KR20150030763A

KR20150030763A - 감광제의 국부 전달을 위한 약제학적 조성물 및 이의 이용

Info

Publication number: KR20150030763A
Application number: KR20157003502A
Authority: KR
Inventors: 델파인 캐롤라인 임버트; 데이비드 윌리엄 캐리 헌트
Original assignee: 더미라, 인코포레이티드
Priority date: 2012-07-11
Filing date: 2013-07-11
Publication date: 2015-03-20
Also published as: US20150209428A1; CN104703624A; JP2015522079A; WO2014011875A1; CA2878846A1; AU2013290140A1; MX2015000429A; EP2872178A1; BR112015000383A2

Abstract

본 발명은 감광제를 포함하는 조성물 및 피부 상태의 치료를 위한 광역동 치료에서의 이의 사용을 포함 및 제공한다.

Description

감광제의 국부 전달을 위한 약제학적 조성물 및 이의 이용{PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR TOPICAL DELIVERY OF PHOTOSENSITIZERS AND USES THEREOF}

관련 출원과의 교차 참조

본 출원은 미국 가출원번호 61/670,554(2012년 7월 11일자 출원), 61/706,732(2012년 9월 27일자 출원), 및 61/708,845(2012년 10월 2일자 출원)의 이익을 주장하며, 이들 출원의 전체 내용은 본 명세서에 통합된다.

발명의 분야

본 발명은 감광제(photosensitizer)를 포함하는 조성물 및 피부 상태의 치료를 위한 광역동 치료(photodynamic therapy)에서의 이의 사용을 포함 및 제공한다.

광역동 치료(PDT)는 광범위한 의료 조건에서 치료를 위해 광-활성화된 약물(감광제)을 사용하는 과정이다. 표적 조직에서 직접적으로 조명될 수 있는 감광제의 축적에 의해 PDT는 선택적 치료법이 된다. 감광제가 빛에 의해 활성화되면, 약물을 보유하는 조직에서 싱글렛 산소(singlet oxygen) 및 다른 자유 라디칼이 생성된다. 이러한 활성 산소 종과 생물학적 거대 분자의 상호작용은 세포의 신진 대사에 변화를 일으키는 생화학 반응의 다단계 반응을 유도하고, 고용량의 약물 및/또는 빛에서 세포사(cell death)를 초래할 수 있다.

광역동 치료는 여드름, 활동 과잉의 피지선, 건선, 아토피 피부염 및 특정 유형의 피부암을 포함하는 다수의 피부 상태에 대한 치료로서 제안되어왔다. 이러한 조건에서 PDT를 수행함에 있어서의 과제들 중 하나는 광 조사 후 홍반, 통증, 화상 및 가려움과 같은 일반화되고 불필요한 피부 감광성 반응을 유발하지 않고, 피부의 원하는 위치에 충분한 양의 감광제를 타겟팅하는 것이다. 예를 들어, 여드름, 피지선 과잉 형성, 지루 및 지루성 피부염과 같은 상태, 피지선 과잉 활동에 의해 특정되는 상태의 치료에서, 피지선에 감광 약물을 선택적으로 국소화시키는 것이 바람직하다.

다수의 국부 제형(topical formulation)의 감광제는 피부 상태를 치료하기 위해 제안되었다(예컨대 WO2005/074987). 제형 조성물은 피지선과 연관된 모낭으로 이루어진 구조, 털 피지샘 단위(PSU)와 같은 피부 부속 기관뿐만 아니라 피부에 대한 국소 감광제 전달에 현저한 영향을 미칠 수 있다. 피지선에 감광제 약물을 효과적으로 전달할 보다 나은 제형에 대한 필요성이 있다.

발명의 개요

일 측면에 있어서, 본 발명은 상온에서 과포화된 감광제를 포함하는 감광 성분(photosensitizing component)의 구성 제형(constituted formulation), 하나 이상의 용매, 및 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)를 포함하는, 감광제를 피지선으로 위치시키는데 유용한 약제학적 조성물로서, 상기 감광제는 상기 약제학적 조성물 중 약 0.1중량% 내지 약 0.4중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 그린 포르피린(green porphyrin)이고; 상기 하나 이상의 용매는 상기 약제학적 조성물 중 약 5중량% 내지 약 55중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 벤질 알코올 및 약 25중량% 내지 약 60중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하고; 상기 DGME는 약 15중량% 내지 약 35중량%의 최종 농도로 존재하고; 상기 구성 제형은: a) 벤질 알코올에 용해된 약 0.5중량% 내지 약 1.5중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 그린 포르피린의 제 1의 용액; 및 b) 상기 약제학적 조성물 중 약 15중량% 내지 약 40중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 0중량% 내지 약 30중량% 및 약 40중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올 및 약 30중량% 내지 약 70중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분(diluent component)의 제 2의 용액을 조합하여 형성되고; 상기 제형 용액 중의 감광제의 농도는 상온에서 과포화되는 것인 약제학적 조성물을 제공한다. 하나의 구체예에 있어서, 구성된 약제학적 조성물은 적어도 4시간 동안 물리적으로 안정하다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 희석 성분은 선택적으로 4.0중량% 내지 6.0중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올(oleyl alcohol), 2.5중량% 내지 3.0중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 멘솔(menthol), 0.5중량% 내지 1.5중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트(methyl salicylate) 및 0.25중량% 내지 0.60중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80(polysorbate 80)을 추가적으로 포함한다. 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 벤질 알코올 중 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀(lemuteporfin)을 포함하고, 상기 희석 성분은 약 35.6중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 54.39중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA, 약 5.56중량%의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올, 약 2.78중량%의 초기 농도로 존재하는 멘솔, 약 1.11중량%의 초기 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트 및 약 0.56중량%의 초기 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 포함한다. 또 다른 구체예에서, 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고, 상기 희석 성분은 약 24.30중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 28.55중량%의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올, 및 약 47.15중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함한다. 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 약 0.60중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.40중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고; 상기 희석 성분은 약 34.00중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 및 약 66.00중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함한다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린은 레무테포르핀이다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 여드름 병변을 갖는 환자 피부의 환부(affected area)에 치료적으로 효과적인 양의 상기 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부(some)의 그린 포르피린이 상기 환부의 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 그린 포르피린을 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 여드름을 치료하기 위해 상기 약제학적 조성물을 이용하는 방법을 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 지성 피부 환부에 치료적으로 효과적인 양의 상기 약제학적 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 상기 조성물이 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 지성 피부 환부를 갖는 환자의 피부 피지선의 피지 분비율을 감소시키기 위해 상기 약제학적 조성물을 이용하는 방법을 제공한다.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 그린 포르피린 및 벤질 알코올을 포함하는 감광 성분을 갖는 제 1의 바이알(vial) 및 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME) 및 이소프로판올(IPA) 및 선택적으로 벤질 알코올을 포함하는 희석 성분을 갖는 제 2의 바이알을 혼합하는 것을 포함하는, 상기 약제학적 조성물의 제조 방법으로서, 상기 약제학적 조성물은 최종 농도로서 약 0.1중량% 내지 약 0.4중량%의 상기 그린 포르피린, 약 5중량% 내지 약 55중량% 사이의 상기 벤질 알코올, 약 7중량% 내지 약 25중량% 사이의 상기 DGME, 및 약 25중량% 내지 약 60중량% 사이의 상기 IPA를 갖는 상기 약제학적 조성물의 제조 방법을 제공한다. 하나의 구체예에 있어서, 상기 방법은 벤질 알코올 중 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린 용액을 포함하는 제 1의 바이알 및 약 35.6중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME 용액, 약 54.39중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA, 약 5.56중량%의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올, 약 2.78중량%의 초기 농도로 존재하는 멘솔, 약 1.11중량%의 초기 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트 및 약 0.56중량%의 초기 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 포함하는 제 2의 바이알을 혼합하는 것을 포함한다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 방법은 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 그린 포르피린 용액을 포함하는 제 1의 바이알; 및 약 24.30중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME 용액, 약 28.55중량%의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올, 및 약 47.15중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함하는 제 2의 바이알을 혼합하는 제조 방법을 포함한다. 다른 구체예에 있어서, 약 0.60중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.40중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 그린 포르피린 용액을 포함하는 제 1의 바이알; 및 약 34.00중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME 용액, 및 약 66.00중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함하는 제 2의 바이알을 혼합하는 것을 포함한다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린은 레무테포르핀이다.

또 다른 구체예에 있어서, 본 발명은 환자 피부의 지성 피부 환부에 치료적으로 효과적인 양의 상기 약제학적 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 피지선 내에 국재화하게 두고; 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 지성 피부 영역을 갖는 환자의 피부 피지선의 피지 분비율을 감소시키기 위한 방법을 제공한다. 하나의 구체예에 있어서, 상기 감광제는 그린포르피린이다. 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린은 레무테포르핀이다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 환자의 환부는 상기 조성물을 적용하기 전에 건조열(dry heat)로 전처리된다. 다른 구체예에 있어서, 상기 감광제를 국재화하게 두는 시간은 1 내지 2시간이다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 빛 에너지 노출은 37.5 내지 300J/cm²의 범위이다.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 여드름 병변을 갖는 환자 피부의 환부에 치료적으로 효과적인 양의 상기 감광제 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 상기 환부의 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 여드름을 치료하는 방법을 제공한다. 하나의 구체예에 있어서, 상기 환자는 염증성 여드름 병변, 비염증성 여드름 병변, 또는 염증성 및 비염증성 병변을 갖는다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 감광제는 그린 포르피린이다. 다른 구체예에 있어서, 상기 그린 포르피린은 레무테포르핀이다. 다른 구체예에 있어서, 상기 환자의 환부는 상기 조성물을 적용하기 전에 건조열로 전처리된다. 또 다른 구체예에 있어서, 상기 감광제를 국재화하게 두는 시간은 1 내지 2시간이다. 다른 구체예에 있어서, 상기 빛 에너지 노출은 37.5 내지 300J/cm²의 범위이다.

본 발명은 또한 감광제를 포함하는 감광 성분을 함유하는 제 1 용기(container), 및 제 1 용기에서 용매와 혼합될 수 있는 부형제(exipient) 성분을 함유하는 제 2 용기, 및 상기 두 용기의 내용물을 조합하고, 조합된 내용물들을 환자의 피부에 국소적으로 적용하여, 하나 이상의 피부 질환을 치료하기 위한 PDT를 수행하기 위한 일련의 지시사항 세트(set)를 포함하는 키트를 포함 및 제공한다.

본 발명에 따른 특정 구체예에서, 감광제는 레무테포르핀 및 베르테포르핀과 같은 그린 포르피린을 포함한다.

도 1은 셀룰로오스 겔화제를 함유하거나 함유하지 않은 다양한 용액 제형의 레무테포르핀(표 4에 나타낸 LT-G-001-LT-G-005) 및 연고 제형(LTO-TG1)을 50mW/cm²의 강도로 전달되는 50 또는 100J/cm²의 적색광 투여와 함께 적용하는 경우, 본 발명의 PDT에 따른 구체예의 생쥐 피지 분비에 대한 효과를 나타내는 그래프이다. PDT 처리 72시간 후 얻은 측면 피부 샘플에 대해, 피지선의 존재를 나타내는 오일 레드 O-양성 PSU(□)의 수, 및 각각 4배 현미경 필드내에서 계산되는 모낭(■)의 총 수가 평가된다. 치료 그룹당 5 마리 생쥐에 대한 표준 편차와 평균값을 표시한다.
도 2는 50mW/cm²의 강도로 전달되는 20, 50 또는 100J/cm²의 적색광 투여와 조합되는 레무테포르핀 국소 연고(LTO;TG1-타입) 및 레무테포르핀 국소 용액(LTS;LT-G-002-타입)에서 레무테포르핀에 따른 PDT의 효과를 비교하는 그래프이다. 대조군 생쥐는 레무테포르핀을 포함하지 않는 유사한 제형의 적용을 받은 이후 가장 높은 적색광 투여에 노출된다. PDT 후 72시간째에 측면 피부 샘플로부터 준비된 섹션을 얻고, 각각 4배 현미경 필드 내에서 오일 레드 O-양성 PSU(□) 및 총 모낭(■)에 대하여 평가된다. 치료 그룹당 5마리 생쥐에 대한 표준 편차와 평균을 표시한다.
도 3은 본 발명의 관점에 따라 레무테포르핀 함유 제형의 적용 후 1시간 및 8시간에서의 레무테포르핀 국부 연고(LTO) 및 1시간 피부 접촉 후 레무테포르핀 국부 용액(F-C)을 비교하는, 인체 표본 피부 샘플의 모낭 및 피지선에서의 레무테포르핀 형광 강도 측정을 나타내는 막대 그래프이다.
도 4는 피부 준비 및 본 발명의 특정 측면에 따른 0.1% LTS의 국소 적용 후, 실시예 9로부터의 집단(cohort) 2의 다양한 환자들에 대한 레무테포르핀-관련 형광을 함유하는 어퍼 백(upper back) 피지선의 대표 이미지를 나타낸다. 상위 4개의 형광 이미지들은 적외선(IR) 열로 전처리한 후 0.1% LTS를 적용한 부위들로부터 얻은 것들이다. 하위 4개의 이미지들은 피부의 전처리 없이 60분 동안 0.1% LTS를 투여한 피부 부위들로부터 얻은 것들이다.
도 5는 32.5℃ 폐쇄형 시스템에서 시간 경과에 따라 배치 C(Batch C), 제형 TK1(대조군) 및 배치 U(Batch U), 제형 F21로부터 인공 피지내로 레무테포르핀이 확산되는 것을 나타내는 도면이다.
도 6은 32.5℃ 개방형 시스템에서 시간 경과에 따라 배치 C(Batch C), 제형 TK1(대조군) 및 배치 U(Batch U), 제형 F21로부터 인공 피지내로 레무테포르핀이 확산되는 것을 나타내는 도면이다.
도 7은 35.0℃ 폐쇄형 시스템에서 시간 경과에 따라 배치 C(Batch C), 제형 TK1(대조군) 및 배치 U(Batch U), 제형 F21로부터 인공 피지내로 레무테포르핀이 확산되는 것을 나타내는 도면이다.

개 요

본 발명은 감광제를 포함하는 약제학적 조성물 및 여드름 및 기타 과민 피지선 장애와 같은 피부과 질환의 치료를 위한 광역동 치료(PDT)를 수행하기 위하여 제형화된 감광제를 사용하는 방법을 제공 및 포함한다.

피지선 장애에 대해 PDT를 수행하기 위해서는, 피지선으로 감광제를 전달하는 것이 필요하다. 우리는 WO03/039597에 기재된 것과 유사한 감광제 약물인 레무테포르핀의 이미 알려진 연고 제형을 생쥐의 피부에 도포했을 때, 본 종의 피지선에 감광제를 국소화하는데 효과적임을 관찰하였다. 그러나, 동일한 제형은 사람의 피지선에 약물을 국소화하는데는 일반적으로 효과가 없었다. 따라서, 사람의 피부에 도포할 경우, 피지선에 감광제 약물을 증가된 양, 바람직하게는 감소된 시간에 전달할 수 있는 향상된 제형에 대해 연구하였다.

예상치 않게, 농화제, 겔화제, 왁스 등과 같은 점도 개질제(viscosity modifying agents)의 상당량의 첨가 없이, 액체 용액 형태로 감광제의 제형이 겔, 연고, 로션, 크림 등과 같은 제형보다 더 효과적임을 알게 되었다. 상당량의 하이드록시-프로필 셀룰로오스 또는 에틸 셀룰로오스와 같은 겔화제의 첨가가 실제로 생쥐나 사람의 피지선에 감광제를 비교적 적게 전달할 수 있는 제형을 제공하는 것을 발견하였다. 이러한 점도-개질제는 통상적으로 국소 치료에 자주 사용되고, 항-핵제(anti-nucleating agents)로서 작용하기 때문에, 과포화(supersaturated) 용액을 안정화하는데 일반적으로 유용한 것으로 간주된다.

우리가 개발한 가장 효과적인 용액 제형은 제형 중 약물의 용해도에 접근, 및 바람직하게는 초과하는, 감광제 약물의 농도를 함유하는 것을 발견하였다. 매우 놀랍게도, 통상적으로 과포화 용액으로부터 침전물 형성을 방지하기 위해 당업계에서 사용되는 항-핵제 또는 겔화제(예를 들면, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스와 같은 하이드록실 알킬 셀룰로오스와 같은 중합체(HPMC), 하이드록시프로필 셀룰로오스(HPC), 폴리비닐피롤리돈(PVP) 및 폴리아크릴산과 같은 폴리머들)의 첨가조차 없이, 이러한 용해도 이상으로 제형화되는 레무테포르핀과 같은 그린 포르피린 용액(과포화 용액)은 최대 4시간, 8시간, 12시간, 24시간, 32시간, 48시간 이상 보관시 안정하다. 특정 구체예에서, 레무테포르핀과 같은 그린 포르피린의 안정한 과포화 용액이 제공되며, 이는 상온에서 용해도 평형 약 150중량% 이상, 약 200중량% 이상, 약 250중량% 이상, 약 260중량% 이상, 약 275중량% 이상, 약 280중량% 이상, 약 300중량% 이상, 약 325중량% 이상, 약 350중량% 이상, 약 375중량% 이상, 약 400중량% 이상, 약 425중량% 이상 등의 양으로 용액내에 용해된 감광제 농도를 갖는다.

예를 들면,본 발명에서 상기 특정 약제학적 제형에서 레무테포르핀의 용해도는 (계면 활성제가 첨가될 수 있는지 여부 및 현재, 어떠한 비율로 어떠한 용매인지에 따라) 약 0.025중량% 내지 0.037중량%의 범위이다. (PDT를 수행하기 위한 유효 농도 범위로 결정한) 0.05중량% 내지 0.5중량%의 범위에서 최종 제형의 농도를 달성하기 위해, 과포화 용액이 바람직하다. 4시간이 초과된 시간 동안 이러한 과포화 용액의 예상치 못한 안정성은, 피지선에서의 레무테포르핀의 국소화를 방해하는 과포화 용액으로부터의 활성 성분들의 침전을 방지하기 위해 항-핵제로서 당업계에서 전형적으로 중합체가 사용된다는 본 발명자들의 관찰의 관점(이하 참조)에서 중요한 발견이었다. 그러므로 이하 기술된 제형은 치료적이고 상업적으로 유용한 시간 동안, 사용되어질 레무테포르핀을 용액내에 비교적 높은 농도로 유지하는 것을 가능하게한다.

감광제 제형

이하 사용되는 용어로서“부형제”는 약제학적으로 허용가능한 희석제, 비히클(vihicle), 캐리어(carrier), 용매, 방부제, 항산화제, 점도 개질제 또는 이들의 조합을 포함하는 활성 제약 성분(API) 이외의 다른 의약품의 성분(들)을 의미한다. 달리 명시하지 않는 한, 농도는 중량%를 기준으로 개시된다.

이하 사용되는 용어로서“용매”는 감광제를 용해할 수 있는 약제학적으로 허용 가능한 액체 용매를 의미한다.

이하 사용되는 용어로서“과포화”또는“과포화 용액”은 감광제와 관련해서, 달리 명시하지 않는 한, 주어진 온도 일반적으로 실온 또는 20℃에서 평형 용해도를 초과하는 농도로 용액에 용해된 감광제의 양을 의미한다.

이하 사용되는 용어로서“용해도”또는“포화 용해도”는 감광제와 관련해서, 달리 명시하지 않는 한, 평형 상태에서 주어진 온도, 일반적으로 실온 또는 20℃에서 주어진 용매에 용해될 수 있는 감광제의 양을 의미한다.

한 측면에서, 본 발명은 피지선에 감광제를 국소화하는데 유용한 용액 내 감광 성분 및 부형제 성분을 포함하는 약제학적 조성물을 포함 및 제공하며, 용액이 만들어진 이후 약제학적으로 허용할 수 없는 정도로 용액으로부터 감광제가 침전되지 않는다. 임의의 특정 이론에 얽매이지 않고, 비히클에서 감광제의 열역학적 활성이 가장 높아지고, 그 결과 높은 농도 구배가 휘발성 배합 성분 중 일부의 증발에 의해 더 증가되어, 레무테포르핀이 피지, 피지선에서 분비된 왁스/유성 혼합물, 및 PSU와 피지선을 포함하는 살아있는 세포(피지세포)내로 효과적으로 분배되기 때문에, 이러한 과포화 용액은 레무테포르핀과 같은 큰 분자에서 매우 효과적인 전달시스템이라고 생각된다.

본 발명은 추가로 용해된 감광제 및 선택적으로, 다른 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하고 제공하는데, 상기 조성물에서 감광제의 농도는 조성물에서의 감광제의 포화 용해도를 초과한다.

또한, 본 발명은 감광제, 하나 이상의 용매 및 선택적으로 하나 이상의 약제학적 허용 가능한 부형제를 포함하는, 감광제의 국소 전달에 유용한 조성물을 포함하고 제공하는데, 상기 조성물은 20℃에서 50센티포이즈(cps)미만의 점도를 갖는다. 이러한 조성물은 점도 개질제를 포함하지 않으며 (또는 매우 적은 양으로 포함하며), 과포화 되거나 과포화되지 않을 수 있다.

조성물에서 감광 성분은 선택된 감광제의 종류, 효능 및 용해도에 따라 약 0.001중량% 내지 약 5중량% 범위의 농도로 존재할 수 있다. 통상적으로, 감광 성분은 약 0.01중량% 내지 약 1.0중량% 범위의 농도로 존재한다. 레무테포르핀과 같은 그린포르피린에 대해서, 농도는 0.025중량% 내지 약 0.5중량% 범위일 수 있다. 농도 측면에서 0.025중량% 또는 0.05중량%일 수 있다. 또 다른 측면에서 농도는 0.075중량% 또는 0.1중량%일 수 있다. 다른 측면에서 농도는 0.125중량% 또는 0.15중량%일 수 있다. 또 다른 측면에서 농도는 0.175중량% 또는 0.2중량%일 수 있다. 한 측면에서, 농도는 0.225중량% 또는 0.25중량%일 수 있다. 그러나, 또 다른 측면에서, 농도는 0.3중량% 또는 0.355중량%일 수 있다. 특정 측면에서, 농도는 0.375중량%, 0.4중량% 또는 0.5중량%일 수 있다. 본 발명에 따른 특정 측면에서, 그린 포르피린의 농도는 0.05중량% 내지 0.4중량% 범위일 수 있다. 본 발명에 따른 특정 측면에서, 그린 포르피린의 농도는 약 0.3중량% 내지 약 0.4중량% 범위일 수 있다. 다른 측면에서, 그린 포르피린의 농도는 0.35중량% 내지 0.45중량% 범위일 수 있다. 또 다른 측면에서, 레무테포르핀의 농도는 약 0.1중량% 내지 약 0.3중량% 범위일 수 있다.

조성물 중 부형제 성분은 전형적으로 벤질 알코올 (레무테포르핀과 같은 그린 포르피린에 대한 용매), DGME(디에틸린 글리콜 모노에틸 에테르), 이소프로필 알코올 또는 이들의 조합과 같은 감광제에 대한 하나 이상의 용매를 포함한다. 일부 구체예에서, 벤질 알코올은 예컨대 5중량%, 6중량%, 7중량%, 8중량%, 9중량%, 10중량%, 11중량%, 12중량%,13중량%, 14중량%, 15중량%, 20중량%, 25중량%, 30중량%, 35중량%, 40중량%, 45중량%, 50중량% 등과 같이 약 1중량% 내지 약 50중량% 이상, 약 1중량% 내지 약 40중량%, 약 1중량% 내지 약 30중량%, 약 1중량% 내지 약 20중량%, 약 5중량% 내지 약 50중량% 또는 약 20중량% 내지 약 50중량% 사이 범위의 농도로 존재할 수 있다. 일부 구체예에서, 벤질 알코올은 약 20중량% 초과, 약 20중량% 내지 약 50중량%, 약 25중량% 내지 약 50중량%, 약 30중량% 내지 약 50중량%, 약 40중량% 내지 약 50중량%, 약 45중량% 내지 약 50중량% 등과 같은 양으로 존재할 수 있다. 일 구체예에서, 벤질 알코올은 약 10중량%, 약 39.8중량%, 약 46.9중량% 또는 약 49.6중량% 존재한다. 본 발명에 따른 다른 측면에서, 벤질 알코올 용매는 35중량% 내지 50중량%일 수 있다. 다른 측면에서, 벤질 알코올 용매는 40중량% 내지 50중량% 또는 45중량% 내지 50중량%일 수 있다.

일부 구체예에서, DGME는 15중량%, 16중량%, 17중량%, 18중량%, 19중량%, 20중량%, 21중량%, 22중량%, 23중량%, 24중량%, 25중량%, 26중량%, 27중량%, 28중량%, 29중량%, 30중량%, 31중량%, 32중량%, 33중량%, 34중량%, 35중량% 및 36중량%와 같이 약 5중량% 내지 약 50중량% 또는 이상, 약 10중량% 내지 약 40중량%, 또는 약 15중량% 내지 약 35중량% 사이 범위의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 일 구체예에서, DGME는 약 17.5중량%, 약 16.7중량%, 약 20중량%, 또는 32중량%로 존재한다. 일 측면에서, DGME는 약 15중량% 내지 약 20중량% 사이의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다. 일 측면에서, DGME는 약 17.5중량% 내지 약 22.5중량% 사이의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 일 측면에서, DGME는 약 16.7중량% 내지 약 22.5중량% 사이의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다. 일 측면에서, DGME는 약 17.5중량% 내지 약 32중량% 사이의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 일 측면에서, DGME는 약 16.7중량% 내지 약 20중량% 사이의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다.

일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 약 30중량% 내지 약 85중량% 또는 이상 범위의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 다른 구체예에서, 이소프로필 알코올은 약 40중량% 내지 약 70중량% 범위의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다. 또 다른 측면에서, 이소 프로필 알코올은 약 50중량% 내지 약 60중량% 범위의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 또 다른 측면에서, 이소프로필 알코올은 약 30중량% 내지 약 40중량% 범위의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다. 일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 31중량% 또는 32중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 33중량% 또는 34중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 35중량% 또는 36중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 37중량% 또는 38중량%로 존재한다. 또 다른 구체예에서, 이소프로필 알코올은 39중량% 또는 40중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 이소프로필 알코올은 41중량%, 42중량%, 43중량%, 44중량%, 45중량%, 46중량%, 47중량%, 48중량%, 49중량%, 50중량%, 51중량%, 52중량%, 53중량%, 54중량%, 55중량%, 56중량%, 57중량%, 58중량%, 59중량% 또는 60중량%로 존재한다. 일 구체예에서, 이소프로필 알코올은 약 33.3중량%, 약 35.2중량%, 약 39.8중량% 또는 약 49중량%로 존재한다.

일부 구체예에서, 아세톤은 0중량% 내지 약 10중량% 또는 이상, 약 2중량% 내지 약 10중량% 범위의 농도로 부형제 성분에 존재할 수 있다. 일부 구체예에서, 올레일 알코올은 0중량% 내지 약 6중량% 이상 또는 2중량% 내지 5중량% 범위의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 일 구체예에서, 올레일 알코올은 5중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 폴리소르베이트 80은 0중량% 내지 약 1중량% 이상 또는 약 0.25중량% 내지 약 0.75중량% 범위의 농도로 희석 성분에 존재할 수 있다. 일 구체예에서, 폴리소르베이트 80은 0.5중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 메틸 살리실레이트는 0중량% 내지 약 2중량% 이상, 약 0.5중량% 내지 약 1.5중량% 또는 약 0.075중량% 내지 약 1.25중량% 범위의 농도로 희석 성분에 존재한다. 일 구체예에서, 메틸 살리실레이트는 약 1.0중량%로 존재한다. 일부 구체예에서, 멘솔은 0중량% 내지 약 6중량% 이상, 약 1중량% 내지 약 5중량% 또는 약 2중량% 내지 약 3중량% 범위의 농도로 부형제 성분에 존재한다. 일 구체예에서, 멘솔은 2.5중량%로 존재한다.

감광제에 대한 기타 용매 및 부형제는 또한 DMOS(디메틸설폭사이드), 폴리에틸렌 글리콜(PEG), PEG 유도체, 글리콜 에테르, 프로필렌 글리콜, 폴리소르베이트(예, Tween^®), 지방족 알코올, 방향족 알코올, 글리세롤, 오일, 계면 활성제, 글루코사이드, 트리에틸렌 글리콜, 테트라에틸렌 글리콜, 펜타에틸렌 글리콜, 헥사에틸렌 글리콜, 셉타틸렌 글리콜, 옥타에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 모노- 및 디-에스테르 지방 및 지방산(예를 들면,프로필렌 글리콜 모노카프릴레이트, 프로필렌 글리콜모노라우레이트), 글리세롤, 미네랄 오일, 라놀린, 바세린 또는 피부에 적용하기 적합한 다른 석유 제품, 매크로골(macrogols), 매크로골글리세라이드 또는 폴리에틸렌 글리콜 글리세라이드 및 지방산 에스테르(예를 들면, 스테아로일 매크로골글리세라이드, 올레일 매크로골글리세라이드, 라우로일 매크로골글리세라이드, 리놀레일 매크로골글리세라이드), 에톡실화 피마자유(예를 들면, 크레모포르(Cremophor), 폴리옥실 수소화 피마자유), C₆~C₃₀ 트리글리세리드, 천연오일, 글루코사이드(예를 들면, 세테아를 글루코사이드(cetearl glucosides) 및 계면 활성제)를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.09중량% 내지 0.11중량%의 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 31.9중량% 내지 약 32.1중량%의 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 4.95중량% 내지 약 5.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 53.8중량% 내지 약 54중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.1중량, 벤질 알코올은 32중량%, 및 희석 성분은 5중량%의 DGME 및 53.9중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.065중량% 내지 0.085중량%의 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 31.9중량% 내지 약 32.1중량%의 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 4.95중량% 내지 약 5.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 53.825중량% 내지 약 54.025중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.075중량%, 벤질 알코올은 32중량%, 및 희석 성분은 5중량%의 DGME 및 53.925중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.09중량% 내지 0.11중량%의 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 9.9중량% 내지 약 10.1중량%의 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 31.95중량% 내지 약 32.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 48.8중량% 내지 약 49중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.1중량%, 벤질 알코올은 10중량%, 및 희석 성분은 32중량%의 DGM 및 48.9중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.065중량% 내지 0.085중량%의 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 9.9중량% 내지 약 10.1중량%의 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 31.95중량% 내지 약 32.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 48.825중량% 내지 약 49.025중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.075중량%, 벤질 알코올은 10중량%, 및 희석 성분은 32중량%의 DGME 및 48.925중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.04중량% 내지 0.06중량%의 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 9.9중량% 내지 약 10.1중량%의 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 31.95중량% 내지 약 32.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 48.85중량% 내지 약 49.05중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.05중량%, 벤질 알코올은 10중량%, 및 희석 성분은 32중량%의 DGME 및 48.95중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.11중량% 내지 0.13중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 11.8중량% 내지 약 12중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 22.45중량% 내지 약 22.55중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 57.9중량% 내지 약 58.1중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.12중량%, 벤질 알코올은 11.9중량%, 및 희석 성분은 22.5중량%의 DGME 및 58중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.11중량% 내지 0.13중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 11.9중량% 내지 약 12.1중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 22.75중량% 내지 약 22.85중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 58.5중량% 내지 약 58.7중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.12중량%, 벤질 알코올은 12중량%, 및 희석 성분은 22.8중량%의 DGME 및 58.6중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.12중량% 내지 0.14중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 12.7중량% 내지 약 12.9중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 24.35중량% 내지 약 24.45중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 62.6중량% 내지 약 62.8중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.13중량%, 벤질 알코올은 12.8중량%, 및 희석 성분은 24.4중량%의 DGME 및 62.7중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.33중량% 내지 0.35중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 48.66중량% 내지 약 48.86중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 16.89중량% 내지 약 16.99중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 33.86중량% 내지 약 34.06중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.34중량%, 벤질 알코올은 48.76중량%, 및 희석 성분은 16.94중량%의 DGME 및 33.96중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.39중량% 내지 0.41중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 39.7중량% 내지 약 39.9중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 19.95중량% 내지 약 20.05중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 39.7중량% 내지 약 39.9중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.4중량%, 벤질 알코올은 39.8중량%, 및 희석 성분은 20중량%의 DGME 및 39.8중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.49중량% 내지 0.51중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 49.7중량% 내지 약 49.9중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 24.85중량% 내지 약 24.95중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 24.8중량% 내지 약 25중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.5중량%, 벤질 알코올은49.8중량%, 및 희석 성분은 24.9중량%의 DGME 및 24.9중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.39중량% 내지 0.41중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 39중량% 내지 약 39.2중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 19.45중량% 내지 약 19.55중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 31.2중량% 내지 약 31.4중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.4중량%, 벤질 알코올은 39.1중량%, 및 희석 성분은 19.5중량%의 DGME 및 31.3중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.345중량% 내지 0.365중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 46.85중량% 내지 약 47.05중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 17.49중량% 내지 약 17.59중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 35.06중량% 내지 약 35.26중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.355중량%, 벤질 알코올은 46.95중량%, 및 희석 성분은 17.54중량%의 DGME 및 35.16중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.365중량% 내지 0.385중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 49.53중량% 내지 약 49.73중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 16.62중량% 내지 약 16.72중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 33.23중량% 내지 약 33.43중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.375중량%, 벤질 알코올은 49.63중량%, 및 희석 성분은 16.67중량%의 DGME 및 33.33중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물은 0.344중량% 내지 0.364중량% 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하는 그린 포르피린인 감광제와 약 46.788중량% 내지 약 46.988중량% 농도로 벤질 알코올을 포함하는 용매를 갖는 감광 성분, 및 약 17.667중량% 내지 약 17.767중량%의 농도로 존재하는 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)와 약 34.94중량% 내지 약 35.14중량%의 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 레무테포르핀을 포함하는 감광제는 0.354중량%, 벤질 알코올은 46.888중량%, 및 희석 성분은 17.717중량%의 DGME 및 35.04중량%의 IPA의 농도로 존재할 수 있다.

조합된 2-성분(two-components) 용액의 추가적인 구체예는 0.10중량% 농도의 레무테포르핀, 10.0중량% 농도의 벤질 알코올, 48.9중량% 농도의 이소프로필 알코올, 32중량% 농도의 DGME, 5.0중량% 농도의 올레일 알코올, 2.5중량% 농도의 멘솔, 1.0중량% 농도의 메틸 살리실레이트, 및 0.50중량% 농도의 폴리소르베이트 80을 포함한다. 추가 구체예는 최종 농도(w/w)로 0.30중량%의 레무테포르핀, 49.7중량% 농도의 벤질 알코올, 33.0중량%의 이소프로필 알코올, 및 17.0중량% 농도의 DGME를 포함한다. <참고: Re Delphine's comment, 이전 문장은 표 38에서 0.3중량% 구성 용액, LTS를 설명하기 위한 것이다. 이는 TK1과 동일할 수 있고, 본 명세서 어디서든 언급될 수 있지만, 여기서 이를 반복해서 손해 될 건 없다. 새로운 제형과 관련된 기존의 일부 제형이 어떠한지 정확히 이해하기는 어렵고, 따라서 주의 측면에서 반복적인 경우라도 모든 새로운 정보를 추가하였다. 본 출원 명세서가 매우 반복적일지라도, 특허 심사관이 본 발명을 쉽게 이해할 수 있게 되기를 바란다.>

본 발명에 따른 구체예에서, 피지선에 감광제를 국소화하기 유용한 약제학적 조성물은 54.39중량%의 농도로 존재하는 이소프로필 알코올, 35.60중량%의 농도로 존재하는 DGME, 5.56중량%의 농도로 존재하는 올레일 알코올, 2.78중량%의 농도로 존재하는 멘솔, 1.11중량%의 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트, 및 0.56중량%의 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 상기 희석 성분은 0.1중량%의 레무테포르핀을 포함하는 조합 용액(combined solution)을 수득하기 위하여, 1.00중량% 농도의 레무테포르핀 및 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 레무테포르핀 감광 성분과 혼합될 수 있다.

추가 구체예에서, 약제학적 조성물은 28.55중량%의 농도로 존재하는 벤질 알코올을 포함하는 희석 성분, 47.15중량%의 농도로 존재하는 이소프로필 알코올 및 24.30중량%의 농도로 존재하는 DGME를 포함할 수 있다. 상기 희석 성분은 0.3중량%의 레무테포르핀을 포함하는 조합 용액을 수득하기 위하여, 1.00중량% 농도의 레무테포르핀 및 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 레무테포르핀 감광 성분과 혼합될 수 있다.

추가 구체예에서, 약제학적 조성물은 66.00중량%의 농도로 존재하는 이소프로필 알코올을 포함하는 희석 성분, 및 34.00중량%의 농도로 존재하는 DGME를 포함할 수 있다. 상기 희석 성분은 0.3중량%의 레무테포르핀을 포함하는 조합 용액을 수득하기 위하여, 0.60중량% 농도의 레무테포르핀 및 99.40중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 레무테포르핀 감광 성분과 혼합될 수 있다.

추가 구체예에서, 약제학적 조성물은 54.39중량%의 농도로 존재하는 이소프로필 알코올, 35.60중량%의 농도로 존재하는 DGME, 5.56중량%의 농도로 존재하는 올레일 알코올, 27.8중량%의 농도로 존재하는 멘솔, 1.11중량%의 농도로 존재하는 멘솔 살리실레이트, 및 0.56중량%의 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 포함하는 희석 성분을 포함할 수 있다. 상기 희석 성분은 0.1중량%의 레무테포르핀을 포함하는 조합 용액을 수득하기 위하여, 1.00중량% 농도의 레무테포르핀 및 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하는 레무테포르핀 감광 성분과 혼합될 수 있다.

일부 구체예에서, 제형 조성물은 농화제, 겔화제 등과 같은 점도 강화제의 상당량을 포함할 필요는 없다. 이러한 제형 조성물은 20℃에서 50센티포이즈(cps) 미만의 점도를 갖는다. 필요하거나 원하는 경우, 제형 조성물은 고분자량 폴리에틸렌 글리콜, (하이드록시 프로필 셀룰로오스 또는 에틸 셀룰로오스와 같은) 셀룰로오스, 아크릴산계 중합체(카보폴 중합체 또는 카보머), 알릴 수크로오스 또는 알릴펜타에리트리톨(카보폴 호머폴리머)과 가교결합된 아크릴산계 중합체, 장쇄(C10~C30) 알킬아크릴레이트에 의해 변성되고, 알릴펜타에리트리톨(카보폴 코폴리머)와 가교결합된 아크릴산계 중합체, 폴록사머 (또한, 플루로닉스로 알려진 블록 중합체, 예를 들면, 폴록사머 124, 186, 237, 338, 407 등), 왁스류(파라핀, 글리세롤 모노스테아레이트, 디에틸렌글리콜 모노스테아레이트, 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 글리콜 스테아레이트), 경질 지방(예를 들면, 포화된 C8~C18 지방산 글리세라이드), 산탄검, 폴리비닐 알코올, 고체 알코올 또는 이들의 혼합물과 같은 점도 강화제의 첨가에 의해 점도가 증가될 수 있다. 그러나, 언급한 바와 같이, 점도 조절제를 사용할 때, 피지선에 감광제의 전달을 방해하는 양으로 사용하지 않도록 주의를 기울여야 한다. 본 명세서에 예시된 특정 구체예에서, 임의의 점도 조절제를 추가하지 않는 것이 바람직하다.

특정 측면에서, 부형제의 농도는 일반적으로 U.S.FDA 비활성 성분 지침서(Inactive Ingredient Guide)(IIG)에 나열된 최대 레벨 미만이 되도록 제조될 수 있다. 예로서, 2013년 4월 13일자 국소용 예시적 비활성 성분들에 대한 IIG 레벨은 하기 표 1에 기재된 것들을 포함하지만, 이들에 한정되지는 않는다. 그러나, 당업자는 이러한 레벨이 개정될 수 있음을 이해한다.

표 1: 예시적인 비활성 성분

과포화된 감광제 제형은 다수의 방법으로 이루어질 수 있다. 일 구체예에서, 감광제는 (가열 또는 비가열로) 감광제용 양용매(good solvent)에 용해된 다음, 상기 감광제에 덜 가용성인 다른 부형제들이 추가된다. 또 다른 구체예에서, 감광제와 용매(들)의 현탁액, 및 임의의 다른 부형제들은 용매(들)에서 용해도를 초과하는 다량의 감광제가 완전히 용해될 때까지 가열될 수 있다. 또 다른 구체예에서, 감광제는 에탄올, 물, 프로판올, 이소프로판올 또는 당업계에 공지된 기타 휘발성 액체와 같은 하나 이상의 휘발성 성분을 갖는 하나 이상의 용매(들)에 포화 용해도 이하로 첨가된다. 휘발성이 낮은 성분들의 과포화 상태를 만들기 위해, 상기 휘발성 성분들은 증발된다. 예를 들면, 여드름 치료를 위한 비포화된 감광제 제형은 휘발성 성분을 포함하는 부형제들로 제조될 수 있다. 감광제 제형이 환자의 피부에 도포될 때, 휘발성 성분의 일부는 증발되고, 그 자리에서 과포화 용액이 생성된다. 또 다른 구체예에서, 과포화 용액은 하나 이상의 휘발성 성분들을 갖는 부형제들로 제조된 다음, 휘발 성분의 증발로 상기 용액이 환자의 피부에 도포될 때, 추가로 과포화가 발생한다.

제형의 장기 안정성

레무테포르핀의 과포화 용액은 적어도 4시간, 8시간, 12시간, 24시간, 32시간, 48시간 또는 그 이상동안 물리적으로 안정하다(즉, 레무테포르핀은 용액으로부터 침전이 시작되지 않음)는 것을 발견하였다. 제형 조성물에서 원하는 농도의 감광제가 포화 용해도를 초과하고, 조성물의 장기간의 안정/보관 수명(예컨대 1~2년)을 바란다면, 구성 성분들이 개별적으로 저장되고 사용 전에 혼합되는 두-성분 제형(또는 복합-성분 제형)을 제공하는 것이 유리할 수 있다. 또한, 별도의 성분 바이알들은 그 자체는 과포화되지 않지만, 별도의 성분들이 함께 혼합되는 경우 과포화 용액을 제공하는 것이 유리할 수 있다.

따라서, 다른 구체예에서, 감광 성분을 포함하는 용액과, 부형제 성분을 포함하고 감광제의 용해도가 낮은 제 2의 용액을 혼합함으로써 과포화 용액이 제조된다. 본 발명의 이러한 측면은 감광제를 포함하는 감광 성분, 및 이들과 관련되지만 이들로부터 분리된 부형제 성분을 피지선에 국소화하기에 유용한 약제학적 조성물을 제공하고, 상기 감광제는 혼합시 과포화 용액을 형성하기에 충분한 양으로 존재하고, 상기 감광제는 적어도 4시간, 8시간, 12시간, 24시간, 32시간, 48시간 또는 그 이상의 기간 동안 약제학적으로 허용할 수 없는 정도로 용액으로부터 침전되지 않는다. 바람직하게는, 상기 두 성분은 혼합되며, 따라서 예를 들면 부드러운 진탕(gentle shaking), 교반(stirring), 또는 소용돌이(swirling)에 의해 용이하게 조합될 수 있다.

관련된 측면에서, 본 발명은 또한 두 액체 상을 포함하는 2-성분 약제학적 조성물을 제공하는데, 여기서 액체 중 적어도 하나는 그 액체에 용해되는 감광제를 포함하고, 두 액체상은 혼합되고, 제 1 액체상 및 제 2 액체상은 감광제에 대해 상이한 용해도를 가지며, 각 액체상에서 감광제의 농도는, 두 액체상이 조합될 때, 액체 혼합액 내에서의 총 감광제 농도가 액체 혼합액 내 감광제의 용해도보다 더 큰 정도가 되고, 생성된 액체 혼합액은 감광제로 과포화된다. 다른 구체예에서, 감광제는 액체 용액보다는 고체 상으로 제공된다. 감광제 고체는 제 2의 액체상과 감광제의 혼합 이전에 또는 동시에 용매에 용해된다. 고체 감광제는 용해될 시간을 줄이기 위해 비정질로 만들어지거나 미세화될 수 있다.

일부 구체예에서, 2 성분 제형은 DGME와 함께 또는 DGME 없이, 벤질 알코올에 용해되는 레무테포르핀을 포함하는 제 1 감광 성분을 포함한다. 일부 구체예에서, 2 성분 제형은 DGME 및/또는 이소프로필 알코올 및 선택적으로 벤질 알코올을 포함하는 제 2의 희석 성분을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 희석 성분은 추가적으로 올레일 알코올, 멘솔, 메틸 살리실레이트 또는 폴리소르베이트 80을 포함한다. 광괌각제 성분 및 희석 성분의 구성성분들의 농도는, 두 성분이 조합될때, 구성성분들의 최종 농도가 레무테포르핀, 벤질 알코올, DGME, 이소프로판올, 올레일 알코올, 멘솔, 메틸 살리실레이트, 및 폴리소르베이트 80에 대해 상기에서 제공된 농도 범위 내가 되도록 조절된다.

감광 성분에서 감광제 농도는 용매내에서 포화 용해도 이상에서부터 그 이하까지의 범위일 수 있다. 벤질 알코올에 용해된 레무테포르핀을 포함하는 감광 성분에 대해서, 가열에 따른 겉보기(apparent) 용해도는 약 1.0중량% 내지 2.5중량% 범위 내이다. 예로서, 일 구체예에서, 감광 성분은 벤질 알코올 중 1중량% 레무테포르핀 용액을 포함하고, 사용하기 전에 제형 조성물에서 약 0.1중량%의 레무테포르핀의 최종 농도를 제공하기 위해 대략 1 대 10의 비율로 희석 성분과 함께 혼합된다. 또 다른 실시에에서, 감광 성분은 벤질 알코올 중 2중량% 레무테포르핀 용액을 포함하고, 사용하기 전에 제형 조성물에서 약 0.2중량%의 레무테포르핀의 최종 농도를 제공하기 위해 대략 1 대 10의 비율로 부형제 성분과 함께 혼합된다(또한, 유사한 최종 생성물은 1중량% 레무테포르핀 용액을 포함하는 감광 성분과 부형제 성분을 1 대 5의 비율로 혼합함으로써 수득될 수 있다). 따라서, PDT에 사용되어질 제형 중 감광제와 부형제의 원하는 최종 농도를 제공하기 위해 두 성분의 농도를 조정하고 조작할 수 있음을 알 수 있다.

일 측면에서, 본 발명은 다음의 단계를 포함하는 약제학적 조성물의 제조 방법을 제공한다: (a) 용매에 용해된 감광제를 포함하는 감광 성분을 제공하는 단계; (b) 감광 성분과 혼합가능한(miscible) 희석 성분을 제공하는 단계; (c) 혼합된 용액을 제공하기 위해 일정량의 감광 성분과 일정량의 희석 성분을 혼합하는 단계. 상기 혼합 용액은 감광제로 과포화된다. 편의상, 감광 성분과 희석 성분은 글라스 바이알과 같은 적합한 별도의 용기에 제공될 수 있다. 감광 성분은 레무테포르핀과 같은 그린 포르피린을 포함하고, 용매는 벤질 알코올을 포함할 수 있으며, 양자는 상기 설명된 농도로 포함될 수 있다. 희석 성분은 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME) 및 이소프로필 알코올(IPA)을 포함할 수 있으며, 양자는 상기 설명된 농도로 포함될 수 있다. 임의로, 희석 성분은 상기 설명된 농도로 벤질 알코올을 포함할 수 있다.

임상적으로 유용하기 위해서, 환자에게 적용될 때까지 감광제는 약제학적 조성물로부터 침전되지 않아야 한다. 바람직하게는, 감광 성분이 희석 성분과 혼합된 후에 적어도 약 30초, 약 1분, 약 5분, 약 15분, 약 30분, 약 45분 또는 약 한 시간 또는 그 이상 동안 약제학적 조성물로부터 감광제가 침전되지 않는다. 다른 구체예에서, 감광 성분을 부형제 성분과 혼합한 후에, 적어도 1시간, 적어도 약 2시간, 적어도 약 3시간, 적어도 약 4시간, 적어도 약 5시간, 적어도 약 6시간, 적어도 약 7시간, 적어도 약 8시간, 적어도 약 9시간, 적어도 약 10시간, 적어도 약 11시간 또는 적어도 약 12시간 또는 그 이상동안 약제학적 조성물로부터 감광제가 침전되지 않는다. 일부 구체예에서, 감광 성분을 부형제 성분과 혼합한 후에, 적어도 약 16시간, 적어도 약 24시간, 적어도 약 48시간, 적어도 약 3일, 적어도 약 5일, 적어도 약 7일, 적어도 약 9일, 적어도 약 11일, 적어도 약 14일, 적어도 약 3주, 또는 적어도 약 4주까지 동안 약제학적 조성물로부터 감광제가 침전되지 않는다. 다른 구체예에서, 감광 성분을 부형제 성분과 혼합한 후에, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 4개월, 적어도 약 5개월 또는 적어도 약 6개월 동안 감광제는 계속 용해되어 있을 수 있다. 또 다른 구체예에서, 감광 성분을 희석 성분과 혼합한 후에 적어도 약 1년 또는 적어도 약 2년동안 감광제는 계속 용해되어 있을 수 있다.

본 발명에서 제공되는 약제학적 조성물로부터 감광제가 침전되기 시작할 수 있는 시간 및 그 결과로 사용 전에 얼마나 오랫동안 상기 조성물이 유지될 수 있는지의 시간을 결정하기 위해서, 조성물을 다음과 같이 테스트할 수 있다. 감광 성분과 희석제 성분을 조합한 후에 다양한 시점에서 조성물 샘플들을 취한다. 임의의 침전물을 제거하기 위해, 예를 들면, 한정되지는 않으나 0.22㎛ 필터를 포함하는 적절한 크기의 필터를 통해 샘플의 절반을 여과한다. 감광제의 함량 또는 농도에 대해, 예를 들면, HPLC를 사용하여 여과된 용액을 분석한다. 만약 용액이 안정적이고, 감광제가 더 침전되지 않는다면, 그 다음 여과된 용액 중 감광제의 농도는 실험 오차 내에서, 여과되지 않은 용액 중 감광제의 농도와 거의 동일해야 한다(이 방법은 본 발명의 제형에 레무테포르핀의 안정성이 적어도 4시간, 8시간, 12시간, 24시간, 32시간, 48시간 또는 그 이상임을 증명하기 위해 이하의 실험에서 수행된다). 여과된 샘플 및 여과되지 않은 샘플 중 감광제의 농도가 실험 오차 내에서 거의 동일하지 않다면, 약제학적으로 허용할 수 없는 정도의 침전이 발생한다고 간주될 수 있다.

약제학적 조성물의 성분들을 혼합한 다음, 감광제가 조성물에 계속 용해되어 있는 시간 내에 환자에게 도포해야 한다. 일부 구체예에서, 상기 성분들은 약 1분 내지 약 24시간 이내에 유용하게 조합된다. 일 구체예에서, 상기 성분들은 사용하기 직전에 조합된다. 또 다른 구체예에서, 상기 성분들은 약 30초, 약 1분, 약 5분, 약 15분, 약 30분, 약 45분 또는 한 시간 이내에 유용하게 조합된다. 다른 구체예에서, 상기 성분들은 사용되기 약 1시간 내지 약 12시간 이내, 예컨대 약 1, 약 2, 약 3, 약 4, 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9, 약 10, 약 11, 약 12시간 이내에 유용하게 조합된다. 일부 구체예에서, 상기 성분들은 약 12시간 내지 24시간 이내, 예컨대 약 12, 약 13, 약 14, 약 15, 약 16, 약 17, 약 18, 약 19, 약 20, 약 21, 약 22, 약 23, 약 24시간 이내에 유용하게 조합된다. 일부 구체예에서, 상기 성분들은 약 3시간 내지 4시간 이내에 유용하게 조합된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 감광제를 포함하는 감광 성분을 함유하는 제 1 용기(container), 제 1 용기내의 용매와 혼합가능한 부형제 성분(들)을 함유하는 하나 이상의 용기, 및 상기 용기들의 내용물을 조합하고, 조합된 내용물을 환자의 피부에 도포하여, 하나 이상의 피부 질환을 치료하기 위한 PDT를 수행하기 위한 일련의 지침을 포함하는 키트를 포함 및 제공한다. 일 구체예에서, 상기 용기들은, 예컨대 2개 이상의 바이알과 같이, 물리적으로 분리된다. 또 다른 구체예에서, 감광 성분들과 희석제 성분(들)은 이들 성분들이 초기에 서로 물리적으로 분리될 수 있게하는 2개 이상의 챔버 및 상기 챔버들 사이의 접촉을 허용하는 방출 시스템을 갖는 단일 용기내에 포장된다.

감광제

본 명세서서 사용되는 “감광제” 또는 “감광화 작용제” 또는 “감광화 약물”은 가장 일반적으로 가시광선 스펙트럼에서 전자파를 흡수하여, 이를 가장 일반적으로 활성 산소종 및/또는 열 에너지와 같은 또 다른 형태의 에너지로 방출하는 화합물을 의미한다. 바람직하게는, 상기 화합물은 인체에 무독성이거나 무독성 조성물로 제형화될 수 있다. 바람직하게는, 광분해시에 생성되는 화합물 또한 무독성이다. 소수성 및 친유성 감광제가 분배에 더 효과적이고, 피지를 통해 확산되어 피지선에 국소화될 수 있기 때문에, 소수성 및 친유성 감광제는 본 발명의 조성물 및 방법에 사용하기에 특히 유용하다.

특히, 감광제 중 효능군(potent group)은, 그 전체내용이 참고문헌으로 본 명세서에 통합되는 미국 특허 제5,171,749호에 상세히 기술된 그린 포르피린으로 알려져 있다. 용어 “그린 포르피린”은 모노-하이드로벤조포르피린을 수득하기 위해 디엘스-앨더(Diels-Alder)형 반응으로 알킨과 포르피린 핵을 반응시켜 얻어지는 포르피린 유도체를 지칭한다. 이러한 결과물인 매크로피롤릭(macropyrrolic) 화합물들은 벤조포르피린 유도체(BPDs)로 불리며, 다양한 구조 유사물질들을 갖는 합성 클로린-유사 포르피린들이며, 이들은 미국 특허 제5,171,749호에 나타나 있다.

일반적으로, 그린 포르피린은, 프로토포르피린-IX 고리 시스템(고리 A 및 B)에 존재하는 두 개의 이용가능한 컨쥬게이션된 비방향족 디엔 구조 중 단지 하나에서 반응을 촉진하는 조건하에서, 아세틸렌 유도체와 프로포르피린의 디엘스-앨더 반응에 의해 얻어진 테트라피롤릭 포르피린 유도체 군으로부터 선택된다. 고리 시스템의 중앙에 있는 하나 또는 두 개의 수소를 금속 양이온으로 치환한 그린 포르피린의 금속화 형태 또한 본 발명의 조성물 및 방법의 실시에 사용될 수 있다.

본 발명에 유용한 그린 포르피린 화합물의 제조는 미국 특허 제5,095,030호에 상세히 기술되어 있고, 상기 특허는 그 전체가 본 명세서에 통합된다. 그린 포르피린의 비제한적인 예로는, 벤조포르피린 디에스테르 디-애시드(BPD-DA), 벤조포르피린 디에스테르 모노-애시드 고리 A(BPD-MA, 베르테포르핀으로 알려짐), 벤조포르피린 디에스테르 모노-애시드 고리 B(BPD-MB), 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 이들 화합물은 우수한 조직 침투 특성을 갖는 약 692nm 파장의 빛을 흡수한다. 특히 미국 특허 제5,929,105호에 기재된 에틸렌 글리콜 에스테르로 알려진 그린 포르피린 군이 본 발명에 사용하기에 유용하다. 상기 미국특허에서 A-EA6으로 언급된 예시적인 감광제 화합물은 일반명 레무테포르린으로도 알려져 있고, 다음의 화학 구조를 갖는다.

또한, 감광제는 피지선 또는 피지선 성분들에 용이하게 타겟팅하기 위해 다양한 리간드와 컨쥬게이션될 수 있다. 이러한 리간드는 면역 글로불린과 이들의 단편들뿐만 아니라 수용체-특이 펩타이드 및/또는 리간드를 포함한다. 비제한적인 리간드는 일반적으로 항체와 단일 클론 항체, 및 이들의 면역학적 반응 단편들을 포함한다.

그린 포르피린 감광제의 추가의 예로는 미국 특허 제5,282,255호, 제4,920,143호, 제4,883,790호, 제5,095,030호 및 제5,171,749호에 개시된 그린 포르피린 및 미국 특허 제5,880,145호 및 제5,990,149호에서 논의된 그린 포르피린 유도체를 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. 전형적인 그린 포르피린의 몇몇 구조는 상기 인용된 특허들에 나타나 있고, 또한 상기 특허들은 해당 화합물들의 제조를 위한 내용들도 상세히 제공한다.

프로-포르피린 델타-아미노레블린산(pro-porphyrin δ-aminolevulinic acid, 5-ALA)과 이의 유도체와 같은 전구 약물(pro-drug), 포르피린 및 포르피린 유도체, 예컨대, 클로린(chlorines), 박테리오클로린(bacteriochlorins), 이소바시테리오클로린(isobacyteriochlorins), 프탈로시아닌 및 나프탈로시아닌, 및 기타 테트라- 및 폴리-매크로시클릭 화합물들, 및 관련된 화합물들(예를 들면, 피로페오포르비드(pyropheophorbides), 사피린(sapphyrins), 및 텍사프린(texaphrins)) 및 (주석, 알루미늄, 아연, 루테튬과 같은, 그러나 이에 한정되지 않는) 금속 착물들을 포함하여 다양한 다른 합성 감광제들 및 자연적으로 발생되는 감광제들이 사용될 수 있지만, 이에 한정되지는 않는다. 테트라하이드로클로린(tetrahydrochlorines), 푸르푸린(purpurins), 포르피센(porphycenes) 및 페노티아지늄(phenothiaziniums)의 사용도 고려된다. 다른 적합한 감광제는 WO 97/1981, WO 99/45382 및 WO 01/40232에 기재된 유도체와 같은 박테리오클로로필을 포함한다. 하나의 박테리오클로로필은 파라듐-박테리오페오포비드 WST09(Tookad^TM)이다.

감광제는 프로포르피린 또는 포르피린, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 전구 약물의 몇 가지 예는 Levulan^TM 와 같은 아미노 레불린산 및 WO 02/10120에 기재된 바와 같은 아미노 레불린산 에스테르를 포함하고, Metvix^TM, Hexvix^TM, 및 Benzvis^TM을 사용할 수 있다. 디하이드로 또는 테트라-하이드로 포르피린의 일부 예는 EP 0337,601 또는 WO 01/6650에 기재되어 있고, Foscan^TM(테모포르핀(temoporfin))을 사용할 수 있다. 두 개 이상의 감광제의 조합이 본 발명의 조성물 및 방법에 사용될 수 있다. 감광 화학 물질의 일반적인 목록(nonexhastive list)은 Kreimre-Birnbaum, Sem. Hematol., 26:157~173(1989) 및 Redmond 등, Photoderm . Photobiol., 70(4):391~475(1999)에서 찾을 수 있고, 상기 두 문헌은 그 전체가 본 명세서에 참고문헌으로 통합된다.

빛 에너지 투여

인가된 적용된 감광제를 활성화하기 위해, 적합한 파장의 빛이 피부에 적용된다. 바람직하게는, 빛은 감광제의 흡수 피크 중 적어도 하나에 가까운 파장을 포함한다. 흡수 피크는 다양한 감광제에 따라 다르다. 예를 들면, 레무테포르핀이 감광제인 경우, 레무테포르핀이 약 688+/-1nm에서 흡수 피크를 가지면, 빛의 파장은 바람직하게는 688+/-1nm이거나 또는 약 688+/-1nm에 가깝다. 감광제가 ALA-메틸 에스테르(Metvix^TM)인 경우, 635nm에서 흡수 피크를 갖고, 사용되는 활성 에너지는 바람직하게는 635nm 또는 635nm에 가깝다. 감광제가 ALA(이하, 상표명 Levulan^TM로 입수 가능)인 경우, 417nm 및 630nm에서 흡수 피크를 갖고, 사용되는 활성 에너지는 바람직하게는 417nm 및/또는 639nm이거나 또는 417nm 및/또는 639nm에 가깝다.

활성 및 빛 에너지는 임의의 적절한 수단에 의해 제공될 수 있다. 일반적으로, 활성 에너지는 가시광선 공급원에 의해 제공된다. 빛 에너지 공급원은 레이저, 발광 다이오드(LED), 백열등, 형광등, U.V.램프 또는 이들의 조합을 포함하며, 이에 한정되지 않는다. 예시적인 빛 공급원(광원)은 발광 다이오드이다.

상업적으로 사용할 수 있는 광원은 CureLight^TM(Norway, Oslo, Photocure ASA 에서 구입 가능), BLU-U^TM(USA, Wilmington MA, DUSA Pharmaceuticals에서 구입 가능), PDT Laser(USA, MA, Andover, Diomed에서 구입 가능), Ceralas^TM(GERMAMY, Jena, Biolitec AG에서 구입 가능), Omnilux PDT^TM(UK, Birmingham, PhotoTherapeutics Ltd.에서 구입 가능), 및 Q-Beam^TM, SpectraLife^TM, 및 Quantamed^TM(USA, WI, Barneveld, Quantum Devices Inc.)을 포함한다.

일부 구체예에서, 빛은 적어도 일부 발광 다이오드(LEDs)에 의해 제공된다. 얼굴과 같은 굴곡진 표면을 조사하기 위해서, 미국 특허 제7,723,910호에 기재된 것과 같은 형상에 따라 구성된 광원을 사용하는 것이 편리할 수 있다. 여드름 치료를 위한 PDT는 본 발명의 일부 구체예에서 블루-광 광선 요법(Blu-light Phototherapy)과 조합될 수 있다. 따라서, 일부 구체예는 적색광(예컨대 600~750nm)과 청색광(예컨대, 390~450nm) 모두를 공급하는 LED 장치에 의해 전달되는 빛을 포함한다. 일부의 경우, 장치는 약 420nm 및 약 690nm에서 빛을 공급한다.

PDT 치료 중에 관리되는 빛 또는 활성 에너지 투여량은 선택된 감광제의 효능에 따라 달라질 수 있다. 그린 포르피린과 같은 높은 효능의 감광제에 있어서, 빛의 조사량은 비-제한적인 구체예로서 약 5 내지 약 400J/cm²의 범위 내, 보다 바람직하게는 약 25 내지 약 300J/cm²의 범위 내이다. 일부 구체예에서, PDT 치료에 사용되는 광 투여량은 약 25 내지 약 50J/cm², 약 50 내지 약 100J/cm², 약 100 내지 약 150J/cm²,약 150 내지 약 200J/cm², 약 200 내지 약 250J/cm², 약 250 내지 약 300J/cm², 약 300 내지 약 350J/cm², 약 350 내지 약 400J/cm², 약 400 내지 약 450J/cm², 약 450 내지 약 500J/cm², 약 500 내지 약 550J/cm², 또는 약 550 내지 600J/cm²의 범위 내이다. 광 투여량의 기타 비-제한적 구체예는 약 25, 약 50, 약 75, 약 100, 약 125, 약 150, 약 175, 약 200, 약 250 또는 약 300J/cm²의 투여량을 포함한다.

총 광 투여량은 방사선 공급원의 세기(또한 플루엔스율(fluence rate) 또는 방사 조도(irradiance)라고도 함) 및 조사 시간에 의해 결정된다. 방사선의 총 투여량이 선택되면, 적절한 기간 내에 치료가 완료될 수 있도록, 플루엔스율을 조절할 수 있다. 조사 또는 노광(light exposure) 시간은 통상적으로 약 10초에서 약 4시간까지 지속된다. 레무테포르핀과 같은 그린 포르피린에 있어서, 노광은 통상적으로 1분에서 2시간 사이, 보다 바람직하게는 약 5분에서 약 60분 사이로 지속된다. 일부 구체예에서 조사 시간은 약 1, 약 5, 약 10, 약 15, 약 25, 약 30, 약 35, 약 40, 약 45, 약 50, 약 55 또는 약 60분이다.

에너지 또는 광원의 세기는 일반적으로 600mW/cm² 이하이다. 특정 측면에서, 방사 조도는 약 10 내지 500mW/cm² 사이일 수 있다. 본 발명에 따른 다른 구체예에서, 방사 조도는 약 25 내지 약 100mW/cm² 사이일 수 있다. 일부 구체예에서, 방사 조도는 50mW/cm²이다. 다른 구체예에서, 방사 조도는 80mW/cm²이다. 다른 구체예에서, 고정된 플루엔스율 80mW/cm²에서 7분 49초 내지 31분 15초 사이로 조사 시간을 변화시킴으로써, 37.5J/cm² 내지 150J/cm² 사이로 광 투여량은 변화된다.

여드름 및 기타 과민 피지선 상태의 PDT 치료

본 발명은 또한 환자 피부의 환부에 치료적으로 효과적인 양의 본 발명의 감광제 조성물을 국소적으로 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 피지선 내에 국소화하게 두고, 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 환자의 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자 피부의 환부에서의 과민 피지선 장애를 치료하는 방법을 포함 및 제공한다. 일부 구체예에서, 과민 피지선 장애는 (보통 여드름(acne vulgaris)을 포함하는) 여드름, 지루 (또는 지성 피부), 지루성 피부염, 화농성한선염(hidradenitis suppurativa(acne inversa)), 및 피지선 증식이다. 일부 구체예에서, 환자는 여드름 및 지성 피부 모두를 가지고 있다.

본 발명은 또한 치료를 필요로 하는 환자의 발생 피부에 본 발명의 감광제 조성물의 치료적으로 효과적인 양을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 피지선 내에 국소화하게 두고, 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 환자의 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 피지선에 의한 피지 생성을 감소시키기 위한 방법을 포함 및 제공하고, 이에 의해 환자의 피지 분비율은 감소된다.

본 발명은 또한 본 발명의 감광제 조성물의 치료적으로 효과적인 양을 국소적으로 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 환자의 피지선 내에 국소화하게 두고, 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 환자의 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 여드름을 치료하는 방법을 포함및 제공한다.

본 발명은 또한 환자의 피지 세포(sebocytes)에 치료적으로 효과적인 양의 감광제를 전달하고, 충분한 시간 동안 감광제가 환자의 피지 세포 내에 국소화하게 두고, 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 피지 세포에 노출시키는 단계들을 포함하는, 여드름과 같은 과민성 피지선 장애를 앓고 있는 환자에게 있어서 피지 세포들을 제거(ablating)하기 위한 방법을 포함 및 제공한다.

치료될 수 있는 상태들은 감광제의 국소 제형에 적합한 모든 상태들을 포함한다. 비 제한적인 구체예로는 예컨대, 피부염, 건선, 악성 및 전-악성 피부 병변, 광선 각화증 및 과민성 피지선 장애와 같은 피부 상태들을 포함한다. 과민성 피지선 장애는 제한 없이, 여드름(acne vulgaris를 포함하는), 지루 (또는 지성 피부), 지루성 피부염, 화농성(hidradenitis), 한선염(suppurativa), 및 피지선 증식을 포함한다. 기타 신체 부위가 치료될 수 있지만, 여드름 및 지성 피부와 같은 상태는 통상적으로 얼굴, 가슴 및/또는 등에 영향을 미친다.

PDT 치료에서, 우선 피부는 바람직하게는 항균 세정제로 세정되고 건조된다. 피부는 피부 온도가 45℃에 도달할 때까지 또는 20분 동안 고정된 시간 동안 건조열(IR)로 처리될 수 있다. 이는 피지선에 감광제의 침투를 향상시킬 수 있다. 대안적으로, 피부는 또한 미세 연마술(microderm abrasion)로 처리될 수 있다. 감광제의 도포 전에 필요하다면, 피부는 (예를 들면, 아세톤 또는 이소프로필 알코올을 사용하여) 탈지될 수 있다.

일단 피부 표면이 깨끗하게 준비되면, 그 부위를 충분히 깨끗하게 한 다음, 선택된 제형의 감광제가 피부 표면의 환부에 적용된다. 감광제-함유 제형은 환자의 피지선에 감광제가 국소화하도록 허용하는 충분한 시간 동안 피부와 접촉한 상태로 유지된다. 감광제 제형의 종류 및 농도에 따라, 일반적으로 접촉 시간은 약 1분에서 약 24시간 사이 또는 그 이상일 수 있다. 바람직하게는, 감광제가 레무테포르핀과 같은 그린 포르피린인 경우, 제형은 약 1 내지 약 180분 동안 피부와 접촉된다. 예시적인 접촉 시간은 약 1, 약 5, 약 10, 약 20, 약 30, 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 110, 약 120, 약 130, 약 140, 약 150, 약 160, 약 170, 약 180분이다. 추가적인 예시적 접촉 시간은 약 3.5, 약 4, 약 4.5, 약 5, 약 5.5, 약 6, 약 6.5, 약 7, 약 7.5 또는 약 8시간이다. 그 다음, 여분의 제형은 바람직하게는 미지근한 물에 적신 깨끗한 거즈나 천으로 제거된다. 그 다음 전술한 바와 같이 조사가 적용된다. 환자의 최대 허용 용량(MTD)이 결정될 때까지, 광 투여를 증가시키는 치료법을 사용하는 것이 바람직할 수 있다. PDT에 따른 조사 부위의 고통 또는 홍반은 MTD가 초과되었다는 신호이다. 그 후에 그 사람은 MTD 또는 그 이하로 치료받을 수 있다.

필요에 따라, 여러 번 치료적 효과를 갖도록 치료가 반복될 수 있다. 반복되는 경우, 치료 빈도는 다를 수 있다. 예를 들면, 매일, 약 이틀, 약 일주일에 2번, 약 매주, 약 2주마다, 약 한 달에 두 번, 약 4주마다, 약 매달, 약 6주마다, 약 8주마다, 약 2달마다, 약 분기별, 약 1년에 2번, 또는 약 매년, 또는 기타 적절한 시간 간격으로 치료를 받을 수 있다. 피부 상태의 개선을 원하는 정도가 나타날 때까지 치료를 계속할 수 있다. 예를 들면, 여드름 병변의 총 수가 약 5%, 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80% 또는 약 90% 또는 그 이상 감소될 때까지, 치료는 반복될 수 있다. 또 다른 비제한적인 구체예를 수행하기 위해서, 피지 분비율이 약 5%, 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80% 또는 약 90% 또는 그 이상 감소될 때까지, 치료는 반복될 수 있다.

치료의 효능 확인

본 발명의 조성물 및 방법의 효능은 임의의 적합한 수단에 의해 결정될 수 있다. 대부분의 경우, 효능을 결정하기 위해, 숙련된 의사에 의해 인식되는 바와 같이, 피지선 장애 또는 기타 피부 질환의 단순 저하(simple decrease), 감소(reduction) 또는 개선이 사용될 수 있다. 따라서, 환자의 여드름, 지루, 지루성 피부염, 화농성한선염 또는 피지선 과증식의 개선과 같은 과민 피지선 장애의 개선은 효능의 지표로 사용될 수 있다.

비-제한적인 예로서 여드름 치료는 양적 및/또는 질적 데이터에 기초하여 효능이 결정될 수 있다. 병변의 총 수는 치료 시작 전에 하나 이상의 테스트 영역을 사전 규정(predefining)함으로써 평가될 수 있다. 병변의 수(비-염증, 염증 및 전체, 또는 개방 면포(open comedones), 폐쇄 면포, 구진(papules), 농포(pustules)와 결절(nodules))는 치료 전후 테스트 영역 내에서 수행된다. 시험 영역 내의 병변의 크기도 기록된다. 또한 시험 영역도 촬영된다. 시험 영역의 개수는 각 환자에 따라 선택되어 질 수 있고, 환자의 여드름 병변의 위치에 따라 시험 영역의 위치는 달라질 수 있다. 시험 영역은 초기 PDT 치료 첫주 이내, 일주일 후, 2주 후, 또는 한 달 또는 두 달 또는 기타 원하는 빈도로 평가될 수 있다. FDA에 의해 추천받은 하기 표 5에 나타낸 바와 같은 여드름에 대한 5점 조사관 종합 평가(IGA)와 같은 종합 평가 척도가 효능을 측정하는데 사용될 수 있다.

표 2. 조사자의 종합 평가( IGA ) 기준

피지 생성을 감소시키기 위한 PDT의 효능은 USA, TX, Dalls, Corporation CuDerm으로부터 이용가능하고, 그 목적을 위해 특별히 고안된 제품인 SebuTape^TM을 사용함으로써 측정될 수 있다. 본 발명의 실시예 9는 피지 배출을 정확히 측정하기 위해 SebuTape^TM을 사용하는 방법을 보여준다. SebuTape^TM 측정은 최초 PDT 치료의 첫주 이내, 일주일 후, 2주일 후, 또는 한 달 또는 2달 후에 또는 기타 원하는 빈도로 할 수 있다. 피지선의 수를 감소시키기 위한 PDT의 효능은 PDT 치료 후 생검(biopsies)을 채취하고, 이미지에서 PSU(피지선과 함께 또는 피지선 없는 모낭 구조)의 총 수를 결정하기 위한 오일 레드 O 염색(Oil Red O staining) 후, 지질-염색(피지선 포함) PSU의 수를 카운팅하는 조직 검사를 이용하여 측정될 수 있다. 이러한 과정은 본 발명의 실시예 3에 기재된다.

[ 실시예 ]

실시예 1. 다양한 용매 내에서 레무테포르핀의 용해도

각종 용매 조성물에서 레모테포르핀의 용해도는 표 3의 마지막 컬럼에 나타나 있다. 모든 값은 HPLC 분석에 의해 분석적으로 수득되었다.

용해도는 주로 벤질 알코올을 포함하는 용매계 제형에서 최대의 용해도를 나타내는 레무테포르핀에 대한 결과이다. 가열 후 벤질 알코올에 용해될 수 있는 레무테포르핀의 양은 대략 2.5중량%이다. 다른 용매의 첨가는 대략 도입되는 새로운 용매의 양만큼 용해도를 감소시킨다. 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)는 레무테포르핀을 용해하는 효율에 있어서 벤질 알코올의 약 20%이다.

표 3. 다양한 용매에서 레무테포르핀의 용해도

* 용매 명칭 아래의 값들은 용액 조성 중 용매의 중량%를 나타냄

실시예 2. 감광제 제형에서의 점도 증진제의 효과

생쥐의 피지선을 제거하는 PDT의 효능에 대한 레무테포르핀의 점도 증가의 영향을 평가하기 위해서, 감광제 조성물을 표 4에 나타낸 성분으로 제조하고, 688nm 적색광(50mW/cm²의 비율로 전달된 50J/cm² 또는 100J/cm²)에 노출되기 전에, 제모된 생쥐의 측면 피부에 30분 동안 도포하였다. 각 처리군은 5마리 동물로 구성된다.

표 4

피지선의 변화를 평가하기 위해, 생쥐는 PDT 후 72시간에 희생되었다. PDT 처리된 오른쪽 측면에 문신 포인트 내에서 전층 피부(Full-thickness skin)를 조심스럽게 절제하였다. 이러한 정사각형 조직의 상부 절반은 Neg-50^TM 동결용 포매제( cryo embedding medium)로 채워진 플라스틱 몰드에 넣어 액체 질소로 냉동하였다. 하부 절반은 18시간 동안 포르몰(formol) 아세틱 알코올에서 보존되었다. 표준 인-하우스 프로토콜에 의해 왁스로 처리될 때까지, 조직은 70% 알코올로 옮겨졌다. 필요하다면, 조직 내에 일반적인 조직학적 변화를 평가하기 위하여, 포르말린 고정 샘플은 표준 시약 (예컨대, 헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin))으로 순차적으로 염색되었다.

피지선 평가를 위하여, 냉동된 조직 샘플은 유리 슬라이드 위에 저온 유지 장치에서 8㎛ 섹션으로 절단되어, 10% 완충 포르말린에 즉시 고정되었다. 2개의 슬라이드 3세트가 세트 사이 약 200㎛ 거리로 각각의 블록으로부터 절단되었다. 각 세트로부터 1개의 슬라이드는 오일 레드 O(Oil Red O)로 염색된 다음 아크릴계 마운팅 매체(mounting medium)로 커버-슬립되어 준비되었다. 각 세트로부터 두 번째 슬라이드는 첫 번째 슬라이드가 손상되는 경우에 “백업”으로 사용되었다.

이미지는 디지털 카메라가 장착된 Olympus BX61 현미경에 탑재된 4× 대물렌즈를 이용하여 각의 단면으로부터 대표적인 부분들이 촬영되었다. 슬라이드들은 이미지 내의 PSU (피지선 있는 모낭 구조 또는 피지선 없는 모낭 구조)의 총 수를 카운팅하고, (피지선 함유) 지방-염색 PSU의 수를 카운팅하여 평가되었다. 슬라이드들은 두 개의 독립된 해독기에 의해 평가되었다. 결과는 도 1에 나타나 있다.

각 제형에 대해 조합된 비히클을 테스트하는데 필요한 생쥐의 수가 많기 때문에, 이 실험에서 대조군은 포함되지 않는다. 그러나, 일반적으로, 어린(naive) 생쥐 측면 피부에 대하여, 70~80%의 PSU가 검출 가능한 오일 레드 O-양성 피지선에 포함된다. 오일 레드 O-양성 피지선으로 PSU의 가장 낮은 수를 생성하는 가장 효과적인 조성물은 제형 LT-G-002(도 1)이다. 상기 제형은 점도 조절제를 포함하지 않는다. 평균적으로, LT-G-002 및 각각의 광 투여로 치료된 측면 피부에서의 PSU의 대략 30%가 오일 레드 O-양성 분비선을 포함한다. LTO-TG1를 이용한 PDT는 피지선 수에 대한 감소 효과가 유사하지만, 다소 낮다. 반대로, 제형 LT-G-001, LT-G-003, LT-G-004 또는 LT-G-005 (이들 모두는 점도 증진제로서 하이드록시-프로필 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 또는 이둘 모두를 포함)를 사용한 PDT로 치료된 생쥐의 피지선 수에는 거의 효과가 없었다. 따라서, 이러한 점도 증진제는 피지선에서 레무테포르핀의 국소화를 방해할 수 있다.

실시예 3. 점도 증진제가 결핍된 레무테포르핀 조성물에 의한, 생쥐 피지선 에 대한 다양한 PDT 광 투여의 효과

이 실험은 3가지의 다른 적색광 투여량에서 LT-G-002를 이용한 PDT의 효과와 (레무테포르핀 양의 2배를 포함하는) LTO-TG1의 효과를 비교한다. 각각의 레무테포르핀 국소 제형을 이용한 PDT는 대조 비히클과 100J/cm²의 적색광 투여로 치료된 생쥐에서 얻어진 결과와 비교하여, 20, 50 또는 100J/cm²의 적색광 투여량에서 피지선 수가 감소하는 효과를 나타내었다(도 2). 각각의 레무테포르핀 제형을 적용한 경우, 적색광 투여량 20J/cm² 보다는 50 및 100J/cm²에서 분비선 수에 대해 더 큰 효과가 얻어졌다.

실시예 4. 인간 모낭 및 피지선에서 레무테포르핀 국소화

인체 피부에서 레무테포르핀의 국소화를 위한 모델로는 오하이오 밸리 조직 은행(Ohio Vally Tissue Bank)으로부터 조달된 분절된 인간 사체 피부, NDRI(National Disease Research Interchange)로부터 조달된 신선한 (≤ 사후 24시간) 인체 피부를 이용하였다. 이 실험은 점도 증진제가 없는 레무테포르핀 국소 용액(LTS)과 레무테포르핀 국소 연고(LTO) (실시예 2로부터의 LTO-TG1, 표 4)를 비교하였다. LTS 제형은 레무테포르핀 0.1중량%, 올레일 알코올 5중량%, 벤질 알코올 5중량%, DGME 32중량%, 비타민 E TPGS 0.5중량%, 멘솔 5중량% 및 에탄올 52중량%를 포함한다. 상기 제형은 측정된 양으로 피부에 적용되고, 공기 중에 개방된 채로 두었다. 피부는 설정된 시간 (1 또는 8시간) 동안 제형과 접촉이 유지되었고, 생검되었고, Neg-50^TM 동결 조직 배지(frozen tissue medium)에서 세팅되고, 그 다음 섹셔닝(sectioning) 및 형광 현미경 평가를 위하여 준비되었다.

조직 형광 결과는 LTS 제형이 인간 사체 피부 피지선에 1시간 이내에 국소화하고, 2배의 레무테포르핀 양을 포함하는 LTO 제형에 있어서는 8시간 정도 요구되는 것을 보여주었다(도 3). 따라서, 제형의 용액 형태가 연고 형태보다 인간 피지선에 레무테포르핀의 보다 신속한 전달을 제공한다. 감광제를 포함하는 제형의 적용과 빛으로 감광제가 활성화되는 사이 특정된 시간 동안 피험자가 대기해야 하는 임상 환경에서 이는 중요하다: 보다 짧은 시간이 더 좋다.

실시예 5. LTS 감광제 조성물의 안정성

레무테포르핀 국소 용액의 배치(batch)를 표 5의 조성에 따라 제조하고, 5ml 바이알로 분배하여, 안정성 시험 동안 유지하였다. 3개월 후, 일부 바이알 침전이 관찰되었다. 표준 분석 기술에 의해 침전물은 레무테포르핀으로 확인되었다. 레무테포르핀을 위한 최적 전달 시스템은 비교적 높은 농도의 레무테포르핀을 포함하지만, 레무테포르핀이 쉽게 용해되지 않는 DGME(실시예 1 참조)와 같은 성분도 포함해야한다. 따라서, 장기 저장을 원한다면, 레무테포르핀 제형을 다른 방식으로 구현하는 것이 필요하다.

표 5. 레무테포르핀 국소 용액( LTS )

실시예 6. 제형화된 레무테포르핀의 용해도 연구

레무테포르핀 국소 용액(LTS)은 상온에서 레무테포르핀에 표 5의 다른 성분들(사전에 미리 혼합됨)을 첨가하여 제조되었다. 용액을 교반하고, 샘플들을 다양한 시점에서 제거한 후, 용해되지 않은 레무테포르핀 양을 결정하기 위해 여과하였다. 결과는 표 6에 나타내었다. 용해된 레무테포르핀 양은 약 0.048중량%이었다.

높은 온도, 약 75℃에서 DGME 및 벤질 알코올에 상기 약물을 용해하여 레무테포르핀 국소 용액 0.1중량%를 제조하는 것이 가능하다. 그 다음 상기 용액은 실온에서 냉각되고, 남아있는 LTS 성분은 증가되어 균일한 용액을 형성하도록 혼합된다. 용해도 데이터에 의하면, 상기 제조 과정으로 과포화 용액이 된다.

표 6. 표 5에 나타낸 제형에서 레무테포르핀의 용해도

레무테포르핀 용해도에 대한 소정의 LTS 부형제의 효과를 결정하기 위한 연구가 수행되었다. 용액 시스템으로부터 이소프로필 알코올의 제거는 약 0.03중량%에서 0.07중량%까지 레무테포르핀 용해도를 증가시킨다 (데이터 미기재). 폴리소르베이트 80은 0.027중량%에서 0.037중량%까지 용해도를 증가시킨다(데이터 미기재).

실시예 7. 2-성분 제형 시스템

효과적인 국소 전달 제형으로 레무테포르핀의 용해도와 장기간의 안정성 문제를 해결하기 위하여, 2-성분 제형 시스템을 개발하였다. 제 1 성분은 가장 가용성인 용매에 용해되는 레무테포르핀을 포함하는 감광 성분이다. 제 2 성분은 잔여량의 LTS 부형제를 포함하는 희석 성분이다. LTS 2-성분 제형의 일부 실시예는 표 7 내지 표 24에 나타내었다.

표 7 내지 표 24에 기재된 조성물은 다음과 같이 만들어진다. (레무테포르핀을 포함하는) 감광 성분과 희석 성분은 별도 조제 용기에서 제조된다. 수조에 연결된 재킷 비커는 75℃로 설정하고, 스터 플레이트(stir plate)에 위치시킨다. 약 1시간 동안 가열하면서, 감광 성분을 혼합한다. 한 시간 가열 후, 계속 혼합하면서 활성 용액을 실온에서 냉각한다. 희석 부형제는 계량되어, 별도의 유리 용기에 옮겨진다. 희석 부형제는 실온에서 약 30~60분 동안 혼합된다.

충전은 Flexicon^® 바이알 충전제를 사용하여 수행한다. 충전 검사가 수행되고, 평균 충전 중량은 목표 충전 중량의 2중량% 이내이었다. 희석 성분이 먼저 충전되고, 이어서 각 배치 제조를 위한 감광 성분이 충전되었다. 충전 후, 모든 바이알을 표시한 후, 실온 또는 원하는 온도 (예컨대 2~8℃)로 조절된 USP에 놓아두었다.

표 7. 배치 A (0.1중량%)

표 8. 배치 B (0.075중량%)

표 9. 배치 C (0.1중량%)- 레무테포르핀 TK1 제형

표 10. 배치 B (0.075중량%)- 레무테포르핀 TK2 제형

표 11. 배치 H (0.05중량%)- 레무테포르핀 TK3 제형

표 12. 배치 I (0.12중량%)- 레무테포르핀 P2 제형

표 13. 배치 J (0.12중량%)- 레무테포르핀 P3 제형

표 14. 배치 K (0.13중량%)- 레무테포르핀 P5 제형

표 15. 배치 L (0.34중량%)- 레무테포르핀 PX 제형

표 16. 배치 M (0.40중량%)- 레무테포르핀 P12 제형

표 17. 배치 N (0.50중량%)- 레무테포르핀 P14 제형

표 18. 배치 O (0.40중량%)- 레무테포르핀 P15 제형

표 19. 배치 P (0.355중량%)- 레무테포르핀 P16 제형

표 20. 배치 Q (0.375중량%)- 레무테포르핀 P17 제형

표 21. 배치 R (0.354중량%)- 레무테포르핀 P18 제형

표 22. 배치 S (0.354중량%)- 레무테포르핀 F20 제형

표 23. 배치 T (0.3중량%)- 레무테포르핀 F21 제형

표 24. 배치 U (0.3중량%)- 레무테포르핀 F21 제형

표 25A 및 표 25B는 2-성분 시스템에서 활성 감광제를 추가하기 위한 추가 의 가능한 레무테포르핀 제형의 실시예를 제공한다. 이들 제형들은 상술한 바와 같이 제조된다.

표 25A

표 25B

실온에서 최종 용액의 레무테포르핀 평형 용해도(mg/mL) 및 t=0(비중 보정하지 않음)에서의 과포화는 표 26에 나타내었다.

표 26. 제형 용해도

실시예 8. 인간 피지선에서 레무테포르핀 약물 국소화 : LTS (0.02%), LTS(0.1%) 및 LTO (0.2%)의 비교

LTS 제형을 이용한 레무테포르핀의 피지선 국소화는 인간 임상 실험에서 연구되었다. 이 작업은 피부 사전 준비를 하거나 하지 않은 경우에, 건강한 피험자의 상부 등(back) 피지선에 레무테포르핀-관련 형광의 분포를 지원하기 위한 이들의 잠재력에 대하여, 두 가지 강도(strength)(0.02%, 0.1%)의 레무테포르핀 국소 용액(LTS) 제형을 평가하기 위하여 수행되었다. 이전 세대 제형인, 적외선(IR) 열 피부 준비(heat skin preparation)와 조합된 밀봉(occlusion)상태의 레무테포르핀 국소 연고(LTO) 0.2%에 대해서는 이미 LTO의 피지선 전달 특성이 연구되었기 때문에, 이를 대조군 치료로서 병행해서 테스트하였다. LTO 조성물은 사람의 피지선에 레무테포르핀을 전달하기 위해 최적이 아닌 것으로 결정되었다. 다른 피부 준비 방법과 조합하거나 조합하지 않고서, LTS의 안전성 및 국소 내성 또한 본 연구에서 평가되었다.

연구 설계

각 10명의 건강한 피험자의 두 집단(총 20명의 피험자)으로 구성되는 부분-맹검(partial-blind)법에 의한 순차적인 무작위 약물 국소화 연구는 동의하에 수행되었다. 20명의 연구 피험자 각각은 모든 예약 방문에 참석하고, 연구를 완료하였다. 피험자의 평균 연령은 24세(범위:18~30세)이었다. 피험자 중 11명(55%)은 여성이었다. 집단 1 및 2는 각각 LTS 0.02중량% 및 0.1중량%의 두 가지 다른 투여 강도로 평가되었다. 각 피험자는 등 위쪽에 위치하는 4개의 테스트 부위(2cm × 2cm)를 가졌다. 피험자들은 각각 4가지 치료법을 받았다:

ㆍ임의의 피부 준비 없이 LTS

ㆍ미세 피부 연마(MDA: micro-derm-abrasion)로 피부 준비 후 LTS

ㆍIR 열 장치로부터의 건조열로 피부 준비 후 LTS

ㆍIR 장치로부터의 건조열로 피부 준비 후 플라스틱 필름으로 밀봉된 LTO

각 제형은 약 60분 동안 피부와 접촉을 유지하도록 허용되었다. 접촉 시간이 완료되면, 미온수를 적신 깨끗한 거즈를 이용하여 테스트 부위들로부터 여분의 물질을 제거한 다음 각 테스트 부위로부터 4mm 펀치 생검을 취하였다.

피지선 형광 분석

생검은 Neg-50^TM 동결 섹션 포매제(frozen section embedding medium)내에 놓여지고, 액체 질소중에서 스냅-동결되었다. 샘플은 -70℃로 저장되고, 필요한 방법론에 대해 광범위한 경험을 갖는 조직학 실험실로 드라이아이스 상태로 운반되었다. 조직 블록은 Micro EM500 Cryostat의 척(chuck) 상에 배치한 다음 조직 영역을 노출하도록 손질하였다. 8미크론 두께의 섹션이 절단되어 현미경 슬라이드 상에 놓여지고, Prolong^® Antifade(Molecular Probes)가 부착된 유리 커버 슬립으로 즉시 덮어서 불투명한 상자에 4℃에서 저장되었다.

각 생검 샘플에 대해서, 약 20개의 슬라이드 세트가 준비되었다. 이들 각 세트는 3개의 슬라이드로 구성되었다. 처음 3개 세트는 피지선의 부재/존재에 대해 평가하였다. 일반적으로, 다음의 5개 세트는 생략되고, 이어서 3개 세트는 피지선 구조의 존재에 대해서 평가되었다. 허용 가능한 피지선 존재를 갖는 총 9개 세트가 확인될 때까지 이러한 선택 과정은 계속되었다. 그러나, 마지막 슬라이드 세트가 적절한 피지선 표시를 갖는 9개 세트가 없는 것으로 평가된다면, 9개 세트가 얻어질 때까지, 상기 생략된 세트들을 준비된 순서대로 조사하였다. 생검 샘플에서 9개 세트를 얻을 수 없다면, 획득 가능한 최대 수의 세트들이 최종적으로 평가되었다.

피부에서의 레무테포르핀의 분포를 평가하고, 피지선에 레무테포르핀의 특이적 축적이 있는지를 결정하는데 형광 현미경이 사용되었다. 슬라이드는 단색 Photometrics 350 카메라(Roper Scientific)가 장착된 Zeiss Axiovert 100 현미경으로 관찰되었다. 섹션들은 피지선을 갖는 섹션을 식별하기 위해, 밝은 필드 조명 아래에서 관찰되었다. 그런 다음, 이미지들이 레무테포르핀에 대한 적절한 에피-형광 조명으로 측정되었다(여기 425nm; 방사 690nm). 각각에 대한 형광 이미지의 노출은 5배 확대에서 2×2 영역을 커버하는 5배 대물 렌즈로 5초간 이루어진다. 각 이미지는 회색 65500 음영 결과 16비트 뎁스(depth)로 얻어졌다. 이러한 셋팅은 형광 검출에 대한 정밀도를 증가시킨다. 모든 샘플에 대한 설정 범위(즉, 콘트라스트 강도)는 Image-Pro Plus software를 사용하여 500~5000배율로 설정되었다. 이전 연구에서, 레무테포르핀-나이브(naive) 피부로부터 얻어진 피부 생검 샘플은 검출 가능한 형광을 나타내지 않는 것으로 지속적으로 관찰되었다.

생검 샘플 이미지는 샘플의 실체 및 기원에 대하여 모르는 상태인 숙련된 평가자 패널들에 의해, 조사된 피지선 내의 형광 분포에 대해 평가하였다. 그룹 공통으로, 형광이 주변 조직보다 더 큰 강도로 일반 분비선 구조를 나타내고/나타내거나 분비선 소엽(lobules)들의 윤곽을 나타낸다면, 샘플들은 피지선에 의한 레무테포르핀의 흡수를 긍정적으로 나타내는 것으로 간주되었다. 비-변수(non-parametric) Chi-(X²)-스퀘어(square) 테스트는 각 집단 내에서 다양한 치료들에 의한 피지선 레무테포르핀 형광 결과에서 관찰된 차이가 통계학적으로 유의한지의 여부를 나타내도록 수행되었다.

결 과

이 약물-분포 연구에서, LTS/LTO 제형의 적용뿐만 아니라 채택된 다른 피부 준비 방법은 일반적으로 내성이 좋았다. 부종은 어떠한 테스트 부위에서도 관찰되지 않았다. 국소 피부 홍반이 관찰되는 경우, 이는 피부 준비 절차와 주로 연관되어 있었다.

다양한 국소 제형들로 적용된 레무테포르핀의 피지선 국소화는 조직 형광 이미지 분석을 이용하여 평가되었다. 레무테포르핀 형광 신호는 그 정도가 다양했지만, 다양한 테스트 요법에서 모낭과 피지선 내에서 분명하게 나타났다. 모든 샘플에서, 비-필로피지선(non-pilosebaceous) 구조 주변에 뚜렷한 형광 신호는 없었다. 일부 샘플에서, 강한 레무테포르핀 형광은 모낭의 외부 기공 영역 내의 플러그(plug)와 관련되었다. 이러한 환경이 이들 샘플의 인접 부분에서 발산되는 형광 플레어(flaring) 현상을 만들어낸다. 충분히 눈에 띄는 분리된 피지선 형광이 또한 존재하지 않는 한, 이러한 관찰은 일반적으로 부정적인 결과로 기록되었다. 여러 섹션들이 각질층에서 약물 형광을 나타내었는데, 이는 피부 표면에 일부 잔여 약물이 남아있음을 시사한다.

대조군(IR 열 전처리 + 밀봉 0.2% LTO) 부위로부터 얻어진 섹션들에 대하여, 피부 영역들을 MDA와 조합된 0.1% LTS 또는 다양하게 전처리된 더 낮은 강도의 LTS(0.02%)에 노출시켰고, 이들 슬라이드의 약 20%는 피지선 내에서 명백한 형광 신호를 나타내었다(표 27). 대조군 부위(IR 열 전처리 + 0.2% LTO)에 대한 형광 이미지 결과는 집단 1 및 2(각각 19.2% 및 19.1%)에서 비슷하였고, 이는 본 처리 및 분석 방법론이 재현성이 있음을 나타내는 것이다. 밀봉 상태의 0.02% LTS 대 0.2% LTO로 치료된 피험자에 대해, 비-변수 Chi-스퀘어 통계 테스트(X² 값=1.36, 자유도 3, P=0.715)에 의해 결정되는 바와 같이, 레무테포르핀-관련 피지선 형광을 갖는 그룹 샘플들의 비율에 유의한 차이는 없었다.

평가된 모든 세트들로부터 적어도 두 개의 형광-양성 슬라이드 세트를 갖는 생검 샘플로 정의되는 양성 생검수가 가장 높은 테스트 그룹은 집단 2였다(0.1% LTS). 0.1% LTS의 경우, 측정할 수 있는 (피지선을 포함하는) 생검에서 9개 중 6개는 피지선 형광에 대해 양성으로 간주되었다 (피지선의 형광 이미지에 대해 도 4 참조). IR 열 처리 + 0.1% LTS를 받은 그룹의 경우, 측정할 수 있는 생검에서 9개 중 7개는 약물- 특이적 피지선 형광에 대하여 양성인 것으로 판단되었다. 밀봉 상태의 0.2% LTO와 비교하여 0.1% LTS로 치료된 피험자의 경우, Chi-스퀘어 통계 분석(X² 값= 15, 자유도 3, P= 0.002)에 의해 결정된 바와 같이, 피지선 레무테포르핀-특이적 형광을 나타내는 그룹 샘플의 비율에 유의한 차이가 있었다. 전반적으로, 0.1% LTS 단독으로 또는 적외선 열 전-처리와 함께 치료된 피험자는, MDA + 0.1% LTS 또는 밀봉 0.2% LTO 후 적외선 열 처리를 수행한 경우보다 더 넓은 범위의 등 피부 피지선 형광을 나타내었다.

이러한 데이터는 다음과 같은 결론을 지지한다. LTS를 투여받은 피험자에게서, 형광 현미경을 통해 50~70% 이상의 생검 및 17~45%의 생검 슬라이드에서 레무테포르핀이 관찰되었다는 사실에 의해 입증된 바와 같이, LTS는 사람의 피지선에 레무테포르핀을 분배할 수 있다. (레무테포르핀의 농도가 LTO 보다 LTS에서 2 내지 10배 낮다는 사실에도 불구하고) 생검 샘플 및 슬라이드가 유사한 조건에서 LTO보다 LTS를 투여받은 피험자에게서 더 자주 양성이었다는 사실에 의해 입증된 바와 같이, LTO에 비해 LTS는 관련된 피지선으로의 레무테포르핀의 분배를 향상시킬 수 있다. 생검 샘플 및 슬라이드는 0.02% LTS보다 0.1% LTS를 투여받은 피험자에게서 더 자주 양성을 나타낸다는 사실에서 입증된 바와 같이, 높은 농도의 LTS는 피지선에 더 분배될 수 있다. 양성 생검 샘플 및 슬라이드의 빈도가 피부 준비 절차를 받지 않은 피험자보다 피부 준비 절차를 받은 피험자에게서 상당히 높지는 않다는 사실에 의해 입증된 바와 같이, LTS 적용 전에 열(heat)이나 미세 박피술 투여에 의한 피부“준비”는 피지선으로의 레무테포르핀의 분배를 반드시 개선시키지는 않는다.

표 27. 형광 이미지 분석 결과

^a각각피지선에서 강한 형광 신호를 보이는 1개의 슬라이드를 갖는 2개의 음성 생검 제외

^b 피지선 없는 1개의 생검, 및 피지선 구조를 갖는 단지 3개의 슬라이드를 갖는 1개의 생검 제외

MDA: 미세 피부 연마(micro derm abrasion)

실시예 9. 피험자의 이마에서 피지 분비율( SER )의 측정

피지 분비율은 피험자에 대한 치료 효과를 모니터하는데 사용될 수 있고, 다음과 같이 측정될 수 있다. 먼저 다음 단계를 수행함으로써 피험자의 이마가 탈지된다: 1) 물로 화장품 패드를 촉촉하게 한다; 2) 패드에 샴푸(1/4 크기에 대한 양)를 바르고, 샴푸가 분산되도록 패드를 반으로 접는다; 3) 작은 원을 그리면서 이마 중앙에서 관자놀이까지 이동하면서 각 면을 한 번씩 반복하면서 부드럽게 피험자의 이마를 세척한다; 4) 물을 적신 거즈로 가볍게 이마를 닦는다; 5) 깨끗한 화장품 패드로 이마가 건조되게 두드린다; 6) 이마의 각 면에 대해 3개의 이소 프로필 알코올 패드로 이마의 중앙에서 관자놀이까지 이동하면서, 하나의 패드로 이마의 하부 절반을, 또 다른 패드로 상부 절반을 닦은 다음 세 번째 패드를 접지 말고 이마 측면 전체를 닦는 방식으로 70% 이소프로필 알코올로 이마를 닦는다; 7) 적어도 5분간 피험자의 이마가 건조되게 두드린다.

SebuTape^TM 패치는 운반 시트로부터 조심히 들어올려, 테이프가 주름 없이 피부 표면에 부드럽게 도포되도록 보장되는 위치에 적용된다. 테이프가 피부 표면에 양호하게 접촉되어 있도록 상기 패드를 단단히 누른다. 30분 내지 120분 이후 (프로토콜에 따라) 패치를 제거하고, 저장 카드의 검은 사각형으로 옮긴다. 패치가 도포된 정확한 날짜, 시간 및 측면(즉, 왼쪽이나 오른쪽)은 패치 아래 주석부에 기록된다.

저장 카드는 600dpi 해상도로 화상 샘플링된 후 즉시 스캔된다. 각 이미지 파일은 설명적 파일명을 이용하여 적절한 폴더에 JPEG 포맷으로 저장된다. PhotoShop^®(Adobe, San Jose, CA)과 같은 적절한 소프트웨어를 사용하여, 패치에 대한 모든 어두운 픽셀이 선택된다. 피지 산물은 검은 픽셀로 나타낸 다음 807.5 계수를 곱함으로써 피지 분비율로 변환될 수 있다.

실시예 10. 레무테포르핀 과포화 용액의 안정성

A. 바이알 1 벤질 알코올 용매에 대한 LTS 제형의 안정성

바이알 1 감광 성분이 최종 조합된 LTS 용액에서 벤질 알코올 및 0.1, 0.075 및 0.05중량%의 세 가지 레무테포르핀 농도로 구성되는 세 가지 제형(배치 C(표 9), D(표 10) 및 H(표 11))은 바이알 2 내의 나머지 부형제들과 함께 재구성된 후, 안정성에 대해 조사되었다.

각 제형을 위하여 바이알 2 내용물이 바이알 1에 첨가되고, 혼합 및 재구성 후 0 및 4시간에 채취되었다. 각 샘플은 HPLC에 의해 분석되기 전에 0.22㎛ 필터를 통해 여과되었다. 이러한 분석은 조합된 제품이 충분히 안정성이 있고, 피험자에게 투여하기 전에 침전되지 않는다는 것을 확인하기 위해 수행되었다. 데이터는 표 28에 나타내었다.

표 28. LTS 배치 C, D 및 H 재구성 용액

재구성 데이터는, 재구성 후 4시간 내지 최대 48시간까지 레무테포르핀이 여전히 용해된 상태이고, 테스트된 제형들에서 LTS 용액으로부터 레무테포르핀이 침전되지 않는다는 것을 증명하였다.

B. 바이알 1 벤질 알코올 및 DGME 용매에 대한 LTS 제형의 안정성

두 제형이 조사되었고, 상기 두 제형에서 바이알 1의 감광 성분은 최종 제형에서 DGME, 벤질 알코올 및 0.1%(배치 A, 표 7) 및 0.075%(배치 B, 표 8)의 두 개의 농도의 레무테포르핀으로 구성되었다. 바이알 2의 내용물이 바이알 1의 내용물에 첨가되고, 혼합 및 재구성된 후 0 및 4시간에 채취되었다. 이 샘플은 분석 전에 0.2㎛ 필터를 통해 여과되었다. 이 실험은 조합된 제품이 충분히 안정성이 있고, 피험자에게 투여하기 전에 침전되지 않는다는 것을 확인하기 위해 수행되었다. 얻어진 데이터는 표 29에 나타내었다.

표 29. LTS 배치 A 및 B 재구성된 용액

재구성 데이터는 레무테포르핀이 최대 4시간까지 여전히 용해된 상태이고, 용액으로부터 침전되지 않는다는 것을 증명하였다. 또한 배치 C의 바이알 1에서의 레무테포르핀의 화학적 안정성이 5℃에서 12개월, 및 40℃에서 적어도 6개월로 연장되는 것을 발견하였다. 추가 연구는 레무테포르핀 TK1이 적어도 48시간 동안 물리적으로 안정하다는 것을 증명하였다.

C. 0.1% LTS 의 물리적 안정성(육안 평가)

표 9로부터의 배치 C를 사용하여, 0.1% LTS를 수득하기 위해, 벤질 알코올 중의 1중량% 레무테포르핀 용액 0.9g을 비활성 바이알 전체 내용물과 조합하였다. 이 용액은 모든 시점에서 육안 평가로 허용가능한 물리적 안정성을 보여주었다. 그 결과는 표 30에 나타내었다.

표 30. LTS 의 물리적 안정성

D. 표 9(배치 C)에서 0.1% LTS 의 단기 물리적 안정성(48시간에 걸친 HPLC 평가)

표 9로부터의 배치 C를 사용하여 구성된 0.1중량% 레무테포르핀 용액은 다양한 시점(0, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 16시간, 24시간 및 48시간)에서여과되고 샘플링되어, 레무테포르핀 함량에 대해 분석되었다. 표 31에 나타낸 결과는 여과 후 0.1% LTS에서 레무테포르핀은 안정적이고, 적어도 48시간 동안 약 100%의 제형 강도(formula strength)로 유지되었음을 보여준다.

표 31. LTS 단기 물리적 안정성

E. 0.3% LTS 의 단기 화학적 및 물리적 안정성(48시간에 걸친 HPLC 평가)

표 23으로부터의 배치 U(F21)를 사용하여 구성된 LTS(0.3 중량%) 용액은 다양한 시점(0, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 16시간, 24시간 및 48시간)에서 여과되고 샘플링되어, 레무테포르핀 함량 및 총 관련 화합물(TRC: Total Related Compounds)에 대해 분석되었다. 여과 후 0.3% LTS에서 레무테포르핀의 함량은 안정적이고, 48시간 내내 유지되었다. 이 분석은 여과된 용액과 여과되지 않은 용액 사이에 차이가 없음을 보여주고, 이는 과포화 용액이 48시간 이상 물리적으로 안정적임을 증명한다(표 32 및 표 33).

표 32. 비여과된 용액

§ TRC, 총 관련 화합물

표 33. 여과된 용액

§ TRC, 총 관련 화합물

실시예 11. 레무테포르핀 PDT 를 사용한 여드름 피험자의 PDT 치료

본 실시예는 건강한 피험자 및 가벼운 여드름이 있는 피험자에 대한 레무테포르핀 국소 용액(LTS)을 이용한 광역동 치료(PDT)의 효과에 관한 임상Ⅰ/Ⅱ의 이중 맹검법(double-blind)으로 순차 연구한 것이다. 최대 202명의 피험자는 4단계(단계 1에 12명, 단계 2에 30 내지 90명, 단계 3에 30 내지 60명 및 단계 4에 20 내지 40명)로 등록되었다. 이 연구는 FDA가이드 라인에 따라 수행되었고, 피험자는 고지에 입각한 동의(informed consent)가 요청될 것이다.

단계 1

12명의 건강한 피험자는 단계 1에서 두 개의 다른 집단으로 배정된다. 이 단계는 적색광의 최대 허용 투여량(MTD_red)을 측정하기 위해 6개의 광 투여량(25, 50, 75, 125, 225 및 300J/cm²; 688nm)으로 LTS-PDT를 평가하였다. 광 노출은 LTS 적용 후 60±5분 정도 소요된다. MTD_red는 이하 두 가지 중 하나의 광 투여량으로서 정의된다: (1) 최대의 허용가능한 회복가능 홍반 및/또는 광 처리 관련 불편함을 야기하는 광 투여량, 또는 (2) 참을 수 없는 불편함 또는 홍반 없이 테스트된 최대 광 투여량. 6개의 빛 치료는 두 집단을 통해 관리된다. 각 집단은 6명의 피험자를 포함한다. 각 피험자의 상부 등에는 각 5cm×8cm의 4개의 테스트 부위가 있을 것이다.

같은 날, 4개의 테스트 부위 각각에 다음이 적용된다:

집단 1:

ㆍ 무처리(음성 대조군)

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 25J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 50J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 75J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

집단 2:

ㆍ 무처리(음성 대조군)

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 125J/cm²(80mW/cm²)의 광 투여

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 225J/cm²(80mW/cm²)의 광 투여

ㆍ LTS 0.1% 적용 후 300J/cm²(80mW/cm²)의 광 투여

광 투여에서 3명 이상의 피험자에게 참을 수 없는 불편(0~4점 스케일에서 4점)이 발생한다면, 그 투여량은 중단된다.

각 연구 방문(0, 1, 14일)에서, 홍반 및 부종은 점수 시스템을 통해 평가되고, 과다 색소침착의 평가 및 구진성 여드름양(papulopustular acneiform) 반응은 부작용 평가와 함께 수행된다. 불편함을 평가하기 위해 피험자는 또한 적색광 치료 직후 인터뷰한다. 임상 실험실 테스트 및 생체 징후(vital sign) 평가는 안정성 평가의 일부가 될 것이다. 피험자는 치료 후 2주 동안 추적될 것이다.

단계 2

10명 피험자로 된 추가 집단을 최대 6개까지 추가할 가능성을 가지고, 이마에 적어도 두 개의 염증성 여드름 병변이 있는 약 30명의 피험자는 2단계에서 3개의 다른 집단으로 배정된다. 전반적인 목적은 여드름 병변이 있는 피험자의 얼굴에 광 투여량을 MTD_red까지 상승시킨 후, 피지 분비율 및 생검을 통한 임상 활성(clinical activity)을 측정하는 것이다. 이는 각 집단에서 10명의 피험자에게 LTS 0.1% 및 비히클을 이마에 적용한 후, 적생광에 노출시킴으로써 평가되었다. 활성 성분 치료와 비히클의 투여는 이마의 중간선을 기준으로 이마의 절반씩 분할되어 처리된다. 활성 성분 치료와 비히클 적용의 결정은 무작위로 이루어지고, 이중-맹검(double-blind) 방식으로 수행된다. 투여될 수 있는 최대 적색광 투여량은 단계 1에서 결정되는 MTD_red 투여량이 될 것이다.

광 투여량 및 LTS/비히클 적용은 각 집단에 대하여 다음과 같이 수행되어 질 것이다.

집단 1: LTS 0.1% 및 비히클 적용(60±5분 인큐베이션) 후 25J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

집단 2: LTS 0.1% 및 비히클 적용(60±5분 인큐베이션) 후 75J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

집단 3: LTS 0.1% 및 비히클 적용(60±5분 인큐베이션) 후 150J/cm²(50mW/cm²)의 광 투여

후원자 및 연구자에 의해 집단 1 내지 3에 대한 효능과 안정성 데이터를 검토한 결과, 결정은 효능 강화 또는 내성 개선을 위하여 추가적인 집단을 추가하게 될 것이다. 10명 피험자로 된 집단이 최대 6개까지 추가될 수 있다. 이러한 추가 집단 내 피험자에 사용되는 적색광 뿐만 아니라 LTS 및 비히클 인큐베이션 시간은 집단 1 내지 3에 대한 결과에 따라 결정될 것이다. 추가 집단의 피험자에게 사용되는 변수는 단계 1에서 테스트된 변수를 초과하지 않는다. 특히, 추가 집단 피험자에게 사용되는 최대 광 투여량은 MTD_red가 될 것이다_.추가 집단의 피험자에게 사용되는 조사량은 단계 1에서 테스트된 두 가지 조사량 중 하나가 될 것이다(50mW/cm² 또는 80mW/cm²). 추가 집단 피험자에 대한 LTS 적용 및 적색광 노출 사이의 인큐베이션 시간은 60분을 초과하지 않는다.

여드름 병변 수와 Sebutape^®를 사용하는 피지 분비율(SER)은 단계 2에서 모든 피험자에 대해 0, 1 및 14일째의 검사에서 모니터될 것이다. 또한, 집단 1 내지 3 피험자의 50%는 추가 평가들을 위해, LTS-PDT 치료 후 24±4시간 후, 이마에서 비히클 및 LTS-치료 영역들로부터 하나의 3mm 펀치 생검 샘플이 취해질 것이다. 이들 샘플은 연속적으로 처리될 것이며, 조직 섹션은 면역 조직 화학 방법을 이용하여 PDT 작용의 증거에 대해를 평가될 것이다.

각 방문 연구(0, 1, 14일)에서, 홍반 및 부종은 점수 시스템을 통해 평가되고, 과다 색소침착의 평가 및 구진성 여드름양(papulopustular acneiform) 반응은 부작용 평가와 함께 수행된다. 불편함을 평가하기 위해 피험자는 또한 적색광 치료 직후 인터뷰한다. 임상 실험실 테스트 및 생체 징후(vital sign) 평가는 안정성 평가의 일부가 될 것이다. 피험자는 치료 후 2주 동안 추적될 것이다. 사진에 동의한 피험자의 경우, LTS/비히클 적용 전 0일, 광 치료 후 0일, 그리고 1, 7 및 14일째의 추가 방문에서 이마에 대해 고품질 디지털 의료 사진이 촬영될 것이다.

단계 3

이마에 적어도 2개의 염증성 여드름 병변이 있는 약 30명 및 최대 60명의 피험자들은 단계 3에서 3개의 다른 집단으로 배정된다. 전반적인 목적은 여드름 병변이 있는 피험자의 얼굴에 LTS/비히클-PDT 치료 후에 피지 분비율을 통해 임상 활성을 측정하는 것이다. 이는 각 집단에서 10 내지 20명의 피험자를 치료함으로써 평가된다. LTS 0.1%를 이마와 한쪽 면에 적용하고, 비히클을 다른 쪽 면에 적용한 다음 적색광에 노출시킨다. 활성 성분 치료 및 비히클의 적용의 결정은 무작위로 행해지며, 이중-맹검 방식으로 수행될 것이다. 단계 3에서 사용되는 적색광 투여량의 결정은 단계 2의 피험자로부터 기초한 데이터로 이루질 것이다. 최대 적색광 투여량은 단계 2에서 달성된 MTD_red(300J/cm²)를 초과하지 않을 것이다.

광 투여량 및 LTS/비히클 적용은 각 집단에 대해 다음과 같이 수행될 것이다:

집단 1: 0일에 수행된 분할 LTS-PDT치료

LTS 0.1%(분할 투여량: 각각의 광 투여 전 1.5mg의 총 평균 투여량을 위하여 0.0375mg/cm²)

ㆍ LTS 0.1% 및 비히클의 총 부피의 절반을 30±5분 동안 적용한 다음, 150J/cm²(50mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(80mW/cm²)까지 빛에 노출시킨다. 이 첫 번째 치료 후, LTS 0.1%/비히클의 잔여량을 다시 30±5분 동안 적용한 후 150J/cm²(50mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(80mW/cm²)까지 두 번째 빛에 노출시킨다.

집단 2: 0일에 하나의 LTS-PDT 치료를 수행한 다음 3일째에 다른 치료 수행

LTS 0.1%(투여량: 3mg의 총 평균 투여량을 위하여 0.075mg/cm²)

ㆍ LTS 0.1% 및 비히클을 60±5분 동안 적용하고, 다음으로 0일에 150J/cm²(50mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(80mW/cm²)까지 빛에 노출시킨다. 동일한 치료가 3일째에 반복된다.

집단 3 및 3b: 0일에 분할 LTS-PDT 치료가 수행되고, 3일째에 반복 수행

ㆍ LTS 0.1% 및 비히클의 총 부피의 절반을 30±5분 동안 적용한 다음 150J/cm²(50mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(80mW/cm²)까지 빛에 노출시킨다. 그런 다음, LTS 0.1중량% 비히클의 잔량은 다시 30±5분 동안 적용된 후 150J/cm²(50mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(80mW/cm²)까지 두 번째 빛에 노출된다. 동일한 치료가 3일째에 반복된다.

여드름 병변 수는 단계 3의 모든 피험자에 대해 0, 7 및 14일째의 검사에서 모니터된다. Sebutape^®를 사용한 피지 분비율(SER)은 집단 1 내지 3에서 단계 3의 모든 피험자에 대해 0, 7, 8, 14 및 15일째의 검사에서 사전-무작위로서 모니터될 것이다. 집단 3b의 피험자들에 있어서, Sebutape는 피험자의 적격성을 결정하기 위해 방문 검사시에만 사용될 것이다.

사진에 동의한 단계 3의 피험자들의 경우, LTS/비히클 적용 전에, 이마에 대해 고품질 디지털 의료 사진을 촬영하고, 0일 및 3일째(가능한 경우)에 빛 치료를 한 다음, 1, 4(가능한 경우), 7 및 14일째에 추가 방문한다. 집단 3b에서 10명의 추가 피험자들의 경우, 모든 방문 연구에서 비지아(Visia)를 이용하여 피부 형광을 측정하기 위해서 사진은 필수적이다.

단계 4

이마에 적어도 2개의 염증성 여드름 병변이 있는 약 20에서 최대 40명의 피험자는 단계 4에서 2개의 집단에 배정된다. 전반적인 목적은 얼굴에 LTS/비히클-PDT(0.1% 및 0.3%) 치료의 효과 및 안전성을 평가하는 것이다. 이는 두 가지 제형의 LTS/비히클을 사용하여 각 집단에서 10 내지 20명의 피험자를 치료함으로써 평가된다. 집단 1에 등록된 피험자는 이마의 한쪽 면에 LTS 0.1%를 적용받게 되고, 반대쪽 면에 상응하는 비히클을 적용받은 다음 적색광에 노출된다. 집단 1에 등록된 피험자들로부터의 안전성 데이터는 집단 2에서 등록을 진행하기 전에 연구자 및 후원자에 의해 검토된다. 집단 2는 이마의 한쪽 면에 LTS 0.3%를 적용받게 되고, 반대쪽 면에 상응하는 비히클을 적용받은 다음 적색광에 노출된다. 각 집단에 대한 투여량은 아래에 설명되어 있다. 활성 성분 치료 및 비히클의 적용의 결정은 부작위로 행해지고, 이중-맹검 방식으로 수행된다. 단계 4에서 사용되어질 적색광 투여량은 단계 2 및 3의 피험자들로부터의 데이터를 기반으로 이루어진다. 최대 적색광 투여량은 단계 1에서 달성된 MTD_red(300J/cm²)를 초과하지 않는다.

집단 1 및 2에 대해 광 투여 및 LTS/비히클 적용은 다음과 같이 행해진다:

집단 1: 0일, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 및 7주에 수행되는 분할 LTS/PDT 치료

LTS 0.1%(분할 투여량: 각각의 광 투여 전 3mg의 총 평균 투여량을 위하여 0.075mg/cm²)

ㆍ LTS 및 이것에 매칭되는 비히클이 적용되어 30±5분의 접촉시간 동안 방치된 다음 최대 300J/cm²(50mW/cm²)의 가능성이 있는 150J/cm²(80mW/cm²)에서 빛에 노출된다. 이 치료 후, LTS 및 비히클의 두 번째 적용은 30±5분 동안 적용된 다음 동일한 광 투여량으로 두 번째 빛에 노출된다. 총 8회 치료하는 동안 동일한 분할 치료가 매주 반복된다.

집단 2: 0일, 1, 2, 3, 4, 5, 6 및 7주에 수행되는 분할 LTS/PDT 치료

LTS 0.3%(분할 투여량: 각각의 광 투여 전 6mg의 총 평균 투여량을 위하여 0.150mg/cm²)

ㆍ LTS 및 상응하는 비히클이 적용되어 30±5분의 접촉시간 동안 방치된 다음 150J/cm²(80mW/cm²)에서 최대 300J/cm²(50mW/cm²)까지의 빛에 노출된다. 이 치료 후, LTS 및 비히클의 두 번째 적용이 30±5분 동안 이루어진 다음 동일한 광 투여량으로 두 번째 빛에 노출된다. 총 8회의 치료 동안 동일한 치료가 매주 반복된다.

여드름 병변 수는 단계 4의 모든 피험자들에 대한 0일 및 3, 7, 및 11주째의 방문 검사에서 행해진다. Sebutape^®를 사용한 피지 분비율(SER)은 피험자의 적격성을 결정하기 위한 방문 검사시 및 3, 7 및 11주째의 방문시에 행해진다.

단계 4의 피험자들의 경우, 치료 당일에 LTS/비히클 적용 전 및 빛 치료 후, 및 11주째의 연구 종료 방문시 검사에서 이마에 대해 고품질 디지털 의료 사진을 촬영한다. 의료 사진은 모든 연구 방문시에 피부 형광 측정, 피지 분비의 간접 측정을 위해 또한 사용된다.

통계적 분석

샘플 크기

단계 1

이 단계에서 선택된 샘플 크기에 대한 통계적인 근거는 없다. 샘플 크기는 건강한 피험자에 불필요한 노출을 최소화하면서 안전성 및 내성이 적절하게 평가될 수 있도록 이전 경험에 기초하여 선택된다.

단계 2

짝지워진 스튜던츠 t-테스트(paired Student's t-test)에 기초하여, 집단 1 내지 3에서 10명의 피험자 샘플 크기는, 기준선에서의 6.5의 평균 피지 분비율과 비히클 적용면에서의 피지 분비율에서 개선이 없음을 가정하면, 피지 분비율 1.42인 14일째에 기준선으로부의 차이(difference)에 대한 검출이 80%의 파워(power)로 달성될 것이다. 다수의 테스트를 제어하기 위해, 0.05의 유의 수준(significance level)은 본 페로니 교정(Bonferroni correction)(0.05/3=0.0167)을 이용하여 조절되었다.

단계 3

짝지워진 스튜던츠 t-테스트에 기초하여, 집단 마다 10명의 피험자 샘플 크기는, 기준선에서의 6.5의 평균 피지 분비율과 비히클 적용면에서의 피지 분비율에서 개선이 없음을 가정하면, 피지 분비율 1.42인 14일째에 기준선으로부터의 차이에 대한 검출이 80%의 파워로 달성될 것이다. 다수의 테스트를 제어하기 위해, 0.05의 유의 수준은 본 페로니 교정(0.05/3=0.0167)을 이용하여 조절되었다.

단계 4

단계 4의 샘플 크기는 파워 분석에 기반한 것이 아니라 오히려 다른 단계와 일치하는 샘플 크기를 유지함으로써 수행된다. 비히클과 LTS 치료 면 간의 기준선으로부터의 피지 분비의 측정 차이는 평균, 표준 편차, 중앙값, 최소 및 최대 결정을 이용하여 요약된다. 반복 측정 ANOVA는 피지 분비를 측정하는 각 방법에 대해 피지 분비율의 변화를 비교하는데 이용된다. 상기 모델에서 인자들(factors)은 치료군, 피험자 및 시간이 된다. 또한, 단 변량(univariate) 분석은 각 방문시에 실시되고, 반복된 측정값인“피험자 사이의 효과에 대한 가설의 테스트”p-값이 유의하다면, 통계적으로 유의한 것으로 해석된다. 마지막으로, 치료 상호작용에 의한 시간은 방문 시점에서 치료들 간의 치료 효과 차이의 일관성에 관한 정보를 제공한다.

통계적 및 분석적 계획

연속적 변수들(continuous variables)은 표들에 요약되며, 피험자, 평균, 표준 편차, 중앙값, 최소 및 최대의 수를 포함할 것이다. 범주형(Categorical) 변수는 빈도 및 백분율로 표에 나타낼 것이다. 모든 통계적 테스트는 양면(two-side)이며, 0.5의 유의 수준으로 수행될 것이다. LTS-PDT 치료를 받은 연구에 등록된 모든 피험자는 분석에 포함될 것이다. 안전성 개체군(safety population)은 LTS-PDT치료를 받은 모든 피험자로 정의될 것이다.

인구 통계학적 및 기준 자료 분석

인구 통계학적 자료 및 기준선 자료(baseline data)는 LTS-PDT 치료를 받는 모든 등록된 피험자에 대해 분석될 것이다. 피험자 인구 통계학적 특성 및 기준선 특성은 연속적 변수들에 대한 평균, 표준 편차, 중앙값, 최소 및 최대, 및 범주형 변수들(categorical variables)에 대한 수와 백분율에 의해 요약될 것이다. 요약은 각 단계에 대해 개별적으로 제공될 것이다.

효능 분석(단계 2 및 3에서만)

기준선으로부터의 SER 값들과 피부 형광 및 비히클과 LTS 0.1% 처리 면으로부터의 SER 값들과 피부 형광간의 차이는 평균, 표준 편차, 중앙값, 최소 및 최대 결정을 사용하여 요약될 것이다. 반복된 측정에 대한 ANOVA는 피지 분비율의 변화와 LTS 치료 면과 비히클 치료 면 사이의 피부 형광을 비교하는데 사용될 것이다. 또한, 피지 분비율 변화의 95% 신뢰 구간은 각 집단에 제공될 것이다.

효능 분석(단계 4)

비히클 치료면과 LTS 치료면 사이의 기준선로부터의 피지 분비 측정의 차이는 평균, 표준 편차, 중앙값, 최소 및 최대 결정을 사용하여 요약될 것이다. 반복된 측정 ANOVA는 피지 분비를 측정하는 각각의 방법에 대해 피지 분비율의 변화를 비교하는데 사용될 것이다. 상기 모델에서 인자들은 치료군, 피험자 및 시간이 될 것이다. 또한, 단 변량(univariate) 분석은 각 방문시에 실시되고, 반복된 측정치인“피험자 사이의 효과에 대한 가설의 테스트”p-값이 유의하다면, 통계적으로 유의한 것으로 해석될 것이다. 마지막으로, 치료 상호작용에 의한 시간은 방문 시점에서 치료들 간의 치료 효과 차이의 일관성에 관한 정보를 제공할 것이다.

이들 데이터는 그래프로 나타날 것이다. 피지 분비율 변화의 95% 신뢰 구간은 각각 방문, 집단, 치료 및 방법으로 정해질 것이다. 피지 분비율을 평가하는 다양한 방법의 견고성을 분석하기 위한 메트릭(metric)을 제공하기 위해, 이 섹션의 전반적인 통계적 평가는 0.05의 균일한 알파 레벨에서 수행될 것이다. 다양성을 제어하기 위한 보정은 수행되지 않는다. 상관 관계 분석은 피지 분비를 측정하기 위한 방법의 일관성을 평가하기 위해 수행될 것이다. 총 병변 수에 있어서의 기준선으로부터 변화에 대한 기술적 통계(descriptive statistics)는 치료 그룹과 집단에 의한 방문에서 제시될 것이다.

안전성 분석

단계 1

불쾌감 지수는 테스트 부위(대조군 및 각각의 광 투여량)로 요약될 것이다. 홍반 지수, 부종 지수, PDT-유도 구진성 여드름양(acneiform) 반응의 존재 또는 부재, 및 색소 침착의 존재 또는 부재는 테스트 부위, 평가 방문 및 집단으로 요약될 것이다. MTD_red는 각 피험자에 대해 요약될 것이다. AEs는, MedDRA를 이용하여, AE를 경험한 피험자의 수와 백분율 및 시스템 기관 분류(organ class), 바람직한 기간 및 테스트 부위(대조군 및 각각의 광 투여량)로 요약되는 AEs의 총수에 대해 코딩될 것이다. 병용(concomitant) 약물은 WHO-Drug Dictionary를 이용해 코드화되고, 주제별로 나열될 것이다. 임상적으로 중요한 화학 및 혈액학적 실험값은 AEs로서 기록될 것이다. 생체 신호는 주제별로 나열될 것이다.

단계 2, 3 및 4

불쾌감 지수는 집단 및 치료로 요약될 것이다. 홍반 지수, 부종 지수, PDT-유도 구진성 여드름양 반응의 존재 또는 부재, 및 색소 침착의 존재 또는 부재는 치료, 평가 방문 및 집단으로 요약될 것이다. AEs는, MedDRA를 이용하여, AE를 경험한 피험자의 수와 백분율 및 시스템 기관 분류, 바람직한 기간 및 집단 및 치료로 요약되는 이벤트의 총수에 대해 코딩될 것이다. 병용 약물은 WHO-DD를 이용해 코드화되고, 주제별로 나열될 것이다. 임상적으로 중요한 화학 및 혈액학적 실험값은 AEs로서 기록될 것이다. 생체 신호는 주제별로 나열될 것이다.

치료 배정

단계 1 및 집단 1 내지 3에서의 단계 2의 완료에 따라, 마지막 피험자가 14일째 방문을 마친 후, 각 집단의 치료 배정을 스폰서에게 배포할 것이다. 치료 배정 정보는 추가 집단이 연구에 추가될 수 있는지의 여부에 관한 결정을 지원할 것이다. 치료 배정(treatment assignments) 정보는 연구 현장 직원과 공유하지 않을 것이다.

실시예 12. 제형 스크리닝을 위한 피지 확산 모세관 모델

상술한 바와 같이, 제형 TK1, P12, P14 및 P15를 준비하고, 과잉활동 피지선 장애를 치료하는데 사용하기 위해, 피지 확산 모세관 모델을 이용하여 스크리닝되었다. 우선, Lu et al., “사람과 햄스터 피지 샘플과 인공 피지의 비교”, Inter . Jour. of Pharm ., 367(2009)37-43(피지 L)에 기재된 바와 같이, 유리 모세관은 합성 피지로 채워진다. 채워진 모세관(n=7)은 소량의 제형(7개의 모세관에 대해 약 250㎕)에 침지되고, 캡핑된 원추형 원심 분리 튜브에 넣었다. 시험 용액의 증발을 방지하기 위해 주의가 요구된다. 세트 확산 시점들에, 모세관은 조심스럽게 흡입되어 건조(blotted dry)되고, 각 모세관의 첫 5mm가 다이아몬드 칼로 절단되었다. 5mm 섹션의 7개의 내용물은 유기 용매 혼합물에 용해되고, HPLC를 이용하여 레무테포르핀에 대해 분석되었다. 인공 피지내로 확산되는 레무테포르핀의 양은 접촉 시간의 함수로서 보고된다. 32.5℃에서 60분의 확산 시간에 대한 결과는 표 34에 나타내었다.

표 34. 인공 피지로의 확산

실시예 13. 배치 U, 제형 F21 및 배치C, 제형 TK1 의 피지 확산 모세관 모델 비교

Lu et al.(2009)에 기재된 바와 같이, 유리 모세관은 합성 피지로 채워진다. 채워진 모세관(n=7)은 소량의 제형(7개의 모세관에 대하여 약 250㎕)에 침지되고, 캡핑된 원추형 원심 분리 튜브에 넣었다. 세트 확산 시점들에, 모세관은 조심스럽게 흡입되어 건조되고, 각 튜브의 첫 5mm가 다이아몬드 칼로 절단되었다. 5mm 섹션의 7개의 내용물은 유기 용매 혼합물에 용해되고, HPLC를 이용하여 레무테포르핀에 대해 분석되었다. LTS 0.3%(F21) 대 LTS 0.1%(배치 C에 나타낸 바와 같은 제형 TK1)의 비교 결과는 32.5℃ 폐쇄형 시스템(표 35), 32.5℃ 개방형 시스템(표 36) 및 35℃ 폐쇄형 시스템(표 37)에 대해 다음과 같이 나타난다. 결과는 도 5, 6 및 7에 그래프로 각각 나타난다.

표 35. 32.5℃ 폐쇄형 시스템에서 레무테포르핀 확산의 요약

표 36. 32.5℃ 개방형 시스템에서 레무테포르핀 확산의 요약

a Cont = 대조군 = LTS 0.1%(배치 C에서 설명된 제형 TK1)

표 37. 35.0℃ 폐쇄형 시스템에서 레무테포르핀 확산의 요약

^a Cont = 대조군 = LTS 0.1%(배치 C에서 설명된 제형 TK1)

실시예 14. 제형 CUF -1( LTS 0.3% 활성 용액) 및 CUG -1( LTS 0.3% 비활성 용액)의 제조

실시예 7은 2 성분 제형 시스템의 개발을 설명하였다. 제 1 성분은 최대 가용성인 용매에 용해된 레무테포르핀을 포함하는 감광 성분이다. 제 2 성분은 나머지 LTS 부형제들을 포함하는 희석 성분이다. 본 실시예는 또 다른 2 성분 레무테포르핀 감광제 용액(표 38) 및 상응하는 비히클(플라시보) 제형(표 39)을 설명한다. 표 40 및 표 41은 동일한 최종 구성 용액을 제공하는 2-바이알 시스템의 두가지 구성을 나타낸다. 이들 제형들은 사용된 부형제들을 단순화하여, 상술한 바와 같이 제조된다. 새로운 부형제 조합은 FDA 기준을 충족한다. 또한, 임상 환경에서 관리 편의를 위해 본 실시예에서 조합된 2 성분 시스템의 총 부피는 감소된다.

표 38. LTS 0.3% 구성 용액

표 39. LTS 0.3% 비히클

표 40. LTS 0.3%에 대한 2- 바이알 시스템-구성 1

표 41. LTS 0.3%에 대한 2- 바이알 시스템-구성 2

실시예 15. ( CUF -1 LTS 0.3% 활성 용액 및 CUG -1 LTS 0.3% 비활성 용액으로부터 구성된) LTS 0.3%의 특성

바이알 1(LTS 0.3% 활성 용액, 코드 CUF-1), 바이알 2(LTS 0.3% 비활성 용액, 코드 CUG-1) 및 비히클(LTS, 0.3% 비히클, 코드 PCTK-1)은 6.0000-g LTS 0.3% 구성 용액의 새로운 제형 구성에 대한 특성화 연구를 수행하기 위해, 실시예 14에 따라 제조되었다. 이들 제형에 대한 비중이 측정되었다. LTS 0.3%의 새로운 구성의 화학적 및 물리적 안정성은 48시간 동안 여과된 샘플 및 여과되지 않은 샘플을 제조하고, 분석함으로써 평가되었다.

비중의 측정

샘플의 비중을 측정하기 전에, 피크노미터(pycnometer)를 충분히 세정하였다. 그 다음 빈 피크노미터의 중량을 정확하게 측정하였다. 그 다음 피크노미터에서 리드(lid)을 제거하고, 리드가 조심스럽게 교체되기 전에 물을 채웠다. 오버플로우 오리피스(overflow orifice)로부터 물이 압출된 후에, 피크노미터의 외부 표면을 세정하고 건조시켰다. 그 다음, 피크노미터와 물의 중량이 정확하게 측정되었다. LTS 0.3%, LTS, 0.3% 비히클, 제형 PCTK-1 및 LTS 0.3% 비활성 용액(바이알 2), 제형 CUG-1로 구성된 용액으로 비중 실험이 수행되었다(N=5). 각 용액의 비중을 측정하는 단계에 관련된 계산은 다음을 포함한다:

ㆍ 물 중량 = 피크노미터와 물의 중량 - 빈 피크노미터의 중량

ㆍ 샘플의 중량 = 피크노미터와 샘플의 중량 - 빈 피크노미터의 중량

ㆍ 샘플의 비중 = (샘플의 중량)/(물 중량)

LTS 0.3% 구성 용액의 화학적 및 물리적 안정성

LTS 0.3% 구성 용액은 바이알 1에 3.0000-g의 비활성 용액을 첨가함으로써 제조되었다. 바이알 1의 전체 내용물은 주사기 및 바늘을 이용하여 옮겨지고, 0, 4, 8, 24 및 48시간에 새로운 바이알로 여과 또는 비여과되었다. 3-반복 샘플들이 제조되고, 각 시점에 대해 분석되었다. 샘플들은 빛으로부터 떨어져 보관되고, 암실의 온도는 48시간 동안 기록되었다. 48시간 후, 샘플들은 화학적 분석을 위해 보내졌다. 표 42에 나타낸 데이터에 기초한 비중 결과는 다음과 같다:

ㆍ LTS 0.3% 비활성 용액(바이알 2), 제형 CUG-1= 0.85

ㆍ LTS 0.3% 구성 용액 = 0.93

ㆍ LTS, 0.3% 비히클, 제형 PCTK-1 = 0.94

표 42. LTS 0.3% 비활성 용액, 구성 용액 및 비히클 샘플의 중량

화학적 및 물리적 안정성

LTS 0.3% 비활성 용액 및 활성 용액이 실시예 14에 기재된 바와 같이 제조되었다. LTS 0.3% 구성 용액을 포함하는 바이알 1은 48시간 동안 새로운 바이알로 여과 또는 비여과하였다. 연구가 수행되는 암실의 온도는 48시간에 결쳐 여러 번 기록되었다. 모든 샘플은 빛으로부터 떨어져 보관된다. 이들 연구 결과는 표 43, 44 및 45에 나타내었다.

표 43. 구성 후 48시간 동안 LTS 0.3%의 물리적 안정성

¹과포화 용액의 물리적 안정성은 여과에 의해 측정되었다.

표 44. 구성 후 48시간 동안 LTS 0.3%의 화학적 안정성

표 45. 구성 후 48시간 동안 LTS 0.3% 바이알에서의 중량 손실

결 론

LTS 3% 비활성 용액(바이알 2)인 CUG-1은 0.85의 비중을 나타내었고; 바이알 1 활성 용액(CUF-1)과 바이알 2 비활성 용액(CUG1)의 혼합으로부터 얻어진 LTS 0.3% 구성 용액은 0.93의 비중을 나타내었고; LTS, 0.3% 비히클 제형인 코드 PCTK-1은 0.94의 비중을 나타내었다. 레무테포르핀 함량은 새로운 제형 구성인 6.000-g LTS 0.3% 구성 용액에서 물리적 및 화학적으로 안정적이었다. 48시간까지의 실온 안정성 연구 동안, 여과되거나 여과되지 않은 샘플에서 레무테포르핀 함량의 주요한 변화는 없었다. 레무테포르핀과 관련된 화합물들은 안정성 테스트 기간 동안 변화되지 않았다.

이제까지 본 발명의 구성을 충분히 설명하였고, 본 발명의 취지 및 범위를 벗어나지 않고 불필요한 실험없이, 광범위한 균등 변수들, 농도들 및 조건들 하에서 본 발명이 수행될 수 있음이 당업자에게는 명백할 것이다. 본 발명은 구체적인 실시예와 함께 기재되었지만, 추가로 변형될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 본 출원은 일반적으로 본 명세서에 개시된 원리를 따라, 본 명세서의 개시내용이 속하는 기술 분야에서 공지 또는 일반적인 실시 범위 내에 속하면서, 본 명세서에 기재된 필수적 특징들에 적용될 수 있는, 본 명세서에 개시된 내용의 변형들을 포함하여, 본 명세서의 개시의 어떠한 변형, 사용 또는 적용들을 모두 포함한다.

Claims

주위 온도에서 과포화된 감광제를 포함하는 감광 성분의 구성 제형(constituted formulation), 하나 이상의 용매, 및 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME)를 포함하는, 감광제를 피지선으로 위치시키는데 유용한 약제학적 조성물로서,
상기 감광제는 상기 약제학적 조성물 중 약 0.1중량% 내지 약 0.4중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 그린 포르피린이고,
상기 하나 이상의 용매는 상기 약제학적 조성물 중 약 5중량% 내지 약 55중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 벤질 알코올 및 약 25중량% 내지 약 60중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하고,
상기 DGME는 약 15중량% 내지 약 35중량%의 최종 농도로 존재하고,
상기 구성 제형은,
a) 벤질 알코올에 용해된 약 0.5중량% 내지 1.5중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 그린 포르피린의 제 1의 용액; 및
b) 상기 약제학적 조성물 중 약 15중량% 내지 약 40중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 0중량% 내지 약 30중량% 및 약 40중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올 및 약 30중량% 내지 약 70중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 이소프로판올(IPA)을 포함하는 희석 성분의 제 2의 용액
을 조합하여 형성되고,
상기 구성 용액 중의 감광제의 농도는 주위 온도에서 과포화된 것인 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 구성 제형은 적어도 4시간 동안 물리적으로 안정한 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 희석 성분은 4.0중량% 내지 6.0중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올, 2.5중량% 내지 3.0중량% 사이의 초기 농도로 존재하는 멘솔, 0.5중량% 내지 1.5중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트 및 0.25중량% 내지 0.60중량% 사이의 최종 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 선택적으로 추가하여 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
a) 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 벤질 알코올 중 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르을 포함하고,
b) 상기 희석 성분은 약 35.6중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 54.39중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA, 약 5.56중량%의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올, 약 2.78중량%의 초기 농도로 존재하는 멘솔, 약 1.11중량%의 초기 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트 및 약 0.56중량%의 초기 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80을 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
a) 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고,
b) 상기 희석 성분은 약 24.30중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 28.55중량%의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올, 및 약 47.15중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
a) 상기 그린 포르피린의 제 1의 용액은 약 0.60중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.40중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고,
b) 상기 희석 성분은 약 34.00중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 및 약 66.00중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA를 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 그린 포르피린은 레무테포르핀인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 여드름 병변을 갖는 환자 피부의 환부에 치료적으로 효과적인 양의 상기 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 그린 포르피린이 상기 환부의 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 그린 포르피린을 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 여드름을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 지성 피부 환부에 치료적으로 효과적인 양의 상기 약제학적 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 상기 조성물이 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 지성 피부 환부를 갖는 환자의 상기 피부에서 피지선의 피지 분비율을 감소시키기 위한 방법에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
그린 포르피린 및 벤질 알코올을 포함하는 감광 성분을 갖는 제 1의 바이알 및 디에틸렌글리콜 모노에틸 에테르(DGME) 및 이소프로판올(IPA) 및 선택적으로 벤질 알코올을 포함하는 희석 성분을 갖는 제 2의 바이알을 혼합하는 것을 포함하는 제 1항의 약제학적 조성물의 제조 방법으로서, 상기 약제학적 조성물은 최종 농도로서 약 0.1중량% 내지 약 0.4중량%의 상기 그린 포르피린, 약 5중량% 내지 약 55중량% 사이의 상기 벤질 알코올, 약 7중량% 내지 약 25중량% 사이의 상기 DGME, 및 약 25중량% 내지 약 60중량% 사이의 상기 IPA를 갖는 것인 약제학적 조성물의 제조 방법.
제 10항에 있어서,
a) 그린 포르피린 용액을 포함하는 상기 제 1의 바이알은 벤질 알코올 중 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀을 포함하고,
b) 상기 제 2의 바이알은 약 35.6중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 54.39중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA, 약 5.56중량%의 초기 농도로 존재하는 올레일 알코올, 약 2.78중량%의 초기 농도로 존재하는 멘솔, 약 1.11중량%의 초기 농도로 존재하는 메틸 살리실레이트 및 약 0.56중량%의 초기 농도로 존재하는 폴리소르베이트 80의 용액을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제 10항에 있어서,
a) 그린 포르피린 용액을 포함하는 상기 제 1의 바이알은 약 1.00중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.00중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고,
b) 상기 제 2의 바이알은 약 24.30중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 약 28.55중량%의 초기 농도로 존재하는 벤질 알코올, 및 약 47.15중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA의 용액을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제 10항에 있어서,
a) 그린 포르피린 용액을 포함하는 상기 제 1의 바이알은 약 0.60중량%의 초기 농도로 존재하는 레무테포르핀 및 약 99.40중량% 농도의 벤질 알코올을 포함하고,
b) 상기 제 2의 바이알은 약 34.00중량%의 초기 농도로 존재하는 DGME, 및 약 66.00중량%의 초기 농도로 존재하는 IPA의 용액을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제 10항에 있어서,
상기 그린 포르피린은 레무테포르핀인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
(a) 환자 피부의 환부에 치료적으로 효과적인 양의 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항의 조성물을 적용하고,
(b) 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 피지선 내에 국재화하게 두고,
(c) 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는,
지성 피부 영역을 갖는 환자의 상기 피부에서의 피지선의 피지 분비율을 감소시키는 방법.
제 15항에 있어서,
상기 감광제는 그린포르피린인 것을 특징으로 하는 방법.
제 16항에 있어서,
상기 그린 포르피린은 레무테포르핀인 것을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서,
상기 환자의 환부는 상기 조성물을 적용하기 전에 건조열로 전처리되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서,
상기 감광제를 국재화하게 두는 시간은 1 내지 2시간인 것을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서,
상기 빛 에너지 노출은 37.5 내지 300J/cm²의 범위인 것을 특징으로 하는 방법.
여드름 병변을 갖는 환자 피부의 환부에 치료적으로 효과적인 양의 제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항의 감광제 조성물을 적용하고, 충분한 시간 동안 적어도 일부의 감광제가 환부의 피지선 내에 국재화하게 두고, 상기 감광제를 활성화할 수 있는 파장의 빛 에너지를 상기 환자의 상기 피부에 노출시키는 것을 포함하는, 치료가 필요한 환자의 여드름 치료 방법.
제 21항에 있어서,
상기 환자는 염증성 여드름 병변, 비염증성 여드름 병변, 또는 염증성 및 비염증성 병변을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서,
상기 감광제는 그린 포르피린인 것을 특징으로 하는 방법.
제 23항에 있어서,
상기 그린 포르피린은 레무테포르핀인 것을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서,
상기 환자의 환부는 상기 조성물을 적용하기 전에 건조열로 전처리하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서,
상기 감광제를 국재화하게 두는 시간은 1 내지 2시간인 것을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서,
상기 빛 에너지 노출은 37.5 내지 300J/cm²의 범위인 것을 특징으로 하는 방법.