MXPA98006914A - Nuevos derivados de urea - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos de la fórmula general I:en la que R1 significa hidrógeno o alquilo inferior, R2 significa hidrógeno o halógeno y R3 significa hidrógeno o alcoxi inferior, asícomo sus sales por adición deácidos fisiológicamente compatibles.

Description

Nuevos derivados de urea El invento se refiere a nuevos derivados de urea, en los cuales un átomo de nitrógeno es constituyente de un anillo de piperazina y el otro está sustituido con un radical bencilaminoetilo. Estos nuevos derivados de urea se distinguen por propiedades antagonistas de receptores de neuroqui-ninas con un perfil de efectos que es favorable para el tratamiento de trastornos funcionales e inflamatorios del tracto gastrointestinal de mamíferos superiores, especialmente seres humanos. Además de ello, el invento concierne a medicamentos que contienen estos nuevos compuestos así como a procedimientos para la preparación de estos compuestos . El invento está basado en la misión de desarrollar nuevas sustancias activas para el tratamiento de trastornos funcionales e inflamatorios en el tracto gastrointestinal .

A partir de la Solicitud de Patente Europea, con el número de publicación 655.442, ya se conocen derivados de piperazina con propiedades antagonistas de receptores de neuroquininas . Se descubrió por fin que un grupo de nuevos derivados de piperazina, que están sustituidos en posición 2 con un radical indolilmetilo, y en los cuales el nitrógeno en posición 4 del anillo de piperazina es parte de un entramado de urea que lleva un sustituyente bencilaminoetilo, presentan un perfil de efectos, que los hace apropiados para el tratamiento de trastornos funcionales e inflamatorios del tracto gastrointestinal. El grupo de sustancias conformes al invento se distingue además por una buena compatibilidad y una buena biodisponibilidad oral. Son objeto del invento, por lo tanto, nuevos compuestos de la Fórmula I, en la que R significa hidrógeno o alquilo inferior, R2 significa hidrógeno o halógeno y 15 significa hidrógeno o alcoxi inferior, y sus sales por adición de ácidos fisiológicamente compatibles así como medicamentos que se pueden preparar a partir de estos compuestos. Si en compuestos de la Fórmula I los sustituyentes significan o contienen alquilo inferior, éste puede ser lineal o ramificado y contener de 1 a 4 , preferiblemente de 1 a 2 , átomos de carbono . Si R1 representa alquilo inferior, se prefiere metilo. Si el sustituyente R2 significa halógeno, se prefiere fluoro . Si el sustituyente R3 significa alcoxi inferior, se prefiere metoxi. Son preferidos los compuestos de la Fórmula I, en la que R representa hidrógeno y R3 significa metoxi o compues¬ tos de la Fórmula I, en la que R2 significa fluoro y R3 representa hidrógeno. El radical lH-indol-3-il-metilo está dispuesto preferiblemente en la posición 2R del anillo de piperazina. Los compuestos se pueden preparar de modo en sí conocido. De manera especialmente favorable, se pueden preparar los compuestos de la Fórmula I , haciendo reaccionar el compuesto de la Fórmula II, con un compuesto carbonílico reactivo de la Fórmula general III, en la que Y significa un grupo lábil desalojable por ataque nucleófilo de una amina primaria o secundaria, para formar un compuesto de carbamoílo de la Fórmula general IV, en la -que Y posee el significado anterior, si por * separación del grupo lábil Y a partir de un compuesto obtenido de la Fórmula IV se puede formar un ácido, añadiendo al compuesto de la Fórmula IV una base orgánica no nucleófila, y a continuación haciendo reaccionar el compuesto de la Fórmula IV con un compuesto de la Fórmula general V, en la que R^°^ significa alquilo inferior o un grupo protector de amino y R2 y R3 poseen los significados anteriores, y separando de nuevo a continuación un eventual grupo protector R 1-*-0u1 , 20 o b) haciendo reaccionar el compuesto de la Fórmula II con un compuesto de la Fórmula general VI , en la que R10 , R2 y R3 poseen los significados anteriores , y seguidamente separando de nuevo un eventual grupo R 11UO1± protector de amino; y en caso deseado alquilando compuestos obtenidos de la Fórmula I, en la que R1 significa hidrógeno, para formar compuestos de la Fórmula I, en la que -^ significa alquilo inferior, y en caso deseado transformando compuestos obtenidos de la Fórmula I en sus sales por adición de ácidos, o transformando sales por adición de ácidos en compuestos libres de la Fórmula I. Convenientemente, de acuerdo con la variante a) del procedimiento, se puede hacer reaccionar primeramente un compuesto de la Fórmula II con un compuesto carbonílico reactivo de la Fórmula III para formar un compuesto de carbamoílo de la Fórmula IV, que se puede hacer reaccionar directamente in si tu, eventualmente después de la adición de una base orgánica no nucleófila, con una amina de la Fórmula V. Como grupos lábiles Y en compuestos de la Fórmula III se adecúan por ejemplo halógenos, preferiblemente cloro, grupos trihalometoxi , preferiblemente grupos triclorometoxi, o también grupos imidazolilo. Preferiblemente, como compuestos carbonílieos reactivos de la Fórmula III se pueden emplear fosgeno, carbonato de bis (triclorometilo) (trifosgeno), éster triclorometílico de ácido clorofór ico (difosgeno) o carbonil-diimidazol . En el caso de la reacción de una amina de la Fórmula V con un compuesto de carbamoílo de la Fórmula IV, el grupo lábil Y es desalojado desde el compuesto de la Fórmula IV. Si a partir del grupo Y, liberado en este caso, se puede formar un ácido, al compuesto de la Fórmula IV, antes de la reacción con el compuesto de la Fórmula V, se le puede añadir convenientemente una base orgánica no nucleófila. Si Y representa por ejemplo cloro, el ácido clorhídrico resultante al efectuar la separación de Y puede ser capturado mediante adición de una de las bases antes mencionadas . Como bases no nucleófilas se adecúan las bases orgánicas que son solubles en la mezcla de reacción, tales como bases nitrogenadas terciarias, por ejemplo heterociclos alquilados en N que contienen nitrógeno, tales como N-alquil inferior-morfolina o N-alquil inferior-piperidina o alquil inferior-aminas terciarias y piridinas, tales como p. ej . trietilami-na, tripropilamina, diisopropil-etilamina, piridina, 4-dimetilamino-piridina, 4-dietilamino-piridina ó 4- pirrolidino-piridina. Las bases empleadas en exceso se pueden utilizar también como disolventes. La sucesión de reacciones se puede llevar a cabo como reacción de un solo recipiente (sin aislamiento de los productos intermedios) en el seno de un disolvente aprótico polar tal como un hidrocarburo inferior parcialmente halogenado, por ejemplo diclorometano, a temperaturas comprendidas entre -20°C y la temperatura ambiente, preferiblemente a la temperatura ambiente. La reacción del compuesto de la Fórmula II con un isocianato de la Fórmula VI se puede efectuar de manera en sí conocida conforme a la variante b) de procedimiento. Los compuestos de la Fórmula VI se pueden obtener por ejemplo a partir de las aminas de la Fórmula V por reacción con apropiados compuestos carbonílicos reactivos . Como compuestos carbonílicos reactivos se adecúan por ejemplo los compuestos de la Fórmula III. Convenientemente, a partir de una amina de la Fórmula V se prepara primeramente un isocianato de la Fórmula VI y éste se hace reaccionar luego directamente in si tu con un compuesto de la Fórmula II. La sucesión de reacciones se puede realizar como reacción de un solo recipiente en las condiciones indicadas con anterioridad para la preparación de compuestos de la Fórmula I según la variante a) de procedimiento. Convenientemente, a la mezcla de reacción se le puede añadir un reactivo fijador de ácidos. Como reactivos fijadores de ácidos se adecúan las bases no nucleófilas antes indicadas . Como grupos R101 protectores de amino entran en cuestión los grupos protectores de amino en sí conocidos por ejemplo a partir de la química de los péptidos, los cuales se pueden introducir y luego separar de nuevo, de acuerdo con métodos en sí conocidos. Grupos protectores apropiados son conocidos por ejemplo de la obra de J.A.W. McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry" Plenum Press 1973 o la de T.W. Green y P.G.M. Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley and Sons 1991. Por ejemplo, como grupos RJ-?,L protectores de amino se adecúan grupos ampliamente estables en el medio ácido y en el alcalino, que pueden ser separados en condiciones de hidrogenolisis. Entre ellos se cuentan por ejemplo grupos fenil -alquiloxi inferior-carbonilo tales como el grupo benciloxicarbonilo (denominado abreviadamente en lo sucesivo Cbo) . Preferiblemente, como grupo R 1 O1 protector de amino se puede utilizar el grupo benciloxicarbonilo el cual puede ser separado de manera en sí conocida, p. ej . por hidrogenación catalítica, a fin de obtener compuestos de la Fórmula I, en la que R1 significa hidrógeno. La separación del grupo protector puede efectuarse en el seno de un disolvente orgánico inerte en las condiciones de la reacción, tal como un éter alifático inferior, por ejemplo tetrahidrofurano (denominado abreviadamente en lo sucesivo THF) o dietil-éter, alcanoles inferiores, por ejemplo metanol o etanol, o ácidos orgánicos, por ejemplo ácidos carboxílicos alifáticos inferiores tales como ácido acético, o en el seno de mezclas de estos disolventes y en presencia de un catalizador de hidrogenación. Como catalizadores de hidrogenación se adecúan por ejemplo catalizadores de metales nobles, tales como paladio sobre carbón activo. Convenientemente, la reacción se realiza a la temperatura ambiente. Una presión de hidrógeno, apropiada para la hidrogenación, está situada entre 2 y 7 bares, preferiblemente entre 3 y 5 bares. Los compuestos de la Fórmula I, en la que R significa hidrógeno, se pueden transformar en caso deseado, de acuerdo con métodos en sí conocidos para la aminoalquilación, en compuestos de la Fórmula I, en la que R1 significa alquilo inferior. Para ello, los compuestos de la Fórmula I pueden ser alquilados en condiciones reductoras, por ejemplo por reacción con aldehidos alifáticos inferiores tales como formaldehído. La reacción se puede llevar a cabo en condiciones en sí usuales para la alquilación reductiva de aminas, por ejemplo en las condiciones de una hidrogenación catalíti-ca. Como catalizadores de hidrogenación se adecúan catalizadores metálicos tales como níquel Raney. Como disolventes se pueden utilizar preferiblemente alcanoles inferiores. La hidrogenación catalítica se puede llevar a cabo en las condiciones precedentemente descritas para la separación por hidrogenolisis de grupos R101 protectores de amino. Otra posibilidad de realizar la alquilación es la reacción de compuestos de la Fórmula I, en la que R significa hidrógeno, con halogenuros de alquilo alifáticos inferiores tales como bromuros de alquilo o yoduros de alquilo, preferiblemente yoduro de metilo, sulfatos de alquilo o esteres de ácidos alquil-sulfónicos, en condiciones generalmente usuales para reacciones de sustitución nucleófila. La reacción se puede llevar a cabo en el seno de un disolvente aprótico polar tal como dimetilformamida (denominada abreviadamente en lo sucesivo DMF) , dimetilsulfóxido (denominado abreviadamente en lo sucesivo DMSO) o acetonitrilo a temperaturas entre -20°C y 100°C, preferiblemente entre 60°C y 90°C y mediando utilización de un reactivo fijador de ácidos. Como reactivos fijadores de ácidos se adecúan por ejemplo las bases orgánicas antes indicadas en el caso de la reacción de los compuestos de la Fórmula IV con los compuestos de la Fórmula V. Como sales fisiológicamente compatibles de compuestos de la Fórmula I entran en cuestión sales de éstos con ácidos inorgánicos, por ejemplo ácido sulfúrico, ácidos fosfóricos o hidrácidos halogenados, preferiblemente ácido clorhídrico, o con ácidos orgánicos, por ejemplo ácidos mono-, di- o tri-carboxílicos alifáticos inferiores tales como ácido maleico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido cítrico, o con ácidos sulfónicos, por ejemplo ácidos alcano inferior-sulfónicos tales como ácido metano-sulfónico, o ácidos benceno-sulfónicos eventualmente sustituidos en el anillo de benceno con halógeno o alquilo inferior, tales como ácido p-tolueno-sulfónico. Los compuestos de la Fórmula I se pueden aislar de manera en sí conocida a partir de la mezcla de reacción, y purificar. Las sales por adición de ácidos se pueden transformar de un modo usual en las bases libres y éstas, en caso deseado-, pueden ser transformadas de modo conocido en # sales por adición de ácidos farmacológicamente compatibles. Los compuestos de la Fórmula I contienen un átomo de carbono quiral, a saber el átomo de carbono que lleva el 5 radical lH-indol-3-il-metilo en posición 2 del entramado fundamental de piperazina. Los compuestos de la Fórmula I pueden presentarse por consiguiente en varias formas estereoisómeras. El presente invento abarca tanto las mezclas de isómeros ópticos como también los compuestos de la Fórmula I que son puros en cuanto a los isómeros. Son preferidos los compuestos de la Fórmula I, en la que el radical indolilmeti- * lo está dispuesto en posición 2R del anillo de piperazina. En el caso de que para la síntesis de los compuestos de la Fórmula I se empleen mezclas de isómeros ópticos del compuesto de partida de la Fórmula II, también los compuestos de la Fórmula I se obtienen en forma de mezclas de isómeros ópticos. Partiendo de formas estereoquímicamente uniformes del compuesto de partida, también se pueden obtener compuestos estereoquímicamente uniformes de la Fórmula I . Los compuestos estereoquímicamente uniformes de la Fórmula I se pueden obtener de manera en sí conocida a partir de las mezclas de isómeros ópticos, p. ej . mediante separación por « cromatografía en presencia de materiales quirales de separación o mediante reacción con apropiados ácidos 25 ópticamente activos, por ejemplo ácido tartárico o ácido canfo-10 -sulfónico, y subsiguiente separación en los antípodas ópticamente activos mediante cristalización fraccionada de las sales diastereoisómeras obtenidas . Los dos posibles enantiómeros del compuesto de la Fórmula II son conocidos a partir del documento de patente europea EP-A 655.422 y se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos descritos en esta solicitud de Patente o análogamente a estos procedimientos. Las aminas de la Fórmula V se pueden obtener a partir 35 de los compuestos diamínicos protegidos doblemente en grupos amino, de la Fórmula general VII, ^r en la que R , R y R poseen los significados antes indicados y R401 representa un grupo protector de amino, separando selectivamente a partir de compuestos de la Fórmula VII, de manera en sí conocida, el grupo R401 protector de amino . Como grupos R401 protectores de amino se adecúan los grupos protectores de amino conocidos en general , por ej emplo a partir de la química de los péptidos, tal como los que son conocidos a partir de las fuentes precedentemente indicadas.

Por ejemplo, como grupos R401 protectores de amino se adecúan grupos selectivamente separables, por ejemplo por adición de ácido p-tolueno-sulfónico, ácido trifluoroacético o ácido clorhídrico gaseoso (cloruro de hidrógeno) o disuelto en disolventes, cuyos grupos son ampliamente estables frente a condiciones hidrogenolíticas y alcalinas. Entre ellos se cuentan, por ejemplo, grupos alquil inferior-oxicarbonilo ramificados tales como el grupo tere . -butil-oxicarbonilo 25 (denominado abreviadamente en lo sucesivo BOC) . Preferiblemente, R401 puede representar el grupo tere. -butil-oxicarbonilo . Los compuestos de la Fórmula VII se pueden obtener de manera en sí conocida, por ejemplo por reducción de amidas de la Fórmula general VIII, Vffl 35 - li en la que R ,- R2 , R3 y R401 poseen los significados anterio-res y, si R representa hidrogeno, subsiguiente introducción de un grupo protector R10 . La reducción se puede llevar a cabo con hidruros complejos de metales alcalinos tales como hidruro de litio y aluminio, en calidad de agente de reducción. Como disolvente se adecúan los disolventes orgánicos que son inertes en las condiciones de reacción, tales como éteres alifáticos inferiores, por ejemplo dioxano, THF o dietil-éter, o mezclas de estos disolventes. Un margen apropiado de temperaturas está situado entre -20°C y la temperatura de ebullición de la mezcla de reacción. Por ejemplo, la reducción se puede llevar a cabo a la temperatura ambiente . Las amidas de la Fórmula VIII se pueden preparar por reacción de ácidos ?-aminocarboxílicos protegidos en el grupo amino, de la Fórmula general IX, RWN' 'COOH I rx H en la que R 401 posee los significados anteriores, con las aminas de la Fórmula general X, en la que R , R y R poseen los significados anteriores, mediando métodos usuales para la formación de agrupaciones amido mediante aminoacilación. Como agentes de acilación se pueden emplear los ácidos de la Fórmula IX o sus derivados capaces de reaccionar. Como derivados capaces de reaccionar entran en cuestión especialmente anhídridos mixtos y cloruros o bromuros de los ácidos de la Fórmula IX, o esteres mixtos de los ácidos de la Fórmula IX con ácido clorofórmico o con ácidos sulfónicos orgánicos, por ejemplo ácidos sulfónicos aromáticos tales como ácidos benceno-sulfónicos sustituidos con alquilo inferior o halógeno, p. ej . ácido p-toluenosulfónico. La acilación se puede efectuar en el seno de un disolvente orgánico que sea inerte en las condiciones de reacción, a temperaturas comprendidas entre -20°C y la temperatura ambiente, preferiblemente a la temperatura ambiente. Como disolventes se adecúan hidrocarburos aromáticos tales como benceno o tolueno, éteres alifáticos tales como dietil -éter, THF o dioxano, hidrocarburos inferiores parcialmente halogenados, tales como diclorometano o mezclas de estos disolventes. La acilación se puede llevar a cabo convenientemente, en particular cuando en calidad de agente de acilación se utiliza uno de los halogenuros de los ácidos de la Fórmula IX, en presencia de un reactivo fijador de ácidos. Como reactivos fijadores de ácidos se adecúan las bases orgánicas no nucleófilas, antes indicadas con ocasión de la reacción de los compuestos de carbamoílo de la Fórmula IV con los compuestos de la Fórmula V. En el caso de que como agente de acilación se empleen los propios ácidos de la Fórmula IX, la reacción de las aminas de la Fórmula X con los ácidos de la Fórmula IX se puede llevar a cabo convenientemente también en presencia de un reactivo de acoplamiento, conocido a partir de la química de los péptidos como apropiado para la formación de amidas. Como ejemplos de reactivos de acoplamiento, que activan la formación de amidas con los ácidos libres, reaccionando con el ácido in si tu mediando formación de un derivado de ácido capaz de reaccionar, se mencionarán especialmente: alquil-carbodiimidas, p. ej . cicloalquil-carbodiimidas tales como diciclohexil-carbodiimida o l-etil-3- [ (dimetilamino) propil] -carbodiimida, diisopropil-carbodiimida y carbonil-diimidazol . La reacción en presencia de un reactivo de acoplamiento se * puede llevar -a cabo convenientemente a temperaturas comprendidas entre -30°C y +50°C en el seno de disolventes tales como hidrocarburos halogenados y/o de disolventes aromáticos tales como bencenos eventualmente sustituidos, y eventualmen- 5 te en presencia de un compuesto orgánico fijador de ácidos, por ejemplo de una de las bases nitrogenadas no nucleófilas precedentemente descritas. Los ácidos de la Fórmula IX constituyen derivados protegidos en el grupo amino de los derivados de ácido 2-amino-acético, que es conocido en forma sin proteger y puede ser transformado de acuerdo con métodos en sí conocidos en los derivados protegidos en el grupo *• amino . Los compuestos de la Fórmula X son conocidos o se pueden preparar de manera en sí conocida a partir de compuestos conocidos. Los compuestos de la Fórmula I y sus sales por adición de ácidos poseen propiedades antagonistas de receptores de neuroquininas (= NK) y son apropiados para el tratamiento de estados de enfermedad en los que participan neuroquininas como sustancias transmisoras. En tal caso, el grupo de compuestos conformes al invento se distingue por un perfil de efectos que es selectivo y especialmente favorable, que está caracterizado por una alta afinidad para receptores de NK-1 con una afinidad para receptores de NK-2, que es menor en relación con aquélla. Además, los compuestos presentan una buena actividad por vía oral . Por causa de su perfil de efectos, el grupo de sustancias conformes al invento se adecúan especialmente para la inhibición de procesos, en los cuales participan neuroqui- 30 ninas que se fijan a receptores de NK-1, tales como la sustancia P. Por consiguiente, las sustancias se adecúan selectivamente para el tratamiento de estados de enfermedad, en los cuales participa la sustancia P. La sustancia P desempeña, por ejemplo, un papel en transmisión del dolor, 35 emesis, inflamaciones neurógenas, inflamaciones de la vejiga urinaria, enfermedades inflamatorias de las articulaciones y afecciones asmáticas. A causa de la acción dirigida de * manera ventaj-osa hacia el tracto gastrointestinal, el perfil de efectos que presentan las sustancias se adecúa para el tratamiento de trastornos funcionales e inflamatorios en el tracto gastrointestinal. Además, se supone en general de los 5 compuestos que, junto con una alta afinidad para receptores de NK-1 presentan también una cierta afinidad para receptores de NK—2 , que estas dos componentes de efectos tienen una favorable influencia sinérgica sobre los mecanismos que participan en la misma sintomatología. Entre los trastornos 10 funcionales que pueden ser tratados mediante los compuestos ? conformes al invento, se cuentan especialmente los trastornos de los conductos intestinales inferiores que son conocidos como el denominado "síndrome del vientre irritable, del inglés irri table bowel syndrome" (= IBS) o síndrome del intestino irritable. Síntomas esenciales del IBS son dolores de la región hipogástrica, que parecen deberse a una hipersensibilidad del sistema nervioso aferente visceral, y anomalías de la defecación, especialmente al paso anormalmente acelerado de las heces por el colon. La aumentada sensibilidad visceral al dolor frente a excitaciones mecánicas o químicas en el tracto intestinal conduce a que los pacientes del IBS experimenten fuertes dolores viscerales ya con pequeñas dilataciones fisiológicas del colon debidas a la digestión, p. ej . ya con una pequeña formación de gases y ligeros meteorismos y flatos, que apenas pueden ser percibidos por personas sanas . A los trastornos en el tracto gastrointestinal, debidos a causas inflamatorias sobre los que se puede influir f vorablemente mediante los compuestos conformes al invento, pertenecen los trastornos inflamatorios en la región del intestino delgado y del intestino grueso, que se recopilan en términos generales por el concepto de IBD (= inflammatory bowel disease) , entre otros, la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn. El perfil de efectos de las sustancias se distingue por una 35 buena biodisponibilidad por vía oral junto con una favorable selectividad de los efectos antagonistas de receptores de neuroquininas frente a efectos secundarios indeseados . Así, en los márgenes de dosis que bloquean a los receptores de NK—1 no se pudo comprobar en experimentos farmacológicos de pruebas ningún efecto cardiovascular antagonista del calcio.

Los números indicados de los Ejemplos se refieren a los Ejemplos de preparación seguidamente descritos.

Descripción de los métodos de ensayos farmacológicos 1. Determinación de la capacidad de fijación de las sustancias de ensayo a receptores de NK-1 in vitro La afinidad de las sustancias de ensayo para receptores de NK-1 humanos se mide in vi tro . Se determina la inhibición de la fijación de la neuroquinina fisiológica (sustancia P) a receptores de neuroquinina-1. Los estudios de fijación a receptores se llevan a cabo con [ H] -sustancia P como ligando. Para el experimento de fijación, diferentes muestras de una preparación membranal de células CHO (= oocitos de hámster chino, del inglés Chinese Hámster Oocytes) , que expresan el receptor de NK-1 humano, se incuban con una solución del ligando marcado, no conteniendo las tandas de incubación ninguna sustancia de ensayo o conteniendo adiciones de diferentes concentraciones de la sustancia de ensayo. A continuación, se lleva a cabo en las muestras en cada caso una separación entre el ligando fijado y el ligando libre con ayuda de una filtración a través de fibras de vidrio. La fracción que queda en el filtro se lava varias veces con una solución tamponadora y a continuación se mide la radiactividad de la fracción que ha quedado en el filtro con un contador de escintilación de partículas beta. Como CI50 de la respectiva sustancia de ensayo se determina la concentración que produce un desalojamiento semimáximo del ligando fijado. A partir de éste, se calcula la correspondiente constante de inhibición (valor de K.¡_) de la sustancia de ensayo. En este modelo de ensayo, la sustancia del Ejemplo 1 puso de manifiesto un valor de Kj_ de 2,1 nmol/1 para la afinidad para receptores de NK-1 humanos 2. Determinación de la capacidad de fijación de las sustancias de ensayo a receptores de NK-2 ±n vi tro La afinidad de las sustancias de ensayo para receptores de NK-2 humanos se mide in vi tro. Se determina la inhibición de la fijación del compuesto SR-48,968 a receptores de NK-2. El SR-48,968 es un compuesto preparado por síntesis, que es conocido como antagonista específico de la NK-2. Los estudios de fijación a receptores se llevan a cabo con el SR-48,968 como ligando. La realización de los experimentos corresponde al método indicado en el ensayo farmacológico para la determinación de la capacidad de fijación de las sustancias de ensayo a receptores de NK-1 in vi tro . A diferencia de ello, se utilizan ahora sin embargo diferentes muestras de una preparación de membranas de células CHO, que expresan el receptor de NK-2 humano. En este modelo de ensayo, las sustancias de los Ejemplos que se exponen en la siguiente Tabla 1 presentaron los valores indicados de K¿ para la afinidad para receptores de NK-2 : Tabla 1 : Afinidad de las sustancias de ensayo a receptores de NK-2 humanos 3. Determinación del antagonismo funcional de N -1 que presentan las sustancias de ensayo en un tejido aislado de cobaya in vitro El efecto antagonizador de los receptores de NK-1, que presentan las sustancias de ensayo, se midió en preparados de anillos, aislados y mantenidos en una solución nutritiva oxigenada, de las aortas de cobayas de Pirbright-White . Se determina la inhibición de la relajación del tono de los preparados de aortas por la sustancia de ensayo, que se provoca después de estimulación con la sustancia P agonista de NK-1. Para medir la contracción de la musculatura vascular, los preparados se fijan a un gancho, se unen por medio de un hilo con un dinamómetro y se registran las contracciones en cada caso en un dispositivo escritor. Los preparados de aortas se tonifican con fenilefrina. A continuación, los receptores de NK-1 de los preparados se estimulan, antes y después de la administración de la sustancia de prueba, con 0,01 µmol de la sustancia P, con lo cual se provoca una relajación del tono. Las relajaciones antes y después de toma de la sustancia en prueba se cuantifican en tantos por ciento. Como magnitud característica se calcula la concentración de la inhibición semimáxima (= CI^ ) , que indica la concentración con la que aparece una inhibición semimáxima de la relajación del tono. En este modelo de ensayo, las sustancias de los Ejemplos que se exponen en la siguiente Tabla 2 presentaron los valores de CI50 indicados para la inhibición semimáxima: Tabla 2 : Antagonismo funcional de NK-1 que presentan las sustancias de ensayo en un tejido aislado de cobaya Determinación del efecto antagonista de la sustancia P que presentan las sustancias de ensayo in vivo Para la detección del efecto antagonista de la sustancia P que presentan las sustancias de ensayo, se utilizó, como modelo de ensayo normalizado para los efectos farmacológicos inducidos por la sustancia P, la hipotensión en cobayas que es provocada por aplicación de la sustancia P. Se determinó el efecto inhibidor de las sustancias de ensayo frente a la disminución de la presión sanguínea inducida por la sustancia P después de aplicación por las vías intravenosa (= i.v.) e intraduodenal (= i.d.) de las sustancias de ensayo. A cobayas machos se les implanta en estado de narcosis (con cetamina 67 mg/kg, xilazina 13 mg/kg) en cada caso un catéter en una arteria carótida primitiva y en una vena yugular. El catéter arterial sirve para medir la presión sanguínea. La medición se efectúa con un registrador de presión Statham 23d/B. A través del acceso venoso se efectúa la administración de sustancia P o en el caso de administración por vía intravenosa también la aplicación de la sustancia de ensayo. Después de una fase de equilibración durante 20 minutos se aplican 50 pmol/animal de la sustancia P como bolo i.v.. Después de ello se efectúa la administración de la sustancia de ensayo. En el caso de la investiga- ción por vía- i.v., la sustancia de ensayo se aplica intravenosamente en dosificaciones de 0,1, 0,46 y 0,1 µmol/kg respectivamente a un grupo en cada caso de 4 a 6 animales. El grupo testigo recibe la correspondiente cantidad de una solución fisiológica de cloruro de sodio. A los 1, 15, 30, 45 y 60 minutos después de la administración de la sustancia, se aplican i.v. en cada caso 50 pmol de la sustancia P. En los experimentos con administración de la sustancia por vía intraduodenal se implanta, diferenciándose de la descripción anterior, adicionalmente un catéter en el duodeno de los animales sometidos a experimentación. Las sustancias de ensayo se aplican en cada caso a 3 hasta 6 animales en dosificaciones de 0,046, 0,1, 0,46, 1,0, 4,6 y 10,0 µmol/kg a través de este catéter. Como vehículo sirve, en estos experimentos, tilosa. Se mide la presión sanguínea arterial media antes y aproximadamente 1 minuto después de la primera administración de sustancia P (antes de la aplicación de la sustancia de ensayo) y se determina a partir de ello la máxima disminución de la presión sanguínea que es inducida por la sustancia P. Después de 60 minutos se comparan los valores medios de la presión sanguínea arterial de los animales testigos, tratados solamente con sustancia P, y los de los animales tratados con sustancia P y sustancia de ensayo, y a partir de la diferencia se calcula en tanto por ciento, referido a la máxima disminución de la presión sanguínea, la inhibición de la disminución de presión sanguínea, inducida por la sustancia P, que es producida por la respectiva dosis de sustancia de ensayo. Como DE^Q se determina la dosis con la que aparece una inhibición del 50% de la disminución de la presión sanguínea inducida por la sustancia P. En este modelo de ensayo, la sustancia del Ejemplo 1 manifestó, después de aplicación i.v., una DE^Q de 0,2 µmol/kg y, después de aplicación i.d., una DE5Q de 0,08 µmol/kg. Esta relación de la actividad i.d. a la actividad i.v. puede ser valorada como indicio de que la sustancia es bien apropiada para la aplicación por vía oral y de que su efecto se inicia preferentemente en el tracto gastrointestinal . En el mismo modelo de ensayo, las sustancias sometidas a ensayo se investigan también en cuanto a los efectos hipotensores que se deben a propiedades antagonistas del calcio. Para ello, a grupos de animales testigos se les administran solamente las dosis de sustancias de ensayo sin aplicación de sustancia P. La sustancia del Ejemplo 1 no puso de manifiesto en el margen investigado de dosis (unas dosis i.v. hasta de 1 µmol/kg y unas dosis i.d. hasta de 10 µmol/kg) ninguna disminución significativa de la presión sanguínea. Esto es un indicio de que en este margen de dosis no aparecieron efectos secundarios antagonistas del calcio, de ningún tipo. Los efectos secundarios antagonistas del calcio, sorprendentemente pequeños, de los compuestos conformes al invento se pueden detectar también mediante modelos de ensayos normalizados in vi tro, por ejemplo en el tejido aislado de aorta de cobaya. Las sustancias se pueden administrar en usuales preparados farmacéuticos. Las dosis que se han de utilizar pueden ser individualmente diferentes y varían naturalmente dependiendo del tipo del estado que se ha de tratar y de la sustancia utilizada. En general, para la aplicación a seres humanos y a animales mamíferos superiores se adecúan sin embargo formas medicamentosas con un contenido en sustancia activa de 0,1 a 80 mg, especialmente de 1 a 10 mg de sustancia activa por cada dosis individual. Los compuestos pueden estar contenidos conforme al invento en preparados farmacéuticos sólidos o líquidos, en común con sustancias coadyuvantes y/o de vehículo farmacéuticas usuales. Como ejemplos de preparados sólidos se mencionarán preparados aplicables por vía oral tales como tabletas, grageas, cápsulas, polvos o granulados", o también supositorios . Estos preparados pueden contener sustancias de vehículo inorgánicas y/u orgánicas farmacéuticamente usuales, tales como p. ej . talco, lactosa o almidón, junto con agentes coadyuvantes farmacéuticamente usuales, por ejemplo agentes # de deslizamiento o agentes disgregantes de tabletas. Los preparados líquidos, tales como suspensiones o emulsiones de las sustancias activas, pueden contener los usuales agentes diluyentes tales como agua, aceites y/o agentes de suspensión 5 tales como polietilen-glicoles y similares. Adicionalmente, se pueden añadir otras sustancias coadyuvantes, tales como p. ej . agentes conservantes, correctores del sabor y similares . Las sustancias activas se pueden mezclar y formular de manera en sí conocida con las sustancias coadyuvantes y/o de vehículo farmacéuticas. Para la preparación de formas medicamentosas sólidas, las sustancias activas se pueden mezclar de un modo usual por ejemplo con las sustancias coadyuvantes y/o de vehículo, y se pueden granular en seco o en húmedo. El granulado o polvo se puede- envasar directamente en cápsulas o se puede comprimir de modo usual para formar núcleos de tabletas. Éstos, en caso deseado, pueden ser grageados de modo conocido. Los Ejemplos seguidamente dados deben explicar el invento con mayor detalle, pero sin limitarlo en su extensión.

Ejemplo 1: (2R) -1- [3, 5 -Bis (trifluorometil) benzoil] -2- (lH-indol-3-il- 25 metil) -4-{2-[N- (2 -metoxi-bencil) aminoetil] aminocarbonil } - piperazina A) 101,5 g de tere . -butiloxicarbonil-glicina se disolvieron bajo una atmósfera de nitrógeno en 800 ml de diclorome- 30 taño y se mezclaron con 96,5 ml de trietilamina. Mediando enfriamiento por hielo se dejaron afluir gota a gota lentamente 58 ml de éster etílico de ácido clorofórmico, la mezcla resultante se agitó todavía durante 2 horas a la temperatura ambiente y a continuación se añadió gota a gota una solución de 79,8 g de 2 -metoxi-bencilamina en 400 ml de diclorometano. Se dejó agitar durante una noche, se añadieron luego 1.400 ml de una solución ' acuosa al 15% de ácido tartárico y se dejó nuevamente en agitación durante 30 minutos. A continuación se separó la fase orgánica, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró por evaporación bajo presión reducida. El 5 residuo remanente fue cristalizado en una mezcla de dietil-éter y diclorometano y secado en alto vacío. Se obtuvieron 88,9 g de N-BOC-C- (2-metoxi) bencila ino- glicina como un polvo blanco, p. f. = 97 - 97,7°C.

B) 40,0 g del producto precedentemente obtenido se disolvieron bajo una atmósfera de nitrógeno en 600 ml de una #' mezcla de tolueno y THF (1:1) y se añadieron gota a gota a una carga previa enfriada por hielo de 21,0 g de LiAlH4 en 500 ml de THF. La mezcla se dejó en agitación durante una noche a la temperatura ambiente, y luego se añadieron gota a gota consecutivamente una mezcla de 20 ml de agua y 150 ml de THF, mediando enfriamiento por hielo, y a continuación a la temperatura ambiente primero 20 ml de una lejía de sosa acuosa al 15%, seguidos por 60 ml de agua. La solución sobrenadante se filtró con succión respecto del precipitado resultante y el material filtrado se concentró por evaporación a • presión reducida. Se recogió el residuo en 240 ml de una solución acuosa al 7,5% de ácido tartárico y la fase 25 acuosa se extrajo con diclorometano. A continuación, la fase acuosa se llevó a pH 10 por adición de 200 ml de una lejía de sosa acuosa al 10% y se extrajo todavía 3 veces más con diclorometano. Las fases de diclorometano reunidas fueron secadas sobre sulfato de sodio, concen- 30 txadas por evaporación bajo presión reducida y secadas en alto vacío. Se- obtuvieron 28,0 g de N-BOC-N'-(2- metoxi) bencil -1, 2 -diamino-etano oleoso, que se hizo reaccionar ulteriormente sin purificación.

C) 5,0 g-del producto precedentemente obtenido se disolvieron en 50 ml de THF bajo una atmósfera de nitrógeno. A ello se añadieron 20 ml de una lejía de sosa acuosa 1 N.

Mediando • enfriamiento por hielo, se añadieron gota a gota a la mezcla de reacción resultante simultáneamente en total 3,05 g de éster bencílico de ácido clorofórmico y una lejía de sosa acuosa 1 N, de manera tal que no se 5 traspasase el valor de pH 10 hacia valores inferiores. Después de haberse completado la adición, se agitó durante una noche a la temperatura ambiente. A continuación se añadieron 150 ml de metil-terc . -butil-éter, la fase acuosa se separó y la fase orgánica se lavó conse- 10 cutivamente 2 veces con 50 ml de agua, 1 vez con 50 ml de una solución acuosa al 15% de ácido tartárico y nuevamente 2 veces con 50 ml de agua. Luego, la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se concentró por evaporación bajo presión reducida y se secó en alto vacío. Se obtuvieron 4,9 g de N-BOC-N' - (2-metoxi) bencil- N ' -Cbo-1 , 2 -diamino-etano, que se hizo reaccionar ulteriormente sin purificación.

D) 4,8 g del producto precedentemente obtenido se disolvie- 20 ron en 50 ml de diclorometano. A ello se añadieron 4,4 g de ácido p-tolueno-sulfónico y la mezcla de reacción se dejó en agitación durante una noche. A continuación, se añadió una solución de 7,5 g de NaOH en 75 ml de agua. La fase orgánica se separó, se lavó una vez con 75 ml de agua y se secó sobre sulfato de sodio. El disolvente se separó por evaporación bajo presión reducida y el producto se secó en alto vacío. Se obtuvieron 3,5 g de N- (2 -metoxi) bencil-N-Cbo-1, 2 -diamino-etano oleoso, que se hizo reaccionar ulteriormente sin purificación.- 30 E) 2,0 g de (2R) -1- [3 , -bis (trifluorometil) benzoil] -2- (1H- indol-3-il-metil) piperazina se disolvieron en 100 ml de diclorometano. A ello se añadieron consecutivamente 0,6 g de trifosgeno, disuelto en 20 ml de diclorometano, y 12 , 0 ml de diisopropil-etilamina, disueltos en 20 ml de diclorometano. La resultante mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a la temperatura ambiente y a continua- # ción se • añadieron gota a gota 2,8 g del compuesto amínico precedentemente obtenido, disueltos en 20 ml de diclorometano. La mezcla de reacción se siguió agitando todavía durante 18 horas y a continuación se lavó 5 consecutivamente con una solución acuosa al 10% de hidrogenosulfato de potasio, con agua y nuevamente con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio. Luego, la fase de diclorometano se secó sobre sulfato de sodio y se concentró por evaporación bajo presión reducida. La cromatografía del residuo en gel de sílice (agente eluyente: mezcla de diclorometano y metanol 3:1) # proporcionó 2,5 g de (2R) -1- [3 , 5-bis (trifluorometil) - benzoil] -2- ( ÍH- indol -3 -il-metil) -4-{2- [N- (2-metoxi- bencil) -N-Cbo-aminoetil] aminocarbonil}piperazina oleosa, que se hizo reaccionar ulteriormente sin purificación.

F) 2,5 g del producto precedentemente obtenido se disolvieron en 400 ml de etanol y se mezclaron con 0,5 g de un catalizador de paladio al 10% sobre carbón activo. A continuación, se hidrogenó a una presión de hidrógeno de 4 bares durante 6 horas. Se separó del catalizador por filtración y el disolvente se concentró por evaporación bajo presión reducida. La cromatografía en gel de sílice (agente eluyente: mezcla de diclorometano y metanol 9:1) 25 proporcionó 1,0 g de un compuesto bruto del título, que se transformó en el hidrocloruro por tratamiento con dietil-éter saturado con HCl, p. f . = 138 hasta 140°C.

De acuerdo con los métodos precedentemente descritos se pueden preparar también los compuestos de la Fórmula I que se exponen en la siguiente Tabla 3 : Tabla 3 : Otros compuestos de la Fórmula I Ejemplo I: Tabletas que contienen (2R) -1- [3 , 5-bis (trifluorometil) -benzoil] -2- ( lH-indol-3 -il -metil) -4-{2- [N- (2 -metoxi-ben-cil) aminoetil] aminocarbonil}piperazina Se prepararon tabletas con la siguiente composición por tableta: Hidrocloruro de (2R) -1- [3 , 5-bis- ( trifluorometil) benzoil] -2- (ÍH- indol -3-il-metil) -4- {2- [N- (2 -metoxi-bencil) aminoetil] aminocarbonil }piperazina 20 mg Almidón de maíz 60 mg Lactosa 135 mg Gelatina (como solución al 10%) 6 mg La sustancia activa, el almidón de maíz y la lactosa se espesaron con la solución al 10% de gelatina. La pasta se desmenuzó y el granulado resultante se llevó sobre una chapa apropiada y se secó a 45 °C. El granulado secado se condujo a través de una máquina desmenuzadora y se mezcló en una mezclador con las otras sustancias coadyuvantes siguientes : Talco 5 mg Estearato de magnesio 5 mg Almidón de maíz 9 mg y luego se comprimió para formar tabletas de 240 mg.

Claims (4)

REIVINDICACIONES

1. - Compuestos de la Fórmula general I en la que R significa hidrógeno o alquilo inferior, 20 R significa hidrógeno o halógeno y R significa hidrógeno o alcoxi inferior, así como sus sales por adición de ácidos fisiológicamente compatibles .

2. - (2R) -1- [3 , 5-bis (trifluorometil) benzoil] -2- (1H- 25 i dol -3 -il -metil) -4 - { 2 - [N- (2 -metoxi -bencil ) aminoetil] - aminocarbonil}piperazina y sus sales por adición de ácidos fisiológicamente compatibles según la reivindicación 1. 3.- Medicamentos, que contienen una cantidad farmacológicamente activa de un compuesto según la reivindicación 30 1 y sustancias coadyuvantes y/o de vehículo farmacéuticas usuales . 4. - Procedimiento para la preparación de compuestos de la Fórmula general I, 35 en la que R significa hidrógeno o alquilo inferior, R? significa hidrógeno o halógeno y R significa hidrógeno o alcoxi inferior, así como sus sales por adición de ácidos fisiológicamente compatibles, caracterizado porque a) se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula II, con un compuesto carbonílico reactivo de la Fórmula general III, O Y en la que Y significa un grupo lábil desalojable por ataque nucleófilo de una amina primaria o secundaria, para formar un compuesto de carbamoílo de la Fórmula general IV, 10 20 en la que Y posee el significado anterior, si por separación del grupo lábil Y a partir de un compuesto obtenido de la Fórmula IV se puede formar un ácido, se 25 añade al compuesto obtenido de la Fórmula IV una base orgánica no nucleófila, y se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula IV a continuación con un compuesto de la Fórmula general V, 35 en la que R10 significa alquilo inferior o un grupo protector de amino y R y R poseen los significados anteriores, y se separa de nuevo a continuación un eventual grupo protector R10 , o b) se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula II con un compuesto de la Fórmula general VI , 15 en la que R 101 -R* y R¿ poseen los significados anteriores, y a continuación se separa un eventual grupo R101 protector de amino; y en caso deseado, un compuesto obtenido de la Fórmula I, en la que R1 significa hidrógeno, se alquila para formar un 20 compuesto de la Fórmula I, en la que R significa alquilo inferior, y un compuesto obtenido de la Fórmula I se transforma en caso deseado en su sal por adición de ácido, o una sal por adición de ácido se transforma en un compuesto libre de la Fórmula I.