NO135424B - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- NO135424B NO135424B NO1689/72A NO168972A NO135424B NO 135424 B NO135424 B NO 135424B NO 1689/72 A NO1689/72 A NO 1689/72A NO 168972 A NO168972 A NO 168972A NO 135424 B NO135424 B NO 135424B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- cells
- glucose
- glutaraldehyde
- bacterial cells
- weight
- Prior art date
Links
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 29
- 108700040099 Xylose isomerases Proteins 0.000 claims description 25
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 241000218589 Streptomyces olivaceus Species 0.000 claims description 8
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 22
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 20
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 20
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 12
- 229960002737 fructose Drugs 0.000 description 12
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 11
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 7
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 1
- 108091006112 ATPases Proteins 0.000 description 1
- 102000057290 Adenosine Triphosphatases Human genes 0.000 description 1
- 241000607528 Aeromonas hydrophila Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 101001066878 Homo sapiens Polyribonucleotide nucleotidyltransferase 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 1
- 102000006746 NADH Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010086428 NADH Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000002681 Polyribonucleotide nucleotidyltransferase Human genes 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000187759 Streptomyces albus Species 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 150000002303 glucose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Det er velkjent at glucoseisomeraseenzym kan anvendes for å katalysere omdannelsen av glucose (dextrose) til fructose (levulose) som har en hbyere sotningskraft enn utgangsmaterialet. Det er også kjent at glucoseisomerase produseres ved fermentering i passende nær-ingsmedia av organismer, slike som Pseudomonas hydrophila, Streptoray-ces flavovireus, Streptomyces echinatur, Streptomyces achromogenus, Streptomyces albus og Streptomyces olivaceus. Glucoseisomerase dannes inne i bakteriecellene; som gror under dets produksjon. Cellene kan filtreres fra fermenteringsvæsken og anvendes direkte som en kilde til glucoseisomerase. Alternativt kan cellene fjernes ved filtrering og derefter åpnes på velkjent måte. De resulterende, åp-nede celler og frigjort innhold kan derefter anvendes som en kilde for glucoseisomerase. Ytterligere kan cellene åpnes, og celleavfal-let fjernes ved sentrifugering. Den overflytende væske kan derefter anvendes direkte som en kilde for glucoseisomerase, eller enzymet kan gjenvinnes i form av pulver fra denne væske ved velkjente teknikker. Glucoseisomerase fremstillet ved de tidligere kjente teknikker ble ikke kommersielt nyttige på grunn av den høye omkostning ved anvendelse av enzymene. Enzymproduksjonsomkostnin-gene var høye på grunn av det kostbare næringsmedium som er nødven-dig, samt de relativt lave utbytter av enzymet sammenlignet med produksjonsteknikker fra andre enzymer. Det er derfor nødvendig at glucoseisomerase lar seg gjenvinne efter bruk og derefter bruke påny til ytterligere omsetning av glucose til fructose.
Glucoseisomerase er mest egnet for gjenvinning og fornyet bruk hvis den fremdeles inneholdes i de originale bakterieceller. Bakteriecellene kan lett fjernes fra det sukkerholdige omdannelsesmedium. Imidlertid forhindrer kjente teknikker fornyet bruk av bakterieceller, da cellene taper ca. 50 % av sin glucoseisomeraseaktivitet for hver gangs bruk.
Ifølge foreliggende oppfinnelse angis en fremgangsmåte for stabilisering av glucoseisomerase i bakterieceller som omfat-ter en behandling med glutaraldehyd av bakterieceller inneholdende glucoseisomeraseaktivitet.
Fra Biochim. Biphys. Acta 1971, 225(1), 140-50 er det kjent å behandle micrococcus lysodeikticus membraner med glutaraldehyd for å forbedre retensjonen av ATPase, NADH dehydrogenase og polynucleotid fosforylase. De membraner som behandles er av-fall fra sprukne celler.
Der gis imidlertid i denne publikasjon ingen opplys-ninger om hvorvidt en slik behandling kan utføres på hele, uspruk-ne celler, heller ikke om stabilisering av andre enzymer slike
.som glucose isomerase.
Bakterieceller inneholdende glucoseisomeraseaktivitet og som er nyttige ved fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, kan fremstilles ved velkjente fremgangsmåter. De foretrukne enzymholdige celler produseres.ved dyrkning under submerse,
aerobe betingelser, av en kultur av Streptomyces olivaceus NRRL
3583 eller mutanter derav i et medium inneholdende passende nær-ingsmidler. De resulterende bakterieceller skilles fra fermenteringsvæsken ved filtrering eller sentrifugering.
De gjenvundne bakterieceller suspenderes derefter i et vandig medium og blandes med glutaraldehyd. Glutaraldehyd anvendes i en mengde på 0,1 - 50 vekt%, regnet på cellenes tørrvekt.
Fortrinsvis anvendes glutaraldehyd i en mengde på 10 - 50 vekt%
regnet på de tørre cellers vekt.. Bakteriecellene har initialt en pH på ca. 8,5. Mens bakteriecellene behandles med glutaraldehyd, faller pH sluttelig til 6,5. Hvis den initiale pH er over
8,5, eller pH under behandlingen faller under 6,5, bør tilsettes et passende puffermateriale for å bibeholde pH av bakteriecellene innen området fra 6,5 til 8,5.
Bakteriecellene bør behandles med glutaraldehyd fra
30 minut til 2 timer. Den foretrukne behandlingstid er 1-1,5 timer.
Behandlingstemperaturen er ikke kritisk og kan passende være i området 15 - 60°C.
Glucoseisomeraseaktiviteten for bakteriecelleutgangsmate-rialet og glutaraldehydbehandlet materiale ble utldersokt ved folgende fremgangsmåte: En 62,5 %'s (vekt/volumbasis) vandig oppldsning av glucose ble fremstillet ved langsom tilsetning, under omroring, av 625 g vann-fri glucose til 300 ml varmt destillert vann. Opplbsningen ble av-kjblt til romtemperatur og tilsatt 125 ml 1 molar vandig opplosning av tris-(hydroxymethyl)-aminomethan ved pH 8,5, 125 ml 1 molar vandig opplosning av vandig magnesiumsulfat og 50 ml 0,025 molar vandig opplosning av cobolt(II)klorid. Den erholdte blanding ble fortynnet til 1 liter med destillert vann.
En 10 ml porsjon av den ovenfor nevnte glucoseopplosning ble tilsatt til en 25 ml måleflaske. Tilstrekkelig enzym, for bestemmelse, ble tilsatt for å gi en reduksjon av den spesifikke rotasjon, som definert i det folgende, på 2,9 - 7,5 . Flaskeinnholdene ble fortynnet til 25 ml med destillert vann, og den erholdte blanding inkubert ved 60°C i 2 timer. Reaksjonen ble derefter stoppet ved tilsetning av 1 ml 0,5 molar vandig opplosning av perklorsyre. Blandin-gen ble derefter sentrifugert ved 15.000 omdr./min. i 20 minutter, og den optiske rotasjon (i grader) av den ovenfor liggende væske ble be-stemt ved velkjente teknikker. En blindprove gjennomgikk den samme prosedyre, men uten tilstedeværelse av enzym. Den optiske rotasjon
o o 25
av blindprbven ble også målt. Den spesifikke rotasjon [ajp av pro-ven eller blindprbven var 2a, eller 2 ganger den observerte optiske rotasjon. Den prosentvise omdannelse av glucose til fructose ble beregnet efter folgende formel:
Enzymaktiviteten i glucoseisomeraseenheter (GIU) av enzym-prbven under bestemmelse ble beregnet ved folgende formel:
hvori u-g fructose dannet ble beregnet ved multiplikasjon av den ovenfor beregnede "Prosent glucoseomdannelse" verdi med 6,25 x 10^. En glucoseisomeraseenhet er den mengde enzym som vil omdanne et |x mol. glucose til fructose pr. minutt under analysebetingelsene.
Oppfinnelsen beskrives mere detaljert i de folgende eksem-pler:
Eksempel 1
En kultur av Streptomyces olivaceus NRRL 3583 ble overfort til en omrdrt luftet fermenteringsanordning inneholdende 10 liter av en vandig blanding inneholdende 0,7 % xylose, 0,3 % raffinert maissti-velse, 1 % pepton, 0,50 % kjottekstrakt, 0,25 % gjærekstrakt, 0,50 % natriumklorid og 0,05 % magnesiumsulfat, og som hadde en pH på 7,0. Alle de ovenfor gitte prosentverdier er beregnet på vekt/volumbasis. Rdreanordningen roterte med 400 omdr./min, og ble fort gjennom mediet med en hastighet på 3 volumdeler luft pr. volum medium pr. minutt. Fermenteringen ble fortsatt 24 timer ved 32°C. Den fermenterte væske ble derefter sentrifugert ved 40.000 omdr./min for separasjon av bakteriecellene. En del av bakteriecellene ble frosset og lyofilisert. 3 g frysetorkede, hele deiler ble suspendert i 50 ml av en vandig opplosning av tris-(hydroxymethyl)-aminomethan ved en pH på 8,5, og den omrorte suspensjon ble behandlet med 0,1 g av en 25 vekt% vandig glutaraldehydopplosning (0,83 vekt% glutaraldehyd regnet på torrvekten av cellene) under omrdring ved romtemperatur (ca. 20°C) i 1,5 timer. De behandlede celler hadde en aktivitet på 145 GIU/g, ble oppsamlet ved filtrering og tilsatt til en 62,5 vekt%'s vandig opplosning av glucose inneholdende 0,001vekt% coboltklorid og 0,01 vekt% magnesiumklorid. Den erholdte blanding fikk reagere ved 70°C i 2 timer for å omdanne ca. 4,5 % av glucosen til fructose. Cellene ble skilt fra: reaksjonsblandingen ved sentrifugering, og fructose-dextro-seblandingen dekantert.
Cellene ble analysert og funnet å ha. den samme glucoseisomeraseaktivitet som for anvendelse. Cellene ble derefter igjen anvendt til å behandle en frisk glucoseopplSsning under de samme betingelser som beskrevet ovenfor, og derefter gjenvunnet og analysert. Denne fremgangsmåte ble gjentatt for ialt 12 gangers bruk av cellene. Disse celler bibeholdt 56 % av den initiale glucoseisomeraseaktivitet. Celler som ikke hadde vært behandlet med glutaraldehyd mistet i det vesentlige all deres glucoseisomeraseaktivitet efter å ha vært anvendt to ganger.
Eksempel 2
En fermenterende væske inneholdende Streptomyces olivaceus NRRL 3583 bakterieceller ble fremstillet på samme måte som beskrevet i eksempel 1. Endel av denne væske ble sentrifugert, og en 3 grams porsjon av fuktige, hele bakterieceller ble isolert. Disse celler ble derefter suspendert i 50 ml vann og behandlet med 0,1 g av en 25 vekt%'s vandig opplosning av glutaraldehyd i et pH område på 6,5 - 8,5 ved romtemperatur i 1 time. De behandlede celler hadde en aktivitet på 265 GIU/g og ble oppsamlet ved filtrering og anvendt for å omdanne glucose til fructose på den måte som er beskrevet i eksempel 1. Cellene ble gjenvunnet og brukt påny med ny glucose for ialt tolv ganger. Cellene bibeholdt 60,7 % av den initiale glucoseisomeraseaktivitet.
Eksempel 3
En fermenterende væske inneholdende Streptomyces olivaceus NRRL 3583 ble fremstillet på samme måte som beskrevet i eksempel 1.
En aliquot mengde av den totale væske inneholdende 3 g hele celler ble blandet med 0,2 g av en 25 vekt%'s vandig glutaraldehydopplosning (1,67 vekt% glutaraldehyd regnet på torrvekten av cellene) og omrdrt ved romtemperatur i et pH område på 6,5 - 8,5 i en time. De behandlede celler hadde en aktivitet på 271 GIU/g og ble oppsamlet ved filtrering og anvendt til å omdanne glucose til fructose på samme måte som beskrevet i eksempel 1. Cellene ble gjenvunnet og brukt påny med ny glucose ialt tolv ganger. Cellene bibeholdt 61,6 % av den initiale glucoseisomeraseaktivitet.
Eks erope 1 4
En fermenterende væske inneholdende Streptomyces olivaceus NRRL 3583 bakterieceller ble fremstillet på samme måte som beskrevet i eksempel 1. En aliquot del av den totale væske inneholdende 4 g hele celler ble blandet med 0,4 g av en 25 vekt%'s vandig glutaraldehydopplosning (2,5 vekt% glutaraldehyd regnet på torrvekten av cellene) og omrdrt ved romtemperatur i en time. Ingen pH kontroll ble anvendt. Ved reaksjonens begynnelse hadde celleblandingen en pH på 8,4. Ved slutten av reaksjonsperioden var pH 6,8. De behandlede celler hadde en aktivitet på 387 GIU/g og ble oppsamlet ved filtrering og anvendt for å omdanne glucose til fructose, som beskrevet i eksempel 1. Cellene ble gjenvunnet og brukt påny med ny glucoseopplosning ialt fem ganger. Cellene bibeholdt lOO % av den initiale glucoseisomeraseaktivitet.
Eksempel 5
En fermenterende væske inneholdende Streptomyces olivaceus NRRL 3583 bakterieceller ble fremstillet på samme måte som beskrevet i eksempel 1 i et 378 liters forgjæringskar. Denne væske hadde en total aktivitet på 1.350.000 GIU og inneholdt 3,18 kg bakterieceller regnet på torrvekt (425 GIU/gm). pH verdien for væsken ble justert til 8,5 ved tilsetning av natriumhydroxyd. En 3,18 kg porsjon av 50 vekt%'s vandig glutaraldehydopplosning fortynnet til en konsentrasjon på 0,5-0,6 % (vekt/volumbasis) ble tilsatt til væsken under omroring i lopet av en periode på 30 - 40 minutter (50 vekt% glutaraldehyd regnet på torrvekten av cellene). Den erholdte blanding fikk reagere ved romtemperatur i 1,5 timer under mild omroring. En 0,5 %'s (vekt/volum-basis) porsjon diatoméjord filtrerhjelpemiddel ble derefter tilsatt og forgjæringsvæsken filtrert i et roterende vakuumfilter. Filterkaken ble vasket med vann for å fjerne rester av forgjæringsvæsken. De oppsamlede bakterieceller hadde en total aktivitet på 1.215.000 GIU eller 90 % av den initiale aktivitet.
En glucoseopplosning ble fremstillet ved å blande 102,1 kg glucose i 208,2 1 vann (49,2 % glucose på vekt/volumbasis. Til denne opplosning ble tilsatt coboltklorid i en mengde på 0,001 %
(vekt/volumbasis) og magnesiumklorid i en mengde på 0,01 % (vekt/vo-lumbasis). En porsjon av den ovenfor fremstillede glutaraldehydbe?-handlede bakterieceller med en total aktivitet på 407.250 GIU ble og-så tilsatt til glucoseoppldsningen. Den resulterende blanding ble omrdrt ved 60°C 24 timer, under hvilket tidsrom pH ble bibeholdt på 7,7 - 7,9 ved tilsetning av natriumhydroxyd. Bakteriecellene ble filtrert fra reaksjonsblandingen som ble analysert til å inneholde 40,2 % fructose. De ovenfor oppsamlede bakterieceller ble derefter anvendt "i en ny glucoseopplosning på samme måte som beskrevet ovenfor. Denne prosedyre ble gjentatt inntil bakteriecellene var brukt ialt ni ganger. Ved det niende forsok hadde glucoseisoraeraseaktiviteten av - bakteriecellene dannet 38,8 % fructose, hvilket fremdeles var 96,6 % av den initiale aktivitet.
Claims (3)
1. Fremgangsmåte ved stabilisering av glucoseisomerase i hele bakterieceller, karakterisert ved at bakteriecellene inneholdende glucoseisomeraseaktivitet behandles med glutaraldehyd i en mengde på 0,1 - 50 vekt%, regnet på cellenes tørr-vekt, og ved en pH på fra 6,5 til 8,5.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at glutaraldehyd anvendes i en mengde på 10 - 50 vekt%, regnet på cellenes tørrvekt.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at celler av Streptomyces olivaceus behandles med glutaraldehyd.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US14319471A | 1971-05-13 | 1971-05-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO135424B true NO135424B (no) | 1976-12-27 |
| NO135424C NO135424C (no) | 1977-04-05 |
Family
ID=22503004
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO1689/72A NO135424C (no) | 1971-05-13 | 1972-05-12 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3779869A (no) |
| JP (1) | JPS5622514B1 (no) |
| BE (1) | BE783410A (no) |
| BR (1) | BR7202502D0 (no) |
| CA (1) | CA978113A (no) |
| DK (1) | DK130652C (no) |
| FR (1) | FR2137869B1 (no) |
| GB (1) | GB1376983A (no) |
| IL (1) | IL38923A (no) |
| IT (1) | IT1046202B (no) |
| LU (1) | LU65327A1 (no) |
| NL (1) | NL155887B (no) |
| NO (1) | NO135424C (no) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5118518B2 (no) * | 1973-03-07 | 1976-06-10 | ||
| US3957580A (en) * | 1974-03-27 | 1976-05-18 | Pfizer Inc. | Immobilized microbial cells |
| US4001480A (en) * | 1974-08-16 | 1977-01-04 | Swift & Company | Encapsulation process utilizing microorganisms and products produced thereby |
| US3980521A (en) * | 1974-08-28 | 1976-09-14 | Novo Industri A/S | Immobilization of glucose isomerase |
| US3974036A (en) * | 1974-09-03 | 1976-08-10 | Miles Laboratories, Inc. | Process for conditioning bacterial cells containing glucose isomerase activity |
| US4025389A (en) * | 1975-03-13 | 1977-05-24 | Novo Industri A/S | Process and isomerizing glucose |
| US4208482A (en) * | 1976-04-23 | 1980-06-17 | Anheuser-Busch, Incorporated | Immobilization of glucose isomerase |
| AU515471B2 (en) * | 1977-08-23 | 1981-04-02 | Novo Nordisk A/S | Iron containing cell mass glucose isomerase preparation |
| US4212943A (en) * | 1978-03-27 | 1980-07-15 | Miles Laboratories, Inc. | Production of bacterial cell aggregate |
| DK146942C (da) * | 1978-04-19 | 1984-07-30 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzymprodukt |
| US4241185A (en) * | 1979-02-23 | 1980-12-23 | The Great Western Sugar Company | Method of stabilizing α-galactosidase |
| DE3038219A1 (de) * | 1980-10-09 | 1982-04-15 | Süddeutsche Zucker AG, 6800 Mannheim | Verfahren zur herstellung von isomaltulose (6-o-(alpha)-d-glucopyranosido-d-fructose) mit hilfe von immobilisierten bakterienzellen |
| US4337313A (en) * | 1980-12-08 | 1982-06-29 | Miles Laboratories, Inc. | Immobilization of biocatalysts |
| US4355105A (en) * | 1981-03-30 | 1982-10-19 | Miles Laboratories, Inc. | Glutaraldehyde/polyethylenimine immobilization of whole microbial cells |
| US4390627A (en) * | 1981-10-26 | 1983-06-28 | Miles Laboratories, Inc. | Immobilization of the sucrose mutase in whole cells of protaminobacter rubrum |
| US4695455A (en) * | 1985-01-22 | 1987-09-22 | Mycogen Corporation | Cellular encapsulation of pesticides produced by expression of heterologous genes |
| USRE33441E (en) * | 1985-06-14 | 1990-11-13 | Novo Industri A/S | Immobilization of biologically active material with glutaraldehyde and polyazaetidine |
| DK152764C (da) * | 1985-06-14 | 1988-10-03 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzymprodukt |
| US4920052A (en) * | 1988-02-05 | 1990-04-24 | Miles Inc. | Process for producing glucose isomerase |
| AU6029998A (en) * | 1997-01-17 | 1998-08-07 | Regents Of The University Of Minnesota | Dna molecules and protein displaying improved triazine compound degrading ability |
| US6673582B2 (en) | 2000-01-25 | 2004-01-06 | Regents Of The University Of Minnesota | Microbes and methods for remediation |
| US8815569B2 (en) * | 2003-01-08 | 2014-08-26 | Basf Se | Methods for preserving and/or storing cells having a nitrilase or nitrile hydratase activity |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3625828A (en) * | 1969-04-16 | 1971-12-07 | Miles Lab | Process for production of glucose isomerase |
| US3694314A (en) * | 1970-11-09 | 1972-09-26 | Standard Brands Inc | Process for isomerizing glucose to fructose |
-
1971
- 1971-05-13 US US00143194A patent/US3779869A/en not_active Expired - Lifetime
-
1972
- 1972-03-03 CA CA136,193A patent/CA978113A/en not_active Expired
- 1972-03-07 IL IL38923A patent/IL38923A/xx unknown
- 1972-03-15 IT IT49008/72A patent/IT1046202B/it active
- 1972-04-14 GB GB1736172A patent/GB1376983A/en not_active Expired
- 1972-04-25 BR BR2502/72A patent/BR7202502D0/pt unknown
- 1972-04-27 NL NL7205718.A patent/NL155887B/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-05-09 DK DK230772AA patent/DK130652C/da active
- 1972-05-09 LU LU65327D patent/LU65327A1/xx unknown
- 1972-05-10 JP JP4554672A patent/JPS5622514B1/ja active Pending
- 1972-05-12 NO NO1689/72A patent/NO135424C/no unknown
- 1972-05-12 FR FR727217129A patent/FR2137869B1/fr not_active Expired
- 1972-05-12 BE BE783410A patent/BE783410A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BE783410A (fr) | 1972-09-01 |
| CA978113A (en) | 1975-11-18 |
| IL38923A (en) | 1974-10-22 |
| FR2137869A1 (no) | 1972-12-29 |
| DE2223340B2 (de) | 1976-02-19 |
| FR2137869B1 (no) | 1974-07-26 |
| LU65327A1 (no) | 1972-08-23 |
| GB1376983A (en) | 1974-12-11 |
| DK130652C (da) | 1978-11-13 |
| NO135424C (no) | 1977-04-05 |
| JPS5622514B1 (no) | 1981-05-26 |
| NL155887B (nl) | 1978-02-15 |
| US3779869A (en) | 1973-12-18 |
| IT1046202B (it) | 1980-06-30 |
| AU3981372A (en) | 1973-05-10 |
| BR7202502D0 (pt) | 1973-05-24 |
| IL38923A0 (en) | 1972-09-28 |
| DE2223340A1 (de) | 1972-11-23 |
| DK130652B (no) | 1975-03-17 |
| NL7205718A (no) | 1972-11-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO135424B (no) | ||
| US4431737A (en) | Process for the production of alpha-galactosidase and uses of the enzyme thus obtained | |
| Schlegel et al. | The isolation of mutants not accumulating poly-β-hydroxybutyric acid | |
| Takasaki | Studies on Sugar-isomerizing Enzyme: Production and Utilization of Glucose Isomerase from Streptomyces sp. | |
| US3806420A (en) | Process for the preparation of creatinine amidohydrolase | |
| NO155446B (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av isomaltulose. | |
| US3826714A (en) | Thermophilic glucose isomerase enzyme preparation | |
| NO140233B (no) | Fremgangsmaate til gjennomfoering av en enzymkatalysert omdannelse, samt enzymholdig aggregat for bruk ved fremgangsmaaten | |
| NO128540B (no) | ||
| US3645848A (en) | Process of preparing glucose isomerase | |
| HU196841B (en) | Process for the production and immobilization of xylose isomerase and for the isomerization of glycose into fructose | |
| US2821501A (en) | Recovery of starch | |
| Okagbue et al. | Mixed culture of Bacillus circulans WL-12 and Phaffia rhodozyma on different carbon sources: yeast-wall lytic enzyme production and extractability of astaxanthin | |
| NO162347B (no) | Fremgangsmaate for enzymatisk hydrolyse av raffinose. | |
| NO139691B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av glukoseisomeriserende enzym fra mikroorganismer | |
| US2936265A (en) | Proteolytic enzyme and methods for its production | |
| JPH0224519B2 (no) | ||
| JPH0369278B2 (no) | ||
| US4237231A (en) | Method of purifying glucose isomerase and a composition for storing same | |
| D'Souza et al. | Removal of glucose from egg prior to spray drying by fermentation with immobilized yeast cells | |
| JPH06292578A (ja) | 耐熱性マンノースイソメラーゼ及びその製造法並びにこれを用いたマンノースの製造法 | |
| EP0041213B1 (en) | Glucose isomerase, process therefor and use for producing fructose from glucose | |
| AU595144B2 (en) | Process for producing glucose isomerase | |
| DK145679B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af fructose | |
| Illanes et al. | Kinetics of extraction of invertase from autolysed bakers' yeast cells |