MX2015000429A

MX2015000429A - Composiciones farmaceuticas para el suministro topico de fotosesibilizadores y usos de los mismos.

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Publication number: MX2015000429A
Application number: MX2015000429A
Authority: MX
Inventors: Delphine Caroline Imbert; David William Carey Hunt
Original assignee: Dermira Inc
Priority date: 2012-07-11
Filing date: 2013-07-11
Publication date: 2015-07-14
Also published as: JP2015522079A; KR20150030763A; AU2013290140A1; BR112015000383A2; CN104703624A; CA2878846A1; EP2872178A1; WO2014011875A1; US20150209428A1

Abstract

La revelación presente incluye y proporciona composiciones que comprenden agentes fotosensibilizadores y su uso en terapia fotodinámica para el tratamiento de condiciones dermatológicas.

Description

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS PARA EL SUMINISTRO TÓPICO DE FOTOSENSIBILIZADORES Y USOS DE LOS MISMOS REFERENCIA CRUZADA CON SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama el beneficio de las Solicitudes Provisionales de EEUU Nos. de serie 61/670, 554, presentada el 11 de julio de 2012, 61/706,732, presentada el 27 de septiembre de 2012, y 61/708,845, presentada el 2 de octubre de 2012, cuyo contenido es incorporado en su totalidad.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La revelación presente incluye y proporciona composiciones que comprenden agentes fotosensibilizadores y su uso en la terapia fotodinámica para el tratamiento de condiciones dermatológicas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La terapia fotodinámica (PDT, por sus siglas en ingles) es un procedimiento que utiliza fármacos activados por luz (fotosensibilizadores) para tratar una gran variedad de condiciones médicas. La acumulación del fotosensibilizador en un tejido objetivo que puede ser iluminado directamente hace del PDT un tratamiento selectivo. Cuando un fotosensibilizador es activado por luz, el oxígeno singulete y otros radicales libres son producidos en los tejidos que han retenido el fármaco. La interacción de estas especies reactivas de oxígeno con las macromoleculas biológicas induce una cascada de reacciones bioquímicas que causa cambios en el metabolismo de la célula, y a dosis altas de fármaco y/o de luz, puede tener como resultado la muerte de la célula.

La terapia fotodinámica (PDT) ha sido propuesta como un tratamiento para varias condiciones de la piel, incluyendo aené vulgaris, glándulas sebáceas hiperactivas, soriasis, dermatitis atópica, y ciertos tipos de cánceres de piel. Uno de los desafíos al realizar el PDT para estas condiciones ha sido dirigir cantidades suficientes de fotosensibilizador a la ubicación deseada en la piel sin causar reacciones generalizadas e indeseadas de fotosensibilidad de la piel tales como eritema, dolor, quemado y comezón después de la irradiación con luz. Por ejemplo, en las condiciones de tratamiento tales como acné vulgaris, hiperplasia de glándula sebácea, seborrea y dermatitis seborreica, las condiciones caracterizadas por la hiperactividad de la glándula sebácea, sería deseable dirigir al fármaco fotosensibilizador selectivamente a las glándulas sebáceas.

Varias formulaciones tópicas de fotosensibilizadores han sido propuestas para tratar condiciones de la piel (vea por ejemplo, la WO 2005/074987). La composición de la formulación puede influir notablemente el suministro tópico del fotosensibilizador en la piel así como en los apéndices de la piel tales como las unidades de pilosebáceas (PSU, por sus siglas en ingles), las estructuras que consisten en un folículo capilar con glándulas sebáceas asociadas. Hay una necesidad para mejores formulaciones que suministren efectivamente los fármacos fotosensibilizadores en las glándulas sebáceas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En un aspecto, esta invención proporciona una composición farmacéutica útil para localizar un fotosensibilizador a una glándula sebácea, que comprende una formulación constituida de un componente fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador sobresaturado a temperatura ambiente, uno o más solventes, y monoetil éter de dietilen glicol (DGME), en donde el fotosensibilizador es una porfirina verde presente en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.4% en la composición farmacéutica; y en donde el uno o más solventes comprenden alcohol bencílico presente en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 5% y aproximadamente 55% e isopropanol (IPA) en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 25% a aproximadamente 60% en la composición farmacéutica; en donde el DGME está presente a una concentración final (p/p) de aproximadamente 15% y aproximadamente 35%; y en donde la formulación constituida fue formada combinando: a) una primera solución de una porfirina verde presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 0.5% y 1.5% disuelta en alcohol bencílico; y b) una segunda solución de un componente diluyente que comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 15% y aproximadamente 40%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 0% y aproximadamente 30%, y aproximadamente 40% y isopropanol (IPA) presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 30% Y aproximadamente 70% en la composición farmacéutica; en donde la concentración del fotosensibilizador en la solución constituida está sobresaturada a temperatura ambiente. En una modalidad, la composición farmacéutica constituida es físicamente estable por lo menos por 4 horas. En otra modalidad, el componente diluyente opcionalmente comprende adicionalmente alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de entre 4.0% y 6.0%, mentol presente en una concentración inicial (p/p) de entre 2.5% y 3.0%, salicilato de metilo presente en una concentración final (p/p) de entre 0.5% y 1.5%, y polisorbato 80 presente en una concentración final (p/p) de entre 0.25% y 0.60%. En una modalidad adicional, la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% en el alcohol bencílico y el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 35.6%, IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 54.39%, alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 5.56%, mentol presente en una concentración inicial de aproximadamente 2.78%, salicilato de metilo presente en una concentración inicial de aproximadamente 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración inicial de aproximadamente 0.56%. En otra modalidad, la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.00% y el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 24.30%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de 28.55%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 47.15%. En una modalidad adicional, la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 0.60% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.40%; y el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 34.00%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 66.00%. En otra modalidad, la porfirina verde es lemuteporfina.

En otro aspecto, la invención presente proporciona un metodo para utilizar la composición farmacéutica descrita para tratar aené en un sujeto necesitado del mismo, que comprende aplicar una cantidad terapéuticamente efectiva de dicha composición a un área afectada de la piel del sujeto que tiene lesiones de acné, permitir tiempo suficiente para que por lo menos parte de la porfirina verde se dirija a las glándulas sebáceas del área afectada, y exponer la piel del sujeto a energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar la porfirina verde.

En otro aspecto, la invención presente proporciona un metodo para utilizar la composición farmacéutica descrita para reducir la tasa de excreción de sebo de las glándulas sebáceas en la piel de un sujeto que tiene un área afectada de piel grasienta, que comprende aplicar una cantidad terapéuticamente efectiva de dicha composición farmacéutica al área afectada, permitir tiempo suficiente para que por lo menos parte de la composición se dirija a las glándulas sebáceas, y exponer la piel del sujeto a energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador.

En un aspecto adicional, la invención presente proporciona un método para preparar la composición farmacéutica descrita, que comprende mezclar un primer frasco que tiene un componente fotosensibilizador que comprende una porfirina verde y alcohol bencílico y un segundo frasco que tiene un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) e isopropanol (IPA) y opcionalmente alcohol bencílico, en donde dicha composición farmacéutica tiene una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.4% de dicha porfirina verde, de entre aproximadamente 5% y aproximadamente 55% de dicho alcohol bencílico, de entre aproximadamente 7% y aproximadamente 25% de dicho DGME, y de entre aproximadamente 25% y aproximadamente 60% de dicho IPA. En una modalidad, el método comprende mezclar un primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde que comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% en alcohol bencílico y un segundo frasco que comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 35.6%, IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 54.39%, alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 5.56%, mentol presente en una concentración inicial de aproximadamente 2.78%, salicilato de metilo presente en una concentración inicial de aproximadamente 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración inicial de aproximadamente 0.56%. En otra modalidad, el método comprende mezclar un primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde que comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.00%, y un segundo frasco que comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 24.30%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de 28.55%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 47.15%. En una modalidad adicional, el método comprende mezclar un primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde que comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 0.60% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.40%; y un segundo frasco que comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 34.00%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 66.00%. En otra modalidad, la porfirina verde es lemuteporfina.

En otro aspecto, la invención presente proporciona un metodo para reducir la tasa de excreción de sebo de glándulas sebáceas en la piel de un sujeto que tiene un área de piel grasienta, que comprende aplicar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición farmacéutica descrita al área afectada en la piel del sujeto, permitir tiempo suficiente para que por lo menos parte del fotosensibilizador se dirija a las glándulas sebáceas; y exponer la piel del sujeto a energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador. En una modalidad, el fotosensibilizador es una porfirina verde. En una modalidad adicional, la porfirina verde es lemuteporfina. En otra modalidad, el área afectada del sujeto es pre-tratada con calor seco antes de aplicar la composición. En una modalidad adicional, el tiempo permitido para que el fotosensibilizador se ubique es de 1 a 2 horas. En otra modalidad, la exposición a la energía luminosa es en el intervalo de 37.5 a 300 J/cm2.

En un aspecto adicional, la invención presente proporciona un método para tratar aené en un sujeto necesitado del mismo que comprende aplicar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición de fotosensibilizador descrita antes a un área afectada de la piel del sujeto que tiene lesiones de acné, permitir tiempo suficiente para que por lo menos parte del fotosensibilizador se dirija a las glándulas sebáceas del área afectada, y exponer la piel del sujeto a energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador. En una modalidad, el sujeto tiene lesiones inflamatorias de aené, lesiones no inflamatorias de acné o tanto lesiones inflamatorias como y no inflamatorias. En otra modalidad, el fotosensibilizador es una porfirina verde. En una modalidad adicional, la porfirina verde es lemuteporfina. En una modalidad adicional, el área afectada del sujeto es pretratada con calor seco antes de que la composición sea aplicada. En otra modalidad, el tiempo permitido para que el fotosensibilizador se ubique es 1 a 2 horas. En una modalidad adicional, la exposición a la energía luminosa está en el intervalo de 37.5 a 300J/cm2.

La revelación presente también incluye y proporciona un juego que comprende un primer contenedor que contiene un componente fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador, y un segundo contenedor que contiene un componente de excipiente que es miscible con los solventes en el primer contenedor, y un conjunto de instrucciones para combinar el contenido de los dos contenedores, aplicar tópicamente el contenido combinado a la piel de un sujeto, y realizar el PDT para el tratamiento de uno o más trastornos de la piel.

En ciertas modalidades según la revelación presente, los fotosensibilizadores incluyen porfirinas verdes tales como lemuteporfina y verteporfina.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 es un gráfico que muestra el efecto en las glándulas sebáceas de ratón de una modalidad según la revelación presente de PDT con varias formulaciones de solución de lemuteporfina (LT-G-001 -LT-G-005 mostrada en el Cuadro 4; con y sin agentes gelificantes de celulosa) y una formulación de ungüento (LTO-TG1) con dosis de luz roja de 50 o 100 J/cm2 suministradas a una intensidad de 50 mW/cm2. Muestras de piel de flanco obtenidas 72 horas post-PDT son evaluadas para los números de PSU positivos a Aceite Rojo O (?) lo que indica la presencia de glándulas sebáceas, y el número total de folículos capilares (¦) contados dentro de cada 4x de campo microscópico. Se presentan los valores medios con desviaciones estándar para 5 ratones por grupo de tratamiento.

La figura 2 es un gráfico que compara el efecto del PDT con lemuteporfina en una solución tópica de lemuteporfina (LTS; tipo LT-G-002) en comparación con el ungüento tópico de lemuteporfina (LTO; tipo TG1) combinado con dosis de luz roja de 20, 50 o 100 J/cm2 a una intensidad de 50 mW/cm2. Los ratones de control reciben una aplicación de formulación emparejada que no contuvo lemuteporfina y entonces son expuestos a la dosis más alta de luz roja. Se prepararon secciones de las muestras de piel de flanco obtenidas 72 horas post-PDT y son evaluadas para PSU positivo a Aceite Rojo O (?) y el total de folículos capilares (¦) dentro de cada 4x de campo microscópico. Se presentan los valores medios con desviaciones estándar para 5 ratones por grupo de tratamiento.

La figura 3 es un gráfico de barras que muestra la medición de la intensidad de fluorescencia de lemuteporfina en folículos capilares y glándulas sebáceas en muestras de piel de un cadáver humano en comparación con el ungüento tópico de lemuteporfina (LTO) a la 1 hora y 8 horas después de la aplicación de la formulación que contiene lemuteporfina y una solución tópica de lemuteporfina (F-C) después de 1 hora de contacto con la piel según un aspecto de la revelación presente.

La figura 4 muestra imágenes representativas de glándulas sebáceas de la espalda superior que contienen fluorescencia relacionada a la lemuteporfina para diferentes sujetos en el Cohorte 2 del Ejemplo 9 después de la preparación de la piel y la aplicación tópica de LTS a 0.1% según ciertos aspectos de la revelación presente. Las cuatro imágenes superiores de fluorescencia son de sitios pretratados con calor infrarrojo rojo (IR) seguido por LTS al 0.1%. Las cuatro imágenes inferiores son de sitios de la piel medicados con LTS al 0.1% durante 60 minutos sin ningún pretratamiento de la piel.

La figura 5 es un gráfico que muestra la lemuteporfina de difusión del Lote C, la formulación TK1 (control) y el Lote U, la formulación F21 en sebo artificial con el tiempo en un sistema cerrado a 32.5 °C.

La figura 6 es un gráfico que muestra la lemuteporfina de difusión del Lote C, la formulación TK1 (control) y el Lote U, la formulación F21 en sebo artificial con el tiempo en un sistema abierto a 32.5 °C.

La figura 7 es un gráfico que muestra la lemuteporfina de difusión del Lote C, la formulación TK1 (control) y el Lote U, la formulación F21 en sebo artificial con el tiempo en un sistema cerrado a 35.0 °C.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Visión general La revelación presente proporciona e incluye composiciones farmaceuticas que comprenden fotosensibilizadores, y los métodos de uso de los fotosensibilizadores formulados para realizar terapia fotodinámica (PDT, por sus siglas en inglés) para el tratamiento de trastornos dermatológicos tales como aené vulgaris y otros trastornos de glándula sebácea hiperactiva.

Para realizar el PDT para los trastornos de glándula sebácea, es necesario suministrar un fotosensibilizador en las glándulas sebáceas. Observamos que una formulación de ungüento anteriormente conocida del fármaco fotosensibilizador lemuteporfina, semejante a ese descrito en WO 03/039597, cuando es aplicado a la piel de ratones, fue efectivo para dirigir el fotosensibilizador a las glándulas sebáceas de esta especie. Sin embargo, la misma formulación no fue generalmente tan efectiva para dirigir al fármaco a las glándulas sebáceas de humanos. Por lo tanto, buscamos formulaciones mejoradas que, cuando se apliquen a la piel humana, fueran capaces de suministrar una cantidad aumentada de un fármaco fotosensibilizador a las glándulas sebáceas, preferiblemente en una cantidad disminuida de tiempo.

Inesperadamente, encontramos que las formulaciones de fotosensibilizador en forma de una solución líquida, sin la adición de cantidades substanciales de agentes modificadores de la viscosidad, tales como espesantes, agentes gelificantes, ceras, etc., son más efectivas que las formulaciones tales como geles, ungüentos, lociones, cremas, etc.

Descubrimos que la adición de agentes gelificantes tales hidroxipropil celulosa o etil celulosa en cantidades substanciales realmente produjeron las formulaciones relativamente menos capaces de suministrar fotosensibilizador a la glándula sebácea de cualquiera de ratones o humanos. Tales agentes modificadores de la viscosidad son utilizados con frecuencia en terapias tópicas convencionales, y son considerados generalmente útiles para estabilizar una solución sobresaturada porque actúan como agentes anti-nucleantes.

Encontramos que las formulaciones de soluciones más efectivas que desarrollamos contuvieron concentraciones de fármacos de fotosensibilizador que se acercan, y exceden preferiblemente, la solubilidad del fármaco en las formulaciones. Muy sorprendentemente, las soluciones de porfirinas verdes tales como lemuteporfina formuladas por arriba de su solubilidad (soluciones sobresaturadas) son estables durante el almacenamiento hasta por 4 horas, 8 horas, 12 horas, 24 horas, 32 horas, 48 horas, o más, incluso sin la adición de agentes anti-nucleantes o gelificantes (por ejemplo polímeros tales como hidroxi alquil celulosas como hidroxipropil metil celulosa (HPMC), hidroxipropil celulosa (HPC), polivinilpirrolidona (PVP) y ácido poliacrílico) que son utilizados típicamente en la teenica para prevenir que se forme la precipitación en una solución sobresaturada. En ciertas modalidades, se proporcionan las soluciones sobresaturadas estables de porfirinas verdes tales como lemuteporfina, teniendo una concentración de fotosensibilizador disuelto en la solución en cantidades mayores que aproximadamente 150%, mayores que aproximadamente 200%, mayores que aproximadamente 250%, mayores que aproximadamente 260%, mayores que aproximadamente 275%, mayores que aproximadamente 280%, mayores que aproximadamente 300%, mayores que aproximadamente 325%, mayores que aproximadamente 350%, mayores que aproximadamente 375%, mayores que aproximadamente 400%, mayores que aproximadamente 425%, etc. de la solubilidad de equilibrio a temperatura ambiente.

Por ejemplo, la solubilidad de la lemuteporfina en ciertas formulaciones farmacéuticas de la revelación presente descrita en la presente varía de aproximadamente 0.025% a aproximadamente 0.037% (dependiendo de si se pueden agregar surfactantes y dependiendo de cuales solventes están presentes y en que proporción). Para lograr una concentración en la formulación final en el intervalo de 0.05 a 0.5%, (que hemos determinado que está en un intervalo efectivo de concentración para realizar el PDT), es deseable una solución sobresaturada. La estabilidad inesperada de tales soluciones sobresaturadas por periodos de tiempo que exceden 4 horas fue un descubrimiento importante en vista de nuestra observación (en lo siguiente) de que la presencia de los polímeros utilizados típicamente en la téenica como agentes anti-nucleantes para prevenir la precipitación de los ingredientes activos de soluciones sobresaturadas interfirieron con el direccionamiento de la lemuteporfina a las glándulas sebáceas. De ahí las formulaciones descritas en la presente permiten que se use una concentración relativamente alta de lemuteporfina, mientras se mantiene la lemuteporfina en solución para una cantidad de tiempo que es terapéuticamente y comercialmente útil.

Formulaciones de fotosensibilizador Como se utiliza en la presente el término "excipiente" significa los componentes de un producto de fármaco diferente del ingrediente farmacéutico activo (API, por sus siglas en inglés), incluyendo diluyentes, vehículos, portadores, solventes, conservantes, antioxidantes, agentes modificadores de viscosidad o combinaciones de los mismos. A menos que se indique de otro modo, las concentraciones sean reveladas en una base de p/p.

Como se utiliza en la presente, el término "solvente" significa un solvente liquido farmacéuticamente aceptable capaz de disolver un fotosensibilizador.

Como se utiliza en la presente, el término "sobresaturado" o "solución sobresaturada" significa, con respecto a un fotosensibilizador, que la cantidad de fotosensibilizador disuelta en una solución excede la solubilidad de equilibrio a una temperatura dada, generalmente la temperatura ambiente o 20°C a menos que se indique de otro modo.

Como se utiliza en la presente, el término "solubilidad" o "solubilidad de saturación", con respecto a un fotosensibilizador, es la cantidad del fotosensibilizador que puede ser disuelta en un solvente dado a una temperatura dada en equilibrio, generalmente la temperatura ambiente o 20°C a menos que se indique de otro modo.

En un aspecto, la revelación presente incluye y proporciona una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea, que comprende un componente fotosensibilizador y un componente de excipiente en una solución, en donde la concentración del fotosensibilizador en la solución es de sobresaturación, y en donde el fotosensibilizador no precipita de la solución a un grado farmacéuticamente inaceptable después de que se forma la solución. Sin limitarse por ninguna teoría en particular, se piensa que tales soluciones sobresaturadas son sistemas de suministro sumamente efectivos para moléculas grandes como la lemuteporfina porque la actividad termodinámica del fotosensibilizador en el vehículo está en su máximo y el gradiente de alta concentración resultante aumenta más por la evaporación de parte de los componentes volátiles de la formulación, la lemuteporfina efectivamente se divide en el sebo, la mezcla cerosa/oleosa secretada por las glándulas sebáceas, y las células vivas (sebocitos) que comprenden el PSU y las glándulas sebáceas.

La revelación presente incluye además y proporciona una composición farmacéutica que comprende un fotosensibilizador solubilizado y opcionalmente, otros excipientes, en donde la concentración de fotosensibilizador en la composición excede la solubilidad de saturación del fotosensibilizador en la composición.

La revelación presente tambien incluye y proporciona una composición útil para el suministro tópico de un fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador, uno o más solventes y opcionalmente uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, en donde la composición tiene una viscosidad menor de 50 centipoises (cps) a 20°C. Tal composición no contiene (o cantidades muy bajas de) agentes modificadores de la viscosidad, y puede ser sobresaturada o no.

El componente de fotosensibilizador en las composiciones puede variar presente en concentraciones que varían de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 5% (p/p) dependiendo del tipo de fotosensibilizador escogido, su potencia y su solubilidad. Típicamente, el componente de fotosensibilizador está presente en concentraciones que varían de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1.0%. Para las porfirinas verdes, tales como lemuteporfina, las concentraciones pueden variar de 0.025% a aproximadamente 0.5%. En un aspecto la concentración puede ser 0.025% o 0.05%. En otro aspecto la concentración puede ser 0.075% o 0.1%. En otros aspectos la concentración puede ser 0.125% o 0.15%. En un aspecto adicional la concentración puede ser 0.175% o 0.2%. En un aspecto, la concentración puede ser 0.225% o 0.25%. En incluso otro aspecto, la concentración puede ser 0.3% o 0.355%. En ciertos aspectos, la concentración puede ser 0.375%, 0.4% o 0.5%. En ciertos aspectos según la revelación presente, la concentración de una porfirina verde puede estar en el intervalo de 0.05% a 0.4%. En ciertos aspectos según la revelación presente, la concentración de una porfirina verde puede estar en el intervalo de aproximadamente 0.3% a aproximadamente 0.4%. En otros aspectos, la concentración de una porfirina verde puede estar en el intervalo de 0.35% a 0.45%. En otro aspecto, la concentración de lemuteporfina puede estar en el intervalo de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.3%.

El componente de excipiente en las composiciones incluye típicamente uno o más solventes para el fotosensibilizador, tales como alcohol bencílico (un solvente para las porfirinas verdes tales como lemuteporfina), DGME (monoetil eter de dietilen glicol), alcohol isopropílico, o las combinaciones de los mismos. En algunas modalidades, el alcohol bencílico puede estar presente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 1% a aproximadamente 50% o más, aproximadamente 1% a aproximadamente 40%, aproximadamente 1% a aproximadamente 30%, aproximadamente 1% a aproximadamente 20%, aproximadamente 5% a aproximadamente 50%, o aproximadamente 20% a aproximadamente 50%, tal como 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50% de etc. En algunas modalidades, el alcohol bencílico puede estar presente en una cantidad mayor que aproximadamente 20%, aproximadamente 20% a aproximadamente 50%, aproximadamente 25% a aproximadamente 50%, aproximadamente 30% a aproximadamente 50%, aproximadamente 40% a aproximadamente 50%, aproximadamente 45% a aproximadamente 50%, etc. En una modalidad, el alcohol bencílico está presente en aproximadamente 10%, aproximadamente 39.8%, aproximadamente 46.9%, o aproximadamente 49.6%. En otros aspectos según la revelación presente, el solvente de alcohol bencílico puede ser de 35 a 50% (p/p) En otros aspectos, el solvente de alcohol bencílico puede ser de 40% a 50% o 45% a 50%.

En algunas modalidades el DGME puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 5% a aproximadamente 50% o más, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 40%, o de aproximadamente 15% a aproximadamente 35% como 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35% y 36%. En una modalidad, el DGME está presente en aproximadamente 17.5%, aproximadamente 16.7%, aproximadamente 20%, o aproximadamente 32%. En un aspecto, el DGME puede estar presente en el componente de excipiente en una concentración de entre aproximadamente 15% y aproximadamente 20%. En un aspecto, el DGME puede estar presente en el componente de excipiente en una concentración de entre aproximadamente 17.5% y aproximadamente 22.5%. En un aspecto, el DGME puede estar presente en el componente de excipiente en una concentración de entre aproximadamente 16.7% y aproximadamente 22.5%. En un aspecto, el DGME puede estar presente en el componente de excipiente en una concentración de entre aproximadamente 17.5% y aproximadamente 32%. En un aspecto, el DGME puede estar presente en el componente de excipiente en una concentración de entre aproximadamente 16.7% y aproximadamente 20%.

En algunas modalidades, el alcohol isopropílico puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 30% a aproximadamente 85% o más. En otras modalidades, el alcohol isopropílico puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 40% a aproximadamente 70%. En incluso otro aspecto, el alcohol isopropílico puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 50% a aproximadamente 60%. En incluso otro aspecto, el alcohol isopropílico puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de aproximadamente 30% a aproximadamente 40%. En algunas modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 31% o 32%. En algunas modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 33% o 34%. En algunas modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 35% o 36%. En algunas modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 37% o 38%. En incluso otras modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 39% o 40%. En algunas modalidades, el alcohol isopropílico está presente en 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, o 60%. En una modalidad, el alcohol isopropílico está presente en aproximadamente 33.3%, aproximadamente 35.2%, aproximadamente 39.8%, o aproximadamente 49%.

En algunas modalidades, la acetona puede estar presente en el componente de excipiente en concentraciones (p/p) que varían de 0% a aproximadamente 10% o más, o aproximadamente 2% a aproximadamente 10%. En algunas modalidades, el alcohol oleílico puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de 0% a aproximadamente 6% o más, o aproximadamente 2% a 5%. En una modalidad, el alcohol oleílico está presente en 5%. En algunas modalidades, el polisorbato 80 puede estar presente en el componente diluyente en concentraciones que varían de 0% a aproximadamente 1% o más, o aproximadamente 0.25% a aproximadamente 0.75%. En una modalidad, el polisorbato 80 está presente en 0.5%. En algunas modalidades, el salicilato de metilo está presente en el componente diluyente en concentraciones (p/p) que varían de 0% a aproximadamente 2% o más, aproximadamente 0.5% a aproximadamente 1.5% o aproximadamente 0.075% a aproximadamente 1.25%. En una modalidad, el salicilato de metilo está presente en aproximadamente 1.0%. En algunas modalidades, el mentol está presente en el componente de excipiente en concentraciones (p/p) que varían de 0% a aproximadamente 6% o más, aproximadamente 1 % a aproximadamente 5% o aproximadamente 2% a aproximadamente 3%. En una modalidad, el mentol está presente en 2.5%.

Otros solventes y excipientes para los fotosensibilizadores tambien pueden incluir DMSO (dimetilsulfóxido), polietilen glicol (PEG), derivados de PEG, glicol eteres, propilen glicol, polisorbatos (por ejemplo, Tween®), alcoholes grasos, alcoholes aromáticos, gliceroles, aceites, surfactantes, glucósidos , tietilen glicol, tetraetilen glicol, pentaetilen glicol, hexaetilen glicol, septatilen glicol, octaeilen glicol, propilen glicol, mono- y di-ásteres de propilen glicol de grasas y ácidos grasos (por ejemplo, monocaprilato de propilen glicol, monolaurato de propilen glicol), glicerol, aceite mineral, lanolina, petrolato u otros productos del petróleo adecuados para la aplicación a la piel, macrogoles, macrogolglicéridos o glicéridos y ácidos grasos de polietilen glicol ( por ejemplo , macrogolglicéridos de estearoílo, macrogolglicéridos de oeloílo, macrogolglicéridos de lauroílo, macrogolglicéridos de linoleoílo), aceite de ricino etoxilado (por ejemplo, Cremofor, un aceite de ricino polioxil hidrogenado), triglicéridos de C6-C3o, aceites naturales, glucósidos (por ejemplo, glucósidos de cetarilo y surfactantes).

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.09% a 0.11% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.9% y aproximadamente 32.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 4.95% y aproximadamente 5.05% y ¡sopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 53.8% y aproximadamente 54%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.1% y alcohol bencílico en una concentración de 32%, y un componente diluyente que tiene DGME en 5% y IPA en 53.9%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmaceutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.065% a 0.085% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.9% y aproximadamente 32.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 4.95% y aproximadamente 5.05% y ¡sopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 53.825% y aproximadamente 54.025%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.075% y alcohol bencílico en una concentración de 32%, y un componente diluyente que tiene DGME en 5% e IPA en 53.925%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.09% a 0.11% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 9.9% y aproximadamente 10.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil eter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.95% y aproximadamente 32.05% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 48.8% y aproximadamente 49%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.1% y alcohol bencílico en una concentración de 10%, y un componente diluyente que tiene DGME en 32% y IPA en 48.9%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.065% a 0.085% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 9.9% y aproximadamente 10.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.95% y aproximadamente 32.05% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 48.825% y aproximadamente 49.025%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.075% y alcohol bencílico en una concentración de 10%, y un componente diluyente que tiene DGME en 32% e IPA en 48.925%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.04% a 0.06% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 9.9% y aproximadamente 10.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.95% y aproximadamente 32.05% y ¡sopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 48.85% y aproximadamente 49.05%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.05% y alcohol bencílico en una concentración de 10%, y un componente diluyente que tiene DGME en 32% y IPA en 48.95%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.11% a 0.13% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 11.8% y aproximadamente 12%, y un componente diluyente que comprende monoetil eter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 22.45% y aproximadamente 22.55% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 57.9% y aproximadamente 58.1%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.12% y alcohol bencílico en una concentración de 11.9%, y un componente diluyente que tiene DGME en 22.5% e IPA en 58%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.11% a 0.13% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 11.9% y aproximadamente 12.1%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 22.75% y aproximadamente 22.85% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 58.5% y aproximadamente 58.7%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.12% y alcohol bencílico en una concentración de 12%, y un componente diluyente que tiene DGME en 22.8% y IPA en 58.6%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.12% a 0.14% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 12.7% y aproximadamente 12.9%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 24.35% y aproximadamente 24.45% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 62.6% y aproximadamente 62.8%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.13% y alcohol bencílico en una concentración de 12.8%, y un componente diluyente que tiene DGME en 24.4% y IPA en 62.7%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.33% a 0.35% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 48.66% y aproximadamente 48.86%, y un componente diluyente que comprende monoetil eter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 16.89% y aproximadamente 16.99% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 33.86% y aproximadamente 34.06%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.34% y alcohol bencílico en una concentración de 48.76%, y un componente diluyente que tiene DGME en 16.94% y IPA en 33.96%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.39% a 0.41% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 39.7% y aproximadamente 39.9%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 19.95% y aproximadamente 20.05% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 39.7% y aproximadamente 39.9%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.4% y alcohol bencílico en una concentración de 39.8%, y un componente diluyente que tiene DGME en 20% y IPA en 39.8%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmaceutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.49% a 0.51% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 49.7% y aproximadamente 49.9%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 24.85% y aproximadamente 24.95% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 24.8% y aproximadamente 25%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.5% y alcohol bencílico en una concentración de 49.8%, y un componente diluyente que tiene DGME en 24.9% y IPA en 24.9%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.39% a 0.41% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 39% y aproximadamente 39.2%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 19.45% y aproximadamente 19.55% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 31.2% y aproximadamente 31.4%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.4% y alcohol bencílico en una concentración de 39.1%, y un componente diluyente que tiene DGME en 19.5% y IPA en 31.3%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.345% a 0.365% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 46.85% y aproximadamente 47.05%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 17.49% y aproximadamente 17.59% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 35.06% y aproximadamente 35.26%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.355% y alcohol bencílico en una concentración de 46.95%, y un componente diluyente que tiene DGME en 17.54% y IPA en 35.16%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmaceutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporflna, presente en una concentración (p/p) de entre 0.365% a 0.385% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 49.53% y aproximadamente 49.73%, y un componente diluyente que comprende monoetil éter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 16.62% y aproximadamente 16.72% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 33.23% y aproximadamente 33.43%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.375% y alcohol bencílico en una concentración de 49.63%, y un componente diluyente que tiene DGME en 16.67% y IPA en 33.33%.

En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para dirigir un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente fotosensibilizador que tiene un fotosensibilizador que es una porfirina verde, incluyendo lemuteporfina, presente en una concentración (p/p) de entre 0.344% a 0.364% y un solvente que comprende alcohol bencílico en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 46.788% y aproximadamente 46.988%, y un componente diluyente que comprende monoetil eter de dietilen glicol (DGME) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 17.667% y aproximadamente 17.767% y isopropanol (IPA) presente en una concentración (p/p) de entre aproximadamente 34.94% y aproximadamente 35.14%. En otra modalidad, el fotosensibilizador, incluyendo lemuteporfina, puede estar presente a una concentración de aproximadamente 0.354% y alcohol bencílico en una concentración de 46.888%, y un componente diluyente que tiene DGME en 17.717% y IPA en 35.04%.

Una modalidad adicional de una solución de dos componentes combinados comprende una concentración (p/p) de 0.10% de lemuteporfina, alcohol bencílico en una concentración de 10.0%, alcohol isopropílico en una concentración de 48.9%, DGME en una concentración de 32.0%, alcohol oleílico en una concentración de 5.0%, mentol en una concentración de 2.5%, salicilato de metilo en una concentración de 1.0%, y polisorbato 80 en una concentración de 0.50%. Una modalidad adicional comprende una concentración final (p/p) de 0.30% de lemuteporfina, alcohol bencílico en una concentración de 49.7%, alcohol isopropílico en 33.0%, y DGME en una concentración de 17.0%. <NOTA: Acerca del comentario de Delphine, la oración anterior pretende describir el LTS, solución constituida al 0.3% del Cuadro 38. Aunque puede ser igual que TK1 y descrito en cualquier otra parte en la especificación, no hay afectación si se repite aquí. Fue difícil para mí comprender exactamente cómo algunas de las formulaciones viejas se relacionan a las nuevas formulaciones y así yo erre en el aspecto de la precaución y agregué toda la nueva información incluso aunque fuera repetitiva. Queremos poder atraer la atención de un examinador de patente a revelaciones fácilmente entendióles, incluso si la solicitud es muy repetitivas En una modalidad según la revelación presente, una composición farmacéutica útil para localizar un fotosensibilizador a una glándula sebácea puede comprender un componente diluyente que comprende alcohol isopropílico presente en una concentración (p/p) de 54.39%, DGME presente en una concentración de 35.60%, alcohol oleílico presente en una concentración de 5.56%, mentol presente en una concentración de 2.78%, salicilato de metilo presente en una concentración de 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración de 0.56%. Este componente de diluyente puede ser mezclado con un fotosensibilizador de lemuteporfina, que comprende lemuteporfina en una concentración de 1.00% y alcohol bencílico en una concentración de 99.00% para producir una solución combinada que comprende 0.1% de lemuteporfina.

En una modalidad adicional, la composición farmacéutica puede comprender un componente diluyente que comprende alcohol bencílico presente en una concentración (p/p) de 28.55%, alcohol isopropílico presente en una concentración de 47.15%, y DGME presente en una concentración de 24.30%. Este componente de diluyente puede ser mezclado con un fotosensibilizador de lemuteporfina, que comprende lemuteporfina en una concentración de 1.00% y alcohol bencílico en una concentración de 99.00% para producir una solución combinada que comprende 0.3% de lemuteporfina.

En una modalidad adicional, la composición farmaceutica puede comprender un componente diluyente que comprende alcohol isopropílico presente en una concentración (p/p) de 66.00%, y DGME presente en una concentración de 34.00%. Este componente de diluyente puede ser mezclado con un fotosensibilizador de lemuteporfina, que comprende lemuteporfina en una concentración de 0.60% y alcohol bencílico en una concentración de 99.40% para producir una solución combinada que comprende 0.3% de lemuteporfina.

En una modalidad adicional, la composición farmacéutica puede comprender un componente diluyente que comprende alcohol isopropílico presente en una concentración (p/p) de 54.39%, DGME presente en una concentración de 35.60%, alcohol oleílico presente en una concentración de 5.56%, mentol presente en una concentración de 27.8%, salicilato de metilo presente en una concentración de 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración de 0.56%. Este componente de diluyente puede ser mezclado con un fotosensibilizador de lemuteporfina, que comprende lemuteporfina en una concentración de 1.00% y alcohol bencílico en una concentración de 99.00% para producir una solución combinada que comprende 0.1% de lemuteporfina.

En algunas modalidades, la composición de la formulación no requiere contener cantidades substanciales de agentes mejoradores de la viscosidad tales como espesantes, agentes gelificantes, etc. Tales composiciones de formulación tienen una viscosidad menor de 50 centipoises (cps) a 20°C. Si se requiere o desea, las composiciones de la formulación pueden espesarse por la adición de tales agentes mejoradores de la viscosidad como polietilen glicoles de alto PM, celulosas (tales como hidroxipropil celulosa o etil celulosa) polímeros a base de ácido acrílico (polímeros de carbopol o carbómeros), polímeros de ácido acrílico entrelazado con alil sacarosa o alil pentaeritritol (homopolímeros de carbopol) polímeros de ácido acrílico modificados por acrilatos de alquilo de cadena larga (de C10-C30) y entrelazados con alilpentaeritritol (copolímeros de carbopol), poloxámeros (tambien conocidos como plurónicos; polímeros de bloque por ejemplo, Poloxamer 124, 186, 237, 338, 407, etc.), ceras (parafina, monoestearato de glicerilo, monoestearato de dietilen glicol, monoestearato de propilen glicol, monoestearato de etilen glicol, estearato de glicol), grasas duras (por ejemplo, glicéridos de ácidos grasos saturados de C8-C18), goma xantano, alcohol polivinílico, alcoholes sólidos, o mezclas de los mismos. Sin embargo, como fue indicado antes, debe tenerse cuidado al usar agentes modificadores de la viscosidad para asegurar que no sean utilizados en cantidades que interferirán con el suministro de los fotosensibilizadores a las glándulas sebáceas. En ciertas modalidades ejemplificadas en la presente, es deseable no agregar ningún agente modificador de la viscosidad.

En ciertos aspectos, las formulaciones pueden ser preparadas de manera que las concentraciones de los excipientes estén generalmente debajo de los niveles máximos listados en la Guía de Ingredientes Inactivos de la FDA de los EEUU (FDA Inactive Ingredient Guide, JIIG). A manera de ejemplo, el 13 de abril de 2013, los niveles de JIG para los ingredientes inactivos ejemplares para el uso tópico incluyen, pero no son limitados a los siguientes en el Cuadro 1. Sin embargo, los expertos en la teenica comprenden que tales niveles son susceptibles de revisión.

CUADRO 1 Ingredientes Inactivos ejemplares Una formulación sobresaturada de fotosensibilizador puede ser formada en varias maneras. En una modalidad, un fotosensibilizador es disuelto en un solvente bueno para el fotosensibilizador (con o sin calentamiento), y entonces se agregan otros excipientes, en los que el fotosensibilizador es menos soluble. En otra modalidad, una suspensión de fotosensibilizador y solventes, y opcionalmente otros excipientes, pueden ser calentados hasta que una cantidad de fotosensibilizador que exceda la solubilidad en los solventes haya sido disuelta completamente. En otra modalidad, un fotosensibilizador es agregado debajo de la solubilidad de saturación a uno o más solventes que tienen uno o más componentes volátiles, tales como etanol, agua, propanol, isopropanol u otros líquidos volátiles conocidos en la téenica. Los componentes volátiles se evaporan para crear una condición sobresaturada en los componentes menos volátiles. Por ejemplo, una formulación no saturada de fotosensibilizador para el tratamiento de acné puede ser preparada en excipientes que comprenden componentes volátiles. Cuando la formulación de fotosensibilizador es aplicada a la piel de un sujeto, algunos de los componentes volátiles se evaporan, creando una solución sobresaturada in situ. En otra modalidad más, una solución sobresaturada es preparada en los excipientes con uno o más componentes volátiles, y entonces ocurre la sobresaturación cuando la solución es aplicada a la piel de un sujeto a medida que los componentes volátiles se evaporan.

Estabilidad a largo plazo de las formulaciones Hemos encontrado que las soluciones sobresaturadas de lemuteporfina son físicamente estables (es decir, la lemuteporfina no comienza a precipitar de la solución) por lo menos por 4 horas, 8 horas, 12 horas, 24 horas, 32 horas, 48 horas, o más. Si la concentración deseada del fotosensibilizador en la composición de formulación excede la solubilidad de saturación, y se desea la estabilidad a largo plazo/vida de anaquel (por ejemplo, 1-2 años) de la composición, entonces puede ser ventajoso proporcionar una formulación de dos componentes (o una formulación de múltiples componentes) donde los componentes pueden ser almacenados separadamente, y mezclados antes del uso. Además, puede ser ventajoso que los frascos separados del componente no sean sobresaturados por sí mismos, sino que proporcionen una solución sobresaturada cuando los componentes separados sean mezclados conjuntamente.

De ahí en otra modalidad, se prepara una solución sobresaturada mezclando una solución que contiene el componente de fotosensibilizador con una segunda solución que comprende el componente de excipiente, en el que la solubilidad del fotosensibilizador es más baja. Este aspecto de la revelación presente proporciona una composición farmaceutica útil para localizar un fotosensibilizador a una glándula sebácea que comprende un componente fotosensibilizador, que comprende un fotosensibilizador, y asociado con el mismo pero separado del mismo, un componente de excipiente, en donde el fotosensibilizador está presente en una cantidad suficiente para formar, con mezclado, una solución sobresaturada del mismo y en donde el fotosensibilizador no precipita de la solución a un grado farmacéuticamente inaceptable por un período de por lo menos 4 horas, 8 horas, 12 horas, 24 horas, 32 horas, 48 horas, o más una vez que el componente fotosensibilizador y el componente de excipiente son mezclados. Preferiblemente, los dos componentes son miscibles, y así pueden ser combinados fácilmente, por ejemplo, por sacudimiento suave, agitación, o arremolinado.

En un aspecto relacionado, la revelación presente proporciona además una composición farmaceutica de dos componentes que comprende dos fases líquidas, en donde por lo menos una de las fases líquidas comprende un fotosensibilizador disuelto en la misma, las dos fases líquidas son miscibles, y la primera fase líquida y la segunda fase líquida tienen solubilidades diferentes para el fotosensibilizador, y en donde la concentración del fotosensibilizador en cada fase líquida es tal que, con la combinación de las dos fases líquidas, la concentración total del fotosensibilizador en la mezcla líquida es mayor que la solubilidad del fotosensibilizador en esa mezcla líquida, y la mezcla líquida resultante está sobresaturado con el fotosensibilizador. En una modalidad alternativa, el fotosensibilizador es proporcionado como una fase sólida, más que como una solución líquida. El sólido del fotosensibilizador es disuelto en un solvente antes de, o simultáneamente con, el mezclado del fotosensibilizador con la segunda fase líquida. El fotosensibilizador sólido puede ser formado amorfo o micronizado para disminuir el tiempo de la disolución.

En algunas modalidades, la formulación de dos componentes comprende un primer componente fotosensibilizador que comprende lemuteporfina disuelta en alcohol bencílico, con o sin DGME. En algunas modalidades, la formulación de dos componentes comprende un segundo componente diluyente que comprende DGME y/o alcohol isopropílico, y opcionalmente alcohol bencílico. En algunas modalidades el componente diluyente comprende adicionalmente alcohol oleílico, mentol, salicilato de metilo, o polisorbato 80. Las concentraciones de los elementos del componente fotosensibilizador y el componente diluyente son ajustadas para que cuando los dos componentes sean combinados, las concentraciones finales de los elementos esten en los intervalos de concentración proporcionados antes para la lemuteporfina, alcohol bencílico, DGME, isopropanol, alcohol oleílico, mentol, salicilato de metilo, y polisorbato 80.

La concentración de fotosensibilizador en el componente fotosensibilizador puede variar de la solubilidad de saturación anterior en el solvente hacia abajo. Para un componente fotosensibilizador que comprende lemuteporfina disuelta en alcohol bencílico, la solubilidad aparente después del calentamiento está en el intervalo de aproximadamente 1.0% p/p a 2.5% p/p. A manera de ejemplo, en una modalidad, un componente fotosensibilizador comprende una solución al 1% p/p de lemuteporfina en alcohol bencílico, y antes del uso, se mezcla con un componente diluyente en una proporción de aproximadamente 1 a 10 para dar una concentración final de lemuteporfina en la composición de la formulación de aproximadamente 0.1% p/p. En otra modalidad, el componente fotosensibilizador comprende una solución al 2% de lemuteporfina en alcohol bencílico, y antes del uso se mezcla con un componente de excipiente en una proporción de aproximadamente 1 a 10 para dar una concentración final de lemuteporfina en la composición de la formulación de aproximadamente 0.2% p/p. (Un producto final semejante también puede ser obtenido mezclando un componente fotosensibilizador que comprende una solución al 1% de lemuteporfina con un componente de excipiente en una proporción de 1 a 5.) Así puede ser visto que las concentraciones en los dos componentes pueden ser ajustadas y pueden ser manipuladas para dar las concentraciones finales deseadas de fotosensibilizador y de excipientes en la formulación a ser utilizadas en el PDT. Los metodos y las composiciones ejemplares para algunas formulaciones de dos componentes de la revelación presente se dan en los ejemplos siguientes.

En un aspecto, la revelación presente proporciona un método para preparar una composición farmacéutica que comprende los pasos de: (a) proporcionar un componente fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador disuelto en un solvente; (b) proporcionar un componente diluyente miscible con el componente fotosensibilizador; y (c) mezclar una cantidad del componente fotosensibilizador con una cantidad del componente diluyente para proporcionar una solución mezclada, en donde la solución mezclada está sobresaturada con el fotosensibilizador. Convenientemente, el componente fotosensibilizador y el componente diluyente pueden ser proporcionados en contenedores separados adecuados, tales como frascos de vidrio. El componente fotosensibilizador puede comprender una porfirina verde, tal como lemuteporfina, y el solvente puede comprender alcohol bencílico, ambos en las concentraciones descritas antes. El componente diluyente puede comprender monoetil éter de dietilen glicol (DGME) y alcohol isopropílico (IPA), ambos en las concentraciones descritas antes.

Opcionalmente, el componente diluyente puede comprender alcohol bencílico, en las concentraciones descritas antes.

Para ser clínicamente útil, el fotosensibilizador no debe precipitar de la composición farmaceutica hasta que sea aplicado a un sujeto. Preferiblemente, el fotosensibilizador no precipita de la composición farmacéutica por lo menos por aproximadamente 30 segundos, aproximadamente 1 minuto, aproximadamente 5 minutos, aproximadamente 15 minutos, aproximadamente 30 minutos, aproximadamente 45 minutos o aproximadamente una hora o más después de que el componente fotosensibilizador es mezclado con el componente diluyente. En otras modalidades, el fotosensibilizador no precipita de la composición farmacéutica por lo menos por 1 hora, por lo menos por aproximadamente 2 horas, por lo menos por aproximadamente 3 horas, por lo menos por aproximadamente 4 horas, por lo menos por aproximadamente 5 horas, por lo menos por aproximadamente 6 horas, por lo menos por aproximadamente 7 horas, por lo menos por aproximadamente 8 horas, por lo menos por aproximadamente 9 horas, por lo menos por aproximadamente 10 horas, por lo menos por aproximadamente 11 horas, o por lo menos por aproximadamente 12 horas, o más después de que el componente fotosensibilizador es mezclado con el componente de excipiente. En algunas modalidades, el fotosensibilizador no precipita de la composición farmacéutica hasta por lo menos aproximadamente 16 horas, por lo menos aproximadamente 24 horas, por lo menos aproximadamente 48 horas, por lo menos aproximadamente 3 días, por lo menos aproximadamente 5 días, por lo menos aproximadamente 7 días, por lo menos aproximadamente 9 días, por lo menos aproximadamente 11 días, por lo menos aproximadamente 14 días, por lo menos aproximadamente 3 semanas, o por lo menos aproximadamente 4 semanas despues de que el componente fotosensibilizador es mezclado con el componente de excipiente. En otras modalidades, el fotosensibilizador puede permanecer disuelto por lo menos por aproximadamente 2 meses, por lo menos por aproximadamente 3 meses, por lo menos por aproximadamente 4 meses, por lo menos por aproximadamente 5 meses o por lo menos por aproximadamente 6 meses después de que el componente fotosensibilizador es mezclado con el componente de excipiente. En incluso otra modalidad más, el fotosensibilizador puede permanecer disuelto por lo menos por aproximadamente un año o por lo menos aproximadamente 2 años después de que el componente fotosensibilizador sea mezclado con el componente diluyente.

Para determinar el tiempo en que el fotosensibilizador puede comenzar a precipitar de una composición farmacéutica dada de la revelación presente, y de ahí cuánto tiempo puede mantenerse la composición antes del uso, las composiciones pueden ser probadas como sigue. Las muestras de las composiciones son tomadas en varios puntos de tiempo después de combinar el componente fotosensibilizador y el componente diluyente. La mitad de las muestras es filtrada para eliminar cualquier precipitado, por ejemplo por un filtro de tamaño apropiado, incluyendo, pero no limitado a, un filtro de 0.22 mM. Las soluciones filtradas son analizadas, por ejemplo, utilizando HPLC, para el contenido o la concentración de fotosensibilizador. Si la solución es estable, y ningún fotosensibilizador ha precipitado, entonces la concentración de fotosensibilizador en la solución filtrada debe ser aproximadamente la misma como la concentración de fotosensibilizador en la solución sin filtrar, dentro del error experimental. (Este método es llevado a cabo en los ejemplos siguientes para demostrar que la estabilidad de la lemuteporfina en una formulación de la revelación presente es por lo menos 4 horas, 8 horas, 12 horas, 24 horas, 32 horas, 48 horas, o más). Si la concentración de fotosensibilizador en las muestras filtradas y sin filtrar no son aproximadamente las mismas dentro de error experimental, puede ser considerado que ha ocurrido la precipitación a un grado farmacéuticamente inaceptable.

Los componentes de la composición farmacéutica deben ser mezclados y entonces deben ser aplicados al sujeto dentro del período de tiempo que el fotosensibilizador permanece disuelto en la composición. En algunas modalidades, los componentes son combinados dentro aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 24 horas del uso. En una modalidad, los componentes son combinados inmediatamente antes del uso. En otra modalidad, los componentes son combinados dentro de aproximadamente 30 segundos, aproximadamente 1 minuto, aproximadamente 5 minutos, aproximadamente 15 minutos, aproximadamente 30 minutos, aproximadamente 45 minutos o aproximadamente una hora del uso. En otras modalidades los componentes son combinados dentro de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 12 horas del uso, tal como dentro de aproximadamente 1, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8, aproximadamente 9, aproximadamente 10, aproximadamente 11, aproximadamente 12 horas del uso. En algunas modalidades, los componentes son combinados dentro de aproximadamente 12 a aproximadamente 24 horas del uso, tal como dentro de aproximadamente 12, aproximadamente 13, aproximadamente 14, aproximadamente 15, aproximadamente 16, aproximadamente 17, aproximadamente 18, aproximadamente 19, aproximadamente 20, aproximadamente 21, aproximadamente 22, aproximadamente 23 o aproximadamente 24 horas del uso. En algunas modalidades, los componentes son combinados dentro de aproximadamente 3 a 4 horas del uso.

En otro aspecto, la revelación presente tambien incluye y proporciona un kit que comprende un primer contenedor que contiene un componente fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador, y uno o más contenedores que contienen componentes de excipiente miscibles con los solventes en el primer contenedor, y un conjunto de instrucciones para combinar el contenido de los contenedores, aplicar tópicamente el contenido combinado a la piel de un sujeto, y de realizar el PDT para el tratamiento de uno o más trastornos de la piel. En una modalidad los contenedores están físicamente separados, por ejemplo, dos o más frascos. En otra modalidad, el componente fotosensibilizador y los componentes de diluyente son empacados en un contenedor único que tiene dos o más cámaras que permiten a los componentes ser segregados físicamente uno del otro inicialmente, y un sistema de liberación para permitir el contacto entre las cámaras.

Fotosensibilizadores Como se utiliza en la presente "fotosensibilizador" o "agente fotosensibilizador a la luz" o "fármaco fotosensibilizador" significa un compuesto químico que absorbe radiación electromagnetica, más comúnmente en el espectro visible, y lo libera como otra forma de energía, más comúnmente como la especie reactiva de oxígeno y/o como energía térmica. Preferiblemente, el compuesto no es tóxico a humanos o es capaz de ser formulado en una composición no tóxica. Preferiblemente, el compuesto químico producido con la fotodegradación tampoco es tóxico. Los fotosensibilizadores hidrofóbicos o lipofílicos tienden a ser especialmente útiles para el uso en las composiciones y métodos de la revelación presente porque pueden ser más efectivos para dividirse en, y difundirse por el sebo y ubicarse en las glándulas sebáceas.

Un grupo especialmente potente de fotosensibilizadores es conocido como porfirinas verdes, que son descritas a detalle en la Patente de EEUU No. 5.171.749, que es incorporada en la presente como referencia en su totalidad. El término "porfirinas verdes" se refiere a derivados de porfirina obtenidos reaccionando un núcleo de porfirina con un alquino en una reacción de tipo Diels-Alder para obtener una mono-hidrobenzoporfirina. Tales compuestos macropirrólicos resultantes son llamados de benzoporfirina (BPDs), que son porfirinas sintéticas de tipo clorado con varios análogos estructurales y mostradas en la Patente de EEUU No. 5,171,749.

Típicamente, las porfirinas verdes son seleccionadas de un grupo de derivados de porfirina tetrapirrólica obtenidos por reacciones de Diels-Alder de derivados de acetileno con protoporfirina bajo condiciones que promueven la reacción en sólo una de las dos estructuras de dieno no aromático, conjugadas, disponible, presentes en los sistemas de anillo de protoporfirina-IX (anillos A y B). Las formas metalizadas de una porfirina verde, en la que un catión metálico reemplaza uno o dos hidrógeno en el centro del sistema de anillo, también pueden ser utilizadas en la práctica de las composiciones y métodos revelados.

La preparación de compuestos de porfirina verde útiles en esta revelación se describen a detalle en las Patentes de EEUU Nos. 5,095,030, que se incorporan en la presente en su totalidad. Ejemplos no limitativos de porfirinas verdes incluyen diéster del di-ácido de benzoporfirina (BPD-DA), el anillo A de monoácido (BPD-MA, también conocido como verteporfina), el anillo B de monoácido (BPD-MB) o las mezclas de los mismos. Estos compuestos absorben luz de aproximadamente 692 nm de longitud de onda que tienen buenas propiedades de penetración del tejido. Particularmente útiles para uso en la presente son el grupo de porfirinas verdes conocido como esteres de etilen glicol como se expone en las Patentes de EEUU Nos. 5,929,105. El compuesto fotosensibilizador ejemplar llamado en la presente como A-EA6 también es conocido por el nombre genérico de lemuteporfina, y tiene la siguiente estructura química: Adicionalmente, los fotosensibilizadores pueden ser conjugados a varios ligandos para facilitar el direccionamiento a las glándulas sebáceas o a los componentes del mismo. Estos ligandos incluye péptidos y/o ligandos específicos del receptor así como ¡nmunoglobulinas y fragmentos de las mismas. Los ligandos no limitativos incluyen anticuerpos en general y anticuerpos monoclonales, así como fragmentos inmunológicamente reactivos de ambos.

Ejemplos adicionales de fotosensibilizadores de porfirina verde incluyen, pero no son limitados a, las porfirinas verdes reveladas en las Patentes de EEUU Nos. 5,283,255, 4,920,143, 4,883,790, 5,095,030 y 5,171 ,749, y los derivados de porfirina verde discutidos en la Patente de EEUU No. 5,880,145 y 5,990,149. Varias estructuras de porfirinas verdes típicas son mostradas en las patentes citadas anteriormente, que tambien proporcionan detalles para la producción de los compuestos.

Hay una variedad de otros fotosensibilizadores sintéticos y naturales que pueden ser utilizados, incluyendo, pero no limitados a, profármacos tales como ácido pro-porfirina d-aminolevulínico (5-ALA) y derivados de los mismos, porfirinas y derivados de porfirina, por ejemplo, clorados, bacterioclorados, isobacterioclorados, ftalocianina y naftalocianinas y otros compuestos tetra- y poli-macrocíclicos, y compuestos relacionados (por ejemplo, pirofeofórbidos, sapfirinas, y texafirinas) y complejos metálicos (tales como, pero no limitado a, estaño, aluminio, cinc, lutecio). También se contempla el uso de tetrahidroclorados, purpurinas, porficenos y fenotiazinios. Otros fotosensibilizadores convenientes incluyen derivados de bacterioclorofila tales como esos descritos en WO 97/1981 , WO 99/45382 y WO 01/40232. Una bacterioclorofila es paladio-bacteriofeofórbida WST09 (Tookad™).

Un fotosensibilizador puede ser una proporfirina o una porfirina, o una mezcla de las mismas. Algunos ejemplos de profármacos incluyen ácido aminolevulínico tal como Levulan™ y ésteres de ácido aminolevulínico tales como los descritos en WO 02/10120 y disponibles como Metvix™, Hexvix™ y Benzvis™. Algunos ejemplos de di-hidro o tetra-hidro porfirinas se describen en EP 0337,601 o WO 01/6650 y están disponibles como Fosean™ (temoporfina). Las combinaciones de dos o más fotosensibilizadores pueden ser utilizadas en las composiciones y metodos revelados. Una lista no exhaustiva de sustancias químicas fotosensibles puede ser encontrada en el Kreimer-Bimbaum, Sem. Hematol., 26:157-173 (1989), y en Redmond et al., Photoderm. Photobiol., 70(4): 391-475 (1999), ambas se incorporan en la presente como referencia en su totalidad.

Administración de energía luminosa La luz de una longitud de onda conveniente es aplicada a la piel para activar el fotosensibilizador aplicado. Preferiblemente la luz comprende una longitud de onda cercana a por lo menos uno de los picos de absorción del fotosensibilizador. Los picos de absorción varían para fotosensibilizadores diferentes. Por ejemplo, la lemuteporfina tiene un pico de absorción de aproximadamente 688 nm +/-1, y así, cuando la lemuteporfina es el fotosensibilizador, la longitud de onda de la luz está preferiblemente en o cerca de aproximadamente 688 nm +1-1. Cuando el fotosensibilizador es ALA-metil éster (Metvix™), que tiene un pico de absorción de 635 nm, la energía de activación utilizada está preferiblemente en o cerca de 635 nm. Cuando el fotosensibilizador es ALA (disponible bajo el nombre comercial Levulan™), que tiene picos de absorción de 417 nm y 630 nm, la energía de activación utilizada está preferiblemente en o cerca de 417 y/o 630 nm.

La activación o la energía luminosa pueden ser proporcionadas por cualquier medio conveniente. Generalmente, la energía de activación es proporcionada por una fuente de luz visible. Las fuentes de energía luminosa pueden incluir, pero no se limitan a, los láseres, los diodos fotoemisores (LED), las lámparas incandescentes, las lámparas fluorescentes estándar, las lámparas UV o las combinaciones de los mismos. Las fuentes de luz ejemplares son los diodos fotoemisores.

Las fuentes de luz disponibles en el comercio incluyen CureLight™ (disponible de Photocure ASA, Oslo, Noruega), BLU-U™ (disponible de DUSA Pharmaceuticals, Wilmington MA, EEUU), PDT Láser (disponible de Diomed, Andover, MA, EEUU), Ceralas™ (disponible de Biolitec AG, Jena, Alemania), Omnilux PDT™ (disponible de PhotoTherapeutics Ltd., Birmingham, RU), y Q-Beam™, SpectraLife™, y Quantamed™ (Quantum Devices Inc., Barneveld, Wl, EEUU.) En algunas modalidades, la luz por lo menos en parte es suministrada por diodos fotoemisores (LEDs). Para irradiar una superficie contorneada tal como la cara, puede ser conveniente utilizar una fuente de luz que está configurada para seguir el contorno tal como ese descrito en la Patente de EEUU No. 7,723,910. El PDT para el tratamiento de aene puede ser combinado con Fototerapia Blu-light en algunas modalidades de la revelación presente. Por lo tanto algunas modalidades incluyen luz que es suministrada por un dispositivo LED que suministra tanto la luz roja (por ejemplo, 600-750 nm) como la luz azul (por ejemplo, 390-450 nm). En ambos casos, un dispositivo suministra luz a aproximadamente 420 nm y a aproximadamente 690 nm.

La dosis de energía luminosa o de activación administrada durante un tratamiento de PDT puede variar según la potencia del fotosensibilizador escogido. Para fotosensibilizadores de alta potencia, tales como porfirinas verdes, la dosis de luz está en el intervalo de aproximadamente 5 a aproximadamente 400 J/cm2, o más preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 25 a aproximadamente 300 J/cm2, como ejemplos no limitativos. En algunas modalidades, la dosis de luz usada en el tratamiento de PDT está en el intervalo de aproximadamente 25 a aproximadamente 50 J/cm2, aproximadamente 50 a aproximadamente 100 J/cm2, aproximadamente 100 a aproximadamente 150 J/cm2, aproximadamente 150 a aproximadamente 200 J/cm2, aproximadamente 200 a aproximadamente 250 J/cm2, aproximadamente 250 a aproximadamente 300 J/cm2, aproximadamente 300 a aproximadamente 350 J/cm2, aproximadamente 350 a aproximadamente 400 J/cm2, aproximadamente 400 a 450 J/cm2, aproximadamente 450 a aproximadamente 500 J/cm2 , aproximadamente 500 a aproximadamente 550 J/cm2, o aproximadamente 550 a 600 J/cm2. Otros ejemplos no limitativos de dosis de luz incluyen dosis de aproximadamente 25, aproximadamente 50, aproximadamente 75, aproximadamente 100, aproximadamente 125, aproximadamente 150, aproximadamente 175, aproximadamente 200, aproximadamente 250 o aproximadamente 300 J/cm2.

La dosis de luz total depende de la intensidad de la fuente de radiación (también conocida como la tasa de fluencia o de irradiación) y el tiempo de irradiación. Una vez que la dosis total de radiación es escogida, la tasa de fluencia puede ser ajustada para que el tratamiento pueda ser completado en un espacio de tiempo razonable. El período de irradiación o exposición de luz dura típicamente de aproximadamente 10 segundos a aproximadamente 4 horas. Para las porfirinas verdes tales como lemuteporfina, la exposición de luz dura típicamente entre 1 minuto y 2 horas, más preferiblemente entre aproximadamente 5 minutos y aproximadamente 60 minutos. Algunos tiempos ejemplares de irradiación son aproximadamente 1, aproximadamente 5, aproximadamente 10, aproximadamente 15, aproximadamente 25, aproximadamente 30, aproximadamente 35, aproximadamente 40, aproximadamente 45, aproximadamente 50, aproximadamente 55 o aproximadamente 60 minutos.

La intensidad de la energía o fuente de luz está generalmente debajo de 600 mW/cm2. En ciertos aspectos, las irradiaciones pueden estar entre aproximadamente 10 y 500 mW/cm2. En otras modalidades según la presente descripción, la irradiación puede ser entre aproximadamente 25 y aproximadamente 100 mW/cm2. En algunas modalidades, la irradiación es 50 mW/cm2. En otras modalidades, la irradiación es 80 mW/cm2. En otras modalidades, la dosis de luz varía entre 37.5 J/cm2 y 150 J/cm2 al variar el tiempo de irradiación a una tasa de fluencia fija de 80 mW/cm2 entre 7 minutos, 49 segundos a 31 minutos, 15 segundos.

Tratamiento de PDT de Aene v Otras Condiciones de Glándula Sebácea Hiperactiva La revelación presente también incluye y proporciona los métodos para tratar un trastorno de glándula sebácea hiperactiva en un área afectada de la piel de un sujeto necesitado del mismo, que comprende aplicar tópicamente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de fotosensibilizador de la revelación presente al área afectada de la piel del sujeto, permitiendo tiempo suficiente para que por lo menos parte del fotosensibilizador se ubique en las glándulas sebáceas, y exponer la piel del sujeto a la energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador. En algunas modalidades, el trastorno de la glándula sebácea hiperactiva es acné (incluyendo acné vulgaris), seborrea (o piel grasienta), dermatitis seborreica, hidradenitis supurativa (inversa de acné), e hiperplasia de la glándula sebácea. En algunas modalidades, los sujetos tienen tanto acné como piel grasienta.

La revelación presente también incluye y proporciona los métodos para reducir la producción de sebo por las glándulas sebáceas de un sujeto necesitado del mismo, que comprende aplicar tópicamente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de fotosensibilizador de la revelación presente a la piel afectada de un sujeto necesitado de tratamiento, permitiendo tiempo suficiente para que por lo menos parte del fotosensibilizador se ubique en las glándulas sebáceas, y exponer la piel del sujeto a la energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador, con lo cual se reduce la tasa de excreción de sebo del sujeto.

La revelación presente tambien incluye y proporciona los métodos para tratar aené en un sujeto necesitado del mismo, que comprende aplicar tópicamente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de fotosensibilizador de la revelación presente, permitiendo tiempo suficiente para que por lo menos parte del fotosensibilizador se ubique en las glándulas sebáceas del sujeto, y exponer la piel del sujeto a energía luminosa en una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador.

La revelación presente también incluye y proporciona los métodos para la ablación de sebocitos en un sujeto afligido con un trastorno de glándula sebácea hiperactiva tal como acné, que comprende los pasos de suministrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un fotosensibilizador a los sebocitos del sujeto, permitiendo tiempo suficiente para que el fotosensibilizador se ubique en los sebocitos, y exponer los sebocitos a la energía luminosa a una longitud de onda capaz de activar el fotosensibilizador.

Las condiciones que pueden ser tratadas incluyen cualquier condición para la que es adecuada una formulación tópica de un fotosensibilizador. Ejemplos no limitantes incluyen condiciones de la piel tal como dermatitis, soriasis, lesiones malignas y pre-malignas de la piel, queratosis actínica, y trastornos de glándula sebácea hiperactiva. Los trastornos de glándula sebácea hiperactiva incluyen, sin limitación, el acné (incluyendo aené vulgaris), seborrea (o piel grasienta), dermatitis seborreica, hidradenitis, supurativa, e hiperplasia de la glándula sebácea. Cualquier parte del cuerpo puede ser tratada, pero las condiciones tales como acné y piel grasienta afectan típicamente la cara, el pecho y/o la espalda.

Para un tratamiento de PDT, la piel primero es preferiblemente lavada con un limpiador antibacteriano y secada. La piel puede ser tratada con calor seco (IR) hasta ya sea que la temperatura de la piel alcance 45°C o por un tiempo fijo tal como 20 min. Esto puede aumentar la penetración del fotosensibilizador en las glándulas sebáceas. Alternativamente, la piel también puede ser tratada con microdermoabrasión. La piel puede ser desengrasada (por ejemplo utilizando acetona o alcohol isopropílico) si fuese necesario antes de la aplicación del fotosensibilizador.

Una vez que esta superficie de la piel ha sido limpiada y ha sido preparada, la formulación escogida de fotosensibilizador es aplicada al área afectada de una superficie de la piel después de que el área haya sido limpiada completamente. La formulación que contiene fotosensibilizador es dejada en contacto con la piel por el tiempo suficiente para permitir al fotosensibilizador ubicarse en las glándulas sebáceas del sujeto. Generalmente el tiempo de contacto puede ser entre aproximadamente 1 minuto y aproximadamente 24 horas o más, dependiendo del tipo y de la concentración del fotosensibilizador en la formulación. Preferiblemente, la formulación está en contacto con la piel por aproximadamente 1 a aproximadamente 180 minutos si el fotosensibilizador es una porfirina verde tal como lemuteporfina. Los tiempos de contacto ejemplares son aproximadamente 1, aproximadamente 5, aproximadamente 10, aproximadamente 20, aproximadamente 30, aproximadamente 40, aproximadamente 50, aproximadamente 60, aproximadamente 70, aproximadamente 80, aproximadamente 90, aproximadamente 100, aproximadamente 110, aproximadamente 120, aproximadamente 130, aproximadamente 140, aproximadamente 150, aproximadamente 160, aproximadamente 170 o aproximadamente 180 minutos. Tiempos de contacto ejemplares adicionales son aproximadamente 3.5, aproximadamente 4, aproximadamente 4.5, aproximadamente 5, aproximadamente 5.5, aproximadamente 6, aproximadamente 6.5, aproximadamente 7, aproximadamente 7.5 o aproximadamente 8 horas. Entonces se retira el exceso de formulación con gasa o tela limpias humedecidas con agua tibia. Entonces se aplica la irradiación como fue descrito antes. Puede ser conveniente utilizar un regimen de dosis creciente de luz hasta que se determine la dosis máxima tolerada por el sujeto (MTD). Dolor en el sitio de la irradiación o eritema después del PDT son signos de que la MTD ha sido excedida. Después, la persona puede ser tratada en o debajo de la MTD.

El tratamiento puede ser repetido tantas veces como sea necesario para tener un efecto terapéutico. Si se repite, la frecuencia de tratamiento puede variar. Por ejemplo, los tratamientos podrían ser diarios, aproximadamente cada dos días, aproximadamente dos veces por semana, aproximadamente una vez a la semana, aproximadamente cada dos semanas, aproximadamente dos veces al mes, aproximadamente cada cuatro semanas, aproximadamente una vez al mes, aproximadamente cada seis semanas, aproximadamente cada ocho semanas, aproximadamente cada dos meses, aproximadamente cada tres meses, aproximadamente dos veces al año, o aproximadamente una vez al año, u otro intervalo conveniente de tiempo. En ciertos aspectos, el intervalo de tratamiento es cada dos semanas a cada seis meses. El tratamiento puede continuar hasta que haya ocurrido el grado deseado de mejora en la condición de la piel. Por ejemplo, los tratamientos pueden ser repetidos hasta que el número total de lesiones de aene sea reducido por aproximadamente 5%, aproximadamente 10%, aproximadamente 15%, aproximadamente 20%, aproximadamente 25%, aproximadamente 30%, aproximadamente 40%, aproximadamente 50%, aproximadamente 60%, aproximadamente 70%, aproximadamente 80% o aproximadamente 90% o más. Para tomar otro ejemplo no limitante, los tratamientos pueden ser repetidos hasta que la tasa de excreción de sebo haya sido reducida por aproximadamente 5%, aproximadamente 10%, aproximadamente 15%, aproximadamente 20%, aproximadamente 25%, aproximadamente 30%, aproximadamente 40%, aproximadamente 50%, aproximadamente 60%, aproximadamente 70%, aproximadamente 80% o aproximadamente 90% o más.

Determinar la Eficacia del Tratamiento La eficacia de las composiciones y métodos revelados puede ser determinada por cualquier medio conveniente. En muchos casos, puede usarse una disminución, reducción, o mejora sencillas en el trastorno de la glándula sebácea u otro trastorno de la piel, como es reconocido por un medico experto, para determinar la eficacia. Así una mejora en un trastorno de glándula sebácea hiperactiva, tal como una mejora en el aené de un sujeto, seborrea, dermatitis seborreica, hidradenitis supurativa, o hiperplasia de la glándula sebácea, puede ser utilizada como una indicación de eficacia.

Tomando al acné como un ejemplo no limitante, la eficacia puede ser determinada con base en los datos cuantitativos y/o cualitativos. El número total de lesiones puede ser evaluado predefiniendo uno o más áreas de prueba antes del comienzo del tratamiento. Se realizan los conteos de la lesión (no inflamatoria, inflamatoria y total, o comedones abiertos, comedones cerrados, pápulas, pústulas y nodulos) son realizados dentro del área de prueba antes y después del tratamiento. Los tamaños de las lesiones dentro del área de prueba también son registrados. Las áreas de prueba también son fotografiadas. Varias áreas de prueba pueden ser seleccionadas para cada sujeto y la ubicación del área de prueba puede variar dependiendo del lugar de las lesiones de acné del sujeto. Las áreas de prueba pueden ser valoradas dentro de la primera semana, después de una semana, después de dos semanas, o después de un mes o dos del tratamiento inicial de PDT, o en otras frecuencias deseadas. Una escala global de la evaluación tal como la Evaluación Global del Investigador de 5 puntos (IGA) para el acné vulgaris, según es recomendado por la FDA y mostrado en el Cuadro 2 puede ser utilizado para medir la eficacia.

CUADRO 2 Escala de Evaluación Global del investigador La eficacia del PDT para reducir la producción de sebo puede ser medida utilizando SebuTape™, un producto diseñado específicamente para ese propósito y disponible de CuDerm Corporation, Dallas, TX, EEUU. El Ejemplo 9 en la presente demuestra cómo utilizar SebuTape™ para obtener una medida exacta de exudación de sebo. Las mediciones de SebuTape™ pueden ser realizadas dentro de la primera semana, después de una semana, después de dos semanas, o después de un mes o dos del tratamiento inicial de PDT, o en otras frecuencias deseadas. La eficacia del PDT para reducir el número de glándulas sebáceas puede ser medida tomando biopsias después del tratamiento de PDT, y utilizando la histología con tinción de Aceite Rojo O para determinar el número total de PSU (estructuras de folículos capilares con o sin glándulas sebáceas) en una imagen seguida por un conteo del número de PSU (que contiene la glándula sebácea) teñidos por la tintura de lípidos. Este procedimiento es descrito en el Ejemplo 3 en la presente.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 Solubilidad de Lemuteporfina en Varios Solventes La solubilidad de lemuteporfina en varias composiciones de solventes es mostrada en la última columna del Cuadro 3. Todos los valores fueron obtenidos analíticamente por análisis de HPLC.

Los resultados de la solubilidad para la lemuteporfina indicó la solubilidad máxima en formulaciones a base de solvente que contienen principalmente alcohol bencílico. La cantidad de lemuteporfina que puede ser solubilizada en alcohol bencílico despues del calentamiento es aproximadamente 2.5 % p/p. La adición de otros solventes reduce la solubilidad por aproximadamente la cantidad del nuevo solvente introducido. El monoetil éter de dietilen glicol (DGME) es aproximadamente 20% tan eficiente en disolver la lemuteporfina como el alcohol bencílico.

CUADRO 3 Solubilidad Aparente de Lemuteporfina en Varios Solventes *los valores bajo el nombre del solvente son % p/p del solvente en la composición de la solución EJEMPLO 2 Efecto de los Agentes Meioradores de Viscosidad en las Formulaciones de fotosensibilizador Para evaluar el impacto de aumentar la viscosidad de las formulaciones de lemuteporfina en la eficacia del PDT para erosionar las glándulas sebáceas de ratón, se prepararon composiciones fotosensibilizadoras con los componentes mostrados en el Cuadro 4 y se aplicaron en la piel del flanco de un ratón rasurado por 30 minutos antes de la exposición con luz roja de 688nm (50 J/cm2 o 100 J/cm2 suministrado a una tasa de 50 mW/cm2). Cada grupo de tratamiento consistió de 5 animales.

CUADRO 4 Para evaluar los cambios en la glándula sebácea, los ratones fueron sacrificados 72 horas despues del PDT. La piel de espesor completo con los puntos de tatuaje en el flanco derecho tratado con PDT se extirpó con cuidado. La mitad superior de estos cuadrados de tejido fue colocada en un molde plástico lleno de medio de crioincrustación Neg-50™ y congelada en nitrógeno líquido. La mitad inferior fue conservada en alcohol acético de formil durante 18 horas. El tejido fue transferido a alcohol al 70% hasta que se procesara para dar cera por un protocolo interno estándar. Las muestras fijadas en formalina fueron subsiguientemente teñidas con reactivos estándar (por ejemplo, hematoxilina y eosina) para evaluar los cambios histológicos generales dentro del tejido si fuese necesario.

Para las evaluaciones de la glándula sebácea, muestras congeladas de tejido fueron cortadas en secciones de 8 mhti con un criostato en porta-objetos de vidrio e inmediatamente fijadas en formalina al 10% amortiguada. Tres conjuntos de 2 portaobjetos fueron cortados de cada bloque con la distancia entre conjuntos de aproximadamente 200 pm. Un portaobjeto de cada conjunto fue teñido con Aceite Rojo O y entonces cubierto con por cubreobjetos con medio de montaje de acrílico y se dejó fraguar. El segundo portaobjeto de cada conjunto fue utilizado como un "respaldo" en caso de que se dañara el primera portaobjeto.

Se tomaron imágenes de las secciones representativas de cada sección transversal utilizando un objetivo 4x montado en un microscopio Olympus BX61 equipado con una cámara digital. Los portaobjetos fueron evaluados contando el número total de PSU (estructuras de folículos capilares con o sin glándulas sebáceas) en una imagen seguida por un conteo del número de PSU (que contiene la glándula sebácea) teñidos por la tintura de lípidos. Los portaobjetos fueron evaluados por dos lectores independientes. Los resultados se muestran en la figura 1.

Debido al gran número de ratones requeridos para probar un vehículo igualado para cada formulación, no se incluyeron grupos de control en este experimento. Sin embargo, típicamente, para la piel de flanco de ratón sin modificar 70-80% de PSU contuvo glándulas sebáceas positivas al Aceite Rojo O. La composición más efectiva en producir el número más bajo de PSU con glándulas sebáceas positivas a Aceite Rojo O son las formulaciones LT-G-002 (Figura 1). Esta formulación no contuvo un agente modificador de viscosidad. En promedio, aproximadamente 30% de PSU en la piel de flanco tratada con LT-G-002 y cualquier dosis de luz contiene glándulas positivas a Aceite Rojo O. El PDT con LTO-TG1 tiene un efecto semejante pero algo más bajo y reducido en los conteos de las glándulas sebáceas. En contraste, los conteos de las glándulas sebáceas para ratones tratados con PDT utilizando las formulaciones LT-G-001, LT-G-003, LT-G-004 o LT-G-005 (todas conteniendo un agente mejorador de viscosidad que fue ya sea hidroxi-propil celulosa, etil celulosa, o ambos) no son tan efectivos. Así, tales agentes mejoradores de viscosidad pueden prevenir la ubicación de la lemuteporfina en las glándulas sebáceas.

EJEMPLO 3 Efecto de diferentes Dosis de Luz de PDT en Glándulas Sebáceas de Ratón con una Composición de Lemuteporfina que Carece de un Agente Meiorador de Viscosidad Este experimento compara el efecto del PDT con LT-G-002 a ese del LT0-TG1 (que contiene dos veces la cantidad de lemuteporfina) en tres diferentes dosis de luz roja. El PDT con cualquier formulación tópica de lemuteporfina afectó los conteos sebáceos con efectos reducidos e dosis de luz roja de 20, 50 o 100 J/cm2 en comparación con el resultado obtenido para los ratones tratados con vehículo de control y dosis de luz roja de 100 J/cm2 (Figura 2). Se produjeron mayores efectos en los conteos de glándulas, con cualquier formulación de lemuteporfina con dosis de luz roja de 50 y 100 J/cm2 que a 20 J/cm2.

EJEMPLO 4 Ubicación de Lemuteporfina en Folículos capilares Humanos v Glándulas Sebáceas El modelo para la ubicación de lemuteporfina en la piel humana utilizó piel de dermatoma de cadáver humano conseguida del Banco de Tejido de Ohio Vallcy, fresca (£ 24 horas después de la muerte) y piel humana conseguida del NDRI (Intercambio Nacional de Investigación de Enfermedades-National Disease Research Interchange). Este experimento comparó una solución tópica de lemuteporfina (LTS) sin un agente mejorador de viscosidad a un ungüento tópico de lemuteporfina (LTO) (LTO-TG1 del Ejemplo 2, Cuadro 4). La formulación de LTS incluyó lemuteporfina, alcohol oleílico al 0.1%, alcohol bencílico al 5%, DGME al 32%, Vitamina E TPGS al 0.5%, mentol al 5%, y etanol, al 52% todos en p/p. Las formulaciones fueron aplicadas a la piel en una cantidad medida y se dejaron abrir al aire. La piel fue mantenida en el contacto con las formulaciones por el periodo de tiempo designado (1 u 8 horas), se realizó la biopsia, se puso en medio de tejido congelado Neg-50™ y entonces se preparó para la disección y evaluación por microscopia de fluorescencia.

Los resultados de la fluorescencia del tejido mostraron que la formulación de LTS se ubicó en las glándulas sebáceas de piel de cadáver humano dentro de una hora en un grado que le requiere 8 horas a una formulación de LTO que contiene dos veces la cantidad de lemuteporfina (Figura 3). Así un de tipo solución de formulación proporcionó un suministro más rápido de lemuteporfina a las glándulas sebáceas humanas que una forma de ungüento. Esto es importante en un establecimiento clínico en que un sujeto debe esperar por un periodo de tiempo especificado entre la aplicación de una formulación que contiene un fotosensibilizador y la activación del fotosensibilizador con la luz: es mejor un periodo de tiempo más corto.

EJEMPLO 5 Estabilidad de la Composición de fotosensibilizador de LTS Se preparó un lote de solución tópica de lemuteporfina según la fórmula en el Cuadro 5, se distribuyó en frascos de 5 mi, y se mantuvo para prueba de estabilidad. Despues de tres meses, se observó precipitación en algunos frascos. El precipitado fue identificado como lemuteporfina por téenicas analíticas estándar. Un sistema óptimo de suministro para la lemuteporfina contendría una concentración relativamente alta de lemuteporfina, pero también debería contener componentes en los que la lemuteporfina no es fácilmente soluble tal como DGME (vea el Ejemplo 1). Así fue necesario implementar un enfoque diferente a la formulación de la lemuteporfina si se desea un almacenamiento a largo plazo.

CUADRO 5 Una Solución Tópica de Lemuteporfina (LTS) EJEMPLO 6 Estudios de solubilidad de Lemuteporfina Formulada La solución tópica de Lemuteporfina (LTS) fue preparada agregando lemuteporfina a los otros componentes en el Cuadro 5 (ya premezclado) a temperatura ambiente. La solución fue agitada y las muestras fueron eliminadas en varios puntos de tiempo, y entonces filtrada para determinar la cantidad de lemuteporfina sin disolver. Los resultados se presentan en el Cuadro 6: La cantidad de lemuteporfina que se disolvió fue aproximadamente 0.048%.

Fue posible fabricar una solución tópica de lemuteporfina al 0.1% al disolver el fármaco en DGME y alcohol tiencílico a temperatura alta, aproximadamente 75° C. La solución entonces fue enfriada a temperatura ambiente y los componentes restantes de LTS fueron agregados y fueron mezclados para formar una solución homogénea. Con base en los datos de solubilidad, este procedimiento de fabricación tuvo como resultado una solución sobresaturada.

CUADRO 6 Solubilidad de Lemuteporfina en la Formulación Mostrada en el Cuadro 5 Los estudios fueron realizados para determinar el efecto de ciertos excipientes de LTS en la solubilidad de lemuteporfina. La remoción del alcohol isopropílico del sistema de solución aumentó la solubilidad de la lemuteporfina de aproximadamente 0.03 % a 0.07% en p/p (datos no mostrados). El polisorbato 80 aumentó la solubilidad de 0.027% a 0.037% en p/p (datos no mostrados).

EJEMPLO 7 Sistema de Formulación de dos componentes Para resolver los problemas de la solubilidad y la estabilidad a largo plazo de la lemuteporfina en una formulación efectiva de suministro tópico, se desarrolló un sistema de formulación de dos componentes. El primer componente es el componente fotosensibilizador que comprende lemuteporfina disuelta en un solvente en el que es más soluble. El segundo componente es el componente diluyente que comprende el resto de los excipientes de LTS. Algunos ejemplos de formulaciones de dos componentes de LTS se muestran en los Cuadros 7 a 24.

Las composiciones descritas en los Cuadros 7 a 24 se hicieron como sigue. El componente fotosensibilizador (que contiene lemuteporfina) y el componente diluyente fueron fabricados en recipientes separados de formación de compuestos. Un vaso de precipitados enchaquetado conectado a un baño de agua fue puesto a 75°C y colocado en una placa de agitación. El componente fotosensibilizador fue mezclado mientras se calentaba por aproximadamente 1 hora. Después de una hora de calentamiento, la solución activa fue enfriada a temperatura ambiente continuando con el mezclado. Los excipientes de diluyente fueron pesados y transferidos a un recipiente de vidrio separado. Los excipientes de diluyente fueron mezclados a temperatura ambiente por aproximadamente 30 - 60 minutos.

El llenado fue realizado utilizando un relleno de frasco Flexicon®. Se realizaron revisiones de llenado y el peso de relleno promedio estuvo dentro del 2% del peso de llenado objetivo. El componente de diluyente fue llenado primero, seguido por el componente de fotosensibilizador para cada fabricación de lote. Después del relleno, todos los frascos fueron marcados y entonces fueron colocados en un USP a temperatura ambiente controlada o a una temperatura deseada (por ejemplo, a 2-8° C).

CUADRO 7 Lote A (0.1% P/P) CUADRO 8 Lote B (0.075% P/P) CUADRO 9 CUADRO 10 Lote D (0.075% p/p) Formulación de Lemuteporfina TK2 CUADRO 11 Lote H (0.05% P/P) Formulación de Lemuteporfina TK3 CUADRO 12 Lote I (0.12% p/p) Formulación de Lemuteporfina P2 CUADRO 13 Lote J (0.12% p/p) Formulación de Lemuteporfina P3 CUADRO 14 Lote K (0.13% p/p) Formulación de Lemuteporfina P5 CUADRO 15 Lote L (0.34% p/p) Formulación de Lemuteporfina PX CUADRO 16 Lote M (0.40% p/p) Formulación de Lemuteporfina P12 CUADRO 17 Lote N (0.50% p/p) Formulación de Lemuteporfina P14 CUADRO 18.

Lote O (0.40% p/p) Formulación de Lemuteporfina P15 CUADRO 19 Lote P (0.355% p/p) Formulación de Lemuteporfina P16 CUADRO 20 Lote Q (0.375% p/p) Formulación de Lemuteporfina P17 CUADRO 21 Lote R (0.354% p/p) Formulación de Lemuteporfina P18 CUADRO 22 Lote S (0.354% p/p) Formulación de Lemuteporfina F20 aLos pesos como se muestr del Frasco 1 y del Frasco 2 9.0, 12.0, 15. Og, etc. _ CUADRO 23 Lote T (0.3% de p/p) Formulación de Lemuteporfina F21 CUADRO 24 Lote U (0.3% p/p) Formulación de Lemuteporfina F21 a Los pesos co o se muestran o múltiplos i contenido del Frasco 1 y del Frasco 2 a la i totales de 6.0, 9.0, 12.0, 15.0g, etc. _ El Cuadro 25A y el Cuadro 25B proporcionan ejemplos de posibles formulaciones adicionales de lemuteporfina para agregar un fotosensibilizador activo en un sistema de dos componentes. Las formulaciones fueron preparadas como se describió antes.

CUADRO 25A CUADRO 25B La solubilidad de equilibrio de lemuteporfina a temperatura ambiente en la solución final (mg/mL) y la sobresaturación a t = 0 (no corregida para la gravedad específica), se muestra en el Cuadro 26.

CUADRO 26 Solubilidad de la formulación EJEMPLO 8 Ubicación del fármaco Lemuteporfina en Glándulas Sebáceas Humanas: Comparación de LTS (0.02%). LTS (0.1%) v LTO (0.2%) Se estudió la ubicación de la lemuteporfina en la glándula sebácea con la formulación de LTS en un estudio clínico humano. El trabajo fue realizado para evaluar dos fuerzas (0.02%, 0.1%) de la solución tópica de la lemuteporfina (LTS) para su potencial para apoyar la distribución de la fluorescencia relacionada a la lemuteporfina en glándulas sebáceas de la espalda superior de sujetos sanos, ya sea con o sin preparación previa de la piel. Una formulación de la generación anterior, Ungüento Tópico de Lemuteporfina (LTO) al 0.2% bajo oclusión en combinación con una preparación de la piel con calor infrarrojo (IR) fue probada en paralelo como un tratamiento de control porque sus propiedades de suministro a la glándula sebácea habían sido estudiadas anteriormente. La composición del LTO había sido determinada siendo no óptima para el suministro de lemuteporfina en las glándulas sebáceas humanas. La seguridad y la tolerancia local del LTS, en combinación con y sin métodos diferentes de preparación de la piel, también fue evaluada en este estudio.

Diseño del estudio Se realizó un estudio de ubicación de fármaco, aleatorizado, secuencial, parcialmente ciego, que consiste de dos cohortes de 10 sujetos humanos sanos cada uno (20 sujetos en total), bajo consentimiento informado. Cada uno de los 20 sujetos de estudio asistió a todas las visitas planificada y completó el estudio. La edad media de los sujetos fue 24 años (intervalo: 18-30 años). Once (55%) de los sujetos fueron hembras. Las cohortes 1 y 2 evaluaron dos fuerzas diferentes de dosis de LTS, 0.02% p/p y 0.1% p/p, respectivamente. Cada sujeto tuvo cuatro sitios de prueba (2 cm X 2 cm) posicionados en la espalda superior. Los sujetos recibieron cada uno de los cuatro regímenes de tratamiento: • LTS sin ninguna preparación de la piel · LTS despues de la preparación de la piel con micro-dermo-abrasión (MDA) • LTS después de la preparación de la piel con calor seco de un dispositivo de calor de IR • LTO con oclusión de película plástica después de la preparación de la piel con calor seco del dispositivo de IR Cada formulación se dejó permanecer en contacto con la piel por aproximadamente 60 minutos. Con el término del tiempo de contacto, el exceso de material fue retirado de los sitios de prueba utilizando gasa limpia amortiguada con agua tibia y entonces una biopsia de perforación de 4 mm fue tomada de cada sitio de prueba.

Análisis de Fluorescencia de la Glándula Sebácea Las biopsias fueron colocadas en el medio de incrustamiento de sección congelada Neg-50™ y fue congelada instantáneamente con nitrógeno líquido. Las muestras fueron almacenadas a -70 C y enviadas en hielo secó a un laboratorio de la histología con gran experiencia en la metodología requerida. Los bloques del tejido fueron colocados en un plato de un Criostato Microm EM500 Cryostat y entonces se recortaron para exponer el área de tejido. Se cortaron secciones de ocho mieras de espesor sobre portaobjetos de microscopio y fueron inmediatamente cubiertas con un cubreobjetos de vidrio adherido por Prolonga® Antifade (Molecular Probes) y almacenadas en una caja opaca a la luz a 4°C.

Para cada muestra de biopsia, se prepararon aproximadamente veinte conjuntos de portaobjetos. Cada uno de estos conjuntos consistió en 3 portaobjetos. Los primeros tres conjuntos fueron valorados para la ausencia/presencia de glándulas sebáceas. En general, se omitieron los siguientes cinco conjuntos y los siguientes tres conjuntos fueron evaluados para la presencia de estructuras de la glándula sebácea. Este procedimiento de selección continuó hasta que se identificó un total de nueve conjuntos con una presencia aceptable de glándulas sebáceas. Sin embargo, si el último conjunto de portaobjetos había sido evaluado sin nominación de nueve conjuntos con representación adecuada de glándulas sebáceas, los conjuntos omitidos entonces fueron examinados en la secuencia en que fueron preparados hasta que se adquirieron los nueve conjuntos. Si no se pudieron obtener los nueve conjuntos de la muestra de biopsia, entonces el número disponible máximo de los conjuntos fue finalmente evaluado.

La microscopía de fluorescencia fue utilizada para evaluar la distribución de lemuteporfina en la piel y para determinar si había acumulación específica de lemuteporfina en las glándulas sebáceas. Los portaobjetos fueron observados con un microscopio Zeiss Axiovert TV100 equipado con una cámara monocromática Photometrics 350 (Roper Scientific). Las secciones fueron inicialmente observadas bajo iluminación de campo brillante para identificar las secciones con las glándulas sebáceas. Las imágenes entonces fueron tomadas con iluminación de epi;fluorescencia apropiada para la lemuteporfina (excitación 425 nm; emisión 690 nm). La exposición para cada imagen fluorescente fue de 5 segundos con un objetivo de lente 5x que cubre un área de 2 X 2 mm en esta ampliación. Cada imagen fue tomada a profundidad de 16 bitios lo que tuvo como resultado 65500 sombras de gris. Este ajuste dio un aumento en la precisión para la detección de la fluorescencia. El intervalo de presentación (es decir la intensidad de contraste) para todas las muestras fue establecida a una escala de 500-5000 usando el software Imagen-Pro Plus. En estudios anteriores, se observó consistentemente que las muestras de biopsia obtenidas de piel sin tratar con lemuteporfina no exhibieron fluorescencia detectable.

Las imágenes de la muestra de biopsia fueron valoradas para la distribución de la fluorescencia dentro de las glándulas sebáceas examinadas por un panel de evaluadores experimentados que desconocen la identidad y el origen de las muestras. Con consenso de grupo, las muestras fueron consideradas positivas para la captación de la glándula sebácea de lemuteporfina si la fluorescencia reveló claramente la estructura general de la glándula y/o lóbulos glandulares delineados con mayor intensidad que los tejidos circundantes. Se realizó la prueba no paramétrica de Chi-(X2)-cuadrado para revelar si las diferencias observadas en los resultados de fluorescencia de lemuteporfina en las glándulas sebáceas para los diferentes tratamientos dentro de cada cohorte fueron estadísticamente significativas.

Resultados En este estudio de distribución de fármaco, los diferentes métodos de preparación de la piel empleados así como la aplicación de las formulaciones de LTS/LTO en general fueron bien tolerados. No se observó edema en ningún sitio de prueba. Cuando se observó un eritema de piel, fue asociado principalmente con los procedimientos de preparación de la piel.

La ubicación en la glándula sebácea de la lemuteporfina aplicada en diferentes formulaciones tópicas fue evaluada utilizando análisis de imagen de fluorescencia de tejido. La señal de la fluorescencia de la Lemuteporfina fue evidente dentro de los folículos capilares y las glándulas sebáceas con los diferentes regímenes de prueba aunque en varios grados. Para todas las muestras, no hubo una señal apreciable de fluorescencia en las estructuras circundantes no pilosebáceas. En algunas muestras, la fuerte fluorescencia de la lemuteporfina fue asociada con tapones dentro de la región exterior del poro de los folículos capilares. Esta circunstancia produjo un fenómeno de expansión de la fluorescencia que emanó dentro de las porciones adyacentes de estas muestras. Tales observaciones fueron registradas típicamente como un resultado negativo a menos que tambien estuviera presente la fluorescencia lo suficientemente prominente y separada de las glándulas sebáceas. Varias secciones exhibieron fluorescencia del fármaco en la capa córnea del estrato, sugiriendo algo de fármaco residual se quedó en la superficie de la piel.

Para las secciones obtenidas de los sitios de control (pretratamiento térmico de IR más 0.2% de LTO con oclusión), las áreas de la piel expuestas a LTS al 0.1% combinado con MDA o LTS de una fuerza más baja (0.02%) con diferentes pretratamientos, aproximadamente 20% de estos portaobjetos tuvo señal de fluorescencia evidente dentro de las glándulas sebáceas (Cuadro 27). Los hallazgos de la imagen de fluorescencia para los sitios de control (pretratamiento térmico de IR más LTO al 0.2%) fueron semejantes para las Cohortes 1 y 2 (19.2% y 19.1%, respectivamente) indicando la reproducibilidad de la metodología de tratamiento y análisis. Para sujetos tratados con LTS al 0.02% contra LTO al 0.2% bajo oclusión, no hubo diferencia significativa en la proporción de muestras del grupo con fluorescencia de las glándulas sebáceas relacionada a lemuteporfina según se determina por la prueba estadística no paramétrica de Chi-Cuadrado (valor de X2 = 1.36, 3 grados de libertad, P = 0.715).

El grupo de prueba con el número más alto de biopsias positivas, definida como una muestra de biopsia con por lo menos dos conjuntos de portaobjetos positivos a fluorescencia de todos los conjuntos evaluados, fue el Cohorte 2 (LTS al 0.1%). Para el LTS al 0.1%, 6 de 9 de las biopsias evaluadles (que contienen glándulas sebáceas) fueron consideradas positivas para la fluorescencia de la glándula sebácea (vea la Figura 4 para imágenes de fluorescencia de las glándulas sebáceas). Para el grupo que recibió tratamiento termico de infrarrojo más LTS a 0.1%, 7 de 9 biopsias evaluables fueron juzgadas siendo positivas para la fluorescencia específica de fármaco de la glándula sebácea. Para sujetos tratados con LTS al 0.1% en comparación con el LTO al 0.2% bajo oclusión, hubo una diferencia significativa en la proporción de las muestras del grupo que exhiben fluorescencia específica a lemuteporfina de la glándula sebácea como fue determinado por análisis estadístico de Chi-Cuadrado (valor de X2 = 15, 3 grados de libertad, P = 0.002). En términos generales, los sujetos tratados con LTS al 0.1%, ya sea solo o con pre-tratamiento térmico de IR, exhibieron un mayor grado de fluorescencia de glándula sebácea de la piel de la espalda que cuando se realizó MDA más LTS al 0.1% o LTO al 0.2% bajo oclusión después de tratamiento térmico con IR.

Estos datos apoyan las conclusiones siguientes. El LTS permite la distribución de lemuteporfina a la glándula sebácea humana, como fue demostrado por el hecho que en sujetos administrados con LTS, la lemuteporfina fue observada en >50-70% de las biopsias y en 17-45% de los portaobjetos de biopsia a través de microscopía de fluorescencia. El LTS permite una distribución mejorada de la lemuteporfina a la glándula sebácea con respecto al LTO, como se demuestra por el hecho de que las muestras de biopsia y los portaobjetos fueron positivos con mayor frecuencia en sujetos administrados con LTS en comparación a LTO bajo condiciones semejantes (a pesar del hecho de que la concentración de lemuteporfina fue 2 a 10 veces más baja en el LTS que en el LTO). Mayores concentraciones de LTS permiten una mejor distribución a la glándula sebácea, como se demuestra por el hecho de que las muestras de biopsia y los portaobjetos fueron positivos con mayor frecuencia en sujetos administrados con LTS al 0.1% más que al 0.02%. "Preparar" la piel administrando calor o microdermabrasión antes de aplicar LTS puede no mejorar necesariamente la distribución de lemuteporfina a la glándula sebácea, como se demuestra por el hecho de que la frecuencia de las muestras de biopsia y portaobjetos positivos no fue apreciablemente más alta en sujetos que recibieron tales procedimientos de preparación de la piel en comparación a los sujetos que no los recibieron.

CUADRO 27 Resultados del Análisis de imagen fluorescente a Excluye 2 biopsias negativas, cada una con 1 portaobjetos que muestra una señal fluorescente I Q fuerte en las glándulas sebáceas b Excluye 1 biopsia sin una glándula sebácea, y 1 biopsia con sólo 3 portaobjetos con estructura de glándula sebácea MDA: Microderabrasión EJEMPLO 9 Determinación de la Proporción de Excreción de sebo (SER) en la Frente 15 de un Sujeto Puede usarse una proporción de excreción de sebo para vigilar la eficacia de tratamiento de un sujeto, y puede ser determinado como sigue.

La frente del sujeto es primero desengrasada, haciendo lo siguiente: 1) humedecer una almohadilla cosmética con agua; 2) aplicar champú a la almohadilla (una cantidad de aproximadamente el tamaño de un cuarto) y doblar la almohadilla por la mitad para distribuir el champú; 3) lavar la frente del sujeto suavemente utilizando pequeños movimientos circulares, moviendo desde el centro de la frente a la sien y repitiendo una vez en cada lado; 4) enjuagar la frente suavemente con gasa humedecida en agua; 5) tocar la frente seca con una almohadilla cosmética limpia; 6) enjuagar la frente con alcohol isopropílico al 70%, trabajar desde el centro de la frente a la sien con tres almohadillas de alcohol isopropílico para cada lado de la frente, enjuagar la parte de abajo de la frente con una almohadilla, la mitad superior con otra, entonces desdoblar una tercera almohadilla y enjuagar el lado entero de la frente; y 7) dejar secar la frente del sujeto por lo menos 5 minutos.

El parche SebuTape™ es levantado con cuidado de la lámina portadora y se aplicó al sitio, asegurando que la cinta es aplicada suavemente a la superficie de la piel sin arrugas. El parche es firmemente oprimido para asegurar que la cinta esté en buen contacto con la superficie de la piel. Después de 30 min a 120 min (dependiendo del protocolo), el parche es retirado y es transferido a los rectángulos negros en la tarjeta de almacenamiento. La fecha correcta, el tiempo y el lado al que el parche fue aplicado (es decir, izquierdo o derecho) es registrado en la sección de comentarios debajo del parche.

La tarjeta de almacenamiento es escaneada inmediatamente después de muestrear con una resolución de imagen de 600dp¡. Cada archivo de imagen es guardado en un formato JPEG en la carpeta apropiada utilizando un nombre de archivo descriptivo. Utilizando el software apropiado tal como fotoShop® (Adobe, San José, CA), todos los pixeles oscuros en el parche son seleccionados. La descarga de sebo es representada por los pixeles negros que entonces pueden ser convertidos a la tasa de excreción de sebo multiplicando por un factor de 807.5.

EJEMPLO 10 Estabilidad de las Soluciones Supersaturadas de Lemuteporfina A. Estabilidad de la formulación de LTS para el Frasco 1 de Solvente de alcohol bencílico Se examinaron tres formulaciones (Lotes C (Cuadro 9), D (Cuadro 10) y H (Cuadro 11)) en que el Frasco 1 de componente de fotosensibilizador consistió en alcohol bencílico y lemuteporfina en tres concentraciones de lemuteporfina, 0.1, 0.075 y 0.05% p/p en la solución final combinada de LTS para la estabilidad despues de la reconstitución con los excipientes restantes en el Frasco 2.

El contenido del frasco 2 fue añadido a Frasco 1 para cada formulación, mezclado y muestreado al tiempo 0 y 4 horas después de la reconstitución. Las muestras fueron filtradas por un filtro de 0.22 mm antes del análisis por HPLC. Este análisis fue realizado para asegurar que el producto combinado tuviera la estabilidad adecuada y no se precipitara antes de la administración a un sujeto. Los datos se presentan en el Cuadro 28: CUADRO 28.

Solución Reconstituida de los Lotes C. D v H de LTS Los datos de la reconstitución demostraron que a las 4 horas y hasta 48 horas despues de la -reconstitución, la lemuteporfina todavía estaba disuelta y no había precipitado de la solución de LTS para las formulaciones probadas.

B. Estabilidad de la formulación de LTS para el Frasco 1 de Solvente de alcohol bencílico y DGME Dos formulaciones fueron examinadas en las que el componente fotosensibilizador en el Frasco 1 consistió en DGME, alcohol bencílico y lemuteporfina a dos concentraciones de lemuteporfina de 0.1 (Lote A, Cuadro 7) y 0.075% (Lote B, Cuadro 8) en la formulación final. El contenido del frasco 2 fue añadido al contenido del Frasco 1, mezclado y muestreado al tiempo 0 y 4 horas después de la reconstitución. Las muestras fueron filtradas por un filtro de 0.2 mm antes del análisis. Este experimento fue realizado para asegurar que el producto combinado tuviera la estabilidad adecuada y no se precipitara antes de la administración a un sujeto. Los datos obtenidos se presentan en el Cuadro 29: CUADRO 29 Solución Reconstituida de los Lotes A v B de LTS Los datos de la reconstitución demuestran que hasta por 4 horas, la lemuteporfina todavía estaba disuelta y no había precipitado de la solución. Nosotros tambien hemos encontrado que la estabilidad química de la lemuteporfina en el Frasco 1 del Lote C se extiende a por lo menos doce meses a 5°C, y por lo menos 6 meses a 40°C. Los estudios adicionales demostraron que la lemuteporfina TK1 fue físicamente estable por lo menos por 48 horas.

C. Estabilidad física de LTS al 0.1% (Evaluación Visual) Utilizando el lote C del Cuadro 9, 0.9g de la solución de lemuteporfina al 1% en el alcohol bencílico fue combinada con el contenido entero de un frasco inactivo para producir un LTS al 0.1%. Esta solución demostró estabilidad física aceptable por evaluación visual en cada punto de tiempo. Los resultados se muestran en el Cuadro 30.

CUADRO 30 Estabilidad física del LTS D. Estabilidad Física a corto plazo del LTA al 0.1% de LTS como en el Cuadro 9 (Lote C) (Evaluación de HPLC durante 48 horas) Utilizando el Lote C del Cuadro 9, las soluciones de lemuteporfina constituidas al 0.1% (p/p) fueron filtradas y fueron muestreadas en varios puntos de tiempo (0, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 16h, 24h y 48h) y probadas para el contenido de lemuteporfina. Los resultados presentados en el Cuadro 31 muestran que el contenido de lemuteporfina en LTS al 0.1% despues de la filtración es estable y permanece a aproximadamente 100% de fuerza de la fórmula por lo menos por 48 horas.

CUADRO 31 Estabilidad Física a Corto Plazo del LTS E. Estabilidad Física a Corto Plazo del LTS al 0.3% (Evaluación de HPLC durante 48 horas) Utilizando el Lote U (F21) del Cuadro 23, las soluciones de LTS constituidas (0.3%) fueron filtradas y fueron muestreadas en varios puntos de tiempo (0, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 16h, 24h y 48h) y probadas para el contenido de lemuteporfina y Compuestos Relacionados Totales (TRC, por sus siglas en ingles). Los resultados mostraron que el contenido de lemuteporfina en el LTS al 0.3% es estable después de la filtración y permaneció así a través de 48 horas. El ensayo no mostró diferencias entre las soluciones filtradas y sin filtrar, demostrando que la solución sobresaturada es físicamente estable durante 48 horas (Cuadros 32 y 33).

CUADRO 32 Soluciones sin filtrar STRC, Total de Compuestos Relacionados CUADRO 33 Soluciones filtradas *TRC, Total de Compuestos Relacionados EJEMPLO 11 Tratamiento de PDT de Sujetos Humanos con Aené Utilizando PDT de Lemuteporfina Este es el estudio secuencial, doblemente ciego, de Fase l/ll, del efecto de la terapia de fotodinámica (PDT) con Solución Tópica de Lemuteporfina (LTS) en sujetos sanos y en sujetos con acné suave. Un máximo de 202 sujetos será enrolado en 4 etapas (12 en la Etapa 1 , 30 a 90 en la etapa 2, 30 a 60 en la Etapa 3, y 20 a 40 en la Etapa 4). El estudio será realizado según los lineamientos de la FDA y se pedirá a los sujetos que den consentimiento informado.

Etapa 1 Doce (12) sujetos sanos serán asignados a dos cohortes diferentes en la Etapa 1. Esta etapa evaluará al LTS-PDT con seis dosis ligeras (25, 50, 75, 125, 225, y 300J/cm2; 688 nm) para determinar la dosis máxima tolerada de luz roja (MTDr0j0)· La exposición a la luz sucederá 60±5 minutos después de la aplicación de LTS. El MTDr0j0 es definido como la dosis de luz que ya sea: (1) tiene como resultado el eritema y/o molestia de blanqueamiento tolerable más alta asociada con el tratamiento de luz o (2) es la dosis más alta de luz probada sin molestia o eritema intolerables. Los seis tratamientos de luz serán administrados a través de dos cohortes. Cada cohorte incluirá seis sujetos. Habrá cuatro sitios de prueba de 5 cm X 8 cm cada uno en la espalda superior de cada sujeto.

En el mismo día, el siguiente será aplicado a cada uno de los cuatro sitios de prueba: Cohorte 1 : • Sin tratamiento (control negativo) • Aplicación de LTS al 0.1% seguido por una dosis de luz de 25 J/cm2 (50 mW/cm2) • Aplicación de LTS al 0.1% seguido por una dosis de luz de 50 J/cm2 (50 mW/cm2) • Aplicación de LTS al 0.1% seguido por una dosis de luz de 75 J/cm2 (50 mW/cm2) Cohorte 2: • Sin tratamiento (control negativo) · Aplicación de L TS al 0.1% seguido por una dosis de luz de 125 J/cm2 (80 mW /cm2) • Aplicación de L TS al 0.1% seguido por una dosis de luz de 225 J/cm2 (80 mW /cm2) • Aplicación de L TS al 0.1 % seguido por una dosis de luz de 300 J/cm2 (80 mW /cm2) Si tres o más sujetos experimentan molestias intolerables (grado 4 en una escala de 0-4-puntos) en una dosis de luz, esa dosis será discontinuada.

En cada visita de estudio (Día 0, 1 y 14), el eritema y el edema serán evaluados por un sistema de puntuación y se realizará la evaluación de hiperpigmentación y reacción aeneiforme papulopustular, junto con la evaluación de eventos adversos. Los sujetos tambien serán entrevistados inmediatamente después del tratamiento de luz roja para evaluar la molestia. Las pruebas de laboratorio clínico y la evaluación de los signos vitales también formarán parte de las evaluaciones de seguridad. Se dará seguimiento a los sujetos por 2 semanas después del tratamiento.

Etapa 2 Aproximadamente 30 sujetos con por lo menos dos lesiones inflamatorias de acné en la frente serán asignadas a tres cohortes diferentes en la Etapa 2, con la posibilidad de agregar a un máximo de seis cohortes adicionales de diez sujetos. El objetivo general será evaluar la seguridad y medir la actividad clínica a través de tasas de excreción de sebo y biopsias después de escalar las dosis de luz hasta el MTDrOj0 en la cara de los sujetos con lesiones de acné. Esto será evaluado tratando a diez sujetos en cada cohorte con LTS al 0.1% y aplicaciones de vehículo en la frente seguido por exposición a la luz roja. La administración del tratamiento activo y del vehículo será dividida en la mitad de la frente, separada por la línea media. La determinación de la aplicación del tratamiento activo y del vehículo será aleatorizada y será realizada en un modo doblemente ciego. La dosis máxima de luz roja que puede ser administrada será la dosis de MTDr0ja determinada en la Etapa 1.

La dosis de luz y la aplicación de LTS/vehículo serán realizadas como sigue para cada cohorte: Cohorte 1 : Aplicación de LTS al 0.1% y vehículo (60±5 minutos de incubación) seguido por una dosis de luz de 25 J/cm2 (50 mW/cm2) Cohorte 2: Aplicación de LTS al 0.1% y vehículo (60±5 minutos de incubación) seguido por una dosis de luz de 75 J/cm2 (50 mW/cm2) Cohorte 3: Aplicación de LTS al 0.1% y vehículo (60±5 minutos de incubación) seguido por una dosis de luz de 150 J/cm2 (50 mW/cm2) Despues de la revisión de los datos de eficacia y seguridad de las Cohortes 1 a 3 por el patrocinador y el investigador, se hará una decisión acerca de agregar cohortes adicionales para aumentar la eficacia o mejorar la tolerabilidad. Un máximo de 6 cohortes de 10 sujetos puede ser agregado. El tiempo de incubación con LTS y vehículo así como la dosis de luz roja utilizada para los sujetos en estas cohortes adicionales será determinado con base en los resultados de las Cohortes 1 a 3. Los parámetros utilizados con los sujetos en las cohortes adicionales no excederán los parámetros probados en la Etapa 1. Específicamente, la dosis de luz máxima utilizada para sujetos en las cohortes adicionales será el MTDrojo. La irradiación utilizada para los sujetos en las cohortes adicionales será una de las dos irradiaciones probadas en la Etapa 1 (50 mW/cm2 o 80 mW/cm2). El tiempo de incubación entre la aplicación de LTS y la exposición a la luz roja para los sujetos en las cohortes adicionales no excederá 60 minutos.

El conteo de lesión de aené y la Tasa de Excreción de sebo (SER) utilizando el Sebutape® será vigilado en la investigación, el Día 0, 1 y 14 en todos los sujetos en la Etapa 2. Además, el 50% de los sujetos en las cohortes 1 a 3 tendrán una muestra de biopsia de punción de 3 mm tomada en la frente de las regiones tratadas con vehículo y LTS 24±4 horas después del tratamiento de LTS-PDT para evaluaciones adicionales. Estas muestras serán procesadas subsiguientemente y las secciones de tejido serán evaluadas para la evidencia de la acción del PDT utilizando métodos inmunohistoquímicos.

En cada visita de estudio (Día 0, 1 y 14), el eritema y el edema serán evaluados por un sistema de puntuación y se realizará la evaluación de hiperpigmentación y reacción acneiforme papulopustular, junto con la evaluación de eventos adversos. Los sujetos también serán entrevistados inmediatamente después del tratamiento de luz roja para evaluar la molestia. Las pruebas de laboratorio clínico y la evaluación de los signos vitales también formarán parte de las evaluaciones de seguridad. Se dará seguimiento a los sujetos por 2 semanas después del tratamiento. Para los sujetos que consienten las fotografías, las fotografías médicas, digitales y de alta calidad de la frente serán tomadas en el Día 0 antes de la aplicación de LTS/vehículo, después de tratamiento con luz en el día 0, y en las visitas de seguimiento en el Día 1, 7 y 14.

Etapa 3 Aproximadamente 30 y hasta 60 sujetos con por lo menos 2 lesiones inflamatorias de aene en la frente serán asignados a 3 cohortes diferentes en la Etapa 3. El objetivo general será evaluar la seguridad y medir la actividad clínica a través de las tasas de excreción de sebo después de tratamiento de LTS/vehículo-PDT en la cara de sujetos con lesiones de acné. Esto será evaluado tratando 10 a 20 sujetos en cada cohorte. LTS al 0.1% será aplicado a un lado de la frente y el vehículo en el otro lado seguido por exposición a luz roja. La determinación de la aplicación del tratamiento activo y del vehículo será aleatorizada y será realizada en un modo doblemente ciego. La determinación de la dosis de luz roja utilizada en la Etapa 3 será realizada con base en los datos de los sujetos en la Etapa 2. La dosis máxima de luz roja no excederá el MTDrojo alcanzado en la Etapa 1 (300 J/cm2).

La dosis de luz y la aplicación de LTS/vehículo serán realizadas como sigue para cada cohorte: Cohorte 1: Los tratamientos divididos de LTS-PDT se realizaron en el Día 0.

LTS al 0.1% (dosis dividida: 0.0375 mg/cm2 para una dosis promedio total de 1.5 mg antes de cada dosis de luz) • La mitad del volumen total de LTS al 0.1% y vehículo será aplicado por 30±5 minutos seguido por exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) con la posibilidad de hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2). Después de este primer tratamiento, el volumen restante de LTS al 0.1%/vehículo será aplicado por otros 30±5 minutos seguido por una segunda exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2).

Cohorte 2: Un tratamiento de LTS-PDT realizado en el Día 0 seguido por otro tratamiento en el Día 3.

LTS al 0.1% (dosis: 0.075 mg/cm2 para una dosis promedio total de 3 mg) • El LTS al 0.1% y vehículo serán aplicados por 60±5 minutos seguido por exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) con la posibilidad de hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2) en el Día 0. El mismo tratamiento será repetido en el Día 3.

Cohorte 3 v 3b: Los tratamientos divididos de LTS-PDT se realizaron en el Día 0 y se repitieron en Día 3.

LTS al 0.1% (dosis dividida: 0.0375 mg/cm2 para una dosis promedio total de 1.5 mg antes de cada dosis de luz) • La mitad de volumen total de LTS al 0.1% y vehículo será aplicado por 30±5 minutos seguido por exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) con la posibilidad de hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2). Entonces, el volumen restante de LTS al 0.1%/vehículo será aplicado por otros 30+5 minutos seguido por una segunda exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2). Los mismos tratamientos serán repetidos en el Día 3.

El conteo de la lesión de aene será vigilado en la investigación, el Día 0, 7 y 14 en todos los sujetos en la Etapa 3. La Tasa de Excreción de sebo (SER) utilizando el Sebutape® será vigilado en la investigación, previo a la aleatorización, los Días 0, 7, 8, 14 y 15 en todos los sujetos en la Etapa 3 de las Cohortes 1 a 3. Para los sujetos en la Cohorte 3b, el Sebutape será utilizado sólo en la investigación visita para determinar la elegibilidad del sujeto.

Para sujetos en la Etapa 3, que consienten las fotografías, las fotografías médicas, digitales y de alta calidad de la frente serán tomadas antes de aplicación de LTS/vehículo y después de tratamiento de luz en el Día 0 y el Día 3 (si fuese aplicable), y en las visitas de seguimiento en el Día 1, 4 (si fuese aplicable), 7 y 14. Para los 10 sujetos adicionales en la Cohorte 3b, las fotografías serán obligatorias para medir la fluorescencia de la piel con las Visiones en todas las visitas de estudio.

Etapa 4 Aproximadamente 20 y hasta 40 sujetos con por lo menos 2 lesiones inflamatorias de acné en la frente serán asignados a 2 cohortes en la Etapa 4. El objetivo general será evaluar los efectos del tratamiento y la seguridad del tratamiento en la cara con LTS/vehículo-PDT (0.1% y 0.3%). Esto será evaluado tratando 10 a 20 sujetos en cada cohorte, utilizando dos formulaciones de LTS/vehículo. Los sujetos enrolados en la Cohorte 1 recibirán LTS al 0.1% aplicado a un lado de la frente y su vehículo aparejado en el otro lado seguido por exposición a luz roja. Los datos de seguridad de los sujetos enrolados en la Cohorte 1 serán revisados por el Investigador y el Patrocinador antes de continuar con el enrolamiento en la Cohorte 2. La cohorte 2 recibirá LTS al 0.3% aplicado a un lado de la frente y su vehículo aparejado en el otro lado seguido por exposición a luz roja. La dosificación de cada cohorte es resumida a continuación. La determinación de la aplicación del tratamiento activo y del vehículo será aleatorizada y será realizada en un modo doblemente ciego. La dosis de luz roja a ser utilizada en la Etapa 4 será hecha con base en los datos de sujetos en las Etapas 2 y 3. La dosis máxima de luz roja no excederá el MTDrojo logrado en la Etapa 1 (300 J/cm2).

La aplicación de la dosis de luz y del LTS/vehículo serán realizadas como siguen para las Cohortes 1 y 2: Cohorte 1 : Los tratamientos divididos de LTS/PDT se realizaron en el Día 0, semanas 1 , 2, 3, 4, 5, 6 y 7 LTS al 0.1% (dosis dividida: 0.075 mg/cm2 para una dosis promedio total de 3 mg antes de cada dosis de luz) • El LTS y el vehículo aparejado serán aplicados y dejados por un tiempo de contacto de 30±5 minutos seguido por exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) con la posibilidad de hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2). Siguiendo este tratamiento, una segunda aplicación de LTS y vehículo será aplicada durante 30±5 minutos seguida por una segunda exposición a la luz en la misma dosis de luz. El mismo tratamiento dividido será repetido cada semana por un total de 8 tratamientos.

Cohorte 2: Los tratamientos divididos de LTS/PDT se realizaron en el Día 0, semanas 1 , 2, 3, 4, 5, 6 y 7 LTS al 0.3% (dosis dividida: 0.150 mg/cm2 para una dosis promedio total de 6mg antes de cada dosis de luz) · El LTS y el vehículo aparejado serán aplicados y dejados por un tiempo de contacto de 30+5 minutos seguido por exposición a la luz a 150 J/cm2 (50 mW/cm2) con la posibilidad de hasta 300 J/cm2 (80 mW/cm2). Siguiendo este tratamiento, una segunda aplicación de LTS y vehículo será aplicada durante 30±5 minutos seguida por una segunda exposición a la luz en la misma dosis de luz. Los mismos tratamientos serán repetidos cada semana por un total de 8 tratamientos.

Los conteos de la lesión del aene serán realizados en la investigación, el Día 0, y en las visitas de la Semana 3, 7 y 11 en todos los sujetos en la Etapa 4. La Tasa de Excreción de Sebo (SER) utilizando Sebutape® será realizada en la visita de investigación para determinar la elegibilidad del sujeto y en las visitas de las Semanas 3, 7 y 11.

Para sujetos en la Etapa 4, las fotografías médicas, digitales y de alta calidad de la frente serán tomadas en la Investigación, antes de la aplicación de LTS/vehículo y después del tratamiento de luz en los días de tratamiento, y en la visita de término del estudio en la Semana 11. Las fotografías médicas también serán utilizadas para medir la fluorescencia de la piel, una medida indirecta de la excreción de sebo, en todas las visitas del estudio.

Análisis estadístico Tamaño de la Muestra Etapa 1 No hay base estadística para el tamaño de la muestra seleccionada para esta etapa. El tamaño de la muestra fue seleccionado con base en la experiencia previa para asegurar que la seguridad y la tolerabilidad serán evaluadas adecuadamente mientras se minimiza la exposición innecesaria de los sujetos sanos.

Etapa 2 Con base en la prueba aparejada t de Student, un tamaño de la muestra de 10 sujetos en los cohortes 1 a 3 logrará una fuerza de 80% para detectar una diferencia de la línea de base en el Día 14 de 1.42 en la tasa de excreción de sebo, asumiendo una tasa promedio de excreción de sebo de 6.5 en la línea de base y ninguna mejora en la tasa de excreción de sebo en el lado del vehículo. Para controlar la multiplicidad de la prueba, el nivel de significancia de 0.05 fue ajustado utilizando una corrección de Bonferroni (0.05/3 = 0.0167).

Etapa 3 Con base en la prueba aparejada t de Student, un tamaño de la muestra de 10 sujetos por cohortes logrará una fuerza de 80% para detectar una diferencia de la línea de base en el Día 14 de 1.42 en la tasa de excreción de sebo, asumiendo una tasa promedio de excreción de sebo de 6.5 en la línea de base y ninguna mejora en la tasa de excreción de sebo en el lado del vehículo. Para controlar la multiplicidad de la prueba, el nivel de significancia de 0.05 fue ajustado utilizando con una corrección de Bonferroni (0.05/3 = 0.0167).

Etapa 4 El tamaño de la muestra para la Etapa 4 no es conducida para un análisis de fuerza sino manteniendo un tamaño de la muestra consistente con las otras etapas. Las diferencias en medidas de excreción de sebo de la línea de base entre los lados de tratamiento con vehículo y LTS serán resumidas utilizando determinaciones media, desviación estándar, mediana, mínima, y máxima. Se utilizará un ANOVA de mediciones repetidas para comparar los cambios en la tasa de excreción de sebo para cada metodo de medición de excreción de sebo. Los factores en el modelo será el brazo de tratamiento, el sujeto y el tiempo. Adicionalmente, se realizarán análisis de una variable en cada visita y serán interpretados para su significancia estadística si el valor de p de las mediciones repetidas de las "Pruebas de Hipótesis para el Efecto entre Sujetos" es significativo. Por último, el tiempo por interacción de tratamiento proporcionará información con respecto a la consistencia de la diferencia del efecto de tratamientos entre tratamientos en los puntos de tiempo de visitas.

Planes Estadísticos v Analíticos Las variables continuas serán resumidas en cuadros e incluirán el número de sujetos, la media, la desviación estándar, la mediana, el min y max. Las variables categóricas serán presentadas en cuadros como frecuencias y porcentajes. Todas las pruebas estadísticas serán de dos lados y serán realizadas con un nivel significativo de 0.05. Todos los sujetos enrolados en el estudio que recibieron tratamiento de LTS-PDT serán incluidos en el análisis. La población de seguridad será definida como todos los sujetos que recibieron el tratamiento de LTS-PDT.

Análisis de los datos demográficos v de línea de base Los datos demográficos y de línea de base serán analizados para todos los sujetos enrolados que recibieron tratamiento de LTS-PDT. Las características demográficas y de línea de base del sujeto serán resumidas por la media, por la desviación estándar, por la mediana, por el mínimo, y por el máximo para variables continuas; y por los conteos de porcentajes para variables categóricas. Los resúmenes serán proporcionados por separado para cada etapa.

Análisis de eficacia (Etapas 2 v 3 únicamente) Las diferencias en los valores SER y la fluorescencia de la piel de la línea de base y entre los lados de tratamiento con vehículo y LTS al 0.1% serán resumidos utilizando las determinaciones de la media, la desviación estándar, la mediana, el mínimo, y el máximo. Un ANOVA para mediciones repetidas será utilizado para comparar cambios en la tasa de excreción de sebo y la fluorescencia de la piel entre el LTS y el lado tratado con vehículo. Además, un intervalo de confianza del 95% del cambio en la tasa de excreción de sebo será proporcionado para cada cohorte.

Análisis de eficacia (Etapa 4) Las diferencias en medidas de excreción de sebo de la línea de base entre los lados de tratamiento con vehículo y LTS serán resumidas utilizando determinaciones media, desviación estándar, mediana, mínima, y máxima. Se utilizará un ANOVA de mediciones repetidas para comparar los cambios en la tasa de excreción de sebo para cada metodo de medición de excreción de sebo. Los factores en el modelo será el brazo de tratamiento, el sujeto y el tiempo. Adicionalmente, se realizarán análisis de una variable en cada visita y serán interpretados para su significancia estadística si el valor de p de las mediciones repetidas de las "Pruebas de Hipótesis para el Efecto entre Sujetos" es significativo. Por último, el tiempo por interacción de tratamiento proporcionará información con respecto a la consistencia de la diferencia del efecto de tratamientos entre tratamientos en los puntos de tiempo de visitas.

Estos datos serán demostrados gráficamente. Un 95% de intervalo de confianza del cambio en la tasa de excreción de sebo será proporcionado para cada visita, cohorte, tratamiento y método. Las evaluaciones estadísticas generales de esta sección serán realizadas en un nivel alfa uniforme de 0.05 para proporcionar una métrica para explorar la robustez de los varios métodos de evaluación de la tasa de excreción de sebo. No se realizará ninguna corrección para controlar la multiplicidad. La correlación de los análisis será realizada para evaluar la consistencia de los métodos para medir la excreción de sebo. La estadística descriptiva para el cambio de la línea de base en los conteos totales de lesión será presentada para las visitas por grupo de tratamiento y cohorte.

Análisis de seguridad Etapa 1 Las puntuaciones de la molestia serán resumidas por sitio de prueba (control y cada dosis de luz). Las puntuaciones del eritema, puntuaciones del edema, la presencia o la ausencia de reacción aeneiforme papulopustular inducida por PDT, y la presencia o la ausencia de hiperpigmentación serán resumidas por sitio de prueba, visita de evaluación y cohorte. El MTDrojo será resumido para cada sujeto. Las AEs serán codificadas utilizando MedDRA con el número y el porcentaje de sujetos que experimentan un AE y el número total de AEs resumió por clase de órgano de sistema, por término preferido, y por sitio de prueba (control y cada dosis de luz). Las medicinas concomitantes serán codificadas con el Diccionario QUE-fármaco y listadas por sujeto. Los valores del laboratorio químico y hematológico clínicamente significativos serán registrados como AEs. Los signos vitales esenciales serán listados por sujeto.

Etapas 2, 3 v 4 Las puntuaciones de la molestia serán resumidas por cohorte y tratamiento. Las puntuaciones del eritema, puntuaciones del edema, la presencia o la ausencia de reacción aeneiforme papulopustular inducida por PDT, y la presencia o la ausencia de hiperpigmentación serán resumidas por tratamiento, visita de evaluación y cohorte. Las AEs serán codificadas utilizando MedDRA con el número y el porcentaje de sujetos que experimentan un AE y el número total de acontecimientos resumidos por clase de órgano de sistema, termino preferido, la cohorte y el tratamiento. Las medicinas concomitantes serán codificadas con el Diccionario QUE-DD y listadas por sujeto. Los valores del laboratorio químico y hematológico clínicamente significativos serán registrados como AEs. Los signos vitales esenciales serán listados por sujeto.

Asignación de tratamiento Después del término de la Etapa 1 y las Cohortes 1 a 3 en la Etapa 2, las asignaciones de tratamiento para cada cohorte serán liberadas al Patrocinador después de que el último sujeto haya completado la visita del Día 14. La información de la asignación del tratamiento apoyará las decisiones acerca de si pueden agregarse cohortes adicionales al estudio. La información de la asignación del tratamiento no será compartida con el personal del sitio del estudio.

EJEMPLO 12 Modelo Capilar de Difusión de Sebo para la Investigación de la Formulación Las formulaciones TK1, P12, P14, y P15 fueron preparados como se describió antes y fueron investigadas para el uso en el tratamiento de trastornos de glándula sebácea hiperactiva utilizando un modelo capilar de difusión de sebo. Primero, se llenaron tubos capilares con sebo sintetico, como se describió en Lu et al., “Comparison of artificial sebum with human and hámster sebum samples”, Inter. 10ur. of Pharm., 367 (2009) 37-43 (Sebum L). Los capilares llenados (n=7) fueron sumergidos en una pequeña cantidad de formulación (aproximadamente 250 ul para 7 capilares) y colocados en un tubo cónico tapado de centrifugadora. Se tuvo cuidado de evitar la evaporación de la solución de prueba. En puntos de tiempo fijos de difusión, los capilares fueron transferidos secos con cuidado y los primeros 5 mm de cada capilar fueron cortados con un cuchillo de diamante. El contenido de siete secciones de 5 mm fue disuelto en una mezcla de solvente orgánico y probados para la lemuteporfina por HPLC. La cantidad de lemuteporfina que se difundió en el sebo artificial se reporta como una función del tiempo de contacto. Los resultados durante 60 minutos de tiempo de difusión a 532. °C son mostrados en el Cuadro 34.

CUADRO 34 Difusión en Sebo Artificial EJEMPLO 13 Comparación del Modelo Capilar de Difusión de Sebo del Lote U, la Formulación F21 v el Lote C, la Formulación TK1 Los capilares de vidrio fueron llenados con sebo sintetico, como fue descrito en Lu et al. (2009). Los capilares llenados (n=7) fueron sumergidos en una pequeña cantidad de formulación (aproximadamente 250 ul para 7 capilares) y colocados en un tubo cónico tapado de centrifugadora. En puntos de tiempo fijos de difusión, los capilares fueron transferidos secos con cuidado y los primeros 5 mm del tubo fueron cortados con un cuchillo de diamante. El contenido de siete secciones de 5 mm fue disuelto en una mezcla de solvente orgánico y probado para la lemuteporfina por HPLC. La cantidad de lemuteporfina que se difundió en el sebo artificial se reporta como una función del tiempo de contacto. Los resultados comparando el LTS, 0.3% (F21) al LTS, 0.1% (Formulación TK1 como se muestra para el Lote C) se muestran a continuación para un sistema cerrado a 32.5 °C (Cuadro 35), un sistema abierto a 32.5 °C (Cuadro 36) y un sistema cerrado a 35 °C (Cuadro 37). Los resultados se muestran gráficamente en las figuras 5, 6 y 7 respectivamente.

CUADRO 35 Resumen de Difusión de Lemuteporfina en un Sistema Cerrado a 32.5 °C aCont = Control = LTS, 0.1% (fórmula TK1 como se describió para el Lote C) CUADRO 36 Resumen de difusión de Lemuteporfina a 32.5 °C en un Sistema Abierto aCont = Control = LTS, 0.1% (fórmula TK1 como se describió para el Lote C) CUADRO 37 Resumen de difusión de Lemuteporfina a 35.0°C en un Sistema Cerrado aCont = Control = LTS, 0.1% (fórmula TK1 como se describió para el Lote C) EJEMPLO 14 Preparación de las Formulaciones CUF-1 (Solución Activa de LTS, 0.3%) v CUG-1 (Solución Inactiva de LTS, 0.3%) El Ejemplo 7 describió el desarrollo de un sistema de formulación de dos componentes. El primer componente es el componente fotosensibilizador que comprende lemuteporfina disuelta en un solvente en el que es más soluble. El segundo componente es el componente diluyente que comprende el resto de los excipientes de LTS. Este ejemplo ilustra otra solución de fotosensibilizador de lemuteporfina de dos componentes (Cuadro 38) con la formulación de vehículo aparejado (placebo) (Cuadro 39). Los Cuadros 40 y 41 muestran dos configuraciones del sistema de dos frascos que producen la misma solución final constituida. Estas formulaciones simplifican los excipientes utilizados y fueron preparadas como fue descrito antes. La nueva combinación de excipientes cumple con los estándares de la FDA. Además, el volumen total del sistema combinado de dos componentes se reduce en este ejemplo para la facilidad de la administración en el establecimiento clínico.

CUADRO 38 LTS. Solución Constituida al 0.3% CUADRO 39 LTS, Vehículo al 0.3% CUADRO 40 Sistema de 2 frascos para LTS, 0.3% - Confiqurac ión 1 CUADRO 41 Sistema de 2 frascos para LTS, 0.3% - Configuración 2 EJEMPLO 15 Caracterización de LTS, 0.3% (Constituido de CUF-1 Solución Activa de LTS, 0.3% v CUG-1 Solución Inactiva de LTS, 0.3%1 El frasco 1 (Solución Activa de LTS, 0.3%, código CUF-1), el Frasco 2 (Solución Inactiva de LTS, 0.3%, código CUG-1) y el Vehículo (Vehículo de LTS, 0.3%, código PCTK-1) fueron preparados según el Ejemplo 14, para realizar los estudios de caracterización en la configuración de la nueva formulación de la solución constituida de LTS de 6.000-g, 0.3%. Las gravedades específicas para estas formulaciones fueron determinadas. La estabilidad química y la estabilidad física de la nueva configuración del LTS, 0.3% fue probada preparando y analizando las muestras filtradas y sin filtrar sobre un período de tiempo de 48 horas.

Determinación de Gravedad Específica Antes de que se determinara la gravedad específica de las muestras, el pienómetro fue limpiado completamente. El peso del picnómetro vacío entonces fue determinado exactamente. La tapa entonces fue retirada del picnómetro y llenada de agua antes de que fuera reemplazada con cuidado. Despues de que el agua se extruyera por el orificio de sobre-flujo, la superficie exterior del picnómetro fue limpiada y fue secada. El peso del picnómetro y el agua entonces fueron medidos exactamente. La prueba de la gravedad específica fue realizada (N=5) en la solución constituida de LTS, 0.3%, Vehículo de LTS, 0.3%, Fórmula PCTK-1 y Solución Inactiva de LTS, 0.3% (Frasco 2), Fórmula CUG-1. Los cálculos implicaron determinar la gravedad específica de cada uno de las soluciones incluidas: • Peso de agua = peso del picnómetro con agua - peso del picnómetro vacío • Peso de la muestra = peso del picnómetro con muestra -peso del picnómetro vacío • La gravedad específica de la muestra = (peso de la muestra) / (peso del agua) Estabilidad Química v Física del LTS, 0.3% de la Solución Constituida La solución constituida de LTS, 0.3% fue preparada agregando 3.000-g de Solución Inactiva en el Frasco 1. El contenido entero del Frasco 1 fue transferido utilizando una jeringa y aguja y ya sea filtrado o sin filtrar en un nuevo frasco en los puntos de tiempo: 0, 4, 8, 24 y 48 horas. Se prepararon muestras por triplicado y se ensayaron para cada punto de tiempo. Las muestras fueron almacenadas lejos de la luz, y se registró la temperatura del cuarto oscuro durante las 48 horas. Después de las 48 horas, las muestras fueron enviadas para análisis químico. Los resultados de la gravedad específica, con base en los datos mostrados en el Cuadro 42 fueron así: • Solución Inactiva de LTS. 0.3% (Frasco 2), Fórmula CUG- 1 = 0.85 • Solución Constituida de LTS. 0.3% = 0.93 · Vehículo de LTS, 0.3%, la Fórmula PCTK-1 = 0.94 CUADRO 42 Peso de las Muestras de la Solución Inactiva. Solución Constituida v Vehículo de LTS, 0.3% Estabilidad Química v Física La Solución Inactiva y la Solución Activa de LTS, 0.3% fueron preparados como se describió en el Ejemplo 14. El frasco 1, conteniendo la Solución Constituida de LTS, 0.3%, fue ya sea filtrada o sin filtrar en un nuevo frasco durante 48 horas. La temperatura del cuarto oscuro, donde el estudio fue realizado, fue registrada muchas veces a traves de las 48 horas. Todas las muestras fueron almacenadas lejos de la luz. Los resultados de estos estudios son mostrados en los Cuadros 43, 44 y 45.

CUADRO 43 Estabilidad Física1 de LTS.0.3% durante 48 horas despues de la constitución 1La estabilidad física de la solución sobresaturada fue evaluada por filtración.

CUADRO 44 Estabilidad química del LTS, 0.3% durante 48 horas después de la Constitución CUADRO 45 Perdida de peso en los Frascos de LTS, 0.3% durante 48 Horas después de la Constitución Conclusión LTS, Solución inactiva al 0.3% (Frasco 2), CUG-1, tuvo una gravedad específica de 0.85; LTS, Solución Constituida al 0.3%, obtenida de mezclar la solución activa del Frasco 1 (CUF-1) y la Solución inactiva del Frasco 2 (CUG-1), tuvo una gravedad específica de 0.93; y el LTS, Vehículo al 0.3%, código PCTK-1, tuvo una gravedad específica de 0.94. El contenido de Lemuteporfina fue físicamente y químicamente estable en la nueva configuración de la formulación de LTS 6.000-g, Solución Constituida al 3%. No hubo cambios mayores en el contenido de lemuteporfina en ninguna de las muestras filtradas o sin filtrar durante el estudio de estabilidad a temperatura ambiente en las 48 horas. Los compuestos relacionados a la Lemuteporfina no cambiaron durante la prueba de estabilidad.

Ahora habiendo descrito completamente el tema inventivo, será apreciado por los expertos en la teenica que lo mismo puede ser realizado dentro de un gran intervalo de parámetros, concentraciones, y condiciones equivalentes sin separarse del alcance de la revelación y sin experimentación indebida. Aunque la revelación ha sido descrita con respecto a modalidades específicas de la misma, será comprendido que es capaz de modificaciones adicionales. Esta solicitud pretende cubrir cualquier variación, los usos, o las adaptaciones de la revelación que sigue, en general, los principios de la revelación e incluyendo tales separaciones a la revelación presente que entran dentro de la práctica conocida o de costumbre dentro de la técnica a que la pertenece la revelación y como puede ser aplicada a las características esenciales establecidas en lo anterior.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1. Una composición farmaceutica útil para localizar un fotosensibilizador a una glándula sebácea, que comprende una formulación constituida de un componente fotosensibilizador que comprende un fotosensibilizador sobresaturado a temperatura ambiente, uno o más solventes, y monoetil éter dietilen glicol (DGME), en donde el fotosensibilizador es una porfirina verde presente en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.4% en la composición farmacéutica; y en donde el uno o más solventes comprende alcohol bencílico presente en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 5% y aproximadamente 55% e isopropanol (IPA) en una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 25% a aproximadamente 60% en la composición farmacéutica; en donde el DGME está presente en una concentración final (p/p) de aproximadamente 15% y aproximadamente 35%; y en donde la formulación constituida fue formada combinando: a) una primera solución de una porfirina verde presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 0.5% y 1.5% disuelta en alcohol bencílico; y b) una segunda solución de un componente diluyente que comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 15% y aproximadamente 40%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 0% y aproximadamente 30%, y aproximadamente 40% e isopropanol (IPA) presente en una concentración inicial (p/p) de entre aproximadamente 30% y aproximadamente 70% en la composición farmaceutica; en donde la concentración del fotosensibilizador en la solución constituida está sobresaturada a temperatura ambiente.

2. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque la formulación constituida es físicamente estable por lo menos por 4 horas.

3. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque el componente diluyente opcionalmente comprende adicionalmente alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de entre 4.0% y 6.0%, mentol presente en una concentración inicial (p/p) de entre 2.5% y 3.0%, salicilato de metilo presente en una concentración final (p/p) de entre 0.5% y 1.5%, y polisorbato 80 presente en una concentración final (p/p) de entre 0.25% y 0.60%.

4. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque: (a) la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% en alcohol bencílico; y (b) el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 35.6%, IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 54.39%, alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 5.56%, mentol presente en una concentración inicial de aproximadamente 2.78%, salicilato de metilo presente en una concentración inicial de aproximadamente 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración inicial de aproximadamente 0.56%.

5. La composición farmaceutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque: (a) la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.00%; y (b) el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 24.30%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de 28.55%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 47.15%.

6. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque: (a) la primera solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 0.60% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.40%; y (b) el componente diluyente comprende DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 34.00%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 66.00%.

7. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque la porfirina verde es lemuteporfina.

8. Una composición farmaceutica de conformidad con la reivindicación 1, para usarse en el tratamiento de aené en un sujeto necesitado del mismo.

9. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, para usarse en la reducción de la tasa de excreción de sebo de las glándulas sebáceas en la piel de un sujeto que tiene un área afectada de piel grasienta.

10. Un método para preparar una composición farmacéutica de la reivindicación 1, que comprende mezclar un primer frasco que tiene un componente fotosensibilizador que comprende una porfirina verde y alcohol bencílico y un segundo frasco que tiene un componente diluyente que comprende monoetil éter dietilen glicol (DGME) e isopropanol (IPA) y opcionalmente alcohol bencílico, en donde dicha composición farmacéutica tiene una concentración final (p/p) de entre aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.4% de dicha porfirina verde, de entre aproximadamente 5% y aproximadamente 55% de dicho alcohol bencílico, de entre aproximadamente 7% y aproximadamente 25% de dicho DGME, y de entre aproximadamente 25% y aproximadamente 60% de dicho IPA.

11. El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque: a) dicho primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% en alcohol bencílico; y b) dicho segundo frasco comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 35.6%, IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 54.39%, alcohol oleílico presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 5.56%, mentol presente en una concentración inicial de aproximadamente 2.78%, salicilato de metilo presente en una concentración inicial de aproximadamente 1.11%, y polisorbato 80 presente en una concentración inicial de aproximadamente 0.56%.

12. El metodo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque: a) dicho primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 1.00% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.00%; y b) dicho segundo frasco comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 24.30%, alcohol bencílico presente en una concentración inicial (p/p) de 28.55%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 47.15%.

13. El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque a) dicho primer frasco que comprende una solución de una porfirina verde comprende lemuteporfina presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 0.60% y alcohol bencílico en una concentración (p/p) de aproximadamente 99.40%; y b) dicho segundo frasco comprende una solución de DGME presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 34.00%, e IPA presente en una concentración inicial (p/p) de aproximadamente 66.00%.

14. El metodo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque la porfirina verde es lemuteporfina.

15. El uso de una composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para preparar un medicamento para reducir la tasa de excreción de sebo de las glándulas sebáceas en la piel de un sujeto que tiene un área de piel grasienta.

16. El uso como el que se reclama en la reivindicación 15, en donde el fotosensibilizador es porfirina verde.

17. El uso como el que se reclama en la reivindicación 16, en donde la porfirina verde es lemuteporfina.

18. El uso como el que se reclama en la reivindicación 15, en donde el área afectada del sujeto es pre-tratada con calor seco antes de que la composición sea aplicada.

19. El uso como el que se reclama en la reivindicación 15, en donde el tiempo permitido para que el fotosensibilizador se ubique es de 1 a 2 horas.

20. El uso como el que se reclama en la reivindicación 15, en donde la exposición de la energía luminosa está en el intervalo de 37.5 a 300 J/cm2.

21. El uso de una composición de fotosensibilizador de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para preparar un medicamento para tratar aene en un sujeto necesitado del mismo.

22. El uso como el que se reclama en la reivindicación 21, en donde el sujeto tiene lesiones inflamatorias de acné, lesiones no inflamatorias de acné o lesiones tanto inflamatorias como no inflamatorias.

23. El uso como el que se reclama en la reivindicación 21 , en donde el fotosensibilizador es porfirina verde.

24. El uso como el que se reclama en la reivindicación 23, en donde la porfirina verde es lemuteporfina.

25. El uso como el que se reclama en la reivindicación 21, en donde el área afectada del sujeto es pre-tratada con calor seco antes de que el medicamento sea aplicado.

26. El uso como el que se reclama en la reivindicación 21, en donde el tiempo permitido para que el fotosensibilizador se ubique es de 1 a 2 horas.

27. El uso como el que se reclama en la reivindicación 21, en donde la exposición e la energía luminosa está en el intervalo de 37.5 a 300 J/cm2.