NL8300893A - 6'-alkylanaloga van spectinomycine en werkwijze voor het bereiden daarvan. - Google Patents

Description

*-·-......: 6'-Alkylanaloga van speetinomycine en werkwijze voor het bereiden daarvan.

De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het bereiden van 61-alkylspect inomycine en analoga daarvan met inbegrip van tussenprodukten voor toepassing bij deze werkwijze.

De uitvinding heeft verder betrekking op bepaalde alkylspeetino-5 mycineanaloga met zeer goede antibacteriële aktiviteit.

Speetinomycine A is een bekend antibioticum dat voor het eerst langs microbiologische weg werd bereid. Zie Bergy et al., Amerikaans octrooischrift 3.23^.092.

Bepaalde analoga van speetinomycine zijn beschreven 10 door Rosenbrook Jr. et al. in J. Antibiotics, 28. blz. 993 en 960 (1975) en J. Antibiotics, Ji, blz. k51 (1978). Verder zijn door Camey et al. chloordesoxyderivaten van speetinomycine beschreven in J. Antibiotics, JO, blz. 960 (1977). Voorts is door Foley et al. in J. Org. Chem., ^3, 22 blz. ^355~^359 (1978) 15 melding gemaakt van 9-epi-^(R)-dihydrospectinomycine. Aan geen enkele van de speetinomycineanaloga en derivaten beschreven in bovengenoemde publicaties is echter biologische aktiviteit toegeschreven.

Lemieux beschrijft in Can. J. Chem., 51 % blz. 53 20 (1973) een voorkeursrehktie aan de 5”hydroxygroep van 2-desoxy* streptamine (l) met tri-0-acetyl-2-desoxy-2-nitroso-a-D-glyco-pyranosylchloride (2) onder vorming van een a-pseudodisaccharide waarin CBz staat voor carbobenzyloxy. Door Mallams et al. in J. Chem. Soc. Perkin I, blz. 1118 (1978) is de Lemieuxreaktie 25 uitgebreid tot de bereiding van di- en tri-sacchariden.

Verwijdering van oximen is beschreven door Lemieux et al. in Can. J. Chem. 5.1.» blz. 19 (1973) en Mallams et al. in J. Chem. Soc. Perkin I, blz. 1097 (1976).

Door Hannessian et al. (1979) is een chemische 30 bereidingswijze voor speetinomycine beschreven.

Door White et al. is in Tetrahedron Letters, juli, 8300893 2

* A

1979» een chemische bereidingswijze voor speetinomycine en analoga daarvan beschreven. Dezelfde hereidingswijze is beschreven in de onder no. 150.530 op 26 mei 1980 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage die een vervolg is op de onder 5 no. 020.172 op 3 maart 1979 ingediende Amerikaanse octrooi” aanvrage (inmiddels ingetrokken). In de onder de no's 285.16¾ en 285.165 op 20 juli 1981 ingediende Amerikaanse octrooiaanvragen zijn werkwijzen beschreven voor het bereiden van 61 -methylspectinomycine analoga en tussenprodukten voor 10 toepassing bij deze werkwijzen.

In de onder no. 312.035 op 16 oktober 1981 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage is een werkwijze beschreven voor de demethylering van speetinomycine of analoga daarvan en realkylering van de tussenprodukten. In de onder no. 31¾.261 15 op 23 oktober 1981 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage zijn speet inomy cineanaloga waarin op de 3' -plaats modificaties zijn uitgevoerd, beschreven.

Volgens de uitvinding wordt een dienon omgezet tot een groot aantal verschillende 6 *-alkylspectinooycineanaloga 20 door met koper gekatalyseerde Grignardadditie. Daarbij worden verschillende veelzijdige tussenprodukten toegepast. De uitvinding omvat modificatie aan 0-6' met een enonacylaat.

De uitvinding heeft meer in het bijzonder betrekking op een werkwijze voor het bereiden van verbindingen met de 25 formule I onder toepassing van een enonacylaat met de formule VII

als uitgangsverbinding. Ter toelichting op de werkwijze volgens de uitvinding wordt verwezen naar reaktieschema B waarin R waterstof of alkyl voorstelt, R1 t/m R^ waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, R'2, R'^, R’g en R’^ 30 lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, of een beschermende groep bestaande uit aralkoxycarbonyl, gehalogeneerd alkoxy-carbonyl en alkoxycarbonyl voorstellen» met dien verstande dat R2 of R^ altijd waterstof voorstelt, Hg of R^ altijd waterstof voorstelt, R'2 of R'^ altijd een beschermende groep voorstelt en 35 R’g of R’^ altijd een beschermende groep voorstelt, R1Q acyl 8300893 * '* 3 voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt, en B en B^, die gelijk, of verschillend kunnen zijn, elk waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen.Sommige tussenprodukten en stappen tussen 5 VI en I zijn "beschreven in de onder no. 020.073 op 13 maart 1979 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage en de onder no. 285·164 op 20 juli 1981 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage.

De nummering van de koolstofatomen zoals aangegeven 10 in formule I wordt in het hierna volgende steeds toegepast.

De met de werkwijze volgens de uitvinding bereide verbindingen omvatten de gehydrateerde vormen van verbindingen met de formule I. Deze verbindingen zijn op de 3'-plaats gehydrateerd en hebben de formule I’ waarin A, B, B^ en t/m 15 R^q de boven aangegeven betekenis hebben.

Mede inbegrepen zijn farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen met de formules I en I'.

Lage alkyl betekent methyl, ethyl, propyl, butyl, i pentyl, hexyl, heptyl, octyl en isomeren daarvan. Lage 20 alkenyl betekent ethenyl, propenyl, butenyl, pentenyl, hexenyl, heptenyl, octenyl en isomeren daarvan. Lage alkynyl betekent ethynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, heptynyl, octynyl en isomeren daarvan.

Acyl betekent formyl, acetyl, propionyl, butyryl en 25 pentanoyl.

Gehalogeneerd» alkoxycarbonyl betekent mono-, dien tri-halomethoxycarbonyl, mono-, di- en tri-haloethoxycarbonyl, 1 mono-, tri-halopropoxycarbonyl, mono-, di- en trihalobutoxy— carbonyl, mono-, di- en tri-halopentoxycarbonyl en isomeren 30 daarvan.

Halogeen betekent fluor, chloor, broom en jood.

Aralkoxycarbonyl betekent benzyloxycarbonyl, fenylethoxycarbonyl, fenylpropoxycarbonyl, difenyloctoxy-carbcnyl en isomeren daarvan alsmede fluor-enylmethoxycarbonyl.

35 Alkoxycarbonyl betekent isopropyloxycarbonyl, 8300893 _ _ 1 η * 1* t ert.-butyloxycarbonyl en tert.-pentyloxycarbonyl.

Alkyl "betekent rechte en vertakte alkylgroepen met 1-20 koolstof atomen.

Te verstaan wordt gegeven dat wanneer meer dan 5 een hydroxy of alkoxygroep in de suikerrest aanwezig is, deze gelijk of verschillend kunnen zijn.

De uitvinding omvat ook nieuwe tussenprodukten met de formule II', III en IV. Het dienon met de formule IV is een zeer veelzijdige Michael acceptor en een uitstekend tussen-10 produkt voor modificatie.

Met a-anomeer wordt bedoeld een 1'-substituent achter het vlak van de ring en met 0-anomeer die anomeren welke met specfeinomycineovereenkomstige C-1'-configuratie bezitten.

15 De β-anomeren van verbindingen met de formule I

bezitten de gewenste biologische aktiviteit. Deze glycoside-configuratie is aanwezig in ^ectinomycine(schema A).

In stap 1 wordt enonacylaat VII tot reaktie gebracht met dimethylformamide dimethylacetaal in een oplosmiddel 20 onder vorming van het enamine VI. De reaktietemperatuur bedraagt in het algemeen 25°C tot refluxtemperatuur en bij voorkeur U0-80°C. De reaktietijd bedraagt in het algemeen 1-H8 uren en bij voorkeur 2-10 uren. Dimethylformamide dimethylacetaal wordt in overmaat gebruikt. De reaktie wordt 25 bij voorkeur uitgevoerd in dimethylformamide gedurende 7 uren.

Andere acetalen van dimethylformamide zoals di-tert.butyl komen echter ook in aanmerking.

Het uitgangsenonacetaat en werkwijzen voor het bereiden daarvan zijn beschreven in de onder no. 150.530 op 30 16 mei 1980 ingediende Amerikaanse octrooiaanvrage.

Het enamine kan op gebruikelijke wijze uit het reaktiemengsel worden gewonnen bijvoorbeeld door extraheren, chromatograferen en combinaties daarvan.

In stap 2 wordt de zijketenreductie van het enamine 35 VI uitgevoerd met cyaanboorhydride onder normale omstandigheden 8300893 * * 5 onder vorming van het amine V. Het amine V kan op gebruikelijke wijze uit het reaktiemengsel worden gewonnen bijvoorbeeld door extraheren, chromatograferen en combinaties daarvan.

In stap 3 wordt het amine V tot reaktie gebracht met 5 een alkylhalogenide in een oplosmiddel onder vorming van het dienon IV. De reaktietemperatuur bedraagt in het algemeen ongeveer 0-100°C en de reaktietijd ongeveer 1-30 uren.

Hen overmaat methyljodide wordt toegepast. De reaktie wordt bij voorkeur uitgevoerd in 1-20 uren bij 20-U0°C. Geschikte 10 oplosmiddelen omvatten methyleenchloride, CHCl^j THF en ether, bij voorkeur methyleenchloride.

Een andere en tevens voorkeursmethode voor het uitvoeren van stap 3 omvat reaktie van het amine V met m-chloorperbenzoëzuur in een oplosmiddel onder vorming van het 15 dienon IV. De reaktietemperatuur bedraagt ongeveer -20 tot 50°C en de reaktietijd ongeveer 1-βθ min. De reaktie wordt bij voorkeur in 5“20 min. uitgevoerd bij 20-3Q°C. Geschikte oplosmiddelen omvatten ethylacetaat/Skellysolve B, tetrahydro-furan, dioxan en CHgClg, bij voorkeur ethylacetaat/Skellysolve B.

20 In stap k wordt het dienon IV tot reaktie gebracht met Grignardreagens in een oplosmiddel bij aanwezigheid van een koperkatalysator onder vorming van het enon III. De reaktietemperatuur bedraagt in het algemeen ongeveer -130 tot 0°C en de reaktietijd ongeveer 1 min. tot 2 uren. De reaktie 25 wordt bij voorkeur in 1-10 min. bij -78 tot -50°C uitgevoerd. Geschikte oplosmiddelen omvatten diethylether, 1,2-dimethyl-ethaan, tetrahydrofuran en di-isopropylether, bij voorkeur tetrahydrofuran.

In stap 5 wordt het enon III gereduceerd onder 30 vorming van het beschermde 6' -alkylspecfcinDmycinelI. Deze stap is om verschillende redenen zeer kritisch. Het is namelijk zeer lastig om de U’,5* dubbele binding te reduceren zonder de 3’-carbonylgroep te reduceren.Palladiumkatalysatoren, bijvoorbeeld 10 £-ig palladium- op- bariumsulfaat (ionogeen palladium, 35 bruine katalysator) kunnen worden toegepast maar het succes is 8300893 • 1 ! • 6 · twijfelachtig omdat de "beschermende groepen, in het "bijzonder carbobenzyloxygroepen worden verwijderd vat het scheiden nog moeilijker maakt. Verder verken paliadiumkatalysatoren niet goed op analoga met meer hoog gesubstitueerde suiker-zijketens.

5 Daarom heeft platinaoxyde in combinatie met een oplosmiddel en een base de voorkeur.

Sen tweede belangrijk voordeel is dat de beschermende groepen intakt blijven zodat de produkten kunnen worden gezuiverd door chromatografie alvorens de beschermende groep(en) te 10 verwijderen. De reaktie wordt uitgevoerd door het enon III

op te lossen, platinaoxyde en base toe te voegen en het mengsel daarna te behandelen met waterstof. De reductietempera-tuur bedraagt ongeveer 20-l;0oC en de reductietijd ongeveer 1-U uren en bij voorkeur 2-3 uren.

15 Een andere en tevens voorkeursmethode voor het uit voeren van stap 5 omvat reduceren van het didehydrospedtino-mycine III tot het beschermde 6 '^ectinomycinell door reaktie met Li-selectride, een oplossing van lithium tri-sec-butyl-boorhydride. De reaktie wordt uitgevoerd door het didehydro-20 g?ectinomycine[II op te lossen, de lithiumoplossing toe te voegen en vervolgens base en water. De reductietemperatuur bedraagt in het algemeen ongeveer -100 tot -10°C en de reductietijd 5-Uömin. De reductie wordt bij voorkeur in 5“6θ min. bij -78 tot -10°C uitgevoerd. Geschikte oplosmiddelen omvatten 25 tetrahydrof uran, dioxan, 1,2-dimethoxyethaan en diethylether, bij voorkeur tetrahydrofuran.

In stap 6 wordt de bescherming van de verbinding met de formule II opgeheven onder vorming van een verbinding met de formule I. De omstandigheden waaronder zijn afhankelijk 30 van de beschermende groepen R'^ of R'^ en R’g of Η’γ aan de aminogroep in de actinaminering. Wanneer de beschermende groep benzyloxycarbonyl of aralkoxycarbonyl is, kan deze groep worden verwijderd met waterstof in aanwezigheid van een gebruikelijke katalysator zoals palladium zwart, palladium-op-kool, palladiunr-op-35 bariumsulfaat of palladium-op-bariumcarbonaat gesuspendeerd in 8300893 7 een oplosmiddel bijvoorbeeld isopropanol, absolute ethanol, methanol, ethylacetaat, tolueen of tetrahydrofuran, onder een druk van -6 tot 1U00 kPa. Vorming van waterstof in situ uit mierezuur in methanol verdient soms voorkeur.

5 Wanneer de beschermende groepen R’g of R’^ en R’g of R’T alkoxycarbonyl of aryloxycarbonyl zijn, kunnen deze ook Borden verwijderd bij aanwezigheid van een zuur in een oplosmiddel zoals nitromethaan of methyleenchloride.

Wanneer de beschermende groepen R'g of R’^ en R’g 10 of R'7 halogeenalkoxycarbonyl zijn, wordt de bescherming bij voorkeur bij aanwezigheid van zink opgeheven.

Ren uitermate geschikte werkwijze voor het bereiden van verbindingen met de formule VI is weergegeven in reaktie-schema C.

15 In stap 1 wordt N,N'-dibenzyloxycarbonylspectino - mycine (JACS 85. 2652, 1963) tot reaktie gebracht met mierezuur in een oplosmiddel bij aanwezigheid van azijnzuuranhydride, ethylacetaat en pyridine. De reaktietemperatuur bedraagt in het algemeen ongeveer -70 tot 10°C en de reaktietijd ongeveer 20 0,5“30 uren. De reaktie wordt bij voorkeur in ongeveer 10-18 uren bij ongeveer -^0 tot 0°C uitgevoerd. Geschikte oplosmiddelen omvatten ethylacetaat, tetrahydrofuran, methyleenchloride, chloroform en 1,2-dimetbylethaan, bij voorkeur ethylacetaat.

In stap 2 wordt de in stap 1 gevormde verbinding met 25 de formule IX tot reaktie gebracht met azijnzuuranhydride en een base onder vorming van een verbinding met de formule VIII in een oplosmiddel. De reaktietemperatuur bedraagt ongeveer 20-90°C en bij voorkeur 50-70°C, en de reaktietijd ongeveer 2-30 uren en bij voorkeur 10-20 uren. Geschikte oplosmiddelen 30 omvatten ethylacetaat, tetrahydrofuran, 1,2-dimethyloxyethaan en chloroform, bij voorkeur ethylacetaat.

In stap 3 wordt de verbinding VIII blootgesteld aan straling (licht) bij aanwezigheid van dibroomdimethylhydantoine om een carbonylgroep te vormen in de vorm van een verbinding 35 met de formule VII. De reaktietemperatuur bedraagt ongeveer 8300893 8 10-100°C en "bij voorkeur ^0-80°C, en de reaktietijd 2-60 min. en bij voorkeur 10-20 min. In deze stap wordt ook een U,5-dubbele binding gevormd.

In stap U wordt de verbinding met de formule VII 5 tot reaktie gebracht met dimethylformamideacetyl bij aanwezigheid van dimethylformamide, en het produkt wordt tot reaktie gebracht met methanol of water onder vorming van een verbinding met de formule VI. De reaktietemperatuur bedraagt ongeveer 30-90°C en bij voorkeur h-0—T0°C, en de reaktietijd ongeveer 2-6 uren en 10 bij voorkeur 3"5 uren. Elk van de in de boven beschreven stappen gevormde produkten kunnen volgens gebruikelijke methoden uit het reaktiemengsel worden gewonnen.

Een analogon of asterisch mengsel van een verbinding met de formule I kan op elke geschikte en gebruikelijke wijze 15 worden geïsoleerd. Wanneer het isoleren wordt uitgevoerd onder watervrije omstandigheden worden verbindingen met een carbonyl-groep op de 3'-plaats (formule I) verkregen. En wanneer het isoleren wordt uitgevoerd onder waterige omstandigheden kunnen verbindingen die op de 3'-plaats zijn gehydrateerd (formule I’)

20 worden verkregen met uitzondering van verbindingen VII en VI

die geen hydraten vormen.

De ruwe analoga kunnen worden gezuiverd door adsorptie aan een kolom van een zwak zure ionenuitwisselaarhars zoals Amberlite IRC-50 of CG-50 gevolgd door elueren met een oplos-25 middel zoals water, methanol, ethanol, ether, tetrahydrofuran 1,2-dimethoxyethaan of p-dioxan dat chloorwaterstofzuur, broom-water stof zuur, joodwaterstofzuur en/of zwavelzuur bevat.

Zuuradditiezouten kunnen worden verkregen door de verbindingen met de formule I te neutraliseren met een passend 30 zuur tot een pH lager dan ongeveer 7,0 en geschikt ongeveer 2-3· Geschikte zuren omvatten chloorwaterstofzuur, zwavelzuur, fosforzuur, sulfaminezuur en broomwaterstofzuur. Zuur- en basezouten van de verbindingen kunnen voor dezelfde biologische toepassingen als de stamverbinding worden gebruikt.

35 De verbindingen met de formule I remmen de groei 8300893 'f * 9 van microorganismen in verschillende omgevingen. Verbindingen met de formule I en met de β-configuratie zijn bijvoorbeeld werkzaam tegen Escherichia coli en kunnen worden toegepast om de vorming van slijm bij het vervaardigen van papier te 5 onderdrukken of het slijm zelfs te verwijderen waarbij gebruik wordt gemaakt van de antibacteriële werking tegen dit microorganisme. Deze β-anomeren kunnen ook worden toegepast om de levensduur te verlengen van cultures van Trichomonas foetus. Trichomonas hominis en Trichomonas vaginalis door deze te 10 bevrijden van verontreiniging met Escherichia coli. De (S-anomeren zijn verder aktief tegen Bacillus subtilis zodat zij kunnen worden toegepast om visgeur van bijvoorbeeld viskratten die door dit microorganisme wordt veroorzaakt, te onderdrukken. Daarnaast kunnen de p-anomeren worden gebruikt 1'5 om laboratoriumbafels en mycologische laboratoriumapparatuur schoon te maken. ff-Anomeren zijn ook werkzaam tegen Klebsiella •pneumoniae.

De verbindingen met de formule I zijn ook doeltreffend voor het behandelen van bacteriële infekties zoals gonorrhea 20 "bij mens en dier.

Verbindingen met goede antibacteriële aktiviteit zijn | die met de formule I waarin R' een rechte, vertakte of cyclische alkylgroep voorstelt, bijvoorbeeld ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert.butyl en cyclohexyl. De verbindingen 6’-n-propyl-25 spectinomycine ö'-n-butylspectmomycine eró'-pentylspectiriomycine zijn bijzonder krachtige antibacteriële middelen.

De uitvinding heeft verder betrekking op farmaceutische 1 preparaten zoals steriele parenterale oplossingen of suspensies, oogdruppels en water-in-olie emulsies die een passende hoeveel-30 heid verbinding met de formule I bevatten.

Parenterale oplossingen kunnen worden bereid door de werkzame verbinding op te lossen in bij voorkeur water en de oplossing voor het vullen van flesjes of ampulles te steriliseren.

De oplossingen kunnen toevoegingen zoals conserveermiddelen, büf-35 fers en lokale anesthetica bevatten. Om de stabiliteit te ver hogen kan na het vullen van een flesje worden gevriesdroogd.

83 0 0 8 9 3

_____- J

Α Λ.

10

Het flesjes met het droge gelyofiliseerde poeder wordt dan gesloten en er wordt een flesje met water voor injektie "bijgedaan om de droge stof voor gebruik te reconstitueren. Parenterale suspensies kunnen op praktisch dezelfde wijze worden bereid 5 zij het dan dat de verbinding in de drager wordt gesuspendeerd in plaats van opgelost en dat het steriliseren wordt uitgevoerd door expositie aan ethyleenoxyde. Om een gelijkmatige verdeling van de verbinding te bevorderen kunnen oppervlakte aktieve stoffen of bevochtigingsmiddelen worden opgenomen.

10 Aerosolen en andere preparaten kunnen eveneens op gebruikelijke wijze worden bereid of vervaardigd.

Een enkelvoudige dosis werkzame verbinding voor parenterale toediening aan mensen bedraagt in het algemeen ongeveer 2-1*000 mg en in het bijzonder ongeveer 5-200 mg.

15 Bereiding 1: ïï,N *-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formylspectino- mycine

In een 5 1 kolf voorzien van een thermometer en roerder worden ethylacetaat (1,33 l) en 97 /S-ig mierezuur 20 (255 ml) gebracht. Azijnzuuranhydride (618 ml) wordt toegevoegd onder koelen met droog ijs/aceton om de temperatuur beneden li0°C te houden. Pyridine (1,09 1) wordt langzaam toegevoegd zodat de temperatuur ongeveer -1*0° C blijft. Ν,Ν'-dibenzyloxy-spectinomycine (100 g) wordt toegevoegd waarna men het mengsel 25 op kamertemperatuur laat komen onder roeren dat ’snachts wordt voortgezet. De oplossing wordt dan verdund met ethylacetaat (1,65 l), gewassen met 0,5 H zoutzuur (5 x 675 ml), water (2 x 675 ml)» 10 #-ig waterig natrium waterstofcarbonaat (2 x 675 ml) en pekel (2 x 175 ml). Bij drogen en concentreren 30 van de organische laag wordt 105 g N ,N'-dibenzyloxycarbonyl- 2,6-di-0-formylspectinomycine verkregen.

CMR (dg-aceton): 201,6, 161,U, 161,0, 157,1, 13,6, 129,1, 128,U, 128,1, 97,1, 92,1, 73,7, 71,7, 68,3, 67,7, 67,6, 65,9, 56,1, ppm.

35 Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 6 maar onder 8300893 11 vervanging van H ,Ιί ’ -dibenzyloxyspectinomycine door passend gesubstitueerde Ν',Ν' -dibenzyloxyspectomycinen vorden de in onderstaande tabellen I en II aangegeven di-O-formyispectino-mycinen verkregen.

9 ‘ 8300893 ____ - 12 -

Tabel I

5 o^O -

CBz = H

) 1 H 3C f I

10 X Rs [ i δ

H^O 1 OH

^x H3C CBz is & . L· X.

ch3- ch3- ^2^5"* C2H5- 20 C3H7- C3H7-

Cjj, Hg " Ci^Hg·· C5H1I- C5H11- C8Hh- CaHn- CH2=CH- ch2=ch- 25 CH=C- CH=C- 30 35 8300893

Tabel II

- 13 - 5 cbzv ά H.

H c" 3 i Ri l I i

10 rS . 1 0H

Λ*.

H3c CBz 15 R1 Bs ch3- ch3- 20 · C2Hs- C-2Hs- c3h7- c3h7- C^Hg- C^Hg- C5Hu- ' C5Hu- c8hu- c8hu- 25 CH2=CH- CH2=CH- CH=C- CH=C- 30 35 8300893 1¾

Bereiding 2; N ,N' -dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-0-formyl-2' -0-acetylspectinomycine enolacetaat II ,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-0-formylspectino-5 mycine (7,0 g), azijnzuuranhydride (15,0 ml), pyridine (30,0 ml) en dimethylaminopyridine (0,5 g) worden toegevoegd aan ethyl-acetaat (50 ml) in een 250 ml kolf en bet mengsel wordt 'snachts bij 55°C verwarmd. Het reaktieraengsel wordt dan verdund met etbylacetaat (500 ml) en hexaan (500 ml) en geextraheerd met 10 eerst 0,6 N zoutzuur (3 x 1 l), (1 x 0,5 l) en daarna een verzadigde waterige natriumwaterstofcarbonaatoplossing (2 x 500 ml) en pekel (2 x 500 ml). De organische vloeistoffen worden gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd waarbij 7,0 g N,H *-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-0-formyl-2'-0-acetylspectino-15 mycine enolacetaat wordt verkregen.

CMR (dg-aceton): 168,9, 167,7, 161,U, 161,0, 157,1, 139,9, 137,8, 129,1, 128,U, 128,2, 128,1, 122,8, 9¾,7. 92,2, 7fc,1, 71,3, 69,1, 67,6, 67,2, 56,3, 55,5, 31,¾. 30,7, 21,1, 21,0, 20,7 ppm.

20 Te werk gaande overeenkomstig bereiding 2 maar onder vervanging van N,N' -dicarbobenzyloxycarbonyl-2,6-di-0-formyl-spectinomycine door passend gesubstitueerde 2,6-di-0-formyl-2'-O-acetylspectinomycinen worden de in onderstaande tabellen III en IV aangegeven en aminen Verkregen.

8300893

Tabel III

- 15 -

A

5 CBz \ Ri H

)N 3 - n

✓ N

H 3C CBz 15

J£l Ü5 RlO

·% 0 ch3- ch3- ch3c- 20 * S’* C2H5- C2H5- CH3C- 0 tt n-C3H7- n-C3H7- CH3C- 0 lt 25 n-Ct^Hg- n-C^Hg- CH3C-

0 ! II

n*CgHi7- ^”CgH^7“ CH3C- 0 CH2=CH= ch2=ch- ch3c-

30 O

II

CH=C- CHsC- CH3C- 0 H- H- CH3C- 0 35 H- H- CH3C- 0 H- H- CH3CH2C- . 8300893 « i 16 o H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- CH3(CH2)2C- 0 Ξ- H- CH3(CH2)3C- H“ H- isopropionyl H- H- sec-butyryl H“ H- t-butyryl 8300893 V · - 17 -

Tabel IV

5 CBz 5^0 '

CBz r Ri H

• :.¾1¾

N

✓ N

H 3C CBz 15

Ri Rs iio

O

ch3~ ch3- ch3c- 20 s c2hs- c2h5- ch3c- 0

II

n-C3H7- n—C3H7· CH3C- 0 « 25 n-C^Hg- n-C^Hg- CH3C- 0 n“C8^i7" n-CgHi7- CH3C- 0 CH2=CH= CH2=CH- CH3C-

30 S

CH=C- CH=C- CH3C- 0 H- H- CH3C- 0 35 H- H- CH3C- 0 H- H- CH3CH2C- 8300893 ________________ -1 - ƒ 18

O

Η- H- CH3(CH2)2C- 0 Η- Η- CH3(CH2)2C- 0 Η- Η- CH3(CH2)2C- 0 Η- Η- CH3(CH2)2C- 0 Η- Η- CH3(CH2)3C- Η- Η- isopropionyl Η- Η- sec-butyryl Η- Η- t-butyryl 8300893 v .

19

Bereiding 3: Η,Ν’-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-f ormyl-2'-0-acetyl-1*1,5’-didehydrospectinomyc ine NyN*-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2’-0-acetyl 5 speetinonycineenolacetaat (5,26 g) wordt opgelost in tetra- chloorkoolstof (75 ml) en dibroomdimethylhydantoine (1,05 g) wordt toegevoegd. De oplossing wordt verwarmd tot refluxr temperatuur in zichtbaar licht als initiator. Na 20 min. wordt de oplossing afgekoeld en verdund met chloroform (200 ml) 10 en water (100 ml). De afgescheiden organische fasen worden gewassen met waterig natriumchloride (60 ml). De organische vloeistoffen worden gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd waarbij 5,65 g N,N’-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-f ormyl-21-0-acetyl-1*', 51 -didehydrospect inomyc ine wordt verkregen.

15 CMR (dg-aceton): 182,1*, 173,1*, 170,0, 161,6, 161,0, 157,0, 137,6, 129,2, 128,6, 128,2, 103,1*, 95,7, 93,1, 73,7, 72,1, 67,8, 66,9, 56,1, 55,7, 31,8, 30,6, 21,0 ppm.

Te werk gaande overeenkomstig bereiding 3 maar onder vervanging van N ,N1 -dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2' -20 0-acetylspectinonycineenolacetaat door passend gesubstitueerde enolacetaten worden de in onderstaande tabellen V en VI aangegeven 1*’ ,5’-didehydrospectinomycinen verkregen.

É 8300893 « t - 20 -

Tabel V

t

H

5 · O'S

CBzx = Ri H

10 „£/' I o!,0 H 3C CBz 15 ll J3s lio

O

II

ch3- ch3- ch3c-

20 - O

II

c2h5- c2h5- ch3c- 0

II

n-C3H7> Π“03Η7" CH3C- 0

II

25 n-C^Hg- n-Ci^Hg- CH3C- 0

II

n~C8Hi7- n-CgHi7*· CH3C“ 0

II

CH2=CH= ch2=ch- ch3c-

30 O

CH=C- CH=C- CH3C- 0

II

Η- H- CH3C- 0

II

35 Η- H- CH3C- 0

II

Η- H- CH3CH2C- 8300893 » % : * . r ί t » . i ί - 21 - 4,' c l

O

Η- ' H- CH3(CH2)2C- 0 5 Η- H- CH3(CH2)2C-

O

Η- H- CH3(CH2)2C- 0 Η- H- - CH3(CH2)2C- '10 2 Η- H- CH3(CH2)3C- H- · isopropionyl Η- H- sec-butyryl Η- H- t-butyryl 15 .20 « 25 i - -1 ! 30 · ‘ 35 8300893 ______ _* -t * - 22 - ·

Tabel VI

s « l1,? » /N <v^n^*0>4^'0Nv''''ch» hjc T r

10 o r I i L

„*0 RS i ol,°R"

N

✓ N

H3C CBz 15

Ri Is J5io CH3- ch3- CH3C0- c2h5- c2hs- ch3co- 20 n-C3H7- n-C3H7- CH3C0- n-CHH9- n-C^Hg- CH3C0- n-CsHn- n-CgHi7· CH3C0- ch2=ch= ch2=ch- ch3co- CH=C- CH=C- CH3CO- 25 H- H- CH3CO- H- H- CH3C0- H- H- CH3CH2C0- ‘ H- H- CH3(CH2)2C0- H- H- CH3(CH2)2C0- 30 H H- CH3(CH2)2C0- H- H- CH3(CH2)2C0- H- H- CH3(CH2)3C0- H- H- isopropionyl H- H- sec-butyryl 35 H- H- t-butyryl 83 0 0 8 9 3 23

Bereiding 1*: II ,11' -dicarbobenzyloxy-2r -O-acetyl-6-/ (dimethyl-araino)methyleen/-U *,5'-didehydrospeetinomycine Een oplossing van N,N*-dicarbobenzyloxy-2'-0-5 acetyl-1*',5'~didehydrospectinomycine (22,00 g, 3b,b mmol) em dimethylformamide dimethylacetaal (100 ml) in dimethyl-formamide (100 ml) wordt 7 uren geroerd bij 50-55°C onder drieriet bescherming. De bruine oplossing wordt onder vacuum geconcentreerd en het residu wordt gechromatografeerd over 10 silicagel (250 g) dat nat is gepakt in een 2 1 gesinterde glastrechter. Het mengsel wordt geelueerd met 5 % acetonitril in chloroform (2 l), 7 % (3 l), 33 % (3 l) en 50 % (6 l) gedurende 1,5 uren. Prakties van een halve liter worden verzameld. Deze worden onderzocht door dunnelaagchromatografie 15 (1/1 acetonitril in chloroform) en gecombineerd waarbij 19,78 g

zuiver N,II'-dicarbobenzyloxy-2'-0-acetyl-6-/ (dimethylamino )-methyleen/-Ji' ,5'“didehydrospectinomycine en 3,30 g II,N'-dicartobenzyloxy-2'-O-acetyl-6-/ (dimethylamino)methyleen7_l*',5'- I

didehydrospectinomycine dat een weinig DMF (dimethylformamide) ; 20 bevat, worden verkregen. Laatstgenoemde fraktie wordt opnieuw gechromatografeerd zoals boven aangegeven (maar over 60 g silicagel) waarbij 2,75 g zuiver N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-0-acetyl-6-/ (dimethylamino)methyleen7-l*', 5'-didehydrospect inomycine wordt verkregen. De totale opbrengst bedraagt 22,53 g 25 (9b %).

CD(CH3OH)/O_7311nm - 10.1*00 + 1200, /”§/385 " 2-500 + 1.200, Z”®72^6 “ 1*200 + 1.200.

IR(olie): 3380, 1750, 1695, l675sh, 1600, 1555, 1500, 1385, 1350, 1280, 121*0, 1195, 1185, 111*5, 1110, 1085, 1065, 1025, 30 1000, 960, 770, 7^0, 61*5 cm"1.

PMR (CDC13): 2,13 (3H, s), 282 (3H, s), 2,89 (6H, br.s), 2,91 (3H, s), 5,10 (1*H, br, sch), 5,16 (1H, s), 5,97 (1H, s), 7,306 (10H, s).

CMR (CD3C0CD3): 20,9, 31,2, 31,5, 30-1*1* br, 36,3, 59,6, 35 66,2, 67,3, 7M, 75,¾. 88,7, 9b,9, 95,0, 95,1, 95,5, 128,3, 129,1, 8300893 4 24 13T ,9, 138,0, 150,3, 15T »2, 157,7, 163,3, 169,8, 171,2, 180,3 PPM.

Massaspectrum, m/c (diTMS): 839 (M+), 824, 797, 779, 730, 688. Piek geschat/berekend: 839,3480; Gevonden: 839,3466.

5 Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 4 maar onder vervanging van N ,N' -dicarbobenzyloxy-2 ' -0-acetyl-41,5 ’ -didehydro-spectinomycine door passend gesubstitueerde enonacetaten worden de in onderstaande tabellen VII en VIII aangegeven enaminen verkregen.

10 8300893 - 25 -

Tabel VII

_β · o H CH 3 c CBz £ . ✓

• \ = Λ n ^ /N

'ch3 «* 1 r I '

A/*"^ 'V

B, 1 1 0 10 B ORi o Λ H3c CBz 15 B_ .Βχ !io 20 o HO- HO- CH3C- 0 CH30- HO- CH3C- 0 25 C2H5Q- HO- CH3C- 0

II

HS- HO- CH3C- 0

II

CHoS- HO- CH3C-

30 O

C2H5S- HO- CH3C- 0 H- HO- CH3C- 0 35 HO- H- CH3C- 0 HO- CH30- CH3C- -------* 8300893 .-. ! . i ,- -26 - ' * « 0- , ,.

It HO- C2H5O- CH3C-

O

HO- HS- CH3C- 5 0 HO- · CH3S- CH3C- 0 HO- C2H5S- CH3CH2C- 0 10 HO- HO- . CH3(CH2)2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0

II

HO- HO- CH3(CH2)2C- 15 · 0

II

HO- HO- CH3(CH2)2C- 0

II

HO- HO- CH3(CH2)3-C- HO- HO- i sopro pi onyl 20 - HO- HO- * sec-butyryl HO- HO- t-butyryl « 25 · 30 ’ 35 .

8300893 i r | - 27 - | i

Tabel VIII | CBz i £ H CH3

Bi I O

1 ORio

10 N

iU y \ H3C CBz JU lio

15 O

HO- HO- CH3C- 0 CH30- HO- CH3C- 0

II

»20 * C2H50- · HO- CH3C- 0

II

HS- HO- CH3C- 0 CH3S- HO- CH3C-

25 O

II

C2H5S- HO- CH3C- 0 H- HO- CH3C- 0

II

30 HO- H- CH3C- 0 HO- CH30- CH3C- 0

II

HO- CaHs0- CH3C-

35 O

HO- H- CH3C- 0

II

HO- CH3S- CH3C- 8300893 28

O

HO- C2H5S- CHgCHgC- 0 HO- HO- CHgCHgC-

5 O

HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 10 HO- HO- CH3(CH2)3C- 0 HO- HO- CH3(CH2)3-C- HO- HO- isopropionyl HO- HO- sec-butyryl 15 HO- HO- t-butyryl

Bereiding 5: N,N'-dicarbobenzyloxy-21-O-acetyl-6-/ (dimethyl-aminoJmethyleen?-1*' ,5'“didehydrospectinomycine N ,N' -dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-f ormyl-2' -0-20 acetyl-V,5'“didehydrospectinomycine (5»50 g) wordt opgelost in dimethylformamide (39,0 ml) en dimethylformamide dimethyl-acetaal (36,0 ml) wordt toegevoegd. Na U uren verwarmen bij 55"6o°C wordt methanol (36 ml) toegevoegd waarna het verwarmen bij 55“6o°C nog 3 uren wordt voortgezet. Het residu wordt 25 opgenomen in chloroform (15 ml) en op silicagel (200 ml) in een filter gebracht. Achtergebleven DMF wordt uit het produkt weggewassen door elueren met chloroform (0,5 1), 5 % acetonitril in chloroform (0,8 1), 30 ^acetonitril in chloroform (150 ml) en acetonitril (1 1). De frakties worden gecombineerd waarbij 30 2,71 g N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O-acetyl-6-/ (dimethylamino) methyleen/-U',5'-didehydrospectinomycine wordt verkregen.

CMR (dg-aceton): 180,3, 171,2, 169,8, 157,0, 150,3, 137,9, 129,0, 128,2, 95,5, 95,2, 95,1, 9M, 88,7, 75,3, 67,3, 66,2, 59,9, 56,7, 1*1,0, 31,1*, 30,7, 21,2 ppm.

35 Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 5 maar onder 8300893

k J

29 vervanging van N,N’-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-0-formyl-2 O-acetyl-^’,5 *-didehydrospectinomycine door passend gesubstitueerde V ,5'-didehydrospectinomycinen vorden de in onderstaande tabellen IX en X aangegeven enaminen verkregen.

j 8300893 -30-.

Tabel IX

Η O'S) 5 CBz = Rx CH3 \ rx f /

HsC7 | | XCH3 10 ΗΛ0 Rs i °Rio° H 3C CBz 15

Ri Rs iio

O

II

ch3- ch3- ch3c- .

20 * g c2hs- c2h5- CH3C- o

II

• n-C3H7- n-C3Hy— CH3C- 0

II

25 η-0«*Η9- n-C^Hg- CH3C- 0

II

n-CaHi7- n“CeHi7- CH3C-

O

II

ch2=ch= ch2=ch- CH3C- 30 o CH=C- CH=C- CH3C- 0 Η- H- CH3C- 0

II

35 H- H- CH3C- 0 Η- H- CH3CH2C- 8300893 \ ·- -31- ; •' j o H- H- CH3(CH2)2C- 0 5 H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- ·,. CH3(CH2)2C-

1Q O

H- H- CH3(CH2)3C- H- H- isopropionyl H- H- sec-butyryl H- H- t-butyryl 15 .

20 ' • - «w / « * 25 . · 30 V-- 35 8300893 - 32 -

Tabel X

c H

O'S) C8zn = Ri H /CH3

Hfi' V \h3 H^'O Ri Ï <«»·°

s>K

H jC C8z T5

Bi Bs . Bi o

O

II

CH3- ch3- CH3C-

20 O

II

c2h5- c2h5- ch3c- 0

II

* n-C3H7- n"C3Hy“ CH3C- 0

II

25 n-Ci*Hg- n-C^Hg- CH3C- 0

II

n“C8Hi7- n-CgH^y CH3C“ o

II

CH2=CH= ch2=ch- ch3c-

30 O

II

CH=C- CH=C- CH3C- 0

II

H- H- CH3C- 0

II

35 H- H- CH3C- 0

II

H- H- CH3CH2C- 8300893 * ‘ ' ί . ' · 1 • - / --33- i ί .. (

O

‘ H- H- CH3(CH2)2C- 0 5 H- H- CH3(CH2)2C-

O

H- H- CH3(CH2)2C- 0 H- H- CH3(CH2)2C- iO n H- H- CHa(CH2)3C- | H- H- ‘ isopropionyl j H- sec-butyryl H- H- t-butyryl 15 20 ' . .

ή i i i

, I

25 30 35 83 0 0 8 9 3 _ -- '.......

3k

Bereiding 6: N ' -dicarbobenzyloxy-2-0 ^cetyl-ö' -(dimethylamino-methyl)-H',5'-didehydrospeetinomycine N,ïï'-dicarbobenzyloxy-2 *-0-acetyl-61-/ (dimethylamino) 5 methyleen7-l+',5'“didehydrospectinomycine (20,00 g, 28,7 g mrnol) en methyloranje (5 mg) worden opgelost in methanol (200 ml).

De pHwordt met 2N methanolisch chloorwaterstofzuur op U gebracht en natriumcyaanboorhydride wordt in 20 min. portiegewijs toegevoegd waarbij de pH steeds opnieuw wordt ingesteld met 2N 10 methanolisch chloorwaterstofzuur. Nadat in totaal 2,00 g (31*83 mmol) natriumcyaanboorhydride is toegevoegd, wordt de oplossing nog een uur bij kamertemperatuur geroerd. Blijkens dunnelaagchromatografie (1:9 methanol/chloroform) is de uitgangsverbinding verbruikt. De oplossing wordt geconcentreerd, 15 verdund met ethylacetaat (500 ml), 0,1 N natriumhydroxyde (250 ml), 1,0 N natriumhydroxyde (25 ml) en verzadigde pekel (250 ml). De organische fase wordt gewassen met pekel (200 ml) + 100 ml). De drie waterige fasen worden achtereenvolgens gewassen met ethylacetaat (2 x 200 ml). De organische extractoplossingen 20 worden gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd waarbij N ,N1 -dicarbobenzyloxy-2-0' -acetyl-6 ’ - (dimethylaminomethyl )-H *, 5 ’ -didehydrospectinomycine als een schuim wordt verkregen. De opbrengst bedraagt 17*93 g (89 %)· CD (CH^OH): Z”®7321 “ 12.000 + 1.400, /~§7270 + 1.100. 25 UV (CgHj-OH): 273 nm (8.800), 377 nm(sch) (63).

PMR (CDC13): 2,13 (3H, s), 2,17 (6ü), s), 2>6 (3H, s), 3,05 (3H, s), 3,06 (3H, s), 5,05 (te, d), 5,3^ (1H, s), 5,89 (1H, s), 7,26 (10H, d).

CMR (CD3C0CD3): 20,9, 31,3, 1+5-, 56,1, 57,1, 61,3, 30 66,1, 67,3, 7M, 75,H, 93,7, 96,0, 103,1, 128,3, 129,1, 137,9, 157,2, 170,0, 171+,9, 183,1 ppm.

Bereiding 6a: N,N'-dicarbobenzyloxy-2-0'-acetyl-6'-(dimethylaminomethyl )-k*,5'-didehydrospectinomycine 35 N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O^acetyl-ö1-/ (dimethylamino) 8300893 35 methyleen?-^',51-didehydrospectinomycine (57,0 g, 78,7 mmol) ethylacetaat (U50 ml) en methanol (105 ml) worden gemengd.

De pH wordt met 21Ï zoutzuur op 4 gebracht waarna natriumcyaan-boorhydride (7,3 s) in 5 min. verdeeld over 5 porties wordt 5 toegevoegd waarbij de pH steeds opnieuw op ^ wordt ingesteld met 2ïT zoutzuur. Nadat al het natriumcyaanboorhydride is toegevoegd wordt de pH nog 1?min. op U gehouden. Blijkens dunnelaag-chromatografie (1:9 methanol/chloroform) heeft de uitgangs-verbinding gereageerd. De oplossing wordt dan gemengd met 10 water (350 ml) in natriumbydroxyde (175 ml) waarna., de fasen worden gescheiden. De bovenste fase wordt uitgeput met pekel (250 ml) en Skellysolve B (150 ml) wordt toegevoegd om de emulsie te breken. De twee waterige fasen worden achtereenvolgena teruggewassen met ethylacetaat (300 ml) plus Skellysolve B 15 (75 ml) waarna de gecombineerde organische vloeistoffen worden gedroogd boven natriumsulfaat. Het natriumsulfaat wordt door filtreren verwijderd waarbij een N,N'-diearbobenzyloxy- 2-0*-acetyl-6'-(dimetbylaminomethyl)-k',5’-didehydrospectino-mycine bevattend filtraat wordt verkregen.

20 Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 6 en 6a maar onder vervanging van N ,11 ’ -diearbobenzyloxy—2' -0-acetyl-6' -£ (dimethylamino)methyleen7“^* ,5’-didehydrospectinomycine door de passend gesubstitueerde voorloper ena-min^n in de tabellen I en II worden de in onderstaande tabellen XI en XII 25 aangegeven beschermde speetinomycineanaloga verkregen.

8300893

•A

. k · - 36 -

Tabel XI.

CBz B H CH3 5 Hjc/ jjT I rai B1 0 A ORi o

N

/ \ 10 H3c CBz B ii ϋιο 0 15 HO- HO- CH3C- 0

II

CH3O- HO- CH3C- 0

II

c2h5o- ho- ch3c- 20 Ï hs- ho- ch3c- 0 gh3s- ho- ch3c- 0 25 C2H5S- HO- CH3C- 0

II

H- HO- CH3C- 0 HO- H- CH3C- 30 0

II

HO- CH30- CH3C- 0 . >· HO- C2H50- CH3C- 0

II

35 HO- HS- CH3C- « o

II

HO- CH3S- CH3C- 8 3 0 0 8 9 3

a J

' ’ . j « ' * • - 37 - * f * o : HO- C2H5S- CH3CH2C- j'

O

HO- HO- CH2CH2C- 5 2 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 10 HO- HO- CH3(CH2}2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)3_C- HO- HO- isopropionyl HO- HO- sec-butyryl 15 HO- HO- · t-butyryl -20 . .

* Λ 25 « % 30 35 _____ 8300893 - 38 -

- ' Tabel XII

CBz B H CH, \ = o o . n »T] ^ 5 I ORio 10 /N\ H3C CBz B. B.1 iio

15 O

H

HO- HO- CH3C- 0

II

CH3O- HO- CH3C- 0

II

20 C2H50- HO- CH3C- 0

II

HS- HO- CH3C- 0

II

fcH3S- HO- CH3C- 25 O '

II

C2H5S- HO- CH3C- 0 H- HO- CH3C- 0

II

30 HO- H- CH3C- 0 11 · HO- CH3O- CH3C- 0

II

HO- C2H5O- CH3C-

35 O

II

HO- HS- CH3C- 0 HO- CH3S- CH3C- 8300893 * , ·ί * 1 . - 39 ; t 0 χ HO- C2H5S- CH3CH2C- 0 HO- HO- . CH3CH2C-

5 O

HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 10 HO- HO- CH2(CH2)3C- 0 HO- HO- CH3{CH2)3-C- HO- HO- iso pro pionyl HO- HO- sec-butyryl 15 HO- HO- t-butyryl * 20 ^ « .

25 35 .

8300893 « 4o

Bereiding 7: N ,N' -dicarbobenzyloxy-2-0' -acetyl-6 * -methyleen-4', 5' - didehy dro speet inomycine II ,N1-dicarbobenzyloxy-2-0’-acetyl-6’-(dimethylamino-5 methyl)-4',5'“didehydrospectinomycine (17,43 g, 25,00 mmol) wordt opgelost in methyleenchloride (200 ml) en methyljodide (18,0 ml, Ui#0U g, 289 mmol) waarna 6 uren wordt geroerd hij kamertemperatuur. Na nog 16 uren staan hij 10°C wordt de oplossing geconcentreerd. Het residu wordt opgelost in 10 1/9 acetonitril/chloroform. Het mengsel wordt gechromatografeerd over silicagel (300 g) met eerst hetzelfde oplosmiddelmengsel (1+ l) en daarna 1/3 acetonitril/chloroform (¾ l) als eluens.

De eerst geelueerde zuivere verbinding wordt verkregen door de frakties te combineren en te concentreren waarbij 15 10,03 g N ,N'-dicarbobenzyloxy-2-0'-acetyl-61-methyleen-41,5 ’ “ didehydrospectinomycine (61 %) wordt verkregen.

CD (CH^OH): ^33¾ ' 2^.100 ± 2.300, ft7^ -44.800 + 2.300, Z”e72^nm - 10.800 + 2.300.

UV (CgH^OH): 204sch (22.500), 241 (6.750) 250sch 20 (5.900), 256 sch (4.900), 293nm (14.650).

PMR (CDC13): 2,13 (3H, s),3,03 (3H, s), 3,06 (3H, s), 5,05 (4h, d), 5,44 (1H, s), 5,61 (1H, q), 5,95 (1H, s), 6,11 (1H, s), 6,19 (1H, s), 7,29pp (10H, s).

CMR (CD3C0CD3): 20,9, 31,4, 57,2, 60,1, 66,2, 67,4, 74,1, 25 74,7, 75,6, 94,0, 96,1, 104,3, 125,3, 128,4, 129,2, 131,1, 138,0, 138,1, 157,6, 166,6, 170,2, 184,0 ppm.

Bereiding 7a: N,N'-dicarbobenzyloxy-2-0'-acetyl-6’-methyleen-4’, 5'- didehydro speet inomyc ine 30 Aan het in Bereiding 6a bereide N,N'-dicarbobenzyl- oxy-2-0'-acetyl-6'-(dimethylaminomethyl)-4f,5'-didehydrospectinomycine in ethylacetaat/Skellysolve B wordt m-chloorper-benzoëzuur (15 g) toegevoegd. Na 10 min. roeren wordt de oplossing gemengd met een vervaardigde natriumwaterstofcarbonaatoplossing 35 (300 ml) waarna de fasen worden gescheiden. De organische laag 8300893 Μ wordt gewassen met pekel (250 al) en methanol wordt toegevoegd om de emulsie te breken. De twee waterige frakties worden achtereenvolgens gewassen met ethylacetaat (25Ο ml) en Skellysolve B (75 ml). De organische vloeistoffen worden gecombineerd, 5 gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd tot een vast residu. Dit wordt opgelost in chloroform en de oplossing wordt gechromatografeerd over silica (1 1 nat gepakt in een 1 1 gesinterde glastrechter) met chloroform (h l), 2 % acetonitril in chloroform (2 1), 5 % acetonitril in chloroform (2 1), 10 10 % acetonitril (¾ l) en 15 1 acetonitril (4 1) als éluens.

De frakties 10-1¾ worden gecombineerd en geconcentreerd waarbij 15,7 g van een N,ïï1-dicarbobenzyloxy-2-0*-acetyl-6'-methyleen^',5’-didehydrospectinomycine bevattend mengsel wordt verkregen.

15 Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 7 en 7a maar onder vervanging van Ιϊ ,Ii1 -dicarbobenzyloxy-2-01 -acetyl-6 ’ -(dimethylaminomethyl)-¾' ,5'-didehydrospectinomycine door passend gesubstitueerde didehydrospeetinomycinen worden de in onderstaande tabellen XIII en XIV aangegeven beschermde 20 speetinomycine analogs verkregen.

j 8300893

Tabel XIII .

- h2 -

CBz B H

\ = o 'o SY 0 *0 ORi o

N

10 / \

HaC CBz §. lx -Ei o 15 .0

II

HO- HO- CH3C- 0 CH30- HO- CH3C- 0 20 C2H50- HO- CH3C- 0 HS- HO- CH3C- 0 CH3S- HO- CH3C-

25 O

II

C2H5S- HO- CH3C- o H- ‘ - HO- CH3C- - o 30 HO- H- CH3C- 0 · HO- CH30- CH3C- 0 HO- C2H50- CH3C-

35 O

HO- H- CH3C- 8300893 » ' - ί ".»·.· - k3 - i o .

II

HO- CH2S- CH3C- 0 5 HO- C2H5S- CH2CH2C- 0 HO- HO- CH2CH2C-

O I

HO- HO- - CH2(CH2)2C- 1° n HO- HO- CH3(CH2}2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)3C- 0 II .

15 HO- HO- CH3(CH2)3-c‘i* HO- HO- isopropionyl HO- HO- sec-butyryl HO- HO- t-butyryl 20 .

X

. * « 25 ' % 30 35 8300 89 3· » 1 _ - ----^ label XIV .-- - Uit - CBZ 1 ï

H# - | J |J

B, i Ó I ORj o

N

10 / \ 1 : H3C CBz B, Bj lio

15 O

HO- HO- CH3C- 0

II

CH3O- HO- CH3C-

• O

• 20 C2H50- - HO- CH3C- 0 HS- HO- CH3C- o o CH3S- HO- CH3C-

25 - O

C2H5S- HO- CH3C- 0 H- . HO- CH3C- 0 30 HO- H- CH3C- 0 .

HO- CH30- CH3C- 0 HO- CzH50- CH3C-

35 O

HO- HS- CH3C- 0 HO- CH3S- CH3C- 8300893 » * ' Λ , * 1 . ' 1 . )

- I

ί * ί - *5 - i ο k " ύ- HO- C2H5S- CH3CH2C- - Ο HO- HO- · CH3CH2C-

5 O

HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 HO- HO- CH3(CH2)2C- 0 10 HO- HO- CH3(CH2)3C- 0 HO- HO- CH3(CH2)3-C- HO- HO- isopropionyl HO- HO- sec-butyryl. n . 15 HO- HO- t-butyryl · . * . , 1 · · 20 . * •s, . ’ « 25 % 30 35 83 0 0 89 3 1+6

Bereiding 8 N ,N' -dibenzyloxycarbonyl-21 -O-acetyl-U',5' -didehydro- 61-n-octylspectinomycine

In een droge 15 ml driehalskolf voorzien van een 5 magnetisch roerstaafje en septum wordt N,N1 -dicarbobenzyloxy- 2-0'-acetyl-6'-methyleen-l+' ,5'-didehydrospeetinomycine (332 mg, 0,5 mmol) opgelost in tetrahydrofuran (10 ml) waarna koper (II) bromide (25 mg) wordt toegevoegd. Na afkoelen van de suspensie tot -78°C nnder een stikstofatmosfeer wordt heptyl-10 magnesiumbromide (1,2 ml, 2,1 M) door het septum geinjekteerd. .

Blijkens dunnelaagchromatografie (1:1+ CH^CH/CHCl^) is de uitgangsverbinding omgezet in een iets minder polair hoofd-produkt. Het reaktiemengsel wordt uitgeschonken in een oplossing van azijnzuur (0,3 ml) in ethylacetaat (20 ml). Na verdunnen 15 met water (10 ml) en mengen wordt de organische fase afge scheiden en gewassen met een verzadigde waterige natrium-waterstofcarbonaatoplossing (15 ml) en een verzadigde pekel-oplossing (10 ml). De waterige extractoplossingen worden beurtelings gewassen met ethylacetaat (20 ml). De organische 20 extractoplossingen worden gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd tot een schuim. Bij chromatograferen over 6,0 g silica in 1:9 acetonitril-chloroform wordt 0,32 g zuiver N ,N' -dibenzyloxycarbonyl-21 -0-acetyl-l+1,5' -didehydro-6' -n-octylspectinomycine verkregen.

25 CMR (CD3COCD3): 183,1, 178,1+, 170,0, 157,7, 138,0, 12^,1, 128,3, 102,5, 96,0, 93,8, 75,6, 73,1+, 67,3, 66,1, 59,7, 57,2, 35,0, 32,1+, 31,fc, 30,0, 29,8, 29,6, 26,7, 23,2, 20,1+, 11+ ,3 ppm.

Massaspectrum (gesilileerd): M/e 856 (M+), 81+1, 769, 30 671, 600, 1+81+, 356, 313, 281+, 21+3, 217, 199, 171, 11+5, 73.

Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 8 maar onder vervanging van heptylmagnesiumbromide door ethylmagnesium-bromide wordt N,N’-dibenzyloxycarbonyl-2’-0-acetyl-l+’ ,5’-didehydro-6'-ethylspectinomycine verkregen.

35 CMR 183,1, 176,2, 170,0, 151,3, 137,81, 129,0, 128,1, 8300893 kr 102.6, 95,9, 93,6, 75,3, 74,2, 67,3, 66,1, 60,0, 57,1, 36,3, 31,3, 20,8, 20,0, 13,6 ppm.

II ,11' -dibenzyloxycarbonyl-2'-0-acetyl-4',5' -didehydro- 6’-n-propylspectinomycine.

5 CMR 183,3, 176,5, 170,1, 157,2, 138,2, 129,2, 128,4, 102.6, 96,1, 93,8, 75,6, 74,6, 67,4, 66,2, 60,1, 57,3, 34,8, 32,2, 28,8, 22,7, 20,9, 13,9 ppm.

II,N'-dibenzyloxycarbonyl-2’-0-acetyl-4' ,5’-didehydro-6’-n-butylspectinomyc ine.

10 CMR 183,1, 176,^, 170,0, 157,9, 138,2, 129,1, 128,7, 102,5, 96,0, 93,8, 75,6, 74,6, 67,3, 66,1, 60,0, 57,2, 35,0, 31,7, 31,4, 26,3, 22,8, 20,9, 14,1 ppm.

N,N *-dibenzyloxycarbonyl-2r-0-aeetyl-4',5'-didehydro-6'-n-pentylspectinomycine.

15 CMR 183,1, 176,5, 170,0, 157,8, 138,4, 129,1, 128,3, .102,6, 96,0, 93,7, 75,6, 74,8, 67,3, 66,0, 60,2, 57,1, 35,0, 32,0, 31,4, 29,2, 26,6, 23,0, 20,9, 14,2 ppm. en de in onderstaande tabellen XV en XVI aangegeven N ,N-dibenzyloxycarbonyl-2'-0-acetyl-4r,5’-didehydro-6’-n-20 octyl-spectinomycine analoga.

8300893 - 1+8 - '

Tabel XV

ch3 ca\ I H. (CH2)2

5 H C/N

Or^tr 10 Jv 0C-CH* H 3C CBz B Bi 15 HO- H0- CH30- H0- c2h5o- H0- HS- H0- CH3S- HO- __ 20 C2H5S- ‘ HO- ’ H- H0- HO- H- HO- CH3O- HO- C2H5O- 25 HO- HS- HO- CH3S- HO- C2H5S- HO- HO- HO- HO- 3Q HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- 35 HO- HÖ- 8300893

• - 1# -Tabel XVI

« ch3 5 CBzv \ . H (CHj)* ,XX,Jr tss iu ; 8 OC-CHa .

S*n X.

H £ CBz B Bi 15 HO- H0- CH30- HO- C2Hs0- HO- HS- H0- 20 · CH3S- HO- C2H5S” HO- H- HO- HO- H- HO- CH30- 25 HO- ^2^5“ HO- H2- HO- CH3S- HO- C2H5S- HO- HO- 30 HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- 35 HO- HO- HO- HO- 8300893 ----- -----^ 50

Bereiding 9'· N ,N'-dibenzyloxycarbonyl-6’-octylspectinomycine N,N*-dicarbobenzyloxy-2'-0-acetyl-l»' ,5'-didehydro-6’-n-octylspectinomycine (0,32 g) wordt opgelost in 2-propanol 5 (12,0 ml) en triethylamine (0,12 ml) wordt toegevoegd. De op lossing wordt in vier gelijke delen verdeeld en in proefbuizen gebracht die elk 30 mg platinaoxyde bevatten. De proefbuizen worden voorzichtig in een Parr bom gebracht en daarin 2 uren geschud onder een waterstofdruk van ongeveer 1U0 kPa. Na afloop 10 wordt de katalysator afgefiltreerd en wordt aan de gecombineerde filtraten water (0,7 ml) toegevoegd. Na 16 uren staan wordt het filtraat nog U5 min. verwarmd bij 65°C. Hierna wordt geconcentreerd en gechromatografeerd over silica (6 g).

N,N' -dibenzyloxycarbonyl-6' -n-octylspect inomycine wordt 15 geelueerd met 0,5 % methanol in chloroform (200 ml), 1 % (100 ml), 1,5 % (150 ml), 2 % (200 ml) en 3 % (100 ml).

Met behulp van dunnelaagchromatografie worden de gewenste frakties opgespoord. Bij besproeien met eerst DNP en daarna zwavelzuur gevolgd door verwarmen geeft het prodükt een paarse vlek.

20 Aldus werd 0,09 g prodükt verkregen.

CMR (CD3C0CD3): 201,5, 157, 138,1, 129,1, 128,3, 97,5, 92,3, 75,1, 7M, 7M, 71,8, 67,2, 66,U, 65,6, 61,1, 60,1, 57,5, W»,1, 36,1, 32,U, 31,7, 31,1», 30,7, 30,1, 29,8, 25,7, 23,1, 11»,3 ppm.

25 Massaspectrum (gesilileerd): M/e = 928 (M+), 913, 901, 837, 823, 793, 7^5, 62U, 611, 539, 1»93, M9, 359, 91.

Bereiding 9a: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-61-propylspect inomycine

Een oplossing van 1»',51 -didehydro-2-0-acetyl-N ,N1 -30 dibenzyloxycarbonyl-6'-propylspectinomycine (0,70 g) wordt opgelost in tetrahydrofuran (10 ml) en de oplossing wordt af gekoeld tot -78°C. Een 1N oplossing van lithiumtri-sec-butyl-boorhydride in tetrahydrofuran (3,0 ml) wordt toegevoegd.

Na 25 min. roeren onder stikstof bij ~78°C wordt de oplossing 35 uit geschonken in ethylacetaat (10 ml) plus azijnzuur (0,2 ml).

8300893, 51

Meer ethylacetaat (10 ml), water (1,0 ml) en triethylamine (1,0 ml) worden toegevoegd. Na 2 uren wordt nog meer triethylamine (1,0 ml) toegevoegd waarna de oplossing 16 uren wordt geroerd hij kamertemperatuur. Skellysolve B (20 ml) en een 5 verzadigde waterige natriumwaterstofcarhonaatoplossing (15 ml) worden toegevoegd waarna de fasen worden gescheiden. De bovenste laag wordt gewassen met een verzadigde waterige natriumchloride-oplossing (15 ml). De organische fase wordt gedroogd hoven natriumsulfaat en geconcentreerd. Het olieachtige residu wordt 10 geehromatografeerd over silicagel (40 ml) gepakt in methyleen-chloride. Het produkt wordt geelueerd met methyleenchloride (50 ml) 1:1 methyleenchloride/chloroform (60 ml), chloroform (50 ml), 0,5 % methanol in chloroform (100 ml), 1 % methanol in chloroform (100 ml), 2,5 % methanol in chloroform (100 ml) 15 en 5 % methanol in chloroform (200 ml). Bij concentreren van de juiste frakties wordt 0,45 g (68,3 %) Ν,Ν’-dihenzyloxy-carbonyl-β1-propylspect inomycine verkregen.

Te werk gaande overeenkomstig Bereiding 9 of 9a maar onder vervanging van N,N,-dicarhohenzyloxy-6'-octyl-20 speetinomycine door passende andere Ν,Ν-dicarhohenzyioxy-6*- j alkylspectinomycinen worden de volgende speetomycineanaloga verkregen: N,N’-dihenzyloxycarhonyl-6'-ethylspectinomycine.

CMR 201,0, 158,2, 138,2, 129,1, 128,4, 97,6, 92,3, 25 75,2, 74,7, 74,6, 71,5, 67,2, 66,2, 65,6, 61,1, 60,2, 57,6, 57.3, 44,1, 38,2, 31,7, 31,4, 18,2, 14,1 ppm.

N,N’-dihenzyloxycarhonyl-6 *-n-propylspectinomycine.

CMR 201,8, 156,7, 138,1, 129,1, 128,3, 97,5, 92,3, 75,1, 74,7, 74,6, 71,8, 67,2, 66,4, 65,6, 60,9, 59,9, 57,5, 30 44,1, 35,7, 31,4, 30,8, 27,7, 23,0, 14,2 ppm.

N,N’-dihenzyloxycarhonyl-6'-n-hutylspect inomyc ine.

CMR 201,5, 156,2, 138,2, 129,4, 128,6, 97,7, 92,6, 75.3, 75,1, 74,8, 72,1, 67,6, 66,7, 66,0, 61,0, 60,0, 57,8, 44.3, 35,3, 31,6, 32,5, 32,1, 31,8, 31,2, 30,2, 29,2, 25,6, 35 23,3, 14,6 ppm.

8300893 52 Ν,Ν'-dibenzyloxy carbonyl-6’-isobutylspectinomycine.

N ,N ’ -dibenzyloxycarbonyl-6' -n-pentylspectinomycine. CMR 202,0, 158,1, 138,2, 129,1, 128,h, 97,6, 92,k, 75,2, 7h,6, 7M, 71,8, 67,2, 66,¾. 65,7, 61,1, 60,1, 57,5, 5 57,3, V*,1, 36,1, 32,3, 31,7, 31,¾. 29,7, 25,6, 23,2, 1U,3 ppm.

N ,N'-dibenzyloxycarbonyl-6'-(3,3“dimethyl)-n-butyl-spect inomycine.

N ,N'—dibenzyloxycarbonyl-6 *-cyclopentenylspectinomycine.

10 N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6’-cyclohexylmethylspectino mycine.

CMR 202,0, 157,5, 138,0, 129,1, 178,3, 97,5, 92,3, 75.1, 7¾.7, 72,1, 67,2, 66,k, 65,6, 60,9, 60,7, 57,5, M.1, 38.2, 33,8, 33,5, 31,7, 31,¾. 27,2, 26,9 ppm, 15 en de in onderstaande tabellen XVII en XVIII aangegeven 6'-n-butylspectinomycine analoga.

N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 *-undecylspectinomycine.

8300893 - 53 -

label XVII

ch3 CB\ I i (CHi), -CH2 5 y fc^T s 1 OH u

10 CBZ

B h.

HO- HO- · CH30- HO- 15' C2H50- HO- HS- HO- CH3S- HO- C2HsS- ' HO- H- HO- 20 HO- H- Η0- CH30- HO- c2h5o- H0- HS- H0- CH3S- 25 HO- C2HsS- HO- HO- HO- Η0- HO- HO- HO- HO- 30 HO- HO- HO- HO- HO- . HO- HO- HO- 35 8300893

• - 5¾ -Tabel XVIII

. CH3 C5zv i " mu 5 HaC' γ' 2 i OH 0 1Q HaC^^CBz £ £1 Rio Ri i 0 HO- HO- CH3C- CH3- 15 0 CH30- HO- CH3C- CH3- 0 C2H50- HO- CH3C- CH3- 0 20 HS- HO- CH3C- CH3- 0 CH3$- HO- CH3C- CH3- 0 C2HsS- HO- CH3C- CH3-

25 O

H- HO- CH3C- CH3- 0 HO- ' H- CH3C- CH3- 0 30 HO- CH30- CH3C- CH3- 0 HO- C2H5C- CH3C- CH3- 0 HO- H- CH3C- CH3-

35 O

HO- CH3S- CH3C- CH3- 8300893 « * rf 4

: ·. -5 5- I

U H

HO- C2H5S- CH3C- CH3-

O

HO- HO- C2H5C- C2H5- 5 0 HO- HO- C3H7C- C3H7- 0 n HO- HO- CijHgC- CijHg- 0 10 HO- HO- CsHnC- CSHU- 0 it HO- HO- CgHjjC- ^6^13”

O

II

HO- HO- C7H15C- C7H15- IS o HO- HO- CgHj^C- 0βΗχ7- 20 • · f 25 30 * 35 8300893 56

Voorbeeld I

6'-n-octylspect inomycine N,N*-dibenzyloxycarbonyl-6 *-n-octylspect inomyc ine (0,09 g) wordt opgelost in methanol (7,0 ml) en de oplossing 5 wordt onder een stikstofatmosfeer geroerd. Palladiurazvart (60 mg) wordt toegevoegd gevolgd door 97 #“ig mierezuur (0,1+5 ml). Ha 1+0 min. roeren wordt de katalysator afgefiltreerd en wordt het filtraat onder hoog vacuum geconcentreerd.

Het residu wordt opgenomen in water (8 ml) en aangezuurd met 10 0,1 II zoutzuur (0,35 ml) tot een pH 1,5* Het produkt wordt gevriesdroogd voor CMR bepaling. Na afloop van de CMR bepaling wordt het produkt verdund met water en weer gevriesdroogd waarbij 0,05 g 6’ -n-octylspect inomyc ine als het dihydrochloride wordt verkregen.

t.o.v.

15 CMR (DgO, interne referent ie CH^N): 92,9» 92,6, 91,1, 70,9, 68,8, 65,1, 61+,7,60,6, 58,7, 57,5, 38,2, 33,1+, 30,8, 30,1, 29,5, 28,5, 28,2, 2U,2, 21,5, 12,8 ppm.

Te werk gaande volgens voorbeeld I maar onder vervanging van N,N'-dicarbobenzyloxy-6*-n-octylspectinomycine 20 door passend gesubstitueerde beschermde ö’-alkylspectomycinen worden de volgende speetinomycineanaloga als hun dihydrochloriden verkregen.

6’-ethylspectinomycine CMR 29,8, 29,1+, 60,6, 50,6, 57,6, 61+,6, 70,7, 65,0, 25 92,7, 92,7, 91,0, 58,5, 68,8, 35,0, 16,6, 12,1+ ppm.

6*-n-propylspectinomycine CMR 29,8, 29,1+, 60,6, 58,6, 57,6, 61+,6, 70,9, 61+,9, 92,6, 92,6, 91,0, 38,5, 68,7, 32,5, 25,1+, 21,0, 12,3 ppm.

6'-n-butylspeetinomycine 30 CMR 29,9, 21+,1+, 60,1+, 58,5, 57,1+, 61+,5, 70,7, 61+,9, 92.5 , 92,5 , 90,9 , 38,7 , 68,7 , 32,9 , 30,1, 23,1, 20,1+, 12,5 ppm.

6'-iso-butylspect inomycine 6’-n-pentylspectinomycine CMR 29,8, 29,3, 60,6, 58,6, 57,7, 61+,7, 71,0, 65,0, 35 92,7, 92,7, 91;1, 38,6, 68,8, 32,9, 30,1, 23,2, 21,0, 20,8, 12.5 ppm.

_ - ---------——— 8300893 57 6'-(3,3-dimethyl )-n-butylspect inomycine 6 *-cyelopentylmethylspect inomycine 61-cyclohexylmethylspectinomycine CMR 30,1, 29,5, 60,6, 58,6, 57,5, 64,7, 70,9, 65,1, 5 92,6, 92,6, 91,1, 38,2, 68,8, 33,4, 30,7, 28,5, 28,5, 28,2, 28.2, 24,2, 21,5, 12,8, ppm.

6 *-n-undecylspectinomycine CMR 60,5, 58,6, 57,5, 64,9, 70,9, 65,2, 97,7, 92,8, 91.2, 38,8, 68,8, 33,4, 30,9, 28,4, 28,8, 28,8, 28,8, 28,8, 10 28,8, 28,8, 24,4, 21,5, 12,8, 30,2, 24,6 ppm.

en de in onderstaande tabellen XIX en XX aangegeven 6’-n-octyl-spectinomycine analoga.

8300893 --58---Tabel XIX · ch3 5 H 5 H (CHt)i \ . -ch ! 10 Bl i 0 *0

H3C H

s » 15 B B! HO- H0- CH30- HO- 20 C2H50- HO- HS- HO- CH3S- HO- c2h5s- HO- H- HO- 25 HO- H- HO- CH30- HO- C2H50- HO- H2- HO- CH3S- 30 HO- C2H5S- 35 8300893 - 59 - ·

Tabel XX

5 CHj .

H ! H (CHJ* N „ »CHj

HaC' y 10 B, I "/S 1¾ I OH 0

N

h/ H 15 JL Bi HO- H0- 20 CH3O- H0- C2H50- H0- HS- H0- CH3S- H0- C2HsS- H0- 25 H- H0- H0- H- H0- CH3O- H0- C2H5O- HO- HS- 30 HO- CH3S- HO- C2H5S- 35 8300893 * *1 60

Voorbeeld II

6'-n-propylspectinomycinesulfaat N ,N' -dibenzyloxycarbonyl-6' -n-octylspectinomycine (2,20 g) wordt opgelost in methanol (100 ml) en onder een 5 stikstofatmosfeer geroerd. Palladiumzvart (1,39 g) wordt toe gevoegd gevolgd door 97 #~ig mierezuur (U,3 ml). Na goed roeren wordt de katalysator afgefiltreerd waarna het filtraat onder hoog vacuum wordt geconcentreerd. Het residu wordt opgenomen in water (10 ml) en met 1 M waterig waterstof sulfaat 10 (3,5 ml) aangezuurd. Het produkt wordt gevriesdroogd en daarna omgekristalliseerd in aceton:water waarbij 0,87 g 6'-n-propyl-spectinomycinesulfaatpentahydraat wordt verkregen.

CMR (DgO, interne referentie t.o.v. CH^CN): 118,07, 92,67, 91,2¾. 91,06, 70,73, 68,9¾, 65,01, 6k,jk, 60,78, 15 59,15, 57,69, 38,77, 32,83, 30,35, 29,77, 25,78, 21,18 en 12^5 ppm.

8300893

Claims (14)

1. Werkwijze voor het bereiden van spectinomycine-analoga, met het kenmerk dat, verbindingen worden bereid met de formule I" door reaktie van een verbinding met de 5 formule XV met een alkylmagnesiumhalogenide onder vorming van een verbinding met de formule III”, b) reductie van de verbinding met de formule III" tot een verbinding met de formule II", en c) verwijderen van de beschermende groep(en) uit de verbinding met de formule II", desgewenst gevolgd door 10 omzetting in een farmaceutisch aanvaardbaar zout of een hydraat, waarbij in de formules R waterstof of lage alkyl voorstelt, R" een cycloalkylgroep met in de langste brug tot 5 koolstof at omen voorstelt, R^ t/m R^ waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, R’^, R'^*

15 R'g en Η'γ lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl of een beschermende groep bestaande uit aralkoxycarbonyl, gehaloge-neerd alkoxycarbonyl of alkoxycarbonyl voorstellen, met dien verstande dat R^ of R^ altijd waterstof voorstelt en Rg of R^ altijd waterstof voorstelt, en verder dat R’g of R'^ altijd 20 een beschermende groep voorstelt en R’g of R'^ altijd een beschermende groep voorstelt, R ^ acyl voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt en B en B^, die gelijk of verschillend kunnen zijn, elk waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk dat, de bereide verbinding de formule Ia" heeft.

3. Werkwijze volgens conclusie 2, met het kenmerk dat, de bereide verbinding 61 -cyclopentylmethylspect inomycine; 30 6 *-cyclopentylmethylspectinomycinedihydrochloride; 6'-cyclohexylmethylspectinomycine en 61-cyclohexylmethylspectinomycinedihydrochloride is. U. Speetinomycineanalogon gekenmerkt door de formule 1" waarin R waterstof of lage alkyl voorstelt, R" een cycloalkyl- _ _____. ____ 8300893 v groep met in de langste brug tot 5 koolstofatomen voorstelt, R^ t/m waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, A zuurstof of zwavel voorstelt, en B en die gelijk of verschillend kunnen zijn, elk waterstof, hydroxy, 5 alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen, de gehydrateerde vormen daarvan, en de farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbinding met de formule I” en gehydrateerde vormen daarvan.

5. Verbinding volgens conclusie U, gekenmerkt door de 10 formule Ia" waarin R" de in conclusie h aangegeven betekenis heeft, R^ t/m R^ waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, met dien verstande dat Rg of R^ altijd waterstof voorstelt en Rg of Βγ altijd waterstof voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt, en B en B^, die gelijk of 15 verschillend kunnen zijn, elk waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen, de gehydrateerde vormen daarvan, en de farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbinding met de formule Ia" en gehydrateerde vormen daarvan.

6. Verbinding volgens conclusie 5, met het kenmerk dat, de verbinding 6’-cyclopentylmethylspectinomycine; 6' -cyclopentylmethylspectinomycinedihydrochloride; 6' -cyclohexylmethylspectinomycine en 25 6'-cyclohexylmethylspectinomycine dihydrochloride is.

7· Werkwijze voor het bereiden van speetinomycine-analoga, met het kenmerk dat, verbindingen worden bereid met de formule II door a) reaktie van een verbinding met de formule IV met een alkylmagnesiumhalogenide tot een verbinding met de 30 formule III, en b) reductie van de verbinding met de formule III tot een verbinding met de formule II waarbij R, R’, R'^, R’^, R^, R^, R'g, R'^, Rg, R^, R1q, B en B^ de in conclusie 1 aangegeven betekenis hebben.

8. Werkwijze volgens conclusie 7» met het kenmerk dat, 35 de bereide verbinding N ,N1 -dicarbobenzyloxy-6' -cyclohexyl- t 8300893 tj w spectinomycine is.

9. Speetinomycineanalogon, gekenmerkt door de formule III’ waarin R waterstof of lage alkyl voorstelt, R' een cycloalkylgroep met in de langste brug tot 5 koolstof-5 atomen voorstelt, R^ t/m R^ waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, R’g, R'^, R'g en R'^ lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl of een beschermende groep bestaande uit aralkoxycarbonyl, gehalogeneerd alkoxycarbonyl of alkoxycarbonyl voorstellen, met dien verstand dat R^ of R^ 10 altijd waterstof voorstelt en Rg of R^ altijd waterstof voor stelt, en verder dat R'^ of R'^ altijd een beschermende groep voorstelt en R'g of R'^ altijd een beschermende groep voorstelt, R10 acyl voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt, en B en die gelijk of verschillend kunnen zijn, elk waterstof, hydroxy, 15 alkoxy, o-lage alkyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen.

10. Farmaceutische preparaten, met het kenmerk dat, deze als werkzaam bestanddeel een verbinding met de formule I” of Ia”, de gehydrateerde vormen daarvan of een farmaceutisch 20 aanvaardbaar zout daarvan of van de gehydrateerde vormen daarvan bevatten.

11. Verbindingen, preparaten, werkwijzen alsmede daarbij toegepaste, verkrijgbare en verkregen verbindingen zoals beschreven in de beschrijving en voorbeelden. 8300893 1 * R' SCHEMA.A- R' Sj^oloJ* ^^olo J1, tr "”04· ^ o' 'd 8 10 s„ s 1 OH OH R‘ R? R' R4 R? r' Ri ? H 4*1 rL, B R, R CH, RV «Χ oio.; ^>>Y010 y1 β,\4---,Α/1 br?Jv<V''-a ^ vv ft ORn R''N'lRi TT 0H0 R» R| Ia "° Ri ‘ f II Q R' R» o R R CH» rL B..R, R CH» H^yOolo J ^CKf°loy hr\?R* ftu» N"Tdr* OrX «i 'R'T 8 ir0H 0. ?, r;'r;rmii "° ?- r; f h ch, r; bvr, o ch, Rvyyoyoy Ri5lY0t0V - B,ly-,0XJina B,R?M><lAT>r m' riar; “ν’ R’ r^'r; * ’ °^o 111 B# B u CH. Ka 5 H , 1 n» R d p 'M x O I j Ra Β·ν ":· Ί Ύ tV Β'Ύ'·ονπ>'= R^'Ri f R'rRy8 \v 100 rXJ\VX-\/^ r'-N VR’ R V’ rr rr* !«tVY°f°y^n'ch3 Λ ormo IVa ¾ V R‘ K? R»''r'? rL, BV^R1 n R. CH, r' B R, R Y^N'^ RifJrY°^°TCHi ^ /Λ r'* *Vl ^-AIJ N Rgg OR q Rr ^R /C 13 0 0 89 3 R‘ R? VI ° Ri 'R? y]i * The Upjohn Company, Kalamzoo, Michigan, Ver.St.v.Amerika X- *.· 5CHEMA-B- ' R‘v V’ 3 <' DMF R\N V· 5 ch, ^VVvovH’ ™ei R1RyV4owN;H

5 Rr Is h-c-ocHj R«r T If ch3 ^Xr.ATY stapl Rf Xr a N R/?* OR O . N rJ 9 no II Ri'VRi tt nHi Rr'Ri ,o 0 j Vil pH .< 4 J VT vu NaCNBIV/s?ap2 V1 R*'n B^Ri i n /CH’ rJ-BR, o %y\ivc°x°^ Br?Yp''λΊγ ,ch»i B.-J X T T^CH‘ J& stap3 νφ^τ R* R? V t RpRi iv <i0 , R R'MgX^ R^VN Β^Κι 2 ^ R' R>\:^<r0'f0YJ RJ, EI R, R CH, B'R^N^'A'1Xr -^%wRi^Y*V°XQ N R.R, orT stap5 B~I1 J ‘ ? in rOCr,"Ai>r deprotectie R,/vpRi ^ 0 >< r' 6 ’ Π >^tap6 | R, B - R, R CH, R^vColo, ‘I RiT Ί T V' b-Λ, d, Jj· ,VJ r^Xp ’a W N RRS 1Y R, ü, CH 0

7 I 8300893 The Upjohn Company, te Kalamazoo, Michigan, Ver.St.v.Amerika SCHEMA-C- C «o R, r \ or, R RVXO ,ch3 \γγ°X0y CH> H°yu^4J_^—*. °Xv^''''aXx^ Rf n^R6 OhJ^ fN RR* OH^ „,Λη, K v o HCOaH ./ V IV 0 Rfc R? X EtOAc Ra R? ^ pyridine 6 * H , H Lo stap?/? t yo R* Q R RV, O R1 . R R'Xv-V0^0^"^ DMAP Ri'pVvo^o CH, ÖZl i j . stap 3? 0 I I |T u / o J XA 4\χ d; b r o o m - > h-/ i yX'A^Kx " Vi^N^R^ πρΤ dimethyl- ^ RfN R0R* ΟΙΤΗ 0 , 1 0f1oL hyldantome 0 NRS UKe» R‘ Ri VIII 0R” stap^MF Rl R'? Vil /DMFacetaal T Rt OH R. a) CH^OH of water ^fV<r04'0v^/< h°,^x^ax3' Rf Η X 0¾¾ CRi VI R" I R" R D D D CH. ». B\yR< i ,.| R. B u CH, ^iVV0^i0V , rV^O^oJ Bi~wi a' , V] Ryv>A®o - βΓγ''''Αΐιγ R* R? .<< H 0F5.0 »"_

1 Rj N R? 1 a R" ,. i R" Ri B R, R 9Hi Rl. B R, R CH, aK-4»y 'XVV4Y 8”HX'4'ir b'b7-X4 is .. r;7 r; ir R* R? 111 8300893 THE UPJOHN COMPANY, Kalamazoo, Michigan, Ver.St.v.Amerika