MXPA01000888A - Isoquinolinas - Google Patents

Abstract

Se describen compuestos de isoquinolinilguanidina de la fórmula (I):(Ver Fórmula) en la que los sustituyentes son como se definen en este documento, y sales de los mismos, como inhibidores de uroquinasas.

Description

ISOQUINOLINAS MEMORIA DESCRIPTIVA Esta invención se refiere a ciertas isoquinolinas útiles como inhibidores de uroquinasas y, en particular, a isoquinolinilguanidinas útiles como inhibidores de uroquinasas. La uroquinasa (activador de plasminógeno de tipo urinario o uPA; International Union of Biochemístry, número de clasificación EC.3.4.21.31 ) es una proteasa sérica producida por una gran diversidad de tipos de células (células de músculo liso, fibroblastos, células endoteliales, macrófagos y células tumorales). Se ha implicado como que juega un papel clave en la invasión celular y remodelación tisular. Un substrato principal para el uPA es el plasminógeno, que se convierte por un uPA unido a la superficie celular en la proteasa sérica plasmina. Las altas concentraciones de plasmína producidas localmente median la invasión celular rompiendo la matriz extracelular. Los procedimientos importantes que implican la invasión celular y la remodelación tisular ¡ncluyen la reparación de heridas, remodelación ósea, angiogénesís, invasión tumoral y extensión de metástasis. Se han presentado efectos beneficiosos de los inhibidores de las uroquinasas usando anticuerpos monoclonales anti-uroquinasa y ciertos inhibidores de uroquinasas conocidos distintos. Por ejemplo, se ha indicado que ciertos anticuerpos monoclonales anti-uroquinasa bloquean la invasión de tia?l» -¡n¡¿_É,i>í:- mm ^m células tumorales in vitro (W. Hollas, y col., Cáncer Res. 51 : 3690; A. Meissauer, y col., Exp. Cell Res. 192: 453 (1991 ); matástasís tumoral e invasión in vivo (L. Ossowski, J. Cell Biol. 107: 2437 (1988)); L. Ossowski, y col., Cáncer Res. 51 : 274 (1991 )) y la angiogénesis in vivo (J.A. Jerdan y col., 5 J. Cell Biol. 115[3 Pt 2]: 402a (1991 ). Además, se ha indicado que el Amiloride™, un inhibidor de uroquinasas conocido con una potencia sólo moderada, inhibe la metástasis tumoral in vivo (J.A. Kellen y col., Anticancer Res., 8: 1373 (1988)) y la angiogénesis/formacíón de la red capilar in vitro (M.A. Alliegro y col, J. Cell Biol. 115[3 Pt 2]: 402a). 10 Los trastornos de interés particular para el tratamiento mediante inhibidores de las uroquinasas incluyen úlceras dérmicas crónicas (incluyendo úlceras venosas, úlceras diabéticas y llagas por presión), que son una causa importante de morbididad en la población en envejecimiento y originan una carga económica significativa sobre los sistemas sanitarios. Las úlceras dérmicas crónicas se caracterizan por una degradación proteolítica excesiva e incontrolada que da como resultado la extensión de la úlcera, la pérdida de moléculas funcionales de la matriz (por ejemplo, fíbronectina) y el retraso de la epitelización y la curación de la úlcera. Varios grupos han investigado las enzimas responsables de la degradación excesiva en el medio de la herida y se ha destacado el papel de los activadores de plasminógeno (M.C. Stacey y col., Br. J. Surgery, 80, 596; M. Palolahtí y col., Exp. Dermatol., 2, 29, 1993; A.A. Rogers y col., Wound Repair and Regen., 3, 273, 1995). La actividad uroquinasa también se ha implicado como un factor en la psoriasis: Jensen & Lavker (1996) Cell Growth Diff. 7, 1793-1804 Baker BS y Fry L (1992). Br J Dermatol, 126(1), 1-9, 2; Spiers EM, y col. (1994). J Invest Dermatol, 102(3), 333-338, 3 Grondahl-Hansen J, y col. (1987). J Invest Dermatol. 88(1 ), 28-32. Gissler H, y col. (1993). Br J Dermatol, 128(6), 612-618; Venning VA y col. (1993). Clin Exp Dermatol, 18(2), 119-123. La piel humana normal muestra bajos niveles de activadores de plasminógeno que se localizan en los vasos sanguíneos y se identifican como activadores de plasmínógeno de tipo tisular (tPA). En un notable contraste, las úlceras crónicas muestran altos niveles de activadores de plasminógeno de tipo uroquinasa (uPA) localizados difusamente a lo largo de toda la periferia de la úlcera y la lesión, y se pueden detectar fácilmente en fluidos de heridas. Los uPA podrían afectar a la curación de las heridas de varias formas. La plasmina, producida por activación del plasminógeno, puede producir la rotura de la matriz extracelular por medios indirectos (mediante la activación de metaloproteasas de la matriz) y por medios indirectos. Se ha demostrado que la plasmina degrada varios componentes de la matriz extracelular incluyendo gelatina, fibronectina, y proteínas nucleares de proteoglicanos así como su substrato principal, la fibrina. Aunque la activación de las metaloproteasas de la matriz (MMP) puede realizarse por varias proteasas de células inflamatorias (por ejemplo, la elastasa y la catepsina G) la cascada de uPA/plasmina se ha implicado en la activación de MMP in situ, proporcionando una amplia capacidad de degradar todos los componentes de la matriz extracelular. Además, aparte de su efecto sobre la producción de plasmina, se ha demostrado que el uPA cataliza la escisión directa de la fibronectina produciendo péptidos autoproliferativos. Así pues, la sobreexpresión de uPA en el medio de la herida tiene la capacidad de promover la degradación incontrolada de la matriz y la inhibición de la 5 reparación de los tejidos. Así pues, los inhibidores de la enzima tienen la capacidad de promover la curación de heridas crónicas. Varias enzimas relacionadas tales como tPA, que también actúa mediante la producción de plasmina, juegan un papel clave en la cascada fibrinolítica. Debido a esto, es importante que un inhibidor tenga una potencia y selectividad adecuadas por el uPA con respecto tanto al tPA como a la plasmina, para evitar la posibilidad de efectos secundarios anti-fibrinolíticos. La utilidad de tales inhibidores de uroquínasas potentes y selectivos se destaca por la amplia serie de procesos biológicos invasivos y afecciones mediadas por uroquinasas. Estos procesos y afecciones incluyen, pero sin limitación, la curación de heridas, afecciones dependientes de angiogénesis tales como retinopatía, reestructuración ósea, implantación del embrión en el útero, infiltración de células inmunes en sitios inflamatorios, ovulación, espermatogénesis, psoriasis, remodelación de tejidos durante la reparación de heridas y la diferenciación de órganos, fibrosis, invasión local de tumores en áreas adyacentes, extensión metastática de células tumorales desde sitios primarios a secundarios, y destrucción de tejidos en la artritis. Se ha indicado que diversas amidinas aromáticas inhiben el uPA (J.D. Geratz, M.C.-F. Cheng, Thromb. Diathes. Haemorrh. (Stuttg.), 33, 230, -* _ ___ ? _ _« _«_.. ..-_,____*________._.. 1975; J. Stürzebecher, F. Markwardt, Pharmazie, 33, 599, 1978; J.D. Geratz y col., Thromb. Res., 24, 73, 1981). Los compuestos presentados en estas publicaciones generalmente son relativamente débiles y/o no selectivos para un uPA con respecto a otras proteasas de serina relacionadas. El documento EP 0 568 289 A2 describe una serie de benzo[ ]tiofeno-2-carboxamidínas con una potencia y selectividad significativamente mayor con respecto al tPA y la plasmina (véase también M.J. Towle y col., Cáncer Res., 53, 2553, 1993; A.J. Bridges y col., Bioorg. Med Chem., 1 , 403, 1993). Hay algunos informes de derivados de guanidina como inhibidores de uPA. El Amiloride™ (véase más adelante) es un inhibidor débil pero selectivo de uPA (J.-D. Vassalli, D. Belin, FEBS Letíers, 214, 187, 1987), y se informa que diversas fenilguanidinas sustituidas tienen un nivel similar de potencia (H. Yang y col., J. Med. Chem., 33, 2956, 1990).

Amiloride Los compuestos descritos en este documento son inhibidores potentes y reversiblemente competitivos de la actividad enzimática uroquínasa, con selectividad por la uroquinasa con respecto a ciertas otras .Érf proteasas importantes, incluyendo las enzimas fíbrinolíticas activador de plasminógeno de tipo tísular (tPA) y plasmina. La selectividad de los compuestos reivindicados en el presente documento para la inhibición de uroquinasa con respecto a la inhibición de otras proteasas tales como tPA y plasmina, y el hecho de que inhiben la reversibilidad, impide que tengan propiedades trombogénicas. Así pues, de acuerdo con la presente invención se proporcionan compuestos de isoquinolinilguanidina de fórmula (I):- (I) 15 y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la que G es N=C (NH)2 o NHC (=NH) NH2; R1 es H o halo; X es CO, CH2 o S02; R2 es H, arilo, heteroarilo, cicloalquilo C3.7 o alquilo C?-6, estando cada uno de cicloalquilo C3-7 y alquilo C?-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, arilo, het, cicloalquilo C3-7, cicloalquenilo C5-7, OH, alcoxi C?-6, O-het1, alquilo C-?-3, C02R7 y NR4R5; X1 es arileno, alquileno C?-6 opcionalmente sustituido con uno o más grupos R6, o ciclo-alquileno (C4.7) opcionalmente sustituido con R6, anillo de ciclo-alquileno (C - ) que puede contener opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7; 5 o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina; R3 es C02R7, CH2OH, CONR8R9 o CH2NR8R9; o, cuando X1 se toma independientemente de R2 y es metileno 10 opclonalmente sustituido con uno o más grupos R6, o es un 1 ,1 -ciclo-alquileno (C4-7) que contiene opcíonalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(O)p o NR7 y opcionalmente sustituido con R6, entonces R2 y R3 pueden tomarse conjuntamente con los grupos N y X1 a los que están unidos, como un grupo de fórmula (IA) o (IB): 15 (IA) (IB) 20 en la que X2 es etileno, n-propileno o n-butileno; cada uno de R4 y R5 es independientemente H, arilo o alquilo C?-6 opcionalmente sustituido con arilo; ,.---,--,.^r^.,..^^^ ^^^^|^^j^^^^^^^^&1«^ L_^^^^fe^^ R6 es halo, OH, alcoxi C-?-6l alquiltio C?-6, cicloalquilo C3-7> SH; arilo, CO2R7, CONHR8 o alquilo C?_6 opcionalmente sustituido con arilo, alcoxi d-e, C02H, OH, CONR8R9 o por NR8R9; R7 es H o alquilo C-i-ß; 5 cada uno de R8 y R9 es independientemente H o alquilo C1-6 opcíonalmente sustituido con OH, CO2R7, alcoxi C-?_6 o por NR4R5; o R8 y R9 se toman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos, para formar un anillo de 4 a 7 eslabones que incorpora opcionalmente un grupo hetero adicional seleccionado entre O, S y NR7; 10 p es 0, 1 ó 2; "arilo" es fenilo opcíonalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-6, alcoxi C?-6 o halo; "het" es heterociclo de 5 a 7 eslabones saturado o parcial o 15 totalmente insaturado que contiene hasta 3 heteroátomos seleccionados independientemente entre O, N y S, y que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C-?-6, alcoxi C-?-6, C02R7 o halo; "heteroarilo" es un heterociclo de 5 a 7 eslabones totalmente 20 insaturado que contiene hasta 3 heteroátomos seleccionados independientemente entre O, N y S, y que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C?-6, alcoxi C1-6, CO2R7 o halo; .^-iMÉ_- ^¿^_a_ ____ ^|fi ^ ^^ÉSstj^^^^^ "het1" es tetrahidropiran-2-ilo (2-THP); y "arileno" es fenileno opcíonalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C-?-6, alcoxi C-?-6, C02R7 o halo. 5 Los grupos "alquilo" pueden ser de cadena lineal o ramificada. "Halo", en las definiciones anteriores, se refiere a F, Cl o Br. Los grupos "cicloalquileno", en la definición del radical de unión X1 que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(O)p NR7 y que está opcionalmente sustituido con R6, pueden unirse por cualquier 10 átomo disponible. Los grupos "1 ,1 -cicloalquileno", en la definición del radical de unión X1 que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7 y que está opcionalmente sustituido con R6, significa que el enlace es por medio de un centro cuaternario común en una posición del anillo, a saber, por ejemplo: el 1 ,1-ciclobutíleno y el 4,4-tetrahidropiranileno 15 deben considerarse pertenecientes al mismo género de grupos "1 ,1- cicloalquileno" que contienen opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7 y opcionalmente sustituidos con R6. Por supuesto, las dos definiciones dadas para el radical "G" en los compuestos de fórmula (I) son tautoméricas. El experto comprenderá que 20 en ciertas circunstancias prevalecerá un tautómero y que en otras circunstancias estará presente una mezcla de tautómeros. Debe entenderse que la invención incluye todas las formas tautoméricas de las sustancias y mezclas de las mismas.

Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas para los expertos en la técnica e incluyen, por ejemplo, las mencionadas por Berge y col, en J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977). Las sales de adición de ácidos adecuadas se forman a partir de ácidos que forman sales no tóxicas e incluyen las sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, hidrogenofosfato, acetato, trifluoroacetato, gluconato, lactato, salicilato, citrato, tartrato, ascorbato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, formiato, benzoato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato y p-toluenosulfonato. Cuando uno o más de los sustituyentes en el compuesto de fórmula (I) contiene un radical ácido, pueden formarse sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables adecuadas a partir de bases que forman sales no tóxicas e ¡ncluyen las sales de aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio, cinc y aminas farmacéuticamente activas tales como las sales de dietanolamina. Ciertos compuestos de fórmula (I) que tienen un radical ácido pueden existir en forma de uno o más iones bipolares. Debe entenderse que todos tales iones bipolares se incluyen dentro del alcance de la invención. Ciertos compuestos de la fórmula (I) pueden existir como isómeros geométricos. Los compuestos de la fórmula (I) pueden poseer uno o más centros asimétricos y, por lo tanto, existir en dos o más formas esteroisoméricas. La presente invención incluye todos los estereoisómeros individuales e isómeros geométricos de los compuestos de fórmula (I) y mezclas de los mismos. Otro aspecto de la invención es una composición farmacéutica que comprende un compuesto o sal de acuerdo con las definiciones anteriores y un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto más de la invención es un compuesto o sal de acuerdo con las definiciones anteriores para su uso como un medicamento. Otro aspecto de la invención es el uso de un compuesto o sal de acuerdo con las definiciones anteriores para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección o proceso mediado por uPA, tal como la angíogénesis (neo-vascularización), reestructuración ósea, implantación del embrión en el útero, infiltración de células inmunes en sitios inflamatorios, ovulación, espermatogénesis, psoriasis, remodelación de tejidos durante la reparación de heridas y diferenciación de órganos, fibrosis, invasión local de tumores en áreas adyacentes, extensión metastática de células tumorales desde sitios primarios a sitios secundarios y destrucción de tejidos en la artritis. Otro aspecto más de la invención es un procedimiento de tratamiento de una afección mediada por uPA, tal como la angiogénesís (neo-vascularización), reestructuración ósea, implantación del embrión en el útero, infiltración de células inmunes en sitios inflamatorios, ovulación, espermatogénesis, psoriasis, remodelación de tejidos durante la reparación de heridas y diferenciación de órganos, fibrosis, invasión local de tumores en IggMg^^^^^^^^^^ jgi gfa?^^ ^ áreas adyacentes, extensión metastática de células tumorales desde sitios primarios a sitios secundarios, y destrucción de tejidos en la artritis, que comprende administrar una cantidad terapéutica de un compuesto, sal o composición de acuerdo con las definiciones anteriores. 5 Se apreciará que la referencia al tratamiento incluye la profilaxis así como el alivio de síntomas establecidos de las afecciones y procesos mediados por uPA. Preferiblemente, G es N=C (NH)2 Preferiblemente, R1 es halo. 10 Más preferiblemente, R1 es cloro o bromo. Aún más preferiblemente, R1 es cloro. Preferiblemente, X es S02. Preferiblemente, R2 es H, cicloalquilo C3.7 o alquilo C-i-ß, estando cada uno de cícloalquilo C3_ y alquilo C-?-6 opcionalmente sustituido con arilo, 15 het, cicloalquilo C3-7, OH, Ohet1, alcoxi C?_6, C02H, C02(alquílo C-i-ß) o por NR4R5, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidína u homopiperidina. Más preferiblemente, R2 es H, alquilo C-?-3 opcíonalmente 20 sustituido con arilo, con piridilo opcionalmente sustituido, con NR4R5, con HO o con Ohet1, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidína.

^^^^^L^^^^^^^^^^*¡g¡fe*áaa?^^^^^^^^?gtó^^^^^&^fc ____rtr?__l__?ttrr -T X&k *ijj^^&^ Además, más preferiblemente R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, CH2CH20(2-THP), piridinilmetilo, bencilo o metoxíbencilo, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperídina unido al radical R3 por medio de la posición 2 de dicho anillo. Aún más preferiblemente, R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3> CH2CH20H, CH2CH20(2-THP), o R2 y X1 se toman conjuntamente con el átomo N al que están unidos para formar un anillo de pirrolídina unido al radical R3 mediante la posición 2. Preferiblemente X1 es fenileno opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre metoxi y halo, o es alquileno C-?-3 opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre arilo (o alquilo C?-6 opcionalmente sustituido con arilo, alcoxí C?-6, C02H, OH, NH2 o CONH2), o es ciclo-alquileno (C4-7) que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O o NR7, anillo que está opcionalmente sustituido con R6, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidína, piperidina u homopiperidina. Más preferiblemente, X1 es metileno opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre arilo o (alquilo C-?_ opcionalmente sustituido con OH, NH2 o CONH2), o es ciclobutileno, ciclopentileno, ciclohexileno, cícloheptileno, tetrahidropiranileno, pipepdinileno sustituido con R7, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u 5 homopiperidina. Aún más preferiblemente, X1 es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4- tetrahídropiranileno, ?/-metil-4,4-piperidinileno, CH2, CH(CH(CH3)2), CH(CH2)4NH2, CH(CH2)3NH2, CH(CH2)CONH2, 1 ,1 -ciclobutileno, 1 ,1- ciclopentileno, 1 ,1-ciclohexíleno, 1 ,1-cicloheptileno, N-met¡l-4,4-piper¡dinileno o 10 4,4-tetrahidropiranileno, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidma u homopiperidina unido al radical R3 mediante la posición 2. Aún más preferiblemente, X1 es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4- tetrahidropiranileno, ?/-metil-4,4-píperid¡nileno o se toma conjuntamente con 15 R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina unido al radical R3 mediante la posición 2. Preferiblemente, R3 es C02R7 o CONR8R9. Más preferiblemente, R3 es C02H, CONH2, CON(CH3)(CH2)2?H, CON(CH3)(CH2)2NHCH3, C02(alquilo d.3), CONH(CH2)2OH, CONH(CH2)2OCH3, (morfolino)CO o (4-metilpiperazino)CO. Aún más preferiblemente, R3 es CO2H. Un grupo preferido de sustancias (a) son los compuestos en los que X es SO2, donde el radical R3-X1-NR2-, cuando X1 se toma independientemente de R2 y es metileno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R6, o es un 1 ,1 -ciclo-alquileno (C . ) que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7 y opcionalmente sustituido con R6, y R2 y R3 pueden tomarse conjuntamente con los grupos N y X1 a los que están unidos, como un grupo de fórmula (IA) o (IB): (LA) (IB) en la que X2 es etileno, n-propileno o n-butileno. En este grupo de sustancias (a) X1 es preferiblemente C(CH3)2, 1 ,1 -ciclobutileno, 1 ,1 -ciclopentileno, 1 ,1-ciclohexileno, 4,4-tetrahidropiranileno o ?/-met¡l-4,4-p¡peridinileno, más preferiblemente 1 ,1 -ciclopentileno. En este grupo de sustancias (a), X2 es preferiblemente etileno. Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que el sustituyente R1 tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos. Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que el sustituyente X tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos.

Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que el sustituyente R2 tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos. Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que 5 el sustituyente X1 tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos. Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que el sustituyente R3 tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos. 10 Otro grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que cada uno de los sustituyentes R1, X, R2, X1 y R3 tiene los valores descritos por los ejemplos mostrados a continuación, y las sales de los mismos. Un grupo preferido de sustancias son los compuestos en los que R1 es cloro o bromo; X es S02; R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, 15 CH2CH20 (2-THP), piridinilmetilo, bencilo o metoxibencilo, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina unido al radical R3 mediante la posición 2 de dicho anillo; X1 es C(CH3)2, 1 ,1-ciclopentileno, 4,4-tetrahidropiranileno, N- 20 met¡l-4,4-p¡peridinileno, CH2, CH(CH(CH3)2), CH(CH2)4NH2, CH(CH2)3NH2, CH(CH2)C0NH2, 1 ,1 -ciclobutileno, 1 ,1 -ciclopentileno, 1 ,1-ciclohexileno, 1 ,1- cicloheptileno, N-metil-4,4-piperidinileno o 4,4-tetrahidropiranileno, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^a^^^^^^^^g^^^^^^É^SÉÉMM ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ «^^ anillo de azetidína, pirrolidina, piperidina, homopiperidina unido al radical R3 mediante la posición 2; R3 es C02H, CONH2, CON(CH3)(CH2)2OH, CON(CH3)(CH2)2NHCH3, C02(alquilo C1-3), CONH(CH2)2OH; CONH(CH2)2OCH3, (morfolino)CO o (4-metilpiperazíno)CO; y las sales de los mismos. Otro grupo preferido de sustancias son aquellas en las que R1 es cloro; X es S02, R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, CH2CH20(2- THP), o R2 y X1 se toman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de pirrolidina unido al radical R3 por medio de la posición 2; X1 es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4-tetrahidropiranileno, N- metil-4,4-píper¡d¡n¡leno, o se toma conjuntamente con R2 y el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pírrolidina o piperidina unido al radical R3 mediante la posición 2; y R3 es C02H; y las sales de los mismos. Otro grupo preferido de sustancias son los compuestos de los ejemplos mostrados a continuación y las sales de los mismos. Dentro de este grupo son más preferidos los compuestos de los ejemplos 32(b), 34(b), 36(b), 37(b), 38, 39(a y b), 41 (b), 43(b), 44(b), 71 , 75, 76, 78, 79, 84(b) y 87(b y c) y las sales de los mismos. g^^ ^ | íj ^^^^^ ^^^t^^^^ La invención además proporciona procedimientos para la producción de sustancias de la invención, que se describen más adelante y en los ejemplos. El experto apreciará que las sustancias de la invención podrían obtenerse por procedimientos distintos de los descritos en este documento, mediante la adaptación de los procedimientos descritos aquí en las secciones mostradas a continuación y/o una adaptación de los mismos, y de procedimientos conocidos en la técnica. En los procedimientos mostrados a continuación, a menos que se especifique otra cosa, los sustituyentes son como se han definido anteriormente con referencia a los compuestos de la fórmula (I) anterior.

Procedimiento 1 Los compuestos de la fórmula (I) pueden obtenerse a partir del correspondiente derivado de 1-aminoisoquinolina (II): 15 mediante la reacción con cianamida (NH2CN) o un reactivo que actúa como un sintón "NCH+=NH", tal como derivados de carboxamidina, por ejemplo, 1 H- pirazol-1-carboxamidína (M. S. Bernatowicz, Y. Wu. G.R. Matsueda, J. Org. Chem., 1992, 57, 2497), el análogo 3,5-dimetilpirazol del mismo (M. A.

Brimble y col., J. Chem. Soc. Perkin. Trans. I (1990) 311 ), sales sencillas de O-alquiltiouronio o sales de S-alquilisotiouronio tales como O-metilisotiourea (F. El-Fehail y col., J. Med. Chem (1986), 29, 984), sulfato de S- metilisotíouronio (S. Botros y col., J. Med. Chem. (1986) 29, 874; P.S. Chauhan y col, Ind. J. Chem., 1993, 32B, 858) o bromuro de S-etilisotiouronio (M. L. Pedersen y col., J. Org. Chem. (1993) 58, 6966). Como alternativa, puede usarse ácido aminoiminometanosulfínico o aminoiminoetanosulfónico (A. E. Miller y col., Synthesis (1986) 777; K. Kim y col., Tet. Lett (1988) 29, 3183). Otros procedimientos para esta transformación son conocidos por los expertos en la técnica (véase, por ejemplo, "Comprehensíve Organic Functional Group Transformations", 1995, Pergamon Press, Vol 6 p. 639, T. L. Gilchríst (Ed.); Patai's "Chemistry of Functional Groups", Vol. 2. "The Chemistry of Amidínes and Imidates", 1991 , 488). Pueden prepararse aminoisoquinolinas (II) por procedimientos convencionales publicados (véase, por ejemplo, "The Chemistry of Heterocyclic Compounds" Vol. 38 Pt. 2 John Wiley & Sons, Ed. F. G. Kathawala, G. M. Coppolq, H. F. Schuster) incluyendo, por ejemplo, mediante la redisposición del correspondiente derivado de carboxi (redisposiciones de tipo Horffman, Curtius, Lossen, Schmidt) y la posterior desprotección. Como alternativa, pueden preparase aminoisoquínolinas (II) mediante el desplazamiento directo de un grupo saliente, tal como Cl, o Br, con un nucleófilo de nitrógeno tal como azida (seguido por reducción), o por amoniaco, o a través de catálisis con Pd con una amida protegida adecuada (tal como bencilamina), seguido por desprotección usando condiciones convencionales bien conocidas en la técnica. Las haloisoquinolinas se pueden adquirir en el mercado o como alternativa pueden preparase por diversos procedimientos, por ejemplo, los descritos en: Goldschmidt, Chem. Ber. (1985) 28, 1532; Brown y Plasz, J. Het. Chem (1971 ) 6, 303; patente de E.U.A. 3,930,837; Hall y Col., Can. J. Chem. (1966) 44, 2473; White, J. Org. Chem. (1967) 32, 2689; y Ban. Chem. Pharm. Bull. (1964) 12, 1296. Pueden prepararse 1 ,4-(dicloro- o dibromo) isoquinolinas por el procedimiento descrito por Robinson y Col., en J. Org. Chem. (1958) 23, 1071 , mediante la reacción del correspondiente compuesto de isocarbostirilo con PCI5 o PBr5.

Procedimiento 2 Los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse a partir del correspondiente derivado de amínoisoquinolina (II) como se ha definido anteriormente en el procedimiento I, mediante la reacción con un reactivo que actúa como un sintón (lll) de amidina (2+) protegida, 2+ PNH "NHP 1 (l l l) - ..-J^-J________*_-_---. .-. ~ . . .. ,, * . f IIÍÍt_^_lÍttrtlittfliliftÉ tal como un compuesto PNHC(=X)NHP?, PN=CXNHP? o PNHCX=NP1 ) donde X es un grupo saliente tal como Cl, Br, I, mesilato, tosilato, alquiloxí, etc., y donde P y Pi pueden ser iguales o diferentes y son grupos N-protectores tal como los que son bien conocidos en la técnica, tales como t-butoxicarbonilo, 5 benciloxicarbonílo, ariisulfonilo tal como toluenosulfonilo, nitro, etc. Los ejemplos de reactivos que actúan como sintones (lll) incluyen derivados de S-aquiltiouronio N,N'- protegidos tales como N,N'-bis (t- butoxicarbonil)-S-Me- isotiourea, N-N'-bis(benciloxicarbonil)-S-met¡lisot¡ourea o derivados de ácido sulfónico de éstos (J. Org. Chem. 1986, 51 , 1882) o derivados de S-alquiltíouronio tales como N,N'-bis(t-butoxicarbonil)-S-(2,4- dunitrobenceno) (S. G. Lammin, B.L. Pedgrift, A. J. Ratcliffe, Tet. Lett. 1996, 37, 6815) o análogos mono-protegidos tales como éster metílico del ácido [(4- metoxi-2,3,6-trimetilfenil)-sulfonil]carbamimidotio¡co o el correspondiente análogo de 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonilo (D.R. Kent, W. L. Cody, A.M. Dohertry, Tet. Lett., 1996, 37, 8711 ) o S-metíl-N-nitroisotiourea (L. Fushbein y col., J. Am. Chem. Soc. (1954) 76, 1877) o diversas tioureas sustituidas tales como N,N'-bis(t-butoxicarbonil)tiourea (C. Levallet, J. Lerpiniere, S. Y. Ko, Tet. 1997, 53, 5291 ) con o sin la presencia de un promotor tal como un reactivo de Mukaiyama (Yong, Y.F.; Kowalski, J. A; Lipton, M. A. J. Org. Chem., 1997, 62, 1540), o sales de cobre, mercurio o plata, particularmente con cloruro de mercurio (II). También pueden usarse O- alquilsoureas convenientemente N-protegidas tales como O-metil-N- nitroisourea (N. Heyboer y col., Rec. Chim. Trav. Pays-Bas (1962) 81 , 69). ^^^^^^^^^^^^^^^gjgl^^^^ggg^^^^^^^^^^^^ Como alternativa, pueden usarse otros agentes de guanilación conocidos por los expertos en la técnica, tales como I H-pirazol-HN.N'-bisít-butoxicarbonil)]- carboxamídina, el correspondiente derivado bis-Cbz (M. S. Bematowícz, Y. Wu, G. R. Matsueda, Tet. Lett. 1993, 34, 3389) o derivados monoBoc o mono- Cbz (B. Drake. Synthesís, 1994., 579, M. S. Bematowicz.. Tet. Lett. 1993, 34, 3389). Análogamente, pueden usarse el 3,5-dimetil-1-nitroguanilpirazol (T. Wakayima y col., Tet. Lett (1986) 29, 2143). La relación puede realizarse convenientemente usando un disolvente adecuado tal como diclorometano, N,N-dimetilformamida (DMF) o metanol. La reacción también se realiza convenientemente mediante la adición de cloruro de mercurio (II) a una mezcla de la aminoisoquinolina (II) y un derivado de tiourea del tipo (lll) en una mezcla adecuada de base/disolvente, tal como trietilamina/diclorometano.

(IV) 20 El producto de esta reacción es la isoquinolinílguanidina protegida (IV), en la que G1 es un radical de guanidina protegido N=C(NHP) (NHP-i) o un tautómero del mismo, donde P y Pi son grupos protectores de nitrógeno tales como t-butoxicarbonílo ("Boc"), bencilo, benciloxicarbonilo, etc., que pueden desprotegerse convenientemente para dar (I) o una sal del mismo. Por ejemplo, si el grupo protector P y/o Pi es t-butocarbonilo, 5 convenientemente la desprotección se realiza usando un ácido tal como el ácido trifluoroacético (TFA) o el ácido clorhídrico, en un disolvente adecuado tal como diclorometano, para dar la sal bistrifluoroacetato de (I). Si P y/o P-? es un grupo hidrogenolizable, tal como bencilocarbonilo, la desprotección se podría realizar por hidrogenolisis. 10 Otros regímenes de protección/desprotección ¡ncluyen: nitro (K. Suzuki y col., Chem. Pharm. Bull. (1985) 33, 1528, Nencioni y col., J. Med. Chem. (1991 ) 34, 3373, B.T. Golding y col, J.C.S. Chem. Comm. (1994) 2613; p-toluenosulfonilo (J. F. Callaghan y col. Tetrahedron (1993) 49 3479; mesitilsulfonilo (Shiori y col, Chem. Pharm. Bull. (1987) 35, 2698, ibid. (1987) 15 35, 2561 , ibid., (1989) 37, 3432, ibíd., (1987) 35, 3880, ibid., (1987) 35, 1076; 2-adamantoiloxícarbonilo (luchi y col. ibid., (1987) 35, 4307, y metilsulfoniletoxicarbonilo (Filippov y col., Syn. Lett. (1994) 922). Será evidente para los expertos en la técnica que pueden conseguirse otros regímenes de protección y posterior desprotección durante 20 la síntesis de un compuesto de la invención, mediante diversas técnicas convencionales distintas, por ejemplo, como se describe en "Protective Groups in Organic Synthesis" por T W Grenne y P G M Wuts, John Wiley y Sons Inc. (1991 ) y por P.J. Kocienski, en "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag (1994).

Procedimiento 3 Los compuestos de la fórmula (I) pueden obtenerse a partir de compuestos de fórmula (V) en la que Z es un grupo sobresaliente adecuado, tal como Cl, Br u OPh, mediante el desplazamiento del grupo saliente por la base libre de guanidina. Los compuestos de fórmula (V) están disponibles como se ha mencionado anteriormente en la sección sobre la preparación de compuestos de fórmula (II) en el procedimiento 1 , y por variaciones rutinarias de los mismos. La base libre de guanidina puede generase convenientemente ¡n situ a partir de una sal adecuada, tal como el clorhidrato, carbonato, nitrato o sulfato, como una base adecuada tal como hidruro sódico, hidruro potásico u otra base de metal alcalino, preferiblemente en un disolvente no prótico seco tal como tetrahidrofurano (THF), DMSO, N,N-dimetilformamida (DMF), etilenglicol dimetil éter (DME), N,N-dimetilacetamida (DMA), tolueno o mezclas M_ ^- »Jtt*A»_ a-__. - - y«___a_a__ ., . . É ,^_«_*_X_.... . ^y? .____»,. _«_...»>« de los mismos. Como alternativa, pueden generarse a partir de una sal adecuada usando un alcóxido en un disolvente alcohólico tal como t-butóxido potásico en t-butanol, o en un disolvente no prótico como se ha indicado anteriormente. La guanidina libre así formada puede combinarse con el derivado de 1 -isoquinolina (V) y la reacción para formar compuestos de fórmula (I) puede realizarse a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y 200°C, preferiblemente entre aproximadamente 50°C y 150°C, preferiblemente durante un período comprendido entre 4 horas y 6 días. Será evidente para los expertos en la técnica que puede ser necesario que algunas de las funcionalidades en los grupos R3, R2 y/o X1 estén protegidas y se liberen después de la guanilacíón, o se añadan o generen después de haber añadido el radical guanidina al substrato. Por ejemplo, podría llevarse un grupo ácido a través de la etapa de guanilación mientras que se protege como un éster y posteriormente se hidroliza. La hidrólisis catalizada por bases de un éster etílico y la hidrólisis catalizada por ácidos de un éster t-butílico son dos ejemplos adecuados de esto. En otro ejemplo, un alcohol puede protegerse con grupos bien documentados en la bibliografía, tales como 2-tetrahidropiranil éter (2-THP), y posteriormente retirarse mediante un tratamiento con ácido. En la invención también se incluye la adición de una nueva funcionalidad después de haber instalado el radical guanidina. Por ejemplo, la alquilación del sulfonamido NH (es decir, "X-NR2") es S02NH) con un haluro de alquilo puede realizarse en presencia de una base tal como carbonato potásico y, opcionalmente, en presencia de un promotor tal como Kl. En otro ejemplo, un grupo ácido puede convertirse en una amida a través de una serie de condiciones de acoplamiento conocidas por los expertos en la técnica o, 5 convenientemente, a través del cloruro de ácido mientras que está en presencia de la guanidina libre o protegida. Como alternativa, un grupo éster puede hacerse reaccionar directamente con una amina para generar una amida; si esto ocurre en un proceso intramolecular, puede formarse una lactama. Usando una metodología similar, pueden prepararse esteres y lactonas. En esta etapa podría estar presente otra funcionalidad en una forma protegida y posteriormente revelarse tal como un grupo amino que podría protegerse por grupos bien documentados en la bibliografía, por ejemplo, un grupo Boc, y posteriormente retirarse bajo condiciones convencionales, tales como tratamiento con una base fuerte tal como HCl o TFA.

Procedimiento 4 Los compuestos de la invención en los que uno o más sustituyentes es o contiene un grupo de ácido carboxílico o un grupo carbamoílo, pueden obtenerse a partir del correspondiente compuesto en el que el correspondiente sustituyente es un nitrilo mediante la hidrólisis completa o parcial. Los compuestos de la invención en los que uno o más sustituyentes es o contiene un grupo de ácido carboxílico pueden obtenerse a partir del correspondiente compuesto en el que el correspondiente sustituyente es un radical carbamoílo, mediante hidrólisis. La hidrólisis puede realizarse por procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, los mencionados en "Advanced Organic Chemistry" por J. March, 3a edición (Wiley-lnterscience) capítulo 6-5, y referencias de este documento. Convenientemente, la hidrólisis se realiza usando un ácido clorhídrico concentrado, a temperaturas elevadas, y el producto forma la sal clorhidrato. 10 Procedimiento 5 Cuando se desea o es necesario, el compuesto de fórmula (I) se convierte en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) puede 15 prepararse convenientemente mezclando entre sí soluciones de un compuesto de fórmula (I) y el ácido o base deseado, según sea apropiado. La sal puede precipitarse de la solución y recogerse por filtración, o puede recogerse por otros medios tales como por evaporación del disolvente.

Otros procedimientos Los compuestos de la fórmula (I) en la que uno o más sustituyentes es o contiene Cl o Br pueden desalogenarse para dar los correspondientes compuestos hidruro de fórmula (I) mediante hidrogenolisis, convencionalmente usando un catalizador de paladio sobre carbón, en un disolvente adecuado tal como etanol, a aproximadamente 20°C y a una presión elevada. Los compuestos de fórmula (I) en la que uno o más sustituyentes 5 es o contiene un grupo carboxi, pueden prepararse a partir de un compuesto con un grupo hidrolizable para dar un radical carboxi, por ejemplo, un correspondiente nitrilo o éster, mediante hidrólisis, por ejemplo, mediante hidrólisis acida con, por ejemplo, HCl acuoso concentrado a reflujo. En la técnica se dispone de otros procedimientos de hidrólisis. 10 Los compuestos de fórmula (I) en la que uno o más sustituyentes es o contiene un radical amida, pueden fabricarse mediante reacción de un compuesto carboxí correspondiente opcionalmente protegido, mediante acoplamiento directo con la amina de elección, o mediante la formación inicial del correspondiente cloruro de ácido o anhídrido mixto y la posterior reacción con la amina, seguido por la desprotección, si es apropiado. Tales transformaciones son bien conocidas en la técnica. Ciertos de los compuestos de fórmula (I) que tienen un grupo electrófilo unido a un anillo aromático pueden obtenerse mediante la reacción del correspondiente compuesto de hidruro con un reactivo electrófilo. Por ejemplo, la sulfonilación del anillo aromático usando procedimientos y reactivos convencionales, tales como ácido sulfúrico fumante, da un ácido sulfónico correspondiente. Este después puede convertirse opcionalmente en la correspondiente sulfonamida por procedimientos conocidos en la técnica, por ejemplo, convirtiéndolo primero en el cloruro de ácido, seguido por la reacción con una amina. Ciertos de los compuestos de la invención pueden obtenerse mediante técnicas de acoplamiento cruzado tales como mediante la reacción de un compuesto que contiene un sustituyente de bromo unido, por ejemplo, a un anillo aromático, con, por ejemplo, un derivado de ácido borónico, una olefina o un derivado de estaño por procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, por los procedimientos descritos en ciertas de las preparaciones mostradas más adelante. Ciertos compuestos de la invención que tienen un sustituyente electrófilo pueden obtenerse mediante intercambio de halógeno/metal seguido por la reacción con un reactivo electrófilo. Por ejemplo, un sustituyente bromo puede reaccionar con un reactivo de litiacíón tal como n-butil-litio y posteriormente como un reactivo electrófilo tal como C02, un aldehido o una cetona, para dar respectivamente un ácido o un alcohol. Los compuestos de la invención se pueden adquirir por los procedimientos descritos en este documento en los procedimientos o ejemplos, o por una adaptación adecuada de los mismos usando procedimientos conocidos en la técnica. Debe entenderse que los procedimientos sintéticos de transformación mencionados aquí pueden realizarse en diversas secuencias diferentes para que puedan formarse eficazmente los compuestos deseados. El químico especialista aplicará su criterio y experiencia en cuanto a la secuencia más eficaz de reacciones para la síntesis de un compuesto deseado dado. Será evidente para los expertos en la técnica que puede ser necesario proteger y desproteger grupos funcionales sensibles durante la 5 síntesis de un compuesto de la invención. Esto puede conseguirse por técnicas convencionales, por ejemplo, como se describe en "Protective Groups in Organic Synthesis" por T W Greene y P G M Wuts, John Wiley y Sons ínc. (1991 ) y por P. J. Kocienski en "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag (1994). 10 Durante algunas de las reacciones descritas aquí, es posible que cualquier estereocentro presente pueda, bajo ciertas condiciones, racemizarse, por ejemplo, si se usa una base en una reacción con un substrato que tiene un centro óptico que comprende un grupo sensible a bases. Esto es posible, por ejemplo, durante una etapa de guanilacíón. Sería 15 posible evitar los problemas potenciales tales como éste mediante la elección de la secuencia de reacciones, las condiciones, los reactivos, regímenes de proteccíón/desprotección, etc. como es conocido en la técnica. Los compuestos y sales de la invención pueden separarse y purificarse por procedimientos convencionales. 20 La separación de diastereómeros puede realizarse por técnicas convencionales, por ejemplo, mediante cristalización fraccionada, cromatografía o H.P.L.C. de una mezcla estereoisomérica de un compuesto de fórmula (I) o una sal o un derivado adecuado del mismo. También puede -J ___._* _..-«_«_---*_ .^¿^.^fe.,..,..^^ xiliiÉAr •¿»^^^fe^^^*^^.^^-^. . *. ..******* -*,. * prepararse un enantíómero individual de un compuesto de fórmula (I) a partir de un intermedio correspondiente ópticamente puro, mediante resolución tal como mediante H.P.L.C. del correspondiente racemato usando un soporte quiral adecuado o mediante cristalización fraccionada de las sales diastereoméricas formadas por la reacción del correspondiente racemato con un ácido o base ópticamente activado adecuado. Para uso humano, los compuestos de fórmula (I) o sus sales pueden administrase solos, pero generalmente se administrarán en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable seleccionado con respecto a la vía de administración deseada y la práctica farmacéutica convencional. Por ejemplo, pueden administrarse por vía oral, incluyendo la vía sublingual, en forma de comprimidos que contienen excipientes tales como almidón o lactosa, en cápsulas u óvulos, bien solos o en mezcla con excipientes, o en forma de elixires, soluciones o suspensiones que contienen agentes aromatizantes o colorantes. Pueden inyectarse por vía parenteral, por ejemplo, intravenosa, intramuscular o subcutánea. Para la administración parenteral, se usan de la mejor manera en forma de una solución o suspensión acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo, suficiente sal o glucosa como para hacer la solución isotónica con la sangre. Pueden administrarse por vía tópica, en forma de cremas estériles, geles suspensiones, lociones, pomadas, polvos finos, pulverizaciones, vendas con fármaco incorporado o mediante un parche cutáneo. Por ejemplo, pueden incorporarse en una crema que consta de una emulsión acuosa o aceitosa de ^^^^^^^^¿¡^^^^^^^^^^^^^^^¡^¡^11^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ polietilenglicoles o parafina líquida, o pueden incorporarse en una pomada que consta de una base de parafina blanda blanca, como un hidrogel con celulosa, derivados de poliacrilato u otros modificadores de la viscosidad, o en forma de un polvo seco, pulverizador líquido o aerosol con butano/propano, HFA o CFC como propelentes, o en forma de una venda con fármaco incorporado como una venda de tul, vendas de gasa impregnadas con parafina blanda blanca o con polietilenglicoles, o vendas con hidrogel, hidrocoloide, alginato o películas. El compuesto o sal también puede administrarse por vía ¡ntraocular como una gota ocular con tampones apropiados, modificadores de la viscosidad (por ejemplo, derivados de celulosa), conservantes (por ejemplo, cloruro de benzalconio (BZK)) y agentes para ajustar la tonicidad (por ejemplo, cloruro sódico). Todas tales formulaciones también pueden contener estabilizantes y conservantes apropiados. Para la administración oral o parenteral a los pacientes humanos, el nivel de dosificación diario de los compuestos de fórmula (I) o sus sales será de 0.001 a 20, preferiblemente de 0.01 a 20, más preferiblemente de 0.1 a 10 y aún más preferiblemente de 0.5 a 5 mg/ kg (en una sola dosis o en dosis divididas). Así pues, los comprimidos o las cápsulas de los compuestos contendrán de 0.1 a 500, preferiblemente de 50 a 200 mg de compuesto activo para la administración individual o de dos o más dosis de una vez, según sea apropiado.

En cualquier caso, el médico determinará la dosis real que será la más adecuada para un paciente individual y ésta variará con la edad, el peso y la respuesta del paciente particular. Las dosis anteriores son ejemplares del caso medio; por supuesto puede haber casos individuales en los que se requieran dosis mayores o menos y tales casos están dentro del alcance de esta invención. Se apreciará que la referencia al tratamiento incluye la profilaxis así como el alivio de los síntomas establecidos de la afección a tratar.

Procedimientos de ensayo Se ensayaron los compuestos con respecto a su capacidad de inhibir la uroquinasa humana, el tPA humano y la plasmina humana, usando sustancialmente los mismos procedimientos descritos por Yang, y col., J. Med. Chem., (1990) 33, 2961. El ensayo de uroquinasa se realizó usando S-2444 (Quadratech 820357) como substrato y la uroquinasa usada fue Uroquinasa Humana HMWT (Calbiochem 672081). El ensayo de tPA se realizó usando un substrato de tPa S-2288 (Quadratech 820832), Quadratech 321116 como estimulador de tPA y el tPa usado fue tPA Humano (Quadratech 881157). El ensayo de plasmina se realizó usando plasmina humana (Quadratech 810665) que actuaba sobre Chromozym-PL (Boehringer 378461 ) como substrato. _^^_.^_.!_«__^__a_.... , ^, ..~,m . . tfmrf?- * i jgiifliÉBifíiwr"- -*-• - - ----- •- - - • -**- Los compuestos de los ejemplos 32(b), 34(b), 36(b), 37(b), 38, 39 (a y b), 41 (b), 43(b), 44(b), 71 , 75, 76, 78, 79, 84(b), y 87 (b y c) tenían valores de K, de 20 nM o menores frente a la uroquinasa. La invención se ilustra mediante los siguientes ejemplos. 5 SECCIÓN EXPERIMETAL DETALLES GENERALES Los puntos de fusión (p.f) se determinaron usando un aparato de punto de fusión de Gallenkamp o Electrothermal y están sin corregir. Los datos de resonancia magnética nuclear de protón (1H RMN) se obtuvieron usando un Varian Unity 300 o una Varian Inova 400. Los datos del espectro de masa de baja resolución (LRMS) se registraron en un Fisons Instruments Trio 1000 (Termonebulización) o un Finnigan Mat. TSQ 7000 (APCI). Los análisis de combustión elemental (Anal.) se determinaron mediante Exeter Analytical UK. Ltd. La cromatografía en columna se realizó usando gel de sílice Merck (0.040-0.063 mm). La cromatografía en columna de fase inversa se realizó usando un gel Mitsubishi MCI (CHP 20P). Se usaron las siguientes abreviaturas: solución de amoniaco cal. sp. 0.880 (NH3 0.880); azodicarboxilato de dietilo (DEAD); 1 ,2- dimetoxietano(DME); ?/,?/-dimetilacetamida (DMA); ?/,?/-dimetilformamida (DMF); dimetílsulfóxido (DMSO); tetrahidrofurano (THF), ácido trifluoroacético (TFA); tolueno (PhMe); metanol (MeOH); acetato de etilo (EtOAc)o propanol (PrOH). Se usan otras abreviaturas de acuerdo con la práctica química convencional. Se ha asignado algunas de las nomenclaturas usando el software IUPAC NamePro de Advanced Chemical Development Inc. Se advirtió que después de llevar a cabo algunas preparaciones que implicaban la guanilación de intermedios que contenían un centro cuaternario adyacente a un grupo sensible a bases, por ejemplo, un éster, se había producido alguna racemización, de forma que en tales casos puede haberse producido una mezcla de enantiómeros.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 (a) 2-(f(4-Cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolin¡l)sulfonillamino)benzoato de tere-butilo (b) Clorhidrato del ácido 2-(f(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinoliniDsulfonillaminojbenzoico Se añadió clorhidrato de guanidina (66 mg, 0.63 mmoles) en una porción a una suspensión de NaH (18 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.6 mmoles) en DMSO (3.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió 2-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}benzoato de tere-butilo (1110 mg, 0.24 mmoles) y la mezcla se calentó a 100°C durante 24 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (x 3) y la fase orgánica reunida después se lavó con salmuera y se evaporó al vacío. El residuo se purificó pero cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH.NH3 0.880 (97:3:0.3 a 95:5:0.5) como eluyente para dar una resina amarilla (36 mg). Esta resina se suspendió en agua y se extrajo con éter (x 3). La fase orgánica reunida se lavó con salmuera y se evaporó al vacío para dar 2-{[(4- cloro-1-guanidino-7-isoquinolín¡l)sulfonil]am¡no}benzoato de terc-butilo (30 mg, 0.063 mmoles) en forma de un sólido pardo.

TLC Rf 0.60 (CH2CI2-MeOH-NH3 0.880, 90:10:1 ). 1H (CD3OD, 400 MHz) 61.4 (9H, s), 7.1 (1 H, dd), 7.5 (1 H, dd), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, d), 7.9 (1 H, d), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 475 (MH+). La columna de gel de sílice después se eluyó con MeOH y los lavados reunidos se concentraron al vacío para dar un sólido blanquecino. Este se disolvió en una solución de EtOH saturada con gas HCl y la mezcla se agitó a temperatura ambiente. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo después se disolvió en EtOAc-MeOH, se filtró y se evaporó de nuevo al vacío. El sólido se trituró con agua y después se secó para dar el clorhidrato del ácido 2-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]am¡no}benzoico (11.8 mg, 0.02 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. pf >280°C (desc.) 1H (CD3OD, 400 MHz) d 7.0 (1 H, dd), 7.3 (1 H, dd), 7.65 (1 H, d), 7.8 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.3 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 420, 422 (M+), 421 (MH+). Análisis encontrado: C, 43.58; H, 3.37; N, 14.65. Calculado para C17H14CIN504S-1 , 0HCI-0,7H2O: C, 43.54; H, 3.53; N, 14.94.

EJEMPLO 2 ͧL 3-{f(4-Cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolíniDsulfoninaminoIbenzoato de tere-butilo (b) Trifluoroacetato del ácido 3-{.(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinoliniDsulfonipaminoIbenzoico Se añadió en una porción clorhidrato de guanídina (140 mg, 1.47 mmoles) a una suspensión de NaH (44 mg, dispersión al 80% en peso de aceite mineral, 1.47 mmoles) en DMSO (4.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de 3-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]amino}benzoato de terc-butilo (280 mg, 0.59 mmoles) en DMSO (2.0 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 18 h. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml), se extrajo con EtOAc (x 3) y la fase orgánica reunida después se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3 a 95:5:0.5) como eluyente para dar 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- tif_JI_i^i_____krftoi_*___fc-as^ - - k£ i^ . aeé- rttÉ e -^ isoquínolinil)sulfonil]am¡no}benzoato de tere-butilo (64 mg, 0.13 mmoles) en forma de un sólido castaño. pf >142°C (desc). 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 7.25-7.35 (2H, m), 7.65-7.7 (2H, m), 7.95 (1H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 475 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.07; H, 4.55; N, 13.94. Calculado para C21H22CIN5O4S-0, 0.23CH2CI2: C, 51.46; H, 4.57; N, 14.13. Se disolvió 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}benzoato de tere-butilo (30 mg, 0.063 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se trituró con Et20 y después se hizo azeotrópico conCH2CI2 para dar trifluoroacetato del ácido 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}benzoico (29 mg, 0.055 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. pf >180°C (desc.) 1H (CD3OD, 400 MHz) d 7.2-7.35 (2H, m), 7.55 (1 H, d), 7.65 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm. LRMS 419, 421 (MH+). Análisis encontrado: C, 42.51 ; H, 3.07; N, 13.19. - ,. -. - - .__.-_—_ -- ^ .._ -^. -. -___________,-___( Calculado para d7H?4CIN5O S-1.0CF3CO2H: C, 42.75; H, 2.83; N, 13.12.

EJEMPLO 3 (a) 3-(f(4-Cloro-1-quanidino-7-¡soquinolinil)sulfoninamino)-4- metoxibenzoato de metilo (b) Clorhidrato del ácido 3-([(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinolini0sulfon¡pamino)-4-metoxibenzoico Se añadió clorhidrato de guanídina (179.8 mg, 1.88 mmoles) en una porción a una suspensión de NaH (54.9 mg, dispersión al 80% en peso de aceite mineral, 1.83 mmoles) en DMSO (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 20 minutos. Se añadió 3-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]am¡no}-4-metoxibenzoato de metilo (238.6 mg, 0.541 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 24 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3 a 90:10:1 ) como eluyente para dar 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]amino}-4- metoxibenzoato de metilo (203.2 mg, 0.43 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. pf 134-137°C (desc.) 1H (DMSO- e, 300 MHz) d 3.45 (3H, s), 3.8 (3H, s), 6.95 (1 H, d), 7.05-7.4 (4H, s a), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, s), 8.0 (2H, s) 8.1 (1 H, s), 9.05 (1 H, s) 9.9 (1 H, s a) ppm. LRMS 464, 466 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.37; H, 3.81 ; N, 14.74. Calculado para C19H18CIN5?5S-0.15CH2CI2: C, 48.26; H, 3.87; N, 14.69. Se añadió lentamente una solución acuosa de NaOH (0.7 ml, 1.0 M, 0.7 mmoles) a una solución agitada de 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}-4-metoxibenzoato de metilo (52.2 mg, 0.113 mmoles) en dioxano (2.5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas y después a 70°C durante 3 h. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente, se añadió HCl diluido (2 ml, 2 N), los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se secó por azeotropizacíón con /-PrOH (x 3). El sólido se extrajo con /-PrOH caliente (x 4), los extractos orgánicos reunidos se filtraron y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se trituró con Et20 para dar el clorhidrato del ácido 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfon¡l]am¡no}-4-metoxibenzo¡co (29 mg, 0.055 mmoles) en forma de un sólido. pf 258°C (desc.) 1H (DMSO- e, 300 MHz) d 3.45 (3H, s), 6.95 (1 H, d), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, s), 8.3-8.7 (4H, s a), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s) 8.9 (1 H, s), 10.05 (1 H, s a), 10.9 (1 H, s a), 12.75 (1 H, s a) ppm. LRMS 450 (MH+). Análisis encontrado: C, 44.50; H, 4.60; N, 12.17. Calculado para C?8H16CIN5S-1.0HCI-1 ,0(CH3)2CHOH-1.0H2?: C, 44.69; H, 4.82; N, 12.41.

EJEMPLO 4 (a) Clorhidrato del éster .-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolíniDsulfonilIqlicína (b) Trifluoroacetato de /V-[(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinoliniDsulfonilIqlicina Se añadió NaH (29 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.97 mmoles) en una porción a una solución agitada de clorhidrato de guanídina (146 mg, 1.52 mmoles) en DMSO (2.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió f-butílico ?/-[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolinil)sulfonil]glicina (150 mg, 0.38 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 9 horas. La mezcla enfriada se diluyó con agua (30 ml), se extrajo con EtOAc (4 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) para dar un precipitado pegajoso. El Et20 se decantó y el residuo se trituró con EtOAc para dar un sólido blanco. La filtración con lavados de EtOAc y Et20 dio clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 10 isoquinolinil)sulfonil]glicina (68 mg, 0.14 mmoles). pf 172-175°C 1H (DMSO-cfe, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 3.75 (2H, s), 8.3 (1 H, d), 8.35-8.4 (2H, m), 8.5 (1 H, s), 8.5-8.9 (4H, a), 9.1 (1 H, s) 11.3 (1 H, s a) ppm. LRMS 414, 416 (MH+). 15 Análisis encontrado: C, 42.45; H, 4.92; N, 14.76. Calculado para C16H20CIN5O4S-I .OHCI-O.331-.2O 0.2EtOAc: C, 42.58; H, 4.95; N, 14.78. Se disolvió clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfon¡l]glicina (50 mg, 0.11 mmoles) en CF3CO2H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se trituró con Et20 y EtOAc para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1- ____fc_A__*__ , ¿«t ¿_a. ^_^»a______g__fe^<^__¡*. .. -._»__«_____-____»__,-«__.__ __~- . .... guanidino-7-isoquinol¡n¡l)sulfoníl]glicina (36 mg, 0.073 mmoles) en forma de un polvo blanco. 1H (CF3C02D, 400 MHz) d 4.1 (2H, s), 8.25 (1 H, d), 8.3 (1 H, s), 8.55 (1 H, d), 9.0 (1 H, s) ppm. LRMS 358 (MH+), 715 (M2H+) Análisis encontrado: C, 36.25; H, 2.86; N, 14.28. Calculado para d2H12CIN5O4S-1.0CF3CO2H 0.2EtOAc: C, 36.32; H, 3.01 ; N, 14.31.

EJEMPLO 5 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soqu?nolinil)sulfon¡p-;g-alan¡na £b) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7- isoquinoliniDsulfonirhff-alanina ___Í__________l - ~^-~ ****~ —-* . .^ - ?bá^M?M?******^ Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (140 mg, 1.46 mmoles) en una suspensión agitada de NaH (36 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.17 mmoles) en DME (8.0 ml) y la mezcla se calentó a 30°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico A/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]-/?-alanina (150 mg, 0.37 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 18 horas. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2- MeOH-NH3 0.880 (97:3:03 a 95:5:0.5) como eluyente para dar éster f-butílico de /V-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soqu¡nolinil)sulfonil]-9-alan¡na (75 mg, 0.175 mmoles) en forma de una espuma amarilla. pf >180°C (desc.) 1H (DMSO-cfe, 300 MHz) d 1.35 (9H, s), 2.3 (2H, t), 2.9 (2H, dt), 7.1-7.4 (4H, a), 7.8 (1 H, t a), 8.05 (2H, s), 8.1 (1 H, s) 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 428 (MH+). Análisis encontrado: C, 47.32; H, 5.24; N, 16.02. Calculado para C17H22CIN5O4S-0.2H2O: C, 47.32; H, 5.23; N, 16.23. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-/?-alanina (30 mg, 0.07 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se evaporó al vacío, se hizo azeotrópica con PhMe, MeOH y después con CH2CI2, para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolínil)sulfon¡l]-ß-alanina (32 mg, 0.066 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf > 200°C (desc.) 1H (DMSO-d6 + D20, 400 MHz) d 2.35 (2H, t), 3.0 (2H, t), 8.2 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 372 (MH+) Análisis encontrado: C, 37.38; H, 3.11 ; N, 14.52. Calculado para C13H14CIN5O4S-1.0CF3CO2H: C, 37.08; H, 3.11 ; N, 14.42.

EJEMPLO 6 (a) Ester f-butílico de ?/-[.4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonin- V-metilqlicina (b) Bis.trifluoroacetato) de ?/-í(4-cloro-1-quanidino-7- isoqu¡nol¡nil)sulfonil]-?/-met¡lql¡cina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (286 mg, 2.99 mmoles) en una suspensión agitada de NaH (77.5 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 2.58 mmoles) en DME (2.0 ml) y la mezcla se calentó a 50°C bajo N2 durante 20 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílico 5 de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-metilglicina (393 mg, 0.97 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 2 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3) como eluyente para dar éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 10 isoquinolinil)sulfonil]-?/-met¡lglicina (260 mg, 0.607 mmoles) en forma de una espuma blanquecina. pf 84°C 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 2.85 (3H, s), 3.95 (2H, s), 7.0-7.5 (4H, a), 8.0 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s) 9.05 (1 H, s) ppm. 15 LRMS 427 (MH+), 855 (M2H+). Análisis calculado: C, 47.92; H, 5.38; N, 15.07. Calculado para C17H22CIN504S: C, 47.72; H, 5.18; N, 16.37. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-metilglicina (255 mg, 5.96 mmoles) en CF3C02H (4.0 ml) y CH2CI2 (2.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío para dar bis(trifluoroacetato) de /V-[(4-cloro-1-guanidino-7- ^^^^^^^^^^jg^^^^^^^«g^_^^__^^^^^^^ isoquinolinil)sulfonil]-?/-metilglicína (349 mg, 0.56 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 240-242°C (desc.) 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 2.9 (3H, s), 4.05 (2H, s), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.4-8.7 (4H, a), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 372, 374 (MH+), 744 (M2H+) Análisis encontrado: C, 36.26; H, 3.10; N, 11.04. Calculado para C13H14CIN5O4S-0.2CF3CO2H-0.3PhMe: C, 36.56; H, 2.96; N, 11.16. 10 EJEMPLO 7 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinolin¡l)sulfonin-?/-fenilqlicina 15 (b) Trifluoroacetato de ?/-r(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soqu¡nolinil)sulfonill-?/-fenilqlicina Se añadió NaH (32 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.07 mmoles) en una porción a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (164 mg, 1.71 mmoles) en DME (5.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolin¡l)sulfonil]-?/-fenilglicina (200 mg, 0.43 mmoles) y la mezcla se calentó a 95°C durante 6 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3 a 95:5:0.5) como eluyente para dar éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-fenilglicina (28 mg, 0.057 mmoles) en forma de una resina amarilla. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 4.45 (2H, s),7.2-7.3 (2H, m), 7.2-7.4 (4H, a), 7.3-7.4 (3H, m), 7.9 (1 H, d), 8.0 (1 H, d) 8.1 (1 H, s), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 490, 498 (MH+), 981 (M2H+). Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-fenilgl¡c¡na (25 mg, 0.05 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró al vacío, se hizo azeotrópica con PhMe y el residuo se trituró con Et20 para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-fenilglic¡na (13 mg, 0.23 mmoles) en forma de un polvo amarillo pálido. pf 218-223°C. ^*«*fc¿»^-^. - - -. — iiÉ_p >áilte^^ -- — » ^^A__^_ 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 4.5 (2H, s), 7.1-7.2 (2H, d), 7.25-7.4 (3H, m), 7.8-8.4 (4H, a), 8.0 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 434, 436 (MH+), 744 (M2H+). Análisis encontrado: C, 42.55; H, 3.39; N, 11.90. Calculado para Ci8H16CIN5O4S-1.0CF3CO2H-H2OO.2Et2O: C, 42.74; H, 3.52; N, 12.22.

EJEMPLO 8 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡p-?/-(c¡clopentilmet¡l)qlicina i ?/-[(4-cloro-1-quanid¡no-7-isoquinolinil)sulfonil1-?/- (ciclopentilmetil)glicina 15 Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (96 mg, 1.0 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (19 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.63 mmoles) en DME (5.0 ml) y la mezcla se calentó a É»^^^^,.^^^......^,^^,^,,^^,. ? . . „ A^-?^.:..** niffl - ' ir ?_____F-_ - J tí TiiTÜrtü- «... .... . -.>__. . — .... Afe 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]-?/-(c¡clopentilmetil)glicina (120 mg, 0.25 mmoles) en DME (5.0 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 3 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml), se lavó con NH4CI acuoso (150 ml), se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 40:60) como eluyente para dar éster f-butílico de N-[(4-cloro-1-guan¡dino-7-¡soqu¡nolinil)sulfonil]-?/-(ciclopent¡lmet¡l)glic¡na (60 mg, 0.12 mmoles). 1H (CDCI3. 400 MHz) d 1.1-1.25 (2H, m), 1.35 (9H, s), 1.45-1.7 (4H, m), 1.7-1.8 (2H, m), 2.1 (1 H, m), 3.25 (2H, d), 4.0 (2H, s), 8.05 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 496 (MH+) Análisis encontrado: C, 52.99; H, 6.07; N, 13.82. Calculado para C22H30CIN5O4S: C, 53.38; H, 5.90; N, 14.15. Se añadió una solución de HCl (2 ml, 2 M, 4 mmoles) a una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(ciclopentilmetil)glic¡na (50 mg, 0.10 mmoles) en dioxano (4.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C durante 24 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, y el residuo se trituró con diclorometano para dar clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1 -guan¡dino-7-isoquinol¡n¡l)sulfonil]-/V-(ciclopentilmetil)glicina (40 mg, 0.080 mmoles) en forma de un sólido blanco, pf 139-142°C 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.2-1.3 (2H, m), 1.5-1.7 (4H, m), 1.7-1.8 (2H, m), 2.2 (1 H, m), 3.65 (2H, d), 4.2 (2H, s), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 440 (MH+) Análisis encontrado: C, 43.48; H, 5.32; N, 12.91. Calculado para C18H22CIN5O4S-1.0HCh1.0H2OO.05CH2CI2-0.05 dioxano: C, 43.17: H, 5.11 ; N, 13.92.

EJEMPLO 9 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quan¡dino-7- isoquinolinil)sulfonil1-/V-(ciclohexilmetipql¡c¡na (b) Clorhidrato de ?/-r(4-cloro-1-quanid¡no-7-¡soquinolinil)sulfonil1- ?/-(ciclohexilmetil)qlicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (125 mg, 1.31 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (25 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.82 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-(ciclohexilmetil)glicina (160 mg, 0.33 mmoles) y la mezcla se calentó a 80-90°C durante 2.5 horas. Los disolventes se 5 evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml) y se lavó con NH4CI acuoso (150 ml), se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano- EtOAc (100:0 a 40:60) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4- cloro-1 -guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-/V-(ciclohexilmetil)gl¡cina (65 mg, 10 0.127 mmoles) en forma de una espuma blanquecina. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 0.8-0.95 (2H, m), 1.1-1.25 (3H, m), 1.3 (9H, s), 1.6-1.8 (6H, m), 3.1 (2H, d), 4.0 (2H, s), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 510 (MH+) 15 Análisis calculado: C, 54.21 ; H, 6.46; N, 13.46. Calculado para C22H32CIN504S: C, 54.16; H, 6.32; N, 13.73. Se añadió una solución de HCl (2 ml, 2 M, 4 mmoles) a una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidíno-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]- ?/-(ciclohexilmetil)gl¡cina (53 mg, 0.10 mmoles) en dioxano (4.0 ml). La mezcla 20 se agitó a 23°C durante 18 horas y después se calentó a 50-60°C durante 16 horas. Tras la refrigeración, salió un precipitado blanco de la solución. El sólido se recogió por filtración, se trituró con EtOAc y después se secó al vacío para dar el clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]- ?/-(cíclohexilmetíl)gl¡c¡na (26 mg, 0.057 mmoles). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 0.8-1.0 (2H, m), 1.1-1.3 (3H, m), 1.55-1.8 (6H, m), 3.2 (2H, d), 4.15 (2H, s), 8.3 (1 H, d), 8.45 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 454, 456 (MH+) Análisis encontrado: C, 44.70; H, 5.15; N, 13.56. Calculado para C23H32CIN504S HCl H20: C, 44.89; H, 5.36; N, 13.77.

EJEMPLO 10 (a) Ester f-butílico de ?/-,(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soqu¡noliniOsulfonil]-?/-benc¡lglicína £b) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolin¡Dsulfonil]-?/-bencilqlic¡na Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (180 mg, 1.88 mmoles) a una suspensión de NaH (45 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.5 mmoles) en DME (11 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- 5 isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-bencilgl¡c¡na (225 mg, 0.467 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 18 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (x 3) y la fase orgánica reunida después se lavó con agua, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 10 0.880 (97:3:0.3) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanid¡no-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]-/V-benc¡lgl¡c¡na (172 mg, 0.34 mmoles) en forma de una espuma amarilla. pf > 150°C (desc.) 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 1.2 (9H, s), 3.8 (2H, s), 4.45 (2H, s), 15 7.1-7.4 (4H, a), 7.2-7.35 (5H, m), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.1 (s, 1 H), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 504, 506 (MH+) Análisis calculado: C, 55.19; H, 5.55; N, 13.23. Calculado para C23H26CIN504S .1 C6H14: C, 55.30; H, 5.39; N, 20 13.66. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-bencilglicina (50 mg, 0.10 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se ^^&y^j ^^¿, ,^.. .^3X ._.. iái¿?¿m *^? í*í.? ^K ?*Éi*ÍÍ* diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se hizo azeotrópico con PhMe y después con CH2CI2 para dar el trifluoroacetato de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-bencilglic¡na (52 mg, 0.10 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 274°C (desc.) 1H (DMS-de, 400 MHz) d 3.95 (2H, d), 4.5 (2H, s) 7.2-7.35 (5H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.4-8.6 (4H, a), 8.45 (1 H, s), 8.9 (1 H, s), 10.6 (1 H, a), 12.7 (1 H, a) ppm. LRMS 448, 450 (MH+), 497 (M2H+). Análisis encontrado: C, 43.96; H, 3.39; N, 11.87. Calculado para C?9H18CIN5O4S-1.0CF3CO2H-0.5H2O: C, 44.18; H, 3.53; N, 12.27. ÉÉ$ ^ ?^&ß ^¡^^m »¿a_fa_li EJEMPLO 11 íü Ester f-butílico de ?/-r(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinoliníl,sulfonil]-/V-(2-metilbencil)glicina Í_LL Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7- isoquinolinil)sulfonil1-?/-(2-metilbencipqlicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanídina (120 mg, 1.26 mmoles) a una suspensión de NaH (32 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.06 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]- V-(2-metilbencil)glicína (200 mg, 0.405 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 2 horas. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. 20 El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-CH2CI2 (50:50), después CH2CI2 y finalmente CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente para dar éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]-?/-(2-metilbencil)glicina (94 mg, 0.18 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. pf > 110°C (desc.) 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.25 (9H, s), 2.3 (3H, s), 3.8 (2H, s), 4.6 5 (2H, s), 7.1-7.2 (4H, m), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (s, 1 H), 9.3 (1 H, s) ppm. LRMS 518, 520 (MH+). Análisis encontrado: C, 56.21 ; H, 5.83; N, 12.57. Calculado para C24H28CIN5O4S-0.3H2O-0.25C6H14: C, 56.20; H, 5.94; N, 12.85. 10 Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-(2-metilbencil) glicina (30 mg, 0.058 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 Aora. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se hizo azeotrópico con PhMe y después con Et02 para dar 15 trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(2- metilbencil) glicina (29 mg, 0.05 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. pf >150°C (desc.) 1H (CD3OD, 400 MHz) d 2.3 (3H, s), 3.95 (2H, s), 4.7 (2H, s), 7.05-7.2 (4H, m), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. 20 LRMS 462, 464 (MH+) Análisis encontrado: C, 45.51 ; H, 3.95; N, 11.36. Calculado para C20H20CIN5O4S 1.0CF3CO2H 1.0H2O 0.1 PhMe: C, 45.20; H, 3.98; N, 11.61.

EJEMPLO 12 (a) Trifluoroacetato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino- 7-isoquinol¡nil)sulfon¡n-?/-(2-metox¡bencil)qlicina ( Trifluoroacetato de ?/-f(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)sulfonil1-?/-(2-metoxibencíl)glicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (225 mg, 2.36 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (44 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.47 mmoles) en DME (20 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro- 7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(2-metoxibencil)glicina (300 mg, 0.59 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 2 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (x 3). Los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20) y después CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente para dar el producto en forma de un semi-sólido amarillo. Este semi-sólido se disolvió en EtOAc, se añadió una solución de TFA (35 µl) en EtOAc (25 ml) y los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe. El residuo se trituró con /'-Pr20, el sólido blanco resultante se recogió por filtración y después se secó para dar el 5 trifluoroacetato del éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoqu¡nolinil)sulfonil]-?/-(2-metoxibenc¡l)gl¡cina (219 mg, 0.338 mmoles). pf >197°C (desc.) 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 1.25 (9H, s), 3.6 (3H, s), 4.0 (2H, s), 4.45 (2H, s), 6.8-6.9 (2H, m), 7.1-7.2 (2H, m), 8.3 (2H, s), 8.4-8.6 (4H, s a), 8.5 10 (1 , 1 H), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 534, 536 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.33; H, 4.55; N, 10.52. Calculado para C24H28CIN505S 1.0CF3CO2H: C, 48.18; H, 4.51 ; N, 10.81. 15 Se disolvió el trifluoroacetato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guan¡dino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]-/V-(2-metox¡benc¡l) glicina (150 mg, 0.231 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. La mezcla se diluyó con PhMe, se concentró al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe, y el residuo se trituró con /-Pr20 20 para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/- (2-metoxibencil)glícina (122 mg, 0.106 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf >165°C (desc.) 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 3.6 (3H, s), 4.0 (2H, s), 4.5 (2H, s), 6.8 (1H, s), 6.85 (1H, dd), 7.1-7.2 (2H, m), 8.3 (2H, s), 8.35-8.5 (4H, s a), 8.5 (s, 1H), 8.8(1 H, s) ppm. LRMS 478, 480 (MH+) Análisis calculado: C, 44.64; H, 3.58; N, 11.83. Calculado para C20H2oCIN5?5S 1.0CF3CO2H: C, 44.69; H, 3.68; N, 11.63. j^ j^¡^^^^gj^^^^^| ig^ j ¿^¿ EJEMPLO 13 (a) Clorhidrato del éster f-butílico de ?/-r(4-cloro-1-quanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil1-?/-(3-metoxibenc¡l)qlicina (b) A/-[(4-cloro-1-quan¡dino-7-isoqu¡nol¡n¡l)sulfon¡n-/S/-(3-metoxibenciQqlicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (149 mg, 1.55 mmoles) a una suspensión de NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.16 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquínolinil)sulfonil]-?/-(3-metoxibenc¡l)glic¡na (200 mg, 0.39 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 2 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (x 3) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20-EtOAc y se añadió una solución de HCl en Et20 (0.5 M) para dar un precipitado. El sólido se recogió por filtración, se trituró con EtOAc y A* J & k -y^ &l después se secó para dar el clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-/V-(3-metoxibencil)glicina (124 mg, 0.21 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf >203-205°C (desc.) 5 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 3.65 (3H, s), 4.05 (2H, s), 4.5 (2H, s), 6.7 (1 H, s), 6.75-6.85 (2H, m), 7.2 (1 H, dd), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (s, 1 H), 9.3 (1 H, s), 11.6 (1 H, s a) ppm. LRMS 534, 536 (MH+), 1069 (M2H+) Análisis encontrado: C, 50.22; H, 5.11 ; N, 12.23. 10 Calculado para C24H28CIN505S 1.0HCI: C, 56.52; H, 5.12; N, 12.28. Se disolvió clorhidrato del éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1- guan¡dino-7-isoquinolinil)sulfonil]-/V-(3-metoxibencil)glicina (95 mg, 0.167 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente 15 durante 1 hora. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con Et20 y se secó para dar ?/-[(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoquinolin¡l)-sulfonil]- V-(3- metoxibencil)glicina (65 mg, 0.128 mmoles) en forma de un polvo blanco. 20 pf >290°C (desc.) 1H (CF3C02D, 400 MHz) d 3.9 (3H, s), 4.3 (2H, s), 4.6 (2H, s), 6.9-7.0 (3H, m), 7.3 (1 H, dd), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.6 (1 H, d), 8.95 (1 H, s) ppm.

. LRMS 477, 479 (MH+), 955 (M2H+) Análisis encontrado: C, 48.67; H, 4.09; N, 13.88. Calculado para C20H2oCIN5?5S 0.25CF3CO2H: C, 48.62; H, 4.03; N, 13.83.

EJEMPLO 14 (a) Clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)sulfon¡l1-/V-(3-clorobencil)qlicína 10 i Trifluoroacetato de ?/-|Y4-cloro-1-guanidino-7- ¡soguinol¡nil)sulfonin-A/-(3-clorobencil)glicina Se añadió NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.16 mmoles) en una porción a una suspensión de clorhidrato de guanidina (150 mg, 1.55 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro- 7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(3-clorobencil)gIicina (185 mg, 0.36 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 5 horas. La mezcla enfriada se diluyó con Et20, se lavó con agua, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) para dar un precipitado. Los disolventes se evaporaron al vacío y el sólido blanco se trituró con EtOAc y después se secó para dar el clorhidrato del éster f-butílico de N- [(4-cIoro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil)-/V-(3-clorobencil)glicina (85 mg, 0.145 mmoles). pf 203-205°C. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 4.1 (2H, s), 4.55 (2H, s), 7.2-7.35 (4H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (s, 1 H), 9.3 (1 H, s), 11.55 (1 H, s a) ppm. LRMS 538, 549 (MH+), 1076 (M2H+). Análisis calculado: C, 47.04; H, 4.53; N, 11.82. Calculado para C23H25CI2N504S 0.1 HCl 0.5H2O: C, 47.31 ; H, 4.66; N, 11.99. Se disolvió el clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoqu¡nol¡nil)sulfonil]-?/-(3-clorobencil)glicina (60 mg, 0.104 mmoles) en CF3C02H (0.5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con PhMe y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con Et20 y se secó para dar trifluoroacetato de /V-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-(3-clorobencil)glicina (31 mg, 0.052 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 306-308°C. 1H (CFD3C02D, 400 MHz) d 4.3 (2H, s), 4.55 (2H, s), 7.0-7.1 (2H, m), 7.1-7.15 (2H, m), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 482, 484 (MH+), 496, 498 (MH+ del correspondiente éster metílico). Análisis encontrado: C, 42.60; H, 3.04; N, 12.03. Calculado para C19H17CI2N504S 1.0CF3CO2H: C, 42.29; H, 3.04; 10 N, 11.74.

EJEMPLO 15 (a) Clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 15 isoguinol¡n¡l)sulfonin-?/-(4-metoxibencil)glic¡na (b) ?/-r(4-cloro-1-quanidino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfon¡n-?/-(4- metoxibenciQqlicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (118 mg, 1.24 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (23 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.78 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dícloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]-?/-(4-metoxibencil)glicina (155 mg, 0.31 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 1 hora. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (x 3). Los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano EtOAc (80:20) y después CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente para dar una goma amarilla. La trituración con /'-Pr20 dio el éster f-butílico de A/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoquinolin¡l)sulfon¡l)-/V-(4-metoxibencil)glicina (80 mg, 0.15 mmoles) en forma de un sólido amarillo pegajoso. Una pequeña muestra (10-15 mg) se disolvió en EtOAc, se añadió una solución de HCl en Et20 y los disolventes se evaporaron al vacío, para dar clorhidrato del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(4-metox¡bencil)glicina (18 mg) en forma de un sólido. (Todos los datos de caracterización son para la sal clorhidrato). pf >192°C. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 3.7 (3H, s), 4.0 (2H, s), 4.4 (2H, s), 6.8 (2H, d), 7.1 (2H, d), 8.3 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4-8.9 (4H, s a), 8.5 (s, 1 H), 8.2 (1 H, s) ppm. LRMS 534, 536 (MH+). mi i iifi i li i l fililliir lí Análisis encontrado: C, 51.36; H, 5.53; N, 11.23. Calculado para C24H28CIN505S 1.OHCI 0.28 /-Pr20: C, 51.48; H, 5.54; N, 11.69. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 5 isoquínolinil)sulfonil]-/\/-(4-metoxibencil)glic¡na (65 mg, 0.122 mmoles) en CF3C02H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 min. La mezcla se diluyó con PhMe, se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2- MeOH-NH3 0.880 (83:15:3) como eluyente para dar ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 10 ¡soquinolinil)sulfonil]-?/-(4-metoxibencil)glic¡na (11 mg, 0.023 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf >293°C (desc.) 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 3.7 (3H, s), 3.8 (2H, s), 4.4 (2H, s), 6.85 (2H, d), 7.15 (2H, d), 7.2-7.5 (4H, s a), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (s, 15 1 H), 9.1 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 48.44; H, 4.47; N, 14.12. Calculado para C20H20CIN5S 1.0H2O: C, 48.34; H, 4.27; N, 14.28. _^^ . . , - .^^a— JMh^i __^. -— —|Bi||| mt|[[|?| EJEMPLO 16 (a) Ester f-butílico de ?/-[.4-cloro-1-quanidino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil1-?/-(2-p¡ridilmetil)qlic¡na . Diclorhidrato de ?/-í.4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinol¡n¡psulfon¡n-?/-(2-piridilmetipqlicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (293 mg, 3.07 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (57 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.92 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]-?/-(2-piridilmetil)glicina (370 mg, 0.78 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 1 hora. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml) y se lavó con NH CI acuoso (150 ml), se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 20:80) como eluyente para dar el éster f-butílíco de _..M___M»-________fi___ ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil]-/V-(2-piridilmet¡l)gl¡cina (120 mg, 0.24 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 4.1 (2H, s), 4.65 (2H, s), 7.2 (1 H, m), 7.5 (1 H, d), 7.65 (1 H, dd), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.45 5 (1 H, d), 9.25 (1 H, s) ppm. LRMS 505 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.93; H, 5.03; N, 15.45. Calculado para C22H25CIN604S 0.1 H20 0.2EtOAc: C, 52.24; H, 5.18; N, 15.89. 10 Se añadió una solución de HCl (3 ml, 2M, 6 mmoles) a una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]- ?/-(2-piridilmetil)glicina (115 mg, 0.23 mmoles) en dioxano (5.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C durante 18 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se trituró con EtOAc caliente para dar diclorhidrato de ?/-[(4-cloro-1- 15 guanidino-7-¡soqu¡nolin¡l)sulfonil]-?/-(2-piridilmet¡l)glicina (95 mg, 0.167 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. pf 216-220°C. 1H (CD3OD, 400 MHz) d 4.4 (2H, s), 5.1 (2H, s), 8.05 (1 H, m), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.6 (1 H, dd), 8.85 (1 H, d), 9.3 (1 H, 20 s) ppm. Análisis encontrado: C, 39.01 ; H, 4.01 ; N, 14.14. Calculado para C18H17CIN604S 2.0HCI 2.0H2O 0.12 dioxano: C, 39.05; H, 4.25; N, 14.78. - — *" -*--' -**~*-- ..* ~.^ « - » >.. -- iii?iiin¡?iBlmi iaiíft?xi-" M'L-' -*- ...^^..^.^^-..^ EJEMPLO 17 (a) Ester f-butílico de ?/-í(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoqu¡nol¡n¡l)sulfonil.-/V-(3-p¡ridilmetil)glicina . Diclorhidrato de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soquinol¡nil)sulfonin-?/-(3-piridilmet¡l)qlicina Se añadió clorhidrato de guanidina (317 mg, 3.32 mmoles) en una parte a una suspensión agitada de NaH (62.3 mg, dispersión al 80% en 5 peso en aceite mineral, 2.08 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-(3-piridilmetil)glicina (400 mg, 0.83 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 80°C durante 4 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml) y se lavó con NH CI acuoso (200 ml), se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando (i) pentano-EtOAc (70:30 a 50:50) y después (¡i) CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente para dar el éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1- - < _¿.._^» •% »»_ _^^ ^ág^?j^sjí^íí&j guanidino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]-?/-(3-piridilmetil)glicina (104 mg, 0.21 mmoles) en forma de un sólido amarillo claro. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.8 (2H, s), 4.5 (2H, s), 6.4- 6.8 (4H, a), 7.2 (1 H, m), 7.6 (1 H, d), 8.0 (1 H, d), 8.05 (1 H, s), 8.05 (1 H, d), 8.4 5 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 9.3 (1 H, s) ppm. LRMS 505, 507 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.95; H, 5.02; N, 16.25. Calculado para C22H25CIN604S: C, 52.33; H, 4.99; N, 16.64. Se añadió CF3C02H (1.0 ml) a una solución agitada de éster f- 10 butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]-?/-(3- pirid¡lmet¡l)glic¡na (100 mg, 0.20 mmoles) en CH2CI2 (1.0 ml) y la mezcla se agitó a 23°C durante 3.5 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópícamente con PhMe y CH2CI2. El residuo aceitoso se disolvió en EtOA y se añadió una solución de EtOAc saturada con HCl (3.0 ml) 15 que dio un precipitado. El sólido blanco se recogió por filtración y se secó para dar díclorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soqu¡nol¡nil)sulfon¡l]-A/-(3- piridilmetil)glicina (48 mg, 0.086 mmoles). 1H (CD3OD, 400 MHz) d 4.25 (2H, s), 4.9 (2H, s), 8.05 (1 H, dd), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.7 (1 H, d), 8.8 (1 H, d), 9.0 (1 H, s), 9.2 20 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 39.32; H, 4.07; N, 15.07. Calculado para C18H17CIN604S 2.0HCI 1.5H20 O.OdEtOAc CH2CI2: C, 39.19; H, 3.72; N, 14.64.

EJEMPLO 18 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolini!)su!fon¡l1-/V-(4-pir¡d¡lmet¡Dglic¡na (b_L Diclorhidrato de A/-[(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soqu¡nolinil)sulfonip-/V-(4-piridilmetil)glicina Se añadió en una porción clorhidrato de guanldína (300 mg, 3.14 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (59 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.97 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílíco de A/-[(1 ,4-d¡cloro-7-¡soquinol¡nil)sulfonil]-?-(4-piridilmetil)glicina (379 mg, 0.79 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 80°C durante 4 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml), y se lavó con NH4CI acuoso (150 ml), se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía repetida en columna sobre gel de sílice usando (i) pentano-EtOAc (70:30 a 50:50) y después con (ii) CH2CI2- MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente para dar el éster f- a"-j**j""mJ*- -A -^-^ ¿^^^^^A butílico de ?/-[(4-cloro-1 -guaníd¡no-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-?/-(4-piridilmetil)gl¡cina (96 mg, 0.19 mmoles). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.9 (2H, s), 4.55 (2H, s), 7.25 (2H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 8.6 (2H, d), 9.3 (1 H, s) ppm. LRMS 505, 507 (MH+). Análisis encontrado: C, 52.63; H, 5.09; N, 16.18. Calculado para C22H25CIN604S: C, 52.33; H, 4.99; N, 16.64. Se añadió CF3C02H (1.0 ml) a una solución agitada de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-(4-p¡r¡dilmetil)gl¡c¡na (88 mg, 0.17 mmoles) en CH2CI2 (1.0 ml) y la mezcla se agitó a 23°C durante 3.5 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con CH2CI2. El residuo aceitoso se disolvió en CH2CI2-MeOh (1.0 ml, 9:1 ) y se añadió una solución de EtOAc saturado con HCl (3.0 ml) que dio un precipitado. El sólido blanco se recogió por filtración y se secó para dar diclorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)-sulfonil]-?/-(4-piridilmet¡l)glicina (18 mg, 0.033 mmoles). 1H (CD3OD, 400 MHz) d 4.3 (2H, s), 5.0 (2H, s), 8.2 (2H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.55 (1 H, d), 8.8 (2H, d), 9.1 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C: 39.57; H, 4.12; N, 14.85. Calculado para C18H17CIN604S 2.0HCI 1.5H20: C, 39.39; H, 4.04; N, 15.39. . ._-- ^HH Üfg á^M ____________t____________l____ ,__?__t___M_a______¿- .-^^^-^.... flÉi_^- . ,__.._¿. , ^«SA«fe__J^_.J____...

EJEMPLO 19 (al Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil1-?/-[(1 )-1-feniletinqlicina (b) Clorhidrato de N-f(4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil.sulfonil1-?/-[(1 .-1-feniletillql¡cina Se añadió en una porción NaH (30 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.01 mmoles) a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (154 mg, 1.61 mmoles) en DME (6.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquínolinil)sulfonil]-?/-[(1 .)-1-fenilet¡l]glicina (200 mg, 0.40 mmoles) en DME (3.0 ml) y la mezcla se calentó a 95°C durante 5 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (50:50 a 33:66) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-?/-[(1 R)-1-fenilet¡l]glic¡na (125 mg, 0.23 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida después de evaporación repetida en CH2CI2. pf 106-111 °C. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.3 (3H, d), 3.7 (1 H, d), 3.95 (1 H, d), 5.05 (1 H, q), 7.1-7.4 (4H, a), 7.2-7.3 (5H, m), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.2 (1 H, d), 9.15 (1 H, s) ppm. 5 LRMS 518, 520 (MH+), 1035 (M2H+). Análisis encontrado: C, 55.15; H, 5.55; N, 12.84. Calculado para C2 H28CIN504S 0.2EtOAc 0.1CH2CI2: C, 54.96; H, 5.52; N, 12.87. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 10 isoquinolinil)sulfonil]-?/-[(1R)-1-feniletil]-glicina (100 mg, 0.19 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (7.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se trituró con EtOAc para dar el clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino- 7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-[(1 R)-1-feniletil]glicina (75 mg, 0.14 mmoles) en 15 forma de un polvo blanco. pf 185-190°C 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.35 (3H, d), 3.85 (1 H, d), 4.15 (1 H, d), 5.3 (1H, q), 7.15 (5H, s a), 8.3 (1 H, d), 8.4-8.8 (4H, a), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1H, s), 9.1 (1 H, s), 11.3 (1 H, a), 12.5 (1 H, a) ppm. 20 Análisis encontrado: C, 47.42; H, 4.40; N, 13.54. Calculado para C20H2oCIN50 S 1.0HCI 0.5H2O 0.2EtOAc: C, 47.59; H, 4.53; N, 13.34.

EJEMPLO 20 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quan¡dino-7- isoquinolin¡l)sulfon¡n-?/-r(1 S)-1-fenilet¡nql¡cina (b) Clorhidrato de N-f(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoguinolini0sulfon¡l1- ?/-,(1 S.-1-feniletillglicina Se añadió en una porción NaH (30 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.01 mmoles) a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (154 mg, 1.61 mmoles) en DME (6.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-[(1 S)-1-feniletil]glicina (200 mg, 0.40 mmoles) en DME (3.0 ml) y la mezcla se calentó a 95°C durante 5 h. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (50:50 a 33:66) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-[(1 S)-1-fen¡letil]glicina (128 mg, 0.23 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida después de la evaporación repetida en CH2CI2. pf 109115°C. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.3 (3H, d), 3.7 (1 H, d), 3.95 (1 H, d), 5.05 (1 H, q), 7.1-7.45 (4H, a), 7.2-7.3 (5H, m), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.2 (1 H, d), 9.15 (1 H, s) ppm. LRMS 518, 520 (MH+), 1035 (M2H+). Análisis encontrado: C, 55.26; H, 5.56; N, 12.86. Calculado para C24H28CIN504S 0.1 EtOAc 0.05CH2CI2: C, 55.28; H, 5.54; N, 12.97. Se disolvió éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-[(1 S)-1-fen¡let¡l]gl¡cina (100 mg, 0.19 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (4.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se trituró con EtOAc para dar el clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolínil)sulfonil]-?/-[(1 S)-1-fenilet¡l]glic¡na (72 mg, 0.14 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 196-200X 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.35 (3H, d), 3.85 (1 H, d), 4.15 (1 H, d), 5.3 (1 H, q), 7.15 (5H, s a), 8.3 (1 H, d), 8.4-8.8 (4H, a), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 9.1 (1 H, s), 11.3 (1 H, a), 12.4 (1 H, a) ppm. Análisis encontrado: C, 47.42; H, 4.30; N, 13.51. Calculado para C20H20CIN5O4S 1.0HCI 1.0H2O 0.1 EtOAc: C, 47.47; H, 4.45; N, 13.57. ^-..^:^ aafe¿ ái?__jJ._.Jv--u¿!,a_.. «_ -.-... __. . ....__ . _ ^^^^&MÍáÍStílí iM^í¡ist?^tS^á»?^^á&Ji,^ EJEMPLO 21 (a) Ester f-butílico de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1-guanidíno-7-isoguinol¡n¡l)sulfonil1-L-alanina (b) Clorhidrato de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-alanina Se añadió NaH (30 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.01 mmoles) en una porción a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (154 mg, 1.61 mmoles) en DME (5.0 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 45 minutos. Se añadió una solución de éster t-butílico de ?/-bencil-?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]-L-alanina (200 mg, 0.40 mmoles) en DME (2.0 ml) y la mezcla se calentó a 95°C durante 4 h. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (50:50 a 20:80) como eluyente para dar el éster t-butílico de ?/-bencil- V-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-L-alan¡na (120 mg, 0.225 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida después de la evaporación repetida en CH2CI2. ..»w^-__BI _É_Í_É_____i____Í__?_Í 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.1 (9H, s), 1.15 (3H, d), 4.35 (1 H, d), 4.5 (1 H, q), 4.7 (1 H, d), 7.1-7.45 (4H, a), 7.2-7.4 (5H, m), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 518, 510 (MH+). Análisis encontrado: C, 55.33; H, 5.55; N, 12.82. Calculado para C24H28CIN5O4S»0.1 EtOAc»0.05CH2CI2: C, 55.30; H, 5.48; N, 13.19. Se disolvió éster t-butílico de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolin¡l)sulfonil]-L-alanina (100 mg, 0.19 mmoles) en una solución de EtOAc saturado con HCl (5.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla se concentró al vacío, evaporando azeotrópica mente con EtOAc, para dar el clorhidrato de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-alanina (77 mg, 0.15 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 256-262°C. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.2 (3H, d), 4.35 (1 H, d), 4.7 (1 H, q), 4.8 (1 H, d), 7.1-7.4 (5H, m), 8.3 (2H, s), 8.4-8.7 (4H, a), 8.5 (1 H, s), 9.05 (1 H, s), 11.2 (1 H, a), 12.7 (1 H, a) ppm. LRMS 461 , 463 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.02; H, 4.38; N, 13.33. Calculado para C20H20CIN5O4S.1.0HCI.0.25H20.0.1 EtOAc: C, 47.88; H, 4.39; N, 13.69.

EJEMPLO 22 (a) Ester t-butílico de N-,t-butox¡carbon¡lmetil ,-?/-[.4-cloro-1- quan¡dino-7-isoquinol¡n¡0su!foni!1qlicina (b) Clorhidrato de ?/-(carboximetil)-?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soguinolinil)sulfonil]glicina Se añadieron K2C03 anhidro (88 mg, 0.64 mmoles) y después bromoacetato de t-butilo (56 µl, 0.38 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol¡n¡l)sulfon¡l]-glicina (132 mg, 0.33 mmoles) en DMF (2.0 ml) y la mezcla se agitó a 23°C durante 18 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (300 ml), se lavó con salmuera (150 ml) y agua (200 ml), se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (80:20 a 50:50) como eluyente para dar éster t-butílico de ?/-(t- butox¡carbonilmetil)-?/-[(4-cloro-1-guanídino-7-isoqu¡nol¡n¡l)sulfonil]glic¡na (101 mg, 0.19 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (18H, s), 4.1 (4H, s), 8.0 (1H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.25 (1 H, s) ppm. LRMS 528 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.57; H, 5.78; N, 12.73. 5 Calculado para C22H3oCIN506S.0.1 EtOAc: C, 49.95; H, 5.80; N, 13.00. Se añadió una solución de HCl (3 ml, 2M, 6 mmoles) a una solución de éster t-butílíco de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]- ?/-(t-butoxicarbonilmetil)glicina (90 mg, 0.17 mmoles) en dioxano (4.0 ml). La 10 mezcla se agitó a 23°C durante 18 horas y después se calentó a 70°C. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se secó para dar clorhidrato de ?/-(carboximetil)-?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquínol¡n¡l)-sulfonil]glic¡na (61 mg, 0.127 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 296-300°C (desc.) 15 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 4.05 (4H, s), 7.9-8.3 (4H, a), 8.2 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 9.0 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 38.29; H, 3.58; N, 14.13. Calculado para C14H?4CIN5O6S.1.0HCI.0.1 H2O«0.3 dioxano: C, 37.99; H, 3.69; N, 14.57. __<-B»i dtej«_»Ai -A-a-s.. , a?^ ^-^- ^^^^^^ ÉU^^^^^^^^_r^_^^^_^_^L^^lXi-.^^ EJEMPLO 23 (a) Ester t-butílico de ?/-í(4-cloro-1-quanidino-7- isoqu¡nol¡n¡l)sulfonin-L-alanina (b) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡n-L-alanina Se añadió en una porción NaH (37 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.23 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (189 mg, 1.97 mmoles) en DME (6 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 min. Se añadió éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}-L-alanina (200 mg, 0.49 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 7 horas. La mezcla enfriada se concentró al vacío, el residuo se suspendió en agua y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS04) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente A». _____^-I__ ___». ^^MüHtÉ---. _____««_>, ...... . . ........... ftjjfiillHiÉ para dar éster t-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-L- alanina (160 mg, 0.37 mmoles) en forma de un polvo blanco. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.1 (9H, s), 1.15 (3H,d), 3.8 (1 H, dq), 7.1-7.4 (4H, a), 8.0 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.3 (1 H, d), 9.05 (1 H, s) 5 ppm. Se añadió CF3C02H (1.0 ml) a una solución agitada de éster t- butílico de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-alanina (aproximadamente 150 mg, 0.35 mmoles) en CH2CI2 (3.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se evaporó al vacío, 10 evaporando azeotrópicamente con PhMe y CH2CI2 y después se trituró con Et02 para dar trifluoroacetato de ?/-[(4cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-alan¡na (62 mg, 0.126 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf > 250°C. 15 1H (CD3OD + TFA-d, 300 MHz) d 1.35 (3H, d), 4.05 (1 H, q), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 389, 391 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 36.66; H, 3.11 ; N, 14.00. Calculado para C?3H?4CIN5O4S» 1.0CF3CO2H .0.3H2?: C, 36.64; 20 H, 3.21 ; N, 14.24.

EJEMPLO 24 (a) Ester metílico de /V-[(4-cloro-1-quanino-7-isoquinolin¡l)sulfonil1-D-alanina (b) Clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-quanino-7-isoquinolinipsulfonil1- D-alanina Se añadió en una porción NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.17 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (179 mg, 1.87 mmoles) en DMSO (5 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N durante 45 minutos. Se añadió éster metílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliníl)sulfonil]amino}-D-alanina (170 mg, 0.47 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 4 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS04) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice usando pentano-EtOAc (66:33 a 0:100) como eluyente para dar el éster metílico de ?/-[(4-cloro-1-guaníno-7-isoquinolinil)sulfonil]-D-alanina (22 mg, 0.057 mmoles) en forma de una espuma/aceite amarillo. 1H (CD3OD, 300 MHz) d 1.3 (3H, d), 3.4 (3H, s), 4.1 (1 H, q), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 386, 388 (MH+). Se añadió una solución de NaOH (1 ml, 2 M, 2 mmoles) a una 5 solución de éster metílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-D- alanina (17 mg, 0.044 mmoles) en MeOH (3 ml) y la mezcla se calentó a 60°C durante 18 horas. La mezcla enfriada se neutralizó con HCl diluido (2 M), el MeOH se evaporó al vacío y el residuo se trituró con agua (10 ml). El sólido se recogió por filtración con lavados de agua y se secó bajo alto vacío para dar el 10 clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidíno-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]-D-alanina (9 mg, 0.021 mmoles) en forma de un polvo blanquecino. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.2 (3H, d), 3.8 (1 H, dq), 7.2-7.6 (4H, a), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 8.2 (1 H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 37.56; H, 3.98; N, 15.74. 15 Calculado para C13H14CIN5O4S-1.0HCI 0.5H2?: C37.42; H, 3.86; N, 16.78.

EJEMPLO 25 (a) Ester f-butílico de 1-([(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoqu¡nol¡n¡l)sulfonil1amino>-L-valina (b) Trifluoroacetato de ?/-[,4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinolin¡l)sulfonip-L-valina Se añadió en una porción NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.17 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (176 mg, 1.84 mmoles) en DMA (4 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 60°C durante 30 minutos. Se añadió éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolin¡l)sulfonil]amino}-L-valina (161 mg, 0.43 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80°C durante 18 h. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) que dio un precipitado blanco. El Et20 se decantó, el residuo sólido se disolvió en MeCN y la solución se enfrió hasta aproximadamente 0°C, con lo ^^^^g^^^¿ _^^^_____^^|^^^|Í l ^^^ uM^^gA^^^^^^^^^ que dio un precipitado. Este sólido se recogió mediante filtración y después se secó para dar el éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]am¡no}-L-valina (36 mg, 0.072 mmoles) en forma de un sólido blanco. La evaporación de las aguas madre orgánicas reunidas dio una goma que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el éster t-butílíco de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-L-valina (104 g, 0.228 mmoles). (La muestra se caracterizó como la sal clorhidrato), pf 192-194°C (desc.) 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 0.8 (3H, d), 0.85 (3H, d), 1.05 (9H, s), 2.0 (1 H, sept), 3.7 (1 H, dd), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.5-8.7 (4H, a), 9.05 (1 H, s), 11.3 (1 H, a) ppm. LRMS 456, 458 (MH+). Análisis encontrado: C, 45.67; H, 5.54; N, 13.97. Calculado para d9H26CIN5O4S- l .OHCI-O.5H2O: C, 45.51 ; H, .63; N, 13.97. Se disolvió éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolínil)sulfonil]amino}-L-valina (104 mg, 0.228 mmoles) en CF3CO2H (1.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con PhMe (25 ml) y se concentró al vacío. El residuo se cristalizó con Et20 que contenía una pequeña cantidad de EtOAc para dar un sólido blanco. Este sólido después se trituró con agua y se secó para dar el trifluoroacetato de 1-{[(4cloro-1-guanídino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-L-valína (39 mg, 0.084 mmoles). pf > 300°C. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 0.95 (3H, d), 1.0 (3H, d), 2.25 (1H, sept), 4.0 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.55 (1 H, d), 9.0 (1 H, s) ppm. LRMS 400, 402 (MH+). Análisis encontrado: C, 41.29; H, 4.37; N, 14.99. Calculado para C15H18CIN5O4S-0.5CF3CO2H-0.3H2O: C, 41.57; H, 4.16; N, 15.15.

EJEMPLO 26 (a) Clorhidrato de éster f-butílico de 1-([(4-cloro-1-quanidino-7-¡soqu¡nolinil)sulfon¡pamino}-D-valína íbi Clorhidrato de ?/-{[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfon¡Hamino)-D-valina **- .?^^^^S ^^SSlí rf^^^O^^?x^t-.., i^ta ? IÉÍÉ__UÉÉÍ__I___M Se añadió en una porción NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.17 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (176 mg, 1.84 mmoles) en DMSO (2.5 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 23°C durante 30 min. Se añadió en una porción éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-D-val¡na (200 mg, 0.46 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 3 h. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (0.5 ml, 1 M) que dio un precipitado blanco. La purificación mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente produjo el producto que se trató de nuevo con una solución de HCl en Et20 (1 M) para dar clorhidrato del éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-D-valina (76.6 mg, 0.151 mmoles). pf 124-125°C (desc.). H (DMSO-de, 300 MHz) d 0.8 (3H, d), 0.85 (3H, d), 1.05 (9H, s), 2.0 (1 H, sept), 3.7 (1 H, dd), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (1 H, s), 8.4-8.8 (4H, a), 9.05 (1 H, s), 11.2 (1 H, a) ppm. LRMS 456, 458 (MH+), 478, 480 (MNa+). Análisis encontrado: C, 46.07; H, 5.67; N, 13.50. Calculado para d9H26CIN5O4S- 1.0HCI-0.5MeOH: C, 46.07; H, 5.75; N, 13.77. ^^¡|jgU¡^ ^ *~ ~* ~~- «j^^jj^y Se disolvió clorhidrato del éster t-butílico de 1 {[(4-cloro-1 - guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfon¡l]amino}-D-val¡na (61 mg, 0.12 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (10 ml) a 0°C, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró al vacío, el residuo 5 se extrajo con EtOAc caliente y la solución orgánica después se concentró al vacío y se secó para dar el clorhidrato de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}-D-valina (24.3 mg, 0.050 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. pf > 190°C (desc). 10 1H (TFA-d, 400 MHz) d 0.95 (3H, s a), 1.0 (3H, s a), 2.3 (1 H, s a), 4.05 (1 H, s a), 8.35 (1 H, s a), 8.4 (1 H, s a), 8.55 (1 H, s a), 9.1 (1 H, s a) ppm. LRMS 400 (MH+), 417 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 41.29; H, 4.76; N, 14.16. Calculado para C15H18CIN5O4S.1.0HCI.0.7H2O«0.4EtOAc: C, 15 41.18; H, 4.91 ; N, 14.46. - ?rf .-J *...-. . >s«. ^ . » sSfaa¡¡B É6&^slÉia8^^ EJEMPLO 27 (a) Clorhidrato del éster f-butílico de 1-{[(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinolinil)sulfon¡11am¡no)-D-terc-leucina . Clorhidrato de ?/-{[(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡pamino}-D-terc-leucina Se añadió en una porción NaH (58 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.27 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (191 mg, 2.0 mmoles) en DMSO (5.0 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 23°C durante 30 minutos. Se añadió en una porción una solución de éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]amino}-D-terc-leucina (225 mg, 0.50 mmoles) en DMSO (3.0 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 9 h. Se añadió una segunda porción de guanidina (0.67 mmoles) [preparada a partir de clorhidrato de guanidina (100 mg) y NaH (20 mg)] en DMSO (1.0 ml) y la mezcla se calentó a 90°C durante 8 horas más. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y con salmuera, se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (1.5 ml, 1 M) que dio un precipitado blanco. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el clorhidrato del éster f-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]am¡no}-D- 5 terc-leucina (222 mg, 0.43 mmoles). pf 187-189°C. 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 0.9 (9H, s), 0.95 (9H, s), 3.6 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.4-8.8 (4H, a), 8.5 (1 H, s), 9.0 (1 H, s), 11.15 (1 H, a) ppm. 10 LRMS 470, 472 (MH+). Análisis encontrado: C, 46.55; H, 5.78; N, 13.46. Calculado para C20H28CIN5O4S.1.0HCI .0.5H2O: C, 46.60; H, 3.87; N, 13.59. Se disolvió clorhidrato del éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1- 15 guanid¡no-7-isoqu¡nol¡nil)sulfonil]amino}-D-terc-leucina (188 mg, 0.36 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (30 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se calentó con EtOAc para dar un sólido blanco. La solución orgánica caliente se decantó y el sólido se secó al vacío para dar el clorhidrato de 1- 20 {[(4cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-D-terc-leucina (109.3 mg, 0.24 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 234-236 (desc.). 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1.1 (9H, s), 3.9 (1 H, s), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.6 (1 H, d), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 414, 416 (MH+). Análisis encontrado: C, 41.70; H, 4.86; N, 15.01. Calculado para C?6H20CIN5O4S.1.0HCI.0.5H2O: C, 41.84; H, 4.83; N, 15.25.

EJEMPLO 28 (a) Ester t-butílico de ?/-[,4-cloro-1-guanidino-7-isoguinoliniDsulfonill-L-fenilalanina (b) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soguinolinil)sulfonil1-L-fenilalanina Se añadió en una porción NaH (22 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.73 mmoles) a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (76.7 mg, 0.80 mmoles) en DMSO (5.0 ml) y la mezcla se .. _^^-_f^__^tf__«^,_^to.> .. . -. >-.,..t1 | ^ ^^É&^^^ám calentó a 60°C bajo N2 durante 20 min. Se añadió éster t-butílico de ?/-[(1 ,4- dicloro-7-isoquínolin¡l)sulfonil]-L-fenilalanina (103 mg, 0.21 mmoles) y la mezcla se calentó a 95°C durante 17 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 80:20:2) para dar el éster t- butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-L-fenilalan¡na (34.7 mg, 0.069 mmoles) en forma de una resina amarilla. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.0 (9H, s), 2.7 (1 H, dd), 2.8 (1 H, dd), 3.9 (1 H, dd), 7.1-7.2 (5H, m), 7.1-7.3 (4H, s a), 7.9 (1 H, d), 7.95 (1 H, d), 8.1 (s, 1 H), 8.5 (1 H, d a), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 504, 506 (MH+). Se disolvió el éster t-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanídino-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-fenilalan¡na (30 mg, 0.060 mmoles) en CFsC02H (2.5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 PhMe, se concentró al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-fenilalan¡na (24.4 mg, 0.42 mmoles) en forma de un sólido blanco, pf 306°C (desc.). 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 2.7 (1 H, dd), 3.0 (1 H, dd), 3.95 (1 H, m), 6.9-7.1 (5H, m), 7.8-8.4 (4H, a), 7.9 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.3 (s, 1 H), 8.6 (1 H, s a), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 448 (MH+).

Análisis encontrado: C, 44.35; H, 3.78; N, 11.38. Calculado para C?9H18CIN5O4S.1.0CF3CO2H.0.5H2O.0.12Et2O: C, 44.50; H, 3.69; N, 12.08.

EJEMPLO 29 (a) Clorhidrato del éster t-butílico de 1-f[(4-cloro-1-guanidino-7-isoguinolinil)sulfoninamino}-Q-metil-D-serina . Clorhidrato de ?/-([(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡sogu¡nol¡nil)sulfonil1amino}-0-metil-D-serina Se añadió en una porción NaH (50 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.66 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanídina (260 mg, 2.72 mmoles) en DMSO (4 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 50°C durante 30 minutos. Se añadió en una porción éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-d¡cloro-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-0-metil-D-ser¡na (300 mg, 0.689 mmoles) y la mezcla se calentó a 90°C durante 8 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua, (50 ml), la solución acuosa se extrajo con EtOAc (x 2) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera y se aaitoi secaron (MgS04). Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el producto deseado. Este material se trató con una solución de HCl en Et20 (1.0 ml, 1 M) los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se trituró con Et20 (x 2) para dar el clorhidrato del éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfon¡l]amino}-0-metil-D-serina (18 mg, 0.036 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (d4-MeOH, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 3.2 (3H, s), 3.5-3.6 (1 H, m), 3.6-3.7 (1 H, m), 4.1-4.2 (1 H, m), 8.35-8.5 (3H, m), 8.9 (1H, s) ppm. LRMS 458 (MH). Se disolvió clorhidrato del éster t-butílico de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinol¡nil)sulfon¡l]amino}-0-metil-D-serina (18 mg, 0.036 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (5 ml) a 0°C, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se concentró al vacío, el residuo se trituró con EtOAc (x 3) para dar el clorhidrato de 1-{[(4cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-L-terc-leucina (9 mg, 0.02 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. 1H (d-TFA, 400 MHz) d 3.6 (3H, s), 4.0-4.2 (2H, m), 4.65 (1 H, s a), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.65 (1 H, d), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 402 (MH). |gg^| ^ gl gMgu EJEMPLO 30 (a) Ester di-t-butílico del ácido ?/-f(4-cloro-1-quanidino-7- isoguinolinil.sulfonin-D-aspártico (b) Clorhidrato del ácido ?/-f(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinol¡n¡Dsulfon¡p-D-aspárt¡co Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (190 mg, 2.0 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (47 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.57 mmoles) en DME (7 ml) y la mezcla se calentó a 60°C bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster di-t-butílico del ácido 1-{[(1 ,4- dicloro-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-D-aspártico (250 mg, 0.50 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante 18 horas. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3) como eluyente para dar el éster di-t-butílico del ácido ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-D-aspártico (50 mg, 0.095 mmoles) en forma de un sólido amarillo. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.4 (9H, s), 2.7 (1 H, dd), 2.8 (1 H, dd), 4.1 (1 H, t a), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.3 (1 H, s) ppm. 5 LRMS 528, 530 (MH+). Se disolvió el éster di-t-butílico del ácido ?.-[(4-cloro-1-guanidino- 7-isoquinolinil)sulfonil]-D-aspártico (50 mg, 0.095 mmoles) en una solución EtOAc saturada con HCl (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró al vacío, el residuo se trituró con PhMe y 10 después con Et20 para dar el clorhidrato del ácido ?/-[(4cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-D-aspártico (29 mg, 0.062 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. 1H (CD3OD, 400 MHz) d 2.7 (1 H, dd), 2.8 (1 H, dd), 4.4 (1 H, t a), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. 15 LRMS 415 (M+). Análisis encontrado: C, 36.05; H, 3.72; N, 13.62. Calculado para C?4H14CIN5?6S» 1.0HCI »0.8H2O: C, 36.03; H, 3.59; N, 15.01.

EJEMPLO 31 (a) Ester t-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil1-L-prolina (b) Clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soguinolinil)sulfonil1- L-prolina Se añadió en una porción NaH (35 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.16 mmoles) a una solución agitada del clorhidrato de guanidina (177 mg, 1.85 mmoles) en DME (5 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 45 minutos. Se añadió una solución de éster t-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7-ísoquinolinil)sulfonil]amino}-L-prolina (200 mg, 0.46 mmoles) en DME (2 ml) y la mezcla se calentó a 95X durante 4 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (80:20 a 0:100) como eluyente, seguido por una evaporación azeótropa con CH2CI2, para dar el éster t-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-prolina (153 mg, 0.32 mmoles) en forma de una espuma amarilla pálida. ??_?t?i-M__a_________ttÉ iism 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.35 (9H, s), 1.6-1.7 (1 H, m), 1.7-1.9 (2H, m), 1.9-2.0 (1 H, m), 3.15-3.25 (1 H, m), 3.35-3.5 (1 H, m), 4.1 (1 H, dd), 7.15-7.4 (4H, a), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.05 (1 H, s) ppm. LRMS 545, 456 (MH+), 907 (M2H+). Análisis encontrado: C, 50.02; H, 5.41 ; N, 14.84. Calculado para C19H2 CIN5O4S 0,1 EtOAc-0,05CH2Cl2: C, 50.02; H, 5.37; N, 15.00. Se disolvió el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-prolina (60 mg, 0.13 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (5.0 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentró al vacío, evaporado azeotrópicamente con EtOAc, y el residuo se trituró con CH2CI2 para dar el clorhidrato de A/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-prolina (44 mg, 0.095 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 185-189X. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.5-1.7 (1 H, m), 1.7-2.0 (3H, m), 3.2-3.5 (2H, m), 4.2 (1 H, dd), 8.3-8.8 (4H, a), 8.2 (2H, s), 8.5 (1 H, s), 8.1 (1 H, s), 9.05 (1 H, s), 11.2 (1 H, a) ppm. Análisis encontrado: C, 39.89; H, 4.06; N, 14.93. Calculado para dsH^CINsO^-I .OHCIAOHsO-O.I EtOAc: C, 40.11 ; H, 4.33; N, 15.19. .__ _ Hü g^^^tta EJEMPLO 32 (a) Ester f-butílico de ?/-f(4-cloro-1-guanidino-7- isoguinoliniOsulfonip-D-prolina (b) Clorhidrato de éster f-butílico de ?/-f,4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinoliniQsulfonill-D-prolina Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (220 mg, 2.3 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (55 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.83 mmoles) en DME (8 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de 1-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}-D-prolina (250 mg, 0.58 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante 5 h. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0,880 (97:3:0.3) como eluyente para dar el éster f- butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-ísoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (200 mg, 0.44 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf>170X(desc.) 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.45 (9H, s), 1.7-1.8 (1H, m), 1.8-2.05 (3H, m), 3.3-3.45 (1H, m), 3.5-3.6 (1H, m), 4.3 (1H, dd), 6.3-6.6 (4H, a), 8.05 (1H, d), 8.1 (1H, d), 8.1(1H, s), 9.2 (1H, s) ppm. 5 LRMS 454, 456 (MH+) Análisis encontrado: C, 49.57; H, 5.27; N, 14.95. Calculado para C?9H24CIN5O4S-0,2H2O-0,04CH2CI2: C, 49.61; H, 5.35; N, 15.19. Se disolvió el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 10 isoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (50 mg. 0.11 mmoles) en una solución de EtOAc saturada con HCl (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. La mezcla se concentró al vacío, evaporado azeotrópicamente con CH2CI2, para dar el clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1- guanid¡no-7-¡soqu¡nolin¡l)sulfon¡l]-D-prolina (40 mg, 0.092) en forma de un 15 polvo blanco. pf>200X(desc). 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.7-1.85 (1H, m), 1.9-2.2 (3H, m), 3.4- 3.5 (1H, m), 3.5-3.6 (1H, m), 4.4 (1H, dd), 8.4 (1H, d), 8.45 (1H, s), 8.5 (1H, d), 8.9 (1H, s)ppm. 20 LRMS 397, 399 (MH+) Análisis encontrado: C, 40.22; H, 3.92; N, 14.88. Calculado para C15H16CIN5?4S-1,0HCI0,2H2O0,25CH2CI2: C, 39.89; H, 3.93; N, 15.25.

M_._g_g. _..__«-__._. __- m¿¿¿¡¿¡¡^ uag^^^g Se detectó que se había producido alguna racemizacíón durante la repetición de la preparación anterior en algunas condiciones. Se desarrolló una ruta alternativa al ejemplo 32 (b), invirtiendo la secuencia de guanilación/hidrólisis, como se ejemplifica a continuación: 1. Hidrólisis Se disolvió (2S)-1-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliníl)sulfonil]-2- 15 pirrolidinacarboxilato de tere-butilo (2S) (50.0 g, 0.116 moles) en HCl concentrado (12 M, 200 ml) y se agitó durante 3.5 horas. Se añadió agua (200 ml) durante 30 minutos y el precipitado blanco resultante se agitó durante 0.5 h más, se filtró y se lavó con agua (3 x 100 ml). El secado al vacío dio el ácido (2S)-1-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-2-pirrolidinacarboxílico en forma de 20 un sólido blanco (42.9 g, 0.114 moles). 1H (de-DMSO, 300 MHz) d1.6-1.95 (3H, m), 1.95-2.1 (1 H, m), 3.25-3.35 (1 H, m), 3.35-3.45 (1 H, m), 4.3 (1 H, dd), 8.35 (2H, s), 8.6 (1 H, s), 8.65 (1 H, s) ppm.

El análisis quiral se realizó usando electroforesís capilar, mostrando una pureza enantiomérica del 97.41%. 2. Guanilación del ácido libre Se calentaron a reflujo bajo una atmósfera de nitrógeno durante 20 minutos t-butóxido potásico (49.0 g, 0.437 moles) y guanidína. HCl (42.8 g, 0.448 moles) en DME (210 ml). Se añadió ácido (2S)-1-[1 ,4-dícloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-2-pírrolidinacarboxílico (42.0 g, 0.112 moles) y se continuó el calentamiento a reflujo durante 5.5 horas. Se añadió agua (420 ml) y la mezcla se acidificó con HCl concentrado a pH=5 dando un sólido que se retiró por filtración, se lavó con DME acuosa (1 :1 , 2 x 75 ml) y agua (2 x 75 ml) y se secó para producir el compuesto del título (b) en forma de un sólido amarillo (40.71 g, 0.102 moles). 1H (de-DMSO, 300 MHz) d1.5-1.65 (1 H, m), 1.7-2.0 (3H, m), 3.1-3.25 (1 H, m), 3.35-4.05 (1 H, m), 4.2 (1 H, dd), 7.2-7.7 (4H, s a), 8.0 (1 H, d), 8.1-8.2 (2H, m), 9.5 (1 H, d). £__M_fll_M___l¡É___ ?___-___i___a____B_a_______ El análisis quiral se realizó usando electroforesis capilar, mostrando una pureza enantiomérica del 99.76% (n = 2) EJEMPLO 33 Clorhidrato de 4-cloro-1-quan¡d¡no-7-([(2fi,-(h¡droximetil,-1- pirrolidinillsulfonillisoquinolina Se añadió en una porción NaH (26 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0.87 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (126 mg, 1.32 mmoles) en DMSO (2 ml) y la mezcla se calentó a 50X bajo N2 durante 20 minutos. Se añadió en una porción una solución de 1 ,4-dicloro-7-{[(2/ .)-(hidroximetil)-1-pirrolid¡nil]sulfonil}isoquinolina (120 mg, 20 0.33 mmoles) en DMSO (3 ml) y la mezcla se calentó a 80-90X durante 1 hora. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (2 x) y los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con agua (x 3) y salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por fc¿i?¿i4¿«^^?ii_??i¿?í=^Mtó^^fe¡y|?a^^^^? « i __ ?báüi? cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 80:20:5) como eluyente para dar el producto deseado en forma de un sólido pegajoso blanquecino. Este material se disolvió en MeOH, se añadió una solución HCl en Et20 (1 M) y los disolventes se evaporaron al 5 vacío. El residuo se recristalizó en MeOH para dar el clorhidrato de 4-cloro-1- guanidino-7-{[(2R)-(hidroximetil)-1-pirrolidinil]sulfonil}isoquinolina (43 mg, 0.10 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 275-276, 5X 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.5-1.65 (2H, m), 1.8-1.95 (2H, m), 3.25- 10 3.35 (2H, m), 3.45-3.55 (1 H, m), 3.6-3.65 (1 H, m), 3.7-3.85 (2H, m), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 383 (MH+), 405 (MNa+), 767 (M2H+). Análisis encontrado: C, 42.36; H, 4.54; N, 16.14. Calculado para C15H18CIN503S -0,^01-0,25^0: C, 42.41 ; H, 15 4.63; N, 16.49.

EJEMPLO 34 (a) Ester metílico del ácido 1-{f(4-c!oro-1-quanidino-7- ¡soquinoliniDsulfoninaminolísobutírico (b) Clorhidrato del ácido 2-{f,4-cloro-1-guanidino-7- isoguinolinil)sulfoninam¡no)¡sobutírico Se añadió en una porción NaH (32 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.07 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (167 mg, 1.7 mmoles) en DMSO (5 ml) y la mezcla se calentó a 50X bajo N durante 20 minutos. Se añadió en una porción éster metílico del ácido 1-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-amino)isobutírico (161 mg, 0.43 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante 6.5 h. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 100, 2 x 25 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía repetida en columna sobre gel de sílice usando (i) CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5), (¡i) hexano-EtOAc (70:30) y después (iii) CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:0.1 ) como eluyente para dar el producto en forma de un aceite amarillo. La trituración con Et20 dio el éster metílico del ácido 1-{[(4-cloro-1-guanidíno- 7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}isobutírico (23 mg, 0.054 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf > 170X (desc). 1H (CD3OD, 300 MHz) d 1.4 (6H, s), 3.5 (3H, s), 8.15-8.25 (3H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 400, 402 (MH+) Análisis encontrado: C 44.02; H, 4.65; N, 16.29. Calculado para C?5H18CIN504S -0,9^0-0,1 i-Pr20: C, 43.95; H, .01 ; N, 16.43. Se añadió una solución de NaOH (1 ml, 2 M, 2 mmoles) a una solución del éster metílico del ácido 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinol¡n¡l)sulfonil]am¡no}¡sobutír¡co (16.5 mg, 0.041 mmoles) en MeOH (0.5 ml) y la mezcla se calentó a 40-50X durante 16 h. La mezcla enfriada se neutralizó con HCl diluido (0.5 ml, 2 M) para dar un precipitado. El sólido se recogió por filtración, se lavó con abundante agua y después se disolvió en HCl concentrado. Los disolventes se evaporaron al vacío evaporando azeotrópícamente con PhMe, y después se secaron a alto vacío para dar clorhidrato del ácido 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}- isobutírico (12 mg 0.026 mmoles) en forma de un sólido de color crema pálido pf 258X (desc). 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.45 (6H, s), 8.4 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 386, 388 (MH+) Análisis encontrado: C, 37.89; H, 4.33; N, 15.18. Calculado para C14H16CIN5?4S -1 ,0HCI-1 ,5H2? 0,05Et2O: C, 37.65; H, 4.56; N, 15.46.

EJEMPLO 35 Clorhidrato de 2-(r(4-cloro-1-guanidíno-7-isoquino!inil,-sulfonillaminol-2-metilpropanamida Se añadió en una porción NaH (41 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.36 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (210 mg, 2.2 mmoles) en DMSO (10 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 23X durante 30 minutos. Se añadió en una porción 2{[(1 ,4-dícloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-2-metilpropanam¡da (225 mg, 0.50 mmoles) y la mezcla se calentó a 90X durante 8 horas. La mezcla enfriada se concentró &^^^ ¡j parcialmente al vacío y el residuo se vertió en agua. La solución acuosa se extrajo con EtOAc (x 4) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y con salmuera y se secaron (MgS0 ). Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el producto deseado. Este material se disolvió en MeOH y se trató con una solución de HCl en Et20 (1.0 ml, 1 M) para producir el clorhidrato de 2-{[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]am¡no}-2-metilpropanamida (86 mg, 0.188 mmoles) en forma de polvo blanquecino. pf 279-281 X 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1.6 (6H, s), 8.35 (1 H, s a), 8.4 (1 H, s), 8.55 (1 H, s), 9.1 (1 H, s a) ppm. LRMS 385, 387 (MH+) Análisis encontrado: C, 39.68; H. 4.81 ; N, 18.18. Calculado para d4H?7CIN6O3S -1 ,0HCI -1.2MeOH: C, 39.71 ; H, 5.00; N, 18.28. ^¿^^á^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ g ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ EJEMPLO 36 í_l 1 -{f(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soguinol¡nil)sulfonil1amino)ciclobutanocarboxilato de etilo (b) Clorhidrato del ácido 1-([(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfon¡11amino}ciclobutanocarboxílico Se añadió en una porción NaH (37 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.24 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (189 mg, 1.98 mmoles) en DMSO (6 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió 1-{[(4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclobutanocarboxilato de etilo (200 mg, 0.50 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80X durante 10 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (50:50 a 0:100) como eluyente para dar 1-{[(4-cloro-1- "^sa*a^ Í ___?_. jßgate^^^^*sá^^^^^ guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclobutanocarbox¡lato de etilo (150 mg, 0.34 mmoles) en forma de un polvo amarillo. pf 165-169X 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.0 (3H, t), 1.6-1.8 (2H, m), 2.05-2.2 5 (2H, m), 2.25-2.4 (2H, m), 3.8 (2H, q), 7.0-7.4 (4H, a), 8.05 (2H, s), 8.1 (1 H, s), 8.6 (1 H, s), 9.5 (1 H, s) ppm. LRMS 426, 428 (MH+). Análisis encontrado: C, 46.62; H, 4.62; N, 15.82. Calculado para C17H2oCIN504S •0,25CH2CI2; C, 46.45; H, 4.63; N, 10 15.70. Se añadió una solución de NaOH (5 ml, 2 M, 10 mmoles) a una solución de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfoníl]amino}ciclobutanocarboxilato de etilo (100 mg, 0.23 mmoles) en MeOH (5 ml) y la mezcla se calentó a 55X durante 6 horas. La 15 mezcla enfriada se neutralizó con HCl diluido (5 ml, 2 M) para dar un precipitado y el MeOH se evaporó al vacío. El sólido se recogió por filtración lavando con abundante agua, y se secó bajo alto vacío para dar el clorhidrato del ácido 1-{[(4-cloro-1-guanidíno-7- ¡soquinolinil)sulfonil]amino}ciclobutanocarboxílico (15 mg, 0.33 mmoles). 20 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.65-1.8 (2H, m), 2.05-2.2 (2H, m), 2.25-2.4 (2H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35-8.7 (4H, a), 8.5 (1H, s), 8.7 (1 H, s), 8.95 (1 H, s), 11.0 (1 H, a), 12.5 (1 H, a) ppm. Análisis encontrado: C, 40.06; H, 4.34; N, 15.09.

Calculado para C15Hi6CIN5O4S -1 ,0HCI-1 ,0H2?: C, 39.83; H, 4.23; N, 15.48.

EJEMPLO 37 (a) Ester etílico de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolinil.sulfoníllcicloleucina (b) ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7-¡soqu¡nolinil)sulfonil]cicloleucina (c) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -quanidino-7-isoquinoliniDsulfonitlcicloleucina Se añadió por porciones NaH (1.12 g, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 37.3 mmoles) a una suspensión agitada de clorhidrato de guanidina (5.85 g, 59.4 mmoles) en DMS (320 ml) y la mezcla se calentó a 30-50X bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió éster etílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfon¡l]cicloleuc¡na (6.2 g, 14.9 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80X durante 8 horas. La mezcla enfriada se ..___^__>.-tt_ «__» . _», BUBÉ_____ll___i concentró al vacío hasta aproximadamente 160 ml y se vertió en agua (800 ml). La mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 150 ml) y los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con agua y con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en 5 columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente y después se recristalizó en EtOAc para dar el éster etílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinol¡nil)sulfonil]ciclo-leucina (1.43 g, 3.25 mmoles) en forma de un sólido amarillo, pf 225-226X 10 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.1 (3H, t), 1.35-1.45 (2H, m), 1.45-1.5 (2H, m), 1.85-1.95 (4H, a), 3.9 (2H, q), 7.1-7.35 (4H, a), 8.0 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 440, 442 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.02; H, 4.97; N, 15.61. 15 Calculado para C18H22CIN504S: C, 49.14; H, 5.04; N, 15.92. Se añadió una solución de NaOH (75 ml, 2 M, 150 mmoles) a una solución de éster etílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]cicloleucina (1.39 g, 3.16 mmoles) en MeOH (75 ml) y la mezcla se calentó a 40-50X durante 24 horas. La mezcla enfriada se 20 neutralizó con HCl diluido (75 ml, 2 M) para dar un precipitado y el MeOH se evaporó al vacío. El sólido se recogió por filtración, lavando con abundante agua y se secó bajo alto vacío para dar ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- __. .. . — - ..,____jfr___-¡_-..„__... _^__ _-1É^,.... ,. _^. ^^^H |g^^i¡j| isoquinolin¡l)sulfonil]c¡cloleuc¡na (1.27 g, 3.08 mmoles) en forma de un polvo blanco. Análisis encontrado: C, 46.60; H, 4.39; N, 16.66. Calculado para C16H18CIN504S: C, 46.66; H, 4.41 ; N, 17.00 5 Se disolvió ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfoníl]cicloleucina (8 mg) en CF3C02H (aproximadamente 1.0 ml) y la mezcla se evaporó al vacío, evaporando azeotrópícamente con PhMe. El residuo se trituró con /'-Pr20 y Et20 para dar un sólido blanco. El sólido se disolvió en MeOH, se filtró y el filtrado se evaporó al vacío para dar 10 trifluoroacetato de /V-[(4-cloro-1-guanidino-7-ísoqu¡nolinil)sulfonil]-cicloleucina (12 mg). pf >178X (desc). 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.3-1.45 (2H, m), 1.45-1.55 (2H, m), 1.85-1.95 (4H, a), 8.25-8.6 (4H, a), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.85 15 (1 H, s), 10.8 (1 H, a), 12.4 (1 H, a) ppm. LRMS 412, 414 (MH+). Análisis encontrado: C, 39.50; H, 3.62; N, 11.50. Calculado para C16H?8CIN5?4S -1 ,0CF3CO2H-1 ,0H2O: C, 39.75; H, 3.89; N, 12.88.

^^^J^^^^^^ ?^^^^^^>^^^^^^^^dj?^^^^^^^^^^^^^^^^^ga»g ~i^^ß __gHg ^^^^^^^^^^^___^^g^^^^^^^^*^^^^^^^^^^ EJEMPLO 38 Clorhidrato de 1 -{[ ,4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡l]am¡no)-N-(2-hidroxíetil)c¡clopentanocarboxam¡da Se añadieron (COCI)2 (60 µ\, 0.67 mmoles) y después DMF (3 gotas) a una suspensión agitada de clorhidrato de N-[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolinil)sulfonil]c¡cloleuc¡na (150 mg, 0.334 mmoles) en CH2CI2 (15 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 30 minutos. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe, para dar el correspondiente cloruro de ácido. Este material se redisolvió en CH2CI2 (15 ml) y se añadió a una solución agitada de 2-hidroxietilamina (400 µ\) en CH2CI2 (15 ml) y la mezcla se agitó durante 1 hora. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol¡n¡l)sulfon¡l]amino}-?/-(2- hidroxietil)c¡clopentanocarboxamida. Este material se disolvió en EtOAc-EtOH y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) que dio un precipitado. Los disolventes se decantaron y el sólido se trituró con Et20, se recogió por filtración y se secó para dar el clorhidrato de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfoníl]amino}-?/-(2-h¡droxiet¡l)ciclopentanocarboxamida (77 mg, 0.155 mmoles) en forma de un sólido blanco, pf 244-246X. 5 1H (CD3OD, 300 MHz) d 1.35-1.5 (2H, m), 1.5-1.65 (2H, m), 1.85- 2.0 (2H, m), 2.0-2.15 (2H, m), 3.1-3.2 (2H, m) 3.5-3.65 (2H, m), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 455 (MH+), 477 (MNa+) Análisis encontrado: C, 43.63; H, 5.03; N, 16.65. 10 Calculado para C18H23CIN6O4S -1 ,0HCI 0,25H2O: C, 43.60; H, 4.98; N, 16.95. ***. ,...^...^.. _____«___«_____ ^ g g gg^ __*__«_____t«»_¿»»_M*^fca^-. _. ^^ gi f EJEMPLO 39 (a) 1 -([(4-Cloro-1 -quanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]amino)-?/-.2- (dimetilamino)etillciclopentanocarboxamida íb? Diclorhidrato de 1 -iT(4-cloro-1 -quanidino-7- isoquinol¡n¡l)sulfonipamino)-?/-[2-(dimetilamino)et¡nc¡clopentanocarboxamida Se añadió una solución de HCl en Et20 (0.5 ml, 1 M) a una solución agitada de ?/-[(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoquinol¡n¡l)sulfon¡l]cicloleuc¡na (100 mg, 0.243 mmoles) en MeOH. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo evaporó azeotrópicamente con PhMe para dar la correspondiente sal clorhidrato. Se añadieron (COCI)2 (42 µ\, 0.48 mmoles) y después DMF (2 gotas) a una solución agitada de clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 20 isoquinolinil)sulfonil]c¡cloleucina (0.243 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 18 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió en CH2CI2 (5 ml), se añadió 2-(dimetilamíno)etilamina (60 µ\, 0.48 mmoles) y la mezcla se agitó durante 3 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se dividió entre EtOAc y NaHC03 acuoso (10%). La fase orgánica se secó y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) como eluyente para dar 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- 5 ¡soquinolinil)sulfonil]amino}-?/-[2-(dimetilamino)etil]-ciclopentanocarboxamida. LRMS 482 (MH+) Este material se disolvió en EtOAc, se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) y los disolventes se evaporaron al vacío para dar el diclorhidrato de 1 {[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfoníl]amino}-?/-[2- 10 (dimetilamino)et¡l]ciclopentanocarboxamida (28 mg, 0.048 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1.5 (2H, s a), 1.7 (2H, s a), 2.1 (4H, s a), 3.2 (6H, s), 3.7 (2H, s a) 4.0 (2H, s a), 7.8 (1 H, s a) 8.45 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.6 (1 H, d), 9.5 (1 H, s) ppm. 15 LRMS 482 (MH+) Análisis encontrado: C, 41.25; H, 5.63; N, 15.59. Calculado para C20H28CIN7O3S -2,0HCI -1 ,5H2O: C, 41.28; H, 5.72; N, 16.85. .-a__^_J^____. _. _________,__.^.^ .„.*___~^__ _.______,._ _ . . __ _.__ . . ...______fe__________^~.- — , - A ..._;__^__ „_ _„üa_a_ EJEMPLO 40 Clorhidrato de 4-cloro-1 -guanidino-?/-f 1 -(hidroximetiDcíclopentil]-7-isoguinolinosulfonamida Se añadió en una porción NaH (30 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.0 mmol) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (157 mg, 1.6 mmoles) en DMSO (5 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 20 minutos. Se añadió 1 ,4-dicloro-?/-[1-(hidroximetil)ciclopentil]-7-isoquinolinosulfonamida (150 mg, 0.40 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80X durante 4 horas. Se añadió una segunda porción de guanidina (0.40 mmoles) [preparada a partir de clorhidrato de guanidina (38 mg) y NaH (12 mg) en DMSO (1 ml) y la mezcla se calentó a 80X durante un período adicional de 6 h. La mezcla enfriada se vertió en agua (80 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó en cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:5:2.5:0.25 a 80:20:5) como fe mtw' ma». ^¡müM*Xg ^s eluyente para dar el producto parcialmente purificado (90 mg). Este material se convirtió en la correspondiente sal clorhidrato mediante tratamiento con una solución HCl en Et20 (1 M) y después se recristalizó en EtOH para dar el clorhidrato de 4-cloro-1 -guanidino-?/-[1 -(hidroximetíl)ciclopentil]-7-isoquinolinosulfonamida (16 mg, 0.040 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 244-247X 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.4-1.55 (4H, m), 1.55-1.7 (2H, m), 1.8-1.9 (2H, m), 3.5 (2H, s), 8.4 (1 H, d) 8.45 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 398, 400 (MH+). Análisis encontrado: C, 44.17; H, 4.84; N, 15.88. Calculado para C10H20CIN5O3S-1 ,0HCI: C, 44.24; H, 4.87; N, 16.12. >-. _*.?36 ?j g¿<¡.« - -a£,jar «. ., ___«, ^^^ggl^ ^|^^g?^^[ ^^(^^g ¿g^ EJEMPLO 41 (a) Diclorhidrato del éster etílico de ?/-f(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolin¡l)sulfonil]-n-f2-(dimetilamino)-etinc¡cloleuc¡na . Diclorhidrato de N-[(4-cloro-1 -quanidino-7- isoquinolinil)sulfonin-N-[2-(dimetilam¡no)etil1-cicloleucina Se añadió en una porción NaH (32 mg, dispersión al 80% en 15 peso en aceite mineral, 1.05 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (145 mg, 1.52 mmoles) en DMSO (4 ml) y la mezcla se calentó a 50X bajo N2 durante 20 minutos. Se añadió en una porción clorhidrato del éster etílico de ?/-[(1 ,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]-N-[2- (dimetilamino)etil]cicloleucina (160 mg, 0,305 mmoles) en una porción y la 20 mezcla se calentó a 90X durante 1 hora. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20, se filtró y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) que dio un precipitado. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se recristalizó en EtOH caliente para dar el diclorhidrato del éster etílico de N-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-N-[2- (dimetilamino)etil]cicloleucina (123 mg, 0,20 mmoles) en forma de un sólido 5 amarillo pálido. pf 228-230°C. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1 ,45 (3H, t), 1 ,7 (2H, s a), 1 ,9 (2H, s a), 2,2 (2H,s a), 2,5 (2H s a ), 3,3 (6H, s), 3,75 (2H,s a), 4,3 (2H, s a), 4,4 (2H, q), 8,15 (1 H, s a), 8,4 (1 H, d), 8,5 (1 H, s), 8,65 (1 H, d), 9,35 (1 H, s) ppm. 10 LRMS 511 , 513 (MH+). Análisis encontrado: C, 43,74; H, 5,88; N, 13,75. Calculado para C22H31CIN604S • 2.0HCI • 1 ,0H2O: C, 43,90; H, 5,86; N, 13,96. Se añadió una solución de NaOH (5 ml, 5 M) a una solución del 15 clorhidrato del éster etílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]- N-[2-(dimetilam¡no)etil]cicloleucina (75 mg, 0,128 mmoles) en dioxano (5 ml) y la mezcla se calentó a 80X durante 30 horas. La mezcla enfriada se diluyó con agua (20 ml), el dioxano se evaporó al vacío y el residuo acuoso se neutralizó con HCl diluido (2 M) hasta pH 6. El precipitado se recogió por 20 filtración lavando con agua y después se disolvió en MeOH, se filtró y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0,880 (90:10:1 a 80:20:5) como eluyente para dar el producto deseado. Este material se disolvió en MeOH- _=_¿___£¿_______md______M__l___Í ^^mm^»^ EtOAc, se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se trituró con EtOAc para dar el diclorhidrato de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]-N-[2-(dimetilamino)-etil]cicloleucina (15,4 mg, 0,025 mmoles). 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1 ,7 (2H,s a), 1 ,9 (2H, s a), 2,2 (s a), 2,6 (2H, s a), 3,25 (6H, s), 3,8 (2H, s a), 4,3 (2H, s a), 8,1 (1 H, s a), 8,4 (1 H, d), 8,5 (1 H, s), 8,65 (1 H, d), 9,4 (1 H, s) ppm. LRMS 483 (MH+). Análisis encontrado: C, 39,03; H, 5,60; N, 14,02. Calculado para C2oH27CIN604S • 2HCI • 3H20: C, 39,38; H, 5,78; N, 13,78. - _-.-^*_¿s_?__. — . — , ._ -, — ,,___.__.„.-_. ...:*¿ii Bm¡mÉ?É ák£?jfi¡g^ EJEMPLO 42 Ester etílico de N-(t-butoxicarbon¡lmetil)-N-r(4-cloro-1-quanídino- 7-isoquinolinil)sulfonil]cicloleucina Se añadieron K2C03 anhidro (34 mg, 0,25 mmoles) y bromoacetato de t-butilo (44 µl, 0,30 mmoles) a una solución agitada de éster etílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]cicloleucina (110 mg, 0,25 mmoles) en DMF (1 ,0 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 18 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (60 ml), se lavó con agua (3 x 100 ml), se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 20:80) como eluyente para dar el éster etílico de N-(t-butoxicarbonilmetil)-N-[(4-cloro-1- 20 guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]cicloleuc¡na (95 mg, 0,17 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1,3 (3H, t), 1,45 (9H, s), 1,6-1,7 (4H, m), 1,85-1,95 (2H, a), 2,25-2,35 (2H, m), 4,2 (2H, g), 4,5 (2H, s), 8,1 (1H, d), 8,15 (1H, s), 8,3 (1H, dd), 9,3(1H, d) ppm. LRMS 554 (MH+). Análisis encontrado: C, 52,31; H, 5,94; N, 13,33. Encontrado para C22H32CIN5O6S: C, 52,03; H, 5,82; N, 12,64.

EJEMPLO 43: íal 1 -(K4-Cloro-1 -quanidino-7-isoquinolinil .sulfonil]- amino)ciclohexanocarboxilato de metilo (b) Clorhidrato del ácido 1-{[(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinoliniDsulfonillamino'.cicIohexanocarboxílíco Se añadió en una porción NaH (22,3 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 0,743 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (117 mg, 1 ,98 mmoles) en DMSO (5 ml) y la mezcla se calentó a 50-70X bajo N2 durante 25 minutos. Se añadió 1-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclohexanocarboxilato de metilo (124 mg, 0,30 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80X durante 8 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó en un mínimo de EtOAc caliente para dar 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-amino}c¡clohexanocarboxilato de metilo (12 mg, 0,043 mmoles) en forma de un sólido amarillo. La evaporación de las aguas madre y la trituración del residuo con Et20 dio una segunda recolección (7 mg). pf >220 C (desc.) 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1 ,1-1 ,35 (6H, m), 1 ,65-1 ,75 (2H, m), 5 1 ,75-1 ,85 (2H, m), 3,35 (3H,s), 7,1-7,4 (4H, a), 8,0 (1 H, d), 8,05 (1 H, d), 8,1 (1 H,s), 8,15 (1 H, s), 9,0 (1 H, s) ppm. LRMS 440, 442 (MH+) Análisis encontrado: C, 48,55; H, 5,12; N, 15,73. Calculado para d8H22CIN504S • 0,3H2O: C, 49,14; H, 5,04; N, 10 15,92. Se añadió una solución de NaOH (1 ml, 2 M, 2 mmoles) a una solución de 1-{[(4-cloro-1-guanidinio-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclohexanocarbox¡lato de metilo (12 mg, 0,027 mmoles) en MeOH (4 ml) y la mezcla se calentó a 50-60X durante 4 días. La 15 mezcla enfriada se neutralizó con HCl diluido (1 ml, 2 M) para dar un precipitado. El sólido se recogió por filtración, lavando con abundante agua, y después se trituró con EtOAc. El sólido se disolvió en HCl concentrado, los disolventes se evaporaron al vacío evaporando azeotrópicamente con PhMe, y después se secaron bajo alto vacío para dar el clorhidrato del ácido 1-{[(4- 20 cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-ciclohexanocarboxílico (11 mg, 0,021 mmoles). pf 194° (desc.) ""^~ - ~~¿ *- --^- —..-. —.- -a..-<--t.<a.-» , .. ^«-n. -. »»"^ - •*» - •«- -- .._,«_,_ **** .+*., -_ 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1,1-1,4 (6H, m), 1,6-1,8 (2H, m), 1,8- ,95 (2H, m), 8,15-8,7 (4H a), 8,2 (1H, s), 8,3 (1H, d), 8,4 (1H, d), 8,45 (1H, s), ,9 (1H, s), 10,9 (1H, a), 12,4 (1H, a) ppm. RMS 426 (MH+) Análisis encontrado: C, 39,87; H, 5,05; N, 13,16. Calculado para C17H20CIN5O4S • 1,0HCI • 3,0H2O: C, 39,54; H, ,27; N, 13,56.

EJEMPLO 44 ísL 4-{[(4-Cloro-1-quanidino-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l1- amino)tetrahidro-2H-piran-4-carboxi!ato de metilo (b) Clorhidrato del ácido 4-{[(4-cloro-1-quanid¡no-7- isoquinolin¡l)sulfoninamino)tetrahídro-2H-piran-4-carboxilico Se añadió en una porción NaH (33,5 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1 ,12 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidína (176 mg, 1 ,84 mmoles) en DMSO (3,0 ml) bajo N2 y la mezcla se calentó a 50X durante 15 minutos. Se añadió 4-{[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]am¡no}tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-carboxilato de metilo (187 mg, 0,446 mmoles) en una porción y la mezcla se calentó a 80X durante 8 h. Se añadió una segunda porción de guanidina (0,45 mmoles) [preparada a partir de clorhidrato de guanidina y NaH] en DMSO (1 ,0 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante un período adicional de 4 h. La mezcla enfriada se vertió en agua (100 ml), se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera y se secaron (MgS04). Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0,880 (95:5:0,5) como eluyente, y después se cristalizó con EtOAc, para dar 4-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}tetrahidro-2H-p¡ran-4-carboxilato de metilo (83 mg, 0,186 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 245-247X 1H (CDCI3, 400 MHz) d 3,3 (3H, s), 3,35-3,45 (8H, m), 7,1-7,4 (4H, a), 8,05 (2H, s), 8,1 (1 H, s), 8,4 (1 H, s), 9,0 (1 H, s) ppm. LRMS 442, 444 (MH+) Análisis encontrados: C, 46,18; H, 4,56; N, 15,32. Calculo para C^oCINsOsS-O^^O: C, 45,83; H, 4,62; N, 15,72. Se añadió una solución de NaOH (1 ml, 2 M, 2 mmoles) a una solución de 4-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nol¡n¡l)sulfonil]am¡no}tetrah¡dro-2H-piran-4-carboxilato de metilo (68 mg, 0,153 mmoles) en MeOH (12 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 30 h. La mezcla enfriada se neutralizó con HCl diluido (1 ml, 2 M) y se concentró parcialmente por evaporación al vacío para dar un precipitado que se recogió por filtración, lavando con agua. El sólido se extrajo con HCl concentrado caliente, la solución se decantó del material insoluble y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo sólido se evaporó azeotrópicamente con PhMe y después se secó bajo alto vacío para dar clorhidrato del ácido 4-{[(4-cloro-1-guanidino-7- .. . - * _.__^_?__ ¿>A_ -_ ¡soquinolinil)sulfonil]amino}tetrahidro-2H-piran-4-carboxilico (30 mg, 0,062 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 190-21 OX (desc.). 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 3,2-3,5 (8H, m), 8,2-8,7 (4H, a), 8,3 (1H, d), 8,4 (1H, d), 8,45 (1H, s), 8,95 (1H, s), 11,0 (1H, s a), 12,6 (1H, s a) ppm. Análisis encontrado: C, 39,76; H, 4,33; N, 14,12. Calculado para C16H18CIN5?5S-1,0HCM,1H2O: C, 39,69; H, 4,41; N, 14,47. ^ • - -— -*«*— • *aMM'MM>*ir?___??wft- -*rff— - - -*- - - ^ ^ EJEMPLO 45 (a) (±)-Cis-2-{[4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil)sulfonil1am¡no)- cic ohexanocarboxilato de t-butí o (b) Clorhidrato del ácido (±)-cis-2-([4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡l1amino)-ciclohexanocarboxílico Se añadió clorhidrato de guanidina (325 mg, 3,4 mmoles) en una porción a una suspensión agitada de NaH (89 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 2,97 mmoles) en DME (5 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N durante 30 minutos. Se añadió una solución de (±)-cis-2- {[1 ,4- d¡cloro-7-isoquínol¡nil)sulfon¡l]amino}-ciclohexanocarbox¡lato de f-butilo (391 mg, 0,85 mmoles) en DME (5 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante 6 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc, se lavó con NH CI acuoso, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando tolueno-i- PrOH-NH3 0,880 (100:0:0 a 90:10:0,05) como eluyente para dar (±)-cis-2-{[4- cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-amino}ciclohexanocarboxilato de f-butilo (75 mg, 0,15 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1 ,1-1 ,8 (7H, mm), 1 ,4 (9H, s), 1 ,95 (1 H,m), 2,55 (1 H, dd), 3,45 (1 H, s a), 5,9 (1H, d), 6,0-6,5 (4H, a), 8,05 (1 H, d), 8,1 (1 H, d), 8,15 (1 H, s), 9,3 (1 H, s) ppm. LRMS 482, 484 (MH+) 5 Se añadió CF3CO2H (3,0 ml) a una solución agitada de (±)-cis- 2-{[4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-ciclohexanocarboxilato de t-butilo (66 mg, 0,14 mmoles) en CH CI (3,0 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 6 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con CH2CI2 (x 3). El residuo se disolvió en EtOAc y se 10 añadió una solución de HCl en Et20 (200 µl, 1 ,0 M) que dio un precipitado. El sólido blanco se recogió por filtración y se secó para dar el clorhidrato del ácido (+)-cis-2-{[4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]amino}- ciclohexanocarboxílico (35 mg, 0.069 mmoles) p.f. 220-223X (desc.). 15 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.1-1.3 (3H, m), 1.4-1.6 (4H, m), 1.7- 1.8 (1 H, m), 2.5 (1 H, m), 3.75 (1 H, s a), 8.0 (1 H, d), 8.25-8.6 (4H, a), 8.35 (2H, s), 8.45 (1 H, s), 8.95 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 42.95; H, 4.96; N, 13.79. Calculado para: d7H2oCIN504S.1.0HCI.1.25H20: C, 43.1 1 ; H, 20 5.27; N, 13.81.

EJEMPLO 46 (±)-fra/7S-2-f[4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)sulfoninamino>ciclohexanocarboxilato de etilo Se añadió clorhidrato de guanidina (458 mg, 4.8 mmoles) en una porción a una suspensión agitada de NaH (90 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 2.97 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de (±)-c/s-2-{[(1 ,4- dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclohexanocarboxilato de etilo (377 mg, 0.87 mmoles) en DMA (5 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante 4 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió con EtOAc (200 ml), se lavó con NH CI acuoso (20 ml) y después con agua (500 ml) y los lavados acuosos reunidos se extrajeron con EtOAc (2 x 50 ml). Los extractos de EtOAc reunidos se lavaron con agua (4 x 100 ml), se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando tolueno-/'-PrOH-NH3 0.880 (100:0:0 a 90:10:0.05) como eluyente para dar (±)-fraps-2-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfoníl]amino}ciclohexanocarboxilato de etilo (65 mg, 0.14 mmoles) en forma de un sólido blanco. [También se aisló una pequeña cantidad de (±)-c/'s-2-{[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}- ciclohexanocarboxilato de etilo (< 20 mg)]. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.1-1.8 (6H, m), 1.1 (3H, t), 1.9 (1H, m), 2.0 (1H, m), 2.25 (1H, td), 3.45 (1H, m), 3.8-4.0 (2H, m), 8.05 (1H, d), 8.1 (1H, d), 8.15 (1H,s), 9.3 (1H,s) ppm. LRMS 454, 456 (MH+).

EJEMPLO 47 . c/s-4-{f(4-Cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil)- sulfonipamino)c¡clohexano-carboxilato de t-butilo í_l fra/.s-4-{f(4-cloro-1-quan¡dino-7-isoquinolinil)- sulfoninamíno)ciclohexano-carboxilato de t-butilo (c) Clorhidrato del ácido c/s-4-([,4-cloro-1-quanidino-7- 10 ¡soqu¡nolinil)sulfoninamino)ciclohexano-carboxílico Se añadió clorhidrato de guanidina (286 mg, 3.0 mmoles) en una porción a una suspensión agitada de NaH (56 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.82 mmoles) en DME (5 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N durante 30 minutos. Se añadió una solución de cis-4-{[(1 ,4-dicloro-7- 20 isoquinolinil)sulfonil]amino}-c¡clohexanocarboxilato de t-butilo (346 mg, 0.75 mmoles) en DME (15 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante 2 horas. Se añadió una segunda porción de guanidina (0.75 mmoles) [preparada a partir de clorhidrato de guanidina (72 mg) y NaH (22 mg)] en DME (5 ml) y la mezcla ^^^^^^^^j^^^^^^H^j ^^l^^^^^^^ -¿^^- -^•^¡¡¡¡11 , l " ll ^- - -' «aaa-M*^*»^ se calentó a 90X durante 1 hora. Después se añadió DMA (10 ml) a la mezcla de reacción heterogénea y la mezcla ahora homogénea se calentó durante un período adicional de 6 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se inactivo con NH4CI acuoso (10 ml), se diluyó con agua (150 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 150 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua (100 ml), se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía repetida en columna sobre gel de sílice usando (i), pentano-EtOAc (100:0 a 25:75) y después (¡i), PhMe-EtOAc (50:50 a 0:100) como eluyente para dar c/'s-4-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-ciclohexanocarboxilato de t-butilo (247 mg, 0.51 mmoles). (También se aisló una pequeña cantidad de fra/7s-4-{[(4-cloro-1-guan?dino-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]am¡no}-ciclohexanocarboxilato de t-butilo (20 mg)]- 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.5-1.8 (8H, mm), 2.3 (1 H, m), 3.4 (1 H, m), 4.8-4.9 (1 H, a), 6.1-6.55 (4H, a), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.15 (1 H, s), 9.3 (1 H, s) ppm. LRMS 482 (MH+), 963 (M2H+). Análisis encontrado: C, 52.14; H, 5.92; N, 14.19. Calculado para C2.H28CIN504S: C, 52.33; H, 5.86; N, 14.53. Se suspendió c/s-4-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclohexanocarboxilato de t-butilo (55 mg, 0.121 mmoles) en una solución de EtOAc saturado con HCl (50 ml) y la mezcla se calentó a reflujo. La mezcla se enfrió, el sólido blanco se recogió por filtración ».-__»_ fag___..,..__ , lavado con EtOAc y después se secó para dar el clorhidrato del ácido c/'s-4- {[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfonil]am¡no}ciclohexanocarboxíl¡co (110 mg, 0.236 mmoles). pf 287-289X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.5-1.6 (6H, m), 1.8-1.9 (2H, m), 2.35 (1 H, m), 3.4 (1 H, m), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 43.88; H, 4.61 ; N, 14.69. Calculado para C17H2oCIN504S-1.0HCI-0.2H2?: C, 43.82; H, 4.63; H, 15.03. _M_____a____i fAfa"-— -fc- - - "^**^**—— --* ._*_-... ..^..i»,. ..

EJEMPLO 48 íal frans-4-([(4-Cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil)- sulfonillaminojciclohexano carboxilato de etilo (b) Clorhidrato del ácido frans-4-(f(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinoliniDsulfoniHaminolcicIohexano carboxílico Se añadió en una porción clorhidrato de guanidina (273 mg, 2.86 mmoles) a una suspensión agitada de NaH (55 mg, dispersión al 80% en peso en aceite mineral, 1.82 mmoles) en DME (10 ml) y la mezcla se calentó a 60X bajo N2 durante 30 minutos. Se añadió una solución de trans-4-{[{ 1 ,4- dicloro-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-ciclohexanocarbox¡lato de etilo (370 mg, 0.78 mmoles) en DMA (10 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante 3 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se dividió entre Et20 (100 ml), NH4CI acuoso (10 ml) y agua (150 ml). La fase acuosa separada se extrajo con E-2O (3 x 100 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando tolueno-/-PrOH-NH3 0.880 (100:0:0 a ^Sj^^^^^^^^^^^^^5|tf ájfihg^^^^j^MJk r^ tfQpmk~**.^. *. 90:10:0.05) como eluyente para dar trans-4-{[(4-cloro-1-guanidíno-7-isoquinol¡nil)sulfonil]amino}c¡clohexanocarboxilato de etilo (70 mg, 0.15 mmoles). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.1 (3H, s), 1.1-1.3 (4H, mm), 1.6 (2H, d a), 1.8 (2H, d a), 2.1 (1 H, m), 2.9 (1 H, m), 3.95 (2H, q), 7.1-7.4 (4H, a), 7.8 (1 H, d), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRSM 454, 456 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.27; H, 5.32; N, 15.43. Se añadió una solución de HCl (5 ml, 2 M, 10 mmoles) a una solución de trans-4-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]amino}ciclohexanocarboxilato de etilo (55 mg, 0.121 mmoles) en dioxano (5.0 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de MCI (CHP 20P) usando agua-MeOH (100:0 a 20:80) como eluyente para dar ácido trans-4-{[(4-cloro-1-guanidíno-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-amino}ciclohexanocarboxílico. Este material se disolvió en HCl diluido (20 ml, 0.1 M), los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el clorhidrato del ácido frans-4-{[(4-cloro- 1-guanídino-7-¡soquinolin¡l)sulfonil]amino}ciclohexanocarboxílico (35 mg, 0.067 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf >205X (desc).

"*«F«^^-^_^ ^^B^fc______ftjtt^ff**t*-**'^^a|J'8*''r'J - *!*****- - " 1**- ItífS&cJUa? 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.2-1.4 (4H, mm), 1.8 (2H, d a), 1.9 (2H, d a), 2.1 (1 H, m), 3.1 (1 H, m), 8.3 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 8.9 (1 H, s), ppm. Análisis encontrado: C, 42.75; H, 5.04; N, 13.35. Calculado para C?7H20CIN5O4S 1.0HCM .5H2O 0.4Et2O: C, 43.04; H. 5.44; N, 13.49.

EJEMPLO 49 (a) Ester f-butílico de ?/-f(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinoüniDcarbonipqlicina . Trifluoroacetato de ?/-f(4-cloro-1 -quanidíno-7- ¡soquinolinil)carbon¡pqlicina 15 Se añadió NaH (34 mg, dispersión al 60% en peso en aceite mineral, 0.85 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidína (80 mg, 0.84 mmoles) en DMSO (2 ml) a 23X. después de 30 minutos, se añadió éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]gl¡cina (120 mg, 0.34 mmoles) y la solución resultante se calentó a 90X durante 21 horas. Tras la refrigeración, la mezcla se vertió en agua (30 ml), se extrajo con EtOAc y después con CH2CI2 y los extractos orgánicos reunidos se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carbon¡l]gl¡c¡na (25 mg, 0.07 mmoles) en forma de una goma amarilla. LRSM 378 (MH+), 756 (M2H+). Se agitó una solución del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]glicina (24 mg, 0.06 mmoles) en CF3CO2H (0.5 ml) a 0X durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe, y el residuo se trituró con Et20 para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carboníl]gl¡c¡na (21 mg, 0.05 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf >300X. H (TFA-d, 400 MHz) d 4.6 (2H, s), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.6 (1 H, d), 9.3 (1 H, s) ppm. LRMS 322 (MH+). Análisis encontrado: C, 40.60; H, 2.91 ; N, 15.47. Calculado para C13H12CIN5?3 CF3C02H: C, 40.58; H, 2.93; N, 15.46. ! ÉtÉÉi____rf?_ffmif*? --iM__iii _ÍÉII _1______É_- t fiTimpA - - EJEMPLO 50 (a) Ester f-butilico de ?/-r(4-cloro-1-Quanidino-7- isoguinolin¡l)carbonil1-ß-alanina (b) ?/-f(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)carbon¡n-ß-alanina Se añadió por porciones NaH (114 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 2.85 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (272 mg, 2.85 mmoles) en DMSO (8 ml) y la solución se calentó a 80X durante 20 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolin¡l)carbon¡l]-ß-alan¡na (420 mg, 1.14 mmoles) y la mezcla se calentó a 90X durante una noche. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera saturada, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó en /'-Pr20-CH2Cl2 para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil)-carbonil]-ß-alanina (190 mg, 0.48 mmoles). pf 224-226X 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 2.55-2.5 (2H, m), 3.5 (2H, dt), 7.0-7.3 (4H, s a), 7.85 (1 H, d), 8.0 (1 H, s), 8.1 (1 H, d), 8.65 (1 H, t), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 392 (MH+), 783 (M2H+) 5 Análisis encontrado: C, 54.89; H, 5.68; N, 17.94. Calculado para C?8H22CIN503: C, 55.17; H, 5.66; N, 17.87. Una solución del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanídino-7- isoquinolinil)carboníl]-ß-alanina (145 mg, 0.37 mmoles) en CF3C02H (1.5 ml) se agitó a 0X durante 30 minutos y después a temperatura ambiente durante 10 1 hora. Se añadió PhMe (15 ml), la mezcla se evaporó al vacío y el residuo se trituró con EtOAc y Et20 para dar ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carboníl]-ß-alanina (117mg, 0.26 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 235-236X 15 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 2.6 (2H, t), 3.55 (2H, dt), 8.25 (1 H, d), 8.35-8.4 (2H, m), 8.5 (4H, s a), 8.8-8.9 (2H, m) ppm. LRSM 336 (MH+). Análisis encontrado: C, 42.72; H, 3.56; N, 14.55. Calculado para C?4H14CIN5O2 0.25EtOAc: C, 42.75; H, 3.57; N, 20 14.49. gg feAX >* & *k EJEMPLO 51 (a) Ester etílico de ?/-f(4-cloro-1-quanídino-7- isoqu¡nolinil)carbonil]cicloleucina (b) ?/-[(4-cloro-1-quanid¡no-7-isoquinol¡n¡l)-carbon¡Hcicloleucina Se añadió NaH (45 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 1.13 mmoles) a f-BuOH y la mezcla se calentó a 50X durante 15 minutos. Se añadió clorhidrato de guanidina (105 mg, 1.10 mmoles) y la mezcla se calentó a 50X durante un período adicional de 15 minutos. Se añadió éster etílico de ?/-[(1 ,4-dícloro-7-¡soquinolinil)carbonil]cicloleuc¡na (350 mg, 0.92 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante 17 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente seguido por trituración con CH2CI2-/-Pr2?, para dar el éster etílico de ?/-[(4-cloro-1- guanidíno-7-isoquinolinil)carbonil]cicloleucina (55 mg, 0.14 mmoles) en forma de polvo amarillo pálido.

H (CDCI3, 400 MHz) d 1.0 (3H, t), 1.5-1.65 (4H, m), 1.8-2.0 (2H, m), 2.0-2.15 (2H, m), 3.9 (2H, q), 6.7 (4H, s a), 7.5 (1H, s), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, s), 7.9 (1 H, d), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 404(MH+). Análisis encontrado: C, 55.94; H, 5.42; N, 16.94. Calculado para C19H22CIN3O3-0.25H2O: C, 55.87; H, 5.55, N, 17.14. Una solución parcialmente heterogénea del éter etílico de ?/-[(4- cloro-1-guanidino-7-isoquinoliníl)-carbonil]cicloleucina (45 mg, 0.11 mmoles) en dioxano (1.5 ml) se agitó con NaOH acuoso (1 ml, 2 M) durante 2.5 horas a 23X. se añadió HCl diluido (1 ml, 2 M) para dar una suspensión de color crema. El sólido se recogió por filtración y se secó al vacío para dar ?/-[(4- cloro-1-guanidíno-7-isoqu¡nolinil)carbon¡l]c¡cloleucina (40 mg, 0.11 mmoles) pf >275X. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1.9-2.1 (4H, m), 2.2-2.4 (2H, m), 2.5-2.7 (2H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 9.25 (1 H, s) ppm. LRMS 376 (MH+), 751 (M2H+). Análisis encontrado: C, 51.67; H, 4.92; N, 17.39. Calculado para C17H18CIN5?3-H20: c, 51.84; H, 5.11 ; N, 17.78.

EJEMPLO 52 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidíno-7- isoquinol¡ní!)carbon¡p-DL-fen¡lqlic¡na (b) Trifluoroacetato de ?/-f(4-cloro-1 -quanidino-7- isoquinolin¡l)carbonil1-DL-fenilqlicina Una mezcla de clorhidrato de guanidina (326 mg, 3.41 mmoles) y NaH (137 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 3.43 mmoles) en DMSO (5 15 ml) se calentó hasta 70X, se añadió una solución de éster f-butílico de N- [(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolinil)carbon¡l]-DL-fen¡lglícina (590 mg, 1.37 mmoles) en DMSO (3 ml) y la mezcla se calentó a 80-90X durante una noche. Tras la refrigeración, la mezcla de reacción se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua, se 20 secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. La purificación del residuo por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2Cl2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente, seguido por cristalización en /'-Pr20, dio el _«fe__IÉ__l_^i__íí&__fk^_ lÍilfttl_ll^«UH__? -Tr XIGÉIMI. ÍÉT___ -? éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoquinol¡n¡l)carbonil]-DL- fenilglicina (1 10 mg, 0.24 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. pf 158X (espuma), 170X (desc.). 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 6.5 (4H, s a), 5 7.25-7.4 (3H, m), 7.4-7.5 (3H, m), 8.05 (1 H, d), 8.10 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 9.2 (1 H, d) ppm. LRMS 454 (MH+). Análisis encontrado: C, 61.53; H, 5.96; N, 14.27. Calculado para C23H24CIN5O3 O.3 /-Pr20: C, 61.53; H, 5.92; N, 10 14.27. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilglicina (100 mg, 0.22 mmoles) en CF3C02H (1.5 ml) se agitó a 0X durante 30 minutos y después a 23X durante 1 h. la mezcla de reacción se diluyó con PhMe (15 ml) y se evaporó al vacío. La 15 goma residual se trituró con EtOAc y después con Et20 y el sólido blanco resultante se secó al vacío para dar trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilglicina (50 mg, 0.10 mmoles). 1H (DMSO-d6) 300 MHz) d 5.6 (1 H, d), 7.3-7.45 (3H, m), 7.55(2H, d), 8.2 (1 H, d), 8.2-8.4(5H, m), 8.45(1 H, d), 8.95(1 H, s), 9.4(1 H, d) ppm. 20 LRMS 398 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.72; H, 3.68; N, 14.04. Calculado para C.9H16CIN5?3-0.95CF3CO2H: C, 49.27; H, 3.35; N, 13.68. - '-"*- -*--- • -**¿-*»*« ^y^i^ ^^jj ^u¡|&| .a.Mfe, ..,.J . ?.Ae-i..

EJEMPLO 53 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoguinolinil)carbon¡n-L-fenilglicina ib! Trifluoroacetato de ?/-f (4-cloro-1 -guanídino-7- isoguinolin¡l)carbon¡l]-L-fenilqlicina Se añadió NaH (38 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.27 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanídina (121 mg, 1.27 mmoles) en DMSO (4 ml) a 23X, y ala mezcla se calentó a 80-85X durante 15 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolin¡l)- carbonil]-L-fenilglicina (218 mg, 0.51 mmoles) y la mezcla se calentó a 85X durante 4 horas. La solución enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (x 3). Los orgánicos reunidos se lavaron con salmuera saturada, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con /'-Pr20 para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-L- fenilglicina (55 mg, 0.12 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido, pf 147X (desc.). tó|¡g^ ¿j^^í^^^g^^^^^^^ .» M___M l-_ft -*_>— _ 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 6.2-6.8 (4H, s a), 7.3-7.4 (3H, m), 7.45-7.5 (3H, m), 8.0-8.1 (2H, m), 8.15-8.2 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+), 907 (M2H+). 5 Análisis encontrado: C, 61.22; H, 6.01 ; N, 13.91. Calculado para C23H2.CIN5PO3O.4 /'-Pr20: C, 61.21 ; H, 6.07; N, 14.05. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolin¡l)carbonil]-L-fenilglicina (40 mg, 0.09 mmoles) en CF3CO2H (1 ml) 10 se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con EtOAc para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-L- fenilglicina (32 mg, 0.06 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 163X (encogimientos), >200X (desc.). 15 1H (TFA-d, 400 MHz) d 5.85 (1 H, s), 7.35-7.4 (3H, m), 7.4-7.45 (2H, m), 8.25 (1 H, d), 8.3 (1 H, s), 8.4 (1 H, d), 9.15 (1 H, s) ppm. LRMS 398 (MH+), 795 (M2H+). Análisis encontrado: C, 48.28; H, 3.74; N, 13.57. Calculado para C19H16CIN5O3 CF3CO2H 0.5H2O: C, 48.43; H, 20 3.48; N, 13.45.

EJEMPLO 54 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)carbonil1-D-fenilglicina . Trifluoroacetato de ?/-r(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soguinolinil)carbon¡ll-D-fenilglic¡na Se añadió NaH (30 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.0 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (97 mg, 1.0 mmoles) en DMSO (3 ml) y la solución se calentó hasta 80X durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbon¡l]-D-fen¡lgl¡cina (175 mg, 0.41 mmoles), la mezcla se calentó a 85X durante 3.5 horas y después a 23X durante una noche. La mezcla se vertió en agua (25 ml), se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml), y los orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente, seguido por cristalización en CH2CI2-/'-Pr20 _________________ ._¿_____. _~ *¡maá*&*«*¡>*.jabl.,w para dar el éster f-butílíco de ?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-¡soquinol¡nil)carbonil]- D-fenilglicina (37 mg, 0.08 mmoles)en forma de un sólido. pf 154-156X (desc.). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 7.3-7.4 (3H, m), 7.4-7.5 (3H, m), 8.05 (1 H, d), 8.05 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+), 907 (M2H+). Análisis encontrado: C, 61.15; H, 6.00; N, 13.87. Calculado para C23H24CIN5O3-0.45 /-Pr2O 0.2H2O. C, 61.31 ; H, 6.15; N, 13.91. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carbonil]-D-fenilglicina (40 mg, 0.09 mmoles) en CF3C02H (0.5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoqu¡nolinil)carbonil]-D- fenilglicina (21 mg, 0.04 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 222X (desc). 1H (TFA-d, 400 MHz) d 5.9 (1 H, s), 7.4-7.5 (3H, m), 7.5-7.55 (2H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.4 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 398 (MH+), 795 (M2H+). Análisis encontrado: C, 49.02; H, 3.42; N, 13.26. Calculando para C19H?6CIN503 CF3CO2H 0.25 H20: C, 48.85; H, 3.42; N, 13.56. •'.i , n?-t^^--432-^^-- --j.¡m* __._. ... . ~¿.

EJEMPLO 55 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoguínolinil)carbonin-DL-val¡na (b) Trifluoroacetato de A/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoguinolinil)carbonil]-DL-valina Se añadió NaH (88 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 2.2 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (210 mg, 2.2 mmoles) en DMSO (5 ml) a 70X y la solución se agitó durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-val¡na (350 mg, 0.88 mmoles) y la solución se calentó a 80-90X durante una noche. La mezcla enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con CH2CI2-/'-Pr 0 para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinol¡nil)carbon¡l]-DL-val¡na (285 mg, 0.68 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 178-180X (desc.). -*___*. --• '¿¡j&n&i ^^»-.* ^^. e?z x?^Uit. 1H (CDCI3, 300 MHz) muestra una mezcla 1 :1 de rotámeros, d 1.0 (1/2 de 6H, d), 1.05 (1/2 de 6H, d), 1.5 (9H, s), 2.2-2.4 (1H, m), 4.7 (1/2 de 1 H, d), 4.75 (1/2 de 1 H, d), 6.2-6.8 (4H, s a), 6.9 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 420 (MH+), 839 (M2H+). Análisis encontrado: C, 56.00; H, 6.35; N, 16.33. Calculado para C20H26CIN5?3-0.5H2O: C, 55.71 ; H, 6.36; N, 16.32. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolínil)carbonil]-DL-valina (200 mg, 0.48 mmoles) en CF3C02H (1.5 ml) se agitó a 0X durante 30 minutos y a 23X durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con EtOAc para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-val¡na (170 mg, 0.36 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 243-245X (desc). 1H (DMSO-d6, 300 MHz) muestra una mezcla 1 :1 de rotámeros, d 0.95 (1/2 de 6H, d), 1.0 (1/2 de 6H, d), 2.15-2.3 (1 H, m), 4.35 (1 H, t), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.4-8.6 (4H, s a), 8.85 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 364 (MH+). Análisis encontrado: C 44.96; H, 3.95; N, 14.56. Calculando para deH^CINsOs CFaCOsH: C, 45.24; H, 4.01 ; N, 14.65. j^^f^^i&fe EJEMPLO 56 ͧ1 Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoqu¡nolin¡l)carbonil1-DL-prolina . Trifluoroacetato de A/-[(4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soquinolinil)carbon¡p-DL-prol?na Se añadió NaH (65 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 1.63 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (154 mg, 1.61 mmoles) en DMSO (5 ml) a 50X y la solución se agitó durante 15 minutos. Se añadió éster f-butílico de ? -[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolinil)carbonil]-DL-prolina (253 mg, 0.64 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante una noche. La mezcla se vertió en agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (x 2). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con CH2CI2-/-Pr20 para dar éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol?n?l)carbon¡l]-DL- prolina (241 mg, 0.58 mmoles). pf 147-149X (desc.). 1H (CDCI3, 300 MHz) muestra una mezcla 1 :3 de rotámeros d 1.55 (9H, s), 1.8-2.1 (3H, m), 2.15-2.45 (1 H, m), 3.55-3.65 (1 H, m), 3.75-3.85 (1 H, m,), 4.35-4.45 (1 H, m), 6.5-7.2 (4H, m a), 7.7 (1/4 de 1 H, d), 7.85 (3/4 de 1 H, d), 7.9-8.1 (2H, m), 8.85 (1/4 de 1 H, s), 8.95 (3/4 de 1 H, s) ppm. LRMS 418 (MH+), 835 (M2H+). Análisis encontrado: C, 58.46; H, 6.49; N, 14.95. Calculado para C20H24CIN5O3 0.4 /-Pr20: C, 58.65; H, 6.50; N, 15.27. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)carbon¡l]-DL-prolina (175 mg, 0.42 mmoles) en CF3C02H (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato de A/-[(4-cloro-1-guan¡d¡no-7-isoquinolinil)carbon¡l]-DL-prolina (156 mg, 0.33 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 185X (desc). 1H (DMSO-de+1 gota de TFA-d, 300 MHz) d 1.8-2.1 (3H, m), 2.25-2.4 (1 H, m), 3.45-3.7 (2H, m), 4.4-4.5 (1 H, m), 8.0-8.6 (4H, m) ppm. LRMS 362 (MH+) Análisis encontrado: C, 45.65; 3.84, N, 14.43. Calculado para C16H16CIN3?3-CF3C02H: C, 45.43, H, 3.60; N, 14.72. ^.^^a ?^.^ ^^. .. . . . , , ¡¿M^É8»ü^^.-... -^_^...„..„, ... ,*A_*-._ «»_ EJEMPLO 57 (a) Ester t-butílico de N-f(4-cloro-1-guanidino-7-isoguinolinil)carbonil1-DL-fenilalan¡na (b) Trifluoroacetato de N-[(4-cloro-1 -quanidino-7-isoquinolinil)carbon¡l1-DL-fenilalan¡na Se añadió NaH (78 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 1.95 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (188 mg, 1.97 mmoles) en DMSO (6 ml) a 50X y la solución se agitó durante 15 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilalanina (350 mg, 0.79 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante una noche. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Los orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con CH2CI2-/'-Pr20 para dar el éster f-butílico de /V-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol¡nil)carbonil]-DL-fenilalanina (172 mg, 0.37 mmoles) en forma de un sólido de color crema, pf 201 -203X (desc.). ^g &g^ ^^ 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.45 (9H, s), 1.5-1.8 (1 H, m a), 3.25 (2H, d), 5.0 (1 H, dt), 6.0-6.8 (3H, s a), 6.9 (1 H, d), 7.15-7.35 (5H, m), 8.0-8.1 (3H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 468 (MH+), 935 (M2H+). Análisis encontrado: C, 61.60; H, 5.60; N, 14.97. Calculado para C24H26CIN503: C, 61.60; H, 5.76; N, 14.68. Se agitó una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilalanína (210 mg, 0.48 mmoles) en CF3C02H (1 ml) a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilalanina (196 mg, 0.37 mmoles). pf 192X (desc). 1H (DMSO-de + 1 gota de TFA-d, 300 MHz) d 3.1 (1 H, dd), 3.25 (1 H, dd), 4.7 (1 H, dd), 7.1-7.35 (5H, m), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.35 (1 H, d), 8.9 (1 H, s), 9.15 (1/2H, d NH de amida parcialmente intercambiado)ppm. LRMS 412 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.92; H, 3.81 ; N, 13.57. Calculado para C2oH18CIN5?3-0.9CF3C02H: C, 50.90; H, 3.70; N, 13.61. _^__. . j____»t_ „ >___-. __. _________________¡ EJEMPLO 58 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoqu¡nolinil)carbonil1-DL-leuc¡na (b) Trifluoroacetato de ?/-f(4-cloro-1-guan¡dino-7-isoquinolinil) carbonill-DL- eucina Se añadió NaH (73 mg, dispersión al 60% en aceite mineral, 1.83 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanídina(174 mg, 1.82 15 mmoles) en DMSO (6 ml) a 50X y la solución se agitó durante 15 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)carbon¡l]-DL-leucina (300 mg, 0.73 mmoles) y la solución se calentó a 80X durante una noche. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron 20 (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con CH2CI2-/'-Pr20 para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]- DL-leucina (185 mg. 0.43 mmoles). pf 210-212X (desc.) í &*& '- ,-^Jt. ¡ g g |j^g ^^^^^^^^to^^^^^^_^_??___^^^^X^to^^ jß 1H (CDCI3, 300 MHz) d 0.9-1.0 (6H, m), 1.5 (9H, s), 1.6-1.8 (3H, m), 4.7-4.08 (1 H, m), 6.4-7.0 (4H, s a), 6.85 (1 H, d), 8.05 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 9.15 (1 H, s)ppm. LRMS 434 (MH+), 866 (M2H+). 5 Análisis encontrado: C, 58.35; H, 6.75, N, 15.51.

Calculado para C2.H2sCIN5O3-O.i 5 /Pr20: C, 58.55; H, 6.75; N, .59. Una solución de éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carbonil]-DL-leucina (184 mg, 0.57 mmoles) en CF3C02H (1 ml) 10 se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con v V PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar trifluoroacetato de N-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-leucina (183 mg, 0.37 mmoles). pf 249X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) mezcla 1 :1 de rotámeros d 0.9 (1/2 de 6H, d), 0.95 (1/2 de 6H, d), 1.6-1.8 (3H, m), 4.45-4.5 (1 H, m), 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.4 (1 H, d), 8.3-8.6 (4H, s a), 8.95 (1 H, s), 9.0 (1 H, d) ppm. LRMS 378 (MH+). Análisis encontrado: C, 46.31 ; H, 4.27; N, 14.08.

Calculado para C, 46.39; H, 4.30; N, 14.24.

EJEMPLO 59 (a) DL-3-{f(4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil)carbon¡l]-am¡no)-3- fenilpropanoato de f-butilo (b) Trifluoroacetato del ácido DL-3-{[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolin¡l)carbon¡pamino)-3-fenilpropanoico Se añadió NaH (67 mg, dispersión al 60% en aceite, 1.68 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (161 mg, 1.69 mmoles) en DMSO (6 ml) y la solución se calentó hasta 50X durante 15 minutos. Se añadió DL-3-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)carbon¡l]amino}-3-fen¡lpropanoato de f-butilo (300 mg, 0.67 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante una noche. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó en /-Pr20 para dar DL-3-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]amino}-3- fenilpropanoato de f-butilo (55 mg, 0.12 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 227X (desc). 1H (CDCI3 + 1 gota de DMSO-d6, 300 MHz) d 1.25 (9H, s), 2.75 (1 H, dd), 2.85 (1 H, dd), 5.5 (1 H, ddd), 6.4-6.8 (4H, s a), 7.1-7.35 (5H, m), 7.8 (1 H, d), 7.9 (1 H, d), 7.95 (1 H, s), 8.5 (1 H, d), 9.05 (1 H, s), ppm. LRMS 468 (MH+). Análisis encontrado: C, 61.48; H, 5.62; N, 14.70. Calculado para C24H26CIN503: C, 61.60; H, 5.60; N, 14.97. Una solución de DL-3-{[(4-cloro1-guanidino-7- isoquinolinil)carbonil]amino}-3-fenilpropanoato de f-butilo (153 mg, 0.33 mmoles) en CF3C02H (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato del ácido DL-3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)carbonil]amino}-3-fenilpropanoico (132 mg, 0.25 mmoles). pf 241-244X. 1H (DMSO-de +1 gota de TFA-d, 300 MHz) d 2.8 (1 H, dd), 2.95 (1 H, dd), 5.5-5.6 (1 H, m), 7.2-7.35 (3H, m), 7.4 (2H, d), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.4 (1 H, d), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 412 (MH1). Análisis encontrado: C, 49.95; H, 3.64,; N, 13.03. Calculado para C3oH18CIN503 CF3C02H: C, 50.25; H, 3.45; N, 13.32.

EJEMPLO 60 (a) Ester . ß-di-f-butílico del ácido ?/-í.4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolin¡l)carbonil1-DL-aspártico (b) Trifluoroacetato del ácido ?/-f.4-cloro1-quanidino-7- isoquinoliniDcarboniH-DL-aspártico Se añadió NaH (35 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.77 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (168 mg, 1.76 mmoles) en DMSO (6 ml) y la solución se calentó hasta 50X durante 30 minutos. Se añadió éster a,ß-di-f-butílico del ácido ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]- DL-aspártico (330 mg, 0.70 mmoles) y la mezcla se calentó a 80-90X durante una noche. La mezcla fría se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con extracto de EtOAc (5 x 20 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por (i) trituración con /'-Pr20, (¡i) cromatografía en columna de sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente, y (iii) cristalización en /-Pr20, para dar el éster a,ß-di-f-butílico del ácido ?/-[(1 ,4- cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)carbonil]-DL-aspárt¡co (145 mg, 0.29 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 165-167X 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.45 (9H, s), 1.5 (9H, s), 2.9 (1 H, dd), 3.0 (1 H, dd), 4.95-5.0 (1 H, m), 7.5 (1 H, d), 7.95 (1 H, s), 8.0 (1 H, d), 8.15 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 492 (MH+), 983 (M2H+). Análisis encontrado: C, 56.06; H, 6.28; N, 13.92. Calculado para C23H2oCIN5?5: C, 56.15; H, 6.15; N, 14.24. Una solución de éster a, ß-di-f-butílíco del ácido ?/-[(4-cloro-1- guanidíno-7-isoquinolin¡l)carbonil]-DL-aspártico (120 mg, 0.24 mmoles) en CF3CO2H (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato del ácido ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolín¡l)carbon¡l]-DL-aspártico (60 mg, 0.12 mmoles). pf 125X (desc). 1H (TFA-d, 400 MHz) d 3.3-3.4 (2H, m), 5.35-5.4 (1 H, m), 8.25 (1 H, d), 8.3 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 9.2(1 H, s) ppm. LRMS 380 (MH+), 758 (M2H+). Análisis encontrado: C, 43.22; H, 3.75; H, 14.31. Calculado para C15H14CIN5?5-0.8CF3CO2H-0.25Et2O: C, 43.19; H. 3.56; N, 14.31.

EJEMPLO 61 (a) Ester f-butílíco de 0-t-butil-?/-f(4-cloro-1-guanidino-7-isogu¡nolin¡l)carbon¡H-DL-ser¡na (b) Trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-4-guanídino-7-isogu¡nolinil)carbon¡n-DL-serina Se añadió NaH (54 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.80 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (173 mg, 1.81 mmoles) en DMSO (6 ml) y la solución se calentó hasta 80X durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de O-f-butil-A/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-serina (330 mg, 0.70 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante 3 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se cristalizó con /-Pr20 para dar el éster f-butílico de 0-f-butil-?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-¡soquinol¡nil)carbon¡l]-DL-serina (138 mg, 0.300 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 215-219X ^¿^ . *a^-.,a E_-¿..... ^ßat^^^ 1H(CDCI3 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.5 (9H, s), 1.5-1.7 (1.7, s a), 3.75 (1 H, dd), 3.95 (1 H, dd), 4.8-4.9 (1 H, m), 6.2-6.8 (3H, s a), 7.25-7.3 (1 H, m), 8.0 (1 H, s), 8.05(1 H, d), 8.15 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 464 (MH+), 927 (M2H+). Análisis encontrado: C, 56.88; H, 6.65; N, 15.10. Calculado para C22H30CIN5O4-0.25H2O-0.2/'-Pr2O: C, 57.00; H, 6.87; N, 14.32. Una solución del éster t-butílico de 0-f-butil-/V-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-serina en CF3C02H (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se cristalizó dos veces en MeOH-EtOAc para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-4-guan¡d¡no-7-¡soquinolinil)carbonil]-DL-serina (68 mg, 0.19 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 203X (desc.). 1H (TFA-d, 400 MHz, d 4.4 (1 H, dd), 4.5 (1 H, dd), 5.2-5.25 (1 H, m), 8.35 (1 H, s), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 352 (MH+), 703 (M2H+). Análisis encontrado: C, 42.48 H, 3.69; N, 14.21. Calculado para d4H14CIN504 CF3C?2H EtOAc: C, 42.19; H, 3.66; N, 13.98. «___«* a ..«__ .... .. .-.__ -f_tfrifll__-i | *'*'?fc~- «fc*~". «- EJEMPLO 62 (a) Ester f-butílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)carbon¡n-DL-a-ciclopentilqlicina íb? Trifluoroacetato de N-[,4-cloro-1 -guanidino-7- ¡soqu¡nolinil)carbonil1-DL-a-c¡clopentilqlic¡na Se añadió NaH (30 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.00 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (96 mg, 1.01 mmoles) en DMSO (3 ml) y la solución se calentó a 75-80X. Se añadió éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolinil)carbonil]- -ciclopentilglic¡na (170 mg, 0.40 mmoles) y la mezcla se calentó a 80X durante 4.5 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol¡n¡l)carbonil]-DL-a-ciclopentilglicina (105 mg, 0.23 mmoles) en forma de un sólido amarillo.

^^^^ Se preparó una muestra analítica como se indica a continuación: este sólido amarillo se extrajo con /-Pr20 caliente (3 x 20 ml), la solución caliente se filtró y, tras la refrigeración, dio el compuesto del título en forma de un sólido amarillo pálido (40 mg) que se recogió por filtración y se secó al vacío. pf 219-221 X (desc.). 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4-1.8 (18H, m), 2.25-2.4 (1 H, m), 4.7 (1 H, dd), 6.2-6.9 (3H, s a), 6.95 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 8.15 (1 H, d), 9.15 (1 H, s) ppm. LRMS 446 (MH+), 891 (M2H+). Análisis encontrado: C, 58.83; H, 6.39; N, 15.34. Calculado para C22H2dCIN5O3 0.2H2O: C, 58.78; H, 6.37; N, 15.30. Se agitó una solución del éster f-butílico de /V-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoquínolinil)carbonil]-DL-a-c¡clopent¡lglicina (65 mg, 0.15 mmoles) en CF3C02H (0.5 ml) a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se cristalizó con EtOAc. Este sólido después se trituró con Et20 para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-a-ciclopentilglicina (52 mg, 0.10 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 235X (desa). ..y .^tA*l^, ... _ ._ «-....-... .. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 1.4-1.8 (6H, m), 1.85-2.0 (2H, m), 2.4- 2.55 (1 H, m), 4.8 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 9.15 (1 H, s) ppm. LRMS 390 (MH+), 779 (M2H+). Análisis encontrado: C, 47.34; H, 4.36; N, 13.60. Calculado para C18H2oCIN5?3-CF3C02H: C, 47.67; H, 4.20; N, 13.90.

EJEMPLO 63 (a) Clorhidrato de ?/-bencil-?/-f(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinol¡n¡l)carbonil1qlicina (b) Clorhidrato de ?/-bencil-/V-í(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinoliniPcarbonipglicina Se añadió NaH (16 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 0.53 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (82 mg, 0.86 mmoles) en DME (4 ml) y la mezcla se calentó a 60X durante 30 minutos. Se añadió éster f-butílico de ?/-benc¡l-?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soqu¡nolinil)carbonil]gl¡c¡na (95 mg, 0.21 mmoles) en DME (2 ml) y la mezcla se calentó a 90X durante 4 horas. La mezcla enfriada se dividió entre Et20 y agua y los extractos orgánicos reunidos se secaron y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en E-2O y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) para dar un precipitado de clorhidrato de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoqu¡nolinil)carboníl]glic¡na. La evaporación de los aguas madre etéreas dio éster f-butílico de /V-bencil-?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]glicina recuperado, sin reaccionar, que se hizo reaccionar de nuevo con guanidina (de la misma forma que anteriormente) para dar un segundo lote. Rendimiento total: 70 mg, 0.15 mmoles. pf 130X (desc). 1H (DMSO-ds, 400 MHz) mezcla 5:6 de rotámeros, d 1.2 (6/11 de 9H, s), 1.4 (5/11 de 9H, s), 4.0 (6/11 de 2H, s), 4.05 (5/11 de 2H, s), 4.5 (5/11 de 2H, s), 4.75 (6/11 de 2H, s), 7.2-7.5 (5H, m), 7.9-8.0 (1 H, m), 8.2-8.3 (1 H, m), 8.35 (1 H, s), 8.75 (5/11 de 1 H, s), 8.85 (6/11 de 1 H, s) ppm. LRMS 468 (MH+), 934 (M2M+). Análisis encontrado: C, 56.98; H, 5.71 ; N, 13.01. Calculado para C24H26CIN5?3 HCI 0.5H2O 0.2i-Pr2O: C, 56.70; H, 5.82; N, 13.12. Se agitó una solución de clorhidrato de ?/-bencíl-?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)carbonil]gl¡cina (50 mg, 0.10 mmoles) en CF3CO2H (1 ml) a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se diluyó con PhMe, mü?tiu ¡4sÉg ___. se evaporó al vacío, y el residuo se trituró con Et2? para producir un sólido blanco (41 mg). Este sólido se disolvió en EtOAc y se añadió una solución de HCl en Et20 que dio un precipitado. Las aguas madres se decantaron y el sólido se trituró con MeCN para dar el clorhidrato de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1-guanid¡no-7-isoquinolinil)carbonil]glicina (16 mg, 0.04 mmoles) en forma de un polvo blanquecino. 1H (TFA-d, 400 MHz) mezcla 1 :4 de rotámeros, d 4.2 (1/5 de 2H, s), 4.45 (4/5 de 2H, s), 4.7 (4/5 de 2H, s), 4.95 (1/5 de 2H, s), 7.2 (2H, d), 7.3-7.4 (3H, m), 8.15 (1/5 de 1 H, d), 8.2 (4/5 de 1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (4/5 de 1 H, d), 8.5 (1/5 de 1 H, d), 8.7 (1/5 de 1 H, s), 8.8 (4/5 de 1 H, s) ppm. LRMS 412 (MH+), 823 (M2H+), 845 (M2Na+). Análisis encontrado: C, 52.55; H, 4.33; N, 15.10. Calculado para C2oH18CIN503-HCI-0.5H20: C, 52.52; H, 4.41 ; N, 15.32. ____»*-,.i______.______ _..^fc.

EJEMPLO 64 (a) Ester f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinol¡nil)metin-?/-met¡l-DL-fen¡lql¡cina (b) Diclorhidrato del éster f-butílico de ?.-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)metil]-?/-metil-DL-fenilqlicina (c) Trifluoroacetato de ?/-f(4-cloro-1 -quanidino-7- 10 isoquinol¡n¡l)metin- V-metil-DL-fen¡lglicina Se añadió NaH (21 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 0.7 mmoles) a f-BuOH (2.5 ml) y se calentó a 50X durante 15 minutos. Se añadió clorhidrato de guanidína (68 mg, 0.71 mmoles) y se calentó a 50X durante un período adicional de 15 minutos. Se añadió el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4- dicloro-7-isoquinolinil)metil]-?/-metil-DL-fenilglicina (102 mg, 0.24 mmoles) y la 20 mezcla se calentó a 95X durante 9.5 horas. La mezcla enfriada se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (9:1 ) y después CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- ^j^^ ii?IJiUiltiiÉ_ii_____?_______^ ^?s^^^^j ^ j^to ¡soquinolin¡l)metil]-?/-met¡l-DL-fenilglic¡na (26 mg, 0.06 mmoles) en forma de una goma amarilla. Una porción de este material se disolvió en Et20, se añadió una solución de HCl en Et20 y el precipitado resultante se trituró con hexano y después con /'-Pr20 para dar la correspondiente sal diclorhidrato. 1H (CD3OD, 400 MHz) base libre, d 1.4 (9H, s), 2.2 (3H, s), 3.7 (1 H, d), 3.8 (1 H, d), 4.2 (1 H, s), 7.3-7.4 (3H, m), 7.5 (2H, d), 7.9 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.05 (1 H, s), 8.35 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.89; H, 6.01 ; N, 12.42. Calculado para C24H28CIN502-2HCM .5H20: C, 52.04; H, 6.01 ; N, 12.64. Se agitó una solución del éster f-butílico de ?/-[(4-cloro-1- guan¡dino-7-¡soquinoliníl)metil]-?/-met¡l-DL-fenilglic¡na (20 mg, 0.44 mmoles) en CH2CI2 (2 ml) con CF3C02H (2 ml) a temperatura ambiente durante 4 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se trituró con Et20 y después con EtOAc para dar el trifluoroacetato de A/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)metil]-?/-metil-DL-fenilglicina (6.5 mg, 0.02 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 180-182X (desc.). 1H (TFA-d, 400 MHz) mezcla 3:5 de rotámeros, d 2.7 (5/8 de 3H, s), 3.05 (3/8 de 3H, s), 3.95-4.05 (3/8 de 1 H, m), 4.55-4.7 (5/8 de 1H, m), 4.95- 5.1 (1 H, m), 5.35 (5/8 de 1 H, s), 5.45 (3/8 de 1 H, s), 7.4-7.7 (5H, m), 7.95 (3/8 de 1 H, d), 8.1 (5/8 de 1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.4-8.65 (2H, m), ppm.

LRMS 400 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.10; H, 4.27; N, 12.90. Calculado para C20H2oCIN502 CF3C02 H20: C, 49.87; H, 4.37; N, 13.22.

EJEMPLO 65 (a) Ester f-butílico de ?/-bencil-?/-f(4-cloro-1-quanidino-7- isoguinoliniDmetillglicina (b) Bistrifluoroacetato de ?/-bencil-?/-f(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinoliniDmetillqlicina Se añadió NaH (48.6 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.62 mmoles) a f-BuOH (5 ml) y se calentó hasta 50X durante 15 minutos. Se añadió clorhidrato de guanidina (155 mg, 1.62 mmoles) y se calentó a 50X durante 20 minutos más. Se añadió el éster f-butílico de ?/-bencil-?/-[(1 ,4- dicloro-7-isoquinol¡nil)metil]glic¡na (40 mg, 0.09 mmoles) y después la mezcla se calentó a 95X durante 20 horas. La mezcla enfriada se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5), seguido por trituración con hexano y cristalización con /-Pr2?, para dar el éster f-butílico de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil)metil]gl¡cina (5 mg, 0.01 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.45 (9H, s), 3.15 (2H, s), 3.8 (2H, s), 3.95 (2H, s), 7.2-7.4 (5H, m), 7.85-7.95 (1 H, m), 8.0-8.1 (2H, m), 8.5-8.55 (1 H, m) ppm. LRMS 454 (MH+), 907 (M2H+). Análisis encontrado: C, 62.57; H, 6.13; N, 15.17. Calculado para C24H28CIN5O20.4H2O: C, 62.51 ; H, 6.29; N, 15.19. Una solución de éster t-butílico de ?/-bencil-?/-[(4-cloro-1- guan¡dino-7-isoquinolinil)met¡l]gl¡c¡na (16 mg, 0.04 mmoles) en CF3C02H (1 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas. La solución se diluyó con PhMe, se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20 para dar el bístrifluoroacetato de ?/-bencil-A/-[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoqu¡nolinil)metil]- glicina (6 mg, 0.02 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 199X desc. 1H (TFA-d, 400 MHz) d 4.2 (2H, s), 4.6 (1 H, d), 4.75 (1 H, d), 4.85 (1 H, d), 4.95 (1 H, d), 7.3-7.5 (5H, m), 8.0 (1 H, d), 8.3 (1 H, s), 8.45 (1 H, d) 8.5 (1 H, s) ppm. LRMS 398 (MH+).

Análisis encontrado: C, 44.50; H, 3.81 ; N, 10.80. Calculado para C20H20CIN5O2-2CF3CO2H-1.2H2O: C, 44.52; H, 3.80; N, 10.82.

EJEMPLO 66 (a) Ester terc-butílico de ?/a-[(4-cloro-1-quanidino-7- isoquinolinil)sulfonil-A/g-terc-butiloxicarbonil-L-lisina Í__L Diclorhidrato de ?/a-[,4-cloro-1-quanidino-7- isoquinoliniPsulfoniH-L-lisina Se añadió en una sola porción NaH (44 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.47 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (224 mg, 2.35 mmoles) en DMSO (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente hasta que se realizó la disolución. Se añadió éster ferc-butílico de ?/a-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfon¡l]-?/£--ferc-butiloxicarbonil-L-licina (330 mg, 0.59 mmoles) y la solución se agitó a 100X durante 6 horas. Tras la refrigeración, la mezcla de reacción se inactivo con agua (30 ml), se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera. La solución orgánica se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como 5 eluyente para dar el éster ferc-butílico de ?/a-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinipsulfonill-?/f-terc-butiloxicarbonil-L-lisína (152 mg, 0.26 mmoles). Se obtuvo una muestra analítica mediante cristalización en /'-Pr20. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.15 (9H, s), 1.3-1.5 (13H, m), 1.5-1.8 (2H, m), 3.0-3.1 (2H, m), 3.8-3.9 (1 H, m), 4.5-4.6 (1 H, m), 5.2-5.4 (1 H, m), 10 6.25-6.6 (3H, m), 8.0 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 8.1 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 585 (MH+) Análisis encontrado: C, 51.02; H, 6.32; N, 14.12. Calculado para C25H37CIN606S: C, 51.32; H, 6.37; N, 14.36. Se disolvió el éster ferc-butílico de ?/a-[(4-cloro-1-guanid¡no-7- 15 isoquinolinipsulfonill-?/g-terc-butiloxicarbonil-L-lisina (119 mg, 0.20 mmoles) en EtOAc (10 ml) y se saturó con HCl gaseoso. Después de 20 minutos, el precipitado blanco resultante se obtuvo por filtración y se recristalizó en EtOH para dar ?/a-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]-L-l¡sina (13 mg, 0.03 mmoles). 20 1H (DMSO-d3 + CF3C02D, 300 MHz) d 1.1-1.7 (6H, m), 2.65-2.75 (2H, m), 3.75-3.80 (1 H, m), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.25 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 429 (MH+) llím , m.. .. ,-.,- ,.,-, .l- ...-..^Mil¿iiiMM^^^ Análisis encontrado: C, 37.00; H, 4.93; N, 15.72. Calculado para C16H2?CIN6O4S-2HCI-H2O 0.15EtOH: C, 37.15; H, 4.95; N, 15.97.

EJEMPLO 67 Diclorhidrato de ? a-f(4-cloro-1 -guanidino-7 -isoquinolinil)sulfonil-D-lisina Se añadió NaH (33 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.1 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de guanidina (170 mg, 1.78 mmoles) en DMSO (3 ml) a 50X. Después de 30 minutos, se añadió éster ferc-butílico de [(1 ,4-cloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/£--ferc-butiloxicarbonil-D-lisina (250 mg, 0.44 mmoles) y la solución se agitó a 90X durante 8 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua y el precipitado se extrajo en Et20 (4 x 15 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se trataron con HCl etéreo 1 N. La solución se concentró al vacío, el residuo se trituró con Et20 y después con EtOAc-EtOH para dar el diclorhidrato de ?/a-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-D-lis¡na (90 mg, 0.18 mmoles). nfT t_____ _fh t ?lit 1H (DMSO-d3, 400 MHz) d 1.2-1.4 (2H, m), 1.4-1.7 (4H, m), 2.6-2.75 (2H, m), 3.9-4.0 (1 H, m), 3.9-4.0 (1 H, m), 7.75-7.85 (3H, s a), 8.3 (1 H, d) 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.2-9.0 (3H, m a), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 429 (MH+) Análisis encontrado: C, 36.15; H, 5.10; N, 15.06. Calculado para C16H21CIN6?4S-2HCI-2H2O 0.13EtOAc: C, 36.18; H, 5.16; N, 15.25.

EJEMPLO 68 (a) Ester terc-butílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soguinoliniDsulfonil-L-Qlutamina íbl Trifluoroacetato de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soguinolin¡psulfon¡n-L-glutamina Se añadió NaH (25 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 0.83 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (128 mg, 1.34 mmoles) en DMSO (2 ml) y se agitó a 50X durante 1 hora. Se añadió éster ferc-butílico de k&^X? &*-?~ ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil]-L-glutamina (150 mg, 0.32 mmoles) y la solución resultante se agitó a 100X durante 6 horas, se dejó enfriar y después se vertió en agua. La mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml) y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar el éster terc-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-glutamina (30 mg, 0.06 mmoles) en forma de un polvo de color ante. 1H (DMSO-ds, 300 MHz) d 1.0-1.2 (9H, s), 1.6-1.75 (1 H, m), 1.75- 1.9 (1 H, m), 2.05-2.15 (2H, m), 3.26-3.8 (1 H, m), 6.65-6.75 (1 H, s a), 7.0-7.45 (5H, m a), 7.95-8.1 (3H, m), 8.35 (1 H, d) 9.0 (1 H, s) ppm. LRMS 485 (MH+) Se disolvió el éster terc-butílico de ?/-[(4-cloro-1-guanidíno-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-glutamina (15 mg, 0.03 mmoles) en ácido trifluoroacético (1 ml) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, se diluyó con tolueno y se concentró para dar un residuo. La trituración con Et20 dio un polvo al que se añadió MeOH y la suspensión se filtró. El filtrado se concentró y después se trituró con EtOAc para dar el trifluoroacetato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-L-glutamina (9 mg, 0.02 mmoles). 1H (DMSO-ds + TFA-d, 300 MHz) d 1.6-1.75 (1 H, m), 1.8-2.0 (1 H, m), 2.0-2.15 (2H, m), 3.8-3.9 (1 H, m), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, s) 8.8 (1H, s) ppm.

LRMS 429 (MH+). EJEMPLO 69 (2R)-1 -({4-Cloro-1 -quanidino-7 -isoquinolinil)sulfonil)-2- plrrolidinacarbonxamida Se añadió cloruro de oxalilo (136 µl, 1.56 mmoles) a una solución de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil]-D-prolina (339 mg, 0.78 mmoles) en CH2CI2 (30 ml), seguido por DMF (100 µl), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se evaporó al vacío y se 15 evaporó azeotrópicamente con tolueno, para dar un sólido blanquecino. Este se suspendió en CH2CI2 (15 ml), se añadió NH3 0.880 (760 µl, 7.8 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se dividió entre CH2CI2 y agua y las capas se separaron. La fase orgánica se extrajo con CH2CI2, las soluciones orgánicas reunidas se secaron (MgS0 ) y 20 se evaporaron al vacío. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna en columna sobre gel de sílice usando elución en gradiente de CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (100:0:0 a 95:5:0.1 ) para producir (2R)-1-({4-cloro-1- ?eg*V*^^^^gj^?B^^^^^V^^^^^^^^^^^^^ £ rtííj^^^^^^ ________________ _á_ __&i__tt__¡_______f_________ ?^M ai fc^ ^ guanid¡no-7-¡soquinolin¡l}sulfon¡l)-2-pirrolidinacarboxamida (102 mg, 0.26 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. 1H (d4-MeOH, 400 MHz) d 1.5-1.6 (1 H, m), 1.7-2.0 (3H, m), 3.3-3.4 (1 H, m), 3.53-3.65 (1 H, m), 4.1-4.2 (1 H, m), 8.1-8.2 (3H, m), 9.15 (1 H, s), ppm. LRMS 397 (MH+), 419 (MNa+). Análisis encontrado: C, 44.05; H, 4.42; N, 20.14. Calculado para C15H17CIN6?3S + 0.15CH2CI2: C, 44.43; H, 4.26; N, 20.52.

EJEMPLO 70 (2R)-1-((4-Cloro-1-quanid¡no-7-¡soqu¡nolinil sulfonil)-?/-(2-hidroxiet¡l)-2- pirrolidinacarbonxamida Se añadió cloruro de oxalilo (40 µl, 0.46 mmoles) a una solución de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-D-prolina (100 mg, 0.23 mmoles) en CH2CI2 (10 ml), seguido por DMF (1 gota) y la mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se evaporó — — "-*— . — — - iü±_________HA___d__ al vacío y se evaporó azeotrópícamente con tolueno. El residuo se disolvió en CH2CI2 (5 ml) y se añadió a una solución de etanolamina (17 µl, 0.28 mmoles) en CH2CI2 (5 ml), la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y después se concentró al vacío. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) para producir (2R)-1-({4-cloro-1-guan¡d¡no-7-isoqu¡nolinil}sulfonil]-?/-(2-hidrox¡etil)-2-pirrolid¡nacarboxamida (65 mg, 0.147 mmoles) en forma de una espuma amarilla. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.45-1.8 (4H, m), 3.15 (3H, m), 3.35-3.55 (3H, m), 4.1 (1 H, m), 4.65 (1 H, m), 7.9 (1 H, m), 8.0 (1 H, d), 8.15 (2H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 441 , 443 (MH+). Análisis encontrado: C, 43.96; H, 4.89; N, 17.47. Calculado para d7H2?CIN6O4S 0.4CH2CI2: C, 44.01 ; H, 4.63; N, 17.70%.

Mti__tí_tl_M__a__^ EJEMPLO 71 (a) (2R)-1 -((4-Cloro-1 -guanid¡no-7-isogu¡nolinillsulfonil)-2-piperidinacarboxilato de tere-butilo (b) Clorhidrato del ácido .2R)-1-((4-cloro-1-quanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil,-2-piperid¡nacarboxi!ato Se añadió clorhidrato de guanidina (128 mg, 1.34 mmoles) a una solución de NaH (32 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.07 mmoles) en DME (5 ml) y la mezcla se agitó a 60X durante 30 min. Se añadió (2R)-1-[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nol¡nil)sulfon¡l]-2-piperidinacarboxilato de ferc-butilo (150 mg, 0.34 mmoles) y la reacción se calentó a reflujo durante 7 horas y se agitó durante 18 horas más a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. La goma amarilla residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3) como eluyente para dar (2R)-1-({4-cloro-1-guanid¡no-7-¡soqu¡nol¡nil}sulfonil]-2-p¡peridinacarboxilato de ferc-butilo, en forma de un sólido amarillo (126 mg, 0.27 mmoles).

J— l. «-?.^*fc__ pf 157-158X. 1H (CDCIs, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 1.4 (1 H, m), 1.6-1.8 (4H, m), 2.15 (1 H, m), 3.3 (1 , m), 3.85 (1 H, m), 4.75 (1 H, m), 8.0 (1 H, d), 8.1 (1 H, d) 8.15 (1 H, s), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 468 (MH+) Análisis encontrado: C, 51.23; H, 5.68; N, 14.51. Calculado para C20H2eCIN5O4S: C, 51.33; H, 5.60; N, 14.97%. Una solución de (2R)-1-({4-cloro-1 -guanidino-7- isoqu¡nolinil}sulfonil)-2-p¡peridinacarboxilato de tere-butilo (50 mg, 0.107 mmoles) en EtOAc saturado con HCl (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La solución se concentró al vacío y se evaporó azeotrópicamente varias veces con CH2CI2 para dar el clorhidrato de ácido (2R)-1-({4-cloro-1- guanidino-7-isoquinolinil}sulfonil)-2-piperidinacarboxílíco (37 mg, 0.083 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf desc >220X 1H (CD3OD, 400 MHz) d 1.35 (1 H, m), 1.5 (1 H, m), 1.65-1.8 (3H, m), 2.2 (1 H, m), 3.2-3.3 (2H, m), 3.95 (1 H, m), 8.3 (1 H, d), 8.45 (2H, m), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 412, 414 (MH+) EJEMPLO 72 (a) 4-[({4-Cloro-1 -quanídino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil)-a?t?ino1-1 -metil-4-piperidinacarboxilato de metilo (b) Clorhidrato del ácido 4-[({4-cloro-1-quanidino-7-isoqu¡no[¡n¡l)sulfoni0amino]-1-met¡l-4-piperidinacarboxílíco Se añadió clorhidrato de guanidina (270 mg, 2.83 mmoles) a una solución de NaH (65 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 2.16 mmoles) en DMSO (6 ml) y la solución se agitó a 60X durante 30 min. Se añadió 4-{[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]amino}-1-metil-4-piperidinacarboxilato de metilo (300 mg, 0.7 mmoles) y la mezcla de reacción se agitó a 80X durante 5 h. Se añadió más NaH (30 mg, 1 mmol) y clorhidrato de guanidina (135 mg, 1.4 mmoles) en DMSO (1 ml) y la reacción se calentó durante 2.5 h más. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El sólido amarillo residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH-NHs 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) para producir 4-[({4-cloro-1 -guanidino- _-^*_- 7-isoquinolinil}sulfon¡l)amino]-1 -metil-4-piperidinacarboxilato de metilo (232 mg, 0.51 mmoles). pf desc. >205X. 1H (CD3OD, 400 MHz) d 2.05 (4H, m), 2.15 (3H, s), 2.25 (2H, m), 2.4 (2H, m), 3.4 (3H, s), 8.05-8.15 (3H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 455 (MH+) Análisis encontrado: C, 47.17; H, 5.02; N, 17.96. Calculado para C?8H23CIN6O4S 0.25H2O: C, 47.06; H, 5.16; N, 18.29%. Una solución de 4-[({4-cloro-1-guanidino-7- isoqu¡nolinil}sulfon¡l)amino]-1-met¡l-4-piper¡dinacarboxilato de metilo (100 mg, 0.22 mmoles) en NaOH acuoso (2 ml, 2 M, 4 mmoles) y MeOH (5 ml) se agitó a 60X durante 42 horas. La solución enfriada se neutralizó usando HCl 2 M y la mezcla se concentró al vacío, hasta que se produjo la precipitación. El sólido se filtró, se secó y se disolvió en HCl concentrado y solución se evaporó al vacío. El sólido resultante se trituró con Et 0 y después con /'-Pr20 y se secó al vacío para dar clorhidrato del ácido 4-[({4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolinil}-sulfonil)amino]-1-metil-4-piperidinacarboxílico (18 mg, 0.035 mmoles). 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 2.1 (2H, m), 2.3 (2H, m), 2.7 (3H, s), 2.8-3.0 (2H, m) 3.3 (2H, m), 8.25-8.75 (7H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 441 (MH) EJEMPLO 73 (a) ?/-f(1-Guan¡dino-7-¡soqu¡nolinil)sulfon¡p-D-prolinacarboxilato de tere-butilo (b) Clorhidrato de ?/-[(1-quanidino-7-isoquinolin¡l)sulfon¡n-D- prolina Una mezcla de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfon¡l]-D- 15 prolinacarboxilato de ferc-butilo (200 mg, 0.44 mmoles) y paladio al 5% sobre carbón (150 mg) en EtOH (30 ml) se hidrogenó a 50 psi (344,737 kPa) y 50X durante 24 horas. La mezcla enfriada se filtró a través de Arbocel® y la capa de filtro se lavó bien con EtOH. Los filtrados reunidos se concentraron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice 20 usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (97:3:0.3 a 95:5:0.5) para producir el ?/-[(1-guanidino-7-isoquinoliníl)sulfonil]-D- prolinacarboxilato de tere-butilo (143 mg, 0.34 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. _________d_Ht_MI__ti____l_______«^ íM_«_É__É_____ __í____? __i____fa__í_ ____________ 1H (CDCIs, 400 MHz) d 1.45 (9H, s), 1.75 (1H, m), 1.95 (3H, m), 3.4 (1H, m), 3.55 (1H, m), 4.3 (1H, m), 7.1 (1H, d), 7.75 (1H, d), 8.0 (1H, d), 8.15 (1H,d), 9.25 (1H,s) ppm. LRMS 420 (MH+). Una solución de ?/-[(1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfoníl]-D-pindinacarboxílato de ferc-butilo (130 mg, 0.31 mmoles) en EtOAc saturado con HCl (7 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y se evaporó azeotrópicamente con CH2CI2 para dar el clorhidrato de ?/-[(1-guanidino-7-isoquinolin?l)sulfonil]-D-prolina (118 mg, 0.295 mmoles) en forma de un sólido blanco, pf desc. >250X 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.6 (1H, m), 1.75-1.95 (3H, m), 3.2 (1H, m), 3.4 (1H, m), 4.4 (1H, m), 7.7 (1H, m), 8.2 (2H, m), 8.3 (1H, m), 9.05 (1H, s) ppm. LRMS 364 (MH+) .__m.. , ^_. ^XX m-?MJ* EJEMPLO 74 Clorhidrato de 1 -f({4-cloro-1 -quan¡dino-7-isoquinolinil)sulfonil)aminol-?.- met¡l-/.-[2-(met¡lam¡no)etinciclopentanocarboxamida Se añadió DMF (5 gotas) a una suspensión de clorhidrato del ácido 1 -{[(1 -guanidino-4-cloro-7- isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclopentanocarboxílico (1.1 g, 2.46 mmoles) en CH2CI2 (100 ml) seguido por cloruro de oxalilo (319 µl, 3.68 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se añadió más cloruro de oxalilo (106 µl, 1.23 mmoles) y se continuó la agitación durante 30 minutos más. La mezcla se evaporó al vacío, se trituró con CH2CI2 y el residuo después se disolvió en CH2CI2 (100 ml). Esta solución de cloruro de ácido (10 ml) se añadió a una solución de ?/,?/-dimetiletilenodiamina (500 µl, 4.7 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la evaporación hasta la sequedad, el residuo se dividió entre agua y CH2CI2, la capa acuosa se separó y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se secaron (Na2S04), se evaporaron para dar una goma y se purificaron por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1) como eluyente para dar una aceite. Este se disolvió en EtOAc, se trató con HCl etéreo (1 N) y el precipitado blanco se filtró y se trituró con Et20-/'-Pr20 y EtOH para producir el compuesto del título (28 mg, 0.058 mmoles). pf 206X (espumas). 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.35 (4H, m), 1.7 (2H, m), 2.0 (2H, m), 2.6 (3H, s), 3.05 (2H, m), 3.2 (3H, s), 3.4 (2H, m), 3.5 (2H, m), 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.6-8.8 (4H, m), 9.2 (1 H, s) ppm. LRMS 482, 484 (MH+). 10 EJEMPLO 75 Clorhidrato de 1 -r({4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil>sulfonil)am¡no]-?/- (2-hidroxíetil,-?/-met¡lciclopentanocarboxamida Una suspensión de cloruro de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolinil)sulfonil]amino}ciclopentanocarbon¡lo (110 mg, 0.245 mmoles) en »^^e^^£^^jj g^^X^^^^^^^^^^^^a^^^^^¡^^S^ ____»«___?_<_ - . .- ^t» ',.&,.. __-. _ji^ CH2CI2 (10 ml) (preparada como se ha descrito en el ejemplo 76) se añadió durante un minuto a una solución de N-metiletanolamina (500 µl, 6.25 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la solución amarilla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La mezcla de reacción se evaporó al 5 vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH30.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar una goma transparente. Esta se disolvió en EtOAc, se añadió con HCl etéreo (1 N), la mezcla se evaporó al vacío y se trituró con EtOAc. El sólido resultante se filtró y se secó al vacío a 50X para dar el clorhidrato de 1-[({4-cloro-1-guanidino-7- 10 isoquinoliníl}sulfonil)am¡no]-?/-(2-h¡drox¡etil)-?/-met¡lc¡clopentanocarboxamida. 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 1.4 (4H, m), 1.8 (2H, m), 2.0 (2H, m), 2.6 (1 H, m), 3.05-3,2 (4H, m), 3.35-3.6 (4H, m), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.55 (4H, m), 9.0 (1 H, s), 11.0 (1 H, s) ppm. LRMS 468, 471 (MH+). 15 Análisis encontrado: C, 41.87; H, 5.55, N, 15.40. Calculado para d9H25CIN604S-HCI-2H20: C, 42.15; H, 5.58, N, 15.52%.

EJEMPLO 76 Clorhidrato de 1 -.((4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil>sulfonil)aminol-?/- (2-metoxietil)-ciclopentanocarboxamida Se preparó 1-[({4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil}sulfon¡l)amino]-?/-(2-metoxietil)ciclopentanocarboxamida a partir de 2-metoxietilamina y cloruro de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]amíno}-c¡clopentanocarbonilo, siguiendo el mismo procedimiento descrito en el ejemplo 76. Este producto se trató con HCl etéreo (1 N) y la mezcla se evaporó al vacío. El sólido residual se disolvió en EtOH, se añadió agua (1 gota), la solución se concentró al vacío hasta que se produjo la precipitación y el sólido resultante se filtró, se lavó con Et20 y se secó al vacío a 50X para producir el clorhidrato de 1-[({4-cloro-1-guanídino-7- isoquinolin¡l}sulfonil)-amino]-?/-(2-metox¡et¡l)c¡clopentanocarboxamida (35 mg, 28%). 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.3-1.5 (4H, m), 1.9 (4H, m), 2.95 (2H, m), 3.2 (5H, m), 7.55 (1 H, t), 8.2 (1 H, s), 8.35 (2H, m), 8.45 (1 H, s), 8.6 (4H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 469, 471 (MH+). Análisis encontrado: C, 43.33; H, 5.38, N, 15.82. Calculado para C19H25CIN604S-HCI-1.2H20: C, 43.30; H, 5.43, N, 15.95%.

EJEMPLO 77 (a) ?/-[(2-terc-But¡! aminoetilcarbamato)-1 -[({4-cloro-1 -quanidino-7-¡soquinolinil)sulfonil)amino1-ciclopentanocarboxamída (b) Diclorhidrato de ?/-[(2-aminoet¡l-1-[((4-cloro-1-quanidino-7-isoquinol¡nil)sulfonil)amino1ciclopentanocarboxamida Se añadió una suspensión de cloruro de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)sulfon¡l]am¡no}-ciclopentanocarbon¡lo (220 mg, 0.49 mmoles) a una solución de 2-aminoetilcarbamato de terc-butoxi (250 mg, 1.56 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente para dar un aceite amarillo. Este producto se cristalizó en MeOH-/'-Pr20 para producir ?/-(2-terc-butilaminoetilcarbamato)-1-[({4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolín¡l}sulfon¡l)-amino]c¡clopentanocarboxam¡da (27 mg, 0.05 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. .__j^^._._i____ 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (11 H, m), 1.4 (2H, m), 1.8 (2H, m), 1.9 (2H, m), 2.45 (2H, m), 3.05 (4H, m), 5.65 (1 H, m), 6.8 (4H, m), 7.1 (1 H, m), 7.2 (1 H, m), 7.9 (3H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 576 (MNa+). 5 Una solución de ?/-(2-terc-butil aminoetilcarbamato)-1-[({4-cloro- 1 -guanidino-7-isoquinolinil}sulfon¡l)amino]-ciclopentanocarboxamida (20 mg, 0.036 mmoles) en HCl etéreo (1 ml, 1 N) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH, se concentró al vacío, el residuo se trituró con Et20 y después con /'-Pr20 y después se secó 10 para dar el diclorhidrato de ?/-(2-aminoetil-1-[({4-cloro-1-guanid¡no-7- ¡soquinolinil}sulfonil)amino]ciclopentanocarboxamida (16 mg, 0.30 mmoles) en forma de un polvo blanquecino. 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.6 (4H, m), 1.85 (2H, m), 1.9 (2H, m), 2.8 (2H, m), 3.2 (2H, m), 5.4 (1 H, s a), 7.9 (2H, s a), 8.05 (1 H, m), 8.2 (1 H, s), 15 8.4 (1 H, m), 8.45 (1 H, s), 8.55-8.75 (4H, m), 9.25 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+) _____________ __________!___• MT'- «*anfc- ~?>- -- ^aae_a_i_--_i__ EJEMPLO 78 Clorhidrato de 4-cloro-1 -guanidino-?/-H -(morfolinocarbonil.ciclopentill-7- ¡soquinolinasulfonamida El compuesto del título se preparó a partir de cloruro de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]amino}-ciclopentanocarbonílo y morfolina, siguiendo un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 74. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.35 (4H, m), 1.7 (2H, m), 2.0 (2H, m), 3.4-3.65 (8H, m), 8.35-8.65 (8H, m), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 480, 482 (MH+) .-._-.__-^_u^., . _*____.._- _J__ti?_?__________M_l_a flHJfr -Xirfrtrfr EJEMPLO 79 Diclorhidrato de 4-cloro-1-quanidino-?M'1-r(4- metilpiperaz¡no)carboninciclopent¡l>-7-isoq?inolinasulfonamida Se añadió trietilamina (1.36 ml, 10.0 mmoles) a una solución de díclorohidrato de (1-aminociclopentil) (4-metíl-1-piperazinil)metanona (567 mg, 2.0 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (592 mg, 2.0 mmoles) en CH2Cl2 (25 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se dividió entre EtOAc y agua y las capas se separaron. La fase orgánica se lavó con agua, se extrajo con HCl (2 N) y estos extractos ácidos reunidos se lavaron con EtOAc y se re-basificaron usando Na2C03. Esta solución acuosa se extrajo con EtOAc, los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na S04) y se evaporaron al vacío para dar una espuma. Esta se cristalizó en CH2CI2-/-Pr20 para producir 1 ,4-dicloro-?/-{1-[(4-metil-1- piperazinil)carbonil]ciclopentil}-7-isoqu¡nol¡nasulfonamida (153 mg, 0.33 mmoles) en forma de un sólido. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.5-1.75 (6H, m), 2.25-2.45 (9H, m), 3.6 (4H, m), 5.1 (1 H, s), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 49.12; H, 5.02; N, 1.06. Calculado para C20H24CI2N4O3S 0.3CH2CI2: C, 49.07; H, 4.99; N, 11.28%. Se añadió NaH (22 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 0.73 mmoles) a una disolución de clorhidrato de guanidina (142 mg, 1.49 mmoles) en DMSO (2 ml) y la solución se agitó a 50X durante 30 minutos. Se añadió 1 ,4-dicloro-?/-{1 -[(4-metiI-1 -piperazinil)carbonil]ciclopent¡l}-7-isoquinolinasulfonamida (140 mg, 0.28 mmoles) y la reacción se agitó a 90X durante 5 horas. La reacción enfriada se vertió en agua, la mezcla se extrajo con EtOAc y los extractos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. La espuma amarilla residual se disolvió en /'-Pr20, se añadió HCl etéreo (1 N), la solución se evaporó al vacío y el producto se suspendió en etanol. Esta mezcla se filtró, el filtrado se enfrió en un baño de hielo y el sólido resultante se filtró, se lavó con EtOH y se secó para dar el diclorhidrato de 4-cloro-1-guanidino-?/-{1-[(4-metil-1-piperazinil)carbon¡l]c¡clopentil}-7-¡soquinolinasulfonam¡da (68 mg, 0.12 mmoles). 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.35 (4H, m), 1.7 (2H, m), 2.0 (2H, m), 2.75 (3H, s), 3.0 (2H, m), 3.25-3.45 (4H, m), 4.4 (2H, m), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.6 (4H, m), 8.7 (1 H, s), 9.1 (1 H, s), 11.15 (2H, s a) ppm. LRMS 494, 496 (MH+). i T— ^X* - — -- a - ~ - - " llf affi_fÜfrÍÉí_- 1 - " **-*- - -«-> - . * . + ^^ EJEMPLO 80 (a) Ester etílico de N-f(4-cloro-1-quanidino-7- isoqu¡nolinil)sulfonil1-N-(metil,cicloleuc¡na (b) Clorhidrato de N-[,4-cloro-1-quan¡dino-7-isoquinol¡nil)sulfoni!1- N-(metil.cicloleucina Se añadió NaH (31 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.04 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (164 mg, 1.67 mmoles) en DMSO (4 ml) y la solución se calentó a 50X durante 1 hora. Se añadió el éster etílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinol¡n¡l)sulfon¡l]-N-(metil)cicloleucina (180 mg, 0.42 mmoles) en DMSO (2 ml) y la reacción se calentó a 80X durante 3 horas. La mezcla de reacción enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El aceite amarillo residual se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente, y se recristalizó en EtOAc para producir el éter etílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-N-(metíl)cicloleucina (105 mg, 0.23 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 186-188X 1H (DMSO-d6, 400 MHz) d 1.1 (3H, t), 1.55 (4H, m), 2.0 (2H, m), 2.2 (2H, m), 2.95 (3H, s), 4.0 (2H, q), 7.2-7.4 (4H, s a), 8.05 (2H, m), 8.15 (1 H, s), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 454, 456 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.04; H, 5.38; N, 15.31. Calculado para C19H24CIN504S 0.2H2O: C, 49.88, H, 5.38, N, 15.31 %. Una solución del éster etílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolinil)sulfon¡l]-N-(met¡l)c¡cloleucina (80 mg, 0.176 mmoles) en NaOH (1 ml, 2 N) y MeOH (10 ml) se agitó a 70X durante 18 horas. La mezcla enfriada se neutralizó usando HCl (2 N) y el MeOH se retiró al vacío. El precipitado resultante se separó por filtración, se lavó con agua y se redisolvió en HCl concentrado. Esta solución se evaporó al vacío, se evaporó azeotrópícamente con tolueno, el residuo se disolvió en EtOH y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío y el sólido resultante se recristalizó en /-Pr20 para dar el clorhidrato de N-[(4-cloro-1 -guan¡dino-7-isoquinolin¡l)sulfon¡l]-N-(metil)cicloleucina (18 mg, 0.039 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 225X (desc.). ^j ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^g^^^^^^^ 1H (DMSO-de + TFA-d, 400 MHz) d 1.4-1.6 (4H, m), 1.95-2.0 (2H, m), 2.15-2.25 (2H, m), 3.0 (3H, s), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1H, d), 8.45 (1 H, s), 8.95 (1 H, s) ppm. LRMS 426, 428 (MH+). Análisis encontrado: C, 41.50, H, 4.79; N, 13.82. Calculado para C17H2oCIN504S-HCM .8H20: C, 41.27; H, 5.01 ; N, 14.15.

EJEMPLO 81 10 (a) Clorhidrato de éster terc-butílico de N-[(4-bromo-1-quanidino- 7-¡soquinolin¡l)sulfon¡l1-D-prol¡na mi Clorhidrato de N-f(4-bromo-1-quanidino-7- 15 isoquinol¡n¡l)sulfonill-D-prol¡na Se añadió NaH (48 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.6 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (233 mg, 2.43 mmoles) en DMSO (8 ml) y la solución se agitó hasta la temperatura ambiente durante 30 k____«IÍÍÍÍ______________álHé^ÍÉl^ im^i^m.^¿^^ÉMlsá?íálÍ^^^^É?¡iá£áá _,».-- _. «_.,. , __« -.. minutos. Se añadió éster ferc-butílico de ?/-[(4-bromo-1-cloro-7- isoquinolin?l)sulfon?l]-D-prolina (290 mg, 0.61 mmoles), la reacción se agitó a 60X durante 2 horas y se dejó enfriar a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de vertió en agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El aceite amarillo residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2Cl2-MeOH-NH3 0.880 (97.5:2.5:0.25) como eluyente, para dar una espuma amarilla. Esta se disolvió en Et20, se trató con HCl etéreo, la mezcla se evaporó al vacío y el residuo se trituró con Et20, para dar el clorhidrato del éster terc-butílico de ?/-[(4-bromo- 1-guanidino-7-isoqu¡nol¡n¡l)sulfonil]-D-prol¡na (166 mg, 0.31 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 203X 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.65 (1H, m), 1.8 (2H, m), 2.0 (1 H, m), 3.35 (1 H, m), 3.45 (1 H, m), 8.35 (2H, m), 8.5-8.8 (5H, m), 9.1 (1 H, s), 11.4 (1 H, s) ppm. LRMS 497, 499 (MH+). Análisis encontrado: C, 41.96; H, 4.65; N, 12.65. Calculado para C19H2 BrN5O4S HCI 0.5H2?: C, 41.96, H, 4.82, N, 12.88%. Se trató el éster terc-butílico de A/-[(4-bromo-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (150 mg, 0.28 mmoles) con una solución enfriada con hielo de HCl en EtOAc (20 ml) y la reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 4 horas. La solución se concentró al vacío y el producto bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) como eluyente. El producto se trató con HCl etéreo, el precipitado resultante se filtró, se lavó con Et20 y se secó para producir el clorhidrato de ?/-[(4-bromo-1- guanidino-7-ísoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (75 mg, 0.156 mmoles) en forma de un polvo blanco. 1H (DMSO-de 300 MHz) d 1.6 (1 H, m), 1.7-2.0 (3H, m), 3.2-3.45 (2H, m), 4.4 (1 H, m), 8.3 (2H, m), 8.5-8.85 (5H, m), 9.15 (1 H, s) pm. LRMS 443 (MH+). Análisis encontrado: C, 35.56; H, 3.54; N, 13.52. Calculado para C15H?6BrN5?4S-HCM .5H2?: C, 35.62; H, 3.99; N, 13.85%.

EJEMPLO 82 (2R) 1 -((4-cloro-1 -guanidino-7 -Soquinolinil)sulfonil.-?/-r2- (dimet¡lamino)et¡H -2-pirrolidínacarboxamida Se suspendió clorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)sulfon¡l]-L-prolina (300 mg, 0.69 mmoles) en una solución de DMF (5 gotas) y CH2CI2 (15 ml) y se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (15 µl, 1.72 mmoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, después se concentró al vacío y se evaporó azeotrópicamente con tolueno. El residuo se disolvió en CH2CI (15 ml), se añadió ?/-(2-aminoacetil)-N,N-dímetilamina (1 ml, 0.9 mmoles)y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se evaporó al vacío, el residuo se dividió entre EtOAc y solución de Na2C03, las capas se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El sólido amarillo residual se purificó por cromatografía en comuna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5 a 90:10:1 ) para dar (2RJ-1 -({4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil}sulfonil)-?/-[2- AS__ .-.^&¡£hí _ _ — - „ —^ ^^j&é^^^^>^ (dimetilamino)etil]-2-pirrolidinacarboxamida (195 mg, 0.42 mmoles) en forma de un sólido amarillo. 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.55 (1 H, m), 1.65 (1 H, m), 1.7 (2H, m), 2.15 (6H, s), 2.25 (2H, t), 3.2 (3H, m), 3.5 (1 H, m), 4.1 (1 H, dd), 7.2-7.4 (4H, s a), 7.8 (1 H, m) 8.0 (1 H, d), 8.15 (2H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 47.67; H, 5.61 ; N, 20.31. Calculado para C?9H26CIN7O3S-0.5H2O: C, 47.84, H, 5.71 , N, .56%.

EJEMPLO 83 Diclorhidrato de 1-{((4-cloro-1 -quanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil) [2- (dimetilamino)et¡n-N-(2-hidroxietil)-?/-metilc¡clopentanocarboxamida Se disolvió diclorhidrato de ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 20 ¡soquinolinil)sulfonil]-N-[2-(d¡metilamino)etil]-cicloleucina (170 mg, 0.31 mmoles) en DMF (10 µl) y CH2CI2 (15 ml). Se añadió cloruro de oxalílo (100 µl, 1.15 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se retiró al vacío, se reemplazó con CH2CI2 limpio, se añadió N- metiletanolamina (230 µl, 2.86 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la reacción se agitó durante 2 h. El disolvente se retiró al vacío y la goma resultante se extrajo con Et20 y EtOAc. Estos extractos orgánicos reunidos se concentraron al vacío y el producto bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel 5 de sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ). El aceite amarillo resultante se disolvió en EtOAc y se acidificó con HCl etéreo (1 N) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color crema (17 mg, 0.03 mmoles). 1H (DMSO-de, + TFA-d, 300 MHz) d 1.55 (4H, m), 2.0 (2H, m), 10 2.4 (2H, m), 2.6 (3H, s), 2.9 (6H, s), 3.35 (2H, m), 3.5 (3H, m), 3.95 (2H, m), 4.3 (2H, t), 8.4 (3H, m) 8.5 (1 H, s), 9.35 (1 H, s) ppm. LRMS 540, 542 (MH+) EJEMPLO 84 (a) Diclorhidrato de etil /V-[(4-bromo-1-quanidino-7-isoqu¡nol¡nil)sulfonin-?/-[2-(dimetilam¡no)etil1-cicloleucina Ü_L Diclorhidrato de ?/-({4-bromo-1 -guanidino-7-isogu¡nol¡n¡l)sulfonil)-?/-f2-(d¡metilamino)etil1-cicloleucina Una mezcla de NaH (28 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 0.93 mmoles) y clorhidrato de guanidina (126 mg, 1.32 mmoles) en DMSO seco (3 ml) se calentó a 50X durante 30 minutos. Se añadió clorhidrato de ?/-[(4-bormo-1-cloro-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-N-[2-(d¡metilamino)etil]-cicloleucina (150 mg, 0.26 mmoles) y la mezcla se calentó hasta 90X durante 1 hora, se enfrió, se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (3 x). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04) y se concentraron al vacío para dar una goma amarilla. Después de la cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5), el residuo se disolvió en EtOAc y se acidificó con HCl etéreo (1 N) para producir un precipitado blanco. Este se filtró, se secó y se iM?M__i_____H______«___ jj jg^g&^^^g'¡^g£_. ...____^ »^_J^_-fe-.,« recristalizó en EtOH para dar un sólido blanco (20 mg, 0.04 mmoles). La concentración de las aguas madre produjo una segunda recolección (95 mg, 0.17 mmoles) de diclorhídrato de etil ?/-[(4-bromo-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil]-N-[2-(dimetilam¡no)-etil]c¡cloleucina. 5 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.15 (3H, t), 1.6 (4H, m), 2.0 (2H, m), 2.3 (2H, m), 2.9 (6H, s), 3.5 (2H, m), 3.95 (2H, m), 4.0 (2H, q), 8.34 (2H, s), 8.6 (1 H, s) 9.4 (1 H, s), 11.6 (1 H, s a) ppm. LRMS 555, 557 (MH+) Análisis encontrado: C, 39.67; H, 5.61 ; N, 12.51. 10 Calculado para C22H3.BrN604S-2HCI-2H20: C, 39.77; H, 5.61 , N, 12.65%. Se trató diclorhidrato de ?/-[(4-bromo1-guanidino-7- ¡soqu¡nolinil)sulfonil]-?/-[2-(dímetilam¡no)et¡l]-c¡cloleuc¡na (95 mg, 0.17 mmoles) en EtOH (3 ml) con NaOH (4 N, 8 ml) y la solución se agitó a 60X durante 5 h 15 y se dejó en reposo durante 60 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se acidificó usando HCl 2 N, se concentró al vacío y el residuo se evaporó azeotrópicamente con /'-PrOH para dar un sólido blanquecino. Este se extrajo en MeOH, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 20 0.880 (80:20:5) como eluyente. El producto se suspendió en EtOAc, se trató con HCl etéreo, la mezcla se evaporó al vacío y el producto se trituró con EtOAc para producir el diclorhidrato de ?/-({4-bromo-1-guanidino-7- ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^¿?^^^^gH^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ ¡soquinolinil}sulfonil)-?/-[2-(dimetilam¡no)-etil]cicloleucina (15 mg, 0.027 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.45-1.6 (4H, m), 1.95 (2H, m), 2.2 (2H, m), 2.6 (6H, s), 3.1 (2H, m), 3.7 (2H, t), 7.35-7.6 (4H, s a), 8.0 (1 H, d), 8.15 (1 H, d), 8.25 (1 H, s), 9.15 (1 H, s) ppm. LRMS 527, 529 (MH+). Análisis encontrado: C, 41.31 ; H, 5.35; N, 14.14. Calculado para C20H27BrN6O4S HCI H2O: C, 41.27; H, 5.19; N, 14.44%.

EJEMPLO 85 íal Diclorhidrato de 3-f[(4-cloro-1 -quanidino-7- ¡soquinol¡nil)su!fonipamíno)-2,2-dimetilpropanoato de etilo (b) Clorhidrato de ?/-({4-cloro-1-quan¡d¡no-7-isoquinolinil)sulfonil)- 2,2-dimetil-/?-alan¡na Se preparó clorhidrato de 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡l]am¡no}-2,2-d¡met¡lpropanoato de etilo (29%) en forma de un sólido blanco a partir de 3-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolínil)sulfonil]am¡no}-2,2- dimetilpropanoato de etilo, siguiendo un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 83. pf 183-187X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.1 (6H, s), 1.15 (3H, t), 2.95 (2H, d), 20 4.0 (2H, q), 7.95 (1 H, t), 8.35 (1 H, m), 8.4 (1 H, m), 8.45 (1 H, s), 8.5-8.65 (3H, s a), 9.1 (1 H, s), 11.2 (1 H, s). LRMS 428 (MH+). Análisis encontrado: C, 43.99; H, 5.01 ; N, 14.69.

Calculado para C17H22CIN504S HCI: C, 43.97; H, 4.99; N, 15.08%. Una solución de clorhidrato 3-{[(4-cloro-1-guanidino-7- ¡soquinolinil)sulfon¡l]amino}-2,2-dimetilpropanoato de etilo (28 mg, 0.06 5 mmoles) en solución de NaOH (2N, 0.5 ml) y MeOH (1 ml) se agitó a 75X durante 24 horas. La mezcla enfriada se acidificó a pH 6 usando HCl (2 N), se concentró al vacío para retirar el MeOH y el precipitato resultante se filtró, se lavó con agua y se secó. El sólido se suspendió en una solución de MeOH/EtOAc, se añadió HCl etéreo y la mezcla se evaporó al vacío para 10 producir el clorhidrato de ?/-({4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil}sulfonil)-2,2- dimetil-/?-alan¡na en forma de un sólido blanco (22 mg, 0.05 mmoles). Pf. Deso 304X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.05 (6H, s), 2.9 (2H, d), 7.9 (1 H, t), 8.3-8.6 (6H, m), 9.05 (1 H, s) ppm.

EJEMPLO 86 (a) 1-[((4-Cloro-1-quanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfon¡l)-amino1-/V,?/- dimetilciclopentanocarboxamida (b) 1 -lf(4-Cloro-1 -guanidino-7-isoquinolin¡psulfonil] [2-(tetrahidro- 2H-p¡ran-2-¡loxi)etil1amino)-?/,?/-dimetilciclopentanocarboxam¡da (c) Clorhidrato de 1-[((4-cloro-1-quanídino-7-isoquinol¡nil)sulfonil) 10 (2-hidroxiet¡l)am¡no1-?/,?/-dimetilciclopentanocarboxamida Se añadió cloruro de oxalilo (3.5 ml, 4.0 mmoles) a una suspensión de clorhidrato de ?/-({4-cloro-1-guanidino-7- 20 isoquinol¡níl}sulfonil)cicloleuc¡na (870 mg, 1.94 mmoles) en CH2CI2 (100 ml), seguido por DMF (5 gotas) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución se concentró al vacío y se avaporó azeotrópicamente con tolueno para dar una goma amarilla. Esta se disolvió en CH2CI2 (100 ml), la solución se enfrió hasta -20X y se añadió N,N-dímetilamina fría (10 ml). La solución se dejó calentar hasta la temperatura ambiente con agitación durante 30 minutos, después se concentró al vacío y el residuo se hizo azeotrópico con tolueno. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente y se cristalizó en MeOH para producir 1-[({4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolínil}sulfon¡l)am¡no]-?/,?/-dimet¡lciclopentano-carboxamida (302 mg, 0.69 mmoles) en forma de un sólido amarillo, pf 264-268X. 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 1.35 (4H, m), 2.0 (2H, m), 2.2 (2H, m), 3.1 (6H, s), 8.35 (2H, m), 8.4-8.7 (2H, m), 9.1 (1 H, s) ppm. LRMS 439, 441 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.07; H, 5.27; N, 18.51. Calculado para C18H23CIN6?3S-0.3H2O: C, 48.66; H, 5.35; N, 18.91 %. Se añadió K C03 (113 mg, 0.82 mmoles) a una solución de 1-[^-cloro-l-guanidino^-isoquinolinilJsulfoni -amino]-/.,^-dimetilciclopentanocarboxamida (150 mg, 0.34 mmoles) en DMF (2.5 ml) y la mezcla se calentó hasta 75X. Después se añadieron 2-(2-bromoetoxi)tetrahidro-2H-pirano (J.C.S. 1948, 4187) (150 mg, 0.72 mmoles) y yoduro sódico (3 mg) y la reacción se agitó a 75X durante 3 días. La mezcla de reacción enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se ^^^¡g^^^^^^^^^^^^^^j^j£jg í^^^j i evaporaron al vacío. El aceite amarillo residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc como eluyente y se trituró con una solución de hexano-EtOAc 820:1) para dar 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil] [2-(tetrahidro-2/-/-p¡ran-2-¡loxi)etil]am¡no}-?/,?/- dímetilciclopentanocarboxamida (56 mg, 0.099 mmoles). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.45-1.85 (?H, m), 2.9-3.2 (6H, m), 3.35- 3.6 (4H, m), 3.95 (2H, m), 4.1 (1 H, m), 4.65 (1 H, s), 8.1 (3H, m), 9.25 (1 H, s) ppm. Se añadió gota a gota HCl etéreo a una solución de 1 -{[(4-cloro- 1 -guanidíno-7-isoqu¡nolin¡)sulfonil] [2-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloxi)et¡l]amino}- ?/,?/-dimetilciclopentanocarboxam¡da (37 mg, 0.065 mmoles) en EtOAc (1.5 ml), hasta que no se produjo más precipitación. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2Cl2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente, y se evaporó azeotrópicamente con tolueno. Este producto se disolvió en una solución de MeOH-CH Cl2, se añadió HCl etéreo (5 ml) y la mezcla se evaporó al vacío y se trituró con Et20 para producir el clorhidrato de 1-[({4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil}sulfonil) (2-hidroxietil)am¡no]-?/,?/-d¡metilc¡clopentanocarboxamida (9 mg, 0.017 mmoles) en forma de un sólido crema/blanco. 1H (DMSO-de + TFA-d, 300 MHz) d 1.25-1.45 (4H, m), 1.7 (2H, m), 2.25 (2H, m), 2.8-3.0 (6H, m), 3.3 (2H, m), 3.7 (2H, t), 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.6 (1 H, s a), 9.0 (1 H, s) ppm.

LRMS 483 (MH+).

EJEMPLO 87 (a)1-{f(4-Cloro-1-quan¡d¡no-7-isoqu¡nolinil)sulfonil1 [2-(tetrahidro- 2H-piran-2-ilox¡)et¡namino}-ciclopentanocarboxilato de etilo (b) Acido 1-([,4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil, -sulfonil] [2-(tetrah¡dro-2H-piran-2-iloxi)et¡l]amino}-c¡clopentanocarboxílico (c) Clorhidrato de ?/"-(4-cloro-7-. , 10-oxo-9-oxa-6-azaspiro[4.5]dec-6-il) sulfon¡n-1 -isoquinoliniDquanidina Se añadió NaH (45 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.5 mmoles) a una solución de clorhidrato de guanidina (231 mg, 2.4 mmoles) en DMSO (5 ml) y la solución se agitó a 50X durante 20 minutos. Se añadió 1-{[(1 ,4-dicloro-7-?soquinolinil)sulfonil] [2-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloxi)etil]amino} ___i__M_____1______«Í_?á_wi_ÍÍ___i ciclopentanocarboxilato de etilo (330 mg, 0.6 mmoles) y la reacción se agitó a 70X durante 2.5 horas. La reacción enfriada se vertió en agua, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. La goma amarilla residual se purificó por 5 cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente para dar 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolínil)sulfon¡l] [2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etil]amino} ciclopentanocarboxilato de etilo en forma de un aceite naranja. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.25 (3H, t), 1.45-1.75 (14H, m), 2.1 (2H, m), 2.35 (2H, m), 3.5 (1 H, m), 3.75-3.9 (4H, m), 4.0 (1 H, m), 4.2 (2H, q), 4.61 (1 H, s), 8.05-8.15 (3H, m), 9.25 (1 H, s) ppm. LRMS 568 (M+). Una solución de 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolin¡l)sulfonil] [2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etil]amino}ciclopentanocarboxilato de etilo en MeOH (5 ml) se calentó hasta 75X, se añadió una solución de NaOH (1 ml, 2 N, 2 mmoles) y la reacción se agitó a 50X durante 48 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró al vacío para retirar el MeOH y la solución acuosa restante se acidificó a pH 6 usando HCl 1 N. El precipitado resultante se filtró, se lavó con agua y el filtrado se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío para dar el ácido 1 -{[(4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil)sulfoníl] [2-(tetrahidro-2H-piran-2- iloxí)et¡l]amino}ciclopentanocarboxíl¡co (9 mg, 0.017 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. 1H (CDCIs, 300 MHz) d 1.4 (4H, m), 1.55 (4H, m), 2.0 (2H, m), 2.2 (2H, m), 3.35 (3H, m), 3.45-3.75 (5H, m), 4.5 (1 H, m), 8.0 (1 H, d), 8.15 (2H, m), 9.15 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C: 49.50; H, 5.50; N, 12.26. Calculado para C23H3oCIN5?6S-H20: C, 49.50; H, 5.78; N, 12.55%. Se disolvió el ácido 1-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfonil] [2-(tetrahidro-2 -/-piran-2- iloxi)etil]amino}c¡clopentanocarboxílico (20 mg, 0.037 mmoles) en EtOAc (20 ml), se añadió HCl etéreo (10 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El precipitado resultante se filtró, se lavó con EtOAc y se secó al vacío para dar el clorhidrato de ?/"-{4-cloro-7-[(10-oxo-9- oxa-6-azaspiro[4.5]dec-6-il)sulfonil]-1-isoquinolinil}guanid¡na (17 mg, 0.36 mmoles). 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.6-1.8 (4H, m), 2.25 (4H, m), 3.95 (2H, t), 4.4 (2H, t), 8.35 (2H, m), 8.45 (1 H, s), 9.25 (1 H, s), 11.5 (1 H, s) ppm. LRMS 437 (M+). Análisis encontrado: C, 44.04; H, 4.58; N, 14.17. Calculado para C18H20CIN4S-HCI H2O: C, 43.91 ; H, 4.71 ; N, 14.22%.

EJEMPLO 88 (a) Ester metílico de N-[(4-cloro-1-quanidino-7- ¡soquinoliniDmetillcicloleucina (b) Diclorhidrato de ?/-((4-cloro-1-quanidino-7-isoquinolinil|metil cicloleucina Se añadió NaH (52 mg, dispersión al 80% en aceite mineral, 1.73 mmoles) a una suspensión de clorhidrato de guanidina (265 mg, 2.77 mmoles) 15 en DMSO (2.5 ml) y la mezcla se calentó hasta 50X durante 20 minutos. Se añadió éster metílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-?soquinolinil)metil]-cicloleucina (245 mg, 0.69 mmoles) en DMSO (2.5 ml) y después de calentar a 90X durante 4.5 horas, la solución se vertió en agua (50 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x), los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera 20 y se secaron (Na2S04). El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (90:10:1 ) para dar un sólido amarillo. Este se disolvió en una solución de CH2CI2-MeOH y se acidificó con HCl etéreo (1 N), se concentró al vacío y el producto bruto & ¡^^^^^^^^^^^^^^^¡^^^^^^^^^^^^^^ se recristalizó en EtOH para dar el éster metílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)metil]cicloleucina (30 mg, 0.08 mmoles) en forma de un sólido crema. pf 271-275X 1H (DMSO-de- 300 MHz) d 1.25 (3H, t), 1.75 (2H, m), 1.9 (2H, m), 2.1-2.3 (4H, m), 4.25 (2H, q), 4.35 (2H, m), 8.25 (3H, m), 8.4 (1 H, s), 9.3 (1 H, s), 11.7 (1 H, s) ppm. LRMS 390 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.09; H, 5.74; N, 14.71. Calculado para C19H24CIN5O2-2HCI 0.2H2O: C, 48.93; H, 5.71 ; N, .02%. Se disolvió el éster metílico de N-[(4-cloro-1-guanidino-7-isoquinolinil)metil]cícloleucina (100 mg, 0.27 mmoles) en metanol (4 ml) a 50X, se añadió NaOH (2 N, 1 ml) y la mezcla de reacción se calentó durante 2 días a 50X. La mezcla enfriada se basificó a pH 6 con NaOH (2 N) para dar un precipitado que se separó por filtración y se lavó con agua. El sólido se disolvió en MeOH/EtOAc, se acidificó con HCl etéreo (1 N) y se trituró con /'-Pr20 para dar el compuesto del título (b) en forma de un sólido amarillo pálido (10 mg, 0.03 mmoles). pf 281-289X 1H (DMSO-de + TFA-d, 300 MHz) d 1.8 (2H, m), 1.85 (2H, m), 2.15 (2H, m), 2.25 (2H, m), 4.4 (2H, s), 8.2 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 9.15 (1 H, s) ppm.

LRMS 362 (MH+).

PREPARACIONES PREPARACIÓN 1 7-Bromo-1 ,4-dicloroisoquinolina Una solución de ácido 4-bromocinámico (5.03 g, 22.2 mmoles) en SOCI2 (15 ml) se agitó a 23X durante 16 h y después se calentó a reflujo durante 2 h más. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se evaporó azeotrópicamente con PhMe (x3) para producir cloruro de 4- bromocinamoílo (22 mmoles) en forma de un sólido de color naranja-pardo. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) d 6.65 (1 H, d), 7.4 (2H, d), 7.6 (2H, d), 7.8 (1 H, d) ppm. Una solución de NaN3 (2.2 g, 33.8 mmoles) en agua (7.5 ml) se añadió gota a gota durante 5 minutos a una solución agitada de cloruro de 4- bromocinamoílo (22 mmoles) en acetona (22 ml) a -10X. La mezcla heterogénea se agitó a 0X durante 1 h y se diluyó con agua (25 ml). El precipitado se recogió por filtración y se secó al vacío sobre P205 para dar azída de 4-bromocinamoílo (5.22 g, 20.7 mmoles) en forma de un sólido de color dorado. 1H RMN (CDCIs, 300 MHz) d 6.4 (1 H, d), 7.4 (2H, d), 7.5 (2H, d), 7.65 (1 H, d) ppm.

Se añadió gota a gota una solución caliente de azida de 4- 10 bromocinamoílo (5.22 g, 20.7 mmoles) en Ph20 (25 ml) durante 15 minutos a Ph20 (10 ml) agitado a 270X. [PRECAUCIÓN: potencialmente explosivo - usar una pantalla amortiguadora.] La mezcla se calentó a 270X durante 1.5 horas, se enfrió hasta 23X y después se vertió en hexanos (400 ml). El precipitado se recogió por filtración, aclarando con hexanos (2 x 100 ml), y se 15 purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (6:4 a 0:100) como eluyente para dar 7-bromo-1 (2/-/)- isoquinolona (1.64 g, 7.3 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHz) d 6.55 (1 H, d), 7.25-7.15 (1 H, m), 7.6 (1 H, d), 7.8 (1 H, d), 8.25 (1 H, s), 11.4 (1 H, s a) ppm.

Una mezcla de 7-bromo-1(2/- )-isoquinolona (1.28 g, 5.69 mmoles) y PCI5 (2.04 g, 9.80 mmoles) se calentó a 140X durante 5 horas. La mezcla enfriada se inactivo con hielo (50 g) y se añadió NH3 0.880 hasta que se hizo alcalina como se demuestra mediante el uso de papel de tornasol. La mezcla acuosa se extrajo con CH2CI2 (3 x 50 ml) y las fases orgánicas reunidas se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (97:3 a 95:5) como eluyente para dar 7-bromo-1 ,4-dicloro?soquinolina (1.13 g, 4.08 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 133.5-135X 1H (CDCI3, 300 MHz) d 7.9 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.35 (1 H, s), 8.5 (1 H, s). LRMS 276, 278 (MH+) Análisis encontrado: C, 39.04; H, 1.32; N, 5.06. Calculado para C9H4BrCI2N: C, 39.03; H, 1.46; N, 5.06. _,-..__?ft«_^--A..._ .._ _. .___ _, _ -_^_- jJriSLJiÍJÍ»fciatiMÉte 8^J^ r,-^_ -._ .....j^ ._^^ ..-__ _ -«.. . a-_-l___ PREPARACIÓN 2 2-Aminobenzoato de t-butilo Una mezcla de cloruro de 2-nitrobenzoílo (15 ml, 110 mmoles) y f-BuOH (100 ml) se calentó a reflujo durante 3 horas. La mezcla enfriada se 10 vertió en agua enfriada con hielo, se basificó con Na2C?3 y se extrajo con CH2CI2 (x 2). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (95:5) como eluyente para dar 2-nitrobenzoato de f-butilo (4.9 g, 22 moles) en forma de un aceite 15 amarillo. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.6 (9H, s), 7.5 (1 H, dd), 7.6 (1 H, dd), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, d) ppm. LRMS 240 (MNH4+). Una solución de 2-nitrobenzoato de f-butilo (4.9 g, 22 mmoles) 20 en EtOH (160 ml) se agitó con paladío al 10% sobre carbono (700 mg) bajo una atmósfera de H2 (60 psi) (413,68 kPa) a 23X. Después de 4 h, la mezcla se filtró y se evaporó al vacío para dar 2-aminobenzoato de f-butilo (4.0 g, 20.7 mmoles) en forma de un aceite amarillo. -^ *- ^sgÉ&a*^^j«g£ÍÉ ^ 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.6 (9H, s), 5.6-5.8 (2H, s a), 6.6 (1H, dd), .2 (1H, dd), 7.8 (1H, d) ppm. LRMS 194 (MH+).

*• —-" ¡JÍM »5-J- wsg PREPARACIÓN 3 2-1.(1 ,4-Dicloro-7-¡soqu¡nolinil)sulfon¡namino)benzoato de f-butilo Se añadió gota a gota /.-butil-litio (0.88 ml, 2.5 M en hexanos, 2.2 mmoles) a una solución agitada de 7-bromo-1 ,4-dicloroisoquinolina (570 mg, 2.0 mmoles) en THF-Et20 (10 ml, 1 :1) bajo N2 a -78X. Después de 5 minutos, la mezcla se añadió a una solución de S02CI2 (0.35 ml, 4.35 mmoles) en hexano (10 ml) a -78X bajo N2 y la mezcla se calentó lentamente hasta 23X y después se agitó durante 4.5 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con CH2CI2 y PhMe, el residuo se suspendió en CH2CI2 (12 ml) que contenía NEt3 (1.15 ml, 8.25 mmoles) y se añadió 2- aminobenzoato de f-butilo (520 mg, 2.7 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días y después se calentó a reflujo durante 6 horas. La mezcla enfriada se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl acuoso (2 M) y salmuera y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (97:3 a 95:5) como eluyente para da, inicialmente, 1 ,4,7-tricloroisoquinolina (200 mg) seguido por 2-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-benzoato de f-butilo (120 mg, 0.26 mmoles) en forma de una resina amarilla.

^^X^^-.-.X^ , .. ..« . . -*__M_ÉÍI_ _a_l_____-_ --«. .- . ^Ai_- 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 7.05 (1 H, dd), 7.5 (1 H, dd), 7.7 (1 H, d), 7.8 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.8 (1 H, s), 10.0 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+) PREPARACIÓN 4 3-Aminobenzoato de f-butilo Una mezcla de ácido 3-nitrobenzoico (5 g, 30 mmoles), dicarbonato de di-terc-butilo (20 g, 92 mmoles) y DMAP (0.84 g, 6.9 mmoles) en THF (60 ml) se agitó a 23X durante 2 días. La mezcla se vertió en agua enfriada con hielo, se basificó con Na2S0 y se extrajo con CH2CI2 (x3). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (95:5) como eluyente para dar 3-nitrobenzoato de f-butílo (5.4 g, 24 mmoles) en forma de un aceite incoloro. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 7.6 (1 H, dd), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.8 (1 H, s) ppm. -*"**-• »-"-" — Éi_„- __ -.= __ .. k tu_____H__a Una solución de 3-aminobenzoato de f-butilo (5.8 g, 26 mmoles) en EtOH (260 ml) se agitó con paladio al 10% sobre carbono (1.0 g) bajo una atmósfera de H2 (60 psi) (413.68 kPa) a 23X. Después de 4 horas, la mezcla se filtró y se evaporó al vacío para dar 3-amínobenzoato de f-butilo (4.0 g, 20.7 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.6 (9H, s), 3.6-3.9 (2H, s a), 6.8 (1 H, d), 7.2 (1 H, dd), 7.3 (1 H, s), 7.4 (1 H, d) ppm. LRMS 194 (MH+), 387 (M2H+).

PREPARACIÓN 5 3-1.(1.4-Dicloro-7-isoquinolinil,sulfonM1amino)benzoato de f-butilo Se añadió gota a gota n-butil-litio (0.88 ml, 2.5 M en hexanos, 2.2 mmoles) a una solución agitada de 7-bromo-1 ,4-dicloroisoquinolina (570 mg, 2.0 mmoles) en THF-Et20 (10 ml, 1 :1) bajo N2 a -78X. Después de 5 minutos, la mezcla se añadió a una solución de S02CI2 (0.35 ml, 4.35 mmoles) en hexano (10 ml) a -78X bajo N2 y la mezcla se calentó lentamente hasta 23X y después se agitó durante 4.5 h. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe, el residuo se suspendió en CH2CI2 ..._- ..^- i », ^_»______..__^_._._J_U. ''"^^•^ - -^*-^-..^...*&& ng- (12 ml) y se añadió 3-aminobenzoato de f-butilo (520 mg, 2.7 mmoles) seguido por NEt3 (1.15 ml, 8.25 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 días y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (90:10 a 50:50) como eluyente para dar inicialmente 1 ,4,7-tricloroisoquinolina (150 mg) seguido por 2-{[(1 ,4-dícloro-7-isoqu¡nol¡nil)sulfonil]am¡no}benzoato de f-butilo (289 mg, 0.63 mmoles) en forma de un sólido pardo que se usó sin purificación adicional. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) datos seleccionados: d 1.5 (9H, s), 7.20-7.25 (1 H, m), 7.3-7.45 (1 H, m), 7.5 (1 H, dd), 7.6 (1 H, s), 8.45 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 8.6 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 454 (MH+).

PREPARACIÓN 6 15 Cloruro de 1 ,4-dícloro-7-isoquinolinasulfonilo Una solución de N-clorosuccinimida (9.66 g, 72 mmoles) en MeCN (80 ml) se añadió gota a gota a una solución agitada de 1 -(2/-/)- isoquinolona (10 g, 69 mmoles) en MeCN (250 ml) que se estaba calentando a reflujo. La mezcla se calentó a reflujo durante 1.5 h más y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado resultante se recogió por filtración, aclarando con MeCN, y después se secó al vacío para dar 4-cloro-1 (2/- )-¡soquinolona (11.3 g, 62.9 mmoles) en forma de un sólido de color rosa pálido. 1H RMN (DMSO-de, 300 MHz) d 7.5 (1 H, s), 7.6 (1 H, dd), 7.8-7.9 (2H, m), 8.25 (1 H, d), 11.5 (1 H, s a) ppm. LRMS 180, 182 (MH+), 359, 361 , 363 (M2H+).

Se añadió por porciones 4-cloro-1-(2/-/)-isoquinolona (20.62 g, 115 mmoles) a ácido clorosulfónico agitado (61 ml, 918 mmoles) a 0X. La mezcla se calentó a 100X durante 3.5 días y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se añadió en pequeñas porciones sobre agua enfriada con hielo [PRECAUCIÓN] y el precipitado resultante se recogió por filtración. El sólido se lavó con agua, se trituró con MeCN y después se secó al vacío para dar cloruro de 4-cloro-1-oxo-1 ,2-dihidro-7-isoquinolinasulfonilo (18.75 g, 67.4 mmoles) en forma de un sólido de coloro crema. 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz) d 7.45, (1 H, s), 7.8 (1 H, d), 8.0 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 11.5 (1 H, s a) ppm. ^j^g ^| tA^¡^^¡ g¡¡^ Análisis encontrado: C, 39.37; H, 2.09; N, 4.94. Calculado para C9H5CI2N03S: C, 38.87; H, 1.81 ; N, 5.04.

Se añadió POCI3 (9.65 ml, 103.5 mmoles) a una suspensión agitada de cloruro de 4-cloro-1-oxo-1 ,2-díhidro-7-isoqu¡nolinasulfonilo (22.1 g, 79.6 mmoles) en MeCN (500 ml) a temperatura ambiente y la mezcla después se calentó a reflujo durante 15 h. Tras la refrigeración, la solución de MeCN se decantó del lodo ¡nsoluble y se evaporó al vacío. El residuo se extrajo con EtOAc caliente y se evaporó para dejar un sólido que se agitó con Et20 (1.2 I) a temperatura ambiente durante una noche. La solución etérea se decantó del material insoluble y se evaporó al vacío para dar cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (20 g, 67 mmoles) en forma de un sólido de color amarillo pálido. 1H (DMSO-de, 400 MHz) d 8.2 (2H, s), 8.5 (1 H, s), 8.55 (1 H, s) ppm. 20 Análisis encontrado: C, 37.19; H, 1.34; N, 4.77. Calculado para C9H4CI3N02S: C, 36.45; H, 1.36; N, 4.72.

PREPARACIÓN 7 3-{r(1 ,4-Dicloro-7-¡soquinolinil)sulfoninamino>-4-metoxibenzoato de metilo Se añadió 3-amíno-4-metoxibenzoato de metilo (212 mg, 1.17 mmoles) a una solución agitada de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (342 mg, 1.15 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) que contenía 2,6-lutidina (0.135 ml, 1.16 mmoles) bajo N2 a OX. Después de 5 minutos, la mezcla se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 22 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se suspendió en EtOAc (50 ml) y después se lavó con agua y con salmuera, se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos -EtOAc (80:20 a 20:80) como eluyente para dar 3-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-4-metoxibenzoato de metilo (365 mg, 0.83 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) d 3.7 (3H, s), 3.9 (3H, s), 6.75 (1 H, d), 7.2 (1 H, s), 7.8 (1 H, dd), 8.15 (1 H, dd), 8.25 (1 H, s), 8.3 (1 H, d), 8.5 (s, 1 H), 8.85 (1 H, s) ppm. LRMS 441 (MH+), 458 (MHNH4+). _____t______l__lÉ_t__^MÍ_É -J__ri_£ - _<_*_»__- ,- ____.„._ ¡g¡ ¡ ttjbg&tt£^¡ £ PREPARACIÓN 8 Ester t-butílico de ?_-r(1,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonipqlicina Se añadió NEÍ3 (0.59 ml, 4.24 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de éster t-butílico de glicina (340 mg, 2.02 mmoles) y cloruro 1 ,4- dicloro-7-isoquinolinalsulfonilo (500 mg, 1.68 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (25 ml), se lavó con HCl diluido (x2, 1 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El sólido se trituró con EtOAc, se recogió mediante filtración y se secó para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-d¡cloro-7-¡soqu¡nolin¡l)sulfonil]gl¡c¡na (435 mg, 1.11 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 194-196X. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.8 (2H, d), 5.3 (1 H, t a), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 391 (MH+), 408, 410 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 45.58; H, 4.03; N, 7.03. Calculado para C15H?6CI204S: C, 46.04; H, 4.12; N, 7.16. ______Í____áriláldÉiiÍMlÍltfÍriMÍIHll__ÉI___i ítí w tMS mmltMH --*- _Mffi PREPARACIÓN 9 Ester t-butílico de -V-.(1,4-dicloro-7-isoquinolinil,su.foniH-ß-alan¡na Se añadió NEt3 (0.60 ml, 4.3 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de éster t-butílico de /?-alanina (331 mg, 1.82 mmoles) y cloruro 10 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (510 mg, 1.72 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con salmuera saturada a la mitad, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (90:10 a 15 60:40) como eluyente para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquínolinil)sulfonil]-ß-alanina (580 mg, 1.43 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCIs, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 2.5 (2H, t), 3.25 (2H, dt), 5.5 (1 H, t a), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. 20 LRMS 405, 407 (MH+), 422 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 47.41 ; H, 4.46; N, 6.80. Calculado para C16H18CI2N204S: C, 47.42; H, 4.48; N, 6.91. " -*- ' - - i -, __^_. ^^á?jjkeí í&^^^^tó^ PREPARACIÓN 10 Ester t-butílico de N-r(1,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfon¡n-?f-metilqlicina Se añadió clorhidrato de éster t-butílico de ?/-metilglic¡na (264 mg, 1.45 mmoles) a una solución agitada de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (376 mg, 1.27 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) que contenía NEt.3 (0.44 ml, 3.16 mmoles) bajo N2 a OX, y la mezcla después se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo s disolvió en EtOAc (50 ml), se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentanos-EtOAc (80:20) como eluyente para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]-?/-metilglicina (485 mg, 1.20 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) d 1.35 (9H, s), 3.0 (3H, s), 4.05 (2H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm. LRMS 709 (M2H+). Análisis encontrado: C, 47.37; H, 4.43; N, 6.79. Calculado para C16H18CI2N204S: C, 47.42; H; 4.48; N, 6.91. ^^^^^^¿¿¡¡¿^^gS?^^e PREPARACIÓN 11 Ester t-butílico de /.-fenilglicina Se añadió cloroacetato de t-butilo (10 g, 66.3 mmoles) a una solución agitada de anilina (11.3 g, 120 mmoles) en NEt3 (10 ml) y la mezcla se agitó hasta la temperatura ambiente durante 24 horas y después a 60X 10 durante 18 h. La mezcla enfriada se diluyó con Et20 (100 ml), se filtró aclarando con Et20 y el filtrado después se lavó con agua y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (98:2 a 92:8) como eluyente para dar éster t-butílíco de ?/-fenilglicina (6.56 g, 31.6 15 mmoles) en forma de un aceite. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 3.8 (2H, s), 4.45 (1 H, s a), 6.6 (2H, d), 6.7 (1 H, t), 7.2 (2H, dd) ppm. LRMS 208 (MH+), 415 (M2H+).

PREPARACIÓN 12 Ester t-butílico de ?M(1,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfoni.1-^fenilqlicina Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfon¡lo (300 mg, 1.01 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-fenilglicína (228 10 mg, 1.10 mmoles) en CH2CI2 (5.0 ml) que contenía NEt3 (0.35 ml, 2.5 mmoles) bajo N2 a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 5 días. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (20 ml, 1 M), y con NaHC03 acuoso saturado, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice 15 usando hexanos-EtOAc (90:10 a 60:40) como eluyente para dar éster t- butílico de /V-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-fenilglicina (485 mg, 1.20 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCIs, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 4.4 (2H, d), 7.2-7.4 (5H, m), 8.05 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. 20 LRMS 467 (MH+). !f__MÍtÍ__M____Í___Í_ jMUIh->*"-J¿' *' *-« " J* '««*"-*« PREPARACIÓN 13 Ester t-butílico de ?.-(ciclopentilmetil)-?.-f(1 ,4-dicloro-7- isoquinoliniQsulfonil.glicina Se añadieron PPh3 ( 243 mg, 1.5 mmoles) y después una solución de DEAD (236 µl, 1.5 mmoles) en THF (2 ml) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dícloro-7-isoquinolinil)sulfonil]glicina (391 mg, 1.00 mmoles) y ciclopentanometanol (130 µl, 1.2 mmoles) en THF (3 ml) bajo N2 a 0X, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadieron una porción más de ciclopentanometanol (1.2 mmoles), PPh3 (1.5 mmoles) y DEAD (1.5 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días más. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 95:5) como eluyente para dar éster t-butílico de N- (ciclopentilmetil)-?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]gl¡cina (144 mg, 0.30 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) d 1.15-1.4 (3H, m), 1.3 (9H, s), 1.5- 1.7 (3H, m), 1.7-1.8 (2H, m), 2.1 (1 H, m), 3.25 (2H, d), 4.1 (2H, s), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm. _____KI_________rial_____i_i ,^_afe_>___ _-a-_-__. .__•-_ ___. ._ __-_ LRMS 473 (MH+), 490, 492 (MNH4+). Análisis encontrado; C, 53.23; H, 5.58; N, 5.86. Calculado para C2?H26CI2N204S: C, 53.28; H, 5.54; N, 5.92.

PREPARACIÓN 14 Ester t-butílico de ? -(ciclohexilmetil)-/V-[(1,4-dicloro-7- isoquinolinil.sulfonip licina Se añadió bromuro de ciclohexilmetilo (209 µl, 1.5 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?7-[(1 ,4-dicloro-7- isoqu¡nolinil)sulfonil]glic¡na (391 mg, 1.00 mmoles) y K2C03 anhidro (276 mg, 2.0 mmoles) en DMF (5 ml) bajo N2 a 23X. La mezcla se agitó durante 2 horas y después se calentó a 50-60X durante 6 horas. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc (200 ml), se lavó con agua (250 ml), se secó (MgS0 ) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 95:5) como eluyente para dar éster t-butílico de ?/-(ciclohexilmetil)-?/-[(1 ,4- dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]gl¡cina (320 mg, 0.66 mmoles). 1H (CDCIs, 400 MHz) d 1.15-1.3 (3H, m), 1.3 (9H, s), 1.5-1.8 (8H, m), 3.15 (2H, d), 4.05 (2H, s), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm. LRMS 487 (MH+), 504, 506, 508 (MNH4+).

PREPARACIÓN 15 Ester t-butílico de ?/-bencilqlicina Una solución de bromoacetato de t-butilo (1.5 ml, 10.1 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se añadió gota a gota una solución agitada de bencilamina (10.9 ml, 100 mmoles) en CH2CI2 (40 ml) a 0X, la mezcla se agitó durante 1 hora y después se calentó bajo temperatura ambiente y se agitó durante 3 días más. La mezcla se lavó con agua (3 x 50 ml) y con HCl diluido (1 N) y los lavados acuosos reunidos se extrajeron con Et 0. La fase orgánica se lavó con NaHC?3 acuoso saturado, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en Et20, se trató con una solución de HCl en éter (0.5 M) y el precipitado resultante se recogió y se disolvió en EtOAc. Esta solución se filtró a través de hyflo y se evaporó parcialmente al vacío para dar una suspensión espesa. El sólido se recogió por filtración, se lavó con Et20 y g^^^^^^^^^^^A^^^^^^^^^^^S^^^^^^ después se secó para dar clorhidrato de éster t-butílico de ?/-bencilglicina (1.03 g, 4.0 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCIs, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 3.5 (2H, s), 4.4 (2H, s), 7.3- 7.4 (3H, m), 7.55-7.65 (2H, m), 10.2-10.3 (2H, s a). LRMS 222, (MH+), 443 (M2H+).

PREPARACIÓN 16 Ester t-butílico de ?/-f(1 ,4-dicloro-7-isoquinoHnil.-sulfonip-?_-bencilglicina Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (300 mg, 1.01 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-bencilglicina (310 mg, 1.20 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) que contenía NEt3 (0.35 ml, 2.5 mmoles) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. La mezcla se diluyó con CH2CI2 y se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexanos-EtOAc (90:10) como eluyente para dar éster t-butílico de /V-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-?/-benc¡lglicina (290 mg, 0.60 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. pf 134-136X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.9 (2H, s), 4.55 (2H, s), 7.25- 7.4 (5H, m), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 481 (MH+), 498 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 54.52; H, 4.50; N, 5.77. Calculado para C22H22CI2N204S: C, 54.89; H, 4.61 ; N, 5.82.

PREPARACIÓN 17 Ester t-butílico de ?/-(2-meti!bencil.ql¡cina Se añadió cloroacetato de t-butilo (2.13 g, 14.1 mmoles) a una 15 solución agitada de 2-metilbencilamina (1.71 g, 14.1 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) que contenía NEt3 (2.95 ml, 21.2 mmoles) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se suspendió en EtOAc y se lavó con agua y con salmuera, se secó (MgS0 ) y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó 20 mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentanos- EtOAc (95:5 a 80:20) como eluyente para dar éster t-butílíco de ?/-(2- metilbencil)glicina (1.29 g, 5.48 mmoles). -jj gMj-¿Éii . « ^ _^.-«____-A._. ^ ^.-C,^^,,. ________________i___ 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.5 (9H, s), 2.35 (3H, s), 3.3 (2H, s), 3.8 (2H, s), 7.1-7.2 (3H, m), 7.25-7.3 (1 H, m) ppm. LRMS 236 (MH+), 471 (M2H+).

PREPARACIÓN 18 Ester t-butílico de ?H .1 ,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)-sulfonip-?.-(2- metilbencil)glicina Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (400 mg, 1.35 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-(2- metilbencil)glic¡na (380 mg, 1.61 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) que contenía NEt3 (0.28 ml, 2.5 mmoles) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 y se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS0 ) y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 90:10) como eluyente para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfon¡l]-?/- (2-metilbencil)glicina (480 mg, 0.97 mmoles) en forma de un sólido blanco, pf 96-98X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.25 (9H, s), 2.3 (3H, s), 3.9 (2H, s), 4.6 (2H, s), 7.1-7.25 (4H, m), 8.3 (1H, d), 8.4 (1H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 495 (MH+), 512 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 55.70; H, 4.86; N, 5.63. Calculado para C23H2 CI2N2?4S: C, 55.76; H. 4.88; N, 5.65.

PREPARACIÓN 19 Ester t-butílico de ?/-(2-metoxibencil)glicina Una solución de bromoacetato de t-butilo (1.5 ml, 10.2 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) se añadió a una solución agitada de 2-metoxibencilamína (6.88 g, 50.2 mmoles) en CH2CI2 (70 ml) bajo N2 a 0X, y la mezcla después se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se lavó minuciosamente con HCl diluido (30 ml, 1 M) y la fase acuosa separada se extrajo con CH CI2. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con NaHC03 saturado y con salmuera, se secaron (Na2S04) y después se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH (99:1 a 95:5) como eluyente para dar éster t- - ÍÍTl .fÍÍí^_rfci^^^,^*'^J*" butílico de ?/-(2-metoxibencil)glic?na (0.90 g, 3.58 mmoles) en forma de un aceite amarillo pálido. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.25 (9H, s), 2.0 (1 H, s a), 3.3 (2H, s), 3.8 (2H, s), 3.85 (3H, s), 6.85 (1 H, d), 6.9 (1 H, dd), 7.2-7.3 (2H m) ppm. LRMS 252 (MH+), 503 (M2H+), 525 (M2Na+). Análisis encontrado: C, 66.52; H, 8.54; N, 5.54. Calculado para C14H21N03; C, 66.91 ; H, 8.42; N, 5.57.

PREPARACIÓN 20 Ester t-butílico de ?/-,(1 ,4-dicloro-7-isoquinolin¡l)-sulfonill-.V-(2- metoxibencíDglicina Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de A/-(2-metoxibencil)glicina (508 mg, 2.02 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) que contenía NEt3 (0.35 ml, 2.5 mmoles) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 y se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC?3 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante _____--_ .-ajasa_ cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (95:5 a 90:10) como eluyente y después se trituró con hexano-í-Pr20 para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-(2-metoxibencil)glicina (501 mg, 1.02 mmoles) en forma de un sólido amarillo. pf 106-108X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.7 (3H, s), 4.0 (2H, s), 4.6 (2H, s), 6.8 (1 H, d), 6.9 (1 H, dd), 7.2 (1 H, dd), 7.3 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 511 , 513 (MH+), 528 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 54.09; H, 4.78; N, 5.33. Calculado para C23H24Cl2N2?5S: C, 54.01 ; H, 4.73; N, 5.48.

PREPARACIÓN 21 Ester butílico de ?_-(3-metoxibencil)qlicina Una solución de bromoacetato de t-butilo (1.5 ml, 10.1 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) se añadió gota a gota a una solución agitada de 3-metoxibencilamina (6.86 g, 50 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) a 0X y la mezcla después se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 1.5 . __^_ , ._A__ ..... jifÜf - - - f-^*^^.- ~_ __»_,_...... . , ^ .. horas. Se añadió HCl diluido (30 ml, 1 M) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. La fase acuosa se extrajo con CH2CI2 y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua, con salmuera y con NaHC03 acuso saturado, se secaron (MgS0 ) y después se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH (99:1 a 90:10) como eluyente para dar la amina requerida en forma de un aceite incoloro. El tratamiento con una solución de HCl en éter (1 M) dio clorhidrato de éster t-butílico de ?/-(3-metoxibencil)-glicina (0.83 g, 2.88 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 141-142X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.45 (9H, s), 3.5 (2H, s), 3.85 (3H, s), 4.35 (2H, s), 6.9 (1 H, d), 7.1 (1 H, d), 7.3 (1 H, s), 7.3-7.35 (1 H, m), 10.3 (2H, s a) ppm. LRMS 252 (MH+), 503 (M2H+). Análisis encontrado: C, 58.37; H, 7.75; N, 4.83. Calculado para d4H2?N03-HCI: C, 58.43; H, 7.71 ; N, 4.87. ... -.. -____- -.- _----... -.,. . .. .. . . ..^d^^^ ?^?^^^^^.^^^.^. __ .__... .._.__ ^r»,' - - . r - PREPARACIÓN 22 Ester t-butílico de ?/-r(1,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)-sulfonil,-/V-(3- metoxibencil.qlicina Se añadieron NEt3 (0.59 ml, 4.24 mmoles) y después cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfon¡lo (500 mg, 1.68 mmoles) a una solución agitada de clorhidrato de éster t-butílico de /V-(3-metoxibencil)glicina (582 mg, 2.02 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (25 ml), se lavó con HCl diluido (x2, 1 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se extrajo con /'-Pr20 que dio un precipitado tras un período de reposo. El sólido blanco se recogió por filtración y se secó para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfonil]-?/-(3-metoxibencil)glicina (262 mg, 0.51 mmoles). Se obtuvo un segundo lote (165 mg, 0.32 mmoles) mediante la evaporación de las aguas madre y la purificación del residuo por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20). pf 129-131 X. ^a ii....i..^tt___í_________te________í ^•"" 1H (CDCIs, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.75 (3H, s), 3.9 (2H, s), 4.55 (2H, s), 6.8-6.9 (2H, m), 6.85 (1 H, s), 7.25 (1 H, m), 8.3 (1H, d), 8.4 (1H, d), 8.5 (1H, s), 8.9 (1H, s) ppm. LRMS 511 (MH+), 528 (MNH4+). Análisis encontrado: C. 54.03; H, 4.79; N, 5.34. Calculado para C23H2 CI2N205S: C, 54.01 ; H, 4.43; N, 5.48.

PREPARACIÓN 23 Ester t-butílico de ?/-r(1 ,4-dicloro-7-isoquinolin¡l)-sulfonil-?.-(3- clorobencil.glicina Se añadió cloruro de 3-clorobencilo (0.063 ml, 0.50 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de /V-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]glicina (195.5 mg, 0.50 mmoles) en DMF (5 ml) que contenía K2C03 (83 mg, 0.60 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con agua (50 ml), se extrajo con Et 0 (3 x 30 ml) y con EtOAc (3 x 30 ml) y los extractos orgánicos reunidos después se lavaron con agua y con salmuera, se secaron (Na2SO4) y Mͧ Í| se evaporaron al vacío. El sólido se trituró con hexanos, se recogió mediante filtración y se secó para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil-?/-(3-clorobencil)glicina (212 mg, 0.41 mmoles) en forma de un sólido amarillo pálido. pf 141-143X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.95 (2H, d), 4.5 (2H, s), 7.15-7.3 (4H, m), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm LRMS 515, 517 (MH+), 532, 534 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 51.14; H, 4.14; N, 5.31. Calculado para C22H21CI3N204S: C, 51.22; H, 4.10; N, 5.43.

PREPARACIÓN 24 Ester t-butílico de ?.-(4-metoxibencil, glicina Una solución de bromoacetato de t-butilo (1.5 ml, 10.2 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) se añadió gota a gota a una solución agitada de 4-metoxibencilamina (6.89 g, 50.2 mmoles) en CH2CI2 (70 ml) a 0X y la mezcla después se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. Se añadió HCl diluido (30 ml, 1 M) y la mezcla se agitó durante 10 minutos. La fase acuosa se extrajo con CH2CI2 y los extractos orgánicos reunidos se ,.< M^^?^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^¿^^^^ lavaron con NaHC03 acuoso y con salmuera, se secaron (Na2S04) y después se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH (99:1 a 90:10) como eluyente para dar la amina requerida en forma de un aceite incoloro. El 5 tratamiento con una solución de HCl en éter (1 M) seguido por trituración con Et20 dio clorhidrato de éster t-butílico de ?/-(4-metoxibencil)glicina (148 mg, 0.51 mmoles) en forma de un sólido naranja. pf 133-134X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.45 (9H, s), 3.5 (2H, s), 3.8 (3H, s), 4.3 10 (2H, s), 6.9 (2H, d), 7.5 (2H, d), 10.2 (2H, s a) ppm. LRMS 252 (MH+), 503 (M2H+), 525 (M2Na+). Análisis encontrado: C, 58.08; H, 7.71 ; N, 4.80. Calculado para C14H21N03 HCI: C, 58.42; H, 7.71 ; N, 4.87. _¡______________ Sü.9. -ais - ÍMfifWHtArr*a~*'< .^^^k. ^ *_>___.__ £_ _- ..____&__» _¿>^^,» PREPARACIÓN 25 Ester t-butílico de ?--r(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil,-sulfon¡p-?.-(4- metoxibeni!)qlicina Se añadieron NEt3 (0.25 ml, 1.78 mmoles) y después cloruro de 10 1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nasulfonilo (210 mg, 0.71 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílíco de ?/-(4-metoxibencil)glicina (245 mg, 0.85 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) bajo N2 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se 15 evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (95:5 a 90:10) como eluyente y después se trituró con hexano-/'-Pr20 para dar éster t-butílico de ?/-[(1 ,4- dicloro-7-¡soquinol¡nil)sulfon¡l]-?/-(4-metoxibencil)gl¡c¡na (160 mg, 0.31 mmoles) en forma de un sólido blanco. 20 pf 117-118X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 3.8 (3H, s), 3.9 (2H, s), 4.5 (2H, s), 6.85 (2H, d), 7.2 (2H, d), 8.3 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. £aUi^Hu?aBiiMkABaisrtfaB?-£^É^ü^Sife*Mcii&^^EU^ari&___B ^g^^. aat ss_ .-»+ =é___~ ....¿a __ _ _.________» __tf__j__l______É____ LRMS 51 1 (MH+), 528 (MNH4+). Análisis encontrado C, 53.90; H, 4.59; N, 5.34. Calculado para C23H24CI2N205S: C, 54.01 ; H, 4.73; N, 5.48.

PREPARACIÓN 26 Ester f-butílico de ?.-r(1 .4-d¡cloro-7-isoquinolinil)-sulfon¡p-?_-(2- piridilmetiDglicina Se añadió clorhidrato de 2-(clorometil)piridina (246 mg, 1.5 mmoles) a una solución agitada de éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- 5 isoquinol¡n¡l)sulfon¡l]gl¡cína (391 mg, 1.0 mmoles) y K2C03 anhidro (415 mg, 3.0 mmoles) en DMF (5 ml) bajo N2 a 23X y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla enfriada se evaporó azeotrópicamente con xileno, se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y los extractos orgánicos después se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 50:50) como eluyente para dar éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)sulfon¡l]-?/-(2-piridinilmetil)-gl¡cina (400 mg, 0.83 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 4.1 (2H, s), 4.7 (2H, s), 7.1 (1 H, m), 7.5 (1 H, d), 7.7 (1 H, dd), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, m), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s), ppm. LRMS 482, 484 (MH+).

PREPARACIÓN 27 Ester f-butílico de ?/-f 1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonin-?.-(3- piridilmetiPglicina Se añadió clorhidrato de 3-(clorometil)piridina (246 mg, 1.5 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]glicina (391 mg, 1.0 mmoles) y K2C03 anhidro (416 mg, 3.0 mmoles) en DMF (5 ml) bajo N2 a 23X y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla enfriada se evaporó azeotrópicamente con xileno, se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y los extractos orgánicos después se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 50:50) como eluyente para dar éster í-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- - ' JteüSai? - -..- ._ifc_ isoquinol¡nil)sulfonil]-?/-(3-piridilmetil)gl¡c¡na (400 mg, 0.83 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 4.1 (2H, d), 4.7 (2H, s), 7.1 (1 H, m), 7.5 (1 H, d), 7.7 (1 H, dd), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, m), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 482, 484 (MH+).

PREPARACIÓN 28 Ester f-butílico de ?H.1,4-dicloro-7 -isoqu¡nolin¡Dsulfonip-?/-(4- piridilmetiPqlicina Se añadió clorhidrato de 4-(clorometil)pírid¡na (246 mg, 1.5 mmoles) a una solución agitada de éster t-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfon¡l]glicina (391 mg, 1.0 mmoles) y K2C03 anhidro (416 mg, 3.0 mmoles) en DMF (5 ml) bajo N2 a 23X y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla enfriada se evaporó azeotrópicamente con xileno, se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y después los extractos orgánicos se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante É^W ^^^^ ^^ cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 50:50) como eluyente para dar éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolin¡l)sulfonil]-?/-(4-p¡ridilmet¡l)glicina (397 mg, 0.82 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 4.0 (2H, d), 4.6 (2H, s), 7.3 (2H, d), 8.25 (1 H, dd), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.6 (2H, d), 8.9 (1 H, d) ppm. LRMS 482, 484 (MH+).

PREPARACIÓN 29 Ester t-butílico de ?.-..I R.-1-feniletiPlqlicina Una solución de bromoacetato de f-butilo (5.0 g, 25.6 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) se añadió gota a gota a una solución agitada de (+)-(/ .)-8,1- metilbencilamina (4.65 g, 38.5 mmoles) en CH2CI2 (40 ml) a 0X y la mezcla después se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con agua y con HCl diluido (1 M) y después se secó (MgS04). Los disolventes se evaporaron al vacío para dar éster t-butílico de ?/-[(1 R)-1-feniletil)]glicina (3.15 g, 13.4 mmoles) en forma de un polvo blanco, pf 193-197X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.95 (3H, d), 3.3 (1H, d), 3.6 (1H, d), 4.6 (1H, q), 5.3 (1H, s), 7.3-7.45 (3H, m), 7.5-7.65 (2H, m). LRMS 236 (MH+).

PREPARACIÓN 30 Ester f-butílico de ?H(1 ,4-di oro-7-isoguinoliniPsulfonill-?H -1R)-1- feniletiPIglicina Una mezcla de NEt3 (0.59 ml, 4.21 ml), cloruro de 1 ,4-dícloro-7- isoquinolinasulfonílo (500 mg, 1.69 mmoles) y éster f-butílico de ?/-[(1 R)-1- feniletil)]glicina (476 mg, 2.02 mmoles) en CH2CI2 (8 ml) se agitó bajo N2 a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano- EtOAc (90:10) como eluyente para dar el éster t-butílico de A/-[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolinil)-sulfonil]-?-[(1 R)]-1-feniletil)]glicina (490 mg, 0.99 mmoles) en forma de un aceite incoloro. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 1.4 (3H, d), 3.9 (1 H, d), 4.1 (1 H, d), 5.15 (1 H, q), 7.1-7.25 (5H, m), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 8.65 (1 H, s), 8.7 (1 H, d) ppm. LRMS 495 (MH+), 512 (MNH4+). li__Ml___M_M_^i__É__ii_ £jj^ ¡ ___^ _^. ____.¿ PREPARACIÓN 31 Ester f-butílico de ?/-r(1S)-1-feniletiP1glícina Se añadió gota a gota una solución de bromoacetato de f-butilo (5.0 g, 25.6 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) a una solución agitada de (-)-(S)-a-metilbencilamina (4.65 g, 38.5 mmoles) en CH2CI2 (40 ml) a OX y la mezcla después se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con agua y con HCl diluido (1M) y después se secó (MgS04). Los disolventes se evaporaron al vacío para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 S)-1-feniletil)]glicina (2.02 g, 8.6 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 197-202X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.9 (3H, d), 3.3 (1 H, d), 3.55 (1 H, d), 4.5 (1 H, q), 5.3 (1 H, s), 7.3-7.45 (1 H, m), 7.5-7.6 (1 H, m) ppm. LRMS 236 (MH+).

PREPARACIÓN 32 Ester f-butílico de ?/-[(1,4-dicloro-7-isoquinolin¡Psulfonin-?/-r(1 S)-1- feniletiPIqlicina Una mezcla de NEt3 (0.59 ml, 4.21 mmoles), cloruro de 1 ,4-dícloro-7-isoquinolinasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) y éster f-butílico de N-[(1 S)-1-feniletil)]glicina (476 mg, 2.02 mmoles) en CH2CI2 (8 ml) se agitó bajo N2 a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHCOs acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (90:10) como eluyente para dar éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]-?-[(1S)-1-feniletil)]glícina (420 mg, 0.85 mmoles) en forma de un aceite incoloro. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 1.4 (3H, d), 3.9 (1 H, d), 4.1 (1 H, d), 5.15 (1 H, q), 7.1-7.25 (5H, m), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 8.65 (1 H, s), 8.7 (1 H, d) ppm. LRMS 495 (MH+), 512 (MNH4+). ~* fi „ _*__* Üg^g PREPARACIÓN 33 Ester f-butílico de N-bencil-L-alanina Se añadió benzaldehído (2.69 ml, 26.4 mmoles) a una suspensión agitada de éster f-butílico de L-alanina (4.0 g, 22.0 mmoles) y NEt3 (3.07 ml, 22.0) en CH2CI2 (70 ml) a 23X y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se añadió por porciones NaBH(OAc)3 (6.44 g, 30.4 mmoles) y la mezcla se agitó a 23X durante 24 h. La mezcla se lavó con agua, se secó (MgS04) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH (99:1 a 95:5) como eluyente para dar éster f-butílico de /V-bencil-L-alanina (3.97 g, 16.9 mmoles) en forma de un aceite incoloro. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (3H, d), 1.5 (9H, s), 2.1 (1 H, s), 3.25 (1 H, q), 3.7 (1 H, d), 3.8 (1 H, d), 7.2-7.4 (5H, m) ppm. LRMS 236 (MH+), 258 (MNa+). i_fc?__fi_a__-.

PREPARACIÓN 34 Ester f-butílico de N-bencil-?H.1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonip-L- alanina Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquínolinasulfonilo (600 mg, 2.02 mmoles) en CH2CI2 (3 ml) a una solución agitada de éster f-butílico de ?/-bencil-L-alanina (571 mg, 2.43 mmoles) y NEt3 (0.70 ml, 5.06 mmoles) en CH2CI2 (3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC?3 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (95:5 a 85:15) como eluyente para dar éster f-butílíco de ?/-bencil-?-[(1 ,4-dícloro-7- isoquinolinil)sulfonil]-L-alanina (470 mg, 0.95 mmoles) en forma de un sólido incoloro. pf 92-96X 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (9H, s), 1.35 (3H, d), 4.4 (1 H, d), 4.7 (1 H, q), 4.8 (1 H, d), 7.1-7.3 (3H, m), 7.3-7.4 (2H, m), 8.15 (1 H, d), 8.3 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 495 (MH+). ________________________________________•_____! .^ TÉ-iiÉffA - flTrTr PREPARACIÓN 35 Ester f-butílico de ?H _1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonil,-L-a!an¡na Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolinasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (3 ml) a una solución 10 agitada de éster f-butílico de L-alanina (322 mg, 1.77 mmoles) y NEt3 (0.82 ml, 5.9 mmoles) en CH2CI2 (6 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 17 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando 15 pentano-EtOAc (90:10 a 50:50) como eluyente para dar el éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡n¡l)sulfonil]-L-alan¡na (500 mg, 1.23 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 115-119X 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.4 (3H, d), 4.0 (1 H, dq), 5.4 20 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 405 (MH+). Análisis encontrado: C, 47.57; H, 4.39; N, 6.72. Calculado para C16H18CI2N204S: C, 47.42; H, 4.48; N, 6.91.

PREPARACIÓN 36 Ester metílico de ?/-í,1,4-d¡cloro-7 -isoquinoliniPsulfonip-D-alanina Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (3 ml) a una solución agitada de éster metílico de D-alanina (247 mg, 1.77 mmoles) y NEt3 (0.82 ml, 5.9 mmoles) en CH2CI2 (6 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 16 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC?3 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna usando pentano-EtOAc (90:10 a 50:50) como eluyente para dar el éster metílico de ?-[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinol¡n¡l)sulfon¡l]-D-alan¡na (420 mg, 1.16 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 150-152X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.45 (3H, d), 3.55 (3H, s), 4.15 (1 H, dq), 5.4 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 363, 365 (MH+). Análisis encontrado: C, 42.97; H, 3.29; N, 7.42. Calculado para C13H12CI2N204S: C, 42.99; H, 3.33; N, 7.71.

PREPARACIÓN 37 Ester f-butílico de ? -, ,1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonip-L-valina Se añadió NEt3 (0.59 ml, 4.2 mmoles) a una mezcla agitada de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) y éster f- butílico de L-valina (354 mg, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 3 días. La mezcla se lavó con HCl diluido (2 x 20 ml, 1 M), NaHC03 acuoso saturado y salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se extrajo con hexano, que cristalizó tras reposo, para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-L-valina (463 mg, 1.07 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 127-129X 1H (CDCI3, 300 MHz) d 0.9 (3H, d), 1.0 (3H, d), 1.1 (9H, s), 2.0- 2.2 (1 H, m), 3.8 (1 H, dd), 5.25 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 433, 435 (MH+), 450, 452 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 49.86; H, 5.13; N, 6.40. Calculado para C?8H2CI2N2?4S: C, 49.89; H, 5.18; N, 6.46.

PREPARACIÓN 38 Ester f-butílico de /V-f(1,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonill-D-valina El éster f-butílico de D-valina se ha preparado previamente, véase: Shepel, E. N.; lodanov, S.; Ryabova, I.D.; Miroshnikov, A. I.; Ivanov, V. T.; Ovchinnikov; Yu A, Bioorg. Khim., 1972, 2, 581-593. Se añadieron el éster f-butílico de D-valina (354 mg, 1.69 mmoles) y después NEt3 (0.59 ml, 4.2 mmoles) a una solución agitada de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (500 mg, 1.69 mmoles) y en CH2CI2 (20 ml) y la mezcla se agitó a 23X durante 16 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con NaHC03 acuoso saturado, con agua, con ácido cítrico acuoso (1 M), con agua y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en /-Pr20 y se añadió hexano que dio un precipitado. Los disolventes se evaporaron al vacío y el sólido se trituró con hexano para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-D-valina (532 mg, 1.22 mmoles) en forma de un sólido blanco. Se obtuvo una muestra analítica por recristalización en hexano. pf 117-119X ^ _fc¡¡*¡aa_j»g?aÜt_¡tLa__, ¡g^^ j^^ ^^^y^^x - aamAi 1H (CDCls, 400 MHz) d 0.9 (3H, d), 1.0 (3H, d), 1.1 (9H, s), 2.0- 2.2 (1 H, m), 3.8 (1 H, dd), 5.3 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1H, s) ppm. LRMS 433, 435 (MH+). Análisis encontrado: C, 49.99; H, 5.28; N, 6.34. Calculado para C18H22Cl2N204S: C, 49.89; H, 5.12; N, 6.46.

PREPARACIÓN 39 Ester f-butílico de ?.-r(1.4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonip-D-ferc-leucina Se agitó una mezcla de clorhidrato del éster f-butílíco de D-terc- leucina (250 mg, 1.12 mmoles), NEt3 (0.40 ml, 2.87 mmoles) y cloruro de 1 ,4- dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (330 mg, 1.11 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) a 23X durante 16 horas. La mezcla se diluyó con CH CI2 (50 ml), se lavó con agua, con ácido cítrico acuoso (1 M), con agua, con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (90:10) para dar el éster f-butílico de ?-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfoníl]-D- terc-leucina (250 mg, 0.56 mmoles) en forma de una espuma blanca. pf 140-142X. 1H (CDCI3, 40 MHz) d 1.0 (9H, s), 1.05 (9H, s), 3.6 (1 H, d), 5.35 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.85 (1 H, s). LRMS 447, 449, 451 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.03; H, 5.41 ; N, 6.13. Calculado para C19H2 CI2N204S: C, 51.01 ; H, 5.41 ; N, 6.26.

PREPARACIÓN 40 Ester t-butílico de ? -f(1,4-dicloro-7-isoquinolin¡Psulfon¡n-L-fenilalanina Una mezcla de éster f-butílico de L-fenilalanina (352 mg, 1.37 mmoles), NEt.3 (0.41 ml, 2.97 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (399 mg, 1.35 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a 23X durante 20 h. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se suspendió en EtOAC. Esta solución se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (90:10 a 70:30) como eluyente para dar el éster f-butílico de A/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nil)sulfonil]-L- fenílalanina (450 mg, 0.94 mmoles) en forma de una espuma cristalina. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.2 (9H, s), 2.95 (1 H, dd), 3.1 (1 H, dd), 4.1 (1 H, m), 5.3 (1 H, d), 7.0-7.2 (5H, m), 8.1 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.75 (1 H, d) ppm. LRMS 481 (MH+), 498 (MNH4+).

PREPARACIÓN 41 Ester f-butílico de ?/-(benciloxicarboniP-O-metil-D-serina Se añadió gas ¡sobutileno condensado (35 ml) a una solución de sal diciclohexilamina de A/-(benciloxicarbonil)-0-metil-D-ser¡na (2.5 g, 5.76 mmoles) en CH2CI2 (35 ml) a -78X en una bomba de acero. Se añadió H2S04 concentrado (0.5 ml), el recipiente se selló y la mezcla se dejó calentar hasta 123X [PRECAUCIÓN: Presión]. La mezcla se agitó a 23X durante 6 días, el vaso se expuso a la atmósfera y se dejó evaporar el exceso de isobutileno. La mezcla después se vertió en NaHCOs acuoso (30 ml, 10%), se extrajo con CH2CI2 (3 x 30 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron (Na2SO4) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20) como eluyente para dar el ^^^^^«^^^^^^^i^^^^^^^^^^ éster f-butílíco de ?/-(benc¡loxicarbonil)-0-metil-D-serina (1.2 g, 3.88 mmoles) en forma de un aceite incoloro. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.45 (9H, s), 3.35 (3H, s), 3.6 (1 H, dd), 3.75 (1 H, dd), 4.35 (1 H, d a), 5.1 (2H, s), 5.6 (1 H, d a), 8.4-8.9 (5H, m) ppm. LRMS 310 (MH+), 327 (MNH4+).

PREPARACIÓN 42 Ester f-butílico de O-metil-D-serina Una solución de éster f-butílíco de N-(benciloxicarbonil)-0-metil- D-serina (1.15 g, 3.72 mmoles) en MeOH (20 ml) se hidrogenó sobre Pd al 10%/C (150 mg) bajo una atmósfera de H2 (15 psí) (103.42 kPa) a 23X durante 18 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en Et20, se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M), los disolventes se evaporaron al vacío para dar un sólido blanco y este material se trituró con hexano para dar el éster f-butílíco de O-metil-D-serina (0.62 g, 2.90 mmoles). pf 167-169X (desc.). 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 1.8-2.2 (1 H, s a); 3.4 (3H, s), 3.9 (1H, dd), 4.0 (1H, dd), 4.2 (1 H, t), 8.4-8.9 (3H, s a) ppm. g^^^^^^^gi^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^gg^^^^^g^^^^^^^^^^g^^^^^^^^^^j^^^^^^^ LRMS 176 (MH+). Análisis encontrado: C, 45.26; H, 8.59; N, 6.39. Calculado para C8H17N03 HCI: C, 45.39; H, 8.57; N, 6.62.

PREPARACIÓN 43 Ester f-butílico de /V-.(1 ,4-dicloro-7 -Soquinolin¡Psulfonill-O-metil-D- senna Una mezcla de clorhidrato de éster f-butílico de O-metil-D-serina (300 mg, 1.42 mmoles), NEt3 (0.50 ml, 3.6 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquínolinasulfonilo (420 mg, 1.42 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) se agitó a 23X durante 3 días. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (30 ml), se lavó con agua, con ácido cítrico acuoso (1 M), con agua, con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil]sulfonil]-0-metil-D-serina (356 mg, 0.82 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 135-137X.

.A_ÉÍ_M____M_rt-_-i_rr 1 - Y 1 1 1 - __j_-m_^_.^. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.25 (9H, s), 3.3 (3H, s), 3.6 (1 H, dd), 3.7 (1 H, dd), 4.1 (1 H, s a), 5.6 (1 H, d a), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 435, 437 (MH+), 452, 454 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 47.04; H, 4.62; N, 6.42. Calculado para C17H2oCI2N205S: C, 46.90; H, 4.63; N, 6.44.

PREPARACIÓN 44 Ester di-f-butílico del ácido ?/-.(1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfon¡p-D- aspártico Una mezcla del éster dí-f-butílico del ácido D-aspártico (462 mg, 1.64 mmoles), NEÍ3 (0.50 ml, 3.6 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (400 mg, 1.35 mmoles) en CH2CI2 (30 ml), se agitó a 23X durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (30 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHCOs acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío para dar el éster di-f-butílico del ácido ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolin¡l)sulfonil]-D-aspárt¡co (520 mg, 1.03 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 106-110X "útíe*- • -—- -. -.<—_ _ _ __a__ ^^^^ __._-j___: **(* *. - ^ 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.2 (9H, s), 1.4 (9H, s), 2.7-2.8 (1 H, dd), 2.8-2.9 (1 H, dd), 4.15 (1 H, m), 8.2 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 507 (MH+).

PREPARACIÓN 45 Ester f-butílico de ?H -1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfoniri-L-prolina Una mezcla del clorhidrato del éster f-butílico de L-prolina (335 mg, 1.61 mmoles), NE_3 (0.53 ml, 3.78 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (449 mg, 1.51 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a 23X durante 20 h. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se suspendió en EtOAc. Esta solución se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (90:10 a 70:30) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-ísoquinolin¡l)sulfonil]-L- prolina (543 mg, 1.26 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.45 (9H, s), 1.8-2.1 (3H, m), 2.1-2.3 (1 H, m), 3.4-3.6 (2H, m), 4.4 (1 H, dd), 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, d) ppm. LRMS 431 (MH+), 448, 450 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 50.09; H, 4.62; N, 6.37. Calculado para C?8H2oCI2N204S: C, 50.12; H, 4.67; N, 6.49.

PREPARACIÓN 46 Ester f-butílico de ?/-r(1,4-dicloro-7 -isoquinoliniPsulfonip-D-prolina Una mezcla del clorhidrato del éster f-butílico de D-prolina (340 mg, 1.64 mmoles), NEt3 (0.50 ml, 3.6 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (400 mg, 1.35 mmoles) en CH2CI2 (30 ml), se agitó a 23X durante 20 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío para dar el éster t-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (550 mg, 1.28 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 80-82X. ^¡ sg^^^^s ^^^^^^^^^¡s | j^^^gg¿ 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.9-2.0 (3H, m), 2.2 (1H, m), 3.4-3.6 (2H, m), 4.4 (1H, m), 8.3 (1H, d), 8.4 (1H, d), 8.5 (1H, s), 8.9 (1H, s) ppm. LRMS 431 (MH+), 448 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 49.76; H, 4.75; N, 6.39. Calculado para C18H20CI2N2O S: C, 50.12; H, 4.67; N, 6.49.

PREPARACIÓN 47 1.4-Dicloro-7-ff(2R)-(hidroximetiP-1-pirrolidinin-sulfonil>isoquinolina Una mezcla de ( )-2-pirrolid¡nametanol (1.1 ml, 11.0 mmoles), NEt3 (1.5 ml, 20 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (3.0 mg, 10 mmoles) en CH2CI2 (50 ml), se agitó a 23X durante 30 minutos. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con ácido cítrico acuoso (1 N), agua y salmuera, se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío para dar 1 ,4-dicloro-7-{[(2R)-(h¡droximetíl)-1-p¡rrol¡dinil]-sulfon¡l}¡soquinolina (4.0 g, 11 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 167.5-168.5X. ^^fa&¡¡3&^ ^^^^^^^^^^^j^^^^^^^tó^^gg^^^ 1H (CDCb, 400 MHz) d 1.5-1.55 (1H, m), 1.6-2.0 (3H, m), 2.5 (1H, t a), 3.3-3.4 (1H, m), 3.5-3.6 (1H, m), 3.7-3.8 (3H, m), 8.25 (1H, d), 8.4 (1H,d), 8.5(1 H,s) ppm. LRMS 361, 363 (MH+), 378 (MNH4+), 383 (MNa+). Análisis encontrado: C, 46.65; H, 3.91 ; N, 7.61. Calculado para d4H14CI2N203S: C, 46.55; H, 3.91 ; N, 7.75.

PREPARACIÓN 48 2-{f(1 ,4-Dicloro-7-isoquinoliniPsulfon¡pamino. isobutirato de metilo Una mezcla 2-amínoisobutirato de metilo (310 mg, 2.02 mmoles), NEt3 (0.70 ml, 5.05 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nasulfon¡lo (500 mg, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (30 ml), se agitó a 23X durante 17 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), NaHC03 acuoso saturado y salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (70:30) como eluyente para dar 2-{[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolinil)-sulfon¡l]amino}isobut¡rato de metilo (210 mg, 0.56 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 159.5-5.161 X. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.5 (6H, s), 3.7 (3H, s), 5.55 (1 H, s), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H. s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 377 (MH+). Análisis encontrado: C, 44.24; H, 3.72; N, 7.29. Calculado para d4H14CI2N204S: C, 44.57; H, 3.74; N, 7.43.

PREPARACIÓN 49 2-{[(1 ,4-Dicloro-7-isoqu¡nolin¡Psulfon¡namino}-2-metilpropanamida Una mezcla 2-amino-2-metilpropanamida (200 mg, 1.96 mmoles), NEt3 (0.69 ml, 5.0 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (580 mg, 1.96 mmoles) en CH2CI2 (20 ml), se agitó a 23X durante 17 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con agua, con ácido cítrico acuoso (1 N), con agua y con salmuera, se secó (Mg2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.080 (90:10:1 ) como eluyente para dar 2-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}-2- metilpropanamida (228 mg, 0.52 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 220-222X. 1H (d4-MeOH, 400 MHz) d 1.4 (6H, s), 3.3 (2H, s), 8.4 (1 H, dd), 8.45 (1 H, d), 8.55 (1 H, d), 8.9 (1 H, s). LRMS 362, 364 (MH+), 379, 381 (MNH4+). 5 Análisis encontrado: C, 42.81 ; H, 3.70; N, 11.15. Calculado para C?3H13CI2N3O3S«0,25H2O: C, 42.58; H, 3.71 ; N, 11.46.

PREPARACIÓN 50 10 1-Aminociclobutanocarboxilato de etilo Una solución de ácido 1-aminociclobutanocarboxílico (500 mg, 15 4.34 mmoles) en EtOH (10 ml) se saturó con gas HCl y la mezcla se agitó a 23X durante 4 días. Los disolventes se evaporaron al vacío, evaporando azeotrópicamente con PhMe y CH2CI2, para dar el clorhidrato de 1- aminociclobutanocarboxilato de butilo (754 mg, 4.20 mmoles) en forma de un sólido blanquecino. 20 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.25 (3H, t), 1.9-2.1 (2H, m), 2.3-2.5 (4H, m), 4.2 (2H, q), 8.8 (2H, s a) ppm. LRSM 287 (M2H+). „_.,.. . . ..>__,__ .... Jt___. ^..^A-. -_--*_.._.- .,. _ M__ . ____________M__M__J_*- ^ „ _fc_ffi___ „ ____,j_,.j_„?, PREPARACIÓN 51 1 -(f(1.4-Dicloro-7-isoqu¡nol¡niPsulfonil .amino)cic!obutanocarboxilato de etilo Una mezcla de clorhidrato de 1-aminocíclobutanocarboxilato de etilo (382 mg, 2.12 mmoles), NEt3 (1.04 ml, 7.43 mmoles) y cloruro de 1 ,4- dicloro-7-isoquínolinasulfonilo (630 mg, 2.12 mmoles) en CH2C _ (8 ml), se agitó a 23X durante 18 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl diluido (2 M), NaHC03 acuoso saturado y salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (90:10 a 80:20) como eluyente para dar el 1-{[0 ,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}ciclobutanocarboxilato de etilo (480 mg, 1.19 mmoles) en forma de un polvo blanco. pf 123-125X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.2 (3H, t), 1.9-2.1 (2H, m), 2.4-2.6 (4H, m), 4.0 (2H. q), 5.5 (1 H, s a), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H. s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 403, 405 (MH+), 420 (MNH4+).

PREPARACIÓN 52 Ester etílico de cicloleucina Una solución de cicloleucina (8.94 g, 69.2 mmoles) en EtOH (100 ml) se saturó con gas HCl y la mezcla se agitó a 23X durante 2 días. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió en agua (200 ml) y la solución sé basificó con NaHC03 sólido. La solución acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml) y los extractos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en hexano-Et20 (1 :1 ) y se añadió una solución de HCl en Et20-díoxano (0.5 M, 1 :1 ) que dio un precipitado. Este sólido blanquecino se recogió por filtración y se secó para dar el clorhidrato del éster etílico de cicloleucina (6.57 g, 33.9 mmoles). 1H (de-DMSO, 400 MHz) d 1.2 (3H, t), 1.6-1.8 (2H, m), 1.8-2.0 (4H, m), 2.05-2.15 (2H, m), 4.15 (2H, q), 8.6-8.7 (3H, s a) ppm. ^j^^jg_^^^^^¡^ -^^^^_^ -í¡g^^^A^KA PREPARACIÓN 53 Ester etílico de ? (1,4-d¡cloro-7-isoquinoliniDsulfoni._cicloleucina Una mezcla del clorhidrato del éster etílico de cicloleucina (5.56 g, 28.7 mmoles), NEt3 (9.9 ml, 72 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquínolinasulfonilo (7.10 g, 24.0 mmoles) en CH2CI2 (480 ml) se agitó a 23X durante 3 días. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (80:20 a 70:30) como eluyente para dar el éster etílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]c¡cloleucina (6.36 g, 15.2 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 127-129X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.2 (3H, t), 1.6-1.8 (4H, m), 1.9-2.0 (2H, m), 2.1-2.2 (2H, m), 4.1 (2H, q), 5.25 (1 H, s), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 417, 419 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.57; H, 4.35; N, 6.58. Calculado para C17H?8CI2N3Q S: C, 48.93; H, 4.35; N, 6.71. ai^^^4^?i?^^^^_?_i??^?^^^^^^^^|J^g^ ^g^^^^^^^^j^^^^^^^^^«*s^^^^^^ PREPARACIÓN 54 1 ,4-Dicloro-?--[1 -(hidroximetiPciclopentil, 7-isoquinolinasulfonamida Una mezcla de 1-am¡no-1-c¡clopentilmetanol (559 mg, 4.86 mmoles), NEt3 (0.85 ml, 6.0 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (1.2 g, 4.05 mmoles) en CH2CI2 (80 ml) se agitó a 23X durante 16 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (50 ml), se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHCOs acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente, seguido por trituración con Et20, para dar 1 ,4-dicloro-?/-[1- (hidroximet¡l)ciclopentil]-7-isoquinolinasulfonamida (0.62 g, 1.65 mmoles) en forma de un sólido blanco.

PREPARACIÓN 55 Ester etílico de ?/-,(1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonip-?/--2- (dimetilamino)etincicloleucina Se añadió cloruro de 2-(dimetilamino)etilo (140 mg, 1.3 mmoles) a una solución agitada de éster etílico de ?/-[(1 ,4-dícloro-7-isoquinolinil)sulfonil]c¡cloleucina (200 mg, 0.48 mmoles) y K2C03 anhidro (80 mg, 0.58 mmoles) en DMF (4 ml) bajo N2 a 23X y la mezcla se agitó durante 21 horas. La mezcla enfriada se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, se secó (Na S0 ) y los disolventes se evaporaron al vacío. El residuo se disolvió en Et20 y se añadió una solución de HCl en Et20 (1 M) que dio un precipitado. Este sólido blanquecino se recogió por filtración y se secó para dar el éster etílico de ?7-[(1 ,4-d¡cloro-7-¡soquinolinil)sulfon¡l]-/V-[2-(dimetílamino)et¡l]-cicloleucina (170 mg, 0.32 mmoles). pf 238-240X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.15 (3H, t), 1.55-1.7 (4H, m), 2.0-2.1 (2H, m), 2.2-2.35 (2H, m), 2.8 (6H, s), 3.35-3.45 (2H, m), 3.75-3.85 (2H, m), 4.0 (2H, q), 8.45 (1 H, d), 8.5 (1 H, d), 8.7 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 488, 490 (MH+). ____________á__tt__ i_?ti_r. ? -Hr A ~ ¿-- „.ig_.g__a Análisis encontrado: C, 47.53; H, 5.37; N, 7.96. Calculado para C21H27CI2N3O4S»0.25H2O: C, 47.65; H, 5.43; N, 7.94.

PREPARACIÓN 56 1 -{[(1 ,4-D¡cloro-7-¡soquinoliniPsulfonipam¡no. -ciclohexanocarboxilato de metilo El 1-aminociclohexanocarboxilato de metilo se ha preparado previamente, véase: Didier, E.; Horwell, D. C; Pritchard, M. C. Tetrahedron, 1992, 48, 8471-8490. Una mezcla de 1-aminociclohexanocarboxilato de metilo (325 mg, 1.68 mmoles), NEt3 (0.49 ml, 3.5 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonílo (415 mg, 1.40 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) se agitó a 23X durante 16 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2, se lavó con HCl diluido (2 M), con NaHC03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20 a 70:30) como eluyente, seguido por trituración con /-Pr20 para dar 1-{[(1 ,4-dicloro-7- ¡soquinolinil)sulfonil]amino}c¡clohexanocarboxilato de metilo (132 mg, 0.32 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 185-186X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.2-1.5 (6H, m), 1.8-2.0 (4H, m), 3.6 (3H, s), 4.95 (1 H, s), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d) 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 418 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.94; H, 4.43; N, 6.42. Calculado para C?7H18CI2N204S: C, 48.93; H, 4.35; N, 6.71.

PREPARACIÓN 57 4-Aminotetrahidro-2/.-piran-4-carboxilato de metilo El ácido 4-aminotetrahidro-2/-/-piran-4-carboxíl¡co se ha preparado previamente, véase: Palacín, S.; Chin. D.N.; Simanek, E.E.; MacDonald, J.C.; Whitesides, G.M.; McBride, M.T.; Palmore, G. J. Am. Chem. Soc, 1997, 119, 11807-11816. Una solución de ácido 4-aminotetrah¡dro-2/-/-piran-4-carboxílico (0.50 g, 3.4 mmoles) en MeOH (10 ml) se saturó con gas HCl a 0-5°C y la mezcla después se calentó a reflujo durante 3.5 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío, el residuo se disolvió en NaHC03 acuoso saturado y la solución acuosa se extrajo con CH2CI2 (2 x 50 ml). Los extractos reunidos se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío para dar 4-aminotetrahidro-2/-/-piran-4-carboxilato de metilo (410 mg, 2.58 mmoles). 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.4-1.6 (4H, m), 2.05-2.2 (2H, m), 3.6-3.7 (2H, m), 3.75 (3H, s), 3.8-3.9 (2H, m) ppm. LRMS 160 (MH+).

PREPARACIÓN 58 4-{r(1.4-Dicloro-7-isoquinoliniPsulfon¡namino>tetrahidro-2H-piran-4- carboxilato de metilo Una mezcla de 4-aminotetrahidro-2H-p¡ran-4-carbox¡lato de metilo (400 mg, 2.51 mmoles), NEt3 (0.44 ml, 3.14 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinasulfonilo (621 mg, 2.09 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) se agitó a 23X durante 20 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 se lavó con HCl diluido (2 M), NaHC03 acuoso saturado y salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20) y después CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente, seguido por trituración con i-Pr20, para dar el '.^__aa__- „ - -'- liH iíiltf^^ 4-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}tetrahidro-2 .-piran-4-carbox¡lato de metilo (197 mg, 0.47 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 168-170X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.8-1.95 (2H, m), 2.1-2.2 (2H, m), 3.5 (3H, s), 3.5-3.7 (4H, m), 5.4 (1 H, s), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 419 (MH+). Análisis encontrado: C, 45.97; H, 3.85; N, 6.36. Calculado para C16H16CI2N2?5S: C, 45.83; H, 3.85; N, 6.68.

PREPARACIÓN 59 ,±,-c?s-2"fr.1 .4-Dicloro-7-isoquinoliniDsulfonill- amino)ciclohexanocarboxilato de t-butilo El (±)-c/'s-2-aminoc¡clohexanocarbox¡lato de t-butilo se ha preparado previamente, véase: Xie, J.; Soleilhac, J. M.; Renwart, N.; Peyroux, J.; Roques, B.P.; Fournie-Zaluski, M.C. Int. J. Pept. Protein Res, 1989, 34, 246-255. Una mezcla de (±)-c/'s-2-aminociclohexanocarboxilato de t-butilo (282 mg, 1.20 mmoles), NEt3 (0.33 ml, 2.37 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro- 7-isoquinolinasulfonilo (282 mg, 0.95 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a 23X durante 1 hora. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se suspendió en EtOAc (100 ml). Esta solución se lavó con HCl diluido (10 ml, 1 M) y agua, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío para dar (±)-c/s-2-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]amino}c¡clohexanocarboxilato de t-butilo (395 mg, 0.86 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.1-1.8 (16H, m), 1.95-2.1 (1 H, m), 2.5-2.6 (1 H, m), 3.4-3.55 (1 H, m), 6.1 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.9 (1 H, s). LRMS 459, 461 (MH+). Análisis encontrado: C, 51.99; H, 5.28; N, 6.01. Calculado para C20H24CI2N2O4S: C, 52.29; H, 5.27; N, 6.10.

PREPARACIÓN 60 (±)-c/'s-2-(r(1,4-dicloro-7 -isoguinolinil.sulfoniHamino}- ciclohexanocarboxilato de etilo Una mezcal (±)-c/'s-2-aminociclohexanocarboxilato de etilo (251 mg, 1.20 mmoles), NEt3 (0.33 ml, 2.4 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquínolinasulfonilo (296 mg, 1.00 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a 23X _ __.., ._ ..... .....i_JÍ--._Éá_¿.-^__^ durante 1 hora. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (100 ml), se lavó con HCl diluido (30 ml, 1M) y agua, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío para dar el (±)-c/'s-2-{[(1,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]am¡no}c¡clohexanocarboxilato de etilo (385 mg, 0.89 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3) 400 MHz) d 1.2 (3H, t), 1.2-1.4 (3H, m), 1.4-1.7 (3H, m), 1.75-1.85 (1H, m), 2.0-2.1 (1H, m), 2.65 (1H, q), 3.5-3.6 (1H, m), 3.95-4.0 (1H, m), 4.05-4.15 (1H, m), 5.9 (1H, d), 8.2 (1H, d), 8.35 (1H, d), 8.5 (1H, s), 8.9(1H,s). LRMS 431, 433 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.45; H, 4.79; N, 6.31. Calculado para C18H20CI2N2O4S: C, 50.12; H, 4.67; N, 6.49.

PREPARACIÓN 61 C/s-4-{f(1,4-dicloro-7-¡soquinoliniPsulfon¡namino>- ciclohexanocarboxilato de t-butilo El c/s-4-aminociclohexanocarboxilato de t-butilo se ha preparado previamente, véase: Barnish, I. T.; James, K.; Terrett, N. K., Danilewicz, J. C; Samuels, G. M. R.; Wythes, M. J. Eur. Patent, 1998, documento EP 274234. ...»..4¡_te____. -,-j¡* ¡k~,i -_ <. *."<-« - -.- . i^iS^m^ lí?^¿^^^?¿r^^?t^^i^^^&^j^-^^-^^M^^^s^^k Una mezcla de c/s-4-aminocíclohexanocarboxilato de t-butilo (282 mg, 1.20 mmoles), NEt3 (0.33 ml, 2.37 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolínasulfonilo (296, 1.00 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a 0X durante 1 hora. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (150 ml), se lavó con HCl diluido (30 ml, 1 M) y agua, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando pentano-EtOAc (100:0 a 75:25) para dar el c/s-4-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolínil)sulfon¡l]am¡no}ciclohexanocarboxilato de t-butilo (360 mg, 0.78 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.5-1.65 (6H, m), 1.75-1.85 (2H, m), 2.3 (1 H, m), 3.45 (1 H, m), 4.75 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 459, 461 (MH+), 476 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 52.34; H, 5.28; N, 5.98. Calculado para C20H24CI2N2O4S: C, 52.29; H, 5.27; N, 6.10.

PREPARACIÓN 62 rrans-4-(.(1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfon¡pamino)- ciclohexanocarboxilato de etilo El frar.s-4-aminociclohexanocarboxilato de etilo se ha preparado previamente, véase: Skaric, V.; Kovacevic, M.; Skaric, D. J. Chem. Soc. , 10 Perkin Trans. 1 1976, 1199-1201. Una mezcla de fraps-4-aminociclohexanocarboxilato de etilo (168 mg, 0.81 mmoles), NEt3 (0.22 ml, 1.6 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinasulfonilo (200 mg, 0.67 mmoles) en CH2CI2 (8 ml) se agitó a 0X durante 1 hora. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (100 ml), se lavó con HCl 15 diluido (50 ml, 1 M) y con agua, se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío para dar fra/-S-4-{[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nol¡nil)sulfon¡l]am¡no}ciclohexanocarboxilato de etilo (232 mg, 0.54 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.15-1.3 (5H, m), 1.4-1.55 (2H, m), 1.9- 2.0 (4H, m), 2.1-2.2 (1 H, m), 3.2-3.3 (1 H, m), 4.1 (2H, t), 4.55 (1 H, d), 8.25 20 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 431 (MH+).

PREPARACIÓN 63 Cloruro de 1,4-dicloro-7 -isoquinolinacarbonilo Se añadió gota a gota una solución de ?/-clorosuccinimida (4.13 g, 31 mmoles) en MeCN (50 ml) a una solución agitada de 7-bromo-1-(2/-/)-isoquínolona (6.6 g, 29.5 mmoles) en MeCN (150 ml) que se calentó a reflujo. La mezcla se calentó a reflujo durante 3 horas más y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado resultante se recogió por filtración, aclarando con MeCN, y después se secó al vacío para dar 7-bromo-4-cloro-1 (2H)-isoquinolona (6.72 g, 26.0 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 241-243X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 7.5 (1 H, s), 7.76 (1 H, d), 7.8 (1 H, dd), 8.3 (1 H, s) ppm. LRMS 259 (MH+), 517 (M2H+) Análisis encontrado: C, 41.69; H, 1.90; N, 5.37. Calculado para C9H5BrCINO: C, 41.80; H, 1.95; N, 5.42. »..•-.:_____-______. . . .. ... ^.- ..... ____- *,.,**«-_... »^^. *t- .. ^-^ Una mezcla de 7-bromo-4-cloro-1 (2/- )-ísoquinolona (1.0 g, 3.87 mmoles) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (100 mg, 0.14 mmoles) en EtOH (15 ml) y NEt3 (2 ml), se calentó hasta 100X en un recipiente de presión bajo una atmósfera de CO (100 psi) (689, 47 kPa) durante 48 horas. Tras la refrigeración y exposición a la atmósfera del recipiente, el catalizador se retiró por filtración y el filtrado se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (50:50) como eluyente y después por cristalización en /'-Pro20. Este material se reunió con lavados de CH2CI2 de los residuos del catalizador para dar 4- cloro-1 -oxo-1 , 2-dihidro-7-isoquinolinacarboxilato de etilo (743 mg, 2.95 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 184-186X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.45 (2H, t), 4.45 (2H, q), 7.4 (1H, d), 8.4 (1H,d), 9.05 (1H,s) ppm. LRMS 252 (MH+), 269 (MNH4+), 503 (M2H+) Análisis encontrado: C, 57.02; H, 3.99; N, 5.53. Calculado para C12H10CINO3: C, 57.27; H, 4.01 ; N, 5.57.

Se calentó 4-cloro-1-oxo-1 ,2-dihidro-7-isoqu¡nol¡nacarboxilato de etilo (500 mg, 1.99 mmoles) en POCI3 (3 ml) hasta que se formó una solución transparente y después se dejó en reposo a 23X durante 18 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua caliente, se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera saturada, se secaron Mg(S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (90:10) como eluyente, seguido por cristalización en /-Pr20 para dar 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarboxilato de etilo (377 mg, 1.40 mmoles) en forma de un sólido rosa pálido. pf 92-94X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.45 (1 H, t), 4.45 (2H, q), 8.25 (1 H, d), 8.4-8.45 (2H, m), 9.05 (1 H, s) ppm. LRMS 270 (MH+). Análisis encontrado: C, 53.27; H, 3.48; N, 5.14. Calculado para C12H9CI2N02: C, 53.36; H, 3.36; N, 5.19. s^l^^^^: g 2*^^ sjj£j ^^^ í^s^' ^&^j|to^ te Se trató 1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nacarboxilato de etilo (500 mg, 1.85 mmoles) en THF (2 ml) con una solución acuosa de NaOH (3.7 ml, 1 M) y se añadió EtOH (algunas gotas) para dar una mezcla de una sola fase. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, se añadió HCl (3.7 ml, 1 M) para dar una suspensión espesa que se separó por filtración, se lavó con agua y cristalizó en /'-PrOH. El sólido blanco cristalino velloso se trituró con hexano y se secó para producir el ácido 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinacarboxílico (240 mg, 0.99 mmoles). pf 226-228X. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 8.3 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.55 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 242 (MH+) Análisis encontrado: C, 49.59; H, 2.08; N, 5.74. Calculado para C?0H5CI2NO2: C, 49.62; H, 2.08; N, 5.78.

Se añadió cloruro de oxalilo (144 µl, 1.65 mmoles) a una suspensión de ácido 1 ,4-dicloro-7-ísoquinolinacarboxílico (200 mg, 0.83 mmoles) a temperatura ambiente en CH2CI2 (10 ml), seguido por DMF (1 gota). Después de 30 minutos, la solución transparente resultante se evaporó al vacío para producir el cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbonilo que se usó sin purificación adicional.

PREPARACIÓN 64 Ester f-butílico de ? -f(1,4-dicloro-7-¡soquinoliniP-carbon¡nqlicina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbonilo (213 mg, 0.8 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se añadió a una suspensión agitada de clorhidrato de éster f-butílíco de glicina (166 mg, 0.99 mmoles) y Net3 (253 µl, 1.82 mmoles) en CH2CI2 (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a jía^ _-_,-s. _ _Ma_4__¿_ temperatura ambiente durante una noche, se inactivo con una gota de agua y después se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (70:30) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soqu¡nol¡nil)carbonil]glic¡na (140 mg, 0.39 mmoles). Se preparó una muestra analítica por cristalización en /-Pr20-CH2CI2. pf 162-164X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.5 (9H, s), 4.15-4.2 (2H, m), 6.9 (1 H, s), 8.25-8.3 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.75 (1 H, s) ppm. 10 LRMS 355 (MH+). Análisis encontrado. C, 53.98; H, 4.36; N, 7.83. Calculado para C16H16CI2N203: C, 54.10; H, 4.54; N, 7.89.

PREPARACIÓN 65 15 Ester f-butílico de ?/-.(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniP-carbon¡l,-ß-alanina Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinacarbonilo (450 mg, 1.7 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) a una solución agitada del clorhidrato del éster f-butílico de ß-alanina (376 mg, 2.07 mmoles) y Net3 (530 µl, 3.81 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se lavó con HCl (2 x 30 ml, 1 M), NaHC03 acuoso (10%, 30 ml), se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó en /-Pr20 para dar éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- ¡soqu¡nolinil)carbonil]-ß-alanina (440 mg, 1.19 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 131-133X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 2.6 (2H, t), 3.7-3.8 (2H, m), 7.15 (1 H, s a), 8.2-8.3 (2H, m), 8.4 (1H, s), 8.65 (1 H, s) ppm. 10 LRMS 369 (MH+), 740 (M2H+). Análisis encontrado. C, 55.11 ; H, 4.88; N, 7.48. Calculado para C17H18CI2N203: C, 55.29; H, 4.91 ; N, 7.59.

PREPARACIÓN 66 15 Ester etílico de ?.-, ,1.4-dicloro-7-isoquinoliniPcarbonil, -cicloleucina Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinacarbonilo (270 mg, 1.04 mmoles) en CH2CI2 (12 ml) a una solución agitada del clorhidrato del éster etílico de cicloleucina (300 mg, 1.55 mmoles) ____- .__._.< _ — > _ i^_a_ ____A_ ...,.^_^__^^^. ^..._.^.._......,....fe- . ¿j^ y Net3 (415 µl, 2.98 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se lavó con HCl diluido (2 M), NaHC03 acuoso (10%), se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó en /'-Pr20 para dar éster etílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)carbonil]-cicloleucina (372 mg, 0.98 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 178-180X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (3H, t), 21.8-2.05 (4H. m), 2.1-2.3 (2H, m), 2.3-2.45 (2H, m), 4.25 (2H, q), 6.95 (1 H, s a), 8.2-8.25 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 382 (MH+), 398 (MNH4+), 763 (M2H+). Análisis encontrado. C, 56.71 ; H, 4.77; N, 7.27. Calculado para C?8H?8CI2N20s: C, 56.70; H, 4.76; N, 7.35.

PREPARACIÓN 67 Ester f-butílico de ?/-r(1,4-dicloro-7-isoquinol¡niP-carbon¡p-DL-fenilqlic¡na Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbonilo (450 mg, 1.73 mmoles) en CH CI2 (20 ml) se añadió a una solución agitada del clorhidrato del éster f-butílico de DL-fenilglicina (505 mg, 2.07 mmoles) y Net3 (530 µl, 3.81 mmoles) en CH2CI2 (30 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se lavó con HCl diluido (2 x 30 ml, 1 M), y con NaHCOs acuoso (10%), se secó (Na2S04) y se evaporó al 5 vacío para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL- fenilglicína (600 mg, 1.39 mmoles) en forma de un sólido céreo. Se preparó una muestra analítica por la evaporación lenta de una solución en CH2CI2 para dar un sólido blanco de aspecto velloso. pf 146-149X. 10 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.5 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 7.3-7.5 (6H, m), 8.2-8.3 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 431 (MH+), 861 (M2H+). Análisis encontrado. C, 61.57; H, 4.76; N, 6.42. Calculado para C22H20CI2N2O3-0.25H2O: C, 60.63; H, 4.74; N, 15 6.43. * <- . *A-f ¿léSbMti& PREPARACIÓN 68 Ester f-butílico de ?/-, .1 ,4-d¡cloro-7-isoquinolinil)-carbonip-L-fenilqlicína Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-ísoquinolinacarbonilo (148 mg, 0.57 mmoles) en CH2CI2 (6 ml) se añadió a una solución agitada del clorhidrato del éster f-butílico de S-(+)-fenilglicina (138 mg, 0.57 mmoles) y Net3 (200 µl, 1.44 mmoles) en CH CI2 (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (25 ml), se lavó con HCl diluido (0.5 M), NaHCOs acuoso (10%) y salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío para dar éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-L-fenilgl¡cina (218 mg, 0.51 mmoles) en forma de una goma. Se preparó una muestra analítica mediante trituración con hexano produciendo un sólido. pf 173-175X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.45 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 7.3-7.5 (6H, m), 8.25 (2H, s), 8.4 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 431 (MH+), 448 (MNH4+), 861 (M2H+), 883 (M2Na+). Análisis encontrado. C, 58.83; H, 4.88; N, 5.90. Calculado para C22H20CI2N2O3 H2O: C, 58.80; H, 4.93; N, 6.23.

PREPARACIÓN 69 Ester f-butílico de ? (1,4-dicloro-7-¡soquinoliniP-carboni ll-D-fenilqlicina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinol¡nacarbonilo (148 mg, 0.57 mmoles) en CH2CI2 (6 ml) se añadió a una solución agitada de 10 clorhidrato de éster f-butílico de / .-(+)-fenilglicina (138 mg, 0.57 mmoles) y Net3 (200 µl, 1.44 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (25 ml), se lavó con HCl diluido (0.5 M), NaHC03 acuoso (10%) y salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. La trituración del residuo con hexano dio 15 el éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-d¡cloro-7-isoqu¡nolinil)carbon¡l]-D-fenilglic¡na (203 mg, 0.47 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 5.7 (1 H, d), 7.3-7.5 (6H, m), 8.25 (2H, s), 8.4 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LRMS 431 (MH+), 448 (MNH4+), 861 (M2H+), 883 (M2Na+). 20 Análisis encontrado. C, 61.17; H, 4.70; N, 6.37. Calculado para C22H20CI2N2O3: C, 61.26; H, 4.67; N, 6.50. ,____ ^_______. ^,M¿a?jM>áibÉ__________Í___l PREPARACIÓN 70 Ester f-butílico de /V-.(1,4-dicloro-7-isoquinoliniDcarbon¡p-DL-valina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbon¡lo (450 mg, 1.73 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) se añadió a una solución agitada 10 del clorhidrato del éster f-butílico de DL-valina (435 mg, 2.07 mmoles) y Net3 (530 µl, 3.81 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se lavó con HCl diluido (1 M) y NaHCOs acuoso (10%), se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó con /-Pr20 para dar el éster f-butílico de /V-[(1 ,4-dicloro-7- 15 isoquinolinil)carbonil]-DL-valina (390 mg, 0.98 mmoles) en forma de sólido blanco. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.0-1.05 (6H, m), 1.5 (9H, s), 2.3-2.4 (1 H, m), 4.7-4.8 (1 H, m), 6.85 (1 H, d), 8.25-8.3 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.75 (1 H, s) ppm. 20 LRMS 397 (MH+), 793 (M2H+). Análisis encontrado. C, 57.20; H, 5.53; N, 6.99. Calculado para C19H22CI2N203: C, 57.44; H, 5.58; N, 7.05. f i .- i?w* • - itfií -ir ir -- a____¡___?________feli_li_____ÉBM______^^ PREPARACIÓN 71 Ester f-butílico de ? -f(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniP-carbonip-DL-prolina Se añadieron clorhidrato del éster f-butílico de DL-prolina (320 mg, 1.54 mmoles) y después Net3 (513 µl, 3.69, mmoles) a una solución agitada de cloruro de 1 ,4-dícloro-7-isoquinolinacarbanilo (270 mg, 1.04 mmoles) en CH2CI2 (32 ml) y la solución turbia después se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (20 ml), se lavó con HCl diluido (1 M) y salmuera saturada, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizo con /-Pr20 para dar el éster f-butílico de ? -[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-prol¡na (395 mg, 1.00 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 144-146X. 1H (CDCI3, 300 MHz) muestra una mezcla 3:1 de rotámeros d 1.15 (1/4 de 9H, s), 1.55 (3/4 de 9H, s), 1.8-2.15 (3H, m), 2.2-2.4 (1 H, m), 3.45-3.9 (2H, m), 4.2-4.3 (1/4 de 1 H, m), 4.6-4.7 (3/4 de 1 H, m), 7.9 (1/4 de 1 H, d), 8.05 (3/4 de 1 H, d), 8.2-8.3 (1 H, m), 8.4 (1 H, s). 8.55 (1 H, s) ppm. LRMS 395 (MH+), 789 (M2H+). Análisis encontrado. C, 57.79; H, 5.11 ; N, 6.97.

Calculado para C19H2oCI2N203: C, 57.73; H, 5.10; N, 7.09.

PREPARACIÓN 72 Ester f-butílico de ?.-r(1.4-dicloro-7-isoquinoliniP-carbonin-DL- fenilalanina Una mezcla de Net3 (330 µl, 2.37 mmoles), clorhidrato de éster f- butílico de DL-fenilalanina (293 mg, 1.14 mmoles) y cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinacarbonilo (247 mg 0.95 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se dividió entre HCl diluido (1 M) y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó con /-Pr20 para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolinil)carbonil]-DL-fenilalanina (384 mg, 0.86 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 156-157X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.5 (9H, s), 3.2-3.3 (2H, m), 5.0 (1 H, dt), 6.8 (1 H, d), 7.2-7.49 (5H, m), 8.2 (1 H, d), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.6 (1 H, s) ppm.

LRMS 455 (MH+). Análisis encontrado. C, 62.02; H, 4.98; N, 6.28. Calculado para C23H22CI2N203: C, 62.03; H, 4.98; N, 6.29.

PREPARACIÓN 73 Ester f-butílico de .V-F(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniP-carbonill-DL-leucina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbonilo (247 mg, 0.95 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se añadió a una solución de clorhidrato de éster f-butílico de DL-leucina (255 mg, 1.14 mmoles) y Net3 (330 µl, 2.37 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se dividió entre HCl diluido (1 M) y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó con /'-Pr20 para dar éster f-butílíco de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolinil)carbonil]-DL-leucina (285 mg, 0.69 mmoles). pf 183-184X. - *— -»«* »«**«»"*fc- ^^sá^^éÉgrtÍ 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.0-1.1 (6H, m), 1.5 (9H, s), 1.65-1.85 (3H, m), 4.75-4.85 (1 H, m), 6.8 (1 H, d), 8.2 (2H, s), 8.4 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 411 (MH+). Análisis encontrado. C, 58.39; H, 5.84; N, 6.76. Calculado para C20H24CI2N2O3: C, 58.40; H, 5.88; N, 6.81.

PREPARACIÓN 74 DL-3-(r(1 ,4-d¡cloro-7-¡soquinolinil.carbonil1amino}-3-fenilpropanoato de f- butilo Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinocarbonilo (247 mg, 0.95 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se añadió a una solución de éster f-butílico del ácido DL-3-amino-3-fenilpropiónico (252 mg, 1.14 mmoles) y Net3 (260 µl, 1.87 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se dividió entre HCl diluido (1 M) y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío para dar DL-3-{[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbon¡l]am¡no}-3-fen¡lpropanoato de f-butilo (323 mg, .. . - . »_*- ..___.. . .«¿_«h-,k . . . . ._^,____. _£«_«___„_.__. *¡ **~ " A 0.73 mmoles). Se preparó una muestra analítica medíante cristalización con /- Pr20-hexano para producir un polvo blanco. pf 153-155X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4 (9H, m), 2.9-3.05 (2H, m), 5.6 (1 H, 5 dt), 7.2-7.4 (5H, m), 7.9 (1 H, d), 8.2 (2H, s), 8.4 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 445 (MH+). Análisis encontrado. C, 61.99; H, 5.07; N, 6.15. Calculado para C23H22CI2N203: C, 62.03; H, 4.98; N, 6.29.

PREPARACIÓN 75 Ester a,ß-di-f-butílico del ácido ?.-.(1.4-dicloro-7 -isoquinoliniPcarboniri- DL-aspártico Se añadió una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7- isoquinolinacarbonilo (247 mg, 0.95 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) a una solución 20 de clorhidrato del éster a,ß-di-f-butílíco del ácido aspártíco (321 mg, 1.14 mmoles), y Net3 (330 µl, 2.37 mmoles), en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (30 ml), se lavó con HCl (3 x 30 ml, 1 M), Na2C03 acuoso saturado y con Í__Í_________i_____________l_ÍiMía___ ^^^ ^j já^ _M___________f_____ salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó en hexano para dar, en dos recolecciones, el éster a,ß-di-f-butílíco del ácido N- [(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-aspártico (298 + 88 mg, 0.63 + 0.19 mmoles) en forma de un sólido blanco de aspecto velloso. pf 1 12-114X. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.45 (9H, m), 1.55 (9H, m), 2.9 (1 H, dd), 3.05 (1 H, dd), 4.9-5.0 (1 H, m), 7.45 (1 H, d), 8.25-8.35 (2H, m), 8.45 (1 H, s), 8.75 (1 H, s) ppm. LRMS 469 (MH+), 491 (MNa+), 959 (M2Na+). Análisis encontrado. C, 56.20; H, 5.57; N, 5.88. Calculado para C22H26CI2N205: C, 56.29; H, 5.58; N, 5.97.

PREPARACIÓN 76 Ester f-butílico de O-f-butil-?H(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniPcarbonil1-DL- serina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbon¡lo (247 mg, 0.95 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) se añadió a una solución del clorhidrato del éster f-butílico O-f-butil-DL-serina (288 mg, 1.14 mmoles) y Net3 (330 µl, 2.37 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se diluyó con CH2CI2 (30 ml), se lavó con HCl (1 M), con Na2C03 acuoso saturado (1 M) y con salmuera saturada, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó en hexano 5 para dar el éster f-butílico de 0-f-butil-?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]- DL-serina (378 mg, 0.86 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 116-117X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.1 (9H, m), 1.5 (9H, m), 3.7 (1 H, dd), 3.9 (1 H, dd), 4.8-4.9 (1 H, m), 7.15 (1 H, d), 8.25-8.35 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.75 10 (1 H, s) ppm. LRMS 441 (MH+), 881 (M2H+), 903 (M2Na+). Análisis encontrado. C, 57.15; H, 5.94; N, 6.27. Calculado para C21H26Cl2N204: C, 57.15; H, 5.94; N, 6.35.

PREPARACIÓN 77 Ester f-butílico de ?/-,(1 ,4-dicloro-7-isoquinoliniPcarbonil1-DL-a- ciclopentilqlicina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarbonilo (148 mg, 0.57 mmoles) en CH2CI2 (6 ml) se añadió a una solución de clorhidrato del éster f-butílico de DL-a-ciclopentilglicina (134 mg, 0.57 mmoles) y Net3 (200 µl, 1.44 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con CH2CI2 (25 ml), se lavó con HCl diluido (0.5 M), con Na2C03 acuoso saturado y con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó al vacío. El residuo se cristalizó en /-Pr20-hexano para dar el éster f-butílico de ?/-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)carbonil]-DL-a-ciclopentilglícina (198 mg, 0.47 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4-1.9 (17H, m), 2.3-2.5 (1 H, m), 4.8 (1 H, dd), 6.85 (1 H, d), 8.2-8.3 (2H, m), 8.4 (1 H, s), 8.7 (1 H, s) ppm. LRMS 423 (MH+), 440 (MNH4+), 445 (MNa+), 845 (M2H+), 867 (M2Na+). Análisis encontrado. C, 59.56; H, 5.72; N, 6.57. r- -' rJrf1ri- *'*J"a*-^ ---*-"-- ^^ g ^^^g^ ¡^¡J»s gJ?^^^& ^ Calculado para C2?H2 CI2N203: C, 59.58; H, 5.72; N, 6.62.

PREPARACIÓN 78 Ester f-butílico de ?/-r(1,4-dicloro-7 -isoquinoliniPcarboniHglicina Se añadieron cloruro de oxalilo (95µl, 1.09 mmoles) y después DMF (2 gotas) a una suspensión agitada de ácido 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinacarboxílico (130 mg, 0.54 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos para dar una solución transparente del correspondiente cloruro de ácido. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se redisolvió en CH2CI2 (10 ml). Se añadieron el clorhidrato del éster f-butílico de ?/-bencilglicina (152 mg, 0.59 mmoles) y Net3, (200 µl, 1.44 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Los disolventes se evaporaron al vacío y el residuo se dividió entre Et20 y HCl diluido (1 M). La fase orgánica se lavó con HCl diluido (1 M), Na2C03 acuoso (10%, 20 ml) y salmuera saturada, se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El residuo se extrajo con hexano caliente y la solución orgánica se decantó del material insoluble. La solución orgánica se evaporó al vacío y el residuo se teu _____________!____ -^ *" -*-""»-• --» purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (80:20) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-bencil-?/-[(1 ,4-dicloro-7-¡soqu¡nolinil)carbonil]-glicina (130 mg, 0.29 mmoles) en forma de un aceite. 1H (CDCI3, 400 MHz) muestra una mezcla 1 :2 de rotámeros d 1.4 (1/3 de 9H, s), 1.5 (2/3 de 9H, s), 3.75 (1/3 de 2H, s), 4.1 (2/3 de 2H, s), 4.6 (2/3 de 2H, s), 4.85 (1/3 de 2H, s), 7.2-7.45 (5H, m), 7.9-8.05 (1 H, m), 8.2-8.5 (3H, m) ppm. LRMS 445 (MH+), 467 (MNa+), 889 (M2H+), 911 (M2Na+).

PREPARACIÓN 79 7-(ClorometiP-1 ,4-dicloro-isoguinolina Se añadió por porciones LiBH4 (530 mg, 24.3 mmoles) a una solución agitada de 4-cloro-1-oxo-1 ,2-dihidro-7-isoqu¡nolinacarboxilato de etilo (3.06 g, 12.2 mmoles) en THF (100 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla heterogénea se inactivo con HCl diluido (2 M) y se extrajo con CH2CI2 (2 x 100 ml) y EtOAc (5 x 100 ml). El sólido restante se recogió en EtOH caliente y se dejó enfriar para producir un sólido • iM__ft__r___- _É_ ifTfTtpr -***-"*««> • - - • «- ^_ __a____ blanco de aspecto velloso. Este sólido se reunió con los extractos orgánicos reunidos, se evaporó al vacío y se cristalizó con EtOH para dar 4-cloro-7-(hidroximetil)-1 (2H)-isoquinolina (2.19 g, 10.49 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 266-268X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 4.6 (2H, d), 5.4 (1 H, t), 7.4 (1 H, s), 7.7-7.8 (2H, m), 8.2 (1 H, s) ppm. LRMS 210 (MH+), 419 (M2H+). Análisis encontrado. C, 57.11 ; H, 3.81 ; N, 6.54. Calculado para C?oH8CIN02: C, 57.29; H, 3.85; N, 6.68.

Una solución de 4-cloro-7-(h¡droximet¡l)-1-(2/-/)-¡soquinolona (1.00 g, 4.77 mmoles) en POCI3 se agitó a 50X durante i horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo, se inactivo mediante la adición gota a gota de HCl diluido (1 M) (temperatura de reacción <30°C) y después se dividió entre agua y EtEOc. La fase acuosa se volvió a extraer con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice •a, I A_. _ »!__-*»_ «___.- *» ..* ¿ate-J* - usando hexano-EtOAc (80:20) como eluyente para dar 7-(clorometil)-1 ,4-dicloroisoquinolina (870 mg, 3.53 mmoles). pf 139-141 . 1H (CDCls, 400 MHz) d 4.8 (2H, s), 7.9 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 8.3-8.4 (2H, m) ppm. LRMS 241 [CnH9CI2ON H+; producto de MeO (a partir de MeOH) sustitución de Cl].

PREPARACIÓN 80 Ester f-butílico de ?f-benc¡l-?/-r(1,4-d¡cloro-7-isogu¡nol¡niPmetil1-?/-met¡l- DL-fenilglicina Se añadió 7-(clorometil)-1 ,4-dicloroisoquinolina (230 mg, 0.93 mmoles) a una solución de éster f-butílico de ?/-metil-DL-fenilglic¡na (248 mg, 0.96 mmoles) y Net3 (187 µl, 1.34 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 15 horas. [La TLC indicó que la reacción no se había completado]. El disolvente se evaporó al vacío, se añadieron THF (30 ml) y Net3 (100 µl, 0.72 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante 24 horas. ^ ^^^ |^^^^^^^^^^^^^^_^____J^^^^gJ^^^^^^ Aunque la reacción aún estaba incompleta, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-Et20 (98:2) como eluyente para dar el éster f-butílico de ?/-bencil-/V- [(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)metil]-Ay-metil-DL-fenilglicina (120 mg, 0.28 mmoles) en forma de un aceite incoloro. Se preparó la correspondiente sal díclorohidrato como se muestra continuación: una solución de la amina en hexano se agitó con una solución de HCl de Et20 (0.5 M). El precipitado blanco resultante se recogió por filtración y se secó. pf 120-122°C. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.5 (9H, s), 2.25 (3H, s), 3.8 (1 H, d), 3.9 (1 H, d), 4.3 (1 H, s), 7.3-7.4 (3H, m), 7.45-7.5 (2H, m), 7.95 (1 H, d), 8.15 (1 H, d), 8.2 (1 H, s), 8.3 (1 H, s) ppm. LRMS 432 (MH+). Análisis encontrado. C, 56.62; H, 5.58; N, 5.63. Calculado para C23H24CI2N2?2-HCI-H20: C, 56.86; H, 5.60; N, 5.77. _..__.*_. _ _^_*___J_ . _jKa _fe_.A_ka&_..». ¿^^ .____^ _. , _._. __ _. . _. ^^^¡B^^8___ PREPARACIÓN 81 Ester f-butílico de ?/-r(1,4-dicloro-7 -isoguinoliniPmetip-glicina Se añadió 7-(clorometil)-1 ,4-dicloroisoquinolina (378 mg, 1.53 10 mmoles) a una solución agitada de éster f-butílico de ?/-benciI glicina (340 mg, 1.53 mmoles) y Net3 (256 µl, 1.84 mmoles) en THF (20 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 18 horas. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (95:5 a 90:10) como eluyente para dar el éster f-butílico de N- 15 [(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolin¡l)metil]-gl¡cina (245 mg, 0.57 mmoles). Se preparó la correspondiente sal diclorhidrato como se muestra continuación: una solución de la amina en Et20 se agitó con una solución de HCl en dioxano (0.5 M). El precipitado blanco resultante se recogió por filtración y se secó. 20 pf 140-143X. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.4 (9H, s), 3.3 (2H, s), 4.6 (2H, s), 4.8 (2H, s), 7.4-7.45 (3H; m), 7.75-7.8 (2H, m), 8.35 (1 H, d), 8.4 (1 H, s), 8.45 (1 H, s), 8.8 (1 H, d) ppm. ___________M__________ÍH______ M_______________^IIIIa___|___||_? __ ¡___fil___Éi___ste_É_ _i iM^íid________ LRMS 433 (MH+). Análisis encontrado. C, 58.91 ; H, 5.38; N, 5.90. Calculado para C23H24CI2N202 HCI: C, 59.05; H, 5.39; N, 5.99.

PREPARCION 82 Ester terc-butílico de Na-f(1 ,4-dicloro-7-isoguinoliniPsulfon¡n-Ne-terc- butiloxicarbonil-L-lisina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinilsulfonilo (250 mg, 0.84 mmoles), clorhidrato del éster terc-butílico de Ne-terc-butiloxicarbonil-L-lisina (286 mg, 0.84 mmoles) y trietilamina (235 µl, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) se agitó a 23X durante 3 horas. La mezcla de reacción se lavó con agua (2 x 20 ml), se secó (MgS04) y se concentró al vacío para dar un residuo que, tras trituración con hexano y después i-Pr20, dio el éster terc-butílico de Na-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]-Ne-terc-butiloxicarbonil-L-lisina en forma de un polvo blanco (270 mg, 0.48 mmoles). -•**-» *- - -<• &.«,. __ ...., ... .,, ._._*_. _*_. ......... 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.1 (9H, s), 1.35-1.5 (13H, m), 1.6-1.85 (2H, m), 3.0-3.2 (2H, m), 3.8-3.95 (1 H, m), 4.45-4.6 (1 H, m a), 5.35 (1 H, d), 8.2 (1 H, dd), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.8. (1 H, d) ppm. LRMS 562 (MH+), 584 (MNa+). Análisis encontrado: C, 51.04; H, 5.96; N, 7.42. Calculado para C2 H33Cl2N3?6S: C, 51.24; H, 5.91 ; N, 7.47.

PREPARACIÓN 83 Ester terc-butílico de Na-r(1,4-dicloro-7-isoquinolin¡Psulfon¡n-Ne-terc- butiloxicarbonil-D-lisina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-ísoquinolinilsulfonilo (250 mg, 0.84 mmoles, clorhidrato del éster terc-butílico de Ne-terc- butiloxicarbonil-D-lisina (286 g, 0.84 mmoles) y trietilamina (235 µl, 1.69 mmoles) en CH CI2 (25 ml) se agitó a 23X durante 18 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-EtOAc (70:30) como eluyente. La cristalización en i-Pr20 dio el éster terc-butílico de Na-[(1 ,4-dicloro-7- isoquinolin¡l)sulfonil]-Ne-t-but¡lox¡carbonil-D-l¡sina (285 mg, 0.51 mmoles). 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.15 (9H, s), 1.2-1.55 (13H, m), 1.55-1.8 (2H, m), 3.05-3.15 (2H, m), 3.85-3.9 (1 H, m), 4.5-4.6 (1 H, m), 5.4 (1 H, d a), 8.2 5 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LMRS 584 (MNa+). Análisis encontrado: C, 51.18; H, 5.89; N, 7.33. Calculado para C2 H33Cl2N306S: C, 51.24; H, 5.91; N, 7.47.

PREPARACIÓN 84 Ester terc-butílico de N-.(1,4-dicloro-7 -isoguinoliniPsulfoníll-L-glutamina Una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinilsulfonilo (250 mg, 0.84 mmoles), clorhidrato del éster terc-butílico de L-glutamina (201 mg, 0.84 mmoles) y trietilamina (235 µl, 1.69 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) se agitó a 23X durante 18 horas. La mezcla de reacción se lavó con agua (2 x 20 20 ml) y el disolvente se retiró al vacío para dar el éster terc-butílico de N- [(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfon¡l]-L-glutamina (309 mg, 0.67 mmoles). Se obtuvo una muestra analítica después de la cristalización en EtOAc. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.05-1.15 (9H, s), 1.8-1.95 (1 H, m), 2.1- 2.25 (1 H, m), 2.35-2.55 (2H, m), 3.9-4.0 (1 H, m), 5.4-5.6 (1 H, s a), 5.6-5.8 (1 H, s a), 5.85 (1 H, d), 8.2 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LMRS 462 (MH+), 479 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 46.66; H, 4.54; N, 8.96. Calculado para d8H21CI2N305S: C, 46.75; H, 4.58; N, 9.09.

PREPARACIÓN 85 N-r(1,4-Dicloro-7-isoguinoliniPsulfon¡n-ciclopentilamina Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-ísoquinolin¡lsulfonilo (250 mg, 0.84 mmoles) a una solución de ciclopentilamina (100 µl, 1.0 mmoles) y trietilamina (170 µl, 1.22 mmoles) en CH2CI2 (15 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La solución se diluyó con CH2CI2, se lavó con ácido clorhídrico 2 M, con solución acuosa saturada de Na2C03 y después con salmuera. Esta solución se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío para dar N-[(1 ,4-dicloro-7-isoqu¡nolin¡l)sulfonil]-c¡clopentilamina (250 mg, 0.72 mmoles) en forma de un sólido blanco cristalino.

H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4 (2H, m), 1.5-1.7 (4H, m), 1.85 (2H, m), 3.75 (1 H, m), 4.6 (1 H, d), 8.25 (1H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.95 (1 H, s) ppm. LMRS 346 (MH+). Análisis encontrado: C, 48.68; H, 4.02; N, 7.97. Calculado para C14H14CI2N202S: C, 48;71 ; H, 4.09; N, 8.11 %.

PREPARACIÓN 86 1 ,4-Dicloro-7-(1 -pirrolidinilsulfoniPisoguinolina Se añadió pirrolidina (96 mg, 1.35 mmoles) a una solución de cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinilsufonilo (20 mg, 0.67 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla se concentró al vacío y el sólido residual se trituró con agua, se filtró y se secó. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc-hexano (50:50) como eluyente y se recristalizó en i- Pr20 para dar 1 ,4-dicloro-7-(1-pirrolidinilsufonil)-isoquinolina (67 mg, 0.20 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.8 (4H, m), 3.35 (4H, m), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.85 (1 H, s) ppm. LMRS 331 , 333 (MH+). Análisis encontrado: C, 47.23; H, 3.60; N, 8.32. Calculado para C13H12N2CI202S: C, 47.14; H, 3.65; N, 8.46%, PREPARACIÓN 87 (2R)-1 -f(1 ,4-Dicloro-7-isoquinoliniPsulfo.nin-2-piperidinacarboxilato de tere-butilo Se añadió H2S04 concentrado (2.0 ml) a una solución enfriada con hielo de ácido 2-(R)-piperidina carboxílico (415 mg, 3.21 mmoles) en dioxano (10 ml). Se añadió cuidadosamente isobutíleno condensado (40 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente en un recipiente sellado durante 21 h. La mezcla de reacción se vertió en una solución enfriada con hielo de Et20 (100 ml) y NaOH 5 N (20 ml), la mezcla se dejó calentar hasta la temperatura ambiente con agitación y después se diluyó con agua. Las fases se separaron, la capa orgánica se lavó con NaOH 1 N, después se concentró _ÉlM_l____Í_te_ÍÍ_i ¿_ *__^__M__fa»..*-*.. . -•«-.- * .- « .... . *fl.»_^j al vacío hasta la mitad del volumen y se extrajo con HCl 2N. Los extractos ácidos reunidos se basificaron usando NaOH 1 N y se extrajeron con CH2CI2, las soluciones orgánicas reunidas se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío para producir el 2(R)-piperidina carboxilato de tere-butilo (210 mg, 1.14 mmoles) en forma de un aceite. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4-1.6 (11 H, m), 1.75 (3H, m), 1.9 (1 H, m), 2.65 (1 H, m), 3.1 (1 H, m), 3.2 (1 H, m) ppm. LMRS 186 (MH+). Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolinilsulfonilo (245 mg, 0.83 mmoles) a una solución de (R)-piperidina carboxilato de tere-butilo (153 mg, 0.83 mmoles) y trietilamina (170 µl. 1.22 mmoles) en CH2CI2 (15 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La solución se diluyó con CH2CI2, se lavó con ácido clorhídrico 2 M, con Na2C03 saturado y después con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó al vacío. El aceite residual se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de pentano EtOAc (100:0 a 90:10), para dar (2R)-1-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-2-piperidinacarboxilato de tere-butilo (290 mg, 0.65 mmoles) en forma de una película incolora. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.3 (9H, s), 1.55 (2H, m), 1.7-1.85 (3H, m), 2.2 (1 H, m), 3.3 (1 H, dd), 3.9 (1 H, dd), 4.75 (1 H, d), 8.15 (1 H, d), 8.35 (1 H, dd), 8.45 (1 H, s), 8.8 (1 H, s) ppm. LMRS 462, 464 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 50.99; H, 4.95; N, 6.10. _-„A. .- _. ... ., . ^^áü^ ^^^ 1 i?^i ^_ Calculado para C19H22CI2N204S: C, 51.24; H, 4.98; N, 6.29%.

PREPARACIÓN 88 4-{.(1 ,4-D¡cloro-7-isoqu¡noliniPsulfon¡pamin?- -1 -metil-4- piperidinacarboxilato de metilo Una solución de ácido 4-amino-1-metil-4-piper¡dinacarboxíl¡co (4.0 g, 15.6 mmoles) en HCl metanólico (100 ml) se agitó a reflujo durante 20 horas. La mezcla enfriada se concentró al vacío y se evaporó azeotrópícamente con CH2CI2 para dar un aceite. Este se disolvió en Na2C03 enfriado con hielo y se extrajo con CH2CI2 (2 x). Los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío para producir 4-amino-1-metil-4-piperidinacarboxilato (1.6 g, 9.3 mmoles) en forma de un aceite. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.4-1.65 (4H, m), 2.1-2.25 (2H, m), 2.35 (3H, s), 2.4-2.55 (4H, m), 3.75 (3H, s) ppm. LMRS 173 (MH+)- Se añadió cloruro de 1 ,4-dicloro-7-isoquinolin¡lsulfonilo (1.0 g, 3.37 mmoles) a una solución de 4-amino-1-metil-4-piperidinacarboxilato de ^#¡&*^¡ ¿é metilo (700 mg, 4.0 mmoles) y trietilamina (700 µl, 1.0 mmoles) en CH2CI2 (60 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH- NH3 0.880 (97:3:0.3 a 95:5:0.5) para dar 4-{[(1 ,4-dicloro-7- isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-1-met¡l-4-piperidinacarboxilato de metilo (700 mg, 1.62 mmoles) en forma de un sólido blanco. 1H (CDCls, 400 MHz) d 2.05 (2H, m), 2.25 (6H, m), 2.4 (2H, m), 2.55 (2H, m), 3.5 (3H, s), 8.25 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s) 8.85 (1 H, s) ppm. LMRS 432, 434 (MH+).

PREPARACIÓN 89 Ester etílico de N-f(1,4-dicloro-7-isoquinoliniPsulfonin-N- (metiPcicloleucina Se añadió K2C03 (238 mg, 1.73 mmoles) a una solución de éster etílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]cicloleucina (300 mg, 0.72 mmoles) en DMF (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. Se añadió yoduro de metilo (47 µl, 0.76 mmoles) y la reacción se agitó durante 30 minutos más a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y después con salmuera, se secaron (Na2S04) y se secaron (Na2S04) y se evaporaron al vacío. El sólido amarillo residual se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc-hexano (20:80) como eluyente para dar éster etílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]- N-(metil)cicloleucina (204 mg, 0.47 mmoles) en forma de un sólidos blanco. 1H (CDCls, 400 MHz) d 1.25 (3H, t), 1.75 (4H, m), 2.1 (2H, m), 2.4 (2H, m), 3.05 (3H, s), 4.2 (2H, q), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LMRS 431 , 433 (MH+). Análisis encontrado: C, 50.12; H, 4.66; N, 6.43. Calculado para C18H20CI2N2O4S: C, 50.123; H, 4.67; N, 4.49%. 15 PREPARACIÓN 90 Cloruro de 4-bromo-1-cloro-7-isoquinolinasulfonilo Una suspensión de ¡soquinolinol (10 g, 68.9 mmoles) en eCN (250 ml) a 50X se trató con N-bromosuccinimida (12.6 g, 70.8 mmoles), tras lo cual se produjo la disolución casi completa antes de formar un precipitado blanco espeso. Después de calentar a reflujo durante 3 h, la mezcla de reacción se enfrió en hielo y el sólido se filtró, se lavó con MeCN y se secó para producir 4-bromo-1-(2H)-isoquinolona (7.6 g, 34.0 mmoles). 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 7.55 (1 H, s), 7.6 (1 H, m), 7.75 (1 H, d), 7.85 (1 H, m), 8.2 (1 H, d), 11.55 (1 H, s a) ppm. LMRS 223, 225 (MH+). Se añadió por porciones 4-bromo-1-(2H)-isoquinolona (7.5 g, 33.0 mmoles) a ácido clorosulfóníco (23 ml, 346 mmoles) y la solución resultante se calentó hasta 100X durante 2.5 días. Después de la refrigeración, la mezcla de reacción se vertió cuidadosamente sobre hielo para dar un sólido blanco que se filtró, se lavó con agua, MeCN y Et20 y se secó al aire para dar un sólido crema. El clorhidrato de 4-bromo-1-oxo-1 ,2-díhidro-7- isoquinolinasulfonilo (~ 13.5) se usó inmediatamente sin secado adicional. pf > 300X. 1H (DMSO-d6, 300 MHz) d 7.45 (1 H, s), 7.7 (1 H, d), 8.0 (1 H, d), 8.45 (1 H, s), 11.55 (1 H, s a) ppm. A una solución agitada de cloruro de 4-bromo-1-oxo-1 ,2-dihidro- 7-isoquinolinasulfonilo (~ 13.5 g) en acetonitrilo (200 ml) se añadió por porciones POCU (10 ml, 110 mmoles). La mezcla heterogénea resultante se calentó a reflujo durante 24 h, se dejó enfriar y el sobrenadante se decantó de los residuos aceitosos pardos y se concentró hasta que se obtuvo un sólido. La extracción del sólido en EtOAc dio, después de la eliminación del disolvente, un sólido pegajoso, que se trituró con Et20 para producir el compuesto del título (3.83 g, 11.0 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 120.5-121 X. 1H (DMSO-de, 300 MHz) d 8.2 (2H, m), 8.5 (1 H, s), 8.6 (1 H, s) ppm. Análisis encontrado: C, 31.21 ; H, 1.27; N, 4.08. Calculado para C9H4BrCI2NO2S 0.25H2O: C, 31.29; H, 1.31 ; N, 4.05.

PREPARACIÓN 91 Ester terc-butílico de N-r.4-bromo-1-cloro-7-isoquinoliniPsulfon¡p-D- prolina Se trató cloruro de 4-bromo-1-cloro-7-isoquinolinasulfonilo (400 mg, 1.17 mmoles) en CH2CI2 (20 ml) con clorhidrato de éster terc-butílico de (D)-prolina (250 mg, 1.20 mmoles) y trietilamina (410 µl, 2.94 mmoles) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con CH2CI2, se lavó consecutivamente con agua, con ácido cítrico acuoso al 10% y con salmuera, y después se secó (MgS0 ) y se concentró al vacío para dar un sólido blanquecino. Este se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc-hexano (16:84) para dar éster terc- butílico de N-[(4-bromo-1-cloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-D-prolina (350 mg, 0.74 mmoles) en forma de un sólido blanco. pf 128.5-129.5X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.1 (9H, s), 1.85-2.0 (3H, m), 2.2 (1 H, m), 3.5 (2H, m), 4.4 (1 H, dd), 8.3 (2H, m), 8.6 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 475, 477 (MH+), Análisis encontrado: C, 45.41 ; H, 4.21 ; N, 5.83. Calculado para C18H2oBrCIN204S: C, 45.44; H, 4.24; N, 5.89.

PREPARACIÓN 92 Clorhidrato del éster etílico de N-(T(4-bromo-1-cloro-7- ¡soquinoliniPsulfon¡p-N-_2-(dimetilamino)etil. -cicloleucina Se añadió trietilamina (1.02 ml, 7.33 mmoles) a una solución de cloruro de 4-bromo-1-cloroisoquinolinil-sulfonilo (1.0 g, 2.93 mmoles) en CH2CI2 (25 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se lavó consecutivamente con HCl 1 N, con solución de Na2C?3 y con salmuera y después se secó (Na2S0 ) y se evaporó al vacío. El aceite residual se cristalizó en CH2CI2-i-Pr20 para dar éster etílico de N-{[(4-bromo-1-cloro-7 -Soquinol¡n¡l)sulfonil]c¡cloleuc?na (380 mg, 0.82 mmoles) en forma de un sólido. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.2 (3H, t), 1.6-1.8 (4H, m), 2.0 (2H, m), 2.15 (2H, m), 4.05 (2H, q), 8.25 (1 H, d), 8.35 (1 H, d), 8.6 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 484 (MNa+), Se añadió K2C03 (157 mg, 1.14 mmoles) a una solución de éster etílico de N-[(4-bromo-1-cloro-7-isoquinol¡nil)-sulfon¡l]cicloleuc¡na (300 mg, 0.65 mmoles) en DMF (5 ml) y la solución se agitó durante 5 minutos. Se añadió clorhidrato de cloruro de N,N-d¡metilam¡noet¡lo (112 mg, 0.78 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 36 horas. La mezcla de reacción se dividió entre agua y EtOAc, las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las soluciones orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2CI2-MeOH-NH3 0.880 (95:5:0.5) como eluyente para dar una goma. Esta se disolvió en una solución de Et20-EtOAc, se añadió HCl etéreo y la mezcla se evaporó al vacío. El sólido resultante se trituró con agua, se filtró y se secó para dar el clorhidrato de éster etílico de N-{[(4-bromo-1-cloro-7-¡soquinolinil)sulfonil]-N-[2-dimet?lam¡no)etil]-cicloleucina (90 mg, 0.16 mmoles) en forma de un sólido. . ,^^^^,z,.,,.^.,^^ .. . „^*~ ?l*l?*— ***.**— » .. .... __ ^_?_,___fc_«^ 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.3 (3H, t), 1.65 (2H, m), 1.8 (2H, m), 2.15 (2H, m), 2.4 (2H, m), 2.9 (6H, m), 3.6 (2H, m), 4.0 (2H, m), 4.2 (2H, q), 8.2 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.65 (1 H, s), 8.80 (1 H, s) ppm. LRMS 534 (MH+), Análisis encontrado; C, 44.17; H, 4.97; N, 7.24. Calculado para C2?H27BrCIN304S:HCI: 44.30; H, 4.96; N, 7.38%.

PREPARACIÓN 93 Clorhidrato de 3-f.í 1 ,4-dicloro-7 -isoquinoliniPsulfonil1-amino}-2,2- 10 dimetilpropanoato de etilo El compuesto del título se obtuvo en forma de un sólido blanco (86%) a partir del cloruro de 1 ,4-diclorosulfonilo y clorhidrato de 3-amino-2,2- dimetilpropanoato de etilo, siguiendo un procedimiento similar al descrito en la preparación 90. 20 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.25 (9H, m), 3.0 (2H, d), 4.1 (2H, q), 5.4 (1 H, t), 8.2 (1 H, d), 8.4 (1 H, d), 8.5 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 404, 406 (MH+), Análisis encontrado: C, 47.39; H, 4.44; N, 6.73. ___«_____! ___á?_^____?_f_____¿_Íf_tt__M__??_________. _^| ___^_*___ . .- -¿«__t__. _.-,._s»- fr.f[ f.. yy-fc. ^ ,^__.

Calculado para deH^C ^O^: C, 47.42; H, 4.48; N, 6.91 %.

PREPARACIÓN 94 Ester etílico de N-r(1,4-dicloro-7 -isoquinoliniDsulfonill-N-r2-(tetrahidro- 2H-p¡ran-2-iloxi)etillcicloleuc¡na Se añadió K2C03 (238 mg, 1.73 mmoles) a una solución de éster etílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)-sulfonil]cicloleucina (600 mg, 1.44 mmoles) en DMF (10 ml) y la suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añadió una solución de 2-(2-bromoetoxi)-tetrahidro- 2H-pirano (J.C.S. 1948; 4187) (316 mg, 1.44 mmoles) en DMF (4 ml), seguido por yoduro sódico (10 mg) y la reacción se agitó a 70X durante 23 h. La mezcla enfriada se vertió en agua y se extrajo con EtAOc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron (MgS0 ) y se evaporaron al vacío. El aceite amarillo residual se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando hexano-Et20 (75:25) como eluyente, se evaporó azeotrópicamente con CH2CI2 y se secó al vacío para producir éster etílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)sulfonil]-N-[2- (tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etil]cícloleuc¡na (341 , 0.63 mmoles) en forma de un sólido. 1H (CDCI3, 400 MHz) d 1.3 (3H, t), 1.55 (4H, m), 1.65-1.8 (6H, m), 2.15 (2H, m), 2.4 (2H, m), 3.5 (1 H, m), 3.7 (3H, m), 3.8 (1 H, m), 3.95 (1 H, m), 4.2 (2H, q), 4.55 (1 H, m), 8.35 (2H, s), 8.45 (1 H, s), 8.9 (1 H, s) ppm. LRMS 545 (MH+), 562 (MNH4+). Análisis encontrado: C, 52.31 ; H, 5.58; N, 4.84. Calculado para C2 H3oCI2N206S-C, 52.33; H, 5.60; N, 5.09%.

PREPARACIÓN 95 Ester metílico de N-r(1 ,4-d¡cloro-7 -isoquinoliniP-metipcicloleucina Se añadió 7-clorometil-1 ,4-dicloro-isoquinolina (400 mg, 1.62 mmoles) a una suspensión de éster metílico de cicloleucina (255 mg, 1.78 mmoles), K2C03 (500 mg, 3.62 moles) y yoduro sódico (15 mg) y la mezcla resultante se calentó a 75X durante 2.5 horas. Después de enfriar, la mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo con CH2CI2 (2 x 60 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con agua y con salmuera, se secaron (Na2S0 ) y se concentraron al vacío para dar un aceite. Este se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con hexno-EtOAc (85:15) para dar éster metílico de N-[(1 ,4-dicloro-7-isoquinolinil)metil]c¡cloleuc¡na (414 mg, 1.17 moles) en forma de un aceite amarillo. Una muestra de este aceite se trató con HCl etéreo y la mezcla se evaporó para dar la sal clorhidrato del compuesto del título en forma de un sólido blanco. 1H (CDCls, 300 MHz) d 1.4-1.8 (5H, m), 2.0 (3H, m), 3.75 (3H, s), 4.15 (2H, s), 8.25 (3H, m), 8.5 (1 H, s), 10.5 (2H, s a) ppm. Análisis encontrado: C, 52.53; H, 4.09; N, 6.84. Calculado para C-,7H18CI2N202-HCI: C, 52.39; H, 4.91 ; N, 7.19%.

PREPARACIÓN 96 Diclorhidrato de (1 -aminociclopentil) (4-metil-1-piperaziniPmetanona Se añadió clorhidrato 1 -(3-d imet¡lam¡noprop¡l)-3-etilcarbod ¡¡mida (2.49 g, 13.0 mmoles) por porciones a una solución enfriada (a 4X) de hidrato de hidroxibenzotriazol (1.49, 11.0 mmoles) y ácido 1 -[(terc-butoxicarbonil)amino]-ciclopentanocarboxílico (2.29 g, 10.0 mmoles) en DMF (15 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió N-metilpiperazina áaá^j (1.10 g, 11.0 mmoles), la reacción se agitó durante 30 minutos, se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se continuó la agitación durante 17 horas más. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y el aceite amarillo residual se dividió entre solución saturada de Na2C03 y EtOAc. Las capas se separaron, la fase acuosa se extrajo con EtOAc y las soluciones orgánicas reunidas se secaron (MgS0 ) y se concentraron al vacío. El sólido residual se pre-adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de CH2CI2-MeOH- NH3 0.880 (97.5:2.5:0.25 a 90:10:1 ) y se trituró con Et20 para producir 1-[(4-metil-1 -piperazinil)carbonil]ciclopentilcarbamato de tere-butilo (2.31 g, 7.4 mmoles) en forma de un sólido cristalino. pf 171-175X. 1H (CDCI3, 300 MHz) d 1.4 (9H, s), 1.7 (6H, m), 2.25 (3H, s), 2.4 (6H, m), 3.65 (4H, m), 4.7 (1H, s a). LRMS 312 (MH+) Una suspensión de 1-[(4-metil-1-piperazinil)carboníl]ciclopentilcarbamato de tere-butilo (2.2 g, 7.06 mmoles) en EtOAc (120 ml) a 4X se saturó con gas HCl y la reacción después se agitó durante 4 horas. La mezcla se evaporó azeotrópicamente con EtOAc y después con Et20 seco y se secó al vacío para producir diclorhidrato de (1-aminociclopentil) (4-met¡l-1-piperazinil)metanona (2.1 g) en forma de un sólido blanco. pf 267-270X (Descomp) „ j #¿a?t»3BL—~~. -_ M_.ft..¿a_._^ Análisis encontrado: C, 43.29; H, 7.99; N, 13.84. Calculado para CnH2.N3O-2HCI.H2O: C, 43.71 ; H, 8.34; N, 90%. LRMS 212 (MH+). ____a__?_É_____? ^^^^ á^j=tój^sjHjll

Claims (33)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de fórmula (I): y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en la que: G es N=C (NH)2 o NHC(=NH)NH2; R1 es H o halo; X es CO, CH2 o S02; R2 es H, arilo, heteroarilo, cicloalquílo C3- o alquilo C1-6, estando cada uno de cicloalquilo C3- 7 y alquilo C?-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, arilo, het, cicloalquilo C3- , cicloalquenilo C5.7, OH, alcoxi C1-6, O-het1, alquilo C1-3, C02R7 y NR4R5; X1 es arileno, alquileno C?_6 opcionalmente sustituido con uno o más grupos R6, o ciclo-alquileno (C4.7) opcionalmente sustituido con R6, anillo de ciclo-alquileno (C -7) que puede opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7; o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina; R3 es C02R7, CH2OH, CONR8R9 o CH2NR8R9; o cuando X1 ^^^^^^ ^^j^^^^^^á^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ se toma independientemente de R2 y es metileno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R6, o es un 1 ,1 -ciclo-alquileno (C -7) que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7 y opcionalmente sustituido con R6, entonces R2 y R3 pueden tomarse conjuntamente con los grupos N y X1 a los que están unidos, como un grupo de fórmula (IA) o (IB): 10 (IA) (IB) en la que X2 es etileno, n-propileno o n-butileno; cada uno de R4 y R5 es independientemente H, arilo o alquilo C?-ß opcionalmente sustituido con arilo; R6 es halo, OH, alcoxi C1-6, alquiltio C?-6, cicloalquilo C3-7, SH, arilo, C02R7, 15 CONHR8 o alquilo C?.6 opcionalmente sustituido con arilo, alcoxi C-?-6, C02H OH, CONR8R9 o por NR8R9; R7 es H o alquilo C1-6; cada uno de R8 y R9 es independientemente H o alquilo d-6 opcionalmente sustituido con OH, C02R7, alcoxi d-6 o por NR R5; o R8 y R9 se toman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos, para formar un anillo de 4 a 7 eslabones que incorpora 20 opcionalmente un grupo hetero adicional seleccionado entre O, S y NR7; p es 0, 1 ó 2; "arilo" es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo d-6, alcoxi d-6 o halo; "het" es un heterociclo de 5 a 7 eslabones saturado o parcial o totalmente a^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^¡^g^^^g^j^^^^|^^^g^i-^_^p?^_?ili>_-___>_^^^^¿^^^^^. insaturado que contiene hasta 3 heteroátomos seleccionados independientemente entre O, N y S, y que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo d-6, alcoxi C-?-6, C02R7 o halo; "heteroarilo" es un heterociclo de 5 a 7 eslabones totalmente insaturado que contiene hasta 3 heteroátomos seleccionados independientemente entre O, N y S, y que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo d-6, alcoxi d.6) C02R7 o halo; "het1" es tetrahidropiran-2-ilo (2-THP); y "arileno" es fenileno opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo d-6, alcoxi d-6, C02R7 o halo.

2.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R1 es halo.

3.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que X es S02.

4.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R2 es H, cicloalquilo C3.7 o alquilo C?-6, estando cada uno de cicloalquilo C3-7 y alquilo d-6 opcionalmente sustituido con arilo, het, cicloalquilo C3-7, OH, Ohet1, alcoxi d-6, C02H, C02(alquilo d.6) o por NR4R5, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina.

5.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que X1 es fenileno opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre metoxi y halo, o es alquileno d-3 opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre arilo (o alquilo d-6 opcionalmente sustituido con arilo, alcoxi d-6, CO2H, OH, NH2 o CONH2), o es ciclo-alquileno (C4.7) que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O o NR7, anillo que está opcionalmente sustituido con R6, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina.

6.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R3 es C02R7 o CONR8R9.

7.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que preferiblemente R1 es cloro o bromo.

8.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R2 es H, alquilo C1-3 opcionalmente sustituido con arilo, con piridilo opcionalmente sustituido, con NR4R5, con HO o con Ohet1, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidína.

9.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que X1 es metileno opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre arilo o (alquilo d- opcionalmente sustituido con OH, NH2 o CONH2), o es ciclobutileno, ciclopentileno, ciclohexileno, cicloheptileno, tetrahidropiranileno, piperidinileno sustituido con R7, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina. -*.~? ¡?*- . . -aiA AitaBi- .l». ->.^ t_ .v. ^.. . AMMfc_ _h_»..W-J_

10.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R3 es C02H, CONH2, CON(CH3) (CH2)2OH, CON(CH3) (CH2)2NHCH3, C02(alquilo C1-3), CONH(CH2)2OH, CONH(CH2)2OCH3, (morfolino)CO o (4-metilpiperazino)CO. 5

11.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R1 es cloro.

12.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, CH2CH20(2- THP), piridinilmetilo, bencilo o metoxíbencilo, o R2 y X1 pueden tomarse 10 conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, píperidina u homopiperidina unido al radical R3 por medio de la posición 2 de dicho anillo.

13.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que X1 es C(CH3)2, 1 ,1-ciclopentíleno, 4,4-tetrahidropiranileno, 15 ?/-metil-4,4-piper¡din¡leno, CH2, CH(CH(CH3)2), CH(CH2)4NH2, CH(CH2)3NH2, CH(CH2)CONH2, 1 ,1 -ciclobutileno, 1 ,1-cíclopentileno, 1 ,1 -ciclohexileno o 1 ,1- cicloheptileno, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina u homopiperidina unido al radical R3 mediante la posición 2. 20

14.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R3 es C02H.

15.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, CH2CH20(2- THP), o R2 y X1 es toman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de pirrolidina unido al radical R3 mediante la posición 2.

16.- El compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación 5 anterior, en el que X1 es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4-tetrahidropiranileno, ?/-metil-4,4-piperidinileno, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina unido al radical R3 mediante la posición 2.

17.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 , en el 10 que X es S02, donde el radical R3-X1-NR2-, cuando X1 se toma independientemente de R2 y es metileno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R6, o es un 1 ,1 -ciclo-alquileno (C4-7) que contiene opcionalmente un radical hetero seleccionado entre O, S(0)p o NR7 y opcionalmente sustituido con R6, y R2 y R3 pueden tomarse conjuntamente con los grupos N 15 y X1 a los que están unidos, un grupo de fórmula (IA) o (IB): (IA) (IB) 20 en la que X2 es etileno, n-propileno o n-butileno. s^^^^^j^^^j^^^^^^^^^^^^^^^g-gl & ljj^^^^^^

18.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que X1 es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclobutileno, 1 ,1 -ciclopentileno, 1 ,1-ciclohexileno, 4,4- tetrahidropiranileno o ?/-metil-4,4-piperidin¡leno.

19.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 17 ó 18, 5 en el que X2 es etileno.

20.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que los sustituyentes R1, X, R2X1 y R3 tienen los valores descritos por los ejemplos.

21.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 , en el 10 que R1 es cloro o bromo; X es S02; R2 es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH, CH2CH20(2-THP), piridinilmetilo, bencilo o metoxibencílo, o R2 y X1 pueden tomarse conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidína, piperidina u homopiperidina unido al radical R3 por medio de la posición 2 de dicho anillo; X1 es C(CH3)2, 15 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4-tetrahidropiranileno, /V-metil-4,4-piperid¡nileno, CH2, CH(CH(CH3)2), CH(CH2)4NH2, CH(CH2)3NH2, CH(CH2)CONH2, 1 ,1- ciclobutileno, 1 ,1 -ciclopentileno, 1 ,1 -ciclohexileno, 1 ,1-cicloheptileno, N-metil- 4,4-piperídinileno, o 4,4-tetrahidropiranilen, o se toma conjuntamente con R2 y con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, 20 pirrolidina, piperidina u homopiperidina unido al radical R3 mediante la posición 2; y R3 es C02H, CONH2, CON(CH3) (CH2)2OH, CON(CH3) (CH2)2NHCH3, C02(alquilo d.3), CONH(CH2)2OH, CONH(CH2)2OCH3, (morfolino)CO o (4-metilpiperazino)CO. ly» ^^^^ ^«.>^«^ &p fo ßtfm ß¿aa*d??a i» *j?m¿ 'H> > .- . . . J6?^^?^f^* t

22.- El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que R1 es cloro; X es SO2; R2, si se toma independientemente, es H, CH2CH2N(CH3)2, CH3, CH2CH2OH o CH2CH20(2-THP); X1, cuando se toma independientemente, es C(CH3)2, 1 ,1 -ciclopentileno, 4,4-tetrahidropiranileno o 5 ?/-metíl-4,4-piperidinileno, o X1 y R2 se toman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos para formar un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina unido al radical R3 mediante la posición 2; y R3 es CO2H.

23.- El compuesto o sal seleccionado entre los compuestos de los ejemplos y las sales de los mismos. 10

24.- El compuesto o sal seleccionado entre: ?/-[(4-cloro-1- guaníd¡no-7-isoquinolinil)sulfonil]-D-prolina; ácido 2-{[(4-cloro-1 -guanidino-7- isoqu¡nol¡nil)sulfonil]amino}isobutír¡co; ácido 1-{[[4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)-sulfonil]amino}ciclobutanocarboxíl¡co; ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)sulfon¡l]cicloleucina; ?/-[(4-cloro-1-guanidino-7- 15 isoqu¡nolinil)sulfonil]cicloleucina; 1 -{[(4-cloro-1 -guanidíno-7- ¡soquinolinil)sulfonil]amino}-?/-(2-h¡droxietil)c¡clopentanocarboxam¡na; 1-{[(4- cloro-1-guanidino-7-isoqu¡nolinil)sulfonil]am¡no}-?/-[2- (dimetilamino)etil]ciclopentanocarboxamina; 1 -{[(4-cloro-1 -guanidino-7- isoqu¡nolinil)sulfonil]amino}-?/-[2-(dimetilamino)etil]ciclopentanocarboxamina; 20 /V-[(4-cloro-1 -guan¡dino-7-isoquínol¡nil)sulfon¡l]-/V-[2- (dimetilamino)etil]cicloleucina; ácido 1-{[(4-cloro-1-gunaidino-7-isoquinolinil)- sulfonil]amino}ciclohexanocarboxílico; ácido 4-{[(4-cloro-1-guanidino-7- isoquinolinil)-sulfonil]amino}tetrahidro-2H-piran-4-carboxílico; (2R)-1-({4- clorol -guanidino-7-isoquinolin¡l}-sulfonil)-2-piperid¡nacarboxilato de ferc-butilo; ácido (2R)-1 -({4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil}-sulfonil)-2- piperidinacarboxílico; ácido 1 -[({4-cloro-1 -guanidino-7-isoquinolinil}- sulfon¡l)am¡no]-?/-(2-hidroxietil)-?/-metilciclopentanocarboxamida; ácido 1 -[({4- 5 cloro-1-guanid¡no-7-isoquinolin¡l}-sulfonil)amino]-/V-(2- metoxietil)ciclopentanocarboxamida; 4-cloro-1 -guanidino-?/-[1 - (morfolinocarbonil)ciclopent¡l]-7-isoquinolinasulfonamida; 4-cloro-1-guanidino- V-{1-[(4-metilpiperazino)carbonil]ciclopentil}-7-ísoquinolinasulfonamida; ?/-({4- bromo-1-guan¡dino-7-ísoquinolinil}sulfonil)-- .-[2-(dimetilamino)et¡l]c¡cloleucina; 10 ácido 1-[({4-cloro-1-guanidino-7-¡soquinolin¡l)sulfonil][2-(tetrahidro-2H-p¡ran-2- iloxi)etil]am¡no}ciclopentanocarboxílico; y ?/"-{4-cloro-7-[(10-oxo-9-oxa-6- azaspiro[4.5]desc-6-il)sulfonil]-1-ísoquinolin¡l}guan¡dina; y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

25.- Una composición farmacéutica que comprende un 15 compuesto o sal de acuerdo con cualquier reivindicación anterior y un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

26.- Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, para uso como un medicamento.

27.- El uso de un compuesto o una sal como el que se reclama 20 en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección o proceso mediado por uPA.

28.- Un procedimiento para fabricar un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 , que comprende la reacción del correspondiente derivado de 1-aminoisoquinolina (II): con cianamida (NH2CN) o un reactivo que actúa como un sintón "NCH+=NH", donde R1, R2, R3, Xy X1 son como se han definido en la reivindicación 1.

29.- Un procedimiento para fabricar un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 , que comprende la reacción del correspondiente derivado de 1-aminoisoquinolina (II): donde R1, R2, R3, X y X1 son como se han definido en la reivindicación 1, con un reactivo que actúa como un sintón (lll) de amidina (2+) protegido: 2+ PNH 'NHP (lll) para dar un intermedio de fórmula (IV): (IV) en la que G1 es un radical de guanidina protegido N=C(NHP)(NHP-?) o un tautómero del mismo, donde P y Pi son grupos protectores de nitrógeno tales como t-butoxicarbonilo ("Boc"), bencilo, bencíloxicarbonilo, etc., que pueden desprotegerse convenientemente para dar el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo.

30.- Un procedimiento para fabricar un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 , que comprende la reacción del correspondiente compuesto de fórmula (V): 8^f^^^jg^j^^^^g^aaal^ ^ »|^^ íjtíy^gB ¡^» en la que R1, R2, R3, X y X1 son como se han definido en la reivindicación 1 , y Z es un grupo saliente adecuado tal como Cl, Br u OPh, mediante el desplazamiento del grupo saliente por la base libre de guanídina.

31.- Un compuesto de fórmula (II): en la que R1, R2, R3, X y X1 son como se han definido en la reivindicación 1 , o una sal del mismo.

32.- Un compuesto de fórmula (IV): (IV) _ _. _. ,__.,.»._.. -.- «***. —>• . en el que R1, R2, R3, X y X1 son como se han definido en la reivindicación 1 y G1 es un radical guanidina protegido N=C(NHP)(NHP-?) o un tautómero del mismo, donde P y Pi son grupos protectores de nitrógeno.

33.- Un compuesto de fórmula (V): en la que R1, R2, R3, X y X1 son como se han definido en la reivindicación 1 y Z es un grupo saliente.