NO169947B - Fremgangsmaate for fremstilling av et monoklonalt antistoff til et tumorassosiert antigen - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av et monoklonalt antistoff til et tumorassosiert antigen Download PDFInfo
- Publication number
- NO169947B NO169947B NO823530A NO823530A NO169947B NO 169947 B NO169947 B NO 169947B NO 823530 A NO823530 A NO 823530A NO 823530 A NO823530 A NO 823530A NO 169947 B NO169947 B NO 169947B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- tumor
- antibody
- cea
- labeled
- chelating agent
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 54
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 24
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 3
- 230000002494 anti-cea effect Effects 0.000 description 27
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 13
- 102000012406 Carcinoembryonic Antigen Human genes 0.000 description 11
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 8
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 7
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 6
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 5
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000003182 parenteral nutrition solution Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 2
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- ULAKFSAOPCUOJB-UHFFFAOYSA-N C1=CC(=CC=C1C(C(=O)O)N(CCN(CC(=O)O)CC(=O)O)CC(=O)O)NC(=O)CBr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C(C(=O)O)N(CCN(CC(=O)O)CC(=O)O)CC(=O)O)NC(=O)CBr ULAKFSAOPCUOJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 208000003252 Signet Ring Cell Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 1
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000006193 diazotization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 108091005979 iodinated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000006396 nitration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000135 prohibitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 201000008123 signet ring cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 229940071566 zinc glycinate Drugs 0.000 description 1
- UOXSXMSTSYWNMH-UHFFFAOYSA-L zinc;2-aminoacetate Chemical compound [Zn+2].NCC([O-])=O.NCC([O-])=O UOXSXMSTSYWNMH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1048—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell determinant being a carcino embryonic antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1066—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell being from skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av et monoklonalt antistoff
til et tumorassosiert antigen hvortil et metall-radionuklid er bundet, og det særegne ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er at det monoklonale antistoff merkes med et metall-radionuklid ved hjelp av et chelaterende middel som er konjugert til antistoffet, idet det som chelaterende middel anvendes et polyamino-karboksylsyre-chelaterende middel med formel
hvori X er 0 eller et helt tall, y er 1 eller 2, z er et helt tall fra 1 til 7 og R er hydrogen eller en gruppe hvormed det chelaterende middel er konjugert med antistoffet eller en gruppe som påvirker bindingskonstanten av det chelaterende middel for radionuklidet.
Disse trekk ved oppfinnelsen fremgår av patentkravet.
En pålitelig teknikk for stedsspesifikk deteksjon av tumorer har lenge vært etttersøkt. Det er f.eks. beskrevet metoder for detektering av carcino-embryonisk antigen (CEA) assosiert med human-carcinom og som sirkulerer i blodstrømmen, se US patentskrift nr 3.663.684 og 3.697.638. Disse metoder kan klart ikke anvendes for å bestemme tumor-lokaliseringen. Nylig er det foreslått å anvende antistoffer merket med radioaktive isotoper av jod for å detektere en antigenisk substans assosiert med en tumor. Således beskrives i US patentskrift nr 3.927.193 en fremgangsmåte hvor det an-
vendes anti-stoffer til CEA merket med og ^1.^
I henhold til det nevnte patentskrift ble det ved
forsøk gjennomført med hann-hamstere av syrisk type,
hvori human signet-ring celle-carcinoma var innført,
ved injeksjon av merket geite-anti CEA etterfulgt av undersøkelse av dyrets organer, påvist at radioisotop lokaliserte i tumoren. Det ble derfor foreslått at lokalisering av en tumor i et menneske kunne bestemmes ved in vivo tilførsel av en parenteral oppiløsning av antistoffet etterfulgt av fotoavsøkning av verten.
Den aktuelle bruk av radio-ioderte antistoffer har ikke tilfredsstilt de forventninger som var stilt til de tidligere arbeider. F.eks. rapporterte Goldenberg et al, N. Eng. J. Med. 298, 1384-1388 (1978) noe hell i 1978 ved avsøkning av mennesker med radio-iodert anti CEA. Pga. resterende bakgrunns-aktivitet var imidlertid den rapporterte begrensede suksess avhengig av bruken av subtraksjonsteknikk. Mach et al, N. Eng. J. Med., 303, 5-10, (1980) rapporterte ennå mindre suksess og bestemte at 0, 1% av den tilførte dose ^lokaliserte i tumoren.
I utvalgte tilfeller var imidlertid påvisning av tumoren fremdeles mulig.
Det er vel kjent at affinitetsrensing av heterologe anti-sera for oppnåelse av antistoffene anvendt ved tidligere tumor-påvisningsprosesser vanligvis resulterer i tap av høy-affinitets-antistoff og at de oppnådde antistoffer,
som er blanding av spesifikke antistoffer for forskjellige determinanter på antigenet, stort sett omfatter antistoffer med lav affinitet og antistoffer som gir ikke-spesifikke reaksjoner. Monoklonale antistoffer kan på den annen side selekteres til å fremvise høy affinitet til selekterte steder på antigenet og lav ikke-spesifikk binding. Det er
imidlertid overraskende funnet at monoklonale antistoffer til turaor-antigenet merket med radioisotoper av jod i henhold til velkjente metoder fremdeles viser dårlig lokalisering på tumor-stedet til tross for det forhold at in vitro immuno-reaktivitet kan påvises. Dette kan skrive seg fra eller skriver seg sannsynligvis fra tapet av radioaktivt jod ved det merkede antistoff.
Det foreligger følgelig fremdeles et behov for en pålitelig teknikk for in vivo detektering av den nøyaktige lokalisering av en tumor.
Ved den foreliggende oppfinnelse blir et monoklonalt antistoff eller antistoff-fragment til et tumor-antigen bundet med et chelat-bundet radio-nuklid, f.eks. DTPA-bundet ]-11In, ved konjugering av et chelaterende middel med antistoffet til å danne et kompleks mellom det chelaterende middel og radionuklidet. Det resulterende merkede anti-stoffet, eller fragmentet derav, vil ved injisering i en tumbr-bærende vert hurtig lokaliseres i selve tumoren med høy spesifisitet. I noen tilfeller kan lokalisering i fjerne metastaser også forekomme og indikerer spredning av tumoren. Lokalisering av tumoren kan detekteres ved hjelp av foto-avsøkningsteknikk. Blandinger av merkede monoklonale anti-stoffer kan også anvendes.
Det er derfor et formål for den foreliggende oppfinnelse å oppnå monoklonale antistoffer til tumor-assosierte antigener merket med metalliske radionuklider.
Oppfinnelsen muliggjør påvisning av tumorer i en angrepet vert.
Oppnåelse av disse og relaterte formål vil fremgå av den etterfølgende beskrivelse av oppfinnelsen, i sammenheng med de vedføyde tegninger, hvori: Fig. 1 er en gruppe grafiske fremstillinger som illustrerer fordelingen i vev av<11>1In og 125j sammenlignet med
6 7
fordelingen av Ga som en funksjon av tiden etter injisering i hårløse mus infisert med hurrian-kolonkreft
111 125 67
av anti-CEA merket med ' In og I og Ga-citrat.
Fig. 2 er en gruppe grafiske fremstillinger som illu-
111 125 67 strerer mengden av In og I og Ga utskilt av hårløse mus med økende tid'etter injeksjon av "<*>"^In og "''^I
6 7
merket anti-CEA og Ga-citrat.
Fig. 3 er en gruppe av grafiske fremstillinger som viser vev-fordelingen av "^^in og "*"^I i hårløse mus 48 timer etter injeksjon av<11>"1"In og 125I merket anti-CEA sammenlignet med ^""^In citrat og "^"^1-merket humanalbumin. Fig. 4 er en gruppe grafiske fremstillinger som illustrerer tumor/vevforhold for<111>ln og 125i sammenlignet med<67>Ga, etter injeksjon av<11>1In og 125I merket anti-CEA og ^Ga-citrat i hårløse mus, som en funksjon av tiden.
I samsvar med den foreliggende oppfinnelse blir monoklonale antistoffer eller fragmenter derav til turnorassosierte antigener merket med chelat-bundne radio-nuklider". De"monoklonale antistoffer som anvendes ved oppfinnelsen er produkter av den såkalte hybridom .-teknologi som nå er velkjent. Det vises f.eks. til det opprinnelige arbeid avMilstein og Kohler, rapportert i Nature, 256, 495-497
(1975). Prinsipielt involverer prosessen injisering
av mus eller annet passende dyr med et immunogen, i dette tilfellet et tumor-assosiert antigen som f.eks.
CEA. Den immuniserte mus drepes deretter og celler tatt
fra milten sammenføres med myelom -celler til å gi hybride celler som benevnes "hybridomer" som kan reproduseres in vitro. Populasjonen av celler som frembringer antistoffer dyrkes selektivt, og selekteres til å isolere individuelle
kloner, som hver sekreterer en enkelt antistoff-species spesifikk til et spesielt område ("determinant") på overflaten av antigenmolekylet.
De individuelle kloner kan videre selekteres for bestemmelse av dem som produserer antistoffer med den høyeste affinitet for antigenet, og som fremviser lav ikke-spesifikk binding. Antistoffet selektert for radiomerking (vanligvis isolert fra ascites), bringes til å konjugeres med det angitte chelaterende middel som deretter anvendes for å binde radionuklidet. Det chelaterende middel kan bringes til antistoffet under - anvendelse av en lang rekke metoder.
De chelaterende midler som anvendes inkluderer en rekke polydentate chelaterende midler hvor ligande kompleksdannes med metalliske radionuklider, i form av polyamino-karboksyl-syrene med formel:
hvor X er 0 eller et helt tall (x=0 eller x=l foretrekkes), y=l eller 2 (y=l foretrekkes) og z er et helt tall fra 1 til 7 (z=l eller 7 foretrekkes) og hvori R er hydrogen eller en gruppe hvorigjennom det chelaterende middel konjugeres med antistoffet eller en gruppe som påvirker bindingskonstanten av det chelaterende middel for radionuklidet. Blant brukbare grupper R kan spesielt nevnes gruppen hvori A er gruppen hvormed konjugeringen oppnås. F.eks. kan A være ~^ 2+ som oppnås ved diazotering av gruppen -NH2, som selv kan oppnås ved reduksjon av en nitrogruppe (-NCO som i sin tur kan oppnås ved nitrering av fenyl-kjernen. Gruppen A kan også være
oppnådd
ved acetylering av gruppen -NH2ved hjelp av kjente metoder, hvori L er en avgående gruppe som erstattes ved konjugeringen, f.eks. et halogen som Cl, Br eller I (Br foretrekkes) .
I andre tilfeller kan R være -CH3eller -CH2C6H4OCH2CO2H.
For disse polyaminokarboksylsyrene kan konjugeringen
oppnås via selve karboksylsyregruppen ved dannelse av f.eks. et syreanhydrid-mellomprodukt som læres av Krejcarek og Tucker, Biochemical and Biophysical Research Communications, 77, 581 (1977).
Av polyaminokarboksylsyrene foretrekkes polyamino-eddiksyrene. Spesifikke polyamino-karboksylsyrer som kan anvendes inkluderer etylen-diaminotetraeddiksyre (EDTA) og derivater derav som f.eks. di-etylendiamino-pentaeddiksyre (DTPA), p-bromacetamidofenyl (etylendinitrilo-tetraeddiksyre) og 1-(p-aminofenyl)-etylendiaminotetra-eddiksyre) hvorav den siste omdannes til et diazoniumsalt for å tillate konjugering. Av disse chelaterende midler foretrekkes DTPA.
Radionuklider som kan anvendes ved oppfinnelsen er dem som danner stabile komplekser med polydentate chelaterende midler.
De chelaterende midler med formel 1 danner stabile komplekser med radionuklider i en +3 oksydasjons-
tilstand. Blant radionuklider som danner stabile komplekser
i +3 oksydasjonstilstand er<52>Fe,<11:L>In, 113mln<99m>TC<68>Ga, 67Ga, 169Yb, 57Co, 167Tm, 166Tm, 146Gd, 157Dy, 9^b 103Ru, 97Ru, 99Rh, 101mRhog<2>01T1.
De mest egnede radionuklider er gamma-emittere med en energi mellom 100 og 400 keV med halveringstider i området fra omtrent 5 timer til 5 døgn.
For fremstilling av det monoklonale antistoff anvendes den mer fleksible vei med først å konjugere et chelaterende middel til antistoffer og deretter danne et kompleks med radionuklidet. På denne måte foretrekkes spesielt å anvende<111>In (T1/2=2,8døgn) som radionuklidet i konjuksjon med DTPA som et chelaterende middel.
Oppfinnelsen kan utnyttes for deteksjon av tumorer under anvendelse av monoklonale antistoffer til tumor-
assosierte antigener generelt. I tillegg til CEA,
kan f.eks. melanom-assosierte antigener, alfa-feto-
protein, ferritin, human-choriogonadotropin, sink-glycinat-markør og prostatinsyre-fosfatase (PAP) f.eks. anvendes som immunogener for å stimulere produksjonen av de ønskede monoklonale antistoffer som beskrevet i det foregående.
I aktuell bruk, blir det merkede antistoff i en passende parenteral oppløsning injisert inn i klienten. Etter til-strekkelig tid, blir klienten fotoavsøkt for å detektere eventuelle steder med lokalisert stråling som kunne tyde på en tumor og/eller en av dens metastaser.
De følgende forsøkt gjennomført med monoklonalt antistoff til CEA merket med ^2^iQg In demonstrerer fordelen med å anvende monoklonale antistoffer merket med chelat-bundne radionuklider for tumor-påvisning i samsvar med oppfinnelsen sammenlignet med prosesser som anvender jod-merkede antistoffer.
1. Fremstilling av radiomerket anti-CEA.
Monoklonal: anti-CEA, tilgjengelig fra Hybritec, Inc. La Jolla, Ca., USA, ble merket med 12 5i ved å anvende metoden til Bolton og Hunter, Biochem. J. 133, 529-39
(1973). Produktet ble ført gjennom en "Sephadex G-25) kolonne og det endelige material inneholdt mindre enn 0,5% fritt jod. Radiomerket monoklonal antistoff-binding var mer enn 80% med heste anti-mus-antistoff til sepharose og mer enn 75% med CEA-bundet til sepharose.
Det samme monoklonale anti-CEA ble merket med "'"^In under anvendelse av konjugert DTPA som det chelaterende middel i henhold til metoden til Krejcarek og Tucker, Biochemical and Biophysical Research Communication, 77, 581, (1977). Reaksjonsproduktet ble renset ved å føres gjennom en "Sephadex G-75" kolonne. Antigen-binding var sammenlignbar med den som opptrådte med 12 5I merket antistoff. Metoden med merkingen påvirket ikke affinitetskonstanten
Ka, for antistoffet i forhold til uchelatert antistoff
som bestemt ved titrering med CEA.
In vitro stabiliteter av de merkede anti-CEA antistoffer ble bestemt ved inkubering av en del av materialet i en parenteral oppløsning omfattende steril normal saltløsning, U.S.P., ved 37°C i 72 timer og kromatogra£isk bestemmelse av fritt radionuklid. Antistoffoppløsningene ble avsatt på strimler av Baker aluminiumoksyd IB og fremkalt i 50 % vandig aceton. Det proteinbundne radio-
nuklid forblir på plass mens fritt radionuklid vandrer. Etter inkubasjonsperioden viste det radiojoderte material mindre enn 3% aktivitet tilstede som fritt jodid. Lagring ved 4°C reduserte dette med 50%. Under de samme betingelser viste ^"'"In anti-CEA sammenlignbar stabilitet.
2. Fordelingsstudier i hårløse mus.
Vevs-fordelingsstudier av det radiomerkede monoklonale muse-anti-CEA ble gjennomført i hårløse mus som bar 0,1 til 1,0 gm human-kolon-tumorer. Musene veide fra 17 til 28 gm (gjennomsnittlig omtrent 23 gm) . Tumorene var initiert ved subkutan injeksjon av en blanding inneholdende CEA-produserende human-kolon adenocarcinoma-celler. Fordelingsstudier ble gjennomført 3 uker deretter. To forsøk ble gjennomført. I det første ble 19 dyr
delt opp i 4 grupper på 4 til 6 dyr og ble injisert intravenøst (IV) med 0,1 ml av en steril normal salt-
125
løsning U.S.P. inneholdende 0,5 mikrocurie I anti-CEA antistoff (omtrent 0,3 mikrogram antistoff) og som en kontroll bærerfritt 6 7Ga-citrat, et kjent ikke-
spesifikt human-kolon-tumorpåvisende middel. Injeksjoner ble foretatt uten bedøvelse -under anvendelse av en 100 mikroliter Hamilton-sprøyte for å sikre nøyaktighet. Dyr hvori dosen delvis infiltrerte i halen ble utelatt
fra undersøkelsen. Etter injeksjon ble musene anbragt i sterile metaboliske bur med forhøyet trådnettgulv for oppsamling av urin og avføring. Under gulvet var steril 4x4 trådnetting fylt på en slik måte at den ikke kunne gnages av dyrene. Dyrene, holdt i et rent rom ved 4°C, med steril foring og vann ad libitum, ble avlivet i grupper 4, 24, 48 og 72 timer etter injeksjonen av spor-stoffet.
Musene ble bedøvet med eter og blodprøver ble oppnådd ved direkte kardial-punktur. Musene ble så avlivet ved hjelp av servikal dis-lokalisering. Under etterfølgende disseksjon ble tumoren, lever, nyrer, muskel, hjerte, lunge, femur og milt fjernet,- renset 2 ganger i vann, 1 gang i 10% formalin, tørket av og veid i våt tilstand på en analyse-vekt. Intakt mave og innvoller ble også fjernet og målt. Blod, muskel og ben ble antatt å representere henhv.
7, 40 og 10% av den totale kroppsvekt for beregninger om
total organopptagning. De andre organer ble veid samlet.Radioaktivitets-bestemmelser ble gjennomført i en auto-gamma-partikkelteller med åpninger anordnet over 27-35 keV fototopp av I og 93 keV fototopp for Ga. Telleren var programmert til å avvise etter 10 minutter eller opptelling til 1 million for å oppnå statistisk signi-fikans for eksemplene med laveste aktivitetsnivåer. Korreksjoner for bakgrunns- og resiprokt bidrag av iostopisk aktivitet mellom åpnings-innstiIlingene ble gjort ved å anvende preparerte kilder og løse simultan-ligninger. Aktiviteten i prøvene ble så sammenlignet med standarder for det injiserte material, med resultater uttrykt som % injisert dose pr. gram og % injisert dose pr. organ. Forhold mellom tumor og vev ble beregnet fra dataene for % dose/gm. Aktivitet i tarmer, urin og avføring ble beregnet som % av totalt injisert dose.
I det annet forsøk ble 37 hårløse mus som bar tumorer
vokst fra samme humankolon-kreftceller delt inn i 5 grupper på 7 til 8 dyr. En gruppe tjente som en kontroll og
125
ble samtidig injisert IV med en mikro-curie av I human-serum albumin (0,01 mg USA) og 3 mikrocurie bærerfri ^^In-citrat (0,01 mg citrat) og avlivet 48 timer etter injeksjon. I de resterende 4 grupper mottok dyrene samtidig injeksjoner av 3 mikrocurie ^^"In-merket anti-CEA (1,5 mikrogram antistoff) og 5 mikrocurie bærerfritt 6 7Ga-citrat. Gruppene ble avlivet etter henholdsvis 4, 24,
48 og 72 timer. Vevs-disseksjon, prøvetagning for radiobedømmelse, telleteknikk og beregninger ble gjennom-ført som beskrevet i det foregående. I tilfellet med<111>I-n ble spektrometret innstilt til å telle 247 keV fototoppen under anvendelse av en keV åpning (210-250 keV)
men Ga ble telt med en 30 keV åpning overlappende 93 keV fototoppen. Disse innstillinger resulterte i mindre enn 10% resiproke bidrag av radioaktivitet.
Som vist i fig. 1, økte konsentrasjonene av ^^^In
anti-CEA som lokaliserte seg i tumoren stadig under tidsforløpet av forsøket. 23% av den injiserte dose var akkumulert etter 72 timer og resultatene antyder at dette nivå ville vært ennå høyere hvis senere prøve-tagning var blitt forsøkt. Blodnivået sank derimot under tidsperioden. Leveren viste en hurtig opptagning etter 4 timer etterfulgt av en periode med liten endring og deretter en økning til 72 timer. De andre vev viste liten variasjon over den undersøkte tidsperiode.
6 7
Innholdet av Ga i tumoren forble ganske konstant under forløpet av forsøket, idet den var omtrent 1/4 av tilsvarende for "L"L1In anti-CEA etter 72 timer. Blodnivået av 6 7Ga falt stadig mens leverkonsentrasjonen viste et mønster noe lignende det "'""'"'''Indium-antistof f. Muskel-6 7
konsentrasjonen av Ga falt inntil 48 timer hvoretter den utjevnet seg, mens benkonsentrasjonen forble den samme hele tiden.
Mengden av jod i tumoren toppet seg etter 4 timer idet
den til å begynne med var noe større enn mengdene av "'""''"''Indium og sank deretter ujevnt under resten av forsøket, idet den bare var 1/10 av"'"''"■''In ved 72 timer. Ved dette tidspunkt viste det seg dobbelt så • mye<67>Ga i tumoren
125 125
som I. Telletakten for I i alle vev sank hurtig fra deres maksimum ved 4 timer og i noen tilfeller ble bakgrunnsnivåer oppnådd etter 48 timer.
Ekskresjons-dataene (fig. 2) viser en stadig økning i urinveis ''""'""''In mellom 24 og 72 timer og når et maksimum på 14% av den injiserte dose. Avføringskonsentrasjonen av<III>In forble ganske konstant ved 2 4 og 48 timer og økte deretter til 17% ved 72 timer, mens mengden i innvollene forble forholdsvis konstant over hele perioden
og aldri oversteg 5% av dosen.
6 7
Ga ekskresjonsmønstret var ganske likt mønstret for
■^■^In men • viste likevel mer sporstoff i innvollene og avføring enn iakttatt på ^ In og mindre i urinen.
125
Nesten 60% av I radioaktiviteten ble fjernet i
urinen under de første 24 timer og 75% etter 48 timer.
125
Ytterligere 5% av I gikk tapt i avføringen. Etter
72 timer var således omtrent 80% av<125>I initialt injisert blitt utskilt av dyret. Kromatografering av 125
I i urinen, viste at det meste av det var fritt
jodid med en annen species antagelig representerende
125
fritt I kompleksdannet til noe annet enn et protein.
Fig. 3 presenterer data for ^"^In merket anti CEAved 48 timer og sammenligner den med ^Indium-citrat og -*-2^I HSA. ''"In-eit rat ble anvendt, som en kontroll for eventuelt indium som kunne ha dissosiert fra antistoff,
125
mens I HSA ble anvendt som en ikke-spesifikk protein-kontroll. In anti-CEA demonstrerte et helt forskjellig fordelingsmønster fra "^^In-citratet og konsentrerte mer effektivt i tumoren med en faktor på 10. Opptak av de to sporstoffer av de andre vev var også forskjellige. Tumorkonsentrasj onene av<125>I H§A var 20% av<11>''"In anti-125 125
CEA, men fremdeles 50% større enn for anti-CEA. ii-.HSA fordeling i ikke-tumorvev, er også mye forskjellig fra tilsvarende for ^"^In anti-CEA-produktet. Det er spesielt
125
signifikant at I HSA, som lenge har vært ansett som et stabilt iodert protein, viste nesten 60% utskilling
(43% i urinen) etter 48 timer, bemerkelsesverdig i samsvar med det foregående funn at 12 5I anti-CEA ble også
funnet i urinen. Urinveisfraksjonen representerer sannsynligvis fritt jod.
Forholdet tumor/vev (fig. 4) viser ^"^"'"in anti-CEA
som overlegen i forhold til 6 7Ga med hensyn til alle vev med unntagelse av blod, som var omtrent
6 7 12 S
det samme som for Ga i dette tilfellet. I anti-CEA forhold, mens de øyensynlig foretrekkes fremfor dem
111T 67- ..
som vises av In og Ga i noen vev, er misvisende da de skriver seg fra lave<125>I nivåer i normalt vev snarere enn fra lokalisering i tumoren.
I lys av de foregående forsøk er 12 5I anti-CEA klart
ikke egnet som tumorlokaliserende middel. Den hurtige og utstrakte de-halogenering nedsetter tumor-sporstoff-konsentrasjonen og øker blodbakgrunnen og dette er pro-hibitivt for dets bruk ved påvisning uten sofistikert subtraksjonsteknikk. Ved 72 timer inneholder tumoren således den dobbelte mengde av det ikke-spesifikke<67>Ga på en pr. gram. basis som<125>I, og videre er forholdene tumor/blod bedre for 6 7Ga enn for det.ioderte antistoff. Når man tar i betraktning at 6 7Ga er ansett som ikke egnet for avbilding av adenocarcinoro i kolon, forklares lett de vanskeligheter som Mach et al,
støtte på, N.Eng. J. Med. 303, 5-10 (1980). Dataene
125
som anvender I demonstrerer utvetydig at i fravær
131
av subtraksjonsteknikk, hvis I ble anvendt, ville
131
meget store doser av det I merkede material matte bli tilført for å oppnå de nødvendige tumor-konsentrasjoner for effektiv avbilding. Dette ville resultere i at klienten mottok en høy strålingsdose som skyldes den
8 døgns fysikalske halveringstid og 608 keV beta-la 4- ' 131X
komponenten i I.
I motsetning hertil tillater den store prosentandel av
den injiserte dose av ^"^in anti-CEA som innføres i tumoren og de mer gunstige fysikalske egenskaper av ^"^in injeksjon av mindre mengder av den radio-farmasøytiske substans, mens avbildningen forbedres og strålingsdosen
reduseres for klienten.
Forholdene tumor/bakgrunn som dannes av ^"^In anti-CEA er godt innenfor det området som kreves for avbildnings-formål pga. den store grad av radionuklid-lokaliserihg i tumoren. Videre antyder dataene at tumoren oppnår radiomerking som ellers var blitt innlemmet i eller var knyttet til andre vev.
Individuelle mus ble fotoavsøkt 4, 24, 48 og 72 timer etter injeksjon av<111>ln-merket anti-CEA under anvendelse av et gamma-kamera av typen "Phogam H P Anger". Etter 4 8 timer var tumoren godt definert uten behov for å gripe til subtraksjonsteknikk. Etter 72 timer var tumor-definisjonen ytterligere forbedret.
Det er vel kjent at CEA og noen andre tumor-assosierte antigener sekreteres eller utskilles av tumoren. I slike tilfeller vil forekomsten av bakgrunnsstråling som opptrer på grunn av at antigenet sirkulerer i blodet eller andre vev, og kombineres med merket antistoff reduseres ved initialt å tilføre umerket antistoff for å kombi-nere med sirkulerende antigen. Dette vil også ha tendens til å redusere den høyere leveropptagning av merket antistoff. Etter en passende periode tilsettes merket antistoff og klienten fotoavsøkes for å bestemme mulige steder for lokalisert bestråling.
Mens den foregående drøftelse har påpekt bruken av et enkelt monoklonaltantistoff merket med et radionuklid,
er det også mulig å anvende to eller endog flere merkede monoklonale antistoffer for forskjellige antigeniske determinanter. De forskjellige anti-stoffer selekteres til å være ikke-interfererende med bindingen av antigenet i et annet antistoff. Ved å anvende flere, ikke-interfererende merkede antistoffer kan tumor-avbildningen forbedres da antigenet vil ha en høyere kapasitet for
nyttig for avbilding av en tumor hvor assosiert antigen er tilstede i en lav konsentrasjon.
Claims (1)
- Fremgangsmåte for fremstilling av et monoklonalt antistoff til et tumorassosiert antigen hvortil et metall-radionuklid er bundet,karakterisert vedat det monoklonale antistoff merkes med et metall-radionuklid ved hjelp av et chelaterende middel som er konjugert til antistoffet, idet det som chelaterende middel anvendes et polyamino-karboksyl-syre-chelaterende middel med formelhvori X er 0 eller et helt tall, y er 1 eller 2, z er et helt tall fra 1 til 7 og R er hydrogen eller en gruppe hvormed det chelaterende middel er konjugert med antistoffet eller en gruppe som påvirker bindingskonstanten av det chelaterende middel for radionuklidet.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO913586A NO177454C (no) | 1981-10-27 | 1991-09-11 | Diagnostisiseringsmiddel |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US31528681A | 1981-10-27 | 1981-10-27 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO823530L NO823530L (no) | 1983-04-28 |
| NO169947B true NO169947B (no) | 1992-05-18 |
| NO169947C NO169947C (no) | 1992-08-26 |
Family
ID=23223718
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO823530A NO169947C (no) | 1981-10-27 | 1982-10-25 | Fremgangsmaate for fremstilling av et monoklonalt antistoff til et tumorassosiert antigen |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58135820A (no) |
| AT (1) | AT392004B (no) |
| BE (1) | BE894829A (no) |
| CA (1) | CA1202892A (no) |
| CH (1) | CH653040A5 (no) |
| DE (1) | DE3239410A1 (no) |
| DK (1) | DK164682C (no) |
| ES (2) | ES516797A0 (no) |
| FI (1) | FI82379C (no) |
| FR (1) | FR2515046B1 (no) |
| GB (1) | GB2109407B (no) |
| IL (1) | IL67068A0 (no) |
| IT (1) | IT1153857B (no) |
| LU (1) | LU84441A1 (no) |
| NL (1) | NL8204108A (no) |
| NO (1) | NO169947C (no) |
| SE (1) | SE8206073L (no) |
| ZA (1) | ZA827806B (no) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4957939A (en) * | 1981-07-24 | 1990-09-18 | Schering Aktiengesellschaft | Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging |
| CA1225930A (en) * | 1982-06-07 | 1987-08-25 | Otto A. Gansow | Metal chelate conjugated monoclonal antibodies |
| US4741900A (en) * | 1982-11-16 | 1988-05-03 | Cytogen Corporation | Antibody-metal ion complexes |
| SE8401945L (sv) * | 1983-04-08 | 1984-11-13 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Antikropp mot cancer i urinblasan hos menniska |
| GB2139645A (en) * | 1983-04-08 | 1984-11-14 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Antibody to human prostrate cancer |
| JPS59199636A (ja) * | 1983-04-26 | 1984-11-12 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk | 放射性診断剤 |
| US4677058A (en) * | 1983-05-19 | 1987-06-30 | Karl Tryggvason | Detecting malignant cells with monoclonal antibodies specific to type IV collagenase enzyme |
| US4732864A (en) * | 1983-10-06 | 1988-03-22 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Trace-labeled conjugates of metallothionein and target-seeking biologically active molecules |
| JPS60201260A (ja) * | 1984-03-27 | 1985-10-11 | Yamasa Shoyu Co Ltd | 心疾患診断薬 |
| JP2507982B2 (ja) * | 1984-04-10 | 1996-06-19 | 武田薬品工業株式会社 | ヒト癌胎児性抗原反応性モノクロ―ナル抗体の製造法 |
| US4898724A (en) * | 1984-06-04 | 1990-02-06 | The Dow Chemical Company | Organis amine phosphonic acid complexes for the treatment of calcific tumors |
| CA1260827A (en) * | 1984-08-31 | 1989-09-26 | Richard C. Siegel | Antibody-metal ion complexes |
| US4837003A (en) * | 1984-09-13 | 1989-06-06 | Mallinckrodt, Inc. | Radiolabeled antibody fragments |
| US4659839A (en) * | 1984-10-10 | 1987-04-21 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for radiolabeled antibody fragments |
| US5242679A (en) * | 1985-01-14 | 1993-09-07 | Neorx Corporation | Metal radionuclide labeled proteins for diagnosis and therapy |
| US4897255A (en) * | 1985-01-14 | 1990-01-30 | Neorx Corporation | Metal radionuclide labeled proteins for diagnosis and therapy |
| US4986256A (en) * | 1985-02-28 | 1991-01-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Use of paramagnetic metalloporphyrins as contrast agents for tumors in MRI imaging |
| US4824986A (en) * | 1985-04-26 | 1989-04-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Metal chelate protein conjugate |
| US4830847A (en) * | 1985-06-28 | 1989-05-16 | The Procter & Gamble Company | Diphosphonate-derivatized macromolecules |
| US4732974A (en) * | 1986-03-05 | 1988-03-22 | Mallinckrodt, Inc. | Metal ion labeling of carrier molecules |
| US4877868A (en) * | 1986-03-12 | 1989-10-31 | Neorx Corporation | Radionuclide antibody coupling |
| US5082930A (en) * | 1986-05-29 | 1992-01-21 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins |
| US4861869A (en) * | 1986-05-29 | 1989-08-29 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins |
| US4925804A (en) * | 1986-06-17 | 1990-05-15 | Baxter International Inc. | Interligand metal transfer assay |
| US4831175A (en) * | 1986-09-05 | 1989-05-16 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Backbone polysubstituted chelates for forming a metal chelate-protein conjugate |
| US5246692A (en) * | 1986-09-05 | 1993-09-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services | Backbone polysubstituted chelates for forming a metal chelate-protein conjugate |
| FR2604092B1 (fr) * | 1986-09-19 | 1990-04-13 | Immunotech Sa | Immunoreactifs destines a cibler les cellules animales pour leur visualisation ou leur destruction in vivo |
| CA1340014C (en) * | 1986-10-27 | 1998-08-25 | Bryan Michael Longenecker | Carcinoma-marking monoclonal antibodies elicited with synthetic asialo-gmi antigen |
| US5057302A (en) * | 1987-02-13 | 1991-10-15 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| US5227474A (en) * | 1987-02-13 | 1993-07-13 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| DE3710730A1 (de) * | 1987-03-31 | 1988-10-20 | Schering Ag | Substituierte komplexbildner, komplexe und komplexsalze, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische mittel |
| US5053493A (en) * | 1987-04-02 | 1991-10-01 | Centocor Cardiovascular Imaging Partners, L.P. | Method for labeling antibodies with a metal ion |
| US5177192A (en) * | 1987-04-02 | 1993-01-05 | Centocor, Incorporated | Method for labeling antibodies with a metal ion |
| US4838274A (en) * | 1987-09-18 | 1989-06-13 | Air Products And Chemicals, Inc. | Perfluoro-crown ethers in fluorine magnetic resonance imaging |
| US5217704A (en) * | 1987-11-06 | 1993-06-08 | Abbott Laboratories | Methods and materials for the preparation of metal labelled antibody solutions |
| US5648471A (en) * | 1987-12-03 | 1997-07-15 | Centocor, Inc. | One vial method for labeling antibodies with Technetium-99m |
| US4867962A (en) * | 1988-02-26 | 1989-09-19 | Neorx Corporation | Functionally specific antibodies |
| US4988496A (en) * | 1988-05-31 | 1991-01-29 | Neorx Corporation | Metal radionuclide chelating compounds for improved chelation kinetics |
| US5075099A (en) * | 1988-05-31 | 1991-12-24 | Neorx Corporation | Metal radionuclide chelating compounds for improved chelation kinetics |
| US5218128A (en) * | 1988-06-15 | 1993-06-08 | Centocor, Inc. | Bifunctional coupling agents and radionuclide labeled compositions prepared therefrom |
| US5688488A (en) * | 1989-04-03 | 1997-11-18 | Purdue Research Foundation | Composition and method for tumor imaging |
| US5792444A (en) * | 1989-05-09 | 1998-08-11 | The General Hospital Corporation | Labeled chemotactic peptides to image focal sites of infection or inflammation |
| US5807535A (en) * | 1992-07-31 | 1998-09-15 | Australian Nuclear Science & Technology Organisation | Metal complexes of hydroxyaryl containing aminocarboxylic acid chelating agents |
| ES2146217T3 (es) * | 1992-07-31 | 2000-08-01 | Australian Nuclear Science Tec | Agentes quelantes de los acidos aminocarboxilicos con hidroxiarilo. |
| US7521531B2 (en) | 1996-08-28 | 2009-04-21 | Immunomedics, Inc. | Methods for the purification of stable radioiodine conjugates |
| US6663866B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-12-16 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| US6558669B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-05-06 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4323546A (en) * | 1978-05-22 | 1982-04-06 | Nuc Med Inc. | Method and composition for cancer detection in humans |
| US4272503A (en) * | 1978-05-25 | 1981-06-09 | New England Nuclear Corporation | Reductant composition for technetium-99m and method for making technetium-99m labelled ligands |
| US4311688A (en) * | 1979-10-29 | 1982-01-19 | Serono Laboratories Inc. | Composition and method for cancer detection in humans |
| DE3173342D1 (en) * | 1980-03-03 | 1986-02-13 | Milton David Goldenberg | Agent for tumor localization and therapy with labeled antibodies and antibody fragments |
-
1982
- 1982-10-25 FR FR8217800A patent/FR2515046B1/fr not_active Expired
- 1982-10-25 NL NL8204108A patent/NL8204108A/nl not_active Application Discontinuation
- 1982-10-25 DE DE19823239410 patent/DE3239410A1/de active Granted
- 1982-10-25 NO NO823530A patent/NO169947C/no unknown
- 1982-10-25 FI FI823633A patent/FI82379C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-10-25 ES ES516797A patent/ES516797A0/es active Granted
- 1982-10-25 AT AT0391682A patent/AT392004B/de not_active IP Right Cessation
- 1982-10-25 GB GB08230356A patent/GB2109407B/en not_active Expired
- 1982-10-26 DK DK474182A patent/DK164682C/da active
- 1982-10-26 IL IL67068A patent/IL67068A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-10-26 ZA ZA827806A patent/ZA827806B/xx unknown
- 1982-10-26 SE SE8206073A patent/SE8206073L/ not_active Application Discontinuation
- 1982-10-26 IT IT23932/82A patent/IT1153857B/it active
- 1982-10-26 CA CA000414208A patent/CA1202892A/en not_active Expired
- 1982-10-26 CH CH6239/82A patent/CH653040A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-10-26 JP JP57188921A patent/JPS58135820A/ja active Granted
- 1982-10-26 LU LU84441A patent/LU84441A1/fr unknown
- 1982-10-27 BE BE0/209345A patent/BE894829A/fr not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-01-31 ES ES529310A patent/ES8505482A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES529310A0 (es) | 1985-05-16 |
| NL8204108A (nl) | 1983-05-16 |
| AT392004B (de) | 1991-01-10 |
| NO823530L (no) | 1983-04-28 |
| CA1202892A (en) | 1986-04-08 |
| IL67068A0 (en) | 1983-02-23 |
| CH653040A5 (de) | 1985-12-13 |
| SE8206073D0 (sv) | 1982-10-26 |
| ZA827806B (en) | 1983-08-31 |
| DK164682B (da) | 1992-08-03 |
| FR2515046B1 (fr) | 1985-11-29 |
| ES8505482A1 (es) | 1985-05-16 |
| ATA391682A (de) | 1990-07-15 |
| DE3239410C2 (no) | 1991-12-19 |
| JPS58135820A (ja) | 1983-08-12 |
| FI823633A0 (fi) | 1982-10-25 |
| IT1153857B (it) | 1987-01-21 |
| BE894829A (fr) | 1983-02-14 |
| ES8404857A1 (es) | 1984-05-16 |
| FR2515046A1 (fr) | 1983-04-29 |
| GB2109407B (en) | 1985-12-18 |
| DK474182A (da) | 1983-04-28 |
| DK164682C (da) | 1992-12-21 |
| IT8223932A0 (it) | 1982-10-26 |
| NO169947C (no) | 1992-08-26 |
| FI823633L (fi) | 1983-04-28 |
| DE3239410A1 (de) | 1983-05-19 |
| LU84441A1 (fr) | 1983-06-13 |
| ES516797A0 (es) | 1984-05-16 |
| JPH0564130B2 (no) | 1993-09-14 |
| FI82379C (fi) | 1991-03-11 |
| SE8206073L (sv) | 1983-04-28 |
| FI82379B (fi) | 1990-11-30 |
| GB2109407A (en) | 1983-06-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO169947B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et monoklonalt antistoff til et tumorassosiert antigen | |
| Bakir et al. | c-erbB2 protein overexpression in breast cancer as a target for PET using iodine-124-labeled monoclonal antibodies | |
| AU613318B2 (en) | Affinity enhancement system | |
| DE69434086T2 (de) | Herstellung und Verwendung von Immunkonjugaten die eine VL-Kette enthalten welche am Asn in Position 18 glykosyliert ist | |
| Zalutsky et al. | Radiohalogenation of a monoclonal antibody using an N-succinimidyl 3-(tri-n-butylstannyl) benzoate intermediate | |
| JPS6270377A (ja) | ハプテンで修飾された診断薬および治療薬の抗体コンプレツクス | |
| Ferreira et al. | Comparison of bifunctional chelates for 64 Cu antibody imaging | |
| Moreau et al. | DOTAGA-trastuzumab. A new antibody conjugate targeting HER2/Neu antigen for diagnostic purposes | |
| Schuhmacher et al. | Multistep tumor targeting in nude mice using bispecific antibodies and a gallium chelate suitable for immunoscintigraphy with positron emission tomography | |
| US6375925B1 (en) | Methods and reagents for non-invasive imaging of atherosclerotic plaque | |
| Gaffar et al. | Experimental studies of tumor radioimmunodetection using antibody mixtures against carcinoembryonic antigen (CEA) and colon‐specific antigen‐p (CSAp) | |
| Wikstrand et al. | Comparative localization of glioma-reactive monoclonal antibodies in vivo in an athymic mouse human glioma xenograft model | |
| Tolmachev et al. | Comparative Evaluation of Anti‐HER2 Affibody Molecules Labeled with 64Cu Using NOTA and NODAGA | |
| Sakahara et al. | Localization of human osteogenic sarcoma xenografts in nude mice by a monoclonal antibody labeled with radioiodine and indium-111 | |
| Alirezapour et al. | Optimized preparation and preliminary evaluation of [64 Cu]–DOTA–trastuzumab for targeting ErbB2/Neu expression | |
| CA2113578A1 (en) | Trifunctional compounds having specificity for multi-drug resistant cells | |
| JP2002531523A (ja) | プレターゲッティング方法を用いるホウ素中性子捕獲療法 | |
| AU2009201892A1 (en) | Anti-met monoclonal antibody, fragments and derivatives thereof for use in tumor diagnosis, corresponding compositions and kits | |
| Qiu et al. | Pretargeted Nuclear Imaging and Radioimmunotherapy Based on the Inverse Electron‐Demand Diels–Alder Reaction and Key Factors in the Pretargeted Synthetic Design | |
| ZIMMER et al. | Radioimmunoimaging of human small cell lung carcinoma with I-131 tumor specific monoclonal antibody | |
| Rea et al. | Site-specifically radioiodinated antibody for targeting tumors | |
| WO1998021581A1 (en) | Methods and reagents for non-invasive imaging of atherosclerotic plaque | |
| AU781426B2 (en) | Monoclonal antibody directed against cells of human renal cell carcinoma | |
| Garkavij et al. | Extracorporeal whole-blood immunoadsorption enhances radioimmunotargeting of iodine-125-labeled BR96-biotin monoclonal antibody | |
| US6291639B1 (en) | Metal-binding cystein-free peptides for diagnostic and therapeutical purposes, methods for their production, and pharmaceuticals containing these compounds |