NO178186B - Forbindelser som kan koble metallioner til biologisk nyttige molekyler - Google Patents
Forbindelser som kan koble metallioner til biologisk nyttige molekyler Download PDFInfo
- Publication number
- NO178186B NO178186B NO900838A NO900838A NO178186B NO 178186 B NO178186 B NO 178186B NO 900838 A NO900838 A NO 900838A NO 900838 A NO900838 A NO 900838A NO 178186 B NO178186 B NO 178186B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- reaction mixture
- solution
- compounds
- acid
- equivalent
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 22
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 title abstract description 5
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- -1 alkyl hydrazone Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 claims description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 claims 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N ethionamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 12
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 abstract description 10
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 abstract description 9
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 abstract description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 42
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 37
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 27
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 26
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 12
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 11
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N Propionic aldehyde Chemical compound CCC=O NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 7
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 5
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 5
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 5
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 4
- HBBSDZXXUIHKJE-UHFFFAOYSA-N 6-hydrazinylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound NNC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 HBBSDZXXUIHKJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DTPRWLPNMBIPBQ-UHFFFAOYSA-N 2-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)-6-hydrazinylpyridine-3-carboxylic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.NNC1=CC=C(C(O)=O)C(N2C(CCC2=O)=O)=N1 DTPRWLPNMBIPBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PCNFLKVWBDNNOW-UHFFFAOYSA-N 4-hydrazinylbenzoic acid Chemical compound NNC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 PCNFLKVWBDNNOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N butyric aldehyde Natural products CCCC=O ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000007769 metal material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 229910052702 rhenium Inorganic materials 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- QQWYQAQQADNEIC-RVDMUPIBSA-N tert-butyl [(z)-[cyano(phenyl)methylidene]amino] carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)O\N=C(/C#N)C1=CC=CC=C1 QQWYQAQQADNEIC-RVDMUPIBSA-N 0.000 description 3
- DKACXUFSLUYRFU-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-aminocarbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NN DKACXUFSLUYRFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- FXIHWFULEZIREG-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-2-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(O)(Br)C(O)=O FXIHWFULEZIREG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAZVFQBTJPBRTJ-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-5-nitropyridine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)N=C1 BAZVFQBTJPBRTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- REIDAMBAPLIATC-UHFFFAOYSA-M 4-methoxycarbonylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 REIDAMBAPLIATC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LKYGFDGSOYBOLS-UHFFFAOYSA-N 4-methoxycarbonylbenzoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 LKYGFDGSOYBOLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAWMVMPAYRWUFX-UHFFFAOYSA-N 6-Chloronicotinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(Cl)N=C1 UAWMVMPAYRWUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZKYHGLOCOKEDX-UHFFFAOYSA-N C1CC(=O)N(C1=O)C2=C(C=CC(=C2)NN)C(=O)O.Cl Chemical compound C1CC(=O)N(C1=O)C2=C(C=CC(=C2)NN)C(=O)O.Cl CZKYHGLOCOKEDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHRNIBNFXIWJSW-UHFFFAOYSA-N C1CC(=O)N(C1=O)C2=C(C=CC(=C2)NNC(=S)N)C(=O)O Chemical compound C1CC(=O)N(C1=O)C2=C(C=CC(=C2)NNC(=S)N)C(=O)O SHRNIBNFXIWJSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- SREKQYKLPZJBJG-UTCJRWHESA-N [(z)-propylideneamino]thiourea Chemical compound CC\C=N/NC(N)=S SREKQYKLPZJBJG-UTCJRWHESA-N 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 229940011182 cobalt acetate Drugs 0.000 description 2
- QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L cobalt(II) acetate Chemical compound [Co+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- BRWIZMBXBAOCCF-UHFFFAOYSA-N hydrazinecarbothioamide Chemical compound NNC(N)=S BRWIZMBXBAOCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000717 hydrazino group Chemical group [H]N([*])N([H])[H] 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 2
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 238000011555 rabbit model Methods 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N rhenium atom Chemical compound [Re] WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NZLNRXJWZWZVSG-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 1,2,2,2-tetrachloroethyl carbonate Chemical compound ClC(Cl)(Cl)C(Cl)OC(=O)ON1C(=O)CCC1=O NZLNRXJWZWZVSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XIQDPIGFIOLMLD-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazole-4-carbonyl bromide Chemical compound S1C=NC(=C1)C(=O)Br XIQDPIGFIOLMLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMVYYTRDXNKRBQ-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CSC=N1 HMVYYTRDXNKRBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQFXEUXYHUZZMZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydrazinyl-4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]benzoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C(NN)=C1 BQFXEUXYHUZZMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYBZVRJWOKJEIU-UHFFFAOYSA-N 2-o-tert-butyl 5-o-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-hydrazinylpyridine-2,5-dicarboxylate Chemical compound NNC1=NC(C(=O)OC(C)(C)C)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O CYBZVRJWOKJEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJJRWOOSQFSTJD-UHFFFAOYSA-N 4-(2-carbamothioylhydrazinyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]benzoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C1=CC(NNC(N)=S)=CC=C1C(O)=O PJJRWOOSQFSTJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 1
- RBEFRYQKJYMLCC-UHFFFAOYSA-N 4-isothiocyanatobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(N=C=S)C=C1 RBEFRYQKJYMLCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCIFXNYCUSUETL-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-2-phenylbenzaldehyde Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(C=O)C(C=2C=CC=CC=2)=C1 DCIFXNYCUSUETL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BXRFQSNOROATLV-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzaldehyde Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(C=O)C=C1 BXRFQSNOROATLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBNGJNCAXKNLLQ-UHFFFAOYSA-N 6-[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]hydrazinyl]pyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NNC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 DBNGJNCAXKNLLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101710204837 Envelope small membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 101710145006 Lysis protein Proteins 0.000 description 1
- 101100208721 Mus musculus Usp5 gene Proteins 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FATUQANACHZLRT-KMRXSBRUSA-L calcium glucoheptonate Chemical compound [Ca+2].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)C([O-])=O FATUQANACHZLRT-KMRXSBRUSA-L 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940042396 direct acting antivirals thiosemicarbazones Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N phenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1 HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940067157 phenylhydrazine Drugs 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- NMUGSRKCNFEQJU-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[(5-aminopyridin-2-yl)amino]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NNC1=CC=C(N)C=N1 NMUGSRKCNFEQJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOJDJJYIHUKZIK-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[(5-nitropyridin-2-yl)amino]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NNC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=N1 LOJDJJYIHUKZIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJNXYVKGTMHIDS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[[5-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)pyridin-2-yl]amino]carbamate Chemical compound C1=NC(NNC(=O)OC(C)(C)C)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O GJNXYVKGTMHIDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003584 thiosemicarbazones Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
- C07D207/404—2,5-Pyrrolidine-diones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. succinimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/534—Production of labelled immunochemicals with radioactive label
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Paints Or Removers (AREA)
- Manufacture Of Metal Powder And Suspensions Thereof (AREA)
Description
Oppfinnelsen angår bifunksjonelle forbindelser som kan koble metallioner, særlig technetium og rhenium, til biologisk nyttige molekyler.
På grunn av deres høye biologiske spesifisitet er visse makromolekyler (f.eks. monoklonale antistoffer) blitt benyttet til å dirigere (target)- radioisotoper til spesifikke in vivo-seter, for det formål å danne bilder og/eller utøve terapi. Bruken av den metastabile isotop av technetium, ^^<m>Tc, i diagnostisk nukleær medisin er vel etablert og de beta-ustrålende isotoper av rhenium 18^Re, 188Re og 18^Re kan anvendes terapeutisk. En rekke fremgangsmåter for festing av technetium til makromolekyler er blitt beskrevet. Noen av disse fremgangsmåter omfatter reduksjonen av disulfidgrupper i makromolekylet (vanligvis et immunoglobolin) til tioler og den etterfølgende bruk av disse grupper til å binde redusert Tc
(f.eks. McKenzie et al., International Publication #W0 87/04164 og Br.emer et al. , EPO 271 80 6 A2) . Fremgangsmåter av denne type har en rekke potensielle ulemper. Reduksjonen av disulfid-enheter kan føre til proteindenaturering, og et etterfølgende tap av biologisk spesifisitet. Heller ikke kan fremgangsmåten benyttes til å merke makromolekyler som mangler disulfid-forbindelser.
Alternativt kan <99m>Tc kobles til makromolekyler via bifunksjonelle chelater såsom DTPA (D. Lanteigne og D.J. Hnatowich, Int. J. Appl. Radiat. Isot., Vol. 35(7), side 617 (1984), chelaterende tiosemikarbazoner (Y. Arano et al., Int. J. Nucl. Med. Biol., Vol. 12, side 425 (1985), og diamidditiol-ligander (A. Fritzberg, Europeisk patentsøknad nr. EP 188256 2A) . Problemer forbundet med disse fremgangsmåter innbefatter betydelig ikke-spesifikk binding av technetium (binding til proteinet ved seter andre enn den chelaterende gruppe) og langsom kinetikk ved Tc-merking.
Det er følgelig en hensikt med oppfinnelsen å skaffe nye bifunksjonelle molekyler som har hydrazin- eller hydrazid-grupper, og proteinreaktive grupper som kan anvendes til å
koble metallioner såsom <99m>Tc til makromolekyler.
I henhold til oppfinnelsen er der skaffet nye bifunksjonelle hydrazin- og hydrazidsalter samt konjugater derav.
I store trekk har de hydrazin- eller hydrazidforbindelser som her er beskrevet som bifunksjonelle aromatiske hydraziner eller hydrazider, en proteinreaktiv substituent og et negativt kontraion. En modifikasjon av denne oppfinnelse er også skaffet i hvilken hydrazin- eller hydrazidfunksjonen er beskyttet som et laverealkyi-hydrazon.
De nye hydrazin- og hydrazidforbindelser ifølge oppfinnelsen er representert ved en av de følgende formler (I) eller (II):
hvor:
En av A eller B er et karbonatom, og det andre er et nitrogenatom, eller begge er et karbonatom
D er en direktebinding,
C=0 eller
E er C=0 eller danner sammen med F en maleimidylgruppe,
F er succinimidyloksy når E er C=0,
R er hydrogen eller laverealkyl-gruppe,
R' og R" kan være like eller forskjellige og er valgt fra
hydrogen og laverealkyl, og
X er et negativt kontraion.
Når E er karbonyl C=0, er F en gruppe som i kombinasjon med den tilknyttede karbonylgruppe danner en aktiv ester eller aktivt amid. Eksempler på egnede materialer for F innbefatter en gruppe som N-oksysuccinimidyl.
Egnede grupper for R, R' og R" omfatter de følgende: H, CH3,. C2H5.
Eksempler på nyttige X-ioner er halogenider.
De ovenfor beskrevne forbindelser er stabile, isolerbare derivater av molekyler som inneholder to kryssreaktive forbindelser: en hydrazin/hydrazid-gruppe og en proteinreaktiv gruppe såsom en aktiv ester, et aktivt amid eller maleimido-gruppe.
I syntesen av disse stabile derivater blir en syrelabil beskyttelsesgruppe såsom t-butoksykarbonyl (t-BOC) fjernet fra hydrazin/hydrazidet under vannfrie sure betingelser, hvilket etterlater den proteinreative gruppe uendret og hydrazin/hydrazid-gruppen i en ureaktiv protonert form. Alternativt kan hydrazin/hydrazid-gruppen være beskyttet som et laverealkyl-hydrazon.
Når en bifunksjonell forbindelse som har en protonert (eller hydrazonbeskyttet) hydrazin/hydrazid-funksjon deretter kombineres med et makromolekyl såsom et protein, polypeptid eller glykoprotein i nøytrale eller litt basiske medier, fortrinnsvis ved en pH-verdi på 7-8,5, vil den proteinreaktive del av forbindelsen reagere med nukleofile grupper på proteinet, polypeptidet eller glykoproteinet (f.eks. amingrupper såsom lysinrester) for å gi et konjugat inneholdende frie hydrazin/hydrazid-grupper. I det tilfelle som gjelder hydrazon-konjugater blir det frie hydrazin/hydrazid dannet ved dialyse, inn i en sur (pH 5,6) buffer. Fordi denne type konjugat omfatter et hydrazin eller hydrazid, en sterk metallbindende gruppe, vil den lett reagere når den blandes med et egnet metallmateriale i surt medium for å gi et merket protein, polypeptid eller glykoprotein.
Metallmaterialet kan være f.eks. et redusert Tc-materiale dannet ved omsetting av Tc04~ med et reaksjonsmiddel, f.eks. tinn(II)ion, i nærvær av en chelaterende oksygenligand (f.eks. glukoheptonat). Eksempler på egnede reduserte Tc-materialer omfatter Tc-glukoheptonat, Tc-glukonat, Tc-2-hydroksyiso-butyrat, Tc-laktat og Tc-4,5-dihydroksy-l,3-benzendisulfonat. Andre metaller og ligander ligger også innenfor oppfinnelsens omfang.
En Tc-merkeprosess kan passende utfores i en vandig buffer, fortrinnsvis ved en pH-verdi på 4,5-6,5, i en time eller mindre. Reaksjon med andre egnede metallmaterialer finner sted på lignende måte under lignende betingelser.
Radiokjemisk utbytte som bestemt ved væskekromatografi med høy ytelse (HPLC) og tynnsjiktkromatografi (TLC) ved anvendelse av Tc er 9 0%. Behandling av protein med ikke-koblende analoger (dvs. forbindelser uten en proteinreaktiv karbonylgruppe, såsom 4-hydrazinobenzoesyre eller 6-hydrazinopyridin-3-karboksylsyre) gir ikke protein som er istand til betydelig Tc-binding, og demonstrerer således den høye spesifisitet av denne teknikk.
Technetiumatomene anses å bli bundet til konjugatet via en hydrazid-binding eller diazenid-binding:
hvor: L er en underordnet (ancillary) dioksygenligand
Eksempler på denne type kobling er blitt beskrevet for Mo og Re (Comprehensive Coordination Chemistry, Vol. 2, G. Wilkinson, ed., Pergamon (Oxford) 1987, s. 130-151) og en rekke analoge komplekser av <99>Tc er blitt fremstilt ved omsettingen av et organohydrazinderivat og et Tc(V)okso-materiale.
Den ovenfor angitte merkemetode er blitt anvendt til å merke polyklonalt humant IgG og Fc-regionen av humant IgG. Te-kon jugatene er blitt anvendt til å danne bilder av fokale seter for infeksjon i en rottemodell. Merkingsmetoden er også blitt brukt-til å merke fragment E^ (se L.C. Knight et al, J. Clin. Invest., Vol. 72, 1983, s. 2007-2013) som ble anvendt til å danne bilder av tromber i en kaninmodell for dyp blodåre-trombose og det monoklonale antistoff 5E8.
Eksempler
Følgende eksempler belyser oppfinnelsen:
De NMR- og IR-data som er angitt i eksemplene ble oppnådd som følger: % NMR-spektra ble nedtegnet på et 80 MHz IBM AF-80-spektrometer. Alle ■'■H NMR-resultater ble nedtegnet under anvendelse av DMSO-dg, med mindre noe annet er angitt. IR-spektra ble nedtegnet på et Perkin-Elmer 59 8 infrarødt spektrometer. NMR-6g IR-spektra var i overensstemmelse med den struktur de var blitt tilegnet.
Navn på forbindelser i parenteser under tittelforbindelsene i de forskjellige eksempler, svarer til nomenklaturen i Chemical Abstracts service index. Reaksjonsskjemaer er vist ved de ledsagende skjemaer 1-8.
Eksempel 1:
Fremstillin<g> av succinimidvl- 4- hydrazinobenzoat-
hvdroklorid
f2, 5- pyrrolidindion, l- f( 4-hydrazinobenzovl) oksvl - monohvdrokloridl
4-Hydrazinobenzoesyre, 2-(t-butoksykarbonyloksyimino)-2-fenylacetonitril (BOC-ON), dicykloheksylkarbodiimid og N-hydroksysuccinimid ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Syntese av 4- BOC- hvdrazinobenzoesvre
Til en omrørt oppløsning av 4-hydrazinobenzoesyre (1 ekvivalent) og trietylamin (3 ekvivalenter) i dimetylformamid (5 mg/l), ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av BOC-ON (1 ekvivalent) i dimetylformamid. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur i 3 timer. Ti prosent vandig saltsyre ble tilsatt og deretter ble oppløsningen uklar. Oppløsningen ble ekstrahert med etylacetat og de kombinerte organiske ekstrater ble vasket med vann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk, for å gi et brunt faststoff. Faststoffet ble rekrystallisert fra kloroform for å gi det ønskede■produkt som et blekbrunt faststoff, utbytte 69%,
analyse: beregnet for Ci2<H>16<N>2°4<:>
C - 57,13, H - 6,39, N - 11,10,
funnet C - 57,02, H - 6,13, N - 11,61.
<X>H NMR 6: 1,45 (s, 9H), 6,77 (d, Jab = 8,6Hz, 2H), 7,85
(d, Jab = 8,6Hz, 2H)
Syntese av succinimidvl- 4- BOC- hvdrazinobenzoat
rHvdrazinkarboksvlsvre. 2- f4- r r( 2. 5- diokso- l-pyrrolidinvl) oksvlkarbonvll- fenvll- 1. 1- dimetvletvlester 1
Til en oppløsning av 4-BOC-hydrazinobenzoesyre (1 ekvivalent) og N-hydroksysuccinimid (1 ekvivalent) i dioksan (10 ml pr. g syre), ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av dicycloheksylkarbodiimid (1 ekvivalent) i dioksan (5 ml/g).
Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur i 16 timer. Eddiksyre (0,5 ml) ble deretter tilsatt og omrøring ble fortsatt i 1 time. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å fjerne urea-biproduktet. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk for å gi et brunt faststoff som ble behandlet med eter, og faststoffene ble isolert ved filtrering for å gi et blekbrunt faststoff, utbytte 86%,
analyse: beregnet for C15<H>19<N>3O5:
C - 55,01, H - 5,48, N - 12,03,
funnet: C - 55,17, H - 5,84, N - 11,86.
<1>H NMR 5: 1,47 (s, 9H), 2,88 (s, 4H), 6,85 (d, Jab = 8,9Hz,
2H) 8,04 (d, <J>ab <=> 8,9Hz, 2H)
Syntese av succinimidvl- 4- hvdrazinobenzoat-hydroklorid
Til en oppløsning av hydrogenklorid i dioksan (50 ml pr. g ester, fremstilt ved bobling av hydrogenklorid inn i dioksan i ca. 5 minutter), ble der tilsatt succinimidyl-4-BOC-hydrazino-benzoat (1 ekvivalent). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur. Reaksjonsblandingen var aldri homogen, men fargen var opprinnelig blekbrun og ble etter to timer oransje. Reaksjonsblandingen ble filtrert og vasket med eter, for å gi et blekgult faststoff, utbytte 72%, smp. 20 3,5 - 205°C,
analyse: beregnet for C11H12CIN3O4:
C - 46,25, H - 4,23, Cl - 12,40, N - 14,71,
funnet: C - 46,74, H - 4,38, Cl - 12,24, N - 14,26. <X>H NMR 5: 2,87 (s, 4H) , 7,05 (d, 2H, J^ = 8,9Hz) 7,97
(d, 2H, Jab = 8,9Hz)
Eksempel 2^
Fremstilling av succinimidvl- 6- hvdrazinopvridin- 3-karboksylathvdroklorid
[ 2, 5- pyrrolidindion, 1- f[( 6- hvdrazino- 3-pyridinyl) karbonvlloksvl-, monohvdrokloridl
6-Klornikotinsyre, di-t-butyldikarbonat og 85% hydrazinhydrat ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Syntese av 6- hvdrazinopyridin- 3- karboksylsyre
6-Klornikotinsyre (8,0 g) ble satt til 85% hydrazinhydrat (35 ml). Reaksjonsblandingen ble plassert i et 100°C oljebad i 4 timer. Den homogene reaksjonsblanding ble konsentrert til tørrhet for gi et hvitt faststoff. Faststoffet ble oppløst i vann og ved syrning til pH 5,5 med konsentrert saltsyre, ble et bunnfall dannet. Bunnfallet ble isolert ved filtrering og faststoffet ble vasket med 95% etanol og eter for å gi 6,0 g av et blekbrunt faststoff, utbytte 77%, smp. 292 - 293°C,
analyse: beregnet for C5H7N3O2:
C - 47,06, H - 4,61, N - 27,44,
funnet: C - 46,83, H - 4,38, N - 27,27.
<1>H NMR 5: 6,69 (d, J = 8,8Hz, 1H), 7,84 (dd, J= 2,4, 8,8Hz,
1H) , 8, 51 (d, J = 2,4Hz, 1H)
Syntese av 6- BQC- hvdrazinopvridin- 3- karboksvlsvre
Til en oppløsning av 6-hydrazinopyridin-3-karboksylsyre (1,4 g; 9,8 mmol), ble trietylamin (1,2 ml; 11,8 mmol) i dimetylformamid (10 ml) satt til di-t-butyldikarbonat (2,13 g; 9,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble homogen etter 1 time og omrøring ble fortsatt i 16 timer ved værelsetemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert til tørrhet under redusert trykk for å gi et brunt faststoff. Residuet ble oppløst i en minimums-mengde etylacetat og filtrert gjennom silikagel 60 (230-400 mesh), ved .bruk av etylacetat som elueringsmiddel. Elueringsmiddelet ble konsentrert til tørrhet. Produktet ble anvendt uten ytterligere rensing.
<1>H NMR 6: 1,40 (s, 9H), 6,52 (d, J = 8,8Hz, 1H), 7,97
(dd, J = 2,4, 8,8Hz, 1H), 8,58 (d, J = 2,4Hz, 1H)
Syntese av succinimidvl- 6- BOC- hvdrazinopyridin- 3-karboksvlat
fHydrazinkarboksvlsvre, 2- f 5-\ f( 2, 5- diokso- l-pvrrolidinvl) oksvlkarbonvll - 2- pvridinyll-.
1, 1- dimetvletvlesterl
Til en oppløsning av 6-BOC-hydrazinopyridin-3-karboksylsyre (1,45 g; 5,75 mmol) og N-hydroksysuccinimid (0,66 g; 5,75 mmol) i dimetylformamid (15 ml) ble der satt en oppløsning av dicycloheksylkarbodiimid (1,18 g; 5,75 mmol) i dimetylformamid (5 ml). Reaksjonsblandingen ble uklar etter 1 time og omrøring ble fortsatt i 16 timer ved værelsetemperatur. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert til tørrhet, for å gi et brunt fast residuum. Residuet ble oppløst i en minimal mengde acetylacetat og filtrert gjennom silikagel 60 (230-400 mesh) ved bruk av etylacetat som elueringsmiddel. Elueringsmiddelet ble konsentrert til tørrhet for å gi et blekgult faststoff som ble rekrystallisert fra etylacetat/- heksaner, utbytte 60%, smp. 169,5 - 172°C,
analyse: beregnet for C^Hig^Og:
C - 51,43, H - 5,18, N - 15,99, funnet: . C - 51,81, H - 5,26, N - 15,60.
<1>H NMR 5: 1,41 (s, 9H), 2,87 (s, 4H)6,64 (d, J = 8,8Hz, 1H)
8,08 (dd, J = 2,4, 8,8Hz) 8,73 (d, J = 2,4Hz, 1H)
Syntese av succinimidvl- 6- hvdrazinopvridin- 3-karboksvlathvdroklorid
En oppløsning av hydrogenklorid i dioksan ble fremstilt ved bobling av vannfritt hydrogenklorid inn i dioksan (20 ml) ved moderat hastighet i 10 min. Succinimidyl-6-B0C-hydrazino-pyridin-3-karboksylat (100 mg) ble opplost i dioksan (2 ml) og HCl/dioksan (2 ml) ble tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur. Etter 5 minutter ble oppløsningen uklar og et bunnfall ble dannet. Omrøring ble fortsatt i 4 timer. Den uklare reaksjonsblanding ble filtrert for å gi 5 5 mg av et hvitt faststoff, utbytte 67%,
analyse: beregnet for C]_oHllclN4°4:
C - 41,87, H - 3,87, Cl - 12,37, N - 19,53, funnet: C - 41,92, H - 3,90, Cl - 12,30, N - 19,47.
<X>H NMR 5: 2,88 (s, 4H), 7,01 (d, J = 8,8Hz, 1H) 8,19(dd,
J = 2,4, 8,8Hz, 1H) 8,83 (d, J = 2,4H, 1H)
Eksempel 3
Fremstilling av succinimidvl- 4- hvdrazidotereftalathvdroklorid
TBenzoesvre. 4- f r f 2. 5- diokso- l- Pvrrolidinyl) oksvl karbonyl!-. hvdrazid. monohvdrokloridl
Monometyltereftalat, oksalylklorid, t-butylkarbazat, dicycklo-heksylkarbodiimid (DCC) og N-hydroksysuccinimid (NHS) ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Syntese av metvltereftalatklorid
Til en oppløsning av monometyltereftalat (1 ekvivalent), toluen (30 ml pr. g ester) og 3 dråper DMF ble der dråpevis tilsatt oksalylklorid (2,0 ekvivalenter). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 45°C i 16 timer. Oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk for å gi det ønskede produkt som et blekgult faststoff. Produktet ble brukt uten ytterligere rensing, utbytte 82,0%, smp. 50 - 52°C. IR (tynn film), 2970, 1775, 1720, 1430, 1400, 1280, 1105, 880 cm"<1>.
<1>H NMR 6: 3,97 (s, 3H), 8,14 (S, 4H).
Svntese av metvl- 4- BOC- hydrazidotereftalat [ 1. 4- benzen-dikarboksvlsvre, monometylester, 2— r fl. 1- dimetyletoksv) karbonyl! hydrazidl .
Til en kraftig omrørt blanding av t-butylkarbazat (1 ekvivalent) , ble metylenklorid (20 ml/g) og 25% natriumbikarbonat (2,0 ekvivalenter), ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av metyltereftalatklorid (1 ekvivalent) i metylenklorid (40 ml/g). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 1/2 time. Fasene ble separert og den vandige fase ble ekstrahert med metylenklorid. De kombinerte organiske faser ble vasket med 10% saltsyre og saltlake. Den organiske fase ble tørket (MgSC>4) , filtrert og konsentrert for å gi et hvitt faststoff, utbytte 91,7%, smp. 197 - 199°C. IR (KBr): 3010, 1720, 1670, 1430, 1270, 1220, 1130, 1100, 1030, 870, 750 cm<-1>.
% NMR (CDC13) 5: 1,49 (s, 9H), 3,93 (s,3H), 7,83 (d, JAB
= 8Hz, 2H) , 8,07 (d, JAB<=> 8Hz, 2H) .
Svntese av 4- BOC- hvdrazidotereftalsvre
Til en oppløsning av metyl-4-B0C-hydrazidotereftalat (1 ekvivalent) i metanol (50 ml/g), ble der tilsatt natrium-hydroksid (10,0 ekvivalenter). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å fjerne metanolen. Vann ble tilsatt og oppløsningen ble forsiktig syrnet til pH 1,0. Den sure oppløsning ble ekstrahert med etylacetat og det organiske ekstrakt ble tørket (MgSC^), filtrert og konsentrert ved tørrhet under redusert trykk for å gi et hvitt faststoff, utbytte 87,5%, smp. 208 - 210°C.
^■H NMR 5: 1,41 (s, 9H) , 7,97 (d, J = 2,4Hzr 4H) , 8,90 (m, 1H)
10,3 (m, 1H).
Svntese av succinimidvl- 4- BOC- hvdrazidotereftalat fHvdrazinkarboksvlsvre, 2- T4- f f( 2, 5- diokso- l- Pvrrolidinvl)-oksvlkarbonvllbenzoyll-, 1. 1- dimetvletvlesterl
Til en oppløsning av 4-BOC-hydrazidotereftalsyre (1 ekvivalent) og N-hydroksysuccinimid (1 ekvivalent) i DMF (10 ml/g), ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av DCC (1 ekvivalent) i DMF (5 ml/g). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 16 timer. Eddiksyre (0,5 ml) ble deretter tilsatt og omrøring ble fortsatt i 1 time. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å fjerne urea-biproduktet. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk for å gi en gulbrun olje. Hurtigvakuumkromatografi (heksaner/etylacetat (7/3)) ble brukt til å isolere produktet, utbytte 47,8%, smp. 182 - 185°C. IR (KBr): 3330, 3230, 2990, 1770, 1740, 1660, 1530, 1500, 1370, 1280, 1200, 1150, 1070, 1000, 870, 790, 640 cm<-1>.
<1>H NMR (CDC13) 6: 1,50 (s, 9H), 2,91 (s, 4H), 6,70 (m, 1H),
7,91 (d, JAB = 8,8Hz, 2H), 8,20 (d,JAB <= >8,8Hz, 2H).
Analyse: beregnet for C^H-Lg^C^ :
C - 54,11, H - 5,07, N - 11,13,
funnet: C - 53,66, H - 5,15, N - 11,09.
Svntese av succinimidyl- 4- hvdrazidotereftalathvdroklorid
Til en oppløsning av hydrogenklorid i tetrahydrofuran (50 ml/g, fremstilt ved bobling av hydrogenklorid inn i tetrahydrofuran i ca. 10 minutter), ble der tilsatt succinimidyl-4-BOC-hydrazidotereftalat (1 ekvivalent). Reaksjonsblandingen var homogen i 1 time, deretter ble der over en periode på 4 timer dannet et blekhvitt bunnfall. Reaksjonsblandingen ble filtrert og vasket med eter for å gi det ønskede produkt som et blekt hvitt faststoff, utbytte 37,7%, smp. 278 - 280°C. IR(KBr): 3400, 3200, 2800, 2600, 1770, 1730, 1690, 1530, 1490, 1290, 1240, 1070, 1000, 870, 730, 640, 610 cm-<1>.
<X>H NMR 5: 2,91 (s, 4H), 8,11 (d, JAB = 8,8Hz, 2H), 8,25 (d, <J>AB
= 8,8Hz, 2H).
Analyse: beregnet for C]_2H12C1N3°5 :
C - 45,95, H - 3,86, Cl - 11,30, N - 13,40, funnet: C - 45,84, H - 3,91, Cl - 11,37, N - 13,33.
Eksempel 4
Fremstilling av 5- maleimidvl- 2- hvdrazinopvridinhvdroklorid flH- pvrrol- 2, 5- dion, 1-( 6- hvdrazino- 3- Pvridinvl)-, monohvdrokloridl .
2-klor-5-nitropyridin, hydrazinhydrat, di-tert-butyldikarbonat, 10% palladium på trekull, maleinsyreanhydrid, koboltacetat og eddiksyreanhydrid ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Svntese av 2- hvdrazino- 5- nitropvridin
Til en omrørt oppløsning av hydrazinhydrat (30,0 ekvivalenter), vann (.4 ml pr. g pyridin) og etanol (2 ml pr. g pyridin) ble der tilsatt 2-klor-5-nitropyridin (1 ekvivalent). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 16 timer (en meget tykk grønn oppslemming ble dannet). Bunnfallet ble isolert ved filtrering og faststoffet ble vasket med metanol og deretter eter for å gi et grønt faststoff. Produktet ble anvendt' uten ytterligere rensing, utbytte 77,3%, smp. 205 - 207°C. IR (KBr): 3340, 3200, 2980, 1670, 1605, 1580, 1485, 1420, 1330, 1300, 1120, 980, 830, 770 cm-1.
<X>H NMR 5: 4,64 (br s, 2H), 6,76 (d, J = 8,8Hz, 1H), 8,15
(dd, J = 2,4, 8,8Hz, 1H), 8,86( d, J = 2,4Hz, 1H), 9 , 12, (m, 1H) .
Analyse: beregnet for C5H5N4O2:
C - 39,21, H - 3,93, N - 36,51,
funnet: C - 38,96, H - 3,92, N - 36,35.
Svntese av 2-( BOC- hydrazino)- 5- nitropvridin
Til en omrørt oppløsning av 2-hydrazino-5-nitropyridin (1 ekvivalent), DMF (15 ml pr. g pyridin) og trietylamin (1,1 ekvivalenter) ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av di-tert-butyldikarbonat (1,0 ekvivalent) i DMF (4 ml pr. g dikarbonat). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 48 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk til en gulbrun olje. Hurtigvakuumkromatografi (heksaner/- etylacetat (8/2) ) ble brukt til å isolere produktet. Produktet ble rekrystallisert fra etylacetat/heksaner, utbytte 63,4%, smp. 135 - 137°C. IR (KBr): 3280, 2980, 1710, 1600, 1500, 1330, 1290, 1270, 1250, 1150, 1120, 1010, 830, 760, 650, 500 cm"<1>.
<1>H NMR 5: 1,41 (s, 9H), 6,60 (d, JAB = 8,8Hz, 1H), 8,28 (dd,
J = 2,4, 8,8Hz, 1H), 8,9 3 (d, JAB = 2,4Hz, 1H),
9 , 14 (m, 1H) , 9 , 56 (m, 1H) .
Analyse: beregnet for C^gH^^C^ :
C - 47,24, H - 5,55, N - 22,03,
funnet: C - 46,99, H - 5,50, N - 21,93.
Svntese av 2-( BQC- hvdrazino)- 5- aminopvridin
Til en Parr-hydrogeneringskolbe ble der tilsatt 2-BOC-hydra-zino-5-nitropyridin (1 ekvivalent), 10% palladium på trekull (0,3 g Pd/g pyridin) og etanol (100 ml pr. g pyridin). Reaksjonen ble hydrogenert ved 345 kPa H2 i 2 timer ved værelsetemperatur på en Parr-hydrogenator. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom en filtercelleplugg og renset med etanol. Den gulgrønne oppløsning ble konsentrert under redusert trykk for å gi et blekgult faststoff. Produktet ble rekrystallisert fra etanol, utbytte 81,64%, smp. 140 - 142°C. IR (KBr): 3360, 3200, 2980, 1650, 1635, 1580, 1490, 1390, 1360, 1300, 1260, 1160, 1020, 880, 860, 830, 750, 590, 530 cm"<1>.
<1>H NMR 5: 1,37 (s, 9H), 6,34 (d, J = 8,8Hz, 1H), 6,89 (dd, J =
2,4, 8,8Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 7,49 (d, J = 2,4Hz, 1H), 8,50 (m, 1H).
Analyse: beregnet for C]_qh16<n>4°2<:>
C - 53,55, H - 7,19, N - 24,98,
funnet: C - 53,73, H - 7,21, N - 25,05.
Svntese av 2- BOC- hvdrazino- 5- maleimidvlpvridin THvdrazin-karboksvlsvre, 2- f 5-( 2, 5- dihvdro- 2, 5- diokso- lH- pvrrol- l- vl)- 2-pyridinvll-, 1, 1- dimetvletvlesterl .
Til en omrørt oppløsning av 2-BOC-hydrazino-5-aminopyridin (1 ekvivalent) i aceton (50 ml/g) ble der tilsatt maleinsyreanhydrid (1,1 ekvivalenter). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 2 timer. Til reaksjonsblandingen ble der satt eddiksyreanhydrid (1,2 ekvivalenter), koboltacetat (0,007 ekvivalenter) og trietylamin (0,3 ekvivalenter). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 60°C i 2 timer. Fargen på reaksjonen begynte som sterkt gul og sluttet som mørkegul. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å gi en gulbrun olje. Hurtigvakuumkromatografi (heksaner/etylacetat (8/2)) ble brukt til å isolere produktet. Produktet ble rekrystallisert i eter/heksan, utbytte 28,3%, smp. 182 - 184°C. IR (KBr): 3400, 3300, 3100, 2990, 1700, 1610, 1500, 1410, 1360, 1320, 1270., 1210,. 1150, 1050, 830, 750, 690 cm<-1>.
XH NMR 6: 1,39 (s, 9H) , 6,58 (d, J = 8,8Hz, 1H) , 7,14 (s, 2H) ,
7,45 (dd, J = 2,4, 8,8Hz, 1H), 7,94 (d, J = 2,4Hz, 1H) , 8, 37 (m, 1H) .
Analyse: beregnet for C14H15N4O4:
C - 55,26, H - 5,30, N - 18,41,
funnet: C - 55,14, H - 5,30, N - 18,33.
Svntese av 5- maleimidvl- 2- hvdrazinopyridinhvdroklorid
En oppløsning av hydrogenklorid i dioksan ble fremstilt ved bobling av vannfritt hydrogenklorid inn i dioksan (50 ml) ved moderat hastighet i 10 minutter. 2-(BOC-hydrazino)-5-male-imidylpyridin (200 mg) ble oppløst i dioksan (5 ml), og HCl/dioksan (10 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur. Etter 3 0 minutter ble opp-løsningen uklar og et bunnfall ble dannet. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i tilsammen 5 timer. Oppslemmingen ble filtrert og vasket med eter for å gi 50 mg av et hvitt faststoff, utbytte: 31,6%, smp. 280 - 290°C (nedbrutt, gult til brunt). IR (KBr): 3440, 3100, 2580, 1720, 1610, 1560, 1480, 1390, 1200,, 1150, 830, 690 cm<-1>.
XE NMR 5: 7,0 (d, J = 8,8Hz, 1H), 7,19 (s, 2H), 7,63 (dd, J =
2,4, 8,8Hz, 1H), 8,15 (d, J = 2,4Hz, 1H). Massespektrum: m/z = 204 (M-HC1)<+>.
Eksempel 5:
Fremstilling av succinimidyl- 2-( 2- propenvlhvdrazon) nikotinat fPropanol. r5- f f( 2. 5- diokso- l- Pvrrolidinvl) oksvlkarbonvll - 2-<p>yridinvDhvdrazonl.
6-Hydrazinonikotinsyre ble fremstilt som tidligere beskrevet, og propionaldehyd ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Svntese av succinimidvl- 2-( 2- propenvlhvdrazon) nikotinat.
Til en suspensjon av 6-hydrazinonikotinsyre (1 ekvivalent) i DMF (40 ml/g) ble der tilsatt propionaldehyd (3 ekvivalenter). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time. Dersom reaksjonsblandingen ikke ble homogen ble kolben varmet opp forsiktig med en varmepistol inntil reaksjonsblandingen ble homogen. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til omgivelsestemperatur og en oppløsning av N-hydroksysuccinimid
(1 ekvivalent) i DMF ble tilsatt. Deretter ble en oppløsning av DCC (1 ekvivalent) i DMF tilsatt dråpevis. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer ved omgivelsestemperatur. Bunnfallet som ble dannet ble fjernet ved sugefiltrering og moderluten ble
konsentrert til tørrhet. Det brune faste residuum ble suspendert i etylacetat og omrørt i 1 time og filtrert. Et blekbrunt faststoff ble utfelt fra etylacetatoppløsningen og ble isolert ved filtrering for å gi det ønskede produkt, utbytte 6 5%.
XH NMR 5: 1,06 (t, 3H), 2,34 (m, 2H), 2,86 (s, 4H), 7,11 (d, J
= 9,4Hz, 1H), 7,54 (t, 1H, J = 4,9Hz), 8,10 (dd, J = 9,44, 2,33Hz, 1H), 8,72 (d, J = 2,33Hz, 1H).
Analyse: beregnet for C13H14N4O4:
C - 53,79, H - 4,86, N - 19,30,
funnet: C - 53,66, H - 4,89, N - 19,12.
Eksempel 6:
Fremstilling av succinlmidyl- 2-( 2-( 1- propenvl) hvdrazon)-tiazol- 4- karboksylat [ Propanal. \ A -\ F( 2 . 5- diokso- l- pvrrolidinvl) oksvlkarbonvll- 2- tiazolvl1hvdrazonl
Tiosemikarbazid og brommelkesyre ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WT).
Svntese av propionaldehydtiosemikarbazon.
Til en oppløsning av tiosemikarbazid (1 ekvivalent) og propionaldehyd (1,5 ekvivalenter) i MeOH, ble der satt noen dråper iseddik. Blandingen ble varmet opp til tilbakeløps-temperatur i 4 5 minutter. Reaksjonsblandingen ble konsentrert på en roterende inndamper (rotovap) hvilket bevirket dannelsen av et bunnfall. Faststoffene ble isolert ved filtrering, vasket med eter og tørket i vakuum, utbytte 71%.
Svntese av 2-( 2-( 1- propenylhvdrazon)) tiazol- 4- karboksvl-svreh<y>drobromid.
Til en oppløsning av propionaldehydtiosemikarbazon (1 ekvivalent) i MeOH, ble der satt brommelkesyre (1 ekvivalent). Reaksjonsblandingen ble varmet opp ved et tilbakeløp i 1 time, deretter avkjølt til værelsetemperatur og oppløsningsmiddelet ble fjernet på den roterende inndamper. Det resulterende gule faststoff ble findelt med MeOH/eter og et blekgult faststoff ble isolert og vasket med eter og tørket i vakuum.
<X>H NMR 6: 1,00 (t, J = 7,9Hz, 3H), 2,15 (m , 2H), 7,44 (t, J =
4,9Hz).
Svntese av succinimidvl- 2-( 2-( 1- propenvl) hvdrazon)- tiazol- 4-karboksvlat.
Til en oppløsning av syre (1 ekvivalent), N-hydroksysuccinimid (1 ekvivalent) og trietylamin (1,5 ekvivalenter) i DMF ble der dråpevis tilsatt en oppløsning av DCC (1 ekvivalent) i DMF. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer ved værelsetemperatur. Bunnfallet som ble dannet ble fjernet ved filtrering og moderluten ble konsentrert til tørrhet. Etylacetat ble satt til residuet og omrørt i 1 time. De uoppløselige materialer ble fjernet ved filtrering og moderluten ble konsentrert til tørrhet. Produktet ble hurtigkromatografert ved bruk av heksaner/etylacetat (1/2) som elueringsmiddel, for å gi det ønskede produkt som et ikke helt hvitt faststoff, utbytte 35%.
<X>H NMR 5: 1,08 (t, J = 7,9Hz, 3H), 2,24 (m, 2H), 7,40 (t, J =
4,9Hz, 1H) , 8,11 (s, 1H) .
Eksempel 7:
Fremstilling av succinimidvl- 2-( 2- metvletenvlhvdrazon)-■ tiazol- 4- karboksvlat.
Svntese av succinimidvl- 2-( 2- metvletenvlhvdrazon)- tiazole-4- karboksylat.
2-(Metyletenylhydrazon)-4-tiazolkarboksylsyrehydrobromid (1 ekvivalent) (fremstilt ifølge fremgangsmåten i henhold til H. Johne, D. Seifert, S. Johne and E. Bulka, Pharmazie 33, 259
(1978)) ble oppløst i DMF (20 ml/g). N-Hydroksysuccinimid (1 ekvivalent) og trietylamin (1,5 ekvivalenter) ble tilsatt. Til den homogene blanding ble en oppløsning av DCC (1 ekvivalent) dråpevis tilsatt i løpet av 15 minutter. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer ved værelsetemperatur. Bunnfallet som ble dannet ble fjernet ved filtrering og moderluten ble konsentrert til tørrhet for å gi et oransje-brunt faststoff. Residuet ble suspendert i etylacetat og omrørt ved værelsetemperatur i 1 time. Uoppløselig materiale ble fjernet ved filtrering og moderluten ble konsentrert for å gi et brunt faststoff. Faststoffene ble findelt med eter og isolert på nytt ved filtrering for å gi et gulbrunt faststoff, utbytte 40%. En prove av produktet ble filtrert gjennom en kort plugg av silikagel ved anvendelse av heksaner/etylacetat (2/1) som eluat. Eluatet ble konsentrert for å gi det ønskede produkt som et blekgult faststoff, smp. 202 - 205°C (nedbrutt).'
<X>K NMR 6: 1,92 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 2,86 (s, 4H), 8,11
(s, 1H).
Massespektrum: m/z = 297 (M+l)<+>
Eksempel 8:
Fremstilling av succinimidvl- 4- tiosemikarbazidobenzoat-hemihvdroklorid fHvdrazinkarbotioamid, N- F4- f\( 2, 5- diokso- l-pyrrolidinvl) oksvllkarbonyl]- fenvll-, hemihvdrokloridl.
4-Aminokarboksylsyre ble innkjøpt fra Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI).
Svntese av BOC- 4- tiosemikarbazidobenzoesvre [ Hvdrazin-karboksvlsvre. 2— f f( 4- karboksvfenvl) aminoTtioksometvll-.
l-( 1. 1- dimetvletvl) esterl.
Til en oppløsning av 4-isotiocyanatobenzoesyre (1 ekvivalent)
(fremstilt ifølge fremgangsmåten i henhold til D.W. Browne and G.M. Dyson, J.Chem.Soc. 178 (1934)) og trietylamin (1,2 ekvivalenter) i DMF, ble der tilsatt en oppløsning av t-butylkarbazat (1 ekvivalent). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur i 3 timer, og deretter konsentrert til tørrhet. Residuet ble oppløst i etylacetat og vasket med 10% citronsyre og saltlake. Den organiske fase ble tørket (MgSC>4) , filtrert og konsentrert for å gi det ønskede produkt som et ikke helt hvitt faststoff, utbytte 70%, smp. 131 - 133°C (nedbrutt).
^ NMR 5: 1,42 (s, 9H), 7,67 (d, JAB = 8,9Hz, 2H), 7,87 (d,<J>AB
= 8,9Hz, 2H).
Svntese av succinimidvl- BOC- 4- tiosemikarbazidobenzoat fHvdrazinkarboksvlsvre, 2- r r r4-\\( 2 . 5- diokso- l- Pvrrolidinvl)-oksvl! karbonyl! fenvllaminoltioksometvll- 1. 1- dimetvletvlesterl .
Til en oppløsning av syre (1 ekvivalent) og N-metylmorfolin (1,1 ekvivalenter) i acetonitril, ble der tilsatt en oppløsning av succinimidyltetrakloretylkarbonat (1 ekvivalent) i acetonitril. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved værelsetemperatur i 16 timer. Etylacetat ble satt til reaksjonsblandingen og den homogene oppløsning ble vasket med kald, 5% citronsyre, kaldt vann, kald vandig mettet natriumbikarbonatoppløsning, kaldt vann og kald saltlake. Den organiske fase ble tørket (MgSC^), filtrert og konsentrert for å gi en blekgul olje. Oljen ble hurtigkromatografert på silikagel ved bruk av heksaner/etylacetat som elueringsmiddel. Produktet ble isolert som en gul olje som stivnet ved tilsetning av.eter. Faststoffene ble isolert ved filtrering for å gi det ønskede produkt, utbytte 25%, smp. 161 - 163°C.
<1>H NMR 6: 1,52 (s, 9H), 2,88 (s, 4H), 7,74 (d, JAB = 10,0Hz,
2H) , 8,05 (d, <J>AB <=> 10,0Hz, 2H) .
Analyse: beregnet for C17<H>20N4SO5:
C - 49,99, H - 4,94, N - 13,72, S - 7,85, funnet: C - 50,05, H - 4,95, N - 13,64, S - 7,95.
Svntese av succinimidyl- 4- tiosemikarbazidobenzoat- hemi-hvdroklorid.
Til en suspensjon av BOC-succinimidylester i eter ble der tilsatt en oppløsning av tørt HCl(g) i eter (fremstilt ved bobling av HCl-gass inn i tørr eter). Suspensjonen ble omrørt ved værelsetemperatur i 16 timer. Reaksjonsblandingen var heterogen over hele reaksjonsforløpet.
Faststoffene ble isolert ved filtrering for å gi det ønskede hydrokloridsaltprodukt, utbytte 80%, smp. 155 - 160°C.
<1>H NMR 6: 2,88 (s, 4H), 8,01 (s, 4H).
Analyse: beregnet for C12Hi3<N>4S04. 0,5 HC1:
C - 44,00, H - 4,15, N - 17,10, S - 9,79, funnet: C - 44,56, H - 3,88, N - 17,04, S - 9,74.
Eksempel 9:
Koniuaasion av IgG
Til en oppløsning av 10 mg IgG (molekylvekt = 155.000) i 2 ml 0,1 M natriumfosfatbuffer (pH 7,8) ble der tilsatt 17,2 ul av 30 mM succinimidyl-4-hydrazinobenzoathydroklorid i dimetylformamid. Etter omrøring i 5 timer ved værelsetemperatur ble reaksjonsblandingen dialysert mot 0,1 M natriumacetatbuffer (pH 5,2). Antallet hydrazinogrupper som konjugerte på proteinet ble målt ved fremgangsmåten i henhold til T.P. King et al.
(Biochemistry, 25:5774, 1986).' I korte trekk ble hydrazino-proteinkonjugatet omsatt med 4-nitrobenzaldehyd for å omdanne hydrazinogruppene til hydrazoner. Antallet hydrazoner pr. proteinmolekyl ble bestemt spektrofotometrisk ved bruk av hydrazonet av p-nitrofenylbenzaldehyd og fenylhydrazin
(<\>max = 412, £ = 2,41xl0<4>) som en standard. Modifikasjons-utbytter på 25 - 35% ble oppnådd.
Eksempel 10:
Merking av konjugert IgG med "mTc
En DuPont Tc-glukosan-pakke ble rekonstituert med 3 ml vann inneholdende lOmCi av "mTc04~. 250 ul av denne oppløsning ble blandet med 250 ul av 1-5 mg/ml konjugert IgG i en 0,1 M natriumacetatbuffer (pH 5,2). Etter inkubering i 1 time ved værelsetemperatur var mer enn 9 5% av aktiviteten forbundet med proteinet, som bestemt ved radiometrisk HPLC (TSK 3000-kolonne) og øyeblikkelig- (instant)' tynnsjiktkromatografi (ITLC) .
800 uCi av Tc-merket IgG ble injisert i rotter som hadde en byll i det ene bakbenet. Etter 24 timer ble rottene drept. Fordelingen av radioaktiviteten ble målt:
Forholdet infisert muskel/normal muskel = 6,3
Eksempel 11:
Koniuaasion av fragment E^.
(DD)E-protein ble konsentrert til 5-10 mg/ml og modifisert med et 20 ganger så stort molart overskudd av succinimidyl-6-hydrazinopyridin-3-karboksylathydroklorid i 12,5 mM boratbuffer ved pH 8,5. Etter 5 timers inkubasjon (med forsiktig omrøring) ved 4°C, ble prøven dialysert i ca. 12 timer mot avgasset nanorent (nanopure) vann.
Fragment E^ ble separert fra det modifiserte DD(E)-kompleks ved at prøven ble gjort 0,5 5 M i eddiksyre, og fortynning 1:1 V/V
med 6 M urea. pH-verdien av prøven ble justert til 5,5 med 10 N NaOH og prøven ble deretter dialysert mot lOmM citratbuffer (pH 5,7) for å fjerne overskytende reagenser. Under dialysen felles DD-proteinet ut, hvilket etterlater modifisert fragment Ei i
oppløsning. DD-bunnfallet ble lett fjernet ved sentrifugering.
Modifisert E^ ble merket med Tc-99m via reaksjon med Tc-99m-glukoheptonat som tidligere beskrevet. Det Tc-99m-merkede E]_ ble brukt til å danne bilde av en trombe i en kaninmodell (se D. Coilen et al., J. Clin. Invest. 71, s. 368-376 (1983)).
Eksempel 12:
Konjugasjon av monoklonalt antistoff 5E8 (se E.A. Chen et al, Cancer Research, 49, s. 3642-3649 (1989)).
5E8 (ved en konsentrasjon på 5-10 mg/ml) ble modifisert med et 14 ganger så stort overskudd av succinimidyl-6-hydrazino-pyridin-3-karboksylathydroklorid i 12,5 mM boratbuffer ved pH 8,5 (5 timer ved værelsetemperatur). Antistoffkonjugatet ble dialysert mot en 20 mM citratbuffer (pH 5,2 100 mM i NaCl). Etter sentrifugering for å fjerne en liten mengde turbiditet, ble graden av modifikasjon (bestemt spektrofotometrisk, som tidligere beskrevet) funnet å være 6,5 hydrazingrupper pr. proteinmolekyl. Analyser ved ELISA og immunocytoadherens viste ikke noe tap i immunreaktivitet.
Claims (7)
1. Hydrazin- eller hydrazidforbindelse med formelen (I), eller (II) :
karakterisert ved at
en av A eller B er et karbonatom, og det andre er et nitrogenatom, eller begge er et karbonatom.
S D er en direktebinding, C=0 eller HN-cl,
E er C=0 eller danner sammen med F en maleimidylgruppe, F er succinimidyloksy når E er C=0,
R er hydrogen eller en laverealky1-gruppe, R' og R" kan være like eller forskjellige og er valgt fra hydrogen og laverealkyl, og
X er et negativt kontraion.
2. Forbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at D er en direktebinding til 4-posisjonen i ringen.
3. Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at R er hydrogen eller metyl, E er karbonyl, F er N-oksysuccinimidyl og X er Cl.
4. Forbindelse som angitt i krav 3, karakterisert ved at A er karbon, B er nitrogen og R er hydrogen.
5. Forbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at D og E er karbonyl, F er N-oksysuccinimidyl og X er Cl.
6. Forbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved atDer tioamid, E er karbonyl, F er N-oksysuccinimidyl og X er cl.
7. Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at E er karbonyl, F er N-oksysuccinimidyl, A er karbon, B er nitrogen, R og R' er hydrogen og R" er etyl.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US31527089A | 1989-02-24 | 1989-02-24 |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO900838D0 NO900838D0 (no) | 1990-02-22 |
NO900838L NO900838L (no) | 1990-08-27 |
NO178186B true NO178186B (no) | 1995-10-30 |
NO178186C NO178186C (no) | 1996-02-07 |
Family
ID=23223639
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO900838A NO178186C (no) | 1989-02-24 | 1990-02-22 | Forbindelser som kan koble metallioner til biologisk nyttige molekyler |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0384769B1 (no) |
JP (1) | JP3073997B2 (no) |
KR (1) | KR0142079B1 (no) |
AT (1) | ATE137219T1 (no) |
AU (1) | AU630668B2 (no) |
CA (1) | CA2010800C (no) |
DE (1) | DE69026637T2 (no) |
DK (1) | DK0384769T3 (no) |
ES (1) | ES2085890T3 (no) |
FI (1) | FI95907C (no) |
GR (1) | GR3019758T3 (no) |
HU (1) | HU207293B (no) |
IE (1) | IE74849B1 (no) |
IL (1) | IL93432A (no) |
NO (1) | NO178186C (no) |
NZ (2) | NZ239288A (no) |
PT (1) | PT93264B (no) |
ZA (1) | ZA901283B (no) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5792444A (en) * | 1989-05-09 | 1998-08-11 | The General Hospital Corporation | Labeled chemotactic peptides to image focal sites of infection or inflammation |
US6001979A (en) | 1989-08-29 | 1999-12-14 | Nycomed Amersham Plc | Cores for technetium radiopharmaceuticals |
US5589576A (en) * | 1989-08-29 | 1996-12-31 | Amersham International Plc | Cores for technetium radiopharmaceuticals |
US5296599A (en) * | 1991-09-19 | 1994-03-22 | Millipore Corporation | Activated carbamates compounds |
GB9209641D0 (en) * | 1992-05-02 | 1992-06-17 | Johnson Matthey Plc | Improvements in radiolabelling |
GB9223168D0 (en) * | 1992-11-05 | 1992-12-16 | Johnson Matthey Plc | Improvements in molecule labelling |
US5750088A (en) * | 1993-03-30 | 1998-05-12 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Stable hydrazones linked to a peptide moiety as reagents for the preparation of radiopharmaceuticals |
ATE162524T1 (de) * | 1993-07-19 | 1998-02-15 | Resolution Pharm Inc | Hydrazine mit einer n3s konfiguration als radionukleide chelatoren |
US5753206A (en) | 1995-06-07 | 1998-05-19 | Immunomedics, Inc. | Radiometal-binding analogues of luteinizing hormone releasing hormone |
US6686461B1 (en) | 2000-03-22 | 2004-02-03 | Solulink Bioscience, Inc. | Triphosphate oligonucleotide modification reagents and uses thereof |
US7102024B1 (en) | 2000-08-01 | 2006-09-05 | Schwartz David A | Functional biopolymer modification reagents and uses thereof |
AU4769701A (en) | 2000-03-22 | 2001-10-03 | Solulink Inc | Hydrazine-based and carbonyl-based bifunctional crosslinking reagents |
US7723296B2 (en) | 2001-01-18 | 2010-05-25 | Genzyme Corporation | Methods for introducing mannose-6-phosphate and other oligosaccharides onto glycoproteins and its application thereof |
JP5137814B2 (ja) | 2005-04-06 | 2013-02-06 | ジェンザイム・コーポレーション | 治療ターゲティングのための酸不安定リンカーを介するpegおよびポリシアルリソソーム酵素のコンジュゲート |
CN101631794B (zh) | 2007-01-18 | 2013-01-02 | 建新公司 | 包含氨基氧基基团的寡糖及其轭合物 |
LT2889043T (lt) | 2008-12-16 | 2019-07-10 | Genzyme Corporation | Sintetiniai tarpiniai junginiai oligosacharido-baltymo konjugatų gamybai |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS57181058A (en) * | 1981-04-30 | 1982-11-08 | Ikeda Mohandou:Kk | Compound labeled with 99m technetium, and its preparation |
US4861869A (en) * | 1986-05-29 | 1989-08-29 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins |
DE3728599A1 (de) * | 1986-12-10 | 1988-06-23 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung einer mit technetium-99m-markierten organspezifischen substanz |
US5066490A (en) * | 1988-06-01 | 1991-11-19 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services | Protein crosslinking reagents cleavable within acidified intracellular vesicles |
-
1990
- 1990-02-19 IL IL9343290A patent/IL93432A/en not_active IP Right Cessation
- 1990-02-20 ZA ZA901283A patent/ZA901283B/xx unknown
- 1990-02-20 KR KR1019900002035A patent/KR0142079B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1990-02-22 NO NO900838A patent/NO178186C/no not_active IP Right Cessation
- 1990-02-22 AU AU50074/90A patent/AU630668B2/en not_active Expired
- 1990-02-23 DK DK90301949.5T patent/DK0384769T3/da active
- 1990-02-23 IE IE66690A patent/IE74849B1/en not_active IP Right Cessation
- 1990-02-23 DE DE69026637T patent/DE69026637T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-02-23 ES ES90301949T patent/ES2085890T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-02-23 CA CA002010800A patent/CA2010800C/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-02-23 PT PT93264A patent/PT93264B/pt active IP Right Grant
- 1990-02-23 EP EP90301949A patent/EP0384769B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-02-23 NZ NZ239288A patent/NZ239288A/en unknown
- 1990-02-23 JP JP02041389A patent/JP3073997B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1990-02-23 FI FI900948A patent/FI95907C/fi active IP Right Grant
- 1990-02-23 NZ NZ232656A patent/NZ232656A/en unknown
- 1990-02-23 HU HU90970A patent/HU207293B/hu unknown
- 1990-02-23 AT AT90301949T patent/ATE137219T1/de not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-04-25 GR GR960400832T patent/GR3019758T3/el unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HUT53600A (en) | 1990-11-28 |
PT93264A (pt) | 1990-08-31 |
IE74849B1 (en) | 1997-08-13 |
DE69026637T2 (de) | 1996-09-26 |
FI900948A0 (fi) | 1990-02-23 |
FI95907C (fi) | 1996-04-10 |
DK0384769T3 (da) | 1996-05-13 |
JP3073997B2 (ja) | 2000-08-07 |
DE69026637D1 (de) | 1996-05-30 |
HU207293B (en) | 1993-03-29 |
HU900970D0 (en) | 1990-05-28 |
KR900012910A (ko) | 1990-09-03 |
NO178186C (no) | 1996-02-07 |
AU630668B2 (en) | 1992-11-05 |
CA2010800C (en) | 2001-01-16 |
IE900666L (en) | 1990-08-24 |
EP0384769B1 (en) | 1996-04-24 |
NZ232656A (en) | 1992-04-28 |
EP0384769A2 (en) | 1990-08-29 |
ES2085890T3 (es) | 1996-06-16 |
CA2010800A1 (en) | 1990-08-24 |
IL93432A (en) | 1994-02-27 |
NO900838D0 (no) | 1990-02-22 |
EP0384769A3 (en) | 1991-11-27 |
PT93264B (pt) | 1996-01-31 |
JPH0327356A (ja) | 1991-02-05 |
ZA901283B (en) | 1991-03-27 |
ATE137219T1 (de) | 1996-05-15 |
KR0142079B1 (ko) | 1998-06-01 |
FI95907B (fi) | 1995-12-29 |
NO900838L (no) | 1990-08-27 |
NZ239288A (en) | 1992-04-28 |
AU5007490A (en) | 1990-09-13 |
GR3019758T3 (en) | 1996-07-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US6217845B1 (en) | Protein labelling | |
NO178186B (no) | Forbindelser som kan koble metallioner til biologisk nyttige molekyler | |
DE3855177T2 (de) | Makrozyklische tetraaza-verbindungen | |
US5247075A (en) | Tri-aza macrocycles and metal complexes thereof | |
US5625075A (en) | Metal radionuclide chelating compounds for improved chelation kinetics | |
AU595164B2 (en) | Radiolabeled antibody fragments | |
Pak et al. | Nε functionalization of metal and organic protected L‐histidine for a highly efficient, direct labeling of biomolecules with [Tc (OH2) 3 (CO) 3]+ | |
EP0178125A2 (en) | Labeled antibody fragments. | |
EP0420934B1 (en) | Bifunctional coupling agents and radionuclide labeled compositions prepared therefrom | |
JP5705434B2 (ja) | キレート剤 | |
FI113044B (fi) | 2-hydratsinopyridiinijohdannaisia | |
US5034514A (en) | Novel cross-linking agents | |
Banerjee et al. | Design and synthesis of site directed maleimide bifunctional chelators for technetium and rhenium | |
WO1994008949A2 (en) | Metal-oxime chelates for use as radiopharmaceutical agents | |
Banerjee et al. | Bifunctional chelates with aliphatic amine donors for labeling of biomolecules with the {Tc (CO) 3}+ and {Re (CO) 3}+ cores: the crystal and molecular structure of [Re (CO) 3 {(H2NCH2CH2) 2 N (CH2) 4CO2Me}] Br | |
EP0187832A1 (en) | Compounds for site-enhanced delivery of radionuclides and uses thereof | |
McKenzie et al. | Development of a bifunctional crosslinking agent with potential for the preparation of immunotoxins | |
JPH03501621A (ja) | チオール反応性架橋試薬 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MK1K | Patent expired |