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PIRANQINDQLES PARA EL TRATAMIENTO DEL GfeAUCOMA ' La presente invención se enfoca a piranoindoles sustituidos novedosos. Estos compuestos novedosos son útiles para disminuir y controlar la presión intraocular (PIÓ) normal o . a 5 elevada y para tratar el glaucoma. i i * ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La enfermedad .conocida como glaucoma se caracteriza por una -pérdida permanente de la función visual debido a un daño irreversible al nervio óptico. Los varios tipos morfológica o 10 funcionalmente distintos de glaucoma se caracterizan tipicamente por una PIÓ elevada, que se considera como la causa de la evolución patológica de la enfermedad. La hipertensión ocular es una condición en la cual la presión intraocular es elevada pero no ha ocurrido ninguna pérdida 15 párente de función visual; estos pacientes se' consideran como de alto riesgo para el desarrollo eventual de, la pérdida visual asociada con glaucoma. Algunos pacientes con pérdida "•? ^ de campo glaucomatoso tienen una presión intraocular >' - relativamente baja. Pacientes con glaucoma conocidos como Jft normotensos o de baja tensión pueden también bneficiarse de • agentes que disminuyen y controlan la PIÓ. Si el glaucoma o hipertensión ocular se detectan temprano y se tratan rápidamente con fármacos que reducen efectivamente la presión intraocular elevada, se puede generalmente mejorar la pérdida 25 de la función visual o su deterioro progresivo. Terapias
farmacológicas que a^ comprobado ser efectivas para la reducción de la presión mtraocular incluyen agentes que^ difminuy$n
de humor É I S? y agentes que 'incrementan la facilidad de flujo hacia el exterior. Dichas t- 5 ? erapias son administradas generalmente a través de una de dos rutas posibles, tópicamente (aplicación directa al ojo) o bien oralmente. fxisten ciertas personas que no responden bien cuando s<?n tratadas con ciertas terapias existentes para el glaucoma. t# "for consiguiente existe la necesidad de otros agentes terapéuticos tópicos que controlan la PIÓ. Se ha encontrado que compuestos serotonérgicos que poseen una actividad agonista en los receptores de 5-HT2 disminuyen afectivamente y controlan una PIÓ normal y elevada y son , 15 tiles para el tratamiento del glaucoma, réase la solicitud copendiente mancomunada PCT/US99/19888. Compuestos que actúan ? como agonistas en los receptores de 5-HT2 son bien conocidos „ y tienen varias utilidades, primariamente para trastornos y" condiciones asociados con el sistema nervioso central (CMS) « $ß La patente norteamericana No. 5,494,928 divulga ciertos derivados de 2- (indol-1-il) -etilamina que son agonistas dé 5- t, HT2C para el tratamiento de trastorno compulsivo obsesivo y otros trastornos de la personalidad derivados del sistema nervioso central. La patente norteamericana 5,571,833 divulga *'2^ derivados de triptamina que son agonistas de 5-HT_ para el *>
f- ^- ,
. tratamiento de la hipertensión portal y ttigráña. La patente A'norteamericaria No. 5 874,477 divulga un método para el tratamiento de la malaria empleando agonista^ de 5-HT2A'2c- L . J t y patente norteamericana No. 5,902,815 divulga el uso < «deí S agonistas de 5-HT2A para prevenir efectos adversos de la i hipofunción de receptor de NMDA. El documento 098/31354A2 divulga agonistas de 5-HT2B para el tratamiento de la depresión y otras condiciones del sistema nervioso central. El documento WO00/12475 divulga derivados de indolina como * J*IM) *-agonistas de receptor de 5-HT2B y 5-HT2c para el tratamiento de**' varios trastornos del sistema nervioso central, pero ^especialmente para el tratamiento de la obesidad. El ¿ ,.documento WO00/35992 divulga ciertos derivados de - • pirazino?l, 2-a] quinoxalina como agonistas de 5-HT2C para el 15 tratamiento de trastorno obsesivo-compulsivo, dep esión, trastornos de la alimentación, y otros trastornos „que t ' involucran el sistema nervioso central. Respuesta agonista en' el receptor de 5-HT2ft se reporta como la actividad primaria responsable de la actividad halucinogénica, con una posible , f participación menor del receptor de 5-HT2c ffPsychopharmacology, Vol. 121:357, 1995). Ciertas pirano [3, 2-e)indol-3-etilaminas y los análogos de N, N-dimetilamino correspondientes han sido reportados en Combinación con estudios de perfil de enlace con receptor de "* 2S* -sßrotonina [J. Med. Chem. 35,3625 (1992)]. Se ha mostrad -que
estos compuestos p ^^á una buena afinidad en el receptor 5- HT2 de serofi sina, aún cuando no ee ha . asociado ninguna utilidad con estos compuestos . La síntesis de otros piranp [3, 2-e] índoles que llevan una ami&a terciaria, ya sea 3- (N~!ítetílpirrolidin-2-il>metilo] o 3- {N-metilpirrol?dm-3- ilo) , ha sido reportada [ Tetrahedron Lett. 35, 45 (1994) ] , pero no se ha observado ninguna utilidad para estos* compuestos . La deaminación metStfcwólica rápida de arlletilammas primarias en general, y triptaminas en particular, por monoamina oxidasa [Principies &f Drug Action (Principios de acción farmacológica) , 3ra Edición, página 382 (1990) ] es un impedimento significativo para el uso de tales compuestos como agentes terapéuticos. Se ha observado que" esta deaminación oxidante rápida puede ser retardada f > ^ dramáticamente o eliminada mediante la incorporación de un *? grupo alquilo en el átomo de carbono en la posición a a la , amina primaria [Biotransformation of Xenobiotics { (Bíotransformación de Xenobióticos), en Casaret & Do?ll 's oxicology, 5 Edición, C.D. Klaasen Ed. páginas 129-145 U.996) ; Medicinal res. Rev. 9, 45 (1989)]. Por consiguiente/ Se puede anticipar que compuestos que llevan dicho grupo alfa alquilo tales como los compuestos de la presente divulgación ofrecen una ventaja terapéutica clara. La solicitud EP 708,099 (1996) se refiere a la utilidad de j^irana [3,2-e] Índoles seleccionaaos como agonistas de
;4.inceptores de melatonina; y por consiguiente se enfoca exclusiv m€£ni|e hacia 3- (N-acil~aminoalquil)pirano{3, 2- e] índoles, es decir derivados de amida no básicos, co püéstcs que no incorporan una amina primaria básica, un3^¿* „ 5 ^-funcionalidad crítica para los compuestos de la preáente» divulgación. La patente norteamericana 5,461,061 divulga* , ciertas 8-amino-pirano-[3, 2-e] indol-1-alquilaminas que se indican como agonistas selectivos de 5-HTA útiles para el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central yffl incluyendo depresión, ansiedad, demencia senil, y trastornos compulsivos obsesivos. Los derivados de indolina de la patente norteamericana 5,633,276 (1997), es decir derivados 1- (N-acil-aminoetil) furano- y pirano [2, 3-g] indol, también son compuestos no básicos que son moduladores de receptores de ífS melatonina, con mayor preferencia agonistas [J. Pharmacol. Exp. Ther. 285,1239 (1998)], que son útiles para el tratamiento de condiciones asociadas con un sistema trastornado de la melatonina. COMPENDIO DE LA INVENCIÓN 20 La presente invención se enfoca a nuevos derivados de pírano[3,2-e]indol-3-etilamina y pirano [3, 2-g] indol-1- etilamina que pueden emplearse para disminuir y controlar la PIÓ asociada con glaucoma de tensión normal, hipertensión ocular, y glaucoma en anímales de sangre callente, incluyendo t " ¿ßQt humano. Los compuestos son formulados en composiciones
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farmacéuticas adecuatess para su administración tópica al ojoi DESCRIPCIÓN DE LAS MODALIB&DÉi PREFERIDAS Compuestos que son útiles de conforfildad con la presente invención son representados a través de la siguiente fórmula 5 I. FORMULA I
10 Bn donde se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxilo, * alquilo C?-C6, alcoxi Ci-Cß, NR5R6; R2 se selecciona entre hidrógeno, halógeno o alquilo C?-C$; IR3 y R5 se seleccionan entre hidrógeno o alquilo Ci-Cß; 15 3fc* es alquilo C?-C4; R6 se selecciona entre hidrógeno, alquilo Ci-Ce o C(=0)- alquilo C?-C4; X y Y son nitrógeno o carbono, pero X y Y no pueden ser idénticos; - r los enlaces de líneas de rayas ( ) se refieren a un doble t enlace adecuadamente apuntado y un enlace único; cuando Y es nitrógeno, los enlaces de línea de rayas pueden ser ambos enlaces individuales; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los
Se reconoce que los compuestos de la fórmula I pueden contener uno o varios centros quirales. - La invención contempla todos los enantiómeros, diasteredraéros y mezclas de los mismos. 5 En las definiciones anteriores, el número total de átomo- e 4 carbono en un grupo sustituyente es indicado por el prefijo» Ci--, en donde los números i y j definen el número de átomos de carbono; esta definición incluye grupos alquilo cíclicos o bien grupos (alquilo cíclicos) alquilo, de cadena recta, y de i© cadena ramificada. Es importante reconocer que un sustituyente puede estar presente ya sea de manera individual o de manera múltiple cuando se incorpora en la unidad estructural indicada. Por ejemplo, el halógeno sustituyente puede ser flúor, cloro, ,'4# bromo o yodo, lo que indica que la unidad a la cual está unido puede estar sustituido con uno o varios átomos de halógeno, que pueden ser iguales o diferentes. SÍNTESIS Los 1- (a-alquil-etílamino)-3, 7, 8,9-tetrahidro-piranoI3,2- 20 e] índoles sustituidos deseados 4 de la fórmula I pueden ser preparados a partir de los 3, 7, 8, 9-tetrahidro-pirano[3,2-e]- indoles 1 apropiadamente sustituidos a través de la secuencia foien conocida (esquema 1) que involucra una formilación de Vilsmeier-Haack del compuesto de mdol, por ejemplo 1, 25 eguido por condensación del carboxaldehído (2) resultante
con ' el aitroalcaiio apropiado para proporcionar eÑL nitroalq sn^ Correspondiente (3), que es subsecuentemente reducido 'por ejemplo con LiAlH4 para proporcionar tltfá compuestos 4 deseados de la fórmula I [Heterocycles 37f 719 (1994), J. Meé. Chem. 35,3625 (1992), J. Med. Chem. 33,2777 (1990), J. Chem. Soc. , 3493 (1958)]. Esquema I
Los 3,7,8,9-tetrahidro-pirano[3,2-e]indoles 1 pueden ser preparados a partir de los 3-metil-4-nitrofenoies sustituidos en posición 5 o en posición 6 apropiados (por ejemplo, Synth. Común. 16, 63 (1986), J. Chem. Soc. Perkin 1, 1613 (1984), J. ¿ed. Chem. 22, 63 (1979)] a través del producto intermedio 5- metíl-6-nitro-cromano sustituido en posición 7 o sustituido
transformar el grupo hidroxilo en otros grupos funcionales, por ejemplo, un halógeno sustituyente o » un grupo amino o ilquilamino. Esquema 2 10
75
il-etilamlnas) 12 deseadas déla fórmula I pueden ser preparadas a partir de '1,7,8- < tetrahidro-pirano(2,3-g]indol 9 apropiadamente
por métodos bien conocidos en la técnica y descritos en el Esquema 3 (Patente norteamericana No. 5,494,928 (1997); J. Med. Chem. 40,2762, (1997)]. Alternativamente,' los compuestos 12 pueden ser Esquema 3
preparados por el método del esquema 4. La reacción de 9 con , ? el alaminol activado 13, en donde el grupo hidroxilo ha sido *" adecuadamente activado hacia una aminaoión nucleofílica .subsecuente por formación de un éster de sulfonato (J. Chem. Soc. Perkm 1, 1479, (1981) ] por ejemplo, metansulfonilo, 25 toluensulfonilo, bromofenilsulfonilo, o nitrofemlsulfow lo,
*>*Í
proporciona é que después de desprotección N proporciona los compuestos 12 de la fórmula I . Esquema 4
DMSO KOH Desprotege 12
Los productos intermedios 1, 7, 8, 9-tetrahidro-pirano{2, 3- , g] indol 9 pueden prepararse a partir del 6-formil-cromano -apropiado a' través del método descrito en Can. J. Chßm. 60, 2093 (1982) o bien a partir del 5-a?ßíno-cromano apropiado por el método descrito en la patente norteamericana 5, 633, 276 (1997). Los compuestos de esta invención, Fórmula I, pueden ser incorporados' en varios tipos de formulaciones oftálmicas para sus administración a los ojos (por ejemplo, de manera tópica, intracameral, o bien a través de un implante) . Los compuestos son incorporados de preferencia en las formulaciones oftálmicas tópicas para su administración al ojo. Los ^compuestos pueden combinarse con conservadores oftalmológicamente aceptables, surfactantes, realzadores de la viscosidad, realzadores de la penetración, amortiguadores, cloruro de sodio, y agua para formar una suspensión o solución oftálmica estéril acuosa. Formulaciones ' de
ser preparadas mediante la disolución b un compuesto en un amortiguador acuoso ísotónico fisiológicamente aceptable. Además, la solución oftálmica puede incluir un surfactante oftalmológicamente 5 .. aceptable con el objeto de ayudar a disolver el compuestos , además, la solución oftálmica puede contener un agente para incrementar la viscosidad, por ejemplo, hidroximetilcelulosa, hidroxiet ílcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, ßietilcelulosa, polivinilpirrolidona, o similares, con el 10 objeto de mejorar la retención de la formulación en saco conjuntival . Agentes de formación de gel pueden también • utilizarse, incluyendo, sin limitarse a ellos, gelano y goma xantano . Con el objeto de preparar formulaciones para , * ttnguento oftálmico estériles, el ingrediente activo es W combinado con un conservador en un vehículo apropiado, por «jemplo aceite mineral, lanolina líquida, o petrolato blanco . Formulaciones estériles de gel oftálmico pueden prepararse ?ßdiante la suspensión del ingrediente activo en una base hidrofílica preparada a partir de la combinación, por ejemplo 0 de carbopol-974, o similares, de conformidad con las formulaciones publicadas para preparaciones oftálmicas análogas; conservadores y agentes de tonicidad pueden ser incorporados . Los compuestos se formulan de preferencia como suspensiones 5 oftálmicas tópicas o soluciones oftálmicas tópicas con ur. pH
5% en peso, pero de preferencia en una cantidad de 0.25% a 2% en peso. Así, para una presentación tópica, 1 a 2 gotas de estas formulaciones deben administrarse a la superficie del Ojo de 1 a 4 veces al día según el criterio de un medico experto . Los compuestos pueden también utilizarse en combinación con Otros agentes para el tratamiento del glaucoma, por ejemplo, sin limitarse a ellos, ß-bloqueadores (por ejemplo, timolol, betaxolol, levobetaxolol, carteolol, levobunolol, propanolol) , inhibidores de anhidrasa carbónica (por ejemplo, brinzolamida, y dorzolamida) , agonistas a-1 (por ejemplo aipradolol) , agonistas a-2 (por ejemplo, iopidina y brimonidina) , mióticos (por ejemplo, pilocarpina y epinefrina) , análogos de la prostaglandina (por ejemplo, latanoprost, travaprost, unoprostona, y compuestos presentados en las patentes norteamericanas No . 5, 889, 052; 5, 296, 504 ; 5, 422, 368; y 5, 151, 444) , "lípidos hipotensores" (por ejemplo, lumigan y compuestos presentados en 5, 352, 708) , y neuroprotectores (pro ejemplo, compuestos de la patente "norteamericana No . 4.690, 931) , particularmente eliprodilo y R-eliprodilo de conformidad con lo planteado en la solicitud pendiente Ü. S . S .N. 06/203350, y compuestos apropiados de ; -WÜ94/13275, incluyendo memantma .
invención pero no deben considerarse cola© implicando niílgúna ^limitación a las reivindicaciones. Los compuestos preferidos- J 5 sde la fórmula I se describen en los ejemplos 1, 3, 4 y ß. El compuesto más preferido es el compuesto del ejemplo 4* El espectro de resonancia magnética de protones de 'cada compuesto de los ejemplos fue consistente con la estructura asignada. , 40 MÉTODO 1 Ensayo de enlace con receptor de 5-HT2 Con el objeto de determinar las afinidades relativas de compuestos serotonérgicos en los receptores de 5-HT2, su habilidad para competir con el enlace de radioligando 15 agonista [125I]DOI con receptores de cerebrales se deterítiina de conformidad con lo descrito a continuación con « Modificación menor del procedimiento de la literatura \fNeuropharmacology, 26, 1803 (1987)]. Alícuotas de jloiaogenados de corteza cerebral de rata o de ser humano poét ?iortem (400 µl) dispersados en 50 mM de amortiguador Tris HCl (pH 7.4) son incubados con [125I]DOI (80 pM final) en ausencia *o presencia de metiotepina (10 µM final) para definir enlace total y no específico, respectivamente, en un volumen total de 0.5 ml . La mezcla de ensayo es incubada durante 1 hora a 'W na temperatura de 23° C en tubos de polipropileno y , los ? * ^ :«!*•'
'ensayos terminados por filtración rápida en vacío en filtros" ^d fibra de -vidrio Whatman GF/B previamente empapados en - * polietilenimina al 0.23% empleando amortiguador a temperatura ,« hielo* Los compuestos de prueba (en concentracioriés diferentes) son sustituidos por metiotepina. Se determina la Radioactividad unida al filtro por espectrometría «de centelleo en un contador beta. Los datos son analizados , empleando un programa de computo de ajuste de curva iterativo, no lineal [Trends Pharmacol. Sci. 16, 413 (1995M e 1© para determinar el parámetro de afinidad de compuesto. La concentración del compuesto que se requiere para inhibir el enlace de 126I]DOI en 50% del máximo se conoce como el valor *tCso. Un compuesto es considerado como poseyendo afinidad alta para el receptor de 5-HT2 si el valor IC5o es inferior a 50 15 *'i . MÉTODO 2 Ensayo funcional de 5-HT2: ensayo de producción de fosfoinositido (Pl) ^ La actividad agonista relativa de compuestos "serotonérgicos 2fr * *en el receptor de 5-HT2 puede ser determinada in vitro empleando la capacidad de los compuestos para estimular la producción de fosfatos de inocitol [ H] en células de músculo liso vascular de rata A7r5 marcadas con [3H]myo-inositol mediante su capacidad de activar la enzima fosfolipasa C. - %stas células son cultivadas en placas de cultivo, mantenidas
de 5% *CC y 95% de aire y*. alimentarás '"fß?fti-semanalmente con medio Eagle modifitíáda según Dulbecéo (DMEM que contiene 4.5 g / 1 de glucosa ' '* complementado con 2 mM de glutamina, 10 µg / mi e féntamicina, y suero bovino fetal al 10%. Para el piapósíito i -"* pfle llevar a cabo los experimentos de producción ,fosfoinositido (Pl), las células A7r5 son cultivadas en ^ flacas de 24 pozos de conformidad con lo descrito previamente |J. Pharmacol. Expt. Ther. 286, 411 (1^98)]. Células JO confluentes son expuestas durante 24-30 horas a 1.5 µCi t^]- yo-inositol (18.3 Ci / mmol) en 0.5 ml de medio sin suero. Las células son después enjuagadas una vez con DMEM / F-12 que contiene 10 mM de LCI1 antes de incubación con el agente * * J de prueba (o bien solvente como control) en X . O ml del mismo 'H 'f|tódio durante 1 hora a una temperatura de 37° C después de lo Cual el medio es aspirado y se agrega 1 ml de, ácido fórmica 0.1 M frío para detener la reacción. La separación cromatográfica de fosfato de inositol [3H] (f^j-IPs) en lá ", columna AG-1-X8 se efectúa de conformidad con lo descrito *2T previamente [J. pharmacol. Expt. Ther. 286,411 (1998)] con lavados secuenciales con H20 y 50 mM de formato de amonio, vgeguido por elusión de la fracción [3H]Ips total con formato de amonio 1.2 M que contienen ácido fórmico 0.1 M. El eluál (4 ml) es recogido, mezclado con 15 ml de fluido de centello* -i se determina [3H]-Ips total mediante conteo de centello en „
un contad r beta. Los datos de concentración-respuesta SO?H analizados por función dé ajuste sigmoide de la programática Opgm Scientific Graphic (Microcal Software, Northampton, MA) con el objeto de determinar la potencia agonista (valor EC5o) y la eficacia (Emax) . La serotonina (5-HT) se e pleaJcsmo compuesto agonista para control positivo (estándar) y lá eficacia de los compuestos de prueba se compara con la eficacia de 5-HT (establecido en 100%) . La concentración de compuesto que se requiere para estimular la producción de
10 [3H]-IPs en 50% de la respuesta máxima se conoce como el valor EC50. Compuestos se consideran agonistas potentes si sü valores de EC50 en este ensayo funcional son inferiores o iguales a 1 µM y se consideran agonistas completos si su eficacia es mayor que 80% de la eficacia de 5-HT. 15 Los procedimientos antes mencionados fueron empleados para generar los datos mostrados en la tabla 1. tabla 1. Enlace de receptor de 5-HT2 y datos funcionales Compuesto IC50, nM EC50? nM Eficacia (Emax% (R)-DOI 0.46 27.7 82 20 Ejemplo 1 0.82 189 119 Ejemplo 3 0.72 116 81 Ejemplo 4 - 111 109 Ejemplo 6 1.95 300 92 MÉTODO 3 25 Respuesta de PIÓ aguda en ojos (hipertensivos) tragados con
... Sr-?
ntes La presión intraocular (PIÓ) fue determinada con un pneuraatonómetro Alcon después de una anestesia ligera de la córnea con proparacina al 0.1%. Los ojos fueron lavados! co» solución salina después de cada medición. Después de medición de la PIÓ de línea basal, el compuesto de prueba fue* instilado en una alícuota de 30 µL en el ojo derecho- solamente de nueve mono cmomolbus. El vehículo fue instilado en los ojos derechos de seis animales adicionales. Mediciones subsecuentes de la PIÓ fueron tomadas 1,3 y 6 horas posteriormente. Un compuesto se considera eficaz en este modelo de hipertensión ocular si se observa una disminución de la PIÓ de línea basal del ojo tratado con láser (O.D.) de por lo menos 20% después de la administración tópica. El perfil de la respuesta de PIÓ después de la administración «tópica de compuestos representativos se presenta en la tabla 2. Tablas 2. Respuesta de PIÓ en mono cinomolbus conscientes Compuesto Dosis PIÓ de Reducción porcentual de µg línea PIÓ ± SEM basal Horas después de la (m Hg) administración 1 3 (R)-DOI 100 31.9 11.0 ± 4.9S 25.3 ± 2.97 Ejemplo 1 300 41.9 18.8 ± 3.31 28.0 ± 5.20
jemplo 3 300 36.7 16.0 ± 3.79 28.0 + 5.49
Compuesto * Dosis PIÓ de Reducción porcentual de µg línea PIÓ ± SEM basal Horas después de la (mmHg) administración 6 (R)-DOI 100 31.9 34.4 ± 4.98 Ejemplo 1 300 41.9 26.1 ± 5.35 Ejemplo 3 300 36.7 22.9 ± 6.70 EJEMPLO 1 Hidrocloruro de l-metil-2- (3-metil-3, 7, 8, 9-tetrahidro- pirano [3, 2-1] indol-1-il) -etilamma Paso A. 1- (2-nitropropen?l)-3-metil-3, 7, 8, 9-tetrah dro- pirano[3,2,e] indol Una mezcla de 3-metil-3, 7, 8, 9-tetrahidro-pirano[3, 2,e] indol- 1-carboxaldehído (1.02 g. 4.74 mmoles) y acetato de amonio (0.30 g, 3.90 mmoles) en 12 ml de nitroetano fue calentada a Una temperatura de 100° C durante 3 horas, agitada a temperatura ambiente durante 18 horas, mezclada con agua (50 ml) y extraída con EtOAC (3 x 50 ml) . Los extractos Combinados fueron secados (MgSOa) , filtrados y evaporados hasta sequedad. La cristalización del residuo a partir de una mezcla de diclorometano y hexano proporcionó un sólido de color anaranjado (1.10 g, 85%): punto de fusión 200-202° C. Paso B. Hidrocloruro de l-met?l-2- (3-met?l-3, 7, S, 9-
etanol y* acetato de etilo proporcionó un sdlido de color beige (0.65 *j, 40%): punto de fusión 270-271° C. Análisis Calculado para Ci4H?8N20 • HCl • 0.33 C2H5OH - 0.33 H20: C* 61.31, H, 7.54; N, 9.79. Encontrado: C, 61.37; H, 7.54; N, 9.65. EJEMPLO 4 I A " * Hidrocloruro de (R) ~2- (3, 7, 8, 9-tetrahidro-pirano[3,2-e] indol- 1-il) etilamina Paso A. (S) -l- (2-hiroxiprop?l) -3, 7, 8, 9-tetrahidro-pirana[3, 2- lO e] mdol A una solución de 3, 7,8, 9-tetrahidro-p?rano[3# 2-e] indol (1.00 g, 5.78 inmoles) en THF anhidro (50 ml) a una temperatura de 0o C, se agregó una solución de bromuro de etilmagnesio (1.0 M en terc-butil metil éter, 6.94 ml, 6.94 mmoles). La mezcla X
15- fue agitada durante 10 minutos y se agregó óxido de (S)- propileno (0.50 g, 8.67 mmoles) . Esta mezcla fue agitada durante 15 horas y después vaciada en una solución saturada ? de cloruro de amonio, que fue extraída con EtOAC (2 x 100' *ffll) . Los extractos combinados fueron secados (MsS0) y -H$b *- evaporados hasta obtener un residuo que fue purificado ,por Cromatografía en columna (sílice, 20 a 40 EtOAC en hexanó) para proporcionar un aceite (0.336 g, 27%). Paso B. (i?)-l- (2-az?doprop?l) - (3, 7, 8, 9-tetrahidro-pirano[3,2- e]mdol ¿'25 ""Se agrego anhídrxdo metansulfónico (0.477 g, 2.73 mmoles) a
la*
A (0.35 g, 1.52 inmoles) y ?
en THF anhidro (50 ml) a una temperatura de 0° C. La mezcla fue agitada durante 30 '-minutos y se agregó azida de sodio (0.59 g, 9.1 mmo3.es) seguido por evaporación hasta obtener un residuo, se agregó DMF anhidra (50 ml) y la mezcla fue calentada a una temperatura de 90° C durante 1 hora. La mezcla de la reacción fue vaciada en agua con hielo (100 ml) y esta mezcla fue extraída con EtOAC (2 x 75 ml) . Los extractos combinados fueron secados (MgS0 ) y evaporados hasta obtener un residuo que fue purificado por cromatografía en columna (sílice, de 10 a 20% de EtOAC en hexano) para proporcionar un aceite (0.26 g, 67%): LCMS (APCl) 257 (M + H). Paso C. Hidrocloruro de (R) -l-metil-2- (3,7,8, 9-tetrahidro- pirano [3, 2-e] indol-1-il) etilamina Una mezcla del producto del Paso B (0.26 g, 1.01 mmol) y 10% Pd / C (0.026 g) fue agitada bajo una atmósfera de hidrógeno durante 5 horas, filtrada y evaporada hasta sequedad. El residuo fue disuelto en EtOAC, se agregó HCl / EtOH ÍN, y la mezcla fue evaporada hasta obtener un sólido. La cristalización a partir de MeOH / EtOAC proporcionó un sólido de color amarillento (0.221 g, 79%): punto de fusión 262-264° C; [ ]D2S + 24.8° (c = 0.206, MeOH). Análisis. Calculado para C?5H20N2O • HCl • 0.5 H20: H, 7.31; C, 60.95; N, 10.15. Encontrado: H, 7.49; C, 61.25; N, 9.75.
£ !i»- 25 en dicloarpRwano (150 ml) se agregó MCPBA (2.53 g, 14. ßj mmoles) . La mezcla fue agitada durante la noche a temperatura ambiente, extraída con EtOAC (2 x 200 ml) y lavada con un» solución saturada de bicarbonato de sodio. Los extractos "combinados fueron secados, filtrados y evaporados para proporcionar un residuo que fue purificado por cromatografía' (sílice, de 10 a 20% de acetato de etilo en hexano)para proporcionar el epóxido en forma de un aceite (1.46 g, 72%), Una solución del epóxido (1.44 g, 5.74 mmoles) en THF (30 ml) fue combinado con una solución de NaOH 2 N (6 ml, 12 mmoles) , Se agregó metanol (10 ml) con el objeto de proporcionar u a solución que fue agitada durante 4 horas. La mezcla de la reacción fue evaporada hasta obtener un residuo que fue disuelto en EtOAC y lavado con agua. El EtOAC fue secado y evaporado para proporcionar un aceite (1.12 g, 93%). Paso C: 3,7, 8, -tetrahidro-pirano[3, 2-e]indol-8-ol Una mezcla del producto del Paso B (2.35 g, 11.2 mmoles) y dimetilformamida dimetilacetal (5 ml) en DMF (10 ml) fue calentada a una temperatura de 164° C durante un período de 64 horas bajo una atmósfera de nitrógeno y después evaporada hasta sequedad. El residuo fue disuelto en EtOH (100 ml) y se agregó paladio en carbono al 10% (0.20 g) . La mezcla fue agitada bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 días, filtrada y evaporada hasta sequedad. El residuo fue combinado con una mezcla de EtOAC en diclorometano y sílice y se
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Paso F: Hidrocloruro de 1- (2-aminopropil) -3, 7,8, 9-tetrahidro- pirano[3,2-e] indol-8-ol A una mezcla del producto del Paso E (0.54 g, 1.98 mmoles) en THF (50 ml) se agregó L1AIH4 (1 M, 5.93 ml) y la mezcla tili calentada a una temperatura de 70° C durante 3 horas. L mezcla de la reacción fue enfriada y se agregaron agua y NáOH al 15%. Después de agitarla durante 1 hora a temperatura . ambiente, el precipitado fue removido por filtración; el filtrado fue concentrado, mezclado con EtOAc, y lavado son salmuera. El producto crudo fue purificado por RP-HPLC (columna C-18, de 0% a 60% de acetonitrilo en agua que contiene 0.1% de TFA) para proporcionar un aceite viscoso. El aceite fue convertido en la sal de hidrocloruro (0.20 g, 36%): punto de fusión 187-192° C; MS(ES+)247(M + H) . l»as siguientes formulaciones oftálmicas tópicas son útiles de conformidad con la presente invención administradas 1-4 veces $1 día según el criterio del clínico experto en la materia. EJEMPLO 7 ingredientes Cantidad (% en peso) Compuestos del Ejemplo 3 0. 01 - 2% J?idroxipropilmetilcelulosa 0. 5% Posfato de sodio dibásico 0.2% ianhidro) Cloruro de sodio 0. 5% iTA disódico (Edetato 0 . 01 %
Polysorbaté #0 0.05% Cloruro de benzalconío 0.01% ^idróxido de sodio / Para ajustar al pH a 7.3 - 7.4 ' Ácido clorhídrico AAgua purificada q.s. hasta 100% EJEMPLO 8 ingredientes Cantidad (% en peso) Compuestos del Ejemplo 1 0.01 - 2% , tdetilcelulosa 4.0% ,*»*
Fosfato de sodio dibásico 0.2% (anhidro) * Cloruro de sodio 0.5% EDTA disódico (Edetato 0.01% ? «1 %5 Disódico) Polysorbate 80 0.05% Cloruro de benzalconio 0.01% Hidróxido de sodio / Para ajustar al pH a 7.3 - 7.4 Ácido clorhídrico 20 'Agua purificada q.s. hasta 100% EJEMPLO 9 Ingredientes Cantidad (% en peso) Compuestos del Ejemplo 3 0.01 - 2% €oma Guar 0.4-6.0% 25 ^Fosfato de sodio dibásico 0.2%
-(anhidro) Cloruro de £#&ÍQ 0.5% EDTA disódico (Edetato 0.01% Disódico) Polysorbate 80 0.05% Cloruro de benzalconio 0.01% Hidróxido de sodio / Para ajustar al pH a 7.3 - 7.4 Ácido clorhídrico Agua purificada q.s. hasta 100% EJEMPLO 10 Ingredientes Cantidad (% en peso) "Compuestos del Ejemplo 1 0.01 - 2% Petrolato blanco y aceite consistencia de ungüento mineral y lanolina Fosfato de sodio dibásico 0.2% (anhidro) Cloruro de sodio 0.5% EDTA disódico (Edetato 0.01% Disódico) Polysorbate 80 0.05% Cloruro de benzalconio 0.01% Hidróxido de sodio / Para ajustar al pH a 7.3 - 7.4 Ácido clorhídrico