MXPA06009085A - Uso de n-(2-aril-propionil)-sulfonamidas para el tratamiento de lesiones de la medula espinal. - Google Patents

Abstract

Las N-(2-aril-propionil)-sulfonamidas de formula general (I) son utiles en el tratamiento de lesiones de la medula espinal. (ver formula I).

Description

USO DE N-(2-ARIL-PROPIONIL)-SULFONAMIDAS PARA EL TRATAMIENTO DE LESIONES DE LA MEDULA ESPINAL CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con el uso de N- (2-aril-propionil) -sulfonamidas de fórmula general (I): (I) en la cual R2 es un grupo arilo, R es un grupo alquilo de C?-C6 lineal o ramificado, trifluorometilo, ciciohexilo, o-tolilo, 3-piridilo, 2-piridil-etilo, p-ciano-fenilmetilo, p-aminofenilmetilo, 3-ciaho-1-propilo, 4-aminobutilo, un grupo alcoxietileno CH3- (CH2)ni- (OC^C^Ími- un grupo en el cual n± es cero o 1 y i es un entero de 1 a 3, o un grupo P?P2N-CH2-CH2- en el cual Pi y P2 son independientemente H, alquilo de C1-C3, benciloxicarbonilo, a-, ß~ o r-piridocarbonilo, carboxicarbonilo o carbalcoxicarbonilo, o Pa y P2, cuando están unidos al átomo de N al cual están ligados forman un residuo de ftalimido,-piperidino, morfolino; P0 es H o alquilo de C1-C3 lineal o ramificado, preferiblemente hidrógeno, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de lesiones de la medula espinal.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las lesiones de la medula espinal (SCI) son una de las condiciones más frustrantes eñ neurología y medicina. La vasta mayoría de pacientes con SCI son jóvenes, y la mayoría sobrevivientes de lesiones significativas enfrentan una perspectiva de recuperación limitada y discapacidad permanente. La incidencia de nuevos de casos de CSI es alta, excediendo 12,000 nuevos casos por año de paraplejia o cuadraplejia en los Estados Unidos (Se hon L. et al. Spine 26,S2-S12, 2001). Aún con un manejo apropiado, la tasa de mortalidad de la SCI ha caido un poco. Como resultado, la prevalescencia de pacientes discapacitados por SCI ahora se aproxima a 200,000 en los Estados Unidos únicamente. La necesidad de intervención aguda efectiva, tanto para limitar el número de pacientes dañados permanentemente como para dar una esperanza real a los recién lesionados, es particularmente sentida. El tratamiento actual de la SCI se limita a una terapia con altas dosis de glucocorticoides, la cual es útil únicamente cuando se administra dentro de una-s horas de la lesión (Brackén .B. et al. The New England Journal of Medicine 322, 1405-1411, 1990) . Los mecanismos por los cuales los esteroides ejercen sus efectos moderadamente benéficos aún no son claros, aunque generalmente se atribuyen a los efectos protectores sobre la peroxidación de lipidos. En realidad, la metilprednisolona suprime la degradación de la membrana y neurofilamentos inhibiendo la peroxidación de lipidos en médulas . espinales lesionadas (Braughler J:M: et al. J. Neurosurg 67, 102-105, 1987). Aún, a pesar de la inadecuación fundamental, el tratamiento con altas dosis de glucocorticoides sigue siendo la única terapia disponible para la SCI. Ahora se sabe que la patogénesis de la SCI implica a las citocinas, particularmente el Factor de la Necrosis Tumoral (TNF) , la expresión del cual contribuye a la muerte neuronal después de la SCI (Beattie M.S. et al. Progress in Brain Research 137, 37-47, 2002) e infiltración de leucocitos. En realidad, la SCI da como resultado una lesión primaria, caracterizada por la perturbación de la estructura neural y vascular, y una cascada de procesos secundarios que conducen colectivamente a la pérdida adicional de tejido. La inflamación postraumática, caracterizada por la acumulación de microglia activada y leucocitos, se piensa contribuye a la patogénesis secundaria (Mautes A.E.M. et al. Physical Therapy 80, 673-687, 2000) . Las estrategias dirigidas a bloquear el flujo de neutrófilos y macrófagos y a la inhibición de la actividad fagocitica y secretora de los macrófagos en la medula espinal lesionada han dado como resultado neuroprotección y función locomotora mejorada (Giulian D. et al. Ann . Neurol . 27, 33-42, .1990; Taoka Y. et al. Neuroscience 79, 1177-1182, 1997). En realidad, de acuerdo al conocimiento disponible, la inhibición selectiva de la quimiotaxis inducida por la interleucina 8 (CXCL8) no es una condición suficiente para la protección contra la SCI. En efecto, la literatura científica identifica numerosos factores implicados en la ideología de la SCI, factores entre los cuales, la CXCL8 ciertamente no aparece como uno de los más importantes: por ejemplo Taoka Y. et al. ( Journal of Neurotrauma 18, 533-543, 2001) reporta que la leucocitopenia e inhibición del reclutamiento de leucocitos por la administración de un anticuerpo monoclonal anti selectina P, un bloqueador especifico de la adhesión de los leucocitos, redujo significativamente las perturbaciones motoras observadas después de la SCI. Además, investigación. reciente ha mostrado niveles elevados en plasma de mediadores inflamatorios, incluyendo la interleucina 2, interlecucina 6, receptor de interleucina 2 soluble, 'y molécula de adhesión intracelular 1 (ICAM-1) en pacientes con SCI prolongada, como posibles factores patógenos del retraso de la recuperación funcional (Segal J.L. et al.

Arch . Phys . Med. Rehábil . 78, 44-47, 1997). La ' US 2001/0016195 describe el tratamiento de un número de diferentes patologías, incluyendo la SCI, por medio de antagonistas, por ejemplo anticuerpos de varias citocinas incluyendo .la IL-1, IL-6 e IL-8. Este documento no relaciona la SCI con la inhibición de la IL-8. Se sigue que, de los datos de la literatura, una inhibición especifica de la respuesta inflamatoria o, al menos, del reclutamiento de leucocitos parecería ser necesaria para la inhibición de la SCI. Las N- (2-aril-propionil) -sulfonamidas de la fórmula general (I) anterior son descritas en la EP 1123276 y en la Solicitud de Patente Europea EP 04101202.2. Se reporta que las sulfonamidas descritas ahi son útiles, por ejemplo, en la prevención y tratamiento de daño tisular debido al reclutamiento exacerbado de neutrófilos polimorfonucleares (leucocitos PMN) en los sitios inflamatorios .

LA INVENCIÓN Ahora se ha encontrado de manera sorprendente que las sulfonamidas de fórmula (I), y particularmente las sulfonamidas de fórmula (la) (la) donde R representa de uno a tres sustituyentes, los cuales son los mismos o diferentes, seleccionado de hidrógeno, átomos de halógeno, alquilo de C?~C4, alcoxi de C1-C4, hidroxi, aciloxi de C?-C , ciano, nitro, amino, acilamino de C3.-C3, halo-alquilo de C1-C3, halo-a?coxi de.C?-C3, benzoilo, 4- (2-metil-propil) -fenilo, 3-fenoxi-fenilo, 2- [4- (l-oxo-2-isoindolinil) fenilo] , 5-benzoil-tien-2-ilo, 4-tienoilo-fenilo, halogenoalquilsulfoniloxi de C?-C2, son efectivos en la protección contra el daño funcional de la SCI. R, en los compuestos de fórmula (la) , representa preferiblemente hidrógeno, 4-isobutil, 3-benzoil, 4-trifluorometansulfoniloxi . La protección del daño funcional de la SCI ha sido demostrada en un modelo experimental en ratas, descrito con detalle - aqui posteriormente, usando dos compuestos representativos de fórmula (I), a saber el compuesto de fórmula (II) y su sal de lisina (L-lisina o DL-lisina) , y el compuesto de fórmula (III) . Se encontró que ambos compuestos fueron muy activos en este modelo in vivo .

(II) (R)- ibuprofen metansulfonamida (III) R-2- [ ( 4 ' -trifluorometansulfonilixi) fenil] -N-metansulfonilo propionamida El compuesto de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (III) también reducen el daño tisular, evaluado como una extensión de la cavidad postraumática, apoptosis de oligodendrocitos e infiltración de leucocitos. La invención es ilustrada en el siguiente Ejemplo. • EJEMPLO Ratas Sprague-Dawley (hembra) con un peso de 240-260 g fueron mantenidas en instalaciones animales bajo condiciones de alojamiento estándar (22±2°C, humedad del 65%, luz artificial de 06.00-20.00 h) . Una dieta seca estándar y agua estuvieron disponibles ad libitum . La SCI en las ratas fue efectuada como se reportó anteriormente (Gorio A. et 1. Proc . Na ti . Acad. Sci . USA 99, 9450-9455, 2002) . El aparato lesionante es controlado por computadora y está libre de la influencia de la fuerza de la gravedad. La fuerza aplicada fue de 1N por 1 segundo. La recuperación de la discapacidad de los miembros traseros fue evaluada por medio de la "prueba de locomoción libre" efectuada a las 24 horas, 4, 7, 11, 15, 19 y 27 dias después de la SCI. La "prueba de locomoción libre" permite la detección de la colocación de las patas, y rotación de la articulación. La calidad de recuperación funcional es expresada cualitativamente de acuerdo a la "escala BBB" desarrollada en la Universidad de Ohio. Esa prueba permite la cuantificación del déficit de locomoción libre de los miembros traseros observando sus movimientos en el espacio abierto libre de obstáculos: 0 - La rata lesionada no puede mover sus miembros. 1 - Movimiento pequeño de una articulación (cadera o rodilla) De 2 a 6 - Movimiento de extensión progresiva de las 3 articulaciones. 7 - Buen movimiento de las 3 articulaciones 8 - Los animales caminan sin soporte plantar del peso De 9 a 11 - Los animales caminan ocasionalmente a progresivamente con mayor frecuencia con soporte plantar < del peso. 12 - Coordinación ocasional de los miembros posteriores y miembros anteriores durante el andar_ De 13 a 14 - Coordinación progresiva con los miembros anteriores. 15 - Soporte plantar consistente del peso y coordinación durante el andar; movimiento ocasional de los dedos durante el avance. De 16 a 18 - Tendencia progresiva a mover los dedos; durante el andar la pata está predominantemente en posición paralela al cuerpo. 19 - La posición de la pata es correctamente paralela al cuerpo, y la cola se mantiene abajo durante el andar. 20 - Tambaleo lateral y locomoción inestable. 21 - Condición normal • La apoptosis de los oligodendrocitos se determinó al nivel de los gracilis y el fascículo acunado (3mm rostralmente desde el sitio de la lesión por contusión) 28 dias después de la SCI usando dUTP mediado por deoxinucleotidiltransferasa terminal y metodología de marcación (TÚNEL) .

La infiltración de leucocitos fue estimada cuantitativamente por células CD68 positivas los dias 1 y 7 después de la SCI. La extensión de la cavidad postraumática se efectuó por técnicas histológicas clásicas 28 dias después de la SCI. Se consideraron los siguientes _ grupos experimentales de animales : Grupo 1 (n=28) ratas tratadas con solución salina después de la SCI Grupo 2 (n=28) ratas tratadas con compuesto de fórmula (II) después de la SCI Grupo 3 (n=28) ratas tratadas con compuesto de fórmula (III) después de la SCI Los animales fueron tratados con solución salina o compuesto de fórmula (II) (15 mg/kg) por inyección de i.v. dentro de 30 minutos después de la SCI, entonces s.c. cada 2 horas en las siguientes 6 horas. Los siguientes dias los animales fueron tratados s.c. a las 8 am y 5 pm hasta el 7th dia después de la SCI. Los animales fueron tratados con compuesto de fórmula (III) (8 mg/kg) por inyección i.v. dentro de los 30 minutos después de la SCI, entonces s.c. 24 horas después de la SCI. Los siguientes dias los animales fueron tratados s.c. cada 36 horas hasta el 7th dia después de la SCI, Además se evaluó la eficacia del compuesto de fórmula (II) después del tratamiento por infusión continua subcutánea (s.c.) tras la recuperación de la incapacidad de los miembros posteriores. La . bomba fue implantada subcutáneamente en la rata. Se hizo una pequeña incisión en la piel entre la escápula y, usando un hemostato, se formó una cavidad separando los tejidos conectivos s.c._ La bomba fue insertada en la cavidad con el moderador de flujo apuntando alejándose de la incisión. La incisión en la piel fue cerrada con grapas para heridas. La calidad de la recuperación funcional fue evaluada a las 24 horas, 4, 7, 11, 14, 24 y 27 dias después de la SCI. Se consideraron los siguientes grupos experimentales de animales: Grupo 1 (n=8) ratas tratadas con solución salina por infusión s.c. comenzando a los 30 minutos después de la SCI. Grupo 2 (n=8) rafas tratadas con compuesto de fórmula (II) a una velocidad de infusión de 2.5 mg/kg/h comenzando a los 30 minutos después de la SCI. Grupo 3 (n=8) ratas tratadas con compuesto de fórmula (II) a una velocidad de infusión de ' 5 mg/kg/h comenzando a los 30 minutos después de la SCI. Grupo 4 (n=8) ratas tratadas con compuesto de fórmula (II) a una velocidad de infusión de 10 mg/kg/h comenzando a los 30 minutos después de la SCI. Grupo 5 (n=8) ratas tratadas con compuesto de fórmula (II) a una velocidad de infusión de 10 mg/kg/h comenzando a las 24 horas después de la SCI. Los animales fueron tratados con solución salina o compuesto de fórmula (II) por infusiones s.c. hasta el séptimo dia después de la- SCI. Los datos fueron analizados por ANOVA seguida por la prueba t de Dunnett. El significado estadístico fue aceptado a P< 0.05.

RESULTADOS El efecto del compuesto de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (III) sobre la recuperación funcional (puntaje motor) expresado cuantitativamente de acuerdo a la "escala BBB", fue evaluada a diferentes tiempos después de la SCI. La Figura (1) muestra el efecto de la (R) -ibuprofen metansulfonamida, y la figura (2) muestra el efecto de la R-2 [ (4' -trifluorometansulfoniloxi) fenil] N-metansulfonilpro-pionamida. Todos los animales sometidos a SCI se vieron afectados de manera profunda inmediatamente después de la lesión (puntaje motor de 0 para todos los grupos) y no fue evidente una recuperación significativa en el grupo tratado con vehículo (solución salina) hasta el séptimo dia después de la SCI. El tratamiento con compuesto de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (III) promovió significativamente la recuperación funcional de los miembros posteriores después de la SCI. La recuperación fue progresiva haciendo el periodo más efectivo entre el cuarto y el décimo primer dia después de la SCI. La evaluación inmunohistológica de la infiltración de leucocitos fue evaluada al dia 1 y a los 7 dias después de la SCI. Como se muestra en la Tabla 1, el compuesto de fórmula (II) redujo dramáticamente la infiltración de leucocitos (80% de inhibición) a las 24 horas y 7 dias después de la SCI . También se observó una inhibición similar del reclutamiento de leucocitos en ratas tratadas con compuestos de fórmula (III) (no se muestran los datos) . Es bien sabido que la apoptosis de los oligodendrocitos es un evento crucial durante las etapas iniciales y después de la lesión traumática de la medula espinal, y que el grado de recuperación neurológica también depende de que tanto pueda ser contrarrestado o atenuado el proceso. La muerte de los oligodendrocitos produce la desmielinización de los axones disponibles por la lesión, produciendo de este modo la pérdida de la capacidad para conducir impulsos eléctricos a través del sitio de la lesión. La atenuación farmacológica de la apoptosis de los oligodendrocitos es de este modo un blanco primario de cualquier tratamiento farmacológico que tenga como propósito promover la recuperación después de la SCI. Como se muestra en la Tabla 2, el tratamiento con compuesto de fórmula (II) y compuesto de fórmula (III) bloqueó la apoptosis oligodendrocitica determinada 28 dias después de la SCI [85% y 65% de inhibición después del tratamiento de ratas con (R) -ibuprofen metansulfonamida y R-2- [4' -tri- fluorometansulfoniloxi) fenil] -N-metansulfonil propionamida, respectivamente] . Finalmente, se investigó el efecto del compuesto de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (III) sobre el daño al tejido inducido por la SCI. Como se muestra en la Tabla 3, el tratamiento con los compuestos descritos anteriormente redujo significativamente el daño al tejido en el sitio de la lesión y la extensión de la cavidad postraumática 28 dias después de la SCI. A continuación evaluamos la eficacia del compuesto de fórmula (II) después de la infusión continua s.c. sobre la recuperación funcional. Como se muestra en la figura (3) el tratamiento con el compuesto de fórmula (II) a una velocidad de infusión de 5 mg/kg/h o 10 mg/kg/h promovió significativamente la recuperación funcional de los miembros posteriores después de la SCI evaluada hasta 14 dias después de la SCI. Además, el compuesto de fórmula (II) administrado por infusión s.c. a una velocidad de infusión de 10 mg/kg/h promovió significativamente la recuperación funcional de los miembros posteriores aún si la administración del compuesto comenzó 24 horas después de la SCI. Como se muestra en la figura (4) la recuperación fue progresiva siendo el periodo más efectivo entre el séptimo y el vigésimo cuarto dia después de la SCI. En conclusión, los datos reportados anteriormente muestran claramente como el compuesto de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (III) pueden ser usados de manera ventajosa en la práctica médica en la promoción de la recuperación funcional después de la SCI.

Tabla 1. Número de leucocitos infiltrados (media ± DE; n = 8) Tiempo a partir de 1 dia 7 dias la SCI Solución Fórmula Solución Fórmula • salina (II) salina (II) Epicentro 125 ± 36 24±3*** 235 ± 54 g+3*** Periferia 56 ± 13 +1*** 99 ± 32 +2*** ***p<0.001 animales tratados con (R) -ibuprofen metansulfonamida contra animales tratados con solución salina.

Tabla 2. Número de núcleos apoptóticos oligodendrocíticos (media ± DE; n = 12) *P < 0.05 y *** P < 0.001 animales tratados con-10 fármaco contra animales tratados con solución salina Tabla 3. Porcentaje de tejido disponible en el sitio de la lesión (media ± DE; n= 12) ±5 0 ** P < 0.01 animales tratados con fármaco contra animales tratados con solución salina Para los propósitos terapéuticos considerados, las composiciones farmacéuticas adecuadas pueden ser preparadas 5 usando técnicas y excipientes convencionales como aquellos descritos en "Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook" Mack Publishing Co., New York, 18va Ed., 1990. Las composiciones de la invención serán administradas, de manera preferible, intramuscular, intravenosamente, como un bolo, en vista del carácter urgente de la patología a ser tratada, aún cuando no pueden ser excluidas otras rutas de administración, por ejemplo la ruta oral. La dosis promedio diaria dependerá .de varios factores como la severidad de la enfermedad y las condiciones del paciente (edad, sexo y peso) . La dosis generalmente variará de uno a unos cuantos mg hasta 1500 mg para los compuestos diariamente, subdivididas opcionalmente en administraciones múltiples. También pueden administrarse dosis más altas gracias a la baja toxicidad de los compuestos de la invención, aún para tratamientos a largo plazo.

Claims (4)

1. REIVINDICACIONES 1. Uso de N- (2-aril-propionil) -sulfonamidas de fórmula general (I) : en la cual R2 es un grupo arilo, R es un grupo alquilo de C?-C6 lineal o ramificado, trifluorometilo, ciciohexilo, o-tolilo, 3-piridilo, 2- piridil-etilo, p-ciano-fenilmetilo, p-aminofenilmetilo, 3- ciano-1-propilo, 4-aminobutilo, un grupo alcoxietileno CH3- (CH2)ni_ (OCH2CH2)mi- un grupo en el cual ni es cero o 1 y i es un entero de 1 a 3, o un grupo P?P2N-CH2-CH2- en el cual Pj. y P2 son .independientemente H, alquilo de C1-C3, benciloxicarbonilo, -, ß- o ó-piridocarbonilo, carboxicarbonilo o carbalcoxicarbonilo, o Pi y P2, cuando están unidos al átomo de N al • cual están ligados forman un residuo de ftalimido, piperidino, morfolino; R' es H o alquilo de C1-C3 lineal o ramificado, preferiblemente hidrógeno, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de lesiones de la medula espinal.
2. 2. Uso según la reivindicación 1 de los compuestos de fórmula (la) (la) donde R representa de uno a tres sustituyentes, los cuales son los mismos o diferentes, seleccionado de hidrógeno, átomos de halógeno, alquilo de Cx-C4, alcoxi de C?-C4, hidroxi, aciloxi de C?~C7, ciano, nitro, amino, acilamino de C1-C3, halo-alquilo de O.-C3, halo-alcoxi de C1-C3, benzoilo, 4- (2-metil-propil) -fenilo, 3-fenoxi-fenilo, 2- [4- (l-oxo-2-isoindolinil) fenilo] , 5-benzoil-tien-2-ilo, 4-tienoilo-fenilo, halogenoalquilsulfoniloxi de C?-C2.
3. 3. Uso según la reivindicación 2 donde R representa hidrógeno, 4-isobutilo, 3-benzoilo, 4-trifluoro-metansulfoniloxi .
4. 4. Uso según la reivindicación 2 de los compuestos de fórmula (II) y (III) . (II) (in; 10