NL8401120A - Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek. - Google Patents

Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek. Download PDF

Info

Publication number
NL8401120A
NL8401120A NL8401120A NL8401120A NL8401120A NL 8401120 A NL8401120 A NL 8401120A NL 8401120 A NL8401120 A NL 8401120A NL 8401120 A NL8401120 A NL 8401120A NL 8401120 A NL8401120 A NL 8401120A
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
virus
disease
marek
mdv
vaccine
Prior art date
Application number
NL8401120A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Centraal Diergeneeskundig Inst
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centraal Diergeneeskundig Inst filed Critical Centraal Diergeneeskundig Inst
Priority to NL8401120A priority Critical patent/NL8401120A/nl
Priority to EP85200461A priority patent/EP0159743B1/en
Priority to AT85200461T priority patent/ATE56364T1/de
Priority to DE8585200461T priority patent/DE3579617D1/de
Priority to HU851448A priority patent/HU194496B/hu
Priority to AU41561/85A priority patent/AU574164B2/en
Priority to PCT/NL1985/000014 priority patent/WO1985004588A1/en
Priority to IN234/CAL/85A priority patent/IN163229B/en
Priority to IL74809A priority patent/IL74809A/xx
Priority to ES541930A priority patent/ES8605680A1/es
Priority to ZA852564A priority patent/ZA852564B/xx
Priority to US06/720,176 priority patent/US4673572A/en
Priority to MX851025U priority patent/MX7718E/es
Priority to DD85274954A priority patent/DD232822A5/de
Priority to JP60075246A priority patent/JPS6123A/ja
Priority to YU599/85A priority patent/YU44687B/xx
Priority to CA000478672A priority patent/CA1251397A/en
Publication of NL8401120A publication Critical patent/NL8401120A/nl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A61K39/255—Marek's disease virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16311—Mardivirus, e.g. Gallid herpesvirus 2, Marek-like viruses, turkey HV
    • C12N2710/16334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/816—Viral vaccine for avian species, e.g. poultry or other birds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

NO 32234 - 1 - &
Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van Marek.
De uitvinding heeft betrekking op een viruspreparaat, dat een virus van de ziekte van Marek bevat, dat is verkregen door seriële passage van de virusstam MDV CVI-988 in aviaire celcultures.
Dergelijke preparaten zijn beschreven door Rispens et al. in 5 Avian Dis. _16, blz. 108-125 en 126-138 (1972). De daar beschreven stam MDV CVI-988 was een weinig virulent veldisolaat dat door seriële passages in celcultures. verder kon worden verzwakt. Het viruspreparaat, dat na ongeveer 35 passages in celcultures was verkregen, is sindsdien met succes toegepast voor het inenten van kuikens tegen de 10 ziekte van Marek (Marek's disease, MD).
Er zijn nog andere vaccins tegen de ziekte van Marek in gebruik, namelijk een vaccin op basis van een herpesvirus van kalkoenen (HVT Fc126) (Avian Dis. J4, blz. 413-419 (1970)) en een vaccin verkregen door verzwakking van een virulente MDV-stam (HPRS-16) (J. Gen.
15 Virol. 4, 557-564 (1969)). De MDV-stammen HPRS-16 en CVI-988 behoren serologisch tot hetzelfde serotype 1, terwijl HVT Fc126 tot serotype 3 behoort. Vaccins op basis van CVI-988 en HPRS-16 worden als besmette celsuspensies toegediend vanwege het cel-geassocieerde karakter van MD virussen. Celvrije vaccins op basis van HVT zijn wel beschikbaar, 20 maar ook deze vaccins worden veelal in cel-geassocieerde vorm gebruikt. Ten behoeve van handelsvaccins op basis van MDV CVI-988 werden tot dusver 35ste of 36ste viruspassages gebruikt. De virus-attenuering was aanvankelijk uitgevoerd in eende-embryo fibroblasten (DEF). ·
Eenden zijn echter moeilijk onder SPF (specific pathogen free)-condities 25 te houden. Daardoor zijn per produktiepartij uitgebreide tests noodzakelijk om de afwezigheid van vogel-pathogene micro-organismen te garanderen. Kippen- zijn met minder problemen onder SPF-condities aan te houden. Kippecellen hebben bovendien de voorkeur omdat daarmee geen diersoortvreemde cellen in de MD vaccins worden verwerkt. De CVI-988 30 stam werd derhalve aan kippe-embryo-fibroblasten celcultures (CEF) aangepast en de Nederlandse Marekvaccinproducenten gingen over tot vaccinproduktie in CEF in de periode 1976-1978.
Hoewel het vaccin op basis van MDV CVI-988 in de praktijk zeer bevredigende resultaten geeft, kan het .bij kippen van het ras Rhode 35 Island Red (RIR), die een zeer grote,' genetisch bepaalde gevoeligheid 8401120 — 2 — %
i V
- voor- MD bezitten, MD-lesies veroorzaken, wanneer kuikens worden ingeënt met een dosis, die het tienvoudige bedraagt van de normale dosis (Avian Pathology 6, biz. 395-403 (1977)) *
Er is nu door seriële passage van MDV CVI-988 in eende-embryo-5 fibroblasten (DEF) en 6 maal plaque-zuiveren tussen passages no. 39 en no.· 49 een viruskloon geïsoleerd, die niet pathogeen is voor RIR-kuikens, doch: wel uitstekende immunogene eigenschappen heeft. Met het oog op toepassing als zaaivirus bij eventuele vaccinproduktie werd de betrokken viruskloon aangepast aan CEF door middel van het afwisse-TQ· lend verrichten van viruspassages in CEF en DEF. Deze kloon is in de 65ste CEF passage (MDV CVI-988 CEF^^) gedeponeerd bij de Phabagen Collectie te Utrecht onder nummer PC PV 1.
De uitvinding betreft' nu een viruspreparaat, in het bijzonder een vaccin, dat de genoemde viruskloon bevat.
_15 De virusstam werd- geattenueerd door middel van 52 seriële passages in DEF. Adaptering aan CEF had plaats gedurende de 53ste t/m 63ste passage,· en vervolgens werden passages in CEF-verricht. Eende-èmbryo-fibroblasten werden verkregen door middel van trypsinisatie van embryonen uit 13 dagen bebroede eende-eieren.
20 ·. Kweekvaten (Petrischalen of flesjes) werden af gevuld met celsuspensies waarin. 0,8 x 10 cellen per ml. De cultures werden geïncubeerd bij 37°C in een milieu waarin het percentage CO^ op 5% werd gehouden. Het groeimedium was als volgt samengesteld: ·
Gedemineraliseerd water 818 ml 25 Medium 199 (10x geconcentreerd) 90 ml
NaHCQ3, 1,4% 87 ml
Kalfsserum 60 ml
Natriumbenzylpenicilline' (5Q.Q0Ó I.E./ml)
Streptomycins sulfaat (50.000 IJE./ml) r 5 ml 30 Pimafucin ® (0,25%/ml) -1
Vitamineconcentraat (BME, .Gibco) 1 ml
Glutamine 2,6% - 3,8 ml
Na een kweekperiode van 2 dagen komen aaneengesloten enkelvoudige cellagen (monolayers)- tot stand en kan de besmetting worden 35 uitgevoerd door middel van overeating van een besmette celsuspensie van de voorgaande viruspassage. Vanaf dat moment bevat het onderhouds-medium: / 8401120; - 3 - ‘ t
Gedemineraliseerd water 810 ml Médium F-10 (10x) 50 ml
Medium 199 (10x) 40 ml
Tryptose-fos faat-bouillon 40 ml 5 NaHC03, 1,4% 75 ml
Kalfsserum 30 ml
Antibiotica etc. als bovenvermeld.
Na een kweekperiode van 3 tot 5 dagen, afhankelijk van de virus-dosis in het inoculum, zijn specifieke cytopathologische veranderingen tO waarneembaar.
Tussen de 39ste en 49ste DEF passages werd het virus gekloneerd door middel van 6 viruspassages waarbij steeds met de virusopbrengst van één gelokaliseerde cytopathologische verandering (virus plaque) werd overgeënt. Dergelijke monolayers werden beent met eindpuntver-15 ' dunningen van het virus en het nieuw-gevormde virus werd ter plaatse gelokaliseerd door middel van toevoeging van 0,85% agar aan het medium. De aanpassing aan CEF geschiedde door middel van viruspassages in CEF op een soortgelijke wijze als bovenvermeld voor DEF.
Voor de bereiding van CEF monolayers werd uitgegaan van 11 dagen 20 bebroede SPF kippeëieren. De kweekmedia waren zoals bovenvermeld. In de periode dat de virusstam niet door middel van virusvermeerdering in DEF of CEF werd aangehouden, werd het virus opgeslagen in vloeibare stikstof, bij -196°C. Op deze wijze kan het virus-besmette preparaat onbeperkt worden bewaard, zonder verandering, van virus-25 eigenschappen.
De produktie van commerciële Marekvaccins geschiedt in principe op dezelfde wijze als in het onderzoeklaboratorium. Ten behoeve van de schaalvergroting worden veelal rolflessystemen toegepast in plaats van stationaire kweekvaten. Controletësts op zaaimateriaal, voort-30 gangscontroles tijdens de produktie, onderzoek, op het eindprodukt ten aanzien van afwezigheid van pathogena micro-organisraen en ten aanzien van werkzaamheid geschieden volgens richtlijnen zoals vastgesteld door een internationale groep van deskundigen (Report of the Avian Products Standardization Committee of the International 35 Association of Biological Standardization E.C. Hulse et al. eds. pp 29-42 Geneva, Switzerland; Biostandards). Ten aanzien van de werkzaamheid dienen Marekvaccins aan een bepaalde protective index (beschermende index) te voldoen. Deze kan worden omschreven als de 8401120 -4- v' *V ♦ verhouding tussen, de percentages zieke proefdieren, bij gevaccineerde en niet-gevaccineerde groepen,. Volgend na challenge-besmetting en binnen . een vastgestelde periode» Een meer nauwkeurige methode voor het bepalen van de immunogene eigenschappen van. de viruspreparaten ge-5 schiedt door middel van een PD_Λ-test, zoals beschreven in Journal of
DU
Biological Standardization 9, 15-22 (1981).
De 50% beschermende dosis (PD—) wordt gedefinieerd als het aantal
DU
plaque of focus-vormende eenheden (FFU) - in een in vitro proef bepaald: - die nodig, zijn om. 50%. van het (voor MD)-gevoelige deel van 10: een groep ^specific pathogen, free" (SPF) kuikens te beschermen tegen klinische symptonen en macroscopische lesies van de ziekte van Marek.
De· challenge geschiedt op de 9<Ie levensdag door middel van intra-musculaire injectie met virulent Marekvirus in- een dosering waarmee bij ongevaccineerde kuikens; meer dan 7Q% Mareklesies worden opgewekt.
15 - gedurende een observatieperiode van. 10 weken. De daarbij verkregen proefresultaten kunnen statistisch worden bewerkt met behulp van een computerprogramma dat ontwikkeld is door de UCLA Health Sciences Computing. Facility (BMD03S-, versie van 1 juni. 1964), Nadere gegevens betreffende de toepassing van deze statistische methode zijn vermeld 20 in Journal of Biological Standardization j), 15-22 (1981). Met het genoemde computerprogramma kan men de uitkomsten van de proeven aan een probit-analyse onderwerpen en de helling van de probit-regressie-lijnen bepalen. Hiermee wordt een PD^ berekend op basis van ziekteverschijnselen bij dat deel van de proefdieren dat MD-gevoeligheid ' 25 bezit. De natuurlijke weerstand komt. bij de controlegroepen tot uiting.
, In de volgende, voorbeelden wordt de uitvinding nader toegelicht. Voorbeeld I.
Bepaling van de pathogeniciteit van MDV CVI-988-DEF^ ten opzichte 30 van RIR-kuikens- in vergelijking met die van HVT Fc126 en MDV CVI-988-CEF35.
De proef werd uitgevoerd met SPF Rhode Island Red (RIRj kuikens van het Houghton Poultry Research. Station (Houghton, Engeland). Deze kuikens bezitten een extreme gevoeligheid ten aanzien van de ont-35 wikkeling van MD' lesies.
De kuikens werden in gemodificeerde Horsfall-Bauer isolatoren gehouden. Alle vogels werden, ad libitum met een gebruikelijk voeder gevoerd·» Ze werden dagelijks, gedurende 24 weken, onderzocht op het optreden van klinische symptonen van MD» 8401120 - 5 -
Jr vi
De kuikens werden als eendagskuikens intramusculair ingeënt met 10.000 focus-vormende eenheden van het desbetreffende virus in 0,5 ml weefselkweekmedium, hetgeen, overeenkomt met het tienvoudige van de dosering die in de praktijk wordt toegepast. Alle vaccins bevatten 5 het virus in cel-geassocieerde vorm.
Een groep van 20 BIR-kuikens werd ingeënt met MDV CVI-988-CEF^, het normale, in de handel zijnde vaccin. Een andere groep van 20 RIR-kuikens kreeg het vaccin volgens de uitvinding, MDV CVI-988-DEF^^.
Een groep van 43 RIR-kuikens werd geënt met HVT Fc126.
10 Dode en stervende vogels werden verwijderd en aan autopsie onderworpen. De weefsels werden mikroskopisch onderzocht. Aan het eind van de observatieperiode werden alle nog overgebleven kuikens gedood en makroskopisch en mikroskopisch onderzocht. Zenuwlesies werden geklassificeerd volgens Payne en Biggs, Journal of the National 15 Cancer Institute 39, 281-302 (1967) als infiammatoire lesies (type Bj en lymfomateuze lesies (type A). Verhoogde lymfoide infiltratie en lymfocytaire hyperplasia in viscerale organen werden beschouwd als tekenen van de ziekte van Marek. Het totale aantal kuikens werd gekorrigeerd voor aspecifieke sterfte binnen 21 dagen na het uitkomen.
20 De resultaten zijn weergegeven in de volgende tabel A. Daarin is de verhouding van het aantal kuikens met makroskopische pathologische en/of mikroskopische verschijnselen van MD ten opzichte van het totale aantal aan de proef onderworpen kuikens vermeld.
De inenting van RIR-kuikens met het handelsvaccin MDV
25 CVI-988-CEF__ veroorzaakte verlamming bij 5 van de 8 kuikens. De 3b verlamming werd vergezeld door endoneurale ontsteking van perifere zenuwen en zenuwplexi (lesies van het type B). Twee andere kuikens werden in stervende toestand verwijderd. Deze kuikens vertoonden ook lesies van het type B in perifere zenuwen. Een kuiken, dat gedurende 30 de proef stierf, vertoonde geen enkel verschijnsel van de ziekte van Marek. In de eerste twee weken stierven 12 kuikens door toevallige oorzaken.
In de groep RIR-kuikens, die met het vaccin volgens de uitvinding waren geënt, konden noch makroskopische verschijnselen, noch 35 mikroskopische lesies worden waargenomen. Bij. één RIR-kuiken, dat met HVT FcT26 was geënt, werd. een verlamming waargenomen. Uit mikroskopisch onderzoek van de perifere zenuwen bleek, dat er kleine lesies waren opgetreden, die karakteristiek zijn voor een endoneuraal \ 8401120 \ --S' u - 6 ·- · lymfoma* Aan het einde van de. .observatieperiode werd bij drie kuikens, die met HVT FcT26 waren geënt, het ontstaan van lesies van het type B in perifere zenuwen aangetoond. Bij een kuiken met klinische verlamming werd een niet-specifieke neuritis waargenomen.
t - Tabel A - 8401120 , - 7 -
rH
W v*»»· S UN + c w
Q (O » N /«V
x «β K H O K
ca co o — o W »-4 C 00 w w w ce y y >»· ea .u e .si co at* f*» c e jj -Η co — «n — y W Q 3 ^- *** ''r ^ oo < u» jé r^. o <r o
H
o > c - -S Λ y y 00 y * «
ca C
> <* t i co n n cm Q _ en -»
** S
ai «o Λ c· e y 0 "ft ca ® ® co eu y e o *i-t ai •h 4-i ® ο. l t en i y 3 « >v
y < *4 W
« > · 05 | 00 ,3 g y — I cm t
y C SC
-Q y e y y « < ,, «e & « “ ·«=* y »h ö w o. i i ·“ i a} y cm y Pn ^ aé ,4 y, ·»*
Se »-* e C « » u y c « £ <<? ca ·*+ ·η y . 2
ei Ja ffl P- F''* I I I B
*4 3 y > H
H 4J u 4U SS
CQ "»* g ·¥
<* CS <U 9 S
H G u ÖO 3 £ y >1-4 G « ™ JÉ t’r4 ‘5 ’m •h y ^ f** 3 y 3 4J 3 f*> mi I ! , y
Ijt U £ fli ü Os 1 o y s 2 2 ai X CC K Λ ra DS y-v « £ =» co e w o •η y ω Sf > ^ --4 y e y y « ·« o» *** -1-» *β y
O- «^4 r=°4 -CM CM Λ O
rt O « — < ΓΤ “ js OU ut ^ ” n «o -gg § <β § s 3 | a “ F-f C » y y y ** ·« - e us jé O O en O ·Η y c -ft cm cm <* cm y » 60 CO 3 ** » s < * 3 ü S «o ·η e, m — £ ü en- «r. o g £ % 6 · > · u o S ë Ö0 #a& g
Art e λ λ Ci *3 e *h S S £ w % % S ® o ·- y •’ïi -s β t t CM y u fu η α ^ > > u o cu ui y ·* 3 YVfeii ^ 5 U O 5> ^ É·4 C* * y y e S S bï f9 C ^
>*σ ι-4 s X a u — CM
8401120 £· <- ' \ * ' - 8 -
De hierboven beschreven proef werd eveneens verricht met twee groepen van 20. SPF-kuikens,Witte Leghorn, stam A (WLA) van het Centraal Diergeneeskundig: Instituut te Lelystad, Nederland. Deze kuikens zijn gedeeltelijk resistent, tegen MD,, wat voor de meeste 5 veldpopulaties geldt.
De ene groep· van 20. kuikens werd geënt met MDV CVI-988-CEF„ en 35 de andere groep met HVT Fc126. In geen enkel geval kon enig aan MD toe te schrijven klinisch, symptoom en/of histologische lesie worden waargenomen.
10 Voorbeeld II.
Bepaling van de immunogeniciteifc van MDV CVI-988-DEF^^ in vergelijking met die van MDV CVT-988-CEF3^ en HVT Fc126. .
In. deze proef werd de immunogene werking van een viruspreparaat volgens de uitvinding, MDV CVI-988-DEF^^, vergeleken met twee in de 15 praktijk veelvuldig toegepaste preparaten, namelijk MDV CVI-988-CEF-c en HVT Fd26. Daartoe werd de PD^ bepaald, die gedefinieerd wordt als het aantal door plaque-titratie bepaalde focus-vormende eenheden (FFU), die vereist zijn om 50% van het Cvoor MD) gevoelige gedeelte -van, een groep kuikens tegen, de: klinische sympfconen en/of makrosko-20 pische lesies van MD te beschermen.
Challenge-besmetting geschiedde met een virulente MDV-kloon GA-5 (Journal of the National Cancer Institute 51, 929-939 (1973)).
Er· werden SPF-kuikens, Witte Leghorn, stam A (WLA) van het Centraal Diergeneeskundig Instituut, te Lelystad, Nederland gebruikt.
25 De verschillende groepen proefkuikens werden in gemodificeerde
Horsfall-Bauer isolatoren gehouden. De kuikens van elke doserings-groep werden over twee. isolatoren verdeeld. De vogels kregen ad libitum:, een gebruikelijk, voeder.
Na het inenten werden de viruspreparaten onderworpen aan 30 plaque-titratie in kippe-erabryo-fibroblast cultures (CEF) of eende- embryo-fibroblasfc cultures (DEF). De kuikens werden gedurende een periode van 10 weken geobserveerd om na te gaan of er klinische symptomen, van MD optraden. Gedurende deze periode werden dode of zieke, vogels uit de isolatoren verwijderd. Aan. het eind van de proef-35 periode werden alle· overgebleven vogels eveneens op 'symptomen van de ziekte van Marek onderzocht. De resultaten van alle proeven werden onderworpen aan probit-analyse met behulp van het computerprogramma BMD03S.
8401110
X
- 9 - ' <Φ :
Bi tabel B is het aantal kuikens dat klinische verschijnselen en/of makroskopische lesies van MD vertoonden en het totale aantal proefdieren per dosisgroep weergegeven. Elk van de onderzochte viruspreparaten gaf bescherming tegen intramusculaire besmetting met 5 MDV GA-5» waarbij de hoogste virus-dosis het meest effectief was. Uit probit-analyse van de uit de drie proeven verkregen gegevens konden PDgQ-waarden tussen 14 en 33 FFü worden berekend. De PD^-waarden voor de drie onderzochte viruspreparaten vertonen geen signifikante verschillen. Alle waarden liggen beneden 40 FFU, welke als gemiddelde 10 PD^0 waarde werd bepaald bij zes andere commerciële MDV CVI-988 vaccinpreparaten (Journal of Biological Standardization _9, 15-22 (1981)).
Het onderste gedeelte van de tabel geeft de waarden, die door probit-analyse uit de proefresultaten zijn berekend.
15 Tabel B
PD^-bepaling in WLA-kuikens; challenge infectie met MDV GA-5.
Vaccin Aantal kuikens met MD/totale aantal kuikens dosis (FFÜ) MDV CSTI-988 MDV CVI-988 HVT FcI26 CEF,_, DEF_, kloon 35 51 20 1000 2/30 500 3/27 3/32 1/31 100 3/24 6/31 2/32 20 8/26 20/32 10/31 4 14/23 23/32 24/32 25 0 17/22 28/31 24/28
Natuurlijke weerstand Z beschermd 22 10 13 PB50 14 33 14,7 30 952 confidentie- interval van 4,4-44,9 16,5-66,0 6,7-32,1 helling van probit-regressie lijn 0,87 1,07 1,50 8401120 -1 o- *
Voorbeeld III.
Dezelfde bepalingen als van voorbeeld II werden uitgevoerd met de viruspreparaten MDV CVI-988-DEF^ en CEF^ volgens de uitvinding, in vergelijking metMDV CVI-988-CEF3^ en HVT Fc126 + MDV SB-1, waarbij 5 de infectie plaats vond met virulent MDV-K virus.
In de onderstaande tabel C is weer het aantal kuikens met makroskopische MD-lesies in 10 weken, naast het totale aantal kuikens vermeld. Tevens is de uit probit-analyse berekende PD^Q en het 95% confidentie-interval van de PD_n aangegeven, ou
10 TABEL C
PD^Q-bepaïing .met WLA-kuikens;, challenge-infectie met MDV-K
Vaccin MDV CVÏ-988 MDV CVï-988 MDV CVI-988 HVT Fel26 dosis (FFU) DEF_. kloon CEF.. kloon CEF,_ +MDV SB-1 54 54 35 500 2/30 0/29 0/30 0/27 15 100 13/30 3/29 4/29 3/29 20 15/28 5/30 7/29 5/29 4 18/30 10/28 16/30 7/29 0 18/28 . 14/29 23/30 17/29
Controles 72/94 20 FD50 26.5 12.9 10.3 6.4 95% confidentie-interval 10,8-64,8 3,4-48,5 3,3-32,1 0,48-85,4 van FD^0
Voorbeeld IV.
25 Dezelfde PD^-bepaling als beschreven in de voorbeelden II en ΠΙ werd uitgevoerd met de viruspreparaten volgens de uitvinding, MDV CVI-988-DEF^-kloon. en MDV CVI-988-CEF^.-kloon, in vergelijking met het handelspreparaat MDV CVI-988-CEF._, waarbij de kuikens werden geïnfecteerd met het virus MDV RB/TB. Dit virus is afkomstig van een 30 Amerikaans bedrijf waarbij een Marek-uitbraak optrad bij kippen die met HVT-vacein waren, gevaccineerd.
De proefresultaten zijn in de volgende tabel D vermeld. .
*1 8401120 ' ·*.. Λ - 11 - TABEL D-
P^sQ-bepaling met WLA-kuikens; challenge-infectie met MDV-RB/1B
Vaccin MDV CV1-988 MDV CVI-988 MDV CVI-988 dosis (FFU) DEF_, kloon CEF_. kloon CEFoc 54 54 35 5 2500 0/23 0/21 0/20 500 1/24 3/20 0/20 100 5/24 0/20 5/20 20 T5/24 3/19 11/20 0 25/25 18/18 18/20 10 PBS0 31.6 <10^ 34.3 i 951 confident!e- interval van PD5Q 6,9-144,1 5,6-210,7 ^ Vanwege het onregelmatig verloop van de dosis-response lijn kon de PD^-waarde niet met het computerprogramma worden berekend.
t 8401120

Claims (2)

  1. 4, Viruspreparaat volgens conclusie 3, met het k e n -m e r k, dat de aviaire cellen aviaire embryo-fibroblasten zijn.
  2. 5, Viruspreparaat volgens- conclusie 3 of 4, met het ken-15 merk, dat de aviaire cellen eende-embryo-fibroblasten of kippe- embryo-fibroblasten zi-jnv / 840 1 1 2 0
NL8401120A 1984-04-09 1984-04-09 Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek. NL8401120A (nl)

Priority Applications (17)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL8401120A NL8401120A (nl) 1984-04-09 1984-04-09 Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek.
EP85200461A EP0159743B1 (en) 1984-04-09 1985-03-25 Live purified marek's disease vaccine
AT85200461T ATE56364T1 (de) 1984-04-09 1985-03-25 Lebender gereinigter impfstoff gegen die marek'sche krankheit.
DE8585200461T DE3579617D1 (de) 1984-04-09 1985-03-25 Lebender gereinigter impfstoff gegen die marek'sche krankheit.
HU851448A HU194496B (en) 1984-04-09 1985-03-27 Process for preparing a living vaccine against marek disease
AU41561/85A AU574164B2 (en) 1984-04-09 1985-03-27 Marek,s disease vaccine
PCT/NL1985/000014 WO1985004588A1 (en) 1984-04-09 1985-03-27 Live purified marek's disease vaccine and process for the preparation thereof
IN234/CAL/85A IN163229B (nl) 1984-04-09 1985-03-28
IL74809A IL74809A (en) 1984-04-09 1985-04-03 Live purified marek's disease vaccine
ES541930A ES8605680A1 (es) 1984-04-09 1985-04-03 Procedimiento de obtener un preparado virico contra la enfermedad de marek.
ZA852564A ZA852564B (en) 1984-04-09 1985-04-04 Live purified marek's disease vaccine
US06/720,176 US4673572A (en) 1984-04-09 1985-04-05 Live purified Marek's disease vaccine
MX851025U MX7718E (es) 1984-04-09 1985-04-08 Procedimiento para preparar una vacuna anti marek avicola
DD85274954A DD232822A5 (de) 1984-04-09 1985-04-08 Verfahren zur herstellung eines viruspraeparates gegen die mareksche gefluegelkrankheit
JP60075246A JPS6123A (ja) 1984-04-09 1985-04-09 ウイルス調製物
YU599/85A YU44687B (en) 1984-04-09 1985-04-09 Process for making alive purified vaccine for marek's disseases
CA000478672A CA1251397A (en) 1984-04-09 1985-04-09 Live purified marek's disease vaccine

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL8401120 1984-04-09
NL8401120A NL8401120A (nl) 1984-04-09 1984-04-09 Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek.

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NL8401120A true NL8401120A (nl) 1985-11-01

Family

ID=19843774

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL8401120A NL8401120A (nl) 1984-04-09 1984-04-09 Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek.

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4673572A (nl)
EP (1) EP0159743B1 (nl)
JP (1) JPS6123A (nl)
AT (1) ATE56364T1 (nl)
AU (1) AU574164B2 (nl)
CA (1) CA1251397A (nl)
DD (1) DD232822A5 (nl)
DE (1) DE3579617D1 (nl)
ES (1) ES8605680A1 (nl)
HU (1) HU194496B (nl)
IL (1) IL74809A (nl)
IN (1) IN163229B (nl)
MX (1) MX7718E (nl)
NL (1) NL8401120A (nl)
WO (1) WO1985004588A1 (nl)
YU (1) YU44687B (nl)
ZA (1) ZA852564B (nl)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4456101A (en) * 1980-11-08 1984-06-26 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Vehicular brake operating system
JP2508625B2 (ja) * 1985-08-30 1996-06-19 ソニー株式会社 半導体レ−ザ−
FR2598596B1 (fr) * 1986-05-15 1990-10-19 Sanofi Elf Bio Ind Procede de traitement du lait en vue de l'obtention de fromages
US5849299A (en) * 1991-06-28 1998-12-15 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Attenuated revertant serotype 1 marek's disease vaccine
WO1993023078A1 (en) * 1992-05-19 1993-11-25 Viktoria Alexeevna Lukina Vaccine for prophylaxis of marek disease of birds and method of its preparation
IL114501A (en) * 1994-07-14 1999-08-17 Akzo Nobel Nv Marek's disease virus vaccine
EP0703294A1 (en) * 1994-07-14 1996-03-27 Akzo Nobel N.V. Marek's disease virus vaccine
EP0748867A1 (en) * 1995-06-12 1996-12-18 Duphar International Research B.V Marek's disease vaccine
US5989805A (en) * 1995-10-27 1999-11-23 Board Of Trustees Operating Michigan State University Immortal avian cell line to grow avian and animal viruses to produce vaccines
EP0954223A4 (en) * 1996-06-04 2002-01-16 Univ Georgia Res Found MODIFIED AVIAN POLYOMA VIRUS VACCINE AFFECTING PSITTACIDS
EP1038952A3 (en) * 1998-12-09 2001-06-27 Pfizer Products Inc. Processes for preparation of Marek's Disease Virus using continuous avian cell lines
EP3326646A1 (en) 2012-03-22 2018-05-30 Merial, Inc. Modified marek's disease virus, and vaccines made therefrom

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1292803A (en) * 1968-11-18 1972-10-11 Nat Res Dev Improvements relating to the production of antigens
US3642574A (en) * 1970-04-29 1972-02-15 Us Agriculture Method for producing vaccine for immunization of poultry against marek{3 s disease
US3783098A (en) * 1971-08-10 1974-01-01 Cornell Res Foundation Inc Highly potent,viable and stable cellfree virus preparations from cells infected with cell-associated viruses and method for obtaining the same
US4160024A (en) * 1978-05-01 1979-07-03 Cornell Research Foundation, Inc. Marek's disease vaccine

Also Published As

Publication number Publication date
CA1251397A (en) 1989-03-21
HUT38542A (en) 1986-06-30
JPS6123A (ja) 1986-01-06
AU4156185A (en) 1985-11-01
MX7718E (es) 1990-10-10
ES541930A0 (es) 1986-04-16
YU59985A (en) 1988-06-30
EP0159743B1 (en) 1990-09-12
EP0159743A1 (en) 1985-10-30
AU574164B2 (en) 1988-06-30
HU194496B (en) 1988-02-29
IN163229B (nl) 1988-08-27
US4673572A (en) 1987-06-16
JPH0317808B2 (nl) 1991-03-11
WO1985004588A1 (en) 1985-10-24
ATE56364T1 (de) 1990-09-15
DE3579617D1 (de) 1990-10-18
DD232822A5 (de) 1986-02-12
YU44687B (en) 1990-12-31
ZA852564B (en) 1985-11-27
IL74809A (en) 1990-09-17
IL74809A0 (en) 1985-07-31
ES8605680A1 (es) 1986-04-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Robertson et al. Avian reovirus.
Bagust Laryngotracheitis (gallid‐1) herpesvirus infection in the chicken 4. latency establishment by wild and vaccine strains of ILT virus
Smith et al. The oncogenic effects of nontransforming viruses from avian myeloblastosis virus
KR0156732B1 (ko) 연속 셀 라인에서의 ibdv 생성
NL8401120A (nl) Viruspreparaat, waarmee gevaccineerd kan worden tegen de ziekte van marek.
Bülow Immunological effects of reticuloendotheliosis virus as potential contaminant of Marek's disease vaccines
US3642574A (en) Method for producing vaccine for immunization of poultry against marek{3 s disease
Morgan et al. Latent viral infection of cells in tissue culture: IV. Latent infection of L cells with psittacosis virus
Kodama et al. Anti‐viral immunity against Marek's disease virus infected chicken kidney cells
CN108379575B (zh) 一种以新城疫病毒热稳定毒株制备的灭活疫苗及其制备方法
Geerligs et al. Efficacy and safety of cell associated vaccines against Marek's disease virus grown in a continuous cell line from chickens
US5789231A (en) Marek&#39;s disease vaccine
KR20000069501A (ko) 뉴우캐슬병에 대한 난내 백신화
Spalatin et al. Evidence of genetic heterogeneity of some lentogenic Newcastle disease virus strains
EP0687471A1 (en) Production of an efficacious toxoplasma gondii bradyzoite vaccine in tissue culture
Mack et al. Serological response in chickens to beta-propiolactone treated Newcastle disease virus
McNeilly et al. Bursal lymphocyte proliferation in the presence of phorbol myristate acetate: effect of IBDV strains on the proliferation response
Mancini et al. Cultivation of avian encephalomyelitis virus in vitro. 1. In chick embryo neuroglial cell culture
桐沢力雄 et al. In vivo and in vitro infections of chicken lymphocytes with Marek's disease virus or herpesvirus of turkeys.
KR20000070736A (ko) 전염성 활액낭염 백신
v Bülow et al. Plaque Assay of Turkey Herpesvirus and Attenuated Marek's* Disease Virus
Cho Studies of turkey herpesvirus viremia in two strains of vaccinated chickens: strain difference and effects of vaccine dose
Cho An improved method for extracting cell-free herpesviruses of Marek's disease and turkeys from infected cell cultures
JPS6244528B2 (nl)
Bubel et al. An improved method for detection of ganglionic latency in herpes simplex virus type-1 infected guinea pigs

Legal Events

Date Code Title Description
A1B A search report has been drawn up
BV The patent application has lapsed