MXPA01010610A - Metodo para la descontaminacion de levadura. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a un metodo mejorado para reducir las unidades formadoras de colonias de bacterias en levaduras. El metodo involucra poner en contacto la levadura con un acido hop (derivado del lupulo) en una cantidad suficiente para dar una concentracion final del acido hop (derivado del lupulo) de al menos aproximadamente 40 ppm.

Description

MÉTODO PARA LA DESCONTAMINACIÓN DE LEVADURA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Dentro de la industria cervecera, la levadura usada en una fermentación es comúnmente recuperada de la fermentación y usada nuevamente en varias fermentaciones subsecuentes. Es imperativo que la levadura permanezca libre de contaminación bacteriana. Una forma de prevenir la contaminación bacteriana es tratar la suspensión de levadura para eliminar selectivamente la bacteria (particularmente la bacteria del ácido láctico de desechos de cerveza) bajo condiciones que permiten la sobrevivencia de las células de levadura. En un método, la levadura de la cerveza colectada se trata con ácido para disminuir el pH a un punto en el cual la bacteria se muere y en el cual la levadura sobrevive. Tipicamente, ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido sulfúrico o fosfórico) o ácidos orgánicos (por ejemplo, ácido láctico) , se han usado para este proceso de desinfección. Sin embargo, nuestra investigación ha mostrado sorprendentemente que cuando la levadura no se ha expuesto a ácidos hop (derivados del lúpulo) , como en el caso de la post-fermentación por lupulización, la desinfección del ácido no es efectiva. Esta observación conduce al REF: 133510 !*-* ' -— - ^"^^ descubrimiento inesperado que los ácidos hop (derivados del lúpulo) (por ejemplo isohumulona) usados en combinación con ácido fosfórico, sulfúrico o láctico, incrementan mayormente la efectividad bactericida del tratamiento del ácido. Sin embargo, existen ciertos aislados tolerantes al ácido de la bacteria del ácido láctico tal como especies de Pediococcus y Lactobacillus que son resistentes al tratamiento del ácido, aún cuando los ácidos hop (derivados del lúpulo) están presentes en levaduras colectadas tomadas a partir de una fermentación hopped (derivada del lúpulo) en calderas o son agregados a la levadura a concentraciones típicamente encontradas en la fermentación hopped (derivada del lúpulo) en calderas. Por lo tanto, existe una necesidad en la técnica de un método de descontaminación de levadura que sea efectivo en la reducción de cepas resistentes al ácido de la bacteria del ácido láctico. La presente invención describe, inter alia, el uso de un ácido hop (derivado del lúpulo) , isomerizado, reducido e hidrogenado, ácidos tetrahidroiso-alfa (tetrahidroisohumulona, tetrahidroisocohumulona y tetrahidroadhumulona) , en combinación con ácido orgánico y/o _._*_-_ inorgánico para desinfectar levaduras de cerveza (rebordes) a partir de todos las bacterias contaminantes, incluyendo bacterias de ácido láctico resistentes al ácido. Esta combinación es sorprendentemente más efectiva en la eliminación de la bacteria del ácido láctico que en los ácidos orgánicos e "i norgánicos en combinación con la isohumulona (el cual es el ácido alfa primario en las cervezas hopped (derivadas del lúpulo) en calderas) o en combinación con ácidos iso-alfa reducidos (ácidos dihidroisoalfa) . Los ácidos tetrahidroiso-alfa son tipicamente usados como agentes de lupulización postfermentación para agregar amargor y estabilidad de espuma a las cervezas, y como tales, no están presentes en la levadura colectada a p.rtir de la fermentación. La adición de este compuesto a bajas concentraciones a la levadura de reborde previo al tratamiento del ácido, ha mostrado incrementar mayormente la efectividad del tratamiento del ácido para eliminar la bacteria del ácido láctico. Alcanzando la concentración a 40 ppm de los ácidos tetrahidroiso-alfa en levaduras de rebordes, es sorprendentemente muy efectivo al eliminar bacterias aún resistentes al ácido. Además, agregando 40 ppm de ácidos tetrahidroiso-alfa a levaduras de reborde durante el .. i üü jj¿ _ . almacenamiento y previo al tratamiento del ácido, actúa como un agente antimicrobiano fuerte que reduce la bacteria previo al tratamiento con ácido, sin tener algún efecto apreciable en la levadura.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención es en parte, un método mejorado para reducir las unidades formadoras de colonias de bacterias en levaduras que comprende los pasos de: (a) poner en contacto la levadura con un ácido hop (derivado del lúpulo) en una cantidad suficiente para dar una concentración final de al menos aproximadamente 40 partes por millón (ppm) cuando las cepas bacterianas resistentes al ácido están presentes o a una concentración final de al menos 10 ppm cuando solamente están presentes las cepas bacterianas no resistentes al ácido; (b) mantener la mezcla de levadura del paso (a) por al menos aproximadamente cinco minutos; (c) después del paso (b) , ajustar el pH de la mezcla de levadura del paso (b) a un pH en el rango de aproximadamente 2.0 hasta aproximadamente 2.6 con un ácido orgánico o inorgánico adecuado; y (d) mantener la mezcla de levadura del paso (c) a una temperatura adecuada y por un periodo de tiempo suficiente para reducir las unidades formadoras de colonias bacterianas con relación a una suspensión de levadura de control, tratada con 20 ppm de ácidos iso-alfa. Es un objeto de la invención proporcionar un método para reducir las unidades formadoras de colonia de bacterias en la levadura. Es una ventaja de la invención que la reducción de unidades formadoras de colonias de bacterias en la levadura puedan estar acompañadas por el tratamiento de la levadura con un ácido hop (derivado del lúpulo) que es fácilmente disponible . Es una caracteristica de la presente invención que el método puede ser usado para inhibir el crecimiento de la bacteria en la levadura mientras está almacenada, más particularmente, el crecimiento de la bacteria del ácido láctico del desperdicio de cerveza en la levadura de cerveza mientras está en almacenamiento. Otros objetos, características y ventajas llegarán a ser aparentes después de la revisión de la descripción detallada de la invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS VARIAS VISTAS DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra la concentración de las unidades formadoras de colonias (CFU) de Pediococcus resistentes al ácido en la levadura tratada con tetrahidroisohumulona a dos diferentes concentraciones en combinación con ácido fosfórico o sulfúrico como una función de tiempo. (La gráfica es una comparación de ácidos hop (derivados del lúpulo) con ácido sulfúrico o fosfórico para desinfectar levaduras de cerveza sembradas con Pediococcus resistentes al ácido) . La Figura 2 muestra la concentración de unidades formadoras de colonias de Pediococcus resistentes al ácido en la levadura tratada con varios ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido fosfórico como una función de tiempo. (La gráfica muestra la desinfección del ácido de levadura de cerveza sembrada con Pediococcus resistentes al ácido usando diferentes ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido fosfórico ajustado a pH 2.3). La Figura 3 muestra la concentración de unidades formadoras de colonias de Pediococcus resistentes al ácido en levaduras tratadas con varios ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido fosfórico como una función de tiempo. (La gráfica es una comparación de diferentes ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido a _ 9 a i ^ t • ,.____.. fosfórico a pH 2.3 para desinfectar levaduras de cerveza sembradas con Pediococcus resistentes al ácido) . La Figura 4 muestra la concentración de unidades formadoras de colonias de Pediococcus resistentes al ácido en la levadura tratada con varios ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido fosfórico como una función de tiempo. (La gráfica es una comparación de diferentes ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácido fosfórico a pH 2.3 para desinfectar la levadura de cerveza sembrada con Pediococcus resistentes al ácido) . La Figura 5 muestra la concentración de unidades formadoras de colonias de Pediococcus resistentes al ácido en levaduras tratadas con . tetrahidroisohumulona en combinación con diferentes ácidos orgánicos e inorgánicos como una función de tiempo. (La gráfica muestra el tratamiento del ácido de especies de Pediococcus resistentes al ácido usando tetrahidroisohumulona en combinación con diferentes ácidos orgánicos e inorgánicos). La Figura 6 muestra la concentración de unidades formadoras de colonias de Pediococcus resistentes al ácido en la levadura tratada con diferentes ácidos orgánicos e inorgánicos sin la presencia de cualquier ácido hop (derivado del lúpulo) y con tetrahidroisohumulona como un _«. control. (La gráfica muestra el tratamiento del ácido de la levadura sembrada con especies de Pediococcus resistentes al ácido sin ácidos hop (derivados del lúpulo) ) .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se evaluaron un número de ácidos hop (derivados del lúpulo) en combinación con ácidos inorgánicos o ácidos orgánicos, por su habilidad para desinfectar levaduras sembradas con una cepa de Pediococcus damnosus resistentes al ácido (la más resistente al ácido encontrada por nosotros) . Debido a que la Pediococcus damnosus es la bacteria más resistente al ácido que hemos encontrado, se espera razonablemente que los métodos de la presente invención no solamente sean efectivos en la desinfección de la levadura contaminada con Pediococcus damnosus, sino que también serán efectivos en la desinfección de levadura contaminada con otras bacterias resistentes al ácido y no resistentes al ácido. El tratamiento de levadura con ácidos tetrahidroiso-alfa a una concentración de al menos 40 ppm en combinación con ácido fosfórico a pH 2.3, fue superior a otras combinaciones de ácido hop (derivado del lúpulo) /inorgánico en la reducción o eliminación de la ...- .«-_i .—-prueba del microorganismo Pediococcus . El tratamiento con ácidos tetrahidroiso-alfa a una concentración inferior de 20 ppm, en conjunto con el ácido fosfórico, mostró ser inconsistente e inefectivo en la eliminación del Pediococcus resistente al ácido. Ninguno de los otros ácidos hop (derivados del lúpulo) sometidos a prueba en este estudio se realizó tan también como con los ácidos tetrahidroiso-alfa en combinación con ácido fosfórico. Las preparaciones de ácidos tetrahidroiso-alfa elaboradas de cualquier fracción de ácidos beta o alfa o por diferentes fabricantes, muestran igualmente ser efectivas. También los isómeros cis y trans de ácidos tetrahidroiso-alfa mostraron ambos ser igualmente efectivos. Usando ácido sulfúrico en lugar de ácido fosfórico y en combinación con ácidos tetrahidroiso-alfa, se incrementó además la efectividad de la eliminación del Pediococcus de prueba. El ácido láctico y el ácido cítrico fueron equivalentes al ácido sulfúrico cuando se usaron al mismo pH con ácidos tetrahidroiso-alfa. Comparados con el ácido sulfúrico o fosfórico, ácido láctico y ácido cítrico, se requieren cantidades mucho mayores de ácido para llevar el pH de la suspensión de la levadura por debajo hasta 2.3. El uso de cualquiera de los ácidos de prueba sin la adición del ácido hop (derivado del lúpulo) , fue ?l. ---*-*""»-completamente inefectiva en la eliminación del Pediococcus de prueba resistente al ácido. Otro método para desinfectar levadura de cerveza, es aquél que usa persulfato de amonio (probado a concentraciones de 0.75% y 0.25%) acidificado (con ya sea ácido fosfórico o sulfúrico) . En estos estudios, también se mostró que la habilidad del persulfato de amonio acidificado para eliminar el Pediococcus de prueba resistente al ácido, fue también mayormente incrementada por la adición de los ácidos tetrahidroiso-alfa. El pH de la mezcla de ácido hop (derivado del lúpulo) /levadura es preferiblemente ajustado a un rango de aproximadamente 2.0 hasta aproximadamente 2.6. Más preferido es un rango de pH de aproximadamente 2.2 hasta 2.4. Se espera razonablemente que la invención sea ampliamente aplicable al tratamiento de cualquier levadura incluyendo sin limitación, levadura de cerveza espesa y amarga, levadura de vino, levadura de destiladores, levaduras para hornear, levaduras de champagne, levaduras para la elaboración de sidras, levaduras de alimentos, levaduras de Kluveromyces, etc. Deberá también entenderse que esperamos razonablemente que el tratamiento de la levadura con los . „1.. ácidos hop (derivados del lúpulo) de la presente invención, puedan ser efectivos en la reducción de las unidades formadoras de colonias de bacterias en tales levaduras durante el intervalo que esta es almacenada para su uso 5 futuro. Tal tratamiento de levadura con los ácidos hop (derivados del lúpulo) de la presente invención podrá hacerse por la dosificación de la levadura con tales ácidos hop (derivados del lúpulo) antes de que la levadura se seque para su embarque eventual para el usuario final o por la 10 adición de tales ácidos hop (derivados del lúpulo) a las suspensiones de levaduras en los tanques de rebordes cuando se anticipa que la suspensión de levadura del tanque de reborde se mantendrá en la planta por un periodo de tiempo antes de usarse en la planta. En tales casos, anticipamos 15 que una concentración de ácido tetrahidroiso-alfa de al menos 40 ppm proporcionará control bacteriano efectivo a la levadura. cidos Hop (derivados del lúpulo) Sometidos a Pruebas: 20 Se evaluaron los siguientes ácidos hop (derivados del lúpulo) purificados, derivados de ácido hop (derivado del lúpulo) y extractos hop (derivados del lúpulo) : SPIRE B (ácidos iso-alfa reducidos)- mejor conocidos como ácidos dihidroiso-alfa (o ácidos ro-isoalfa) . Redihop (ácidos iso-alfa reducidos) - mejor conocidos como ácidos dihidroiso-alfa (o ácidos ro-iso-alfa) Alfa-hidrohop - ácidos (alfa) -tetrahidroiso-alfa producidos a partir de ácidos alfa. Beta-hidrohop - ácidos (beta) -tetrahidroiso-alfa producidos a partir de ácidos beta Ácidos trans-tetrahidroiso-alfa Ácidos cis-tetrahidroiso-alfa Ácidos tetrahidroiso-alfa e iso-alfa (mezcla 50:50) Ácidos tetrahidro-alfa Ácidos iso-alfa secundarios (85% de pureza vía purificación secundaria) Fracción de carácter hop (derivado del lúpulo) (HCF) - aceites hop (derivados del lúpulo Ácidos hexahidroiso-alfa Ácidos hexahidroiso-alfa y tetrahidroiso-alfa (mezcla 50:50) Hexahidrocolupulona Estos ácidos hop (derivados del lúpulo) purificados, derivados del ácido hop (derivado del lúpulo) , y extractos hop (derivados del lúpulo) son bien conocidos en la técnica y están disponibles por ejemplo, a partir de .Jj. ^ .¡ t. o Miller Bre ing Company ( aterto n Hops Company), John I. Haas, Inc., S.S. Steiner, Inc., y Kalsec (Kalamazoo Holdings, Inc. ) .

Cepas de Pruebas Bacterianas: Se obtuvieron varios aislados de especies de Pediococcus resistentes al ácido, a partir de suspensiones de levaduras de una cervecería que tiene problemas con la desinfección de manera efectiva de las levaduras de cervezas. El aislado más resistente al ácido se seleccionó e identificó por API'S Rapid CHL, Biolog y Qualicon Ríboprinter como Pediococcus damnosus . Un aislado perdió su resistencia al ácido en la subcultivación y subsecuentemente mostró tener un patrón de riboprint diferente de la cepa resistente al ácido.

Levadura de Reborde para Experimentos de Desinfección: Muestras de levaduras de rebordes usadas en estos estudios se obtuvieron a partir de unos medios para la elaboración comercial de cerveza. En todos los casos, la levadura se colectó a partir de fermentaciones que no contienen ácidos hop (derivados del lúpulo) . En cada prueba, se usó la generación más baja de levadura disponible.

Ensayo de Desinfección del Ácido: Las muestras de levaduras de rebordes se enfriaron a 34 °F con agitación continua. Aislados recientes de la cepa de Pediococcus de prueba se tomaron a partir de ágar BMB (Barney-Miller Bre ery) , (Patente Estadounidense 4,906,573; Difco #T634-17) o caldo de Lactobacilos-MRS y se suspendieron nuevamente en caldo de Lactobacilos-MRS estériles. Esta suspensión entonces se agregó a la muestra de levadura de reborde y se agitó por una hora para asegurar la distribución completa, uniforme de la bacteria. Una muestra de la suspensión sembrada entonces se tomó y se diluyó serialmente en caldo MRS y se plaqueó o colocó en placas en ágar BMB+ (BMB más 3 ppm de Actidiona) para obtener conteos de Pediococcus de control al tiempo 0. Alícuotas de 500 ml de la suspensión sembrada se distribuyeron en jarras de un litro estériles equipadas con barras agitadoras. Los ácidos hop (derivados del lúpulo), ácidos inorgánicos y ácidos orgánicos se agregaron en diferentes combinaciones a estas suspensiones mientras se media el pH usando un medidor de pH calibrado. Cuando los ácidos hop (derivados del lúpulo) se emplearon, los ácidos hop (derivados del lúpulo) se agregaron al menos cinco minutos antes de la adición de otros ácidos.

Todas las muestras fueron continuamente agitadas usando agitación magnética a 34 °F por el periodo de tiempo especificado. Las muestras se tomaron a intervalos de una hora y se pipetearon inmediatamente en el caldo MRS para neutralizar el pH y detener el tratamiento del ácido. Estas muestras fueron entonces diluidas serialmente en tubos adicionales de caldo MRS. Todas las diluciones fueron plaqueadas o colocadas en placas en filtros en ágar BMB+. Todas las placas fueron entonces incubadas en un incubador anaeróbico con C02 a 28 °C por siete días.

Resultados Experimentales: Se diseñaron los experimentos para determinar si la modificación del método de descontaminación de levadura incrementando la concentración del ácido hop (derivado del lúpulo) o cambiando el ácido inorgánico, podría disminuir la concentración del Pediococcus que se Vuelve Fuerte resistente al ácido viable en la levadura.

Ejemplo 1: La Figura 1 muestra que incrementando la concentración de los ácidos tetrahidroiso-alfa (Hidrohop) de 20 ppm hasta 40 ppm, mejora mayormente la efectividad de la eliminación del Pediococcus de prueba cuando se usa el tratamiento del ácido fosfórico. La figura también muestra que cuando se usa el ácido sulfúrico en lugar del ácido fosfórico, el Pediococcus resistente al ácido es eliminado 5 aún más efectivamente.

Ejemplo 2: La Figura 2 presenta datos a partir de un experimento que compara diferentes ácidos hop (derivados del 10 lúpulo) (agregados a 40 ppm) en combinación con el ácido fosfórico ajustado a pH para eliminar el Pediococcus resistente al ácido. Como la gráfica muestra, los ácidos tetrahidroiso-alfa fueron superiores a los otros cuatro ácidos hop (derivados del lúpulo) sometidos a pruebas. La 15 hexahidrocolupulona, la cual en experimentos previos mostró ser muy eficiente en la eliminación de otras bacterias Gram positivas, fue la última efectiva en la eliminación del Pediococcus de prueba proporcionando solamente dos logs de eliminación en cinco horas. Los ácidos alfa isomerizados 20 reducidos y los ácidos hexahidroiso-alfa fueron ambos efectivos en la eliminación del organismo de prueba que reduce la población 4 logs en cinco horas. Sin embargo, todavía fueron menos efectivos que los ácidos tetrahidroiso- _&_a ____TÍI__1S . . alfa. Los ácidos iso-alfa secundarios fueron el segundo compuesto más efectivo (comparado con los ácidos tetrahidroiso-alfa) sometidos a prueba que producen más de 6 logs de eliminación en 5 horas.

Ejemplo 3: La Figura 3 gráfica los datos a partir de un experimento que compara los ácidos tetrahidroiso-alfa, así como también los ácidos cis-tetrahidroiso-alfa y ácidos trans-tetrahidroiso-alfa en combinación con los ácidos tetrahidroiso-alfa (formados a partir del ácido alfa) para desinfectar levaduras de cerveza sembradas con un Pediococcus resistente al ácido. Estos se sometieron a prueba a una concentración de 40 ppm en combinación con el ácido fosfórico y se ajustó el pH a 2.3. Como lo muestra la gráfica, los ácidos tetrahidro-alfa fueron inefectivos al eliminar el Pediococcus resistente al ácido, mostrando solamente ligeramente más de un log de eliminación en cinco horas. Los otros tres manchados muestran que los ácidos tetrahidroiso-alfa formados a partir de los ácidos alfa, ácidos cis-tetrahidroiso-alfa y ácidos trans-tetrahidroiso- alfa, fueron estrechamente equivalentes a cada uno de los otros mostrando muy buena eliminación del organismo de prueba. Esto demuestra que no aparece diferencia en los isómeros cis y trans para la eliminación, y que los ácidos tetrahidroiso-alfa producidos a partir de ya sea los ácidos beta o alfa (experimentos previos) , demuestran la misma efectividad en la eliminación de los organismos de prueba.

Ejemplo 4: La Figura 4 muestra una comparación de otras cuatro mezclas de ácidos hops (derivados del lúpulo) /ácido hop (derivado del lúpulo) comparada con los ácidos tetrahidroiso-alfa para desinfectar levaduras de cervezas sembradas con un Pediococcus resistente al ácido. Todos se sometieron a prueba a una concentración de 40 ppm en combinación con ácido fosfórico ajustado a pH 2.3. La isohumulona reducida fue muy inefectiva en la eliminación de la bacteria de prueba. Una mezcla comercial 50:50 de ácidos tetrahidroiso-alfa y ácidos iso-alfa fue más efectiva que los ácidos iso-alfa reducidos. Una mezcla comercial 50:50 de ácidos tetrahidroiso-alfa y ácidos hexahidroiso-alfa y ácidos hexahidroiso-alfa solos fue aún más efectiva en la eliminación del organismo de prueba durante el tratamiento del ácido. Sin embargo, los ácidos tetrahidroiso-alfa por si mismos confirman ser superiores en la eliminación del organismo de prueba.

Ejemplo 5: La Figura 5 representa datos a partir del tratamiento del ácido de la levadura sembrada con Pediococcus resistentes al ácido usando ácidos tetrahidroiso-alfa en combinación con diferentes ácidos inorgánicos y orgánicos. El control del ácido fosfórico sin ácidos hop (derivados del lúpulo) agregados, no mostró eliminación del organismo de prueba durante cinco horas de tratamiento. Cuando los ácidos tetrahidroiso-alfa se agregaron al ácido fosfórico, el organismo de prueba fue efectivamente eliminado. Sin embargo, cuando se usaron el ácido sulfúrico, ácido láctico o ácido cítrico para ajustar el pH a 2.3 en combinación con los ácidos tetrahidroiso-alfa, la efectividad de eliminación del organismo de prueba además se incrementó.

Ejemplo 6: La Figura 6 presenta los datos de comparación del ácido cítrico, ácido láctico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico a pH 2.3, sin algún ácido hop (derivado del lúpulo) agregado para eliminar el Pediococcus resistente al I . ír A -. ? « 1~ - ...id . ácido en levaduras de cerveza. Solamente el ácido láctico mostró alguna eliminación del organismo de prueba después de dos horas de tratamiento. Un control tratado con 40 ppm de ácidos tetrahidroiso-alfa y ácido fosfórico, mostró eliminación efectiva durante tres horas de tratamiento. Los datos a partir de HCF (fracción de carácter derivada del lúpulo) no están presentes aquí, pero en experimentos previos no mostraron tener efectos antimicrobianos contra la bacteria del ácido láctico.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención. .,** .

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: 1. Un método mejorado para reducir las unidades formadoras de colonia de bacterias en levaduras, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) poner en contacto la levadura con un ácido hop (derivado del lúpulo) en una cantidad suficiente para dar una concentración final de al menos aproximadamente 40 partes por millón (ppm) cuando las cepas bacterianas resistentes al ácido están presentes, o a una concentración final de al menos 10 ppm cuando están presentes las cepas bacterianas no resistentes al ácido; (b) mantener la mezcla de levadura del paso (a) por al menos aproximadamente cinco minutos; (c) después del paso (b) , ajustar el pH de la mezcla del paso (b) desde aproximadamente 2.0 hasta aproximadamente 2.6; y (d) mantener la mezcla de levadura del paso (c) a una temperatura adecuada y por un periodo de tiempo suficiente para reducir las unidades formadoras de colonias bacterianas con relación a un control de levadura tratado ^^^^ con ácidos iso-alfa a una concentración de 20 ppm. 2. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque el ácido hop (derivado del lúpulo) se selecciona del grupo que consiste de ácidos cis-tetrahidroiso-alfa, ácidos trans-tetrahidroiso-alfa, ácidos alfa-tetrahidroiso-alfa, ácidos beta-tetrahidroiso-alfa y combinaciones de los mismos . 3. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque el pH se ajusta usando un ácido seleccionado del grupo que consiste de ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido láctico, y combinaciones de los mismos. 4. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque las bacterias resistentes al ácido son las Gram positivas . 5. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque las bacterias resistentes al ácido son las bacterias del ácido láctico. 6. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la bacteria resistente al ácido pertenece al género Pediococcus . 1 . El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la concentración de las unidades que forman colonias se reduce al menos, aproximadamente 100 veces con relación a la concentración de las unidades que forman colonias en las levaduras tratadas con 20 ppm de ácidos hop (derivados del lúpulo) . 8. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la suspensión del paso (d) se mantiene a una temperatura adecuada por al menos, aproximadamente 1 hora. 9. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la levadura es la levadura de cerveza. 10. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque el pH se ajusta a partir de aproximadamente 2.2 hasta aproximadamente 2.4. 11. El método de la reivindicación 2, caracterizado porque las unidades formadoras de colonias se reducen por al menos aproximadamente 10 veces después de una hora, con relación a un método de control en el cual la levadura es tratada con 20 ppm del ácido iso-alfa correspondiente. 12. Un método mejorado para reducir las unidades formadoras de colonias de bacterias en levaduras a ser almacenadas, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) poner en contacto la levadura a ser almacenada con un ácido tetrahidroiso-alfa en una cantidad suficiente para dar una concentración final de al menos aproximadamente 40 partes por millón (ppm) . .J_ "**- . _£_^_. _*,_.. 13. El método de la reivindicación 12, caracterizado porque comprende el paso adicional de mantener la mezcla de levadura del paso (a) por al menos aproximadamente 5 minutos. 14. El método de la reivindicación 12, caracterizado porque el ácido tetrahidroiso-alfa se selecciona del grupo que consiste de ácidos cis-tetrahidroiso-alfa, ácidos trans-tetrahidroiso-alfa, ácidos alfa-tetrahidroiso-alfa, ácidos beta-tetrahidroiso-alfa y combinaciones de los mismos. 15. El método de la reivindicación 12, caracterizado porque la levadura es la levadura de cerveza. 16. Una levadura tratada por el método de la reivindicación 1. 17. La levadura de la reivindicación 16, caracterizada porque la levadura es la levadura de cerveza. 18. Una levadura tratada por el método de la reivindicación 12. 19. La levadura de la reivindicación 18, caracterizada porque la levadura es la levadura de cerveza. ^^^^^^^¡^^^^^^^^^^¡j^¡^