MXPA02002835A - Metodo y dispositivo para concentrar y estabilizar estrogenos de la orina de las yeguas. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a un metodo y a un dispositivo para concentrar y estabilizar los estrogenos conjugados de la orina de yeguas prenadas en soportes solidos con el fin de obtener un material de partida adecuado para la produccion de agentes farmaceuticos que contienen la mezcla natural de estos estrogenos conjugados como componente activo. El dispositivo de conformidad con la invencion se caracteriza por ser adecuado para la concentracion y estabilizacion practica y descentralizada de mezcla de estrogenos conjugados (CE por sus siglas en ingles) contenidos en la orina de yeguas prenadas (PMU por sus siglas en ingles) sobre un soporte solido (= agente de adsorcion) especialmente en la proximidad del establo o del campo, en una columna o cartucho. Con el dispositivo, las columnas adsorbentes se pueden llenar directamente en el sitio de la recoleccion de la orina. El resultado es que ya no es necesario transportar diariamente grandes cantidades de liquido de orina a un punto de procesamiento central. El proceso de llenado puede tener lugar en forma continua por un periodo de tiempo mas largo de hasta varias semanas, hasta que se satura la columna o cartucho adsorbente. La orina restante que escurre al exterior se queda en el sitio, en donde de cualquier manera ya existen dispositivos adecuados para su confinacion. Solo se transporta la columna o el cartucho lleno, y el transporte puede tener lugar a intervalos mas prolongados y tomar mas tiempo, por ejemplo, hasta algunas semanas. Debido a la sorprendentemente buena estabilidad de los CE en el agente de adsorcion no existe el riesgo de descomposicion.

Description

MÉTODO Y DISPOSITIVO PARA CONCENTRAR Y ESTABILIZAR ESTRÓGENOS DE LA ORINA DE LAS YEGUAS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un método y a un dispositivo para concentrar y estabilizar los estrógenos conjugados de la orina de yeguas preñadas en soportes sólidos para obtener material de partida adecuado para la fabricación de productos farmacéuticos que contienen como componente activo la mezcla activa de estos estrógenos conjugados. Los estrógenos se usan en la medicina para la terapia de sustitución de hormonas. En particular se usan mezclas de estrógenos para el tratamiento y la profilaxis de las molestias que se presentan en las mujeres en el climaterio después de una menopausia natural o artificial.

Para esto han comprobado ser particularmente efectivas y bien tolerables las mezclas naturales de estrógenos conjugados como se encuentran en la orina de yeguas preñadas . El contenido de sólidos disuelto en la orina de yeguas preñadas (a continuación abreviado como "PMU" por la acepción inglesa = "Pregnant Mares1 Uriñe") puede variar naturalmente dentro de una gama muy amplia y se encuentra en general en la gama de 40 - 90 g de sustancia seca por litro. Además de la orina y las otras sustancias usualmente contenidas en la orina, en el contenido de sólidos de la PMU están contenidos componentes fenólicos en cantidades de aproximadamente 2 - 5 % en peso con relación a la sustancia seca. Entre estos componentes fenólicos hay cresoles y la dihidro-3, 4-bis [ (3-hidroxifenil) metil] -2 (3H) -furanona que se conoce como HPMF. Estos pueden estar presentes 'en forma libre o conjugada. En la PMU está contenida una mezcla natural de- estrógenos que está en gran medida presente en forma conjugada, por ejemplo como sal de sodio del semiéster del ácido sulfúrico (a continuación abreviada como "sal de sulfato"). El contenido de_ est-rógenos conjugados (a continuación abreviado como "CE" en razón del término inglés = "Conjugated Estrogen") puede ser de 0.3 a 1 % en peso calculado como sal de sulfato de estrógeno y con relación a la sustancia seca. Para la preparación y obtención directa de los estrógenos- conjugados que contiene la PMU se describen diversos métodos en el estado de la técnica. Comúnmente los extractos que contienen estrógenos conjugados de la PMU se obtienen mediante la extracción con un solvente orgánico polar no miscible con agua o solo poco miscible con agua como, por ejemplo, acetato de etilo, n-butanol o ciclohexanol . Sin embargo con estas extracciones de tipo liquido-liquido se presentan una multitud de problemas como son fuerte formación de espuma, formación de sedimento, formación de emulsión y mala separación de fases. En general se requieren varias etapas de extracción, lo cual conduce a pérdidas y una obtención solo parcial del contenido de estrógeno. Para evitar estas desventajas se propusieron por lo tanto en el estado de la técnica una serie de métodos de extracción de fase sólida. Para la preparación de pequeñas cantidades de líquidos de orina y plasma para una determinación analítica de estrógenos mediante cromatografía en fase gaseosa, Heikkinnen et al. (Clin. Chem. 27/7, (1981), 1186 - 1189) y Shacketon et al. (Clinica Chimica Acta 107(1980) 231 -243) describen una extracción de estrógenos en fase sólida mediante un cartucho con gel de silice silanizado que contiene residuos de octadecilsilano (Sep-PakR C18-cartridge, fabricante Waters Ass. Inc. Milford, MA, USA). En esto los estrógenos se lixivian del cartucho con metanol. H.L. Bradlo propuso en 1968 (ver Steroids 11 (1968) 265 - 272) usar Amberlite XAD-2R, una resina de poliestireno neutral, apolar, hidrófoba de la empresa Rohm & Haas para la extracción de estrógenos conjugados de orina. La capacidad de adsorción indicada es poca. Según Bradlow se hace pasar una orina opcionalmente diluida a una baja velocidad de paso a través de una columna que contiene la resina. Los estrógenos se lixivian con metanol o etanol.

Las solicitudes de patente mas recientes describen métodos para obtener un extracto que contiene las mezclas naturales de estrógenos conjugados de orina de yeguas mediante la extracción en fase sólida de la mezcla de estrógenos conjugados de la orina de yeguas preñadas en, por ejemplo, gel de silicede fase inversa (WO 98/08525) o en resinas de adsorción poliméricas no iónicas semipolares (WO 98/08526) . Además de la optimización precedentemente descrita del acondicionamiento directo, completo de la orina de yeguas preñadas (PMU) para la obtención de mezclas naturales de estrógenos conjugados (CE) , para el rendimiento y la calidad de la materia prima que contiene estrógeno, y de la mezcla natural de estrógenos conjugados que a partir de ella se deberá aislar también son de particular importancia las etapas previas al acondicionamiento como son, por ejemplo, el aseguramiento de un almacenaje y manejo cuidadosos para el estrógeno en el sitio de recolección de la orina. En este contexto también se deberá procurar una optimización del transporte de la materia prima que contiene estrógeno recolectada desde el sitio de la recolección hasta el sitio del acondicionamiento y aislamiento de los estrógenos conjugados .

Un acondicionamiento completo de la PMU mediante, por ejemplo, extracción en fase sólida requiere de personal quimico-farmacéutico especializado, calificado para poder mantener bajo condiciones bien controlables los altos requisitos de pureza y calidad de una sustancia o mezcla de sustancias que se deberá usar como principio activo farmacéutico. La recolección de la orina (PMU) sin embargo por lo general se lleva a cabo en el entorno normal de las yeguas preñadas, es decir, en acaballaderos, un ámbito campesino y frecuentemente también en sitios mas remotos. Por regla general en esos sitios solo existe una infraestructura simple y la recolección de la orina (PMU) y su manejo la lleva usualmente a cabo personal humilde adiestrado al cual no se le pueden imponer exigencias demasiado estrictas en lo referente al manejo de la orina recolectada. Los estrógenos conjugados (CE) cuya composición es como la excretada en la orina de yeguas preñadas son una mezcla compleja que contiene en particular estronsulfato de sodio, equilinsulfato de sodio asi como otros CE. Para el aislamiento de los CE es muy importante que la PMU se acondicione lo mas rápido posible en estado fresco. Con un almacenaje algo prolongado la orina se comienza a descomponer rápidamente. La orina adquiere un tono oscuro, huele a amoniaco y baja mucho el contenido de CE. La velocidad de descomposición depende de las condiciones de almacenamiento y de criterios de limpieza". Por consiguiente, puesto que se trata de grandes cantidades de liquido, la orina (PMU) recolectada debe hasta ahora ser transportada diariamente desde el sitio de la recolección a un sitio central de acondicionamiento para poder asegurar un acondicionamiento lo mas rápido posible. Por consiguiente existe una urgente necesidad de métodos y dispositivos adecuados para, con el trato mas cuidadoso posible para el producto y máxima sencillez de manejo, llevar a cabo directamente en el sitio de recolección de la orina (PMU) una concentración y estabilización de los estrógenos conjugados (CE) contenidos en la orina de yeguas preñadas, asi como de un transporte lo mas eficiente posible desde el sitio de recolección al sitio del acondicionamiento y el aislamiento. Por consiguiente es el objeto de la presente invención desarrollar un método técnico adecuado para la obtención de la mezcla natural de estrógenos conjugados y un dispositivo adecuado para la concentración y estabilización de los estrógenos conjugados (CE) de la orina recolectada de yeguas preñadas que evite las desventajas precedentemente descritas. En particular, el método y el dispositivo deben permitir una concentración y estabilización de los estrógenos conjugados de la PMU con trato cuidadoso para el producto y manipulación sencilla en el sitio de recolección de la orina y un transporte- lo mas eficiente posible de la materia prima que contiene estrógeno proporcionada de esta manera desde el sitio de recolección hasta el sitio del acondicionamiento y aislamiento propiamente dichos de la mezcla natural de estrógenos conjugados. Se descubrió ahora sorprendentemente que los estrógenos conjugados (CE) son muy estables ligados a soportes sólidos (= agentes de adsorción) y se conservan por periodos mas prolongados sin indicación alguna • de una descomposición . Por consiguiente, la presente invención se refiere a un método acorde a la práctica, descentralizado, es decir, próximo a los acaballaderos y/o pastizales para la concentración y estabilización de las mezclas de estrógenos- conjugados (CE) de la orina de yeguas preñadas (PMU) , que se caracteriza porque - la mezcla natural de estrógenos conjugados (CE) contenida en la orina de yeguas preñadas (PMU) se concentra y estabiliza en un soporte sólido (= agente de adsorción) al proceder de manera que desde un recipiente de depósito se bombea en forma continua o en cantidades parciales discretas, a una velocidad de flujo preestablecida, a través de un cartucho colocado en posición perpendicular, una cantidad total máxima preestablecida de un liquido de orina recolectado, opcionalmente previamente tamizado, y el liquido de orina que se escurre al exterior se desecha, siendo que 5 - el cartucho está lleno de un agente de adsorción adecuado rodeado (constantemente) de liquido para la adsorción de una cantidad predefinida de la mezcla de • estrógenos- conjugados (CE) contenida en el liquido de la orina, y siendo que 10 - la cantidad total máxima del liquido de orina bombeado a través del cartucho que se prees-tablece como punto de control final para la carga del agente de • adsorción se ajusta a la capacidad máxima de carga del agente de adsorción para los estrógenos conjugados (CE) contenidos en el liquido de la orina. El concepto "acorde a la práctica" significa en este caso que el método es adecuado a las condiciones de la práctica de recolección en el campo, o sea, que se puede manejar de manera sencilla y segura por parte del personal adiestrado; es decir, no es complicado y se puede llevar a cabo con la exclusión en gran medida de operaciones erróneas . El concepto "descentralizado" significa en este caso que el método se puede llevar a cabo en el sitio respectivo de la operación de recolección de orina sin instalaciones químico-farmacéuticas especiales, es decir, en particular se puede llevar a cabo próximo . a las acaballeradas y/o los pastizales. Como "cartucho" se usa para esto cualquier tipo de columna cerrada con admisión y desagüe que se pueden cerrar así como elementos de conexión, por ejemplo, acoplamientos rápidos. El concepto "cartucho" comprende por consiguiente dentro del marco de la presente invención también las columnas como las que se usan usualmente, por ejemplo, en laboratorios, en operaciones técnicas y químicas, y que están equipadas como se acaba de mencionar para el uso de conformidad . con la invención. De acuerdo al método de conformidad con la invención se proporciona convenientemente una materia prima o material de partida que sirve para la preparación de productos farmacéuticos que contienen la mezcla natural de estrógenos- conjugados de la PMU como principio activo, al concentrar prácticamente en forma completa en el agente de adsorción (soporte) el contenido de la mezcla natural de estrógenos y poderlo estabilizar durante un período mas prolongado en las condiciones normales del entorno del respectivo sitio de recolección. Después de la carga completa (máxima) es posible recambiar fácilmente el cartucho y sustituirlo por un cartucho con agente de adsorción sin cargar. Los cartuchos con el agente de adsorción cargado se pueden almacenar todavía bastante tiempo en el campo a la temperatura ambiente o en caso deseado también con refrigeración hasta aproximadamente 4°C y bajo ciertas condiciones también congelado hasta aproximadamente -20°C, por ejemplo, hasta que se encuentra disponible una determinada cantidad de cartuchos cargados para un transporte colectivo conveniente a un punto central de acondicionamiento. El transporte se puede llevar a cabo a las temperaturas del entorno o como se describió precedentemente para el almacenaje, con refrigeración o congelación. El acondicionamiento y aislamiento propiamente dicho de la mezcla natural de estrógenos conjugados (CE) puede entonces tener lugar de manera convencional en el sitio central de acondicionamiento de una manera usual para el respectivo agente de adsorción, por ejemplo, mediante lavado y lixiviación de los CE del agente de adsorción. Por ejemplo, es posible seguir concentrando la lixiviación de manera en sí conocida con el fin de obtener un concentrado en gran medida o completamente libre de solvente orgánico, adecuado para el procesamiento galénico ulterior. En caso deseado también es posible producir una mezcla de sólidos libre de agente de lixiviación mediante otros procesos de secado adecuados como, por ejemplo, mediante secado por atomización, secado en lecho fluido, liofilización o secado al vacío. Tanto la lixiviación que contiene la mezcla de estrógenos como también un concentrado o un producto sólido secado por atomización producido a partir de esta se pueden incorporar de manera en sí conocida en preparaciones galénicas sólidas o líquidas como, por ejemplo, tabletas, grageas, cápsulas o emulsiones. Además del método de conformidad con la invención la invención también se refiere a un dispositivo que se puede usar en este método, que tiene convenientemente en cuenta las sencillas condiciones en el sitio de uso y garantiza que el proceso se desarrolla seguro y con trato cuidadoso del producto. Este dispositivo de conformidad con la invención es adecuado para la concentración y estabilización acorde a la práctica, descentralizada, es decir, en particular próxima a las acaballeradas y los pastizales. A continuación se explicarán de manera general algunos parámetros de proceso adicionales importantes para llevar a cabo el método. Con respecto a los diseños especiales en la construcción y los aparatos de dispositivos adecuados para llevar a cabo el método conforme a la invención se remite a la siguiente descripción detallada del dispositivo de conformidad con la invención, a la que eventualmente deberá recurrirse en forma complementaria a la siguiente descripción general de la realización del proceso.

Para el método de conformidad con la invención es posible usar la PMU recolectada como tal, y la cantidad diariamente recolectada de PMU se mantiene para este propósito primero en un recipiente de depósito. Opcionalmente se recomienda la separación previa de impurezas mecánicas burdas como son paja, heno o lo similar mediante un simple tamiz de malla ancha al llenar el recipiente de depósito con la PMU acabada de recolectar. En caso deseado es posible adicionar a la orina recolectada en el recipiente de depósito conservantes, germicidas, bactericidas y/o antihelmínticos para reducir el número de gérmenes y virus. A partir del recipiente de depósito la PMU se bombea regularmente mediante una bomba, por ejemplo, mediante una bomba de manguera al cartucho que contiene el agente de adsorción en función de la cantidad de orina que se recibe, por ejemplo una o dos veces al día. Este cartucho tiene por lo general dimensiones y pesos que permiten un manejo manual por personas de fuerza normal. En lo referente al método se recomienda establecer las dimensiones internas del cartucho para el lecho de agente de adsorción a ser alojado de manera que pueda alojar aproximadamente 30 a 50 1 de agente de adsorción y que la PMU tenga que recorrer preferiblemente un trecho de 80 a 120 cm desde la admisión hasta el desagüe. De conformidad con la invención, la adsorción de los estrógenos conjugados en el agente de adsorción tiene lugar mediante el contacto de la PMU con el agente de adsorción al introducir el líquido de la orina en un cartucho dispuesto en forma perpendicularmente erecta que contiene el agente de adsorción, a discreción, desde la cabeza o desde el fondo, y manteniéndolo dentro de este en contacto con el agente de adsorción durante el flujo de paso por un tiempo suficiente para la adsorción del contenido de estrógeno, hasta que la orina residual finalmente abandona el cartucho por el lado opuesto. En esto la PMU se introduce en el cartucho, por ejemplo, por el lado de la cabeza o del fondo de manera que se asegura que el agente de adsorción se encuentra constantemente rodeado de líquido con el fin de excluir dentro de lo posible un indeseable flujo en seco en el cartucho . El tiempo de contacto o bien la velocidad de flujo se ajustan al agente de adsorción respectivo, y en el caso de adsorciones adecuadas para el método (= velocidad de carga) debería encontrarse en la gama de 3 a 10 volúmenes de lecho adsorbente/h, preferiblemente 4 a 6 volúmenes de lecho adsorbente/h. Son velocidades adecuadas de carga, por ejemplo, 4.5 a 5.5 volúmenes de lecho adsorbente/h.

Los tiempos de contacto y velocidades de flujo especiales para los agentes de adsorción particularmente preferidos se especifican mas adelante en la descripción de estos agentes de adsorción. La cantidad total máxima de líquido de orina que se puede conducir a través del cartucho depende de la capacidad de adsorción del agente de adsorción respectivo, y en el caso de las adsorciones adecuadas para el método debiera encontrarse en la gama de 20 a 60 volúmenes del lecho adsorbente, preferiblemente de 30 a 40 volúmenes del lecho adsorbente. Por lo general la cantidad total máxima de líquido de orina que se puede conducir por el cartucho para la carga debe por consiguiente encontrarse en la gama de 900 a 2,000 1 según el agente de adsorción y el tamaño del cartucho. El respectivo valor final del volumen de paso se le fija de manera preestablecida al personal de operación en el sitio de la recolección para el respectivo tipo de cartucho. Para la medición de la cantidad de líquido de orina bombeada a través del cartucho es -posible usar por consiguiente un contador volumétrico sencillo, preferiblemente, por ejemplo, un reloj de agua. Al ser alcanzada la carga máxima se puede transmutar opcionalmente a un segundo cartucho paralelo y continuar con el proceso de adsorción.

Al ser alcanzado el valor final preestablecido para el cartucho es posible, en caso deseado, antes de interrumpir el suministro de líquido lavar el cartucho con los CE adsorbidos, por ejemplo, con agua y/u otra solución de lavado acuosa adecuada. Después de esto se cierran el desagüe del líquido y la admisión de líquido y seguidamente se suelta la conexión, por ejemplo, un sencillo acoplamiento rápido de la admisión del líquido al cartucho. Después de esto el cartucho cargado se puede retirar y almacenar en un lugar adecuado hasta que tiene lugar el transporte al punto central de acondicionamiento, y conectar un cartucho fresco sin cargar a la admisión de líquido. Después de la carga con la PMU, por ejemplo antes del recambio de un cartucho completamente cargado con PMU, o también . antes de ser alcanzada la capacidad total de carga, a discreción después de etapas de carga parcial individuales, en caso deseado es posible todavía enjuagar el cartucho con agua y/u otra solución de lavado, acuosa adecuada, por ejemplo, una solución de lavado básica como en particular, por ejemplo, hidróxido sódico acuoso diluido (por ejemplo, NaOH acuosa 0.5-2 N) para eliminar del cartucho líquido de orina residual. La cantidad de la solución de lavado no es crítica y se elige preferiblemente de manera- que sea suficiente para expulsar la orina residual del cartucho sin que al hacer esto se deslaven cantidades dignas de mencionar de los estrógenos conjugados. Resulta conveniente, por ejemplo, el uso de 1 -3, preferiblemente aproximadamente 2 volúmenes de lecho de líquido de lavado por volumen de lecho de agente de adsorción. En esto el agua de lavado o la solución de lavado convenientemente se conduce a través del cartucho que contiene el agente de adsorción con una velocidad de paso de 3 a 10, preferiblemente 5 a 7 partes en volumen de agua de lavado por 1 parte en volumen de agente de adsorción/hora. El agente de adsorción cargado de CE en el cartucho puede servir como materia prima o material de partida para aislar CE puro para la preparación de medicamentos que contienen la mezcla natural de estrógenos conjugados. En una variante de la invención, para una mayor estabilización del CE adsorbido es posible para finalizar, después de haberlo lavado con agua y/o solución de lavado, enjuagar el cartucho con una solución conservante, por ejemplo, una solución que contiene un agente de conservación, una solución acuosa de pH ajustado y/o una solución salina acuosa antes de soltar el cartucho del dispositivo y sustituirlo por uno nuevo. Para evitar la formación de gérmenes en la columna, en particular durante el almacenaje o el transporte sin refrigeración es posible usar los agentes de conservación usuales y, por ejemplo, también germicidas, bactericidas y/o antihelmínticos. Un ajuste del pH del agua de lavado será de acuerdo al respectivo agente de adsorción utilizado. Como soluciones salinas es posible usar soluciones acuosas de sales orgánicas de concentraciones diversas, para las cuales se dan ejemplos en la tabla III. I. Se recomienda particularmente el uso de soluciones salinas también si los cartuchos cargados con CE se deberán almacenar refrigerados, en particular congelados. Las soluciones salinas preferidas son las soluciones de cloruro de sodio con concentraciones de sal de aproximadamente 10 a 35 % en peso, preferiblemente 25 a 33 % en peso. En un perfeccionamiento preferido del método de conformidad con la invención, antes de bombearla del recipiente- de depósito al cartucho la orina recolectada se libera preferiblemente de mucosidad y sustancias sólidas mas_ finas. Por consiguiente es conveniente conducir primero el líquido de la orina desde el recipiente de depósito a través de uno o varios filtros previos antes de bombear el líquido de la orina a través del cartucho. Así, por ejemplo, es posible conducir la PMU a través de al menos un dispositivo de separación conocido, por ejemplo a través de una instalación filtrante con a lo menos un filtro de profundidad o filtro de masa filtrante sobre tamices. Como dispositivo de separación puede servir, por ejemplo, un filtro de profundidad con lecho de arena o un cartucho filtrante comercial, o es posible usar filtros de masa filtrante sobre tamices o filtros de placa o filtros de bujía o filtros de saco o también tubos de filtración. Los filtros se pueden usar en forma individual o varios en cualquier combinación de unos con otros, por ejemplo en serie uno tras otro y/o en paralelo. En caso deseado es posible adicionar auxiliares de filtración al líquido de la orina (PMU) antes de la filtración. Los auxiliares de filtración adecuados son, por ejemplo, aquellos que ligan carbonato de calcio y/o mucinas y con ello mejoran la filtración de la orina. Opcionalmente es posible poner a continuación del filtro un separador de partículas, por ejemplo en el caso de un lecho de arena un separador de arena corriente abajo. En sí el experto está familiarizado con los principios y la forma de realización de la filtración. Con miras al problema a ser resuelto por la invención entran en consideración por consiguiente los principios usuales de la filtración de clarificación para el uso de conformidad con la invención. La filtración de clarificación tiene por objeto la depuración de la fase líquida, de manera que el principal aspecto para su evaluación es la pureza del filtrado para alcanzar la meta del proceso. El proceso de separación se realiza fundamentalmente mediante la interacción entre el agente de filtración y la suspensión. Esto se debe observar al elegir el agente filtrante, al modelar el proceso como también al proyectar los aparatos filtrantes para la técnica del proceso. En la mayoría de los casos la sustancia sólida separada influye en forma determinante en el desarrollo del proceso. Así, en el caso de una suficiente proporción de sustancia sólida, y si tiene la capacidad de formar puentes (las partículas se apoyan sobre el agente de filtración sin obstruirlo) , entonces la torta filtrante que se forma y que crece continuamente adopta la función del agente de filtración. En este caso de filtración de masa filtrante sobre tamices, de la filtración por la torta es la estructura de la torta filtrante la que determina el desarrollo del proceso, en tanto que el agente filtrante propiamente dicho solo tiene una función de apoyo después de una fase de inicio. El sitio de la separación de la sustancia sólida es otra característica esencial para diferenciar los procesos de filtración. En el caso de la filtración superficial la separación de la sustancia sólida tiene lugar en la superficie del agente filtrante mediante un efecto de cedazo, es decir, en razón de las relaciones de tamaño entre las partículas de sustancia sólida y los poros del agente filtrante. Contrariamente a esto en el caso de la filtración en profundidad las partículas de sustancia sólida penetran en el agente filtrante y se depositan al interior del mismo. Los agentes de adsorción que se pueden usar en el cartucho pueden de suyo ser todos los agentes de adsorción inorgánicos u orgánicos que tienen una suficiente capacidad de adsorción para la mezcla natural de estrógenos conjugados- que contiene la PMU. Como agente de adsorción para el método de conformidad con la invención son adecuados, por lo tanto, para insertarse en el cartucho, las resinas de adsorción poliméricas, gel de sílice,- gel de sílicede fase inversa o preferiblemente resinas de adsorción poliméricas semipolares. Los geles de sílice hidrofobizados que se pueden insertar en el cartucho como agente de adsorción son, por ejemplo, los geles de sílice de fases inversas, en sí conocidos '(= geles de sílice Reverse-Phase, abreviados como "geles de sílice RP", según se conocen en inglés), que son geles 'de sílice químicamente modificados que tienen grupos o respectivamente ligandos funcionales hidrófobos. Así, por ejemplo, son adecuados los geles de sílice RP silanizados que como grupos funcionales hidrófobos contienen radicales n-octadecildimetilsililoxi, n-octildimetilsililoxi o dimetilhidroxisililoxi. Son adecuados, por ejemplo, los geles de sílice silanizados con un tamaño medio de grano de 15 a 500 µm. Resultó ser particularmente conveniente el gel de sílice que contiene radicales dimetilhidroxisililoxi con un tamaño medio de grano en la gama de 0.05 - 0.3 mm, por ejemplo el "Kieselgel 60/Dimethylsilanderivat" de la empresa Merck. Convenientemente el líquido de la orina se puede conducir a través del cartucho que contiene el gel de sílice a una velocidad de paso que es suficiente el tiempo de contacto para la adsorción del contenido de estrógeno. Por ejemplo, son adecuadas velocidades de paso que corresponden a un caudal de 5 a 20 partes en volumen de PMU por 1 parte en volumen de gel de sílice/hora. La adsorción preferiblemente se lleva a cabo a la temperatura ambiente. Convenientemente la velocidad de paso del líquido de la orina a través del reactor se puede controlar trabajando con una leve sobrepresión (controlada por la potencia de las bombas) . La cantidad de gel de sílice hidrofobizado a ser usada puede variar según el tipo de gel de sílice empleado y la cantidad del contenido de sustancias sólidas en el líquido de orina recolectado. En el caso de una PMU prefiltrada, es decir, liberada de mucosidad y sustancias sólidas, es posible, por ejemplo, cargar una parte en volumen del gel de sílice hidrofobizado con hasta 80 partes en volumen de PMU previamente tratada sin que se puedan detectar cantidades notables de estrógeno en el líquido de orina que se escurre al exterior.

Las resinas adsorbentes poliméricas semipolares que se pueden usar como agente de adsorción en el cartucho son preferiblemente polímeros porosas orgánicos no iónicos, los cuales en contraste a las resinas adsorbentes poliméricas hidrófobas no polares tienen una polaridad intermedia (=, por ejemplo, con un momento dipolo de la superficie activa de la resina en la gama de 1.0 a 3.0, en particular' 1.5 a 2.0 debye) y una estructura algo mas hidrófila, por ejemplo resinas del éster del ácido policarboxílico. Convenientemente se usan resinas semipolares macroporosas con estructura preferiblemente macrorreticular y diámetros de poro promedio en la gama de 50 a 150, preferiblemente 70 a 100 Angstróm, y una superficie específica en la gama de 300 a 900, preferiblemente 400 a 500 m2/g. Resultan ser particularmente adecuadas las resinas de éster del ácido policarboxílico macroporosas, transversalmente reticuladas, alifáticas, en particular las resinas del éster poliacrílico transversalmente reticuladas como, por ejemplo, Amberlite XAD-7R de la empresa Rohm und Haas. Convenientemente se puede conducir el líquido de la orina a través del cartucho que contiene la resina absorbente a una velocidad de paso tal que es suficiente el tiempo de contacto para la adsorción del contenido de estrógeno. Son adecuadas, por ejemplo, velocidades de paso que corresponden a 3 a 10, preferiblemente 5 a 7 partes de volumen de PMU por 1 parte de volumen de resina adsorbente/hora. La adsorción preferiblemente se lleva a cabo a la temperatura ambiente. Convenientemente la velocidad de paso del líquido de la orina a través del reactor se puede controlar trabajando con una leve sobrepresión (regulada mediante la potencia de la bomba) . La cantidad de resinas adsorbente semipolar a ser usado puede variar según el tipo de la resina adsorbente y la cantidad de contenido de sólidos en el líquido de la orina recolectado. En el caso de usar PMU se puede cargar, por ejemplo, una parte en volumen de resina adsorbente, por ejemplo resina adsorbente de éster del ácido policarboxílico alifática transversalmente reticulada con hasta 80 partes en volumen de PMU previamente tratada sin que se puedan detectar cantidades notables de estrógeno en el líquido . de orina que se escurre al exterior. Además de los agentes de adsorción preferidos mencionados también es posible usar otras resinas adsorbentes u otros tipos de gel de sílice. Como resinas adsorbentes son en esto adecuadas las resinas adsorbentes apolares, semipolares así como también las polares. La cantidad de la orina que se puede bombear por encima el agente de adsorción se deberá para esto determinar previamente en base a la respectiva capacidad del agente de adsorción. Los ejemplos de resinas adsorbentes que se pueden usar son los tipos comerciales como las adsorciones poliméricas Amberlite con estructuras básicas de estirenodivinilbenceno (por ejemplo, los tipos XAD-1180, XAD-2, XAD-4, XAD-16) , con estructuras básicas de éster acrílico (por ejemplo, XAD-7) o aquellas con estructuras básicas altamente polares que contienen nitrógeno y oxígeno (por ejemplo, XAD-12) . Otras resinas adsorbentes son las resinas Dowex (copolímeros de estireno y divinilbenceno) como, por ejemplo, Dowex 112, Dowex Optipore, Dowex Optipore V 493; Lewatite (poliestirenos reticulados), por ejemplo, Lewatit OC 1064, Lewatit OC 1066 ó Lewátit OC 1163, resinas intercambiadoras de aniones de poliamina, por ejemplo, resinas Dowex. Las resinas adsorbentes favorables son en particular XAD-7, XAD-16 (tipo HP) , XAD 118 y Dowex Optipore, preferiblemente como Dowex Optipore V 493, así como Lewatite OC 1064, OC 1066 y OC 1163. Además del método de conformidad con la invención precedentemente descrito la invención se refiere también a un dispositivo para ser usado con este método que tiene en cuenta de manera conveniente las condiciones sencillas en el sitio de uso y garantiza que el método se lleve a cabo de manera segura tratando con cuidado el producto. El dispositivo de conformidad con la invención se caracteriza por ser adecuado para la concentración y estabilización descentralizada, acorde a la práctica, es decir, en particular próxima a las acaballeradas o los pastizales de las mezclas de estrógenos conjugados (CE) contenidos en la orina de yeguas preñadas (PMU) sobre un soporte sólido (= agente de adsorción) , siendo que este dispositivo comprende: un cartucho dispuesto erecto en forma perpendicular lleno con un agente de adsorción adecuado (continuamente) rodeado de líquido para la adsorción de una cantidad predefinida de la mezcla de estrógenos conjugados (CE) contenido en el líquido de la orina de yeguas preñadas, y siendo que el cartucho comprende o bien, a) una admisión de líquido localizada por el lado del fondo y una salida del líquido dispuesta en el lado de la cabeza, o b) una admisión de líquido dispuesta en el lado de la cabeza y una salida de líquido dispuesta en el lado del fondo, así como localizados corriente arriba del cartucho en la secuencia indicada y conectados a través de mangueras - una bomba, un contador volumétrico y un medidor de cantidad de paso. El dispositivo de conformidad con la invención se destina a la ejecución del método precedentemente descrito para la concentración y estabilización descentralizada, acorde a la práctica, de los estrógenos conjugados (CE) contenidos en la PMU. En caso deseado el dispositivo también puede contener dos cartuchos conectados en paralelo que se operan en forma sucesiva o bien alternante. El cartucho que se usa en el dispositivo de conformidad con la invención puede tener dimensiones que con relación a la altura y el diámetro se encuentran dentro de una gama muy amplia. Sin embargo, para no menoscabar la manipulación en la práctica las dimensiones del cartucho en lo referente a tamaño y peso deberían ser tales que se puedan manipular y cargar bien a mano por una persona de fuerza normal, por ejemplo al recambiar cartuchos cargados por cartuchos frescos sin cargar. Por ejemplo, el cartucho debiera por consiguiente tener aproximadamente dimensiones tales que el cartucho tenga dimensiones internas para el lecho de agente de adsorción que permitan alojar 30 a 50 1 del agente de adsorción, siendo que la altura interna se encontrará en particular en la gama de 80 a 120 cm. Generalmente el diámetro interno del cartucho se encontrará en 10 a 25 cm. El experto está en condiciones de darle al cartucho dimensiones exactas para asegurar condiciones de flujo óptimas durante la operación. Además, el cartucho que se usa en el dispositivo de conformidad con la invención convenientemente consta de materiales robustos, de uso rudo y resistentes a los productos químicos como se usan usualmente para la fabricación de aparatos para la industria química, por ejemplo, vidrio de laboratorio irrompible, plástico y/o metal como, por ejemplo, chapa de acero. En el dispositivo de conformidad con la invención es posible usar en sí cualquier tipo de bomba, de construcción sencilla y robusta como, por ejemplo, monobombas, bombas de manguera o bombas de membrana. Por ejemplo, para el dispositivo de conformidad con la invención resultó ser conveniente como bomba una bomba de manguera. - En el dispositivo de conformidad con la invención es posible usar en si cualquier tipo medidor de cantidades de paso, de construcción sencilla y robusta como, por ejemplo, rotámetros, contadores volumétricos de aspas giratorias o contadores volumétricos inductivos. Por ejemplo, como contador volumétrico para el dispositivo de conformidad con la invención resultó ser conveniente un rotámetro con flotador. En el dispositivo de conformidad con la invención es posible usar para la medición de las cantidades de líquido de orina bombeadas a través del cartucho medidores de cantidad de paso de cualquier tipo, de construcción sencilla y robusta como, por ejemplo, relojes de agua o caudalómetros inductivos. Resultó ser conveniente como medidor de cantidad de paso para el dispositivo de conformidad con la invención, un reloj de agua. En una variante favorable el dispositivo de conformidad con la invención se intercalan entre la bomba y el contador volumétrico adicionalmente a lo menos uno o varios filtros previos, por ejemplo filtros de profundidad o filtros de masa filtrante sobre tamices. En el caso de los filtros se puede tratar, por ejemplo, de un filtro de profundidad con lecho de arena o de un cartucho filtrante comercial, o de filtros de masa filtrante sobre tamices o filtros de placa o filtros de bujía o filtros de saco o también tubos de filtración comerciales. Corriente abajo del filtro previo es posible disponer opcionalmente además un separador de partículas, por ejemplo, en el caso de un lecho de arena como filtro previo un subsiguiente separador de arena. En variantes del dispositivo es posible conectar los filtros individualmente o varios también en combinación a discreción de unos y otros, por ejemplo en serie uno tras otro y/o conectados en paralelo. Un perfeccionamiento conveniente de esta variante se caracteriza por el hecho de que el filtro previo es un módulo de dos filtros previos conectados en paralelo que se operan alternativamente en forma individual y que incluso en el caso de una operación continua del dispositivo se pueden intercambiar por un filtro previo fresco. Otro perfeccionamiento conveniente de estas variantes se caracteriza porque la instalación filtrante es un módulo de una unidad de filtración previa conectada en serie que consta de filtro previo (por ejemplo, filtro de saco) y uno o dos filtros del lecho profundo y corriente abajo de estos dos filtros absolutos conectados en paralelo (por ejemplo, filtros de membrana), siendo que los filtros absolutos se operan alternativamente en forma individual y se pueden intercambiar por uno fresco incluso con operación continua del dispositivo. Además es opcionalmente conveniente que en el dispositivo de conformidad con la invención se intercale en cada caso un manómetro entre la bomba y el filtro previo, así como también un manómetro en la sección después del filtro previo, preferiblemente hasta después del contador volumétrico para controlar el funcionamiento correcto del filtro previo. Para explicar adicionalmente el dispositivo de conformidad con la invención en perfeccionamiento preferido sirve la figura 1 que muestra en forma esquemática un dispositivo para la estabilización y concentración de CE de PMU. En la figura 2 se reproduce en representación esquemática el método de una variante de la filtración de orina cruda. El método de conformidad con la invención y el dispositivo de conformidad con la invención presentan una serie de ventajas de las cuales a continuación se mencionan brevemente las mas importantes. La concentración de los CE, es decir, la carga de las columnas de agente de adsorción se puede llevar a cabo directamente en el sitio de la recolección. Con ello se suprime el transporte diario de grandes cantidades de líquido de orina a un sitio de acondicionamiento central. La carga se puede llevar a cabo durante un período de tiempo mas prolongado de hasta varias semanas en forma continua hasta que se satura la columna adsorbente; en el caso de la resina de adsorción XAD-7, por ejemplo, la cantidad de orina adsorbida es de aproximadamente 35 volúmenes del lecho. La orina residual liberada de los CE permanece en el lugar de la recolección, en el cual de cualquier manera existen dispositivos adecuados para el confinamiento. Solo se transporta la columna cargada, es decir, solo aproximadamente 1/35 del peso original del líquido de orina. El transporte se puede efectuar a intervalos de tiempo mayores. El tiempo de transporte también puede ser mas largo, por ejemplo bien puede prolongarse hasta por algunas semanas. Debido a la buena estabilidad de los CE en la columna adsorbente no se espera una descomposición. Se suprime el tratamiento de grandes cantidades de orina mediante separador e instalación de ultrafiltración, puesto que la separación de las sustancias de mucosidad y sedimentos eventualmente presentes en la orina de partida se lleva a cabo mediante filtros de masa filtrante sobre tamices o de profundidad (por ejemplo, filtros de arena, cartuchos filtrantes, filtros de masa filtrante sobre tamices, filtros de placa, filtros de bujía, filtros de saco o tubos de filtración) robustos y exentos de mantenimiento que e,n caso necesario se pueden recambiar con facilidad. Las figuras y los ejemplos siguientes deberán explicar la invención con mas detalle pero sin limitar su alcance. Figuras Fig. 1 Dispositivo esquemático conveniente para la estabilización y concentración de CE de PMU; los elementos del dispositivo tienen el significado siguiente:' (1) = admisión del líquido de orina del recipiente de depósito; (2) = bomba, por ejemplo, bomba de manguera; (3) = tuberías de conexión; (4) = manómetro; (5) = válvula de tres vías; (6) = acoplamientos rápidos; (7) = válvulas de cierre; (8) = filtros; (9) = contador volumétrico con flotador (rotámetro) ; (10) = medidor de cantidades de paso, por ejemplo, reloj de agua; (11) = cartucho, columna; (12) = lecho de agente de adsorción; (13) = desagüe. Fig. 2 •• Representación esquemática del método para la filtración de orina cruda en el cual la instalación filtrante consta de un módulo de unidad de prefiltración conectada en serie que comprende filtro previo (por ejemplo, filtro de saco) y uno o dos filtros de lecho profundo y a continuación de ellos dos filtros absolutos conectados en paralelo (por ejemplo, filtros de membrana) . Ejemplos Ejemplo 1 Instrucción general de operación para la concentración y estabilización de los estrógenos conjugados (CE) contenidos en la orina de yeguas preñadas (PMU) directamente en el sitio de la recolección del PMU mediante la adsorción por un agente de adsorción contenido en un cartucho. Para este propósito la PMU recolectada se llena en un recipiente de depósito en cada caso a través de un embudo equipado con un cedazo. El cedazo tiene una amplitud de malla gruesa y solamente sirve para separar impurezas mecánicas gruesas como paja, heno, etc. El método se explica a continuación de manera ejemplar con el uso de una columna adsorbente (como cartucho) con una resina adsorbente semipolar. Si se usan cartuchos con otras adsorciones, entonces opcionalmente el manejo y en particular el acondicionamiento del cartucho cargado se rigen conforme al tipo del agente de adsorción respectivo. El proceso de carga y el lavado final del cartucho en el sitio de la recolección de la orina se apega sustancialmente a lo que se describe bajo A) y B) , o eventualmente se adapta solamente en aspectos menores a posibles condiciones especiales en el campo o del respectivo agente de adsorción. A) Adsorción del contenido de estrógeno de la PMU por un agente de adsorción La adsorción del contenido de CE de la PMU se lleva a cabo en una instalación de adsorción como se esboza ejemplarmente en la figura 1. Una cantidad total de PMU preestablecida con relación a la capacidad del cartucho o respectivamente la columna adsorbente se bombea a la temperatura ambiente, opcionalmente después de un tamizado y opcionalmente filtración previos, en su totalidad o en partes a una velocidad de paso preestablecida a través de una columna o respectivamente cartucho lleno con un agente de adsorción. Como agente de adsorción se puede usar, por ejemplo, una resina adsorbente de éster poliacrílico semipolar hinchada en agua (= Amberlite XAD-7 de la empresa Rohm und Haas, tamaño de grano 0.3 a 1.2 mm, momento dipolo 1.8 debye, diámetro de poros promedio 80 Angstróm, superficie específica aproximadamente 450 m2/g, seca) u otras adsorciones adecuadas. Después de alcanzar la cantidad de carga máxima preestablecida de PMU se detiene la alimentación de PMU a la columna o respectivamente al cartucho y, en caso deseado, se bombea de la columna o respectivamente cartucho cargado a una columna o respectivamente cartucho libre conectado en paralelo. El contenido de estrógeno de la PMU se adsorbe completamente sobre la columna adsorbente cargado de esta manera. B) Lavado de la columna adsorbente cargada La columna o respectivamente cartucho adsorbente cargado se lava después de finalizado el proceso de adsorción facultativamente con agua u otra solución de lavado acuosa, por ejemplo una solución de lavado alcalina como, en particular, hidróxido sódico (por ejemplo, NaOH 0.5-2 N) . Para este propósito el agua de lavado o la solución de lavado se bombea asimismo a través de la columna o respectivamente del cartucho a la temperatura ambiente con una velocidad de paso preestablecida de, por ejemplo, aproximadamente 5.5 volúmenes de lecho por hora. El líquido de lavado que se escurre se desecha. C) Almacenamiento y Transporte Para el transporte de retirada o respectivamente el almacenamiento intermedio de la columna adsorbente cargada, ésta se cierra por ambos lados después de terminado el proceso de adsorción o respectivamente después del lavado facultativo con, por ejemplo, agua (o cpn otra solución de lavado acuosa, opcionalmente alcalina, como en particular hidróxido sódico diluido, por ejemplo, NaOH 0.5-2 N) , se desconecta del dispositivo de carga y se almacena en un sitio adecuado. El almacenamiento puede tener lugar a la temperatura ambiente, por ejemplo 15 a 30°C en una nave de almacenamiento normal, o bien en una cámara frigorífica a hasta aproximadamente 4°C. Si el líquido que se encuentra en la columna adsorbente se protege contra congelamiento es posible también almacenar a temperaturas mas bajas, por ejemplo hasta -20°C. Las columnas o bien cartuchos cargados se transportan a intervalos regulares de unos días hasta algunas pocas semanas desde el sitio de recolección y almacenaje a un sitio central de acondicionamiento en donde se garantiza el acondicionamiento y aislamiento químico de los estrógenos conjugados de una manera experta. D) Desorción de los estrógenos conjugados de la columna o bien cartucho adsorbente El acondicionamiento de las columnas o bien cartuchos cargados para separar las impurezas y aislar los CE se lleva a cabo de una manera usual para el agente de adsorción respectivo. En el caso del uso de una resina de adsorción semipolar del tipo Amberlite, por ejemplo, XAD-7, el acondicionamiento se puede llevar a cabo como en la solicitud de patente internacional WO 98/08526. Para este propósito se hace pasar el fluido de lixiviación con una velocidad de flujo adecuada a través de la columna o respectivamente cartucho precalentado a 45°C. La sustancia lixiviada que escurre se recolecta en fracciones. La primera fracción es (= aproximadamente 1 volumen de lecho) , las fracciones restantes son en cada caso de aproximadamente 0.75 volumen de lecho. Las fracciones individuales se analizan mediante HPLC con respecto a su contenido de sal sulfatada de estrógeno, cresol y H.PMF. La primera fracción se recolecta durante todo el tiempo que la sustancia lixiviada aparece desde incolora hasta de coloración débilmente amarilla. Esta fracción por lo general solamente contiene trazas de sal sulfatada de estrógeno . Después de haber escurrido el primer volumen de lecho de sustancia lixiviada aparece un cambio de color de la sustancia lixiviada a un tono de color café oscuro intensivo. En las siguientes 2 a 4 fracciones se encuentran entonces contenidos regularmente aproximadamente 80 a 98 % de todos de los estrógenos conjugados adsorbidos en la columna. Las fracciones restantes solamente contienen todavía cantidades pequeñas de sal de sulfato de estrógeno. Esto también es notorio debido a la reducción de la intensidad- del color. Opcionalmente es posible seguir acondicionando las fracciones residuales después de eliminar por destilación el contenido de solvente y aislar mas CE. Las fracciones principales que contienen los estrógenos conjugados tienen en cada caso elevados contenidos- de SS (SS = sustancia seca, determinada por HPLC) de sal de sulfato de estrógeno y están libres de cresol y HPMF a tal grado que estas fracciones ya constituyen extractos adecuados para un procesamiento ulterior galénico. E) Regeneración de las columnas de resina adsorbente La regeneración de las columnas o bien cartuchos cargados se lleva a cabo de la manera en cada caso usual para el respectivo agente de adsorción. En el caso de usar una resina adsorbente semipolar del tipo Amberlite, por ejemplo XAD-7, la regeneración se puede llevar a cabo en la solicitud de patente internacional WO 98/08526. Para la regeneración, la columna o respectivamente el cartucho se lava primero con una mezcla de etanol/agua que contiene 50 % en peso de etanol ajustada a pH 12, luego con una solución acuosa de citrato de sodio al 10 % en peso y nuevamente con la mezcla de etanol/agua y finalmente con agua destilada. Toda la regeneración se lleva a cabo para la resina adsorbente especificada ejemplarmente a una temperatura de 45°C, siendo que también en este caso las soluciones de regeneración y lavado se pueden introducir a través de la columna o respectivamente el cartucho por el lado del fondo o de la cabeza. La columna o respectivamente el cartucho se puede cargar y volver a regenerar varias veces, por ejemplo, hasta 40 veces. Ejemplo 2 Pruebas de estabilidad con columnas adsorbentes cargadas para determinar el contenido de CE desorcible Para analizar la estabilidad de la columna, es decir, la estabilidad de los CE adsorbidos (estrógenos conjugados) se llevaron a cabo pruebas de estabilidad con columnas de adsorbente cargadas con orina de partida. Para este propósito se cargaron de la manera usual columnas adsorbentes, a continuación se retiró la resina adsorbente de la columna y se almacenó a dos temperaturas a lo largo de diversos períodos de tiempo. Después de transcurrido el tiempo de almacenamiento se lixivió la sustancia adsorbida y se analizó con respecto a su contenido de CE e impurezas. El resultado obtenido se comparó con el resultado de la lixiviación de pruebas de control, es decir, pruebas sin tiempo de almacenamiento. A) Ejecución de la prueba La absorción se llevó a cabo respectivamente en una columna de 3 1 llena de manera conocida con resina adsorbente semipolar del tipo XAD 7 (resina adsorbente del semipolar de éster poliacrílico, es decir, Amberlite XAD-7 de la empresa Rohm und Haas, tamaño de grano 0.3 a 1.2 mm, momento dipolo 1.8 debye, diámetro de poros promedio 80 Angstrdm, superficie específica aproximadamente 450 m2/g, seca) . Para este propósito se alimentó a la columna una cantidad de 90 1 (= 30 volúmenes de lecho) previamente ultrafiltrada de orina de yeguas (proveniente de Polonia) a la temperatura ambiente con una velocidad de paso de 5 volúmenes de lecho por hora. El contenido de estrógeno de la PMU se adsorbió completamente sobre la columna de resina adsorbente semipolar cargada de esta manera. Después de terminada la carga de la columna con la orina de yeguas se lavó con 3 1 de agua y la resina cargada se sacó de la columna y se distribuyó en 10 pruebas de 300 ml, y estas se transfirieron a columnas mas pequeñas. Una prueba se desechó. A continuación se procedió como sigue: 1. Lixiviación inmediata de la prueba de control, es decir, sin almacenamiento. 2. Almacenamiento de las respectivas pruebas restantes a 4°C ó a 25°C. 3. Lixiviación de las pruebas 1 (4°C) y 2 (25°C) después de almacenadas durante una semana. 4. Lixiviación de las pruebas 3 (4°C) y 4 (25°C) después de almacenadas durante dos semanas.

. Lixiviación de las pruebas 5 (4°C) y 6 (25°C) después de almacenadas durante cinco semanas. 6. Lixiviación de las pruebas 7 (4°C) y 8 (25°C) después de almacenadas durante ocho semanas. La lixiviación se llevó a cabo de manera en sí conocida lavando primero la resina adsorvente cargada con una solución de hidróxido de sodio acuosa. Después de cada etapa de lavado se analizó el respectivo líquido de lavado mediante HPLC con respecto a su contenido de estrona (como sal de sulfato) , equilina, cresol y HPMF. Como líquido de lixiviación se usó una mezcla de agua/etanol (al 30 % en peso, valor pH 12) alcalinizada mediante la adición de hidróxido de sodio, y la lixiviación de la resina se llevó a cabo a una temperatura de lixiviación de 45°C. La sustancia lixiviada se recolectó en fracciones y las fracciones individuales se analizaron a su vez mediante HPLC con respecto a su contenido de estrona, cresol y HPMF. La primera fracción se recolectó durante todo el tiempo que la sustancia lixiviada apareció desde incolora hasta con color levemente amarillo. Esta fracción solo contiene trazas de estrona (sal de sulfato de estrógeno) . Después de haber escurrido el primer volumen de lecho de sustancia lixiviada se produce un cambio de color de la sustancia lixiviada a un tono de color café oscuro intensivo. En las siguientes 2 a 4 fracciones está contenida entonces aproximadamente 80 a 98 % de la cantidad total de estrógenos conjugados adsorbidos en la columna. Las fracciones restantes para la regeneración de la resina (a respectivamente 45°C en la secuencia indicada con etanol al 50 % en peso con pH 12, citrato de sodio al 10 % en peso y agua ya solamente contienen pequeñas cantidades de sal de sulfato de' estrógeno. Esto también es notablemente visible debido a la reducción de la intensidad del color. B) Resultados Los resultados obtenidos en las pruebas de estabilidad de la columna para las pruebas individuales se reproducen en las tablas 1.0 a 1.9 y se compilan en la tabla 1.10, y a continuación se explicarán adicionalmente. La carga de la columna o respectivamente el cartucho con orina, ver tabla 1.0 así como la lixiviación de la columna de control, tabla 1.1 muestran un desarrollo normal de la adsorción y desorción. Es cierto que se encontraron valores incrementados de cresol y HPMF en la sustancia lixiviada, lo cual sin embargo probablemente se debe en gran medida a un flujo no completamente laminar en la columna y a los valores muy elevados de cresol, de aproximadamente 1000 mg/l, en la orina de partida. Las tablas 1.2 a 1.9 reproducen los resultados para la lixiviación después del almacenamiento de una, dos, cinco y ocho semanas. Fundamentalmente se comprueba que las hormonas adsorbidas (CE) por regla general se desorben cuantitativamente. Eventualmente, por ejemplo, en particular después de solo una semana de almacenamiento a 25°C se comprueba una desorción cuantitativa solo en la regeneración etanólica al 50%, siendo que sin embargo en este caso solo se trata de la desorción de cantidades residuales del CE, siendo que la mayor parte ya se pudo aislar antes en la desorción propiamente dicha. Una dependencia de la desorción del tiempo de almacenamiento y de la temperatura no parece estar dada o en todo caso solo de manera limitada, por ejemplo en cuanto las condiciones de flujo eventualmente no óptimas en las columnas pequeñas no pueden desempeñar un mayor papel. Pero la sustancia lixiviada en todos los casos está en gran medida libre de cresol y HPMF. Para obtener resultados óptimos se debe por consiguiente cuidar de un flujo óptimo a través de la columna, independientemente del tiempo de almacenamiento. Por lo tanto las columnas o respectivamente cartuchos deben estar continuamente inmersas en líquido, es decir, se debe evitar un flujo en seco. Los resultados después de un almacenamiento durante cinco semanas, tablas 1.6 a 1.7 muestran para una temperatura de 4°C un buen desarrollo de la lixiviación; para T = 25°C todavía aparecen por cierto porciones de hormonas en la sustancia regenerada. Los contenidos de HPMF y creosol en la sustancia lixiviada son muy bajos en ambos casos . Sorprendentemente se obtienen muy buenos resultados incluso después de un almacenamiento muy largo, como se muestra para el almacenamiento de ocho semanas con excelentes resultados en las tablas 1.8 a 1.9. Los picos de lixiviación para estrona y equilina son muy empinados o pronunciados, es decir, el volumen de la sustancia de CE lixiviada es muy pequeña. Los valores de cresol y HPMF tienden a cero. La tabla I.10 reproduce todas las pruebas" en una relación sinóptica. La suma, por ejemplo, del contenido de estrona de la sustancia lixiviada y de la sustancia regenerada en todos los casos se encuentra dentro de aproximadamente 1055 mg ± 4% y corresponde con ello al balance esperado. Recopilando se puede por consiguiente sostener que el almacenamiento de una a ocho semanas de la resina XAD-7 cargada a temperaturas de 4°C y 25°C cié. camente muestra diferencias en el comportamiento de la lixiviación, la altura y anchura de los picos hormonales, mas no sin embargo en la suma del total de las hormonas lixiviadas, las cuales todas se encuentran en la gama de 1055 mg ± 4% en lo referente al contenido de estrona. De esto se puede deducir que las diferencias cualitativas observadas en gran medida solo se deben a las condiciones no homogéneas de flujo en las columnas relativamente pequeñas que se. usaron y que se pueden evitar fácilmente con columnas o respectivamente cartuchos de dimensiones acordes a la práctica. Tabla 1.0: Prueba de columna con respecto a la estabilidad del material en la columna Carga de la columna con orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Agente de adsorción XAD 7, volumen = 3 1 Después de la administración a la columna se evacúa la resina y se lava con 3 1 de agua. La resina se divide en partes iguales de 300 ml y se somete a una prueba de estabilidad de la columna. Un paquete de resina se lixivia inmediatamente, los otros se almacenan a la temperatura ambiente y en el frigorífico.

Tabla 1.1 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación sin almacenamiento Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafi?trada Solución de partida: 90 1 cargados a una columna de 3L (Tabla 1.1, Resina distribuida en 10 partes de a 300 ml) Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 continuación tabla 1.1 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regeneración: Citrato de sodio 10% / agua , ambos 45°C Regenerad 600 24 25 11.7 2.9 0.0 5.9 1.1 o 2 Regenerad 600 24 25 11.3 1.4 0.0 3.8 0.0 X* Tabla 1.2 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 7 días de almacenamiento, 4°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml 5 Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Solución de partida: 90 1 cargados a una columna de 3L (Tabla 1.1, Resina distribuida en 10 partes de a 300 ml) oo • continuación tabla 1.2 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regeneración: Citrato de sodio 10% / agua , ambos 45°C Regenerad 600 24 25 12.1 18.8 11.3 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 o 2 Tabla 1.3 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 14 días de almacenamiento, 25°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml 5 Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Lp O Solución de partida: 90 1 cargados a una columna de 3L (Tabla 1.1, Resina distribuida en 10 partes de a 300 ml) Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 continuación tabla 1.3 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regeneración: Citrato de sodio 10% / agua , ambos 45°C Regenerad . 600 24 25 12.3 19.0 11.4 0.0 0.0 7.9 . 4.7 10.0 6.0 Tabla 1.4 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 14 días, 4°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Pruebas Vol. Tiempo Flujo Flujo pH SS Estrona Estrona HPMF HPMF Cresol Cresol Equilina Equilina L? ml min ml/min VL/h % mg/l mg mg/l mg mg/l mg mg/l mg Solución de partida: 90 1 cargados a una columna de 3L (Tabla 1.1, Resina distribuida en 10 partes de a 300 ml) Contenido 7700 113.6 874.7 89.7 690.7 965.3 7432.8 66.8 514.4 de partida Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 Lavado 1 300 12 25 5.0 9.3 77.3 23.2 42.6 12.8 1255.9 376.8 55.9 16.8 Lavado 2 . 300 12 25 5.0 13.1 28.0 8.4 454.6 136.4 60OQ.0 1800.0 139.3 41.6 continuación tabla 1 4 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regeneración Citrato de sodio 10% / agua, ambos 45°C Tabla 1.5 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 14 días de almacenamiento, 25°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml 5 Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada continuación tabla 1.5 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regenerad 600 24 25.0 5.0 12.4 163.6 98.2 1.1 0.7 25.4 15.2 99.1 59.5 0 •1 Tabla 1.6 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 35 días de alamcenamiento, 4°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Lp • continuación tabla 1.6 Lixiviación: Etanol 30%, 45°C, pH 12 X Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regenerad 600 24 25.0 5.0 12.4 15.5 9.3 0.0 0.0 14.3 8.6 15.3 9.2 • 0 Tabla 1.7 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 35 días de almacenamiento, 25°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml p co Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada • Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 continuación tabla 1.7 Lixiviación: Etanol 30%, 45°C, pH 12 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Tabla 1.8 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 56 días de almacenamiento, 4°C 1 s o Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml 5 Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada continuación tabla 1.8 Lixiviación: Etanol 30%, 45°C, pH 12 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 • Tabla 1.9 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 56 días de almacenamiento, 4°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 300 ml 5 Solución de partida: Orina nativa de Polonia, ultrafiltrada Solución de partida: 90 1 cargados a una columna de 3L (Tabla 1.1, Resina distribuida en 10 partes de a 300 ml) continuación tabla 1.9 Lixiviación: Etanol 30%, 45°C, pH 12 * Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Tabla I.10 Resumen de los resultados de las pruebas de estabilidad de la columna continuación tabla 1.10 Lp Lixiviación (elución) Ejemplo 3 Pruebas de estabilidad con columnas adsorbentes cargadas para determinar números de gérmenes La calidad e inocuidad microbiológica de los materiales de partida naturales para la producción de preparaciones farmacéuticas se vuelve cada vez mas importante a últimos tiempos. Por este motivo se llevaron a cabo análisis para determinar los números de gérmenes en las pruebas después de un almacenamiento de las columnas de cinco y ocho semanas, de acuerdo a métodos usuales (Farmacopea ) . Los resultados de las determinaciones de 'números de gérmenes se reproducen en la tabla II. Los números totales de gérmenes para una temperatura de almacenamiento de 4°C se debe calificar de pequeño. Para la temperatura de almacenamiento de 25°C el agua de lavado de la columna tiene de 1.2 a 4.6 x 106 gérmenes, en la sustancia lixiviada se encontraron 80 a 170 gérmenes. Sin embargo hay que hacer notar que las adsorciones de las columnas almacenadas no se lavaron ni se conservaron previamente, o sea, que desde el principio estaban expuestas a uh mayor riesgo de formación de gérmenes. En el caso del almacenamiento sin refrigeración es por consiguiente recomendable que las columnas cargadas se laven a conciencia a lo menos con agua, pero convenientemente adicionalmente con soluciones de lavado adicionalmente estabilizadores y conservantes, por ejemplo solución de cloruro de sodio. Tabla II: Pruebas de estabilidad para determinar el número de gérmenes * Especificaciones en KBE/ml (KBE = unidades formadoras de colonias) Ejemplo 4: Pruebas de estabilidad con columnas adsorbentes cargadas, congeladas En función de la estación del año y/o de la región pueden presentarse temperaturas por debajo del punto de congelación durante el almacenamiento o durante el transporte de columnas o respectivamente cartuchos cargados, con la consecuencia indeseada de que el contenido acuoso de las columnas o respectivamente cartuchos se solidifica. Las pruebas correspondientes permiten suponer que el proceso de congelación parece tener un efecto negativo sobre la lixiviación de las columnas o respectivamente cartuchos vueltos a descongelar. En cuanto no sea posible llevar a cabo un temperizado de la columna, o en cuanto tenga, -lugar un almacenamiento a bajas temperaturas se recomienda que para impedir el congelamiento el último lavado se lleve a cabo con agua con mezclas frigoríficas adecuadas. A) Ejecución de la prueba De la multitud de posibles mezclas frigoríficas de las cuales para explicación se especifican algunas ejemplarmente en la tabla III.1, se recurrió ejemplarmente para otros experimentos a una solución de cloruro de sodio. Mediante una adición de 23 g de NaCl por 100 g de agua el punto de congelamiento se encuentra a -21°C. La carga de la columna se llevó a cabo de la manera usual. Después de terminar la carga con orina se llevó a cabo un lavado con tres volúmenes de lecho de agua, después con dos volúmenes de lecho de una solución de NaCl al 33 % en peso. A continuación la columna se almacenó durante 9 días a -19°C en un mueble congelador.

Tabla III.1: Ejemplos de mezclas acuosas fluidas salinas y frigoríficas B) Resultados Incluso después de 9 días de almacenamiento a - 19°C el contenido de la columna permaneció fluido, y esto sin indicaciones de posible solidificación parcial. El acondicionamiento de la columna, es decir, el lavado básico, lixiviación y regeneración transcurrió de manera normal. El contenido total de hormona por SS fue de aproximadamente 22 % en peso. Los resultados se representan en la tabla III.2. No se pudieron detectar efectos negativos del elevado contenido de NaCl sobre el contenido de CE y la separación de cresol y HPMF. En suma es posible determinar por consiguiente que la estabilización de las columnas o respectivamente cartuchos cargados con orina con una mezcla frigorífica líquida, por ejemplo, una solución acuosa de cloruro de sodio y un almacenamiento a temperaturas de congelación, por ejemplo de hasta -20°C incluso -durante períodos de tiempo de 1.2 a 2 semanas tiene un efecto positivo. El contenido de la columna o respectivamente cartucho se mantiene fluido, el acondicionamiento de las columnas o respectivamente cartuchos para aislar el CE mediante lavado, lixiviación y regeneración transcurre normal. No se pudieron encontrar resultados negativos incluso con elevados contenidos de NaCl.

Tabla III.2 Prueba de Columna con respecto a la estabilidad del material de la columna Lixiviación después de 9 días de almacenamiento, -19.1°C Agente de adsorción: XAD 7, Volumen = 200 ml Solución de partida: 71 cargados a una columna de 3L = 35 volúmenes de lecho continuación 1, tabla III.2 Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 • Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 Regeneración: Citrato de sodio 10% / agua, ambos 45°C Ejemplo 5: Concentración y estabilización de orina en la prueba práctica A) Generalidades En una prueba práctica se debía demostrar que con un contenido suficiente de hormonas en la orina no solo se pueden obtener buenos resultados en el laboratorio sino también bajo condiciones de producción. Se llevó a cabo una prueba como puede desarrollarse en campañas de recolección en cualquier sitio. B) Ejecución de la prueba Se recolectó orina fresca de calidad suficiente en una acaballerada. Con tres caballos y 15 a 20 1 de orina/dia se obtuvieron en 10 días un total de 150 a 200. Para la adsorción se eligió por consiguiente una columna adsorbente de 5 1. La carga diaria con orina, excepto el fin de semana, se llevó a cabo en la prueba de acuerdo al esquema siguiente: Inicio de la recolección de orina durante el fin de semana Lunes: Alimentación de la orina del sábado, domingo y lunes Martes a viernes: Alimentación de la orina del día respectivo Lunes: Alimentación de la orina del sábado, domingo y lunes Martes: Lixiviación La alimentación de la orina con una velocidad de carga de aproximadamente 4.5 volúmenes de lecho/h se llevó a cabo directamente en la columna, únicamente con una bujía de algodón con límite de separación de 20 µm sirvió de filtro previo. Entre las alimentaciones individuales no se llevó a cabo un lavado con agua para dificultar las condiciones. En pruebas previas se pudieron pasar hasta 450 1 de orina' a través de una bujía de algodón sin pérdidas de presión. En esta prueba práctica sin embargo resultó ser difícil la ración filtrada en virtud de un contenido inesperadamente alto de sedimento de carbonato de' calcio y/o mucinas . Después de respectivamente 40 a 50 1 se producía un bloqueo con un aumento de la presión hasta cerca 4 bar que hacia necesario un recambio del filtro. En función del contenido de carbonato de calcio y/o mucinas se recomienda por consiguiente adicionar opcionalmente coadyuvantes de filtración. A pesar de que la bujía dejó pasar porciones de sedimento > 20 µm, no se produjo un taponamiento de la columna adsorbente. C) Resultados Contenidos de hormonas Los resultados de esta prueba práctica se reproducen • en la tabla IV Los contenidos de estrona y equilina de la orina cruda fueron satisfactoriamente elevados con 123 mg/l y 74 mg/l, y corresponden a una orina de calidad mediana a buena. Sin embargo fueron inesperadamente altos los valores de cresol con 531 mg/l en la orina fresca, que hasta ahora no se habían observado. En este caso desempeña un papel la cuestión de la alimentación y se debe tomar en cuenta. Aunque fundamentalmente es posible controlar, por ejemplo, mayores contenidos de cresol, en el caso individual si pueden provocar dificultades. Por consiguiente puede ser necesario prolongar el proceso de lavado alcalino durante el acondicionamiento para minimizar los valores de- cresol en la sustancia lixiviada etanólica. Por lo demás la adsorción y la desorción transcurrieron como de costumbre. En la sustancia lixiviada se dio una evolución bien marcada para la estrona y la equilina. En las sustancias lixiviadas 2 y 3 se hallaron mas de 95% de estrona/equilina . Con relación al contenido de SS el contenido total de hormona es de aproximadamente 30 % en peso. Con esto se satisfizo la expectativa que se esperaba de la prueba y se obtuvo bajo condiciones de prueba difíciles una excelente concentración a un contenido de hormona/SS > 15 % en peso.

Tabla IV.1: Prueba práctica para la estabilización y concentración de CE Días de prueba: 1-10, carga de la columna (en 7 días de trabajo) Agente de adsorción: XAD 7, volumen = 5 1 Solución de partida: orina nativa, sin tratar La columna se opera de abajo hacia arriba Solución de partida: 140 1 cargados a una columna de 5L, = 28 volúmenes de lecho (cantidad total de 7 cargas individuales) co Carga: Agua con NaOH (2%), pH 13 continuación tabla IV.1 Pruebas Vol. Tiempo Flujo Flujo PH SS Estrona Estrona Cresol Cresol Equilina Equilina HPMF Estrona mm ml/min VL/h % mg/l mg mg/l mg mg/l mg mg/l /SS % Carga: Agua con NaOH (2%), pH 13 Tabla IV.2: Prueba práctica para la estabilización y concentración de CE Acondicionamiento de la columna en el 11. día de la prueba Agente de adsorción: XAD 7, volumen = 5 1 Solución de partida: orina nativa, sin tratar La columna se opera de abajo hacia arriba Pruebas Vol. Tiempo Flujo Flujo PH SS Estrona Estrona Cresol Cresol Equilina Equilina HPMF Estrona ml rmn ml/min VL/h mg/l mg mg/l mg mg/l mg mg/l /SS % Contenido de 140 9.0 112.5 531.1 37.4 42.5 oo o partida Lavado: Agua con NaOH (2%), pH 13 continuación tabla IV.2 Lixiviación: Etanol 30%, 45°C, pH 12 Regeneración: 50 % etanol, 45°C, pH 12 'oo Números de gérmenes Adicionalmente a la adsorción de orina se analizó una posible cobertura con gérmenes bacterianos de la columna. Con las presentes condiciones: 1. Alimentación de orina cruda contaminada (no se separan gérmenes mediante la filtración con la bujía de algodón) 2. No se efectúa lavado después de la alimentación diaria 3. La prueba se lleva a cabo a la temperatura ambiente 4. 10 días de duración de la prueba no era posible excluir la posibilidad de . * colonización de gérmenes en la columna y un subsiguiente crecimiento de los gérmenes. Una determinación . de la cantidad total de gérmenes en diversas etapas de la adsorción arrojó el resultado siguiente: D) Resumen de los resultados A lo largo de un período de prueba de 10 días se alimentó orina fresca diariamente a una columna adsorbente de 5 1. El volumen total de orina fue de 140 1 con un contenido medio de estrona y equilina de 123 mg/l y 74 mg/l. Se prescindió intencionalmente de un lavado de columna con agua después de la adsorción diaria de orina. En ambas sustancias lixiviadas principales que se obtuvieron muy marcadas se hallaron aproximadamente 93% de estrona y equilina. El contenido total de hormonas de la sustancia lixiviada con relación a TS fue de aproximadamente 30 % en peso. Otro resultado sorprendente se refiere a una imaginable contaminación con gérmenes de la columna. Aquí, a pesar de la alimentación de orina cruda altamente contaminada de gérmenes no se pudo reconocer una cobertura de la columna incluso después de 10 dias. La sustancia lixiviada obtenida estuvo casi libre de gérmenes con 1.5 gérmenes/ml. Bajo condiciones difíciles se comprobó con ello a mayor escala que con un contenido de hormonas suficiente en la orina cruda es posible realizar con buena calidad una estabilización y concentración a un contenido de hormona/TS superior a 15% con una columna adsorbente. Ejemplo 6: Pruebas de filtración con bujías filtrantes En una prueba práctica adicional se llevaron a cabo pruebas de filtración con filtros de bujía, cuyos resultados se pueden resumir como sigue: Material utilizado: orina fresca (proveniente de acaballerada alemana) La orina de yeguas preñadas parcialmente agitada reunida en tambores se trasegó a un recipiente desde los tambores mediante una bomba de manguera a través de un saco de 5µ (filtro previo). En el recipiente quedó un sedimento de aproximadamente 0.5% en peso. Una representación esquemática de la forma de proceder para la filtración de la orina cruda se reproduce en la figura 2. 1. Prueba Saco 5µ Filtros de bujía 5µ, 3µ, Iµ conectados en serie Bujías absolutas 2 x 1.2µ conectadas en paralelo Carga de la columna 95 1 de filtrado Sedimento de filtrado 0.000 % 2. Prueba Saco 5µ Filtros de bujía 5µ, 3µ, lµ conectados en serie Bujías absolutas 2 x 3µ conectadas en paralelo Carga de la columna 142 1 de filtrado Sedimento de filtrado 0.001 % 3. Prueba Saco 5µ Filtros de bujia 3µ, lµ conectados en serie Bujías absolutas 2 x lµ conectadas en paralelo Carga de la columna 160 1 de filtrado Sedimento de filtrado 0.000 % Por cada prueba se tomó una prueba después de la bujía absoluta (filtro de membrana) . Cada 100 1 se tomó una prueba del escurrimiento, después de la columna. Carga total de la columna: 397 1 de filtrado El contenido de sólidos (TS) después del acondicionamiento fue de 5.9 % en peso.

Claims (23)

1. REIVINDICACIONES 1. Método para la concentración y estabilización descentralizada acorde a la práctica de mezclas de estrógenos conjugados de la orina de yeguas preñadas, el cual se caracteriza porque - la mezcla natural de estrógenos conjugados contenida en la orina de yeguas preñadas se concentra y estabiliza en un soporte sólido al proceder de manera que desde un recipiente de depósito se bombea en forma continua o en cantidades parciales discretas, a una velocidad de flujo preestablecida, a través de un cartucho colocado en posición perpendicular, una cantidad total máxima preestablecida de un líquido de orina recolectado, opcionalmente previamente depurado mecánicamente de manera burda, y el líquido de orina que se escurre al exterior se desecha, siendo que el cartucho está lleno de un agente de adsorción adecuado rodeado de líquido para la adsorción de una cantidad predefinida de la mezcla de estrógenos conjugados contenida en el líquido de la orina, y siendo que la cantidad total máxima del líquido de orina bombeado a través del cartucho preestablecida como punto de control final para la carga del agente de adsorción se ajusta a la capacidad máxima de carga del agente de adsorción para los estrógenos conjugados contenidos en el líquido de la orina.
2. 2. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque las dimensiones internas del cartucho para el lecho de agente de adsorción se calculan de manera que el cartucho puede alojar 30 a 50 1 de agente de adsorción y la orina de las yeguas preñadas debe recorrer desde la entrada hasta la salida un trecho de 80 a 120 cm.
3. 3. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el cartucho que se usa en el método consta de vidrio de laboratorio irrompible, plástico y/o metal .
4. 4. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque como bomba se usa una monobomba, una bomba de manguera o una bomba de membrana.
5. 5. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque como contador volumétrico se usa un rotámetro con flotador, un contador volumétrico con aspas rotatorias o un contador volumétrico inductivo.
6. 6. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque para medir la cantidad de líquido de orina bombeado a través del cartucho se usa un medidor de cantidades de paso, de preferencia un reloj de agua o un caudalómetro inductivo.
7. 7. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque la velocidad de carga se encuentra en la gama de 3 a 10 volúmenes de lecho de agente de adsorción por hora, preferiblemente 4 a 6 volúmenes de lecho de agente de adsorción por hora.
8. 8. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque agente de adsorción se usan resinas adsorbentes poliméricas, gel de sílice o gel de sílice de fase inversa, en particular resinas adsorbentes poliméricas, preferiblemente resinas adsorbentes poliméricas semipolares.
9. 9. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad máxima total de líquido de orina es de 20 a 60 volúmenes de lecho de agente de adsorción, preferiblemente 30 a 40 volúmenes de lecho de agente de adsorción.
10. 10. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque después de cargar el agente de adsorción con una cantidad de orina de yeguas preñadas que corresponde aproximadamente a la capacidad total del agente de adsorción, o incluso antes de alcanzar la capacidad total de carga, después de etapas individuales de carga parcial a discreción se lava con agua y/o otra solución de lavado acuosa adecuada.
11. 11. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque después de cargado el agente de adsorción, el cartucho en caso deseado se enjuaga con agua y/o alguna otra solución de lavado acuosa adecuada, y para finalizar para una estabilización adicional con una solución conservante, por ejemplo con una solución que contiene un agente de conservación, una solución acuosa de pH ajustado y/o una solución acuosa salina.
12. 12. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el líquido de la orina del recipiente de depósito primero se bombea a través de uno o varios filtros previos, preferiblemente a lo menos a través de un filtro de profundidad o un filtro de masa filtrante sobre tamices, antes de que el líquido de la orina se bombee a través del cartucho.
13. 13. Método según la reivindicación 12, caracterizado porque el filtro previo es un filtro de profundidad con lecho de arena o un cartucho filtrante, un filtro de placas, un filtro de bujía, un filtro de saco o un tubo de filtración.
14. 14. Método según la reivindicación 12 ó 13, caracterizado porque al líquido de la orina se le adicionan auxiliares de la filtración antes de filtrarlo.
15. 15. Dispositivo para la concentración y estabilización descentralizada, acorde a la práctica de mezclas de estrógenos conjugados de la orina de yeguas preñadas sobre un soporte sólido, que comprende - un cartucho dispuesto en forma verticalmente erecta, lleno con un agente de adsorción rodeado continuamente de líquido, adecuado para la adsorción de una cantidad predefinida de la mezcla de estrógenos conjugados contenida en el líquido de la orina de yeguas preñadas, y siendo que el cartucho comprende o bien a) una admisión de líquido localizada por el lado del fondo y una salida del líquido dispuesta por el lado de la cabeza, o b) una admisión de líquido dispuesta por el lado de la cabeza y una salida de líquido dispuesta por el lado del fondo, así como localizados corriente arriba del cartucho en la secuencia indicada y conectados a través de mangueras una bomba, un contador volumétrico y un medidor de cantidad de paso.
16. 16. Dispositivo según la reivindicación 15, caracterizado porque entre la bomba y el contador volumétrico se intercala adicionalmente por lo menos un filtro previo, preferiblemente un filtro de profundidad o un filtro de masa filtrante sobre tamices.
17. 17. Dispositivo según la reivindicación 16, caracterizado porque el filtro previo es un módulo de dos filtros previos conectados en paralelo que se pueden' operar individualmente en forma alternativa y se pueden recambiar durante la operación continua del dispositivo.
18. 18. Dispositivo según la reivindicación 16 ó 17, caracterizado porque para controlar la función correcta del 5 filtro previo se intercala un manómetro entre la bomba y el filtro previo y un manómetro en la sección corriente abajo del filtro previo, preferiblemente corriente abajo del contador volumétrico.
19. 19. Dispositivo según la reivindicación 15, 10 caracterizado porque el cartucho tiene dimensiones internas para el lecho de agente de adsorción con una altura interior en la gama de aproximadamente 80 a 120 cm y un diámetro interior en la gama de aproximadamente 10 a 25 cm.
20. 20. Dispositivo según la reivindicación 15, 15 caracterizado porque el cartucho que comprende el dispositivo es de vidrio de laboratorio irrómpible, plástico y/o metal.
21. 21. Dispositivo según la reivindicación 15, caracterizado porque la bomba que comprende el dispositivo 20 es una monobomba, una bomba de manguera o una bomba de ñ membrana .
22. 22. Dispositivo según la reivindicación 15, caracterizado porque el contador volumétrico que comprende el dispositivo es un rotámetro con flotador, un contador volumétrico de aspas rotatorias o un contador volumétrico inductivo.
23. 23. Dispositivo según la reivindicaci n 15, caracterizado porque el medidor de cantidad de paso que comprende el dispositivo para medir la cantidad de líquido de orina bombeada a través del cartucho es un reloj de agua o un caudalómetro inductivo. • 10 C # RESUMEN La invención se refiere a un método y a un dispositivo para concentrar y estabilizar los estrógenos conjugados de la orina de yeguas preñadas en soportes sólidos con el fin de obtener un material de partida adecuado para la producción de agentes farmacéuticos que contienen la mezcla natural de estos estrógenos conjugados como componente activo. El dispositivo de conformidad con la invención se caracteriza por ser adecuado para la concentración y estabilización práctica y descentralizada de mezcla de estrógenos conjugados (CE por sus siglas en inglés) contenidos en la orina de yeguas preñadas (PMU por sus siglas en inglés) sobre un soporte sólido (= agente de adsorción) , especialmente en la proximidad del establo o del campo, en una columna o cartucho. Con el dispositivo, las columnas adsorbentes se pueden llenar directamente en el sitio de la recolección de la orina. El resultado es que ya no es necesario transportar diariamente grandes cantidades de líquido de orina a un punto de procesamiento central. El proceso de llenado puede tener lugar en forma continua por un período de tiempo más largo de hasta varias semanas, hasta que se satura la columna o cartucho adsorbente. La orina restante que escurre al exterior se queda en el sitio, en donde de cualquier manera ya existen dispositivos adecuados para su confinación. Solo se transporta la columna o el cartucho lleno, y el transporte puede tener lugar a intervalos más prolongados y tomar más tiempo, por ejemplo, hasta algunas semanas. Debido a la sorprendentemente buena estabilidad de los CE en el agente de adsorción no existe el riesgo de descomposición.