MX2014013723A - Composicion de proteinas resistente a esterilizacion por radiacion. - Google Patents

Abstract

Una composición de proteína que comprende una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa como un aditivo y tiene resistencia a la esterilización por radiación.

Description

COMPOSICION DE PROTEINAS RESISTENTE A ESTERILIZACION POR RADIACIÓN CAMPO TÉCNICO La presente invención se refiere a una composición de proteina que comprende los aminoácidos específicos y/o un derivado de éter de celulosa y tiene resistencia a la esterilización por radiación.

TÉCNICA ANTERIOR Las proteínas naturales y sintéticas son cada vez más y más importantes como medicamentos. Cuando se usan para aplicaciones médicas, sus productos deben ser esterilizados. Como medio de esterilización, se conocen la esterilización por calor en un autoclave, la esterilización con radiación ionizante tal como un rayo g o haz de electrones, la esterilización por gas con un gas de óxido de etileno, esterilización por plasma con peróxido de hidrógeno, y la esterilización por separado usando un esterilizante químico que comprende una formulación de glutaraldehído o un filtro. Sin embargo, las actividades de las proteínas tales como proteínas bioactivas se reducen mediante esterilización con calor o radiación. La esterilización con óxido de etileno tiene posibilidades de que un subproducto puede ser producido por una reacción química y que un gas residual altamente tóxico puede afectar negativamente el cuerpo humano. La esterilización con un esterilizante químico tiene un problema de que la resistencia a un esterilizante de una proteína y cambios en el pH, la intensidad de iones y la temperatura debe ser tomada en cuenta. Entonces, para la fabricación de productos farmacéuticos y médicos que contienen o inmovilizan una proteína, sus procesos de producción deben ser llevados a cabo totalmente en condiciones estériles y se requiere una gran cantidad de costos de producción.

Aunque una solución que contiene una proteína se somete a esterilización separada con un filtro, es difícil aplicar esta esterilización separada a una composición que contiene partículas grandes o una composición sólida o semisólida.

La patente EP0437095 enseña que un producto de celulosa oxidado neutralizado en combinación con heparina o un fragmento de heparina (NORC) se puede esterilizar por irradiación con rayos gamma. Sin embargo, este documento no enseña la esterilización de ORC o n-ORC al cual se une una proteína.

La patente EP0562864 describe una sustancia para el cuidado de la herida compuesta que contiene una matriz de esponja de colágeno, un segundo polímero bioabsorbible, tal como una fibra dispersada de celulosa regenerada oxidada (ORC) y un agente activo como el péptido. Este documento enseña que el agente activo puede estar contenido en la matriz, el polímero bioabsorbible o ambos de ellos y que la sustancia de esponja de material compuesto se puede esterilizar mientras está empacado.

La patente US5730933 describe un método de esterilización péptido biológicamente activo con rayos gamma o irradiación con haz de electrones sin la pérdida de la actividad biológica del péptido. Este método es una teenología que comprende las etapas de formar una mezcla de péptido biológicamente activo y una proteína extraña tal como la gelatina, la congelación o liofilización de esta mezcla, y la irradiación de la misma. Este documento enseña que la existencia de la proteína extraña estabiliza el péptido y evita la reducción de la actividad del péptido.

La patente W02000/033893 da a conocer un complejo de péptido terapéutico y un polisacárido seleccionado del grupo que consiste en celulosa regenerada oxidada, celulosa regenerada oxidada neutralizada y mezclas de los mismos. Este documento enseña que cuando el péptido se formula junto con una cantidad eficaz del polisacárido antes de la esterilización con radiación ionizante, la actividad biológica del agente terapéutico de péptido no se pierde y se estabiliza si el péptido se esteriliza con radiación ionizante.

Sin embargo, estos documentos no sugieren que la desactivación de una proteína en el momento de la esterilización con radiación ionizante puede ser suprimida por formar un derivado de éter de celulosa y coexistente especifica aminoácidos con la proteina.

Mientras tanto, el documento JP-A 2011-47089 da a conocer un procedimiento para producir una nanofibra que contiene una enzima que tiene una excelente actividad de la enzima. En este proceso, una solución de centrifugación que contiene una enzima y un polímero disuelto en un disolvente no acuoso se hace girar por un método de centrifugación electrostática para formar una nanofibra de ziógeno que se imparte a continuación con agua y se seca. Sin embargo, este documento no dice nada acerca de la esterilización de la nanofibra que contiene la enzima.

DESCRIPCION DE LA INVENCION Es un objeto de la presente invención proporcionar una composición de proteina que tiene resistencia a la esterilización por radiación.

Los inventores de la presente invención realizaron estudios intensivos para resolver el problema anterior y encontraron que, sorprendentemente, la resistencia a la esterilización por radiación de una proteina se mejora haciendo una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa coexistente con la proteina. La presente invención se realizó basándose en este descubrimiento.

Es decir, la presente invención es una composición de proteina que comprende una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa como aditivo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra el efecto de resistencia de esterilización para una proteina de una combinación de un derivado de éter de celulosa y aditivos específicos de la presente invención (eje de ordenadas: gel valor relativo intensidad (antes de la esterilización: 100)); y La Figura 2 muestra el efecto de la esterilización de resistencia de una combinación de un derivado de éter de celulosa y aditivos específicos de la presente invención (eje de ordenadas: un aumento en la cantidad de un agregado de proteína (%)).

MEJOR MODO DE LLEVAR A CABO LA INVENCIÓN La presente invención es una composición de proteína que comprende una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa como aditivo.

La proteína utilizada en la presente invención no está particularmente limitada. Los ejemplos de la proteína incluyen proteínas hemostáticas tipificados por el fibrinógeno y la trobina, enzimas tipificadas por asparaginasa, catalasa, superóxido dismutasa y lipasa, proteínas de transporte tipificadas por la hemoglobina, albúmina de suero y lipoproteínas de baja densidad, las proteínas musculares se caracterizan por la actina y la miosina, proteínas de defensa tipificadas por anticuerpos y complementos, proteínas de toxina tipificadas por toxina de la difteria, toxina botulínica y veneno de serpiente, hormonas de proteínas tipificadas por la insulina, factores de crecimiento y citoquinas, proteínas de almacenamiento tipificadas por la ovoalbúmina y la ferritina, proteínas estructurales tipificadas por el colágeno y la queratina, y factores de crecimiento epidérmico tipificadas por factor de crecimiento (EGF), factor de crecimiento tipo insulina (IGF), factor de crecimiento transformante (TGF), factor de crecimiento nervioso (NGF), factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF), factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF), factor de estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF), factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), eritropoyetina (EPO), trombopoyetina (TPO), factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF o FGF2) y factor de crecimiento de hepatocitos (HGF). De estos, se prefieren las proteínas hemostáticas, enzimas, proteínas de transporte, proteínas musculares, proteínas de defensa, proteínas de toxinas, hormonas proteicas, proteínas de almacenamiento, proteínas estructurales y factores de crecimiento, y el fibrinógeno se prefiere particularmente.

La proteína utilizada en la presente invención puede ser de origen animal o fabricada por una téenica de recombinación genética. Si es de origen animal, que es preferiblemente de origen humano. La proteína fabricada por la técnica de recombinación genética puede ser una variante obtenida mediante la sustitución de la secuencia de aminoácidos por otra secuencia de aminoácidos si la bioactividad esencial es la misma.

También se pueden usar las proteínas obtenidas mediante la modificación de estas proteínas y mezclas de los mismos.

Para la proteína usada en la presente invención, un estabilizador y un aditivo que son farmacéuticamente aceptables (que se denominará como "estabilizador, etc." en lo sucesivo, y se distinguen de aditivo que se hace coexistente con la proteína para proporcionar resistencia a la esterilización por radiación en la presente invención) puede ser añadido. Los ejemplos preferidos del estabilizador, etc. incluyen arginina, isoleucina, ácido glutámico, ácido cítrico, cloruro de calcio, cloruro de sodio, inhibidores de la proteasa (tales como aprotinina), albúmina, agentes agente tensioactivos, fosfolípidos, polietilenglicol, hialuronato de sodio, glicerina, trehaiosa y alcoholes de azúcar (tales como glicerol y manitol). Al menos se prefiere uno seleccionado de arginina, cloruro de sodio, trehalosa, manitol y ácido cítrico, y el ácido cítrico es particularmente preferido.

Una mezcla de la proteína y el estabilizador, etc. utilizado en la presente invención contiene la prcteína en una cantidad de no más de 35 partes en peso, preferiblemente no más de 30 partes en peso basado en 100 partes en peso de la mezcla.

Cuando el aditivo utilizado en la presente invención es una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina, el contenido de glicina es generalmente de 5 a 90 partes en peso, preferiblemente de 15 a 60 partes en peso, más prefe iblemente 20 a 40 partes en peso, el contenido de fenilalanina es generalmente de 1 a 80 partes en peso, preferiblemente de 2 a 40 partes en peso, más preferiblemente de 4 a 20 partes en peso, y el contenido de histidina es generalmente de 2 a 70 partes en peso, preferiblemente de 5 a 40 partes en peso, más preferiblemente 8 a 20 partes en peso basado en 100 partes en peso del total del aditivo y la proteína.

Cuando el aditivo en la presente invención es un derivado de éter de celulosa, la proteína o una mezcla de la proteína y el estabilizador, etc. utilizados en la presente invención, pueden estar soportados sobre el derivado de éter de celulosa, pero preferiblemente contenidos en el derivado de éter de celulosa (la palabra "contenido" se refiere a un estado que al menos parte de la proteina entra en el interior del derivado de éter de celulosa). En este caso, las moléculas de la proteina y el estabilizador, etc. pueden ser dispersados en el derivado de éter de celulosa, pero preferiblemente como partículas formadas por la agregación de las moléculas de la proteína y el estabilizador, etc. (pueden ser denominadas como "partículas de proteína", incluyendo partículas mezcladas con el estabilizador, etc.).

Esta existencia preferida de la proteína o las partículas de proteína en el derivado de éter de celulosa se mantiene sin cambios cuando el aditivo es sólo el derivado de éter de celulosa y también cuando el aditivo se compone de una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y el derivado de éter de celulosa.

Ejemplos del derivado de éter de celulosa usado en la presente invención incluyen hidroxipropil celulosa, metil celulosa, hidroxietrl celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, carboximetil celulosa de socio y mezclas de los mismos.

Uno seleccionado del grupo que consiste en hidroxipropil celulosa, hidroxieti1 celulosa, hidroxipropilmetil celulosa y mezclas de los mismos se prefiere, e hidroxipropi1 celulosa es el más preferido.

Aunque el peso molecular del derivado de éter de celulosa usado en la presente invención no está particularmente limitado, cuando la medición de la viscosidad se lleva a cabo a una concentración de 2% y 20 °C, se selecciona un peso molecular que exhibe una viscosidad de 1 a 10.000 mPa · s, preferiblemente de 2 a 5000 mPa · s, más preferiblemente de 2 a 4000 mPa · s.

En la composición de proteina de la presente invención, otro polímero u otro compuesto se pueden utilizar en combinación, siempre que el objeto de la presente invención no se vea afectado.

El derivado de éter de celulosa utilizado en la presente invención tiene preferiblemente alta pureza. Especialmente, el contenido de aditivos y plastificante contenidos en el derivado de éter de celulosa y residuos tales como catalizador residual, monómeros residuales y el disolvente residual utilizado para el moldeo y post procesamiento son preferiblemente tan bajos como sea posible. Especialmente cuando la composición se usa con fines médicos, es necesario reducir estos contenidos a valores por debajo de las normas de seguridad.

La forma de la composición de proteína de la presente invención no se limita a una forma particular incluyendo una forma indeterminada, y la composición puede estar en forma de una película, fibra, lámina, cuerpo en forma de placa, el cuerpo similar a un tubo, el cuerpo lineal, en forma de varilla cuerpo, el material amortiguador, espuma o cuerpo poroso. El método de moldeo para producir un producto moldeado no está particularmente limitado si es un método en el que no se reduce la actividad de la proteina. Por ejemplo, se pueden emplear las téenicas de moldeo adecuadas, tales como moldeo por extrusión, moldeo por inyección, moldeo por calandrado, moldeo por compresión, moldeo por soplado, conformación al vacio, moldeo en polvo, moldeo por colado y colado. La composición de proteina de la presente invención es adecuada para la producción de películas y fibras. La forma de fibras, como se usa aquí, se refiere a un cuerpo moldeado 3-D formado por la laminación, tejido, tricotado u otra técnica de uno o una pluralidad de fibras. La forma de la fibra es, por ejemplo, una tela no tejida. Además, un tubo y una malla obtenida mediante el procesamiento de la tela no tejida se incluyen en la forma de fibra.

Para la producción de éstos, cualquiera de las técnicas que se han empleado para la producción de películas o fibras de plástico pueden ser empleados. Por ejemplo, se pueden usar técnicas de moldeo por extrusión tales como la fundición, electrocentrifugado, moldeo por extrusión inflación y moldeo por extrusión de boquilla en T, y la técnica de calandrado. El moldeo anterior puede ser moldeo solución o masa fundida de moldeo, de los cuales la solución de moldeo se prefiere con el fin de facilitar la dispersión de la proteína o las partículas de proteína a fin de evitar el deterioro funcional de la proteína.

El proceso para producir la composición de proteína que tiene una forma de película de la presente invención se explicará, tomando la téenica de fundición como un ejemplo. Partículas de proteína que tiene un diámetro medio de partícula (generalmente de 0.1 a 200 mm, preferiblemente 1 a 100 mm) adecuada para la dispersión en un disolvente se preparan golpeando polvos de proteína liofilizada en un mortero. Después de que las partículas de proteína se dispersan en uno o más disolventes adecuados (tales como 2-propanol y etanol), que puede disolver el derivado de éter de celulosa, puede formar una suspensión con las partículas de proteína y se evapora en el paso de formación de película para formar una película, la derivado de éter de celulosa y además opcionalmente un plastificante tal como MACROGOL se disuelven en la dispersión resultante para preparar una solución de contaminación que contiene las partículas de proteína dispersadas en la solución del derivado de éter de celulosa. Una película se forma por la técnica de fundición utilizando la solución de contaminación obtenida.

La composición de proteína que tiene una forma de película de la presente invención comprende la proteína o las partículas de proteína en una cantidad generalmente de no menos de 100% en peso, preferiblemente no menos de 500% en peso, más preferiblemente de 800 a 950% en peso basado en l celulosa derivado de éter aunque esto depende del tipo de la proteina y del tipo de derivado de éter de celulosa. Cuando el contenido de la proteina o las partículas de proteína cae por debajo del intervalo anterior, la función de la proteína puede no obtenerse completamente y cuando el contenido excede el intervalo anterior, la capacidad de moldeo de película puede llegar a ser insatisfactorio.

El espesor medio de una película de la composición de proteína que tiene una forma de película de la presente invención que difiere de acuerdo con el uso previsto es preferiblemente de 10 a 1000 jum.

El diámetro promedio de la fibra de la composición de proteína que tiene una forma de fibra de la presente invención es, por ejemplo, 0.01 a 50 mm y puede determinarse adecuadamente por una persona experta en la téenica de acuerdo con el uso previsto. La composición de proteínas puede estar en la forma de una fibra larga. La fibra larga es una fibra formada sin la adición de la etapa de cortar una fibra en el curso de la transición desde el centrifugado hasta el procesamiento de un cuerpo de fibra moldeada. Puede estar formado por electrocentrifugado, unión duradera y métodos de soplado por fundición. De estos, se prefiere el método de electrocentrifugado como la fibra larga puede ser moldeado sin la adición de calor y el deterioro funcional de la proteína puede ser suprimida.

El método electrocentrifugado es un método en el que se obtiene un cuerpo moldeado de fibra en un electrodo mediante la aplicación de un alto voltaje a una solución que contiene un polímero. Este procedimiento comprende las etapas de preparar una solución de centrifugado que contiene un polímero, aplicando un alto voltaje a la solución, dispersión a chorro de la solución, formando un cuerpo moldeado de fibra por evaporación del disolvente de la solución de hidro asaje, eliminando la carga de la fibra formada como cuerpo moldeado un paso opcional, y acumulando el cuerpo moldeado de fibra por la pérdida de carga.

Se da una descripción posteriormente del proceso para producir la composición de proteína que tiene una forma de fibra o una forma de tela no tejida de la presente invención, teniendo el método de electrocentrifugado como un ejemplo.

Se explicará la etapa de preparar una solución de centrifugado en el método de electrocentrifugado. Una suspensión de una solución de proteínas y derivados de éter de celulosa partículas se usa preferiblemente como la solución de centrifugado en la presente invención.

La concentración del derivado de éter de celulosa en la suspensión es preferiblemente de 1 a 30% en peso. Cuando la concentración del derivado de éter de celulosa es inferior a 1% en peso, es difícil formar un cuerpo de fibra moldeada de manera desventajosa. Cuando la concentración es mayor que 30% en peso, el diámetro de la fibra del cuerpo de fibra moldeado obtenido se hace grande y la viscosidad de la suspensión se hace alta desventajosamente. La concentración del derivado de éter de celulosa en la suspensión es más preferiblemente 1.5 a 20% en peso.

El disolvente para el derivado de éter de celulosa no está particularmente limitado si se puede disolver el derivado de éter de celulosa, forma una suspensión con las partículas de proteína y se evapora en la etapa de centrifugado de manera que se puede formar una fibra. Sólo pueden utilizar un disolvente o una combinación de dos o más disolventes se. Los ejemplos del disolvente incluyen el cloroformo, 2-propanol, tolueno, benceno, alcohol bencílico, diclorometano, tetracloruro de carbono, ciclohexano, ciclohexanona, tricloroetano metil etil cetona, acetato de etilo, acetona, etanol, metanol, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, 1-propanol, fenol, piridina, ácido acético, ácido fórmico, hexafluoro-2-propanol, hexafluoroacetona, N, N-dimetilformamida, N, N-dimetilacetamida, acetonitrilo, N-metil-2-pirrolidinona, N-óxído de N-metilmorfolina, 1,3-dioxolan, agua y mezclas de los mismos. De estos, 2-propanol o etanol se utilizan preferiblemente desde los puntos de vista de facilidad de manejo y las propiedades fisicas.

Aunque el método de preparación de una suspensión mezclando entre si la solución del derivado de éter de celulosa y las partículas de proteina no está particularmente limitadas, se pueden usar las ondas ultravioleta o medios de agitación. Como los medios de agitación, se pueden usar medios de agitación de alta velocidad tal como un homogeneizador o medios de agitación tal como un molino de bolas o dispositivo de abrasión. De estos, se prefiere dispersión con ondas ultrasónicas.

Además, la solución de centrifugado se puede preparar por adición del derivado de éter de celulosa después de una suspensión se forma a partir de un disolvente y las partículas de proteína.

Antes de la preparación de la suspensión, las partículas de proteína pueden ser microfabricadas. Para microfabricación, hay molienda en seco y molienda en húmedo tanto de que se puede emplear y también se pueden combinar en la presente invención.

La molienda en seco se lleva a cabo por molienda con un molino de bolas, molino planetario o un molino oscilante, golpeando en un mortero con una mano de mortero, o por molienda con un tipo de medio de agitación pulverizador, molino de chorro o molino de piedra.

Mientras tanto, la molienda en húmedo se lleva a cabo mediante agitación con un agitador o amasadora que tiene una alta fuerza de esfuerzo cortante, mientras que las partículas de proteína se dispersan en un medio de dispersión adecuado, o mediante el uso de un molino de bolas o molino de perlas, mientras que las partículas de proteína se dispersan en un medio.

Además, también se pueden usar partículas de proteína producidas por un secador de esterilización.

En la composición de proteínas que tiene una forma de fibra o una forma de tela no tejida de la presente invención, los tamaños de las partículas de proteína no se limitan particularmente, pero preferiblemente de 0.01 a 100 pm. Es téenicamente difícil de fabricar partículas de proteínas que tienen un tamaño de partícula menor de 0.01 mm, y cuando el tamaño de las partículas es mayor que 100 pm, degrade dispersabilidad y el cuerpo moldeado de fibra se vuelve desventajosamente frágil.

El método de esterilización utilizado para la composición de proteínas de la presente invención es la esterilización por radiación. Los ejemplos de la radiación incluyen rayos alfa, rayos beta, rayos gamma, rayos de neutrones, rayos de electrones y rayos-X. De estos, se prefieren los rayos gamma y haces de electrones, y son los más preferidos haces de electrones. Aunque el método de esterilización no se limita particularmente, la dosis de la radiación es 10 a 80 kGy, preferiblemente de 20 a 30 kGy. Aunque la condición de temperatura no está particularmente limitada, es -80 a 40 ° C, preferiblemente de -80 a 30 °C.

La radiación tal como rayos alfa, positrones, rayos gamma, rayos de neutrones, haces de electrones o rayos X tiras de un electrón a partir de moléculas o átomos que constituyen una sustancia cuando se aplica a la sustancia. Un enlace molecular se rompe por esto, y se produce un radical altamente reactivo y reacciona químicamente con una sustancia que rodea secundariamente.

Es bien sabido que una proteína tiende a perder su función (actividad) después de la exposición a la radiación. Esto se considera que es debido a la destrucción de "una estructura de orden superior", que es una fuente de desarrollar una función por la rotura de una unión molecular por la exposición. Sin embargo, el deterioro funcional de la composición de proteínas de la presente invención se suprime incluso cuando se expone a la radiación. Esto significa que la estructura de orden superior de la proteína es retenida en la composición de la presente invención, que es un efecto común independientemente del tipo de la proteína. No se considera a partir del espesor del derivado de éter de celulosa a través del cual se transmite la radiación que este efecto es debido a la detección, y el mecanismo de control no se conoce. No se conoce bien el mecanismo de un fenómeno que el efecto del derivado de éter de celulosa se mejora notablemente mediante la adición de aminoácidos específicos.

La composición de proteína de la presente invención puede comprender además un electrón/eliminador de iones, agente de transferencia de energía, eliminador de radicales, antioxidantes y plastificante. Ejemplos del eliminador de electrones/iones incluyen N, N'-tetrametil fenilendiamina, difenilendiamina, pireno y quinona. Ejemplos del agente de transferencia de energía incluyen acenafteno. Ejemplos del eliminador de radicales incluyen mercaptanos, octahidrofenantreno, monoalquil éteres de difenilo, tocoferol, ácido cítrico, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, hidroquinona t-butilo, galato de propilo y derivados de ácido ascórbico. Los ejemplos del antioxidante incluyen BHT, triésteres fosfito, agentes antienvejecimiento fenólico y sales de ácidos tio orgánicos. Se prefieren los aditivos que son generalmente aceptados como seguros para su uso en alimentos y productos farmacéuticos. La cantidad del aditivo que no está particularmente limitado es, por ejemplo, de 0.01 a 10% en peso basado en el derivado de éter de celulosa en la composición de proteínas.

El derivado de éter de celulosa que contiene la proteina en la etapa de esterilización contiene preferiblemente nada de agua. El contenido en agua del derivado de éter de celulosa es preferiblemente no más de 10% en peso, más preferiblemente no más de 4% en peso, mucho más preferiblemente, sustancialmente 0% en peso.

La composición de proteina de la presente invención puede ser envuelta en un material de empaque a esterilizar con radiación. A medida que el material de empaque, se utiliza preferiblemente un material que tiene propiedades de barrera de gases de alta tales como aluminio. La composición de proteínas puede estar herméticamente sellado y empaquetado junto con un desoxidante o desecante o mientras un gas inerte se introduce en el empaque después de desgasificación, o ambos métodos pueden combinarse entre sí. Como el desoxidante y el desecante, se prefieren los que no hacen daño al cuerpo humano y no se desactivan por la exposición a la radiación.

La composición de proteina de la presente invención puede ser utilizada como un material médico que requiere la función y la esterilidad de una proteína.

La presente invención incluye una composición de proteína estéril obtenida mediante la esterilización de la composición de proteínas de la presente invención con radiación.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos se proporcionan con el fin de ilustrar adicionalmente la presente invención, pero no son de ninguna manera de tomarse como limitantes.

Los métodos de medición para los Ejemplos 1 a 4 y Ejemplos Comparativos 1 y 2 1. Promedio diámetro de la fibra: Los diámetros de fibras en lugares seleccionados al azar de una foto de la superficie del cuerpo moldeado de fibra obtenido tomada por un microscopio electrónico de barrido (VE8800 de Keyence Corporation) con un aumento de 3000 veces para obtener el valor promedio de todos los diámetros de las fibras como diámetro promedio de fibra. N = 20. 2. Espesor promedio: Los espesores de película de 15 cuerpos moldeados de fibra cortados a un tamaño de 50 mm x 100 m se midieron con una fuerza de medición de 0.01 N por medio de una unidad (LITEMATIC VL-50 de Mitutoyo Corporation) de alta resolución de medición digimatic para calcular el promedio valor. Esta medición se llevó a cabo con la fuerza medida mínima que podría ser utilizado por la unidad de medición. 3. Medición ELISA (1) Fibrinógeno 10 mg/ml de un anticuerpo antihumano fibrinógeno (DAKO A0080) se inmovilizó a una placa ELISA (Nunc 468667). Después de que se lavó con PBS que contenia 0.05% de Tween 20, Block Ace (UK-B80 de DS Biomedical Pharma Co., Ltd.) se añadió a cada pocilio para llevar a cabo el enmascaramiento. Después de lavar con PBS que contenia 0.05% de Tween 20, se añadió un cuerpo de prueba. El fibrinógeno humano (núm. FIB3 de Enzyme Research Laboratories) fue utilizado como un estándar para formar una curva de calibración. Después de lavar con PBS que contenía 0.05% de Tween 20, se añadió un anticuerpo antihumano de fibrinógeno marcado con HRP (CPL5523). Después de una reacción, el producto de reacción se lavó con PBS que contenía 0.05% de Tween 20, un reactivo TMB (KPL 50-76-0250-65-02) se añadió, y la mezcla resultante se dejó durante 6 minutos para desarrollar color.1 M H3PO4 se añadió para detener el desarrollo de color a fin de medir OD450-650 nm con un lector de microplacas. (2) Trombina 5 mg/ml de un anticuerpo antihumano de trombina (núm SAHT-AP de Affinity Biologicals, Inc.) se inmovilizó a una placa ELISA (Nunc 468667). Después de que se lavó con PBS que contenia 0.05% de Tween 20, Block Ace (UK-B80 de DS Biomedical Pharma Co., Ltd.) se añadió a cada pocilio para llevar a cabo el enmascaramiento. Después de lavar con PBS que contenia 0.05% de Tween 20, se añadió un cuerpo de prueba. La trombina humana (HCT-0020 de Haematologic Technologies, Inc.) fue utilizada como un estándar para formar una curva de calibración. Después de lavar con PBS que contenía 0.05% de Tween 20, 0.1 mg/ml de un anticuerpo trombina antihumano marcado con HRP se añadió (núm SAHT-HRP de Affinity Biologicals, Inc.). Después de una reacción, el producto de reacción se lavó con PBS que contenía 0.05% de Tween 20, se añadió un reactivo TMB (DAKO S1599), y la mezcla resultante se dejó durante 10 minutos para desarrollar color. H2SO40.5 M se añadió para detener el desarrollo de color a fin de medir OD450-650 nm con un lector de microplacas. 4. Medición de la accividad de la trombina 20 mL de una muestra y 80 pL de una solución de dilución para la medición de actividad (0.01% F-68, 50 mmol/L de NaCl, 50 mmol/L Tris-HCl, pH 8.4) se añadieron al tubo de poliestireno de BD a se incubaron a 37 °C durante 3 minutos. Tro bina recombinante (JPU trombina Standard 400 U/mL o de la OMS/US trombina Standard 110 IU/ml: preparado por sus propias empresas) diluido con el tampón anterior a 4, 2, 1, 0.5 y 0.25 U/ml en el caso de JPU y 6, 3, 1.5, 0.75 y 0.375 IU/mL en el caso de IU fue utilizado como un estándar.100 pL del equipo de prueba de sustrato cromogénico S-2238 (1 mM: Daiichi Puré Chemicals Co., Ltd.) se añadieron y se mezclaron con la solución de reacción obtenida bajo agitación para llevar a cabo una reacción a 37 °C durante 7 minutos, y luego se añadió 800 mL de una solución de ácido cítrico 0.1 M para terminar la reacción. 200 ml de la solución de reacción se transfirió a placas de 96 pocilios para medir 00405/650.

Ejemplo 1 Después de que los polvos liofilizados de fibrinógeno (Bolheal, (marca comercial registrada, el mismo se aplicará en adelante), adhesivo tisular: Vial 1) se dispersaron en 2-propanol, se disolvió hidroxipropil celulosa (6-10 mPa *s, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd.) en la dispersión resultante a una concentración de 16% en peso para preparar una solución de centrifugado que tiene una relación de partículas que contienen fibrinógeno /hidroxipropil celulosa de 20 (9.2 como fibrinógeno)/100 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo mediante un método de electrocentrifugado a una temperatura de 22 °C y una humedad de no más del 26% para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El diámetro interior de una boquilla de chorro fue de 0.8 mm, la tensión fue de 11 kV, la velocidad de flujo de la solución de centrifugado fue de 1.2 ml/h, y la distancia desde la boquilla de chorro a una placa plana fue de 15 cm. El cuerpo de fibra moldeado obtenido tenia un diámetro de fibra promedio de 0.86 mm y un espesor medio de 137 mch. La lámina obtenida se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy. La lámina esterilizada se cortó a un tamaño de 0.5 cm x 0.5 cm, y la proteina se extrajo con 62.5 ml de solución salina fisiológica para llevar a cabo la medición ELISA. Como resultado, la cantidad de la proteina inmovilizada fue de 0.15 mg/cmz. Mientras tanto, cuando la medición ELISA se realizó sobre la lámina no esterilizada del mismo modo, la cantidad de la proteína inmovilizada fue de 0.16 mg/cm2. Por lo tanto, la velocidad de recuperación de la proteína de la lámina esterilizada fue del 94% de la de la lámina no esterilizada.

Ejemplo 2 Después de polvos de fibrinógeno liofilizado (Bolheal adhesivo tisular: Vial 1) se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropil celulosa (6-10 mPa · s, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd.) se disolvió en la dispersión resultante a una concentración de 16 % en peso a fin de preparar una solución de centrifugado que tiene una relación de polvo liofilizado de fibrinógeno/hidroxipropil celulosa de 40 (18 como fibrinógeno)/100 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo por el método de electrocentrifugado a una temperatura de 22 °C y una humedad de no más del 26% para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El diámetro interior de la boquilla de chorro fue de 0.8 mm, la tensión fue de 12.5 kV, la velocidad de flujo de la solución de centrifugado fue de 1.2 ml/h, y la distancia desde la boquilla de chorro a la placa plana fue de 15 cm. El cuerpo de fibra moldeado obtenido tenia un diámetro de fibra promedio de 0.43 mm de lámina no esterilizada y un espesor medio de 152 mm de lámina no esterilizada. La lámina obtenida se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy. La lámina esterilizada se cortó a un tamaño de 0.5 cm x 0.5 cm, y la proteina se extrajo con 62.5 ml de solución salina fisiológica para llevar a cabo la medición ELISA. Como resultado, la cantidad de la proteina inmovilizada fue de 0.27 mg/cm2. Mientras tanto, cuando la medición ELISA se realizó sobre la lámina no esterilizada del mismo modo, la cantidad de la proteina inmovilizada fue de 0.30 mg/cm2. Por lo tanto, la velocidad de recuperación de la proteina de la lámina esterilizada fue de] 90% de la de la lámina no esterilizada.

Ejemplo 3 Después de polvos de fibrinógeno liofilizado (Bolheal adhesivo tisular: Vial 1) se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropil celulosa (6-10 mPa · s, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd.) se disolvió en la dispersión resultante a una concentración de 16 % en peso a fin de preparar una solución de centrifugado que tiene una relación de polvo liofilizado de fibrinógeno/hidroxipropil celulosa de 100 (46 como fibrinógeno)/100 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo por el método de electrocentrifugado a una temperatura de 22 °C y una humedad de no más del 26% para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El diámetro interior de la boquilla de chorro fue de 0.8 mm, la tensión fue de 12.5 kV, la velocidad de flujo de la solución de centrifugado fue de 1.2 ml/h, y la distancia desde la boquilla de chorro a la placa plana fue de 15 cm. La lámina obtenida se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy.

Ejemplo Comparativo 1 Los polvos de fibrinógeno liofilizado (adhesivo tisular Bolheal: Vial 1) fueron esterilizadas con un haz de electrones de 20 kGy. La proteina se extrajo con 1 mi de solución salina fisiológica para llevar a cabo la medición ELISA. Como resultado, el valor de medición ELISA fue de 31 mg/mL. Mientras tanto, cuando la medición ELISA se realizó sobre polvos liofilizados de fibrinógeno no esterilizados (Bolheal) Del mismo modo, el valor de medición ELISA fue de 90 pg/mL. Por lo tanto, la velocidad de recuperación de la proteina de la lámina esterilizada fue de 34% de la de la lámina no esterilizada.

Ejemplo 4 Después de partículas que contiene trombina (preparada por liofilización de una solución acuosa que contiene 1 g/ml de trombina recombinante, cloruro de sodio, citrato de sodio, cloruro de calcio y manitol y tiene un pH de 7) se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropil celulosa (2.0- 2.9 mPa · s, fabricado por Nippon Soda Co., Ltd.) se disolvieron en la dispersión resultante a una concentración de 13% en peso con el fin de preparar una solución de contaminación que tiene una relación de partículas de celulosa/hidroxipropilo que contiene trombina de 100/100 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo por el método de electrocentrifugado para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El cuerpo moldeado de fibra obtenido tenía un espesor de 204 mm, un peso de 2.08 mg/cm2 y una densidad aparente de 101 mg/cm3. La lámina obtenida se cortó a un diámetro de 1 cm, y la proteína se extrajo con 200 ml de solución salina fisiológica para medir su actividad. Como resultado, el valor de nedición de la actividad fue de 110.3 U/cm2. La lámina obtenida se esteriliza por exposición a un haz de electrones 30 kGy para medir la actividad de la trombina. Cuando la actividad de la trombina antes de la esterilización fue de 100%, la velocidad de retención de la actividad de la trombina justo después de la exposición a un haz de electrones fue de 68.4%.

Ejemplo Comparativo 2 Después de que se aplicó un haz de electrones 30 kGy a las partículas que contiene trombina (preparada por liofilización de una solución acuosa que contiene 1 mg/ml de trombina recombinante, cloruro de sodio, citrato de sodio, cloruro de calcio y manitol y tiene un pH de 7) para esterilizarlos, se midió la actividad de la trombina. La actividad de trombina antes de la exposición fue de 404.73 U/vial. Cuando la actividad de la trombina antes de la esterilización fue de 100%, la velocidad de retención de la actividad de la trombina justo después de la exposición a un haz de electrones fue de 51.8%.

Métodos de medición para los Ejemplos 5 y 6 y en los Ejemplos Comparativos 3 y 4 1. Promedio de espesor: Los espesores de película de 9 cuerpos de fibra moldeados obtenidos mediante la reducción de la composición a un tamaño adecuado se midieron con una fuerza de medición de 0.01 N por medio de una unidad de medición de alta resolución digimatic (LITEMATIC VL-50 de Mitutoyo Corporation) para calcular el valor promedio. Esta medición se llevó a cabo con la fuerza medida mínima que podría ser utilizado por la unidad de medición. 2. Medición de la actividad de la enzima Un kit de ensayo fluorométrico continuo lipasa (fabricado por PROGEN Biotechnik GMBH) se utilizó para medir la actividad de la lipasa. La velocidad de retención de la actividad se calculó a partir de la siguiente ecuación. La cantidad de la enzima activa se calcula en términos de concentración del valor de la actividad.

Velocidad de retención de la actividad (%) {cantidad de enzima activa después de la esterilización (mg/cm2)/cantidad de enzima activa antes de la esterilización (mg/cm2)} x 100 Medición fluorescente usando Tokyogreen (marca registrada, el mismo se aplicará en lo sucesivo) -Glu (de Sekisui Medical Co., Ltd.) fue empleado para medir la actividad de b-glucosidasa. La velocidad de recuperación de la actividad se calculó a partir de la siguiente ecuación. El peso teórico de la enzima inmovilizada se calcula a partir de% en peso del polvo de enzima cargado y el peso de la composición.

Velocidad de recuperación de la actividad (%) = {cantidad de enzima activa (mg)/peso teórico de enzima inmovilizada (mg)} x 100 La velocidad de retención de la actividad se calculó a partir de la siguiente ecuación.

Velocidad de retención de la actividad (%) = {velocidad de recuperación de la actividad después de la esterilización (%)/velocidad de recuperación de la actividad antes de la esterilización (%))} x 100 Ejemplo 5 Después de que los polvos de lipasa (derivada de páncreas de cerdo, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd., lo mismo se aplicará en lo sucesivo) se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropil celulosa (6-10 mPa · s, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd.) se disolvió en la dispersión resultante a una concentración de 13% en peso para preparar una solución de centrifugado que tiene una relación de celulosa polvo de lipasa/hidroxipropilo de 50/100 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo por el método de electrocentrifugado a una temperatura de 27°C y una humedad de no más del 27% para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El diámetro interior de la boquilla de chorro fue de 0.8 mm, la tensión fue de 18 kV, la velocidad de flujo de la solución de centrifugado fue de 1.2 ml/h, y la distancia desde la boquilla de chorro a la placa plana fue de 16.5 cm. El cuerpo moldeado fibra obtenida (10 cm x 14 cm) tenía un espesor medio de 168 m. El cuerpo de fibra moldeado obtenido se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy. Después de que el cuerpo de fibra moldeada esterilizada se cortó a un tamaño de 1 cm x 1 cm, lipasa se extrajo con 1 mi de un tampón de lipasa contenida en un kit para medir su actividad. Como resultado, la cantidad de la enzima activa fue de 0.46 mg/cm2. Mientras tanto, cuando medición de la actividad se realizó sobre la lámina no esterilizada del mismo modo, la cantidad de la enzima activa fue de 0.40 mg/cm2. Se entiende desde arriba que la velocidad de retención de la actividad del cuerpo moldeado de fibra esterilizada fue de 115% de la del cuerpo moldeado de fibra no esterilizado y que la lipasa no fue desactivada por la esterilización con un haz de electrones.

Ejemplo 6 Después de que los polvos de lipasa se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropi1 celulosa (6-10 mPa s , fabricado por ako Puré Chemical Industries, Ltd.) se disolvió en la dispersión resultante a una concentración de 13% en peso con el fin de preparar una solución fundido que tiene una relación polvo de lipasa/hidroxipropil celulosa de 50/100 (p/p). De fundición se llevó a cabo mediante el uso de una cuchilla rascadora (YBA-3 de YOSHIMITSU) con una anchura de revestimiento de 0.38 mm para obtener una lámina. La lámina obtenida (4 cm x 6 cm) tenia un espesor medio de 180 mm. La lámina obtenida se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy. Después de la lámina esterilizada se cortó a un tamaño de 1 cm x 1 cm, lipasa se extrajo con 1 i de un tampón de lipasa contenidos en un kit para medir su actividad. Como resultado, la cantidad de la enzima activa fue de 0.69 mg/cm2. Mientras tanto, cuando medición de la actividad se realizó sobre la lámina no esterilizada del mismo modo, la cantidad de la enzima activa fue de 0.64 mg/cm2. Se entiende desde arriba que la velocidad de retención de la actividad de la lámina esterilizada fue de 108% de la de la lámina no esterilizada y que la lipasa no fue desactivada por la esterilización con un haz de electrones.

Ejemplo 7 Después de que los polvos de b-glucosidasa (derivados de almendra, fabricado por Oriental Yeast Co., Ltd., la misma se aplicará en lo sucesivo) se dispersaron en 2-propanol, hidroxipropil celulosa (6-10 mPa · s, fabricado por Wako Puré Chemical Industries, Ltd.) se disolvió en la dispersión resultante a una concentración de 13% en peso para preparar una solución de centrifugado que tiene una relación en polvo b-glucosidasa/hidroxipropil celulosa de 38/62 (p/p). El centrifugado se lleva a cabo por el método de electrocentrifugado a una temperatura de 27 °C y una humedad de no más del 27% para obtener un cuerpo moldeado de fibra en forma de lámina. El diámetro interior de la boquilla de chorro fue de 0.9 rom, la tensión fue de 18 kV, la velocidad de flujo de la solución de centrifugado fue de 1.2 ml/h, y la distancia desde la boquilla de chorro a la placa plana fue de 16.5 cm. El cuerpo moldeado fibra obtenida (10 cm x 10 cm) tenia un espesor medio de 207 mm. Después de que el cuerpo de fibra moldeado obtenido se cortó a un tamaño de 2 cm x 2 cm, se esterilizó con un haz de electrones 20 kGy. b-glucosidasa fue extraído de la lámina esterilizada obtenida con 1 mi de solución salina fisiológica para medir su actividad con Tokyogreen-^Glu. Como resultado, la velocidad de recuperación de la actividad fue de 42%. Mientras tanto, cuando medición de la actividad se realizó sobre la lámina sin esterilizar asi mismo, la velocidad de recuperación de la actividad fue de 46%. Se entiende desde arriba que la velocidad de retención de la actividad del cuerpo moldeado de fibra esterilizada fue del 91% de la del cuerpo moldeado de fibra no esterilizado y que la desactivación de la enzima puede ser suprimida porque lo contiene en el derivado de éter de celulosa.

Ejemplo comparativo 3 Los polvos de lipasa se esterilizaron con un haz de electrones 20 kGy.1 mi de un tampón de lipasa se añadió a 1 mg de los polvos para medir su actividad. Como resultado, el valor de actividad fue de 0.25 pmol/ml · min. Mientras tanto, cuando medición de la actividad se realizó sobre polvos de lipasa no esterilizadas del mismo modo, el valor de actividad fue de 0.34 pmol/ml min. Por lo tanto, la velocidad de retención de la actividad de los polvos esterilizados fue del 74% de la de los polvos no esterilizados.

Ejemplo Comparativo 4 Los polvos b-glucosidasa se esterilizaron con un haz de electrones 20 kGy. 2 mg de los polvos se disolvieron en 1 mi de solución salina fisiológica para medir su actividad con Tokyogreen-Glu. Como resultado, la velocidad de retención de la actividad fue de 81%.

Método de medición para los Ejemplos 8 a 10 Cuando se aplica un haz de electrones para polvos liofilizados de fibrinógeno (partículas que contiene fibrinógeno), se producen los cambios de fibrinógeno (aumento de la cantidad de su agregado, la reducción en la fuerza de gel). Para investigar el efecto de suprimir los cambios de fibrinógeno por la exposición a un haz de electrones (efecto de esterilización resistir), una solución a granel de fibrinógeno se preparó y 1 i de la solución a granel se cargó en un vial de 5 mi de vidrio a liofilizar. Un haz de electrones 30 kGy se aplicó a una parte del vial en el que se completó la liofilización para comparar cada producto liofilizado antes y después de la esterilización.

La comparación de evaluación se llevó a cabo por medición de la resistencia del gel por medio del probador de banco de tamaño pequeño EZTest (de Shimadzu Corporation) y el contenido del agregado por medio de BioSep-SEC-s4000 (de Phenomenex) (análisis de las condiciones: fraccionamiento con una solución tampón de ácido fosfórico 50 mM (pH de 7.0) y 0.5 M de arginina sal de clorhidrato como fases móviles a una velocidad de flujo de 1.0 ml/in, la detección de una sustancia diana con una longitud de onda de 280 nm, y determinar la cantidad del agregado de un pico detectado antes de un pico de monómero).

En cuanto al procedimiento de preparación de una muestra para el análisis (muestra analítica), un vial de producto liofilizado esterilizado y un vial de producto liofilizado esterilizado se disolvieron cada uno en 1 mi de agua destilada. Las soluciones resultantes se centrifugaron por un tubo de centrífuga a 15000 rpm durante 5 minutos y dejar que pase a través de un filtro de 0.45 mm para ser utilizado como muestras analíticas.

Ejemplo 8 El efecto de resistencia de esterilización para una proteina de una combinación de un derivado de éter de celulosa y aditivos específicos fue investigado por el método siguiente. (método) La función de fibrinógeno se evaluó mediante la medición de la resistencia del gel de cada una de las soluciones de fibrinógeno a granel de las composiciones que comprenden "un derivado de éter de celulosa + aditivos específicos" (composiciones (1) muestran en Nos.1 a 6 en la Tabla 1 a continuación) y soluciones de fibrinógeno a granel de las composiciones (2) preparadas mediante la eliminación del derivado de éter de celulosa a partir de las composiciones (1), y las resistencias de gel antes y después de la esterilización de estas soluciones se compararon entre sí para investigar el efecto de la esterilización resistir. Los resultados se muestran en la Tabla 2.

Las composiciones (1) (polvos liofilizados y hidroxipropil celulosa se suspendieron en 2-propanol para formar una lámina) y las composiciones (2) (polvos liofilizados) se disolvieron en agua a una concentración de 1% de Fbg y se diluyeron con una solución tampón que contiene arginina 10 mM y cloruro sódico 270 M y tiene un pH de 8.5 a una concentración de 2 mg/mL.

Después de que se agregaron 10 mL de Fibrogam in (240 unidades/ml) y 110 ml de una solución de trombina (que contiene 0.2 mg/ml de cloruro de calcio 100 mM) se añadieron a un tubo de polipropileno de 2 mi y se pipeteó la solución resultante, 900 ml de una solución de fibrinógeno 2 mg/ml se añadió de tal manera que las burbujas de aire no estaban contenidas y se dejó reposar a 37 ° C durante 1 hora para medir la resistencia del gel por medio del probador superior de bando de tamaño pequeño EZTest (de Shimadzu Corporation).

Tabla 1 Composiciones (1): composiciones que comprenden derivado de éter de cleuloaa + aditivos especificos Composiciones (2): composiciones que comprenden aditivos específicos Estas se prepararon mediante la eliminación del derivado de éter de celulosa (hidroxipropil celulosa: HPC) a partir de las composiciones (resultados) Los valores de la resistencia del gel después de la esterilización se muestran en la Tabla 2 y en la Fig. 1 cuando los valores anteriores a la esterilización son 100.

Tabla 2 Efecto de resistencia de esterilización para proteina Las composiciones de composición (1) (derivado de éter de celulosa + aditivos específicos) composiciones (2) (aditivos específicos) El efecto de mejora de resistencia a la esterilización debido a la existencia del derivado de éter de celulosa no se observó en la composición No.1, mientras que el efecto anterior debido a la existencia del derivado de éter de celulosa se observó en las composiciones Nos.2 a 6. Este efecto fue especialmente marcado en la composición Nos.3 a 6.

Ejemplo 9 La esterilización efecto de la glicina resistencia se investigó con las composiciones (dos) mostradas en la Tabla 3 a continuación de la misma manera que en el Ejemplo 8. Los resultados se muestran en la Tabla 4.

Tabla 3 composiciones para evaluar el efecto de resistencia de la esterilización de glicina Tabla 4 Resultados de la evaluación de la esterilización efecto de resistencia de la glicina Un aumento en el contenido del agregado fibrinógeno fue suprimido por la adición de glicina.

Ejemplo 10 El efecto de resistencia de esterilización de una combinación de un derivado de éter de celulosa y aditivos específicos fue investigado por el mismo método que en el Ejemplo 8.

Se utilizaron la hidroxipropil celulosa (HPC) como el derivado de éter de celulosa y ocho soluciones a granel de fibrinógeno diferentes se muestra en la Tabla 5 a continuación.1.0% de fibrinógeno, cloruro de sodio 110 mM, 1.0% de glicina y 0.2% de manitol se utilizaron en las ocho composiciones siguientes. Los resultados se muestran en la Tabla 6 y en la Fig.2.

Tabla 5 Efecto de resistencia de esterilización de una combinación de derivado de éter de celulosa y aditivos específicos Tabla 6 resultados de evaluación del efecto de resistencia a esterilización de una combinación de derivado de éter de celulosa y aditivos específicos Un aumento en el contenido de la proteina agregada fue suprimido por la adición del derivado de éter de celulosa. El efecto de la supresión de un aumento en el contenido de arriba debido a la existencia del derivado de éter de celulosa se caracterizó en las composiciones gue comprenden de 2 a 4 fenilalanina e histidina. Se entiende de esto que la razón de que el efecto de mejorar la resistencia a la esterilización debido a la existencia del derivado de éter de celulosa no se observa en la composición No.l mientras que se observa el efecto y marcado de la composición Nos. 3 a 6 en el Ejemplo 7 es considerado para ser debido al hecho de que la coexistencia de fenilalanina e histidina con el derivado de éter de celulosa en la composición Nos.3 a 6 proporciona un efecto de resistencia de esterilización marcado para una proteína.

Efecto de la invención La composición de proteína de la presente invención tiene resistencia a la esterilización por radiación. La composición estéril de la presente invención retiene la estructura y función de una proteína a pesar de que se esteriliza.

Viabilidad Industrial La composición de proteína de la presente invención se utiliza en la industria de fabricación de productos médicos, que requiere la función y la esterilidad de una proteína.

Claims (12)

REIVINDICACIONES

1.- Una composición de proteína que comprende una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa como aditivo.

2.- La composición de proteína de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el aditivo es un derivado de éter de celulosa y una proteina está contenida en el derivado de éter de celulosa.

3.- La composición de proteina de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el aditivo es una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina.

4.- La composición de proteina de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el aditivo consta de una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y un derivado de éter de celulosa, y una proteína está contenida en el derivado de éter de celulosa.

5.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 4, en la que el derivado de éter de celulosa se selecciona del grupo que consiste en hidroxipropil celulosa, metil celulosa, hidroxietil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, carboximetil celulosa de sodio y mezclas de los mismos.

6.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 4, en la que el derivado de éter de celulosa se selecciona del grupo que consiste en hidroxipropil celulosa, hidroxietil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa y mezclas de los mismos.

7.- La composición de proteina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 4, en la que el derivado de éter de celulosa es hidroxipropilcelulosa.

8.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la proteína se selecciona del grupo que consiste en enzimas, proteínas de transporte, proteínas musculares, proteínas de defensa, proteínas de toxinas, hormonas proteicas, proteínas de almacenamiento, proteínas estructurales, factores de crecimiento y sus mezclas.

9.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la proteína es fibrinógeno.

10.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que está en una forma de película.

11.- La composición de proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que está en una forma de fibra o una forma de tela no tejida.

12.- La composición de la proteína de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, que se esteriliza con radiación. RESUMEN Una composición de proteina que comprende una mezcla de glicina, fenilalanina e histidina y/o un derivado de éter de celulosa como un aditivo y tiene resistencia a la esterilización por radiación.