NO174182B - Fremgangsm}te for fremstilling av et terapeutisk effektivt preparat inneholdende et vitamin B12 - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk effektivt preparat inneholdende et vitamin B12. Preparatet er ment for nese-administrering av et vitamin B^2til e_t menneske som lider av vitamin Bi2-mangel•

Cyanokobalamin er et vitamin B^2»°S e"t av B^-klassen av vitaminer som innbefatter vitamin B^2a(hydroksokobalamin), vitamin B^2b(aquakobalamin), vitamin B^2c(nitrilokobal-amin), koenzym B^2(5'Odeoksyadenosinkobalamin) og metyl B^2(metylkobalamin). Cyanokobalamin er hovedelementet av klassen og har størst anvendelse innen medisin. Foreliggende oppfinnelse vil bli beskrevet under henvisning til cyanokobalamin, men fagmannen vil innse at oppfinnelsen kan anvendes på hele klassen.

Vitamin B^2er en essensiell forbindelse for normal vekst, hematopoese, produksjon av alle epitelceller og opprett-holdelse av myelin gjennom nervesystemet. Det ble først isolert fra leverkonsentrat av Ricks og hans medarbeidere i 1948, og strukturen ble kartlagt av Hodgkin og hennes medarbeidere sist i 1950-årene. Det er i dag kommersielt tilgjengelig som en tablett og som en injiserbar oppløsning.

Terapeutisk anvendes vitamin B^2ved behandling av en rekke sykdommer knyttet til B^-mangel, hovedsakelig anemier som pernisiøs anemi og "diplyllobothrium latum". Mens det minimale dagsbehovet for vitamin B^2er ca* 0,1 pg er den generelt foreskrevne innledende terapeutiske dosen 100 til 1000 jjg tilført intramuskulært. Opprettholdelsesterapi med vitamin B^ 2 er vanligvis 100 jjg intramuskulært, månedlig og må fortsettes gjennom hele livet.

Siden pernisiøs anemi er en sykdom som ofte opptrer i høy alder når mange som lider av sykdommen har redusert muskel-masse og er atrofiske, kan gjentatte intramuskulære injek-sjoner av vitamin B^ være ubehagelig, smertefulle og ofte kreve legebesøk. I noen tilfeller er hospitalisering påkrevet, særlig i de innledende trinnene. Følgelig for-eligger det behov for en mer hensiktmessig, mindre smertefull og mindre kostbar fremgangsmåte for administrering av vitamin B^g»spesielt en fremgangsmåte som ikke krever hospitalisering eller gjentatte kontakter med lege.

Uheldigvis har det frem til i dag ikke vært tilgjengelig noen effektiv fremgangsmåte for administrering av B^2som Sir terapeutisk nyttige blodnivåer av vitaminet, bortsett fra parenteral administrering.

I 1953 og 1954 beskrev Monto et al i Am. J. Med. Sei., 223, 113 (1953) og Arch. of Int. Med. 93, 219 (1954 ) administrering av B^2vec* nese-inhalering eller drypping. Bærerne for administrering var vandig isotonisk natriumklorid-oppløsning og laktosepulver. Selv om resultatene ble angitt som effektive, sikre og økonomiske gjenstår det faktum at parenteral administrering fremdeles er den eneste fremgangsmåten som betraktes som sikker, pålitelig og effektiv innen legestanden for behandling av mennesker med vitamin B^-mangler. Intet preparat for neseinhalering eller.-drypping er kommersielt tilgjengelig for nese-administrering til mennesker. Heller ikke finnes det publikasjoner som be-skriver nese-inhalering eller -drypping så vidt søkeren kjenner til.

Vanskeligheten med nesedrypping ved nesedosering slik fremgangsmåten er beskrevet i de siterte artiklene er at det meste av B^2passerer direkte inn i halsen. Det er ikke i kontakt med neseslimhinnen i et tilstrekkelig tidsrom til å tillate nyttig og uniform absorpsjon. Det meste av B^2som administreres går derimot til spille.

Det er nå oppdaget preparater for nese-administrering av B^2som kan holdes i kontakt med neseslimhinnen i et lengere tidsrom. I løpet av den tiden preparatene befinner seg i slik kontakt absorberes B^2uniformt fra preparatene gjennom neseslimhinnen og fordeles deretter uniformt systemisk. Anvendelsen av preparatene tillater, på grunn av den effektiviteten hvormed B-^2 absorberes, anvendelse av langt mindre mengder av B^2enn mengdene som normalt er til stede i parenterale Bi2~Preparater. Siden pasienten videre selv kan administrere B^2minimaliseres eller elimineres behovet for hospitalisering eller kontakt med lege.

Foreliggende oppfinnelse muliggjør fremstilling av preparater inneholdende vitamin B^2spesifikt sammensatt for nese-administrering som, i motsetning til vandig isotoniske natriumkloridpreparater, vil forbli i kontakt med neseslimhinnen i et tilstrekkelig langt tidsrom til å tillate konsistent, kontinuerlig og uniform absorpsjon av terapeutisk effektive mengder av et vitamin B^2gjennom neseslimhinne-membranen.

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer følgelig en fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk effektivt preparat inneholdende et vitamin B^2»kjennetegnet ved at det innebefatter at det tilveiebringes en isotonisk vandig oppløsning inneholdende tilstrekkelig buffer til at pH kontrolleres fra 4 til 6, dertil tilsettes vitaminet B^2°S tilstrekkelig fortykningsmiddel, i form av metylcellulose, xanthangummi, karboksymetylcellulose, hydroksypropylcellulose eller karbomer o.l., til at viskositeten er fra 2500 til 6500 eps, og videre eventuelt tilstrekkelig fuktighetsbevarende middel til at preparatet inneholder 1 til 10 vekt-# fuktighetsbevarende middel, basert på den samlede vekten av preparatet, samt eventuelt tilstrekkelig overflateaktivt middel til at preparatet inneholder fra 0,2 til 2 vekt-$ overflateaktivt middel, basert på den samlede vekten av preparatet, hvor de ovenfor angitte trinnene utføres i en hvilken som helst rekkefølge.

Oppfinnelsen innbefatter følgelig fremstilling av preparater inneholdende en terapeutisk effektiv mengde av et vitamin

Bi2'slike preparater er tilstrekkelig viskøse til at de oppholder seg i nesepassasj ene i et tidsrom som er tilstrekkelig til at det meste av B^2absorberes. Preparatene er stabile, lette å håndtere, og kan derfor selv-administreres av pasienten.

Preparatene kan foreligge i form av geler, lotions, salver, kremer o.l., og vil inneholde en tilstrekkelig mengde av et fortykningsmiddel, slik at viskositeten er fra 2500 til 6500 eps, selv om mer viskøse preparater, opp til 10.000 eps kan anvendes. De mest fordelaktige preparatene har en viskositet på 2500 til 5000 eps, idet de over dette området blir vanskeligere å administrere.

På grunn av effektiviteten hvormed B^2absorberes fra preparatene fremstilt ifølge oppfinnelsen vil en terapeutisk effektiv mengde av B^2f°r nese-administrering normalt være betydelig lavere enn for andre administreringsfremgangsmåter. Typisk vil konsentrasjonen av B^21 et preparat fremstilt ifølge oppfinnelsen være 0,05 til 1 vekt-# basert på den samlede vekten. I doseringsenhetsformer vil dosene normalt være fra 50 til 1000 mikrogram.

pE for preparatene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse er fra 4 til 6. Ved denne pH-verdien er B^2stabilt, slik at preparatene har en holdbarhet som kan være ett år eller mer. I tillegg er irritasjonen av neseslimhinnen minimal ved denne pH-verdien. pH-verdien opprettholdes med en fysiologisk akseptabel buffersammensetning, hensiktsmessig i en acetat-, citrat-, fosfat-, ftalat-, borat- eller annen buffer.

Acetat- og citratbuffere er foretrukket på grunn av hensikts-messighet og økonomi.

Isotonisiteten av preparatene oppnås ved å anvende natriumklorid, eller annet farmasøytisk akseptabelt middel såsom dekstose, borsyre, natriumtartrat eller annet uorganisk eller organisk oppløst stoff. Natriumklorid er spesielt foretrukket for buffere inneholdende natriumioner.

Viskositeten av preparatene opprettholdes ved det valgte nivået ved å anvende et terapeutisk akseptabelt fortykningsmiddel. Metylcellulose er foretrukket fordi det er lett og økonomisk tilgjengelig og lett å arbeide med. Andre egnede fortrykningsmidler innbefatter f.eks. xanthan-gummi, karboksymetylcellulose, hydroksypropylcellulose, karbomer o.l. Den foretrukne konsentrasjonen av fortykningsmiddelet vil avhenge av det valgte middelet. Det viktige punktet er å benytte en mengde som gir den valgte viskositeten.

Preparater som fremstilles innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse inneholder et fuktighetsbevarende middel for å inhibere tørking av slimhinnen og forhindre irritiasjon. Et hvilket som helst av en rekke fuktighetsbevarende midler kan anvendes, innbefattende f.eks. sorbitol, propylenglykol eller glyserol. Som med fortykningsmidlene vil konsentrasjonen variere med det valgte middelet, selv om nærværet eller fraværet av disse midlene, eller deres konsentrasjon, ikke er et viktig trekk ved foreliggende oppfinnelse.

En forbedret absorpsjon av B^2gjennom slimhinnen oppnås ved å anvende et overflateaktivt middel. Typiske nyttige overflateaktive midler for disse terapeutiske preparatene innbefatter polyoksyetylenderivater av fettsyre-partielle estere av sorbitolanhydrider, såsom "Tween 80", "Polyoxyl 40 Stearat", "Polyoxyethylen 50 Stearat" og "Octoxynol".

Et konserveringsmiddel anvendes generelt for å øke holdbar-heten av preparatene. Benzylalkohol er egnet, selv om en rekke konserveringsmidler innbefattende, f.eks. parabener, thimerosal, klorobutanol, eller benzalkoniumklorid også kan anvendes. En egnet konsentrasjon av det konserverende middelet vil være fra 0,02 til 2% basert på den samlede vekten, selv om det kan forekomme betydelig variasjon avhengig av det valgte middelet.

Et typisk preparat fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder følgende komponenter pr. 100 ml.

Viskositeten av sammensetningen er ca. 4500 eps. pH-verdien er ca. 5.

De følgende eksemplene er angitt for å illustrere oppfinnelsen .

EKSEMPEL 1

Følgende preparater ble fremstilt ved blanding.

Viskositeten av preparatene ligger innenfor området definert ovenfor.

Det typiske preparatet beskrevet ovenfor, før eksemplene, ble undersøkt i mennesker for å bestemme kvantitative økninger i B^-blodnivåer etter nese-administrering. Tre normale frivillige personer fikk 0,1 cm<3>av den angitte sammensetningen (100 jjg B^g) innført i nesen med en nesesprøyte-applikator. En serie blodprøver ble tatt fra forsøks-objektene etter 0, 0,05, 0,08, 0,16, 0,25 , 0,5, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 6,0, 8,0 og 24 timer etter dosering og ble analysert for B^-innhold ve(* radioimmunoanalyse.

Det ble funnet at mindre enn 15 minutter etter administrering var serumnivået av B^2betydelig forhøyet, og at betydelig forhøyede blodnivåer ble opprettholdt under hele under-søkelsesperioden på 24 timer.

De aktuelle plasmablodnivåene av B^2i forsøkspersonene etter nese-administrering av det ovenfor angitte preparatet var:

En ytterligere og tilsvarende undersøkelse ble utført med tre forsøkspersoner ved å anvende det samme preparatet hvorved 0,2 cm<3>ble administrert intranasalt (200 pg B^)- De aktuelle plasmablodnivåene som ble oppnådd var:

EKSEMPEL 2

Et preparat inneholdende følgende komponenter pr. 100 ml ble fremstilt ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen.

Igjen ble det funnet at ca. 15 minutter etter administrering var serumnivået av B^2betydelig forhøyet, og at betydelig forhøyede blodnivåer ble opprettholdt under hele under-søkelsesperioden på 24 timer.

EKSEMPEL 3

Følgende sammenligningsforsøk ble gjennomført på femti friske, voksne frivillige mennesker for å sammenligne tilgjengeligheten, hastigheten for tilgjengelighet og varigheten av tilgjengeligheten av B12administrert ved forskjellige fremgangsmåter. Kommersielt tilgjengelige orale og bilinguale tabletter ble sammenlignet med preparatene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse som ble administrert oralt. Alle prøver ble undersøkt ved høy-ytelses-væskekromatografi for B±2Pr• doseringsenhet som følger:

Preparatet som ble benyttet til å fremstille den intramurale doseringsenheten på 400 mikrogram var identisk, bortsett fra at det inneholdt 4,0 g cyanokobalamin.

En serie blodprøver ble tatt fra forsøksobjektene etter 0, 5, 1, 2, 4, 8, 24, 48 og 72 timer etter dosering og analysert for B-^-innhold ved radioimmunoanalyse.

Resultatene er vist i figurene 1, 2, 3 og 4 hvori konsentrasjonen i picogram pr. milliliter er avsatt som funksjon av tiden. Resultatene er også sammenfattet i tabell 1. I tabellen er basislinjen den gjennomsnittlige B^-konsentrasjonen hos forsøksperson-gruppen før B-^-administrering.

Fra en analyse av tallene og tabellene fremgår følgende"uventede fordeler ved nese-administrering av B- ±2 ved preparatene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse:

1. Forøkede blodnivåer ved lavere doser.

2. Maksimale blodnivåer oppnås raskere, og ved lavere doseringsnivåer. 3. Høye blodnivåer opprettholdes gjennom hele forsøksperioden som angitt ved de større arealene under kurven. 4. Vesentlig høyere blodnivåer ved lavere doser selv to dager etter administrering.

Claims (4)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk effektivt preparat inneholdende et vitamin B12»karakterisert vedat den innbefatter at det tilveiebringes en isotonisk vandig oppløsning inneholdende tilstrekkelig buffer til at pH kontrolleres fra 4 til 6, dertil tilsettes vitaminet B^2°§tilstrekkelig fortykningsmiddel, i form av metylcellulose, xanthangummi, karboksymetylcellulose, hydroksypropylcellulose eller karbomer o.l., til at viskositeten er fra 2500 til 6500 eps, og videre eventuelt tilstrekkelig fuktighetsbevarende middel til at preparatet inneholder 1 til 10 vekt-# fuktighetsbevarende middel, basert på den samlede vekten av preparatet, samt eventuelt tilstrekkelig overflateaktivt middel til at preparatet inneholder fra 0,2 til 2 vekt-# overflateaktivt middel, basert på den samlede vekten av preparatet, hvor de ovenfor angitte trinne utføres i en hvilken som helst rekkefølge.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisertved at det som vitamin B]_2tilsettes cyanokobalamin.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2,karakterisert vedat det fremstilles doseenheter som inneholder fra 50 til 1000 mikrogram vitamin B^-

4 . Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat fortykningsmiddelet som tilsettes er metylcellulose.