .
A. 3-( 5- Metyl- tiofen- 2- yl)- akrylsyre- metylester.
Til 5-metyl-tiofen-2-karboxaldehyde (5 g, 40 mmol) i CH2C12 (100 ml) tilsettes metyl(trifenylphosphoranyliden)acetat (13,3 g, 4 0 mmol). Løsningen omrøres i 72 timer. Etter denne tid konsentreres løsningen. Residuet oppslemmes i Et20. Filtreres løsningen gjennom en propp av celitt. Den oppsamlede væske konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med en gradient av 50% EtOAc/ heksaner til 60% EtOAc/ heksaner for å oppnå tittelforbindelsen (4,5 g, 25 mmol) som en olje.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 7,69 (d, 1H) , 7,04 (d, 1H) , 6,71 (d, 1H), 6,11 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 2,49 (S, 3H).
B. 3-( 5- Metvl- tiofen- 2- yl)- acrvlsyre.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 29, del B under anvendelse av 3-(5-metyl-tiofen-2-yl)-akrylsyre-metylester istedenfor 2-amino-5-metyltiofen-3-karboksylsyre-metylester. Tittelforbindelsen erholdes ved filtrering som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,58 (d, 1H) , 7,24 (d, 1H) , 7,82 (d, 1H), 5,98 (d, 1H) , 2,46 (s, 3H) .
C. 2- Metyl- 5H- tieno[ 3, 2- c] pyridin- 4- on.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del A, under anvendelse av 3-(5-metyl-tiofen-2-yl)-akrylsyre istedenfor 3-p-tolyl-akrylsyre. Produktet behandles deretter som beskrevet i EKSEMPEL 1, del B, C, og D. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 1% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 11,72 (bs, 1H), 7,31 (s, 1H) , 7,18 (d, 1H), 6,68 (d, 1H), 2,58 (s, 3H). EI MS, [M] += 165.
D. 4- Klor- 2- metvl- tieno[ 3, 2- c] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del E, under anvendelse av 2-metyl-5H-tieno[3,2-c]pyridin-4-on istedenfor 7-metyl-2H-isokinolin-1-on. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 70% CH2C12/heksaner til 100% CH2C12 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13/ 300 MHz) 5 8,13 (d, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,16 (d, 1H), 2,61 (s, 3H).
E. 2- Brommetyl- 4- klor- tieno[ 3, 2- c] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del F under anvendelse av 4-klor-2-metyl-tieno[3,2-c]-pyridin istedenfor l-klor-7-metylisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 5% EtOAc/heksaner til 10% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
XH NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,21 (d, 1H) , 7,63 (d, 1H) , 7,49 (s, 1H), 4,80 (s, 2H) .
F. 1-( 4- Klor- tieno[ 3. 2- c] pyridin- 2- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] karbaminsyre- tert- butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 2-brommetyl-4-klor-tieno[3,2-c]pyridin istedenfor 7-brommetyl-l-klorisokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 20% EtOAc/CH2Cl2 til 3 0% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt skum.
1H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,22 (d, 1H) , 7,63 (d, 1H) , 7,39 (S, 1H), 5,13 (bs, 1H), 4,78 (AB, 2H), 4,21 (m, 1H), 3,33 (m, 2H), 2,62 (M, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,42 (s, 9H).
G. 3-( S) - Amino- 1-( 4- klor- tieno[ 3, 2- c] pyridin- 2- Ylmetyl)-pyrrolidin- 2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av 1-(4-klor-tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S)-yl]karbaminsyre-tert-butylester istedenfor [1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -karbaminsyre-tert-butylester. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,50 (bs, 3H) , 8,22 (d, 1H) , 8,06 (d, 1H), 7,51 (s, 1H), 4,81 (AB, 2H), 4,04 (m, 2H), 3,32 (m, 2H) , 2,31 (m, 1H), 1,96 (m, 1H) .
H. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- tieno[ 3, 2-cl pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-amino-l-(4-klor-tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on istedenfor 3-(S)-amino-1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,36 (s, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 8,18 (d, 1H), 8,02 (m, 2H), 7,91 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 4,66 (AB, 2H), 4,10 (m, 1H), 3,88 (S, 3H), 3,14 (m, 2H), 1,97 (m, 1H), I. 58 (m, 1H) . I. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno[ 3 , 2-cl pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del L under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1- (4-klor-tieno [3, 2-c] pyridin-3-yl-metyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid istedenfor 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid. Det resulterende produkt behandles deretter som beskrevet i EKSEMPEL 1, del M. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,58 (bs, 3H) , 8,32 (s, 1H) , 8,26 (d, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H) , 7,78 (s, 1H) , 7,69 (m, 2H), 7,49 (dd, 1H), 7,28 (dd, 1H), 4,62 (AB, 2H), 4,02 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H), 3,13 (m, 2H), 1,96 (m, 1H) , 1,58 (m, 1H). FAB MS, [M+H] <+>= 483.
EKSEMPEL 34
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- hydroksy- tieno [ 3 , 2-c] pyridin- 3- yl- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] amidtrifluoracetat.
A. 7- Metoksvnaf talen- 2- sulfonsyre- [ 1- ( 4- hydroksy- 1ieno T3 . 2-c] pyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del L under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-tieno[3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S)-yl]amid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid. Det resulterende produkt behandles deretter som beskrevet i EKSEMPEL 1, del M. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktf raks joner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 11,32 (bs, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,20 (d, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H) , 7,69 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,30 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 6,71 (d, 1H), 4,52 (AB, 2H), 4,06 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,10 (m, 2H) , 1,90 (m, 1H) , 1,50 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>= 484 .
EKSEMPEL 35
Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno[ 3, 2- c] pyridin- 3 - yl - me tyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amidtrifluoracetat .
A. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre- Tl-( 4- klor- tieno[ 3. 2-clpyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 3-amino-l-(4-klor-tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on for 3-(S)-amino-1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid og benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid. Tittelforbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,21 (d, 1H) , 7,96 (s, 1H) , 7,90 (m, 2H), 7,64 (d, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,39 (s, 1H), 5,58 (bs, 1H), 4,76 (s, 2H), 3,97 (m, 1H), 3,38 (m, 2H), 2,68 (m, 1H) , 2,18 (m, 1H) . C. Benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- amino- tieno[ 3, 2-clpyridin- 3- yl- metyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del L under anvendelse av benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-tieno [3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid for 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid. Det resulterende produkt behandles deretter som beskrevet i EKSEMPEL 1, del M. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,70 (d, 1H) , 8,55 (bs, 2H) , 8,07 (m, 3H), 7,78 (s, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,49 (m, 3H), 4,66 (AB, 2H) , 4,16 (m, 1H), 3,24 (m, 2H), 2,12 (m, 1H) , 1,72 (m, 1H) . FAB MS, [M+H] <+>= 459.
EKSEMPEL 36
5- Pyridin- 4- yl- tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- aminoisokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 4- Tiofen- 2- yl- pyridin.
2-Bromtiofen (7,6 ml, 78,5 mmol) tilsettes dråpevis til en flamme- og vakuumtørket tre-halset rund-bunnet kolbe utstyrt med en kjøler, stopper og magnesium (2 g, 82,3 mmol) i dietyleter (70 ml). Den resulterende grå løsning omrøres ved tilbakeløp i 1,5 timer. I mellomtiden omdannes 4-brom-pyridinhydroklorid til den frie base på følgende måte: 4-Brompyridinhydroklorid (15,3 g, 78,7 mmol) oppløses i vann (100 ml), og avkjøles i et isbad. En ekvivalent av 1 N NaOH (ca. 100 ml) tilsettes dråpevis inntil pH er -5,6. Den iskjølte vandige løsning ekstraheres med heksan (3 x 150 ml), og de kombinerte organiske lag tørkes over MgS04 og filtreres. Heksanet fjernes under vakuum (11 mm Hg) under kjøling i et isbad til et volume på ca. 3 0 ml. Den resulterende farveløse klare løsning fortynnes med THF (150 ml) under N2. Grignard-reagenset avkjøles deretter til romtemperatur og tilsettes via en kanyle til løsningen av NiCl2dppp (0,54 g, 1 mmol) og 4-brompyridin i THF. Den resulterende mørke løsning tilbakeløpskokes over natten. Reaksjonsblandingen helles deretter over mettet Nød-løsning og ekstraheres med dietyleter (3 x 200 ml). De kombinerte eteriske lag surgjøres med 2 N HC1 (3 00 ml) , og
det vandige lag vaskes med dietyleter. Det vandige lag avkjøles deretter i et isbad og nøytraliseres med natrium-bikarbonat. Det vandige lag ekstraheres med etylacetat (3 x 200 ml), og de kombinerte organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres for å oppnå et brunt fast stoff. Det rå faste stoff tas opp i varme heksaner, og den gule løsning separeres fra det uløselige sorte stoff. Heksan-løsningen konsentreres, og den ovenfor beskrevne prosedyre gjentas. Ved avkjøling av heksanløsningen dannes gule faste presipitater. Det gule faste stoff oppsamles for å oppnå tittelforbindelsen (8,99 g, 55,8 mmol).
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) S 8,60 (d, 2H) , 7,51 (m, 1H), 7,49 (d, 2H), 7,42 (dd, 1H), 7,14 (dd, 1H). EIMS, [M]<+>=161.
B. 5- Pyridin- 4- yl- tiofen- 2- sulfonylklorid.
Til en løsning av 4-tiofen-2-yl-pyridin (3,33 g, 20,7 mmol) i THF (137 ml) ved -78°C tilsettes n-BuLi (8,7 ml av en 2,5 M løsning i heksaner, 21,7 mmol). Etter omrøring i 15 minutter bobles S02-gass gjennom løsningen i 30 minutter. Løsningen får deretter oppvarmes til romtemperatur og omrøres over natten. Løsningen konsentreres til tørrhet, og det resulterende faste stoff suspenderes i heksan (100 ml). Til den iskjølte løsning tilsettes svovelylklorid (1,7 ml. 21,7 mmol). Isbadet fjernes, og suspensjonen omrøres i 2 timer. Blandingen konsentreres deretter til tørrhet og fortynnes med etylacetat, vaskes med mettet NaHC03 (aq) , vann og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres for å oppnå et gult fast stoff som er tittelproduktet (3,39 g, 13,1 mmol) som anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
^ NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 8,75(d, 2H), 8,60 (d, 1H), 7,90 (d, 1H) , 7,51 (d, 2H) , EI, [M]<+>=259, 261, Cl-mønster. C. 5- Pyridin- 4- yl- tiofen- 2- sulfonsyre- [ 1- ( 1- klor-isokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
5-Pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonylklorid tilsettes til en løsning av 3-(S)-amino-1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid (0,12 g, 0,38 mmol) i pyridin (2 ml). Den resulterende blanding omrøres over natten, deretter konsentreres til tørrhet. Residuet fortynnes med metylenklorid, vaskes med mettet NaHC03-løsning og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres for å oppnå 105 mg av et råstoff. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet (0,026 g, 0,052 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,67 (d, 2H) , 8,30 (d, 1H) , 8,14 (s, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,57-7,61 (m, 2H), 7,48-7,46 (m, 3H), 5,60 (bs, 1H), 4,67 (AB, 2H), 3,98 (m, 1H) , 3,29 (m, 2H) , 2,68 (m, 1H) , 2,15 (m, 1H) . APCI MS, [M+H]<+>= 499, 501, Cl-mønster. D. 5- Pyridin- 4- yl- tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat .
Ammoniumacetat (0,12 g, 1,56 mmol), fenol (0,049 g, 0,52 mmol), og 5-pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,026 g, 0,052 mmol) oppvarmes til 90°C i 6 timer, deretter avkjøles til romtemperatur. Produktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen (0,005 g, 0,007 mmol) som et hvitt fast stoff.
<1>H NMR (DMS0-d6, 300 MHz) 8 13,0 (bs, 1H) , 9,0 (bs, 1H) , 8,60-8,70 (m, 3H), 8,29 (s, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,89 (d,
1H), 7,71-7,80 (m, 4H) , 7,66 (d, 1H), 7,23 (d, 1H). FAB MS, [M+H]<+>= 480.
EKSEMPEL 37
5- Pyridin- 3- yl- tiofen- 2- sulfonsyre- [ 1-( l- aminoisokinolin- 7-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 3- Tiofen- 2- yl- pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 36, del A under anvendelse av 3-brompyridin istedenfor 4-brompyridinhydroklorid.
<X>H NMR (CDC13/ 300 MHz) 8,89 (dd, 1H), 8,52 (dd, 1H), 7,87 (ddd, 1H) , 7,38 (s, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,31 ((m, 1H) , 7,12 (dd, 1H). EI, [M]<+>= 161.
B. 5- Pyridin- 3- yl- tiofen- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 36, del B under anvendelse av 3-tiofen-2-yl-pyridin istedenfor 4-tiofen-2-yl-pyridin.
<X>H NMR (CDCla, 300 MHz) 8 8,95 (bs, 1H), 8,70 (bs, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,45 (bs, 1H), 7,44 (d, 1H). EI, [M]<+>= 259, 261, Cl-mønster. C. 5- Pyridin- 3- yl- tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- klor- isokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] - amid. Trietylamin (0,35 ml, 2,5 mmol) tilsettes dråpevis til en løsning av 5-pyridin-3-yl-tiofen-2-sulfonylklorid (0,22 g, 0,85 mmol) og 3-(S)-amino-1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid (0,22 g, 0,71 mmol) i CH3CN (5 ml). Suspensjonen omrøres ved romtemperatur over natten, deretter konsentreres til tørrhet. Residuet fortynnes med metylenklorid, vaskes med mettet NaHC03 løsning og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres, konsentreres og renses deretter ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå produktet (0,23 g, 0,4 5 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,89 (d, 1H), 8,63 (dd, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,82-7,89 (m, 2H), 7,70 (d, 1H), 7,57-7,68 (m, 2H) , 7,33-7,40 (m, 2H), 5,45 (d, 1H) , 4,67 (AB, 2H), 3,95 (m 1H), 3,28 (m, 2H), 2,75 (m, 1H) , 2,10 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H]<+>= 499, 501, Cl-mønster. D. 5- Pyridin- 3- yl- tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]-amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 36, del D under anvendelse av 5-pyridin-3-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid istedenfor 5-pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) - yl]-amid og oppvarming ved 100°C over natten. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 12,95 (bs, 1H), 8,90-9,05 (m, 2H), 8,55-8,65 (m, 2H), 8,31 (s, 1H), 8,17 (m, 1H), 8,96 (d, 1H), 8,82 (d, 1H), 7,70-7,72 (m, 2H), 7,65 (d, 1H), 7,53 (dd, 1H), 7,21 (d, 1H), 4,60 (AB, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 2,29 (m, 1H), 1,78 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 480 .
EKSEMPEL 38
Benzotiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- aminokinolin- 6- ylmetyl)- 2-oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 4- Klor- 6- metylkinolin
6-Metyl-(1H) -kinolin-4-on (1,57 g, 9,7 mmol) i 20 ml fosforoksyklorid oppvarmes til 110 °C i 4 timer. Blandingen avkjøles til romtemperatur, deretter fortynnes med isvann (-200 ml), og pH-verdien justeres til ca. 10 ved langsom tilsetning av 10 N NaOH. Den vandige løsning ekstraheres med metylenklorid (4 x 250 ml) , og de kombinerte organiske lag vaskes med saltvann, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres. Den ubehandlede rest filtreres gjennom silikagel med 33% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (1,05 g, 5,9 mmol) som et gult fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,69 (d, 1H), 8,0 (m, 2H), 7,58 (dd, 1H) , 7,44 (d, 1H) , 2,58 (s, 3H) . EI MS, [M ]+=177, 179, Cl-mønster.
B. 6- Brommetyl- 4- klorkinolin.
N-Bromsuccinimid (1,1 g, 6,19 mmol) og 70% benzoylperoksid (0,215 g, 0,62 mmol) tilsettes til en løsning av 4-klor-6-metylkinolin (1,05 g, 5,93 mmol) i 35 ml karbontetraklorid. Den resulterende blanding oppvarmes til tilbakeløp over natten, deretter avkjøles til romtemperatur og fortynnes med metylenklorid. Det organiske lag vaskes med 1 N NaOH, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 33% EtOAc/heksaner for å oppnå produktet (0,915 g, 3,57 mmol) som et hvitt fast stoff.
'H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,73 (d, 1H) , 8,13 (d, 1H) , 8,07 (d, 1H), 7,74 (dd, 1H), 7,42 (d, 1H) , 4,67 (s, 2H) . Ione-spray, [M+H]<+>=256, 258, 260 Cl, Br-mønster.
C. 3-( S) - Amino- 1-( 4- Klorkinolin- 6- ylmetyl)- pyrrolidin- 2- on-hydroklorid
Natriumhydrid (0,096 g, 2,4 mmol, 60% ifølge vekt) tilsettes til en løsning av [2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] - karbaminsyre-tert-butylester (0,4 g, 2 mmol) i 15 ml THF ved 0°C. Blandingen omrøres i 30 minutter, deretter tilsettes en løsning av 6-brommetyl-4-klorkinolin (0,513 g, 2 mmol) i 15 ml THF langsomt. Den resulterende løsning oppvarmes til romtemperatur over 4 timer. Reaksjonen undertrykkes med mettet ammoniumkloridløsning, deretter fortynnes med EtOAc. Det organiske lag separeres, vaskes med saltvann, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres. Residuet oppløses i etylacetat (50 ml), og mettet med HCl-gass ved 0°C. Løsningen omrøres ved 0°C i 15 minutter, deretter oppvarmes løsningen til romtemperatur. Etter fire timer ved romtemperatur oppsamles det faste stoff som utfelles, og det vaskes med eter for å oppnå tittelforbindelsen (0,445 g, 1,43 mmol) som et lysegult fast stoff.
<2>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,05 (d, 1H) , 8,78 (bs, 3H) , 8,27 (d, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,96 (d, 1H), 4,67 (AB, 2H), 4,12 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 2,43 (m, 1H), 2,09 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H]<+>=276, 278. D. Benzotiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klorkinolin- 6- ylmetyl)- 2-oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
3-(S)-Amino-1-(4-klorkinolin-6-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid (0,12 g, 0,38 mmol) suspenderes i 15 ml CH3CN. Til denne løsning tilsettes trietylamin (110 ml, 0,79 mmol) etterfulgt av benzotiofen-2-sulfonylklorid (0,094 g, 0,40 mmol). Blandingen omrøres over natten ved romtemperatur, underkastes vandig opparbeidelse og konsentreres deretter til tørrhet. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 2-10% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittel-
forbindelsen (0,11 g, 0,23 mmol) som et hvitaktig fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,77 (d, 1H) , 8,08 (d, 1H) , 8,04 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,88 (m, 2H), 7,58 (dd, 1H), 7,49 (m, 3H), 6,01 (bs, 1H), 4,67 (AB, 2H), 4,03 (t, 1H), 3,27 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,16 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+>= 472, 474, Cl-mønster.
E. Benzotiof en- 2- sulf onsyre- [ 1- ( 4- aminokinolin- 6- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] - amidtrifluoracetat.
Benzotiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-klorkinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,11 g, 0,23 mmol) behandles med fenol (1 g) og ammoniumacetat (0,22 g, 2,8 mmol) ved 110°C som tidligere beskrevet. Etter fem timer avkjøles blandingen til romtemperatur og fortynnes med 100 ml metylenklorid. Den organiske løsning vaskes med 1 N NaOH (2X) og saltvann, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved HPLC under eluering med en gradient av 10 til 100% CH3CN/ 0,1 % TFA i vann over 30 minutter. Fraksjoner inneholdende det rene produkt lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (0,02 g, 0,044 mmol).
<*>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 5 8,25 (d, 1H) , 8,13 (s, 1H) , 7,97 (s, 1H), 7,85 (m, 2H), 7,80 (AB, 2H), 7,48 (m, 2H), 6,80 (d, 1H) , 4,64 (s, 2H) , 4,35 (t, 1H) , 3,31 (m, 2H) , 2,48 (m, 1H), 1,89 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H]<+>= 453.
EKSEMPEL 39
6- Klor- benzo Tb] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- amino- isokinolin-6- ylmetvl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 1- Fenoksy- 6- brommetyl- isokinolin.
Til 1-klor-6-metyl-isokinolin (2,28 g, 13,3 mmol), som fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del E, under anvendelse av 6-metyl-2H-isokinolin-l-on istedenfor 7-metyl-2H-isokinolin-l-on, tilsettes 20 g fenol. Løsningen oppvarmes til 80°C, og KOH (3,73 g, 66,4 mmol) tilsettes. Etter tilsetningen omrøres løsningen og oppvarmes til 14 0°C. Etter 24 timer avkjøles løsningen til omgivelsestemperatur og oppløses i CH2C12. Den organiske løsning vaskes med H20. Det organiske lag vaskes med 1 N NaOH og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Det resulterende residu oppløses i 50 ml CCL4. Til den resulterende løsning tilsettes NBS (2,01 g, 11,27 mmol) og benzoylperoksid (0,6 g, 1,73 mmol). Løsningen oppvarmes til tilbakeløp. Etter 16 timer fortynnes løsningen med CH2C12. Det organiske lag vaskes med 10% Na2C03 og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 5% EtOAc/heksaner og 10%EtOAc/heksaner.
MS, [M]<+> = 313, 315, Br-mønster.
B. [ 1-( l- Klor- isokinolin- 6- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3( S)-yl] - karbaminsyrebenzylester.
Til en løsning av (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyrebenzylester (0,15 g, 0,64 mmol) i 6 ml av 10:1 THF:DMF ved 0°C tilsettes en 60% NaH-dispersjon (0,03 g, 0,71 mmol) etterfulgt av 1-fenoksy-6-brommetyl-isokinolin (0,2 g, 0,64 mmol). Etter 16 timer behandles løsningen med 10 ml mettet NH4C1. Løsningen fortynnes med CH2C12. Det organiske lag vaskes med H20 og mettet NaCl. Det resulterende produkt suspenderes i 5 g NH4OAc og oppvarmes til 120°C. Etter 36 timer avkjøles løsningen til omgivelsestemperatur. Løsningen fortynnes med H20 og CH2C12. Det organiske lag vaskes med H20 og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 5% MeOH/ CH2C12 til 10% MeOH/ CH2C12 for å oppnå produktet som et hvitt fast stoff (0,043 g, 0,11 mmol).
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,41 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,63 (S, 1H), 7,42 (m, 3H), 7,32 (m, 4H), 7,22 (m, 5H), 5,40 (bs, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,64 (AB, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,24 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 1,92 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+> = 391. C. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- amino- isokinolin- 6 - ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat .
Til en løsning av [1-(1-klor-isokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3(S)-yl]-karbaminsyrebenzylester (0,043 g, 0,11 mmol) i 4 ml av MeOH, tilsettes 10% ifølge vekt Pd/C (0,02 g). Atmosfæren ovenfor reaksjonsblandingen erstattes med hydrogen. Etter 16 timer løsningen filtreres gjennom celitt, og celitten vaskes med MeOH. Den oppsamlede løsning konsentreres. Det resulterende residu oppløses i 3 ml CH2Cl2:EtOH (2:1). Til løsningen tilsettes Et3N (0,01 g, 0,11 mmol) og 6-Klor-benzo[b]tiofen sulfonylklorid (0,03 g, 0,11 mmol). Etter 4 timer konsentreres løsningen. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA). De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,95 (bs, 3H), 8,71 (d, 1H), 8,46 (d, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,04 (m, 2H), 7,71 (s, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,12 (d, 1H), 4,52 (AB, 2H),
4,28 (m, 1H), 3,17 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), l,67(m, 1H). FAB MS, [M+H]<+> = 4 87, 489, Cl-mønster.
EKSEMPEL 4 0
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( 1, 2, 3, 4-tetrahydro- isokinolin- 7- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]-amidtrifluoracetat.
A. [ 1-( 1-( 1. 2. 3. 4- Tetrahydro- isokinolin- 7- ylmetyl)- 2-oksopyrrolidin- 3( S)- yl] karbaminsyre- tert- butylester.
Til en løsning av [1-(l-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3(S)-yl]karbaminsyre-tert-butylester (0,48 g, 1,28 mmol) i 50 ml AcOH:MeOH (1:1) tilsettes 5% ifølge vekt Pt02/C (0,1 g) . Atmosfæren over reaksjonsblandingen erstattes med hydrogen. Etter 16 timer filtreres løsningen gjennom celitt, og celitten vaskes med MeOH. Den organiske løsning konsentreres for å oppnå produktet som et hvitt skum.
MS, [M+H]<+> = 346.
B. 7-( 3- tert- Butoksykarbonvlamino- 2- oksopyrrolidin- l- ylmetyl)- 3. 4- dihydro- lH- isokinolin- 2- karboksylsyrebenzylester.
Til en løsning av [1-(1-(1,2,3,4-tetrahydro-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3(S)-yl]karbaminsyre-tert-butylester (0,54g, 1,58 mmol) i 50 ml av CH2C12 tilsettes trietylamin (0,66 ml, 4,73 mmol) og benzylklorformiat (0,39 ml, 1,89 mmol). Løsningen omrøres i 16 timer. Etter denne tid fortynnes løsningen med CH2C12. Den organiske løsning vaskes med H20 og mettet NaCl. Residuet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med 20% EtOAc/ CH2C12.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 7,35 (m, 5H) , 7,08 (d, 1H) , 7,02 (d, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,14 (s, 2H), 5,10 (m, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,38 (m, 2H), 4,16 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 3,18 (dd, 2H) , 2,78 (m, 2H), 2,59 (m, 1H), 1,81 (m, 1H), 1,42 (s,
9H) .
FAB MS, [M+H]<+> = 480.
C. 7- f3-( 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylamino)- 2- oksopyrrolidin- 1- ylmetyl]- 3. 4- dihydro- 1H- isokinolin- 2- karbok-sylsyrebenz<y>lester.
Til en løsning av 7- (3-tert-butoksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-3,4-dihydro-1H-isokinolin-2-karbok-syl syrebenzyles ter (0,347 g, 0,72 mmol) i 8 ml av CH2C12 tilsettes 2 ml av TFA. Etter 4 timer konsentreres løsningen. Residuet oppløses i CH2C12 og Et3N (0,30 ml, 2,17 mmol), og 6-klorbenzo[b]tiofen sulfonylklorid (0,23 g, 0,87 mmol) tilsettes. Etter 16 timer konsentreres løsningen. Residuet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 10% EtOAc/ CH2C12. Produktet (0,25 g, 0,51 mmol) erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 7,91 (s, 1H) , 7,80 (m, 2H) , 7,42 (d, 1H), 7,34 (m, 5H), 7,08 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,88 (s, 1H), 5,10 (S, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,34 (s, 2H), 3,88 (m, 1H) , 3,68 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 2,77 (m, 2H), 2,59 (m, 1H) , 2, 08 (m, 1H) . D. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( 1, 2, 3. 4-tetrahydro- isokinolin- 7- ylmetyl) - pyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amid-trif luoracetat .
7-[3-(6-Klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl]-3,4-dihydro-lH-isokinolin-2-karboksyl-syrebenzylester (0,25 g, 0,51 mmol) tilsettes til 5 ml 30% HBr/AcOH ved 0°C. Løsningen omrøres i 3 0 minutter. Etter denne tid tilsettes 3 0 ml Et20. Det resulterende faste stoff oppsamles ved filtrering. Det rå faste stoff renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA). De passende frak-
sjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6,300 MHz) 5 8,95 (bs, 2H) , 868 (d, 1H) , 8,24 (s, 1H) , 8,00 (m, 2H), 7,51 (dd, 1H), 7,16 (d, 1H) , 7,06 (m, 1H) , 6,96 (s, 1H) 4,27 (s, 2H), 4,16 (m, 3H) , 3,30 (m, 2H), 3,05 (m, 2H), 2,92 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,60 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+> = 476, 4 78, klor-mønster.
EKSEMPEL 41
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- lH- pyrrolo-[ 3, 2- c] pyridin- 2- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
A. 1- Benzensulfonyl- 4- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2- c] pyridin.
Benzensulfonylklorid (3 ml, 23,5 mmol) tilsettes dråpevis til en løsning av tetrabutylammoniumhydrogensulfat (0,53 g, 1,56 mmol), natriumhydroksid (1,56 g, 38,9 mmol) og 4-klor-lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin (2,38 g, 15,6 mmol) (fremstilt ifølge Rasmussen, M. J. Het. Chem, 1992, 29, 359) i CH2C12. Blandingen omrøres ved romtemperatur i 4 timer med fortynnetCH2Cl2, vaskes med mettet NH4C1-løsning og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 1% MeOH/CH2Cl2 til 2% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet (3,21 g, 11 mmol) som et hvitt fast stoff.
<1>H NMR (CDC13, 3 00 MHz) 8 8,25 (d, 1H) , 7,92(m, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 7,83 (dd, 1H), 7,60-7,66 (m, 2H), 7,51 (m, 2H), 6,80 (dd, 1H). EI MS, [M]<+>= 292, 294, Cl-mønster.
B. 1- Benzensulfonyl- 4- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2- c] pyridin- 2- karboksylsyreetylester.
Litiumdiisopropylamid (3,2 ml av en 1,5 M løsning i THF, 4,80 mmol) tilsettes til en løsning av tetrametyletylen-diamin (0,71 ml, 4,75 mmol) og 1-benzensulfonyl-4-klor-lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin (1 g, 3,42 mmol) i THF (13 ml). Den resulterende gule løsning omrøres ved -78°C i 1 time, og deretter tilsettes etylklorformiat (0,78 ml, 8,16 mmol) dråpevis. Blandingen bringes langsomt til romtemperatur over en 3,5 tidsperiode. Reaksjonen undertrykkes med mettet NH4Cl-løsning og deretter fortynnes med etylacetat. Det organiske lag vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres for å oppnå et lysebrunt fast stoff (1,46 g) som produktet som anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,30 (d, 1H) , 8,12 (d, 2H) , 8,03 (d, 1H), 7,70 (m, 1H) , 7,55 (m, 2H), 7,30 (s, 1H) . 4,45 (q, 2H) , 1,46 (t, 3H) . FAB MS, [M+H]<+>= 365, 367, Cl-mønster. C. 1- Benzensulf onyl- 4- klor- lH- pyrrolo [ 3 . 2- c] pyridin- 2- yl) - metanol.
Litiumaluminumhydrid (3,4 ml av en 1 M løsning i THF) tilsettes dråpevis til en løsning av l-benzensulfonyl-4-klor-lH-pyrrolo [3 , 2-c] pyridin-2-karboksylsyreetylester (1,46 g, 3,42 mmol) i THF (27 ml) ved 0°C. Etter omrøring i 1,5 timer ved 0°C undertrykkes reaksjonen med H20, deretter fortynnes med etylacetat. Det organiske lag vaskes med mettet NH4CI-løsning og saltvann, deretter tørkes over MgSC-4, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 3% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet (0,78 g, 2,42 mmol) som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,25 (d, 1H) , 8,85-8,95 (m, 3H) , 7,64 (m, 1H), 7,51 (m, 2H) , 6,80 (s, 1H), 4,97 (d, 2H), 2,85 (t, 1H) . EI MS, [M]<+>= 322, 324, Cl-mønster. D. 1- Benzensulfonvl- 2- brommetyl- 4- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2-c] pyridin.
Karbontetrabromid (0,939 g, 2,83 mmol) tilsettes til en løsning av trifenylfosfin (1,485 g, 5,66 mmol) og 1-benzensulf onyl-4-klor-lH-pyrrolo [3,2-c]pyridin-2-yl)-metanol (0,914 g, 2,83 mmol) i CH2C12 (12 ml) ved 0°C. Den resulterende gule løsning omrøres i 1 time ved 0°C, deretter oppvarmes til romtemperatur over en 1 times tidsperiode. Reaksjonsblandingen konsentreres, renses deretter ved kolonnekromatografi under eluering med 1% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet (0,760 g, 1,97 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8,27 (d, 1H) , 7,91-8,00 (m, 3H) , 7,67 (m, 1H), 7,51 (m, 2H), 6,95 (s, 1H) , 4,94 (s, 2H) . FAB MS, [M+H]<+>= 385, 387, 389, Br, Cl-mønster.
E. [ 1-( 1- Benzensulfonyl- 4- klor- 1H- pyrrolo[ 3. 2- c] pyridin- 2-ylmetyl)- 2- oksopyrrolid- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert- butylester.
Natriumhydrid (0,081 g, 2,02 mmol, 60% mineraloljedispersjon) tilsettes til en løsning av [2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (0,404 g, 2,02 mmol) i DMF (5 ml) ved 0°C. Blandingen omrøres i 10 minutter, deretter kanyleres dråpevis til en løsning av 1-benzensulf onyl -2 -brommetyl -4 -klor- lH-pyrrolo [3,2-c]pyridin (0,74 g, 1,92 mmol) i DMF (10 ml) ved 0°C. Den resulterende gule løsning omrøres i 1 time ved 0°C, deretter undertrykkes reaksjonen med mettet ammoniumkloridløsning og fortynnes med EtOAc. Det organiske lag vaskes med vann og saltvann, deretter tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Det faste produkt (0,94 g, 1,86 mmol) anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,25 (d, 1H) , 7,98 (m, 2H) , 7,83 (d, 1H), 7,68 (m, 1H), 7,50 (m, 2H), 6,70 (s, 1H), 4,95
(AB, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,45 (s, 9H). FAB MS, [M+H]<+>= 505, 507, Cl-mønster .
F. 3-( S)- Amino- 1-( l- benzensulfonyl- 4- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2-c] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(1-benzensulfonyl-4-klor-lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolid-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester istedenfor [1-(1-klor-isokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester og omrøring i 2 timer ved 0°C uten oppvarming til romtemperatur.
<x>n NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,50 (d, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 8,04 (m, 2H), 7,82 (m, 1H), 7,65 (m, 2H), 6,83 (s, 1H), 4,93 (s, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,51 (m, 2H), 2,41 (m, 1H), 2,01 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+>= 405, 407, Cl-mønster.
G. 6- Klor- benzo[ bltiofen- 2- sulfonsyre[ 1-( 1- benzensulfonyl-4- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2- c] pyridin- 2- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3- ( S)- vi]- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid og 3-amino-l-(1-benzensulfonyl-4-klor-lH-pyrrolo-[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 3% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå produktet som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,23 (d, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,70-7,7,88 (m, 3 H), 7,55-7,61 (m, 2H), 7,40-7,50 (m, 3H), 6,51 (s, 1H), 5,45 (bs, 1H), 4,86 (s, 2H), 3,98 (m, 1H), 3,41 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,18 (m, 1H).
FAB MS, [M+H]<+>= 635, 63 7, Cl-mønster.
H. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 4- klor- lH- pyrrolo[ 3. 2- cl pyridin- 2- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yll - amid.
Ammoniakkgass bobles i 5 minutter inn i en løsning av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre[1-(1-benzensulfonyl-4-klor-lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,14 g, 0,22 mmol) i MeOH (10 ml). Løsningen tilbakeløpskokes over natten, konsentreres deretter til tørrhet. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med 5% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå produktet (0,065 g, 0,13 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 11,95 (bs, 1H) , 8,71 (d, 1H) , 8,30 (s, 1H), 8,05 (m, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,35 (d, 1H), 6,40 (S, 1H), 4,50 (AB, 2H), 4,23 (m, 1H), 3,23m, 2H), 2,41 (M, 1H), 1,78 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H]<+>= 495, 497, Cl-mønster.
EKSEMPEL 42
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo-[ 3, 2- cl pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
Palladium på karbon (0,01 g) tilsettes til en løsning av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-lH-pyrrolo [3,2-c] pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid i 95% etanol (5 ml) og mettes med H2-gass. Blandingen oppvarmes ved 65°C over natten, deretter avkjøles til romtemperatur og filtreres gjennom celitt. Løsningsmiddelet fjernes, og råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 100% CH3CN. De passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 14,60 (bs, 1H) , 12,70 (bs, 1H) , 9,15 (s, 1H), 8,71 (d, 1H) , 8,38 (d, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,08 (S, 1H) , 8,00 (d, 1H) , 7,85 (d, 1H), 7,52 (dd, 1H) , 6,88 (s, 1H), 4,63 (AB, 2H), 4,21 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,75 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H]<+>= 461, 4 63, Cl-mønster.
EKSEMPEL 43
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo[ 3, 2-b] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat .
A. 5- Klor- lH- pyrrolo[ 3. 2- b] pyridin.
En blanding av pyrrolo[3,2-b]pyrid-5-on (fremstilt ifølge prosedyren beskrevet i J. Med. Chem. 1990, 33, 2087) (1,33 g, 9,91 mmol) og 20 ml av fosforoksyklorid oppvarmes i en forseglet Parrs høyttrykkskar av rustfritt stål ved 180°C i 2,5 timer. Etter avkjøling fjernes overskuddet av fosforoksyklorid in vacuo. Residuet avkjøles i et isbad, og reaksjonen undertrykkes med isvann. Den resulterende blanding nøytraliseres ved tilsetning av mettet NaHC03-løsning og ekstraheres med EtOAc (3x). De kombinerte organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet (1,07 g, 7,01 mmol) anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDC13 + CD3OD, 300 MHz) 8 7,71 (d, 1H), 7,49 (d, 1H) , 7,10 (d, 1H), 6,59 (d, 1H) . EIMS, [M]+ = 152, 154, Cl-mønster.
B. 1- Benzensulfonyl- 5- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2- b] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin som beskrevet i EKSEMPEL 41, del A. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/heksaner til 2 0% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,23 (d, 1H), 7,87 (d, 2H) , 7,81 (d, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,26 (d, 1H), 6,81 (d, 1H) . C. 1- Benzensulfonyl- 5- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2- b] pyridin- 2-karboksyls<y>reetylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 1-benzensulfonyl-5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin som beskrevet i EKSEMPEL 41, del B. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 10% EtOAc/heksaner til 33% EtOAc/heksaner, hvilket gir tittelforbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,41 (d, 1H), 8,04 (d, 2H), 7,66 (m, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,37 (d, 1H), 7,21 (s, 1H), 4,41 (q, 2H), 1,40 (t, 3H). EI MS, [M]<+> = 364, 366, Cl-mønster. D. ( 1- Benzensulfonyl- 5- klor- lH- pyrrolo [ 3, 2- b] pyridin- 2- yl)-metanol.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 1-benzensulfonyl-5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-karboksylsyreetylester som beskrevet i EKSEMPEL 41, del C. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 2 0% EtOAc/heksaner til 50% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,30 (d, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,63 (m, 1H) , 7,50 (m, 2H), 7,25 (d, 1H), 6,80 (s, 1H) , 4,97 (s, 2H), 2,99 (bs, 1H). EI MS, [M]<+> = 322, 324, Cl-mønster.
E. 1- Benzensulfonyl- 2- brommetyl- 5- klor- lH- pyrrolo[ 3, 2-blpyridin.
Til en løsning av (l-benzensulfonyl-5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b] pyridin-2-yl)-metanol (0,16 g, 0,50 mmol) i 4 ml Et20/- CH2C12 (1:1) ved 0°C tilsettes fosfortribromid (0,023 ml, 0. 25 mmol) dråpevis. Reaksjonskaret holdes i mørke og omrøres ved 0°C i 1 time, deretter ved romtemperatur i 2 timer. Blandingen fortynnes med vann og EtOAc, og lagene separeres. Det vandige lag ekstraheres med EtOAc. De kombinerte organiske lag vaskes med vann, mettet NaHC03 løsning og mettet NaCl solution, deretter tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet (0,16 g, 0,41 mmol) anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>K NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,33 (d, 1H) , 7,87 (d, 2H) , 7,64 (m, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,28 (d, 1H) , 6,93 (s, 1H), 4,96 (s, 2H) .
F. [ 1-( l- Benzensulfonyl- 5- klor- lH- pyrrolo[ 3. 2- b] pyridin- 2-ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- karbaminsyre- tert-butylester.
Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av 1-benzensulfonyl-2-brommetyl-5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin istedenfor 7-brommetyl-l-klor-isokinolin. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 15% EtOAc/heksaner til 50% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,36 (d, 1H) , 7,80 (d, 2H) , 7,64 (m, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 5,13 (bs, 1H), 4,93 (AB, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,39 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
G. 3- ( S)- Amino- 1-( l- benzensulfonyl- 5- klor- lH- pvrrolo\ 3 . 2 - b] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av [1-(1-benzensulfonyl-5-klor-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelf orbindelsen erholdes som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) 5 8,51 (bs, 2H), 8,42 (d, 1H), 8,00 (d, 2H), 7,78 (m, 1H), 7,64 (m, 2H), 7,41 (d, 1H), 6,96 (s, 1H), 4,90 (AB, 2H), 4,16 (m, 1H), 3,49 (m, 2H), 2,47 (m, 1H), 2,10 (m, 1H).
H. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( l- benzensulfonyl- 5-klor- lH- pyrrolo [ 3 , 2- b] pyridin- 2- ylmetyl) - 2- oksopvrrolidin-3- ( S)- yll - amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid og 3-(S)-amino-1-(1-benzensulfonyl-5-klor-lH-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-2-ylmetyl) -pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,37 (s, 1H) , 8,34 (d, 1H) , 7,92 (d, 1H), 7,79 (m, 2H), 7,72 (m, 2H), 7,58 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,31 (dd, 1H), 7,24 (m, 2H), 6,48 (s, 1H), 5,42 (s, 1H), 4,85 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,76 (m, 1H), 3,34 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 2,10 (m, 1H) . I. 7- Metoksvnaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 5- klor- lH- pyrrolo-[ 3 , 2- bl pyridin- 2- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl] - amid.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre- [1-(1-benzensulfonyl-5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid som beskrevet i EKSEMPEL 41, del H. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 6% MeOH/CH2Cl2 hvilket gir tittelf orbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300MHz) 5 9,73 (bs, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,70 (m, 3H), 7,49 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,20 (m, 1H), 6,99
(d, 1H) , 6,75 (bs, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,58 (m, 2H), 3,93 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,35 (m, 2H), 2,48 (m, 1H), 2,08 (m, 1H) .
J. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo[ 3, 2- bl pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(5-klor-lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid som beskrevet i EKSEMPEL 42 ved romtemperatur under anvendelse av en katalytisk mengde av KOH i MeOH/benzen (1:1) istedenfor EtOH løsningsmiddel. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 70% CH3CN/H20 (0,1% TFA), og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) 8 12,65 (bs, 1H) , 8,60 (bs, 1H) , 8,43 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,26 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,71 (dd, 1H), 7,56 (m, 2H) , 7,32 (dd, 1H) , 6,80 (s, 1H) , 4,66 (AB, 2H), 4,17 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,20 (m, 2H), 2,00 (m, 1H), 1,60 (m, 1H). FAB MS, [M+H]+ = 451.
EKSEMPEL 44
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-( 1- furo[ 3, 2- b] pyridin- 2-ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl)- amid.
A. ( 2- Okso- l- prop- 2- ynyl- pvrrolidin- 3-( S)- yl)- karbaminsyre-tert- butylester .
•Tittelforbindelsen fremstilles fra (2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 1, del H under anvendelse av propargylbromid istedenfor 7-brommetyl-1-klor-isokinolin. Råproduktet tritureres fra
Et20/heksaner for å oppnå tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 5,09 (bs, 1H) , 4,19 (m, 1H) , 4,15 (m, 2H) , 3,45 (m, 2H), 2,69 (m, 1H), 2,29 (t, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,48 (s, 9H).
B. ( 1- Furo [ 3 , 2- b] pyridin- 2- ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl)- karbaminsyre- tert- butylester.
En blanding av 2-jod-3-hydroksy-pyridin (0,44 g, 2 mmol), (2-okso-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-3- (S) -yl) -karbaminsyre-tert-butylester (0,6 g, 2,5 mmol), bis(trifenylfosfin)-palladium(II) klorid (Pd (PPh3) 2C12) (50 mg) , kobberjodid (25 mg) og trietylamin (3 ml) i 3 ml acetonitril oppvarmes i et fordeglet rør ved 120°C i 2 timer. Etter avkjøling fortynnes reaksjonsblandingen med vann og EtOAc, og lagene separeres. Det vandige lag ekstraheres med EtOAc. De kombinerte organiske lag vaskes med vann og mettet NaCl solution, deretter tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 25% EtOAc/CH2Cl2 til 90% EtOAc/CH2Cl2 hvilket gir tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,53 (d, 1H) , 7,72 (dd, 1H) , 7,21 (dd, 1H) , 6,86 (s, 1H), 5,15 (bs, 1H), 4,69 (AB, 2H) , 4,23 (m, 1H) , 3,38 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,45 (s, 9H) . C. 3- ( S) - Amino- 1- ( furo [ 3 , 2- b] pyridin- 2- ylmetyl) - pyrrolidin-2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av (1-furo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl-2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl) -karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,70 (bs, 2H), 8,65 (d, 1H), 8,35 (d, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,10 (m, 1H) , 3,47 (m, 2H), 2,41 (m, 1H) , 2,09 (m, 1H) . D. 6- Klor- benzo Tb] tiofen- 2- sulfonsyre-( 1- furo[ 3, 2- b] pyridin- 2- ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl)- amid. Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid og 3-(S)-amino-1-(furo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 25% EtOAc/CH2Cl2 til 90% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13 + CD3OD, 300 MHz) 5 8,49 (bs, 1H) , 7,92 (s, 1H), 7,85 (S, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H) , 7,24 (m, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,63 (AB, 2H), 4,03 (m, 1H) , 3,41 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 2,16 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+>= 462, 464, Cl-mønster.
EKSEMPEL 45
6- Klor- benzo fb] tiofen- 2- sulfonsyre-( 1- furo[ 3, 2- b] pyridin- 2-ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl)- amid.
A. l- Fluor- 3-( 2, 2- dimetoksy- etyl- sulfanyl)- benzen.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 9, del A under anvendelse av 3-fluortiofenol istedenfor 3-klortiofenol. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av heksaner til 10% EtOAc/- heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som en olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,21 (m, 1H), 7,09 (m, 2H), 6,82 (m, 2H), 4,51 (m, 1H), 3,09 (s, 31H), 3,07 (s, 3H) .
B. 6- Fluor- benzo[ b] tiofen.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 9, del B under anvendelse av l-fluor-3-(2,2-dimetoksy-etyl-sulfanyl) -benzen istedenfor l-klor-3-(2,2-dimetoksy-etyl-sulfanyl)-benzen. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med heksaner for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
EI MS, [M] + = 152 .
C. 6- Fluor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 8, del A under anvendelse av 6-fluor-benzo[b]tiofen istedenfor tianaftalen. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med heksaner hvilket gir tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,08 (s, 1H), 7,94 (dd, 1H), 7,58 (dd, 1H) , 7,23 (dt, 1H) . D. 6- Fluor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-( 1- furo[ 3, 2- b]-pyridin- 2- ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3- ( S) - yl) - amid. Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-fluor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid og 3-(S)-amino-1-(furo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl) -pyrrolidin-2 -on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 66% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,46 (m, 1H) , 7,96 (s, 1H) , 7,91 (m, 1H), 7,77 (d, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,44 (s, 1H) , 7,29 (m, 2H), 6,86 (s, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,14 (m, 1H), 3,42 (m, 2H) , 2,58 (m, 1H) , 2,09 (m, 1H) . FAB MS, [M+H]<+> = 446.
EKSEMPEL 46
6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo-[ 3, 2- b] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yll - amidtrifluoracetat.
A. 2- Jod- 3- nitro- pyridin.
Til en løsning av 2-amino-3-nitro-pyridin (8 g, 57,5 mmol) i 60 ml av 6 N HC1 kjølt til 0°C tilsettes dråpevis en løsning av natriumnitritt (6,35 g, 92 mmol) i 40 ml av vann. Blandingen omrøres ved 0°C i 1,5 timer. Deretter tilsettes en løsning av kaliumjodid (22,9 g, 138 mmol) i 40 ml vann dråpevis til den gule løsning. Den resulterende røde blanding omrøres ved 0°C i 30 minutter og deretter oppvarmes den ved 60°C i 45 minutter. Etter avkjøling blir blandingen gjort basisk ved nøyaktig tilsetning av 3 N Na-OH. Det vandige lag ekstraheres med CH2C12 (4x) og de kombinerte organiske lag vaskes med 1 N HC1, fortynnet Na2S03 og vann. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet (2,72 g, 10,9 mmol) anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,65 (d, 1H) , 8,25 (dd, 1H), 7,48 (m, 1H). IS MS, [M+H]<+>= 251.
B. 3- Amino- 2- iod- pyridin.
Til en løsning av 2-jod-3-nitro-pyridin (2,72 g, 10,9 mmol) i 10 ml av konsentrert HC1 tilsettes dråpevis en løsning av tinn(II)kloriddihydrat (10,3 g, 45,7 mmol) i 12 ml av konsentrert HCl. Blandingen oppvarmes ved 90°C i 15 minutter. Den resulterende røde blanding avkjøles til 0°C og omrøres i 2 timer da et presipitat dannes. Det faste stoff filtreres, oppløses i vann og gjøres basisk ved tilsetning av IN NaOH. Det vandige lag ekstraheres med CH2C12 (4x) og de kombinerte organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet (1,5 g, 6,82 mmol) anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,81 (m, 1H) , 7,07 (m, 2H) , 4,05 (bs, 2H). IS MS, [M+H]<+> = 221. C. ( 2- Jod- pyridin- 3- yl)- karbaminsyreetylester.
Etylklorformiat (0,91 ml, 9,5 mmol) tilsettes til en løsning av 3-amino-2-jod-pyridin (1,4 g, 6,36 mmol) i 15 ml av pyridin avkjølet til 0°C. Blandingen omrøres ved 0°C i 2 timer og får langsomt varmes opp til romtemperatur. Ved dette tidspunkt fjernes overskudd av pyridin in vacuo. Residuet fortynnes med EtOAc, vaskes med vann, IN HC1 og mettet NaHC03. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 3 0% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelforbindelsen (1,2 g, 4,11 mmol) som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,51 (d, 1H) , 8,07 (dd, 1H) , 7,25 (dd, 1H), 7,16 (bs, 1H), 4,28 (q, 2H), 1,38 (t, 3H). D. 2-( 3-( S)- tert- Butoksykarbonylamino- 2- oksopyrrolidin- l-ylmetvl)- pyrrolo f 3. 2- b] pyridin- 1- karboksylsyreetvlester.
En blanding av (2-jod-pyridin-3-yl)-karbaminsyreetylester (0,6 g, 2,05 mmol), (2-okso-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester (0,49 g, 2,05 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (72 mg), kobberjodid (12 mg) og trietylamin (1,1 ml) i 4 ml av acetonitril oppvarmes i et lukket rør ved 100°C i 18 timer. Etter avkjøling fortynnes reaksjonsblandingen med MeOH og filtreres gjennom en celitt propp. Filtratet konsentreres in vacuo. Residuet fortynnes med EtOAc og vaskes med vann (4x) . Det kombinerte vandige lag ekstraheres med EtOAc (2x). De kombinerte organiske lag vaskes med vann, tørkes deretter over MgS04, filtreres og konsentreres hvilket gir det rå mellomprodukt koblet acetylen. IS MS, [M+H]+ = 4 03. Det rå acetylen mellomprodukt oppløses i 16 ml DMF og behandles med 1,8-diaza-bicyklo-[5,4,0]undek-7-en (DBU) (0,58 ml, 4,1 mmol). Blandingen oppvarmes ved 60°C i 2 timer. Etter avkjøling fortynnes den resulterende blanding med vann og EtOAc og lagene separeres. Det organiske lag vaskes med vann og tørkes deretter over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 90% EtOAc/CH2Cl2 hvilket gir tittelforbindelsen (0,07 g, 0,22 mmol) som et beige fast stoff.
JH NMR (CDC13, 300 MHz) 6 8,51 (d, 1H) , 8,35 (d, 1H) , 7,21 (dd, 1H), 6,60 (S, 1H), 5,34 (bs, 1H), 4,95 (AB, 2H), 4,55 (q, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,48 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,50 (t, 3H), 1,46 (s, 9H). IS MS, [M+H]+ = 403.
E. 2- ( 3-( S)- Amino- 2- oksopyrrolidin- l- ylmetyl)- pyrrolo[ 3. 2-b] pyridin- 1- karboksylsvreetylesterhydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av 2-(3-(S)-tert-butoksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl)-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-karboksylsyreetylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et beige fast stoff
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,70 (m, 1H) , 8,58 (m, 4H) , 7,50 (m, 1H), 6,91 (s, 1H), 4,91 (m, 2H), 4,51 (q, 2H), 4,01 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 2,48 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,43 (t, 3H).
F. 2-[ 3-( S)-( 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylamino)- 2-oksopyrrolidin- l- ylmetyll - pyrrolo[ 3. 2- bl pyridin- 1- karbok-s<y>ls<y>reet<y>lester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid og 2-(3-(S)-amino-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl)-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-karboksylsyreetylesterhydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med 60% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå tittelforbindelsen som et fast stoff.
<X>H NMR (CDC13/ 300 MHz) 8 8,49 (d, 1H) , 8,30 (d, 1H) , 7,90 (S, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,48 (dd, 1H), 7,20 (dd, 1H), 6,88 (bs, 1H) , 6,49 (s, 1H) , 4,81 (AB, 2H) , 4,49 (q, 2H), 4,13 (m, 1H), 3,39 (m, 2H), 2,61 (m, 1H), 2,13 (m, 1H) , 1,45 (t, 3H) .
G. 6- Klor- benzo[ bltiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo[ 3, 2- b] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid-trif luoracetat .
Til en løsning av 2-[3-(S)-(6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylamino)-2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl]-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-karboksylsyreetylester (0,03 g, 0,06 mmol) i 3 ml av MeOH tilsettes 4 dråper 10N NaOH løsning. Blandingen omrøres ved romtemperatur i 1 time. Råblandingen renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen (0,015 g, 0,026 mmol) som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-de, 300 MHz) 8 8,72 (d, 1H) , 8,58 (bs, 1H) , 8,41 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,55 (m, 2H), 6,69 (bs, 1H), 4,68 (AB, 2H), 4,25 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,73 (m, 1H). IS MS, [M+H]<+> = 461, 463, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet med 1,6 mol H20 beregn. C=43,76%, H=3,54%, N=9,28%, funnet C=43,76%, H=2,98%, N=8,95%.
EKSEMPEL 47
6- Klor- benzo [ b] tiof en- 2- sulf onsyre- [ 2- okso- l- ( lH- pyrrolo-[ 2 , 3- clpyridin- 2- ylmetyl) - pyrrolidin- 3 - ( S) - yl] - amidtrifluoracetat.
A. 3- ( S) - Amino- l- prop- 2- ynyl- pyrrolidin- 2- on- hydroklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I under anvendelse av (2-okso-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-3-(S)-yl)-karbaminsyre-tert-butylester som utgangsmaterial. Tittelforbindelsen erholdes som et beige fast stoff
<X>H NMR (CDC13 + DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,75 (bs, 3H) , 4,15 (AB, 2H) , 3,90 (m, 1H), 3,53 (m, 2H), 2,76 (t, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,19 (m, 1H).
B. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-( 2- okso- l- prop- 2-ynyl- pyrrolidin- 3-( S)- yl)- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonylklorid og 3-(S)-amino-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet isoleres som et beige skum og anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,90 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,80 (d, 1H) , 7,41 (dd, 1H), 5,53 (bs, 1H), 4,11 (AB, 2H), 3,91 (m, 1H), 3,42 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,27 (t, 1H) , 2,15 (m, 1H) .
C. ( 4- Jod- pyridin- 3- yl)- karbaminsyre- tert- butylester.
Til en løsning av (pyridin-3-yl) -karbaminsyre-tert-butylester (fremstilt ifølge prosedyren beskrevet i Tetrahedron Lett. 1994, 35, 9003) (2,2 g, 11,3 mmol) i 20 ml THF ved - 78 °C tilsettes dråpevis fc-BuLi (15,4 ml av en 1,7 M løsning i pentan, 26 mmol). Etter 15 minutter oppvarmes løsningen til -10°C i 3 timer. Blandingen avkjøles til -78 °C og en løsning av jod (5,7 g, 22,4 mmol) i 20 ml THF tilsettes via sprøyte. Den resulterende blanding omrøres ved -78 °C i 1 time, får deretter oppvarmes til romtemperatur og blir undertrykket med mettet NH4C1 løsning. Det vandige lag ekstraheres med EtOAc (2x). De kombinerte organiske lag vaskes med 1 N HCl, vann, fortynnet Na2S203, mettet NaHC03 og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes deretter over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 5% EtOAc/CH2Cl2 til 20% EtOAc/CH2Cl2 hvilket gir tittelf orbindelsen (1,3 g, 4,06 mmol) som et brunt fast stoff.
<1>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 9,17 (s, 1H) , 7,92 (d, 1H) , 7,70 (d, 1H) , 6,69 (bs, 1H) , 1,58 (s, 9H) . EI MS, [M] + = 320. D. 2-[ 3-( S)-( 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonylamino)- 2-oksopyrrolidin- l- ylmetyl]- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 1- karboksylsyre- tert- butylester.
En blanding av (4-jod-pyridin-3-yl)-karbaminsyre-tert-butylester (0,85 g, 2,65 mmol), 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-(2-okso-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-3-(S)-yl)-amid (0,98 g, 2,65 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (95 mg), kobberjodid (18 mg) og trietylamin (1,45 ml) i 8 ml DMF oppvarmes ved 100°C i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen avkjøles til 50°C og DBU tilsettes. Den resulterende blanding oppvarmes ved 50°C i 1,5 timer. Etter avkjøling fortynnes råblandingen med EtOAc og vaskes med mettet NH4C1 løsning, vann og mettet NaCl. Det organiske lag tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 1% MeOH/CH2Cl2 til 4% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelf orbindelsen (0,73 g, 1,3 mmol) som et lysebrunt fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 6 9,28 (s, 1H), 8,38 (d, 1H), 7,88 (m, 2H) , 7,68 (d, 1H), 7,46 (m, 3H), 6,31 (s, 1H) , 4,93 (AB, 2H), 4,00 (m, 1H), 3,49 (m, 2H), 2,76 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 1,60 (s, 9H). IS MS, [M]+ = 561, 563, Cl-mønster.
E. 6- Klor- benzo[ b] tiofen- 2- sulfonsyre-[ 2- okso- l-( lH- pyrrolo [ 2 . 3- c] pyridin- 2- ylmetyl) - pyrrolidin- 3- ( S) - yll - amid-trif luoracetat .
Tittelforbindelsen fremstilles fra 2-[3-(S)-(6-klor-benzo-[b] tiof en-2-sulf onylamino) -2-oksopyrrolidin-l-ylmetyl] - pyrrolo [2, 3-c]pyridin-1-karboksylsyre-tert-butylester som beskrevet i EKSEMPEL 27, del C. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,07 (bs, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,74 (d, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,27 (d, 1H), 8,03 (m, 3H), 7,52 (dd, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,71 (AB, 2H), 4,27 (m, 1H), 3,29 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,77 (m, 1H). FAB MS, [M+H] + = 461, 463, Cl-mønster. Elementanalyse beregnet med 0,7 mol H20 beregn. C=44,94%, H=3,33%, N=9,53%, funnet C=44,92%, H=2,91%, N=8,91%.
EKSEMPEL 48
Tieno [ 3 , 2- b] pyridin- 2- sulfonsyre- [ 2- okso- l- ( lH- pyrrolo [ 2, 3-c] pyridin- 2- ylmetyl) - pyrrolidin- 3- ( S) - vil - amidditrifluoracetat .
A. Tieno[ 3, 2- b] pyridin- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 8, del A ved bruk av tieno[3,2-b]pyridin (fremstilt ifølge prosedyren beskrevet i J. Heterocyclic Chem. 1984, 21, 785) istedenfor tianaftalen. Råproduktet anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 8,93 (dd, 1H) , 8,39 (s, 1H) , 8,38 (d, 1H) , 7,59 (m, 1H) . EI MS, [M]+ = 233, 235, Cl-mønster.
B. Tieno[ 3, 2- b] pyridin- 2- sulfonsyre-( 2- okso- l- prop- 2- ynyl-pyrrolidin- 3-( S)- yl)- amid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del K under anvendelse av tieno[3,2-b]pyridin-2-sulfonylklorid og 3-(S)-amino-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-2-on-hydroklorid som utgangsmaterial. Råproduktet isoleres som et hvitt fast stoff og anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 8,81 (d, 1H) , 8,22 (d, 1H) , 8,13 (S, 1H), 7,41 (m, 1H), 6,05 (bs, 1H), 4,10 (AB, 2H), 3,98 (m, 1H), 3,48 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,27 (t, 1H), 2,17 (m, 1H) . C. Tieno[ 3. 2- b] pyridin- 2- sulfonsyre- r2- okso- l-( lH- pyrrolo [ 2, 3- c] pyridin- 2- ylmetyl)- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidditrifluoracetat.
Tittelforbindelsen fremstilles fra tieno[3,2-b]pyridin-2-sulfonsyre-(2-okso-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-3-(S)-yl)-amid som beskrevet i EKSEMPEL 47, del D. Råblandingen fortynnes med EtOAc og vaskes med mettet NH4C1 løsning, vann og mettet NaCl. Det vandige lag konsentreres in vacuo til en rest. Blandingen av salter tritureres med MeOH og CH2C12, filtered, vaskes med CH2Cl2/MeOH og det gule filtrat konsentreres. Råproduktet renses ved RP-HPLC under eluering i en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 50% CH3CN/H20 (0,1% TFA) og de passende produktfraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et beige fast stoff
<X>H NMR (DMSO-d6/ 300 MHz) S 13,00 (bs, 1H) , 9,06 (s, 1H) , 8,88 (d, 1H) , 8,77 (m, 1H), 8,60 (d, 1H), 8,26 (d, 1H) , 8,12 (s, 1H), 8,01 (d, 1H), 7,52 (m, 1H), 6,80 (s, 1H) , 4,71 (AB, 2H), 4,35 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,22 (m, 1H), 1,78 (m, 1H) . IS MS, [M+H] <+> = 428. Elementanalyse beregnet med 1,9 mol HzO beregn. C=40,05%, H=3,33%, N=10,15%, found C=40,06%, H=2,82%, N=9,87%.
EKSEMPEL 49
Benzo [ b] tiof en- 2- sulfonsyre- ( 2- okso- l- tieno [ 3 , 2- c] pvridin-2- ylmetyl- pyrrolidin- 3- ( S) - yl) - amidtrifluoracetat.
A. 1- ( Tieno [ 3 . 2- c] pyridin- 2- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] karbaminsyre- tert- butylester.
Til en løsning av 1-(4-klor-tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] karbaminsyre-tert-butylester (0,46 g, 1,2 mmol), fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 33, del F, i 20 ml MeOH tilsettes 10 % ifølge vekt Pd/C (0,1 g) og KOH (0,13 g, 2,4 mmol) . Atmosfæren ovenfor reaksjonsblandingen erstattes med hydrogen og løsningen oppvarmes til 50°C. Etter 16 timer, filtreres løsningen gjennom celitt og celitten vaskes med MeOH. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 30% EtOAc/CH2Cl2 til 40% EtOAc/CH2Cl2 for å oppnå produktet som et hvitt fast stoff (0,2 g, 0,7 mmol).
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 9,00 (s, 1H), 8,44 (d, 1H), 7,70 (S, 1H) , 7,31 (S, 1H) , 5,12 (bs, 1H) , 4,72 (AB, 2H) , 4,18 (m, 1H) , 3,32 (m, 2H), 2,62 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,42 (s, 9H) . FAB MS, [M+H]<+> = 348.
B. Benzo [ b] tiof en- 2- sulf onsyre- ( 2- okso- l- tieno [ 3 , 2- c] pyridin- 2- ylmetyl- pvrrolidin- 3 - ( S)- yl)- amidtrifluoracetat.
Til en løsning av 1-(tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] karbaminsyre-tert-butylester (0,1 g, 0,35 mmol) i 4 ml av CH2C12 tilsettes Et3N (0,08 g, 0,78 mmol) og benzo[b]tiofensulfonylklorid (0,08g, 0,35 mmol). Etter 6 timer fortynnes løsningen med CH2C12 og vaskes med 10% Na2C03 og mettet NaCl. Residuet renses ved RP-HPLC under eluering med en gradient av 10% CH3CN/H20 (0,1% TFA) til 80% CH3CN/H20 (0,1% TFA). De passende fraksjoner lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,25 (bs, 1H), 8,63 (d, 1H), 8,50 (m, 1H) , 8,39 (m, 1H), 7,99 (m, 4H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (m, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,14 (m, 1H), 3,11 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1,62 (m, 1H). FAB MS, [M+H]<+> = 444
EKSEMPEL 50
7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( lH- imidazo[ 4, 5- cl-pyridin- 2- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl] amid-trif luoracetat .
A. [ 3-( S)- Amino- 2- okso- cyklopentyl]- eddiksyre benzyl esterhydroklorid.
Natriumhydrid (0,13 g, 3,3 mmol, 60% ifølge vekt) tilsettes til en løsning av [2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyre-tert-butylester (0,6 g, 3 mmol) i THF (3 0 ml) ved 0°C. Blandingen omrøres i 3 0 minutter deretter tilsettes benzyl 2-brom-acetat (0,76 g, 3,3 mmol). Den resulterende løsning oppvarmes til romtemperatur og omrøres i 1,5 timer. Reaksjonen undertrykkes med mettet ammoniumkloridløsning og fortynnes deretter med metylenklorid. Det organiske lag separeres, vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved flash-kromatografi (0-3% MeOH/ CH2C12) og det isolerte material behandles i etylacetat med HCl-gass (som beskrevet i EKSEMPEL 1, del I) for å oppnå tittelforbindelsen (0,55 g, 1.9 mmol) som et lysegult fast stoff.
<X>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 8 7,32 (m, 5H), 5,17 (s, 2H), 4,15 (d, 2H) , 4,08 (m, 1H), 3,54 (m, 2H), 2,54 (m, 1H), 2,03 (m, 1H) . EI MS, [M]<+>=248.
B. 3-( S )-( 7- Metoksy- naftalen- 2- sulfonylamino)- 2- oksopyrrolidin- l- yl]- eddiksyre.
[3-(S)-Amino-2-okso-cyklopentyl]-eddiksyre benzylester-hydroklorid (0,34 g, 1,2 mmol) suspenderes i CH3CN (20 ml). Til denne blanding tilsettes trietylamin (0,36 g, 3,6 mmol) etterfulgt av 7-metoksy-naftalen-2-sulfonylklorid (0,31 g, 1,2 mmol). Blandingen omrøres over natten ved romtemperatur, underkastes vandig opparbeidelse og konsentreres deretter til tørrhet. Råmaterialet renses ved flash-kromatografi (0-5% MeOH/ CH2C12) . Påfølgende hydro-genolysis i MeOH/CH2Cl2 med 5% Pd/C ved 25 psi i 1,5 timer gav tittelforbindelsen (0,40 g, 1 mmol) som et hvitt fast stoff.
<*>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,33 (S, 1H) , 7,80 (m, 3H) , 7,23 (m, 2H) , 5,90 (br, 1H), 3,95 (m, 6H), 3,38 (m, 2H) , 2,40 (m, 1H), 2,07 (m, 1H). IS MS, [M+H]<+>= 379. C. N-( 3- Amino- pyridin- 4- yl)- 2-[ 3-( S)-( 7- metoksy- naftalen- 2-sulfonylamino)- 2- oksopyrrolidin- l- yl]- acetamid.
Trietylamin (0,13 g, 1,3 mmol) og isobutylklorformiat (0,18 g, 1,3 mmol) tilsettes til en løsning av [3-(S)-(7-metoksy-naftalen-2-sulfonylamino)-2-oksopyrrolidin-l-yl] - eddiksyre (0,5 g, 1,3 mmol) i THF (15 ml) ved -10°C. Blandingen omrøres i 20 minutter, deretter behandles den med en løsning av 3,4-diamino-pyridin (0,16 g, 1,5 mmol) i DMF (5 ml). Den resulterende blanding oppvarmes til romtemperatur og omrøres i 3 timer. Reaksjonsblandingen konsentreres in vacuo og fortynnes deretter med metylenklorid. Det organiske lag vaskes med saltvann, tørkes over MgS04, filtreres og konsentreres. Residuet renses ved flash-kromatografi (5-8% MeOH/ CH2C12) . for å oppnå tittelforbindelsen (0,27 g, 0,58 mmol) som et fast stoff.
<X>H NMR (CDC13, 300 MHz) 8 8,88 (br, 1H) , 8,30 (s, 1H) , 8,00 (s, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,70 (m, 3H), 7,40 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,12 (S, 1H), 5,28 (s, 2H), 4,07 (m, 4H), 3,88 (3, 3H), 3,34 (m, 2H), 2,22 (m, 1H), 1,90 (m, 1H). IS MS, [M+H]<+>= 470. D. 7- Metoksy- naftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( lH- imidazo r 4, 5-c] pyridin- 2- ylmetyl- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
N-(3-Amino-pyridin-4-yl)-2-[3-(7-metoksy-naftalen-2-sul-fonylamino)-2-oksopyrrolidin-l-yl]-acetamid (0,22 g, 0,47 mmol) i eddiksyre (15 ml) oppvarmes ved 110°C over natten. Den resulterende løsning konsentreres til tørrhet. Residuet renses ved HPLC under eluering med en gradient av 10 til 100% CH3CN/ 0,1 % TFA i vann over 30 minutter. Fraksjoner inneholdende rent produkt lyofiliseres for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (0,24 g, 0,42 mmol).
<*>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 9,30 (s, 1H) , 8,40 (d, 1H) , 8,28 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,70 (m, 3H), 7,40 (m, 1H), 7,20 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 4,92 (m, 2H), 4,46 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,38 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 2,03 (m, 1H). Ione-spray MS, [M+H]<+>= 4 52.
EKSEMPEL 51
7- Metoksynaf talen- 2- sul f onsyre [ 1- ( 2- amino- 3H- benzoimidazol-5- metyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
A. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre-[ 1-( 3, 4- diaminobenzyl)- 2-oksopyrrolidin- 3-( S)- yl]- amid.
10% Palladium på karbon (0,08 g) tilsettes til en løsning av 7-metoksy-naftalen-2-sulfonsyre[1-(4-amino-3-nitro-benzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,22 g, 0,5 mmol)
(fremstilt som beskrevet i EKSEMPEL 25, del F) i MeOH (4 0 ml) og CHC13 (3 ml) under nitrogenatmosfære. Den heterogene blanding hydrogeneres ved romtemperatur i et Parr-apparat under 47 p.s.i. hydrogen i 5 timer. Katalysatoren filtreres og filtratet kontrollert med tic viser inget utgangsmaterial. Filtratet konsentreres in vacuo og anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
<X>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 6 8,41 (s, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,25 (dd, 1H), 7,02 (d, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,79 (dd, 1H), 4,30 (s, 2H), 4,13 (t, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,13 (m, 2H), 2,14 (m, 1H), 1,70 (m, 1H) . IS MS, [M+H]<+>= 441.
B. 7- Metoksynaftalen- 2- sulfonsyre[ 1-( 2- amino- 3H- benzoimidazol- 5- metyl) - 2- oksopvrrolidin- 3- ( S) - yl] - amidtrifluoracetat.
Trietylamin (0,063 ml, 0,45 mmol) tilsettes til en løsning av 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(3,4-diaminobenzyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid (0,205 g, 0,47 mmol) i MeOH (8 ml) under nitrogen. Cyanogenbromid (0,19 ml av en 3 M løsning, 0,56 mmol) tilsettes dråpevis til reaksjonsblandingen ved 0°C. Etter omrøring i 5 minutter ved 0°C, bringes reaksjonsblandingen til romtemperatur og omrøres over natten. Den klare løsning konsentreres deretter in vacuo og den ubehandlede rest renses under anvendelse av kolonnekromatografi under eluering med en gradient av 9% MeOH/ CH2C12 til 50% MeOH/ CH2C12 for å oppnå produktet med 56% utbytte. Produktet lyofiliseres i acetonitril/TFA-vann for å oppnå tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 5 8,40 (d, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,25 (dd, 1H) , 7,15 (d, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,92 (dd, 1H), 4,41 (AB, 2H) , 4,15 (t, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,10 (m, 2H), 2,10 (m, 1H) , 1,64 (m, 1H) . Ione-spray MS, [M+H]<+>= 466.
EKSEMPEL 52
3-( S)- Amino- 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- pyrrolidin- 2-on- hydroklorid.
A. 7- Metyl- l- fenoksyisokinolin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i Eksempel 1, del L, under anvendelse av l-klor-7-metylisokinolin som utgangsmaterial. Råmaterialet renses ved kolonnekromatograf i under eluering med 20% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelproduktet som en svakt gul olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,22 (s,lH), 7,90 (d,1H), 7,68-7,60 (m, 1H), 7,60-7,52 (m, 1H) , 7,50-7,40 (m, 2H), 7,30-7,20 (m, 4H), 2,57 (s, 3H).
B. 7- Brommetyl- l- fenoksyisokinolin.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i Eksempel 1, del F, under anvendelse av 7-metyl-l-fenoksyisokinolin som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 10% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelproduktet som en klar olje.
<X>U NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,40 (s, 1H), 7,95 (d, 1H) , 7,80-7,65 (m, 2H) , 7,50-7,40 (m, 2H) , 7,30-7,20 (m, 4H) , 4,65 (s, 2H). C. Tl- ( l- Fenoksyisokinolin- 7- ylmetyl) - 2- oksopyrrolidin- 3-( S) - yll - karbaminsyrebenzylester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i Eksempel 1, del H under anvendelse av 7-brommetyl-1-fenoksyisokinolin og [2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] karbaminsyrebenzylester som utgangsmaterial. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 70% EtOAc/heksaner for å oppnå tittelproduktet som en klar olje.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 8,25 (s, 1H), 7,97 (d, 1H) , 7,79 (d, 1H) , 7,60(d, 1H), 7,48-7,40 ( m, 2H) , 7,38-7,20 (m, 9H) , 5,40 (bs, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,75 (AB, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,30 (m, 2H) , 2,67 (m, 1H), 1,90 (m, 1H) . D. [ 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- 2- oksopyrrolidin- 3-( S)-yl] - karbaminsyrebenzylester.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i Eksempel 1, del M, under anvendelse av [1-(1-fenoksyisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -karbaminsyrebenzylester som utgangsmaterial. Reaksjonsblandingen fortynnes med metylenklorid og vaskes med 3 N NaOH og saltvann. Det organiske lag tørkes over MgSOr, filtreres og konsentreres in vacuo. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 10% MeOH/CH2Cl2 for å oppnå tittelproduktet som et skumlignende gult fast stoff.
<X>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 8 7,95-7,87 (m, 2H) , 7,70 (d, 1H) , 7,45 (d, 1H), 7,40-7,30 (m, 5H), 7,00 (d, 1H), 5,75-5,55
(m, 3H), 5,20-5,15 (m, 4H), 4,3-4,1 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 2,55 (m, 1H), 2,27 (m, 1H) .
E. 3-( S)- Amino- 1-( l- aminoisokinolin- 7- ylmetyl)- pyrrolidin-2- on- hydroklorid.
10% Palladium på karbon (0,089 g) tilsettes til en løsning av [1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-karbaminsyrebenzylester (0,33 g, 0,84 mmol) i etanol. Den heterogene blanding hydrogeneres ved romtemperatur i et Parr-apparat under 45 p.s.i. hydrogen i 3 timer. Reaksjonsblandingen filtreres gjennom en propp av celitt,
vaskes med etanol og filtratet konsentreres in vacuo for å oppnå produktet (0,2 g, 0,78 mmol) som et skumlignende fast stoff. Produktet oppløses i dietyleter og avkjøles til 0°C. Hydrogenkloridgass bobles gjennom løsningen hvilket gir produktet som et hydroklorid salt.
<X>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) d 8,95-8,50 (b, 2H) , 8,05 (s,
1H), 7,75-7,70 (m, 2H), 7,53 (d, 1H), 7,30-7,10 (b, 2H), 6,93 (d, 1H) , 4,57 (AB, 2H) , 3,40 (m, 1H) , 3,15 (m, 1H) , 2,37 (m, 1H), 2,02 (m, 1H). FAB MS: [M+H]<+> = 257.
F. 7- Metoksynapthalene- 2- sulfonsyre-[ 1-( 1- aminoisokinolin-7- yl- metyl)- 2- okso- pyrrolidin- 3-( S)- yl]- amidtrifluoracetat.
Tittelforbindelsen kan fremstilles ved an alternative rute under anvendelse av 3-(S)-amino-1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-2-on-hydroklorid og 7-metoksynaftalen-2-sulfonylklorid som utgangsmaterial og fortsettelse som beskrevet i Eksempel 1, del K.
Eksempel 53.
6- Klortieno[ 2, 3- b] pyridin- 2- sulfonylklorid.
A. 2- Brom- 6- klortieno[ 2, 3- b] pyridin.
Tittelforbindelsen fremstilles fra 2-brom-5-acetyltiofen ifølge prosedyren beskrevet i J. Chem. Soc, Perkin Trans. I, 1981, 1531. Råproduktet renses ved kolonnekromatografi under eluering med 2% EtOAc/heksaner for å oppnå et hvitt fast stoff.
1H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 7,89 (d, 1H) , 7,28 (d, 1H) , 7,27 (d, 1H) .
B. 6- Klortieno\ 2 , 3- b] pyridin- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 1, del D, under anvendelse av 2-brom-6-klortieno[2,3-b]pyridin istedenfor tianaftalen. Råproduktet erholdes som et hvitt fast stoff og er av tilstrekkelig renhet for å anvendes i det påfølgende trinn.
1H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 8,22 (d, 1H) , 8,09 (s, 1H), 7,52 (d, 1H). EI MS, [M] += 267, 269, Cl-mønster.
Eksempel 54
6- Fluorbenzo[ b] tiofen- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 9, deler A-C, under anvendelse av 3-fluortiofenol istedenfor 3-klortiofenol.
Eksempel 55
6- Klortieno[ 3. 2- b] pyridin- 2- sulfonylklorid.
Tittelforbindelsen fremstilles som beskrevet i EKSEMPEL 48, del A, ved bruk av 6-klortieno[3,2-b]pyridin (fremstilt ifølge prosedyren beskrevet i J. Heterocyklisk Chem. 1984, 21, 785) istedenfor tianaftalen. Råproduktet anvendes i det påfølgende trinn uten ytterligere rensing.
Molekylene beskrevet heri hemmer blodkoagulering i kraft av sin evne til å inhibere det penultimate enzym i koaguleringskaskaden, ved å kontrollere aktiviteten av Faktor Xa. Både aktiviteten av den frie Faktor Xa og Faktor Xa som er innebygget i protrombinasekomplekset (Faktor Xa, Faktor Va, kalsium og fosfolipid) inhiberes av forbindelser med formel I. Inhiberingen av Faktor Xa-aktiviteten erholdes ved direkte kompleksdannelse mellom inhibitoren og enzymet og er derfor uavhengig av plasma-kofaktoren antitrombin III. Effektiv inhibering av Faktor Xa-aktiviteten oppnås ved administering av forbindelsene enten ved oral administrering, kontinuerlig intravenøs infusjon, intravenøs bolusadministrering eller en annen parenteral rute slik at den ønskede virkning oppnås, nemlig å forhindre aktiviteten av Faktor Xa-indusert dannelse av trombin fra protrombin.
Antikoagulant-terapi er tilrådelig for behandling og pro-fylakse av flere forskjellige trombotiske tilstander av både den venøse og den arterielle vaskulatur. I det arterielle system er abnorm trombusdannelse primært forbundet med arteriene i den koronare, cerebrale og perifere vaskulatur. Sykdommene forbundet med trombotisk okklusjon av disse kar innbefatter prinsipielt akutt myokardialt infarkt (AMI), ustabil angina, tromboembolisme, akutt karlukning forbundet med trombolytisk terapi og perkutan transluminal koronar angioplasti (PTCA), transiente iskemiske anfall, slag, intermittent klaudikasjon og "bypass"-implantering i de koronare (CABG) eller perifere arterier. Kronisk antikoagulant-terapi kan også være velgjørende når det gjelder å forhindre karenes luminale innsnevring (restenose) som ofte opptrer etter PTCA og CABG, og når det gjelder å opprettholde vaskulær tilgangspatens i langtidshemodialysepasienter. Vedrørende den venøse vaskulatur opptrer patologisk trombusdannelse hyppig i venene i de lavere ekstremiteter etter abdomen-, kne- og hofteoperasjoner (dyp venetrombose, DVT). DVT utsetter ytterligere pasienten for en høyere risiko for pulmonar tromboembolisme. En systemisk, disseminert intravaskulær koagulopati (DIC) opptrer vanligvis i både vaskulære systemer under septisk skjokk, visse virale infeksjoner og kreft. Denne tilstand karakteriseres ved et hurtig forbruk av koagulasjonsfaktorer og deres plasma-inhibitorer resulterende i at det dannes livstruende trombin gjennom hele mikrovaskulaturen i flere organsystemer. Indikasjonene omtalt ovenfor innbefatter noen, men ikke alle, mulige kliniske situasjoner hvor antikoagulant-terapi er på sin plass. Fagkyndige personer på dette område er oppmerksomme på omstendighetene som krever enten akutt eller kronisk profylaktisk antikoagulant-terapi.
Foreliggende forbindelser kan anvendes alene eller i kombinasjon med andre diagnostiske, antikoagulerende, anti-blodplatiske eller fibrinolytiske midler. For eksempel kan adjunktiv administrering av inhibitorer av aktiviteten av Faktor Xa med standard heparin, lavmolekylært heparin, direkte trombin-inhibitorer (dvs. hirudin), aspirin, fibrinogen-reseptor-antagonister, streptokinase, urokinase og/eller vevsplasminogen-aktivator resultere i større antitrombotisk eller trombolytisk virkningsfullhet eller effektivitet. Forbindelsene beskrevet heri kan administreres for å behandle trombotiske komplikasjoner i mange forskjellige dyr så som primater, inklusive mennesker. Inhibering av faktor Xa er nyttig ikke bare i antikoagulant -terapien av individer med trombotiske tilstander, men er nyttige når inhibering av blodkoagulering er nød-vendig for å forhindre koagulering av lagret helblod og for å forhindre koagulering i andre biologiske prøver for testing eller lagring. Således kan enhver inhibitor av Faktor Xa-aktivitet tilsettes til, eller bringes i kontakt med, ethvert medium inneholdende, eller mistenkt for å inneholde, Faktor Xa, og hvor det er ønskelig at blodkoagulering inhiberes.
I tillegg til sin anvendelse i antikoagulant-terapi kan inhibitorer av Faktor Xa-aktivitet finne anvendelse i behandlingen eller forebyggelsen av andre fysiologiske tilstander hvor genereringen av trombin har vært med-virkende i å spille en patologisk rolle. For eksempel er det blitt antatt at trombin bidrar til morbiditeten og mortaliteten i slike kroniske og degenerative sykdommer som artritt, kreft, aterosklerose, restenose etter koronar angioplasti og Alzheimers sykdom i kraft av sin evne til å regulere mange forskjellige celletyper ved spesifikk spaltning og aktivering av en celleoverflatisk trombin-reseptor. Inhibering av faktor Xa-aktivitet vil effektivt blokkere trombingenereringen og derfor nøytralisere enhver patologisk virkning av trombin på forskjellige celletyper.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan benyttes for behandling av et menneske eller dyr som lider av, eller utsettes for, en fysiologisk tilstand som kan lindres ved administrering av en inhibitor med Faktor Xa-aktivitet, for eksempel tilstander som tidligere beskrevet. Således omfatter oppfinnelsen anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse med formel I for fremstilling av et medikament for behandling av en fysiologisk forstyrrelse som kan moduleres ved å hemme en aktivitet av Faktor Xa. "Effektiv mengde" er ment å skulle beskrive en mengde av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse som effektivt forhindrer aktiviteten av Faktor Xa og derved frembringer den ønskede terapeutiske effekt.
Foreliggende oppfinnelse innbefatter også innenfor sitt område farmasøytiske formuleringer som omfatter minst én av forbindelsene med formel I i kombinasjon med en farma-søytisk godtagbar bærer eller belegg.
I praksis kan forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse generelt administreres parenteralt, intravenøst, intra-muskulært under huden, colonisk, nasalt, intraperitonealt, rektalt eller oralt.
Produktene kan fremstilles i former som muliggjør administrering på den mest passende måte, og oppfinnelsen ved-rører også farmasøytiske sammensetninger inneholdende minst ett produkt ifølge oppfinnelsen som er passende for anvendelse i human- eller veterinærmedisin. Disse sammensetninger kan fremstilles ifølge velkjente metoder under anvendelse av en eller flere farmasøytisk akseptable adju-vanter eller eksipienser. Adjuvantene omfatter bl.a. diluenter, sterile vandige media og de forskjellige ikke-toksiske organiske løsningsmidler. Sammensetningene kan fremstilles i form av tabletter, piller, granuler, pulvere, vandige løsninger eller suspensioner, injiserbare løsninger, eliksirer eller siruper, og kan inneholde et eller flere midler valgt fra gruppen omfattende søtnings-midler, aromastoffer, farvestoffer eller stabiliserings-midler for å oppnå farmasøytisk akseptable preparater.
Valg av vehikkel og innholdet av aktiv substans i vehik-kelet bestemmes generelt i samsvar med oppløseligheten og produktets kjemiske egenskaper, den spesielle form for administrering og forskriftene som må overholdes i farma-søytisk praksis. For eksempel kan eksipienter så som laktose, natriumcitrat, kalsiumkarbonat, dikalsiumfosfat og midler som går i oppløsning, så som stivelse, alginsyrer og visse komplekse silikater kombinert med smøremidler, så som magnesiumstearat, natriumlaurylsulfat og talkum, anvendes for fremstilling av tabletter. For å fremstille en kapsel er det fordelaktig å anvende laktose og polyetylenglykoler med høy molekylvekt. Når vandige suspensjoner anvendes, kan de inneholde emulgerende midler eller midler som muliggjør suspensjon. Diluenter så som sukrose, etanol, polyetylen-glykol, propylenglykol, glyserol og kloroform eller blandinger derav kan også anvendes.
For parenteral administrering av produktene ifølge oppfinnelsen anvendes emulsjoner, suspensjoner eller løsninger i vegetabilsk olje, for eksempel sesamolje, jordnøttolje eller olivenolje, eller vandig-organiske løsninger så som vann og propylenglykol, injiserbare organiske estere så som etyloleat, så vel som sterile vandige løsninger av de farmasøytisk akseptable salter. Saltløsningene av produktene ifølge oppfinnelsen er spesielt nyttige for administrering ved intramuskulær eller subkutan injeksjon. De vandige løsninger, også omfattende løsninger av saltene i rent destillert vann, kan anvendes for intravenøs administrering med det forbehold at deres pH må være passende justert, at de er skjønnsomt bufret og gjort isotoniske med en tilstrekkelig mengde glukose eller natriumklorid, og at de er sterilisert ved oppvarming, stråling eller mikrofiltrering.
Passende sammensetninger inneholdende forbindelsene i oppfinnelsen kan fremstilles med konvensjonelle midler. For eksempel kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen oppløses eller suspenderes i en passende bærer for anvendelse i en forstøver eller en suspensjon eller løsningsaerosol, eller kan absorberes eller adsorberes på en passende fast bærer for anvendelse i en pulverinhalator.
Faste sammensetninger for rektal administrering innbefatter suppositorier formulert i henhold til kjente metoder og inneholdende minst én forbindelse med formel I.
Prosentandelen av aktive ingredienser i sammensetningene i oppfinnelsen kan varieres hvis det er nødvendig at den skal utgjøre en andel slik at en passende dosering kan oppnås. Selvsagt kan flere enhetsdoseringsformer administreres ved omtrent samme tidspunkt. Doseringen som anvendes, fastsettes av legen og avhenger av den ønskede terapeutiske effekt, administreringsmåten og behandlingens varighet og pasientens tilstand. For voksne er doseringen generelt fra ca. 0,01 til ca. 100, fortrinnsvis ca. 0,01 til ca. 10, mg/kg kroppsvekt pr. dag ved inhalering, fra ca. 0,01 til ca. 100, fortrinnsvis 0,1 til 70, mer spesielt 0,5 til 10, mg/kg kroppsvekt pr. dag ved oral administrering, og fra ca. 0,01 til ca. 50, fortrinnsvis 0,01 til 10, mg/kg kroppsvekt pr. dag ved intravenøs administrering. I hvert enkelt tilfelle vil doseringen fastsettes i henhold til de karakteristiske faktorer hos personen som skal behandles, så som alder, vekt, generell helsetilstand og andre karakteristika som kan påvirke de medisinske produkters effekt.
Produktene ifølge oppfinnelsen kan administreres så hyppig som nødvendig for å oppnå den ønskelige terapeutiske virkning. Noen pasienter kan reagere raskt overfor en høyere eller lavere dosering og kan finne meget lavere vedlikeholdsdoser adekvate. For andre pasienter kan det være nødvendig å ha langtidsbehandlinger med 1 til 4 doser pr. dag, i samsvar med hver enkelt pasients fysiologiske behov. Generelt kan det aktive produkt administreres oralt 1 til 4 ganger pr. dag. Det er selvfølgelig at det for andre pasienter vil være nødvendig å ordinere ikke mer enn en eller to doser pr. dag.
Forbindelsene innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse utøver bemerkelsesverdige farmakologiske aktiviteter i henhold til tester beskrevet i litteraturen, og disse testresultater antas å korrelere med den farmakologiske aktivitet i mennesker og andre pattedyr. Følgende farmakologiske testresultater er typiske karakteristika for forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse.
Enzymforsøk:
Evnen hos forbindelsene i foreliggende oppfinnelse til å virke som inhibitorer av faktor Xa, trombin, trypsin, vevsplasminogen-aktivator (t-PA), urokinaseplasminogen-aktivator (u-PA), plasmin og aktivert protein C evalueres ved å bestemme konsentrasjonen av inhibitor som resulterer i et 50% tap av enzymaktivitet (IC50) under anvendelse av rensede enzymer.
Alle enzymforsøk utføres ved romtemperatur i 96-brønners mikrotiterplater under anvendelse av en endelig enzym-konsentrasjon på 1 nM. Konsentrasjonene av faktor Xa og trombin bestemmes ved aktivsetetitrering, og konsentrasjonene av alle andre enzymer er basert på proteinkonsen-trasjonen meddelt av produsenten. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen oppløses i DMSO, fortynnes med sine respektive buffere og analyseres ved en maksimal endelig DMSO-konsen-trasjon på 1,25%. Den fortynnede løsning av forbindelsen tilsettes til brønner inneholdende buffer og enzym og pre-ekvilibreres i mellom 5 og 3 0 minutter. Enzymreaksjonene initieres ved tilsetning av substrat, og farven utviklet fra hydrolysen av peptid-p-nitroanilidsubstratene overvåkes kontinuerlig i 5 minutter ved 4 05 nm på en Vmax mikroplateleser (Molecular Devices). Under disse betingelser brukes mindre enn 10% av substratet i alle forsøk. De målte utgangshastigheter ble anvendt for å beregne mengden av inhibitor som resulterte i en 50% reduksjon av kon-trollhastigheten (IC50) . De tilsynelatende Ki-verdier bestemmes deretter ifølge Cheng-Prusoffs ligning (IC50 = Ki [1+[S]/Km]) under forutsetning av kompetitiv inhi-ber ingkine tikk .
Eksempelvis har 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diaminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat en Ki-verdi på 80 nM.
Et ytterligere in vi tro forsøk kan anvendes for å bestemme potensen av forbindelser ifølge oppfinnelsen i normalt humant plasma. Den aktiverte partielle tromboplastintid er et plasma-basert blodlevringsforsøk som er avhengig av in situ generering av faktor Xa, dens innbygging i protrombinasekomplekset og påfølgende generering av trombin og fibrin som til slutt gir dannelse av en levring som for-søkets sluttpunkt. Dette forsøk anvendes for tiden klinisk for å overvåke virkningene ex vivo av det vanligvis anvendte antikoagulerende medikament heparin samt direkte virkende antitrombinmidler som gjennomgår klinisk evaluering. Derfor betraktes aktivitet in vitro i dette forsøk som en surrogatmarkør for antikoagulerende aktivitet in vivo.
Leverin<g>sforsøk basert på humant plasma:
Aktivert partiell tromboplastinleveringstid bestemmes i duplikat med et MLA Electra 800-instrument. Et volum på 100 ml citrert normalt humant sammenslått plasma (George King Biomedical) tilsettes til en kyvette inneholdende 100 ml av en forbindelse ifølge oppfinnelsen i Tris/NaCl buffer (pH 7,5) og plasseres i instrumentet. Etter en 3 minutters opp-varmingsperiode tilfører instrumentet automatisk 100 ml aktivert cefalogenplastinreagens (Actin, Dade) etterfulgt av 100 ml 0,035 M CaCl2 for å initiere levringsreaksjonen. Levringsdannelsen bestemmes spektrofotometrisk og måles i sekunder. Forbindelsens potensial kvantifiseres som konsentrasjonen som kreves for å fordoble en kontroll-levringstid målt med humant plasma i fravær av forbindelsen ifølge oppfinnelsen.
En forbindelse ifølge oppfinnelsen kan også vurderes med hensyn til sin in vivo antitrombotiske virksomhet i to veletablerte eksperimentelle dyremodeller for akutt vaskulær trombose. En kaninmodell for jugular venøs trombose og en rottemodel for karotid arteriell trombose brukes til å påvise den antitrombotiske aktivitet av disse forbindelser i distinkte dyremodell-paradigmaer av henholdsvis human venøs trombose og arteriell trombose.
Eksperimentell trombosemodell av kaninvener in vivo:
Dette er en velkarakterisert modell av fibrinrik venøs trombose som er evaluert i litteraturen og har vist seg å være sensitiv overfor flere antikoagulantdroger inklusive heparin ("Antithrombotic Effeet of Recombinant Truncated Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI 1-161) in Experi-mental Venous Trombosis - a Comparison with Low Molecular Weight Heparin", J. Holst, B. Lindblad, D. Berggvist, O. Nordfang, P.B. Ostergaard, J.G.L. Petersen, G. Nielsen og U. Hedner. Trombosis and Haemostasis. 71, 214-219 (1994). Hensikten med å utnytte denne modell er å vurdere forbin-deisene evne til å hindre at det dannes venøse trombi (propper) in vivo generert på et skadet sted og partiell stase i den jugulare vene.
Hvite New Zealandske hann- og hunnkaniner med en vekt på 1,5-2 kg anestiseres med 35 mg/kg ketamin og 5 mg/kg xylazin i et volum av 1 ml/kg (i.m.). Den høyre jugulare vene kanyleres for infusjon av anestetika (ketamin/xylazin 17/2,5 mg/kg/h med en hastighet av omtrent 0,5 ml/h) og administrering av testsubstanser. Den høyre karotide arterie kanyleres for måling av arterielt blodtrykk og innsamling av blodprøver. Kroppstemperaturen blir holdt ved 39°C med en GAYMAR T-PUMPE. Den venstre eksterne jugulare vene isoleres, og alle sidegrener langs en 2-3 cm lang blottet del av karet tettes. Den interne jugulare vene kanyleres like ovenfor todelingen av den felles jugular, og spissen av kanylen føres like bort til den felles jugulare vene. Et 1 cm langt segment av venen isoleres med ikke-traumatiske vaskulære klemmer, og en relativ stenose dannes ved å binde en ligatur rundt venen med en 18G nål like nedenfor den borteste klemme. Dette frembringer et område med redusert flyt og partiell stase ved det skadede sted. Det isolerte segment skylles forsiktig med saltvann 2-3 ganger via kanylen i den interne jugular. Deretter fylles det isolerte segment med 0,5 ml 0,5% polyoksyetyleneter (W-1) i 5 minutter. W-l er en detergent som river opp det endotele cellebelegg på segmentet og tilveiebringer således en trombogen overflate for å initiere levringsdannelse. Etter 5 minutter trekkes W-l bort fra segmentet, og segmentet skylles igjen forsiktig med saltvann 2-3 ganger. De vaskulære klemmer fjernes deretter, og blodstrømmen gjen-opprettes gjennom denne del av karet. Blodlevring får dannes og vokse i 30 minutter etter at venen er kuttet like nedenfor den stenotiske ligatur og inspiseres med hensyn til blodstrøm (fravær av blodstrøm noteres som fullstendig okklusjon). Hele det isolerte venesegment ligeres deretter, og den dannede propp fjernes og veies (våtvekt). Virkningen av testmiddel på de endelige blodproppvekter anvendes som det primære sluttpunkt. Dyrene holdes i ytterligere tredve minutter for å oppnå et farmakodynamisk sluttpunkt for antikoaguleringen. Medikamentadministreringen initieres 15 minutter før den vaskulære skade med W-l og fortsetter gjennom perioden for proppdannelsen og matureringen. Tre blodprøver(3 ml hver) erholdes for evaluering av hemostatiske parametere: Én like før administreringen av W-1; en andre 3 0 minutter etter fjerningen av de vaskulære klemmer og en tredje ved avslutningen av eksperimentet. Antitrombotisk virkningsfullhet uttrykkes som en reduksjon i den endelige blodproppvekt i preparatene behandlet med en forbindelse ifølge oppfinnelsen i forhold til vehikkelbehandlede kontrolldyr.
Eksperimentell trombosemodell i rottearterier in vivo:
Den antitrombotiske virkningsfullhet av inhibitorer av faktor Xa på blodplaterik arteriell trombose kan evalueres under anvendelse av en velkarakterisert FeCl2~indusert trombosemodell med en karotid rottearterie ("Superior Activity of a Thromboxane Reseptor Antagonist as Compared with Aspirin in Rat Models of Arterial and Venous Thrombosis", W.A. Schumacher, CL. Heran, T.E. Steinbacher, S. Youssef og M.L. Ogletree. Journal of Cardiovascular Pharmacolo<qy>. 22, 526-533 (1993); "Rat Model of Arterial Thrombose Induced by Ferric Chloride", K.D. Kurtz, B.W. Main, og G.E. Sandusky. Trombosis Research. 60, 269-280
(1990); "The Effeet of Thrombin Inhibition in a Rat Arterial Thrombosis Model", R.J. Broersma, L.W. Kutcher og E.F. Heminger. Trombosis Research 64, 405-412 (1991). Denne modell er meget anvendt for å evaluere det antitrombotiske potensial for mange forskjellige midler inklusive heparin og direkte virkende trombininhibitorer.
Sprague Dawley-rotter med en vekt på 375-450 g anestiseres med natriumpentobarbital (50 mg/kg i.p.). Ved oppnåelsen av et akseptabelt anestesinivå barberes den ventrale overflate av halsen og prepareres for aseptisk kirurgi. Elektro-kardiogramelektroder tilkobles og bly(II) overvåkes gjennom hele eksperimentet. Den høyre femorale vene og arterie kanyleres med PE-50-rør for administrasjon av en forbindelse ifølge oppfinnelsen, henholdsvis for å ta blod-prøver og overvåke blodtrykket. En insisjon gjøres midt i den ventral overflate av halsen. Trachea blottlegges og intuberes med PE-240-rør for å forvisse seg om luftveis-patens. Den høyre karotide arterie isoleres, og to 4-0 silkesuturer anbringes rundt karet for å underlette instru-menteringen. En elektromagnetisk flytprobe (0,95-1 mm lumen) anbringes rundt karet for å måle blodstrømmen. Distalt fra proben anbringes en 4x4 mm strimmel av parafilm under karet for å isolere det fra det omgivende muskelbed. Etter at strømningsmålinger for basislinjen er utført, anbringes en 2x5 mm strimmel av filterpapir som på forhånd er mettet i 35% FeCl2, på toppen av karet nedstrøms fra proben i ti minutter og fjernes deretter. FeCl2 antas å diffundere inn i det underliggende segment av arterien og bevirke deendotelisering resulterende i akutt trombusdannelse. Etter påføringen av det FeCl2-våte filterpapir, overvåkes blodtrykket, den karotide arterieblodstrøm og hjerte-hastigheten i en observasjonsperiode på 60 minutter. Etter okklusjonen av karet (definert som oppnåelse av null blodstrøm), eller 60 minutter etter filterpapirapplika-sjonen hvis patensen opprettholdes, ligeres arterien proksimalt og distalt for området for skaden, og karet skjæres ut. Trombusen fjernes og veies umiddelbart og noteres som det primære sluttpunkt i studien.
Etter kirurgisk instrumentering tas en kontroilblodprøve (Bl) . Alle blodprøver oppsamles fra det arterielle kateter og blandes med natriumcitrat for å forhindre klumpdannelse. Etter hver blodprøve skylles kateteret med 0,5 ml 0,9% saltvann. En forbindelse ifølge oppfinnelsen administreres intravenøst (i.v.), begynnende 5 minutter før FeCl2-på-føringen. Tiden mellom FeCl2-applikasjonen og tiden da den karotide blodstrøm når null noteres som okklusjonstiden (TTO) . For kar som ikke okkluderer innen 60 minutter gis TTO en verdi på 60 minutter. Fem minutter etter appli-kasjonen av FeCl2 tas en andre blodprøve (B2). Etter 10 minutters FeCl2-eksponering fjernes filterpapiret fra karet, og dyret overvåkes under resten av eksperimentet. Ved oppnåelsen av null blodstrøm tas en tredje blodprøve (B3), og blodproppen fjernes og veies. De template blødningstidsmålinger utføres på forlabbenes tåputer samtidig med at blodprøvene tas. Koaguleringsprofiler bestående av den aktiverte partielle tromboplastintid (APTT) og protrombintid (PT) utføres på alle blodprøver. I noen tilfeller kan en forbindelse ifølge oppfinnelsen administreres oralt. Rottene fastholdes manuelt under anvendelse av standard teknikker, og forbindelsene administreres ved intragastrisk gavage under anvendelse av en 18 kalibers buet doseringsnål (volum på 5 ml/kg). Femten minutter etter den intragastriske dosering anestiseres dyret og instrumenteres som beskrevet tidligere. Eksperi-mentene utføres deretter ifølge protokollen beskrevet ovenfor.
Foreliggende oppfinnelse kan utføres i andre spesifikke former uten å avvike fra oppfinnelsens ånd eller essen-sielle egenskaper.

Claims (40)

1. Forbindelse, karakterisert ved formel I er et bicyklisk heteroaryl valgt blant isokinolyl, kinolyl, dihydrokinolyl, tetrahydroisokinolyl, benzimidazolyl, kinazolinyl, tienopyrimidinyl, furopyridyl, imidazopyridyl eller pyrrolopyridyl ; Z er Ci-C6-alkylenyl; Ri er hydrogen eller d-C6-alkyl; R2 er R3S (0)p-; R3 er eventuelt med Ci-C6-alkoksy subsitutert naftyl, eventuelt med halogen substituert benzotienyl, eventuelt med fenoksy substituert fenyl hvor fenoksygruppen eventuelt kan være substituert med halogen og/eller N02, eventuelt med pyridyl substituert tienyl eller tienopyridyl ; Xi og Xia er H; X2 og X2a tatt sammen danner okso; X3 er H; X4 er H; X5, <X>5a og X5b er uavhengig valgt fra H, R5R6N- eller R70-, og en av X5, <X>5aQg x5b kan være okso som substiterer den distale ring av i en posisjon alfa til et nitrogenatom derav; R5 og R6 er H; R7 er H eller Ci-C6-alkyl; m er 1; p er 2; et farmasøytisk akseptabelt salt derav, et N-oksid derav, et hydrat derav eller et solvat derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved atZer metylenyl.
3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at er isokinolyl.
4. Forbindelse ifølge krav 3, karakterisert ved at isokinolylgruppen er bundet til Z i 7-stillingen derav.
5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at er kinolyl.
6. Forbindelse ifølge krav 5, karakterisert ved at kinolylgruppen er bundet til Z i 7-stillingen derav.
7. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at er kinazolinyl.
8. Forbindelse ifølge krav 7, karakterisert ved at kinazolinylen er bundet til Z i 7-stillingen derav.
9. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at er en gruppe valgt blant tienopyrimidinyl, furopyridyl, imidazopyridyl eller pyrrolopyridyl.
10. Forbindelse ifølge krav 9, karakterisert ved at gruppen er bundet til Z gjennom 5-ringen.
11. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at en av X5, X5aQg X5b er H, hydroksy eller amino som er substituert på den proksimale ring av i en posisjon som er tilstøtende til posisjonen av den proksimale ring som Z er bundet til.
12. Forbindelse ifølge krav 11, karakterisert ved at en av X5, <X>5aQg <X>5b er hydroksy eller amino.
13. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at en av X5, X5aQg X5b som substituerer den distale ring av i posisjonen alfa til et nitrogen derav, er H eller amino.
14. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R, S)-yl]-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidhydro-klorid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R)-yl]-amidtrifluoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-hydroksyiso-kinolin- 7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amid; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (R,S) -yl] -metylamidtrifluoracetat ; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metyl-amidtrifluoracetat; benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre- [1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amidtrifluoracetat ; 6- klor-benzo [b] tiof en-2-sul f onsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3 - (S) -yl] -amid-trif luoracetat ; 7- metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (l-amino-6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid-hydroklorid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(6-metoksyisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 4-(2-klor-6-nitofenoksy)benzen-sulfonsyre-[1-(1-amino-6- metoksyisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) - yl]-amidtrifluoracetat; 7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diaminoiso-kinolin-7-yl-metyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid-trif luoracetat ; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1,6-diamino-isokinolin-7-yl-metyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] - amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)yl]-amidtrifluoracetat; 6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin- 7- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metyl-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (2-hydroksykinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metyl-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-hydroksykinolin-5- ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (2-hydroksykinolin-6- ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid; 7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(lH-benzimidazol-5-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[ 2-(lH-benzimidazol-5-yletyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminokinazolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-metylamidtrifluoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[ 2,3-d]pyrimidin-6-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [2- (6-aminotieno[2,3-d] pyrimidin-6-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-aminotieno[2,3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(7-hydroksytieno-[2,3-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3,2-c] pyridin-3-yl-metyl) -2-oksopyrrolidin-3 - (R,S) -yl] - amidtrifluoracetat; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(4-hydroksytieno-[3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amidtrifluoracetat; benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3,2-c]pyridin-3-yl-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R,S)-yl]-amidtrifluoracetat; 5-pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonsyre- [1- (1-aminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amidtrifluoracetat ; 5- pyridin-3-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3- (S) -yl] -amid-trif luoracetat ; benzotiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-aminokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat ; 6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-amino-isokinolin-6-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1,2,3,4-tetrahydro-isokinolin-7-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(4-klor-lH-pyrrolo [3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3 - (S)-yl]-amid; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1H-pyrrolo [3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid; 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo-[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid-trif luoracetat ; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-(1-furo[3,2-b]-pyridin-2-ylmetyl-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-amid; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-(1-furo[3,2-b]-pyridin-2-ylmetyl-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl)-amid; 6-klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl] - amidtrifluoracetat; 6- klor-benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat; tieno[3,2-b]pyridin-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidditrifluoracetat ; benzo[b]tiofen-2-sulfonsyre-(2-okso-l-tieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl-pyrrolidin-3 -(S)-yl)-amidtrifluoracetat ; 7- metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(lH-imidazo[4,5-c] - pyridin-2-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]amid-trif luoracetat ; eller 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre[1-(2-amino-3H-benzoimidazol-5-metyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
15. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved ved at den er 7-metoksynaf talen- 2 -sul f onsyre- [1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
16. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaf talen- 2 -sul f onsyre- [1-(l-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(R)-yl]-amidtrifluoracetat.
17. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at dem er 7-metoksynaftalen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] metylamidtrifluoracetat.
18. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er benzo[b]-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
19. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b]tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
20. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1-(1,6-diaminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S) -yl] -amidtrifluoracetat.
21. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b] tiof en-2-sulf onsyre [1- (1, 6-diaminoisokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
22. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1- (2-aminokinolin-7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
23. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b] tiof en-2-sulf onsyre- [1- (2-aminokinolin7-ylmetyl) -2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
24. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er benzo [b] - tiofen-2-sulfonsyre-[1-(2-aminokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
25. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [1-(4-aminotieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-okso-3-yl]-amidtrifluoracetat.
26. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er benzo[b]-tiof en-2-sulfonsyre-[1-(4-aminotieno[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-2-okso-3-yl]-amidtrifluoracetat.
27. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved 5-pyridin-4-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3- (S)-yl]-amidtrifluoracetat.
28. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved 5-pyridin-3-yl-tiofen-2-sulfonsyre-[1-(1-aminoisokinolin-7-ylmetyl)-2-oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
29. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er benzotiofen-2-sul f onsyre- [1- (4-aminokinolin-6-ylmetyl) -2 -oksopyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
30. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b] tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amid.
31. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 7-metoksynaf talen-2-sulf onsyre- [2-okso-l-(lH-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
32. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b] tiof en-2-sulf onsyre- [2-okso-l- (lH-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl]-amidtrifluoracetat.
33. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er 6-klor-benzo-[b]tiofen-2-sulfonsyre-[2-okso-l-(lH-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl] -amidtrifluoracetat.
34. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er tieno[3,2-b]-pyridin-2-sul f onsyre- [2-okso-l- (lH-pyrrolo [2,3-c]pyridin-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-(S)-yl] -amidditrifluoracetat.
35. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved formel hvori er valgt fra tienopyrimidinyl, furopyridyl, imidazopyridyl eller pyrrolopyridyl bundet til Z via 5-ringen, eller en gruppe med formel og R2 er valgt fra gruppen med formlene bestående av
36. Farmasøytisk sammensetning, karakterisert ved at den omfatter en farmasøytisk akseptabel mengde av forbindelsen ifølge krav 1 og en farmasøytisk akseptabel bærer.
37. Anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av forbindelsen ifølge krav 1 for fremstilling av et medikament for behandling av en fysiologisk forstyrrelse som kan moduleres ved å hemme en aktivitet av Faktor Xa.
38. Anvendelse ifølge krav 37, hvor den fysiologiske forstyrrelse er venøs vaskulatur, arteriell vaskulatur, abnorm trombusdannelse, akutt myokardialt infarkt, ustabil angina, tromboembolisme, akutt karlukning forbundet med trombolytisk terapi, perkutan transluminal koronar angioplasti, transiente iskemiske anfall, slag, intermittent klaudikasjon eller "bypass"-implantering av de koronare eller perifere arterier, luminal kar-innsnevring, restenose etter koronar eller venøs angioplasti, opprettholdelse av vaskulær tilgangspatens i langtidshemodialysepasienter, patologisk trombusdannelse som opptrer i venene i de lavere ekstremiteter etter abdomen-, kne- og hoftekirurgi, risiko for pulmonar tromboembolisme eller disseminert systemisk intravaskulær koagulopati som opptrer i vaskulære systemer under septisk skjokk, visse virale infeksjoner eller kreft.
39. Anvendelse ifølge krav 37, hvor den fysiologiske forstyrrelse er abnorm trombusdannelse, akutt myokardialt infarkt, ustabil angina, tromboembolism, akutt karlukning forbundet med trombolytisk terapi, transiente iskemiske anfall, intermittent klaudikasjon eller "bypass"-implan-tering i de koronare eller perifere arterier, restenose etter koronar eller venøs angioplasti, patologisk trombusdannelse som opptrer i årene i de lavere ekstremiteter etter abdomen-, kne- og hoftekirurgi eller risiko for pulmonar t romboemboli sme.
40. Anvendelse ifølge krav 37, hvor den fysiologiske forstyrrelse er slag, luminal karinnsnevring, opprettholdelse av vaskulær tilgangspatens i langtidshemodialysepasienter eller disseminert systemisk intravaskulær koagulopati som opptrer i vaskulære systemer under septisk skjokk, visse virale infeksjoner eller kreft.
NO19992853A 1996-12-13 1999-06-11 Sulfonsyre- eller sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)- azaheterocyklylamidforbindelser NO312416B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3315996P 1996-12-13 1996-12-13
PCT/US1997/022406 WO1998025611A1 (en) 1996-12-13 1997-12-03 Sulfonic acid or sulfonylamino n-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO992853D0 NO992853D0 (no) 1999-06-11
NO992853L NO992853L (no) 1999-08-10
NO312416B1 true NO312416B1 (no) 2002-05-06

Family

ID=21868858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19992853A NO312416B1 (no) 1996-12-13 1999-06-11 Sulfonsyre- eller sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)- azaheterocyklylamidforbindelser

Country Status (23)

Country Link
EP (1) EP0944386B1 (no)
JP (1) JP4223560B2 (no)
KR (1) KR20000057528A (no)
CN (1) CN1244798A (no)
AP (1) AP1032A (no)
AT (1) ATE224192T1 (no)
AU (1) AU726637B2 (no)
BG (1) BG103558A (no)
BR (1) BR9713921A (no)
CA (1) CA2274686C (no)
DE (1) DE69715658T2 (no)
DK (1) DK0944386T3 (no)
EA (1) EA002817B1 (no)
ES (1) ES2184145T3 (no)
HU (1) HUP9904188A3 (no)
IL (1) IL130152A0 (no)
NO (1) NO312416B1 (no)
OA (1) OA11062A (no)
PL (1) PL333921A1 (no)
PT (1) PT944386E (no)
SK (1) SK71299A3 (no)
WO (1) WO1998025611A1 (no)
ZA (1) ZA9711207B (no)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6602864B1 (en) * 1996-12-13 2003-08-05 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Sulfonic acid or sulfonylamino N-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
US6281227B1 (en) * 1996-12-13 2001-08-28 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Sulfonic acid sulfonylamino n-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
IL123986A (en) * 1997-04-24 2011-10-31 Organon Nv Medicinal compounds
AR016817A1 (es) * 1997-08-14 2001-08-01 Smithkline Beecham Plc Derivados de fenilurea o feniltiourea, procedimiento para su preparacion, coleccion de compuestos, compuestos intermediarios, composicion farmaceutica,metodo de tratamiento y uso de dichos compuestos para la manufactura de un medicamento
AU8875398A (en) 1997-08-29 1999-03-22 Proteus Molecular Design Ltd 1-amino-7-isoquinoline derivatives as serine protease inhibitors
BR9815377A (pt) 1997-09-30 2001-01-16 Daiichi Pharmaceutical Co Ltda Derivados de sulfonil
CN1302292A (zh) 1998-03-19 2001-07-04 味之素株式会社 氨基异喹啉衍生物
AU5196399A (en) * 1998-08-11 2000-03-06 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel sulfonyl derivatives
EP1283199A4 (en) * 2000-05-16 2003-12-17 Takeda Chemical Industries Ltd MELANIN CONCENTRATION HORMONE ANTAGONIST
GB0114005D0 (en) 2001-06-08 2001-08-01 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0114004D0 (en) 2001-06-08 2001-08-01 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0127568D0 (en) 2001-11-16 2002-01-09 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
AU2003232173A1 (en) * 2002-06-12 2003-12-31 Qsi Pharma A/S Compounds and methods for controlling bacterial virulence
PT1569912E (pt) 2002-12-03 2015-09-15 Pharmacyclics Llc Derivados 2-(2-hidroxibifenil-3-il)-1h-benzoimidazole-5- carboxamidina como inibidores do fator viia
WO2006020561A2 (en) * 2004-08-09 2006-02-23 Glaxo Group Limited Antibacterial agents
FR2890072A1 (fr) 2005-09-01 2007-03-02 Fournier S A Sa Lab Nouveaux composesde pyrrolopyridine
JP5147401B2 (ja) * 2005-09-06 2013-02-20 塩野義製薬株式会社 Ｐｇｄ２受容体アンタゴニスト活性を有するインドールカルボン酸誘導体
FR2955110A1 (fr) 2010-01-08 2011-07-15 Fournier Lab Sa Nouveaux derives de type pyrrolopyridine benzoique
EP2606893A1 (en) * 2011-12-21 2013-06-26 Sanofi Sulphonylaminopyrrolidinone derivatives, their preparation and their therapeutic application
CN104098497B (zh) * 2014-06-17 2016-04-13 王庚禹 一种新的酰胺类化合物

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4121947A1 (de) * 1991-07-03 1993-01-07 Basf Ag 2-(3-(4-amidino-phenyl))-propionsaeurederivate, ihre herstellung und verwendung
WO1995035311A1 (en) * 1994-06-17 1995-12-28 Corvas International, Inc. 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors
US5612353A (en) * 1995-06-07 1997-03-18 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Substituted (sulfinic acid, sulfonic acid, sulfonylamino or sulfinylamino) N-[(aminoiminomethyl)phenylalkyl]-azaheterocyclylamide compounds

Also Published As

Publication number Publication date
AP9901552A0 (en) 1999-06-30
EA199900542A1 (ru) 2000-02-28
CA2274686A1 (en) 1998-06-18
PT944386E (pt) 2003-01-31
BR9713921A (pt) 2000-03-21
JP2001506630A (ja) 2001-05-22
JP4223560B2 (ja) 2009-02-12
DK0944386T3 (da) 2003-01-27
EP0944386A4 (en) 2001-04-11
HUP9904188A3 (en) 2003-02-28
CN1244798A (zh) 2000-02-16
ZA9711207B (en) 1998-07-20
AU726637B2 (en) 2000-11-16
HUP9904188A1 (hu) 2000-06-28
WO1998025611A1 (en) 1998-06-18
AP1032A (en) 2001-12-24
CA2274686C (en) 2009-02-03
EP0944386A1 (en) 1999-09-29
PL333921A1 (en) 2000-01-31
AU5518298A (en) 1998-07-03
DE69715658T2 (de) 2003-05-22
ES2184145T3 (es) 2003-04-01
EA002817B1 (ru) 2002-10-31
DE69715658D1 (de) 2002-10-24
IL130152A0 (en) 2000-06-01
SK71299A3 (en) 2000-12-11
EP0944386B1 (en) 2002-09-18
NO992853D0 (no) 1999-06-11
BG103558A (en) 2000-04-28
OA11062A (en) 2002-03-11
NO992853L (no) 1999-08-10
KR20000057528A (ko) 2000-09-25
ATE224192T1 (de) 2002-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO312416B1 (no) Sulfonsyre- eller sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)- azaheterocyklylamidforbindelser
US6281227B1 (en) Sulfonic acid sulfonylamino n-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
EP1051176B1 (en) SUBSTITUTED OXOAZAHETEROCYCLYL FACTOR Xa INHIBITORS
US6602864B1 (en) Sulfonic acid or sulfonylamino N-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
JP4107687B2 (ja) 置換ｎ―［（アミノイミノメチル又はアミノメチル）フェニル］プロピルアミド
EA001739B1 (ru) Замещенные n-[(аминоиминометил)фенилалкил]азагетероцикламиды сульфоновых кислот
MX2007016253A (es) Nuevas glicinamidas sustituidas, su preparacion y su uso como medicamentos.
CA2343109A1 (en) Thrombin inhibitors
CZ210895A3 (en) Fibrinogen receptors antagonizing matters and pharmaceutical compositions containing thereof
HRP20010903A2 (en) Pyrazinone thrombin inhibitors
AU2044401A (en) Pyrazinone thrombin inhibitors
Xing et al. Design, synthesis and biological evaluation of anthranilamide derivatives as potential factor Xa (fXa) inhibitors
CA3203896A1 (en) Plasmin inhibitor, and preparation method therefor and application thereof
MXPA99005483A (en) Sulfonic acid or sulfonylamino n-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
CZ211599A3 (cs) Sulfonové nebo sulfonylaminové N- (heteroaralkyl)-azaheterocyklylamidové sloučeniny
CZ20004497A3 (en) Sulfonyl- or sulfonylamino-N-(heteroaralkyl)azaheterocyclylamide derivatives and pharmaceutical preparation containing thereof
MXPA00011884A (en) Sulfonic acid or sulfonylamino n-(heteroaralkyl)-azaheterocyclylamide compounds
CZ20002728A3 (cs) Substituované oxoazaheterocyklylové inhibitory faktoru Xa, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
MXPA00007250A (en) SUBSTITUTED OXOAZAHETEROCYCLYL FACTOR Xa INHIBITORS