MX2014005698A - Terapia de combinacion para cancer de ovario. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mamífero en necesidad de tal tratamiento que comprende administrar una cantidad efectiva de una combinación de gemcitabina, cisplatino o carboplatino, y 5-[2-ter-butil-5-(4-fIuo ro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5 -b]piridin-2- ilamina.

Description

TERAPIA DE COMBINACIÓN PARA CÁNCER DE OVARIO El cáncer de ovario es el segundo cáncer ginecológico más común y el más letal en térm inos de n úmero absoluto. El tratamiento usualmente involucra qu im ioterapia y cirugía , y algu nas veces radioterapia .

Desafortunadamente, una cura para el cáncer de ovario todavía permanece esquiva y existe una necesidad para más y diferentes terapias q ue pueden probar ser efectivas en el tratamiento de cáncer de ovario.

Varias clases de fármacos anti-cancerígenos usados para tratar varios tipos de cánceres que incluyen cáncer de ovario han sido identificadas, que incluyen fármacos que contienen platino y análogos de pirim idina . El cisplatino (también conocido como cisplatino o cis-diam inadicloroplatino ( I I )) fue el primer miem bro de u na clase de fármacos anti-cancerígenos que contienen platino, el cual también incluye carboplatino. Estos com plejos de platino reaccionan in vivo, uniéndose a y provocando la reticulación del DNA, el cual finalmente activa la apoptosis (muerte cel ular programada) .

El clorhidrato de gemcitabina (posteriormente referido como gemcitabina) es un análogo de pirim idina. Es actualmente usado para tratar varios tipos de cánceres que incluyen en combinación con carboplatino para el tratam iento de cáncer de ovario.

Aunque se reporta en la l iteratura que la gemcitabina más cisplatino es un régimen bien tolerado y activo en pacientes con cáncer de ovario recurrente, los presentes inventores han descubierto que cuando estos agentes son usados en combinación con 5-[2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, un compuesto descrito en el documento US 7,582,652 que está actualmente sometido a investigación clínica como un tratamiento posible para una variedad de indicaciones de cáncer, la triple combinación proporciona un mejoramiento en la eficacia sobre la combinación de gemcitabina más cisplatino. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina Además, puesto que la combinación de carboplatino y gemcitabina son también actualmente usados para el tratamiento de cáncer de ovario, y también se reportó en la literatura que la eficacia comparable es vista en el tratamiento de cáncer de ovario entre carboplatino comparado con cisplatino (sin embargo con menos toxicidad observada con carboplatino), los inventores actuales concluyen que la triple combinación de gemcitabina, carboplatino, y 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-¡l]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina pueden ser más eficaces que una combinación de gemcitabina y carboplatino junto con el beneficio potencial de toxicidad reducida administrando carboplatino en lugar de cisplatino.

La presente invención se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mamífero que comprende administrar u na combinación de gemcitabina, un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino, y 5-í2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-im ídazol-4-¡l]-3-(2,2-d¡meti l-propi l)-3H-ímidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable En una modalidad adicional , la administración es en el m ismo d ía. En otra modalidad adicional, la administración es durante un ciclo de tratamiento de 21 d ías. En otra modalidad ad icional , gemcitabina y el agente de platino son adm inistrados hasta 2 días después de 5-í2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-im idazol-4-i l]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o se administra u na sal farmacéuticamente aceptable y la gemcitabina se administra nuevamente hasta 7 días después. En otra modalidad adicional, la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención también se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mam ífero que se somete a terapia concurrente con 5-í2-ter-buti l-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-im idazol-4-il]-3-(2 , 2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]pirid in-2-ilam¡na o una sal del m ismo farmacéuticamente aceptable que comprende ad ministrar una combinación de gemcitabina y u n agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino. En una modalidad adicional , la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención también se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mam ífero que se somete a terapia concurrente con 5-í2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-im idazol-4-il1-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino que comprende administrar gemcitabina . En una modalidad adicional , la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención también se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mam ífero que se somete a terapia concurrente con 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-im idazol-4-il]-3-(2, 2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal del m ismo farmacéuticamente aceptable y gemcitabina que com prende administrar un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino. En una modalidad adicional , la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención tam bién se refiere a un método para tratar cáncer de ovario en un mam ífero que se somete a terapia concurrente con gemcitabina y un agente de platino seleccionado a partir del grupo q ue consiste de cisplatino y carboplatino que comprende admin istrar 5-f2-ter-buti l-5-(4-f luoro-fenih-l H-im idazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal del m ismo farmacéuticamente aceptable. En una modalidad ad icional , la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención también se refiere a 5-f2-ter-butil-5- (4-fluoro-fen¡l)-1 H-¡m¡dazol-4-¡l]-3-(2 , 2-dimetil-propil)-3H-¡m¡dazo[4,5-b]piridin-2-ilam ina , o una sal del m ismo farmacéuticamente aceptable, para uso en terapia de combinación con gemcitabina y un agente de platino seleccionado a partir de cisplatino y carboplatino en el tratamiento de cáncer de ovario. En una modalidad adicional, la administración de 5-r2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-imidazol-4-i ll-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, precede aquella de gemcitabina y el agente de platino . En otra modalidad adicional , la adm inistración de 5-f2-ter-buti l-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-ill-3-(2.2-dimeti l-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, gemcitabi na y el agente de platino es dentro de 24 horas. En otra modalidad adicional , gemcitabina y el agente de platino son administrados hasta 2 días después de la administración de 5-[2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-imidazol-4-il]-3-(2, 2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y la gemcitabina se admi nistra nuevamente hasta 7 d ías después. En otra modalidad adicional, la administración de gemcitabina y el agente de platino precede aquella de 5-f2-ter-but¡l-5-(4-fluoro-feni0-1 H-imidazol-4-il]-3-(2 ,2-dimeti l-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable. En otra modal idad adicional , gemcitabina y el agente de platino son administrados sim ultáneamente. En otra modalidad adicional, el agente de platino es cisplatino. En otra modalidad ad icional , el agente de platino es carboplatino. En otra modalidad adicional, la administración es durante un ciclo de tratamiento de 21 días. En otra modalidad adicional, la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.

La presente invención también se refiere al uso de 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de cáncer de ovario en donde tal medicamento está siendo administrado en combinación con un agente de platino y gemcitabina. En una modalidad adicional, la administración de 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable precede aquella de gemcitabina y el agente de platino. En otra modalidad adicional, la administración de 5-[2-ter2butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable, gemcitabina, y el agente de platino es dentro de 24 horas. En otra modalidad adicional, gemcitabina y el agente de platino son administrados hasta 2 días después de 5-r2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina o se administra una sai farmacéuticamente aceptable y la gemcitabina se administra nuevamente hasta 7 días después. En otra modalidad adicional, la administración de gemcitabina y el agente de platino precede aquella de 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-in-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable. En otra modalidad adicional, gemcitabina y el agente de platino son administrados simultáneamente. En otra modalidad adicional el agente de platino es cisplatino. En otra modalidad adicional el agente de platino es carboplatino. En otra modalidad adicional de la misma, la adm inistración es durante un ciclo de tratamiento de 21 días. En otra modalidad adicional , la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato. 5-[2-Ter-butil-5-(4-fluoro-feni l)- 1 H-imidazol-4-i l]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4,5-b]piridin-2-ilamina puede ser elaborada de conformidad con los procedimientos como se describe en el documento Estadounidense 7 , 582 ,652. Alternativamente, la molécu la puede ser elaborada siguiendo procedimientos proporcionados en la presente . Los reactivos y materiales de partida son fácilmente disponibles para uno de habilidad ordi naria en la técnica o pueden ser elaborados por procedimientos los cua les son seleccionados a partir de técnicas estándares de quím ica orgán ica y heterocícl ica, o técn icas las cuales son análogas a la síntesis de compuestos conocidos estructuralmente similares. La nomenclatura de las siguientes Preparaciones y Ejem plo de Referencia 1 en general se hace usando la característica de nomenclatura I UPAC en Symyx Isentris® versión 3.2.

Preparación 1 6-Cloro-N-(2, 2-dimetil propil)-3-metil-pirid¡n-2-am ina 2,6-Dicloro-3-nitropiridina (30 g, 152.34 mmol) se disolvió en metil fer-butil éter (300 mL) para obtener una solución amarilla la cual entonces se enfrió a 0-5 °C. A esta solución se agregó trietilamina (20 mL, 143.49 mmol), seguida por una adición lenta de neopentilamina (16 mL, 136.40 mmol). Después que la adición se completó la mezcla de reacción se agitó a 5 °C por 2 horas y después a temperatura ambiente durante la noche. Al siguiente día (después de aproximadamente 18 horas) la reacción se mostró como completa por cromatografía de capa delgada (20% de acetato de etilo en hexano). La mezcla de reacción se lavó con agua (100 mL) y salmuera (100 mL). La porción orgánica se secó sobre MgS04, filtró, y después se concentró a un residuo. Se agregó alcohol isopropílico (20 mL). Aparecieron los cristales y se recolectaron por filtración con lavado usando alcohol isopropílico frío (15 mL) para obtener el compuesto del título (32 g, 86%).

Preparación 2 Bromhidrato de 5-Cloro-3-(2,2-dimetilpropil)imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (6-Cloro-3-nitro-piridin-2-il)-isobutil-amina (24.4 g, 0.10 mol) se cargó en una autoclave de 1L con tolueno (300 mL).

En un vaso de precipitado 5% de Pt/C (1.5 g) se mezcló con agua (12 mL) y 50% de ácido hipofosforoso (0.25 mL) con agitación por 10 minutos. La preparación del catalizador de Pt/C se cargó en la autoclave. La mezcla de reacción se calentó a 75 °C a 50 psi de hidrógeno. Después de 3 horas, el análisis de GC indica que el material de partida es menor de 1% presente. La reacción se detuvo y enfrió descendentemente a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y la torta de filtro se enjuagó con metanol. Lo filtrado que contiene el producto, 6-cloro-N2-(2,2-dimetilpropil)piridina-2,3-diamina, se concentró bajo vacío a un volumen de aproximadamente 100 mL y se usó directamente en la ciclización sin purificación adicional.

La solución anterior se diluyó con metanol (150 mL) y se enfrió en un baño de hielo. Bromuro de cianógeno (11 g, 0.105 mol) se agregó en una porción. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente con agitación conforme el baño de hielo se calentó. La reacción se completó después de aproximadamente 5 hasta 10 horas.

La mezcla de reacción se concentró bajo vacío hasta aproximadamente 4 volúmenes (para recolectar aproximadamente 6 volúmenes de destilado) bajo vacío. Se agregó metil fer-butil éter (6 volúmenes, 180 mL). La mezcla se enfrió en un baño de hielo y se agitó por 1 hora. El material se filtró para proporcionar el compuesto del título (22.0 g, 76%) como un sólido blancuzco.

Preparación 3 3-(2,2-Dimetilpropil)-5-[(E)-2-(4-fluorofenil)vinil]imidazo[4,5-b]piridin-2-amina Bis(di-fer-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio(ll) (CAS No: 887919-35-9) (100.4 mg, 141.8 µ????) se cargó a un matraz en forma de pera y el sólido se desoxigenó con 5 ciclos de vacío/nitrógeno. Se agregó 1-Butanol (55 mL) y después los contenidos del matraz son desoxigenados con 3 ciclos de vacío (30 segundos cada uno)/nitrógeno seguido por 2 ciclos más de vacío (60 segundos cada uno)/nitrógeno con agitación. Una solución completa no se logró, sino preferiblemente una mezcla brumosa.

A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos equipado con un adaptador Claisen, agitador mecánico, termopar, reflujo condensador, y septo de caucho se agregó bromhidrato de 5-cloro-3-(2,2-dimetilpropil)imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (22.65 g, 70.9 mmol), y después el espacio de cabeza se desoxigenó con un ligero barrido de nitrógeno por 15 minutos. Al sólido blanco esponjoso se agregó 1-butanol (46 mL), diisopropiletilamina (34.48 g, 46.5 mL, 266.8 mmol), y 4-fluoroestireno (11.66 g; 11.4 mL, 95.5 mmol), cada uno mediante jeringa. Después de la desoxigenación de esta mezcla rociando con nitrógeno por 40 minutos, la mezcla de catalizador/butanol se agregó mediante jeringa. La suspensión se roció por 10 minutos con nitrógeno, y después el espacio de cabeza se barrió por 5 minutos con nitrógeno. La reacción se dejó agitar a 118-120° C durante la noche. Después de 18 horas, la mezcla se enfrió con agitación. La precipitación o cristalización ocurre entre 45 °C y 70 °C. Partiendo a una temperatura de 41 °C, se agregó agua desionizada (100 mL) por goteo durante 10 minutos para proporcionar una suspensión. Después de la agitación y enfriamiento a 26 °C, se aplicó un baño de hielo para enfriar los contenidos del matraz. Después de 1 hora, etanol y más hielo se agregaron al baño y la temperatura se redujo a -2 °C. La mezcla se mantuvo de -2 a -5 °C por 1 hora, después se filtró a través de una almohadilla de polipropileno (buena filtración), se enjuagó con agua desionizada (4 volúmenes), seguido por heptano (3 volúmenes). El material se extrae al aire seco por vacío por 10 minutos y después se secó en un horno a vacío a 40 °C para proporcionar el compuesto del título como un sólido blancuzco (20.25 g, 88%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): d 7.51 (m, 2H); 7.41 (d, 1H); 7.32 (d, 1H)¡ 7.19 (m, 3H); 7.08 (d, 1H); 6.79 (s, 2H); 3.89 (s, 2H); 1.00 (s, 9H).

Preparación 4 1-[2-Amino-3-(2,2-dimetilpropil)imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluorofenil)etan-1 ,2-diona 3-(2,2-Dimetilpropil)-5-[(E)-2-(4-fluorofenil)vinil]imidazo[4,5-b]piridina-2-amina (100.0 g, 308.26 mmol) se mezcló con dimetil sulfóxido (200 mL) en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 2 L equipado con un condensador a reflujo, termopar, y agitador mecánico. Después de la agitación por 10 minutos, se agregó 48% de bromuro de hidrógeno (28.69 g, 170.20 mmol) durante 4 minutos a la suspensión gris. Se observó un exoterma de 22 °C a 33 °C. A la mezcla de reacción se agregó ácido acético (9.28 g, 154.53 mmol). Después de la agitación 1.8 horas, se agregó 48% de bromuro de hidrógeno (31.75 g, 188.35 mmol) adicional. La mezcla de reacción se calentó y se volvió espesa. Se agregó ácido acético (400 mL, 6.98 mol). Después de alcanzar 91 °C, se agregaron dimetil sulfóxido (50 mL) y 40% de H2S04 (100 mL). La temperatura se incrementó a 100 °C. Después de 3 horas, se agregaron 40% de H2SO4 (300 mL) adicional y se instaló una trampa Dean-Stark para remover los solventes de baja ebullición tales como dísulfuro de dimetilo. Después de la agitación de otras 17 horas a 100 °C, otra porción de 40% H2SO4 (80 mL) se cargó a la reacción. La reacción se agitó 1 hora y después se agregó agua desionizada (300 mL). La reacción se agitó por 3 horas y después la temperatura se incrementó a 103 °C seguido por adición de más agua desionizada (200 mL). Después de 2.5 horas más de agitación se agregó otra porción de agua desionizada (200 mL). La agitación y calentamiento se continuó otras 1.5 horas en tal tiempo el calor se apagó (28 horas totales a partir del tiempo de la primera adición de 40% de H2SO4). La mezcla de reacción se dejó cristalizar, mientras se enfría a temperatura ambiente durante la noche. El producto se filtró, se enjuagó con agua desionizada (2 ? 200 mL), y después se secó en un horno a vacío a 50 °C.

El material sólido (como la sal) se trató con hidróxido de sodio 1M (550 mL) con agitación por 18 horas. La suspensión se filtró, se enjuagó con agua desionizada (500 mL), y se secó en un horno a vacío a 50 °C para proporcionar el compuesto del título (83.7 g, 77%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): d 7.95 (d, 1H); 7.87 (m, 2H); 7.60 (d, 1H); 7.58 (s, 2H); 7.39 (t, 2H); 3.60 (s, 2H); 0.61 (s, 9H).

Preparación 4A (Procedimiento alterno) 1-[2-Amino-3-(2,2-dimetilpropil)imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluorofenil)etan-1 ,2-diona 3-(2,2-Dimetilpropil)-5-[(E)-2-(4-fluorofenil)vinil]imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (1.00 g, 2.93 mmol) se suspendió en 1,4-dioxano (4 mL) y 50% de ácido sulfúrico (1 mL) en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos equipado con un termopar y reflujo condensador. La mezcla se volvió una solución clara y se calentó a reflujo (90-93 °C interno y temperatura del baño de aceite 115 °C). Bromuro de hidrógeno (400 µ?, 3.56 mmol) y dimetil sulfóxido (2.50 mL, 35.20 mmol) se agregaron respectivamente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo usando un baño de aceite y se introdujo nitrógeno a una velocidad de aproximadamente una burbuja/segundo. Después de 1 hora, se agregó una segunda porción de 50% de ácido sulfúrico (3 mL, 21.4 mmol). Después de 5 horas, se agregó una tercera porción de 50% de ácido sulfúrico (4 mL, 31 mmol) y la reacción se continuó bajo reflujo durante la noche. El análisis de HPLC mostró el producto por ser > 93%. El baño de aceite se removió y la reacción se dejó enfriar hasta aproximadamente 70 °C en tal tiempo se agregó agua (5 mL). Después del enfriamiento a temperatura ambiente (aproximadamente 30 minutos) la mezcla se filtró, y la torta se lavó con agua (10 mL) para obtener la sal de sulfato de hidrógeno del producto (1.33 g).

La sal anterior se agregó a hidróxido de sodio 1N (50 mL) y se agitó a temperatura ambiente por 30 minutos para obtener una suspensión ligeramente amarilla. La mezcla se filtró y el sólido ligeramente amarillo se lavó con agua (3 * 10 mL) y después se secó a 55 °C bajo vacío para proporcionar el compuesto del título (0.91 g, 88%).

Ejemplo de Referencia 1 5-[2-rer-Butil-5-(4-fluorofenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)im¡dazo[4,5-b]piridin-2-amina dimeta nsulfonato o 5-r2-ter-ButM-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-M]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina di meta nsulfonato 1-[2-Amino-3-(2,2-dimetilpropil)imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluorofenil)etan-1 ,2-diona (354 g, 1 mol) se mezcló con etanol (2.8 L), acetato de amonio (550.0 g, 7.1 mol), y trimetil acetaldehído (110 g, 1.3 mol). La reacción se calentó a aproximadamente 70 CC (la temperatura de la reacción se mantuvo por debajo del reflujo para ayudar a suprimir la sublimación de Nh OAc) hasta que la desaparición de la diona se monitoreó por HPLC o LC-MS. Después de la terminación de la reacción (usualmente durante la noche), la mezcla se concentró bajo vacío. Se agregaron acetato de etilo (5.3 L) y agua (3.5 L), seguido por NaOH 1N (1.4 L). La mezcla se agitó por 20-30 minutos a temperatura ambiente. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2.8 L). Las porciones combinadas de acetato de etilo se lavaron dos veces con 10 volúmenes de salmuera. La solución de acetato de etilo se evaporó hasta aproximadamente 1.2 L (aproximadamente 3 volúmenes). Se agregó etanol (2.8 L) y la mezcla se calentó hasta aproximadamente 65 °C. Se agregó ácido metansulfónico (240.0 g, 2.5 mol) en acetato de etilo (600 mL) en una forma por goteo rápido. La mezcla se mantiene a aproximadamente 65 °C por 3 horas. La fuente de calor se removió y la reacción se enfrió a temperatura ambiente con agitación por 2 horas más. El producto sólido se recolectó por filtración, se enjuagó con acetato de etilo (500 mL), y se secó en un horno a vacío a aproximadamente 45 °C para obtener el compuesto del título (490 g, 80%). ES/MS m/z 421.5 (M+1). 1H NMR (300 MHz, DMSO-c/6): d 8.99 (s, 2H), 7.90 (d, 1H, J = 9.0 Hz); 7.86 (d, 1H, J = 9.0 Hz); 7.60 (dd, 2H, J = 9.0 Hz), 7.34 (dd, 2H, J = 9.0 Hz); 3.68 (s, 2H); 2.35 (s, 6H); 1.51 (s, 9H); 0.71 (s, 9H).

Los siguientes Ejemplos ilustran la eficacia mejorada de la triple combinación de administración de los compuestos, 5-[2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina (sal de dimetansulfonato (Compuesto A)), gemcitabina, y un agente de platino durante la combinación dual de gemcitabina y un agente de platino en estudios de xenoinjerto de ratón de cáncer de ovario humano. Se debe entender que los Ejemplos son expuestos por medio de ilustración y no limitación, y que varias modificaciones se pueden hacer por uno de habilidad ordinaria en la técnica.

Ejemplo 1 Combinación triple in vivo con el Compuesto A, gemcitabina, y cisplatino El propósito de este estudio es comparar el tratamiento de combinación dual de gemcitabina y cisplatino y el tratamiento de combinación triple (que incluye el Compuesto A) en un modelo de ratón de xenoinjerto de cáncer de ovario humano para determinar cuál es más eficaz.

Los xenoinjertos de ratón de tumor humano son generados a partir de pasajes tempranos de las siguientes líneas celulares de cáncer de ovario: A-2780 (National Cáncer Institute), SK-OV-3x.luc (línea celular SK-OV-3 modificada para expresar luciferasa (#1, medio de expresión), Indiana University). Células de cáncer de ovario A-2780 se hicieron crecer en RPMI 1640 con L-glutamina, 25 mM de HEPES (Invitrogen 22400-089) suplementado con 1 mM de piruvato y 10% de Suero Bovino Fetal Certificado (Gibco 16000, FBS). Células SK-OV-3x.luc (células de cáncer de ovario) se hicieron crecer en medio McCoy's 5A con L-glutamina (Invitrogen 16600-082) suplementado con aminoácidos no esenciales, 1 mM de piruvato y 10% de FBS.

Ratones sin pelo atímicos Harían (6-7 semanas de edad) se alojaron con alimento y agua a albedrío y se climatizaron por una semana previo a la implantación subcutánea del xenoinjerto en el flanco trasero derecho con un número definido de células. Los implantes A-2780 o SK-OV-3x.luc consisten de 0.1 mL de células (2 o 5 x 106 células, respectivamente) en medio libre de suero con 0.1 mL de MATRIGEL® (BD Biosciences) por un volumen final de 0.2 mL. Los tumores se dejaron desarrollar a un volumen de 120-150 mm3 y después se aleatorizaron en grupos de tratamiento para lograr un tamaño de tumor promedio consistente a través de todos los grupos. Cada grupo de tratamiento del estudio SK-OV-3x.luc es de 12 animales; cada grupo del estudio de A-2780 es de 20 animales.

El Compuesto A se preparó semanalmente en hidroxietilcelulosa (HEC) 1%/TWEEN® 80 0.25%/Antiespuman 0.05% (HEC/TWEEN®) y se almacenó a 4 °C. Una dosis de 30 mg/kg del Compuesto A para el grupo de tratamiento SK-OV-3x.luc (o 10 mg/kg para el grupo de tratamiento A-2780), o su vehículo, se administró oralmente por sonda gástrica tres veces al día (TID) en un volumen de 0.2 mL por 3 semanas. El protocolo de tratamiento incluye un tratamiento inicial de dos días con el Compuesto A previo a la introducción de los tratamientos de gemcitabina y cisplatino.

Cisplatino y gemcitabina se diluyeron en PBS, prepararon y administraron semanalmente como inyecciones intraperitoneales de 0.2 mL. El volumen se administró como una constante como se ilustra en la Tabla 1 .

Tabla 1 Los tratam ientos de una semana (QW) de gemcitabina y cisplatino se dan comenzando al tercer d ía a 0.5 y 1 hora , respectivamente, después de la 7ma. dosis (que corresponde a solo durante dos días completos de dosificación del Com puesto) del Compuesto A o veh ículo cada semana. Las dosis más altas de gemcitabi na y cisplatino son seleccionadas con base en la eficacia como agentes únicos, y d il uciones de relación fija de estas son dosificadas en combinación (administración secuencial como compuestos separados) : 1 00 mg/kg de gemcitabina + 4 mg/kg de cisplatino ( 100+4); 50 mg/kg de gemcitabina + 2 mg/kg de cisplatino (50+2); o 25 mg/kg de gemcitabi na + 1 mg/kg de cisplatino (25+1). Los grupos de tratamiento SK-OV-3x.luc y A-2780 son administrados con la terapia de combinación triple de conformidad con los siguientes regímenes de dosificación. Los vehículos correspondientes son empleados donde no se indica el tratamiento. 1. HEC/TWEEN®, 0.2 mL, oral, TIDx21/PBS, 0.2 mL+0.2 mL, IP, QWx3 2. Compuesto A, 10 (o 30) mg/kg, oral, TIDx21/PBS, 0.2+0.2 mL, IP, QWx3 3. HEC/TWEEN®, 0.2 mL, oral, TIDx21/gemcitabina+cisplatino (25+1) mg/kg, IP, QWx3 4. HEC/TWEEN®, 0.2 mL, oral, TIDx21/gemcitabina +cisplatino (50+2) mg/kg, IP, QWx3 5. HEC/TWEEN®, 0.2 mL, oral, TIDx21/gemcitabina +cisplatino (100+4) mg/kg, IP, QWx3 6. Compuesto A, 10 (o 30) mg/kg, oral, TIDx21/gemcitabina +cisplatino, 25+1 mg/kg, IP, QWx3 7. Compuesto A, 10 (o 30) mg/kg, oral, TIDx21/gemcitabina +cisplatino, 50+2 mg/kg, IP, QWx3 8. Compuesto A, 30 mg/kg, oral, TIDx21/gemcitabina +cisplatino, 100+4 mg/kg, IP, QWx3* *Solamente estudio SK-OV-3x.luc El volumen del tumor y peso corporal son registrados y analizados dos veces semanalmente usando una herramienta de análisis y captura de datos. El volumen del tumor (mm3) se estima usando la fórmula: v = I x w2 x 0.536 donde / = más largo del diámetro medido y w = más pequeño del diámetro perpend icular. La actividad antitumoral se calculó como un porcentaje de reducción del volumen de tumor tratado (T) con relación al volumen del tumor de control no tratado (C) [1 -(T/C)] x 1 00. Los datos del volumen del tumor son transformados a una escala log para ecualizar la varianza a través del tiempo y los grupos de tratamiento. Los datos de volumen log son analizados con un anál isis de medidas repetidas de dos formas de varianza por tiempo y tratam iento usando los procedimientos MIXE D en software SAS (versión 8.2) . El modelo de correlación para las medidas repetidas es energ ía espacial . Los grupos tratados son comparados con el grupo de control en cada punto de tiempo. El procedim iento M IXED también se usó separadamente para cada grupo de tratam iento para calcular la med ia ajustada y el error estándar en cada punto de tiempo. Am bos análisis se cuentan para la autocorrelación dentro de cada a nimal y la pérdida de datos que ocurre cuando los an imales con tumores grandes son removidos del estudio de manera temprana. La media aj ustada y el error estándar son trazados para cada grupo de tratamiento contra el tiempo . Por convención, los valores p < 0.05 indican diferencias significantes en el crecimiento del tumor. El porcentaje máximo de pérdida de peso y mediciones de vol u men de tumor final se presentan con la comparación estad ística resu ltante de inhi bición de crecimiento del tumor entre los tratamientos de com binación e individuales.

El volumen de tumor promedio final de xenoinjertos SK-OV-3x. luc tratados por 3 semanas con el Compuesto A solo, o con combinaciones de dosis inferior de gemcitabina y cisplatino (25+ 1 , 50+2) administrados en un esquema una vez cada semana, no es estadísticamente diferente del control de vehículo (Tabla 2). La combinación más alta de gemcitabina + cisplatino (100+4) proporciona la inhibición del crecimiento del tumor con relación al control de vehículo. El co-tratamiento de cada uno de los animales tratados con gemcitabina + cisplatino con el Compuesto A resulta en un mejoramiento de la inhibición del crecimiento del tumor. Las combinaciones de 25+1, 50+2 y 100+4 con el Compuesto A logran o superan la respuesta anti-tumoral a la combinación de 100+4.

El tratamiento de combinación triple de cada uno de los animales tratados con 25+1 y 50+2 gemcitabina + cisplatino con el Compuesto A resulta en un mejoramiento de la inhibición de crecimiento del tumor durante la combinación dual de gemcitabina + cisplatino como se muestra en la Tabla 2. Específicamente, las combinaciones de 25+1, 50+2, y 100+4 con el Compuesto A superan significantemente la respuesta anti-tumoral a su combinación dual respectiva 25+1, 50+2, y 100+4.

Tabla 2: Inhibición de crecimiento del tumor SK-OV-3x. luc con tratamientos de combinación de gemcitabina, cisplatino y Compuesto A % máx significancia (valores p) de pérdida de Volumen del peso tumor final vehículo A (G+C)1 Final vehículo 0.0 505 ± 51 12 A 1.4 522 ± 54 NS 10 25+1 5.2 407 ± 39 NS NS 12 50+2 4.1 524 ± 54 NS NS 12 100+4 13.7 337 ± 43 0.010 0.007 11 25+1 /A 5.4 253 ± 42 <0.001 <0.001 0.002 11 50+2/A 7.7 364 ± 30 0.030 0.021 0.017 10 100+4/A 13.1 202 ± 15 <0.001 <0.001 0.001 11 1Cada combinación de gemcitabina + cisplatino (G+C)/A se compara con su combinación igualada (G+C) solamente.

En un segundo modelo, el modelo de tumor de ovario A2780, el tratamiento de combinación triple de cada uno de los animales tratados con gemcitabina + cisplatino con el Compuesto A resulta en un mejoramiento de inhibición de crecimiento del tumor durante la combinación dual de gemcitabina +cisplatino, como se muestra en la Tabla 3. Específicamente, las combinaciones de 25+ 1 y 50+2 con el Compuesto A significantemente superan la respuesta anti-tumoral a la com binación d ual de 25+ 1 y 50+2.

Tabla 3: Inhibición de crecimiento del tumor A-2780 con tratamientos de combinación de gemcitabina, cisplatino y Compuesto A % máx significancia (valores p) de pérdida Volumen del de peso tumor final vehículo A (G+C)1 final vehículo 1.8 2257 ± 279 20 A 3.0 1828 ± 208 NS 20 25+1 4.6 536 ± 58 <0.001 <0.001 19 50+2 5.1 381 ± 39 <0.001 <0.001 19 100+4 7.4 219 ± 22 <0.001 <0.001 20 25+1 /A 7.9 361 ± 34 O.001 <0.001 0.009 19 50+2/A 8.6 218 ± 14 <0.001 <0.001 <0.001 20 1Cada combinación de gemcitabina + cisplatino (G+C)/A com para con su com paración ig ualada (G+C) solamente. ( 1 00+4) no evalúa en combinación con el Compuesto A.

Terapia de combinación triple in vivo con el Compuesto A, gemcitabina, y carboplatino El carboplatino (25 mg/kg - 100 mg/kg) puede ser sustituido por cisplatiño esencialmente como se describe en el Ejemplo 1.

Los compuestos descritos en la presente invención son preferiblemente formulados como composiciones farmacéuticas administradas por una variedad de rutas. Muy preferiblemente, tales composiciones son para administración oral, intravenosa o intraperitoneal. Tales composiciones farmacéuticas y procesos para preparar las mismas son bien conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (D. Troy, et al., eds., 21a ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005).

Los compuestos de la presente invención son en general efectivos sobre un amplio intervalo de dosificación. La cantidad de 5-[2-t_er2butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina administrada normalmente cae dentro del intervalo de aproximadamente 100-420 mg cada 12 horas por 10 días, más preferiblemente 100-300 mg cada 12 horas por 10 días, y muy preferiblemente 200 mg cada 12 horas por 10 días o alternativamente 300 mg cada 12 horas por 10 días. Se anticipa que 5-[2-ter2butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-im¡dazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina será administrada por al menos dos días previo al inicio del régimen de gemcitabina y cisplatiño o gemcitabina y carboplatino.

De conformidad con el régimen de dosificación aprobado por la FDA, la combinación de administración de gemcitabina y carboplatino debe ser adm in istrada intravenosamente a una dosis de 1000 mg/m2 durante 30 m inutos en los días 1 y 8 de cada ciclo de tratamiento de 21 días. El carboplatino AUC 4 debe ser administrado intravenosamente al día 1 después de la administración de gemcitabina . Los pacientes deben ser monitoreados previo a cada dosis con un conteo de sangre completa, que incluye conteos diferenciales . Los pacientes deben tener un conteo de gran ulocitos absoluto >1 500 x 1 06/L y un conteo de plaquetas =1 00, 000 x 1 06/L previo a cada ciclo.

Modificaciones de Dosis El ajuste de dosificación de Gemcitabina para toxicidad hematológ ica dentro de un ciclo de tratam iento se basa en los conteos de plaquetas y granulocitos tomados al día 8 de la terapia . Si se detecta supresión de médula, la dosificación de gemcitabina debe ser modificada de conformidad con las directrices en la Tabla 4.

Tabla 4: Directrices de Reducción de Dosificación para Gemcitabina en Combinación con Carboplati no En general , para toxicidad severa (Grado 3 o 4) no hematológica, excepto náusea/vómito, la terapia con gemcitabina no debe ser mantenida o disminuida por 50% dependiendo del juicio del especialista que trata . Para ajuste de dosificación de carboplatino, véase información de prescripción del fabricante.

El ajuste de dosis para gemcitabina en combinación con carboplatino para ciclos subsecuentes se basa en la toxicidad observada . La dosis de gemcitabi na en ciclos subsecuentes debe ser reducida a 800 mg/m2 en los días 1 y 8 en caso de cualquiera de las siguientes toxicidades hematológicas: • Conteo absoluto de granulocitos < 500 x 1 06/L por más de 5 días • Conteo absoluto de granulocitos < 1 00 x 1 06/L para neutropenia febril de más de 3 días · Plaquetas < 25, 000 x 1 0e/L • Retraso de ciclo de más de una semana debido a toxicidad Si cualquiera de las toxicidades anteriores se repite después de la reducción de dosis inicial , para el ciclo subsecuente, la gemcitabina debe ser dada al d ía 1 solamente a 800 mg/m2.

Se cree que el cisplatino podría ser administrado en una manera sim i lar al carboplati no.

En alg unos casos los niveles de dosificación por debajo del lím ite inferior del intervalo anterior pueden ser más q ue adecuados, mientras en otros casos todavía dosis más grandes pueden ser empleadas sin provocar algún efecto secundario nocivo, y por lo tanto el intervalo de dosificación anterior no está propuesto para limitar el alcance de la invención en cualquier forma. Se entenderá que la cantidad del compuesto actualmente administrado será determinada por un especialista, en vista de las circunstancias relevantes, que incluyen la condición a ser tratada, la ruta elegida de administración, el compuesto actual o compuestos administrados, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, y la severidad de los síntomas del paciente.

Claims (19)

REIVINDICACIONES

1 . Un método para tratar cáncer de ovario en un mamífero, caracterizado porque comprende ad ministrar una combinación de gemcitabina , un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino, y 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-im idazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina 0 una sal farmacéuticamente aceptable.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque la administración es dentro de 24 horas.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porq ue la gemcitabina y el agente de platino se admin istran hasta 2 días después de 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o se adm inistra una sal farmacéuticamente aceptable y se adm inistra la gemcitabina nuevamente hasta 7 días después.

4. Un método para tratar cáncer de ovario en un mamífero que se somete a terapia concurrente con 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-imidazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-¡midazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable de la m isma , caracterizado porque comprende administrar una com binación de gemcitabina y un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino.

5. Un método para tratar cáncer de ovario en un mam ífero que se somete a terapia concurrente con 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-feniD- 1 H-im idazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-im idazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina 0 una sal farmacéuticamente aceptable de la m isma y un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino, caracterizado porque comprende administrar gemcitabina .

6. Un método para tratar cáncer de ovario en un mamífero que se somete a terapia concurrente con 5-f2-ter-buti l-5-(4-f luoro-fenil)- 1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-2-ilamina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y gemcitabi na , caracterizado porque com prende administrar un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino.

7. U n método para tratar cáncer de ovario en un mamífero que se somete a terapia concurrente con gemcitabina y un agente de platino seleccionado a partir del grupo que consiste de cisplatino y carboplatino, caracterizado porque com prende admi nistrar 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-imidazol-4-il]-3-(2, 2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4, 5-b]pirídin-2-ilami na o una sal farmacéuticamente aceptable de la m isma .

8. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -7 , caracterizado porque la administración es durante un ciclo de tratamiento de 21 días.

9. El método de conform idad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -8 , caracterizado porque la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansu lfonato.

1 0. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)- 1 H-im idazol-4-il]-3-(2 ,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilam ina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso en terapia de combinación con gemcitabina y un agente de platino seleccionado a partir de cisplatino y carboplatino en el tratamiento de cáncer de ovario.

11. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con la reivindicación 10, en donde la administración de 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, precede aquella de la gemcitabina y el agente de platino.

12. 5-[2-terlbutil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con la reivindicación 10 o 11 en donde la administración de 5-r2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, la gemcitabina y el agente de platino es dentro de 24 horas.

13. 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fen¡n-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-prop¡l)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con la reivindicación 10 o 11 en donde la gemcitabina y el agente de platino se administran hasta 2 días después de administración de 5-f 2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1 H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y se administra la gemcitabina nuevamente hasta 7 días después.

14. 5-f2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-ill-3-(2.2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con la reivindicación 10 o 12 en donde la administración de la gemcitabina y el agente de platino precede aquella de 5-r2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenin-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

15. 5-[2-terlbutil-5-(4-fluoro-fenil)- H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con las reivindicaciones 10-14, en donde la gemcitabina y el agente de platino son administrados simultáneamente.

16. 5-r2-ter-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-in-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10-15, en donde el agente de platino es cisplatino.

17. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10-15, en donde el agente de platino es carboplatino.

18. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10-17, durante un ciclo de tratamiento de 21 días.

19. 5-[2-ter butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]p¡ridin-2-ilamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10-18, en donde la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de dimetansulfonato.