PIRIMIDINA-SÜLFAMIDAS Y SU USO COMO ANTAGONISTAS DE RECEPTOR DE ENDOTELI A
DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención se refiere a pirimidina-sulfamidas novedosas de la fórmula general I su uso como ingredientes activos en la preparación de composiciones farmacéuticas . La invención también se refiere a aspectos relacionados que incluyen procesos para la preparación de los compuestos, composiciones farmacéuticas que contienen uno o más compuestos de la fórmula general I, y especialmente su uso como antagonistas de receptor de endotelina. Las endotelinas (ET-1, ET-2, y ET-3) son péptidos de 21 aminoácidos producidos y activos en casi todos los tejidos (Yanagisawa M et al.: Nature (1988) 332:411). Las endotelinas son vasoconstrictores potentes y mediadores importantes de funciones cardiaca, renal, endocrina e inmune (McMillen A et al.: J Am Coll Surg (1995) 180:621). Intervienen en la broncoconstricción y regulan la liberación de neurotransmisores , activación de células ~ inflamatorias, fibrosis, proliferación celular y diferenciación celular (Rubanyi GM et al.: Pharmacol Rev (1994) 46:328). Dos receptores de endotelina se han clonado y caracterizado en mamíferos (ETA, ETB) (Arai . H et al.: Nature (1990) 348:730; Sakurai T et al .-?·· Nature , (1990) 348:732). El Ref.163574 receptor de ETA se caracteriza por mayor afinidad para ET-1 y ET-2 que para ET-3. Es predominante en células de músculo liso vascular y es mediador de la vasoconstricción y respuestas proliferativas (Ohlstein EH et al.: Drug Dev Res (1993) 29:108). Por el contrario, el receptor de ETB tiene afinidad equivalente para los tres isopéptidos de endotelxna y se une a la forma lineal de endotelilna, tetra-ala-endotelina, y sarafotoxina S6C (Ogawa Y et al.: BBRC (1991) 178:248). Este receptor está localizado en el endotelio vascular y músculos lisos, y también es particularmente abundante en pulmón y cerebro. El receptor de ETB de células endoteliales es mediador de respuestas vasodilatadoras transitorias para ET-1 y ET-3 a través de la lilberación de óxido nítrico y/o prostaciclina mientras que el receptor de ETB de células de músculo liso ejerce acciones de vasoconstricción (Summer MJ et al.: Brit J Pharmacol (1992) 107:858). Los receptores de ETA y ETB son- - altamente- similares en estructura y pertenecen a la superfamilia de receptores acoplados a proteína G. Un papel fisiopatológico ha sido sugerido para ET-1 en vista de -sus niveles incrementados en el plasma y tejido en varios -estados de enfermedad tales como hipertensión, hipertensión pulmonar, sepsia, aterosclerosis, infarto de miocardio agudo, insuficiencia cardiaca congestiva, insuficiencia renal, migraña y asma. Como consecuencia, los antagonistas de receptor de endotelina - han sido estudiados extensivamente como agentes terapéuticos potenciales . Los antagonistas de receptor de endotelina han demostrado eficacia preclínica y/o clínica en varias enfermedades tales como vasoespasmo cerebral después de hemorragia subaracnoidea, insuficiencia cardiaca, hipertensión pulmonar y sistémica, inflamación neurogénica, insuficiencia renal e infarto al miocardio . Hoy en día, solo un antagonista receptor de endotelina (Tracleer™) es comercializado y algunos están en pruebas clínicas. Sin embargo, algunas de estas moléculas poseen un número de debilidades tales como síntesis compleja, baja solubilidad, peso molecular alto, farmacocinética deficiente o problemas de seguridad (v.gr., incrementa la enzima hepática) . Además, no se conoce la contribución de diferir el bloqueo de receptor de ETA/ETB al resultado clínico. Por lo tanto, el ajuste de las propiedades fisicoquímicas y farmacocinéticas y el perfil de selectividad de cada antagonista para una indicación clínica dada es obligatorio. Hasta ahora, no se han reportado antagonistas de receptor de endotelina con una estructura de núcleo de pirimidina que contenga una unidad de sulfamida [2, 3, 5, 6, 8]. De manera sorprendente, ahora los inventores de la presenta invención han descubierto una nueva clase de piridinas sustituidas de la estructura que se da más adelante y han encontrado que permiten el jxtste específico- anteriormente descrito y, además, se han identificado compuestos que presentan perfiles de unión mixtos así como selectivos a ETA- . La actividad inhibidora de los compuestos de la fórmula general I sobre receptores de endotelina se puede demostrar mediante el uso de los procedimientos de prueba que se describen a continuación. Para la evaluación de la potencia y eficacia de los compuestos de la fórmula general I se usaron las siguientes pruebas : 1) Inhibición de unión de endotelina a membranas de células de
CHO que portan receptores de ET humanos : Para estudios de unión de competencia, se usaron membranas de células de CHO que expresaban receptores de ETA o
ETB recombinantes humanos. Membranas microsomales de células de CHO recombinantes se prepararon y se hizo la prueba de unión como se describió antes (Breu V. , et al, FEBS Lett 1993;
334:210). La prueba se realizó en 200 ul de regulador de 50 mM de pH tris /HCl, pH 7.4, con la inclusión de 25 mM de MnCl2, 1 mM de EDTA y 0.5% (p/v) de BSA en placas de microtitulación de propipropileno . Membranas que contenían 0.5 ug de proteína se incubaron durante 2 horas a 20°C con 8 pM de [125I]ET-1 (4000 cpm) y concentraciones cada vez mayores de antagonistas no marcados . La unión máxima y mínima se estimó en muestras sin y con 100 nM ET-1, respectivamente. Después de 2 horas, las membranas se filtraron sobre placas de filtro que contenían filtros de GF/C (Unifilterplates de Canberra Packard S.A. Zurich, Suiza) . A cada pozo se añadieron 50 uL de una mezcla de escintilación ( icroScint 20 Canberra Packard S.A. Zurich, Suiza) y las placas de filtro se contaron en un contador de microplacas (TopCount, Canberra Packard S.A. Zurich, Suiza) . Todos los compuestos de prueba se disolvieron, se diluyeron y se añadieron en DMSO. La prueba se realizó en presencia de 2.5% de DMSO que se encontró que no interfería significativamente con la unión. Se calculó CI50 como la concentración de antagonista que inhibía 50% de la unión específica de ET-1. Para compuestos de referencia, se encontraron los siguientes valores de CI50: células ETA: 0.075 nM (n=8) para ET-1 y 118 nM (n=8) para ET-3; células ETB: 0.067 nM (n=8) para ET-1 y 0.092 nM (n=3) para ET-3. Los valores de CI50 obtenidos con los compuestos de la fórmula general I se dan en la tabla 1. TABLA 1
Compuesto de ejemplo CI50 [nM] ETA ETB
Ej emplo 1 0.28 174
Ejemplo 2 0.22 222
Ejemplo 3 0.20 120
E emplo 4 1.27 560 2) Inhibición de contracciones inducidas por endotelina sobre anillos aórticos de rata (receptores de ETA) y anillos traqueales de rata (receptores de ETB) aislados : La potencia inhibidora funcional de los antagonistas de endotelina se evaluó por su inhibición de la contracción inducida por endotelina-1 sobre los anillos aórticos de rata (receptores de ETA) y la contracción inducida por sarafotoxina S6c sobre anillos traqueales de rata (receptores de ETB) . Ratas Wistar adultas fueron anestesiadas y se les extrajo sangre. La aorta torácica o tráquea fueron extirpadas, disecadas y cortadas en anillos de 3-5. El endotelio/epitelio se removió mediante frotación suave de la superficie íntima. Cada anillo se suspendió en 10 mi de baño de órganos aislado con solución de rebs-Henseleit (en mMr- NaCl 115, KCl 4.7, MgS04 1.2, KH2P04 1.5, NaHC03 25, CaCl2 2.5, glucosa 10) mantenida a 37°C y se desgasificó con 95% en 02 y 5% de C02. Los anillos se conectaron para forzar transductores y la tensión isométrica se registró (EMKA Technologies SA, Paris, Francia) . Los anillos se estiraron a una tensión de reposo de 3 g (aorta) o 2 g (tráquea). Las dosis acumulativas de ET-1 (aorta) o sarafotoxina S6c (tráquea) se añadieron después ~de una incubación de 10 minutos con el compuesto de prueba o su vehículo. La potencia de inhibición de compuesto de prueba se evaluó al calcular la relación de concentración, es decir, el cambio a la derecha de la CE50 inducida por - diferentes concentraciones de compuesto de prueba. CE50 es la concentración de endotelina necesaria para obtener una contracción semi-máxima, pA2 es el logaritmo negativo de la concentración de antagonista que induce un cambio de dos veces en el valor de CE50. Los valores de pA2 obtenidos con los compuestos de la fórmula general I se dan en la tabla 2. TABLA 2 Compuesto de ejemplo Valor de pA2 Aorta Tráquea
Ejemplo 1 6.90 5.29 Ejemplo 2 8.48 <5.0
Debido a su capacidad para inhibir la unión de endotelina, los compuestos descritos que se pueden usar para tratamiento de enfermedades, que están asociadas con un incremento en vasoconstricción, proliferación o inflamación debido a endotelina. Ejemplos de -esas enfermedades son hipertensión, hipertensión pulmonar, enfermedades coronarias, insuficiencia cardiaca, isquemia. renal y miocardial, insuficiencia renal, isquemia cerebral, demencia, migraña, hemorragia subaracnoidea, síndrome de Raynaud, úlceras digitales e hipertensión portal . También se pueden usar en el tratamiento o prevención de aterosclerosis , restenosis después de angioplastia de balón o stent, inflamación, úlcera de estómago y duodeno, cáncer, melanoma, cáncer de próstata, hipertrofia prostética, disfunción eréctil, pérdida del oído, amaurosis, bronquitis crónica, asma, fibrosis pulmonar, septicemia por organismos gram negativos, choque, anemia de células falciformes, glomerulonefritis , cólico renal, glaucoma, enfermedades de tejido conectivo, terapia y profilaxis de complicaciones diabéticas, complicaciones de cirugía vascular o cardiaca o después de trasplante de órganos, complicaciones de tratamiento con ciclosporina, dolor, hiperlipidemia así como otras enfermedades, que actualmente se sabe que están relacionadas con endotelina. Los compuestos se pueden administrar por vía oral, rectal, parentelal, v.gr., por administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, intratecal o transdérmica o por vía sublingual o como preparación oftálmica o se pueden administrar con aerosol. Ejemplos de aplicaciones son cápsulas, tabletas, suspensiones o soluciones administradas por vía oral, supositorios, inyecciones, gotas para los ojos, pomadas o aerosoles/nebulizadores . Las aplicaciones _ preferidas son intravenosas, intramusculares o administraciones "orales así como gotas para los ojos. La dosis usada depende del tipo del ingrediente activo específico, la edad y los requerimientos del paciente y el tipo de - aplicació . Generalmente, se consideran dosis de 0.1 - 50 mg/kg de .peso corporal por día. Las preparaciones con compuestos pueden contener excipientes inertes o también excipientes farmacodinámicamente activos. Tabletas o granulos, or ejemplo, puede contener un número de agentes de unión, excipientes de llenado, sustancias de vehículo o diluyentes. La presente invención se refiere a pirirnidina-sulfamidas de la fórmula general I,
Fórmula General I en donde R1 representa alquilo inferior-O- (CH2)n- , cicloalquilo-O- (CH2)n-, cicloalquilo-CH2-0- (CH2) n- ; R2 representa-CH3; Ra-Y- (CH2) m- ; R3 representa arilo; heteroarilo; R4 representa hidrógeno; ' trifluorometilo; alquilo inferior; alquilo inferior-amino; alquiloxi inferior; alquiloxi inferior-alquiloxi inferior; hidroxi-alquiloxi inferior; alquilo inferior-sulfinilo; alguiltio inferior; alquiltio inferior-alquilo . inferior; hidroxi-alquilo inferior; alquiloxi inferior-alquilo inferior; hidroxi-alquiloxi inferior-alquilo inferior; hidroxi-alquilamino inferior; alquilamino inferior-alquilo inferior; amino; di-alquilamino inferior; [N- (hidroxi-algü lo inferior) -N- (alquilo inferior) ]-amino; arilo; arilamino; arilo-alquilamino inferior; ariltio; arilo-alquiltio inferior; ariloxi; arilo-alquiloxi inferior; arilo-alquilo inferior; arilosulfinilo; heteroarilo; heteroariloxi ; heteroarilamino; heteroariltio; heteroarilo-alqu lo inferior; heteroarilo-sulfinilo; heterociclilo ; heterociclilo-alquiloxi inferior; heterocicliloxi ; heterociclilo-amino; heterociclilo-alquilamino inferior; heterocicliltio ; heterociclilo-alquilo inferior-tio; heterociclilo-alquilo inferior; heterociclilsulfinilo; cicloalgüilo; cicloalguiloxi ; cicloalguilo-alquiloxi inferior; cilloalquilamino; cicloalguilo-alguilamino Inferior? cicloalquilo-tio; cicloalquilo-alguiltio inferior; cicloalquilo-alquilo inferior; cicloalguilsulfinilo ; R6 representa hidrógeno o -metilo; X representa oxigeno; azufre; -C¾- o un enlace; Y representa un enlace, -0-; -NH-; -S02-NH- ; -NH-S02-NH-; -0-C0-; -CO-0- ; -O-CO-NH- ; -NH-C0-0-; -NH-CO- H-; n representa los enteros 2, 3 ó 4; m representa los enteros 2, 3 ó 4; Ra representa arilo, heteroarilo, alquilo inferior, cicloalquilo, hidrógeno; y enantiómeros ópticamente puros, mezclas de enantiómeros tales como por ejemplo racematos, diastereómeros ópticamente puros, mezclas - de diastereómeros, racematos diastereoméricos, mezclas de racematos diastereoméricos y las formas meso y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . En las definiciones de la fórmula general I - si no se establece otra cosa - la expresión inferior significa grupos de cadena recta o ramificada con uno a siete átomos de carbono, preferiblemente 1 a 4 átomos de carbono. Ejemplos de grupos alquilo inferior y alcoxi inferior son metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec. -butilo, ter-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, iso-butoxi, sec-butoxi y ter-butoxi . Los grupos alquilenodioxi inferior son preferiblemente grupos metilenodioxi y etilenodioxi . Ejemplos de grupos alcanoilo inferior son acetilo, propanol y butanoilo . Alquenilo inferior significa v.gr., vinileno, propenileno y butenileno. Alquenilo inferior y alquinilo inferior significa grupos como etenilo, propenilo, butenilo, 2-metil-propenilo, y etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, 2-metil-pentinilo . Alqueniloxi inferior significa aliloxi, viniloxi y propeniloxi. La expresión cicloalquilo significa un anillo de hidrocarburo cíclico saturado con 3 a 7 átomos de carbono, v.gr., ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexyl y cicloheptilo, que pueden ser sustituidos con grupos alquilo inferior, hidroxi-alquilo inferior, amino-alquilo inferior, y alcoxi inferior-alquilo inferior. La expresión heterociclilo significa anillos de cuatro, cinco, seis o siete miembros saturados o insaturados (pero no aromáticos) , que contienen uno o dos átomos de nitrógeno, oxígeno o azufre que pueden ser los mismos o diferentes y esos anillos pueden ser adecuadamente sustituidos con alquilo inferior, alcoxi inferior, v.gr., piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, 1 , -dioxanilo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidropirrolilo, dihidroimidazolilo, dihidropirazolilo, pirazolidinilo y derivados sustituidos de esos anillos con sustituyentes como se delineó anteriormente. La expresión heteroarilo significa anillos aromáticos de seis miembros que contienen uno a cuatro átomos de nitrógeno, anillos aromáticos de seis miembros benzo-fusionados que contienen uno a tres átomos de nitrógeno, anillos aromáticos de cinco miembros que contienen un átomo de oxígeno o un átomo de nitrógeno o un átomo de azufre, anillos aromáticos de cinco miembros benzo-fusionados que contienen un átomo de oxígeno o un átomo de nitrógeno o un átomo de azufre, anillos aromáticos de cinco miembros que contienen un átomo de oxígeno y un átomo de nitrógeno y derivados benzo-fusionados de los mismos, anillos aromáticos de cinco miembros que contienen un átomo de azufre y un átomo de nitrógeno y derivados benzo-fusionados de los mismos, anillos aromáticos de cinco miembros que contienen dos átomos de nitrógeno y derivados benzo-fusionados de los mismos, anillos aromáticos de cinco miembros que contienen tres átomos de nitrógeno y derivados benzo-fusionados de los mismos o el anillo de tetrazolilo; v.gr., furañilo, tienilo, pirrolilo, piridinilo, pirimidinilo, indolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, imidazolilo, triazinilo, tiazinilo, tiazolilo, isotiazolilo, piridazinilo, oxazolilo,. isoxazolilo, 5-oxo-l,2,4-oxadiazolilo, ' 5~oxo-l , 2 , 4-tiadiazolilo, 5-tioxo-l, 2 , 4-oxadiazolilo, 2-oxo-l, 2 , 3 , 5-oxatiadiazolilo, por lo que esos anillos pueden ser sustituidos con alquilo inferior, alquenilo inferior, amino, amino-alquilo inferior, halógeno, hidroxi, alcoxi inferior, trifluorometoxi , trifluorometilo, carboxilo, carboxamidilo, tioamidilo, amidinilo, alcoxi inferior-carbonilo, ciano, hidroxi-alquilo inferior, alquilo inferior-oxi-alquilo inferior u otro anillo de heteroarilo o heterociclilo (v.gr., Í7]). La expresión arilo representa anillos aromáticos no sustituidos así como mono-, di- o tri-sustituidos con 6 a 10 átomos de carbono como anillos de fenilo o naftilo que pueden ser sustituidos con arilo, halógeno, hidroxi, alquilo inferior, alquenilo inferior, alquinilo inferior,- " alcoxi inferior, alqueniloxi inferior, alquinilo inferior-alquilo inferior-oxi , alquenileno inferior, alquilenoxi inferior o alquilenodioxi inferior que forma con el anillo de fenilo un anillo de cinco o seis miembros, hidroxi-alquilo inferior, hidroxi-alquenilo inferior, hidroxi-alquilo inferior-alquinilo .inferior, alquiloxi inferior-alquilo inferior, alquiloxi inferior-alquiloxi inferior, trifluorometilo, trifluorometoxi , cicloalquilo, hidroxi-cicloalquilo, heterociclilo, heteroarilo. Las sales farmacéuticamente aceptables de expresión abarcan ya sea sales con ácidos inorgánicos o ácidos orgánicos como ácidos halogenohídricos , v.gr. , ácido clorhídrico o bromhídrico; ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido acético, ácido maleico, ácido tartárico, ácido metilsulfónico, ácido p-toluoilsulfónico y similares o en el caso del compuesto de la fórmula general I es de naturaleza ácida con una base inorgánica como una base de metal alcalino o de metal alcalinotérreo, v.gr., hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de calcio y similares. Los compuestos de la fórmula general I pueden tener uno o más átomos de carbono asimétricos y se pueden preparar en forma de enantiómeros o diastereómeros ópticamente puros, mezclas de enantiómeros o diastereómeros, racematos diastereo éricos, mezclas de racematos diastereoméricos y también en la forma meso. La presente invención abarca todas esas formas. Las mezclas se pueden separar de una manera conocida como tal, es decir, cromatografía en columna, cromatografía de capa delgada, CLAE. o cristalización. Debido a su capacidad para inhibir la unión de endotelina, los compuestos descritos de la fórmula general I y sus sales farmacéuticamente aceptables se pueden usar para tratamiento de ¦ enfermedades que están asociadas con un incremento en vasoconstricción, proliferación o inflamación debida a endotelina. Ejemplos de dichas enfermedades son hipertensión, enfermedades coronarias, insuficiencia cardiaca, isquemia renal y miocardial, insuficiencia renal, isquemia cerebral, demencia, migraña, hemorragia subaracnoidea, síndrome de Raynaud, hipertensión portal e hipertensión pulmonar. También se pueden usar para el tratamiento o prevención de arterosclerosis , restenosis después de angioplastia de balón o stent, inflamación, úlcera de estómago y duodeno, cáncer, hipertrofia prostética, disfunción eréctil, pérdida del oído, amaurosis, bronquitis crónica, asma, septicemia por organismos gram negativos, choque, anemia de células falciformes, glomerulonefritis, cólico renal, glaucoma, terapia y profilaxis de complicaciones diabéticas, complicaciones de cirugía vascular o cardiaca o después de trasplante de órganos, complicaciones de tratamiento de ciclosporina, dolor, hiperlipidemia así como otras enfermedades que se sabe actualmente que están relacionadas con endotelina. Estas composiciones se pueden administrar en forma enteral u oral, v.gr. , como tabletas, grageas, cápsulas de gelatina, emulsiones, soluciones o suspensiones, en forma nasal como aspersiones o rectalmente en forma de supositorios. Estos compuestos también se pueden administrar por vía intramuscular, parenteral o intravenosa, v.gr., en forma de soluciones inyectables . Estas composiciones farmacéuticas pueden contener los compuestos de la fórmula general I así como sus sales f rmacéuticamente aceptables en combinación con excipientes inorgánicos y/u orgánicos que son usuales en la industria ' farmacéutica como lactosa, maíz o derivados de los mismos, talco, ácido esteárico o sales de estos materiales. Para cápsulas de gelatina se pueden usar aceites vegetales, ceras, grasas, polioles líquidos o semilíguidos . Para la preparación de soluciones y jarabes, se pueden usar, v.gr., agua, polioles, sacarosa, glucosa. Los compuestos inyectables se pueden preparar mediante el uso de v.gr., agua, polioles, alcoholes, glicerina, aceites vegetales, lecitina, o liposomas. Los supositorios se pueden preparar mediante el uso de aceites naturales o hidrogenados, ceras, ácidos grasos (grasas), polioles líquidos o semilíguidos. Las composiciones' pueden contener además conservadores, sustancias mejoradoras de estabilidad, sustancias mejoradoras o reguladoras de viscosidad, sustancias mejoradoras de solubilidad, edulcorantes, colorantes, compuestos mejoradores de sabor, sales para cambiar la presión osmótica, reguladores de pH o antioxidantes. Los compuestos de la fórmula general I también se pueden usar en combinación con una o más de otras sustancias terapéuticamente útiles, v.gr., a- y ß-bloqueadores como fentolamina, fenoxibenzamina, atenolol, propranolol, timolol, metoprolol, carteolol y similares; vasodilatadores como hidralacina, inoxidil, diazoxido, o flosequinan; antagonistas de calcio como ditiazem, nicardipina, nimodipina, verapamilo o nifedipina; inhibidores de ACE como cilazapril, captopril, enalapril, lisinopril y similares; activadores de canal de potasio como pinacidil; antagonistas de receptor de angiotensina II como losartan, valsartan, irbesartan y similares; diuréticos como hidroclorotiacida, clorotiacida, acetolamida, bumetanida, furosemida, metolazona o clortalidona; simpatolíticos como metildopa, clonidina, guanabenz, o reserpina; derivados de prostaciclina como flolan; sustancias anticolinérgicas y otras sustancias terapéuticas que sirven para tratar la presión sanguínea alta o cualesquiera trastornos cardiacos . La dosis puede variar dentro de límites amplios pero se debe adaptar a la situación específica. En general, la dosis dada diariamente en forma oral debe ser entre aproximadamente 3 mg y aproximadamente 3 gramos, preferiblemente entre aproximadamente 10 mg y aproximadamente 1 gramo, especialmente preferido entre 5 mg y 300 mg, por adulto con un peso corporal de aproximadamente 70 kg. La dosis se debe administrar preferiblemente en 1 a 3 dosis por día que sean de igual peso. Como es usual, los niños deben recibir dosis menores que sean adaptadas al peso corporal y la edad. Los compuestos preferidos son compuestos de la formula general I en donde R3 representa fenilo, fenilo mono-o di-sustituido, sustituido con etoxi, metoxi o cloro ,y X representa oxigeno, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . Un segundo grupo de compuestos preferidos de la formula general I son aquellos en donde R3 representa fenilo, fenilo mono-o di-sustituido, sustituido con etoxi, metoxi o cloro, X representa oxigeno y R2 representa - (C¾) m-Y-Ra, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . Un tercer grupo de compuestos preferidos de la formula general I son aquellos en donde R3 representa fenilo, fenilo mono-o di-sustituido, sustituido con etoxi, metoxi o cloro, X representa oxígeno y R2 representa - (CH2) 2-0-Ra, en donde Ra es heteroarilo, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . Otro grupo de compuestos preferidos son compuestos de la fórmula II
Fórmula II
en donde R1, R2, R3 y R4 son como se define en la fórmula general I anterior, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula II. También preferidos son los compuestos de la fórmula
en donde R1, R2 y R4 son como se define en la fórmula general I anterior y A representa hidrógeno, metilo, etilo, cloro, bromo, flúor, trifluorometilo o metoxi, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula III. También preferidos son los compuestos de la fórmula IV
en donde R1, R4 y m son como se define en la fórmula general I anterior y A es como se define en la formula III anterior y R5 representa arilo o heteroarilo, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula IV. Otro grupo especialmente preferido de compuestos son los compuestos de la fórmula V
en donde R1 es como se define en la fórmula general I anterior, A es como se define en la fórmula III anterior y R5 representa arilo o heteroarilo, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula V. Compuestos especialmente preferidos entre el grupo de compuestos de la fórmula V son aquellos en donde R5 representa pirimidina sustituida, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . Otro grupo de compuestos preferidos son compuestos de la fórmula general I, en donde R1 representa CH3-O-CH2CH2- , R6 representa hidrógeno y R2, R3, y R4 son como se define en la fórmula general I, y sales farmacéuticamente aceptables de compuestos de los mismos .
Otro grupo de compuestos preferidos son compuestos de la fórmula V en donde R1 representa CH3-O-CH2CH2-, A es como se define en la fórmula III anterior y R5 representa arilo, o heteroarilo, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula V. Compuestos particularmente preferidos son: [6- [2- (5-bromo-pirimidin-2-iloxi) -etoxi] -5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico; {5- (4-bromofenil) -6- [2- (5-bromopirimidin-2-iloxi) -etoxi] -pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico; {5- (4-bromofenil) -6- [2- (5-metilsulfanil-pirimidin-2-iloxi) -etoxi] -pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico ; {5- (4-bromofenil) -6- [2- (5-metoxipirimidin-2-iloxi) -etoxi] -pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico . Los compuestos de la fórmula general I de la presente invención se pueden preparar de conformidad con la secuencia general de reacciones delineadas más adelante. Por razones de simplicidad y claridad, algunas veces sólo se describen partes de las posibilidades de síntesis que conducen a los compuestos de la fórmula general I. Las referencias de la literatura dadas entre corchetes [] se exponen al final de este párrafo.
Posibilidad A: Los compuestos deseados de la fórmula general I se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula 1 :
Fórmula 1 en donde G es un residuo reactivo, de preferencia un átomo de cloro, y los otros símbolos son que se definen en la fórmula general I anterior, con un compuesto de la fórmula 2: R2 OH Fórmula 2
en donde R2 es como se define en la fórmula general I anterior, o una sal de la misma. Posibilidad B: Los compuestos de la fórmula general I también se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la formula 3 :
Fórmula 3 en donde los símbolos son los mismos que se definen en la fórmula general I anterior, o una sal de la misma, con un compuesto de la fórmula 4:
G2 R5 Fórmula 4
en donde G2 es un residuo reactivo, de preferencia un átomo de halógeno, y R5 es el mismo que se definió en la fórmula IV anterior. Posibilidad C: Los compuestos de la fórmula general I también se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula
Fórmula 5
en donde G3 es un grupo alquilsulfonilo inferior o un grupo fenilsulfonilo u otros símbolos son los mismos que se describen en la fórmula general I anterior, o una "sal del mismo, con un compuesto de la fórmula 6:
4' H Fórmula 6
en donde R4' representa: cicloalquilo ^ alquilo inferior arilo ^ cicloalqullo^ alquilo inferior^
Para las posibilidades A a C véase también [5] . En el esquema de reacción de reacción 1 , el procedimiento de síntesis para preparar los compuestos de la fórmula general I se ilustra mediante la descripción de la síntesis del ejemplo 1 . Los otros ejemplos dados en este documento se pueden preparar mediante la misma vía de síntesis, al adaptar los sustituyentes y condiciones de reacción. Las referencias de literatura dadas en [] se exponen al final de este párrafo. Las amidinas 1 fueron ya sea comerciales o se sintetizaron al aplicar la metodología estándar :.[!] por reacción de nitrilo apropiado con metilato de sodio en metanol seguido por adición de cloruro de amonio. Los ásteres malónicos 2-sustituidos 2 se prepararon de conformidad con procedimientos publicados [ 2 ] al hacer reaccionar dimetilcloromalonato 4 con el alcohol 3 apropiado [ 9 ] en acetona: carbonato de potasio como base. Los compuestos 2 se disolvieron en metanol, se añadió metilato de sodio y la agitación se continuó durante aproximadamente 30 minutos seguida por la adición de un derivado de amidina 1 . La agitación a temperatura ambiente se continuó durante otras 8 horas. Después de tratamiento ácido, las 4,6-dihidroxipirimidinas 5 se pudieron aislar en rendimientos de 70 a 90% [2] . Los compuestos 5 o la forma tautomérica de los mismos se transformaron en los derivados de dicloro 6 con oxicloruro de fósforo en presencia de ?,?-dimetilanilina a temperaturas elevadas (60-120°C) en rendimientos de 40 a 75% [3]. Los dicloruros 6 se hicieron reaccionar con un exceso de la sal de potasio de sulfamida apropiada 7 (preparada como se delinea en el esquema de reacción 2) en DMSO a temperatura ambiente o 40 a 60% para dar las monocloropirimidinas 8 en rendimientos de 70 a 90% ya sea después de recristalización o cromatografía. Los derivados de pirimidina 8 se hacen reaccionar después con etilenglicol (u otro 1-co-diol, o un mono alcohol) en presencia de una base como ter-butilato de potasio, hidruro de sodio o sodio a 80 - 110°C durante 4 a 16 horas para dar compuestos 9 como los primeros compuestos reivindicados en rendimientos de 50 a 70%. Los compuestos 9 se pueden transformar después a compuestos 11 mediante reacción 2-cloro-5-bromopirimidina 10 (u otro derivado de pirimidina o piridina [16], [17]) en THF/DMF -5/1 ya sea a temperatura ambiente o a 50-70% en rendimientos de 50-80%.
ESQUEMA DE REACCION DE REACCION 1 Síntesis ejemplificada del ejemplo 1
O o d) T ^NHK H
a) K2C03, acetona, reflujo; b) NaOMe, MeOH, t.a.; C) POCI3, ?,?-dime ilanilina, 70-130°C; d) 7, DMSO, t.a.; e) K-ter-butilato, etilenglicol , 75-100°C; f) NaH, DMF y/o THF, 10, t.a. a 60°C.
Para descripciones experimentales adicionales, véase [1] - [3], [5], [6], [ 8 ] , [10] - [15] y [20]. ESQUEMA DE REACCIÓN DE REACCION 2 Preparación de las porciones sulfonamida Véase también [10] - [15], [19] y [20], y la preparación de pirimidinas sustituidas de conformidad con [16] y [ 17 ] . ESQUEMA DE REACCION DE REACCION 3 Preparación de los precursores para la sxntesis de los compuestos de la fórmula general I en donde X representa un enlace [53,[18]
a los productos finales de conformidad con la fórmula general I como se describió en el esquema de reacción 1
En el esquema de reacción de reacción 3 , los símbolos representan los mismos que se definen en la fórmula general anterior. [1] W. Góhring, J. Schildknecht, M. Federspiel; Chimia, 1996, 50, 538-543. [2] W. Neidhart, V. Breu, D. Bur, K. Burri, M. Clozel, G. Hirth, M. Müller, H-. -P. Wessel, H. Ramuz; Chimia, 1996, 50, 519-524 y referencias citadas ahí. - [3] W. Neidhart, V. Breu, K. Burri, M. Clozel, G . Hirth, U. Klinkhammer, T. Giller, H. Ramuz; Bioorg. Med. Chem. Lett., 1997, 7, 2223-2228. R. A. Nugent, S. . Schlachter, M. J. Murphy, G. J. Cleek, T. J. Poel, D. G. Whishka, D. R. Graber, Y . Yagi, B. J. Keiser, R. A. Olmsted, L. A. Kopta, S. M . Swaney, S. M. Poppe, J. Morris, W. G. Tarpley, R. C. Thomas; J". Med. Chem. , 1998, 41, 3793-3803. [4] J. March; Advanced Organic Chemistry, 4a. ed. , 1994, p. 499 y referencias citadas ahí. [5] EP 0 743 307 Al; EP 0 658 548 Bl; EP 0 959 072
Al (Tanabe Seiyaku) [6] EP 0 633 259 Bl; EP 0 526 708 Al; WO 96/19459 (F. Hoffmann-LaRoche) [7] para la síntesis de heterociclos de 5 miembros, véase: Y. Kohara et al; J. Med. Chem., 1996, 39, 5228-5235 y referencias citadas ahí . [8] EP 0 882 -.719 Al (Yamanouchi Pharmaceutical Co.,
Ltd) [9] M. Julia, J. de Rosnay, Chim. Ther. 1965, 4, 334-343. [10] E. Cohén, B. Klarberg ; J\ Am. Chem. Soc,
1962, 84, 1994 [11] G. Weiss, G. Schulze, Liebigs Ann. Chem., 1969,
725, 40. [12] R. Graf, Chem. Ser., 1959, 92, 509.
[13] J. A. Kloek, K. L. Leschinsky, J. Org. Chem., 1976, 41, 4028. [14] R. E. Olson, T. M. Sielecki, et al; J. Med. Chem. , 1999; 42, 1178. [15] R. P. Dickinson, K. N. Dack, et al; J". Med.
Chem., 1997; 40, 3442. [16] D. G. Crosby, R. V. Berthold ; J. Org. Chem. , 1960; 25; 1916; D. J. Brown, J. M. Lyall, Aust. J. Chem. 1964, 17, 794-802; H. C. oppel, R. H. Springer, R. . Robins, C. C. C eng, J. Org. Chem. 1962, 27, 3614-3617; S. A. Jacobsen, S. Rodbotten, T. Benneche, J. Chem. Soc. Perkin Trans 1, 1999, 3265-3268; C. Maggiali, G. Morini, F. ossini, Fármaco, fid. Sci. 1988, 43, 277-292; Patente Francesa 1 549 494 (1968) (D. Razavi) . [17] US-4,233,294 1980. (Bayer AG) [18] E. D. Morgan; Tetrahedron, 1967, 23, 1735. [19] M. J. Tozer, I. M. -Buck et al.; Bioorg. Med. Chem. Lett., 1999, 9, 3103. G. Dewynter et al. ; Tetrahedron, 1993, 49, 65. [20] WO 02 53557 (Actelion Pharmaceutxcals Ltd.) EJEMPLOS Los siguientes ejemplos ilustran la invención. Todas las temperaturas son en °C. Lista de Abreviaturas • - Ac20 - anhídrido acético ac . - acuoso CiHex ciclohexano DBU 1, 8-diazabiciclo[5.4.0] undec-7-eno (1,5-5) DCM dic1orornetano DMAP -dime i1aminopiridina DMF dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetilo EA acetato de etilo Et3N trietilamina Hex hexano HV condiciones de alto vacio OtBu ter-butilato de potasio CPBA ácido m-cloroperbenzoico . min minutos refl reflujo t .a. temperature ambiente THF tetrahidrofurano TR tiempo de retención LOS siguientes compuestos se prepararon conformidad con el procedimiento descrito anteriormente y mostrado en los esquemas 1 a 3. Todos los compuestos se caracterizaron por 1H-RMN (300MHz) y ocasionalmente por 13C-RMM (75MHz) (Varian Oxford, 300MHz; los r desplazamientos químicos se dan en ppm en relación con el solvente usado; multiplicidades: s = singulete, d = doblete, t = triplete; m = multiplete) , por CL-EM1 (Finnigan Navigator con HP 1100 Binary Pump y DAD, columna: 4.6x50 mm, Develosil RP Aqueous, 5 µp?, 120a, gradiente: 5-95% de acetonitrilo en agua, 1 minuto, con ácido trifluoroacético al 0.04%, flujo: 4.5 ml/min) o CL-EM2 (Waters Micromass; plataforma de ZMD con sonda de Esl con Alliance 2790 HT y DAD 996, columna: 2x30 mm, Gromsil 0DS4, 3 um, 1205; g-radiente : 0 - 100% de acetonitrilo en agua, 6 minutos, con ácido fórmico al 0.05%, flujo: 0.45 ml/min), tR se da en minutos; por CCD (placas de CCD de Merck, gel de sílice 60 F254) y ocasionalmente por punto de fusión. EJEMPLO 1
a) A una suspensión de 2CO3 (49.3 g) en acetona (100 mi) se añadió gota a gota una solución de 2-cloro-5-metoxi-fenol (37.7 g, punto de ebullición 83-86°C, 13 mbar, [9]) a 40°C. La adición gota a gota de cloromalonato de dimetilo (43.6 g) en acetona (100 mi) siguió. La mezcla se puso a reflujo durante 16 horas antes que el solvente fuera removido bajo presión reducida. El residuo se recogió en agua (400 mi) y se extrajo dos veces con DCM (400 mi) . Los extractos orgánicos se secaron sobre gS04 y se evaporaron. Bajo tratamiento del residuo oleoso con éter dietílico, el producto se cristalizó. Los cristales se recogieron, se lavaron con una mezcla de éter dietílico y hexano y se secaron para dar éster dimetílico de ácido 2- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi ) -malónico (53.73 g) como cristales blancos. 1H-RMN (CDC13) : 3.76(s, 3H) , 3.86(s, 6H) , 5.20(s, 1H) , 6.53-6.58(m, 2H) , 7.24-7.29(m, 1H) . b) Una solución de éster dimetílico de ácido 2-(2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -malónico (10 g) en metanol (100 mi) se añadió gota a gota a 0°C a una solución de NaOMe (5.6 g) en metanol (250 mi) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas antes de que se añadiera clorhidrato de formamidina (3.347 g) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo restante se trató con HC1 acuoso 2N (150 mi) . Después de agitarse durante 1 hora el material sólido se recogió, se lavó con agua y se secó para dar 5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidina-4, 6-diol (8.65 g) como un polvo blanco . ??-??? (D6-D SO) : 3.65(s, 3H) , 6.23, d, J=2.7 , 1H) ,
6.58(dd, J=2.7, 8.8, 1H) , 7.33(d, J=8.8, 1H) , 8.07(s, 1H) , 12.3 (s br, 2H) . c) A una solución de N, N-dimetilanilina (7.5 mi) en POCI3 (75 mi) se añadió en porciones 5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidina-4, 6-diol (8.65 g) . La solución rojo oscuro a café se calentó a 120°C y se agitó durante 3 horas. La mezcla se enfrió y el exceso de POCI3 se evaporó. El residuo se trató con agua con hielo (400 mi) y después se extra o dos veces con EA (200 mi) . La fase orgánica se lavó con agua y se evaporó. El producto crudo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice y se eluyó con heptano:EA 7:3. El producto aislado se suspendió en metanol, se filtró se lavó con metanol, éter dietílico/hexano y se secó para dar 4,6-dicloro-5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -piri idina (8.23 g) como un polvo amarillo pálido. ""?-??? (CDC13) : 3.72(s, 3H) , 6.05(d, J=2.7, 1H) , 6.62(dd, J=2.7, 8:8, 1H), 7.38{d, J=8.8, 1H) , 8.69(s, 1H) . d) Se añadió gota a gota ter-butanol (5.56 g) a una solución de isocíanato de clorosulfonilo (10.61 g) en DCM (40 mi) mientras la temperatura se mantuvo a 0-4°C. La agitación se continuó durante 30 minutos a 0°C antes de que se añadiera gota a gota la solución enfriada con hielo de 2-metoxi-etilamina (5.63 g) y trietilamina —(8.35 g) en DCM (80 mi) mientras que la temperatura de la mezcla se mantuvo a 0-2°C. Después la mezcla se calentó a temperatura, ambiente y la agitación se continuó durante 72 horas. La mezcla se lavó dos veces con -agua (15 mi) y la fase- acuosa se extrajo nuevamente con DCM (50 mi) . La fase orgánica se secó sobre MgSCXj y se evaporó. El aceite restante se secó al alto vacío antes de que se disolviera en 2-propanol (200 mi) . La solución se enfrió a -70°c y después se trató con HC1 5-6N en 2-propanol (80 mi) . La mezcla se calentó a temperatura ambiente y la agitación se continuó durante 18 horas antes de que el solvente se evaporara. El residuo se disolvió en metano1 (150 mi) y se añadió en porciones ter-butilato de potasio (8.42 g) . La solución se agitó durante 10 minutos y el solvente se evaporó . El residuo restante se secó al alto vacío para dar sal de potasio de amida de ácido 2-metoxietansulfámico (15.51 g) . hí-K (D6-D SO) : 2.88-2.96 (m, 2H) , 3.15 (s, 3H) , 3.32-3.40 (m, 2H) ; 13C-RMN (D6-DMS0) : 43.7, 58.6, 72.3. e) Una solución de 4, 6-dicloro-5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi ) -pirimidina (1.00 g) y sal de potasio de amida de ácido 2-metoxietilsulfámico (1.38 g). en DMSO (15 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas antes de que se diluyera con una solución acuosa al 10% de ácido cítrico (100 mi) y se extrajo dos veces con EA (100 mi) . La fase orgánica se lavó dos veces con agua (100 mi) , se secó sobre MgS04 y se evaporó. El producto se cristalizó a partir de éter dietílico/hexano. Los cristales se recogieron,: se lavaron con éter dietílico adicional y se secaron al alto vacío para dar ^[-cloro-5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (1.19 g) como un polvo beige. - -CL-EM1 : tR = 1.02 minv [M+l] + = 422. 92. ^-WW- iCBCli-) :- 3.20-3.28 (m, 2H) , 3.27 (s, 3H) , 3.44-3.50 (m, 2H) , 3.72 (s, 3H) , 5.90-5.96 (m br, 1H) , 6.18 (d, 2.9, 1H) , 6.65 (dd, 2.9, 8.8, 1H) , 7.37 (d, 8.8, 1H) , 7.91 (s br, 1H) , 8.54 (s, 1H) ; 13C-RMN (CDC13) : 44.1, 56.1, 59.1, 70.2, 102.9, 110.0, 114.7, 131.5, 132.2, 151.3, 152.4, 152.8, 153.9, 159.6. f) A una suspensión de [6-cloro-5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (1.17 g) en etilenglicol (15 mi) se añadió ter-butilato de potasio (3.10 g) . La solución clara resultante se agitó a 90°C durante 24 horas, se enfrió a · temperatura ambiente, se diluyó con EA (200 mi) y se lavó con ácido cítrico acuoso al 10% (150 mi) y agua (2x100 mi) . La fase acuosa se extrajo una vez más con EA (100 mi) . La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice y se eluyó con hexano: EA 1:3 para dar [5-(2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -6- (2-hidroxi-etoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (1.03 g) como un vidrio incoloro. CL-EM1: tR = 0.89 min, [M+l]+ = 448.92. g) NaH (78 mg de dispersión al 55% en aceite mineral) se añadió a una solución de [5- (2~cloro-5-meto i-fenoxi) -6- (2-hioroxi-etoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (200 mg) en DMF (6 mi) . La mezcla se agitó durante 5 minutos antes de que se añadiera 5-bromo-2-cloro-pirimidina (172 mg) . La mezcla se calentó a 55°C y se agitó durante 3 horas, se diluyó con EA (75 mi) y se lavó con una solución acuosa de 10% de ácido cítrico (50 mi) y agua (2x50 mi) . La fase orgánica se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía sobre placas de CCD preparativa con heptano:EA 1:2 para dar [6- [2- (5-bromo-pirimidin-2-iloxi) -etoxi] -5- (2-cloro-5-metoxi-fenoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico como una espuma incolora. CL-EM: tR - 1.07 min, [M+l] + = 604.95. 1H-RMN (CDC13) : 3.23 (d, 5.3, 2H) , 3.29 (s, 3H) , 3.50 (t, 4.7, 2H) , 3.67 (s, 3H) , 4.52-4.54 (m, 2H) , 4.68-4.74 (m, 2H), 5.93 (t, 5.9, 1H) , 6.24 (d, 2.3, 1H) , 6.52 (dd, 2.9, 8.8, 1H) , 7.22 (d, 8.8, 1 H) , 7.58 (s, 1 H) , 8.32 (s, 1 H) , 8.45 (s, 2H) . EJEMPLO 2
á) A una solución de ácido 4-bromofenilacético (50 g) en metanol (250 mi) se añadió gota a gota cloruro de tionilo (34.2 mi) mientras la temperatura de la mezcla de reacción se mantuvo a 0-5°C. Bajo adición completa, el enfriamiento se removió y la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente. La agitación se continuó durante 75 minutos antes de que el solvente se removiera bajo vacío. El aceite amarillo se disolvió en benceno y se evaporó. El residuo se disolvió en EA, se lavó con agua, salmuera, Na2C03, acuoso saturado 2 N y salmuera. La fase orgánica se secó sobre gS04 y se evaporó y se secó al alto vacío a 85°C durante 30 minutos para dar éster metílico de ácido 4-bromofenilacético (52.4 g) como un aceite amarillo. ¦"¦H-RMN (De-DMSO) : 3.60(s, 3H) , 3.67 (e, 2H) , 7.22 (d, 8.5, 2H-) , 7.50(d, 8.5, 2H) . b) A 40°C, una solución de éster metílico de ácido 4-bromofenilacético (52 g) en THF (100 mi) se añadió cuidadosamente durante un período de 40 minutos a una suspensión de NaH (15.6 g) en THF seco (450 mi). La agitación se continuó durante 70 minutos sin calentamiento y la temperatura cayó a 27°c. La evolución de gas se había detenido antes de que se añadiera gota a gota carbonato de dimetilo (76.42 mi) mientras la temperatura de la mezcla se mantuvo a 29-31°C. La agitación se continuó durante 22 horas a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió a -10°C y después se neutralizó cuidadosamente a pH 6-7 con HCl acuoso antes de que el volumen del THF se removiera bajo vacío. El residuo se disolvió en' EA (700 mi), se lavó tres veces con HCl acuoso 1 N y una vez con salmuera, se secó sobre MgSOg. La mayor parte del EA se evaporó antes de que se añadiera hexano. El producto se cristalizó durante la noche a 4°C. Los cristales se recogieron, se lavaron con hexano y se secaron para dar éster dimetílico de ácido 2- (4-bromofenil)-malónico (45.9 g) como cristales amarillos pálidos. 1H-RMN (D6-DMSO) : 3.66(s, 6H) , 5.07 (S, 1H) , 7.30- 7.34(m, 2H) , 7.55-7.59(m, 2H) . c) Una solución de éster dimetílico de ácido 2- (4-bromofenil) -malónico (11.73 g) en metanol (100 mi) se añadió a 0°C a una solución de sodio (2.83 g) en metanol (100 mi) . La mezcla se agitó durante 18 horas a temperatura ambiente antes de que se añadiera clorhidrato de formamidina (4.10 g) . La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El solvente se removió y el residuo se suspendió en ácido cítrico acuoso al 10% (100 mi) y se agitó durante 10 minutos. El precipitado blanco se recogió, se lavó con ácido cítrico acuoso al 10%, agua, se evaporó tres veces con CiHex y se secó al alto vacío a 40°C para dar 5- (4-bromofenil) -pirimidina-4, 6-diol (9.90 g) como un polvo color belge pálido. CL-EM: tR = 2.75 min, [M+H]+ = 222.96, [M-H] " = 220.92. """H-RMN (D6-DMSO) : 7.43-7.48 (m, 2H) , 7.50-7.55 (m, 2H) , 8.13(s, 1H) , 12.1(s br, 2H) . - d) A una suspensión de 5- (4-bromofenil} -pirimidina-4,6-diol (9.90 g) en POCI3 (130 mi) se añadió cuidadosamente N, N-dimetilanilina (13.5 mi) . La mezcla se calentó a 130°C durante 2 horas . La solución café oscuro se evaporó y el residuo se vació en agua con hielo . La suspensión se diluyó con HCl 2 N y agua y se agitó durante 20 minutos. El precipitado se recogió y se lavó con agua. El material sólido se disolvió en EA, se lavó con HCl acuoso 1 N y salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgSC y se evaporó. El material se purificó adicionalmente por cromatografía en columna sobre gel de sílice y se eluyó con hexano:EA 95:5 a 1:1 seguido por cristalización a partir de hexano/EA a -20°C para dar 4,6-dicloro-5- (4-bromofenil) -pirimidina (8.3 g) como cristales de color amarillo pálido. ^-RMN (D6-DMSO) : 7.39-7.44 (m, 2H) , 7.72-7.76 (m, 2H) , 8.94(s, 1H) . e) Una solución de 4 , 6-dicloro-5- (4-bromofenil) -pirimidina 1.79 irig) y sal- de* potasio de amida de ácido 2-metoxietansulfámico (4.54 g, Ejemplo 1) en DMF (25 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas antes de que el volumen del solvente se removiera bajo vacío. El residuo se trató con ácido cítrico acuoso al 10%. La suspensión se filtró, y la solución madre se extrajo -dos veces con EA. La fase orgánica se evaporó y se combinó con el material sólido recogido en principio. El producto crudo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice y se eluyó con DCM que contenía 4¾ de metanol - para dar [6-cloro-5- (4-bromofenil) -pirimidin-4-il] -amida- = . ácido 2-metoxi-etansulfámico (640 mg) como una espuma beige. CL-EM2: tR = 4.46 minutos, [M+l]+ = 422. 93 , [M-l]" =
420 . 82 . f) A una suspensión de [6-cloro-5- (4-bromofenil) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxietansulfámico (640 mg g) en etilenglicol (10 mi) se añadió ter-butilato de potasio (1.70 g) en tres porciones. La solución clara resultante se agitó durante 17 horas a 90°C, ' se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EA (200 mi) y se lavó con ácido cítrico acuoso al 10% (150 mi) y agua (2x100 mi) . La fase acuosa se extrajo una vez más con EA (100 mi) . La fase orgánica combinada se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice y se eluyó con hexano:EA 2:1 a 3:1 para dar [5- (4-bromofenil) -6- (2-hidroxietoxi) -pirimidin-4-il] amida de ácido 2-metoxietansulfámico (533 mg) como una espuma incolora. :.- - ¦ CL-EM2: tR = 3.81 min, [M+3 (isótopo de Br)]+ = 449. 5, [M-1+2 (isótopo de Br) ]"= 446.94. Hi-RMN (CDC13) : 3.14-3.22 (m, 2H) , 3 . 30 (s, 3H) , 3.47-3.53 (m, ,2H) , 3.82-3 . 88 (m, 2H) , 4.47-4.52 (m, 2H) , 5. 98-6. 06 (m br, 1H) , 7.17-7.22 (m, 2H) , 7.62-7.68 (m, 2H) , 8 . 49 (s, 1H) . g) NaH (59 mg al 55% en aceite mineral) se añadió a una solución de [5- (4-bromofenil) -6- (2-hidroxietoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxietansulfámico (150 mg) en D F (4 mi) . La mezcla se agitó durante 5 minutos antes de que se añadiera 5-bromo-2-cloropirimidina (130 mg) . La mezcla se calentó a 55°C y se agitó durante 3 horas, se diluyó con EA (75 mi) y se lavó con una solución acuosa al 10% de ácido cítrico (50 mi) y agua (2x50 mi) . La fase orgánica se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía sobre placas de CCD preparativa con EA 1 para dar {5- (4-bromofenil) -6- [2- (5-bromopirimidin-2-iloxi) -etoxi]pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (91 mg) como una espuma de color beige. CL-EM1: tR = 0.97 min, [M+l+2 (isótopo de Br)]+ =
605.00, CL-EM2: tR = 4.97 min, [M+l]+ = 602.91, [M-l]" =
601.0 . EJEMPLO 3
{5- (4-bromofenil) -6- [ 2- (5-metilsulfanil-pirimidin-2 -iloxi) -etoxi] -pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico se obtuvo en analogía al ejemplo 2 al empezar a partir de [5- (4-bromofenil) -6- ( 2-hidroxietoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (ejemplo 2 ) y 2- cloro-5-metilsulfanil-pirimidina como una espuma incolora. CL-E 2 : tR = 4.88 min, [M+3 (isótopo de Br)]+ = 572.87, [M-l+2 (isótopo de Br)]"= 571.12. ¦"¦H-RM (CDCI3 ) : 2.00 (s, 3H) , 2.69-2.73 (m, 2H) , 2.82 (s, 3H) , 3.00-3.07 (m, 2H) , 4.11-4.20 (m, 2H) , 4.23-4.31 (m, 2H) , 5.60 (s br, 1H) , 6.67-6.74 (m, 2H) , 7.06-7.13 (m, 2H) , 7.99 (s, 2H) , 8.00 (s, 1H) . EJEMPLO 4
{5- (4-bromofenil) -6- [2- (5-metoxipirimidin-2-iloxi) - etoxi] -pirimidin-4-il}-amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico se obtuvo en analogía al ejemplo 2 empezando a partir de [5- ( -bromofenil) -6- (2-hidroxietoxi) -pirimidin-4-il] -amida de ácido 2-metoxi-etansulfámico (ejemplo 2) y 2-metansulfonil-5- metoxipirimidina como un sólido blanco. CL-EM2: tR = 4.56 min, [M+3 (isótopo de Br)]+ = 556.97, [M-l+2 (isótopo de Br)]" = 555.05. ^-RMN (CDCI3 ) : 3.14-3.20 (m, 2H) , 3.28 (s, 3H) , 3.46- 3.51 (m, 2H) , 3.87 (s, 3H) , 4.56-4.60 (m, 2H) , 4.68-4.73 (m, 2H) , 6.06 (s br, 1H) , 7.13-7.18 (m, 2H) , 7.52-7.56 (m, 2H) , 8.15 (s, 2H) , 8.47 (s. 1H) . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.