NL8302562A - Gesubstitueerde peptideverbindingen. - Google Patents

Description

... f ____; ft

Gesubstitueerde peptideverbindingen

De uitvinding heeft betrekking op gesubstitueerde peptideverbindingen met formule 1 en zouten daarvan, vaarin X een amino of iminozuur is met formule 2h, formule 25, formule 26, formule 27, formule 28, formule 29, formule 30, 5 formule 31, formule 32, formule 33, formule 3**, of formule 35.

R^ is waterstof, halogeen, een korte keten alkyl, keto, hydroxy, -UH-C(O)- korte keten alkyl, azido, amino, een groep met formule 36, formule 37, formule 38, formule 39, ; formule 1*0, formule 1*1, een 1- of 2-nafthylgroep met formule 41a, 10 een groep met formule 1*2, formule 1*3, formule U*, formule 1*5» een 1- of 2-nafthyloxygroep met de formule 1*6, een groep met formule 1+7, formule 1*8, of een 1- of 2-nafthylthiogroep met formule 1+9,

Rg is halogeen, een ketogroep, een groep met formule 15 50, formule 1+5, formule Ml·, een 1- of 2-nafthyloxygroep met formule 1*1, een groep met formule 1*7, formule 1*8, of een 1- of 2-nafthylthiogroep met formule 1*9.

is een ketogroep of een groep met formule 38.

R10 is halogeen of een groep met formule 51· 20 R^, R^’, R^g en R^' zijn onafhankelijk waterstof of een korte keten alkylgroep of R'^, en ®*12 z^n ^3^31,3^0^ en Rjj is een groep met formule 52.

R^ is waterstof, een korte keten alkylgroep met 1 tot 1* koolstof atomen, een korte keten alkoxygroep met 1 tot k 25 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 1 tot 1* kool- stofatomen, chloor, broom, fluor, een trifluormethyl, hydroxy, fenyl, fenoxy, fenylthio of fenylmethylgroep.

R^ is waterstof, een korte keten alkylgroep met 1 tot 1* koolstofatomen, een korte keten alkoxygroep met 1 tot 1* 30 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 1 tot k koolstofatomen, chloor, broom, fluor, een trifluormethyl of 8302562 2 - 1 r hydroxygroep.

m is 0, 1, 2, 3 of 1+.

p is 1, 2 of 3, vooropgesteld, dat p alleen groter is dan 1 wanneer of H* waterstof, chloor, fluor of een 5 methyl of methoxygroep is.

R^ is waterstof of een korte keten alkylgroep met 1 tot 1+ koolstofatomen.

Y is zuurstof of zwavel.

R^ is een korte keten alkylgroep met 1 tot 1+ koolstof-10 atomen, een groep met formule 38, of de R g groepen verbinden zich om een ongesubstitueerde 5“ of 6-ring te vormen of genoemde ring waarin een of meer van de koolstofatomen als substituent een korte keten alkylgroep met 1 tot k koolstofatomen of een di-(korte keten alkylgroep met 1 -if koolstofatomen) 15 draagt.

R^ is waterstof, een korte keten alkylgroep of een groep met formule 39» formule if0, formule if 1, formule if2, formule 53» formule 5if of formule 55· R,. is waterstof, een korte keten alkylgroep, een 20 groep met formule 56, formule 57» formule 58, formule 59» formule 60, formule 61, formule 62, formule 63, formule 6U, formule 65, of formule 66.

r is een geheel getal van 1 tot if.

R is een korte keten alkyl, benzyl of fenethyl- 25 groep.

f'j R20 is waterstof, een korte keten alkyl, benzyl of fenethylgroep. R waterstof, een korte keten alkylgroep, cyclo-alkylgroep, een groep met formule 56, formule 58a, formule 58b, formule 58c, formule 62a, formule 62b, formule 62c, formule 63a, 30 formule 63b of formule 63c. R^ is waterstof, een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 56, formule 57, formule 58, formule 59, formule 60, formule 61, formule 62, formule 63, formule 61f, formule 65 of formule 66, vooropgesteld, dat R^ 35 alleen waterstof is als R geen waterstof is.

R2 is een groep met formule 67, formule 39, formule 1+0 8302562 k .......

3 —V Ο.

’’Η of formule Μ.

R^ is waterstof, een korte keten alkylgroep, een groep met formule 67, formule 39» formule HO, formule M, formule k2, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep, 5 een groep met formule 58, formule 59» formule 60, formule 61, formule 62, formule 63, formule 6k, formule 65 of formule 66, waarin m, R^, p en r zoals boven vermeld zijn.

Rg is waterstof, een korte keten alkyl, benzyl, of benzhydrylgroep of een groep met forrnde 68, formule 69, 10 formule 70 of formule 71.

R^ is waterstof, een korte keten alkyl, cycloalkyl <· of fenylgroep.

,, R<0 is waterstof, een korte keten alkyl, korte keten { ) 18 alkoxy of fenylgroep of R^ en vormen samen een groep met 15 formule 72, formule 73, formule Jb of formule 75·

Rg1 en R22 zijn onafhankelijk waterstof of een korte ' keten alkylgroep.

R22 is een korte keten alkylgroep.

De uitvinding heeft in zijn ruimste zin -betrekking 20 op de gesubstitueerde peptideverbindingen met formule 1, op samenstellingen die deze verbindingen bevatten en de werkwijze om dergelijke verbindingen te gebruiken als farmaceutische middelen en op tussenprodukten die bruikbaar zijn voor de bereiding van deze verbindingen.

25 De uitdrukking "korte keten alkyl" die gebruikt wordt bij het definiëren van de verschillende symbolen heeft betrekking op rechte of vertakte ketengroepen met tot 7 koolstof at omen.

De korte keten alkylgroepen waaraan de voorkeur wordt gegeven bevatten tot h koolstofatomen waarbij de grootste voorkeur uitgaat 30 naar methyl en ethyl. Dienovereenkomstig hebben de uitdrukkingen "korte keten alkoxy" en "korte keten alkylthio" betrekking op dergelijke korte keten alkylgroepen verbonden aan een zuurstof of zwavel.

De uitdrukking "cycloalkyl" heeftbetrekking op ver-35 zadigde ringen met 3 tot 7 koolstofatomen, waarbij de grootste

__J

8302562 t ’ * ‘· i S.

k voorkeur uitgaat naar cyclopentyl en cyclohexyl.

De uitdrukking "halogeen" heeft betrekking op chloor, broom en fluor.

De uitdrukking "door halogeen gesubstitueerde korte 5 keten alkyl" heeft betrekking op dergëijke korte keten alkyl- groepen als boven beschreven, waarin êén of meer waterstofatomen vervangen zijn door chloor, broom of fluoratomen, zoals trifluormethyl, dat de voorkeur geniet, pentafluorethyl, 2,2,2-trichloorethyl, chloormethyl en broommethyl.

10 De groepen met formule 39» formule ^0 en formule M

geven aan dat de alkyleenbrug gebonden is aan een beschikbaar koolstofatoom.

^ De verbindingen met de formule 1, waarin R waterstof is, kunnen worden bereid door een carboxymethylpeptideester met 15 de formule 2 om te zetten in zijn zuurchloride en daarna te laten reageren met een oxazolon met formule 3, waarin R^q en Rg (in de omschrijving van X) beschermingsgroepen zijn zoals b.v. waarin R^q benzyloxycarbonyl is en Rg benzyl is. Verwijdering van de R^Q en Rg beschermingsgroep, b.v. door hydrogeneren, 20 levert de produkten met formule 1, waarin Rg waterstof is.

De carboxymethylpeptideester met formule 2 wordt bereid door de peptideester met formule te laten reageren met tert.butylbroomacetaat en daarna de R^q beschermingsgroep in te voeren, b.v. door behandelen met benzylchloorformiaat.

25 De verbinding met formule 1 kunnen ook worden bereid ' door een keton met formule 5, waarin halogeen staat voor Cl of

Br, te laten reageren met de peptideester met formule 6, in aanwezigheid van een base, zoals natriumbicarbonaat, gevolgd door verwijdering van de Rg-estergroep.

30 Het ketontussenprodukt met formule 5 kan worden bereid door een keton met formule 7, waarin Rj^ een beschermingsgroep, zoals benzyloxycarbonyl, is, te behandelen met broom-waterstof en azijnzuur, gevolgd door reaktie met het zuur-halogenide met formule 8, in aanwezigheid van een base, zoals 35 natriumbicarbonaat.

De verbindingen met formule 1 kunnen ook worden 8302562 5 > i if "bereid door een aminoketon met formule 9, in het bijzonder het hydrochloridezout daarvan, te laten reageren met de halogeen acetylamino of iminozure ester met formule 10, vaarin Rg in de omschrijving van X een gemakkelijk verwijderbare ester beschermings-5 groep is en halogeen staat voor Cl of Br.

De verbindingen met formule 1 kunnen ook worden bereid door een aminoketoncarbonzuur met formule 11 te koppelen met de amino of iminozure ester met formule 12 in aanwezigheid van een koppelingsmiddel, zoals dicyclohexylcarbodiimide, waarin Rg 10 in de omschrijving van X een gemakkelijk verwijderbare beschermings- groep is. Verwijdering van Rg beschermingsgroep levert de produk-ten met formule 1 waarin Rg waterstof is.

( · Het aminoketon met formule 9 kan worden bereid door het carboxyalkylamine met formule 13, waarin R^q beschermings-15 groep, zoals benzyloxycarbonyl is, om te zetten in zijn zuur- chloride en daarna te laten reageren met een oxazolon met formule 3 waardoor een verbinding met formule 1k wordt verkregen.

Verwijderen van Rj^ beschermingsgroep, zoals door hydrogeneren levert de reaktiedeelnemer met formule 9· 20 Het aninoketon met formule 9, waarin R anders dan waterstof is, kan ook worden bereid door het keton met formule 5 te laten reageren met gesubstitueerd amine met formule 15· Het aminoketoncarbonzuur met formule 11 kan worden bereid door het amineketon met formule 9 te laten reageren met een halogeen 25 azijnzure ester met formule 16, waarin Prot een gemakkelijk verwijderbare ester beschermingsgroep is, zoals tert.butyl, waardoor de ester met formule 17 wordt verkregen.

Verwijdering van de ester beschermingsgroep levert de reaktiedeelnemer met formule 11. In de bovenstaande reakties 30 dienen, indien een of alle groepen R, R^, R^ en R,_ staan voor formule 57» formule 58, formule 59, formule 61, formule 62, formule 63, formule 65, de hydroxy, amino, imidazolyl, mercaptan of guanidinylgroep beschermd te zijn tijdens de reaktie. Geschikte beschermingsgroepen zijn b.v. benzyloxy-35 carbonyl, tert.butoxycarbonyl, benzyl, benzhydryl, trityl, en 9302562 --------—--^ 6 t 1 nitro in het geval van guanidinyl. De heschermingsgroep wordt verwijderd door hydrogeneren, behandeling met zuur of een andere bekende methode na voltooiing van de reaktie.

De esterprodukten met formule 1, waarin Rg een korte 5 keten alkyl, benzyl of benzhydrylgroep is, kunnen chemisch worden behandeld, zoals met natriumhydroxyde in waterig dioxan of met trimethylsilylbromide, waardoor de produkten met formule 1 worden verkregen waarin Rg waterstof is. De benzyl en benzhydryl-esters kunnen ook worden gehydrogeneerd, b.v. door behandeling 10 met waterstof in aanwezigheid van palladium op koolstofkatalysator.

De esterprodukten met formule 1, waarin Rg een groep met formule 68 is, kan worden verkregen door het peptide te λγ'} gebruiken met formule k of formule 6 of de halogeenacetylamino of iminozure ester met formule 10 in de bovenstaande reakties 15 met een dergelijke estergroep reeds op de goede plaats. Dergelijke ester reaktiedeelnemers kunnen worden bereid door peptide met formule U of formule 6 te behandelen met de halogeenacetylamino-of iminozure ester met formule 10, waarin Rg waterstof is, met een zuurchloride, zoals met formule 76 of formule 77» 20 teneinde het H-atoom te beschermen. De beschermde verbinding wordt dan tot reaktie gebracht in aanwezigheid van een base met een verbinding met formule 18, waarin L een verwijderbare groep is, zoals chloor, broom, of tolylsulfonyl, gevolgd door verwijdering van de N-beschermingsgroep, zoals door behandeling 25 met zuur of hydrogeneren.

De esterprodukten met formule 1, waarin Rg een groep met formule 68 is, kunnen ook worden verkregen door het produkt met formule 1, waarin Rg waterstof is, te behandelen met een molaire overmaat van een verbinding met formule 18.

30 De esterprodukten met formule 1, waarin Rg een groep met formule 69 is, kunnen worden bereid door het produkt met formule 1, waarin Rg waterstof is, te behandelen met een molaire overmaat van de verbinding met formule 19·

De esterprodukten met formule 1, waarin Rg een groep 35 met formule 70 of formule 71 is, kunnen worden bereid door 8302562 7 ' * 1 t

C

liet produkt met formule 1, waarin Eg waterstof is, te koppelen met een molaire overmaat van de verbinding met formule 20 of de formule 21 in aanwezigheid van een koppelingsmiddel, zoals dicyclohexylcarbodiimide, gevolgd door verwijdering van de 5 hydroxybeschermende groep.

De esters met formule 1, waarin Eg een korte keten alkylgroep is, kunnen worden vékregen uit de carbonzure verbindingen, d.w.z. waarin Eg waterstof is, de gebruikelijke ver-esteringsmethoden, b.v. behandeling met een alkylhalogenide 10 met de formule Eg-halogeen, of een alkohol met de formule Bg-OH.

De peptide esters met formule b en formule 6 kunnen " worden verkregei door het hydrochloridezout van de amino of ’ j iminozure ester met formule 12, waarin Eg b.v. benzyl is, te koppelen met het N-beschermde aminozuur met formule 22, waarin 15 Prot een beschermingsgroep is, zoals een groep met formule 78.

Deze reaktie wordt bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een koppelingsmiddel, zoals dicyclohexylcarbodiimide. Verwijdering van de N-beschermingsgroep, b.v. door behandeling met tri-fluorazijnzuur, levert de peptideesters met formule b en formule 6.

20 De halogeenacetylamino of iminozure ester met formule 10 kan worden bereid door de amino of iminozure ester met formule 12 te laten reageren met een halogeenaeetylhalogenide met formule 23.

De produkten met formule 1, waarin Ej een aminogroep 25 is, kunnen worden verkregen door de overeenkomstige produkten f met formule 1, waarin Βγ. een azidogroep is, te reduceren.

Voorkeursverbindingen volgens de uitvinding met betrekking tot het peptidegedeelte van de struktuur met formule 1 zijn de verbindingen waarin: 30 B waterstof, een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1-U koolstof atomen of een fenylgroep is.

E.j waterstof, een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen, -CF^, een groep met formule 62, waarin r een geheel getal van 1 tot k is, een groep met 35 formule 56, formule 57, formule 58, formule 59, formule 60, 8302562 8 T' i * / formule 61, formule 62, waarin r = 1, een groep met formule 6ka, formule 65a, -CHg-CiOj-ÏÏHg of -(CHgJg-CCoJ-NHg, vooropgesteld, dat R^ alleen waterstof is, als R anders dan waterstof is.

5 R^ is waterstof, een cyclohexyl of fenylgroep, R^ is waterstof, een rechte of vertakte keten korte keten alkyl-groep met 1 tot k koolstof atomen, een groep met formule 56, formule 5T» formule 58, formule 59, formule 6o, formule 6l, formule 63, waarin r = 1 is, een groep met formule 6Ua, formule 10 65a, -CH2-C(0)-HH2 of -(CH^-Ci

Rg is waterstof, een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1 tot 1+ koolstofatomen, een alkalimetaal-( 1 zout, een groep met formule 68, formule 69a, formule 70 of ,formule 71 is.

15 R23 is een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep, in het bijzonder -CiCH^)^· R._ is waterstof, een rechte of vertakte keten korte 17 keten alkylgroep met 1-1+ koolstof atomen of een cyclohexylgroep.

R^ is een rechte of vertakte keten korte keten 20 alkylgroep met 1-1+ koolstofatomen of een fenylgroep.

R is een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1 tot 1+ koolstofatomen, in het bijzonder -CCCH^)^· R^ is waterstof.

R^ is hydroxy.

f. 25 Rj is een rechte of vertakte keten korte keten alkyl groep met 1-1+ koolstofatomen of een cyclohexylgroep.

R^ is een aminogroep.

R^ is een -0-korte keten alkylgroep, waarin de korte keten alkylgroep een rechte of vertakte keten met 1 tot 1+ kool-30 stofatomen heeft.

R^ is een groep met formule 38, waarin p = 1, waarin m gelijk is aan 0, 1 of 2 en R^ waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is.

R^ een groep met formule 1+5, waarin p = 1, 1-nafthyl-35 oxy of 2-nafthyloxy, waarin m gelijk is aan 0, 1 of 2 en R^ 8302562 “ ί ί τ 9 waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methyl-thio of hydroxygroep is.

is een -S-korte keten alkylgroep, waarin de korte keten alkylgroep een rechte of vertakte keten met 1 tot h 5 koolstof atomen is.

Bj is een groep met formule U8, waarin p = 1, een 1-nafthylthio of 2-nafthylthiogroep, waarin m gelijk is aan 0, 1 of 2 en waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is.

10 Rq is een -0-korte keten alkylgroep, waarin de korte keten alkylgroep een rechte of vertakte keten met 1 tot kool- « stof atomen heeft.

'* Rg is een groep met formule U5 waarin p = 1, m gelijk is aan 0, 1 of 2 en waterstof, chloor, broom, fluor, een 15 methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is.

Rg is een -S-korte keten alkylgroep, waarin* korte keten alkylgroep een rechte of vertakte keten met 1 tot U koolstofatomen heeft.

Rg is een groep met formule U8 waarin p = 1, m gelijk 20 is aan 0, 1 of 2 en R^g waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is.

Rp is een fenyl, 2-hydroxyfenyl of b-hydroxyfenyl- groep.

R10 zijn beide fluor of chloor.

25 R^0 zijn beide -Y-R^g, waarin Y zuurstof of zwavel is, R^g een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1 tot k koolstofatomen is of de R^ groepen zich verenigen om een ongesubstitueerde 5“ of 6-ring te vormen of deze ring waarin een of meer van de beschikbare koolstofatomen een 30 methyl of dimethylsubstituent draagt.

R^, R' , R12 en R*12 zijn allen waterstof, of R^ λ een fenyl, 2-hydroxyfenyl of U-hydroxy fenyl groep en R’^, R12 en R* zijn waterstof.

Met betrekking tot het peptidegedeelte van de 35 struktuur met formule 1 gaat de grootste voorkeur uit naar ver- 8302552 10 bindingen volgens de uitvinding vaarin X een groep met formule 2h, formule 27a, formule 3¾ of formule 35 is.

R is waterstofcf een methylgroep.

R1 is waterstof, een methylgroep of -(CH^^ÏÏÏÏg, 5 in het bijzonder een methylgroep, vooropgesteld, dat R^ alleen waterstof is, als R anders dan waterstof is.

Rg is waterstof, een rechte of vertakte keten korte keten alkylgroep met 1 tot U koolstof atomen of een alkal imet aal-zout.

10 R^ is een cyclohexyl of fenylgroep.

R^ is waterstof, een cyclohexylgroep, een korte keten alkoxygroep met 1 tot U koolstof atomen, een groep met formule f 33, formule 1*5 of formule 1*8 waarin p - 1, en waarin 9 gelijk is ^ · aan 0, 1 of 2 en waterstof, chloor, broom, fluor, een 15 methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is, waarbij in het bijzonder de voorkeur wordt gegeven als R^ waterstof is.

t is gelijk aan 2 of 3, in het bijzonder wanneer t gelijk is aan 2.

Voorkeursverbindingen volgens de uitvinding ten aanzien 20 van het ketogedeelte van de struktuur met formule 1 zijn de verbindingen waarin R^ een groep met formule 67, waarin p = 1, is, waarin p = 1, is, waarin m gelijk is aan 1, 1 of 2 en R^ waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is, in het bijzonder een fenylgroep.

25 R^ is een rechte of vertakte keten korte keten alkyl- ' , groep met 1 tot U koolstof atomen, een groep met formule 62, formule 67, waarin p - 1 of een groep met formule Ui, waarin m gelijk is aan 0, 1 of 2, R ^ waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is en r een geheel 30 getal is-van 1 tot in het bijzonder benzyl.

De verbindingen met formule 1, waarin Rg waterstof is, vormen zouten met een verscheidenheid aan anorganische of organische basen. De niet giftige, farmaceutisch aanvaardbare zouten verdienen de voorkeur, ofschoon andere zouten ook bruik-35 baar zijn voor het isoleren of zuiveren van het produkt. Dergelijke 8302562 11 '* * i farmaceutisch aanvaardbare zouten zijn onder meer metaalzouten, zoals natrium, kalium of lithium, aardalkalimetaalzouten zoals calciumof magnesium en zouten afgeleid van aminozuren, zoals arginine en lysine. De zouten worden verkregen door de 5 zuurvorm van de verbinding te laten reageren met een equivalent van de base die het gewenste ion verschaft in een medium waarin het zout neerslaat of een waterig medium gevolgd door lyofili-seren.

Dienovereenkomstig vormen de verbindingen met formule 1, 10 in het bijzonder waarin Rg een estergroep is, zouten met een verscheidenheid aan anorganische en organische zuren. Ook hier weer wordt de voorkeur gegeven aan de niet giftige farmaceutisch ! aanvaardbare zouten, ofschoon andere zouten ook bruikbaar zijn voor het isoleren of zuiveren van het produkt. Dergelijke 15 farmaceutisch aanvaardbare zouten zijn onder meer zouten gevormd met zoutzuur, methaansulf onzuur, zwavelzuur, maleïnezuur. De zouten worden verkregen door het produkt te laten reageren met een equivalente hoeveelheid van het zuur in een medium waarin een zout neerslaat.

20 Zoals boven aangegeven, is het peptidegedeelte van het molekuul van de produkten met formule 1, weergegeven door formule 79j in de L-configuratie. Een centrum van asymmetrie is ook aanwezig in het ketogedeelte van het molekuul, wanneer R^ anders dan waterstof is. Derhalve kunnen de verbindingen met formule 1 25 voorkomen in diastereoisomere vormen of in mengsels daarvan.

De hierboven beschrevenwerkwijzen kunnen gebruikmaken van racematen, enantiomeren of diastereomeren als uitgangsmaterialen.

Als diastereomere produkten worden bereid, kunnen ze worden gescheiden volgens gebruikelijke chromatografische gefraktioneerde 30 kristallisatiemethoden.

De produkten met formule 1, waarin de aminozuurring monogesubstitueerd is, geven aanleiding tot cis-trans isomerie.

De configuratie van het eindprodukt zal afhangen van de configuratie van de R^, Rg en R^ substituent in het uitgangsmateriaal 35 met formule 12.

6302562 12 'f ' 1 ‘ i

De verbinding met formule 1 en de farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan zijn hypotensieraiddelen. Ze verhinderen de omzetting van het decapeptide angiotensine I in angiotensine II en zijn derhalve bruikbaar voor het verminderen of verlichten 5 van met angiotensine verband houdende hypertensie. De werking van het enzyme renine op angiotensinogeen, een pseudoglobuline in bloed, vormt angiotensine I. Angiotensine I wordt door angiotensine omzettend enzyme (ACE) omgezet in angiotensine II. Dit laatste is een aktieve druk veroorzakende stof, die als het 10 oorzakelijk middel is beschouwd bij verscheidene vormen van hypertensie bij verschillende zoogdiersoorten, b.v. mensen.

De verbindingen volgens de uitvinding onderbreken de angio-ζ ') tensinogeen —> (renine) —* angiotensine I —> angiotensine II

reeks door angiotensine omzettend enzyme af te remmen en de * 15 vorming van de druk veroorzakende stof angiotensine II te verminderen of uit te sluiten. Zo wordt door toediening van een verbinding die een (of een combinatie) van de verbindingen volgens de uitvinding bevat, door angiotensine veroorzaakte hypertensie in een zoogdiersoort (b.v. mensen) die daaraan 20 leidt, verlicht.

Een enkelvoudige dosis of bij voorkeur twee of vier dagelijkse dosis, verschaft op een basis van 0,1 tot 100 mg, bij voorkeur 1 tot 50 mg perkg lichaamsgewicht per dag is geschikt om de bloeddruk te verlagen. De stof wordt bij voorkeur 25 . oraal toegediend, maar parenterale wegen, zoals de subcutane, intermusculaire, intraveneuze of intraperitoneale weg, kunnen ook worden gebruikt.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook worden geformuleerd in combinatie met een diureticum voor de 30 behandeling van hypertensie. Een comb inat ieprodukt dat een ver binding volgens de uitvinding en een diureticum bevat, kan worden toegediend in een werkzame hoeveelheid, die een totale dagelijkse dosis van 30 tot 600 mg, bij voorkeur 30 tot 330 mg bevat van een verbinding volgens de uitvinding en 15 tot 300 mg, bij voorkeur 35 15 tot 200 mg van het diureticum, aan een zoogdiersoort die daaraan 8302562 ' ί Ί 13 "behoefte heeft. Voorbeelden van de diuretica die beoogd worden voor gebruik in combinatie met de verbinding volgens de uitvinding zijn de thiazide diuretica, b.v. chloorthiazide, hydrochloorthiazide, flumethiazide, hydroflumethiazide, 5 bendroflumethiazide, methyclothiazide, trichloormethiazide, polythiazide of banzthiazide, alsmede ethacrynzuur, ticrynafeen, chloorthalidon, furosemide, musolimine, bumetanide, triamtereen, amiloride en spironolacton en zouten van dergelijke verbindingen.

De verbindingen met formule 1 kruinen worden geformu-10 leerd voor gebruik voor de verlaging van de bloeddruk in samenstellingen zoals tabletten, capsules of elixers voor orale toediening, of in steriele oplossingen of suspensies voor parenterale toediening. 10 tot 500 mg van een verbinding met \ ' formule 1 wordt vermengd met fysiologisch aanvaardbare drager, 15 excipient, bindmiddel, conserveringsmiddel, stabilisator, smaakstof en dergelijke, in een eenheidsdoseringsvorm zoals nodig is volgens aanvaarde farmaceutische praktijk. De hoeveelheid werkzame stof in deze samenstellingen of preparaten is zodanig, dat de geschikte doseringen het aangegeven trajekt wordt ver-20 kregen.

De verbindingen met formule 1, waarin X een groep met formule 80 is, bezit ook enkefalinase afremmende werking en zijn bruikbaar als analgetische middelen. Zo wordt door de toediening van een samenstelling of een combinatie van dergelijke 25 verbindingen met formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan bevat, pijn verlicht bij de zoogdiergastheer. Een enkelvoudige dosis of bij voorkeur twee of meer verdeelde dagelijkse dosis, verschaft op een basis van 0,1 tot 100 mg per kg lichaamsgewicht per dag, bij voorkeur 1 tot 50 mg per kg 30 per dag, verschaft de gewenste analgetische werking. De samen stelling wordt bij voorkeur oraal toegediend, maar parenterale wegen, zoals subcutaan, kunnen ook worden gebruikt.

De onderstaande voorbeelden dienen ter toelichting van de uitvinding. Temperaturen zijn vermeld in °C. Lïï-20 heeft 35 betrekking op een Sephadex chromatografie gel dat in de handel 830 2 5 62 'l * 1 ' l * verkrijgbaar is bij Pharmacia Fine Chemicals.

Voorbeeld I

1 “/ïi“r3“(benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyL7-L-alanyl7- L-nroline, monohydrochloride_ 5 a) L-alanyl-L-proline, fenylmethylester, p-tolueen- sulfonzuurzout N-ƒ( 1,1 -dimethylethoxy)carbonylJ-L-alanine (310,7 g), L-proline, fenylmethylester, hydrochloride (396,2 g), dicyclohexyl-carbodiimide (338,6 g), hydroxybenzotriazoolhydraat (251,5 g), 10 diisopropylethylamine (285,7 ml) en tetrahydrofuran (5 l) worden gecombineerd bij 0° (dicyclohexylcarbodiimide wordt het laatste toegevoegd) en een nacht lang bij kamertemperatuur ^ ') geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd en geconcentreerd.

Het residu wordt opgelost in 1 ethylacetaat en gewassen met 15 5 % natriumdicarbonaat (2 x 2 l), 5 #-ig kaliumbisulfaat (2 x 2 l) en water. De ethylacetaatlaag wordt gedroogd (MgSO^) en geconcentreerd, het residu wordt opgelost in 3 1 diethyl-ether en men laat dit een nacht lang bij 0° staan. Het mengsel wordt gefiltreerd en het filtraat geconcentreerd waardoor 620 g 20 ruwe 11-/71,1 -dimethylethoxy) carbonyl/-L-alanyl-L-proline, fenylmethylester worden verkregnn.

N-/( 1,1-dimethylethoxy)carbonyLf-L-alanyl-L-proline, fenylmethylester (275 g) wordt in een ijsbad gekoeld en behandeld met 500 ml koud trifluorazijnzuur (vers gedestilleerd) onder argon 25 en bij kamertemperatuur gedurende 1 uur geroerd. Het mengsel wordt in vacuum geconcentreerd en 2x azeotropisch met tolueen gedestilleerd. Het ruwe trifluorazijnzure zout, een olie, wordt opgelost in 500 ml ether en langzaam onder roeren behandeld met een oplossing van p-tolueensulfonzuurhydraat (1 equivalent) opgelost 30 in 6 1 ether. Het verkregen neerslag wordt door filtreren ver zameld. De vaste stof wordt opgelost in 11 methanol en behandeld met b 1 ether en gekoeld. Het verkregen neerslag wordt verzameld en gedroogd waardoor 300 g L-alanyl-L-proline, fenylmethylester, p-tolueensulfonzuurzout; smpt. 156-I580, worden verkregen.

35 8302562 15 1 1 · i • ( b) 1-/ϊί-/2-( 1,1-dimethylethoxy)-2-oxoethyl7-N-/‘( fenyl methoxy ) carionylJ-L-alanylJ-L-proline, fenylmethylester_... ____________

Een mengsel van L-alanyl-L-proline,fenylmethylester, 5 p-tolueensulfonzuurzout (32,16 g, 72 mmol), tert.butylbroom- acetaat (1^,2 g, 72 mmol), triethylamine (20,1 ml, 1¼ nmol), en tetrahydrofuran (290 ml) wordt 72 uur bij kamertemperatuur geroerd. Benzylohloorformiaat (12,^ ml, 87,8 mmol) en triethylamine (12,5 ml, 87,8 mmol) worden toegevoegd en het mengsel wordt 10 een nacht lang geroerd. Het reaktieprodukt wordt ingedampt en verdeeld tussen water en ethylacetaat. De in ethylacetaat oplos-' bare stoffen worden gewassen met verdund zoutzuur en daarna met ' > water. De ethylacetaatoplossing wordt daarna ingedampt en gechromatografeerd op siliciumdioxydegel (230-U00 mesh) met 15 gebruikmaking van het oplosmiddelsysteem ethylacetaat/hexaan (1:1) 0,7 kg/cm^ druk) waardoor 19,5 g 1-/11-/2-( 1,1-dimethyl-ethylet hoxy) -2-oxoethyl7-H-/( fenylmethoxy) carbonyl7”I'-alanyl7-L-proline, fenylmethylester worden verkregen.

c) 1-/11-( carboxymethyl)—N—/*( fenylmethoxy) carbonylJ-L- 20 alanyl7-L-nroline, fenylmethylester_ 1-/11-/2-( 1,1-dimethyl et hoxy )-2-oxoet hyl/-H-/l[ fenylmethoxy )carbonyl7-L-alanyl7-L-proline , fenylmethylester (18 g, 3^,3 mmol) wordt opgelost in trifluorazijnzuur (50 ml) en men laat het I5 uur bij kamertemperatuur staan. Het mengsel wordt 25 ingedampt en gefiltreerd door een kleine kolom siliciumdioxyde- . „ gel (200 g) met gebruikmaking van het oplosmiddelmengsel chloroform/methanol/azijnzuur (9,6:0,2:0,2) waardoor 11,U g 1 ”/ÏT-( carboxymethyl )-N-/X fenylmethoxy) carbonyl7-L-alanyl7“L-proline, fenylmethylester.

30 d) 1 -/li-/2- (benzoylamino) -2-oxo-l+-f enylbutyl/-N- [{fenylmethoxy)carbonyl7-L-alanyl7-L-proline, fenylmethylester 1-/N-( carboxymethyl )-H-/( fenylmethoxy )carbonyl7-L-alanyl7~L-proline, fenylmethylester (7,0 g, 15,0 mmol) wordt 35 opgelost in droge tetrahydrofuran (50 ml) en gekoeld in een 8302562 •T ; f -.

16 ijs"bad, oxalylchloride (1,57 ml, 18 mmol) wordt toegevoegd, gevolgd door U druppels dimethylformamide. Na 15 min. wordt het reaktiemengsel bij kamertemperatuur nog 1 uur geroerd. Het mengsel wordt ingedampt, weer opgelost in tetrahydrofuran 5 (30 ml) en de oplossing wordt gekoeld in een ijsbad. De oplossing wordt druppelsgewijze in een tijdbestek van 5 min. toegevoegd aan een ijskoude oplossing van 2-fenyl-^l·-(fenylmethyl)-5()-oxa-zolon (3,98 g» 15»75 mmol) in tetrahydrofuran (2¾ ml). Triethylamine (2,5 ml, 17»1 mmol) wordt toegevoegd aan het 10 reaktiemengsel en wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel wordt gefiltreerd om triethylamine hydro-chloridezout te verwijderen en de gefiltreerde tetrahydrofuran-£ ) oplossing wordt ingedampt en opnieuw opgelost in pyridine (16 ml). U-dimethylaminopyridine (50 mg) wordt toegevoegd en 15 de oplossing wordt 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Ijsazijn (16 ml) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt k5 min. op 100° verhit. Het reaktiemengsel wordt daarna afgekoeld, onder vacuum ingedampt, opgelost in ethylacetaat en geextraheerd met waterig natriumbicarbonaat en verdund zoutzuur. Het ethyl-20 acetaat extract wordt na indampen gechromatografeerd over siliciumdioxydegel (230-UOO mesh) met gebruikmaking van het oplosmiddelsysteem ethylacetaat/benzeen (U:6) waardoor U,9 g 1 ”/S“Z3-( benzoylamino) -2-oxo-U-f enylbutyl7"N- £( f enylmet hoxy) -carbonyl7-L-alanyl7-L-proline, fenylmethylester.

25 Analyse berekend voor Cj^Hj^N^O^ . 0,H2 H^O: C 70,31; N 6,15; H 6,17 Gevonden C 70,31; N 6,13; H 6,08 e) 1-/N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7-L- alanyl?-L-proline, monohydrochloride_ 30 1 -/N-Z3- (benzoylamino) -2-oxo-U-f enylbuty!l/-N-£( fenyl- methoxy)carbonyl7“L-alany\7-L-proline, fenylmethylester (1,0 g) wordt opgelost in absolute ethanol (30 ml) en 1n zoutzuur (2,25 ml). Palladium-koolstofkatalysator (10 %, 200 mg) wordt toegevoegd en de oplossing wordt een nacht lang onder een water-35 stofdeken geroerd. De katalysator wordt afgefiltreerd en de 8302562 * f

IT

oplossing wordt ingedampt. Het ruwe produkt (700 mg) wordt gecombineerd met 300 mg ruw produkt uit een voorafgaande reaktie op kleine schaal en door een kolom gevoerd van LH-20 (2,5¾ cm x 38,1 cm) in methanol. De frakties die het 5 gewenste produkt bevatten worden bijeen gebracht, ingedampt, opgelost in water en gefiltreerd. De heldere waterige oplossing wordt gelyofiliseerd waardoor 800 mg 1-/-H-/3-(benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyl7-L“alanyl7“L-proline, monohydrochloride; = ”59*8 (c = 1,!*; methanol); smpt. 98-130° (ontl.) 10 worden verkregen.

Tic (siliciumdioxydegel, n-butaiiol/azgnzuur/water, 1+:1:1)

Bf = 0,¾¾.

f } Analyse berekend voor . 0,75 HgO: C 59,88; H 6,33; If 8,38; Cl 7,07 15 Gevonden: C 59,82; H 6,30; H 8^2; Cl 6,85

Voorbeeld II

1 -^“ZT“amino-3“(benzoylamino )-2-oxoheptyl7-L-alany3j-L-proline, dihydrochloride_ a) N^-benzoyl-N -/Ifenylmethoxy)carbonyl7-L“lysine

Aan een ijskoude oplossing van N -/(fenylmethoxy) carbonyl7-Ii-lysine (10,09 g, 36 mmol) in waterig natrium-hydroxyde worden benzoylchloride ( 5 ml, ¾3,2 mmol) en waterig natriumhydroxyde (ta, 10,8 ml) gelijktijdig in 5 porties toegevoegd in een tijdsbestek van 30 min. Het ijsbad wordt pc ? verwijderd en het roeren wordt nog \\ uur bij kamertemperatuur "" voort gezet. Het reaktiemengsel wordt daarna geextraheerd met ethylacetaat (weggeworpen), de waterige moederloog wordt aangezuurd met verdund zoutzuur en geextraheerd met ethylacetaat.

Het ethylacetaatextract wordt geconcentreerd en het residu 30 gekristalliseerd uit ethylacetaat-hexaan waardoor 12,9 g N^-benzoyl-Sf^-^fenylmethoxy)carbonyl7-L-lysine; smpt. 110-112° (109°).

b) 2-fenyl-^A“/Z( f enylmethoxy) carbonyl7 aminq/-butyl7-5(te)-oxazolon 35 2 6 ^ N -benzoyl-N (fenylmethoxy)carbony]J-Irlysine 8302532 18 t ! 1 ; (11,53 g, 30 mmol) wordt opgelost in tetrahydrofuran (55 ml) en in een ijstad geroerd. Aan dit reaktiemengsel wordt een oplossing van dicyclohexylcarbodiimide (6,8 g, 33 mmol) in tetrahydrofuran druppelsgewijze toegevoegd in een tijdsbestek 5 van 15 min. Het ijsbad wordt na een uur verwijderd en het roeren wordt nog 18 uur bij kamertemperatuur voortgezet.

Dicyclohexylureum wordt afgefiltreerd en tetrahydrofuran wordt in vacuum geconcentreerd. Het residu wordt gekristalliseerd uit ethylacetaat-hexaan waardoor 9,^ g 2-fenyl~^-/^-/7‘(fenyl-10 methoxy)carbonyl7amino/butyl/"5(te)-oxazolon; smpt. 72-73° (68°).

c) 1-/Ï-/3-(benzoylamino)-7“ZT( fenylmethoxy)-carbonyl/ aminoJ-2-oxoheptyl7“H-/'( f enylmethoxy) carbonyl7-L- ^ ') alanyl7-L-proline, fenylmethylester_ 1 “/N- (c arboxymet hyl )-ïï-/t f enylmethoxy )-carbonyl/-L-15 alanyl7-L-proline, fenylmethylester _(_2,82 g, 6 mmol) uit voor beeld I c), wordt opgelost in tetrahydrofuran (20 ml) en de oplossing wordt in een ijsbad geroerd. Oxalylchloride (0,63 ml, 7,2 mmol) wordt toegevoegd, gevolgd door U druppels dimethyl-formamide. 11a roeren van dit reaktiemengsel gedurende 20 min.

20 in een ijsbad wordt het daarna bij kamertemperatuur nog een uur geroerd. De oplosmiddelen worden in vacuum verwijderd en het residu wordt opnieuw opgelost in tetrahydrofuran (10 ml) en in een ijsbad gekoeld. Aan deze koude geroerde oplossing wordt een koude oplossing van 2-fenyl-1-/1-/77 f enylmethoxy) 25 carbonyl/amino/butyl/-5(lH)-oxazolon (2,2 g, 6 mmol) in tetrahydrofuran (ll ml) toegevoegd, gevdgd door triethylamine (0,85 ml, 6 mmol). Het ijsbad wordt verwijderd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd.

Het neergeslagen triethylamine-hydrochloride wordt door filtreren 30 verwijderd en de moederloog wordt in vacuum geconcentreerd.

Deze wordt daarna opnieuw opgelost in pyridine (6 ml), 1-dimethylaminopyridine (30 mg) wordt toegevoegd en de oplossing wordt 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Azijnzuur (6 ml) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 15 min. op 105° 35 verhit. Het wordt daarna ingedampt, opgenomen in ethylacetaat 8302562 [ ---------- • ï ; * 19 en gewassen met water, verdund zoutzuur en waterig natriumbicarbonaat . Ha verdampen van het oplosmiddel wordt het ruwe produkt (3,8 g) gechromatografeerd (siliciumdioxydegel,230 g) met gebruikmaking van ethylacetaat-hexaan (1*: 3), gevolgd door 5 ethylacetaat-hexaan (2:1) voor elutie waardoor 1,8 g 1 -/N-/3-(benzoylamino) -7-//(f enylmethoxy) carbonyl/amino/-2-oxoheptyl7“N-/( f enylmethoxy) carbonyl7-L-proline, fenylmethylester.

d) 1-/ÏI-ZY-amino-3-(benzoylamino)-2-oxoheptyl/-L- alanvl7-IiTiroline, dihydrochloride_ 10 (benzoylamino )-7“^T( f enylmethoxy )-carbonyl/- amino7"2-oxoheptyl/-N-/’( f enylmethoxy) carbonyl/-L-alanyl/-L-" proline, fenylmethylester (1,3 g, 1,6 mmol) wordt opgelost /'·, in ethanol (75 ml) en waterig zoutzuur (1N, 5 ml). Paladium op koolstofkatalysator (10 ¢, 1*50 mg) wordt toegevoegd en het 15 mengsel wordt een nacht lang bij atmosferische druk gehydro-geneerd. De katalysator wordt afgefiltreerd en de oplossing wordt in vacuum ingedampt. Het residu wordt opgelost in water en gelyofiliseerd. Het lyofilaat wordt getritureerd met ether waardoor 0,6 g 1-/tt-/Y-amino-3“(benzoylamino)-2-oxoheptyl7-L- o 22 o 20 alanyl7~L-proline, hydrochloride; smpt. 80-155°; /<* = -50 (c = 1,1; methanol). 0,09 (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijn-zuur/water, 1*:1:1).

Analyse berekend voor . 2HC1 . 1,5 HgO:

C 1*9,63; H 7,00; N 10,52; Cl 13,55 25 Gevonden: C 1*9,63; H 6,82; N 10,1*8; Cl 13,36 Voorbeeld III

1“Z&-/3-(benzoylamino)-2-oxoheptyl7-L-alanyl/-L-•proline, monohydrochloride a) N-benzoyl-D.L-norleucine 30 D,L-norleucine (39,3 g, 300 mmol) wordt opgenomen in natriumhydroxyde (2n, 150 ml) en onder roeren in een ijsbad worden natriumhydroxyde en (2n, 150 ml) en benzoylchloride (330 mmol, 38,3 ml) in een tijdsbestek van 30 min. toegevoegd.

Het bad wordt verwijderd en Is uur wordt het reaktiemengsel 35 geextraheerd met ether. Het waterige gedeelte wordt aangezuurd

____J

8302562 20 't * * i met 2 n zoutzuur en de kristallen gefiltreerd waardoor 68,9 g N-benzoyl-D,L-norleucine, smpt. 131-133° (125°) worden verkregen, b) U-butvl^-fenvl-5(1*H)-oxazolon N-benzoyl-D,L-norleucine (1*0 g, 170 mmol) wordt 5 opgenoaen intetrahydrofuran (300 ml) onder roeren in een ijsbad.

Aan dit reaktiemengsel wordt een oplossing van dicyclohexyl-carbodiimide (38,52 g, 187 mmol) in tetrahydrofuran (195 ml) druppelsgewijze in een tijdsbestek van 15 min. toegevoegd.

Het ijsbad wordt verwijderd en het roeren wordt nog 18 uur 10 bij kamertemperatuur voortgezet. Dicyclohexylureum wordt afgefiltreerd en het tetrafuran wordt in vacuum geconcentreerd.

Het residu (31,7 g) wordt gezuiverd op siliciumdioxyde in hexaan:ether (2:1) waardoor 32,1 g l*-butyl-2-fenyl-5(l*H)-oxazolon. v c) 1“/N-/3“(benzoylamino)-2-oxoheptyl7-N-/( fenyl- 15 " methoxy)carbonyl7"L-alanyl7-L-proline, fenyl- methylester_

Een oplossing van 1-/N-(earboxymethyl)-N-£(f enyl-methoxy)carbonylJ-L-alanyiJ-L-proline, fenylmethylester (1,1*1 g, 3 mmol) uit voorbeeld 1(c), in tetrahydrofuran (10 ml) 20 wordt in een ijsbad gekoeld, onder roeren wordt oxalylchloride (0,32 ml, 3,7 mmol) toegevoegd gevolgd door vier druppels dimethylformamide. Het reaktiemengsel wordt in het ijsbad 20 min. geroerd en daarna 1 uur bij kamertemperatuur. Het wordt in vacuum ingedampt, opnieuw opgelost in tetrahydrofuran 25 (5 ml) en in een ijsbad gekoeld. Een koude oplossing van l*-butyl-2-fenyl-5(llH)-oxazolon (0,65 g» 3 mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) wordt druppelsgewijze toegevoegd, gevolgd door triethylamine (0,1*3 ml, 3,1 mmol). Het reaktiemengsel wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd. Ha affiltreren van 30 triethylaminehydrochloride wordt de tetrahydrofuranoplossing in vacuum geconcentreerd. Het residu wordt opnieuw opgelost in pyridine ( 3 ml), l*-dimethylarninopyridine (15 mg) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Azijnzuur (3 ml) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel 35 wordt 1*0 min. bij 100° verhit. Het wordt dan ingedampt, opnieuw 8302562 ' '* ; * 21 opgelost in ethylacetaat en gewassen met water, verzadigd natriumbicarbonaat, verdund zoutzuur en water. Na indampen wordt het residu gechromatografeerd over siliciumdioxydegel met gebruikmaking van het oplosmiddelsysteem ethylacetaat-5 benzeen (4:6), waardoor 0,8 g 1-/N-£3“(benzoylamino)-2-oxoheptyl7-N-ƒ( fenylmethoxy)carbonyi/-L-alanyl/-L-proline, fenylmethylester.

d) 1-/N-/3-(benzoylamino )-2-oxoheptyl7-L-alanyl7-L- proline, monohydrochloride_ 1 -/N“/3- (benzoylamino) -2-oxoheptyl7“N-£( f enylmethoxy) 10 carbonyl7“L-alanyl7"L“proline, fenylmethylester (0,96 g, 1,5 mmol) wordt opgelost in ethanol (75 ml)· Zoutzuur (in, 2ml) wordt toegevoegd, gevolgd door palladium op koolstofkatalysator f ' (10 JS, 200 mg). De oplossing wordt een nacht lang onder een V* ' waterstofdeken geroerd. De katalysator wordt afgefiltreerd, de 15 ethanolische oplossing wordt ingedampt en het residu wordt opgelost in water en gelyofiliseerd waardoor 0,62 g 1-7ÏÏ-/3”(benzoylamino)-2-oxoheptyl7-L-alanyl7”L-proline, monohydrochloride; smpt. 86-123°; /c - -62,9° (c = 1,05; methanol). 0,57 (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 20 4:1:1).

Analyse berekend voor ¢^22^31^3^5 · HC1 . 2Η,,0: C 53,85; H 7,U0; N 8,57; Cl 7,23 Gevonden: C 53,85; H 7,20; N 8,73; Cl 7,29.

Voorbeeld IV

25 1 -/N~Z"3- (benzoylamino )-2-oxo-4-( pyridin-3-yl )butyl7- v .. L- alanyl7-L-proline, dihydrochloride_ a) 2-benzoylamino)-3-(pyridin-3~yl)-2-propeenzuur 2-fenyl-4-(3-pyridinylmethyleen)-5(4H)-oxazolon (3 g, 12 mmol) (zie Griffith c.s., J. Org. Chem., Vol. 29, 30 blz.2659) wordt opgelost in azijnzuur ( 24 ml) en waterig zoutzuur ( 0,5 n, 150 ml). Het reaktiemengsel wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd. Het wordt ingedampt en opnieuw ingedampt uit absolute ethanol. Het wordt getritureerd met tetrahydrofuran, gefiltreerd en de gefiltreerde vaste stof 35 wordt opnieuw getritureerd met absolute ethanol waardoor 2,8 g 8302562 22 ϊ ' 1

J

2-(benzoylamino)-3-(pyridin-3-yl)-2-propeenzuur; smpt. 215-216° (203°).

Ta) 2-(benzoylamino)-3-(pyridin-3-yl)-2-propaanzuur 2-(benzoylamino)-3”(pyridin-3-yl)-2-propeenzuur 5 (iH g, U6 mmol) wordt opgelost in water (500 ml) en een nacht lang gehydrogeneerd met gebruikmaking van palladium op kool-stofkatalysator (10 %, 1,8 g). De katalysator wordt afgefiltreerd en het reaktiemengsel werdt ingedampt tot een klein volume (100 ml) en gelyofiliseerd waardoor 13»1 g produkt worden ver-10 kregen. Het lyofilaat wordt getritureerd met absolute ethanol-ethermengsel en gefiltreerd waardoor 12 g 2-(benzoyl-amino)-3-(pyridin-3-yl)-2-propaanzuur; smpt. 99 - 115° worden Γ ~'j verkregen.

c) 1-/N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-(pyridin-3-yl)-15 butyl7-N-/( fenylmethoxy) c arbonyl/p\L-alanyl7-L- proline, fenylmethylester_ 1 -/Ir- (carboxymethyl) -N-./( f enylmethoxy) carbonyl7-L-alanylJ-L-proline, fenylmethylester (6,2 g 13,1 mmol) uit voorbeeld l(c), wordt opgelost in tetrahydrofuran (20 ml) en de 20 oplossing wordt in een ijsbad geroerd. Oxalylchloride wordt toegevoegd, gevolgd door U druppels dimethylformamide. Na roeren van dit reaktiemengsel in een ijsbad gedurende 20 min., wordt het daarna nog een uur bij kamertemperatuur geroerd.

De oplosmiddelen wordt in vacuum verwijden!en het residu wordt 25 opnieuw opgelost in tetrahydrofuran (20 ml).

2-(benzoylamino )-3~(gyridin-3-yl )-2-propaanzuur (1* g, 13 mmol) wordt gesuspendeerd in tetrahydrofuran (1*5 ml) en onder roeren in een ijsbad worden triethylamine (1,96 ml, 1¾ mmol) en dicyclohexylcarbodiimide (2,96 g, 1U mmol) toegevoegd. 30 Het reaktiemengsel wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd. Het wordt daarna gefiltreerd en het filtraat wordt tot droog ingedampt. Dit residu wordt opgelost in tetrahydrofuran (30 ml) en in een ijsbad geroerd. Aan deze oplossing wordt de bovenstaande oplossing van 1 -/ΪΊ- (carboxymethyl) -N-/( f enylmethoxy) -35 carbonyl7-L-alanyl7“L-proline, fenylmethylester, een zuur- 8302562 23 τ * f chloride in tetrahydrofuran (20 ral) toegevoegd. Triethylamine (1,9 ml, 13,6 mmol) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang hij kamertemperatuur geroerd. Het wordt gefiltreerd om triethylamine hydrochloride te verwijderen.

5 Het filtraat wordt in vacuum ingedampt, opnieuw opgelost in pyridine (15 ml), k-dimethylaminopyridine (65 mg) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 3 uur hij kamertemperatuur geroerd.

Azijnzuur (16 ml) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 15 min. op 100° verhit. Het wordt dan ingedampt, opnieuw 10 opgelost in ethylacetaat en gewassen met waterig natriumbicarbo naat en water. Na indampen wordt het ethylacetaatextract ge-, chromatografeerd over siliciumdioxydegel met gebruikmaking " van ethylacetaat voor elutie waardoor 3,3 g 1 -/N-/Ï3-(benzoyl- amino) -2-oxo-^- (pyr idin-3-yl )butyl7-N-/T fenylmethoxy) carbonyl7-L-15 alanyl7-L-proline, feny-lmethylester.

d) 1-/ft-/"3”(benzoylamino )-2-oxo-U-(pyridin-3-yl )-butyl7-L-alanyl7-L-proline, dihydrochloride Het fenylmethylesterprodukt uit deel (c) (2,6 g, 3,8¾. mmol) wordt opgelost in ethanol (75 ml) en waterig zoutzuur 20 (1η, 8 ml) wordt toegevoegd, gevolgd door palladium op koolstof katalysator (10 %t 0,6 g). Na 16 uur hydrogeneren wordt een aanvullend 0,5 g katalysator toegevoegd en het hydrogeneren wordt nog 6 uur voortgezet. Het mengsel wordt gefiltreerd, ingedampt en gecombineerd met een dergelijk reaktieprodukt, 25 verkregen door hydrogeneren van 0,8 g esterprodukt uit deel (c).

v·· . Het gehydrogeneerde materiaal wordt dan gechromatografeerd over LH-20 in water waardoor het homogene produkt wordt verkregen.

Een waterige oplossing van dit materiaal wordt behandeld met waterig zoutzuur (1η, 3 ml) en de oplossing wordt gelyofili-30 seerd waardoor 1,0 g 1-/ft-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-(pyri din-3- yl)butyl7"L“alanyl7-L-proline, dihydrochloride; smpt. 120-135°; fa - -55,5° (c = 1,1, methanol). Rf 0,11 (silicagel; n-butanol/azijnzuur/water; h:1:1).

Analyse berekend voor ^1^28¾^ 5 * * 2H20: 35 C 51,35; H 5,75; N 9,98; Cl 12,63

Gevonden: C 51,35; H 5,8¾¾ N 9,96; Cl 12,8¾ 8302562 i ; j : 2k

Voorbeeld V

1-/N-/3-(benzoylamino)-k-(-hydroxy fenyl)-2-oxo- butyl?-L-alanylJ-L~proline. monohvdrochloride a) 2-fenyl-i+-/Z1+-(fenylmethoxy) fenyl7methyl7-5 C UH) - 5 oxazolon 0-benzyl-L-tyrosine (11,0 g, *+0,5 mmol) wordt opgenomen in 0,5 n natriumhydroxyde (81 ml) en water (81 ml) onder krachtig roeren in een ijsbad. Hieraan worden in 5 gelijke hoeveelheden toegevoegd een totaal van 52 ml benzoylchloride, 10 *+5 ml 1 n natriumhydroxyde en een aanvullende U00 ml water in een tijdbestek van 25 min. Het bad wordt verwijderd en de reaktie wordt 2 uur bij kamertemperatuur doorgevoerd. Het , j mengsel wordt 2x geextraheerd met ethylacetaat. Het waterige gedeelte wordt gefiltreerd, aangezuurd met 1 n zoutzuur en 15 de kristallen worden gefiltreerd waardoor 12,9 g N-benzoyl-0-benzyl-L-tyrosine; smpt. 166-168° (162°) worden verkregen.

Dit U-benzoyl-O-benzyl-L-tyrosine (12,76 g, 35 mmol) wordt opgenomen in droog tetrahydrofuran (50 ml) onder roeren in een ijsbad. Hieraan wordt dicyclohexylcarbodi-20 imide (7,7 g, 37,*+ mmol) in tetrahydrofuran (18 ml) druppelsgewijze toegevoegd. Ka 20 min. wordt het ijsbad verwijderd en de reaktie loopt een nacht lang bij kamertemperatuur verder.

Het dicyclohexylureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt tot droog geconcentreerd. Het ruwe produkt wordt gekristalliseerd 25 met ether/hexaan waardoor 10,26 g 2-fenyl-WA” (f enylmethoxy )-fenyl/methyl/-5(*+H)-oxazolon; smpt. 85-87° (83°).

b) 1 -/ïï-/3-( benzoylamino )-2-oxo-U-JU-( f enylmethoxy )- fenyl7butyl7-N-/‘(fenylmethoxy4carbonyl7“L-alanyl7” L—proline- fenylmethylester_ 30 1-/11-( carboxymethyl )-N-/"( f enylmethoxy) -carbonyl7“L- alanyl7-L-proline, fenylmethylester (2,82 g, 6 mmol), uit voorbeeld I (c) wordt opgelost in tetrahydrofuran (20 ml) en de oplossing wordt in een ijsbad geroerd. Oxalylchloride (0,63 ml, 7,2 mmol) wordt toegevoegd, gevolgd door *+ druppels dimethyl-35 formamide. Ha roeren van dit reaktiemengsel gedurende 20 min.

8302562 ’ ’ i 25

In een ijsbod, wordt bet daarna nog een uur bij kamertemperatuur geroerd. De oplosmiddelen worden in vacuum verwijderd en het residu wordt opnieuw opgelost in tetrahydrofuran (10 ml) en in een ijsbad gekoeld. Aan deze koude geroerde oplossing wordt een 5 koude oplossing van 2-fenylfenylmethoxy J-fenyl/methyl/- 5(te)-oxazolon (2,1½ g, 6 mmo 1) in tetrahydrofuran (Uo ml) toegevoegd. Triethylamine (0,8½ ml, 6 mmol) wordt toegevoegd en een basisch milieu wordt gehandhaafd gedurende de reaktie door aanvullende noodzakelijke hoeveelheden triethylamine toe te 10 voegen. Het reaktiemengsel wordt een nacht lang bij kamer temperatuur geroerd. Het wordt daarna gefiltreerd en het filtraat wordt ingedampt en opnieuw opgelost in pyridine (7 ml), ^dimethyl . ' aminopyridine ( 30 mg) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Azijnzuur (7 ml) 15 wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt ½5 min. op 100° verhit. Het wordt daarna ingedampt en het residu wordt opnieuw opgelost in ethylacetaat en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat en verdund zoutzuur. Het neutrale ethylacetaat extract wordt ingedampt en gechromatografeerd over 20 siliciumdioxydegel (300 g) met gebruikmaking van het oplosmiddel- systeem ethylacetaat:benzeen (6,5:3,5) waardoor 2,7 g 1-ZÏI-/3- (benzoylamino) -2-οχο-^2Ά~ (f enylmethoxy) -fenyl7butyl/-N-f enylmethoxy)carbonyl7"L-alanyl/-L-proline, fenylmethylester.

c) 1 (benzoylamino) -½- (^hydroxy f enyl) -2- 25 oxobutyl7-L-alanyl7-L-proline, monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (b) (1,8 g, 2,26 mmol) wordt opgelost in ethanol (150 ml) dat waterig zoutzuur (in, 3,5 ml) bevat. Palladium op koolstof katalysator (10 #, 500 mg) wordt toegevoegd en de oplossing wordt een nacht lang onder een waterstof-30 deken geroerd. Hij wordt ingedampt, opgelost in water en gelyofiliseerd waardoor 1-/U-/3-(benzoylamino )^-(^hydroxy-fenyl-2-oxobutyl7-L-alanyl7-L-proline, monohydrochloride, smpt. 118-152°; /*a7^ * -63,1° (c = 1,07; methanol), wordt verkregen. Rf 0^7 (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 35 ^1:1).

8302562 2 6 ^ Λ t ' * *

Analyse berekend voor 0._Η.ηΝ_0^ . HC1 . H„0: O il/ j o 2 C 57,^2; H 6,16; N 8,0U; Cl 6,78 Gevonden: C 57*^2; H 6,03; 21 8,0ll·; Cl 7,11.

Voorbeelden VI - LXII

5 Volgens de procedure van de voorbeelden I-III en V

wordt de in kolom 1 weergegeven peptideester behandeld waardoor de carboxymethylpept ideester als weergegeven in kolom 2 wordt verkregen. Omzetting in zijn zuurchloride en verdere reaktie met het oxazolon uit kolom 3 levert het N-beschermde ester-10 produkt van kolom h. Verwijdering van de N-beschermingsgroep en de estergroep levert het eindprodukt van kolom 5S waarin Rg waterstof is. Kolom 1 geeft verbindingen met formule U, kolom 2 geeft verbindingen met formule 2a, kolom 3 geeft verbindingen met formule 3» kolom U geeft verbindingen met 15 formule 1a en kolom 5 geeft verbindingen met formule 1b.

8302562 27 τ- ' .# τ <§ ' · ? § s 8 3 " 8~ V =" je .Η— !_/—= χ I ° \_i \_ζ I * Λ é> &0 è

*"1 'c I

.¾ 2- a a r-1

D

<U

s

O H

Ο Η H

> > > 8302562 - 28 - * ; τ © ® ' Γ , £5 r*

Ia © l ja <ƒ’ t# -<l·· V—5f '-f '

' I

. . CN

I _?Ί

<Ί X

.-I © <è © i

Μ I

λ I M

f*J <N 3

X X O

(o) © © f' “ * (.; «

£N

X

I υ «rt I i g” 0 <n λ

Ct*. ι—1 <ö o

H

1) 0>

'Show X

> ï> h X

8302562 - 29 - 1 ; * κ § ' ^ §5 “3 «3 . ,(xf" <°><r χΓ 1 ρ» * v.y ι * cs cs a I . Μ Ο

Ο I

è <§> <ê>.

η Ι ^^

« I

«-I (O) (έ> b" / *.

n n S3 o pf* I I 'cs Λ 1 ι 0 u O cs in

rt a B

S3 fÖ t“l

O

0) •g

o WH

o i—ι Η H

> X X "X

_ J

8302562 - 30 - t ; r ; <? Φ f κ o -* o ^ o J *-* <n y α ' Ü • 8 o /--Γa ' -oy--* r«vy--« * 1 Xo'^*' o o ‘ Π 33 ! > a™ »« § V ‘ 3 .

d © d

Pi I

., 6 é è f "l'

CN

*** {Ί a

h I H

ps I Ti «„ Un on a a ό a _. K <ΰ <u fl ο > ..

£ S SB

8302562 - 31 - Λ I * © ' <? 1

Ti „ § I

B to Q Q · rt 25 O O «— 8 « «5 d o— o ó w o=.ó /--K /--* , cxt' -0 r* I *«

SJM ^"<N

u ‘ as T o I w (o) H' N* o (Q) (S) co * r-( | | |

«1 \ o U

U rt -°1 cO S 33 fa Ό I—i <ü

O

P w

OH Η M

É B 5 0 __ 8302562 ·. ' « ; - 32 - @

T ' @ S

Co) us f (a) §e V/—s § g f ✓—» o—( i ·ΐα ss'1 k ° \ * I V_x o^-a-u

,..y 1 I

* ^ <s

SB

a - * I (Q) S' $.

ss 35 © * [j« ‘ ? *

Γ I

CJ fM

CN SB

ss υ f1 © JL u /ΟΛ m 3 CO) “ a) ^ «

g M · Η H

£ B ö B

8302562 - 33 - © ® ' Φ Υ ΐ if ί fa ρ J?.

.γ*Φ Kf tl «η **% » , « I V* t °« «I a" κ * 'c «" [ F ‘ » ij= ê © i A, *- a"7 « *

*-a I 'Ö H

S3 H · fc - - fer

££ R ' R R

8302562 c r , -3^- 4 i ? f f i % w P u j o )— /--« / * w' = <4 i~ ér' v‘ i >Kr Z« «F I 3 CJ CS ^ 1 è (Q) (Q) ^ * i «f I (pl /K i , " · ^ <S> (ë) © «f I ,

I 1 · M CJ01 CJ

l -d o Η · υ_, H Ui j/0 £3 Kh £ » K * ö

£2 B S B'S

8302562 " ' i - 35 - • *

f ?! I

' ·.. ft- ςί· [f sr ir , « b” bm b™ «"1(g) ¥ ® © 8rt

B

t :: è-ó ^

of1 I I

1 I . M * i ύ «* °« sT ' sT K a

Lh M ö

O O ö ü · H

w B B B I

_____^ 8302562 - 36 - A ' ' , t ψ f . p X a g S 5' _^ «3 ° Oj ,^t‘ cf' ,, I i è

•'tN JH

a a I

• I © (Q) © - in λ 0 es a , , a «I ό ’rs I // va °,n Ucn S ' a a a z

<N

. o g «> M x & £Ü R δ § 8302562 , ' r i - 37 - ψ >§> f I § § ., . ..cxf <xf <f'

OJ

I ‘’"m

« Pi W

^ S o s . π „ è <ê> <ê> .«, (q) è κ * I ^ L·/ '·* υ o A κΜ ·ƒ °ρ» {' *** Μ J- w W χΧ °=1 φ Τ' g Γβ°* ' 8 υρ» « -4 I <Ν ? As “ 1 <Θ> . ^ (Q) © Η 5— Μ J Tf Μ ·!—ι Μ δ« δ 5 5 si s a s 8302552 - 33 - r 9. © f I ' a § o Ö o o? § ^ rfs(Qtic~a ' * 1 Via "·», • i ^ i 6 · è "' é; 4 è i i u

Ol . , * I 04 η- *" © l· <? I Ad ^ i1 ? (Q) . a=/-ü s- ! ·0

RS „ ' Η H

53 S3 S3 8302562 . ‘ i - r , * , * - 39 - 9 Q ' ?

• CM Μ O

§ i §

U « U J

r—1--¾ r * pw\/ * * I \-z j I 1M o > s *"I f pL« A, i® ' § in @ ê '' è (q) è «" I , i % 2” s * I 'ti H .

O O Ö H

0 Ö s 8302562 - Uo - a ® @ © Γ ί ι ί f @ ~ 5* Γ±Β SÏ5-8 ^ I i Β » 5 χ I § β ζ ? Τι * 1 < ίτ ί jr «ί èé 4 ro „ èê ©. @ υ

CN

X

“"Ί , , ^ α ώ υ <η η . η Jrt I tJ Κ Η &* Η * ?·) Η Η ' Η Η Χ Ο. (D >- > f> Η ο ω α ta p? j > & Η χ & χ — Ν ► Vk- - * 8302562 - Ui - .

* ! j i § a § j~* § =? ,, M-f p p a t 1 i s* ./1 « o g .•I è ® (a- -I (gi è <è ^ 4 4 è

I Tj K

H K

vO ® H

O (U Η H

t> P i-3 J J

8302562 > : v ; r - U2 - © o" © tr © © · (§>a i (p> > l=° »" " f V f l-o § a o o y 5 Q V — °

·<* 8 w 8 z« o M

Ϋ 3 V 3 V 3 c« ¥3 ~m èr_S 5—5 5-5' 5-1 * ' É § f ? N | I * 1 ^ / '* !r 1 m '' t Ö- è è S3 i-—/ "' è è d è 1 i i i" 6n 2" I >Ö fn Η H » O <ü H > l.

£ü 3 3 & g' 8302562 - 1+3 - τ . r. » -j*·, * a” si0 ' x**

C* · CM CM

0 O N O

1 l λ I

0=0 0=0 pi 0=0

I IX I

0 o o o 1 i « Tm a /—v xx xx v-O v~ü v-ü ° ? ? o=ig 0=,0 3 .0=¾ /—" rv BW“~ = *1m L^- ^ < I | **»

χ04 xM JN

V V s 1 © © (§) "' é è. <g.

1 I , I

ύ o u i <ö a” ü xrt s

h Η H *“ ö M

O o Μ Μ p o <u > >r 3 > p 3 j *-* 8302562 f !' γ .· - IA - f ® · @ ·

o=v °-v yU

0 o / 1 'd O ={ d K '

S V

è ? O

I « 0=0 | Λ 0 = 0 d ~ 0=0 ^ . -, (ts (“* er* , v_^ V-a V-a i n «

0 I

·— d I

1 = w ö· Φ ê fH ‘

O

<ê> '6 é 1 en «Γ I . =" ',« A, . ώ„

?H H S* I_j K

O <1) Η P} a a s 8302562 , " - 1

De beschermingsgroepen in voorbeelden XX, XXXVT-XXXIX en XLI, de beschermingsgroepen in voorbeelden XLIII en XLIV en de R<_ beschermingsgroepen in voorbeelden XLIX, L en LII - LV worden verwijderd als de laatste trap in de synthese.

5 De Rg estergroepen weergegeven in voorbeelden LVH-LXII worden niet verwijderd.

Voorbeeld LXIII

l-fft-flS )-3-( benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl7“L“ alanyl7-L-proline. monohydrochloride_ 10 a) (S)-3_amino-1-chloor-^-fenyl-butan-2-on, hydrobromide (S) -/"3-chloor-2-oxo-1 - (fenylmethyl )própyl7-carbamine-' « zuur, fenylmethylester (51Λ g) wordt opgelost in een mengsel van azijnzuur (252 ml) en broomwaterstof in azijnzuur (3,^5 n, 15 3^8 ml) en 1| uur op kamertemperatuur gehouden. Het reaktie- mengsel wordt daarna in vacuum geconcentreerd en neergeslagen met ether waardoor 36,6 g (S)-3-amino-1-chloor-U-fenyl-but an-2-on, hydrobromide; smpt. (175°) 177“179° worden verkregen.

b) (S)-N-/3-chloor-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl7“ 20 benzamide (S)-3-amino-1-chloor-U-fenyl-butan-2-on, hydrobromide (36,3 g, 130,3 mmol) wordt gesuspendeerd in 520 ml droog tetra-hydrofuran en 18,2 ml triethylamine (130,3 mmol) gedurende 10 min. onder roeren. Het mengsel wordt in een ijsbad geplaatst 25 en 15,2 ml benzoylchloride worden toegevoegd, gevolgd door 10,95 g natriumbicarbonaat. ITa 5 min. wordt het ijsbad verwijderd en wordt het reaktiemengsel 1g uur op kamertemperatuur gehouden. Het reaktiemengsel wordt daarna in vacuum geconcentreerd en het residu opgenomen in 1 1 waterige methanol (10 * water).

30 Het neerslag wordt verzameld, gefiltreerd en gewassen met methanol waardoor 25,3 g (S)-N-/3-chloor-2-oxo-1-(fenylmethyl)-propyl7-benzamide; smpt. (160°) 170°-172° (ontl.); fa = -129 (c 1,7; dimethylformamide) wordt verkregen.

c) 1-/11-/7 S )-3- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl7-L- 35 alanyl7-L-proline, 1,1-dimethylethylester_

_A

8302562 1*6 r * ! * * L-alanyl-L-proline, 1,1-dimethylethylester (2,1*2 g, 10 mmol), natriumbicarbonaat (81*0 mg) en (S)-N-/3-chloor-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl7benz amide (3,01 g) worden gecombineerd in 50 ml dimethylformamide onder een argondeken bij kamertempera-5 tuur en een nacht lang geroerd. Het reaktiemengsel wordt daarna in vacuo geconcentreerd tot ongeveer de helft van zijn oorspronkelijke volume en hetresidu wordt opgenomen in ethylacetaat en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat waardoor 2,25 g ruw produkt worden verkregen. Dit materiaal wordt opgenomen in 10 ethylacetaat:methanol (9515) waardoor 860 mg 1-/iï“/(S)-3-(benzoyl- amino) -2-oxo-l*-fenylbutylJ-L-alanyl/-L-proline, 1,1 -dimet hylethyl-ester.

d) 1-/lT-Z’(S)-3-(benzoylamino)-2-oxo-l*-fenylbutyl7-L-alanyl7-L--proline, monohydrochloride 15 1 S )-3- (benzoylamino )-2-oxo-l*-f enylbutyl7”L- alanyl7”L-proline, 1,1-dimethylethylester (7**0 mg, 1,1*6 mmol) wordt opgelost in een oplossing van chloorwaterstof in azijnzuur (1,5 n, 10 ml) en 30 min. op kamertemperatuur gehouden. Het wordt daarna geconcentreerd, opgenomen in water, gefiltreerd en 20 gelyofiliseerd waardoor 600 mg 1-/N-^S)-3“(benzoylamino )-2-oxo-l*- fenylbutyl7“L-alanyl7“L-proline, monohydrochloride; smpt. 83 -163°; £a = -109° (c = 1,0l*; methanol) worden verkregen.

0,6 (siliciumdioxydegel; butanol/azijnzuur/water, U:1:1).

Analyse berekend voor C_ ϋϊ,,-.Ν.,Ο-. . HC1 . 1,65 H_0: O 5 5 έ 25 C 57,99; H 6,1*8; N 8,12; Cl 6,85

Gevonden: C 57,99; H 6,39; H 8,09; Cl 6,95-

Voorbeeld LXIV

• P

(S )-1-/ N -/5-(benzoylamino )-2-oxo-l*-fenylbutyl7-L-

Iysyl7-L—proline, dihydrochloride_ 30 a) 1-/H6-/T1,1-dimethylethoxy)carbony]J-N^-/'(fenyl- methoxy)carbonyl7-L-lysyl7“L-proline, 1,1-dimethyl-ethylester_ N^-/*( 1,1-dimet hylethoxy) carbonyl7-N2-/(fenylmethoxy )-carbonyl7-L-lysine (9,51 g) en hydroxybenzotriazool (3,825 g) worden 35 opgenomen in 25 ml dimethylformamide onder roeren in een ijsbad 8302562 ‘ ! n ^7 onder een argondeken. Hieraan wordt L-proline, 1,1-dimethylethyl-ester (U,U9 g) toegevoegd, gevolgd door N,lP-diisopropylethyl-amine (2,2 ml) en dicyclohexylcarbodiimide (5,15 g)· Na 15 min. wordt het "bad verwijderd en laat men de reaktie 6\ uur bij 5 kamertemperatuur voort gaan. Het dimethylformamide wordt in vacuum verwijderd. Het residu wordt opgenomen in ethylacetaat en bet dicyclohexylureum wordt af gefiltreerd. Het filtraat wordt neutraal gewassen met 10 % kaliumbisulfaat en verzadigd natriumbicarbonaat. Het ruwe produkt (13,26 g) wordt gezuiverd op 10 siliciumdioxydegelkolom door elueren met ethylacetaat :hexaan (2:1), waardoor 13,0 g 1-/^-/^1,1-dimethylethoxy)carbonyl7”N2-/ (fenylmethoxy)carbonyl7-L-lysyl7~L-proline, 1,1-dimethylethyl-ester.

b) (S J-l-Zi^-Zs-fbenzoylaminoJ-S-oxo-^-fenylbutylJ- 15 N^-Z( 1,1 -dimethyl ethoxy) carbonyl7~L-lysyl7”L- •proline. 1.1 -dimethvlethylest er

Het esterprodukt uit deel (a) wordt in ethanol gereduceerd met palladium op koolstofkatalysator (10 JS) waardoor 3,99 g 1“/&6“/Ί, 1-dimethylethozy)-carbonyl7-L-lysyl/-L-proline, 20 1,1-dimethylethylester worden verkregen. Dit materiaal wordt opgenomen in UO ml dimethylformamide en behandeld met (s)-N-/3“ chloor-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl/benzamide (3,01 g), uit voorbeeld LXIII (b), en natriumbicarbonaat (8U0 mg). Na 18 uur roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel in vacuum geconcen-25 treerd, opgenomen in ethylacetaat en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat. Het ruwe produkt ( 7,0 g) wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegelkolom en geelueerd met ethylacetaat: 1 % methanol, waardoor 1,7 g (Ξ)-1-/Ν2-£3-(Κβηζογΐ8Μίηο)-2-oxo-b-fenylbutyl/-N^-£(1,1-dimethylethoxy)carbonyl7-Ii-lysyl7-L-proline, 30 1,1-dimethylethylester.

c) (S)-1 (benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl7-L- lysylj-L-proline, dihydrochloride_

Het esterprodukt uit deel (b) (1,6 g) wordt 30 min. bij kamertemperatuur behandeld met 20 ml 1,5n zoutzuur:azijnzuur, 35 tot droog geconcentreerd en getritureerd tot een vaste stof 3302562 Η8 τ V ·

* I

met ether, waardoor 1,37 g produkt worden verkregen. Dit materiaal wordt opgenomen in water, gefilterd op millipore en gelyofiliseerd waardoor 1,28 g produkt worden verkregen. Verdere zuivering wordt uit gevoerd op een LH20 kolom in water waardoor 7^-0 mg

O

5 (S)-1-/¾ -/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7-L-lysyl/“L- o 25 o proline, dihydrochloride; smpt. 120 - 180; /a / ? - -8H ,8 (c = 1,05; methanol) worden verkregen. 0,61 (spoor hij 0,9) (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur, 60, Uo, 38# 20). Analyse berekend voor C28H3A°5 · 21101 * 3H20: 10 C 52,98; H 6,98; N 8,83; Cl 11,17

Gevonden: C 52,98; H 6,93; N 8,66; Cl 11,31

Voorbeeld LXV

. % N-/ÏT-//(S)-3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7- L-alanyl7-N-cyclohexylglycine, monohydrochloride 15 a) N-cyclohexylglycine, 1,1 -dimethylethylester

Cyclohexylamine (70,35 ml) en natriumbicarbonaat (12,9 g) worden onder roeren gesuspendeerd in 200 ml absolute ethanol onder roeren in een ijsbad. Hieraan wordt broomazijnzure 1,1-dimethylethylester (20,78 ml) druppelsgewijze toegevoegd.

20 Het ijsbad wordt verwijderd. Ha 2k uur bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel tot droog geconcentreerd, opgenomen in chloroform en gewassen met water. Het ruwe produkt (tó g) wordt gechromatografeerd op siliciumdioxydegel en geelueerd met ethylacetaat:hexaan (2:1, waardoor 27, ^ g N-cyclohexylglycine, 25 1,1-dimethylethylester.

b) N-cyclohexyl-N-/N-/’( fenylmethoxy) carbonyl7_L“ alanyl7glycine, 1,1-dimethylethylest er_ 11-/( f enylmethoxy) carbonyl7~L-alanine g), N-cyclohexylglycine, 1,1-dimethylethylester (k,26 g), hydroxy-30 benzotriazool (3,06 g), dicyclohexylcarbodiimide 12 g) en triethylamine (2,8 ml) worden 20 uur bij kamertemperatuur geroerd in 1*0 ml dimethylformamide. Het reaktiemengsel wordt daarna in vacuum geconcentreerd, opgenomen in ethylacetaat, het dicyclo-hexylureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt neutraal 35 gewassen met 10 % kaliumbisulfaat en verzadigd natriumbicarbonaat 8302562 : < : * ¾9 waardoor 5,9 g ruw produkt wordt verkregen. Kristallisatie uit ether:hexaan levert 3,97 g N-cyclohexyl-N-/ïi-£(fenylmethoxy)carhonylj L-alanyl7glycine, 1, 1-dimethylethylester; smpt. 10¾ - 105°· c) N-(L-alanyl)-N-cyclohexylglycine, 1,1-dimethylethyl- 5 ester

Het esterprodukt uit deel (b) (3,9 g) wordt opgenomen in methanol met palladium op koolstofkatalysator (10 %, 700 mg) en ¾ uur onder een waterstofdeken geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd en tot droog geconcentreerd waardoor 2,65 g ruwe 10 IT-(L-alanyl)-N-cyclohexylglycine, 1,1-dimethylethylester worden verkregen, d) S) -3“ (benzoylamino) -2-oxo^-fenylbutyiJ-L-alanyl/Hï-cyclohexylglycine, 1,1-dimet hylethyl ester 15 Het ruwe esterprodukt uit deel (c) (2,6 g), natrium bicarbonaat (76Umg) en (S)-N-/’3-chloor-2-oxo-1 -(fenylmethyl)-propyl7benzamide (2,75 g) uit voorbeeld LXIIl(b) worden 20 uur in 25 ml dimethylformamide geroerd. Het reaktiemengsel wordt tot droog geconcentreerd, opgenomen in ethylacetaat, en gewassen 20 met verzadigd natriumcarbonaat waardoor bt7 g ruw produkt worden verkregen. Zuivering op een siliciumdioxydegelkolom en elueren met ethylacetaat: methanol (99:1) levert 1,5 g N-£ïï-f[(s)-3-(benzoylamino )-2-oxo-^-f enylbutyl7“L-alany]i7-N-cyclohexylglycine, 1,1-dimethylethylester.

25 e) H-/ÏT-#(S )-3-(benzoylamino )“2-oxo-U-fenylbutyl7- L-alanyl7-H-cyclohexylglycine, monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (d) (500 mg) wordt 30 min. behandeld met 5 ml 1,5 n zoutzuur:azijnzuur en daarna tot droog geconcentreerd bij kamertemperatuur. Het ruwe produkt wordt 30 opgenomen in methanol en gezuiverd op een LH20 kolom waardoor *113 mg produkt worden verkregen. Dit wordt semi-kristallijn gemaakt in acetonitrile:ether waardoor N-/ft-/’/,(S)-3“(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7-L-alanyl-N-cyclohexylglycine, monohydro-ehloride; smpt. 15¾ - 157° (132°); fa= -67,¾0 (c = 1,35; 35 methanol) wordt verkregen. R^ 0,60 (geringe onzuiverheid bij 0,92) 8302562 r 50 * : * : (siliciumdioxydegel, chloroform:methanol:geconc. ammoniak, 30:10:2).

Analyse berekend voor C^gH^N^O,. , HC1 . H^O C 61,35; H 6,99; N 7,67; Cl 6,U7 5 Gevonden: C 61,08; H 6,79; N 7,65; Cl 6,U6.

Voorbeeld LXVI

N-/N-/£(S)-3-(benzoylamino)-2-oxo-ii-fenylbutyl7“ L-alanylJ-N-fenylglycine, monohydrochloride_ a) N-fenylglycine, 1,1-dimethylethylester 10 Een oplossing van triethylamine (11,25 g, 0,11 mol) en aniline (9,3 g, 0,10 mol) in ether (100 ml) onder een argon-deken wordt in. een ijsbad tot 0° gekoeld. Daaraan wordt broom-.azijnzuur 1,1-dimethylethylester (18 g, 0,093 mol) in een tijd- bestekvan 30 min. toegevoegd. Het verkregen mengsel wordt 1 uur 15 bij 0° geroerd, daarna opgewarmd tot kamertemperatuur en een nacht lang geroerd. De oplossing wordt gefiltreerd en gespoeld met ether en het filtraat geconcentreerd waardoor 6,9 g gele olie worden verkregen. R^ 0,6; 0,7 (siliciumdioxydegel, ethyl-acetaat). Chromatograferen op LPS-1 met gebruikmaking van hexaan: 20 ethylacetaat (7:3) als elutiemiddel levert 2,3 g N-fenylglycine, 1,1-dimethylethylester als een bleek gele vloeistof. R^ 0,7 (siliciumdioxydegel, ethylacetaat).

b) N-fenyl-N-ZiT-Z^ fenylmethoxy) c arbonyl/-L-alanyl7“ glycine, 1,1-dimethylethylester_ 25 Een oplossing van 11-£(fenylmethoxy)carbonyl7”L-alanine (2,8 g, 12,7 mmol) in droog tetrahydrofuran (50 ml) onder argon wordt in een droog ijs-ethanolbad gekoeld. Daaraan worden N-methyl-morfoline (1,28 g, 12,7 mmol) en isobutylchloorformiaat (1,73 g, 12,7 mmol) toegevoegd. Na 20 min. wordt.N-fenylglycine, 1,1-30 dimethylethylester (3,7 g, 12,7 mmol) toegevoegd. Het verkregen mengsel wordt 1 uur bij -20° geroerd en daarna een nacht lang bij kamertemperatuur. Het mengsel wordt verdeeld tussen ethylacetaat en 1n zoutzuur. De organische laag wordt achtereenvolgens gewassen met 1n zoutzuur en 10 ^ natriumbicarbonaat, gedroogd 35 (MgSO^), en geconcentreerd. Chromatograferen op LPS-1 en elueren 8302562 Μ- . < : , 51 met een gradient van ethylacetaatrhexaan (3:1 —> 1:1) levert Π,Ο g N-fenyl-N-/N-/(f enylmethoxy)carbonyl/-L-alanyl/glycine, 1,1-dimethylethylester als een heldere olie. R^ 0,¾ (silicium-dioxydegel, ethylacetaat).

5 c) N-( L-alanyl )-N-fenylglycine . 1,1-dimethylethvlester

Een oplossing van het esterprodukt uit deel (b) ^,0 gs 9S7 mmol) in ethanol (125 ml) en 10 % palladium op koolstof katalysator wordt 18 uur onder een waterstofstroom geroerd.

De oplossing wordt gefiltreerd, geconcentreerd, opgelost in ethyl-10 acetaat en geëxtraheerd met 1n zoutzuur. De waterige laag wordt behandeld met natriumbicarbonaat tot basisch en geextraheerd ' met ethylacetaat. De gecombineerde ethylacetaatextracten worden ( gedroogd (MgSO^) en geconcentreerd, waardoor 1,3 g IT-(L-alanyl)-N- fenylglycine, 1,1-dimethylethylester worden verkregen als een 15 witte vaste stof. R^ 0,52, geringe vlek bij 0,6¾ (siliciumdioxydegel , ethylacetaat:methanol; 1:1).

d) Ή-£§-££( S)-3~(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7“

Ii-alanyl7~N-f enylglyc ine, 1,1 -dimethylethylest er

Aan een geroerde oplossing van (S)-N-/3-chloor-2-oxo-20 1-(fenylmethyl)propyl7benzamide (1,¾ g, ^7 mmol) uit voorbeeld LXIII(b) en N-(L-alanyl)-N-fenylglycine, 1,1-dimethylethylester (1,3 g, ¾,7 mmol) in droog dimethylformamide worden natriumbicarbonaat (θ,3θ g, ¾,7 mmol) en natriumjodide (0,7 g, ¾,7 mmol) toegevoegd. Na een nacht lang roeren bij kamertemperatuur wordt 25 het mengsel geconcentreerd, opgelost in ethylacetaat en afgefiltreerd. Het filtraat wordt gewassen met 10 % natriumbicarbonaat, gedroogd (MgSO^) en geconcentreerd tot een geledlie. Chromato-graferen op LPS-1 en elueren met een gradient van ethylacetaat en gevormd hexaan (1:1) tot ethylacetaat levert 1,8 g 30 N-/ÏI-/“/tS )-3“(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl7-L-alanyl7"N- fenylglycine, 1,1-dimethylethylester. R^ 0,3¾ (siliciumdioxydegel, ethylacetaat).

e) lï—/IT—/V"CS)-3-(benzoylamino)-2-oxo-^fenylbutyl7“ L-alanyl7-IT-fenylglyc ine, monohydro chlori de_ 35 Een oplossing van het esterprodukt uit deel (d) 8302562 52 ** » l· l * (1,6 g, 2,9 mmol) in zoutzuur/azijnzuur (1,77 n, 17,0 ml) wordt 30 min. bij kamertemperatuur geroerd. De oplossing wordt geconcentreerd en het residu wordt getritureerd met ether waardoor een bleekgele vaste stof wordt verkregen. Omkristalliseren uit 5 methanol/ether levert 0,8^ g ïT-0-/f(S)-3-(benzoylamino)-2-oxo-l+- fenylbutyl7-L-alanyl7“N-fenylglycine, monohydrochloride als een witte, kristallijne vaste stof, smpt. 1^7 “ 159° (ontl.)

Rf 0,8 (siliciumdioxydegel, butanol:azijnzuurrwater; 1:1:1). faJ-Q ~ ”12,7° (c = 1,5; methanol).

10 Analyse berekend voor C28H29W305 * HC1 * ïï20: C 62,77; H 5*89; N 7,8U; Cl 6,62 Gevonden: C 62,77; H 5,70; N 7,81+; Cl 6,12

Voorbeeld LXVII

( 1 - (S) -1 -/K-/75-(benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl^-N- 15 methyl-L-alanyl7-L~proline, monohydrochloride_ a) N-/Tfenylmethoxy)carbonyl7-L-alanine L-alanine (89,1 g, 1 mol) wordt opgelost in 2n natriumhydroxyde (500 ml) en tot 0° gekoeld. Daaraan worden gel|ktijdig druppelsgewijze in een tijdsbestek van 1 uur benzyl-20 chloorformiaat (20H,5 g, 1,2 mol) en Un natriumhydroxyde (250 ml) toegevoegd. Het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd (0° tot kamertemperatuur) en gewassen met ethylacetaat (2x 500 ml). Het waterige gedeelte wordt aangezuurd tot pH 2,0 met 6n zoutzuur en geextraheerd met ethylacetaat (3x 600 ml).

25 De gecombineerde ethylacetaatextracten worden gedroogd (Na^SO^), ; geconcentreerd op een roterende verdamper en het vaste residu wordt getritureerd met petroleumether waardoor 19^,0 g II-ƒ (f enylmethoxy )carbonylJ-L-alanine worden verkregen als een witte vaste stof.

30 b) N-methyl-11-/( f enylmethoxy) carbonyl7'-L-alanine

Aan een koude (0°) oplossing van H-/(fenylmethoxy)-carbonylj-L-alanine (22,3 g, 0,1 mol) en methyljodide (50 ml, 0,8 mol) in tetrahydrofuran (50 ml) wordt voorzichtig onder zachtjes roeren natriumhydridedispersie (1^,25 g, 0,3 mol) 35 toegevoegd. De suspensie wordt een nacht lang onder een stikstof-deken (0° —> kamertemperatuur) geroerd, langzaam uit gegoten in 8302562 ‘ 1 53 verzadigd natriumbicarbonaat (200 ml), verdunt met ethylacetaat (300 ml) en de lagen worden gescheiden. De organische laag wordt nog een keer met verzadigd natriumbicarbonaat geextraheerd. De gecombineerde waterige lagen worden aangezuurd tot pH 2,0 met 5 10 % kaliumbisulfaat en geextraheerd met ethylacetaat. De ge combineerde ethylacetaatextracten worden gedroogd ( Ha^SO^) en in vacuum geconcentreerd tot een donker olieachtig residu (23,0 g).

Het ruwe zuur wordt behandeld met dicyclohexylamine (20 ml) in ether (150 ml). Het verkregen ruwe d-cyclohexylamine-10 zout wordt verzameld (37*0 g), omgekristalliseerd uit chloroform/ ether (35*0 g) en terug omgezet inhet zuur door verdeling tussen 1n zoutzuur/ethylacetaat, waardoor een bleekgele olie wordt verkregen, die bij staan uitkristalliseert (17»^ g)·

Omkristalliseren (11,2 g) uit ethylacetaat/petroleum-15 ether levert U,0 g ÏI-methyl-!T-£(fenylmethoxy)carbony3a7-L-alanine & O C a als een wit kristallijn produkt; smpt. 65 - 66,5» fa - -31,1° (c = 2, azijnzuur) c) 1 -/TJ-methyl-N-A f enylmethoxy) c arbonyi/-L-al anyl7“ L-alanvU-L-proline - 1,1 -dimet hvlethylest er_ 20 Aan een oplossing van ïï-methyl-ïï-/7 f enylmethoxy )- carbony]J-L-alanine (U,7^ g, 20 mmol) in gedestilleerd tetra-hydrofuran (50 ml) worden L-proline, 1,1-dimethylethylester (3»^2 g, 20 mmol), hydroxybenzotriazoolhydraat (3,06 g, 20 mmol) en dicyclohexylcarbodiimide (U,12 g, 20 mmol) toegevoegd. Het 25 reakfciemengsel wordt een nacht lang geroerd, het neergeslagen dicyclohexylureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in ethylacetaat (50 ml) en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x) en water (2x), gedroogd (Ha^SO^) en 3ó geconcentreerd, waardoor 6,h g 1-/H-methyl-H-^fenylmethoxy)- carbonyl7-L-alanyJj‘-L-proline, 1,1-dimethylethylester worden verkregen als een olieachtig residu.

d) 1-(U-methyl-L-alanyl)-L-proline, 1,1-dimethylethyl- ester_ 35 Een mengsel van het esterprodukt uit deel (c) (6,h g, 8302562 5¾ r : : 16,1* mmol) en 0,8 g 10 % palladium op koolstofkatalysator in ethanol (95 %5 150 ml) wordt een nacht lang bij atmosferische druk gehydrogeneerd. De katalysator wordt door filtreren verwijderd en het filtraat wordt ingedampt. Het verkregen olie-5 achtige residu wordt vast bij het drogen in hoog vacuum tot een olieachtig vast residu (3,8 g). Tritureren met ether levert 1,5 δ 1-(N-methyl-L-alanyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester, monohydrochloride als een witte vaste stof; Rf 0,HU (silicium-dioxydegel, 20 % methanol/chloroform). fa = -102,1°

10 (c = 2, azijnzuur). Het etherfiltraat levert 2,3 g 1 -(N-methyl-L-alanyl) -L-proline , 1,1-dimethylethylester als een olie; R_ 0,UU

pr ^ - (siliciumdioxydegel, 20 % methanol/chloroform). fa = -101,6 ·' ') (c = 2, azijnzuur) e) (S) -1 -£&-fB- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl/- 15 N-met hyl-L-alanylJ-L-proline, 1,1-dimethylethyl- ester_

Een reaktiemengsel van 1-(N-methyl-L-alanyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester (2,1 g, 8,19 mmol), (s)-N-/3-chloor-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl/benzamide (2,^6 g, 8,19 mmol), 20 uit voorbeeld LXIIl(b), overmaat natriumbicarbonaat en natrium- jodide (1,22 g, 8,10 mmol) in dimethylformamide (15 ml) wordt een nacht lang bij kamertemperatuur onder een stikstofdeken geroerd.

Het reaktiemengsel wordt geconcentreerd, het residu wordt verdeeld tussen water/ethylacetaat, de lagen worden gescheiden, de waterige 25 laag wordt nogmaals geextraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde 1 ^ organische extracten worden gewassen met verzadigd natriumbicarbo naat en water, gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd tot een olie-achti g residu (3,5 g)· Snelle chromatografie (200 g siliciumdioxydegel, 1 % methanol/ethylacetaat) levert 2,8 g (S)-1-/11-30 Z"/3-( benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutylJ-N-methyl-L-alanyl7-L- proline, 1,1-dimethylethylester als een gele olie.

f) (S )-1-/lJ-/Y"3-(benzoylamino )-2-oxo-k~fenylbutyl7-N-methyl-L-alanyl7-L~proline, monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (e) (1g, 2,7 mmol) wordt 35 behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (20 ml). Ha 2 uur roeren bij 8302562 : * : < 55 kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel onder verlaagde druk geconcentreerd en het verkregen olieachtige residu wordt getritu-reerd met ether (kx) waardoor 1,05 g (S)-1 -/ΪΓ-/Ζ3-(benzoylamino)-2-oxo-k-fenylbutyl7-N-methyl-L-alanyl/-L-proline, monohydrochloride 5 als een gebroken witte vaste stof; smpt. 125“135°; R^ Q,2h (siliciumdioxydegel, n-butanol/azi jnzuur/water; lt·: 1:1).

Ca = -8T° (c = 1, methanol).

Analyse berekend voor . SCI . 0,7 H^O: C 60,68; H 6,U1; N 8,16; Cl 6,38 10 Gevonden: C 60,68; H 6,36; H 7,95; Cl 6,1*8

Voorbeeld LXVIII

* (S )-1-i&-/'3-(benzoylamino )-2-oxo-k-fenylbutylJ-h- ( ) fenylglycyl7-L-t>roline, hydrochloride (20:3)__ a) 1 -broomacetyl) -L-proline . 1.1 -dimethylethylester 15 Aan een gekoelde (-10°) oplossing van L-proline, 1.1- dimethylethylester (3^,2 g, 0,2 mol) in methyleenchloride (250 ml) worden diisopropylethylamine (38,3 ml, 0,22 mol) en broomacetylchloride (16,5 ml, 0,2 mol) druppelsgewijze in een tijdsbestek van 20 min. toegevoegd terwijl de temperatuur 20 tussen -10° tot -5° wordt gehouden. Het donkere reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd (-10° tot kamertemperatuur) en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het olieachtige residu wordt weer opgelost in ethylacetaat, gewassen net verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x) en water (2x), 25 gedroogd (lia^SO^) en geconcentreerd tot een donker olieachtig residu (20,0 g). Snelle chromatografie (LPS-1, siliciumdioxydegel, 10 % ethylacetaat/methyleenchloride) levert 11,0 g 1-broomacetyl)-L-proline, 1,1-dimethylethyiester als een bleekgele olie.

b) 1-(N-fenylglycyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester 30 Aan een oplossing van 1-(broomacetyl)-L-proline, 1.1- dimethylethylester (2,1 g, 7,5 mmol) in gedestilleerd tetra-hydrofuran (1*0 ml) wordt aniline (1,5 g, 15 mmol) toegevoegd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang onder stikstofdeken geroerd.

Het reaktiemengsel wordt verdund met ethylacetaat (200 ml), 35 gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2 x 50 ml) en water 8302562 56 1 > ' ι (2χ), gedroogd (Na^SO^), en in vacuum geconcentreerd tot een donker olieachtig residu (U,0 g).Snelle chromatografie (LPS-1 diliciumdioxydegel, 10 % ethylaeetaat/methyleenchloride) levert 2,2 g 1-(N-fenylglycyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester als een 5 donkere olie die hij drogen in hoog vacuunyVast wordt.

c) (S )-1-/ïi-;f3“(benzoylamino) -2-οχο-1*-ί enylbutyl/-N-fenylglycyl7-L-proline, 1.1-dimethylethylester

Een reaktiemengsel van 1-(ïï-fenylglycyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester (1,06 g, 3,5 mmol), (S)-N-/3-chloor-2-oxo-10 1-(fenylmethyl)propyl7henzamide (1,06 g, 3,5 mmol), uit voorbeeld LXIIl(b), overmaat natriumbicarbonaat en natriumjodide (0,52 g, 3,5 mmol) in dimethylformamide (10 ml) wordt een nacht lang £ j onder een stikstof deken bij kamertemperatuur geroerd. Het reaktie mengsel wordt uitgegoten in water (50 ml) en geëxtraheerd met * 15 ethylacetaat (3 x 50 ml). De gecombineerde ethylacetaatextracten worden gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x) en water (3x), gedroogd (NagSO^), en onder verlaagde druk geconcentreerd waardoor een donker olieachtig residu (2,0 g) wordt verkregen. Snelle chromatografie (LPS-1 siliciumdioxydegel, 5 % ethylacetaat/methyleen-20 chloride tot 15 % ethylacetaat/methyleenchloride) levert 0,3 g (S)-1-/ïr-Z3-(benzoylamino)-2-oxo-l|-fenylbutyl/-N-fenyl-glycyl7“L-proline, 1,1-dimethylethylester als een bleekgeel schuim.

d) (S)-1 -/N-/3-.(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/-N- 25 fenylglycyl7-L-proline, hydrochloride (20:3)_

Het esterprodukt uit deel (c) (0,28 g, 0,1*9 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur. Ha 1 uur roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel geconcentreerd onder verlaagde druk en het verkregen olieachtige residu wordt 30 getritureerd met ether (hx) waardoor 1^,0 g (S)-1-/ÏI-/*3-(benzoyl-amino) -2-oxo-1*-fenylbutyl/-H-fenylglycyl7-L-proline, hydrochloride (20:3) als een gebroken witte vaste stof; smpt.

110 - 11*0°; 0,76 (geringe vlek bij 0,53) (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 3:1:1) worden verkregen.

3302562 ; v : , 57

Analyse berekend voor ^30^31^3^5 . 0,15 HC1 , 0,5 HgO: C 68,22; H 6,13; 11 7,95; Cl 1,00 Gevonden: C 68,22; H 6,00; N 8,25; Cl 0,99-

Voorbeelden LXIX - XC

5 Door te verk te gaan volgens de methode van voor beelden LXIII tot LXVIII maar het keton te gebruiken als weergegeven in kolom 1, het zuurchloride als weergegeven in kolom 2 en de peptideester als weergegeven in kolom 3 verkrijgt men hst esterprodukt als weergegeven in kolom Verwijdering van de 10 Rg estergroep en eventuele andere beschermingsgroepen levert het overeenkomstige eindprodukt in zuurvorm.

Kolom 1 geeffc weer formule 7a, kolom '2 formule 8a, kolom 3 formule Ua en kolom U formule 1b.

s } 15 _ i 8302562 - 58 * :

• <N

a o © 4 ύ ., ό cn <η « -v · '/a^ Μ Λ

• sT «" 5 X

> § ö: O .a u 8 § 8 8 S _ o« /s u o u~ © _Li /£ΛΡ3 > 'Γχ-ζχτ' X-<j· ®o-· /V_z V-a « ^-sf ?

Lu I * 1 * o Η I I · I n .

κ | a a a a " & 4 t l - . - ' "3·

« I

I j a <n oi o as a g -γ o è è .©

H

<U

O

rp L_l

^ r>< U4 LJ

! g- g μ h ^ ^ »-3 ^ 3 8302562 ‘ * ; i - 59 - « k » · « ( « . en aT S g § ü ~ ' § ° j o d *—1-^ a jjf» i « * r v ,i F' Jr i j* I· °n I ?-u «r « b , i > a c* ss

• SS <J

«" I © [j* <0*

«Ί I

Si en .·,ό .. ?

Hn «

Hf I ni M > .

Η Η M > O «J Μ S b

O ttJ W W

> P i4 iP w 8302562 * 1 > * , f -60.- i w i .

« I

4 m χ'1 · η H 5 § g o · o 8<* g q ud /n 8«

Jfl Γ-χ— / Lwx ^-Ja «ο * I '—B '

f' I

V y *1 m '<* s o, · n fi ·.

« t § χ.°\ Η I °=§ f\ “ 3« § §

I Z

ê -1 è .

‘ I

- . rt

CN O

*-> CN

M X

X »-* o ^ *"1 <0; (^) ƒ% ^ s a

CN

o

H

H l-t

I T) H 1-( H

h H fc>- >· o <u k k k ,0 <U W X k > P t4 ti i-^ 8302562 - 61 - ' ’ * • O f I as I i * tf I ® . .

n =" S · 'Ïn(ö) g" fl i u ., tr · ch r · (, 1 C4

^ I

« υ ,1 j ' 4· 4 é t «

< BS

9 Ü* 'cs J° @ è è ^’ ·

I A

°« J·- s S lè ^ I >ϋ x _ b b u Η H £3 Ö Ö

o <u M Q Ώ W

o Q) W 3 3 3 8302562 - 62 - * , · * • » cs . O i 1 « l w x Φ © ' -«a" f 5 Τ' ^ s 1=° i ^ i. p I.I- y y^ K ^ j In 4*iJ sf* . è£au<ö)-a s—8 |-i . * - f ^ f f l Λ * o • k"1 i <r * S ^ ^

« 'es I

cj as cs « u * 9* I o ' t ΰ° 0 i Μ H . ^

O <U H > K

O 1) Η · H Q

> p M ><! >3 i ; s s 8302562 -63- 4 1 1 1 i i s m ιλ.

s e

fu <S

o U

o^i o=v B« rt O · O 8 cs x /—\ a x a x V-( ) V-u

8 ? ó ^—' A

§ V=° o*«i 3 o = S 3 Ιιί rv a rp ' χ ι | .

t ,η f- è· *- ' «r I (^) . Ó i

Λ<Ν . I

X ‘Μ CS

8 x * a"1 é © ©

3 H -B

Sn n

ss B B

I S § a 8302562 - 6k - ψ , · * > ‘ «1 a « η <η 3ί Η «η

ο=ύ V

w ? °=V

βΓ ? « .V ο-υ ? ? ° —° ^ 0^0 ., (ƒ" C" «-Ι ’ έ· - «· I (^) è • Ι<*

ί' I

^ υ S οι CJ S .

" é ·6 L Η Ö 0 ο V Η Ö ο <u Η ^ • > -QI >1 8302562 65

De R1 beschermingsgroepen in de voorbeelden LXXIV, LXXVI en LXXVIÏ, en de R^ beschermingsgroepen in voorbeelden LXXVIII en LXXX en de R^ beschermingsgroepen in de voorbeelden LXXXI en LXXXIII tot LXXXV worden als de laatste trap in de 5 synthese verwijderd. De Rg estergroepen, weergegeven in voor beelden LXXXVII tot XC worden niet verwijderd.

Voorbeeld XCI

(+) -1 -/R-/3- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl7-R- methylglycyl/-Ii-proline, monohydrochloride_ 10 a) /3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7methyl- carbaminezuur, fenylmethylester_ R-methyl-R-/(fenylmethoxy)carbonyl·/glycine (2,23 g, ' . 10 mmol) wordt opgelost in 30 ml tetrahydrofuran en in een ijsbad gekoeld. Oxalylchloride (1 ml, 11,5 mmol) wordt toegevoegd, 15 gevolgd door twee druppels dimethylformamide. Ra 30 min. roeren in het ijsbad wordt het mengsel daarna een uur bij kamertemperatuur geroerd. Daaraan worden 0,25 ml oxalylchloride toegevoegd. Het mengsel wordt ingedampt, weer opgelost in 15 ml tetrahydrofuran en in een ijsbad geroerd. Een oplossing-van 2-fenyl-U-20 (fenylmethyl)-5(te)-oxazolon (3,1 g, 12,U mmol), opgelost in 15 ml tetrahydrofuran, wordt aan de bovenstaande oplossing onder roeren in het ijsbad toegevoegd. Triethylaraine (1,U ml, 10 mmol) wordt toegevoegd en de oplossing wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd. Het neergeslagen triethylaminehydro-25 chloridezout wordt afgefiltreerd. Tetrahydrofuran wordt ver wijderd uit het residu en het wordt daarna opnieuw opgelost in pyridine (6 ml) en p-dimethylaminopyridine (20 mg) wordt toegevoegd. Ra 3 uur roeren bij kamertemperatuur wordt azijnzuur (5 ml) toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 30 min. op 105° 30 gehouden. Het reaktiemengsel wordt daarna ingedampt, het residu wordt opgelost in ethylacetaat en gewassen met waterig natriumbicarbonaat en water. Ra tritureren met ethylacetaat/hexaan wordt 2,2 g homogeen /3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/methyl-carbaminezuur , fenylmethylester verkregen; srapt. Ik0-lkl°.

35 8302562 > 66 * b) (+)-N-/3-(methylamino)-2-oxo-1-(f enylmethyl)- propyl/benzamide,hydrochloride_ [2>-(benzoylamino) -2-oxo-^-f enylbutyljmet hylcarbamine-zuur, fenylmethylester (0,5 g) wordt opgelost in ethanol (50 ml) 5 dat 1n zoutzuur (2 ml) bevat. Palladiumkoolstofkatalysator (10 %, 100 mg) wordt toegevoegd en het hydrogeneren wordt een nacht lang voortgezet. Het reaktiemengsel wordt daarna gefiltreerd, ingedampt, opgelost in water en gelyofiliseerd waardoor 300 mg (jO-N-<f3-(methylamino)-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl7'benzamide, 10 hydrochloride worden verkregen als een homogeen wit poeder.

c) (+)-1 -/N-/3-(benzoylamino^-oxo-^-fenylbutyl/-N-met hylglycy lj-L-nroline. 1,1-dimethylethylester j Een reaktiemengsel van (+)-ïï-/3-(methylamino)-2- oxo-1 - (fenylmethyl )propyl7benzamide, hydrochloride (1,65 g, 15 5 mmol), 1-(broomacetyl)-L-proline, 1,1-dimethylethylester (2,9 g, 10 mmol) uit voorbeeld LXVIIl(a), en diisopropylethyl-amine (1,7^ ml, 10 mmol) in dimethylformamide (20 ml) wordt een nacht lang ondeijfetikstof bij kamertemperatuur geroerd.

Het reaktiemengsel wordt verdeeld tussen water/ethylacetaat en 20 de waterige laag wordt nog een keer met ethylacetaat geëxtra heerd. De ethylacetaatextracten worden gedroogd (ïïa^SO^) en geconcentreerd tot een geel olieachtig residu (U,0 g). Snelle chromatografie (150 g op Merck siliciumdioxydegel 6θ) levert 0,7 g (+) * 1 (benzoylamino)-2-oxo-l+-fenylbutyl7-ïï-methyl- 25 glycylJ-L-proline, 1,1-dimethylethylester als een geel schuim.

d) (+)-1 -/!l-/”3"(benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutyl7" H-methylglycyl7-L-proline. monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (c) (0,U g, 0,79 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (5 ml). Ha U5 min.

30 roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel onder verlaagde druk geconcentreerd en het verkregen olieachtige residu wordt getritureerd met ether (3x) waardoor 0,28 g (+,)-1 -/H-/3~ (benzoylamino) -2-oxo-^-f enylbutyl7“H-methylglycyl7“ L-proline, monohydrochloride worden verkregen als een witte 35 vaste stof; smpt. 125-130°. R^, 0,73 (siliciumdioxydegel, n-butanol/ 8302562 r 1 6j azijnzuur/water; 3:1:1).

Analyse berekend voor . HC1 . 0,23 H^O: C 61,01; H 6,2k-, N 8,5¼

Gevonden: C 61,01; H 6,10; N 8,36

5 Voorbeeld XCII

(S)-7-//73"(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutylj-methyl- amino/acetyl/ -1, ^-dithia-7~azaspi.ro A s k7-nonaan-8- carbonzuur» trifluoracetaatzout (1:1) _ a) (S)-7-(broomacetyl)-1,^-dithia-7~azaspiro 10 A A7nonaan-8-carbonzuur__ (s)-1 A-ditbia-7~azaspiroA j^/nonaan-S-carbonzuur, < hydrochloride (2,1 g, 8,7 mmol) wordt opgelost in 1n natrium- ^ ; hydroxyde (25 ml), gekoeld tot 0° en broomacetylbromide (2,1 g, 0,91 ml, 10,¼ mmol) wordt druppelsgewijze in een tijdbestek van 15 10 min. toegevoegd. Het reaktiemengsel wordt 2 uur geroerd (0° tot kamertemperatuur), gewassen met ethylacetaat (2x) en de waterige laag wordt aangezuurd tot pH 2 en geextraheerd met ethylacetaat (3x). De gecombineerde organische extracten worden gedroogd (HagSO^) en geconcentreerd, waardoor 2,25 g 20 (S)“7~(broomacetyl)-1A-dithia-7~azaspiroA,k/nonaan-8-carbonzuur worden verkregen.

b) (S)“7"(broomaeetyl)-1,U-dithia-7~azaspiroA»k7~ nonaan~8~carbonzuurdifenylmethylester_ (S)"7~(broomaeetyl)-1,U-dithia-7~azaspiroAA-7nonaan-25 8-carbonzuur (2,25 g, 6,9 mmol) wordt opgelost in ethylacetaat (150 ml). Difenylazomethaan (1,3 g, 6,9 mmol) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd bij kamertemperatuur. Het ontkleurde reaktiemengsel wordt gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x) 3P en water, gedroogd (Ha^SO^) en geconcentreerd, waardoor 2,5 g (3)-7~(broomacetyl)-1 ,U-dithia_7~a-zaspiroA, bj nonaan-3-c arbon-zuur, difenylmethylester worden verkregen als een wit vast residu.

c) (S)-7-//73-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/- 35 methylaminojacetylj-1 ,U-dithia-7“azaspiroA,k7nonaan- 8-carbonzuur, difenylmethylest er_ 8302562 68 » : > '

Een mengsel van het esterprodukt uit deel (b) (2,U g, U,87 mmol), (+ )-N-/3-(methylamino)-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl/ benzamide (0,81 g, 2,1*3 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCl(b), en diisopropylethylamine (0,85 ml, h,87 mmol) 5 in dimethylformamide (20 ml) wordt een nacht lang bij kamer temperatuur geroerd. Het reaktiemengsel wordt uitgegoten in water (50 ml) en geextraheerd met ethylacetaat (3x 100 ml).

De gecombineerde organische extracten worden gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat, 10 % kaliumbisulfaat en water, 10 gedroogd (NagSO^), en geconcentreerd tot een donker olieachtig residu (2,8 g). Snelle chromatografie (200 g Merck silicium-dioxydegel, 10 % ethylacetaat/methyleenchloride, 20 % methanol/ ethylacetaat) levert 1,1 g (S)-?“//(benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl/methylamino/ acetyl/-1 ,U-dithia-7~azaspiro A A7“ 15 ’ nonaan-8-carbonzuur, difenylmethylester als een gele olie.

d) (S )-7-///3- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl/-methylamino/acetyl/~1 ,^-dithia-7“azaspiro A A7** nonaan-8-carbonzuur, trifluoracetaatzout (1:1)

Het esterprodukt uit deel (c) (10,5 g, 0,72 mmol) 20 wordt toegevoegd aan gekoeld (0°) trifluorazijnzuur (2 ml) dat anisool (0,1 ml) bevat. Ha 1 uur roeren worden de vluchtige bestanddelen in vacuum verwijderd en het residu wordt uitgespoeld met tolueen (2x). Het olieachtige residu wordt getritureerd met ether (kx) waardoor 0,36 g (S )-7-///3-(benzoylamino)-2-οχο-Π-25 f enylbutyl/methylamino/ acety]/-1, 1*-dithia-7-azaspiroA A7“ nonaan-8-carbonzuur, trifluoracetaatzout (1:1); smpt. 120-125° worden verkregen. 0,1*5 (uitlopend) (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 1*: 1:1).

Analyse berekend voor C^H^H^O^ . CgHF^Ogi 30 C 53,11; H i*,92; H 6,1*0; S 9,78

Gevonden: C 52,68; H 5,03; H 6,53; S 9,97-Voorbeeld XCIII

(S )-2-///3-(benzoylamino)-2-oxo-i+-f enylbutyl/methylamino/ acetyl/-1,2,3 ,l*-tetrahydro-3-isochinoline-35 carbonzuur, monohydrochloride 8302562 * ‘ 3 69 a) 2-(broomacetyl)-1,2,3 i^-tetrahydro-S-iso-chinolinecarbonzuur, 1,1 -dimethylet hylest er

Aan een gekoelde oplossing van 1,2,3,^-tetrahycLro-3- isochinolinecarbonzuur, 1,1-dimethylethylester (7,7 g, 33 mmol) 5 in methyleenchloride (100 ml) wordt diisopropylethylamine (6,23 ml, 36,3 mmol) toegevoegd en tenslotte in een tijdbestek van 15 min.

broomacetylbromide (6,6 g, 2,87 ml, 33 mmol), terwijl de temperatuur op 5° wordt gehouden. Het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd (-5° tot kamertemperatuur), geconcentreerd 10 tot ongeveer 33 1/3 % van zijn volume, verdund met ethylacetaat (100 ml), gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % * kaliumbisulfaat (2x) en water (2x), gedroogd (NagSQ^) en geconcentreerd tot een donker geel halfvast residu (11,0 g).

Omkristalliseren uit ethylacetaat/hexaan verschaft k,2 g 15 2-(broomacetyl)-1,2,3,^”tetrahydro-3“isochinolinecarbonzuur, 1,1-dimethylethylester als een roomkleurige vaste stof; smpt.

92-95° (85°).

b) (S)-2-/7/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/-methylamino/acetylj-1,2,3, U-t et rahy dro-3-i so- 20 chinolinecarbonzuur, 1,1-dimethylethylester

Aan een oplossing van 2-(broomacetyl)-1,2,3,^-tetra-hydro-3-isochinolinecarbonzuur, 1,1-dimethylethylester (2,12 g, 6 mmol) in dimethylformamide (20 ml) worden (+J-N-73-(methylamino)-2-oxo-1 -(fenylmethyl)propyl7benzamide (2,0 g, 25 6 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCl(b), en \ diisopropylethylamine (0,77 g» 1,0U ml, 6 mmol)toegevoegd.

Het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd, uitgegoten in water (50 ml) en geextraheerd met ethylacetaat (3x 50 ml).

De gecombineerde ethylacetaatextracten worden gewassen met ver-30 zadigd natriumbicarbonaat (2x) en water (2x), gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd tot een geel olieachtig residu (2,9 g).

Snelle chromatografie (200 g Merck silic iumdioxyde, 2 % methanol/ chloroform) levert 0,68 g (S )-2-/773-(benzoylamino )-2-oxo-U-fenyl-butyl/met hyl amino/ac etyl/-1,2,3, ^-tetrahydro-3-isochinoline-35 carbonzuur, 1,1-dimethylethylester als een geel opgedroogd schuim.

8302562 i 70 t c) (S )-2-///3-(benzoylamino)-2-oxo-4-f enylbutylj-methylamino/ acetyl/-1,2,3,^”tetrahydro-3-iso- chinolinecarbonzuur, monohydrochloride_

Het esterprodukt uit deel (b) (1 ,67 g, 1,17 mmol) 5 wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (5 ml). Ha 1 uur roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel onder verlaagde druk geconcentreerd en het verkregen olieachtige residu wordt getritureerd met ether (bx) waardoor 0,55 g (S)-2-///3-(benzoyl-amino)-2-oxo-^ - fenylbutyl/methylaminoj acetyl/" 1,2,3,4-t et rahydro-10 3"isochinolinecarbonzuur, monohydrochloride verkregen als een gebroken witte stof; smpt. 123-126°. 0,1*7 (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 1*:1:1).

( ^ Analyse berekende voor ^30^3’ ïïC1 ’ °’^2 H20: C 64,82; H 5,92; N 7,56; Cl 6,38 15 Gevonden: C 6^,82; H 6,22; H 7,55; Cl 6,13.

Voorbeeld XCIV

/1(+), bsj-1-/N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-l*-fenylbutyl/-N-methylglycyl/-l+-(fenylthio )-L-proline, monohydrochloride_ 20 a) (Us)-1- (broomacetyl )-U-( f enylthio )-L-proline

Aan een suspensie van (1*S )-!*-( fenylthio )-L-proline (2,2 g, 10 mmol) in methyleenchloride (50 ml, vers gedestilleerd) wordt di(trimethylsilyl ) aceetamide (7,35 ml, 30 mmol) toegevoegd. Het reaktiemengsel wordt 2 uur bij kamer-25 temperatuur geroerd tot het vrijwel helder wordt. Het reaktie-'J mengsel wordt dan gekoeld tot -5° en broomacetylchloride (1,9 g, 1,0 ml, 12 mmol) wordt druppelsgewijze toegevoegd terwijl de temperatuur op -5° wordt gehouden. Ha een nacht lang roeren (-5° tot kamertemperatuur), wordt het reaktiemengsel geconcentreerd 30 tot ongeveer 50 % van zijn volume, verdeeld tussen verzadigd natriumbicarbonaat/ethylacetaat en de lagen worden gescheiden.

De organische laag wordt nog een keer geextraheerd met verzadigd natriumbicarbonaat. De gecombineerde waterige lagen worden aan-gezuurd met pH 2,0 met 10 % kaliumbisulfaat en geextraheerd met 35 ethylacetaat (3x). Be ethylacetaatfrakties worden gecombineerd, 3302562 t t

t X

Π gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd, waardoor 3,5 g (Us)-1-(broomacetyl )-1(--( fenylthio )-L-proline worden verkregen als een viskeuze olie b) (Us) -1 - (broomacetyl)-U-(fenylthio)-L-proline, 5 difenylmethylester

Een oplossing van difenyldiazomethaan (2,0 g, 10,2 mmol) in etbylacetaat (50 ml) wordt druppelsgewijze toegevoegd aan een oplossing van (IfS)-l-(broomacetaat)-4-(fenylthio)-L-proline (3,5 g, 10,2 mmol) in ethylacetaat (50 ml). De paarse 10 oplossing wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd.

Het ontkleurde reaktiemengsel wordt gewassen met verzadigd ✓ natriumcarbonaat (2x) en water (2x), gedroogd (NagSO^) en gecon centreerd, waardoor 1(-,73 g (Us)-1-(broomacetyl)-k-(fenylthio)-L-proline, difenylmethylester worden verkregen als een gele 15 viskeuze olie.

c) β (+) ,ltsJ-1-/ii-^3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyl- butyl7“H-methylglycyl/-U-(fenylthio)-L-proline, difenylmethylester_

Aan een oplossing van (tó)-l-(broomacetyl )-^-(fenyl-20 thio)-L-proline, difenylmethylester (U ,78 g, 9,b mmol) in dimethyl- formamide (20 ml) worden (+)-N-/3”(methylamino)-2-oxo-1-(fenyl-methyl)propy3jbenzamide (2,1(-2 g, 7*2 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCl(b), en diisopropylethylamine (0,93 g, 1,25 ml, 7»2 mmol) toegevoegd. Na een nacht lang roeren bij 25 kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel uitgegoten in water ' \ (50 ml) en geexfcraheerd met ethylacetaat (3x). De gecombineerde ethylacetaatextracten worden gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x) en water (2x), gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd tot een gele olie (6,2 g). Snelle chromatografie (Merck silicium-30 dioxydegel, 2 % methanol/methyleenchloride levert 3,2 g β (+), ksj-1 (benzoylamino) -2-oxo-H-fenylbutyl7“ïï-methyl- glycyl/-^-(fenylthio)-L-proline, difenylmethylester als een bleekgeel schuim.

8302562 72 * v * ► . 1 .

d) /1 (+) ,US/-1-/H-^-(benzoylamino )-2-oxo-U-fenyl-buty]J-U-met hylglycyl7-!+- (fenylthio )-L-proline, monohydrochloride____

Het esterprodukt uit deel (c) (1,6 g, 2,2 nmol) wordt 5 behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (20 ml). Ha 2 uur roeren bg kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel onder verlaagde druk geconcentreerd en het olieachtige residu wordt een nacht lang met ether getritureerd waardoor 1,2 g /Ί( + ) ,Us7-1-ZïT-/!3-(benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyl/-H-methylglycyl7“^*"( fenyl-10 thio)-L-proline, monohydrochloride worden verkregen als een gebroken witte vaste stof;; smpt. 131-133° R^ 0,38 (siliciumdioxyde gel, n-butanol/azijnzuur/water; U:1:1).

's Analyse berekend voor Ο^Η^Η^Ο,-δ . HC1 . 0,9 HgO: C 60,82; H 5,90; N 6,87; S 5,2U; Cl 5,79 15 Gevonden: C 60,82; H 5.7¾. N 6,9^; S 5,25; Cl 5,75.

Voorbeeld XCV

(US) -1 -/ϊί-/5“ (benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl7-ïir-methylglycyl7-^-(H-fluorfenoxy)-L-proline, mono- hydrochloride_ 20 a) (Us)-1-(broomacetyl)-U-(fluorfenoxy)-L-proline, 1,1-dimethylethylester_

Aan een oplossing van (S )-^+-(fluorfenoxy)-L-proline, 1,1-dimethylethylester (2,1 g, 7,5 mmol) in gedestilleerd tetrahydrofura» (50 ml) worden broomazijnzuur (1,0^ g, 7,5 mmol), 25 hydroxybenzotriazoolhydraat (1,1¾ g, 7,5 mmol) en dicyclohexyl- carbodiimide (1,5^ g, 7,5 mmol) toegevoegd. Het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd, het neergeslagen dicyclohexyl-ureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt geconcentreerd.

Het residu wordt opgelost in ethylacetaat (50 ml) en gewassen 30 met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x) en water (2x), gedroogd (ïïa2S0^) en geconcentreerd, waardoor 3,1 g ()-1-(broomacetyl)-1*-(fluorfenoxy)-L-proline, 1,1-dimethylethylester, worden verkregen als een olieachtig residu.

35 8302562 73 I’ll b) (l|-S)-1-/If-Z3-(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbuty3j-N-methylglycy257-U-(^-fluorfenoxy)-L-proline, 1,1-dimethylethylest er

Aan een oplossing van (^S)-1-(broomacetyl)-U-(fluor-5 fenoxy)-L-proline, 1,1-dimethylethylester (3,^ g, 3,5 mmol) in dimethylformamide (20 ml) worden (+)-N-/3“(methylamino)-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl/bepzamÏdg (2,83 g, 8,5 mmol) bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCl(b) en diisopropylethylamine (1,^3 g, 1,92 ml, 11,0 mmol). Ha een nacht lang roeren bij kamertemperatuur 10 wordt het reaktiemengsel uitgegoten in water (100 ml) en geëxtra heerd met ethylacetaat (3x). De gecombineerde ethylacetaat-extracten worden gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x) en water (2x), gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd tot een donker residu (5»5 g)· Snelle chromato-15 grafie (LPS-1 siliciumdioxydegel, 50 % ethylacetaat/methyleen- chloride) geeft 1,2 g (US)—1-/11-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7“H-methylglycyl/-U-( l;-fluorfenoxy )-L-proline, 1,1-dimethylethylester als een bleekgeel schuim.

c) () -1 -/ÏT-/3- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyV" 20 N-methylglycylJ-4-(^-fluorfenoxy )-L-proline, monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (b) (1,2 g, 1,95 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (20 ml). Na 2 uur roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel geconcentreerd 25 onder verlaagde druk en het olieachtige residu wordt een nacht lang getritureerd met ether waardoor 0,92 g (1^)-1-/11-/3-(benzoylamino )-2-oxo-U-f enylbuty3s7-N-methylglycy3j-^-( U-fluor-fenoxy)-L-proline, monohydrochloride worden verkregen als een gebroken witte vaste stof; smpt. 131-1^0°. R^ 0,5^ (siliciumr 30 dioxydegel, n-butanol/azijnzuur/water; 3:1:1).

Analyse berekend voor * HC1 * °>55 HgO: C 61,2U; H 5,65; N 6,91; Cl 5,83 Gevonden C 61,2*:; H 5,66; N T,09; Cl 5,70

Op een overeenkomstige wijze kan de methode van de 35 voorbeelden XCI tot XCV worden gebruikt voor het bereiden van 8302562 i * t f t ' *

7U

de verbindingen uit de voorbeelden I tot 'XC.

Voorbeeld XCVI

N-/N-/3”(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/-N-methyl- glycyl/-N-cvclohexylglycine, monohydrochloride_ 5 a) (+)-N-/3~(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl7-N- methylglycine, 1,1-dimethylethylester_

Aan een oplossing van (+)-N-/3-(methylamino)-2-oxo-1-(fenylmethyl)propyl7benzamide (5,0 g, 15 imnol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCI (b) in dimethylformamide (20 ml) 10 worden broomazijnzure 1,1-dimethylethylester (13,8 g, 3,15 ml, 19,5 mmol) en diisopropylethylamine (2,5 g, 3Λ ml, 19,5 mmol) toegevoegd. Na een nacht lang roeren bij kamertemperatuur wordt s het reaktiemengsel uitgegoten in water (100 ml) en geextraheerd met ethylacetaat (3x). De gecombineerde ethylacetaatextract en 15 worden gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x), en water (2x), gedroogd (Na^SO^) en geconcentreerd tot een gele olie, die een opgedroogd schuim wordt bij drogen in hoog vacuum, waardoor 5,^· g (+)-N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-it-f enylbutyl7-N-methylglycine, 1,1 - dimet hyl et hyl ester 20 worden verkregen.

b) (+)-11-/^-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7- N-methylglycine, monohydrochloride_

Het esterprodukt uit deel (a) (k,51 g, 11 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (20 ml). Na 22 uur 25 roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel onder ver- - - laagde druk geconcentreerd en het olieachtige residu wordt getritureerd met ether waardoor 3,3 g (+)-11-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7-N~methylglycine, monohydrochloride worden verkregen als een gebroken witte vaste stof.

30 c) N-/lï-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbuty]1/”N- methylglycyl7~N-cyclohexylglyeine, 1,1-dimethyl- ethylester_

Aan een oplossing van (+)-N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-H - f eny lb ut yl/-IT-met hyl glycine, hydrochloride (1,0 g, 2,6 mmol) 35 in gedestilleerd tetrahydrofuran (50 ml) worden N-cyclohexyl- 3302562 75 ‘ , » V , * glycine, 1,1-dimethylethylester (0,55 g, 2,6 mmol) "bereid zoals uiteengezet in voorbeeld LXV(a), hydroxybenzotriazool-hydraat (0,39 g, 2,6 mmol) en dieyclohexylcarbodiimide (0,55 g, 2,6 mmol) toegevoegd. Eet reaktiemengsel wordt een 5 nacht lang geroerd, het neergeslagen dicyclohexyluruem wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in ethylacetaat (50 ml) en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x), 10 % kaliumbisulfaat (2x), en water (2x), gedroogd (lia^SO^) en geconcentreerd tot een 10 olieachtig residu (1,5 g). Snelle chromatografie (100 g, Merck siliciumdioxydegel 60) geeft 0,k9 g 11-/11-/3-(benzoylamino)-2-oxo-*· h-fenylbutyl/-N-met hylglycyl/-N-cyclohexylglyc ine, 1,1-dimethyl- ethylester als een schuim.

d) N-/lï-/3“(benzoylamino)-2-oxo-U-f enylbutyl/-ÏT-15 methylglvcvl/-N-cyclohexylglyc ine, monohydrochloride

Het esterprodukt uit deel (c) (0,1*8 g, 0,87 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur (10 ml). Ha 2 uur roeren bij kamertemperatuur wordt het reaktiemengsel geconcentreerd onder verlaagde druk en het olieachtige residu wordt een 20 nacht lang met ether getritureerd waardoor 0,32 g N-/!l-/3-(benzoyl-amino) -2-oxo-h-f enylbutyl7-N-methylglycyl/-N-cyclohexylglyc ine, monohydrochloride verkregen als een gebroken witte vaste stof; smpt. 131-1^5°. Rj 0,36 (siliciumdioxydegel, n-butanol/azijnzuur/ water; 1*:1:1).

25 Analyse berekend voor . HOI . 0,7 H^O: C 61,95; H 6,95; N 7,7fc; Cl 6,53

Gevonden: C 61,95; H 6,7^; H 7,71; Cl 6,23 Voorbeeld XCVII

(S)~7-/71((+)-3-(benzoylamino)-2-oxo-l*-f enylbutyl7-30 methylaminq/acety2j-1,l*-dithia-7~azaspiro/l*,k7- nonaan-8-carbonzuur, methylester_

Aan een oplossing van (+)-H-/3-(benzoylamino)-2-oxo-4-fenylbutyl7-Ii-methylglycine, monohydrochloride (1,0 g, 2,5 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCVl(b), 35 in gedestilleerd tetrahydrofuran (50 ml) worden (S)—1,l*-dithia-7- 3302562 ► 7 6 azaspiroA»Vnonaan-8-carbonzuur,. methylester, monohydrochloride (0,66 g, 2,5 mmol), dicyclohexylcarbodiimide (0,5^· g, 2,5 mmol), hydroxyhenzotriazoolhydraat (0,39 g, 2,5 mmol) en diisopropyl-ethylamine (0,9 ml, 5 mmol) toegevoegd. Het reaktiemengsel 5 wordt een nacht lang geroerd, het neergeslagen dicyclohexyl- ureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt geconcentreerd.

Het residu wordt opgelost in ethylacetaat (100 ml) en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2x) en water (2x), gedroogd (ïïagSO^) en geconcentreerd tot een geel olieachtig residu 10 (1,3 g). Snelle chromatografie (Merck siliciumdioxydegel, 25 % ethylacetaat/methyleenchloride, 1 % methanol/methyleen-chloride) levert 0,53 g (S)-7-/777+ )“3-(benzoylamino)-2-oxo-i4-' fenylbutyl/methylamino/-acetyl/-1 ,U-dithia-7-azaspiroA, Vnonaan- , 8-carbonzuur, methylester als een wit schuim; smpt. 60-62°. 0,52 15 (siliciumdioxydegel, 5 % methanol/methyleenchloride).

Analyse berekend voor C28^33^3°5S2 ’ ^»33 H^O:

C 59,87; H 6,0*4; N 7,^8; S 11,h2 Gevonden: C 59,87; H 5,9**; N 7,56; S 11,36 Voorbeeld XCVIII

20 (S) -7-f+)-3- (benzoylamino) -2-oxo-*4-f enylbutyl/- methylaminoj acetyl7“ 1,*4-dithia-7-azaspiro A AJnonaan- 8-carbonzuur, methylester, monohydrochloride

Het methylesterprodukt uit voorbeeld XCVII (0,26 g, 0,U6 mmol) wordt behandeld met 2nzoutzuur/azijnzuur tot 25 homogeen (2 min.), onder verlaagde druk geconcentreerd, en het olieachtige residu wordt getritureerd met ether (2x) waardoor 0,26 g (S)-7“/T/7±)“3“(benzoylamino)-2-oxoA-fenylbutyl/methyl-amino Ljac etyl7~ 1, *4-dit hia-7-az aspiro A, k/nonaan-8-carbonzuur, methylester. monohydrochloride worden verkregen als een witte 30 vaste stof; smpt. 79“85°· Rf 0,53 (siliciumdioxydegel, 5 % methanol/methyleenchloride).

Analyse berekend voor . HC1 . 0,56 HgO: C 55,8ΐί·; H 5,88; N 6,98; S 10,61+; Cl 5,88 Gevonden: C 55,8*4; H 5,95; N 6,78; S 10,1+3; Cl 5,66 8302562 _ * r 1 77

Voorbeeld XCIX

(4s)-1 **Zn_/3- (benzoylamino) -2-oxo-4-fenylbutyl7“N-methylglycyl7-4-(4-fluorfenoxy)-L-proline, methyl-ester, monohydrochloride 5 a) (4S)-4-(iluorfenoxy)-L-proline, methylester, monohydrochloride

Aan een suspensie van (4S)-4-(fluorfeno:^·)-L-proline (2,5 g, 11 mmol) in methanol hij -30° onder een argondeken wordt thionylchloride (8,09 ml, 11 mmol) toegevoegd. Het reaktie-10 mengsel wordt 2 uur hij -20° geroerd, daarna 16 uur hij kamertemperatuur. Het oplosmiddel wordt hij verlaagde druk verwijderd en het residu wordt opnieuw opgelost in methyleen-’“s chloride (150 ml) en gewassen met 1n natriumcarhonaat (2x) en water (2x). Ha drogen (MgSO^) wordt overmaat zout zuur/methanol 15 toegevoegd en het oplosmiddel wordt hij verlaagde druk verwijderd.

Toevoegen van ether geeft een lichtbruine vaste stof (2,6 g). Omkristalliseren uit methanol/ether geeft 1,49 g (4S)-4-(fluor-fenoxy)-L-proline, methylester, monohydrochloride als een licht bruine vaste stof; smpt. 147”148°; [ q/^= +6,96° 20 (c * 1,55; methanol).

h) (4s)-1-/11-/3“(benzoylamino)-2-oxo-4-fenylbutyl/-N-methylglycylJ-4-(4-fluorfenoxy)-L-proline, methylester_

Aan een oplossing van (+)-H-/3-(benzoylamino)-2-oxo-25 4-fenylbutyl7-H-methylglycine, monohydrochloride (1,17 g, 3 mmol) bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCVl(b), in gedestüLeerd tetrahydrofuran (20 ml)worden (4s)-4-(fluorfenoxy)-L-proline, methylester, monohydrochloride (θ',82 g, 3 mmol), hydroxy-benzotriazoolhydraat (0,46 g, 3 mmol) en dicyclohexylcarbo-30 diimide (0,62 g, 3 mmol) toegevoegd. Het reaktiemengsel wordt een nacht lang geroerd, het neergeslagen dicyclohexylureum wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in ethylacetaat (50 ml) en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat (2 ml) en water (2 ml), gedroogd 35 (Ha^SO^) en geconcentreerd tot een olieachtig residu (1,1 g).

8302562 ► 78 ( i t

Snelle chromatografie (200 g Merck siliciumdioxydegel 60; 3 % methanol/chloroform) levert 0,15 g ()-1 -/U-/*3-(benzoyl-amino ) -2-oxo-U-f enylbutyl7“N-methyiglycyl/-ll· - (^-fluorfenoxy) -L-proline, methylester als een schuim.

5 c) (Us)-1-/ÏT-/3“(benzoylainino)“2-oxo-U-fenylbuty:i7" iI-methylglycyl7”ii“(1i-fluorfenoxy-2-proline, methylester. monohydrochloride_

Het methylesterprodukt uit deel (h) (0,15 g, 0,26 mmol) wordt behandeld met 2n zoutzuur/azijnzuur tot 10 homogeen (2 min.), geconcentreerd onder verlaagde druk, en het olieachtige residu wordt getritureerd met ether (2x) waardoor 0,1¾ g (h-S)—1 -/^-73-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl/-N-methyl-{''> glycyl7~^-(^-fluorfenoxy)-L-proline, methylester, monohydro- chloride als een gebroken witte vaste stof worden verregen 15 smpt. 105-125°. 0,27 (siliciumdioxydegel, 5 % methanol/ chloroform).

Analyse berekend voor . HC1 C 62,79; H 5,76; H 6,86; F 3,10; Cl 5,79 Gevonden: C 62,78; H 5,73; ï 6,87; F 2,83; Cl 5,33.

20 Voorbeeld C

(h-S)—1 -£e£( S) -3~ (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl7~ L-alanyl7~l|- (^-fluorfenoxy) -L-proline, monohydro-chloride_ a) (S) -11/3- (benzoylamino} -2-oxo-U-fenylbutyl7-L-25 alanine. 1.1-dimethylethylest er V./ Aan een geroerde oplossing van (S)-ïi-/3-chloor-2- oxo-1-(fenylmethyl)propyl7benzamide (10,0 g, 33,1 mmol) in dimethylformamide (80 ml) worden L-alanine, 1,1-dimethylethyl-ester, hydrochloride (6,0 g, 33,1 mmol), natriumbicarbonaat 30 (6,1 g, 72 mmol) en natriumjodide (U,9 g, 33,1 mmol) toegevoegd.

De verkregen oplossing wordt een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd, uitgegoten in ether en gewassen met water (2x) en 10 fa natriumbicarbonaat. De etherische oplossing wordt geextraheerd met 1n zoutzuur (3x), de gecombineerde 35 extracten worden basisch ingesteld door toevoeging van vast 8302562 79 1 ί 1 , 1 natriumbicarbonaat en geextraheerd met ethylacetaat (bx). De organische extracten worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en geconcentreerd waardoor 8,9 g bleekgele vaste stof worden verkregen. Een deel van dit materiaal wordt omgekristalliseerd 5 uit ethylacetaat waardoor (S )-11-/3-( benzoylamino)-2-oxo-^- fenylbutyl7"L-alanine, 1,1-dimethylethylester wordt verkregen als een witte vaste stof; smpt. 106,5 “ 110°.

b) ( S) -11-/3“ (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl7- L-alanine, monohydrochloride_ 10 Een oplossing van het estérprodukt uit deel (a) (2,95 g, 5Λ mmol) in 1,¾ n zoutzuur in azijnzuur (39 ml) wordt 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het verkregen witte ( x neerslag wordt verzameld, gespoeld met ether en gedroogd waardoor 2,27 g (S)-N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbuty3j-L-15 alanine, monohydrochloride; smpt. 208-209° (ontl.); fa = -71° (c = 0,38 % in methanol) worden verkregen. 0,51 (silicium-dioxydegel; chloroform/methanol/azijnzuur; b:1:1).

Analyse berekend voor ^20^22¾^¾ * : C 61,6U; H 5,93; N 7,17; Cl 9,07 20 Gevonden: C 61,33; H 5,97; N 7,17; Cl 8,79 c) (S) -II-/ÏT- (benzoylamino) -2-οχο-^-ίenylbutyl7“N“ f[ fenylmethoxy)carbonyl7~L-alanine_

Triethylamine (2,1 ml, 15 mmol) wordt toegevoegd aan een mengsel van (S)-11-/3-(benzoylamino )-2-oxo-)+-fenylbutyl7-L·-25 alanine, monohydrochloride (2,0 g, 5,1 mmol), benzylchloorformiaat (730yiil, 5,1 mmol), water (7 ml) en dioxan (7 ml) bij 25°·

Het verkregen mengsel wordt 3 uur bij 25° geroerd, waarna het wordt uitgegoten in 5 #“ige waterige natriumbicarbonaat-oplossing en gewassen met ether. De waterige laag wordt aange-30 zuurd (HCl) en geextraheerd met ethylacetaat (3x). Het extract wordt gedroogd (MgSQ^) en geconcentreerd, waardoor een kleurloze olie wordt verkregen. Tritureren met ether levert een witte korrelige vaste stof (150 mg), die wordt verzameld en weggeworpen.

De moederloog wordt in vacuum geconcentreerd waardoor 1,75 g 35 (S) -ΙΙ-/ΪΓ- (benzoylamino) -2-oxo-U-f enylbutyl/-If-^( f enylmethoxy)- 8302562 ♦ . 1 80 carbonylJ-L-alanine worden verkregen als een wit glas.

d) (US) -1S)-3"(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyl-butyl7-N-/’( fenylmethoxy) carbony37“L-alanyl/-U-(ί-fluorfenoxy)-L—proline, fenylmethylester 5 Een mengsel van (S )-N-/ÏI-(benzoylamino )-2-oxo-U- f enylbutyl7-ïï-/Ïfenylmethoxy)carbonyl7-L-alanine (300 mg., 0,62 mmol), (1* S) -U - (!+ - f luorfenoxy)-L-proline, fenylmethylester, p-tolueensulfonzuurzout (300 mg, 0,62 mmol), triethylamine (90yiil, 0,62 mmol), dicyclohexylcarbodiimide (130 mg, 0,62 mmol) 10 en hydroxybenzotriazoolhydraat (90 mg, 0,62 mmol) in tetra-hydrofuran (7 ml) wordt 20 uur bij 25°C geroerd. Het mengsel wordt daarna gefiltreerd en verdund met ethylacetaat. De ^ Λ verkregen oplossing wordt achtereenvolgens gewassen met 1n , zoutzuur en 10 % waterige natriumbicarbonaatoplossing, gedroogd 15 (MgSO^), gefiltreerd en geconcentreerd waardoor 500 mg (Us)—1 -βΧ-Π S) “3“ (benzoylamino) -2-oxo-U-f enylbutyl7”'H-/‘( fenylmethoxy ) carbonyl7-L-alanyl7-l+-(U-fluorfenoxy )-L-proline, f enylmet hyle st endorden verkregen als een bleekgele olie..

e) (bS)-1-/11-7(8)-3“(benzoylamino)-2-oxo-H-fenyl- 20 butyl7-L-alanyl7_J+“( ^-fluorf enoxy) -L-proline, monohydrochloride_

Een mengsel van het esterprodukt uit deel (d) (500 mg, 0,6 mmol), palladium op koolstofkatalysator (10 #, 100 mg), absolute ethanol (15 ml) en 1,0 n waterig zoutzuur (800 jjl, 0,8 25 mmol) wordt 17 uur bij 1 at en 25° gehydrogeneerd, waarna het l... wordt gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu wordt gechromato- grafeerd op HP-20 met een lineaire gradient van (9:1, 0,01 n waterige zoutzuur:methanol) tot (1:1, 0,01n waterig zoutzuur: methanol). Frakties die het gewenste produkt (TLC) bevatten 30 worden gecombineerd en geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in een minimum hoeveelheidmethanol. Ether wordt toegevoegd, waardoor een wit neerslag wordt gevormd, dat wordt verzameld en in vacuum wordt gedroogd, waardoor 200 mg (!+S)-1-/ïï-/”(S)-3" (benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutyl/-L-alany\J-k-(U-fluorfenoxy) - o 25 35 L-proline, monohydrochloride; smpt. 152-153° (ontl.); £a 7^ = 8302562 ' r ; * 81 "50° (c = 0,5; methanol). R^, 0,75 (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur, U;1:1) worden verkregen.

Analyse berekend voor ^31^32^3^6 * ^Cl · 1,5 H^O: C 59,57; H 5,80; n 6,72; ci 5,67 5 Gevonden: C 59,68; Η 5,5β; N 6,67; Cl 5,99 Voorbeeld Cl ^(S) ,Ur/- 1-/&-/3- (benzoylamino )-2-oxo~^-fenylbutylJ- L-alanyl7-fr-fenyl-Ir-proline, monohydrochloride_ a) (S) -N-/ÏT- (benzoylamino) -2-oxo-^-fenylbutyl/-N- 10 H f enylmethoxy)carbonyl/'-L-alanine, succininido- ester_

Een mengsel van (S) -Ν-/ΪΓ- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenyl-v butyl7"Ii-/T f enylmethoxy) carbonyl7-L-alanine (800 mg, 1,6 mmol) bereid zoals uiteengezet in voorbeeld C(c), dicyclohexylcarbo-15 diimide (3^0 mg, 1,6 mmol) en N-hydroxysuecinimide (190 mg, 1,6 mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) wordt 18 uur bij 25° geroerd. Na deze tijdsduur wordt het gefiltreerd en geconcentreerd waardoor 950 mg (s)-N-/N-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyl-butyl/-11-/7 f enylmethoxy) carbonyl/-L-alanine, suecinimidoester 20 worden verkregen.

b) /“1 (S), UR/-1-/11-/3-(benzoylamino) -2-oxo-^-fenyl- butyl/-N-/‘( f enylmethoxy) c&rbonylJ-L-alzriylJ-b-fenyl-L—proline _

Aan een oplossing van (S)-N-/ïï-(benzoylamino)-2-25 oxo-U-fenylbutyl7-II-/7 f enylmethoxy) carbonylJ-L-alanine, suecinimidoester (950 mg, 1,6 mmol) in dimethylformamide (5 ml) worden (IfR)-U-fenyl-L-proline, hydrochloride (375 mg, 1,7 mmol) en triethylamine (b0 jx 1, 3,2 mmol)toegevoegd. Het verkregen mengsel wordt 2b uur bij 25° geroerd, waarna het wordt uitge-30 goten in overmaat 1n zoutzuur en geextraheerd met ethylacetaat (3x). De extracten worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^), gefiltreerd en geconcentreerd waardoor 1,1 g /1 (S),Ur7-1-/ÏI-/3-(benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl/-II-/ (f enylmethoxy) carbonyüJ-L-alanyl7-U-fenyl-L-proline.

3302562 t ' ' > 82 c) Z“1(S) ,HR/- 1 -/H-£3“(benzoylamino)-2-oxo-^-fenyl-butyl/-L-alanyl/-H-fenyl-L-proline, monohydro-chloride

Het produkt uit deel (b) (1,0 g, 1,5 mmol), ethanol (20 ml), water (5 ml), 1,0 n zoutzuur (1,5 ml, 1,5 mmol), en palladium op koolkatalysator (10 %3 100 mg) wordt 18 uur bij 1 at en 25° gehydrogeneerd, waarna het wordt gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu wordt gechromatografeerd op HP-20 met gebruikmaking van een lineair gradient (0,01n waterig zout zuurmethanol, U0:60 tot 10:90). Frakties die het gewenste produkt (TLC) bevatten worden gecombineerd en geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in een minimum hoeveelheid / methanol. Ether wordt toegevoegd en het gevormde witte neerslag wordt verzameld en gedroogd waardoor 300 mg /*1 (S), Hr/- 1 (benzoylamino )-2-oxo-U-f enylbutylJ-L-alanyüJ-^-f enyl-L-proline, monohydrochloride; smpt. 160-162° (ontl.); [a - -57° (c = 1,5j methanol) worden verkregen. Rf 0,8 (siliciumdioxydegel; chloroform/methanol/azijnzuur; U: 1:1).

Analyse berekend voor ^31^33^3^5 · HC1 . 1,35 H^O: c 63,27; H 6,29; H 7,1^; ci 6,02 Gevonden: C 63,27; H 6,17; H 7,19; Cl 5,97 Voorbeeld CII

[\ (S) ,^3/-1-/ΐΤ-/3” (benzoylamino )-2-oxo-k-f enylbutyl/-L-alanyl7-^-fenyl-L-proline, monohydrochloride Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruik-making van (Us)-H-fenyl-L-proline, hydrochloride in deel (b) verkrijgt men Z"1 (S) ,i+S/-1-/ïï-/2-(benzoylamino )-3”Oxo-U-fenyl-butyl/-L-alanyl/-^-fenyl-L-proline, monohydrochloride; smpt. 138-1^3°; fa ^ * -6l° (c = 0,3 % in methanol). R^ 0,8¾ (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur, U: 1:1).

Analyse berekend voor ^31^33^30^ · HC1 . 2,13 HgO:

C 61,80; H 6,35; N 6,98; Cl 5,88 Gevonden: C 61,80; H 6,06; H 7,05; Cl 5,65 Voorbeeld CIII

/l(S), i+R/-1 -/5-/3-( benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyl/-L-alanyl/-H-cyclohexyl-L-proline, monohydrochloride 8302562 , ’ ; 83

Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruikmaking van ()-^-cyclohexyl-L-proline, hydrochloride in deel (b) verkrijgt men /1 (S),UR/-1-/lI-/3-(benzoylamino)-2-oxo-l;-fenylbutyl/-L-alanyl/-k-cyclohexyl-L-proline, monohydrochloridej.

5 smpt. 1^0-15^° (ontl.); /a =* -83° (c = 0,36 % in methanol).

R^ 0,8H (siliciumdioxydegel; chloroform/methanol/azijnzuur;

Analyse berekend voor C-.H--ÏÏ-0- . HC1 . 0,79 H_0: 31 39 3 5 é C 63,71; H 7,17; S 7,19; Cl 6,06 10 Gevonden: C 63,71; H 7,21; N 7,05; Cl 5,82

Voorbeeld CIV

/ï (s) 1-/ïï-/3-(benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutylJ- r L-alanyl7-^-cyclohexyl-h-proline, monohydrochloride ' } Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruik- 15 making van (l*S)-4-cyclohexyl-L-proline, hydrochloride in deel (b), verkrijgt men /Ms),I+S/-1-/ÏI-/3-(benzoylamino)-2-oxo-1i·-fenylbutyl7-L-alanyl/-1i-cyclohexyl-L-proline» monohydrochloride; smpt. 139“1^1° (ontl.); /otj^ = -80° (c = 0,2 % in methanol).

R^ 0,83 (siliciumdioxydegel; chloroform/methanol/azijnzuur; 20 U:1:1).

Analyse berekend voor * HC1 1 »5^ H^O:

C 62,28; H 7,26; N 7,03; Cl 5,93 Gevonden: C 62,28; H 7,01; N 7,02; Cl 6,16 Voorbeeld CV

25 (S )-7”/*( S )-2-//3- (benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl/- amino/-1-oxopropyl7-1, U-dithia-7“azaspiro A, Vnónaan- 8-carbonzuur, monohydrochloride_

Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruikmaking van (S)—1 ,U-dithia-7-azaspiroA,^7nonaan-8-carbonzuur 30 hydrochloride in deel (b) voor de L-prolinereaktiedeelnemer, verkrijgt men (S)~7“/(S)-2-//3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyl- butyl/amino7-1-oxopropyl7-1, ^-dithia-7~az aspiro [k ^/ηοηβ^Χί-β- o 25 o carbonzuur, monohydrochloride; smpt. 170-172°; /et = -26° (c = 1,U % in methanol). R 0,73 (siliciumdioxydegel; 35 chloroform/methanol/azijnzuur; 6:1:1).

8302562 8¾ * *. Λ 1

Analyse berekend voor . HC1 . 0,7TH20:

c 5^,77; H 5,71; N 7,10; S 10,83; Cl 5,99 Gevonden: C 5^,77; H 5,70; N 6,9b; S 10,82; Cl 6,07 Voorbeeld CVI

5 Z"1 (S) ,5S7~1~/tI-/~3~(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutylƒ- L-alanyl7-U,5-dihydro-3“fenyl-1H-pyrazool-5”Carbon-zuur, monohydrochloride

Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruikmaking van (S)-^,5~dihydro-3-,,fenyl-1H-pyrazool-5*-carbonzuur 10 voor de L-proline reaktiedeelnemer in deel (b), verkrijgt men de bovengenoemde verbinding.

Voorbeeld CVII

^ ') (S )-2-/11-/7 S)-3” (benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyl7- L-alanylJ-1,2,3,^-tetrahydro-3“isochinolinecarbónzuur, * 15 monohydrochloride

Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruikmaking van (S)-1,2,3,^-tetrahydro-3-isochinoline-carbonzuur, hydrochloride in deel (b) in plaats van de proline reaktiedeelnemer, verkrijgt men (s)-2-/fr-,/(S)-3“( benzoylamino)-2-20 oxo-U-fenylbutyl/-L-alanylƒ -1,2,3 ,U-tetrahydro-3-isochinoline- carbonzuur, monohydrochloride.

Voorbeeld CVIII

1 -/ÏI-/T S) -3” (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutyl/-L-alany1/-2-(2-hydroxyfenyl)—U(R)-thiazolidinecarbonzuur, 25 monohydrochloride__ t" 'v- - Volgens de methode van voorbeeld Cl maar met gebruik making van 2-/7 2-fenylmethoxy) fenylJ-b (R)-thiazolidinecarbonzuur, hydrochloride in deel (b) in plaats van de prolinereaktiedeel-nemer verkrijgt men na verwijdering van hydroxybeschermingsgroep 30 1 S)-3“ (benzoylamino )-2-oxo-1+-fenylhutyl/-L-alanyl/-2- j hydro (2-hydroxyfenyl)MR)-thiazolidinecarbonzuur, moncfchloride

Op een overeenkomstige wijze kunnen de werkwijzen volgens de voorbeelden XCVI, XCVII, XCIX en C tot CVIII worden gebruikt om de verbindingen uit de voorbeelden I tot XCV te 35 bereiden.

8302562 : *-85

Voorbeeld CIX

(+.)-1-/1-/3- (henzoylamino) -2-oxo~l|-f enyrbutyl/-L-alanyl7-L-oroline, methylester, monohydrochloride a) 1-/!T-(2-ethoxy-2-oxoethyl) —IT— fenylmethoxy)-5 carbonyl7“L-alanyl<7-L-proline, 1,1-dimethyl ethyl- ester L-alanyl-L-proline, 1,1-dimethylethylester (25,^ g, 105 mmol) wordt onder roeren opgenomen in tetrahydrofuran (^00 ml). Hieraan worden broomethylacetaat (11t6h ml, 105 mmol) en diiso-10 propylethylamine (18,3 ml, 105 mmol) toegevoegd. Na 6 uur wordt bet reaktiemengsel gekoeld in een ijsbad en benzylchloor-formiaat (16,5 ml, 115,5 mmol) en diisopropylethylamine (20,1 ml, 115,5.mmol) worden toegevoegd. ïïa 1 uur wordt het ijsbad verwijderd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang op kamer-15 temperatuur gehouden. Het wordt dan tot droog geconcentreerd, opgenomen in ethylacetaat en neutraal gewassen met 10 % kaliumbisulfaat en verzadigd natriumbicarbonaat. Het ruwe produkt (52,3 g) wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegelkolom en geelueerd met ethylacetaatihexaan (1:1) waardoor k2,h g 20 1-^i-(2-ethoxy-2-oxoethyl )-N-/"( fenylmethoxy )carbonyl7~L-alany]l7’- L-proline, 1,1-dimethylethylester worden verkregen.

b) 1 -/&- (carboxymethyl) -11-/( fenylmethoxy) carbonyl7- L-alanyl7-L—proline, 1,1-dimethylethylester_

Het esterprodukt uit deel (a) (21 g, ^5,U mmol) wordt 25 bij kamertemperatuur onder roeren opgenomen in methanol (150 ml) V... en 1n natriumhydroxyde (50 ml, 50mmol). ITa 5s uur wordt de methanol in vacuum verwijderd en het waterige gedeelte wordt geextraheerd met ethylacetaat. Het waterige gedeelte wordt aangezuurd met geconcentreerd zoutzuur en geextraheerd met 30 ethylacetaat waardoor 16,95 g 1 —/iT— (carboxymethyl)-H-(fenyl methoxy )carbonyl/“L-alanyl7-L-proline, 1,1-dimethylethylester worden verkregen.

8302562

V

« 86 * l i c) (+)-1-^ïï-/ÏT-£3”(benzoylamino)-2-oxo-^-fenyl- butylZ-N-^ f enyimethoxy) carbonyl7-L-alanyl7- L—proline - 1„1-dimethylethylester_

Het esterprodukt uit deel (b) (10,0 g, 23 mmol) wordt 5 onder roeren in een ij stad opgenomen in tetrahydrofuran (75 uil)·

Hieraan wordt oxalylchloride (2,k ml, 27,6 mmol) druppelsgewijze toegevoegd, gevolgd door 15 druppels dimethylformamide. Na 20 min. wordt het ijsbad verwijderd en het reaktiemengsel wordt 1 uur op kamertemperatuur gehouden. Het mengsel wordt dan 10 in vacuum tot droog geconcentreerd en onder roeren in een ijsbad opgenomen in tetrahydrofuran (bo ml). Hieraan wordt 2-fenyl-U-(fenylmethyl.)”5(UH)-oxazolon (6 g, 23,8 mmol) in tetrahydrofuran [) (35 ml) druppelsgewijze toegevoegd, gevolgd door triethylamine (3,22 ml, 23 mmol). Aanvullend triethylamine wordt toegevoegd 15 om een basisch milieu te handhaven. Na20 min. wordt het ijsbad verwijderd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang op kamertemperatuur gehouden. Het triethylaminehydrochloride wordt afgefiltreerd en het filtraat wordt in vacuum tot droog geconcentreerd. Het residu wordt opgenomen in pyridine (25 ml) 20 en U-dimethylamine pyridine (75 mg) wordt toegevoegd en de oplossing wordt 3 uur onder een argondeken geroerd. Azijnzuur (25 ml) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt k5 min. bij 100° onder een positieve argonstroom geroerd. Het reaktiemengsel wordt tot droog geconcentreerd, opgenomen in ethyl-25 acetaat en neutraal gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat en verdund zoutzuur. Het ruwe produkt (12,8 g) wordt gechromato-grafeerd op siliciumdioxydegel en geelueerd met ethylacetaat: hexaan (1:1) waardoor 9,05 g (+)-1-/N-,£3-(benzoylamino)-2-oxo-^-f enylbutyl/-N-/( f enyimethoxy) carbonyl7-L-alanyl/-L-30 proline, 1,1-dimethylethylester worden verkregen.

d) (+,)-1 -/ÏI-/N-/3-(benzoylamino)-2-oxo-l+-fenylbutyl7-N-/T fenyimethoxy)carbonyl7-L-alanyl7-L-prolxne

Het esterprodukt uit deel (c) (11,U g, 17,7 mmol) wordt opgenomen in trifluorazijnzuur (50 ml) en k5 min. op 35 kamertemperatuur gehouden. Het wordt dan tot droog geconcen- B302562 : f L * 87 treerd en getritureerd net ether:hexaan waardoor 10,3 g ruw produkt worden verkregen. Dit materiaal wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegelkolom in benzeen/azijnzuur (8:2), waardoor 9,T g (+,)-1 -/?!-/?!-/3-(benzoylamino )-2-oxo-l+-f enylbuty3j-ïï-£( fenyl-5 methoxy)carbonyl7-L-alany2^-L-proline; smpt, 70-91°; [o. = “53,0 (c * 1,22; methanol). R^. 0,1+1 (siliciumdioxydegel, benzeen/az ijnzuur; 8:2).

Analyse berekend voor C 67,68; H 6,02; ff 7,17 10 Gevonden: C 67,95; H 6,02; ff 6,82 e) (+ )-1-/ff-/ff-£3"(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutylj- ' ff-/T fenylmethoxy) carbonyi/-L-al anylj -L-pr ol in e, „ j methvlester

Het zure produkt uit deel (d) (3,5 g, 6 mmol) wordt 15 onder roeren bij kamertemperatuur opgenomen in dimethylformamide (12 ml). Hieraan worden natriumbicarbonaat (630 mg, 7,5 mmol) en methyljodide (0,1+7 ml, 7,5 mmol) toegevoegd. Ha 18 uur worden aanvullend methyljodide (T,b mmol) en natriumbicarbonaat (7,1+ mmol) toegevoegd, ffa nog 1+ uur roeren wordt het reaktie-20 mengsel in een vacuum tot droog geconcentreerd, opgenomen in ethylacetaat en gewassen met verzadigd natriumbicarbonaat.

Het ruwe produkt ( 3,7 g) wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegelkolom in ethylacetaat:hexaan (2:1) waardoor 3,5 g (+) -1 £3- (benzoylamino) -2-oxo-l+-f enylbutyl/-ff-,£( fenyl- 25 methoxy)carbonyl/-L-alanylJ-L-proline, methylester worden verkregen.

f) (+)"1(benzoylamino)-2-oxo-l+-fenylbutyl/-L-alanyl7-L--proline, methylester. monohydrochloride

Het esterprodukt uit (e) (900 mg, 1,5 mmol) wordt 30 opgenomen in ethanol (95 f?, 100 ml) en 1n zoutzuur (1,8 ml).

Palladium op koolstofkatalysator (10 %, 180 mg) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt een nacht lang onder waterstof geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd om de katalysator te verwijderen, tot droog geconcentreerd en 2x 35 gelyofiliseerd uit water waardoor 700 mg (+)-1-/S-/3“(benzoyl- 3302562 0 88 t· 1 amino)“2“oxo-H-fenylbutyl7“L-alanyl7-L-alanyl7“L-proline, o o 23 methylester, monohydrochloride; smpt. 110-128° (90°); [a J^ -“69»9° (c * 1,18, methanol) worden verkregen. R^ 0,63 (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur; 9:1:1).

5 Analyse berekend voor ^36^31^3^5 * * ^»^2 H^O: C 60,22; H 6,58; N 8,11; Cl 6,8k Gevonden: C 60,22; H 6,28; N 8,10; Cl 7,06 «

Voorbeeld CX

(+) -1 -/^-/3- (benzoylamino) -2-oxo-ii-f enylbutyl/-L-10 alanvl7-L-proline, methylester, monomethaansulfonaat (+) -1 -/^1-/11-/3- (benzoylamino) -2-oxo-i+-fenylbutyl7“ 11-/(fenylmethoxy) carbonyl/-L-alanylJ'-L-proline, methylester ) (600 mg, 1 mmol) bereid zoals uiteengezet in voorbeeld CIX(e) wordt opgenomen in methanol (60 ml) en methaansulfonzuur ‘ * 15/ (0,066 ml, 1 mmol). Palladium op koolstofkatalysator (10 120 mg) wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 2g uur onder waterstof geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd om de katalysator te verwijderen en daarna in vacuum geconcentreerd. Het ruwe produkt wordt getritureerd met ether en gefil-20 treerd. Het neerslag wordt opgenomen in water en gelyofiliseerd waardoor VfO mg (+ )-1-/!l-/3“(benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutyl7“L-alanyl,7-L-proline, methylest er, monomethaansulfonaat; smpt.

80 - li+0°; fa = -61,U° (c = 1,10; methanol) worden verkregen. Rj 0,63 (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur; 25 9:1:1).

f'

K Analyse berekend voor ¢36^31^3^ · CH^O S

C 56,98; H 6,3*1-; H 7,30; S 5,63 Gevonden: C 56,98; H 6,32; N 7,^7; S 5,63 Voorbeeld CXI

30 (+) -1 -/Iï-/3-(benzoylamino )-2-oxo-U-f enylbutyjJ-L- alanyl7-L-T>roline, methylester, hemisulfaat_ ( +) -1 -/N-/5r-/3“( benzoylamino )-2-oxo-U-f enylbutyl7~N-/"(f enylmethoxy) carbonyl/-L-alanyl/-L-proline, methylest er (600 mg, 1 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld CIX(e), 35 wordt opgenomen in methanol (Uo ml) samen met 1n zwavelzuur 8302562 89 . , I τ . i (0,9 ml). Palladium op koolstofkatalysator (10 #, 120 mg) wordt toegevoegd en liet reaktiemengsel wordt 2 uur onder waterstof geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefitreerd om de katalysator te verwijderen, tot droog geconcentreerd, 5 getritureerd met ether en gefiltreerd. Het ruwe,produkt (Mi6 mg) wordt opgenomen in water, op millipore gefiltreerd, en gelyofili-seerd waardoor U05 mg (+)-1-/N-/!3**(benzoylamino)-2-oxo-k-fenyl-tutyl/-L-alanyl7"L-proline, methylester, hemisulfaat; smpt.

98 - 112° (85°); £a = -60,3° (c * 1,16; methanol) worden 10 verkregen. 0,63 (uitlopend) (siliciumdioxydegel, chloroform/ methanol/azijnzuur; 9:1:1).

Analyse berekend voor . 0,5 H^SO^ . 0,91Hg0: . - C 58,81; Ξ 6,h2; N 7,92; S 3,01 ' 1 Gevonden: C 58,81; H 6,11; ïï 7,91; S 3,09

15 Voorbeeld CXII

(+)-1 -Zfo-Z3-(benzoylamino) -2-oxo-^-fenylbutylj-li-alanvl7~L-proline. propylester, monomethaansulfonaat a) (+)-1-/!i-/li-/5“(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbufcyl7-enylmet hoxy) carbony3j-L-alanyl7“L-proline, 20 propylester (+)-1-/tt-ZS-ZS-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7“H” [{fenylmethoxy)carbonyl/-L-alanyl7-L-proline (1,17 g, 2 mmol) bereid zoals uiteengezet in voorbeeld XCIX(d) onder roeren in een ijsbad opgenomen in tetrahydrofuran (2 ml). Daaraan 25 wordt n-propanol (3,0 ml, U0 mmol) toegevoegd, gevolgd door ( U-dimethylaminopyridine (122 mg, 1 mmol) en dicyclohexylcarbodiimide (I4· 12 mg, 2 mmol). Men laat de reaktie opwarmen tot kamertemperatuur en een nacht lang verlopen. Het dicyclohexylureum wordt af gefiltreerd en het filtraat wordt in vacuum tot droog geconcentreerd.

30 Het ruwe produkt (1,2 g) wordt gechromatografeerd op een silciiumdioxydegelkolom in benzeen’.azijnzuur (9:1) waardoor 1,0 g (+)-l-/K-£X-/3-('benzoyl3mino)-2-oxo-h-fenyl'bu.tylJ-N-[{fenylmethoxy)carbonyl7-L-alanyl/-L-proline, propylester wordt verkregen.

8302562 /* 1 90 b) (+)-1-/!N-/3“(benzoylamino )-2“0X0-U-fenylbutyl7” L-alanyl7-L-proline, propylester, monomethaan- sulfonaat_

Het esterprodukt uit deel (a) (500 mg, 0,8 mmol) 5 wordt opgenomen in methanol (50 ml). Methaansulfonzuur (0,72 ml van een 1 n oplossing in methanol) en palladium op koolstof katalysator (10 #, 100 mg) worden toegevoegd en het reaktie-mengsel een nacht lang onder waterstof geroerd. Het reaktie-mengsel wordt afgefiltreerd om de katalysator te verwijderen, 10 tot droog geconcentreerd, getritureerd met ether en gefiltreerd waardoor b06 mg ruw produkt worden verkregen. Dit wordt opgenomen in water, met millipore gefiltreerd, en gelyofili-seerd waardoor 390 mg (i)-1~^“Z3“(t>enzoylamino)“2-oxo“^-fenylbutyl7-L-alanyl?-L-proline, propylester, monomethaan-15 sulfonaat; smpt. 82-9¾° (69°); /a = ”60,5° (c = 0,95; methanol worden verkregen). 0,H6 (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur; 90:5 : 5) ·

Analyse berekend voor · CH^O^S . 0,5 H20: C 58,15-, H 6,73; H 7,01; s 5,3¾ 20 Gevonden: C 58,15; H 6,63; H 7,05; S 5,3¾

Voorbeeld CXII

(+)-1-/ïï-^3-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7” L-aIanyl?-L-nroline, ethylester, monomethaansulfaat a) (+) -1 (benzoylamino)-2-oxo-H-fenylbutyl7“ 25 ÏÏ-/7 fenylmethoxy)carbonyl/-L-alanyl7-L-proline, fethylester_ (+.)-1 -ΖΗ-/ΐί-Ζ3“ (benzoylamino) -2-oxo-U-f enylbutylj-N-/^ f enylmethoxy) carbonyl/-L-alanyl/-L-proline (1,17 g, 2 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld CIX(d) wordt onder 30 roeren in een ijsbad opgenomen in tetrahydrofuran (2 ml). Daaraan wordt absolute ethanol (2,3 ml, ^0 mmol) toegevoegd, gevolgd door U-dimethylaminopyridine (122 mg, 1 mmol) en dicyclohexylcarbo-diimide (U12 mg, 2 mmol). Men laat de reaktie een nacht lang verlopen bij kamertemperatuur. Het dicyclohexylureum wordt 35 afgefiltreerd, het filtraat wordt tot droog geconcentreerd, het 3302562 r 'f * 91 residu wordt opgenomen in ethylacetaat en neutraal gewassen met 10 % kaliumbisulfaat en verzadigd natriumcarbonaat. Het ruwe produkt (1,2 g) wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegel-kolom in henzeen:azijnzuur (8:2) waardoor 1,0 g (+)-1~/ΪΓ-βϊ-/3-5 (benzoylamino )-2-oxo-l*-fenylbuty]J-li-/’(fenylmethoxy)carbonyl7-L- - aLanylJ-L-proline, ethylester.

b) (+)-1-/Sl-/3~(benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutylj-L-alanylT-L-nroline, ethylester, nonomethaansulfaat Het esterprodukt uit deel (a) (500 mg, 0,811*7 mmol) 10 wordt opgenomen in 50 ml methanol-methanolisch methaansulfonzuur (1η, 0,733 ml). Palladium op koolstofkatalysator (10 100 mg) * wordt toegevoegd en het reaktiemengsel wordt 3 uur onder een j positieve waterstofdruk geroerd. Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd om de katalysator te verwijderen, tot droog geconcen-15 treerd, getritureerd met ether en gefiltreerd. Het neerslag (U28 mg) wordt opgenomen in water, op millipore gefiltreerd en gelyofiliseerd waardoor 3&0 mg (+)-1 -/Η-.Γ3 "(benzoylamino)-2-oxo-l*-fenylbutyl7“L-alanyl/-L“proline, ethylester, mono-methaansulfonaat; smpt. 91“ 96° (72°)·, /et - “57 »2° (c = 1,0l*; 20 methanol) worden verkregen. Rf 0,1*1* (silbiumdioxydegel, chloro-form/methanol/az ij nzuur; 90:5:5)·

Analyse berekend voor ^27^33^3^5 * *^1*^^3 * H^O:

C 57,33; H 6,56; 5 7,17; S 5,^7 Gevonden: C 57,33; H 6,1*3; II 7,12; S 5,1*7-25 Voorbeeld CXIV

(j^) -1(benzoylamino) "2-oxo-1*-fenylbutylj-L-alanylJ-L-proline, 1-methylethylester, monomethaan-sulfonaat a) (+) -1 -/11-/11-/3- (benzoylamino) -2-oxo-l*-fenylbutyl/-30 fenylmethoxy)carbonyl7-L-alanyl7-L-proline, 1-methylethylester (+,)-1 -/&-/H-/3-(benzoylamino )-2-oxo-l*-fenylbutyl/-II-/7fenylmethoxy)carbonyl7“L-alanyl7“L“proline (1,17 g, 2 mmol), bereid zoals uiteengezet in voorbeeld CIX(d), en isopropanol 35 (3,0 ml, 1*0 mmol) worden onder roeren in een ijsbad opgenomen 3302562

?V

92 in tetrahydrofuran (2 ml). Daaraan wordt dicyclohexylcarbodiimide (^12 mg, 2 mmol) toegevoegd. Men laat de reaktie een nacht lang verlopen hij kamertemperatuur. Er wordt dan tot droog geconcentreerd, opgenomen in ethylacetaat en het dicyclohexylureum wordt 5 afgefiltreerd. Het filtraat wordt neutraal gewassen met 10 % kaliumbisulfaat en verzadigd natriumbicarbonaat. Het ruwe produkt ( 1,2 g) wordt gezuiverd op een siliciumdioxydegelkolom met benzeen:azijnzuur (8:2) waardoor 1,0 g (+)-1-$T-/ïï-/3”(benzoyl-amino) -2-oxo-U-fenylbutyl/-N-/( fenylmethoxy) carbonyl7-L-alanyl7“ 10 L-proline, 1-methylethylester.

b) (+)-1 -/ΪΓ-/3-(benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutyl/- L-alanyl7“L-proline, 1-methylethylester, monomethaan- y sulfonaat_

Het esterprodukt uit deel (a) (815 mg, 1,3 mmol) wordt 15 opgenomen in methanol (20 ml) en methanolisch methaansulfonzuur (1η, 1,17 ml) en gedurende 3 uur onder waterstof geroerd in aanwezigheid van palladium op koolstofkatalysator (10 #,160 mg).

Het reaktiemengsel wordt gefiltreerd om de katalysator te verwijderen en in vacuum tot droog geconcentreerd. Het residu 20 wordt getritureerd met ether en het neerslag wordt gefiltreerd waardoor 70^· mg ruw produkt worden verkregen. Dit wordt opgenomen in 35 ml water (2 % oplossing), op millipore gefiltreerd en gelyofiliseerd waardoor 600 mg (+)-1-/iI-/3”(benzoylamino)-2-oxo-^-fenylbutyl/-L-alanyl7-L-proline, 1 -methylethylester, 25 monomethaansulfonaat; smpt. 88 - 105°; £cc ~ ”55*2° (c = 1,05; ( " methanol) worden verkregen. 0,33 (siliciumdioxydegel, chloroform/methanol/azijnzuur; 9:1:1)·

Analyse berekend voor C28^35^3°5 ’ Η,,Ο: c 57,89; H 6,75; N 6,99; s 5,33 30 Gevonden: C 57,89; H 6,62; N 6,62; S 5,32

Voorbeelden CXV - CXXIII

Volgens de methode van de voorbeelden XIX, CXII, CXÏII en CXIV wordt (+)-1-^1-£$-(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyl-butyl/-U-/?( fenylmethoxy) carbonyl/-L-alanyl7“L-proline behandeld 35 met de reaktiedeelnemer als hieronder weergegeven in kolom 1.

8302562 93

1 A

- V

Verwijdering van de alanylbeschermingsgroep levert het ester-produkt als hieronder weergegeven in kolom 2.

4 8302562 . - 9b.-Kolom 2

De formule 1c op het formuleblad

Voorbeeld kolom 1 Rg O o CXV Cl-CH-0-CrC2H5 -ch-o-c-c2H5 ό ό ' o o

8 II

CXVI Cl-CH-O-C-C H -CH-O-C-C H

I I

CH(CH3)2 CH(CH3)2 o o ii · i ΠΠ1 ci-ch2-o-c-c(ch3)3 -ch2-o-c-c(ch3>3 ’ o o

II II

CXVIII Br- CH -O-C-CH, —CH -O-C-CH

8302562 * .1 >· - 95 -

Voorbeeld kolom 1 Rg o h CXIX C1-CH2-0-C-^o) -CH2-0-C-@ o o

ll H

cxx i-ch2-c-oc(ch3)3 -ch2-c-o-c(ch3)3 CH O CH o I 3 ll I 0 CXXI I-C- C-0-CH3 -c --C-0-CH3

I I

CH, ' CH, ? j * l.

.* .

CXXII CH-(CH2-0-CH2r^© }2 -CH (CH^OH^

OH

CH,-CH--CH -CH -CH—CH

I I I II

OH O O OH OH

CXXIII | j- *2C-© H2C-@ 8302562 9β £· v

Voorbeeld CXXIV

1-/Ii-/'(S)-3“(benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbutyl7- L-alanyl7-L-proline, natriumzout__ 1 -/&*£( S )“3“(benzoylamino) -2-oxo-H-fenylbutylJ-L-5 -alanyl7“L~proline, hydrochloride mg, 1 mmol) wordt opgelost in water (50 ml). Waterig natriumbicarbonaat (0,1 n, 20 ml) wordt toegevoegd en de waterige oplossing wordt gelyofili-seerd. Het wordt daarna opgelost in water (10 ml) en aangebracht op een kolom (5 cm x 60 cm) van Sephadex chromatografisch gel 10 G-10 en geelueer<5ewater. Prakties die het gewenste produkt bevatten worden verenigd en gelyofiliseerd waardoor 1-/15-^(3)-3-(benzoylamino) -2-oxo-^-fenylbutyl7-L-alanyl7-L-proline, natriumzout wordt verkregen.

Voorbeeld CXXV

15 ' 1000 tabletten die ieder de volgende bestanddelen bevatten 1 -/N-/*( S) -3- (benzoylamino) -2-oxo-U-fenylbutylJ-L-alanylZ-L-proline, natriumzout 100 mg 20 maïszetmeel 50 mg gelatine 7,5 mg

Avicel (microkristallijne cellulose) 25 mg magnesiumstearaat 2,5 mg worden bereid uit voldoende hoeveelheden door het 1-/N-/"(s)-3“ 25 (benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7-L-alanyl7”L-proline, natrium- 1 zout en maïszetmeel te vermengen met een waterige oplossing van de gelatine. Het mengsel wordt gedroogd en tot een fijn poeder gemalen. De Avicel en daarna het magnesiumstearaat worden bijgemengd onder granulering. Dit mengsel wordt daarna samen-30 geperst in een tablettenpers om 1000 tabletten te vormen die ieder 100 mg werkzaam bestanddeel bevatten.

Op een dergelijke wijze kunnen tabletten die 100 mg van het produkt van een van de voorbeelden I tot CXXIII bevatten, worden bereid. Een dergelijke methode kan worden 35 gebruikt om tabletten te vormen die 50 mg werkzaam bestanddeel 8302562 97 r - 'r 'V - te vatten.

Voorbeeld CXXVI

Tweedelige no. 1 gelatinecapsules die ieder 50 mg )-3"(benzoylamino )-2-oxo-^-fenylbuty^-L-alanyl7-L-proline, natriumzout bevatten, worden gevuld met een mengsel 5 van de volgende bestanddelen: )-3“(benzoylamino)-2-oxo-U-fenyrbutyl7-L-alanyl7-L-proline, natriumzout 50 mg magnesiumstearaat 7 - mg 10 lactose 193 mg * 250 mg

Op een dergelijke wijze kunnen capsules die 50 mg bevatten van het produkt van een van de voorbeelden I tot CXXIII-worden bereid.

15 Voorbeeld CXXVII

Een injekteerbare oplossing wordt als volgt bereid: 1-/ÏI-/t S )-3-(benzoylamino )-2-oxo-U-fenylbutyl/-L-alanyl7-L-proline, natriumzout 500 g 20 methylparaben 5 g propylparaben 1 g natriumchloride 25 g water voor injektie 5 1

De werkzame stof, conserveringsmiddelen en natrium-25 chloride worden opgelost in 3 1 water voor injektie en daarna wordt het volume op 5 1 gebracht. De oplossing wordt gefiltreerd door een steriel filter en aseptisch afgevuld in vooraf gesteriliseerde flacons die worden afgesloten met vooraf gesteriliseerde rubber stop. Iedere flacon bevat 5 ml oplossing 30 in een concentratie van 100 mg werkzaam bestanddeel per ml oplossing voor injektie.

Op een dergelijke wijze kan een injekteerbare oplossing die 100 mg werkzaam bestanddeel per ml oplossing bevat worden bereid voor het nrodukt van een\an de voorbeelden I tot 35 8302562 98 fc. r * r. * * CXXIIÏ.

Voorbeeld CXXVIII

1000 tabletten die ieder de volgende bestanddelen bevatten: 5 1-/N-£ï S)-3“(benzoylamino)-2-oxo-*H- fenylbutyl/-L-alanyl7-L-proline, natriumzout 100 mg

Avicel 100 mg hydro chloort hiaz ide 12,5 mg 10 lactose 113 mg maïszetmeel 17 >5 mg stearinezuur 7 mg 350 mg worden bereid uit voldoende hoeveelheden door het 1-£&-£( S)-3" 15 (benzoylamino)-2-oxo-U-fenylbutyl7“L-alanyl7“L-proline, natriumzout, Avicel en een deel van het stearinezuur tot brokken te slaan. De brokken worden gemalen en door een no. 2 zeef gevoerd en daarna gemengd met het hydrochloorthiazide, lactose, maïszetmeel en de rest van het zetmeel. Het mengsel 20 wordt samengeperst tot 350 mg capsulevormige tabletten in een tabletteerpers. De tabletten worden gekerfd om door midden te kunnen worden gedeeld.

Op een dergelijke wijze kunnen tabletten worden bereid die 100 mg bevatten van het produkt van een van de voor-25 beelden I tot CXXIII.

o 30 8302562

Claims (48)

15 R^ waterstof, chloor, broom, fluor, een korte keten alkyl met 1 tot 1»· koolstofatomen, een korte keten alkoxy met 1 tot b koolstofatomen, een korte keten alkylthio met 1 tot h koolstofatomen, trifluormethyl of hydroxygroep is; m gelijk is aan 0, 1, 2, 3 of U; p gelijk is aan 1, 2 of 3, vooropgesteld dat 20 p alleen meer dan 1 is wanneer R^ of R^ waterstof, chloor, fluor of een methyl of methoxygroep is; R^ waterstof of een korte keten alkylgroep met 1 toti<· koolstofatomen is, Y zuurstof of zwavel is; R^g een korte keten alkylgroep met 1 tot U koolstofatomen, een groep met formule 38 is of de R^g groepen 25 zich verenigen om een ongesubstitueerde 5” of 6-ring te vormen l' ^ of een dergelijke ring in een of meer van de koolstofatomen een korte keten alkyl met 1 tot 4 koolstofatomen of een di(korte keten alkyl met 1 tot b koolstofatomen) substituent bevatten; R^ een korte keten alkyl, benzyl of fenethylgroep is; R^q 30 waterstof, een korte keten alkyl, benzyl of fenethylgroep is; Rg waterstof, een korte keten alkylgroep, benzylgroep, benzhydrylgroep of een groep met formule 68, formule 69, formule 70, formule 71» formule Ma*of formule 82 is; R^ waterstof, een korte keten alkyl, cycloalkyl- of fenylgroep is;

35 R^g waterstof, een korte keten alkyl, korte keten alkoxy of 8302562 I t - »*< (* fenylgroep is, of en R^g samen een groep met formule 72, formule 73, formule ?U of formule 75 vormen, Rg^ waterstof, een korte keten alkylgroep of een groep met formule 83, formule 8U, formule 85 of formule 86 is; Rg^ en Rgg onafhankelijk 5 waterstof of een korte keten alkylgroep zijn; en Rg^ een korte keten alkylgroep is.

2. Peptideverbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R waterstof, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1 tot U koolstofatomen of fenylgroep 10 is; Rj water, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1 tot U koolstofatomen, CF^, of een groep met formule 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 of 63, waarin r - 1, .of een groep met formule 65 waarin r = 3 of een groep met formule 87, formule 88 of formule 89 is, vooropgesteld dat R^ alleen 15 waterstof is als R anders dan waterstof is; R^ waterstof, een cyclohexyl of fenylgroep is; R^ waterstof, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen, of een groep met formule 56, formule 57, formule 58, formule 59» formule 60, formule 61 of formule 63 met r a 1, of een groep 20 met formule 65 waarin r = 3» of een groep met formule 62c, formule 87, formule 88 of formule 89 is; Rg waterstof, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen, een alkalimetaalzoution, een groep met formule 68, formule 69a, formule 70, formule 71, formule 82 of formule Ula 25 is; R^ waterstof, een rechte of vertakte korte keten alkyl- groep met 1-U koolstofatomen of een cyclohexylgroep is; R^g een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen of een fenylgroep is; Rg^ een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen is; Rg een groep 30 met formule 67 met p=1 is; R^ een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen een groep met formule Ui, formule 62, of formule 67 met p=1 is; R^ waterstof, een hydroxygroep, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen, een cyclohexylgroep, een aminogroep, 35 een -0-korte keten alkylgroep, waarin de korte keten alkylgroep 8302562 Λ ► een rechte of vertakte keten met 1-1+ koolstofatomen bevat, een groep met formule 38 of formule 1+5, waarin p = 1 is, 1- nafthyloxygroep, een 2-nafthyloxygroep, een groep met formule 1*7» waarin de korte keten alkylgroep een rechte of 5 vertakte keten met 1-1+ koolstofatomen heeft, een groep met formule 1+8 waarin p = 1, een 1-nafthylthiogroep of een 2- nafthylthiogroep is; Rg een groep met formule 1+1+, formule 1+7» of formule 1+5 of formule 1+8 waarin p = 1 is, waarin de korte keten alkylgroep een rechte of vertakte keten met 10 1-1+ koolstofatomen hevat; R^ een fenyl, 2-hydroxyfenyl of l+-hydroxy- fenylgroep is; R heiden fluor, heiden chloor of heiden een groep met formule 51 zijn; Y staat voor 0 of S; R^g een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-1+ koolstof atomen is of de R^g groepen zich verenigen om een ongesubstitu-15 eerde 5” of 6-ring te vormen of gpnoemde ring waarin een of meer heschikhare koolstofatomen een methyl of dimethyl-substituent bevatten; R^, R ?, R^g en R^’ allen waterstof zijn, of R^ een fenyl, 2-hydroxyfenyl of l+-hydroxyfenylgroep is en R^', R^ en R^' allen waterstof zijn; r een geheel 20 getal is van 1 tot l+; m gelijk is aan 0, 1 of 2; R^g waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is; R ^ waterstof, chloor, broom, fluor, een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is; en Rg^ een fenylgroep is. 25 3· Peptideverhinding volgens conclusie 2, \ . , met het kenmerk, dat X een groen is met formule 35 waarin R.. - 5 waterstof is, formule 2l+, formule 27a of formule 3*+ is; R waterstof of een methylgroep is, R^ waterstof, een methyl-groep of een groep -(CHg)^-IJKg is, vooropgesteld, dat R^ 30 alleen waterstof is, wanneer R anders dan waterstof is; R^ een cyclohexyl of fenylgroep is; Rg waterstof, een rechte of vertakte korte keten alkylgroep met 1-1+ koolstofatomen óf een alkalimetaalzoution is; R^ waterstof, een cyclohexylgroep, een korte keten alkoxygroep met 1-1+ koolstofatomen, een groep 35 met formule 38, formule 1+5 of formule 1+8 met p = 1 is; m gelijk 8302562 < i * I J> ·* is aan O, 1 of 2; R.^ waterstof, chloor, broom, fluor of een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is; en t gelijk is aan 2 of 3· k. Peptideverbinding volgens conclusie 3, 5 met het kenmerk, dat X een groep met formule 35, waarin R_ - 5 waterstof is,

5. Peptideverbinding volgens conclusie met het kenmerk, dat een fenylgroep is en een benzyl- groep is.

6. Peptideverbinding volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is, , R^ een cyclohexylgroep is en Rg waterstof is.

7· Peptideverbinding volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is,

15 R^ een fenylgroep is en Rg waterstof is.

8. Peptideverbinding volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat R een methylgroep is; R1 waterstof is; een cyclohexylgroep is en Rg waterstof is. 9* Peptideverbinding volgens conclusie 3, 20 met het kenmerk, dat X een groep met formule 27b is.

10. Peptideverbinding volgens conclusie 9, met het kenmerk, dat R^ een fenylgroep is en R^ een benzyl-groep is.

11. Peptideverbinding volgens conclusie 10, 25 met het kenmerk, dat R een een methylgroep is; R^ waterstof is en Ry- waterstof is. o

12. Peptideverbinding volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat R een methylgroep is; R^ waterstof is en Rg een methylgroep is.

13. Peptideverbinding volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is. 1U. Peptideverbinding volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat X een groep met formule 3^ is.

15. Peptideverbinding volgens conclusie 1U, 8302562 £ Λ ? , 1(Α met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is en R^ een benzylgroep is.

16. Peptideverbinding volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat R een methylgroep is; R waterstof is 5 en Rg waterstof is.

17· Peptideverbinding volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is.

18. Peptideverbinding volgens conclusie 3, 10 met het kenmerk, dat X een groep met formule 2k is.

19· Peptideverbinding volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat R^ waterstof is. { ' 20. Peptideverbinding volgens conclusie 19“ met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is; R^ een groep 15 ' -(CHgJ^-Mg is; R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is.

21. Peptideverbinding volgens conclusie 19, met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is; R^ een groep -(CHg^"·*^ is; R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg 20 waterstof is.

22. Peptideverbinding volgens conclusie 19, met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is, R^ een groep met formule 1*1 waarin m = 1 is, is; R waterstof; R^ een mèthyl-groep en Rg waterstof is.

23. Peptideverbinding volgens conclusie 19, met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is; R^ een groep met formule 57 waarin R = 1 is; R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is. 2l*. Peptideverbinding volgens conclusie19, 30 met het kenmerk, waarin Rg een fenylgroep is en R^ een benzyl- groep is.

25. Peptideverbinding volgens conclusie 2h, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is.

26. Peptideverbinding volgens conclusie 25, 8302562 , K rtf. /* met het kenmerk, dat deze 1-/&-/( S)-3-(benzoylamino)-2-oxo-b-fenyrbutyl7-L-alanyl7-L-proline, monohydrochloride is.

27. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en 5 Rg een methylgroep is.

28. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, met het kenmerk, dat R waterstof is; R1 een methylgroep is en Rg een ethylgroep is.

29. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, 10 met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg een n-propylgroep is.

30. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, met het kenmerk., dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg een isopropylgroep is.

31. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, met het kenmerk, dat R een methylgroep is; R^ een waterstof is en Rg waterstof is.

32. Peptideverbinding volgens conclusie 2b, met het kenmerk, dat R waterstof is; R1 een groep -(CHgJ^-M,, 20 is en Rg waterstof is.

33. Peptideverbinding volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat R^ een fenylthiogroep is. 3b. Peptideverbinding volgens conclusie 3b, met het kenmerk, dat R^ een fenylgroep is en R^ een benzyl-25 groep is.

35· Peptideverbinding volgens conclusie 3b, met het kenmerk. dat R een methylgroep is; R^ waterstof is en Rg waterstof is.

36. Peptideverbinding volgens conclusie 18, 30 met het kenmerk, dat R^, een b-fluorfenoxygroep is.

37· Peptideverbinding volgens conclusie 36, met het kenmerk, dat Rg een fenylgroep is en R^ een benzylgroep is.

38. Peptideverbinding volgens conclusie 37» 35 met het kenmerk, dat R een methylgroep is; R^ waterstof is en S302 5 62 ίο 6 r Λ ► . Rg waterstof is.

39· Peptideverbinding volgens conclusie 37» met het kenmerk, dat R een methylgroep is, R^ waterstof is en Rg een methylgroep is.

40. Peptideverbinding volgens conclusie 37» met het kenmerk, dat R waterstof is; R1 een methylgroep is en Rg waterstof is. Ui. Peptideverbinding volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat R^ een fenylgroep is.

10 U2. Peptideverbinding volgens conclusie Ui, met het kenmerk, dat R^ een fenylgroep is en R^ een benzylgroep is. v ’ U3. Peptideverbinding volgens conclusie U2, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en 15 Rg waterstof is. UU. Peptideverbinding volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat R^ een cyclohexylgroep is. U5. Peptideverbinding volgens conclusie UU, met het kenmerk, dat R2 een fenylgroep is en R^ een benzylgroep 20 is. U6. Peptideverbinding volgens conclusie U5, met het kenmerk, dat R waterstof is; R^ een methylgroep is en Rg waterstof is. U7. Peptideverbinding volgens conclusie 1, 25 met het kenmerk, dat R een korte keten alkylgroep, een cycloalkylgroep of een groep met formule 53, formule 62a, formule 62b, formule 62c, formule 58a, formule 58b, formule 58c, formule 63a, formule 63b of formule 63c is; en m gelijk is aan 0, 1, 2, 3 of U.

30 U8. Peptideverbinding volgens conclusie U7, met het kenmerk, dat R een methylgroep is. U9. Peptideverbinding met formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan waarin X een groep is met formule 2U, formule 25, formule 26, formule 27, formule 28, 35 formule 29, formule 30, formule 31, formule 32, formule 33, 8302562 . *\lt > 10T formule 3U of formule 80; R^ een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule p6, formule 57, formule 58, formule 59, formule 6θ, formule 61, formule 62, formule 63, formule 6b, 5 formule 65 of formule 66 is; R^ een groep met formule 39, formule Uo, formule Ui of formule 67 is; Rg waterstof, een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 39, formule hO, formule Ul, formule b2, formule 58, formule 59, formule 60, 10 formule 61, formule 62, formule 63, formule 6b, formule 65 of formule 66 is; R^ waterstof, een korte keten alkylgroep, of een groep met formule 56, formule 57, formule 58, •—x formule 59, formule 60, formule 61, formule 62, formule 63, formule 6b, formule 65 of formule 66 is; r een geheel getal is 15 van 1 tot U; R^, waterstof, halogeen, een korte keten alkyl, keto, hydroxy groep, een -ffiW(o)- korte keten alkylgroep, een azido, aminogroep, of een groep met formule 36, formule 37, formule 38, formule 39, formule Uo, formule Ui, een 1- of 2-nafthylgroep met formule Ula, een groep met formule b2, 20 formule U3, formule UU, formule U5, een 1- of 2-nafthyloxygroep met formule b6, een groep met formule bj, formule b8 of een 1- of 2-nafthylthiogroep met formule U9 is; Rg halogeen, een ketogroep, een groep met formule UU, formule bp, formule 50, een 1- of 2-nafthyloxygroep met formule b6, een groep 25 met formule U7, formule U8 of een 1- of 2-nafthylthiogroep met formule bp is; R^ een ketogroep of een groep met formule 38 is, R1q halogeen of een groep met formule 51 is; R^, R.^', R^2 en R12' onafhankelijk waterstof of een ko'rte keten alkylgroep zijn of R.^', en wa^ers^0^ zijn en R^ een groep 30 met formule 52 is; R^ waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-U koolstofatomen, een korte keten alkoxygroep met 1-b koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 1-U koolstofatomen, chloor, "broom, fluor, een trifluormethyl, hydroxy, fenyl, tenoxy, fenylthio of fenylmethylgroep is;

35 R^ waterstof, chloor, broom, fluor, een korte keten alkyl 8302562 « * ff *" . met 1-1)· koolstof at omen, korte keten alkoxy met 1-1) koolstof-atomen, korte keten alkylthio met 1-1) koolstofatomen, trifluormethyl of hydroxygroep is, m gelijk is 0 , 1, 2, 3 of 1); p gelijk is aan 1, 2 of 3, vooropgesteld dat p alleen 5 meer dan een is wanneer of R^ waterstof, chloor, fluor of een methyl of methoxygroep is; R waterstof of een korte keten alkylgroep met 1—4 koolstofatomen is; Y staat voor zuurstof of zwavel; R^g een korte keten alkylgroep met 1-1) koolstofatomen of een groep met formule 38 is, of de R^g 10 groepen zich verenigen om een ongesübstitueerde 5” of 6-ring te vormen of genoemde ring waarin een of meer van de koolstofatomen een korte keten alkyl met 1-1) koolstofatomen of v ) di(korte keten alkyl met 1-1) koolstofatomen of di(korte keten alkyl met 1-1) koolstofatomen) substituent bevat; R^ een 15 korte keten alkyl, benzyl of fenethylgroep is; R^q waterstof, een korte keten alkyl, benzyl of fenethylgroep is; en Rg waterstof, een korte keten alkyl, benzyl of benzhydrylgroep is of een groep met formule 68, waarin R^ waterstof, een korte keten alkyl, cycloalkyl of fenylgroep is en R^g waterstof, 20 een korte keten alkyl, korte keten alkoxy of fenylgroep is, of R^ en R18 samen een groep vormen met formule 72, formule 73, formule 7^ of formule 75·

50. Farmaceutisch preparaat te gebruiken bij de behandeling van hypertensie, met het kenmerk, dat het een 25 farmaceutisch aanvaardbare drager bevat en een hypotensie- bestrijdende verbinding met formule 1, waarin R, R^, Rg, R^ en X zoals in conclusie 1 zijn.

51. Werkwijze voor het behandelen van hypertensie bij een zoogdiergastheer, met het kenmerk, dat men een werkzame 30 hoeveelheid toedient van het preparaat volgens conclusie 50.

52. Farmaceutisch preparaat te gebruiken als analgeti-cum, met het kenmerk, dat het een farmaceutisch aanvaardbare drager bevat en een enkepalinase verhinderende verbinding met formule 1, waarin X een groep met formule 80 is, en waarin R,

35 R^, Rg, R^, R,. en Rg zoals vermeld in conclusie 1 zijn. 8302562 10 9 ? V , «Vt <*

53. Werkwijze voor het verlichten van pijn hij een zoogdiergastheer, met het kenmerk, dat men een werkzame hoeveelheid toedient van het preparaat volgens conclusie 52. 5^. Nieuw keton met formule 5» waarin halogeen 5 staat voor chloor of "broom; B^ een groep met formule 39, formule 1*0, formule 1*1 of formule 6j is; R^ waterstof, een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkyl-groep, of een groep met formule 39» formule 1*0, formule 1*1, formule 1*2, formule 58, formule 59» formule 60, formule 61, 10 formule 62, formule 63, formule 61*, formule 65 of formule 66 is; R^ waterstof, chloor, broom, fluor, een korte keten alkyl met ‘ 1-1* koolstof atomen, een korte keten alkoxy met 1-1* koolstof- atomen, een korte keten alkylthio met 1-1* koolstof atomen, trifluormethyl of hydroxygroep is; m gelijk is aan 0, 1, 2, 3 15 of 1*, p gëijk is aan 1, 2 of 3, vooropgesteld dat p alleen meer dan een is als R^ waterstof, chloor, fluor of een methyl of methoxygroep is; en r een geheel getal is van 1 tot 1*.

55· Ketoverbinding volgens conclusie 5^, met het kenmerk, dat Rg een groep met formule 67 met p=1 is; R^ een groep 20 met formule 67 met p = 1 is; m gelijk is aan 0, 1 of 2; en R^ waterstof, chloor, broom, fluor of een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is.

56. Ketoverbinding volgens conclusie 55, met het kenmerk., dat R^ een fenylgroep is; R^ een benzylgroep 25 is; en halogeen bestaat voor chloor. 57« Nieuw aminoketoncarbonzuur met formule 11, waarin R waterstof, Prot, korte keten alkyl, cycloalkyl of een groep met formule 53, formule 90a, formule 90b, formule 90c, formule 91a, formule 91b, formule 91c, formule 92a, 30 formule 92b of formule 92c is, R^ waterstof, een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 56, formule 57a, formule 58a, formule 59a, formule 61a, formule 62a, formule 63a, formule oh, formule 65a of formule 66 is, vooropgesteld, dat R^ alleen 35 waterstof is, als R anders dan waterstof is; Prot een gemakkelijk 8302562 Μ. * · * verwijderbare beschermingsgroep; R^ een groep met formule 39» formule lo, formule ll of formule 6j is; R^ waterstof, een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 39» formule 10, 5 formule !1, formule 12, formule58, formule 59, formule 60, formule 61, formule 62, formule 63, formule 61, formule 65, formule 66 of formule 67 is; R^ waterstof, chloor, broom, fluor of een korte keten alkyl met 1-1 koolstof atomen, een korte keten alkoxy met 1-1 koolstof at omen, een korte keten alkylthio met 10 1-1 koolstof atomen, trifluormethyl of hydroxygroep is; m gelijk is aan 0, 1,2, 3 of!; p gelijk is aan 1, 2 of 3» vooropgesteld dat p alleen meer dan een is als R^ waterstof, chloor, fluor of een methyl of methoxygroep is; en r een geheel getal is van 1 tot 1. 15 58· Aminoketonearbonzuur volgens conclusie 57» met het kenmerk, dat een groep met formule 67 met p = 1 is, R^ een groep met formule 67 met p = 1 is; m' gelijk is aan 0, 1 of 2, waterstof, chloor, broom, fluor of een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is; R een methylgroep is en 20 R1 waterstof is.

59. Aminoketonearbonzuur volgens conclusie 58, met het kenmerk, dat R^ een fenylgroep is en R^ een benzyl-groep is.

60. Aminoketonearbonzuur volgens conclusie 57, . · s 25 met het kenmerk, dat R^ een groep met formule 67 met p = 1 is; R^ een groep met formule 67 met p =* 1 is; m gelijk is aan 0, 1 of 2; R^ waterstof, chloor, broom, fluor of een methyl, methoxy, methylthio of hydroxygroep is, R een gemakkelijk verwijderbare beschermingsgroep is en R^ een methylgroep is.

61. Peptideverbinding volgens conclusie 50, met het kenmerk, dat R2 een fenylgroep is, R^ een benzylgroep is en R een groep met fo mule 93 is. (!a 8302 5 62