MXPA03003759A - Productos radiofarmaceuticos para el diagntostico de la enfermedad de alzheimer. - Google Patents

Abstract

La invención se dirige al uso de productos radiofarmacéuticos de la fórmula (I) en el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer. En particular, los productos radiofarmacéuticos de la invención tienen la capacidad para atravesar la barrera hematoencefálica y unirse al receptor CCR1 presente en el tejido del cerebro de pacientes que padecen la enfermedad de Alzheim

Description

PRODUCTOS RADIOFARMA.CÉUTICOS PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA ENFE MOAD DE ALZHEIMER Campo de la invención La presente invención se relaciona con nuevos productos radiofarmacéuticos que son de utilidad para el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer.

Breve Descripción de la Técnica Anterior La enfermedad de Alzheimer es un trastorno neurodegenerativo severo ¦ y habitualmente existen aproximadamente 4 millones de norteamericanos que padecen esta enfermedad. Dado que la población de mayor edad continúa creciendo, esta cifra podría alcanzar los 14 millones a mediados del próximo siglo a menos que se descubra una cura o prevención para la enfermedad. Actualmente, no existe ninguna prueba premortem sensible y específica para un diagnóstico temprano de la enfermedad. La enfermedad de Alzheimer se diagnostica actualmente sobre la base de la observación clínica del deterioro cognitivo, acoplado con la eliminación sistemática de otras posibles causas de dichos síntomas. La confirmación del diagnóstico clínico de "probable enfermedad de Alzheimer" solamente se puede realizar examinando el cerebro postmortem. El cerebro en la enfermedad de Alzheimer se caracteriza por la aparición de dos depósitos proteináceos anormales distintivos en regiones del cerebro que son responsables del aprendizaje y la memoria (por ejemplo, en la corteza cerebral y el hipocampo) . Estos depósitos son placas amiloides extracelulares, que son características de la enfermedad de Alzheimer, y ovillos neurofibrilares intracelulares (NFT) , que también se encuentran en otros trastornos neurodegenerativos . ' Los péptidos amiloides son típicamente de 40 ó 42 aminoácidos de longitud ("?ß1_4? o "?ß1-42", respectivamente) y se forman a partir del procesamiento anormal de una proteína mayor asociada a membrana de función desconocida, la proteína precursora de amiloide ("APP") . Se cree que los agregados oligoméricos de estos péptidos son neurotóxicos, dando eventualmente como resultado la degeneración sináptica y la pérdida neuronal. La cantidad de deposición amiloide se correlaciona aproximadamente con la severidad de los síntomas en el momento de la muerte. En el pasado, se han realizado varios intentos para diseñar productos radiofarmacéuticos que se pudieran usar como agentes de diagnóstico para un diagnóstico premortem de la enfermedad de Alzheimer. Bornebroek et al. mostraron que el componente amiloide P sérico (SAP) de la proteína asociada al amiloide, marcado con i23I, se acumula en niveles bajos en la corteza cerebral, posiblemente en las paredes de los vasos, de los pacientes con amiloidosis cerebral (Bornebroek, M., et al., Nucí. Med. Coinmun. (1996), Vol . 17, págs. 929-933). Saito et al, propusieron una administración mediada por vectores de ?ß1-40 marcados con 125I a través de la barrera hematoencef lica . Se describe que el componente ?ß1_4? iodado se une a placas amiloides ?ß en secciones de tejido (Saito, Y.,et al., Proc.Natl.Acad. Sci. EE.UU. 1995, Vol.92, pg. 10227-10231) . En la Patente de EE.UU. N° : 5.231.000 se describen anticuerpos con especificidad por el polipéptido amiloide A4 presente en el cerebro de los pacientes con enfermedad de Alzheimer. Sin embargo, aún no se ha descripto un método para administrar estos anticuerpos a través de la barrera hematoencefálica . Zhen et al. describieron modificaciones del colorante que se unen a amiloides conocidos como "Congo Red™" y complejos de estas moléculas modificadas con tecnetio y renio. Se prevé que los complejos con iones radioactivos puedan constituir agentes potenciales para el diagnóstico por imágenes de la enfermedad de Alzheimer (Zhen et al . , J.Med.Chem. (1999), Vol. 42, pg. 2805-2815) . Sin embargo, el potencial de los complejos para atravesar la barrera hematoencefálica es limitado. Un grupo en la Universidad de Pennsylvania en EE.UU. (Skovronsky, M. , et al., Proc. Nati. Acad. Sci. 2000, Vol. 97, págs. 7609-7614) ha desarrollado un derivado marcado con fluorescencia del Congo Red que es permeable en el cerebro y que se une de una manera no especifica con materiales amiloides (es decir, péptidos en conformación laminar con plegamiento P) . Seria necesario marcar este compuesto con un componente radioactivo y luego verificarlo en exámenes preclinicos para evaluar su farmacocinética y toxicidad antes de la evaluación clínica . Klunk et al. describieron experimentos con un derivado de Congo Red™, la crisamina G (CG) . Se describe que CG se une bien al ß-amiloide sintético in vitro, y atraviesa la barrera hematoencefálica en ratones normales (Klunk et al., Neurobiol. Aging (1994), Vol. 15, N° 6, págs . 691-698) . Bergstróm et al. presentaron un compuesto marcado con iodo-123 como un radioligando potencial para la visualización de receptores de acetilcolin muscarínicos Mi y M2 en la enfermedad de Alzheimer (Bergstróm et al., Eur. J. Nucí. Med. (1999), Vol. 26, págs. 1482-1485) . Recientemente, se ha descubierto que ciertos receptores específicos de quimioquinas son sensibilizados en los cerebros de pacientes con la enfermedad de Alzheimer (Horuk, R. et al., J. Immunol. (1997), Vol. 158, págs. 2882-2890); Xia et al., J. NeuroVirol. (1999), Vol. 5, págs. 32-41) . Además, se ha demostrado recientemente que el receptor de la quimioquina CCRl es sensibilizado en los cerebros de pacientes con enfermedad de Alzheimer avanzada y está ausente en los cerebros normales (Halks-Miller et al, CCRl Immunoreactivity in Alzheimer' s Disease Brains, Society for Neuroscience Meeting Abstract, N° 787.6, Volumen 24, 1998). Los antagonistas del receptor CCRl y el uso de los mismos como agentes antiinflamatorios se describen en la publicación de la Solicitud de Patente PCT, WO 98/56771. Ninguna de las propuestas descriptas previamente han dado como resultado un desarrollo clínico de un agente para el diagnóstico por imágenes para un diagnóstico temprano de la enfermedad de Alzheimer. Por consiguiente, persiste la necesidad de un agente de diagnóstico que pueda ser de utilidad para un diagnóstico confiable y temprano de la enfermedad de Alzheimer.

SUMARIO DE XA INVENCIÓN La presente invención se refiere a productos radiofarmacéuticos que se unen al receptor CCRl y que tienen la capacidad de atravesar la barrera hematoencefálica, y que por ello son de utilidad en el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer, preferentemente en una etapa temprana de la enfermedad. Por consiguiente, en un aspecto, la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) : X1 y X2 son cada uno, independientemente entre si, halo; R1 y R2 son cada uno, independientemente entre si, hidrógeno o alquilo; y R3 es hidrógeno, amina, monoalquilamina, dialquilamina, monoaralquilamina, alquilcarbonilamina, alquenilcarbonilamina, haloalquilcarbonilamina, arilcarbonil-amina, alcoxialquilcarbonilamina, alcoxicarbonilalquil-carbonilamina, glicinamida, monoalquilglicinamida, arilcarbonilglicinamida, aminocarbonilglicinamida, (ami-no-carbonil) (alquil ) glicinamida, (alcoxialquilcarbonil ) glicinamida, ureido, monoalquilureido, monoarilureido, monoaralquilureido o alaninamida; y donde cualquiera de X1 o X2 se selecciona del grupo formado por 123I, 125I, 128I, 131I, 75Br, 7sBr, 80Br y 1BF; o donde uno de los átomos de carbono en el compuesto es UC; o una sal aceptable para uso farmacéutico de los mismos. En otro aspecto, la invención se refiere a compuestos de fórmula (II) : donde X1 y X2 son cada uno, independientemente entre si, halo; R1 y R2 son cada uno, independientemente entre si, hidrógeno o alquilo; y R4 es hidrógeno; y R5 comprende un quelante capaz de ligar un átomo de metal radioactivo seleccionado del grupo formado por 99mTc, 13cRe y 18¾e; o como un complejo con 99mTc, 186Re y 188Re; o una sal aceptable para uso farmacéutico de los mismos. En otro aspecto, esta invención se refiere a un método de diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer en un ser humano que comprende la administración a un ser humano que necesita dicho diagnóstico de un compuesto de fórmula (I) o fórmula (II) , descripto previamente y en este documento, y la medición de la radioactividad que produce dicha administración del compuesto al ser humano ya sea usando una cámara gamma o mediante tomografla de emisión de positrones (PET) . En otro aspecto, la invención se refiere a un método para usar un compuesto de la invención en la elaboración de un producto radiofarmacéutico destinado al diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer en un ser humano. En otro aspecto, la invención se refiere a un método para preparar los compuestos de la invención.

Descripción breve de las figuras En la figura 1 se muestra la expresión del CCR1 en tejido de cerebro con enfermedad de Alzheimer. En la figura 2 se muestra la especificidad de anticuerpos del CCR1 en tejido de cerebro con enfermedad de Alzheimer. En la figura 3 se muestran secciones de tejido con marcación doble para CCRl-?ß1"40. En la figura 4 se muestran placas neuríticas con marcación doble para CCR1 y ?ß1-42. En la figura 5 se muestra una coloración difusa de ?ß1-42 en cerebro con enfermedad de Alzheimer. La figura 6 es un gráfico que muestra la relación entre CCR1 y ?ß1-40 según la calificación CDR. La figura 7 es un gráfico que muestra la relación entre CCR1 y ?ß1-42 según la calificación CDR. La figura 8 es un gráfico que demuestra la disminución de radioactividad total en cerebro en el tiempo. La figura 9 es un gráfico que muestra el porcentaje de dosis inyectada en cerebro y plasma. En la figura 10 se muestran gráficos de la expresión del CCR1 en otras enfermedades neurodegenerativas.

Descripción detallada de la invención Definiciones Tal como se utilizan en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, a menos que se indique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado que se indica a continuación: "Alquilo" se refiere a un radical de cadena lineal o ramificada, monovalente o divalente, que solamente consta de carbono e hidrógeno, que no contiene insaturaciones y que tiene uno a ocho átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, 1-metiletil (iso-propilo) , n-butilo, n-pentilo, 1,1-dimetiletil (t butilo), n-heptilo y semejantes. "Alquilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -Ra, donde Ra es un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, acetilamina, etilcarbonilamina, n-propilcarbonilamina y semejantes. "Alquenilo" se refiere a un radical de cadena lineal o ramificada, monovalente o divalente, que solamente consta de carbono e hidrógeno, que contiene por lo menos un enlace doble y que tiene de dos a ocho átomos de carbono, por ejemplo, etenilo, prop-l-enilo, but-l-enilo, pent-l-enilo, penta-1,4-dienilo y semejantes. "Alquenilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -Rc, donde Rc es un radical alquenilo definido previamente, por ejemplo, etenilcarbonilamina, prop-2-enil-car-bonilamina, but-2-enilcarbonilamina y semejantes. "Alcoxi" se refiere a un radical de fórmula -0RS, donde Ra es un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, 1-metiletoxi (iso-propoxi) , n-butoxi, n-pentoxi, 1, 1-dimetiletoxi (t-butoxi) y semejantes. "Alcoxicarbonilalquilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -Ra-C (O) ORa, donde cada Ra es, independientemente entre si, un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, etoxicarbonilmetilcarbonilamina, metoxicarbonilmetilcarbonilamina, ( 2-etoxicarboniletil ) carbo-nilamina, (2-metoxicarboniletil) carbonilamina y semejantes. " (Alcoxialquilcarbonil) glicinamida" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (0) -CH2-N (H) -C (0) -Ra-0-Ra, donde cada R3 es, independientemente entre si, un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, (metoxiacetil ) glicinamida, (etoxiacetil) glicinamida y semejantes. "Amina" se refiere a un radical -NH2. "Aminocarbonilglicinamida" se refiere a un radical de fórmula - (H) -C (0) -CH2- (H) -C (0) -NH2. " (Aminocarbonil) (alquil) glicinamida" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (0) -CH2-N (Ra) =C (0) -NH2, donde Ra es un radical alquilo definido previamente. "Arilo" se refiere a un radical fenilo o naftilo. A menos que se indique específicamente lo contrario en la memoria descriptiva, el término "arilo" o el prefijo "ar-" (tal como en "aralquilo") significa que se incluyen radicales arilo sustituidos optativamente entre uno o varios sustituyentes seleccionados del grupo formado por halo, alquilo, alcoxi, haloalquilo, haloalcoxi, nitro, amina, monoalquilamina y dialquilamina, ya definidos en este documento. "Arilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -Rb, donde Rb es un radical arilo definido previamente, por ejemplo, ( 4-metoxifenil) carbonilamina, (4-fluorofenil) carbonilamina, (4-clorofenil) carbonilamina y semejantes. "Arilcarbonilglicinamida" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (0) -CH;-N (H) -C (0) -Rb, donde Rb es un radical arilo definido previamente, por ejemplo, fenilcarbonilglicinamida, (4-fluoro-3-trifluorometilfenil) -carbonilglicinamida, (4-fluorofenil ) carbonilglicinamida y semejantes. "Aralquilo" se refiere a un radical de fórmula -RaRb, donde Rs es un radical alquilo definido previamente y Rb es un radical arilo definido previamente, por ejemplo, bencilo y semej antes . "Alcoxialquilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -Ra-0-Ra, donde cada Ra es un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, metoximetilcarbonilamina, etoxietilcarbonilamina, metoxietilcarbonilamina y semejantes. "Alaninamida" se refiere a un radical de fórmula - N (H) -C (0) -C (CH3) H-NH2. "Bencilo" se refiere a un radical de fórmula -CH2-Rh/ donde h es un radical fenilo sustituido optativamente por uno o varios sustituyentes seleccionados del grupo formado por halo, alquilo, halo lquilo, alcoxi, nitro, amina, monoalquilamina, y dialquilamina . "Dialquilamina" se refiere a un radical de fórmula -N(Ra)Ra, donde cada Ra es, independientemente entre si, un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, dimetilamina, metiletilamina, dietilamina, dipropilamina, etílpropilamina y semejantes. "Glicinamida" se refiere a un radical de fórmula -N(H)-C (O) -CH2-NH2. "Halo" se refiere a bromo, cloro, iodo o flúor. "Haloalquilo" se refiere a un radical alquilo, definido previamente, es decir sustituido por uno o varios radicales halo, definido previamente, por ejemplo, trifluorometilo, difluorometilo, triclorometilo, 2-trifluoroetilo, 1-fluorometil-2-fluoroetilo, 3-bromo-2-fluoropropilo, l-bromometil-2-bromo-etilo y semejantes.

"Haloalquilcarbonilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (0) -Rf, donde Rf es un radical haloalquilo definido previamente, por ejemplo, trifluorometilcarbonilamina, trifluorometilcarbonilamina, 2-bromoetilcarbonilamina y semejantes. "Monoalquilamina" se refiere a un radical de fórmula -N (H) Ra, donde Ra es un radical alquilo definido previamente, por ejemplo, metilamina, etilamina, propilamina y semejantes. "Monoaralquilamina" se refiere a un radical de fórmula -?(?)¾, donde Rd es un radical aralquilo definido previamente, por ejemplo, bencilamina, (3,4,5-trimetoxibencil) amina, ( 4-clorobencil ) amina y semejantes. "Monoalquilglicinamida" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (0) -C¾-N (H) Ra, donde Ra es un radical alquilo definido previamente. "Monoalquilureido" se refiere a un radical de fórmula -N(H)-C(0)-N(H)Ra o un radical de fórmula -N (Ra) -C (0) -NH2, donde Ra es un radical alquilo definido previamente. "Monoarilureido" se refiere a un radical de fórmula -N(H) -C(0)-N(H)Rb o un radical de fórmula -N (Rb) -C (0) -N¾, donde Rb es un radical arilo definido previamente. "Monoaralquilureido" se refiere a un radical de fórmula -N (H) -C (O) -N (H) Rd o un radical de fórmula -N (Rd) -C (O) -NH2, donde Rd es un radical aralquilo definido previamente. Los términos "optativo" u "optativamente" significan que un suceso o circunstancia descripto pueden producirse, o no, y que la descripción incluye casos donde dicho suceso o circunstancia tiene lugar y casos en que no. Por ejemplo, "arilo sustituido optativamente" significa que el radical arilo puede estar sustituido o no y que la descripción incluye tanto los radicales arilo sustituidos como no sustituidos. Una "sal aceptable para uso farmacéutico" incluye sales de adición tanto ácida como alcalina. Una "sal de adición ácida aceptable para uso farmacéutico" se refiere a aquellas sales que retienen la eficacia biológica y las propiedades de las bases libres, que no sean biológicamente inconvenientes o indeseadas de otra manera, y que se forman con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y semejantes, y ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido pirúvico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succinico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico y semejantes. Las sales particularmente preferidas de los compuestos de la invención son las sales monoclorhidrato y las sales diclorhidrato. Una "sal de adición alcalina aceptable para uso farmacéutico" se refiere a aquellas sales que retienen la eficacia biológica y las propiedades de los ácidos libres, que no sean biológicamente inconvenientes o indeseadas de otra manera. Estas sales se preparan a partir de la adición de una base inorgánica o una base orgánica al ácido libre. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen, pero sin limitaciones, las sales de sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, zinc, aluminio y semejantes. Las sales inorgánicas preferidas son las sales de amonio, sodio, potasio, calcio y magnesio. Las sales derivadas de bases orgánicas incluyen, pero sin limitaciones, sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas y resinas de intercambio de iones alcalinos, tal como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, etanolamina, 2-dimetilaminoetanol, 2-dietilaminoetanol, trimelamina, diciclohexilamina, lisina, arginina, histidina, cafeína, procaína, hidrabamina, colina, betaína, etilendiamina, glucosamina, metilglucamina, teobromina, purinas, piperazina, piperidina, N-etilpiperidina, resinas de poliamina y semejantes. Las bases orgánicas particularmente preferidas son isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetilamina, diciclohexilamina, colina y cafeína. "Ureido" se refiere a un radical de fórmula -N(H)- C (O) -N¾. A partir de las definiciones anteriores y los ejemplos se considera que para los radicales que contienen un grupo alquilo sustituido se puede producir cualquier sustitución sobre cualquiera de los carbonos del grupo alquilo. Los compuestos de la invención, o las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos, pueden tener átomos de carbono asimétricos en su estructura. Los compuestos de la invención y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos pueden entonces existir como enantiómeros, diastereoisómeros, racematos y mezclas individuales de enantiómeros y diastereoisómeros. Todos dichos enantiómeros, diastereoisómeros, racematos y mezclas individuales de los mismos se consideran dentro del alcance de esta invención. La configuración absoluta de algunos átomos de carbono dentro de los compuestos, si se conoce, está indicada por el descriptor absoluto apropiado R o S.

Utilidad y administración Los compuestos de la invención descriptos en este documento son antagonistas del receptor de la quimioquina conocida como CCRl y tienen capacidad para atravesar la barrera hematoencef lica . Los compuestos son entonces adecuados como agentes de diagnóstico in vivo para el diagnóstico por imágenes de la enfermedad de Alzheimer. La detección de radioactividad se lleva a cabo de acuerdo con procedimientos bien conocidos en el arte, ya sea usando cámara gamma o tomografia de emisión de positrones (PET) .

Preferentemente, la base libre o una forma de sal aceptable para uso farmacéutico, por ejemplo una sal monoclorhidrato o diclorhidrato, de un compuesto de la invención se usa en una formulación galénica como agente de diagnóstico. La formulación galénica que contiene al compuesto de la invención contiene optativamente los adyuvantes conocidos en el arte, por ejemplo reguladores del pH, cloruro de sodio, ácido láctico, agentes tensioactivos, etc. se puede efectuar también una esterilización por filtración de la formulación galénica bajo condiciones estériles antes de su uso. La dosis radioactiva se debe encontrar en un rango entre 1 y 100 mCi, preferentemente entre 5 y 30 mCi y más preferentemente entre 5 y 20 mCi por aplicación.

Pruebas La conveniencia de los compuestos como agentes de diagnóstico por imágenes para la enfermedad de Alzheimer se puede demostrar con los protocolos experimentales conocidos por los especialistas en el arte. Por ejemplo, la sensibilización de los receptores CCR1 en cerebros con enfermedad de Alzheimer se puede demostrar en experimentos de coloración inmunohistoquímica de tejidos de autopsia de cerebro recolectados de pacientes con enfermedad de Alzheimer como se describirá con detalle más adelante en los ejemplos. La capacidad de los compuestos de la invención de unirse al receptor CCR1 y su capacidad para atravesar la barrera hematoencefálica, también se puede evaluar mediante los ensayos in vitro e in vivo que se describirán más adelante en los ejemplos. En particular, en el ejemplo 10 se describe un gran estudio que se llevó a cabo para conocer el grado de expresión CCR1 en las diferentes etapas de la enfermedad de Alzheimer. Los tejidos de cerebro de 50 casos de autopsia mostraron una correlación entre el grado de severidad clínica (demencia) en la enfermedad de Alzheimer y la expresión de CCR1 en los neuritos distróficos. La expresión del CCR1 en las estructuras tipo placa en los cerebros de individuos clínicamente normales es rara. Además, no se ha detectado expresión de CCR1 en los cerebros de individuos con otras enfermedades neurodegenerativas a menos que exista una patología concomitante de enfermedad de Alzheimer (específicamente, ?ß1" 2 en las placas) .

Realizaciones preferidas Entre los diversos aspectos de la invención, se prefieren algunos compuestos de fórmula (I) . En particular, se prefieren los compuestos de fórmula (I) donde X1 es cloro en la posición 4 del anillo fenilo y X2 es un átomo de 1SF en la posición 4 del anillo fenilo. Se prefieren especialmente dichos compuestos para su uso como agentes de diagnóstico mediante tomografía de emisión de positrones (PET) .

Se prefieren aún más los compuestos de fórmula (I) donde RJ está en la posición 2 del anillo fenilo y R1 es un metilo en la posición 2 del anillo piperazinilo y R2 es un metilo en la posición 5 del anillo piperazinilo. Se prefieren igualmente los compuestos de fórmula (I) donde R3 está en la posición 2 del anillo fenilo y R1 es un metilo en la posición 2 del anillo piperazinilo y R2 es hidrógeno. Se prefieren además estos compuestos preferidos en las forma de sus sales mono o diclorhidrato. Entre los diversos aspectos de la invención, se prefieren algunos compuestos de fórmula (II) . En particular, los compuestos de fórmula (II) donde -N(R4)R° se encuentra en la posición 2 del anillo fenilo y R1 se encuentra en la posición 2 del anillo piperazinilo y R2 se encuentra en la posición 5 del anillo piperazinilo. Se prefieren igualmente los compuestos de fórmula (II) donde -N(R4)RD se encuentra en la posición 2 del anillo fenilo y R1 es un metilo en la posición 2 del anillo piperazinilo y R2 es hidrógeno. Se prefieren aún más los compuestos de fórmula (II) , donde R5 comprende un quelante acorde con la fórmula (III) : o la fórmula (IV) : asi como los complejos de los mismos con 9 mTc, 1SoRe y 188 Re. Entre estos compuestos preferidos, se prefieren aún más los compuestos de fórmula (II) donde R5 comprende un quelante acorde con la fórmula (III) o (IV), y donde el quelante está unido al nitrógeno en el grupo -N(R) S del compuesto no radioactivo de fórmula (II) mediante un grupo ligador que comprende un radical alquilo que tiene de uno a diez átomos de carbono, donde el radical alquilo contiene optativamente uno a diez grupos -C(O)-, uno a diez grupos -C(0)N(R)-, uno a diez grupos -N(R)C(0)-, uno a diez grupos -N (R) -, uno a diez grupos -N(R)2f uno a diez grupos hidroxi, uno a diez grupos -C(0)0-, uno a diez átomos de oxigeno, uno a diez átomos de azufre, uno a diez átomos de nitrógeno, uno a diez átomos de halógeno, uno a diez grupos arilo y uno a diez anillos heterociclicos saturados o insaturados, donde R es hidrógeno o alquilo. Un grupo ligador preferido es -C (0) -CH2-N (H) -. Entre los compuestos de la invención, los compuestos de fórmula (I) más preferidos son los compuestos seleccionados del grupo formado por los siguientes: 1- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2-metil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) urea; N' - (mercaptoet-l-il ) -N' - (5-mercapto-3-aza-2-oxopent-1-il) -N-{5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il] glicilglicinaraida, complejo con tecnecio-99ra; 1- (2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] -5-iodo-i23I-fenil) urea; N' - (2-mercapto-et-l-il) -N' - ( 5-mercapto-3-aza~2-oxopent-l-il) -N' - (5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpi-pera-zin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il] glicinamida, complejo con tecnecio-99m; ?'- (2-mercaptoet-l-il) -N- (5-mercapto-3-azapent-l-il ) -N-{5-cloro-2- [2- [4- ( 4-fluorobencil ) -2- (2R) -metilpiperazin-1-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il] glicinamida, complejo con tecnecio-99m; 2- (2-amin-4-clorofenoxi) -1- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- (2-amin-4-clorofenoxi) -1- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin~l-il] etan-l-ona; 2- (2-amin-4-clorofenoxi) -1- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-19F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- (2-amin-4-clorofenoxi) -1- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-:5F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- [4-cloro-2- (dietilamin) fenoxi] -1- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- [4-cloro-2- (dietilamin) fenoxi]-!- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-lsF-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- [4-cloro-2- (dietilamin) fenoxi]-!- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-19F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il ] etan-l-ona; 2- [4-cloro-2- (dietilamin) fenoxi] -1- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro~18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 1- (5-cloro-2- (2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3- (2, 4-diclo-rofenil) urea; 1- (5-cloro-2- {2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (2, -dicloro-fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS)-4- (4-fl oro-18F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (2, -dicloro-fenil)urea/. 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiper zin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (2, 4-diclo-rofenil ) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-lsF-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( -fluoro-18F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS)-4- ( 4-fluoro-18F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ ( 2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2~oxoetoxi } fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) rea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-lsF-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-1fiF-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; 1- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil ) -2, 5, -dimetilpi-perazin-l-il] -2- (2-isopentilamin-4-clorofenoxi) etan-l-ona; 1- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5, -dimetilpipe razin-l-il] -2- (2-isppentilamin-4-clorofenoxi) etan-l-ona; 1- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5, -dimetilpipe razin-l-il] -2- (2-isopentilamin-4-clorofenoxi) etan-l-ona; 1- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2,5,-dimetilpipera-zin-l-il] -2- (2-isopentilamin-4-clorofenoxi) etan-l-ona; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-metiIpropanamida; N- (5-cloro-2- (2- [ (2RS, 5RS ) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-metilpropanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-diiaetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-metilpropanamida; N (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) -2-metilpropanamida; N (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (metoxi) acetamida; N (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (metoxl) acetamida; N (5-.cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (metoxi ) acetamida; N- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR)-4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (metoxi) acetamida; (E) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-butenamida; (E)-N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-diraetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-butenamida; (E) -N- ( 5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-butenamida; (E) -N- (5-cloro-2- (2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-lsF-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-butenamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2 , 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil ) succinamato de metilo; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, SRS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2/ 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) succinamato de metilo; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) succinamato de metilo; ' N- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) succinamato de metilo; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR,5RS)-4~ ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) succinamato de etilo; N- (5-cloro-2- (2- [ (2RS, 5RS)-4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi) fenil) succinamato de etilo; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-19F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) succinamato de etilo; N- (5-cloro-2-f2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il]-2-oxoetoxi}fenil) succinamato de etilo ; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil ) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( -fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil)"acetamida; N- (5-cloro-2- (2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-13F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) acetamida; N- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpíperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) propanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-^F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) propanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2 , 5-dimetilpiperazin-l-il ] -2-oxoetoxi] fenil) propanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-diraetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) propanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-fluorobenzamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS ) - - (4-fluoro-18F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-fluorobenzamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-13F-bencil ) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-fluorobenzamida; N- (5-cloro-2-{2- [ ( 2RS , 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-fluorobenzamida; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3- (p-tolil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F~bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (p-tolil) urea; 1- (5-cloro-2- {2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-19F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3- (p-tolil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3- (p-tolil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-etilurea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-etilurea; 1- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-etilurea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS)-4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -3-etilurea; l-bencil-3- (5-cloro-2- (2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; l-bencil-3- (5-cloro-2- { 2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; l-bencil-3- (5-cloro-2- { 2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-13F-bencil) -2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) urea; l-bencil-3- (5-cloro-2-f 2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-13F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; 1- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-iSF-bencil) -2, 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) -3- (4-nitrofenil) urea; l-"(5-cloro-2- {2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (4-nitrofenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil ) -3- (4-nitrofenil) urea; 1- (5-cloro-2-{2- [ (2SR 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -3- (4-nitrofenil) urea; 2- (2-bencilarain-4-clorofenoxi) -1- [ (2SR, 5RS ) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- (2-bencilamin-4-clorofenoxi) -1- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-13F-bencil) -2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- (2-bencilamin-4-clorofenoxi) -1- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; 2- (2-bencilamin-4-clorofenoxi) -1- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] etan-l-ona; N- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) glicinamida; N- (5-cloro-2-f2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) glicinamida; N- (5-cloro-2- {2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) glicinamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) glicinamida; 1- (5-cloro-2- {2- [ (2R) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2-metil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil ) urea; 1- (5-cloro-2-{2-[ (2S) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2-metil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) urea; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS , 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-(metilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-iSF-bencil) -2, 5-dimetil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-(metilamin) acetamida; N- (5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil ) - 2, 5-dimetil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi }fenil) -2-(metilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-13F-bencil) -2, 5-dimetil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-(metilamin) acetamida; 2-bromo-N- (5-cloro-2-{ (2SR, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-diiaetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) acetamida; 2-bromo-N- (5-cloro-2-{ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) acetamida; 2-bromo-N- (5-cloro-2-{ ( 2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) acetamida; 2-bromo-N- (5-cloro-2-{ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-^F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-di-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil ) -2- (ureido) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (ureido) acetamida; N- { 5-cloro-2- { 2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (ureido) acetamida; N- (5-cloro-2- (2- [ (2SR, 5RS ) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (ureido) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (1-metilureido) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (1-metilu-reido) acetamida; N- ( 5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5RS ) -4- ( 4-fluoro-1£F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (1-metilu-reido) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS)-4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi) fenil) -2- (1-metilu-reido) acetamida; (2RS) -N- (5-cloro-2- (2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida; (2SR) -N- ( 5-cloro-2- { 2- [ (2RS, 5SR) -4- (4-fluoro-13F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida; (2RS) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- (4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -2-aminopropanamida; (2SR) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida (2RS) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -2-aminpropanamida; (2SR) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS ) -4- ( 4-fluoro-ieF bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida; (2RS) -N- (5-cloro-2- {2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida; (2SR) -N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-aminopropanamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-diitietilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi) fenil) -2- (2, 4-difluorobenzoilamin)acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- ( -fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (2, 4-difluorobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2- (2-[ (2SR, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) -2- (2, -difluorobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (2,4-difluorobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2- (2- [ (2SR, 5RS) -4- ( -fluoro-18F-bencil) 2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-(metoxiacetilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS) -4- (4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2-(metoxiacetilamin) acetamida; N- { 5-cloro-2- { 2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -2-(metoxiacetilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5SR)-4- (4-fluoro-I8F-bencil) 2 , 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (metoxiacetilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-f2- [ (2SR, 5RS) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) -2- (2-iodobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2RS, 5RS ) -4- (4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l~il]-2-oxoetoxi}fenil)-2~ (2-iodobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2-{2- [ (2SR, 5SR) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (2-iodobenzoilamin) acetamida; N- ( 5-cloro-2- {2- [ (2RS, 5SR) -4- ( -fluoro-18F-bencil) - 2, 5-dimetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) -2- (2-iodobenzoilamin) acetamida; N- (5-cloro-2- [2- [ (2R) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2-metil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) glicinamida; y N- (5-cloro-2-{2- [ (2S) -4- ( 4-fluoro-18F-bencil) -2-metil-piperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fenil) glicinamida asi como las sales mono y diclorhidrato de los mismos .

Preparación de los compuestos de la invención A. Preparación de los compuestos de fórmula (I) En general, los agentes para diagnóstico por imágenes radioactivos de fórmula (I) de la presente invención se preparan haciendo reaccionar derivados 4-halobencilo radioactivos con derivados piperazina. Se prefieren los derivados 4-flüorobencilo marcados con _8F para el diagnóstico por imágenes mediante PET. Un método general para preparar haluros 4-fluoro-18F-bencilo se describe en Iwata et al., Applied Radiation and Isotopes (2000), Vol. 52, págs . 87-92. Los derivados 4-flüorobencilo marcados con 18F se preparan haciendo reaccionar un compuesto benzaldehido de fórmula (a) con iones 18F para obtener un compuesto benzaldehido de fórmula (b) : donde LG es un grupo saliente, por ejemplo, bromo, cloro, iodo, nitro o N(R) 3+ X~ (donde R es alquilo y X es un ión halo, tal como Br, CI" o I";un ion de un ácido alcanoico, tal como un ion acetato (C¾C (O) O") ; o un ion de un ácido alquilsulfónico o un ácido haloalquilsulfónico, tal como triflato (CF3SC>3~) ) . Preferentemente, LG es triflato. A partir del compuesto de fórmula (b) , existen varias vías de síntesis para preparar los compuestos de fórmula (I) . En una primera vía de síntesis, se reduce un compuesto de fórmula (b) con NaB¾ para obtener un compuesto de fórmula (c) : El compuesto de fórmula (c) se hace reaccionar después con HI, P2I o Ph3PBr2 para obtener un compuesto sustituido con iodo o bromo de las fórmulas (d) o (e) : Los compuestos de las fórmulas (d) y (e) se pueden obtener con un rendimiento radioquimico del 50 al 60%. La pureza radioquímica es mayor que un 95% . La actividad especifica de los compuestos es de 5 mCi por 1 nmol . Luego se puede hacer reaccionar un compuesto de las fórmulas (d) o (e) con un derivado piperazina (f) para obtener un compuesto de fórmula (g) (un compuesto de fórmula (I) ) : (f) (d) o (e) Los compuestos de fórmula (f) se pueden preparar de acuerdo con los métodos conocidos por los especialistas en el arte y se describen con detalle en la publicación de Solicitud de Patente PCT, O 98/56771. En una segunda vía de síntesis, se hace reaccionar directamente un compuesto de fórmula (b) con un compuesto de fórmula (f) usando un agente reductor, por ejemplo, ácido fórmico, formiato de amonio, NaB¾ o NaBH3CN, para obtener un compuesto de fórmula (g) (un compuesto de fórmula (I) ) : B. Preparación de los compuestos de fórmula (II) Para la tomografia computada de emisión de fotón único ("SPECT") , se prefieren los compuestos marcados con 99mTc. Dichos compuestos son compuestos de fórmula (II) . La via de síntesis general para estos compuestos comienza con análogos no radioactivos de los compuestos de fórmula (II) que se hacen reaccionar con quelantes de unión a 9mTc, por ejemplo quelantes-N2S2. La preparación de los análogos no radioactivos de los compuestos de fórmula (II) se describe con detalle en la publicación de la Solicitud de Patente PCT, WO 98/56771. La síntesis de los quelantes emplea procedimientos estándar, por ejemplo, los procedimientos que se describen en A. Mahmood et al., A N2S2~Tetradentate Chelate for Solid-Phase Synthesis: Technetium, Rhenium in Chemistry and Nuclear Medicine (1999) , Vol. 5, pág. 71, o en Z.P. Zhuang et al., Bioconjugate Chemistry (1999), Vol. 10, pág. 159. Los quelantes preferidos son los quelantes de las fórmulas (III) o (IV) : Uno de los quelantes se une directamente al nitrógeno en el grupo -N(R4)R5 del compuesto no radioactivo de fórmula (II) o bien, mediante un grupo ligador que comprende un radical alquilo que tiene uno a diez átomos de carbono, donde dicho radical alquilo contiene optativamente uno a diez grupos -C(0)~, uno a diez grupos -C(0)N(R)-, uno a diez grupos -N(R)C(0)-, uno a diez grupos -N (R) -, uno a diez grupos -N(R) , uno a diez grupos hidroxi, uno a diez grupos -C(O)0-, uno a diez átomos de oxigeno, uno a diez átomos de azufre, uno a diez átomos de nitrógeno, uno a diez átomos de halógeno, uno a diez grupos arilo y uno a diez anillos heterocíclicos saturados o insaturados, donde R es hidrógeno o alquilo. El grupo ligador preferido es -C (O) -C¾-N (H) - . Los siguientes ejemplos específicos se proveen a modo de guía para asistir en la práctica de la invención y no pretenden limitar el alcance de la invención.

' Ejemplo 1 Preparación de 1- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -2-metilpiperazin-l-il ] -2- oxoetoxi } enil) urea k + (BOC)2° MECT UBOC DIEAIMECL2 BOC S A. Se agregó DIEA (19,10 mi, 110 mmol) a una solución de (R) - (- ) -2-metilpiperazina (10 g, 100 mmol) en 250 mi de cloruro de metileno. Se enfrió la solución a -10°C. Se disolvió el anhídrido BOC en 250 mi de cloruro de metileno y se agregó dicha solución a la solución fría de piperazina durante el transcurso de 1 hora. Se dejó entibiar la reacción a temperatura ambiente durante 16 horas. Se filtró la mezcla de reacción para eliminar los sólidos y se lavó el filtrado con 500 mi de agua, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó para dar un aceite. Se purificó el aceite utilizando cromatografía en flash en columna para rendir 11,0 g del compuesto de fórmula (a) . B. Se disolvieron el compuesto de fórmula (a) (11,0 g, 55 mmol) y DIEA (10,5 mi, 60,4 mmol) en 100 mi de cloruro de metileno. Se enfrió la solución resultante a 15-10°C. Se agregó a la solución cloruro de cloroacetilo (4,37 mi, 55 mmol) gota a gota manteniendo la temperatura a -10 °C. Luego de agitar la mezcla de reacción durante 1 hora se lavó con 100 mi de agua, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó para dar un aceite. El aceite se purificó utilizando cromatografía en flash en columna para rendir 14,8 g del compuesto de fórmula (b) . C. Se agregó carbonato de potasio (18,48 g, 133,7 mmol) a una solución del compuesto de fórmula (b) (14,8 g, 53,5 mmol) y del compuesto de fórmula (e) (9,98 g, 53,5 mmol) en 75 mi de DMSO. Se calentó la mezcla resultante a 50 °C durante 3 horas. La mezcla se enfrió a 30°C y se vertió en 700 mi de agua. El agua se extrajo tres veces con 200 mi de acetato de etilo. Se combinaron los extractos de acetato de etilo y se lavó con 200 mi de KOH 1N seguidos de salmuera. Se secó la fase orgánica sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó hasta dar una espuma. Se purificó la espuma utilizando cromatografía en flash en columna para rendir 19, 6 g del compuesto de fórmula (c) . D. Se disolvió el compuesto de fórmula (c) (7,68 g, 18 mmol) en 40 mi de acetato de etilo. Se enfrió la solución resultante en un baño de hielo y se hizo burbujear gas HCl anhidro a través de la solución durante 5 minutos. El producto precipitó mientras la mezcla se dejó reposar a temperatura ambiente durante 1 hora. El producto se recolectó por filtración, se lavó sobre el filtro con acetato de etilo fresco, y se secó al vacío a temperatura ambiente hasta peso constante para rendir 5,9 g de 1- (5-cloro-2- {2- [ (2R) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) rea, el compuesto de fórmula (d) , como un sólido blanco; RMN (2 rotómeros) ; (400 MHz, DMSO) 9,7 (m, 0,5H), 9,2 (m, 0,5H), 8,16 (s, 1H) , 8,13 (s, 0,5H), 6,8 (s, 2H) , 4,9 (m, 2H) , 4,4 (m, 5H) , 3,8 (bs, 0, 5H) , 3,4 (bs, 0,5H), 3,2 (m, 2,5H), 3,0 (m, 2H) 1,2-1,4 (m, 3H) ppm.

Ejemplo 2 Preparación del compuesto de fórmula A una solución de 2-amino-4-clorofenol (10 g, 69,7 mmol) en 100 ral de THfc' anhidro a temperatura ambiente se agregó isocianato de trimetilsililo (18,8 mi, 139,4 mmol) de una vez. La solución se calentó a 60 °C y permaneció a dicha temperatura durante 22 horas luego de las cuales se agregó agua (1,3 mi, 76,7 mmol) . Luego de 30 minutos se enfrió la solución a temperatura ambiente y se concentró para dar un aceite marrón. Dicho aceite se disolvió en acetato de etilo, se trató con carbón activado, se secó sobre sulfato de magnesio y se filtró. El filtrado se concentró para dar un sólido rosado que se desde tolueno/metanol 10:1, para dar 5,4 g del compuesto de fórmula (e) como un polvo pardo.

Ejemplo 3 Preparación de 1- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -4- (4-fluoro-1BF-bencil) -2- metilpiperaxin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) urea A. Se preparó fluoruro de hidrógeno-18F en un ciclotrón mediante bombardeo de H20-130 con protones. El fluoruro de hidrógeno-18F resultante se adsorbió sobre un cartucho de intercambio aniónico. El fluoruro de hidrógeno-18F se eluyó con una solución de Kryptofix 222 (15 mg, 40 umol) y K2CO3 (2,77 mg, 20 umol) en acetonitrilo acuoso (1,5 mi, 66%). Las fracciones radioactivas se evaporaron a sequedad en una corriente de gas nitrógeno. Se repitió dicho procedimiento tres veces con acetonitrilo seco (1 mi) . Luego de agregar una solución de 4-trimetilamonio-benzaldehido-triflato (2 mg, 6,4 umol) en DMF seco (250 µ?) la mezcla de reacción resultante se calentó durante 5 minutos a 100°C. Luego de enfriar una solución de 1- (5-cloro-2- {2- [ (2R) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}fenil) urea a temperatura ambiente, se agregaron un compuesto de fórmula (d) , (3 mg, 8,3 umol) en 50 µ? de ácido acético y una solución de cianoborhidruro de sodio (4 mg, 63,7 umol) en 100 µ? de DMF seco. La mezcla de reacción se calentó a 120°C durante 10 minutos. Luego de agregar 5 mi de agua, se filtró la mezcla con un cartucho de poliestirol. El producto adsorbido se lavó con 2 mi de agua para rendir el compuesto del titulo, 1- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -4- (4-fluoro-18F-bencil ) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxo-etoxi } fenil ) urea, que se eluyó con 1,5 mi de acetonitrilo y se purificó utilizando HPLC. B. Otros compuestos de fórmula (1) que contienen un átomo 18F se preparan en una forma similar.

Ejemplo 4 Preparación de N- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2- metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi }fenil) glicinamida A. A una solución de (R) - (-) -2-metilpiperazina (2,0 g, 20 mmol) en 20 ml de CH2C12 se agregó DIEA (5,2 g, 40 mmol) y cloruro de 4-fluorobencilo (2,39 ml, 20 mmol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas. Luego de completar la reacción, la mezcla de reacción se lavó con agua (3x20 ml) y salmuera, luego se secó sobre a2S0,se filtró y se concentró al vacio para obtener el compuesto de fórmula (f) (2,2 g) en forma de un sólido blanco.

B. Se agregó cloruro de cloroacetilo (0,84 mi, 10 mmol) a una solución del compuesto de fórmula (f) (2,2 g, 10 mmol) en 50 mi de CH2C12. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos y luego se agregó trietilamina (3 mi, 21 mmol) . Luego de 30 minutos, se lavó la mezcla con agua (3x20 mi) y salmuera, luego se secó sobre Na2SC>4 , se filtró y se concentró al vacío para obtener un aceite. La purificación utilizando cromatografía instantánea en columna permitió obtener el compuesto de fórmula (g) (2,5 g) . C. A una solución del compuesto de fórmula (g) (2,4 g, 8,4 mmol) en 50 mi de DMF se le agregó K2C03 (2,5 g, 17 mmol), Nal (0,2 g) y 4-cloro-2-nitrofenol (1,3 g, 8,4 mmol). La mezcla resultante se calentó a 70-80 °C. Luego de 1 hora, la mezcla se concentró al vacio, luego se recogió en acetato de etilo (150 mi) y se lavó con agua (3x100 mi) y luego salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre NasSO se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía instantánea en columna rindió el compuesto de fórmula (h) (3,1 g) . D. A una solución del compuesto de fórmula (h) (1,1 g, 2,6 mmol) en 10 mi de etanol se le agregó una solución de di-hidrato de cloruro de estaño (II) (3,0 g, 13 mmol) en 5 mi de etanol. La mezcla resultante se calentó a 75°C. Luego de 1 hora, la reacción se concentró al vacío, luego se recogió sobre acetato de etilo (100 mi) , se lavó con solución 1N de NaOH en agua (3x100 mi) y salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre a S04, se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía en flash en columna rindió el compuesto de fórmula (i) (0,75 g) . E. A una solución del compuesto de fórmula (i) (0,7 g, 1,78 mmol) en 10 mi de DMF se le agregó BOC-Gli-OSU (0,58 g, 2,13 mmol) . Se calentó a la mezcla resultante 50-60 °C. Luego de 24 horas, la mezcla se concentró al vacío, luego se recogió en acetato de etilo (150 mi) y se lavó con agua (3x100 mi) y luego salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre NaaSOj, se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía en flash en columna rindió el compuesto de fórmula ( ) (0,7 g) . F. A una solución del compuesto de fórmula (j) (0,6 g, 1,1 mmol) en 10 mi de CH202 se le agregó TFA (5 mi) . La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente. Luego de completar la reacción en 1 hora, se concentró dicha reacción al vacío, luego se recogió en acetato de etilo (100 mi) , se lavó con solución 1N de NaOH en agua (2x100 mi) y salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía en flash en columna rindió N-(5-cloro-2- {2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi } fenil) glicinamida, el compuesto de fórmula (k), (0,45 g) en forma de un sólido blanco; RMN (CDC13) 10,2 (s, 1), 8,5 (s, 1), 7,3 (m, 2), 7,0 (m, 3), 5,8 (d, 1), 4,7 (m, 2), 3,4-3,6 (m, 5), 3,0 (m, 1), 2,8 (m, 1), 2,6 (d, 1), 2,2 (m, 1), 2,0 (m, 2) , 1,2-1,4 (m, 3) ppm.

Ejemplo 5 Complejo de tecnecio-99m de N' - (mercaptoet-l-il) -N' - (5- mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N-{5-cloro-2- [2- [4- (4- fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1- il Iglicil-glicinamida A. A una solución agitada de N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] en-1-il}glicinamida (175,5 mg, 0,4 mmol) (el compuesto de fórmula (k) que se preparó según se expuso anteriormente en el ejemplo 4) , N- (S-tritil-2-mercaptoet-l-il) -N- (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il ) glicina (291,4 mg, 0,4 mmol) (que se puede sintetizada de acuerdo con A. Mahmood et al., "Un quelato tetradentado de N2S2 para síntesis en fase sólida: Tecnecio, Renio en Química y Medicina Nuclear" (A ;S2 Tetradentate Chelate for Solid Phase Synthesis: Technetium, Rhenium. in Chemistry and Nuclear Medicine) (1999), Vol . 71), y N-hidroxisuccinimida (45,5 mg, 0,4 mmol) en 5 mi de diclorometano se le agregó gota a gota una solución de diciclohexilcarbodiimida (81,4 mg, 0,4 mmol) en 3 mi de diclorometano. Se agitó la suspensión resultante durante toda la noche a temperatura ambiente. Luego de filtrar, se evaporó la solución resultante bajo presión reducida. Se aisló el producto deseado, N- (S-tritil-2-sulfanilet-l-il) -N- (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2 [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -me-tilpiperazin-l-il ] -2-oxoetoxi] fen-1-il ) glicilglicinamida [340 mg, 72,8%) luego de una cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol, 98:2) como un polvo blanco. Análisis elemental: Cale: C 69,93 H 5,87 N 7,20 O 6,85 S 5,49 Encontrado: C 69,69 H 6,05 N 7,01 O S 5,32 B. Se disolvió N- (S-tritil-2-sulfanilet-l-il ) -N- (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1-il } glicilglicinamida (116,8 mg, 0,1 mmol) , que se preparó según se expuso anteriormente, en 5 mi de ácido trifluoroacético . Luego de agregar trietilsilano (48 µ? 0,3 mmol) se agitó la suspensión resultante durante 15 minutos a temperatura ambiente. El filtrado se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con 7 mi de éter dietílico. El precipitado se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente y se eliminó por filtración, rindiendo el producto deseado, sal de ácido bis-trifluoracético de N- (mercaptoet-l-il ) -N- (5-mercapto-3-aza~2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- ( 4-fluorobencil ) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il }-2-oxoetoxi] fen-l-il) glicilglicinamida, (87 mg, 95,5%), en forma de un sólido blanco.

Análisis elemental: Cale: C 44,81 H 4,65 N 9,22 O 15,80 S 7,04 Encontrado: C 44,54 H 4,91 N 8,99 O S 6,80 C. Se disolvieron tartrato disódico (1 mg) y sal de ácido bis-trifluoracético de N- (mercaptoet-l-il) -N- (5-mer-capto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluoro-bencil) -2- (2R) -itietilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il }gli-cilglicinamida, (100 µg) , que se preparó según se expuso anteriormente, en 500 µ? de buffer fosfato de sodio (0,1 M, pH= 8,5) . Luego de agregar 37 MBq de eluato generador de 99raTc, se agregaron 5 µ? de solución de cloruro de estaño (II) y se calentó la mezcla durante 10 min. a 100°C. El análisis HPLC mostró un pico principal indicando que el producto deseado, complejo de tecnecio-99m de N'- (mercaptoet-l-il) -N'- (5-mercapto-3-aza-2-oxo-pent-l-il ) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- ( -fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il } glicilglicinamida, se sintetizó con una RCP> 90%.

Ejemplo 6 Preparación de 1- (2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2- metilpiperazin-l-il ] -2-oxoetoxi } -5-yodofenil) urea A. A una solución de p-yodofenol (2,2 g, 10 mmol) en 18 mi de ácido acético se le agregó gota a gota una solución de HNO3 (0,7 mi, 70%) en 5 mi de ácido acético durante el transcurso de 10 minutos. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente. Luego de 30 minutos, se diluyó la mezcla de reacción con 100 mi mezcla de agua-hielo. Se recolectó el precipitado y se lavó con 100 mi de agua. La purificación utilizando cromatografía instantánea en columna rindió 1,2 g de 2-nitro-4-yodofenol . B. A una solución del compuesto de fórmula (g) (0,3 g, 1,05 mmol) (según se preparó aquí) en 10 mi de DMF se le agregó K2C03 (0, 45 g, 32 mmol) , Nal (0,01 g) y 2-nitro-4-yodofenol (0,28 g, 1,05 mmol). La mezcla resultante se calentó a 70-80°C. Luego de 1 hora, la mezcla se concentró al vacío, luego se recogió en acetato de etilo . (150 mi) y se lavó con agua (3x100 mi) y luego salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre Na^SCU, se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía en flash en columna rindió 0,28 del compuesto de fórmula (1). C. A una solución del compuesto de fórmula (1) (0,28 g, 0,55 mmol) en 5 mi de etanol se le agregó una solución de dihidrato de cloruro de estaño (II) (0,616 g, 2,73 mmol) en 5 mi de etanol. La mezcla resultante se calentó a 75°C. Luego de 1 hora, la reacción se concentró al vacío, luego se recogió en acetato de etilo (100 mi), se lavó con solución 1N de NaOH en agua (3x100 mi) y salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre Na^SO^, se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía instantánea en columna rindió el compuesto de fórmula (m) (0,25 g) . D. A una solución del compuesto de fórmula (m) (0,25 g, 0,52 mmol) en 3 mi de AcOH se le agregó agua (6 mi) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, luego se agregó gota a gota una solución de KOCN (0, 085 g, 1,0 mmol) en 1 mi de agua. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, luego se calentó a 55°C durante 5 minutos. Luego de completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío, luego se recogió en CH2C12 (50 mi) , se lavó con solución 2N de NaOH en agua (2x100 mi) y salmuera. Se separó la fase orgánica, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró al vacío para rendir un aceite. La purificación utilizando cromatografía en flash en columna rindió el compuesto de fórmula (n) (0,16 g) en forma de un sólido blanco; RMN (CDCI3) 9,0 (s, 1), 8,6 (s, 1), 7,3 (m; 2), 7,0 (t, 3), 6,6 (d, 1), 4,9 (s, 2), 4,7 (m, 2), 4,4 (m, 1) , 3,4-3,6 (m, 3), 3,0 (m, 1) 2,8 (m,l), 2,6 (d, 1), 2,2 (m, 1) , 2,0 (m, 1), 1,2-1,4 (m, 3) ppm.

Ejemplo 7 Preparación de 1- (2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2- metilpiperazin-l-il ] -2-oxoetoxi } -5-yodo-123I-fenil) urea A. A una solución del compuesto de fórmula (n) (1 mg) , que se preparó según se expuso anteriormente, y 10 µg de sulfato de cobre (II) en 300 µ? de DMF se le agregó 1 mCi solución de yoduro [123I] de sodio. La mezcla de reacción resultante se calentó durante toda la noche a 100°C. Luego de agregar 1 mi de solución acuosa semi-saturada de NaHC03 se extrajo el producto con 2 mi de CH2CI2. La fase orgánica se evaporó a sequedad en una corriente de gas nitrógeno. Se purificó el producto deseado, 1- (2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi}-5-yodo-123I~fe-nil) urea, usando un Cartucho RP [eluyente: EtOH/agua (2:1)].

B. Otros compuestos de fórmula (1) se preparan en una forma similar a la que se describió anteriormente.

Ejemplo 8 Complejo de tecnecio-99m de N' - (2-mercaptoet-l-il) - N'- (5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5~cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil ) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1-il } gli-ci-namida A. A una solución agitada de 156,7 mg (0,4 mmol) 5-cloro-2- [2- [4- ( -fluorobencil) -2- (2 ) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] anilina (compuesto de fórmula (i)) (291,4 mg, 0,4 mmol) , N- (S-tritil-2-mercaptoet-l-il) -N- (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2~oxopent-l-il) glicina (sintetizada de acuerdo con A. Mahmood et al., "U quelato tetradentado de N2S? para sintesis en fase sólida: Tecnecio, Renio en Química y Medicina Nuclear" (A N-S^-Tetradentate Chelate for Solid-Phase Synthesis: Technetium, Rhenium in Chemistry and Nuclear Medicine) (1999), Vol . 5, p. 71) y N-hidroxisuccinimida (45,5 mg, 0,4 mmol) en 5 mi de diclorometano se le agregó gota a gota una solución de diciclohexilcarbodiimida (81,4 mg, 0,4 mmol) en 3 mi de diclorometano. Se agitó la suspensión resultante durante toda la noche a temperatura , ambiente . Luego de filtrar, se evaporó la solución resultante bajo presión reducida. El producto deseado, N' - (S-tritil-2-mercaptoet-l-il) - '- (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N-{5-cloro-2- [2- [4- ( 4-fluorobencil ) -2- (2R) -metilpipe-ra-zin-1-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il } glicinamida (352mg, 79,2%), se aisló luego de una cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol, 98:2) como un polvo blanco. Análisis elemental: Cale: C 71,36 H 5,90 N 6,30 O 5,76 S 5,77 Encontrado: C 71,08 H 6,13 N 6,05 O S 5,52 B. Se disolvió N'- (S-tritil-2-mercaptoet-l-il) -N' - (S-tritil-5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- {5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1-il } glicinamida (111,1 mg, 0,1 mmol) en 5 mi de ácido trifluoroacético . Luego de agregar 48 µ? (0,3 mmol) de trietilsilano la suspensión resultante se agitó durante 15 min. a temperatura ambienre. El filtrado se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con 7 mi de éter dietílico. El precipitado se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente y se eliminó por filtración, rindiendo el producto deseado, sal de ácido bis-trifluoracético de N- (2-mercaptoet-l-il ) -N- (5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluoro-bencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il}gli-cinamida, (75mg, 87,8%) en forma de un sólido blanco. Análisis elemental: Cale: C 44,99 H 4,60 N 8,20 O 14,98 S 7,51 Encontrado: C 44,71 H 4,89 N 8,03 O S 7,22 C. Tartrato disódico (1 mg) tartrato disódico y sal de ácido bis-trifluoracético de N- (2-mercaptoet-l-il) -N- (5-mer-capto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1-il } glicinamida, (100 µ?) se disolvieron en 500 µ? de buffer fosfato de sodio (0,1M, pH= 8,5). Luego de agregar 37,5 mBq de eluato generador de 99mTc, se agregaron 5 µ? de solución de cloruro de estaño (II) y se calentó la mezcla durante 10 minutos a 100°C. El análisis por HPLC mostró un pico principal indicando que el producto deseado, Complejo de tecnecio-99m de N'- (2-mercaptoet-l-il) -N'- ( 5-mercapto-3-aza-2-oxopent-l-il) -N-(5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il) glicinamida, se sintetizó con una RCP> 91 %.

Ejemplo 9 Complejo de tecnecio-99m de N- (2-mercaptoet-l-il) -N- (5-mer- capto-3-azapent-l-il) -?-{5-?1?G?-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi]fen-l-il}glicinamida A. A una solución agitada de 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluoro-bencil ) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] anilina (156,7 mg, 0,4 mmol) y trietilamina (40,5 mg, 0,4 mmol) en 5 mi de diclorometano se le agregó gota a gota una solución de cloruro de oí-bromoacetilo (63 mg, 0,4 mmol) en 3 mi de diclorometano. La solución resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. Se evaporó el solvente bajo presión reducida. El producto deseado, N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il}-2-broraoacetamida (175 mg, 85,3%), se aisló luego de una cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol, 99:1) como un polvo blanco. Análisis elemental: Cale: C 51,53 H 4,72 N 8,19 0 5,76 Encontrado: C 51,28 H 4,99 N 7,92 0 B. Una solución agitada de N- { 5-cloro-2- [2- [4- ( 4-fluoro-bencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-1-il }-2-bromoacetamida (165 mg, 0,42 mmol) y ?,?-bis- [S- (4-m.eto-xi-bencil) -2-mercaptoet-l-il] etilendiamina (841, 3mg, 2 mmol) (sintetizada de acuerdo con Z.P. Zhuang et al., Bioconjugate Chem. (1999), Vol. 10, p. 159) en 1, 4-dioxano (5 mi) se calentó bajo reflujo durante 24 horas. La mezcla de reacción resultante se evaporó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en 15 mi de diclorometano y se lavó con solución acuosa saturada de carbonato de sodio. Luego de secar sobre MgS04 se evaporó el solvente bajo presión reducida. El producto deseado, N-(S-(4-metoxibencil ) -2-mercaptoet-l-il) -N- (S- ( '-me-toxibencil) -5-mercapto-3-azapent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il } glicinamida (154 mg, 43%) , se aisló luego de una cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol, 9:1) como un polvo blanco . Análisis elemental: Cale: C 61,99 H 6,50 N 8,22 O 9,38 S 7,52 Encontrado: C 61,71 H 6,58 N 8,03 O S 7,28 C. Se disolvió N- (S- (4-metoxibencil) -2-mercaptoet-l-il) -N- (S ( ' -metoxibencil ) -5-mercapto-3~azapent~l-il) -N-{5-cloro-2- [2- [4- (4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il }glicinamida (140 mg, 0,164 mmol) a 0°C en 5 mi de ácido trifluoroacético . Luego de agregar Hg(OAc)2 (104,5 mg, 0,328 mmol) la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos a 0°C y se saturó con H2S durante 15 min. Luego de filtrar se evaporó el solvente bajo presión reducida. Se trituró el aceite amarillo resultante con 3 mi de éter dietilico. Luego de filtrar se aisló el producto deseado, sal de ácido tris-trifluoracético de N' - (2-mercaptoet-l-il) -N' - (5-mercapto-3-azapent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- ( 4-fluorobencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il } glicinamida, (126 mg (80,5%), como un polvo blanco. Análisis elemental: Cale: C 42,79 H 4,44 N 7,34 O 15,09 S 6,72 Encontrado: C 42,48 H 4,73 N 7,02 O S 6,76 D. Se disolvieron tartrato disódico (1 mg) y sal de ácido tris-trifluoracético de N' - (2-mercaptoet-l-il) -N'- (5-mer-cap-to-3-azapent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluoro-bencil) -2- (2R) -metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il} gli-ci-na-mida, (100 µg) en 500 µ? de buffer fosfato de sodio (0,1M, pH= 8,5). Luego de agregar 37,5 mBq de eluato generador de 99raTc, se suero normal de cabra al 10% (NGS) en PBS durante 30 minutos. Se diluyeron los anticuerpos primarios [Anti-CCRl de conejo, (péptido N-terminal) ; antineurofilamento de ratón; anti-GFAP de ratón; anti-Tau de ratón (A 8 ) ; anti-CD68 de ratón (clon KP1); anti- -aiuiloide de ratón (Boehringer Mannheim, #1 381 431) ; anti-CCR8 de cone o, (péptido N-terminal) ] en PBS-T y las preparaciones se incubaron durante toda la noche a temperatura ambiente. Se completó la tinción usando un kit Biogenex ABCMK. Todos los lavados utilizaron PBS-T. Luego de completar la reacción DAB, las preparaciones se contratiñeron ligeramente con Hematcxilina de Gilí, se deshidrataron y se montaron los cubreobjetos con Permount . Antes de montar los cubreobjetos, algunas preparaciones se re-tiñeron con anticuerpos contra péptido ?ß usando métodos idénticos excepto que el cromógeno fue True BlueMR. Para los estudios de inmunofluorescencia de marcado doble se desparafinaron las preparaciones, se bloquearon con NGS al 10%, y se incubaron durante toda la noche con un cóctel de ambos anticuerpos primarios. Las preparaciones se lavaron con PBS-T y luego se incubaron con un cóctel de anticuerpos secundarios de cabra, cada uno a una dilución 1/50. Para evitar la confusión proveniente de la fluorescencia endógena del tejido (amarillo verdosa) , se conjugaron los anticuerpos secundarios tanto con Cy3 (smax= 565nm; cabra-antiratón, Amersham) como con Cy5 nm; cabra-anti-conej o, Amersham) . Se observaron las preparaciones en un microscopio 57 agregaron 5 µ? de solución de cloruro de estaño (II) y se calentó la mezcla durante 10 minutos a 100°C. El análisis por HPLC mostró un pico principal indicando que el producto deseado, complejo de tecnecio-99m de N- (2-mercaptoet-l-il) -N-(5-mercapto-3-azapent-l-il) -N- { 5-cloro-2- [2- [4- (4-fluoro-bencil) -2- (2R) -raetilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi] fen-l-il } gli-cinamida, se sintetizó con una RCP> 95%.

Ejemplo 10 Localización inmunohistoquímica de CCRl en cerebros humanos Materiales y métodos Un primer grupo de muestras de tejido provenientes de cerebros obtenidos por autopsia dentro de las 12 horas de la muerte se utilizaron para la tinción inmunohistoquímica del receptor CCRl de quimioquina en la enfermedad de Alzheimer y cerebros para control. Para todas las tinciones inmunohistoquímicas e histoquímicas se utilizaron secciones de 5 um de espesor sin teñir provenientes de la corteza frontal y del hipocampo, incluidas en parafina. Las preparaciones se desparafinaron en xileno y se hidrataron en solución salina al buffer fosfato con Tritón X100 al 0,005% (PBS-T) . Para la microscopía óptica (usando DAB como cromógeno) se bloqueó la actividad peroxidasa endógena incubando las preparaciones con H202 al 0,01% en metanol durante 30 minutos. Se redujo la unión no específica bloqueando con confocal con un láser criptón-argón (modelo 2010, Molecular Dynamics, Sunnyvale, CA) . Subsiguientemente, se obtuvo un segundo grupo de tejidos cerebrales compuesto de 10 casos de edad avanzada cognitivamente normales y 40 casos provenientes de pacientes de enfermedad de Alzheimer para quienes se hizo una estimación de puntaje de demencia clínica (CDR) y se evaluó su expresión inmunohistoquímica de CCRl . Las muestras se tiñeron para CCRl y otros marcadores según se describió anteriormente excepto que los anticuerpos monoclonales (clon #6D5) específicos para ?ß·1""42 (un marcador para depósitos amiloides difusos, tempranos así como para placas neuríticas más maduras) se obtuvieron de la Dra. Ursula Moenning. Dichos anticuerpos se visualizaron con Vector RedMR (Vector Labs) . La Dra. Moenning también proporcionó anticuerpos monoclonales específicos para ?ß1-40 (clon #13E9),un marcador para placas encontrado en etapas tardías de enfermedad, que se visualizó con True BlueMR.

Resultados En ambos conjuntos de cerebros, áreas con patología de la enfermedad de Alzheimer mostraron un patrón de tinción característico. Se encontró inmunorreactividad CCRl asociada con placas neuríticas (es decir, seniles) tanto en la formación del hipocampo como en la corteza cerebral. Las estructuras inmunoteñidas eran redondas a ovaladas y usualmente no se asociaban con cuerpos celulares. Las mismas variaban de tamaño y parecían estar llenas de un material granulado punteado. Se encontró que dichas estructuras formaban "coronas" alrededor de los depósitos amiloideos en placas seniles, pero eran distintos de los ?ß en sí (Figuras 1-4) . La parte superior de la figura 1 muestra una placa neurítica con una corona de procesos positivos ante CCR1. Algunas veces los cuerpos celulares neuronales de algunas neuronas CAI y CA3 en casos de la enfermedad de Alzheimer resultaron teñidas por anticuerpos CCR1. La última parte de la figura 1 ilustra dicho descubrimiento. Dicha tinción era diferente de las redes neurofibrilares (NFT) o cuerpos granulovacuolares, aunque normalmente estaba presente en las somas de neuronas con dichos cambios degenerativos. Según se ilustra en la figura 2, la pre-incubación de anticuerpos con un pclipéptido 16-mer de la región extracelular (N-terminal) de la proteína receptora de CCR1 bloqueó completamente toda la tinción de tejido. En particular, la imagen superior en la figura 2 muestra una falta de tinción en cerebro con la enfermedad de Alzheimer con anticuerpos CCR1 pre-incubados con el polipéptido mientras que la imagen inferior de la figura 2 muestra muchas estructuras CCR1-positivas en una sección con las mismas características teñida con anticuerpos no incubados. Los estudios de marcado doble mostraron que casi todas Según se muestra en la figura 4, las estructuras CCR1-positivas se asociaban con placas neuríticas que contenían ?ß?~ 2. En placas difusas (Figura 5) ?ß1-42 no se asociaba típicamente con CCRl ni con ninguna respuesta celular significativa. En casos más avanzados de enfermedad de Alzheimer, se vieron muchas más placas A 1_40-positivas . Según se muestra en la figura 3, algunas de las mismas, aunque no todas se asociaban con tinción CCRl. En algunos casos las placas CCRl-positivas se hallaban completamente libres de tinción ?ß1-40. En casos severos de enfermedad de Alzheimer donde se vieron pérdida neuronal y gliosis significativas, los astrocitos reactivos en el subículo y la corteza entorrinal también resultaron CCRl-positivos . En casos menos severos, no eran comunes los astrocitos reactivos CCRl-positivos . La microscopía confocal de secciones doblemente marcadas mostró que la inmunorreactividad CCRl se co-localizaba con procesos positivos ante neurofilamentos . El marcador macrófago/microglial, CD68, no se asoció con la tinción CCRl, ni tampoco el anticuerpo ATS contra proteína Tau fosforilada anormalmente. Según se esperaba de los estudios de microscopía óptica, la inmunorreactividad CCRl se co-localizó con GFAP en áreas de astrogliosis . Los leucocitos presentes dentro de los vasos cerebrales fueron fuertemente positivos ante CCRl tanto en enfermedad de Alzheimer como en tejidos cerebrales de control, sirviendo como controles internos positivos para los métodos de tinción. Nótese la tinción CCRl-posítiva de dos células intravasculares en la figura 5 (flechas) . Algún material CCR1-positivo también se muestra con un asterisco, pero en general, las placas difusas no se asocian con CCRl. Se emprendió una evaluación cuantitativa de la cantidad de estructuras similares a placas CCRl-positivas en el hipocampo, usando tejido del hipocampo del segundo estudio (donde se agruparon los pacientes en categorías clínicas conocidas mediante puntaje CDR) . Se llevaron a cabo evaluaciones histológicas de secciones individuales bajo condiciones ciegas con respecto al estado clínico (CDR) . Los análisis de volumen se llevaron a cabo usando métodos de computación imparciales. La figura 3 muestra la relación histológica entre neuritas distróficas CCRl-positivas (teñidas en marrón) y una placa neurítica que contiene ?ß1-40 (teñida en azul) . Nótese que en la figura 3 los procesos CCRl-positivos difieren de los amiloides. Las placas con ?ß1"40 eran discretas y se contaron fácilmente, así como los grupos de neuritas CCRl-positivas. Se evaluaron las placas de hipocampo para estimar la cantidad de coronas CCRl-positivas, la cantidad de placas A1_40-positivas, y la cantidad de placas que contienen ambos marcadores. Se contaron las estructuras por región (por ejemplo, CA3, CAI, y subiculo) dentro de la formación completa del hipocampo, incluyendo la corteza entorrinal y luego se totalizaron. Los valores son estimaciones relativas de la cantidad de estructuras en el hipocampo según lo representado por secciones transversales de la formación del hipocampo de 5ßp? de espesor. La figura 6 muestra la relación entre CCR1 y ?ß1- 0 por puntaje CDR. La cuantificación de la cantidad de ?ß1-42 requirió una récnica diferente porque ?ß~42 era más abundante y formaba placas "difusas" que no se podrían enumerar fácilmente (véase la figura 5) . Para dichas placas se utilizó un método asistido por computadora (C.A.S.T. sistema de estereología) para estimar el área de corteza entorrinal ocupada por ?ß1-42. Se expresó dicha área como un porcentaje del área total de corteza sobre la placa. Las áreas ocupadas por placas neuríticas y difusas se contaron por separado. La platina de microscopio manejada por computadora aseguró la evaluación al azar (imparcial) de las secciones de tejido. En la figura 7 se compara el volumen % de corteza entorrinal ocupada por ?ß1"42 (tanto difusa como neurítica) con la cantidad de placas CCRl-positivas en una sección de corteza entorrinal con las mismas características. La figura 6 muestra que en la enfermedad de Alzheimer la cantidad promedio de neuritas distróficas CCRl-positivas en el hipocampo aumenta como una función del puntaje CDR. La cantidad de estructuras positivas en la etapa temprana de la enfermedad de Alzheimer (CDR 0,5) aumenta sobre los niveles de control (CDR 0) . Aunque las diferencias entre los grupos de control y de enfermedad de Alzheimer no se hizo estadísticamente significativa hasta el grupo CDR 2, dichos patrones de expresión apoyan la conclusión que CCRl está regulado en forma ascendente en procesos neuronales distróficos aún en etapas muy tempranas de la enfermedad de Alzheimer. Nótese que la cantidad de placas ?ß1-40 no aumenta hasta etapas más tardías de la enfermedad. De esa manera, la expresión CCRl en tejido cerebral se puede considerar un indicador relativamente temprano de la enfermedad de Alzheimer. En la figura 7 se muestra la correlación entre la cantidad de placas CCRl-positivas en la corteza entorrina y la cantidad de ?ß1-42. En general, los niveles de CCRl en la corteza entorrina aumentan a medida que aumenta el estado de enfermedad; sin embargo, el área mostrada es mucho más pequeña que el área que se muestra en la figura 6. Sin embargo, nótese que los niveles de ?ß1-42 aumentan en las primeras etapas de la enfermedad.

Ejemplo 11 Estimación de la disponibilidad cerebral, usando un trazador marcado con 1C Se preparó un análogo de 1C de 1- (5-cloro-2-{2- [ (2R) -4- (4-fluorobencil) -2-metilpiperazin-l-il] -2-oxoetoxi} fenil) urea y se utilizó para estudios farmacocinéticos de disponibilidad cerebral. Se inyectaron ratones en forma i.v. a través de venas yugulares encanuladas con el análogo a 36 mg/kg conteniendo 334.000 dpm por dosis. Se sacrificaron los ratones (en grupos de cuatro) a 1, 15, 30, 120, y 1440 minutos luego de la inyección mediante inhalación de CO2 seguido de punción intracardiaca para eliminar la sangre completa. Luego se les abrió el pecho y los ratones se perfundieron a través del corazón con solución salina al buffer fosfato durante cinco minutos para eliminar la droga radioactiva residual del compartimento de la sangre. Luego se extrajeron los cerebros, se pesaron, y se muestreó la cantidad de radioactividad en dos partes separadas de la corteza cerebral. Se promediaron los niveles radioactividad por mg de tejido en las dos muestras y los datos se normalizaron al peso total del cerebro, según se ilustra en la figura 8. Las barras representan la desviación estándar (n=4 ratones por punto de tiempo) . En particular, el gráfico de la figura 8 muestra que dos horas después de la inyección, el total de la cantidad de desintegraciones por minuto (DPM) para el análogo de 14C en cerebro completo de ratón disminuye hasta niveles despreciables. En el punto de tiempo de un minuto, los cálculos muestran que, en promedio, en el cerebro completo de ratón (peso promedio de 450g) se encuentra aproximadamente un 3% de la dosis inyectada. También se analizó el contenido radioactivo de las muestras de plasma preparadas con la sangre completa extraída de los ratones. Según se ilustra en la figura 9 se comparó a través del tiempo la cantidad de radioactividad en volúmenes iguales de cerebro y plasma como un porcentaje de la dosis inyectada. El % de dosis inyectada (i.d.) que se encontró por mi de plasma también disminuyó a través del tiempo, alcanzando niveles despreciables luego de dos horas. Para una comparación con los niveles cerebrales, se normalizó la cantidad total de DPM por cerebro a un peso cerebral de un gramo y se expresó como un porcentaje de la i.d. por gramo de tejido cerebral. Nótese que los cerebros ratón pesan un promedio de aproximadamente 450 mg de tal manera que el % de la i.d. en lg de cerebro de ratón que se muestra en el gráfico sobrestima el valor real en aproximadamente el doble. Es claro que los niveles del análogo en el cerebro caen junto con los niveles en plasma. Aunque el análogo es lipofílico, el cerebro de ratón normal no parece ser un sitio de depósito para el antagonista de CCRl.

Ejemplo 12 Expresión de CCRl en otras Enfermedades Neurodegenerativas Materiales y Métodos Se obtuvieron muestras histológicas de tejido cerebral de autopsia de un total de- 29 casos provenientes de siete enfermedades neurodegenerativas diferentes (distintas de la enfermedad de Alzheimer pura) y se estudió el contenido de CCRl. Se inmunotiñieron las placas con anticuerpos contra CCRl según se describe en el ejemplo 10 citado anteriormente y se revisaron con respecto a la enfermedad neurodegenerativa especifica bajo condiciones ciegas. Subsiguientemente, secciones con las mismas características se marcaron doblemente con anticuerpos contra CCRl (DAB como cromógeno) y ?ß4-2 (Vector RedMR como cromógeno) . Las enfermedades examinadas se mencionan abajo: Enfermedad de Parkinson (PD) 6 casos Demencia parkinsoniana de Guam 3 casos Angiopatía congofílica 4 casos Demencia multi-infarto (MID) 4 casos Demencia con cuerpos de Lewy difusos (DLBD) 4 casos Enfermedad de Pick4 casos Parálisis progresiva supranuclear (PSP) 4 casos Se clasificó el contenido de CCRl y ?ß4"2 de las placas teñidas usando una escala histológica de 0 a 4, con 0 como ausencia de tinción, 0,5 indicando expresión rara, y grados 1 hasta 4 indicando niveles de expresión en aumento con 4 como muy abundante.

Resultados Los seis casos de enfermedad de Parkinson y los tres casos de demencia parkinsoniana de Guam fueron negativos para CCR1. En los 4 casos de angiopatia congofilica, en 3 de los 4 casos de DLBD, en 2 de los 4 casos de PSP, y en 1 de los 4 casos tanto de MID como de enfermedad de Pick. Se observaron estructuras similares a placas positivas ante CCR1, similares a las encontradas en la enfermedad de Alzheimer. Los estudios de marcado doble confirmaron la suposición que dichas estructuras similares a placas positivas ante CCR1 se asociaban con ?ß^-2, según se encontró en casos puros de enfermedad de Alzheimer (Ejemplo 10) . La figura 10 muestra los resultados de las evaluaciones patológicas en forma gráfica para todas las enfermedades excepto para la de Parkinson (que es negativa ante CCR1 en cerebro) . Básicamente, nunca se encontró expresión CCP.l en muestras de tejido cerebral a no ser que también resultaran presentes placas neuríticas positivas ante ?ß4-2. Después de la ruptura del código, se descubrió que el caso de enfermedad de Pick que mostraba expresión CCR1 también llevaba el diagnóstico de enfermedad de Alzheimer. Los dos casos de PSP con CCR1 también resultaron diagnosticados con enfermedad de Alzheimer concurrente. La angiopatia congofilica y DLBD son enfermedades que se asocian estrechamente con la patología de la enfermedad de Alzheimer. Por lo tanto, no es sorprendente que también podrían tener altos niveles de expresión CCR1 asociados con ?ß4-2. En poblaciones de edad avanzada frecuentemente se da el caso que la patología de la enfermedad de Alzheimer enmascara otros procesos de enfermedad. Se encontró que esto sucedía en uno de cada cuatro casos de MID. Dichos resultados sugieren que CCR1 es un marcador que se asocia estrechamente con la patología de la enfermedad de Alzheimer (específicamente, placas neuríticas Ap4_2-positivas) dejando de lado otros procesos patológicos concurrentes que pueden estar presentes en el cerebro. Como tal, es probable que sea altamente específico para la patología de la enfermedad de Alzheimer y por lo tanto puede ser útil como un marcador sustituto para diagnosticar el progreso de la enfermedad. Como se ha descrito la presente invención con referencia a las formas de realización específicas de las mismas, aquellos experimentados en el arte deberían comprender que se pueden hacer diferentes cambios y se pueden sustituir equivalentes sin apartarse del verdadero espíritu y alcance de la invención. Además, se pueden hacer muchas modificaciones para adaptar una situación en particular, material, composición de materia, proceso, paso o pasos de proceso, al objetivo, espíritu y alcance de la presente invención. Todas dichas modificaciones se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones anexas.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES compuesto de la fórmula en donde : X y X2 son cada uno, independientemente entre si, halo; R1 y R2 so cada uno, independientemente entre si, hidrógeno o alquilo; y Rá es hidrógeno, amina, monoalquilamina, dialquilamina, monoaralquilamina, alquilcarbonilamina, alquenilcarboni-l-amina, haloalquilcarbonilamina, arilcarbonil-amina, alcoxialquilcarbonilamina, alcoxicarbonilalquil-carbonilamina, glicinamida, monoalquilglicinamida, aril-carbonilglicinamida, aminocarbonilglicinamida, (amino-carbonil) (alquil) glicinamida, (alcoxialquilcarbonil) -glicinamida, ureido, monoalquilureido, monoarilureido, monoaralquilureido o alaninamida; y en donde cualquiera de X1 o X2 se selecciona del grupo formado por 123I, 125I, 1 8I, 131I, 75Br, 76Br, 80Br y 18F; o, donde uno de los átomos de carbono en el compuesto es 1:LC; o una sal aceptable para uso farmacéutico de los mismos. 2. Un compuesto de fórmula (II): en donde X1 y X2 son cada uno, independientemente entre sí, halo; R1 y R2 son cada uno, independientemente entre sí, hidrógeno o alquilo; y R4 es hidrógeno; y R5 comprende un quelante capaz de unirse a un átomo de metal radioactivo seleccionado del grupo formado por 99ir'Tc, 186Re y 188Re; o como un complejo con 99mTc, 186Re y 188Re; o una sal aceptable para uso farmacéutico de los mismos. 3. El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde dicho compuesto se une al receptor de la quimioquina CCR1 y atraviesa la barrera hematoencefálica . . El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde R1 es metilo en la posición 2 del radical piperazinilo y R2 es metilo en la posición 5 del radical piperazinilo. 5. El conpuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde R1 es metilo en la posición 2 del radical piperazinilo y R2 es hidrógeno. 6. El compuesto de la reivindicación 1, en donde X" es cloro en la posición 4 del radical feniio y X2 es un átomo de "F en la posición 4 del radical feniio. 7. El compuesto.de la reivindicación 2, en donde R5 es un quelante de fórmula (III) : 8. El compuesto de la reivindicación 2, en donde Rc es un quelante de fórmula (IV) : 9. El compuesto de la reivindicación 7 o de la reivindicación 8, en donde R5 además comprende un grupo ligador que comprende un radical alquilo que tiene uno a diez átomos de carbono, donde el radical alquilo contiene optativamente uno a diez grupos -C(0)-7 uno a diez grupos -C(0)N(R)-, uno a diez grupos -N(R)C(0)-, uno a diez grupos -N(R)-, uno a diez grupos -N(R)2, uno a diez grupos hidroxi, uno a diez grupos -C(0)0-, uno a diez átomos de oxigeno, uno a diez átomos de azufre, uno a diez átomos de nitrógeno, uno a diez átomos de halógeno, uno a diez grupos arilo y uno a diez anillos heterociclicos saturados o insaturados, donde R es hidrógeno o alquilo. 10. El compuesto de la reivindicación 9 , en donde el grupo ligador es -C (0) -C¾-N (H) . 11. Una sal monoclorhidrato de un compuesto de la reivindicación 1 a la reivindicación 10. 12. Una sal diclorhidrato de un compuesto de la reivindicación 1 a la reivindicación 10. 13. Un método de diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer en un ser humano que comprende la administración a un ser humano que necesita dicho diagnóstico de una compuesto acorde con la reivindicación 1 a 12 y la medición de la radioactividad producida por la administración del compuesto a dicho ser humanos, ya sea mediante cámara gamma o tomografia de emisión de positrones (PET) . 1 . Un método para usar un compuesto acorde con la reivindicación 1 a 12, en donde es para la elaboración de un producto radiofarmacéutico destinado al diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer en un ser humano. 15. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (I) acorde con la reivindicación 1, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (f) : (f) En donde R1, R2, R3, y X1 son como se definieron en la reivindicación 1, con un corapuesto de fórmula (b) : (b) en presencia de un agente reductor.